KR20180068924A - The Mixture for cultivation of Fragrant Mushroomfor increased cell growth speed by stimulation of mitochondrial matrix - Google Patents

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Abstract

The present invention relates to a new method of cultivating Lentinus edodes, and more specifically, to a mixture composition which is capable of improving growth speed of Lentinus edodes by stimulating a mitochondrial matrix in mitochondria of Lentinus edodes to promote cell metabolism and, accordingly improving cell disruption speed of Lentinus edodes cells. A mixture composition for improving the growth speed by stimulating a mitochondrial matrix of Lentinus edodes according to the present invention comprises oily vitamin A fatty acid ester (vitamin A in oil), vitamin B1 hydrochloride, dibenzoyl thiamine, vitamin B1 phenolphthalinate, and sodium L-ascorbate. In other words, the mixture composition according to the present invention can improve the cell disruption speed of Lentinus edodes by activating the mitochondrial matrix in mitochondria. As a result, the mixture composition according to the present invention can increase the growth speed of Lentinus edodes.

Description

표고버섯 미토콘드리아 기질 자극을 통한 생장속도 향상을 위한 혼합조성물{The Mixture for cultivation of Fragrant Mushroomfor increased cell growth speed by stimulation of mitochondrial matrix}TECHNICAL FIELD The present invention relates to a mixed composition for improving growth speed through mitochondrial matrix stimulation of a shiitake mushroom,

본 발명은 새로운 표고버섯 재배 방법에 관한 것으로, 표고버섯의 미토콘드리아 내의 기질(Mitochondrial matrix)를 자극하여 세포대사를 촉진하고 이를 통하여 표고버섯 세포의 세포분열 속도를 향상시켜 표고버섯 생장 속도를 향상시킬 수 있는 혼합조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a new method of cultivating shiitake mushroom, which promotes cell metabolism by stimulating the mitochondrial matrix in mitochondria of shiitake mushroom, thereby improving the rate of cell division of mushroom cells, thereby improving the growth rate of mushroom ≪ / RTI >

표고버섯(Lentinus edodes)은 담자균과 주름버섯목 느타리과 잣버섯속에 속하는 식용버섯으로 봄부터 가을에 참나무류, 활엽수의 나무토막, 그루터기 위에 단생하거나 군생하는 목재 백색 부후균으로 한국, 중국, 일본, 동남아시아, 뉴질랜드 등의 지역에 분포하고 있다.(Kim et al., 2003). 표고버섯의 성분으로 수분이 81.8~90%로 가장 많은 부분을 차지하고 단백질과 아미노산, 지방, 회분, 미네랄, 비타민, 식이섬유를 함유하고 있다. 식이섬유는 버섯의 세포벽에 섬유질 성분과 다양한 다당류를 함유하고 있다(Bartnicki-Garcia, 1968). 표고버섯의 생리적인 특징으로 항암효과, 항균성, B형 간염치료 효과, 항바이러스 연구의 보고가 있다. 연구 가운데 항암효과는 표고버섯의 자실체에서 분리한 β-1,3 glucan인 lentinan이 직접적으로 항암효과를 내지 않고, 숙주매개 면역반응에 관여하여 면역기능을 증강시킴으로써 효과를 내다는 보고가 있다(Chihara,1992).Lentinus edodes is an edible mushroom belonging to the genus Bacillus subtilis and pine mushroom in the spring and autumn. It is a wood white rot fungus which grows on the stump and grows on the stump. Korea, China, Japan, Southeast Asia , And New Zealand (Kim et al., 2003). Shiitake mushrooms contain 81.8 ~ 90% of water, and it contains protein, amino acids, fat, ash, minerals, vitamins and dietary fiber. Dietary fiber contains fibrous components and various polysaccharides on the cell walls of mushrooms (Bartnicki-Garcia, 1968). The physiological characteristics of shiitake mushrooms include anticancer effect, antimicrobial activity, hepatitis B treatment effect, and antiviral studies. Among the studies, lentinan, a β-1,3 glucan isolated from mushroom fruiting body, has not been shown to have anticancer effects directly, but it has been reported that it enhances immune function by participating in host mediated immune response (Chihara , 1992).

표고버섯의 자연 분포지는 한반도, 일본, 중국, 대만, 필리핀, 세레베스, 뉴기니아, 네팔 등이다. 자연산 표고버섯은 자연림 내에서 바람에 쓰러진 나무나 말라죽은 나무에 표고버섯의 홀씨(포자)가 붙어서 생장한 것이다.The natural distribution of shiitake mushrooms is on the Korean Peninsula, Japan, China, Taiwan, the Philippines, Cerebes, New Guinea and Nepal. The natural shiitake mushroom is grown in the natural forest with the spore of the shiitake mushroom attached to the wind or the dead tree.

종래에는 이점에 착안하여 원목토막에 도끼자국을 내고 여기에 홀씨가 붙어 자라기를 기다리는 원시적인 재배방법을 이용하였다. 그 후 표고버섯 균을 인공적으로 배양한 후 원목에 접종하여 재배하는 표고 원목 재배방법으로 발전하여 표고의 생산성이 크게 향상되어왔다.In the past, we took advantage of this point and used a primitive cultivation method that leaves an ax mark on the wood slice and waits for the seed to grow with it. After that, the mushroom cultivated by artificially cultivating mushroom fungus and then inoculating it into the logs has developed into a highland logging method, and the productivity of the elevation has been greatly improved.

특히, 참나무는 밀도가 높아 재질이 단단하여 이런 참나무의 특성을 이용하여 참나무 표고버섯을 재배하는 방법이 개발되어 있다. 즉, 노지 재배법, 시설하우스 재배법, 톱밥 재배법 등을 활용한 표고버섯 재배방법이 이미 개발되어 있다.Particularly, oak has a high density and is made of a hard material, and a method of cultivating oak mushroom using the characteristics of such oak has been developed. That is, a method of cultivating shiitake mushroom has already been developed by utilizing the method of the noi cultivation method, the method of cultivating the facility house, and the sawdust cultivation method.

그러나 기존의 표고버섯 재배방법은 단순히 표고버섯을 재배하기 위한 방법일 뿐, 표고버섯의 미토콘드리아 내의 기질을 자극하여 생장속도를 향상시킬 수 있는 연구나 시도는 거의 이루어지지 않고 있다.However, the conventional method of cultivating shiitake mushroom is only a method of cultivating shiitake mushroom, and studies or attempts to improve the growth rate by stimulating the substrate in mitochondria of shiitake mushroom are hardly achieved.

미토콘드리아(Mitochondria)란, 세포 소기관의 하나로 세포호흡에 관여한다. 따라서 호흡이 활발한 세포일수록 많은 미토콘드리아를 함유하고 있으며 에너지를 생산하는 공장으로 불린다. 1897년 칼 벤더(Carl Benda)가 세포속에 미토콘트리아의 존재를 증명하였으며 그 모양은 공모양과 용수철 모양으로 생겼으며 거의 모든 세포질 속에 존재한다고 하였다. 생긴 모양을 관찰한 결과 이름을 미토콘트리아(mitochondria)라고 불렀는데 그리스어(語)로 실을 의미하는 '미토스(Mitos)'라는 단어와 알갱이 또는 입자를 의미하는 '콘드린(Chondrin)'을 합성하여 명명했다. 칼 벤더가 미토코트리아의 존재를 증명하기 전에도 여러 과학자를 통해서 존재가 알려져 있었는데 1886년 독일의 생물학자인 리하드트 알트만(Richard Altmann)은 미토콘트리아를 바이오블라스트라고 불렀으며 생명을 이루는 부분으로 그 중요성을 최초로 파악했었다. 그외에도 미토콘트리아는 콘드리오솜, 크로미디아, 콘드리오콘트 등 여러가지의 이름으로 불렸지만 과학계에서 그 존재가 받아들여지지 않았다. 미토콘트리아는 이중 막으로 둘러쌓여 있으며 내부는 크리스테(Cristae)라고 불리는 구불구불한 내막으로 이루어져 있다. 그 속에는 DNA와 RNA가 존재하며 크기는 0.2~3㎛로 세포호흡에 관여한다. 모양은 생물종에 따라 각각 특징이 있고, 크기도 세포의 종류에 따라 다르지만 대개 너비 0.5㎛, 길이 2㎛ 정도 되는 것이 많다. 위상차현미경을 사용하면 살아 있는 세포에서도 관찰이 가능하고, 야누스그린 B에 염색되어 다른 부분과 쉽게 구별된다. 또한 시토크롬산화효소에 대한 나디반응, 석신산탈수소효소에 의한 테트라졸리움염 환원반응으로 염색하여 검출한다. 1개의 세포에 함유된 미토콘드리아의 수는 세포의 에너지 수용에 관계되며, 일반적으로 호흡이 활발한 세포일수록 많은 미토콘드리아를 함유하고 있다. 예를 들면, 간세포 1개당 1,000~3,000개, 식물세포에서는 100~200개의 미토콘드리아를 볼 수 있다. 사람의 인체에는 약 1경 개의 미토콘드리아가 있는 것으로 알려져 있으며 여성의 난자에는 약 10만개가 들어있고 남성의 정자에는 100개 정도가 있다. 미토콘드리아를 전자현미경으로 관찰하면, 매우 복잡한 구조를 볼 수 있다. 외막과 내막의 이중 구조로 되어있으며, 내막은 접혀진 미로길 처럼 생겼다. 내막의 안쪽에는 유전정보를 전하는 DNA(데옥시리보 핵산 deoxyribonucleic acid)가 결합되어 있다. 이 내막 돌출부를 크리스타(crista)라고 한다. 크리스타는 미토콘드리아의 장축에 직각 방향으로 배열된 경우가 많다. 세포에 따라서는 평행하거나 불규칙하게 배열된 것도 있다. 생물학자들은 미토콘트리아의 이중막과 독자적인 DNA를 갖는 특징 때문에 독립된 세균으로 여기기도 한다. 태초에는 독자적인 세균으로 활동했을 가능성이 높다고 한다. Mitochondria, one of the cell organelles, are involved in cellular respiration. Thus, the more active the respiratory cells, the more mitochondria they contain and the energy-producing plant is called. In 1897, Carl Benda proved the presence of mitochondria in the cell, and that the shape of the cell was in the form of a collagen and a spring, and was present in almost all cytoplasm. The name "Mitochondria" was used as a result of observing the shape of the figure. The word "Mitos" meaning Greek thread and "Chondrin" meaning granule or particle were synthesized To name it. Before Karl Bender was able to prove the existence of mitochondria, it was known by many scientists. In 1886, German biologist Richard Altmann called mitochondria a bio-blast, I had first grasped the importance. In addition, Mitochondria were called by various names such as Condriosomes, Chromidia, Condrio Cont, but their existence was not accepted in the scientific community. Mitochondria are surrounded by a double membrane, and the inside is composed of a twisty inner membrane called Cristae. There are DNA and RNA in it, and it is about 0.2 ~ 3㎛ in size and is involved in cell respiration. The shape varies according to species, and the size varies depending on the type of cell, but it is often about 0.5 ㎛ wide and 2 ㎛ long. Using a phase contrast microscope, it can be observed in living cells, stained with Janus Green B and easily distinguished from other parts. It is also detected by Nadir reaction against cytochrome oxidase and tetrazolium salt reduction reaction with succinic acid dehydrogenase. The number of mitochondria contained in one cell is related to the energy acceptance of the cell, and generally, the more active the respiration, the more mitochondria it contains. For example, 1,000 ~ 3,000 per hepatocyte and 100 ~ 200 mitochondria in plant cells. It is known that there are about 1 mole of mitochondria in the human body. There are about 100,000 eggs in female eggs and about 100 in male sperm. When observing mitochondria under an electron microscope, a very complex structure can be seen. It has a double structure of outer membrane and inner membrane, and the inner membrane is like a folded labyrinth. On the inside of the inner membrane is DNA (deoxyribonucleic acid) that carries genetic information. This inner lobes are called crista. Christa is often arranged perpendicular to the long axis of mitochondria. Some cells are arranged parallel or irregularly. Biologists may also consider it to be an independent bacterium because of its biomolecule and unique DNA properties. In the beginning, it is likely that he acted as an independent germ.

미토콘드리아 속에 존재하는 효소에는 여러 가지가 있다.There are many enzymes in the mitochondria.

① 외막에 존재하는 효소:모노아민 산화효소, 지방산 티오키나아제, 키누레닌 수산화효소, 시토크롬 C 환원효소. ① Enzyme present in the outer membrane: monoamine oxidase, fatty acid thiokinase, kinurinin hydroxylase, cytochrome C reductase.

② 내외막의 사이에 존재하는 효소:아데닐산키나아제, 뉴클레오티드이인산키나아제 ② Enzyme present between inner and outer membrane: adenylate kinase, nucleotide diphosphate kinase

③ 내막에 존재하는 효소: 케토산 탈수소효소, 숙신산 탈수소효소, α-β-옥시부티르산 탈수소효소, 카르니틴-아실전이효소, 말단전자전달계 ATP 합성효소 ③ Enzyme present in inner membrane: keto acid dehydrogenase, succinate dehydrogenase, α-β-oxybutyrate dehydrogenase, carnitine-acyl transferase, terminal electron transport system ATP synthase

④ 스트로마에 존재하는 효소:시트르산 합성효소, 이소시트르산 탈수소효소, 푸마라아제, 말산 탈수소효소, 아코니타아제, 글루탐산 탈수소효소, 지방산의 β-산화효소계 등이다. (4) Enzymes present in the stroma: citric acid synthase, isocitrate dehydrogenase, fumarase, malic acid dehydrogenase, aconitase, glutamate dehydrogenase, β-oxidase system of fatty acids.

미토콘드리아의 가장 중요한 기능은 몸속으로 들어온 음식물을 통해서 에너지원인 ATP를 합성하는 역할이다. 미토콘드리아의 내막에는 'ATP합성효소'라는 단백질이 존재하는데 이것이 ATP를 만들어내는 역할을 한다. 음식물을 통해 미트콘드리아의 내막과 외막 사이에 만들어진 수소이온이 미토콘드리아 내막으로 유입되고 ATP합성효소에 의해 인산과 ADP(2개의 인산과 아데노신이 결합한 형태)가 결합하여 ATP(3개의 인산과 아데노신이 결합한 형태)가 만들어진다. 이런 미트콘드리아의 ATP합성 기능을 밝혀낸 사람은 미국의 화학자 폴 보이어(Paul Boyer)이다.The most important function of mitochondria is to synthesize ATP, an energy source, through food in the body. In the inner membrane of mitochondria, there is a protein called 'ATP synthase', which plays a role in producing ATP. The hydrogen ions formed between the inner membrane and the outer membrane of mitochondria are introduced into the inner mitochondrial membrane through the food, and the ATP synthase binds the phosphoric acid and ADP (form of two phosphoric acid and adenosine) to form ATP (three phosphoric acid and adenosine Combined form) is made. The American chemist Paul Boyer has discovered the ability of this mitochondrial ATP synthesis.

또한 미토콘드리아는 기능이 상실된 세포를 죽이는 역할을 하기도 한다. 이를 아포토시스라고 하는데 DNA가 파괴된 세포를 흡수하거나 DNA를 절편하여 사망에 이르게 한다. 이는 이미 기능이 상실된 세포가 암세포나 다른 세포로 변이되는 것을 막는 역할이다.Mitochondria also play a role in killing lost cells. This is called apoptosis, which causes the DNA to absorb the destroyed cells or intercept DNA to lead to death. This is a role that prevents cells that have already lost function from being transformed into cancer cells or other cells.

미트콘드리아는 호흡을 관장하는 중심적 구실을 하는 구조체며, 당(糖)이 지질(脂質)의 이화작용(異化作用)으로 생성되는 피루브산, 아세틸 CoA의 산화와 전자전달계를 통한 산화적 인산화에도 관여한다. 이렇게 미토콘드리아는 당과 지방산의 산화와 그것에 수반하는 산화적 인산화에 중심적 역할을 한다.Mitcondria is a structure that plays a central role in controlling respiration. It is also involved in the oxidation of pyruvic acid, acetyl-CoA, produced by the catabolism of lipids, and oxidative phosphorylation through the electron transport system do. Thus, mitochondria play a central role in the oxidation of sugars and fatty acids and the accompanying oxidative phosphorylation.

이외에도 각종 아미노산에서 아미노기(基) 전이 메커니즘을 통해 글루탐산의 α-아미노기로서 질소를 모은다. 이 질소를 글루탐산 탈수소효소의 작용으로 암모니아로 만든 후에, 이것을 요소로 바꾸는 요소합성계의 효소활성도 있다. 또한 미토콘드리아 속에서 아세틸 CoA를 지방산으로 전이하여, 지방산의 사슬을 연장하는 반응의 일부가 행해진다. 미토콘드리아의 기능은 그 구조 변화에 의하여 민감하게 반응한다. 예를 들면, 티록신으로 팽윤된 미토콘드리아는 호흡은 하지만, 산화적 인산화는 일어나지 않는다.In addition, various amino acids accumulate nitrogen as an α-amino group of glutamic acid through an amino group transfer mechanism. After making this nitrogen into ammonia by the action of glutamate dehydrogenase, there is enzyme activity of urea synthesis system which converts it into urea. In mitochondria, a part of the reaction of transferring acetyl-CoA to a fatty acid to extend the fatty acid chain is also performed. The function of the mitochondrion is sensitive to its structural changes. For example, mitochondria swollen with thyroxine respiratory, but not with oxidative phosphorylation.

인체의 근육이 늘어나면 더욱 많은 근육세포 내 더욱 많은 미토콘드리아가 생성되는데 그 결과는 더욱 많은 에너지, 즉 ATP가 생성되게 된다. 따라서 체력이 증가되고 지구력이 강화된다. 하지만 꾸준한 운동을 하지 않으면 미토콘드리아는 소멸되거나 부피가 줄어들기 때문에 인체의 에너지도 줄어들게 된다. 하지만 미토콘드리아는 ATP를 생성하는 과정에서 활성산소를 유발하게 되는데 이 활성산소로 인해 단백질이 파괴되거나 DNA에 나쁜 영향을 미치기도 한다. 세포에는 활성산소로 부터 방어하는 기능이 있지만 점차 노화되어 감에 따라 그 역할이 약화되며 이로 인해 암세포 또는 당뇨병, 고혈압, 심장병 등 각종 질병이 만들어진다.As the muscles in the body grow, more mitochondria are produced in more muscle cells, resulting in more energy, ATP. Thus, physical strength is increased and endurance is strengthened. However, if you do not exercise constantly, the mitochondria will disappear or the volume will decrease, so the energy of the human body will decrease. However, mitochondria produce active oxygen during the production of ATP, which can destroy proteins or adversely affect DNA. Cells have the ability to defend against free radicals, but their role is weakened as they get older and become cancerous or diabetes, hypertension and heart disease.

미토콘드리아는 핵외 자기증식계며, 스스로 증식할 수 있다. 미토콘드리아 속에 고유의 DNA가 존재하며, 또 고유의 단백질 합성계가 존재하는 것이 확인되었다. 미토콘드리아의 DNA나 단백질 합성계는 세균의 그것과 흡사하다. 이러한 사실에서 세균의 세포질에 존재하는 카르디올리핀(일종의 燐脂質)이 미토콘드리아에도 편재함과 동시에, 미토콘드리아가 세균과 유사한 기원을 가진 것임을 시사하고 있다. 또한 미토콘드리아 고유의 유전자의 돌연변이도 알려져 있다.Mitochondria are self-proliferating, and they can multiply themselves. It has been confirmed that DNA inherent in the mitochondria exists and that a unique protein synthesis system exists. The DNA or protein synthesis system of mitochondria is similar to that of bacteria. This suggests that cardiolipin (a type of phospholipid) present in the cytoplasm of bacteria is also localized in mitochondria, and that mitochondria have a similar origin to bacteria. Mutations in the genes specific to mitochondria are also known.

표고버섯 세포내의 미토콘드리아에 대해 살펴보면 다음과 같다. 표고버섯 내에는 둥근 원형 모양의 미토콘드리아가 50㎛ 가까이 신장하여 수개 존재한다. 표고버섯의 미토콘드리아는 내외 2겹의 미토콘드리아 막에 싸여 있다. 막 두께는 약 6nm, 막 사이는 6~8nm이며, 내막은 내부를 향해서 돌출되고 폭 20~30㎛의 울타리모양의 크리스타(crista)를 형성한다. 미토콘드리아는 시트르산회로와 전자전달계 및 양자에게 공역하는 산화적 인산화의 효소군이 있으며, 호기조건하에서 에너지생산의 장(場)이 된다. 기질에는 피루브산이나 지방산에서 아세틸CoA를 생성하는 효소나, 시트르산회로에 의해 아세틸CoA를 산화하는 효소를 함유한다. 이 산화과정에서 생기는 최종산물은 CO2와 NADH로, CO2는 세포로부터 방출되고 NADH는 호흡사슬을 흐르는 전자의 주된 공급원이 된다. 크리스타 및 내막에는 전자전달에 관여하는 여러 가지 효소와 그것에 공역하는 산화적 인산화에 관여하는 ATPase가 묻혀있다. 기본입자는 ATPase의 일부로서 막관통형 프로톤운반체를 포함하고 전기화학적 구배에 따라 프로톤이 이곳을 통과할 때 ATP를 합성한다.       The mitochondria in the mushroom cells are as follows. Within the shiitake mushrooms, round circular mitochondria grow to about 50 ㎛, and there are several. The mitochondria of shiitake mushrooms are wrapped in two layers of mitochondria inside and outside. The film thickness is about 6 nm, the film thickness is 6 to 8 nm, and the inner film is protruded inward and forms a fist-shaped crista with a width of 20 to 30 μm. Mitochondria have a group of enzymes for oxidative phosphorylation that catalyzes the citric acid cycle, the electron transport system, and both, and becomes a field of energy production under aerobic conditions. The substrate contains an enzyme that produces acetyl CoA in pyruvic acid or fatty acid, or an enzyme that oxidizes acetyl CoA in a citric acid circuit. The final products of this oxidation process are CO2 and NADH, CO2 is released from the cell, and NADH is the main source of electrons flowing through the respiratory chain. The crystals and the inner membrane are buried with various enzymes involved in electron transfer and ATPase involved in oxidative phosphorylation which is conjugated to them. The basic particles contain a membrane-penetrating proton carrier as part of the ATPase and synthesize ATP when the proton passes through it by an electrochemical gradient.

미토콘드리아는 에너지를 생산하는 세포 소기관이며, 두 겹의 막으로 둘러싸여 있다. 내막으로 둘러싸인 안쪽 공간을 미토콘드리아 기질이라고 하는데, 고유의 DNA와 RNA, 리보솜뿐만 아니라 세포 호흡 단계인 TCA 회로에 관여하는 다양한 효소를 가진다.Mitochondria are energy-producing organelles, surrounded by two layers of membranes. The inner space surrounded by the inner membrane is called the mitochondrial matrix. It has various enzymes involved in the TCA circuit, which is the cell respiration phase as well as the inherent DNA, RNA, and ribosome.

미토콘드리아 기질에 포함된 피루브산 탈수소 효소 복합체는, 산소가 충분할 때 해당 작용으로 생성된 피루브산과 반응한다. 이 과정에서 CO2가 방출되고 NADPH, 2탄소 화합물인 아세틸CoA가 생성된다.The pyruvate dehydrogenase complex contained in the mitochondrial matrix reacts with pyruvic acid produced by the action when oxygen is sufficient. In this process, CO 2 is released and NADPH, a 2-carbon compound, is produced.

미토콘드리아는 기질에 존재하는 유전 정보를 사용해 스스로 단백질을 합성하며, 증식 또한 가능하다.Mitochondria synthesize proteins by themselves using genetic information present in the substrate, and it is also possible to multiply.

공개특허공보 제10-2015-0116120호 (공개일자 2015.10.15)Japanese Patent Application Laid-Open No. 10-2015-0116120 (published on October 15, 2015) 공개특허공보 제10-2013-0087224호 (공개일자 2013.08.06)Japanese Patent Application Laid-Open No. 10-2013-0087224 (publication date 2013.08.06)

따라서 본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위해 안출한 것으로서, 표고버섯 세포 내의 미토콘드리아 속의 기질(Mitochondrial matrix)을 자극하여 표고버섯의 세포분열을 촉진시키고 이를 통하여 표고버섯의 생장속도를 향상시킬 수 있는 혼합조성물을 제공하는데 그 주된 목적이 있다.SUMMARY OF THE INVENTION Accordingly, the present invention has been made to solve the above-mentioned problems, and it is an object of the present invention to provide a method of stimulating mitochondrial matrix in mitochondrial cells and promoting cell division of mushroom, There is a main purpose in providing a mixed composition.

본 발명의 다른 목적들은 이상에서 언급한 목적으로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 목적들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.Other objects of the present invention are not limited to the above-mentioned objects, and other objects not mentioned can be clearly understood by those skilled in the art from the following description.

상기와 같은 목적을 달성하기 위한 본 발명에 따른 표고버섯 재배 방법의 특징은 (A) 표피가 있는 참나무 원복을 준비하는 단계와, (B) 상기 원목에 종균구멍을 형성하고, 형성된 종균구멍에 표고버섯 종균을 투입하여 접종하는 단계와, (C) 상기 표고버섯 종균이 투입된 원목(골목)을 음지 60%~70%, 양지 40%~30%의 조건하에서 본 눕히기를 하고, 15일 이후에 일주일 간격으로 1번씩 살수를 통해 접종목 관리를 수행하는 단계와, (D) 균사가 80% 이상 성장한 종균활착이 된 원목을 11월~12월 또는 익년 2월인 추계기에 골목세우기를 진행하는 단계와, (E) 물속에 특수 혼합조성물을 녹여서 표고버섯 살포용 액체를 생성하는 단계와, (F) 상기 생성된 표고버섯 살포용 액체를 수확 전까지 15일 간격으로 골목에 반복적으로 살포하는 단계를 포함하여 이루어지는데 있다.According to another aspect of the present invention, there is provided a method of cultivating a mushroom of the present invention comprising the steps of: (A) preparing an oak seedlings having a skin; (B) forming a seedling hole in the wood, (C) a step of laying the log (alley) into which the shiitake mushroom has been introduced under the condition of 60% to 70% of shade and 40% to 30% of sunshine, (D) stepping up the alley in the fall season, which is between November and December or the following February, and (D) (E) dissolving a special mixed composition in water to produce a liquid for spraying mushroom; and (F) repeatedly spraying the generated mushroom spraying liquid onto the alley at intervals of 15 days before harvesting It is.

바람직하게 상기 (A) 단계는 11월~2월에 직경이 10~20cm인 표피가 있는 참나무 원복을 벌채하여 음지에서 건조하는 단계와, 상기 건조된 벌채된 참나무 원목의 토목길이를 1~1.2m 간격으로 잘라 접종장소로 운반하는 단계를 포함하여 이루어지는 것을 특징으로 한다.Preferably, the step (A) comprises: drying oak seedlings having epidermis having a diameter of 10 to 20 cm from November to February; drying the oak seedlings from the shade; and drying the dried oak timber to a length of 1 to 1.2 m And the step of cutting is carried out to the inoculation site.

바람직하게 상기 (C) 단계는 표고버섯 종균이 투입된 원목(골목)을 통풍과 배수가 잘되는 장소에, 습도 70~80% 유지하고, 온도 20~28℃를 유지할 수 있는 동향 내지 남향의 경사지에 정(井)자 쌓기 또는 베개 쌓기를 통한 본 눕히기를 수행하는 단계와, 상기 본 눕히기 되어 있는 표고버섯 종균이 투입된 원목(골목)을 1개월에 한 번씩 뒤집기 작업을 수행하는 단계로 이루어지는 것을 특징으로 한다.Preferably, the step (C) is a step of keeping the wood (alley) into which the shiitake mushroom has been introduced in a place where ventilation and drainage are well, keeping the humidity at 70 to 80%, keeping the temperature at 20 to 28 ° C, A step of laying down a tree (alley) into which the shiitake mushroom seedlings have been laid down by one month at a time, .

바람직하게 상기 (D) 단계는 골목세우기 전에 미리 석회나 베노람수화제를 살포하는 단계와, 원목 중 가는 부분이 아래로 가도록 하여 평당 20~30본을 세워 원목과 원목 간의 거리가 지름 15cm 정도를 유지시키는 단계를 포함하여 이루어지는 것을 특징으로 한다.Preferably, the step (D) is a step of spraying lime or veno ram wettable powder before the alley is set up, and a step of setting the distance between the logs to be about 15 cm The method comprising the steps of:

바람직하게 상기 (E) 단계에서 표고버섯의 생장속도를 향상시키기 위한 구성물질은 유성비타민A, 지방산에스터, 비타민 B1 염산염, 디벤조일티아민, 비타민B1 프탈린염, L-아스코르브산나트륨으로 구성되는 것을 특징으로 한다.Preferably, the constituent material for improving the growth rate of the mushroom in step (E) comprises at least one selected from the group consisting of oily vitamin A, fatty acid ester, vitamin B1 hydrochloride, dibenzoyl thiamine, vitamin B1 phthalin salt and sodium L-ascorbate .

바람직하게 상기 (F) 단계에서 살포되는 표고버섯의 생장속도를 향상시키기 위한 혼합조성물 용액의 살수량은 1골목당 15초 정도 살수하는 것을 특징으로 한다.Preferably, the water content of the mixed composition solution for improving the growth rate of the shiitake mushroom sprayed in the step (F) is about 15 seconds per one alley.

이상에서 설명한 바와 같은 본 발명에 따른 표고버섯 미토콘드리아 기질(Mitochondrial matrix) 자극을 통한 생장속도 향상을 위한 혼합조성물은 미토콘드리아(Mitochondria) 내의 기질(Mitochondrial matrix)을 활성화시킴으로써, 표고버섯의 세포분열 속도를 향상시킬 수 있다. 이를 통하여 결과적으로 표고버섯의 생장속도를 증진시킬 수 있다.As described above, the mixed composition for enhancing the growth rate through stimulation of the mitochondrial matrix of mushroom mitochondrial according to the present invention activates the mitochondrial matrix in the mitochondria, thereby improving the cell division rate of the mushroom . As a result, the growth rate of shiitake mushroom can be increased.

본 발명에 따른 표고버섯 미토콘드리아 기질(Mitochondrial matrix) 자극을 통한 생장속도 향상을 위한 혼합조성물은 유성비타민A 지방산에스터, 비타민 B1 염산염, 디벤조일티아민, 비타민B1 프탈린염, L-아스코르브산나트륨으로 구성되는 것을 특징으로 한다.The mixed composition for improving the growth rate through stimulation of the mitochondrial matrix of the shiitake mushroom according to the present invention is composed of an oily vitamin A fatty acid ester, vitamin B1 hydrochloride, dibenzoyl thiamine, vitamin B1 phthalin salt, and sodium L-ascorbate .

본 발명에 따른 표고버섯 미토콘드리아 기질(Mitochondrial matrix) 자극을 통한 생장속도 향상을 위한 혼합조성물의 구체적인 내용을 살펴보면 다음과 같다.The composition of the mixed composition for improving the growth rate through stimulation of the mitochondrial matrix of the shiitake mushroom according to the present invention is as follows.

유성비타민A 지방산에스터(Vitamin A in oil)는 수산동물의 신선한 간장, 유문수 등으로부터 얻은 지방유 및 그의 비타민A 농축물 또는 비타민A 지방산에스터 또는 이들을 식용 식물유에 녹인 것을 말한다. 비타민류 영양강화제로 분유 및 껌 등에 이용한다. 엷은 노란색~붉은색을 띤 유지 모양으로서 약간 특이한 냄새가 있다. 물에 불용이고 유기용매에 잘 용해된다. 알칼리에 안정하나 산성에 불안정하며 공기 중에 자동산화되어 효력을 잃게 된다. 비타민 A가 결핍되면 야맹증, 각막연화증. 성장 정지, 저항력 저하 등이 일어나며, 과잉되면 구토, 두통, 불면이 일어나고 만성증상으로는 식욕부진, 탈모, 피부 및 점막 건조, 간손상, 신경과민 등이 일어난다. 비타민 A의 1일 영양 권장량은 성인의 경우 700mgRE이다. 분유 및 껌 등에 사용된다. 산화되기 쉽고 광선에 의해 분해변질되어 식품의 풍미 저하를 초래하므로 빛이 차단된 밀봉용기에 담아 저장한다.Vitamin A in oil is a fatty oil obtained from fresh liver and prawns of aquatic animals and its vitamin A concentrate or vitamin A fatty acid ester or it is dissolved in edible vegetable oil. It is a nutritional fortifier for vitamins and is used for powdered milk and gum. It has a pale yellow to red-colored retentive shape with a slight peculiar smell. Insoluble in water and soluble in organic solvents. It is stable to alkali but is unstable to acid and is automatically oxidized in the air to lose its effect. Vitamin A deficiency causes night blindness, corneal softening. Growth arrest, decreased resistance, and excessive vomiting, headache, insomnia occurs. Chronic symptoms include loss of appetite, hair loss, skin and mucous membrane dryness, liver damage, and nervous irritation. The daily recommended daily intake of vitamin A is 700 mg for adults. Powdered milk and gum. It is easily oxidized and decomposed by light rays, resulting in a decrease in the flavor of the food.

비타민 B1 염산염(Vitamin B1 Hydrochloride)은 맛이 쓰고 약간의 쌀겨 냄새가 있는 비타민류 영양강화제로 백미, 소맥분, 유제품, 빵, 제과, 간장, 잼 등에 이용한다. 무색~흰색의 단사정계의 바늘 모양 또는 판 모양 결정은 알파형이고 사방정계의 미세한 바늘 모양의 결정은 베타형이다. 화학식 C12H17ON4ClS·HCl. 물에 잘 용해되며 글리세린, 알코올에는 약간 용해되고, 에테르, 벤젠, 클로로폼에는 용해되지 않는다. 물에 잘 용해되므로 액체 식품에 첨가가 용이한 반면, 염류에 비해 식품에 첨가될 경우 안정도가 떨어져 손실이 큰 결점이 있다. 비타민 B1(티아민)의 염산염 결정은 공기 중에서 안정하고, 열에 대한 안정도는 pH에 따라 달라 산성용액(pH 3.5~5.0)에서는 상당히 안정하나, 알칼리 용액일 경우 상온에서도 불안정하다. 공기 중에서 안정하나 흡습성이 있어 장기간 보존 시 서서히 분해되어 착색된다. pH는 2.7~3.4이며, 녹는점은 248℃이다. 비타민 B1은 피로포스페이트(TPP)의 조효소로 탄수화물과 분지상 아미노산(류신, 아이소류신, 발린)의 대사에 관여한다. 비타민B1 부족 시 각기병, 신경질환, 신경염, 알코올성 건망증후군 등의 대사장애를 일으키며, 조직의 필요량보다 과다한 비타민 B1은 소변을 통해 신속히 배설되므로 과잉 증상은 거의 나타나지 않는다. 마우스의 경구투여 시 LD50(엘디50)은 9,160.5(8,297~10,114)㎎/㎏이다. 비타민 B1의 영양권장량은 성인남자의 경우 1.3mg/day이며, 성인여자는 1.0mg/day을 권장하고 있다. 이용되는 식품에는 백미, 소맥분, 유제품, 빵, 제과, 간장, 잼 등이 있다. 조리 중에 유출되기 쉬우며 가열조리의 경우 약 30%의 비타민 B1이 파괴되고, 자외선에 의해서도 분해된다. 비타민 B1은 피리미딘 핵과 티아졸 핵이 결합된 것으로 염산염 형태로 존재한다. 비타민 B1은 조개류, 민물고기, 고사리, 버섯에 함유되어 있는 효소 티아미나아제(또는 아뉴리나아제)에 의하여 피리미딘 핵과 티아졸 핵으로 분해되며 이 효소는 가열에 의해 불활성화된다. 또한 비타민 B1은 태양광선에 의해 거의 분해되지 않으나 비타민 B1 용액 중에 형광물질이 존재하면 쉽게 분해된다. Vitamin B1 Hydrochloride is a vitamins nutrient enhancer that is tasted and has a slight bran smell. It is used for white rice, wheat flour, dairy products, bread, confectionery, soy sauce, jam. The needle-like or plate-like crystals of colorless to white monoclinic are alpha-type and the fine needle-like crystals of orthorhombic are beta-type. C12H17ON4ClS.HCl. It dissolves well in water and is slightly soluble in glycerin and alcohol and does not dissolve in ether, benzene and chloroform. It is easy to add to liquid foods because it dissolves well in water. However, when added to food, there is a drawback that stability is lowered and loss is higher than salt. The hydrochloride crystals of vitamin B1 (thiamine) are stable in air, and the stability to heat depends on the pH, which is fairly stable in an acidic solution (pH 3.5-5.0), but unstable at room temperature in the case of an alkali solution. It is stable in air but hygroscopic. It is slowly decomposed and colored when stored for a long time. The pH is 2.7 to 3.4 and the melting point is 248 ° C. Vitamin B1 is a coenzyme of pyrophosphate (TPP) that is involved in the metabolism of carbohydrates and branched amino acids (leucine, isoleucine, valine). Vitamin B1 deficiency causes metabolic disorders such as angina pectoris, neuropathy, neuritis, alcoholic fever syndrome, and excess vitamin B1 is excreted more quickly than urine. LD50 (eld 50) of mouse is orally administered is 9,160.5 (8,297-10,114) mg / kg. The nutritional recommendation for vitamin B1 is 1.3 mg / day for adult men and 1.0 mg / day for adult women. Foods used include white rice, wheat flour, dairy products, bread, confectionery, soy sauce, and jam. It is easy to spill out during cooking, and about 30% of the vitamin B1 is destroyed by heating cooking, and it is also decomposed by ultraviolet rays. Vitamin B1 is the hydrochloride form of pyrimidine nucleus and thiazole nucleus. Vitamin B1 is degraded into pyrimidine nucleus and thiazole nucleus by enzymatic thiaminase (or agarase) contained in shellfish, freshwater fish, bracken, and mushroom, and this enzyme is inactivated by heating. In addition, vitamin B1 is hardly degraded by sunlight, but it is easily decomposed in the presence of fluorescent substance in vitamin B1 solution.

디벤조일티아민(Dibenzoyl Thiamine)은 백색의 결정성 분말로 무미하고 무취한 강화제이다. 화학식은 C26H26O4N4S. 유기용매나 산성의 물에는 용해되나 중성의 물에는 거의 용해되지 않는다. 티아민염산염이 수용성이고 열분해에 의해 쌀겨 냄새가 나기 때문에 1953년에 안정하고 물에 불용성인 디벤조일티아민이 합성되었다. 열과 알칼리에 안정하다. 티아민염산염보다 안정성이 좋고 식품 가공 시 분해 되지 않으며 냄새가 없다. 녹는점은 169~174℃이다. 다른 비타민 B1에 비하여 체내에서 흡수가 빠르고 효소에 의한 분해가 일어나지 않아 효율이 높다.주요 특징은 다음과 같다. Dibenzoyl Thiamine is a white crystalline powder, a tasteless and odorless enhancer. The formula is C26H26O4N4S. It dissolves in organic solvents or acidic water but hardly dissolves in neutral water. Since thiamine hydrochloride is water soluble and smells like rice bran by pyrolysis, dibenzoylthiamine, which is stable and insoluble in water, was synthesized in 1953. It is stable to heat and alkali. It is more stable than thiamine hydrochloride, does not decompose in food processing, and has no odor. Melting point is 169 ~ 174 ℃. Compared to other vitamins B1, it is absorbed rapidly in the body and does not decompose by enzymes, so it has high efficiency.

① 열에 안정하여 가공 중 손실과 열 분해로 인하여 아민취 발생이 없다. ① It is stable to heat, so there is no occurrence of amine owing to loss and thermal decomposition during processing.

② 유화 능력이 약간 있어 유지식품에 사용 가능하다.  ② It has a little emulsifying ability, so it can be used for preserving food.

③ 알칼리에 대하여 안정하여 중국국수 강화에 사용한다. ③ It is stable against alkali and used for strengthening Chinese noodles.

④ 매우 난용성이므로 분말을 직접 첨가하던가 또는 산성조건에서 사용해야 한다. 용해도가 약간 높은 디벤조일티아민염산염 형태로 물에 녹여 사용한다.  ④ It is very weakly soluble and should be added directly or in acidic condition. It is dissolved in water in the form of dibenzoyl thiamine hydrochloride with slightly higher solubility.

마우스의 경구투여 LD50(엘디50)은 29,988㎎/㎏ 이다. 물에 잘 녹지 않으므로 쌀, 국수, 두부, 된장, 간장 등에 사용하며, 티아민염산염과 같은 역가의 중량비는 1.454이다. 밀봉용기에 담아 보관한다. Oral LD50 (eld 50) of mouse is 29,988 mg / kg. It is used in rice, noodle, tofu, miso, soy sauce and so on because it does not dissolve well in water. The weight ratio of activity such as thiamine hydrochloride is 1.454. Keep in sealed container.

비타민B1 프탈린염(Vitamin B1 Phenolphthalinate)은 흰색의 미세한 결정 또는 결정성 가루로 무취이거나 약간의 특이한 냄새를 가지고 있는 비타민류 강화제이다. 쌀, 소맥분, 빵, 비스킷, 캐러멜 등에 이용한다. 화학식은 C32H32O5N4S이며, 녹는점은 135℃이다. 약 500배 물에 용해될 정도로 물에는 용해하기 어렵다. 메탄올, 수산화 알칼리, 더운물에 잘 용해되며 에테르, 클로로폼에는 용해하기 어렵다. 식품에 첨가하였을 경우 안정성이 높으며, 염산염보다 용해도는 낮으나 알칼리나 수분에 대해 안정하다. 급성독성은 티아민산염보다 약하며, 물에 녹기 어렵기 때문에 식품에 첨가하였을 경우 안정성이 높아 쌀, 소맥분, 빵, 비스킷, 캐러멜 등에 이용하고 있다. 티아민염산염과 같은 역가의 중량비는 1.734이다. 빛이 차단된 밀봉용기에 보관한다.Vitamin B1 Phenolphthalinate is a vitamins enhancer that is white fine crystals or crystalline powder that is odorless or has a slight peculiar odor. Rice, wheat flour, bread, biscuits, and caramel. The formula is C32H32O5N4S, and the melting point is 135 ° C. It is difficult to dissolve in water to such an extent that it dissolves about 500 times in water. It is soluble in methanol, alkali hydroxide, hot water, and is difficult to dissolve in ether and chloroform. It has high stability when added to food, low solubility than hydrochloride but stable to alkali and water. Acute toxicity is weaker than thiaminate and because it is difficult to dissolve in water, it is used for rice, wheat flour, bread, biscuit, caramel etc. when it is added to food. The weight ratio of the activity such as thiamine hydrochloride is 1.734. Store in a sealed container with light.

L-아스코르브산나트륨(Sodium L-Ascorbate)은 냄새가 없고 비누 맛이 나는 비타민류 강화제이다. 약한 환원 작용이 있어서 산화에 의해 일어나는 색깔의 변화를 방지시켜 주며 육제품, 과일통조림, 주스, 잼의 맛과 향기를 유지시킨다. 화학식은 C6H7NaO6이다. 흰색노란색을 띤 흰색의 알갱이 또는 결정성 가루이며 냄새가 없고 비누 맛이 나는 강화제이다. 물에 대한 용해도는 89%(25℃)이며 에탄올, 메탄올, 식물성 기름에는 녹지 않는다. 건조상태에서 안정하며 흡습상태에서는 불안정하다. 수용액(1→50)의 pH는 6.58.0이고, 녹는점은 약 200℃이다. L-아스코르브산나트륨 1g은 아스코르브산 0.894에 상당한다. 약한 환원 작용이 있어서 산화에 의해 일어나는 색깔의 변화를 방지 시켜 주며 우유, 햄, 소시지 등의 육제품의 색, 향, 맛 유지 및 탄력성을 증가시키며 과일통조림, 주스, 잼의 맛과 향기를 유지시키기 위해 첨가한다. 잼, 과일통조림, 드롭, 주스 등에 보통 이용되는 것은 L-아스코르브산이고, 나트륨염은 햄, 소시지, 생선묵 등의 육색고정, 선도유지로서의 용도가 넓다. 햄, 소시지 등에 아스코르브산을 다량 첨가하면, 이산화질소가 빨리 발생하여 아질산을 소실하고, 다시 pH를 저하시키므로 나트륨염을 이용하는 경우가 많다. 빛이 차단된 밀봉용기에 보존한다. Sodium L-Ascorbate is an odorless and soap-flavored vitamin-like enhancer. It has a weak reducing action to prevent the color change caused by oxidation and maintains the flavor and aroma of meat products, canned fruits, juices and jams. The formula is C6H7NaO6. White yellowish white granules or crystalline powder, odorless and soap-like enhancer. The solubility in water is 89% (25 ° C) and does not dissolve in ethanol, methanol and vegetable oils. It is stable in the dry state and unstable in the moisture absorption state. The pH of the aqueous solution (1 → 50) is 6.58.0 and the melting point is about 200 ° C. 1 g of sodium L-ascorbate corresponds to 0.894 of ascorbic acid. It has a weak reducing action to prevent changes in color caused by oxidation. It increases the color, flavor, taste and elasticity of meat products such as milk, ham, sausage, etc. and maintains the taste and fragrance of canned fruit, juice and jam . L-ascorbic acid is commonly used in jams, canned fruits, drops, juices, etc., and sodium salts are widely used for color fixation and maintenance of lines such as ham, sausage, and fish paste. When a large amount of ascorbic acid is added to ham, sausage and the like, nitrogen dioxide is rapidly generated, nitrite is eliminated, and pH is lowered again, so that sodium salt is often used. Keep in a sealed container with light.

위에서 언급한 물질들로 구성된 표고버섯 미토콘드리아 기질 자극을 통한 생장속도 향상을 위한 혼합조성물의 구성비를 살펴보면 [표 1] 과 같다.       [Table 1] shows the composition ratio of the mixed composition for improving the growth rate through mitochondrial matrix stimulation of mushroom mushroom composed of the above-mentioned substances.

본 발명에 따른 표고버섯 미토콘드리아 기질 자극을 통한 생장속도 향상을 위한 혼합조성물을 구현하기 위한 혼합조성물의 구성비The composition ratio of the mixed composition for realizing the mixed composition for improving the growth rate through the mitochondrial matrix stimulation of the shiitake mushroom according to the present invention 구 분division 나노 사이즈Nano size 구성비율Composition ratio 비 고Remarks 유성비타민A 지방산에스터
(Vitamin A in oil)
Oily Vitamin A Fatty Acid Esters
(Vitamin A in oil)
80nm80nm 20wt%20wt% 오차율±1wt%Error rate ± 1 wt%
비타민 B1 염산염
(Vitamin B1 Hydrochloride)
Vitamin B1 hydrochloride
(Vitamin B1 Hydrochloride)
80nm80nm 20wt%20wt% 오차율±1wt%Error rate ± 1 wt%
디벤조일티아민
(Dibenzoyl Thiamine)
Dibenzoyl thiamine
(Dibenzoyl Thiamine)
120nm120 nm 10wt%10wt% 오차율±0.5wt%Error rate ± 0.5 wt%
비타민B1 프탈린염
(Vitamin B1 Phenolphthalinate)
Vitamin B1 phthalin salt
(Vitamin B1 Phenolphthalinate)
120nm120 nm 20wt%20wt% 오차율±1wt%Error rate ± 1 wt%
L-아스코르브산나트륨
(Sodium L-Ascorbate)
Sodium L-ascorbate
(Sodium L-Ascorbate)
120nm120 nm 30wt%30wt% 오차율±1wt%Error rate ± 1 wt%
총 계sum 100wt%100wt%

상기한 구성비는 반복 실험을 통하여 가장 적합한 황금비를 찾아낸 결과이다.       The above composition ratio is a result of finding the most suitable golden ratio through repeated experiment.

두 번째, 위의 제조방법으로 제조한 나노 사이즈의 혼합조성물에 레이저 조사 공정을 거치도록 한다. 이에 대하여 보다 상세히 살펴보면 하기와 같다.       Secondly, the laser irradiation process is performed on the nano-sized mixed composition manufactured by the above manufacturing method. This will be described in more detail below.

(가). 실리콘 페이퍼(siliconpaper)를 준비한다. 실리콘 페이퍼는 순도 99.9999999%의 단결정(單結晶) 규소를 얇게 잘라 표면을 매끈하게 다듬은 것을 구입하여 사용하도록 한다. 실리콘페이퍼는 결함이나 오염이 없어야 함은 물론, 고도의 평탄도를 유지하도록 한다. 두께 0.3mm, 지름 15~30cm의 원판 모양의 것을 사용할 것을 권장한다.   (end). Prepare silicon paper. Silicon paper is manufactured by cutting thin single crystal silicon of 99.9999999% purity and smoothening the surface. Silicon paper should be free of defects or contamination, and should maintain a high level of flatness. It is recommended to use a disk-shaped one with a thickness of 0.3 mm and a diameter of 15 to 30 cm.

(나). 실리콘 페이퍼(siliconpaper) 위의 상술한 방법으로 제조한 나노 사이즈의 혼합조성물을 일정량 골고루 분산시키도록 한다. 단, 도포 두께는 0.2mm 이하가 되도록 구성한다.  (I). Silicon paper A nano-sized mixed composition prepared by the above method is dispersed evenly in a certain amount. The coating thickness is 0.2 mm or less.

(다). 실리콘 페이퍼(siliconpaper) 위에 상술한 내용대로 0.2mm 이하로 도포한 다음, 여기에 레이저를 조사하도록 한다.  (All). It is coated on a silicon paper with a thickness of 0.2 mm or less as described above, and then irradiated with a laser.

(라). 레이저 펄스의 파장은 1088nm±4nm, 주파수는 4.8~5.2Hz, 평균 출력 광전력은 65~85W의 레이저를 5분간 조사하도록 한다.  (la). A laser with a wavelength of 1088 nm ± 4 nm, a frequency of 4.8 to 5.2 Hz and an average output power of 65 to 85 W is irradiated for 5 minutes.

상술한 첫 번째와 두 번째 공정을 거치면 혼합조성물로 구성된 나소소재는 표고버섯 세포 내의 미토콘드리아의 기질을 자극하는 특성을 지니게 된다. 이렇게 제조한 나노 크기의 혼합조성물을 활용하여 표고버섯에 적용할 경우, 나노입자들이 미토콘드리아 내의 기질을 효과적으로 자극하여 신진대사를 촉진하게 된다. 이를 통하여 세포분열이 촉진되어 표고버섯의 생장속도가 향상되게 된다.    After the first and second steps described above, the Naso material composed of the mixed composition has the property of stimulating the substrate of the mitochondria in the mushroom cells. When applied to a mushroom using the nano-sized mixed composition thus prepared, the nanoparticles effectively stimulate the substrate in mitochondria to promote metabolism. This promotes cell division and increases the growth rate of shiitake mushrooms.

(실시예) (Example)

1. 혼합조성물의 혼합(混合)과정1. Mixing (mixing) process of mixed composition

평균입경이 약 80nm인 유성비타민A 지방산에스터(Vitamin A in oil) 20 중량부, 평균입경이 약 80nm인 비타민 B1 염산염(Vitamin B1 Hydrochloride) 20 중량부, 평균입경이 약 120nm인 디벤조일티아민(Dibenzoyl Thiamine) 10 중량부, 평균입경이 약 120nm인 비타민B1 프탈린염(Vitamin B1 Phenolphthalinate) 20 중량부, 평균입경이 약 120nm인 L-아스코르브산나트륨(Sodium L-Ascorbate) 30 중량부를 골고루 혼합하였다.20 parts by weight of an oily vitamin A fatty acid ester having an average particle diameter of about 80 nm, 20 parts by weight of Vitamin B1 Hydrochloride having an average particle diameter of about 80 nm, dibenzoyl Thiamine), 20 parts by weight of Vitamin B1 phenolphthalinate having an average particle diameter of about 120 nm, and 30 parts by weight of sodium L-ascorbate having an average particle diameter of about 120 nm.

2. 레이저 조사(照射)과정2. Laser Irradiation Process

1번 과정에서 제조한 혼합조성물을 다음의 공정으로 레이저 조사(照射) 처리하였다.The mixed composition prepared in the step 1 was laser-irradiated in the following steps.

(가). 실리콘 페이퍼(siliconpaper)를 준비한다. 실리콘 페이퍼는 순도 99.9999999%의 단결정(單結晶) 규소를 얇게 잘라 표면을 매끈하게 다듬은 것을 구입하여 사용하도록 한다. 실리콘 페이퍼는 결함이나 오염이 없어야 함은 물론, 고도의 평탄도를 유지하도록 한다. 두께 0.3mm, 지름 30cm의 원판 모양의 것을 사용할 것을 권장한다.   (end). Prepare silicon paper. Silicon paper is manufactured by cutting thin single crystal silicon of 99.9999999% purity and smoothening the surface. Silicon paper should be free of defects or contamination, and should maintain a high level of flatness. It is recommended to use a disk-shaped one with a thickness of 0.3 mm and a diameter of 30 cm.

(나). 실리콘 페이퍼(siliconpaper) 위의 상술한 방법으로 제조한 나노 사이즈의 혼합조성물을 일정량 골고루 분산시키도록 한다. 단, 도포 두께는 0.2mm 이하가 되도록 구성한다.  (I). Silicon paper A nano-sized mixed composition prepared by the above method is dispersed evenly in a certain amount. The coating thickness is 0.2 mm or less.

(다). 실리콘 페이퍼(siliconpaper) 위에 상술한 내용대로 0.2mm 이하로 도포한 다음, 여기에 레이저를 조사하도록 한다.  (All). It is coated on a silicon paper with a thickness of 0.2 mm or less as described above, and then irradiated with a laser.

(라). 레이저 펄스의 파장은 1088nm, 주파수는 5.0Hz, 평균 출력 광전력은 75W의 레이저를 5분간 조사하도록 한다.  (la). A laser having a laser pulse wavelength of 1088 nm, a frequency of 5.0 Hz and an average output optical power of 75 W is irradiated for 5 minutes.

3. 혼합조성물 용액의 제조3. Preparation of mixed composition solution

물과 혼합조성물을 중량비 1,000 : 1로 혼합한 다음, 교반기에 투입하여 1,000RPM으로 3분간 교반하여 혼합조성물 용액을 제조하도록 한다.Water and the mixed composition are mixed at a weight ratio of 1,000: 1, and then the mixture is charged into a stirrer and stirred at 1,000 RPM for 3 minutes to prepare a mixed composition solution.

4. 상술한 혼합조성물 용액을 통한 표고버섯(Lentinus edodes)의 균사생장 속도 실험과 균사밀도(Mycelial Growth and Density by using Mixturein Lentinus edodes ) 실험4. Lentinus ( Lentinus) through the above-mentioned mixed composition solution Mycelial growth rate experiments and hyphae density of edodes) (Mycelial Growth Density and by using Mixturein Lentinus edodes ) experiment

(1). 시험재료 수집 : 8종(대조구, 원액, 200, 400, 600, 800, 1000, 1200배액)(One). Test material collection: 8 kinds (control, undiluted, 200, 400, 600, 800, 1000, 1200 times)

(2). 시험설계 : Mixture를 통한 표고버섯(Lentinus edodes)의 균사생장과 균사밀도(Mycelial Growth and Density by using OTM in Lentinus edodes ) (2). Test design: Lentinus through the Mixture mycelial growth and hyphae density of edodes) (Mycelial Growth Density and by using OTM in Lentinus edodes )

(3). 버섯 기본 톱밥배지 조성 및 칼럼반복(3). Mushroom basic sawdust medium composition and column repeat

- 부피(Volume) 70cc/무게(Weight) 50g - Volume 70cc / Weight 50g

- 면실피 80%+미강 20% (충분히 혼합하고 65%조절) - Cotton fiber 80% + Rice bran 20% (fully mixed and 65% controlled)

- 3반복 x 5처리 + Control = 18칼럼 - 3 iterations x 5 processing + Control = 18 column

- 121℃에 40분 고압살균 - High pressure sterilization at 121 ° C for 40 minutes

- Petri-dish 균사 완성분 1cm x 1cm 떼어 넣음 - Petri-dish Mycelium min 1cm x 1cm peel off

- 25℃ 배양실에 암배양(어둡게) - incubation at 25 ℃ incubation room (dark)

- 5일 간격 균사생장 속도(길이) 측정 : 네임펜으로 표시 - Mycelial growth rate (length) measurement at 5 days interval: marked with namepen

- 균사생장이 완성되면 대표적인 것을 함께 놓고 비교 - When the mycelial growth is completed,

- 균사밀도 조사 : Compact하게 균사가 자랐으면 +++개, 보통이면 ++, 약하면 + - Mycelial density survey: ++ if you grow your hyphae compactly, usually ++, weakly +

- 대조구(Control)와 비교한다.  - Compare with Control.

- 가장 좋은 처리를 찾는다. - Find the best treatment.

(4). 실험 1. 혼합조성물 용액(Water Mixture) 농도별 처리에 따른 표고 균사생장 속도 실험(4). Experiment 1. Mycelial growth rate of mycelial growth by treatment with concentration of mixed composition

- 공시균주 : 산조701(921)  - Disclosure strain: Sanjo 701 (921)

- 혼합조성물 용액(Water Mixture) 농도 : 대조구, 원액, 200, 400, 600, 800, 1000, 1200배액  - Water Mixture Concentration: Control, stock solution, 200, 400, 600, 800, 1000, 1200 times

- 재료 및 방법 : 유리컬럼(8처리 X 3반복 X 1균주 = 24컬럼  Materials and Methods: A glass column (8 treated X 3 repeats X 1 strain = 24 columns

참나무톱밥 : 미강 = 8:2 혼합 후 수분 조절할 때, 혼합조성물 용액(Water Mixture) 농도별로 3개 컬럼     Oak sawdust: rice bran = 8: 2 Mixing composition solution (Water Mixture)

- 조사항목 : 균사생장 속도(5일 간격 체크)  - Survey items: Mycelial growth rate (5-day interval check)

표 2. 혼합조성물 용액(Water Mixture) 농도별 처리에 따른 표고 균사생장 속도Table 2. Mycelial growth rate of the mycelia according to concentration of mixed composition solution (Water Mixture) 구 분division 균사생장 속도(mm)Mycelial growth rate (mm) 비고Remarks 대조구Control <10<10 실험 개시 후(後)
5일
도과 후
측정
After the experiment was started,
5 days
After school
Measure
원액Undiluted solution 85-9285-92 200배액200 times 82-8882-88 400배액400 times 73-7773-77 600배액600 times 52-5852-58 800배액800 times 42-4542-45 1,000배액1,000 times 35-3935-39 1,200배액1,200 times 24-2824-28

(5). 실험 2. 혼합조성물 용액(Water Mixture) 농도별 표고 균사밀도 실험(5). Experiment 2. Experimental experiment on the density of the hyphae of the mixed composition solution (Water Mixture)

- 공시균주 : 참아람  - Disclosed strain:

- OTM 농도 : 대조구, 원액, 200, 400, 600, 800, 1000, 1200배액  - OTM Concentration: Control, stock solution, 200, 400, 600, 800, 1000, 1200 times

- 재료 및 방법 : 유리컬럼(8처리 X 3반복 X 1균주 = 24컬럼  Materials and Methods: A glass column (8 treated X 3 repeats X 1 strain = 24 columns

참나무톱밥 : 미강 = 8:2 혼합후 수분조절할 때 혼합조성물 용액(Water Mixture) 농도별로 3개 컬럼     Oak sawdust: rice bran = 8: 2 Mixing Composition Solution (Water Mixture)

- 조사항목 : 균사밀도(5일 간격 체크)  - Survey items: Mycelial density (5-day interval check)

표 3. 혼합조성물 용액(Water Mixture) 농도별 처리에 따른 표고 균사밀도Table 3. Density of sea level hyphae according to treatment of mixed composition solution (Water Mixture) 구 분division 균사 밀도Mycelial density 비고Remarks 대조구Control ++ 실험 개시 후(後)
5일
도과 후
측정
After the experiment was started,
5 days
After school
Measure
원액Undiluted solution ++++++ 200배액200 times ++++++ 400배액400 times ++++++ 600배액600 times ++++++ 800배액800 times ++++++ 1,000배액1,000 times ++++ 1,200배액1,200 times ++++

상기에서는 본 발명에 따른 표고버섯 미토콘드리아 기질 자극을 통한 생장속도 향상을 위한 혼합조성물을 설명하기 위해, 구체적인 실시 예를 들어 설명하였지만, 이러한 구체적인 실시 예로부터 본 발명의 기술사상이 한정되는 것이 아니고 특허청구범위와 발명의 상세한 설명으로부터 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 충분히 변경 또는 변형 가능한 정도는 본 발명의 범주로 이해하여야 할 것이다.In the above description, the mixed composition for improving the growth rate through the mitochondrial matrix stimulation of the mushroom according to the present invention has been described with concrete examples. However, the technical idea of the present invention is not limited to these specific examples, It is to be understood that the scope of the present invention is to be determined by those skilled in the art without departing from the scope and spirit of the present invention.

Claims (3)

유성비타민A 지방산에스터(Vitamin A in oil) 19~21wt%, 비타민 B1 염산염(Vitamin B1 Hydrochloride) 19~21wt%, 디벤조일티아민(Dibenzoyl Thiamine) 9.5~10.5wt%, 비타민B1 프탈린염(Vitamin B1 Phenolphthalinate) 19~21wt%, L-아스코르브산나트륨(Sodium L-Ascorbate) 29~31wt%로 구성되는 것을 특징으로 하는 표고버섯 미토콘드리아 기질 자극을 통한 생장속도 향상을 위한 혼합조성물.Vitamin A in oil, 19 to 21 wt%, Vitamin B1 Hydrochloride, 19 to 21 wt%, Dibenzoyl Thiamine, 9.5 to 10.5 wt%, Vitamin B1 phytinic acid salt (Vitamin B1 Phenolphthalinate) and 29 to 31 wt% of Sodium L-Ascorbate (hereinafter referred to as &quot; Sodium L-Ascorbate &quot;). 제 1 항에 있어서,
실리콘 페이퍼(siliconpaper)를 준비한다. 실리콘 페이퍼는 순도 99.9999999%의 단결정(單結晶) 규소를 얇게 잘라 표면을 매끈하게 다듬은 것을 구입하여 사용하도록 하며, 실리콘 페이퍼는 결함이나 오염이 없어야 함은 물론, 고도의 평탄도를 유지하도록 한다. 두께 0.3mm, 지름 15~30cm의 원판 모양의 것을 사용하도록 하며;
실리콘 페이퍼(siliconpaper) 위에 제1항의 방법으로 제조한 나노 사이즈의 혼합조성물을 일정량 골고루 분산시키도록 한다. 단, 도포 두께는 0.2mm 이하가 되도록 구성하도록 하며;
실리콘 페이퍼(siliconpaper) 위에 상술한 내용대로 0.2mm 이하로 도포한 다음, 여기에 레이저를 조사하도록 하며;
조사하는 레이저 펄스의 파장은 1088nm±4nm, 주파수는 4.8~5.2Hz, 평균 출력 광전력은 65~85W의 레이저를 5분간 조사하는 것을 특징으로 하는 표고버섯 미토콘드리아 기질 자극을 통한 생장속도 향상을 위한 혼합조성물.
The method according to claim 1,
Prepare silicon paper. Silicon paper is manufactured by cutting thin single crystal silicon with a purity of 99.9999999% to obtain a smooth surface. The silicone paper should be free from defects or contamination, and also maintain a high level of flatness. A disk-shaped one having a thickness of 0.3 mm and a diameter of 15 to 30 cm is used;
The nano-sized mixed composition prepared by the method of the first aspect is dispersed evenly on a silicon paper. Provided that the coating thickness is 0.2 mm or less;
A silicon paper is coated on the silicon paper at a thickness of 0.2 mm or less as described above, and then the laser is irradiated thereto;
Wherein the laser pulse is irradiated with a laser having a wavelength of 1088 nm ± 4 nm, a frequency of 4.8 to 5.2 Hz and an average output optical power of 65 to 85 W for 5 minutes, and a mixture for improving growth rate through a mushroom mitochondrial matrix stimulation Composition.
제 1 항에 있어서,
유성비타민A 지방산에스터(Vitamin A in oil)는 입자의 평균크기가 80nm, 비타민 B1 염산염(Vitamin B1 Hydrochloride)은 입자의 평균크기가 80nm, 디벤조일티아민(Dibenzoyl Thiamine)은 입자의 평균크기가 120nm, 비타민B1 프탈린염(Vitamin B1 Phenolphthalinate)은 입자의 평균크기가 120nm, L-아스코르브산나트륨(Sodium L-Ascorbate)은 입자의 평균크기가 120nm로 구성되어 지는 것을 특징으로 하는 표고버섯 미토콘드리아 기질 자극을 통한 생장속도 향상을 위한 혼합조성물.
The method according to claim 1,
The average size of the oily vitamin A fatty acid is 80 nm, the average size of the vitamin B1 Hydrochloride is 80 nm, the average size of the particles is 120 nm, Vitamin B1 Phenolphthalinate has a mean particle size of 120 nm, and sodium L-ascorbate has an average particle size of 120 nm. The mushroom mitochondrial matrix stimulation A composition for enhancing the growth rate through.
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