KR20170099237A - 비술나무 추출물을 이용한 항산화용 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 비술나무 추출물을 이용한 항산화용 조성물을 개시한다.
구체적으로 본 발명은 DPPH 법, Potassium ferricyanide 법 및 SOD 유사활성 측정법에서 농도 의존적으로 항산화 활성을 보이는 비술나무 추출물을 이용한 항산화용 조성물을 개시한다.

Description

비술나무 추출물을 이용한 항산화용 조성물{Antioxidant Composition Using an Extract of Ulmus pumila}
본 발명은 비술나무(Ulmus pumila) 추출물을 이용한 항산화용 조성물에 관한 것이다.
최근 전 세계적으로 인구 고령화 현상이 급속하게 진행되고 소득증대로 인해 건강한 삶에 대해 관심이 높아지면서 항산화 효능을 바탕으로 건강기능식품 산업이 부상하고 있으며, 이러한 현상은 학계와 산업계를 비롯하여 하나의 사회적 현상으로 확대되고 있다.
특히 우리나라는 급격한 경제성장과 함께 평균수명이 현저하게 증가하고 있어 그에 따라 건강에 관한 관심이 크게 높아지고 있으며 그 중에서도 항산화 기능성 천연 식품소재가 새롭게 주목을 받고 있다.
현재 기능성 식품들이 영양학적 측면뿐만 아니라 각종 질병의 치료 및 예방 효과가 있다는 보고와 함께 건강식품은 Nutraceutical, Function food, Designer food, Dietary supplement, Botanical supplement 등 다양한 용어로 불리며 기능성 식품시장을 넓혀 가고 있다.
또한 노인인구가 증가하면서 노화를 조절하는 항산화 활성물질을 이용한 건강식품에 많은 관심을 가지고 있으며 연구도 본격적으로 진행하고 있다.
산소는 지구상에서 가장 많은 원소로서(53.8%) 대기중의 21%를 차지하고 있으며, 사람을 포함한 호기성 생물은 생명유지에 필요한 에너지를 만들기 위해 끊임없이 산소를 필요로 하지만, 호흡과정에서 흡입한 산소 중 일부분은 각종 물리적, 화학적, 환경적 요인 등에 의하여 과산화 라디칼(superoxide radical, O2ㆍ), 수산화 라디칼(hydroxyl radical, OHㆍ), 과산화수소(hydrogen peroxide, H2O2), 단일체 산소(singlet oxygen, 1O2) 등 유독성이 큰 활성산소로 전환된다.
이들 활성 산소는 안정화되려는 경향이 강하기 때문에 반응성이 매우 크며, 따라서 생체 분자들과 빠르게 반응하여 생체막의 지질 산화, 단백질 변성, DNA 손상 등을 초래하여, 암, 동맥경화증, 당뇨병, 자가면역질환, 노화, 뇌졸중, 파킨슨병 등 각종 질환의 발병 위험성을 증가시키고 피부 주름 형성, 아토피성 피부염, 피부암 등 다양한 형태로 피부 노화를 촉진하는 것으로 알려져 있다(Chem . Res. 14: 393 (1981); Arch. Biophys . 247: 1-11 (1986); Science 221: 1256-1264 (1983)).
생명체는 지속적으로 발생하는 이러한 산화적 스트레스에 대응하기 위한 항산화 체계를 갖추고 있는데, 이러한 항산화 체계는 크게 슈퍼옥사이드 디스뮤타아제, 카탈라아제, 글루타티온 퍼옥시다아제, 글루타티온 환원효소, 글루타티온 S-전이효소 등에 의한 효소적 체계와 식이에 의하여 섭취되는 비타민 A, 비타민 C, 비타민 E, 항산화 무기질 등의 항산화제에 의한 비효소적 체계로 구분된다(Annu . Rev. Nutr ., 16, pp33-50 (1996)). 효소적 체계와 비효소적 체계는 상호 보완적으로 작용하여 생체에서 생성되는 산화성 물질을 무독화시킨다.
항산화제는 활성 산소와 반응함으로써 활성 산소에 의한 생체 손상을 억제하거나 최소화하는 것으로, 부틸화 하이드록시아니솔(BHA, Butylated hydroxyanisole), 부틸화 하이드록시톨루엔(BHT, Butylated hydroxytoluene), 프로필 갈레이트(PG, Propyl galate), 터셔리부틸 하이드로퀴논(TBHQ, Teritiarybutyl hydroquinone) 등의 합성 항산화제와 엽록소, 녹차 추출물, 프로롤리스 추출물, 클로렐라, 비타민 E, 비타민 C, 스쿠알레, 플라보노이드, 대나무 잎 추출물 등의 천연 항산화제로 구분될 수 있는데, 합성 항산화제의 경우 발암 및 심혈관 계열에 부작용을 유발하는 것으로 알려지면서 보다 상대적으로 안전한 식물 유래 항산화제에 관한 연구가 활발하게 수행되고 있다(Korean J. Food Sci . Technol . 34:889-892 (2002)).
식물은 항산화성 물질인 폴리페놀, 플라보노이드 등을 함유하고 있어 대부분의 식물 추출물은 항산화 활성을 나타내지만, 식물 유래의 항산화제는 항산화 효과가 일반적으로 합성 항산화제에 비하여 매우 낮기 때문에 실효성이 있는 항산화 효과를 나타내기 위해서는 다량으로 사용하여야 하고 결국 원료 가격의 상승으로 경제성과 실용성이 떨어지는 문제점이 있다. 이러한 이유로 식물 유래 항산화제의 발굴은 합성 항산화제에 버금가는 활성을 나타내는 물질을 찾는데 집중되어 있다.
최근 항산화 활성을 보이는 물질을 탐색하기 위한 항산화 활성 측정 기법으로서 TRAP 법(Anal Biochem ., 28, pp300-306. 1989), DPPH 법(Nature 181:1198-1200 (1958)), ABTS 법(Methods Enzymol . 234: 279-293 (1994); Clin . Sci . 84: 407-412 (1993); Free Rad . Biol . Med . 20: 933-956 (1996)), ORAC 법(Free Rad . Biol. Med . 18:29-36 (1995)), TOSC 법(Free Rad . Biol . Med . 24(3):480-493 (1998); Toxicol . Appl . Pharmacol . 156(2):96-105 (1999)), Potassium ferricyanide 법(Jpn, J. of Nutr. 44:307-315, 1986), SOD 유사활성 측정법(Eur J Biochem 47:469-474, 1974) 등 다양한 방법이 개발되어 있다.
비술나무는 강가나 산기슭, 들에 자라는 느릅나무과의 식물로 민간에서는 그 수피(줄기 또는 뿌리 껍질)를 위장염, 비염, 방광염 등에 사용하여 있고, 어린순과 잎은 식용으로 사용하여 왔다. 이처럼 비술나무는 안전성이 확보되어 있기 때문에 그것의 유용한 생리활성만 확인된다면 기능성 화장품이나 건강기능식품 등의 좋은 소재가 될 수 있다.
본 발명은 DPPH 법, Potassium ferricyanide 법 및 SOD 유사활성 측정법에 의하여 항산화 활성이 확인된 비술나무 추출물을 개시한다.
본 발명의 목적은 비술나무 추출물을 이용한 항산화용 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적이나 구체적인 목적은 이하에서 제시될 것이다.
본 발명자들은 아래의 실시예 및 실험예에서 확인되는 바와 같이, DPPH 법, Potassium ferricyanide 법 및 SOD 유사활성 측정법에 의해 비술나무 메탄올 추출물의 항산화 활성을 측정할 때, 비술나무 추출물이 뚜렷하게 농도 의존적으로 항산화 활성을 보임을 확인할 수 있었다.
본 발명은 이러한 실험 결과에 의하여 제공되는 것으로 본 발명의 항산화용 조성물은 비술나무 추출물을 유효성분으로 포함함을 특징으로 한다.
본 명세서에서, "비술나무 추출물"이란 추출 대상인 비술나무 줄기, 잎, 열매, 꽃, 뿌리, 줄기 껍질, 뿌리 껍질 등을 물, 메탄올, 에탄올, 부탄올 등의 탄소수 1 내지 4의 저급 알콜, 메틸렌클로라이드, 에틸렌, 아세톤, 헥산, 에테르, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, N, N-디메틸포름아미드(DMF), 디메틸설폭사이드(DMSO), 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 또는 이들의 혼합 용매를 사용하여 침출하여 얻어진 추출물, 이산화탄소, 펜탄 등 초임계 추출 용매를 사용하여 얻어진 추출물 또는 그 추출물을 분획하여 얻어진 분획물을 의미하며, 추출 방법은 활성물질의 극성, 추출 정도, 보존 정도를 고려하여 냉침, 환류, 가온, 초음파 방사, 초임계 추출 등 임의의 방식을 적용할 수 있다. 분획된 추출물의 경우 상기 조추출물을 특정 용매에 현탁시킨 후 극성이 다른 용매와 혼합·정치시켜 얻은 분획물, 상기 조추출물을 실리카겔 등이 충진된 칼럼에 흡착시킨 후 소수성 용매, 친수성 용매 또는 이들의 혼합 용매를 이동상으로 하여 얻은 분획물을 포함하는 의미이다. 또한 상기 추출물의 의미에는 동결건조, 진공건조, 열풍건조, 분무건조 등의 방식으로 추출 용매가 제거된 농축된 액상의 추출물 또는 고형상의 추출물이 포함된다. 바람직하게는 추출용매로서 물, 에탄올 또는 이들의 혼합 용매를 사용하여 얻어진 추출물, 더 바람직하게는 추출용매로서 물과 에탄올의 혼합 용매를 사용하여 얻어진 추출물을 의미한다.
또한 본 명세서에서, "유효성분"이란 단독으로 목적하는 활성을 나타내거나 또는 그 자체는 활성이 없는 담체와 함께 활성을 나타낼 수 있는 성분을 의미한다.
본 발명의 항산화용 조성물은 그 유효성분을 항산화 활성을 나타낼 수 있는 한 용도, 제형, 배합 목적 등에 따라 임의의 양(유효량)으로 포함할 수 있는데, 통상적인 유효량은 조성물 전체 중량을 기준으로 할 때 0.001 중량 % 내지 99.999 중량 % 범위 내에서 결정될 것이다. 여기서 "유효량"이란 항산화 효과를 유도할 수 있는 유효성분의 양을 말한다. 이러한 유효량은 당업자의 통상의 능력 범위 내에서 실험적으로 결정될 수 있다.
본 발명의 항산화 조성물은 유효성분 이외에, 항산화 효과의 상승·보강을 위하여 이미 안전성이 검증되고 항산화 활성을 갖는 것으로 공지된 임의의 화합물이나 천연 추출물을 추가로 포함할 수 있다. 구체적으로 그러한 화합물 또는 추출물은 건강기능식품에관한법률에 따른 건강기능식품공전(식약처 고시, 건강기능식품의 기준 및 규격)상의 화합물 또는 추출물이나 건강기능식품에관한법률에 따라 개별인정을 받은 화합물 또는 추출물로서, 녹차 추출물, 대나무 잎 추출물, 메론 추출물, 복분자 추출물, 비즈왁스알코올, 유비퀴놀, 코엔자임Q10, 토마토 추출물, 포도 종자 추출물, 프랑스 해안송 껍질 추출물, 홍삼 추출물(홍삼농축액) 등을 들 수 있다. 이러한 화합물 또는 천연 추출물은 본 발명의 조성물에 그 유효성분과 함께 하나 이상 포함될 수 있다.
본 발명의 조성물은 구체적인 양태에 있어서, 식품 조성물로서 파악될 수 있다.
본 발명의 식품 조성물은 어떠한 형태로도 제조될 수 있으며, 예컨대 차, 쥬스, 탄산음료, 이온음료 등의 음료류, 우유, 요구루트 등의 가공 유류, 껌류, 떡, 한과, 빵, 과자, 면 등의 식품류, 정제, 캡슐, 환, 과립, 액상, 분말, 편상, 페이스트상, 시럽, 겔, 젤리, 바 등의 건강기능식품 제제류 등으로 제조될 수 있다. 또 본 발명의 식품 조성물은 법률상·기능상의 구분에 있어서 제조·유통 시점의 시행 법규에 부합하는 한 임의의 제품 구분을 띨 수 있다. 예컨대 건강기능식품에관한법률에 따른 건강기능식품이거나, 식품위생법의 식품공전(식약처 고시, 식품의 기준 및 규격)상 각 식품유형에 따른 과자류, 두류, 두유류, 발효음료류, 특수용도식품(특히 체중조절용 조제식품) 등일 수 있다.
본 발명의 식품 조성물에는 그 유효성분 이외에 식품첨가물이 포함될 수 있다. 식품첨가물은 일반적으로 식품을 제조, 가공 또는 보존함에 있어 식품에 첨가되어 혼합되거나 침윤되는 물질로서 이해되는데, 식품과 함께 매일 그리고 장기간 복용되므로 그 안전성이 보장되어야 한다. 식품위생법에 따른 식품첨가물공전(식약처 고시, 식품첨가물 기준 및 규격)에는 안전성이 보장된 식품첨가물이 화학적 합성품, 천연 첨가물, 혼합 제제류로 구분하여 한정적으로 규정되어 있다.
이들 식품첨가물은 기능적 측면에 있어서는 감미제, 풍미제, 보존제, 유화제, 산미료, 점증제 등으로 구분될 수 있다.
감미제는 식품에 적당한 단맛을 부여하기 위하여 사용되는 것으로, 천연의 것이거나 합성된 것을 사용할 수 있다. 바람직하게는 천연 감미제를 사용하는 경우인데, 천연 감미제로서는 옥수수 시럽 고형물, 꿀, 수크로오스, 프룩토오스, 락토오스, 말토오스 등의 당 감미제를 들 수 있다.
풍미제는 맛이나 향을 좋게 하기 위하여 사용될 수 있는데, 천연의 것과 합성된 것 모두 사용될 수 있다. 바람직하게는 천연의 것을 사용하는 경우이다. 천연의 것을 사용할 경우에 풍미 이외에 영양 강화의 목적도 병행할 수 있다. 천연 풍미제로서는 사과, 레몬, 감귤, 포도, 딸기, 복숭아 등에서 얻어진 것이거나 녹차잎, 둥굴레, 대잎, 계피, 국화 잎, 자스민 등에서 얻어진 것일 수 있다. 또 인삼(홍삼), 죽순, 알로에 베라, 은행 등에서 얻어진 것을 사용할 수 있다. 천연 풍미제는 액상의 농축액이나 고형상의 추출물일 수 있다. 경우에 따라서 합성 풍미제가 사용될 수 있는데, 합성 풍미제는 에스테르, 알콜, 알데하이드, 테르펜 등이 이용될 수 있다.
보존제로서는 소듐 소르브산칼슘, 소르브산나트륨, 소르브산칼륨, 벤조산칼슘, 벤조산나트륨, 벤조산칼륨, EDTA(에틸렌디아민테트라아세트산) 등이 사용될 수 있고, 또 유화제로서는 아카시아검, 카르복시메틸셀룰로스, 잔탄검, 펙틴 등을 들 수 있으며, 산미료로서는 연산, 말산, 푸마르산, 아디프산, 인산, 글루콘산, 타르타르산, 아스코르브산, 아세트산, 인산 등이 사용될 수 있다. 산미료는 맛을 증진시키는 목적 이외에 미생물의 증식을 억제할 목적으로 식품 조성물이 적정 산도로 되도록 첨가될 수 있다.
점증제로서는 현탁화 구현제, 침강제, 겔형성제, 팽화제 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 식품 조성물은 전술한 바의 식품첨가물 이외에, 기능성과 영양성을 보충, 보강할 목적으로 당업계에 공지되고 식품첨가물로서 안정성이 보장된 생리활성 물질이나 미네랄류를 포함할 수 있다.
그러한 생리활성 물질로서는 녹차 등에 포함된 카테킨류, 비타민 B1, 비타민 C, 비타민 E, 비타민 B12 등의 비타민류, 토코페롤, 디벤조일티아민 등을 들 수 있으며, 미네랄류로서는 구연산 칼슘 등의 칼슘 제제, 스테아린산마그네슘 등의 마그네슘 제제, 구연산철 등의 철 제제, 염화 크롬, 요오드칼륨, 셀레늄, 게르마늄, 바나듐, 아연 등을 들 수 있다.
본 발명의 식품 조성물에는 전술한 바의 식품첨가물이 제품 유형에 따라 그 첨가 목적을 달성할 수 있는 적량으로 포함될 수 있다.
본 발명의 식품 조성물에 포함될 수 있는 기타의 식품첨가물과 관련하여서는 식품공전이나 식품첨가물 공전을 참조할 수 있다.
본 발명의 조성물은 다른 구체적인 양태에 있어서는 약제학적 조성물로 파악될 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물은 유효성분 이외에 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하여 당업계에 공지된 통상의 방법으로 투여 경로에 따라 경구용 제형 또는 비경구용 제형으로 제조될 수 있다. 여기서 "약제학적으로 허용되는" 의미는 유효성분의 활성을 억제하지 않으면서 적용(처방) 대상이 적응 가능한 이상의 독성을 지니지 않는다는 의미이다.
본 발명의 약제학적 조성물이 경구용 제형으로 제조될 경우, 적합한 담체와 함께 당업계에 공지된 방법에 따라 분말, 과립, 정제, 환제, 당의정제, 캡슐제, 액제, 겔제, 시럽제, 현탁액, 웨이퍼 등의 제형으로 제조될 수 있다. 이때 약제학적으로 허용되는 적합한 담체의 예로서는 락토스, 글루코스, 슈크로스, 덱스트로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨 등의 당류, 옥수수 전분, 감자 전분, 밀 전분 등의 전분류, 셀룰로오스, 메틸셀룰로오스, 에틸셀룰로오스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오스, 하이드록시프로필메틸셀룰로오스 등의 셀룰로오스류, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 마그네슘 스테아레이트, 광물유, 맥아, 젤라틴, 탈크, 폴리올, 식물성유 등을 들 수 있다. 제제화활 경우 필요에 따라 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 및/또는 부형제를 포함하여 제제화할 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물이 비경구용 제형으로 제조될 경우, 적합한 담체와 함께 당업계에 공지된 방법에 따라 주사제, 경피 투여제, 비강 흡입제 및 좌제의 형태로 제제화될 수 있다. 주사제로 제제화활 경우 적합한 담체로서는 멸균수, 에탄올, 글리세롤이나 프로필렌 글리콜 등의 폴리올 또는 이들의 혼합물을 들수 있으며, 바람직하게는 링거 용액, 트리에탄올 아민이 함유된 PBS(phosphate buffered saline)나 주사용 멸균수, 5% 덱스트로스 같은 등장 용액 등을 사용할 수 있다. 경피 투여제로 제제화할 경우 연고제, 크림제, 로션제, 겔제, 외용액제, 파스타제, 리니멘트제, 에어롤제 등의 형태로 제제화될 수 있다. 비강 흡입제의 경우 디클로로플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 디클로로테트라플루오로에탄, 이산화탄소 등의 적합한 추진제를 사용하여 에어로졸 스프레이 형태로 제제화될 수 있으며, 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 트윈(tween) 61, 폴리에틸렌글리콜류, 카카오지, 라우린지, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 지방산 에스테르류, 폴리옥시에틸렌 스테아레이트류, 소르비탄 지방산 에스테르류 등이 사용될 수 있다.
약제학적 조성물의 제제화와 관련하여서는 당업계에 공지되어 있으며, 보다 구체적인 사항은 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences(19th ed., 1995)] 등을 참조할 수 있다. 상기 문헌은 본 명세서의 일부로서 간주 된다.
본 발명의 약제학적 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태, 체중, 성별, 연령, 환자의 중증도, 투여 경로에 따라 1일 0.001mg/kg ~ 10g/kg 범위, 바람직하게는 0.001mg/kg ~ 1g/kg 범위일 수 있다. 투여는 1일 1회 또는 수회로 나누어 이루어질 수 있다. 이러한 투여량은 어떠한 측면으로든 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 해석되지 아니 한다.
본 발명의 조성물은 구체적인 양태에 있어서, 화장료 조성물로 파악할 수 있다.
본 발명의 조성물이 화장료 조성물로 파악될 경우에도 그 화장료 조성물은 그 용도상, 법률상 임의의 제품 구분을 띨 수 있으며, 구체적으로 피부 미백 등의 용도를 가진 기능성 화장품, 비기능성 일반 화장품 등일 수 있다. 제품 형태에 있어서도 임의의 제품 형태를 띨 수 있는데, 구체적으로 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 젤, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 스프레이 등으로 제형화될 수 있다. 구체적인 제품 형태에 있어서는 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형 등일 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 그 유효성분 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들, 예컨대, 안정화제, 용해화제, 계면활성제, 비타민, 색소 및 항료와 같은 통상적인 보조제, 및 담체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜, 소르비탄의 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 항산화 활성을 나타내는 그 유효성분을 포함하는 것을 제외하고는 당업계에 통상적으로 행하여지는 화장료 조성물의 제조방법에 따라 제조할 수 있다.
본 발명의 항산화용 조성물은 또 다른 구체적인 양태에 있어서 식품, 화장품, 의약품 또는 사료의 첨가제 조성물로 파악할 수 있다.
식품, 화장품, 의약품, 사료 등에는 공기와의 접촉시 쉽게 산패할 수 있는 불포화 지방산이 포함되는 경우가 많다. 이러한 불포화 지방산의 산패는 식품, 화장품, 의약품, 사료 등의 향, 맛 등을 저하시켜 소비자의 기호도, 선호도 등에 직접적인 영향을 미친다. 종래부터 이러한 제품 등에 항산화제를 첨가하여 산패를 억제하려는 시도가 있어 왔다.
산패 방지의 목적으로 대표적으로 사용되어 온 항산화제는 합성 항산화제로서 부틸화 하이드록시아니솔(BHA, Butylated hydroxyanisole), 부틸화 하이드록시톨루엔(BHT, Butylated hydroxytoluene) 등을 들 수 있는데, 전술한 바와 같이 이들 합성 항산화제는 과도하게 사용될 경우 발암 등의 부작용을 초래할 수 있다. 이러한 이유로 천연 항산화제에 대한 관심이 지속되어 왔다.
본 발명의 항산화용 조성물은 천연물 유래의 비술나무 추출물을 유효성분으로 이용함으로써 합성 항산화제가 갖는 부작용의 우려 없이 불포화 지방산 등의 산패 방지 목적으로 식품, 화장품, 의약품에 첨가되어 사용될 수 있다.
본 발명의 항산화용 조성물이 첨가제 조성물로 파악될 경우 항산화 활성을 보이는 유효성분인 비술나무 추출물의 유효량은 식품, 화장품, 의약품, 사료 등에 포함되는 불포화 지방산의 종류, 불포화 지방산의 함량, 이중결합의 정도 등을 고려하여 당업자의 통상의 능력 범위 내에서 결정될 수 있다.
전술한 바와 같이, 본 발명에 따르면 비술나무 추출물을 이용한 항산화용 조성물을 제공할 수 있다.
본 발명의 항산화용 조성물은 식품, 화장품, 약품 등으로 제품화될 수 있으며, 비술나무의 잎 등이 식용으로 사용되어 왔고 그 수피가 민간에서 약재로 사용하여 왔다는 점에서 합성 항산화제와 비교할 때 상대적으로 부작용이 적을 수 있다.
도 1은 DPPH 법에 의한 비술나무 추출물의 DPPH 소거 활성을 보여주는 결과이다.
도 2는 Potassium ferricyanide 법에 의한 비술나무 추출물의 환원력을 보여주는 결과이다.
도 3은 SOD 유사활성 측정법에 의한 비술나무 추출물의 항산화 활성을 보여주는 결과이다.
이하 본 발명을 실시예 및 실험예를 참조하여 설명한다. 그러나 본 발명의 범위가 이러한 실시예 및 실험예에 한정되는 것은 아니다.
< 실시예 > 비술나무 추출물의 항산화 활성 확인 실험
1. 시료의 준비
비술나무(부위: 줄기) 99.9% 메탄올 추출물을 한국생명공학연구원 부설 한국식물추출물은행(http://extract.kribb.re.kr/)에서 분양받아 시료로 사용하였다.
2. 항산화 활성의 평가
<2-1> DPPH radical 소거 활성
준비된 시료를 12.5, 25, 50, 100㎍/ml의 농도로 물에 녹여 제조한 시료 0.1 ml에 0.2 mM의 MeOH에 녹인 DPPH 0.1 ml을 가하고 vortexing 후 30℃의 Dark chamber에서 30분간 반응시켜 515nm에서 흡광도 (Multiplater spectrophotometer ELx800TM, BioTek, USA)를 측정하였다. 아래의 식에 따라 대조군인 무처리군과 비교하여 각 처리 농도에 따른 시료의 DPPH 라디칼 소거 활성을 백분율로 구하여 [도 1]에 나타내었다. 양성대조군으로 아스코르브산(ascorbic acid)과 탄산(tannic acid) 그리고 쿼세틴(quercetin)을 사용하였다. 결과는 각 농도별 3번 반복 실험에 따른 결과이다.
DPPH 라디칼 소거율(%) = (Control-sample) / Control × 100
[도 1]을 참조하여 보면, 비술나무 추출물이 처리 농도에 비례하여 DPPH 라디칼 소거 활성이 증가함을 알 수 있으며, 50%의 소거 활성에 해당하는 농도 IC50은 55.4㎍/ml로 나타났다.
<2-2> 환원력 측정 - Potassium ferricyanide
62.5, 125, 250㎍/ml의 농도로 조제한 시료 0.2ml에 0.2mM의 sodium phosphate buffer(pH 6.6) 0.5ml과 1% potassium ferricyanide[K3Fe(CN)6] 0.5ml을 넣은 다음 50℃에서 30분간 반응시킨다. 반응 후, 0.5ml의 10% TCA(Trichloroacetic acid) 용액을 넣은 뒤 실온에서 10분간 놓아두고 상층액 100㎕을 취해 3차 증류수 100㎕와 0.1%의 FeCl3 20㎕를 넣어 발색반응을 유도시킨 다음, 700nm에서 흡광도(Multiplater spectrophotometer ELx800TM, BioTek, USA)를 측정하였다. 결과를 [도 2]에 나타내었다. 양성대조군으로 아스코르브산(ascorbic acid)과 탄산(tannic acid)을 사용하였다. 결과는 각 농도별 3번 반복 실험에 따른 결과이다.
[도 2]을 참조하여 보면 농도 의존적으로 환원력이 증가함을 알 수 있다.
<2-3> SOD( Superoxide dismutase ) 유사활성 측정
tris-HCl buffer(50mM tris[hydroxymethyl] amino-methane + 10 mM EDTA, pH 8.5)를 이용하여 pH 8.5로 반응액을 제조하였다. 시료를 500㎍/ml의 농도로 만든 뒤 10㎕를 취하여 tris-HCl buffer(pH 8.5) 150㎕와 7.2 mM pyrogallol을 10㎕를 가하고 25℃에서 10분간 방치 한 후, 1N HCl 50㎕로 반응을 정지시키고 420nm에서 흡광도(Multiplater spectrophotometer ELx800TM, BioTek, USA)를 측정하여, 아래의 식에 따라 대조군인 무처리군과 비교하여 시료의 SOD 유사활성을 구하여 [도 3]에 나타내었다. 양성대조군으로 아스코르브산(ascorbic acid)과 탄산(tannic acid)을 사용하였다. 결과는 각 농도별 3번 반복 실험에 따른 결과이다.
SOD 유사활성(%) = (Control-sample) / Control × 100
[도 3]을 참조하여 보면, 500㎍/ml의 처리 농도에서 23.3%를 나타냈으며, 양성대조군으로 사용된 아스코르브산(ascorbic acid)과 탄산(tannic acid)은 각각 50.8%와 29.3%를 나타내었다.
<2-4> 총 페놀성 화합물 함량 측정 및 총 플라보노이드 함량 측정
(1) 총 페놀성 화합물 함량 측정
총 페놀성 화합물 함량은 페놀성 물질이 phosphomolbdic acid와 반응하여 청색으로 발색되는 것을 이용한 Folin-Denis 방법에 따라 분석하였다. 1mg/ml의 농도로 조제한 시료 0.25ml에 Folin-Denis reagent 0.5ml을 넣고 탄산나트륨(Na2CO3, 0.35g/ml) 용액을 0.5ml 넣어준 다음 실온에서 30분간 보관한 뒤 760nm에서 흡광도(Multiplater spectrophotometer ELx800TM, BioTek, USA)를 측정하였다. 측정된 흡광도는 Vitamin A의 한 종류인 탄닌산(Tannic acid)를 이용하여 작성된 표준곡선을 이용하여 검량선을 작성한 뒤 시료의 총 페놀성 화합물 함량을 계산하였다.
(2) 총 플라보노이드 함량 측정
시료를 1mg/ml의 농도가 되도록 MeOH 용매에 녹인 후, 10% aluminum chloride(AlCl3)와 potassium acetate(CH3COOH)를 1M의 농도가 되도록 혼합하여 40분간 상온에서 반응시킨 뒤 415nm에서 흡광도(Multiplater spectrophotometer ELx800TM, BioTek, USA)를 측정하였다. 각 추출물의 총 플라보노이드 화합물의 함량은 quercetin을 이용하여 작성한 표준곡선으로부터 구하였다.
결과를 아래의 [표 1]에 나타내었다.
Figure pat00001

Claims (6)

  1. 비술나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화용 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 비술나무 추출물은 비술나무 줄기를 추출 대상으로 하고 물, 알콜 또는 이들의 혼합 용매를 추출용매로 사용하여 얻어진 것을 특징으로 하는 항산화용 조성물.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    상기 조성물은 식품 조성물인 것을 특징으로 하는 항산화용 조성물.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    상기 조성물은 화장료 조성물인 것을 특징으로 하는 항산화용 조성물.
  5. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    상기 조성물은 약제학적 조성물인 것을 특징으로 하는 항산화용 조성물.
  6. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    상기 조성물은 식품, 화장품, 약품 또는 사료의 첨가제 조성물인 것을 특징으로 하는 항산화용 조성물.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN111544351A (zh) * 2020-05-15 2020-08-18 姜庚明 一种含有刨花水萃取物的隐纹面膜组合物及其制备方法

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