KR20170121962A - 영여자 숙성액의 제조 방법 및 이에 의해 제조된 영여자 숙성액 - Google Patents
영여자 숙성액의 제조 방법 및 이에 의해 제조된 영여자 숙성액 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 영여자 숙성액의 제조 방법 및 이에 의해 제조된 영여자 숙성액에 관한 것이다.
Description
본 발명은 영여자 숙성액의 제조 방법 및 이에 의해 제조된 영여자 숙성액에 관한 것이다.
마는 마과에 속하는 다년생 덩굴식물로서 주로 뿌리를 식용으로 사용하며, 한의학에서는 마뿌리를 건조시킨 약재를 산약(山藥), 산우(山芋), 서여(薯)이라고도 하였다. 마는 중국 원산으로 약초로 재배되었으며 장마, 둥근마, 참마 등 몇 가지 품종이 대표적이다. 우리나라에서 마는 삼국시대부터 구황작물로 사용되어 왔으며, 일본, 타이완에서도 자생하고 있다.
마에는 각종 필수 아미노산과 비타민, 미네랄, 뮤신과 디아스타제 등의 당류 및 생체활성을 주는 단백질류가 함유되어 피로회복, 자양강장, 소화 기능 증강, 당류, 폐 및 두뇌 활동 증가 등의 효과가 있어, 오늘날에는 건강식품으로 많이 활용되고 있다. 특히 마에 함유된 성분 중 뮤신은 위를 보호해주고 피부 보습 효과도 우수한 것으로 보고되어 있다. 예를 들어, 대한민국 특허공개공보 제2008-0071599호에서는 마 종의 추출물 및 이의 의학적 용도에 대해 개시하고 있다.
그러나 이러한 이로운 효능에도 불구하고 마에는 피부 및 생체에 자극을 유발하는 성분이 다량 함유되어 있어 피부에 바로 적용하게 되면 홍반과 가려움을 유발하며, 복용할 때도 역시 자극성을 희석하기 위해 주로 유제품과 혼합하여 사용된다.
특히, 마의 활용도는 주로 뿌리에만 한정되어 왔으며 마 열매인 영여자(零餘子)의 존재 및 그 가치에 대해서는 잘 알려져 있지 않다. 일반적으로 영여자는 가을에 최소한의 종자만을 채취하고 겨울 동안 그냥 썩어 버려지는 열매이다. 최근 들어 영여자가 위장 건강, 변비 및 다이어트에도 좋다는 사실이 기사에서 거론되고 있으나, 그 응용면에서는 아직 미비하여 영여자의 수요 자체는 크게 늘어나지 않고 있는 실정이다.
본원에서는 일반적으로 사용되지 않고 버려지는 마 열매인 영여자를 숙성시켜 영여자 숙성액을 제조함으로써, 새로운 고부가가치 창출을 위한 화장품으로 응용 가능한 고기능성 신원료를 개발하여 제공하고자 한다.
그러나, 본 발명이 해결하고자 하는 과제는 이상에서 언급한 과제로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
상기한 기술적 과제를 달성하기 위한 기술적 수단으로서, 본 발명의 제 1 측면은 세척된 영여자를 분쇄하는 전처리 단계; 분쇄된 영여자에 미네랄 혼합물 및 당을 첨가하여 숙성시키는 1차 숙성 단계; 1차 숙성된 영여자에 녹두 및 감초 중 하나 이상을 포함하는 숙성 보조제를 첨가하여 숙성시키는 2차 숙성 단계; 및 2차 숙성된 영여자를 여과하는 여과 단계를 포함하는, 영여자 숙성액의 제조 방법을 제공할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 당은 설탕, 포도당, 갈락토오스 및 이들의 조합들로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 포함하는 것일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 미네랄 혼합물은 칼슘 40-60 중량%, 마그네슘5-15 중량%, 규소 20-40 중량%, 칼륨1-5 중량% 및 나트륨 1-5 중량%을 포함하는 것일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 1차 숙성 단계는 4 주 내지 20 주 동안 수행되는 것일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 2차 숙성 단계는 4 주 내지 20 주 동안 수행되는 것일 수 있다.
본 발명의 제 2 측면은, 본 발명의 제 1 측면의 방법에 의해 제조되며, 항노화, 주름 개선 또는 피부 재생 효과를 가지는 영여자 숙성액을 제공할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 영여자 숙성액은 뮤신 함량이 0.1 mg/g미만일 수 있다.
본 발명의 제 3 측면은, 본 발명의 제 2 측면에 따른 영여자 숙성액을 포함하는 항노화, 주름 개선 또는 피부 재생용 화장료 조성물을 제공할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 화장료 조성물은 영여자 숙성액이 0.1-20 중량% 포함된 것일 수 있다.
상술한 과제 해결 수단은 단지 예시적인 것으로서, 본 발명을 제한하려는 의도로 해석되지 않아야 한다. 상술한 예시적인 구현예 외에도, 도면 및 발명의 상세한 설명에 기재된 추가적인 구현예 및 실시예가 존재할 수 있다.
전술한 본원의 과제 해결 수단에 의하면, 종래 거의 활용되고 있지 않았던 영여자의 활용도를 높이기 위해 미네랄 혼합물 및 당을 이용하여 영여자를 숙성시킴으로써 영여자가 가지는 자극적인 특성을 줄임과 동시에 더욱 우수한 효능을 가지는 새로운 영여자 숙성액을 제조할 수 있다.
특히 본 발명의 방법에 의해 제조된 영여자 숙성액은, 수성 용매 또는 알코올 등의 유기 용매를 이용한 단순 영여자 추출물에 비해 높은 세포 안전성 및 세포활성 효과를 가질 뿐만 아니라, 뮤신 함량이 상대적으로 낮아 피부 독성이 낮으며 저자극성이다. 또한, 본 발명의 영여자 숙성액을 함유한 화장품 조성물은 우수한 항노화 기능, 주름 개선 효과 및 피부 재생 효과를 가진다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 영여자 숙성액의 제조 방법을 나타내는 공정도 및 공정 사진이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 영여자 숙성액의 적용 농도에 따른 세포활성을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 영여자 숙성액의 숙성 기간에 따른 세포활성을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 영여자 숙성액의 적용 농도에 따른 세포 성장 정도를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 영여자 숙성액을 적용한 세포의 현미경 이미지이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 영여자 숙성액의 적용 농도에 따른 세포활성을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 영여자 숙성액의 숙성 기간에 따른 세포활성을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 영여자 숙성액의 적용 농도에 따른 세포 성장 정도를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 영여자 숙성액을 적용한 세포의 현미경 이미지이다.
아래에서는 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시예를 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다.
본원 명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성요소를 "포함" 한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성 요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.
본원 명세서 전체에서 사용되는 정도의 용어 "~(하는) 단계" 또는 "~의 단계"는 "~ 를 위한 단계"를 의미하지 않는다.
본원 명세서 전체에서, 마쿠시 형식의 표현에 포함된 "이들의 조합"의 용어는 마쿠시 형식의 표현에 기재된 구성 요소들로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 혼합 또는 조합을 의미하는 것으로서, 상기 구성 요소들로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 포함하는 것을 의미한다.
이하, 본 발명의 영여자 숙성액의 제조 방법 및 이에 의해 제조된 영여자 숙성액에 대하여 구현예 및 실시예와 도면을 참조하여 구체적으로 설명하도록 한다. 그러나, 본 발명이 이러한 구현예 및 실시예와 도면에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 제 1 측면은 세척된 영여자를 분쇄하는 전처리 단계; 분쇄된 영여자에 미네랄 혼합물 및 당을 첨가하여 숙성시키는 1차 숙성 단계; 1차 숙성된 영여자에 녹두 및 감초 중 하나 이상을 포함하는 숙성 보조제를 첨가하여 숙성시키는 2차 숙성 단계; 및 2차 숙성된 영여자를 여과하는 여과 단계를 포함하는, 영여자 숙성액의 제조 방법을 제공할 수 있다.
본 발명의 영여자 숙성액의 제조 방법에 따르면, 종래에 산업적으로 거의 응용되지 않은 영여자의 활용도를 높이기 위해 미네랄 혼합물 및 당을 이용해 숙성시킴으로써 영여자의 내재적인 자극 성분 (예를 들어, 뮤신 등)을 감소시키는 동시에 건강 및 미용상의 효능은 보다 우수한 새로운 영여자 숙성액을 제조할 수 있다.
구체적으로, 본 발명의 영여자 숙성액의 제조 방법은 수성 용매, 유기 용매 또는 발효균을 사용하지 않고, 그리고 물리적으로는 온도와 압력 등과 같이 어떠한 인위적인 조작을 하지 않고 영여자를 숙성시키기 위한 방법으로, 바이오컨버전 원리를 이용해 천연물 자체가 갖고 있는 고유의 자가 효소를 활성화시키기 위한 다량의 미네랄이 함유된 미네랄당을 이용하여 영여자에 적용시킴으로써 마의 내재적 독성은 감소시키는 반면, 영여자 자체의 바람직한 효능 및 활성을 상승시킬 수 있다.
특히, 본 발명의 영여자 숙성액은 일반적인 수성 용매 또는 알코올과 같은 유기 용매를 이용한 단순 영여자 추출물에 비해 높은 세포 안전성 및 세포활성 효과를 지니며 피부 자극 시험에서도 일반 영여자 추출물과는 달리 낮은 독성을 나타냄을 확인하였다. 또한, 본 발명의 영여자 숙성액을 함유한 화장품 조성물에서도 우수한 항노화 기능, 주름 개선능 및 피부 재생능이 있음을 확인하였다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 당은 설탕, 포도당, 갈락토오스 및 이들의 조합들로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 예를 들어, 상기 당은 미네랄을 함유하고 있는 미네랄당일 수 있다.
전통적인 민간요법에 따르면 효소 담그기에 있어서 전체 중량의 50%이상의 과량의 설탕 또는 술(주정)을 사용하나, 본 발명에 따르면 영여자를 세척 및 건조하는 전처리 과정과 최소한의 당, 그리고 효소의 활성을 높일 수 있는 복합 미네랄 혼합물을 사용하여 천연물 자체의 숙성 효과를 높일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 미네랄 혼합물은 칼슘 40-60 중량%, 마그네슘5-15 중량%, 규소 20-40 중량%, 칼륨1-5 중량% 및 나트륨 1-5 중량%을 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 예를 들어, 상기 미네랄 혼합물로서 상기한 조성의 미네랄을 정제수에 투입한 것을 사용할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 1차 숙성 단계는 4 주 내지 20 주 동안 수행되는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 예를 들어, 상기 1 차 숙성 단계는 약 6 주 내지 약 14 주, 특히 약 12 주 내지 약 14 주 동안 실온에서 수행되는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
상기 1 차 숙성 단계에서 미네랄 및 당에 의하여 영여자에 함유된 효소의 활성이 상승되어 우수한 피부활성을 나타낼 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 2차 숙성 단계는 4 주 내지 20 주 동안 수행되는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 예를 들어, 상기 2 차 숙성 단계는 약 6 주 내지 약 14 주, 특히 약 12 주 내지 약 14 주 동안 실온에서 수행되는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
상기 2 차 숙성 단계에서 첨가되는 숙성 보조제인 녹두 및/또는 감초에 의해, 영여자에 포함된 인체 자극 성분이 중화되거나 상쇄될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 예를 들어, 상기 숙성 보조제를 이용한 2 차 숙성 단계에서 영여자에 함유된 뮤신의 함량이 0.1 mg/g미만으로 감소될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본 발명의 제 2 측면은, 본 발명의 제 1 측면의 방법에 의해 제조되며, 항노화, 주름 개선 또는 피부 재생 효과를 가지는 영여자 숙성액을 제공할 수 있다.
본 발명의 제 1 측면과 중복되는 부분들에 대해서는 상세한 설명을 생략하였으나, 본 발명의 제 1 측면에 대해 설명한 내용은 본 발명의 제 2 측면에서 그 설명이 생략되었더라도 동일하게 적용될 수 있다.
예를 들어, 본 발명의 영여자 숙성액은 뮤신 함량이 0.1 mg/g미만일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 뮤신은 피부에 독성 및 자극성을 나타낼 수 있는 물질로서, 본 발명의 숙성 방법에 의해 상기한 함량 미만의 뮤신을 포함하게 되는 영여자 숙성액은 피부 독성 및 피부 자극성을 나타내지 않거나 거의 나타내지 않을 수 있다.
본 발명의 영여자 숙성액은, 종래의 추출물 제조 방식인 수성 용매 및/또는 알코올 혼합 용매를 이용한 추출 방식에 의해 제조된 영여자 추출물에 비하여 보다 높은 세포 안전성 및 세포 증식 효과를 가진다. 실시예에 구체적으로 나타난 바와 같이, 본 발명의 영여자 숙성액은 MTT 분석 결과 일반 영여자 추출물에 비해 높은 세포활성 (미토콘드리아 활성)을 나타내었다.
본 발명의 제 3 측면은, 본 발명의 제 2 측면에 따른 영여자 숙성액을 포함하는 항노화, 주름 개선 또는 피부 재생용 화장료 조성물을 제공할 수 있다.
본 발명의 제 1 측면 및 제 2 측면과 중복되는 부분들에 대해서는 상세한 설명을 생략하였으나, 본 발명의 제 1 측면 및 제 2 측면에 대해 설명한 내용은 본 발명의 제 3 측면에서 그 설명이 생략되었더라도 동일하게 적용될 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 화장료 조성물은 영여자 숙성액이 0.1-20 중량% 포함된 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은, 영여자 숙성액 외에 통상적으로 화장료에 사용되는 당업자에게 알려진 첨가 물질도 제한 없이 추가 함유할 수 있다.
상기 화장료 조성물은 당업자에게 국소 적용이 가능한 것으로 알려진 임의의 제형으로 제공될 수 있으며, 예를 들어 용액, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 유상에 수상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 고체, 겔, 분말, 페이스트, 포말(foam) 또는 에어로졸 조성물의 제형으로 제공될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 상기 제형은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다.
예를 들어, 상기 화장료 조성물은 용제, 보존제, 보습제 및 활성화제로부터 선택되는 하나 이상을 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
예를 들어, 상기 화장료 조성물은 유지류, 계면활성제, 알코올류, 지방산류, 색소, 향료, 자외선흡수제, 킬레이트제, pH 조절제, 완충제 및 이들의 조합들로부터 선택되는 첨가제를 더 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
예를 들어, 본 발명의 화장료 조성물은 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서, 바람직하게는 주 효과에 상승 효과를 줄 수 있는 다른 성분들을 포함할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 화장료 조성물은 보습제, 에몰리언트제, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, pH 조정제, 유기 및 무기 안료, 향료, 냉감제 및 제한제로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상을 더 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 알려진 모든 종류의 미용 제품 또는 화장품 등의 유효성분으로 포함될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 화장료 조성물은 유연 화장수, 영양 화장수, 크림, 영양크림, 수분크림, 앰플, 에센스, 아이크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 마스크 팩, 스프레이 또는 파우더 등의 제형에 포함될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
이하 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하고자 하나, 하기의 실시예는 단지 설명의 목적을 위한 것이며 본 발명의 범위를 한정하고자 하는 것은 아니다.
[실시예]
영여자 숙성액의 제조
1) 영여자 원물의 세척 및 건조, 2) 전처리 단계로서 원물을 절단 및 분쇄하여 영여자 플레이크 제조, 3) 미네랄 및 당을 이용한 1차 숙성, 4) 영여자와 시너지 효과를 낼 수 있는 녹두 또는 감초를 포함하는 숙성 보조제를 이용한 2차 숙성, 및 5) 여과 과정을 거쳐 영여자 숙성액을 제조하였다.
숙성액을 제조하기 위해 활용되는 살아있는 생물인 대부분의 영여자 원물은 자연상태 그대로 채취되어 종자로서의 기능을 잃지 않은 상태에서 사용되었다. 따라서 미생물 및 농약과 같은 다양한 오염원이나 중금속의 존재를 배제할 수 없기 때문에, 숙성액 제조를 위해 영여자 원물의 세척 및 건조단계를 수행하였다. 다음으로, 숙성과정을 보다 원활하게 하기 위해, 덩어리 상태의 영여자를 적당한 크기로 분쇄 혹은 파쇄시켜 공정상 처리하기 용이한 사이즈의 플레이크로 가공하는 전처리 과정을 수행하였다. 이어서 분쇄된 영여자 원물에 미네랄 혼합물로서 칼슘 50%, 마그네슘 10%, 규소 30%, 칼륨 3%, 및 나트륨 3%을 포함하는 정제수 (정제수 리터당 총 미네랄 200mg 함유) 및 당(설탕, 포도당 및/또는 갈락토오스)을 첨가하여 숙성시킴으로써 영여자가 갖고 있는 효소의 활성을 상승시켜 피부활성이 우수한 숙성액이 제조되었다. 영여자 원물: 미네랄 혼합물을 포함하는 정제수:당의 중량비는 약 50:20:30로 사용하였다.
이어서 보다 높은 활성의 영여자 숙성액을 수득하기 위해, 영여자와 함께 숙성과정에서 시너지 효과를 나타낼 수 있고, 특히 마가 내재적으로 함유하고 있는 인체 자극 성분을 중화시키거나 상쇄시킬 수 있는 재료인 녹두 또는 감초를 이용하여 2차 숙성 단계를 수행하였다. 2 차 숙성 단계에서는 녹두 분말 또는 감초 분말 10 중량%을 혼합한 정제수를 숙성 보조제로 사용하여 숙성시켰다.
이러한 과정을 거쳐 수득된 영여자 숙성액은 도 1의 공정도에 나타난 바와 같이 여과 및 용해도에 따른 혼합 희석 과정을 거쳐 화장품에 응용될 수 있는 원료로 제조되었다.
본 실시예에 따른 숙성액 제조는 종래에 민간에서 활용되고 있는 일반 효소처리 과정과는 달리, 미생물에 의한 오염으로부터 배제된 상태로 진행되어야 하기에 그에 적합한 기본적인 숙성 조건을 거쳐 처리되었다. 본 실시예의 숙성액 제조 방법에 따르면 일반 발효공학에서 활용되고 있는 발효조에 비하여 단순한 시스템에서도 보다 효율적으로 효능 및 물성면에서 우수한 천연물 가공 원료를 개발할 수 있다는 장점을 가진다.
MTT 법을 통한 영여자 숙성액의 세포 활성 효과 검증
영여자 숙성액의 세포 활성 효과를 검증하기 위해, 본 발명의 영여자 숙성액을 마우스 섬유아세포에 적용한 후 영여자 숙성액의 적용 농도 및 2 차 숙성 기간에 따른 세포 활성을 MTT 법을 통해 측정하였다.
MTT 법은 탈수소 효소작용에 의하여 노란색의 수용성 기질인 MTT 테트라졸리움(tetrazolium)을 청자색을 띠는 비수용성의 MTT 포마잔(formazan) (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)- 2,5-diphenyl-tetrazolium bromide)으로 환원시키는 미토콘드리아의 능력을 이용하는 검사법이다. MTT 포마잔의 흡광도는 540 nm에서 최대가 되며, 이 파장에서 측정된 흡광도는 살아있고 대사가 왕성한 세포의 농도를 반영한다.
MTT 법의 수행에 적정한 접종세포의 수를 결정한 후, 세포 현탁액을 세포계수기를 사용하여 카운팅한 다음, 96 웰 플레이트의 각 웰에 원하는 농도의 세포 부유액 180 ㎕를 접종하였다. 블랭크로서 배지 180 ㎕ 및 PBS 20 ㎕; 그리고 대조군으로서 세포부유액 180 ㎕와 PBS 20 ㎕을 사용하였다. 측정하고자 하는 시료는 PBS에 투입한 후 농도별로 20 ㎕씩 각 웰에 첨가하였다. 다음으로 원하는 시간만큼 인큐베이션한 후 시료를 제거하고, 각 웰에 MTT 용액을 100 ㎕씩 첨가한 후 4시간 동안 인큐베이션하고 MTT 희석액을 제거하였다. 각 웰에 100 ㎕의 DMSO를 첨가하여 15-20분간 진탕기로 진탕한 후, ELISA reader를 사용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하였다.
도 2는 본 발명의 영여자 숙성액과 종래의 방법에 의해 용매를 이용해 추출한 영여자 추출물을 농도별로 세포에 적용한 후 MTT 법에 의하여 세포 내 미토콘드리아의 생성률 변화를 측정하여 세포활성을 나타낸 그래프이다. 실험군 중 "영여자"는 종래 알려진 방법으로 제조된 영여자 추출물, "MSA 영여자"는 1차 숙성 단계만을 수행한 영여자 숙성액, "MSA 영여자-A"는 녹두를 이용해 2 차 숙성한 영여자 숙성액, 그리고 "MSA 영여자-B"는 감초를 이용해 2 차 숙성한 영여자 숙성액을 처리한 것이다. 도 2에 따르면, 1 차 숙성 후 녹두 또는 감초를 이용해 2 차 숙성한 본 발명의 영여자 숙성액을 적용한 세포가 종래의 영여자 추출물을 적용한 세포에 비해 비해 더욱 우수한 세포 활성을 나타내었으며, 이러한 세포 활성 증진 효과는 세포에 적용된 영여자 숙성액 농도의 상승에 따라 더욱 높아지는 것으로 나타났다.
도 3은 본 발명의 실시예에 따라 녹두를 이용한 2 차 숙성 기간을 각각 1 주 내지 14 주로 하여 제조된 MSA 영여자-A 숙성액을 농도별로 세포에 적용한 후 MTT 법으로 세포 내 미토콘드리아의 생성률 변화를 측정하여 세포활성을 나타낸 그래프이다. 도 3에 나타난 바에 따르면, 4 주 이상, 특히 약 6주 내지 약 14주 동안 2 차 숙성시킨 영여자 숙성액에서 특히 현저한 세포 내 미토콘드리아의 증가가 관찰되었다. 이러한 결과를 통하여, 미네랄 및 설탕(sucrose)과 같은 특정 당류를 이용하여 영여자 숙성액을 제조할 경우 숙성 기간에 따라 세포 활성을 일으키는 효능성분들의 변화가 일어난 것을 아 수 있었으며, 특히 약 12 주 내지 약 14 주의 숙성 기간에서 최적의 효과가 나타났음을 확인하였다.
NR(neutral red) 법을 통한 영여자 숙성액의 세포 성장 효과 검증
영여자 숙성액의 세포 성장 효과를 검증하기 위해, 본 발명의 영여자 숙성액을 마우스 섬유아세포에 적용한 후 영여자 숙성액의 농도에 따른 세포 성장 정도를 NR 법을 통해 측정하였다 (도 4). NR 법은 2007년 11월에 식품의약품안전청이 발행한 "화장품 독성시험 동물대체시험법 가이드라인(I), In vitro 3T3 NRU 광독성시험법"에 기재된 방법에 따라 수행되었다.
도 4에 따르면, 종래의 영여자 추출물을 적용한 세포는 세포활성 및 성장이 다소 억제되는 경향이 나타난 반면, 본 발명의 영여자 숙성액을 적용한 세포는 우수한 세포 성장능을 나타내는 것이 확인되었다. 더욱이, 이러한 세포 성장 증진 효과는 영여자 숙성액 농도의 상승에 따라 더욱 높아지는 것으로 나타났으며, 상이한 숙성 보조제 (녹두 또는 감초)를 사용하여 2 차 숙성을 실시한 실험군 (각각 MSA 영여자-A 및 MSA 영여자-B)에서도 다소 다른 효과가 나타났음을 확인하였다.
도 5는 본 발명의 영여자 숙성액을 세포에 적용한 후의 세포 성장 정도를 보여주는 현미경 사진이다. 도 5의 사진에 따르면, 종래의 방법에 따라 제조된 영여자 추출물에 비하여 본 발명의 영여자 숙성액이 더욱 우수한 세포 성장 유도능을 나타냄을 확인할 수 있다.
영여자 숙성액의 피부자극 테스트
마 및 그 종자인 영여자에 포함된 뮤신 성분은 피부 자극을 유발하는 것으로 알려져 있다. 이와 같이 영여자에 존재하는 뮤신 성분으로 인한 피부 자극이 본 발명의 영여자 숙성 방법에 의해 감소된다는 사실을 확인하기 위해, 영여자의 숙성 전후의 피부자극 정도를 비교 시험 하였다. 그 결과, 숙성되지 않은 영여자에 비해 본 발명의 방법에 의해 숙성된 영여자에서 피부 자극성이 현저히 감소된 것을 확인하였다.
영여자 숙성액을 함유하는 화장료 조성물 제조 및 효능 검증
본 발명의 영여자 숙성액을 이용하여 영여자 숙성액의 피부 항노화 효과, 주름 개선 효과 및 피부 재생 효과를 가지는 우수한 화장료 조성물을 아래와 같이 제조하였다.
1) 영여자숙성액 배합 크림의 제조
폴리 글리세린 -3 스테아레이트/시트레이트 5.00%
쎄테아릴알콜 1.50%
스쿠알란 6.00%
올리브오일 3.00%
실리콘오일 2.00%
글리세린 8.00%
카보폴 0.45%
영여자숙성액1.00 - 10.00%
정제수 (잔량)
상기 물질들을 용기에 모두 도입하여 80℃의 온도에서 용해시킨 다음, 호모 믹서를 이용하여 5 분 동안 혼합한 후에 냉각 및 탈포시켜 크림을 얻었다.
2) 영여자숙성액 배합 에센스의 제조
카보폴 0.40%
히알루론산 1.00%
폴리글루탐산 5.00%
소듐 이디티에이 0.05%
수산화칼슘 0.03%
피이지-1500 3.00%
글리세린 7.00%
영여자숙성액1.00 - 10.00%
정제수 (잔량)
상기 물질들을 용기에 도입하여 80℃의 온도에서 용해시킨 다음, 호모 믹서를 이용하여 5 분 동안 혼합한 후에 냉각 및 탈포시켜 에센스를 얻었다.
3) 영여자숙성액 배합 앰플의 제조
히알루론산 1.00%
폴리글루탐산 5.00%
소듐 이디티에이 0.05%
피이지-1500 3.00%
글리세린 7.00%
영여자숙성액1.00 - 10.00%
정제수 (잔량)
상기 물질들을 용기에 도입하여 80℃의 온도에서 용해시킨 다음, 호모 믹서를 이용하여 5 분 동안 혼합한 후에 냉각 및 탈포시켜 앰플을 얻었다.
제조된 화장료 조성물의 피부활성을 확인하기 위해 간이 임상 시험을 통해 피부 주름 개선 효과, 항노화 효과 및 피부 재생 효과를 확인하였다.
전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며, 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 예를 들어, 단일형으로 설명되어 있는 각 구성 요소는 분산되어 실시될 수도 있으며, 마찬가지로 분산된 것으로 설명되어 있는 구성 요소들도 결합된 형태로 실시될 수 있다.
본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허청구범위에 의하여 나타내어지며, 특허청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 균등 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.
Claims (9)
- 세척된 영여자를 분쇄하는 전처리 단계;
분쇄된 영여자에 미네랄 혼합물 및 당을 첨가하여 숙성시키는 1차 숙성 단계;
1차 숙성된 영여자에 녹두 및 감초 중 하나 이상을 포함하는 숙성 보조제를 첨가하여 숙성시키는 2차 숙성 단계; 및
2차 숙성된 영여자를 여과하는 여과 단계를 포함하는, 영여자 숙성액의 제조 방법. - 제 1 항에 있어서, 상기 당은 설탕, 포도당, 갈락토오스 및 이들의 조합들로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 포함하는 것인, 영여자 숙성액의 제조 방법.
- 제 1 항에 있어서, 상기 미네랄 혼합물은 칼슘 40-60 중량%, 마그네슘 5-15 중량%, 규소 20-40 중량%, 칼륨 1-5 중량% 및 나트륨 1-5 중량%을 포함하는 것인, 영여자 숙성액의 제조 방법.
- 제 1 항에 있어서, 상기 1차 숙성 단계는 4 주 내지 20 주 동안 수행되는 것인, 영어자 숙성액의 제조 방법.
- 제 1 항에 있어서, 상기 2차 숙성 단계는 4 주 내지 20 주 동안 수행되는 것인, 영어자 숙성액의 제조 방법.
- 제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항의 방법에 의해 제조되며, 항노화, 주름 개선 또는 피부 재생 효과를 가지는, 영여자 숙성액.
- 제 6 항에 있어서, 뮤신 함량이 0.1 mg/g 미만인, 영여자 숙성액.
- 제 6 항의 영여자 숙성액을 포함하는, 항노화, 주름 개선 또는 피부 재생용 화장료 조성물.
- 제 8 항에 있어서, 영여자 숙성액이 0.1-20 중량% 포함된, 화장료 조성물.
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