KR20170114603A - 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법 - Google Patents

세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법 Download PDF

Info

Publication number
KR20170114603A
KR20170114603A KR1020160041831A KR20160041831A KR20170114603A KR 20170114603 A KR20170114603 A KR 20170114603A KR 1020160041831 A KR1020160041831 A KR 1020160041831A KR 20160041831 A KR20160041831 A KR 20160041831A KR 20170114603 A KR20170114603 A KR 20170114603A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
culture
mask pack
producing
beta
extract
Prior art date
Application number
KR1020160041831A
Other languages
English (en)
Inventor
최종백
경수현
김미경
박동철
양원동
Original Assignee
주식회사 씨엘바이오
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 주식회사 씨엘바이오 filed Critical 주식회사 씨엘바이오
Priority to KR1020160041831A priority Critical patent/KR20170114603A/ko
Publication of KR20170114603A publication Critical patent/KR20170114603A/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9706—Algae
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/02—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by special physical form
    • A61K8/0212—Face masks
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
    • A61K8/73—Polysaccharides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

본 발명은 세리포리아 락세라타 배양물의 유효성분의 생산성을 향상시키는 배양방법과, 균사체 배양액 추출물 유래의 세포 외 다당체(Exopolysaccharide) 및 베타글루칸을 함유하는, 피부 각질제거 효능을 나타내는 마스크 팩 조성물 및 마스크 팩 조성물에 관한 것이다.
상기 세리포리아 락세라타를 배양한 균사체 건조물 또는 농축물 및 세포 외 다당체 및 베타글루칸은 배양 단계에서 공기 공급 및 교반을 위한 rpm은 0~500 rpm으로 조절하여 배양하는 것을 특징으로 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 목적은 세리포리아 락세라타 균사체 배양액 제조 방법과 그의 추출물 및 유래의 천연물질을 유효성분으로 함유하여 피부 각질제거 효능이 우수한 마스크 팩 및 마스크 팩 조성물을 세계인에게 널리 제공하는 것이다.

Description

세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법{Mask pack sheet of Ceriporia lacerata and the method for preparing thereof}
본 발명은 세리포리아 락세라타(Ceriporia lacerata)가 함유된 마스크 팩 화장품 조성물에 관한 것이며, 더욱 상세하게는 세리포리아 락세라타에 의해 생산되는 세포 외 다당체 또는 베타-글루칸; 상기 세포 외 다당체 또는 베타-글루칸을 포함하는 세리포리아 락세라타의 균사체 배양물; 상기 세포 외 다당체 또는 베타-글루칸을 포함하는 세리포리아 락세라타의 균사체 농축물; 상기 세리포리아 락세라타의 균사체 배양물의 추출물을 유효성분으로 함유하는, 보습력과 피부질환 개선을 특징으로 가지는 마스크 팩 화장품 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
본 발명은 상기한바 대로 세리포리아 락세라타 배양액 및 농축액과 건조물, 그리고 세리포리아 락세라타 배양액 유래의 베타글루칸과 세포 외 다당체를 포함한 물질은 마스크 팩으로 제조하여 각질제거의 특징을 갖는 마스크 팩 및 이의 제조방법에 대한 것이다.
지금까지 개발된 마스크 팩 제조 및 조성물에 관한 종래기술로는, 먼저, 대한민국 공개특허공보 10-2009-0094637 호가 기술되어있는데 이는 오래된 피부 각질을 분해하는 단백질 분해 효소와 모공에 찬 피지를 분해하는 지방질 분해 효소를 함유한 마스크 팩에 관한 것으로, 특히 스크럽제로 피부를 문지르지 않아도 마스크 팩을 할 때 단백질 분해 효소와 지방질 분해 효소의 작용으로 자연스럽게 피부 각질과 모공의 피지를 제거할 수 있게 한 피부 각질 제거용 효소를 함유하는데 이는 피부의 오래된 각질과 모공의 피지를 제거하고 세포의 재생을 돕도록 하기에는 여러 문제점이 있었다. 더불어 10-2003-0033283호 상황버섯을 주재로 한 피부미용 활성 물과 이를 이용한 마스크 팩은 상황버섯을 주재로 하여 항산화효과(SOD) 등으로 피부개선효과를 도모한 피부 외용제로서의 마스크 팩에 관한 것으로 상황버섯이 가지는 성분이 자연 그대로 인체 피부에 전달되게 하는 것을 특징으로 하는데 이는 상황버섯을 액체나 분말로 만들어 마스크 팩에 투입함으로 그다지 많은 효과를 갖기는 어려운 문제점을 가지고 있었다. 아울러 국내특허 10-2015-0145992 호는 정제 수, 베타인, 인삼 추출물, 홍삼수, 효모-홍삼발효 여과 물, 하이드롤라이즈드 콜라겐, 로열젤리 추출물, 소듐하이알루로네이트, 검은깨 추출물, 감초 추출물, 라케모사승마 뿌리 추출물, 하수오 추출물, 상황버섯 추출물, 당귀 추출물, 상백피 추출물, 작약 추출물, 고삼 추출물, 황금 추출물, 구기자 추출물, 백자인 추출물, 검정콩 추출물, 당약 추출물, 알로에 베라 잎 추출물, 및 곤포 추출물을 포함하는 홍삼 마스크 팩용 조성물이 기술된바 있다. 더불어 공개특허 10-2010-0094868 호인 치마 버섯 다당류를 고수율로 대량 제조하기 위한, 개선된 치마버섯 유래 다당류의 제조 방법이 선행기술된바 있는데 이는 합성 배지를 사용하여 치마 버섯 다당류를 그 물성을 유지하면서도 고수율로 제조할 수 있는 치마버섯 유래 다당류를 저비용으로 대량 생산하는 데 유용 하며, 이렇게 생산된 치마 버섯 다당류는 기능성 비누, 로션 및 스킨 등의 화장품, 피부보호 및 치료용 마스크 팩, 및 다이어트 식품 등의 개발에 유용하게 활용될 수 있는 다수의 기술이 선행기술로 기술된바 그러나 본원에서처럼 세리포리아 락세라타의 배지 조성 및 배양방법으로 개선하여 세포 외 다당체 또는 베타-글루칸; 상기 세포 외 다당체 또는 베타-글루칸을 포함하는 세리포리아 락세라타의 균사체 배양물; 또는 상기 세리포리아 락세라타의 균사체 배양물의 추출물의 생산성을 향상시켜 산업적으로 신속하고 대량으로 배양하는 방법을 제공하며 효과가 우수한 마스크 팩용 조성물 및 마스크 팩을 제공하는 기술은 아직껏 개시되지 않았다.
본 발명의 비특허 문헌으로도 다수의 관련문헌을 엿볼 수 있는데 먼저 천연 염생생물 유래 소재 기반 기능성 바이오 마스크 팩 개발(박태규 동향/연구보고서 건국대학교 2013년)이 이루어진바 있다. 더불어(이규영, 홍철희 상지대학교 한의과대학 한방 안이비인후 피부과학 교실 2010년)양파 껍질 추출물을 함유한 안면 마스크 팩의 주름 개선 효과를 갖는 것이 기술된바있다. 더불어 해양소재를 이용한 마스크 팩의 유용성과 피부재생효과(전수민, 최문희, 이용조, 학술 논문 학술지 정보 한국생물공학회 2013년)는 해양 식물을 마스크 팩의 소재로 적극 이용하는 기술이 선보인 적이있다. 더불어 세리포리아 락세라타 버섯의 균사체 액체 배양을 통한 세포 외 다당체 생산 및 항 당뇨 효과(김지은 계명대학교 박사학위논문, 2013)와 특성을 토대로 진행된 바 있었다. 또한, 흰목이 버섯 (Tremella fuciformis)의 균사체 액체배양을 통한 세포 외 다당체를 배양하는 방법(조은재 대구대학교 2007년)이 선행되었다. 버섯 균사체로 발효시킨 복령과 후박의 항산화 및 항암 효과(손미예 경상대학교, 한국전통발효식품연구소, 2207) 논문과 같이 버섯 유효 성분으로 생산되는 고분자 다당체 및 베타-글루칸 등 다양한 기능성 물질이 액체배양을 통한 대량생산으로 식품, 화장품 및 기능성 소재로 활용할 수 있다. 특히, 버섯 균사체 액체배양은 생물전환기술을 최적화함으로써 단시간에 효과적으로 유용물질을 생산할 수 있어서 경제성이 높다. 따라서 식용, 약용을 포함한 다양한 버섯 균사체 배양에 관한 연구 및 다양한 기능성 물질의 생산에 따른 우수한 종균의 선별을 하며, 이를 이용한 생물전환기술의 최적화기술은 산업적으로 매우 유용하다. 이에 본 발명자들은 위와 같은 세리포리아 락세라타의 액체배양을 생산 최적화 및 기능성 물질들을 개발함으로써 천연 물질을 통한 피부 각질제거에 효과적인 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
본 발명은 전술한바 대로 세리포리아 락세라타의 배지 조성 및 배양방법으로 개선하여 세포 외 다당체 또는 베타-글루칸; 상기 세포 외 다당체 또는 베타-글루칸을 포함하는 세리포리아 락세라타의 균사체 배양물; 또는 상기 세리포리아 락세라타의 균사체 배양물의 추출물의 생산성을 향상시켜 산업적으로 신속하고 대량으로 배양하는 방법을 제공한다.
본 발명의 또 다른 목적은 세리포리아 락세라타 균사체 배양액 제조 방법과 그의 배양액 및 유래의 천연물질을 유효성분으로 하여 각질제거 효과가 우수한 마스크 팩용 조성물 및 마스크 팩을 제공하는 것이다.
본원의 마스크 팩 조성물 및 마스크 팩에 사용되는 균사체를 배양하는 방법으로는 고체 배양법과 액체 배양법을 사용할 수 있는데 고체배양법은 재배시간이 길고, 오염이 발생할 확률이 높고, 배양이 완료된 후 균사체만을 회수하는 작업을 자동화하기가 어렵다는 단점이 있는 반면에 균사체의 액체 배양법은 고체 배양법에 비하여 오염가능성이 작고, 비교적 조밀한 공간에서 짧은 시간 동안에 대량 배양할 수 있다는 장점이 있다.
버섯의 액체배양을 위한 영양성분으로 옥수수 침지액(Corn steep liquor), 효모 추출물(Yeast extract), 펩톤(Peptone) 등의 부산물 유래 탄소원과 고가의 질소원 등이 사용되고 있다.
대부분의 균류는 진탕 배양 시 펠릿(Pellet) 또는 필라멘트(Filament) 균사를 형성하며, 특히 담자균류들은 다양한 크기의 균사응집체를 형성한다. 상기 균사응집체로 인하여 벽면 생육(Wall growth)이 발생하며, 이로 인해 교반 및 통기에 의한 물질 전달이 어려워져 균사 생육 및 생성물의 생산도 저해된다.
그동안 상기 문제점으로 인해 에어-리프트 발효조(Air-lift fermenter)가 일부 사용하여 왔으나, 현재 산업적인 생산을 위한 대규모 에어-리프트 발효조의 이용은 미흡한 실정이다.
따라서 발효조에서의 배양이 불가피하며, 또한 벽면 생육의 방지수단이 강구되어야 한다. 기존 세리포리아 락세라타에 대한 배양방법은 기포 통기형(Bubble column) 방식의 배양기에서 온도, pH, CO2 농도, 조사되는 빛의 양, 배지 성분에 대한 보고는 있지만, 교반기가 부착되어 있는 생물반응기(Bioreactor)의 적용이 거의 없으며, 특히 최적 배양 조건으로 세리포리아 락세라타 균사체량, 건조물의 양, 그리고 건조물에 포함되어 있는 세포 외 다당체 및 베타글루칸의 함량을 증가시키기 위해 일정 농도 이상의 용존산소량을 유지하는 방법인 교반기의 교반속도, 통기량 등을 이용한 배양 방법은 전무한 상태이다.
그러므로 천연 소재인 세리포리아 락세라타의 배양 방법의 최적화를 통해 산업적 생산할 수 있는 배양방법을 이용하여 생산을 향상시킬 수 있는 개발 방법이 요구되고 있다.
이에, 본 발명자들은 세리포리아 락세라타 균사체 배양액 추출물을 대상으로 예의 연구를 계속한 결과, 세리포리아 락세라타 배양에 있어 배양조건에 따라 개선되며, 세리포리아 락세라타 배양액 추출물 및 유래의 베타글루칸과 세포외 다당체가 마스크 팩 조성물 및 마스크 팩의 각질제거에 탁월한 효과를 갖는 것을 발견함으로써 본 발명을 완성하였다. 상기와 같은 본 발명은 피지의 흡착이 매우 빠르고, 보습이 빠르고 적절하게 이루어지는 장점이 있고, 얼굴 피부에 기생하는 각종 미생물 특히 대장균등의 미생물 흡착력이 우수한 효과가 있다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 세리포리아 락세라타 균사체 배양액 제조방법과 그의 건조물 및 추출물 유래의 베타글루칸과 세포외 다당체를 함유하여 각질제거 효과를 나타내는 마스크 팩 조성물 및 마스크 팩을 제공한다.
또한, 본 발명은 세리포리아 락세라타의 다양한 배양방법, 즉 초기 및 배양 중의 pH, 공기 주입량, 배양 중에 산소 공급 및 배지 성분의 균일하게 하기 위해 배양물 교반할 수 있는 임펠러(Impeller) 속도에 따라 적정한 용존 산소(D O, Dissolved oxygen)유지 및 배지 성분을 균일한 확산시키며 이의 최적화에 따라 산업적으로 대량 생산할 수 있는 방법을 개시하였고, 이를 기초화장품류 중 하나인 마스크 팩 조성물 및 마스크 팩에 이용하여 효과 좋은 화장품를 제조하고자 하는 것이다.
본 발명에 따른 조성물은 피부 각질제거 효과가 우수한 마스크 팩 조성물 및 마스크 팩을 범용적으로 널리 사용할 수 있다.
본 발명에 따른 배지 조성으로 세리포리아 락세라타에 의해 생산되는 세포외 다당체 또는 베타-글루칸; 상기 세포외 다당체 또는 베타-글루칸을 포함하는 세리포리아 락세라타의 균사체 배양물; 상기 세포외 다당체 또는 베타-글루칸을 포함하는 세리포리아 락세라타의 균사체 농축물; 이의 건조물 또는 상기 세리포리아 락세라타의 균사체 배양물의 추출물 제조 시 탄소원, 질소원, 무기염류를 최적화하여 산업적으로 대량 배양할 수 있다.
또한, 본 발명은 배양방법으로 세리포리아 락세라타에 의해 생산되는 세포외 다당체 또는 베타-글루칸; 상기 세포외 다당체 또는 베타-글루칸을 포함하는 세리포리아 락세라타의 균사체 배양물; 상기 세포외 다당체 또는 베타-글루칸을 포함하는 세리포리아 락세라타의 균사체 농축물; 이의 건조물 또는 상기 세리포리아 락세라타의 균사체 배양물의 추출물 제조 시에 의하여 제조가 가능하다.
그리고 초기 및 배양 중의 pH, 공기 주입량, 배양 중에 산소 공급 및 배지 성분의 균일하게 하기 위해 배양물 교반할 수 있는 임펠러 속도에 따라 적정한 용존 산소유지 및 배지 성분을 균일한 확산시키는 방법을 최적화하여 산업적으로 대량 배양할 수 있다.
더불어 배양중에 영양성분을 첨가함으로써 균사체량을 향상시켜 세리포리아 락세라타 건조물의 양, 그리고 건조물에 포함되어 있는 세포외 다당체 및 베타글루칸의 함량을 증가시킬 수 있다.
이리하여 본 발명은 피부의 노폐물 제거력이 우수하고, 보습 효과가 탁월하여 피부를 촉촉하게 유지할 수 있는 효과가 있으며, 그로 인하여 피부의 노화를 방지하는 우수한 효과가 있다.
도 1은 본원의 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법의 일 실시 예에 있어 세리포리아 락세라타 배양 시 초기 pH에 따른 균사체의 생장성을 나타낸 그래프이다.
도 2는 본원의 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법의 일 실시 예에 있어 세리포리아 락세라타 배양 시 배양시간에 따른 균사체 생산성을 나타낸 그래프이다.
도 3은 본원의 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법에 있어 배양기 종류에 따른 세리포리아 락세라타 배양물의 결과를 나타낸 그래프이다.
도 4는 본원의 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법의 일 실시 예에 있어 700 L 공기 부양식 배양기에서의 배양과 5,000 L 교반형 생물반응기의 최적 조건에서 배양한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 5는 본원의 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법의 일 실시 예에 있어 본원의 마스크 팩을 사용중인 사진이다.
도 6은 본원의 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법의 일 실시 예에 있어 본원의 마스크 팩을 사용전과 사용후 각질이 개선된것을 나타낸 사진이다.
도 7은 본원의 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법의 일 실시 예에 있어 본원의 마스크 팩을 사용전과 사용 후 모공이 수축된 것을 나타낸 사진이다.
이하 본 발명의 실시 예들을 상세히 설명한다. 본 발명을 설명함에서, 관련된 공지 기능 또는 구성에 대한구체적인 설명이 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우에는 그 상세한 설명을 생략할 것이다. 또한, 본 명세서에서 사용되는 용어들은 본 발명의 바람직한 실시 예를 적절히 표현하기 위해 사용된 용어들로서, 이는 사용자, 운용자의 의도 또는 본 발명이 속하는 분야의 관례 등에 따라 달라질 수 있다.
따라서, 본 용어들에 대한 정의는 본 명세서 전반에 걸친 내용을 토대로 내려져야 할 것이다. 명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성요소를 "포함"한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.
본 발명은 상기한바 대로 화장용 마스크 팩 조성물 및 마스크 팩에 세리포리아 락세라타를 함유하는 것을 본원의 특징으로 한다.
본원의 마스크 팩 조성물 및 제조방법은 마스크 팩은 일정 농도 이상의 용존산소량 (Dissolved oxygen)농도하에서 교반 및 통기 변화에 따른 세리포리아 락세라타의 액체배양 시 균사체 양, 건조물의 양, 건조물에 포함되어 있는 세포외 다당체 및 베타글루칸의 함량을 향상시키게 된다.
더불어 교반 속도를 조절하여 일정 농도 이상의 용존산소량을 유지하며, 교반속도에 의해 용존산소량이 조절되지 않을 경우 2단계로 통기를 조절하여 자 발효조(Jar fermenter) 시스템에서 세리포리아 락세라타의 효율적으로 균사체와 건조물, 세포외 다당체 및 베타글루칸을 생산한다.
본 발명은 이처럼 세리포리아 락세라타에 의해 생산되는 세포외 다당체 또는 베타-글루칸; 상기 세포외 다당체 또는 베타-글루칸을 포함하는 세리포리아 락세라타의 균사체 배양물; 상기 세포외 다당체 또는 베타-글루칸을 포함하는 세리포리아 락세라타의 균사체 농축물; 이의 건조물 또는 상기 세리포리아 락세라타의 균사체 배양물의 추출물을 함유하는, 각질제거 효과를 갖는 마스크 팩 조성물 및 마스크 팩의 제조방법을 제공한다.
따라서, 상기 세리포리아 락세라타에 의해 생산되는 세포외 다당체 또는 베타-글루칸; 상기 세포외 다당체 또는 베타-글루칸을 포함하는 세리포리아 락세라타의 균사체 배양물; 상기 세포외 다당체 또는 베타-글루칸을 포함하는 세리포리아 락세라타의 균사체 농축물; 이의 건조물 또는 상기 세리포리아 락세라타의 균사체 배양물의 추출물을 활성성분으로 포함하는 마스크 팩 조성물 및 마스크 팩 제형으로 제품화될 수 있다.
마스크 팩 조성물 및 마스크 팩으로 생산되는 경우, 상기 세포외 다당체 또는 베타-글루칸의 함량은 조성물 총 중량에 대하여 0.001 내지 50중 량%가 될 수 있으며 바람직하게는 0.05 내지 5중량 %로 수치에 대한 한계나 제어를 본원에서는 받지
않음을 밝혀둔다.
최소한의 항산화 및 보습 효과를 달성할 수 있도록 세포외 다당체 또는 베타-글루칸의 함량은 상기 최소치 이상인 것이 바람직하며, 과량 첨가에 따른 사용감 저하 및 각종 제형에의 적용 가능성을 고려하여 세포외 다당체 또는 베타-글루칸의 함량은 상기 최대치 이하인 것이 바람직하다. 이때, 세포외 다당체 또는 베타-글루칸의 함량은 조성물에 함유되는 성분들의 함량에 따라 상기 범위 내에서 적절히 조절하는 것이 바람직하다.
본 발명의 마스크 팩의 조성물이나 제조방법 및 마스크 팩은 당 업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 특별한 제한은 없다. 상기 마스크 팩 조성물 및 마스크 팩의 제형화를 위해 화장품 학적으로 허용 가능한 화장품 원료 또는 첨가제를 사용할 수 있으며, 제조하고자 하는 제형의 제조에 당 업계 기술분야에서 사용 가능한 것으로 공지되어 있는 임의의 화장품 원료 또는 첨가제가 이용될 수 있다.
본 발명의 일 실시 예에 따르면, 본 발명의 조성물에서 상기 세포 외 다당체 또는 베타-글루칸의 함량은 전체 조성물 총 중량에 대하여0.05~5중량% 또는 0.1 내지 10 중량%가 바람직하며 상기 베타-글루칸의 함량은 아무 문제없이 변화가 가능하다
본 발명은 세포외 다당체 또는 베타-글루칸은 세리포리아 락세라타 배양물로부터 얻을 수 있으며, 또한, 세리포리아 락세라타에 의해 생산되는 세포외 다당체 또는 베타-글루칸; 상기 세포외 다당체 또는 베타-글루칸을 포함하는 세리포리아 락세라타의 균사체 배양물; 상기 세포외 다당체 또는 베타-글루칸을 포함하는 세리포리아 락세라타의 균사체 농축물; 이의 건조물 또는 상기 세리포리아 락세라타의 균사체 배양물의 추출물을 생산하기 위한 배지조성 및 배양조건을 제공한다.
본 발명자들은 마스크 팩 조성물 및 마스크 팩의 핵심물질인 세리포리아 락세라타 배양물의 대량생산을 위한 액체배양법을 확립하기 위하여, 균사체의 최적화된 배지 조성 및 배양조건을 결정하였다.
본 발명의 세리포리아 락세라타 균사체의 대량 생산방법은 세리포리아 락세라타의 생산방법에서, 세리포리아 락세라타로부터 액체 배양용 세리포리아 락세라타 균사체를 얻는 단계, 세리포리아 락세라타 균사체를 액체 배양하는 단계, 액체 배양된 세리포리아 락세라타 균사체를 생물반응기를 이용하여 배양시키는 단계를 포함한다.
(1) 세리포리아 락세라타로부터 액체 배양용 세리포리아 락세라타 균사체를 얻는 단계;
액체 배양용 세리포리아 락세라타 균사체는 세리포리아 락세라타로부터 얻을 수 있다. 세리포리아 락세라타를 PDA(Potato dextrose agar) 배지(Culture medium 100 플라스틱 배양 구; Difco, Becton Dickinson and Company)에서 7~11일 정치 배양하였다.
그런 다음 500 배플(Baffle])이 있는 삼각플라스크에 PDB(Potato dextrose broth) 배지(Difco) 200 를 조성한 후, PDA 배양 균주 1개를 넣고 7~11일간 진탕 배양하였다. 이때 접종 원으로 투입될 균사체의 양은 배양할 용액의 양을 기준으로 0.3%(w/v) 정도인 것이 바람직하다.
(2) 세리포리아 락세라타 균사체를 액체 배양하는 단계;
상기 (1) 단계에 의해 얻은 세리포리아 락세라타 균사체를 액체 배양용 배양액에 접종하여 세리포리아 락세라타 균사체를 액체 배양하여 얻을 수 있다.
액체 배양용 배양액은 물에 탄소원, 질소원, 비타민, 무기물을 포함하도록 하여 pH가 4.06.5로 조정할 수 있다. 그런 다음 pH가 조절된 배양액에 세리포리아 락세라타 균사체를 배양액 부피 대비 0.1∼10％으로 배양액에 첨가하고, 20∼25℃에서 7∼11일 동안 액체 배양할 수 있다.
상기에서 탄소원은 말토오스(Maltose), 글루코오스(Glucose), 락토오스(Lactose), 전분(Starch), 덱스트린(Dextrin), 수크로스(Sucrose), 프럭토스(Fructose), 갈락토오스(Galactose), 만노오스(Mannose), 당분(Oligosaccharide) 중에서 선택된 적어도 어느 하나 이상을 사용할 수 있다.
상기에서 질소원은 대두분, 면실분, 아미노산(Amino acid), 펩톤(Peptone),
콘 스티프 리쿼 중에서 선택된 적어도 어느 하나 이상을 사용할 수 있다.
상기 무기물은 일인산칼륨(KH2PO4), 이인산칼륨(K2HPO4), 탄산칼슘(CaCO3), 염화칼슘(CaCl2), 황산 마그네슘(MgSO4), 염화나트륨(NaCl), 황산 망간 (Mn SO4)중에서 선택된 적어도 어느 하나 이상을 사용할 수 있다.
본 발명은 세리포리아 락세라타 균사체를 액체 배양하기 위한 다양한 구성성분의 배양액을 제조하여 사용할 수 있으며 바람직한 하나의 일 실시한 예로서, 상기 배지는, 0.2~5% 포도당, 0.2~1% 펩톤, 0.05~0.25% 일인산칼륨(KH2PO4), 0.02~0.1% 황산 마그네슘(MgSO4) 및 물을 포함할 수 있다. 바람직하게는 포도당 3 중량%, 펩톤 0.5 중량%, 일인산칼륨(KH2PO4) 0.1 중량%, 황산 마그네슘(MgSO4) 0.05 중량%가 바람직하다.
(3) 생물반응기를 이용해 액체 배양된 세리포리아 락세라타 균사체를 배양시키는 단계;
상기 (2) 단계에 의해 액체 배양된 세리포리아 락세라타 균사체는 생물반응기 내의 배양액에 접종하고 배양하여 세리포리아 락세라타 배양물을 제조할 수도 있다.
그리고 생물반응기 내부의 배양액은 정제 수에 탄소원, 효모추출물, 질소원, 비타민, 무기물을 포함하도록 하여 pH가 4.0~6.5으로 조정할 수 있다.
그런 다음 액체 배양된 세리포리아 락세라타(Ceriporia lacerata) 균사체를 배양액 부피 대비 0.1∼10％으로 생물반응기 내의 배양액에 접종한 후, 0.02∼2 vvm(volume of air added to liquid volume per minute)의 공기를 생물반응기 내부로 공급하여 20∼25℃의 온도에서 7∼11일 동안 배양하여 세리포리아 락세라타 배양물을 제조할 수 있다.
상기 생물반응기 내부의 배양액에서, 탄소원은 말토오스, 글루코오스, 락토오스, 전분, 덱스트린, 수크로스, 프럭토스, 갈락토오스, 만노오스 중에서 선택된 어느 하나 이상을 사용할 수 있다.
상기 생물반응기 내부의 배양액에서, 질소원은 대두분, 면실분, 아미노산, 펩톤, CSL, 중에서 선택된 어느 하나 이상을 사용할 수 있다.
상기에서 무기물은 일인산칼륨(KH2PO4), 이인산칼륨(K2HPO4), 탄산칼슘(CaCO3), 염화칼슘(CaCl2), 황산 마그네슘(MgSO4), 염화나트륨(NaCl), 황산 망간 (MnSO4)중에서 선택된 어느 하나 이상을 사용할 수 있다.
본 발명은 세리포리아 락세라타 균사체를 액체 배양하기 위한 다양한 구성성분의 배양액을 제조하여 사용할 수 있다.
바람직한 하나의 일 실시한 예로서, 상기 배지는, 0.2~5% 포도당, 0.2~1% 펩톤, 0.05~0.25% 일인산칼륨(KH2PO4), 0.02~0.1% 황산 마그네슘(MgSO4) 및 물을 포함할 수 있다. 바람직하게는 포도당 3 중량%, 펩톤 0.5 중량%, 일인산칼륨(KH2PO4) 0.1 중량%, 황산마그네슘(MgSO4) 0.05 중량% 이다.
본 발명에서 세리포리아 락세라타 균사체의 대량 배양용 생물반응기로는 본원 관련 분야에서 통상적으로 사용하며, 공기를 주입할 수 있는 생물반응기라면 어떠한 것이라도 사용할 수 있다. 본 발명에서 이러한 생물반응기의 일례로서 순환형(기포 통기형) 공기 부양식 생물반응기, 풍선형 공기 부양식 생물반응기, 칼럼형 공기부양식 생물반응기, 교반식 생물반응기 중에서 선택된 어느 하나를 사용할 수 있다.
한편, 본 발명은 상기에서 언급한 세리포리아 락세라타 균사체를 대량으로 생산하는 방법에 의해 얻은 세리포리아 락세라타 배양물; 세리포리아 락세라타 배양물의 추출물 혹은 건조물을 포함한다.
(4) 세리포리아 락세라타 배양물로부터 건조물, 추출물, 세포외 다당체 또는 베타-글루칸을 제조하는 단계.
본 발명의 세포외 다당체 또는 베타-글루칸은 세리포리아 락세라타 배양물로부터 얻을 수 있다.
바람직하게는, 상기 세포외 다당체 또는 베타-글루칸은 (a) 세리포리아 락세라타를 액체 배지에서 배양하여 균사체 배양물을 제조하는 단계, (b) 세리포리아 락세라타 균사체 및 배양물을 건조해 분말 화하는 단계, 및 (c) 균사체 배양물 분말을 용매로 추출하여 이로부터 세포외 다당체 또는 베타-글루칸을 수득하는 단계를 거쳐 제조할 수 있다.
상기 (b) 단계에서는 상기 (a) 단계에서 제조된 균사체 배양물을 진공건조 또는 동결건조시켜 분말화 할 수 있다. 상기의 건조는 유효물질의 소멸을 방지하기 위해 40℃ 이하의 온도, 보다 구체적으로는 30℃ 이하의 온도에서 48 내지 96시간 동안 수행되는 것이 바람직하다. 그리고 (b) 단계에서의 건조는 증발온도를 상대적으로 높게 설정하는 진공건조기보다 진공 동결 건조기를 사용하는 것이 유효물질 함량 변화가 최소화됨이 바람직하다.
본 발명의 균사체 배양물의 추출물은, 상기 세리포리아 락세라타의 균사체 배양물을 당 업계에 공지된 통상의 방법에 따라, 즉, 통상적인 용매를 사용하여, 통상적으로 이용되는 열수추출, 실온추출, 가온 추출, 초음파추출, 초 임계추출 등의 방법으로 제조될 수 있다.
이때 각 원료 유기농 식물을 추출 용매를 사용하여 각각 추출한 후 혼합하여 사용하는 것이 바람직하다.
구체적으로는 물, 탄소수 1 내지 6의 글리콜, 탄소수 1 내지 4의 무수 또는 함수 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 클로로포름, 1,3-부틸렌 글리콜 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 용매를 사용하여 추출한다.
더욱 바람직하게는 35 내지 45%(v/v) 1,3-부틸렌 글리콜을 추출 용매로 사용하여 추출한다. 이때 추출 용매의 사용량은 원료 중량의 10 내지 30배 부피량이며, 보다 바람직하게는 20 배이다.
추출온도와 시간은 추출하고자 하는 시료의 양에 따라 달라질 수 있으며 40 내지 100℃에서 3 내지 100시간 동안 가열하여 추출하거나, 50 내지 70℃에서 1일 내지 5일간 실시하는 것이 바람직하며 추출결과물을 여과 또는 정제하는 과정을 거칠 수 있다.
또한, 본 발명의 균사체 배양물의 추출물은 감압 증류, 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.
상기 (c) 단계에서는 (b) 단계에서 얻은 균사체 배양물 건조물을 용매로 추출한 후 본 발명에 따른 조성물의 유효성분인 세포외 다당체 또는 베타-글루칸을 분리, 제조한다.
세포 외 다당체를 얻기 위해 건조 분말 1~10g에 증류수 100㎖를 첨가하여 잘 현탁한 후, 10,000 rpm으로 20분 동안 원심분리하여 이의 상등액에 그 양의 2 ~ 4배에 해당하는 95% 이상의 순도를 갖는 용매를 첨가하고 2 ~ 6℃의 냉장고에 넣어 12 ~ 18시간 정치시킬 수 있다. 상기의 정치 물을 10,000 rpm으로 20분 동안 원심분리한 후, 침전물을 회수 및 동결건조하여 조(Crude) 세포외 다당체를 제조할 수 있다.
상기 세포외 다당체는 40 ~ 60 중량%의 당과 30 ~ 40 중량%의 단백질, 40 ~ 50 중량%의 당과 32 ~ 38 중량%의 단백질, 또는 43 ~ 47 중량%의 당과 33 ~ 36 중량%의 단백질을 포함할 수 있고, 보다 구체적으로는 약 45 중량%의 당과 약 34 중량%의 단백질을 더 포함할 수도 있다.
베타-글루칸은 건조 분말 10g에 증류수 50㎖를 가하여 현탁시킨 다음 실온에서 20% 탄산나트륨(Sodium carbonate)을 이용하여 pH를 10.0으로 조정한 후 10시간 정도를 방치하여 분말 시료가 충분히 연화되도록 한다. 이 연화된 시료액에 고온에 안정한 알파아밀레이즈(α-amylase)를 가하여 60℃의 항온수조 내에서 2시간 동안 교반하여 효소처리를 한 후 실온으로 냉각한다. 이 액을 pH 5로 맞춘 다음 아밀로글루코시데이즈(Amyloglucosidase)로 60℃의 항온수조에서 2시간 동안 교반을 한다.
그 다음 효소를 불활성화시키기 위해서 pH를 4.5로 맞춘 후, 5℃의 항온수조에서 30분간 교반한 후 냉각한다. 냉각한 추출액을 원심분리(30 Min, ×8000 rpm)하여 상등액만을 취한 후 40℃의 온도에서 감압 농축하게 되고 이 농축액에 4배량의 에탄올을 가하여 4시간 정도 방치한 다음 원심분리하여 침전물을 얻는다. 이 침전물을 다시 물에 용해한 후 pH를 4.5로 맞춘 다음, 아밀로글루코시데이즈(Amyloglucosidase)로 58℃에서 2시간 동안 효소를 재처리한다. 처리 후 95℃에서 30분 동안 효소를 불활성 시킨 다음 냉각하고 원심분리하여 상등액을 취한 후 에탄올로 재침전시켜 조(Crude) 베타-글루칸(β-glucan)을 제조할 수 있다.
이하 본 발명의 내용을 실시예 및 시험 예를 통하여 구체적으로 설명한다.
그러나 이들은 본 발명을 보다 상세하게 설명하기 위한 것으로 본 발명의 권리범위가 이들에 의해 한정되는 것은 아니다.
세리포리아 락세라타 균사체의 고체배양에서 배지 및 생장조건 결정.
세리포리아 락세라타 균사체의 생장성이 가장 우수한 배지를 결정하기 위하여, 하기 표 1에 기재된 다양한 종류의 배지를 이용하여 균사생장과 밀도를 측정함으로써 최적의 생장 배지를 결정하였다. 구체적으로 각각의 종류의 배지는 살균 전 pH 5.5로 조절되어 살균되었다. 정치배양을 위해서 24±2℃로 고정된 배양기에서 세리포리아 락세라타 균사체를 10일간 배양한 후, 그에 따른 세리포리아 락세라타 균사체의 지름 및 균사밀도를 측정하여 생장성을 조사하였고 아래의 표로 나타내었다.
배지 종류에 따른 균사체 생장성 조사.
배지 PDA YM NU YMG LB MYP MCM
지름/mm 76 67 54 70 61 71 67
균사밀도 *** ** * *** ** ** *
균사밀도 : 우수(***), 양호(**), 보통(*)
실험장소 : CL 바이오 기업 부설연구소.
PDA : Potato 200g, Dextrose 20g, Agar 15g/L
Y M: Yeast extract 3g, Malt extract 3g, Peptone 5g, Dextrose 10g, Agar 15g/L
NU : Peptone 5g, Beef extract 3g, Agar 15g/L
YMG : Yeast extract 4g, Malt extract 10g, Glucose 4g, Agar 15g/L
LB : NaCl 10g, Yeast extract 5g, Tryptone 10g, Agar 15g/L
MYP : Malt extract 30g, Yeast extract 2g, Peptone 1g, Agar 15g/L
MCM : Glucose 20g, Yeast extract 2g, Peptone 3g, MgSO42O 0.5 g, K2HPO4 1g, KH2PO4 0.46 g, Agar 20 g/L
그 결과, 표 1에서 보는 바와 같이 PDA, YMG, MYP 배지에서 대체로 우수한 생장성을 보였으며, 특히 PDA 배지를 사용하였을 때, 균사체의 생장성이 가장 우수하였다.
세리포리아 락세라타 균사체의 온도에 따른 생장성 측정.
본원의 핵심 물진인 세리포리아 락세라타 균사체의 고체 배지 배양온도에 따른 생장성 측정을 위하여, 가장 우수한 생장성을 나타낸 PDA 배지를 사용하여 배양온도를 18℃, 20℃, 22℃, 24℃, 26℃으로 설정한 후, 10일간 배양하여 각 온도에 따른 균사체의 생장성을 조사하였다.
배양 온도에 따른 균사체 생장성 조사.
온도() 18 20 22 24 26
지름(mm) 38 64 80 75 70
균사밀도 * ** *** *** ***
균사밀도 : 우수(***), 양호(**), 보통(*)
실험장소 : CL 바이오 기업 부설연구소.
그 결과, 위 표 2에서 보는 바와 같이 22℃의 온도까지는 생장성이 증가하였지만, 그 이상의 온도에서는 감소하는 결과를 나타내어, 가장 생장성이 우수한 온도는 22℃로 측정되었다.
세리포리아 락세라타 균사체의 액체 종 배양과 세리포리아 락세라타 균사체의 초기 pH에 따른 생장성 조사.
세리포리아 락세라타 균사체의 생장성이 가장 우수한 배지를 결정하기 위하여, 하기 표 1에 생장성이 우수한 PDA 배지로 이것에 대한 액체배지인 PDB(Potato dextrose broth)에서 초기 pH에 따른 균사체량을 조사하였다.
그 결과 도 1에서 보는 바와 같이 pH 5에서 6 사이에서는 거의 유사한 균사체량을 나타내었으며, pH 5.5에서 가장 우수한 균체 성장을 나타내었다.
세리포리아 락세라타 균사체의 배양시간에 따른 생장성 조사.
세리포리아 락세라타 균사체의 본 배양완료 시점을 조사하기 위하여 배양시간에 따른 균사체 량을 조사하였다. 배양을 위해 PDA 고체 배지에서 12일 배양한 균사체를 믹서로 갈아 균질화시킨 후 종 배양 액체배지에 접종하였다. 배양조건은 초기 pH 5.5와 22℃, 그리고 진탕 배양기에서 120 rpm으로 배양하였다.
그 결과 도 2에서 보는 바와 같이 배양 3일 차까지는 균체 성장이 거의 이루어지지 않았지만, 4일 차부터는 급격한 균체가 성장하여 배양 9일 차부터 12일 차까지는 균체량이 유사하였지만 13일 차 이후에는 현저히 감소하였다. 따라서 최적 종 배양 시간은 9일부터 12일까지로 조사되었다.
세리포리아 락세라타 균사체의 액상배양으로 생리활성물질 제조법.
세리포리아 락세라타를 PDA, 배지(100 플라스틱 배양구; Difco, Becton Dickinson and Company)에서 10일 정치 배양하였다. 그런 다음 500 ㎖ 배플이 있는 삼각플라스크에 PDB,배지(Difco) 200 ㎖를 조성한 후, PDA 배양 균주 1개를 넣고 10일간 진탕 배양하였다. 그리고 포도당 3 중량%, 펩톤 0.5 중량%, 일인산칼륨(KH2PO4) 0.1 중량%, 황산 마그네슘(MgSO4) 0.05 중량%, 실리콘 거품제 0.2 중량% 및 잔량의 물을 포함하는 2ℓ 액체 배양 배지를 5ℓ 배양기에서 살균한 후, 25℃로 냉각한 상태에서 접종액으로 사용할 PDB 배양 균주 200 ㎖를 접종하고, 교반속도 300 rpm, 공기를 0.5 vvm으로 통기 시키면서 25℃의 항온에서 7~11일간 액체 배양함으로써 세리포리아 락세라타, 균사체 배양물을 제조하였다.
세리포리아 락세라타 배양물 건조분말(Dried Powder)의 제조.
상기 실시예 5에서 제조된 세리포리아 락세라타 균사체 배양물을 진공동결건조기를 이용하여 35℃ 이하의 저온에서 48시간 동안 동결건조시켜 분말화합으로써 세리포리아 락세라타 균사체 배양물의 건조분말을 제조하였다.
세리포리아 락세라타 배양물로부터 세포 외 다당체(EPS)의 제조.
상기 실시예 6에서 제조된 건조 분말 2 g에 증류수 100 ㎖를 첨가하여 잘 교반한 후, 원심분리(10,000 rpm, 20분)한 다음 상등액에 그 양의 3배에 해당하는 에탄올을 첨가하고 냉장조건(2~8℃)에서 16시간 정치하였다. 상기의 정치 물에서 침전물을 취해 동결건조하여 세리포리아 락세라타 균사체 배양물로부터 세포 외 다당체를 제조하였다.
세리포리아 락세라타 배양물로부터 베타-글루칸의 제조
상기 실시예 6에서 제조된 건조 분말 10 g에 증류수 50 ㎖를 가하여 현탁시킨 다음 실온에서 20% 탄산나트륨(Sodium carbonate)을 이용하여 pH를 10.0으로 조정한 후 10시간 정도를 방치하여 분말 시료가 충분히 연화되도록 하였다.
이 연화된 시료액에 고온에 안정한 알파아밀레이즈(α-amylase)를 가하여 60℃의 항온수조 내에서 2시간 동안 교반하여 효소처리를 한 후 실온으로 냉각하였다.
이 액을 pH 5로 맞춘 다음 아밀로글루코시데이즈(Amyloglucosidase)로 60℃의 항온수조에서 2시간 동안 교반을 행하였다. 그 다음 효소를 불활성화시키기 위해서 pH를 4.5로 맞춘 후, 95℃의 항온수조에서 30분간 교반한 후 냉각하였다.
냉각한 추출액을 원심분리(30 min ×8000 rpm)하여 상등액만을 취한 후 40℃의 온도에서 감압 농축하였다. 이 농축액에 4배량의 에탄올을 가하여 4시간 정도 방치한 다음 원심분리하여 침전물을 얻었다. 이 침전물을 다시 물에 용해한 후 pH를 4.5로 맞춘 다음, 아밀로글루코시데이즈로 58℃에서 2시간 동안 효소를 재처리하였다. 처리 후 95℃에서 30분 동안 효소를 불활성 시킨 다음 냉각하고 원심분리하여 상등액을 취한 후 에탄올로 재침전시켜 조(crude) 베타글루칸(β-glucan)을 제조하였다.
생물반응기 형태에 따른 세리포리아 락세라타 균사체 배양.
상기 생물반응기를 이용한 균사체 배양은 생물반응기 형태에 따라 균사체의 생장량에 차이가 있으므로 세리포리아 락세라타 균사체를 대상으로 배양에 적합한 배양기 형태를 선발하기 위하여 교반형, 컬럼형과 기포 통기형을 대상으로 균사체의 생장량과 건조물의 양, 건조물에 포함되어 있는 세포외 다당체 및 베타글루칸, 함량을 비교하였다. 실시예 5에 나와 있는 배지 조성 및 온도로 수행하였으며, 배양조건은 기포 통기형과 컬럼형은 0.5vvm, 교반형은 300 rpm과 0.5 vvm이며 배양온도는 25℃로 수행하였다. 균사체의 생장량 측정하기 위하여 배양물을 8000 rpm에서 10분간 원심분리한 후, 증류수로 세척과 원심분리를 2회 반복하였다.
원심분리한 후 침전된 균사체를 105℃에서 건조한 후 건조된 균사체량(DCW, dry cell weight)를 측정하였다. 또한, 세포외 다당체와 베타글루칸은 각각 제조된 건조물에 대한 함량으로 측정하였다.
각각의 배양기에서 생성된 균사체, 건조물, 세포 외 다당체, 베타글루칸은 도 3에 나와 있다. 도 3에서 보는 바와 같이 균사체랑 및 건조물량은 교반형에서 가장 높게 나타났으나, 건조물에 포함되어 있는 세포 외 다당체와 베타글루칸의 함량은 공기 부양 식의 칼럼형과 교반형에서 유사하게 나타났다.
따라서 세포 외 다당체와 베타글루칸의 생성량은 공기 부양 식의 칼럼형과 교반형이 유사하지만 균사체량 및 건조물의 양이 높은 교반형 배양기가 유리하다.
교반형 생물반응기에서의 세리포리아 락세라타 배양 최적화.
상기 실시예 5의 배지 조성 및 배양조건으로 초기 rpm에 따른 배양액 속에 포함되어 있는 세리포리아 락세라타 균사체 농도, 건조물(Powder)의 농도, 그리고 건조물에 포함되어 있는 세포 외 다당체 및 베타글루칸의 함량의 측정 하였다.
배양기 교반 속도는 0, 50, 100, 200, 300, 400, 500 rpm으로 배양 초기부터 배양완료 시점까지 유지하면서 배양하였다.
rpm에 따른 세리포리아 락세라타 균사체 배양
rpm 생육정체기
(일)		 균사체량
(g/L)		 건조물의 양
(g/L)		 세포 외 다당체 함량
(mg/g Powder)		 베타글루칸 함량
(mg/g Powder)
0 4 4.7 15.9 2.42 14.1
50 5 6.7 26.5 3.78 20.1
100 7 7.9 29.9 4.55 25.5
200 9 8.8 34.2 5.01 29.2
300 10 8.5 31.0 4.97 28.6
400 8 8.3 30.7 4.95 28.7
500 5 3.9 12.8 1.72 11.4
실험장소 : 계명대학교 식품영양학과 연구실
그 결과, 위 표 3에서 보는 바와 같이 세리포리아 락세라타 균사체 농도, 건조물의 농도 및 건조물에 포함되어 있는 세포 외 다당체와 베타글루칸의 함량은 낮은 rpm인 100 이하에서는 낮게 나타났지만 높은 rpm인 200부터 400까지는 다소 높게 측정되었다.
그러나 높은 rpm인 500에서는 현저히 감소하였다. 생육정체기 측면에서 낮은 rpm은 시기가 빠르게 나타났지만 배양 기간에 비해서는 균사체 농도, 건조물의 농도, 건조물에 포함되어 있는 세포 외 다당체 및 베타글루칸의 함량이 높게 조사되었다. 그러나 200부터 400까지의 rpm에서는 생육정체기 시점이 8일 이상으로 배양 후기까지 지속하는 경향을 나타내었지만, 배양기간을 고려할 경우 낮은 rpm보다는 효율성이 낮게 측정되었다.
따라서 초기 rpm 조절에 따라 세리포리아 락세라타의 배양 성이 변하는 것을 알 수 있었다. 또한, 초기 교반을 하지 않거나, 낮은 rpm으로 시작하여 점차 상승시킬 경우 배양 성이 향상될 것으로 추정되었다.
공기 공급량(Aeration)에 따른 배양.
상기 실시예 5의 배지 조성 및 배양조건으로 초기 공기 공급량에 따른 배양액 속에 포함되어 있는 세리포리아 락세라타 균사체 농도, 건조물(Powder)의 농도, 그리고 건조물에 포함되어 있는 세포 외 다당체 및 베타글루칸의 함량을 측정하였다. 배양기 교반 속도는 가장 유리한 조건으로 조사된 rpm 200으로 수행하였으며, 공기 공급량은 0, 0.01, 0.02, 0.05, 0.1, 0.2, 0.5, 1, 2 vvm으로 배양 초기부터 완료시점까지 유지하면서 배양하였다.
공기 공급량에 따른 세리포리아 락세라타 균사체 배양.
공기
공급량
(vvm)		 생육
정체기 (일)		 균사체량
(g/L)		 건조물의 양
(g/L)		 세포 외 다당체 함량
(mg/g Powder)		 베타글루칸 함량
(mg/g Powder)
0 2 1.9 5.4 1.12 5.2
0.01 8 8.3 29.7 4.78 27.5
0.02 10 8.6 30.8 4.89 28.8
0.05 10 8.5 31.1 5.02 29.1
0.1 10 8.5 30.9 5.01 29.0
0.2 10 8.6 31.4 5.10 30.1
0.5 10 8.4 30.6 4.98 29.4
1 9 8.4 30.8 5.01 28.1
2 3 3.7 8.9 1.89 9.5
실험장소 : 계명대학교 식품영양학과 연구실
그 결과, 위 표 4에서 보는 바와 같이 공기가 공급되지 않을 경우 배양이 이루어지지 않았다. 그리고 공기 공급량이 0.01 vvm부터 1 vvm까지는 공기 공급량이 증가함에 따라 배양 결과에 큰 차이를 나타내지 않았지만 2 vvm에서는 세리포리아 락세라타 균사체 농도, 건조물의 농도, 그리고 건조물에 포함되어 있는 세포 외 다당체 및 베타글루칸의 함량이 현저히 감소하였다.
따라서 교반형 생물반응기에서 공기 공급량은 0.01 vvm부터 1 vvm까지가 배양에 유리함을 알 수 있었다.
내압에 따른 배양.
실시예 5의 배지 조성 및 배양조건으로 초기 내압에 따른 배양액 속에 포함되어 있는 세리포리아 락세라타 균사체량, 건조물의 양, 그리고 건조물에 포함되어 있는 세포 외 다당체 및 베타글루칸의 함량을 측정하였다.
배양기 교반 속도는 상기 실시예에서 가장 유리한 조건으로 조사된 rpm 200으로 수행하였으며, 공기 공급량은 상기 실시예에서 가장 유리한 조건인 0.2 vvm으로 하여 내압을 0.05, 0.1, 0.2, 0.5, 1, 1.5 kg/cm2으로 배양 초기부터 완료시점까지 유지하면서 배양하였다.
내압에 따른 세리포리아 락세라타 균사체 배양.
내압
(kg/cm2)		 생육
정체기
(일)		 균사체량
(g/L)		 건조물의 양
(g/L)		 세포 외 다당체 함량
(mg/g Powder)		 베타글루칸 함량
(mg/g Powder)
0.05 10 8.5 28.9 4.95 28.1
0.1 10 8.6 28.5 4.88 29.1
0.2 10 8.5 29.1 4.89 28.7
0.5 10 8.4 30.1 4.91 29.2
1 10 8.5 29.5 4.94 29.4
1.5 10 8.6 29.9 4.92 29.3
실험장소 : 계명대학교 식품영양학과 연구실
그 결과, 위 표 5에서 보는 바와 같이 교반형 생물반응기의 내압이 증가하거나 감소하더라도 배양 성에 거의 영향이 없었다. 따라서 세리포리아 락세라타 균사체 배양에 있어 내압은 거의 영향이 없음을 알 수 있었다.
용존산소량 조절에 따른 배양.
상기 실시예 등에서 나타난 것과 같이 세리포리아 락세라타 배양에 있어 중요한 요소로 교반형 생물반응기 배양 시 공기 공급량 혹은 내압보다는 rpm에 의한 영향이 높음을 알 수 있었다.
따라서 rpm에 의한 영향으로 나타나는 것으로 대표적인 것은 균사체에 대한 전단 응력(Shear strees)과 배양액에 대한 용존산소량이 있다.
전단 응력 측면에서는 rpm이 증가함에 따라 균사체의 모양에는 큰 변화를 나타내지 않았기 때문에 영향이 클 것으로 추정되는 용존 산소량에 따른 세리포리아 락세라타 배양 시 균사체 농도, 건조물의 농도, 건조물에 포함되어 있는 세포 외 다당체 및 베타글루칸의 함량을 조사하였다.
초기 배양 조건은 rpm 50, 공기 공급량 0.2 vvm, 내압 0.5kg/cm2이며, 실험에 적용되는 용존산소량은 0, 5, 10, 20, 30, 40, 50, 70%로 수행하였다. 배양이 진행됨에 따라 목적으로 하는 용존산소량에 도달되었을 때부터 1차적으로 rpm을 조절하였으며, 목적으로 하는 용존 산소량이 유지되지 않을 경우 공기 공급량과 내압을 조절하여 일정하게 유지하였다.
용존산소량에 따른 세리포리아 락세라타 균사체 배양.
DO
(%)		 생육정체기
(일)		 균사체량
(g/L)		 건조물의 양
(g/L)		 세포 외 다당체 함량
(mg/g Powder)		 베타글루칸 함량
(mg/g Powder)
No control 4 4.3 12.6 2.13 13.3
5 10 12.6 39.1 6.91 40.2
10 11 12.7 40.2 7.15 39.7
20 12 15.2 45.3 8.22 46.1
30 11 13.6 41.1 7.45 42.3
40 11 13.2 41.3 7.27 40.9
50 9 8.9 30.2 5.23 31.1
70 7 6.3 25.4 4.11 23.2
실험장소 : 계명대학교 식품영양학과 연구실
그 결과, 위 표 6에서 보는 바와 같이 균체 성장 측면에서 용존산소량 40%까지는 약간의 차이만 보일 뿐 큰 차이를 나타내지 않았으나, 배양에 따른 균사체량, 건조물의 양, 그리고 건조물에 포함되어 있는 세포 외 다당체 및 베타글루칸의 함량은 현저히 상승하였다.
그리고 용존 산소량 20% 유지 시에는 생육정체기는 12일, 균사체량은 15.2g/L, 건조물의 양은 45.3g/L, 건조물에 포함되어 있는 세포 외 다당체와 베타글루칸의 함량은 각각 8.22 mg/g Powder와 46.1mg/g Powder로 조사되었다. 용존산소량을 고려하지 않은 경우보다 50% 이상 배양성이 향상되었다.
따라서 세리포리아 락세라타 배양에 있어 일정농도의 용존산소량을 유지하기 위해 rpm, 공기 공급량, 내압을 조절하는 것이 유리함을 알 수 있었다.
배양중 영양성분 첨가에 의한 배양.
아울러 생물반응기를 이용하여 균사체를 배양할 경우 유용물질의 생산성을 높이기 위해 배양 중에 영양성분을 첨가하기 때문에 균체 성장 및 유용물질의 생산성에 영향을 주는 질소원과 탄소원을 첨가하여 수행하였다.
그 결과 질소원의 첨가는 균체 성장에는 유리하였지만, 건조물에 포함되어 있는 세포 외 다당체 및 베타글루칸 함량은 감소하였다.
따라서 유용물질의 생산성을 높이는 방법인 탄소원의 첨가를 수행하였으며, 상기 실시예에서 나와 있는 조건에 따라 초기 조건 및 배지 조성과 배양중에 유지되는 용존 산소량을 20% 이상으로 하여 배양을 12일까지 수행하였다.
배양중에 첨가되는 탄소원으로 포도당(Glucose), 과당(Fructose), 만노오스(Mannose), 탄소원(Sucrose), 엿당(Maltose), 전분(Soluble starch)을 배양 5일 차에 배양액 부피에 대해 3%가 되도록 일시 첨가하였으며, 전분은 20%, 나머지 탄소원은 70%로 조제되었다.
배양중에 첨가되는 탄소원 종류에 따른 세리포리아 락세라타 균사체 배양.
탄소원 균사체량
(g/L)		 건조물의 양
(g/L)		 세포 외 다당체 함량
(mg/g Powder)		 베타글루칸 함량
(mg/g Powder)
포도당
(Glucose)		 17.7 52.1 9.12 50.9
과당
(Fructose)		 16.4 51.9 8.30 50.7
만노오스
(Mannose)		 18.1 55.2 9.25 54.8
설탕
(Sucrose)		 18.0 57.1 9.51 59.2
엿당
(Maltose)		 16.7 49.7 8.66 47.3
전분
(Starch)		 15.2 45.8 8.18 44.9
실험장소 : 계명대학교 식품영양학과 연구실
그 결과, 위 표 7에서 보는 바와 같이 전체적으로 탄소원을 첨가할 경우 세리포리아 락세라타 배양에 의한 배양 성이 향상되었다. 특히, 만노오스 혹은 설탕을 첨가할 경우 높은 세리포리아 락세라타 균사체량, 건조물의 양, 그리고 건조물에 포함되어 있는 세포 외 다당체 및 베타글루칸의 함량이 증가하였다.
따라서 배양중에 탄소원을 첨가할 경우 균사체 및 여러 유용물질의 생산성이 향상되며, 특히 만노오스와 설탕을 첨가할 경우 더욱 향상됨을 알 수 있었다.
배양중 첨가되는 설탕 농도에 따른 배양 성 조사.
상기 실시예 결과에서 보는 바와 같이 배양중에 첨가되는 탄소원으로 포도당을 첨가할 경우 배양 성이 향상되었다. 따라서 첨가되는 최적 설탕의 농도를 조사하기 위해 배양 5일 차에 배양액 부피에 대비 0.1, 0.2, 0.5, 1, 2, 3, 4, 5%를 일실시예로 첨가하였다.
배양중에 첨가되는 설탕 농도에 따른 세리포리아 락세라타 균사체 배양.
첨가농도
(%)		 균사체량
(g/L)		 건조물의 양
(g/L)		 세포 외 다당체 함량
(mg/g Powder)		 베타글루칸 함량
(mg/g Powder)
0 14.7 44.2 8.16 45.1
0.1 15.4 47.6 8.91 48.2
0.2 15.9 48.2 9.11 47.9
0.5 16.7 50.7 9.23 51.5
1 17.6 53.2 9.39 58.7
2 18.2 59.2 9.78 61.3
3 17.9 57.4 9.56 60.1
5 15.1 48.1 8.92 50.8
실험장소 : 계명대학교 식품영양학과 연구실
그 결과, 위 표 8에서 보는 바와 같이 설탕이 첨가되지 않은 경우보다는 첨가될 경우 배양성이 향상되었으며, 첨가되는 설탕의 농도가 2%까지는 증가하다가 그 이상의 농도에서는 감소하는 경향을 나타내었다.
따라서 설탕 2%를 첨가할 경우 세리포리아 락세라타 균사체량, 건조물의 양, 그리고 건조물에 포함되어 있는 세포 외 다당체 및 베타글루칸 함량이 증가함을 알 수 있었다.
배양기 크기에 따른 배양 성.
상기 실시예에서 수행한 교반형 생물반응기의 크기는 5 L로 산업적인 용도로는 적합하지 않다. 추후 산업적 생산을 위한 세리포리아 락세라타 대량배양을 수행하기 위해서는 배양기 크기에 따른 배양 성 조사가 필요하다.
따라서 상기 실시예에서 조사된 결과를 토대로 배양기 크기를 5, 10, 30, 100, 500, 5,000 L에서 배양을 수행하였다. 초기 배양 조건은 rpm 0, 공기 공급량 0.2 vvm, 내압 0.5kg/cm2이며, 용존산소량 20%를 유지하기 위해 1차적으로 rpm을 상승시킨 후, rpm이 최대치까지 도달하였을 때 2차적으로 공기 공급량과 내압을 상승시켜 조절하였다. 배양 5일 차에 설탕을 2%가 되도록 첨가하여 12일까지 배양하였다.
배양기 크기에 따른 세리포리아 락세라타 균사체 배양.
배양기 크기
(L)		 균사체량
(g/L)		 건조물의 양
(g/L)		 세포 외 다당체 함량
(mg/g Powder)		 베타글루칸 함량
(mg/g Powder)
5 18.3 59.5 9.53 60.2
10 18.5 60.1 9.51 59.3
30 17.9 60.3 9.47 60.7
100 18.2 58.9 9.60 60.7
500 18.5 60.5 9.52 61.5
5,000 18.4 60.7 9.61 61.7
실험장소 : 경북 바이오 산업연구원
그 결과, 표 9에서 보는 바와 같이 배양기 크기에 따라 세리포리아 락세라타의 균사체량, 건조물의 양, 그리고 건조물에 포함되어 있는 세포 외 다당체 및 베타글루칸의 함량은 큰 차이를 보이지 않았다.
따라서 세리포리아 락세라타 배양에 있어 배양기의 크기에 거의 영향이 없음을 알 수 있었다.
기존 배양과 최적화된 배양 비교.
한편 본발명자들이 기출원한 대한민국 등록특허 10-1031605호 에서는 공기 부양식 칼럼형 700 L 배양기를 사용하여 생산을 수행한 바 있고 본 발명에서 교반형 배양기에서의 최적화된 배양조건을 비교하는 실험을 수행하였다.
실험조건은 공기 부양식 칼럼형 700 L은 특허상에 나와 있는 조건 3 vvm, 25℃이며, 5,000 L 교반형 배양기에서는 25℃, 0 rpm, 공기 공급량 0.5 vvm, 내압 0.5kg/cm2의 초기 조건과 배양중에 용존산소량은 20% 이상 유지하고 배양 5일 차에 설탕을 2% 첨가하였다.
그 결과 도 4에서 와 같이 기존 배양 방식인 공기 부양식 700 L에서 보다 세리포리아 락세라타의 균사체량, 건조물의 양, 그리고 건조물에 포함되는 세포 외 다당체 및 베타글루칸의 함량이 100% 이상 증가하였으며, 특히 균사체의 양은 150%까지 증가하였다.
따라서 공기 부양 식과 비교하여 rpm 등의 조절에 의한 용존 산소량 유지와 배양중에 탄소원 첨가에 의한 교반형 생물반응기에서 배양 성이 향상됨을 알 수 있다.
각질 제거용 조성물 제조.
본 발명에서는 세리포리아 락세라타를 이용한 응용제품 개발로서 세리포리아 락세라타 성분의 피부침투율 극대화, 사용의 편리성, 부작용이 적은 하이드로겔 마스크 팩을 제조하였으나, 이에 국한되는 것이 아님은 물론이다.
세리포리아 락세라타 하이드로겔 마스크 팩은 세리포리아 락세라타 균사체 배양물은 글래스 비드 밀(glass bead mill)로 균질화하며, 세리포리아 락세라타 균사체 배양물의 건조물, 농축물, 세리포리아 락세라타 균사체 배양물로부터 유래된 세포외 다당체 및 베타글루칸을 각각 20 g을 100 ㎖에 현탁하여 세리포리아 락세라타 각각의 시료를 만들었다. 그 다음 수용성 하이드로 콜로이드 일정량과 화장수에 첨가하여 유동성을 지닌 마스크 팩을 제조하였다. 아래는 세리포리아 락세라타 하이드로겔 마스키팩의 구성성분 및 그 함량이다.
세리포리아 락세라타 시료 1~20 중량%, 정제수 70~90 중량%, 녹차추출물 약 1~5%, 갈조추출물 1~5%, 알로에베라잎추출물 1~3%, 카라기난, 로커스트빈검, 구아검, 포타솜클로라이드, 포도당, 황금용액, 향료, 진주가루, 콜라겐, 장미추출물, 에칠헥셀글리세린 중 적절한 함량을 포함하는 세리포리아 락세라타 하이드로겔 마스크 팩 조성물을 제조하였다.
사용감 평가.
한편 도 6은 본원의 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법의 일 실시 예에 있어 본원의 마스크 팩을 사용중인 사진으로 상기 실시예 20에서 제조된 각질제거용 마스크 팩에 대하여 20 ~ 40세 여성 30명을 대상으로 도포성, 마사지 용이성, 세척성, 각질 제거력 및 사용 후 만족도를 조사하였다.
각각의 의해 제조된 마스크 팩과 대조구(세리포리아 락세라타를 포함하지 않는 것)에 대해 피부침투성, 보습효과, 이물감, 피부윤기, 청량감에 대하여, ‘우수하다’, '보통이다', ‘나쁘다’ 중 한가지를 선택하도록 하였으며, 조사 결과를 하기와 같은 방법으로 정리하여 표 10에 나타냈다.
항목 배양물 건조물 농축물 세포외다당체 베타-글루칸 대조구
피부침투성 +++ +++ +++ +++ ++ +++
보습효과 +++ ++ +++ +++ ++ +++
이물감 +++ ++ +++ +++ +++ +
피부윤기 +++ +++ +++ ++ ++ ++
청량감 ++ +++ +++ +++ + -
상기 표 10에 나타나는 바와 같이, 본 발명의 마스크 팩 조성물은 베타-글루칸을 제외하고는 대조구에 비해 전반적으로 동일하거나 우월한 사용감을 보였으며, 특히, 각질제거는 대조구에서는 나타나지 않았으나, 전반적으로 효능을 보였다. 특히 건조물, 농축물, 세포외 다당체에서는 높은 효능을 나타내어 피부 각질제거용 화장료로서 우수함을 알 수 있었다.
평가 방법.
+++ : 30명 중 24명 이상이 「우수하다」 라고 회답.
++ : 30명 중 18 ~ 23명 이상이 「우수하다」 라고 회답.
+ : 30명 중 9 ~ 17명 이상이 「우수하다」 라고 회답.
Χ : 30명 중 8명 이하가 「우수하다」 라고 회답.
- : 무응답
구체적인 임상례 .
연령, 성별 및 직업: 43세, 남, 자영업
사용 기간 : 실시예 19에서 제조된 건조분말을 이용한 마스크 팩을 1일 1회 10주일간 두피에 도포함도 5에 나타낸 바와 같이 상기 임상 대상자는 마스크 팩을 도포하기 시작한 날부터 3일이 지나면서 효과가 나타나기 시작하여, 10일 후에는 피부 각질이 제거되었다.
더불어 상기 도 6~7에서는 본원의 마스크 팩을 사용전과 사용 후 각질이 개선되고 모공이 수축된 것을 나타낸 사진이다.
따라서 여러 실시 예에서 본 바와 같이 본 발명의 세리포리아 락세라타가 포함된 마스크 팩은 피부 보습 및 각질제거에 매우 유효하게 제공할 수 있음을 알 수 있었다.
이와 같이 본원은 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법에 있어 세리포리아 락세라타 배양법은 고체배양과 액체 종 배양을 거친 후 대량 본 배양하는 단계를 포함하며 교반형 생물반응기를 사용하는 것을 특징으로 한다.
더불어 세리포리아 락세라타를 배양한 배양물, 배양물의 건조물 및 농축물, 세리포리아 락세라타로부터 유래한 세포 외 다당체 및 베타글루칸의 추출물이 상기 마스크 팩 조성물 및 마스크 팩에 함유되되;
상기 세리포리아 락세라타를 배양한 배양물, 균사체 건조물 및 세포 외 다당체 및 베타글루칸의 추출물은 배양 단계에서 교반을 위한 rpm은 0~500rpm으로 조절하여 제조하게 된다.
더불어 상기 세리포리아 락세라타를 배양한 균사체 배양물, 그의 건조물, 농축물 및 세포 외 다당체 및 베타글루칸의 추출물의 배양 단계에서 공기 공급량을 0.01~10vvm으로 조절하며 내압을 0.5 ~ 1.5kg/cm2으로 조절하되: 상기 본 배양 단계에서 배양 중 탄소원을 첨가하여 배양하게 된다.
또한, 상기 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법은 본 배양 단계
에서 탄소원 첨가시 배양액 전체중량%에 대하여 탄소원을 0.1 ~ 10% 첨가하여 배양하며 상기 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조과정에 허브 추출물 및 천연 유래 추출물이 혼합시키게된다.
아울러 상기 마스크 팩 조성물은 액체 배양한 세리포리아 락세라타 배양물; 세리포리아 락세라타 배양물의 건조물; 상기 세리포리아 락세라타 배양물의 이의 건조물에 포함되어 있는 세포외 다당체 또는 베타글루칸 함량을 증가시키게 한다.
더불어 상기 세리포리아 락세라타의 균사체 배양물, 추출물, 농축물, 건조물 중 적어도 하나 또는 하나 이상을 포함하는 것을 특징으로 하며 마스크 팩 조성물 및 마스크 팩은 조성물의 총 중량에 대하여 0.05~5중량%가 함유되는 것을 특징으로한다.
또한, 상기 세포 외 다당체 또는 베타-글루칸은 조성물 총 중량에 대하여 0.05~5중량 %가 함유되는 것을 특징으로 하며 상기 세리포리아 락세라타를 배양한 균사체 배양액, 농축액 및 이의 건조물, 세포 외 다당체 및 베타글루칸의 추출물은 배양 단계에서 공기 공급 및 교반을 위한 rpm은 0~500rpm으로 조절하며 상기 세리포리아 락세라타가 마스크 팩 조성물 100g당 0.05~5중량%가 함유되며, 일정 시간 교반하여 제조되며 상기 마스크 팩은 피부보습 및 각질을 방지하는 기능을 갖게 된다.
더불어 상기 세리포리아 락세라타 배양물, 이의 건조물 또는 농축물 및 세리포리아 락세라타로부터 유래한 세포 외 다당체 및 베타글루칸 제조를 위한 배양에서, 탄소원은 말토오스글루코오스, 락토오스, 전분, 덱스트린, 수크로스, 프럭토스, 갈락토오스, 만노오스, 당분 중에서 선택된 적어도 어느 하나이며 질소원은 대두분, 면실분, 아미노산, 펩톤, 콘 스티프 리쿼 중에서 선택된 적어도 어느 하나가 투입되는 것을 특징으로 하는 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법으로
시중에서 유통되고 있는 일반적인 마스크 팩 제품에 비하여 우수하고 효과가 우수하고 부작용이 적으며 피부 개선에 대해서 높은 효과를 나타냄을 여러 실시 예에서 알수 있었다.
이상 설명한 본 발명은 본 발명이 속한 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의하여 다양한 변형이나 응용이 가능하며, 본 발명에 따른 기술적 사상의 범위는 아래의 특허청구범위에 의하여 정해져야 할 것이다.
본원은 특히, 세리포리아 락세라타 균사체의 액체배양은 생물 전환기술을 최적화함으로써 단시간에 효과적으로 유용물질을 생산할 수 있어서 경제성이 높다. 따라서 원료 및 화장품용을 포함한 다양한 버섯 균사체 배양에 관한 연구, 특히 차별화된 다양한 기능성 물질의 생산 등이 우수한 종균의 선별 및 이를 이용한 생물전환기술의 최적화기술은 산업적으로 매우 유용하다는 것이다.
본 발명자들은 세리포리아 락세라타를 기초 화장품 류의 하나인 마스크 팩 조성물 및 마스크 팩에 함유시켜, 피부 보습과 각질제거에 유용한 상품으로 이용할 수 있다.

Claims (12)

  1. 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법에 있어 세리포리아 락세라타 및 세리포리아 락세라타 배양물, 이의 건조물과 농축물, 세포 외 다당체 및 베타글루칸의 추출물이 상기 마스크 팩에 함유된 것을 특징으로 하는 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법.
  2. 청구항 제1항에 있어서,
    상기 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법에 있어 세리포리아 락세라타 배양법은 고체배양과 액체 종 배양을 거친 후 대량 본 배양하는 단계를 포함하며 교반형 생물반응기를 사용하는 것을 특징으로 하는 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법.
  3. 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법에 있어 세리포리아 락세라타를 배양한 배양물, 배양물의 건조물 및 농축물, 세리포리아 락세라타로부터 유래한 세포 외 다당체 및 베타글루칸의 추출물이 상기 마스크 팩 조성물 및 마스크 팩에 함유되되;
    상기 세리포리아 락세라타를 배양한 배양물, 균사체 건조물 및 세포 외 다당체 및 베타글루칸의 추출물은 배양 단계에서 교반을 위한 rpm은 0~500 rpm으로 조절하는 것을 특징으로 하는 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법.
  4. 청구항 제1항 또는 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 세리포리아 락세라타를 배양한 균사체 배양물, 그의 건조물, 농축물 및 세포 외 다당체 및 베타글루칸의 추출물의 배양 단계에서 공기 공급량을 0.01~10vvm으로 조절하며 내압을 0.5 ~ 1.5kg/cm2으로 조절하되: 상기 본 배양 단계에서 배양 중 탄소원을 첨가하여 배양하는 하는 것을 특징으로 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법.
  5. 청구항 제4항에 있어서,
    상기 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법은 본 배양 단계에서 탄소원 첨가시 배양액 전체 중량 %에 대하여 탄소원을 0.1 ~ 10% 첨가하여 배양하는 것을 특징으로 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법.
  6. 청구항 제5항에 있어서,
    상기 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조과정에 허브 추출물 및 천연 유래 추출물이 혼합된 것을 특징으로 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 마스크 팩 조성물은 액체 배양한 세리포리아 락세라타 배양물; 세리포리아 락세라타 배양물의 건조물; 상기 세리포리아 락세라타 배양물의 이의 건조물에 포함되어 있는 세포 외 다당체 또는 베타글루칸 함량을 증가시키는 것을 특징으로 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법.
  8. 청구항 제1항 내지 7항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 세리포리아 락세라타의 균사체 배양물, 농축물 중 적어도 하나 또는 하나 이상을 포함하는 것을 특징으로 마스크 팩 조성물 및 마스크 팩은 조성물의 총 중량에 대하여 1~50중량 %가 함유되는 것을 특징으로 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법.
  9. 청구항 제1항 내지 7항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 세리포리아 락세라타의 균사체 배양물의 추출물, 건조물 중 적어도 하나 또는 하나 이상을 포함하는 것을 특징으로 마스크 팩 조성물 및 마스크 팩은 조성물의 총 중량에 대하여 0.1~20중량 %가 함유되는 것을 특징으로 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법.
  10. 청구항 제1항 내지 7항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 세포 외 다당체 또는 베타-글루칸은 조성물 총 중량에 대하여 0.05~5중량 % 가 함유되는 것을 특징으로 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법.
  11. 각질제거 효과를 나타내는 마스크 팩에 있어 세리포리아 락세라타를 배양한 균사체 배양액 및 이의 건조물, 세포 외 다당체 및 베타글루칸의 추출물이 마스크 팩에 함유되되; 상기 세리포리아 락세라타를 배양한 균사체 배양액, 농축액 및 이의 건조물, 세포 외 다당체 및 베타글루칸의 추출물은 배양 단계에서 공기 공급 및 교반을 위한 rpm은 0~500 rpm으로 조절하며, 일정 시간 교반하여 제조되며 상기 마스크 팩은 피부 보습 및 피부노화를 방지하는 것을 특징으로 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법.
  12. 청구항 제1항 또는 제11항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 세리포리아 락세라타 배양물, 이의 건조물 또는 농축물 및 세리포리아 락세라타로부터 유래한 세포 외 다당체 및 베타글루칸 제조를 위한 배양에 있어서, 탄소원은 말토오스글루코오스, 락토오스, 전분, 덱스트린, 수크로스, 프럭토스, 갈락토오스, 만노오스, 당분 중에서 선택된 적어도 어느 하나이며 질소원은 대두분, 면실분, 아미노산, 펩톤, 콘 스티프 리쿼 중에서 선택된 적어도 어느 하나가 투입되는 것을 특징으로 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법.
KR1020160041831A 2016-04-05 2016-04-05 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법 KR20170114603A (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020160041831A KR20170114603A (ko) 2016-04-05 2016-04-05 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020160041831A KR20170114603A (ko) 2016-04-05 2016-04-05 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20170114603A true KR20170114603A (ko) 2017-10-16

Family

ID=60295641

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020160041831A KR20170114603A (ko) 2016-04-05 2016-04-05 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR20170114603A (ko)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109528593A (zh) * 2018-12-31 2019-03-29 广州御艾化妆品有限公司 一种保湿补水修复面膜精华液及其制备方法

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109528593A (zh) * 2018-12-31 2019-03-29 广州御艾化妆品有限公司 一种保湿补水修复面膜精华液及其制备方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101705482B1 (ko) 세리포리아 락세라타가 포함된 아토피 개선용 로션 또는 크림
CN107106480A (zh) 含有盐单胞菌发酵提取物的化妆品组合物及其用途
KR101467903B1 (ko) 흑미의 담자균류균사 발효 및 생물전환공정을 통해 생산된 면역증강제
CN108823261A (zh) 一种超低分子量铁皮石斛多糖及其制备与应用
CN109996885A (zh) 乳酸菌的胞外多糖及其用途
WO2017186146A1 (zh) 药食用真菌的果蔬培养及益生菌发酵
CN113604395B (zh) 一株可发酵石斛且其发酵液可改善皮肤质量的植物乳杆菌
TWI757293B (zh) 含有Ｌ-羥脯胺酸的解脂耶氏酵母（ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）之菌體、菌體培養物或這些萃取物與其用途及Ｌ-羥脯胺酸的製造方法
KR20150039263A (ko) 천연 식물 발효 추출물 및 해양 유래 물질을 함유하는 화장료 조성물
CN109415682A (zh) 新型鱼孢菌科微生物及其用途
WO2021158179A1 (en) SCHIZOPHYLLUM COMMUNE STRAIN PLNP13 AND β-GLUCAN OBTAINED FROM CO-CULTURING THE STRAIN WITH GANODERMA LUCIDUM
CN109939059B (zh) 一种稻胚芽五菌发酵缓释化妆品及其制备方法和应用
CN107137628A (zh) 来源于共生发酵生成物的透明质酸酶抑制剂及其应用
KR101181269B1 (ko) 김치로부터 분리된 바실러스 속 균주가 생산하는 항산화 및 항노화 활성을 지닌 세포외다당류 및 그 생산방법
CN111349678A (zh) 一种油菜花粉多糖提取方法以及提取产物
KR101760766B1 (ko) 신규한 락토바실러스 쿠르바투스 gfc-aj6 균주, 상기 균주를 이용한 폴리아민 함유 유산균 발효물 및 이의 제조방법
CN109288042A (zh) 一种利用益生菌发酵海带制备恶性肿瘤医用食品原料的方法与应用
Antontceva et al. Influence of Pleurotus ostreatus preparations on fermentation products of lactic acid cultures.
KR20130107940A (ko) 발효 홍삼 제조방법
CN114456943A (zh) 一株桦褐孔菌及其提取物及其应用
KR20170114603A (ko) 세리포리아 락세라타 마스크 팩 시트 및 이의 제조방법
JP5081485B2 (ja) 抗癌剤及び抗癌剤の製造方法
Thuy et al. Deproteinization in purification of exopolysaccharide from Ophiocordyceps sinensis olive oil-stimulated culture.
KR20170114574A (ko) 세리포리아 락세라타가 함유된 아토피 피부염 개선 비누
KR101784101B1 (ko) 세리포리아 락세라타가 함유된 여성 청결제 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
E601 Decision to refuse application