KR20180030789A

KR20180030789A - 돌연변이된 이소시트레이트 데히드로게나제 idh1 r132h의 억제제

Info

Publication number: KR20180030789A
Application number: KR1020177036977A
Authority: KR
Inventors: 하이코 시르머
Original assignee: 바이엘 파마 악티엔게젤샤프트
Priority date: 2015-07-27
Filing date: 2016-07-22
Publication date: 2018-03-26
Also published as: IL256024A; JP6804516B2; JP2018521095A; SV2018005621A; EP3328837A1; TW201708193A; WO2017016992A1; TN2018000038A1; CN107810181A; AU2016300980A1; CA2993473A1; DOP2018000027A; BR112018001534A2; CR20180053A; CL2018000249A1; AR105493A1; CU20180014A7; CN107810181B; ES2860693T3; US10344004B2

Abstract

본 발명은 부가물 (2E)-부트-2-엔디오산 - 3-(2-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]아미노}-1-[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산 (1:4), 이 부가물을 제조하는 방법, 이 부가물을 포함하는 제약 조성물 및 또한 질환의 치료를 위한 의약을 제조하기 위한 이 부가물의 용도에 관한 것이다.

Description

돌연변이된 이소시트레이트 데히드로게나제 IDH1 R132H의 억제제

3-(2-아닐리노-1-시클로헥실-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산이 돌연변이된 이소시트레이트 데히드로게나제 IDH1 R132H의 억제제로서 공개된 명세서 WO2015/121210(A1)에 개시되어 있다.

IDH1 R132H는 다양한 세포 과정 예컨대 시트르산 회로, 지질 대사, 복구 과정 예컨대 히스톤 메틸화 및 DNA 메틸화에 수반된다 (Prensner, J.R., and Chinnaiyan, A.M.: Metabolism unhinged: IDH mutations in cancer, Nature Medicine 2011, 17, 291-293). IDH1 돌연변이의 억제는 종양의 치료에서의 유망한 요법을 나타낸다.

선행 기술에 기초하여, 목적은 돌연변이된 이소시트레이트 데히드로게나제 IDH1 R132H의 고도로 강력한 억제제를 제공하는 것으로 이루어졌으며, 이는 인간 및/또는 동물 신체의 질환의 치료, 특히 종양의 치료에 사용될 수 있다.

본 발명은 (2E)-부트-2-엔디오산 - 3-(2-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]아미노}-1-[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산 (1:4)에 관한 것이며, 또한 하기에서 부가물 또는 본 발명에 따른 부가물로 지칭된다.

이는 푸마르산의 1개의 분자 대 3-(2-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]아미노}-1-[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산의 4개의 분자를 포함하는 부가물의 형태를 취한다.

개별 구성성분의 구조 화학식이 하기 제시된다:

3-(2-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]아미노}-1-[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산

(2E)-부트-2-엔디오산 (푸마르산)

놀랍게도, 이 부가물이 유리 3-(2-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]아미노}-1-[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산과 비교하여 보다 높은 생체이용률을 갖는다는 것이 발견된 바 있다.

한편, X선 결정학에 의한 조사는 부가물이 염이며, 즉 이는 푸마르산으로부터 3-(2-아닐리노-1-시클로헥실-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산으로의 양성자의 전달로부터 발생한다는 것을 밝혀낼 수 있었다.

부가물은 바람직하게는 결정질 형태로 존재한다.

본 발명은 또한 (2E)-부트-2-엔디오산 - 3-(2-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]아미노}-1-[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산 (1:4)의 결정질 형태에 관한 것이며, 이는 하기 2 세타 각에서의 X선 회절도에서의 최대치를 특징으로 한다: 5.4, 6.8, 10.2, 10.3, 10.8, 11.1, 16.8, 21.6.

본 발명은 또한 (2E)-부트-2-엔디오산 - 3-(2-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]아미노}-1-[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산 (1:4)의 결정질 형태에 관한 것이며, 이는 하기 파수 (값은 cm^-1의 단위임)에서의 라만 스펙트럼에서의 최대치를 특징으로 한다:

3088, 3047, 2934, 2910, 2874, 2771, 2717, 1658, 1632, 1615, 1521, 1463, 1451, 1420, 1338, 1306, 1294, 1277, 1245, 1198, 1184, 1167, 1155, 1127, 1109, 1077, 1049, 1018, 979, 961, 943, 922, 908, 877, 866, 839, 817, 789, 767, 714, 700, 685, 646, 631, 613, 568, 517, 503, 450, 438, 416, 388, 358, 339, 330, 102.

본 발명에 따른 부가물은 3-(2-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]아미노}-1-[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산을 이소프로판올 중에 과량 (부가물의 구성성분의 몰비에 기초함)의 (2E)-부트-2-엔디오산과 함께 용해시킴으로써 제조될 수 있다. 1부 3-(2-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]아미노}-1-[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산에 대한 0.3 내지 0.8부 (2E)-부트-2-엔디오산의 몰비가 바람직하고, 1부 3-(2-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]아미노}-1-[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산에 대해 0.5부 (2E)-부트-2-엔디오산을 사용하는 것이 특히 바람직하다.

이소프로판올을 증류시키면, 부가물은 결정화되고 단리될 수 있다.

본 발명은 추가로 본 발명에 따른 부가물을 제조하는 방법을 제공한다.

방법은

- 1 mol의 3-(2-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]아미노}-1-[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산, 0.3 내지 0.8 mol의 (2E)-부트-2-엔디오산을 사용하여, 이소프로판올 중 3-(2-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]아미노}-1-[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산 및 (2E)-부트-2-엔디오산을 도입하는 단계,

- 혼합물을 교반하면서 비점까지 가열하여 투명한 용액을 수득하는 단계,

- 바람직하게는 용액을 농축시킴으로써, (2E)-부트-2-엔디오산 - 3-(2-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]아미노}-1-[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산 (1:4)을 결정화하는 단계

를 포함한다.

3-(2-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]아미노}-1-[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산은 4-(1-시클로펜틸-1H-벤조[d]이미다졸-2-일아미노)-N-히드록시벤즈아미드에 대해 WO2010/151441에 개시된 방법과 유사하게 제조될 수 있다. 또 다른 개선된 방법은 추가로 하기 기재되어 있다.

푸마르산은 상업적으로 입수가능하다.

본 발명에 따른 부가물은 동위원소 변형체의 형태로 존재할 수 있다. 따라서 본 발명은 본 발명에 따른 부가물의 하나 이상의 동위원소 변형체, 특히, 중수소-함유 부가물을 포함한다.

용어 "동위원소 변형체"는 이러한 물질을 구성하는 하나 이상의 동위원소의 비천연 분획을 갖는 물질로서 정의된다.

표현 "비천연 분획"은 그의 고유 주파수보다 더 높은 이러한 동위원소의 분획을 의미하는 것으로 이해된다. 이와 관련하여 사용되는 동위원소의 고유 주파수는 문헌 ["Isotopic Compositions of the Elements 1997", Pure Appl. Chem., 70(1), 217-235, 1998]에서 찾아볼 수 있다.

이러한 동위원소의 예는 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 황, 플루오린, 염소, 브로민 및 아이오딘의 안정한 방사성 동위원소, 예컨대 ²H (중수소), ³H (삼중수소), ¹¹C, ¹³C, ¹⁴C, ¹⁵N, ¹⁷O, ¹⁸O, ³²P, ³³P, ³³S, ³⁴S, ³⁵S, ³⁶S, ¹⁸F, ³⁶Cl, ⁸²Br, ¹²³I, ¹²⁴I, ¹²⁵I, ¹²⁹I 및 ¹³¹I이다.

본 발명에 따른 부가물은 약리학적 및 약동학적 활성의 예측불가능한 유용한 스펙트럼을 나타낸다.

따라서 이는 인간 및 동물에서 질환의 치료 및/또는 예방을 위한 의약으로서 사용하는 데 적합하다.

IDH1 R132H 억제제로서의 본 발명에 따른 부가물의 제약 효능은 존재하는 3-(2-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]아미노}-1-[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산의 효과에 의해 설명될 수 있다.

본 발명은 추가로 장애의 치료 및/또는 예방, 특히 종양의 치료를 위한 본 발명에 따른 부가물의 용도를 제공한다.

본 발명은 추가로 종양의 치료 및/또는 예방 방법에 사용하기 위한 본 발명에 따른 부가물을 제공한다.

본 발명은 추가로 장애의 치료 및/또는 예방, 특히 종양의 치료를 위한 의약의 생산을 위한 본 발명에 따른 부가물의 용도를 제공한다.

본 발명은 추가로 제약 유효량의 본 발명에 따른 부가물을 사용하는, 장애의 치료 및/또는 예방, 특히 종양의 치료를 위한 방법을 제공한다.

본 발명에 따라 치료될 수 있는 고형 종양은, 예를 들어, 유방, 호흡기도, 뇌, 생식 기관, 위장관, 비뇨생식관, 눈, 간, 피부, 두경부, 갑상선, 부갑상선, 골, 및 결합 조직의 종양 및 이들 종양의 전이이다.

치료될 수 있는 혈액 종양은, 예를 들어,

- 다발성 골수종,

- 림프종 또는

- 백혈병

이다.

치료될 수 있는 유방 종양은, 예를 들어:

- 양성 호르몬 수용체 상태의 유방 암종

- 음성 호르몬 수용체 상태의 유방 암종

- Her-2 양성 유방 암종

- 호르몬 수용체 및 Her-2 음성 유방 암종

- BRCA-연관 유방 암종

- 염증성 유방 암종

이다.

치료될 수 있는 호흡기도의 종양은, 예를 들어,

- 비소세포 기관지 암종 예컨대, 예를 들어, 편평 세포 암종, 선암종, 대세포 암종 및

- 소세포 기관지 암종

이다.

치료될 수 있는 뇌의 종양은, 예를 들어,

- 신경교종,

- 교모세포종,

- 성상세포종,

- 수막종 및

- 수모세포종

이다.

치료될 수 있는 남성 생식 기관의 종양은, 예를 들어:

- 전립선 암종,

- 악성 부고환 종양

- 악성 고환 종양 및

- 음경 암종

이다.

치료될 수 있는 여성 생식 기관의 종양은, 예를 들어:

- 자궁내막 암종

- 자궁경부 암종

- 난소 암종

- 질 암종

- 외음부 암종

이다.

치료될 수 있는 위장관의 종양은, 예를 들어:

- 결장직장 암종

- 항문 암종

- 위 암종

- 췌장 암종

- 식도 암종

- 담낭 암종

- 소장의 암종

- 타액선 암종

- 신경내분비 종양

- 위장 기질 종양

이다.

치료될 수 있는 비뇨생식관의 종양은, 예를 들어:

- 방광 암종

- 신장 세포 암종

- 신우 및 하부 요로의 암종

이다.

치료될 수 있는 눈의 종양은, 예를 들어:

- 망막모세포종

- 안내 흑색종

이다.

치료될 수 있는 간의 종양은, 예를 들어:

- 간세포성 암종

- 담관세포 암종

이다.

치료될 수 있는 피부의 종양은, 예를 들어:

- 악성 흑색종

- 기저세포암종

- 가시세포암종

- 카포시 육종

- 메르켈 세포 암종

이다.

치료될 수 있는 두경부의 종양은, 예를 들어:

- 후두 암종

- 인두 및 구강의 암종

- 정중선 구조의 암종 (예를 들어 문헌 [NMC, C.A. French, Annu. Rev. Pathol. 2012, 7:247-265])

이다.

치료될 수 있는 육종은, 예를 들어:

- 연부 조직 육종

- 골육종

이다.

치료될 수 있는 림프종은, 예를 들어:

- 비-호지킨 림프종

- 호지킨 림프종

- 피부 림프종

- 중추 신경계의 림프종

- AIDS-연관 림프종

이다.

치료될 수 있는 백혈병은, 예를 들어:

- 급성 골수성 백혈병

- 만성 골수성 백혈병

- 급성 림프 백혈병

- 만성 림프 백혈병

- 모발상 세포 백혈병

이다.

본 발명에 따른 부가물은 전신적으로 및 국부적으로 작용할 수 있다. 이 목적을 위해, 이는 적합한 방식으로, 예를 들어 경구, 비경구, 폐, 비강, 설하, 설측, 협측, 직장, 피부, 경피, 결막 또는 귀 경로에 의해, 또는 이식물 또는 스텐트로서 투여될 수 있다.

본 발명에 따른 부가물은 이들 투여 경로에 적합한 투여 형태로 투여될 수 있다.

경구 투여에 적합한 투여 형태는 본 발명에 따른 부가물을 신속하게 및 변형된 방식으로 방출할 수 있는 선행 기술에 따라 작용하는 것, 예를 들어 정제 (비코팅된 또는, 예를 들어 본 발명에 따른 부가물의 방출을 조절하는 위액-저항성 또는 지연-용해 또는 불용성 코팅으로 코팅된 정제), 구강 내에서 급속하게 붕해되는 정제 또는 필름/웨이퍼, 필름/동결건조물, 캡슐 (예를 들어 경질 또는 연질 젤라틴 캡슐), 당-코팅된 정제, 과립, 펠릿, 분말, 에멀젼, 현탁액 또는 에어로졸이다.

비경구 투여는 흡수 단계를 피하면서 (예를 들어 정맥내, 동맥내, 심장내, 척수내 또는 요추내 경로에 의함) 또는 흡수를 포함하면서 (예를 들어 근육내, 피하, 피내, 경피 또는 복강내 경로에 의함) 달성될 수 있다. 비경구 투여에 적합한 투여 형태는 현탁액, 에멀젼, 동결건조물 또는 멸균 분말의 형태의 주사 및 주입을 위한 제제를 포함한다.

다른 투여 경로에 적합한 투여 형태는, 예를 들어, 흡입을 위한 제약 형태 (분말 흡입기, 네뷸라이저 포함), 점비제 또는 스프레이; 설측, 설하 또는 협측 투여를 위한 정제, 필름/웨이퍼 또는 캡슐, 좌제, 귀 또는 눈을 위한 제제, 질 캡슐, 수현탁액 (로션, 진탕 혼합물), 친지성 현탁액, 연고, 크림, 경피 치료 시스템 (예를 들어 패치), 밀크, 페이스트, 발포제, 산포제, 이식물 또는 스텐트이다.

본 발명에 따른 부가물은 언급된 투여 형태로 전환될 수 있다. 이는 그 자체로 공지된 방식으로 불활성, 비-독성의, 제약상 적합한 보조제와 혼합함으로써 달성될 수 있다. 이들 보조제는 담체 (예를 들어 미세결정질 셀룰로스, 락토스, 만니톨), 용매 (예를 들어 액체 폴리에틸렌 글리콜), 유화제 및 분산제 또는 습윤제 (예를 들어 소듐 도데실술페이트, 폴리옥시소르비탄 올레에이트), 결합제 (예를 들어 폴리비닐피롤리돈), 합성 및 천연 중합체 (예를 들어 알부민), 안정화제 (예를 들어 항산화제, 예를 들어 아스코르브산), 착색제 (예를 들어 무기 안료, 예를 들어 산화철) 및 향미제 및/또는 냄새 교정제를 포함한다.

본 발명은 또한 본 발명에 따른 부가물을, 전형적으로 1종 이상의 불활성, 비독성, 제약상 적합한 보조제와 함께 포함하는 의약, 및 상기 언급된 목적을 위한 그의 용도를 제공한다.

본 발명에 따른 부가물은 그 자체로 공지된 방식으로, 활성 성분(들)을 제약 제제에 통상적인 보조제를 포함한 목적하는 투여 형태로 전환시킴으로써 제약 제제를 제공하도록 제제화된다.

사용된 보조제는, 예를 들어, 담체 물질, 충전제, 붕해제, 결합제, 함습제, 활택제, 흡수제 및 흡착제, 희석제, 공용매, 유화제, 맛 교정제, 착색제, 보존제, 안정화제, 습윤제, 삼투압을 조절하기 위한 염 또는 완충제일 수 있다. 문헌 [Remington's Pharmaceutical Science, 15th ed. Mack Publishing Company, East Pennsylvania (1980)]이 참조되어야 한다.

제약 제제는

고체 형태, 예를 들어 정제, 당-코팅된 정제, 환제, 좌제, 캡슐, 경피 시스템으로 또는

반고체 형태, 예를 들어 연고, 크림, 겔, 좌제, 에멀젼으로 또는

액체 형태, 예를 들어 팅크제, 현탁액 또는 에멀젼으로

존재할 수 있다.

본 발명과 관련하여 보조제는, 예를 들어, 염, 사카라이드 (모노-, 디-, 트리-, 올리고- 및/또는 폴리사카라이드), 단백질, 아미노산, 펩티드, 지방, 왁스, 오일, 탄화수소 및 그의 유도체일 수 있고, 보조제는 천연 유래이거나 또는 합성 또는 부분 합성 수단에 의해 수득될 수 있다.

경구 또는 경구강 투여에 유용한 형태는 특히 정제, 당-코팅된 정제, 캡슐, 환제, 분말, 과립, 파스틸, 현탁액 또는 에멀젼이다.

비경구 투여에 유용한 형태는 특히 현탁액 또는 에멀젼이다.

본 발명에 따른 부가물은 단독으로 또는, 필요한 경우에, 1종 이상의 다른 약리학적 활성 물질과 조합되어 사용될 수 있으며, 단 이 조합은 바람직하지 않고 허용되지 않은 부작용을 유도하지 않는다. 따라서 본 발명은 추가로 본 발명에 따른 부가물 및 특히 상기 언급된 장애의 예방 및 치료를 위한 1종 이상의 추가의 활성 성분을 포함하는 의약을 제공한다.

예를 들어, 본 발명에 따른 부가물은 신생물성 장애의 치료에 사용되는 공지된 항과다증식, 세포증식억제성 또는 세포독성 물질과 조합될 수 있지만, 또한 동시에 지지 또는 구성적 특성을 갖는 물질과 조합되고, 혈관신생에 긍정적 효과를 나타내는 화합물과 조합될 수 있다.

빠짐없는 목록은 아니지만, 조합에 유용한 적합한 약리학적 활성 물질은 예를 들어 하기를 포함한다:

131I-chTNT, 아바렐릭스, 아비라테론, 아클라루비신, 아플리베르셉트, 알데스류킨, 알렘투주맙, 알리트레티노인, 알트레타민, 아미노글루테티미드, 암루비신, 암사크린, 아나스트로졸, 아르글라빈, 삼산화비소, 아스파라기나제, 악시티닙, 아자시티딘, 바실릭시맙, 벨로테칸, 벤다무스틴, 베바시주맙, 벡사로텐, 비칼루타미드, 비산트렌, 블레오마이신, 보르테조밉, 보수티닙, 브렌툭시맙, 부세렐린, 부술판, 카바지탁셀, 카보잔티닙-s-말레이트, 폴린산칼슘, 레보폴린산칼슘, 카페시타빈, 카르보플라틴, 카르필조밉, 카르모푸르, 카르무스틴, 카투막소맙, 셀레콕시브, 셀모류킨, 세디라닙, 세툭시맙, 클로람부실, 클로르마디논, 클로르메틴, 시스플라틴, 클라드리빈, 클로드론산, 클로파라빈, 코판리십, 크리산타스파제, 크리조티닙, 시클로포스파미드, 시프로테론, 시타라빈, 다카르바진, 닥티노마이신, 다르베포에틴 알파, 다사티닙, 다우노루비신, 다브라페닙, 데시타빈, 데가렐릭스, 데니류킨 디프티톡스, 데노수맙, 데슬로렐린, 덱스라족산 히드로클로라이드, 디브로스피듐 클로라이드, 도세탁셀, 독시플루리딘, 독소루비신, 독소루비신 + 에스트론, 에쿨리주맙, 에드레콜로맙, 엘립티늄 아세테이트, 엘트롬보팍, 엔도스타틴, 에노시타빈, 엔잘루타미드, 에피루비신, 에피티오스타놀, 에포에틴 알파, 에포에틴 베타, 엡타플라틴, 에리불린, 에를로티닙, 에스트라디올, 에스트라무스틴, 에토포시드, 에베롤리무스, 엑세메스탄, 파드로졸, 필그라스팀, 플루다라빈, 플루오로우라실, 플루타미드, 포르메스탄, 포테무스틴, 풀베스트란트, 질산갈륨, 가니렐릭스, 게피티닙, 겜시타빈, 겜투주맙, 글루카르피다제, 글루톡심, 고세렐린, 히스타민 디히드로클로라이드, 히스트렐린, 히드록시카르바미드, I-125 시드, 이반드론산, 이브리투모맙 티욱세탄, 이브루티닙, 이다루비신, 이포스파미드, 이마티닙, 이미퀴모드, 임프로술판, 인터페론 알파, 인터페론 베타, 인터페론 감마, 이필리무맙, 이리노테칸, 익사베필론, 란레오티드, 라파티닙, 레날리도미드, 레노그라스팀, 렌티난, 레트로졸, 류프로렐린, 류코보린, 레바미솔, 리수리드, 로바플라틴, 로무스틴, 로니다민, 마소프로콜, 메클로레타민, 메드록시프로게스테론, 메게스트롤, 멜팔란, 메피티오스탄, 메르캅토퓨린, 메스나, 메토트렉세이트, 메톡살렌, 메틸 아미노레불리네이트, 메틸테스토스테론, 미파무르티드, 밀테포신, 미리플라틴, 미토브로니톨, 미토구아존, 미토락톨, 미토마이신, 미토탄, 미톡산트론, 네다플라틴, 넬라라빈, 닐로티닙, 닐루타미드, 니모투주맙, 니무스틴, 니트라크린, 오비누투주맙, 오파투무맙, 오마세탁신 메페숙시네이트, 오메프라졸, 오프렐베킨, 옥살리플라틴, 오조가미신, p53 유전자 요법, 파클리탁셀, 팔리페르민, 팔라듐-103 시드, 팔로노세트론 히드로클로라이드, 파미드론산, 파미드로네이트 이나트륨, 파니투무맙, 파조파닙, 페가스파르가제, PEG-에포에틴 베타 (메톡시 PEG-에포에틴 베타), 페그필그라스팀, 페그인터페론 알파-2b, 페메트렉세드, 펜타조신, 펜토스타틴, 페플로마이신, 퍼포스파미드, 페르투주맙, 피시바닐, 피라루비신, 플레릭사포르, 플리카마이신, 폴리글루삼, 폴리에스트라디올 포스페이트, 폴리사카라이드-K, 포말리도미드, 포나티닙, 포르피머 소듐, 프랄라트렉세이트, 프레드니무스틴, 프레드니손, 프로카르바진, 퀴나골리드, 라듐-223 클로라이드, 랄록시펜, 랄티트렉세드, 라무시루맙, 라스부리카제, 라니무스틴, 라족산, 레파메티닙, 레고라페닙, 리세드론산, 리툭시맙, 로미뎁신, 로미프롤스팀, 로니시클립, 룩솔리티닙, 사르그라모스팀, 시푸류셀-T, 시조피란, 소부족산, 소듐 글리시디다졸, 소라페닙, 스트렙토조신, 수니티닙, 탈라포르핀, 탈크, 타미바로텐, 타목시펜, 타소네르민, 테세류킨, 테가푸르, 테가푸르 + 기메라실 + 오테라실, 테모포르핀, 테모졸로미드, 템시롤리무스, 테니포시드, 테스토스테론, 테트로포스민, 탈리도미드, 티오테파, 티말파신, 티오구아닌, 토실리주맙, 토포테칸, 토레미펜, 토시투모맙, I 131 토시투모맙, 트라메티닙, 트라벡테딘, 트라스투주맙, 트레오술판, 트레티노인, 트릴로스탄, 트립토렐린, 트로포스파미드, 트립토판, 우베니멕스, 발루비신, 반데타닙, 바프레오티드, 베무라페닙, 빈블라스틴, 빈크리스틴, 빈데신, 빈플루닌, 비노렐빈, 비스모데깁, 보리노스타트, 보로졸, 이트륨-90 유리 마이크로구체, 지노스타틴, 지노스타틴 스티말라머, 졸레드론산, 조루비신.

일반적으로, 본 발명에 따른 부가물과 다른 세포증식억제성 또는 세포독성 활성제의 조합을 사용하여 하기 목적이 추구될 수 있다:

ㆍ 개별 활성 성분을 사용한 치료와 비교하여, 종양의 성장을 저속화시키거나, 그의 크기를 감소시키거나 또는 심지어 그를 완전히 제거하는 데 있어서 개선된 효능;

ㆍ 단독요법의 경우보다 더 낮은 투여량으로 사용되는 화학요법제를 사용하는 것의 가능성;

ㆍ 개별 투여와 비교하여 더 적은 부작용을 갖는 보다 허용되는 요법의 가능성;

ㆍ 보다 넓은 스펙트럼의 신생물성 장애의 치료의 가능성;

ㆍ 요법에 대한 보다 높은 반응률의 달성;

ㆍ 현재의 표준 요법에 비교하여 환자의 더 긴 생존 시간.

또한, 본 발명에 따른 부가물은 또한 방사선요법 및/또는 외과적 개입과 조합되어 사용될 수 있다.

실험 섹션

실시예

실시예 1

메틸 3-(3-니트로-4-{[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]아미노}페닐)프로파노에이트의 제조

3.0 L의 아세토니트릴 중 용액으로서의 402 g (1.77 mol)의 메틸 3-(4-플루오로-3-니트로페닐)프로파노에이트에 367 g (2.66 mol)의 탄산칼륨을 초기 충전하고 300 g (2.12 mol)의 (1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥산아민을 첨가하였다. 혼합물을 12시간 동안 환류 하에 100℃의 재킷 온도에서 교반하였다. 20℃로 냉각시킨 후, 3.6 L의 물을 혼합물에 첨가하였다. 상 분리를 개선시키기 위해, 1.0 L의 포화 염화나트륨 용액을 첨가하였다. 하부 수성 상을 제거하였다. 유기 상을 감압 (대략 50 mbar) 하에 50℃의 재킷 온도에서 농축시켜 유성 잔류물을 수득하였다.

수율: 640.5 g (이론치의 104%)의 고점성 오렌지색 오일.

¹H NMR (400MHz, DMSO-d₆): δ [ppm] = 0.75 - 0.87 (m, 2H), 0.89 (d, 3H), 0.93 (s, 3H), 1.02 (s, 3H), 1.10 (t, 1H), 1.34 - 1.39 (m, 1H), 1.68 - 1.83 (m, 2H), 1.99 - 2.02 (m, 1H), 2.58 - 2.62 (m, 2H), 2.75 - 2.79 (m, 2H), 3.57 (s, 3H), 3.73 - 3.82 (m, 1H), 7.07 (d, 1H), 7.44 (dd, 1H), 7.79 (br. d., 1H), 7.89 (d, 1H).

실시예 2

메틸 3-(3-아미노-4-{[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]아미노}페닐)프로파노에이트 디히드로클로라이드 디옥산 용매화물의 제조

3.2 L의 테트라히드로푸란 중 용액으로서의 640.5 g (1.77 mol)의 메틸 3-(3-니트로-4-{[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]아미노}페닐)프로파노에이트 (실시예 1로부터의 조 생성물)에 32 g의 팔라듐 촉매 (5wt%; 0.05 당량, 32 g, 88.5 mmol)를 수소화 반응기에서 초기 충전하고 혼합물을 수소 분위기 (1.5 bar 양압) 하에 25℃에서 10시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 압력 필터 (자이츠(Seitz) K300 필터 플레이트)를 통해 여과하고 여과물을 감압 (대략 50 mbar) 하에 50℃의 재킷 온도에서 농축시켜 유성 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 1.3 L의 디옥산 중에 용해시키고 이에 560 mL의 디옥산 중 4N HCl (4.4 mol HCl)을 20℃의 내부 온도에서 20분의 기간에 걸쳐 첨가하였다. 이 과정에서, 생성물이 결정화되었다. 이를 2시간 동안 교반하고, 여과하고 각각 500 mL의 MTBE로 2회 세척하였다. 습윤 생성물을 건조 캐비닛에서 40℃의 온도에서 4시간 동안 진공 하에 건조시켰다.

수율: 785 g (메틸 3-(4-플루오로-3-니트로페닐)프로파노에이트의 사용에 기초하여 이론치의 91%)의 연황색 고체.

¹H NMR (400MHz, DMSO-d₆): δ [ppm] = 0.72 - 0.84 (m, 1H), 0.85 - 1.05 (m, 10H), 1.19 - 1.28 (m, 1H), 1.31 - 1.35 (m, 1H), 1.59 - 1.71 (m, 2H), 1.90 - 1.97 (m, 1H), 2.56 - 2.62 (m, 2H), 2.72 - 2.78 (m, 2H) 3.51 - 3.54 (m, 1H), 3.55 (s, 3H), 3.57 (s, 8H, 디옥산), 6.28 - 6.37 (br. m., 5H), 6,69 (br. d., 1H), 6.70 (s, 1H), 7.01 (br. d., 1H).

실시예 3

3-(2-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]아미노}-1-[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산의 제조

3.0 L의 THF 중 500 g (1.043 mol)의 메틸 3-(3-아미노-4-{[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]아미노}페닐)프로파노에이트 디히드로클로라이드 디옥산 용매화물의 현탁액에 296.5 g (2.29 mol)의 N,N-디이소프로필에틸아민을 20℃의 온도에서 첨가하고 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 252 g (1.15 mol)의 4-(트리플루오로메톡시)페닐 이소티오시아네이트를 첨가하고 온도를 50℃에서 1시간 동안 유지하였다. 후속적으로, 300 g (1.56 mol)의 EDCI를 첨가하고 혼합물을 4시간 동안 환류 하에 80℃의 재킷 온도에서 교반하였다. 혼합물을 20℃로 냉각시키고, 1.5 L의 20% 수성 시트르산 용액을 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 교반하고, 1.5 L의 MTBE를 첨가하고 혼합물을 추가로 15분 동안 교반하였다. 하부 수성 상을 제거하였다. 유기 상을 각각 1.5 L의 4.8% 수성 탄산수소나트륨 용액으로 2회 추출하였다. 유기 상을 감압 (대략 50 mbar) 하에 50℃의 재킷 온도에서 농축시켜 유성 잔류물을 수득하였으며, 후속적으로 이에 3 L의 THF 및 2 L의 3.7% 수산화나트륨 용액 (1.56 mol)을 첨가하고, 혼합물을 50℃의 온도에서 3시간 동안 교반하였다. 20℃로 냉각시킨 후, 혼합물을 10% 수성 염산을 사용하여 pH 4로 조정하고, 500 mL의 포화 염화나트륨 용액을 첨가하고 수성 상을 제거하였다. 유기 상을 80℃의 재킷 온도에서 농축시켜 유성 잔류물을 수득하였으며, 이어서 이에 4L의 이소프로판올을 첨가하고 대략 2.5 L를 100℃의 재킷 온도에서 증류시켰다. 900 mL의 물을 동시에 20분의 기간에 걸쳐 80℃의 내부 온도에서 첨가하였다. 이 과정에서, 생성물이 고온 혼합물로부터 결정화되었다. 20℃로 냉각시킨 후, 생성물을 여과하고 500 mL의 이소프로판올 및 500 mL의 물로 연속적으로 세척하였다. 습윤 생성물을 건조 캐비닛에서 60℃의 온도에서 16시간 동안 진공 하에 건조시켰다.

수율: 398 g (이론치의 77%)의 백색 결정질 고체 (m.p.: 248℃).

¹H NMR (400MHz, DMSO-d₆): δ [ppm] = 0.93 (s, 3 H), 0.96 (s, 3 H), 1.03 (s, 3 H), 1.04 - 1.12 (m, 1H), 1.35 - 1.44 (m, 2H), 1.70 - 1.92 (m, 3H), 2.03 (t, 1H), 2.43 - 2.60 (m, 2H), 2.85 (t, 2H), 4.63 (t, 1H), 6.90 (d, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.32 (d, 2H), 7.42 (d, 1H), 7.79 (d, 2H), 8.98 (br. s., 1H), 12.06 (br. s., 1H).

실시예 4

부가물 (2E)-부트-2-엔디오산 - 3-(2-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]아미노}-1-[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산 (1:4)의 제조

296 g (603 mmol)의 3-(2-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]아미노}-1-[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산 및 35 g (301.5 mmol)의 푸마르산에 4.5 L의 이소프로판올을 첨가하고, 혼합물을 교반하면서 환류 온도에서 가열하였다. 80℃에서 온도-조절된 용액을 여과하고 후속적으로 3.25 L의 이소프로판올을 증류시키며 그동안 생성물이 결정화되었다. 20℃로 냉각시킨 후, 생성물을 여과하고 500 mL의 이소프로판올로 세척하였다. 습윤 생성물을 건조 캐비닛에서 60℃의 온도에서 16시간 동안 진공 하에 건조시켰다.

수율: 280 g (이론치의 89%)의 백색 결정질 고체 (m.p.: 235℃).

¹H NMR (400MHz, DMSO-d₆): δ [ppm] = 0.93 (s, 3 H), 0.96 (s, 3 H), 1.03 (s, 3 H), 1.04 - 1.12 (m, 1H), 1.35 - 1.44 (m, 2H), 1.70 - 1.92 (m, 3H), 2.03 (t, 1H), 2.43 - 2.60 (m, 2H), 2.85 (t, 2H), 4.63 (t, 1H), 6,62 (s, 2 H; 푸마르산), 6.90 (d, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.32 (d, 2H), 7.42 (d, 1H), 7.79 (d, 2H), 8.98 (br. s., 1H), 12.1 - 12,6 (br. m., 1H + 푸마르산).

경구 생체이용률

화합물 A는 실시예 3에 따른 방법에서 수득된 바와 같은 결정질 형태의 순수한 3-(2-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]아미노}-1-[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산이다.

화합물 B는 실시예 4에 따른 방법에서 수득된 바와 같은 결정질 형태의 (2E)-부트-2-엔디오산 - 3-(2-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]아미노}-1-[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산인 본 발명에 따른 부가물이다.

상대 생체이용률을 위스타 래트에서의 연구에 의해 결정하였다.

화합물 A를 먼저 용액의 형태로 경구로 투여하였다. 이 목적을 위해, 활성 성분을 400의 평균 분자량을 갖는 80% 폴리에틸렌 글리콜 (PEG400) 및 20% 물의 혼합물 중에 용해시켰다. 활성 성분 용액은 상대 생체이용률을 결정하기 위한 참조점이다 (제제 A1).

화합물 A를 또한 틸로스(tylose) 현탁액 (제제 A2)의 형태로 경구로 투여하였다.

마찬가지로 화합물 B를 틸로스 현탁액 (제제 B)의 형태로 경구로 투여하였다.

틸로스 (틸로스^® MH 300 (시그마(Sigma)))는 수분 저류, 결합, 증점, 필름 형성 및 콜로이드성 특성을 달성하기 위해 수용성 비-이온성 중합체로서 물질에 사용되는 메틸 히드록시에틸 셀룰로스 에테르이다.

0.5% 수성 틸로스 현탁액 (w/v)을 제조하기 위해, 틸로스를 교반하고 약 12시간 동안 순수한 물 중에서 팽윤시켰으며, 이 때 점성 혼합물이 형성되었다. 화합물 A 및 화합물 B를 각각 점성 혼합물로 분쇄하였으며, 이 때 상응하는 틸로스 현탁액이 형성되었다 (제제 A2 및 제제 B).

도 1a, 1b 및 1c는 용액의 형태의 화합물 A의 경구 투여 후 (제제 A1, 도 1a), 현탁액의 형태의 화합물 A의 경구 투여 후 (제제 A2, 도 1b) 및 현탁액의 형태의 화합물 B의 경구 투여 후 (제제 B, 도 1c) 활성 성분 3-(2-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]아미노}-1-[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산 (활성 성분 API)의 혈장 농도를 나타낸다.

제제 A1의 경우, 5 mL/kg 체중을 투여하였다. 이는 10 mg/kg의 활성 성분 API의 양에 상응하였다.

제제 A2의 경우, 5 mL/kg 체중을 투여하였다. 이는 10 mg/kg의 활성 성분 API의 양에 상응하였다.

제제 B의 경우, 2 mL/kg 체중을 투여하였다. 이는 10.6 mg/kg의 활성 성분 API의 양에 상응하였다.

유치 정맥 카테터를 통해 각각의 경우에서 약 0.4 mL의 혈액을 수집함으로써 혈장 농도를 결정하였다. 혈장을 획득하기 위해 혈액 샘플을 원심분리하였다 (약 5분). 혈장 샘플을 활성 성분 3-(2-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]아미노}-1-[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산에 대해 LC/MS/MS에 의해 분석하였다.

순수한 3-(2-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]아미노}-1-[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산은 F_Rel 실험에서 25%의 생체이용률을 나타냈다.

푸마르산을 포함한 4 : 1 부가물의 경우, 110%의 생체이용률이 F_Rel 실험에서 결정되었다.

따라서, 본 발명에 따른 부가물은 순수한 3-(2-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]아미노}-1-[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산보다 명백하게 더 높은 생체이용률을 나타낸다.

X선 분말 회절도

도 2는 실시예 4에 따른 방법에서 수득된 바와 같은 결정질 형태의 본 발명에 따른 부가물의 X선 분말 회절도를 나타낸다.

자동화 STOE 분말 회절계를 게르마늄-단색화 CuKα₁ 방사선을 사용하여 투과 모드에 사용하였다. 구리 애노드를 갖는 X선 튜브를 40 kV 및 40 mA에서 작동시켰다. 2θ 스캔을 2°≤ 2θ ≤ 40°(스텝 크기 0.5°) 사이에서 기록하였다. 소프트웨어 STOE WinX^pow를 데이터를 평가하는 데 사용하였다.

2θ 값의 최대치가 표 1에 열거되어 있다.

표 1: XRPD 반사 표

도 3은 실시예 4에 따른 방법에서 수득된 바와 같은 결정질 형태의 본 발명에 따른 부가물의 라만 스펙트럼을 나타낸다. 밴드 최대치의 위치가 표 2에 열거되어 있다.

표 2: 라만 스펙트럼 밴드 표

생화학적 검정에서의 IDH1 R132H의 억제

IDH1 R132H는 알파-케토글루타레이트 (α-KG)의 (2R)-2-히드록시글루타레이트 (2-HG)로의 NADPH-의존성 환원을 촉매한다. NADPH 소비는 발광에 의해 결정된다.

생화학적 반응을 각각의 경우에 32℃에서 384-웰 타이터 플레이트에서, 41 μL의 반응 부피로 하기 완충제 조건 하에 수행하였다: 50 mM 트리스 pH 7.5, 100 mM NaCl, 20 mM MgCl₂, 0.05% BSA, 0.01% 브리즈, 1 μM NADPH, 및 250 μM α-KG. IDH1 R132H 효소를 1.5 nM의 최종 농도에서 사용하였다. 시험 화합물을 0.002 내지 10 μM의 농도 범위에서 검정하였다. 최종 DMSO 농도는 2.4%였다.

반응물을 30분 동안 인큐베이션하고, 그 후에 40 μL의 검출 혼합물 (0.75 μg/ml 루시페라제, 0.02 U/ml 옥시도리덕타제, 4 μg/mL FMN, 2 μL/ml 데칸알/에탄올, 50 mM 트리스 pH 7.5, 0.5% 글리세롤, 0.01% 트윈(Tween) 20, 0.05% BSA)을 첨가하였다. 발광을 발광 판독기 (10초 측정 시간, 1초 통합 주기, 30% 감수성)를 사용하여 결정하였다. 발광에서의 강하는 mIDH1의 활성에 비례한다. IC₅₀ 값을 억제제 농도에 대한 상대 발광의 플롯으로부터의 내삽에 의해 결정하였다. 결과가 표 3에 요약되어 있다.

표 3: 생화학적 IDH1 R132H 검정에서의 IC₅₀

세포 검정에서의 IDH1 R132H의 억제

(2R)-2-히드록시글루타레이트 (2HG)의 농도를 돌연변이된 이소시트레이트 데히드로게나제 단백질의 과다발현을 갖는 세포주의 배지에서 결정하였다. mIDH는 알파-케토글루타레이트의 2-HG로의 NADPH-의존성 환원을 촉매한다. 세포 (LN229 R132H, 문헌 [Mohrenz et al., Apoptosis (2013) 18:1416-1425])를 10% FCS를 함유하는 DMEM에서 배양하였다. 세포를 트립신을 사용하여 수득하고 96-웰 타이터 플레이트에 두었다. 세포를 37℃에서 5% CO₂에서 인큐베이션하였다. 다음날, 시험 화합물을 세포에 첨가하였다. DMSO의 최종 농도는 0.1%였고 DMSO 대조군을 사용하였다. 이어서 타이터 플레이트를 인큐베이터에 24시간 동안 두었다.

2-HG를 문헌 [Balss et al. (Acta Neuropathol (2012) 124: 883-891)]에 의해 공개된 방법을 사용하여 측정하였다. HClO₄를 각각의 웰에 첨가하고 타이터 플레이트를 원심분리하였다. 분취물을 제거하고 히드록시글루타레이트 데히드로게나제 (HGDH), 디아포라제, NAD+ 및 레자주린와 함께 인큐베이션하였다. 레자주린의 레조루핀로의 전환을 Ex 540 nm Em 600 nm에서 형광 분광분석법에 의해 결정하였다. 형광 신호에서의 증가는 2-HG의 형성에 비례한다. IC₅₀ 값을 억제제 농도에 대한 상대 형광의 플롯으로부터의 내삽에 의해 결정하였다. 결과가 표 4에 요약되어 있다.

표 4: 세포 IDH1 R132H 검정에서의 IC₅₀

Claims

(2E)-부트-2-엔디오산 - 3-(2-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]아미노}-1-[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산 (1:4).
제1항에 있어서, 하기 2 세타 각: 5.4, 6.8, 10.2, 10.3, 10.8, 11.1, 16.8, 21.6에서의 X선 회절도에서의 최대치를 특징으로 하는 결정질 형태의 부가물.
제1항에 있어서, cm^-1 단위의 하기 파수: 3088, 3047, 2934, 2910, 2874, 2771, 2717, 1658, 1632, 1615, 1521, 1463, 1451, 1420, 1338, 1306, 1294, 1277, 1245, 1198, 1184, 1167, 1155, 1127, 1109, 1077, 1049, 1018, 979, 961, 943, 922, 908, 877, 866, 839, 817, 789, 767, 714, 700, 685, 646, 631, 613, 568, 517, 503, 450, 438, 416, 388, 358, 339, 330, 102에서의 라만 스펙트럼에서의 최대치를 특징으로 하는 결정질 형태의 부가물.
- 1 mol의 3-(2-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]아미노}-1-[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산, 0.3 내지 0.8 mol의 (2E)-부트-2-엔디오산을 사용하여, 이소프로판올 중 3-(2-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]아미노}-1-[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산 및 (2E)-부트-2-엔디오산을 도입하는 단계,
- 혼합물을 교반하면서 비점까지 가열하여 투명한 용액을 수득하는 단계,
- 바람직하게는 용액을 농축시킴으로써, (2E)-부트-2-엔디오산 - 3-(2-{[4-(트리플루오로메톡시)페닐]아미노}-1-[(1R,5R)-3,3,5-트리메틸시클로헥실]-1H-벤즈이미다졸-5-일)프로판산 (1:4)을 결정화하는 단계
를 포함하는, 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 따른 부가물을 제조하는 방법.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 질환의 치료 및/또는 예방을 위한 부가물.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 종양의 치료 및/또는 예방 방법에 사용하기 위한 부가물.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 따른 부가물을 포함하는 의약.
제7항에 있어서, 1종 이상의 추가의 활성 성분을 포함하는 의약.
제7항 또는 제8항에 있어서, 1종 이상의 불활성, 비-독성의, 제약상 허용되는 보조제를 포함하는 의약.
제7항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 종양의 치료를 위한 의약.