KR101613681B1 - 라저스트로미아 오바리폴리아 추출물을 포함하는 항산화 조성물 - Google Patents
라저스트로미아 오바리폴리아 추출물을 포함하는 항산화 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 라저스트로미아 오바리폴리아 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 항산화 조성물, 항산화용 건강기능식품 및 항산화용 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 항산화 조성물은 천연물인 라저스트로미아 오바리폴리아로부터 유래된 추출물을 포함하여 안전성을 확보하면서도, 종래의 천연 항산화성 물질보다도 항산화 효과가 우수하고, 합성 항산화성 물질과 동등한 수준의 항산화 효과를 나타내므로, 항산화성 물질을 포함하는 각종 제품의 개발에 널리 활용될 수 있을 것이다.
Description
본 발명은 라저스트로미아 오바리폴리아 추출물을 포함하는 항산화 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로 본 발명은 라저스트로미아 오바리폴리아 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 항산화 조성물, 항산화용 건강기능식품 및 항산화용 화장료 조성물에 관한 것이다.
인체의 노화와 질병을 유발하는 자유라디칼은 활성산소라고도 하고, 인체 내에서 정상적인 대사과정 중 생물학적 반응으로 형성되는데, 세포와 조직에 산화적 스트레스를 유발시켜서 여러 가지 질병을 유발하는 것으로 알려져 있다. 지금까지 알려진 바에 의하면, 소화기 질환, 당뇨병, 암, 심혈관계 질환, 퇴행성 질환 등이 산화적 스트레스에 의하여 유발된다고 알려져 있다. 이를 방지하기 위하여, 생체 내에서 자유라디칼의 생성을 억제하기 위한 생리작용으로서, 산화성 자유라디칼에 전자를 공여하여 산화를 억제하거나 또는 과산화 라디칼(superoxide anion radical)을 정상상태의 산소로 전환시키는 작용기작이 알려져 있다.
상기 과산화 라디칼은 수퍼옥사이드 디스뮤타제라는 효소에 의하여 과산화수소와 물로 분해되거나, 또는 산화질소(nitric oxide)와 반응하여 반응성이 강한 과산화물(peroxy nitrite)을 생성하는 것으로 알려져 있다. 상기 과산화수소는 철이나 동 이온과 같은 금속이온과 결합하여 강력한 활성산소인 하이드록시 라디칼을 생성하는데, 상기 하이드록시 라디칼은 세포의 노화를 촉진하는 것으로 알려져 있다. 또한, 상기 과산화물은 SH-그룹의 산화, 단백질 티로신의 질산화(nitration), 지질과산화, DNA 손상 등을 일으키는 원인이 되는 것으로 알려져 있다. 체내에서는 수퍼옥사이드 디스뮤타제의 활성이 높은 수준으로 유지되기 때문에 과산화물보다는 과산화수소의 발생량이 높은 수준으로 유지되지만, 상기 과산화수소는 카탈라아제 또는 글루타티온 퍼옥시다제에 의하여 물과 이산화탄소로 분해되므로, 최종적으로는 생성되는 수준의 5% 정도만이 잔류한다고 알려져 있다. 그러나 이처럼 잔류하는 5%의 과산화수소가 하이드록시 라디칼을 생성하기 때문에 이들 잔류하는 과산화수소를 제거하여야 하고, 이를 위하여 항산화성 물질이 사용되고 있다.
항산화성 물질은 자연계에 널리 분포되어 있는데, 주로 식물로부터 유래된 페놀성 화합물, 플라보노이드, 토코페롤, 비타민 C, 셀레늄 등의 물질이 항산화성 물질로 사용되어, 식품, 의약품, 화장품 등의 원료로서 사용되고 있다. 그러나, 이같은 자연계에서 유래된 천연 항산화성 물질은 항산화 효과가 크지 않기 때문에, 이들 항산화성 물질을 사용하여 실효를 얻기 위하여는 다량으로 사용하여야 하고, 이로 인하여 가격이 상승하므로, 경제성이 낮다는 문제점이 있었다.
이러한 천연 항산화성 물질의 문제점을 해결하기 위하여, 화학적으로 합성된 항산화성 물질을 개발하려는 활발히 진행되고 있다. 예를 들어, 화학적으로 합성된 항산화성 물질로서 BHT(Butylated Hydroxy Toluene), BHA(Butylated Hydroxy Anisole), Propyl Gallate 등이 개발되었는데, 이들 합성된 항산화성 물질은 천연 항산화성 물질보다도 월등히 우수한 항산화 효과를 나타내므로, 천연 항산화성 물질의 문제점을 해결할 수 있는 수단으로서 인식되고 있다. 그러나, 이들 합성된 항산화성 물질은 인체에 크고 작은 부작용을 유발시킨다는 새로운 문제점이 있어, 사용이 제한되고 있다.
이러한 배경하에서, 본 발명자들은 천연물로부터 유래되어 안전성이 확보되면서도, 우수한 항산화 효과를 나타내는 항산화성 물질을 개발하기 위하여 예의 연구 노력한 결과, 천연물인 라저스트로미아 오바리폴리아로부터 유래된 추출물이 우수한 항산화 효과를 나타냄을 확인하고, 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 하나의 목적은 라저스트로미아 오바리폴리아 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 항산화 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 라저스트로미아 오바리폴리아 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 항산화용 건강기능식품을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 라저스트로미아 오바리폴리아 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 항산화용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위한 하나의 양태로서, 본 발명은 라저스트로미아 오바리폴리아(Lagerstroemia ovalifolia) 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 항산화용 조성물을 제공한다.
본 발명의 용어, "라저스트로미아 오바리폴리아(Lagerstroemia ovalifolia)"란, 인디아, 인도네시아, 북부 오스트레일리아 등의 지역에서 자생하는 Lagerstroemia 속에 속하는 상록관목의 일종을 의미하지만, 그에 포함된 구체적인 생리활성 물질 또는 효과에 대하여는 아직까지 규명되지 않았다. 본 발명자들은 상기 라저스트로미아 오바리폴리아로부터 유래된 추출물이 DPPH(1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl)로부터 유래된 자유라디칼 및 ABTS(2,2'-azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid))로부터 유래된 자유라디칼을 소거할 수 있음과 SOD에 의해 생성된 과산화 라디칼을 소거할 수 있음을 입증함으로써, 상기 추출물이 우수한 항산화 활성을 나타냄을 최초로 규명하였다.
본 발명의 용어, "라저스트로미아 오바리폴리아 추출물"이란 상기 라저스트로미아 오바리폴리아를 추출하여 수득한 추출물을 의미하는데, 본 발명의 목적상, 라저스트로미아 오바리폴리아 추출물은 라저스트로미아 오바리폴리아 또는 그의 분쇄물을 물, C1 내지 C4의 알콜(메탄올, 에탄올, 부탄올 등) 또는 이들의 혼합 용매 등으로 추출하여 수득한 결과물이 될 수 있고, 바람직하게는 라저스트로미아 오바리폴리아 또는 그의 분쇄물을 메탄올로 추출하여 수득한 결과물이 될 수 있으나, 이에 제한되지는 않고, 상기 결과물은 추출액, 추출액의 희석액 또는 농축액, 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 및 이들의 조정제물 또는 정제물 중 어느 하나 이상을 포함할 수 있다. 상기 추출물은 초음파 추출법, 여과법 및 환류추출법 등 당업계의 통상적은 추출방법을 사용하여 수득할 수 있고, 사용된 라저스트로미아 오바리폴리아는 상업적으로 판매되는 것을 구입하여 사용하거나, 자연에서 채취 또는 재배된 것을 사용할 수 있으나, 특별히 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 용어 "분획물"이란 다양한 구성성분을 포함하는 혼합물로부터 특정성분 또는 특정 그룹을 분리하는 분획방법에 의하여 얻어진 결과물을 의미한다. 본 발명의 목적상, 상기 분획물은 바람직하게는 상기 라저스트로미아 오바리폴리아의 추출물을 DMSO, n-헥산, 에탄올, 에틸아세테이트, 부탄올, 이들의 혼합용매 등의 유기용매를 이용한 용매분획방법으로 분획한 결과물일 수 있고, 극성 용매 분획물과 비극성 용매 분획물을 모두 포함할 수 있으며, DMSO 분획물, n-헥산 분획물, 에탄올 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 부탄올 분획물, 이들의 혼합용매 분획물 등이 모두 사용될 수 있으나, 특별히 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 용어 “항산화”란, 좁은 범위로는 체내에서 생성되는 자유라디칼, 상기 자유라디칼로부터 생선되는 과산화수소 또는 과산화물, 상기 과산화수소로부터 생성되는 하이드록시 라디칼의 생성 또는 반응을 억제, 감소 또는 제어하는 작용을 의미하고, 넓은 범위로는 자연계에서 발생하는 산화반응의 생성을 억제, 감소 또는 제어하는 작용을 의미한다. 본 발명의 목적상, 상기 항산화는 좁은 범위의 항산화로서 이해되고, 주로 세포수준에서 발생되는 자유라디칼 또는 과산화수소의 생성 또는 반응을 억제, 감소 또는 제어하는 작용으로서 이해될 수 있으나, 특별히 이에 제한되지는 않는다.
한편, 본 발명의 조성물은 라저스트로미아 오바리폴리아 추출물에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 1종 이상의 유효성분을 추가로 포함할 수도 있다.
또한, 본 발명의 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체를 추가로 포함하는 약학적 조성물이 될 수도 있다. 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 상기 조성물은 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 하나 이상의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스 (sucrose) 또는 락토오스 (lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함될 수 있다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테로 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔 (witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다. 상기 약제학적 조성물은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제 및 좌제으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가질 수 있다.
아울러, 본 발명의 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 어떠한 일반적인 경로를 통하여 투여될 수 있으며, 목적하는 바에 따라 복강 내 투여, 정맥 내 투여, 근육 내 투여, 피하 투여, 피 내 투여, 경구 투여, 비 내 투여, 폐 내 투여, 직장 내 투여될 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 또한, 상기 조성물은 항산화 효과를 나타내기 위하여 단독으로 또는 호르몬 치료, 약물 치료 및 생물학적 반응 조절제와 조합하여 사용할 수 있다.
다른 관점에서 볼 때, 본 발명의 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여할 수 있다. 본 발명의 용어 "약제학적으로 유효한 양"이란 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 개체 종류 및 중증도, 연령, 성별, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고, 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다. 그리고 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 조성물은 염증성 질환의 예방 또는 치료를 위하여 단독으로, 수술, 호르몬 치료, 약물 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 라저스트로미아 오바리폴리아의 메탄올 추출물을 DMSO에 용해시켜 수득한 시료의 자유라디칼 소거활성을 측정한 결과, DPPH(1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl)로부터 유래된 자유라디칼을 농도의존적으로 소거할 수 있을 뿐만 아니라, ABTS(2,2'-azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid))로부터 유래된 자유라디칼에 대하여도 농도의존적으로 소거활성을 나타내는 것을 확인하였다(도 1 및 2). 또한, 과산화 라디칼을 생산하는 SOD(수퍼옥사이드 디스뮤타제 효소)의 활성도 농도의존적으로 저해하며, 합성 항산화성 물질인 BHA보다 우수한 항산화 효과를 나타냄을 확인하였다 (도 3).
다른 하나의 양태로서, 본 발명은 라저스트로미아 오바리폴리아 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 항산화용 건강기능식품을 제공한다.
본 발명의 용어, "건강기능식품"이란, 특정보건용 식품(food for special health use, FoSHU)와 동일한 용어로, 영양 공급 외에도 생체조절기능이 효율적으로 나타나도록 가공된 의학, 의료효과가 높은 식품을 의미하며, 경우에 따라 건강식품, 기능성식품, 건강보조식품 등의 용어와 호용될 수 있다. 본 발명의 목적상 상기 건강기능식품은 항산화 활성을 나타내어 이를 섭취한 개체의 건강을 유지, 개선 또는 회복에 유용한 효과를 얻기 위하여 제조될 수 있으며, 이들의 제품 형태는 바람직하게는 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상, 환 등의 다양한 형태로 제조될 수 있으나, 특별히 이제 제한되지는 않는다.
라저스트로미아 오바리폴리아 추출물을 식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 사용 목적 (예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 라저스트로미아 오바리폴리아 추출물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
상기 외에 본 발명의 건강기능식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 건강기능식품은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.
또 다른 하나의 양태로서, 본 발명은 라저스트로미아 오바리폴리아 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 항산화용 화장료 조성물을 제공한다.
바람직한 하나의 실시예에 따르면, 본 발명의 화장료 조성물은 기능성 화장품의 제조에 사용될 수 있다.
본 발명의 용어 "기능성 화장품(cosmedical, cosmeceutical)"이란 화장품에 의약품의 전문적인 치료기능이 도입되어, 일반 화장품과 달리 생리활성적인 효능, 효과가 강조된 전문적인 기능성을 갖는 제품으로서, 피부의 미백에 도움을 주는 제품, 피부 주름개선에 도움을 주는 제품, 피부를 곱게 태우거나 자외선으로부터 피부를 보호하는데 도움을 주는 제품 중에서 보건복지부령이 정하는 화장품을 의미한다. 본 발명의 목적상 상기 기능성 화장품은 다양한 기능성 화장품 중에서 피부세포에 항산화 효과를 부가하는 제품을 의미하고, 바람직하게는 라저스트로미아 오바리폴리아의 추출물 또는 그의 분획물을 유효성분으로 포함하는 항산화용 기능성 화장품이 될 수 있으나, 특별히 이에 제한되지는 않고, 상기 항산화용 기능성 화장품에 포함되는 라저스트로미아 오바리폴리아 추출물 또는 그의 분획물의 함량 역시 특별히 제한되지 않는다.
본 발명의 기능성 화장품은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있는데, 바람직하게는 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있고, 보다 상세하게는 유연 화장수, 수렴 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 로션, 젤, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 연고, 스틱, 패취, 스프레이 또는 파우더의 제품으로 제조될 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 항산화 조성물은 천연물인 라저스트로미아 오바리폴리아로부터 유래된 추출물을 포함하여 안전성을 확보하면서도, 종래의 천연 항산화성 물질보다도 항산화 효과가 우수하고, 합성 항산화성 물질과 동등한 수준의 항산화 효과를 나타내므로, 항산화성 물질을 포함하는 각종 제품의 개발에 널리 활용될 수 있을 것이다.
도 1은 라저스트로미아 오바리폴리아의 추출물 농도에 따른, DPPH로부터 유래된 자유라디칼의 소거활성을 나타내는 그래프로서, BHA는 BHA를 10㎍/㎖로 처리한 군을 의미한다.
도 2는 라저스트로미아 오바리폴리아의 추출물 농도에 따른, ABTS로부터 유래된 자유라디칼의 소거활성을 나타내는 그래프로서, BHA는 BHA를 10㎍/㎖로 처리한 군을 의미한다.
도 3은 라저스트로미아 오바리폴리아의 추출물 농도에 따른, SOD 저해활성을 나타내는 그래프로서, BHA는 BHA를 10㎍/㎖로 처리한 군을 의미한다.
도 4는 라저스트로미아 오바리폴리아의 메탄올추출물에서 용매별 분획을 제조하는 과정을 나타낸 개략도이다.
도 2는 라저스트로미아 오바리폴리아의 추출물 농도에 따른, ABTS로부터 유래된 자유라디칼의 소거활성을 나타내는 그래프로서, BHA는 BHA를 10㎍/㎖로 처리한 군을 의미한다.
도 3은 라저스트로미아 오바리폴리아의 추출물 농도에 따른, SOD 저해활성을 나타내는 그래프로서, BHA는 BHA를 10㎍/㎖로 처리한 군을 의미한다.
도 4는 라저스트로미아 오바리폴리아의 메탄올추출물에서 용매별 분획을 제조하는 과정을 나타낸 개략도이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명의 구성 및 효과를 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것은 아니다.
제조예
:
라저스트로미아
오바리폴리아
추출물 및
분획물
제조
라저스트로미아 오바리폴리아(Lagerstroemia ovalifolia) 추출물은 메탄올 추출물로서, 한국생명공학연구원에 소재한 해외생물소재허브센터에서 구입하였다. 건조된 추출물을 DMSO 용매에 20mg/㎖ 농도로 용해시켜, 이하의 각 실험에 사용하였다(이하, "라저스트로미아 오바리폴리아 추출물"이라 한다).
또한, 라저스트로미아 오바리폴리아 분획물은 메탄올 추출물 98 mg에 10ml의 물을 첨가하여 현탁시키고, 동량의 100% 헥산을 가하여 진탕 방치하기를 3회 실시하여 헥산 분획물 14.4 mg을 수득하였다. 그런 다음, 상기 헥산 분획물을 제거하고 남은 물층에 클로로포름을 동량 가하여 진탕 방치하기를 3회 반복하여 클로로포름 분획물 17.2mg을 수득하였으며, 다시 남은 물층에 에틸아세테이트를 동량 가하여 같은 방법으로 에틸아세테이트 분획물 51.3 mg을 수득하였으며, 또 다시 남은 물층에 부탄올을 동량 가하여 동일한 방법으로 부탄올 분획물 5 mg을 수득하였으며, 남은 물층은 농축하였으나 물 분획물은 얻지 못하였다.(도 4). 각각의 분획물은 건조시킨후 DMSO 용매에 20mg/㎖의 농도로 용해시켜 이하의 실험에 사용하였다.
실험예
1:
라저스트로미아
오바리폴리아
추출물의
DPPH
자유라디칼
소거 활성 평가
라저스트로미아 오바리폴리아의 메탄올 추출물의 분획물을 이용하여 DPPH(1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl)로부터 유래된 자유라디칼 소거활성을 측정하였다.
구체적으로, 0.15 mM의 농도로 DPPH를 에탄올에 용해시킨 용액 90㎕을 96웰 플레이트에 분주하고, 상기 제조예에서 준비한 라저스트로미아 오바리폴리아 추출물 용액을 각각 10, 20, 40, 80 또는 160㎍/㎖ 의 농도로 희석하여 각각 가한 다음, 상온에서 20분동안 반응시킨 후, 517nm에서 흡광도를 측정하였다. 측정된 흡광도를 하기의 수학식 1에 적용하여 자유라디칼 소거 활성을 산출하고, 상호 비교하였다(도 1). 이때, DMSO 만을 처리한 실험군을 음성대조군으로 사용하고, 합성 항산화제인 BHA를 처리한 군을 양성대조군으로 사용하였다.
A; 본 발명 추출물을 처리하지 않은 음성대조군의 흡광도
B; 본 발명 추출물을 처리한 실험군의 흡광도
도 1은 라저스트로미아 오바리폴리아의 추출물 농도에 따른, DPPH로부터 유래된 자유라디칼의 소거활성을 나타내는 그래프이다. 도 1에서 보듯이, 라저스트로미아 오바리폴리아의 추출물 농도에 비례하여 자유라디칼의 소거활성이 증가됨을 확인하였다.
실험예
2:
라저스트로미아
오바리폴리아
추출물의
ABTS
자유라디칼
소거 활성 평가
라저스트로미아 오바리폴리아의 메탄올 추출물의 분획물을 이용하여 ABTS(2,2'-azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid))로부터 유래된 자유라디칼 소거활성을 측정하였다.
구체적으로, ABTS와 potassium persulfate의 최종농도가 각각 7mM 및 2.45mM이 되도록 혼합하고, 암소에서 12시간동안 반응시켜서 ABTS 라디칼을 형성시켰다. 상기 반응물에 증류수를 가하여 734nm에서 흡광도가 0.7이 되도록 희석하고, 상기 희석된 반응물을 96웰 플레이트에 분주하였다. 상기 제조예에서 준비한 추출물 용액을 각각 10, 20, 40, 80 또는 160㎍/㎖ 의 농도로 희석하여 각각 가한 다음, 상온의 암소에서 7분동안 반응시킨 후, 734nm에서 흡광도를 측정하였다. 측정된 흡광도를 수학식 1에 적용하여 자유라디칼 소거 활성을 산출하고, 상호 비교하였다(도 2). 이때, DMSO 만을 처리한 실험군을 음성대조군으로 사용하고, 합성 항산화제인 BHA를 처리한 군을 양성대조군으로 사용하였다. 도 2는 라저스트로미아 오바리폴리아의 추출물 농도에 따른, ABTS로부터 유래된 자유라디칼의 소거활성을 나타내는 그래프이다. 도 2에서 보듯이, 라저스트로미아 오바리폴리아의 추출물 농도에 비례하여 자유라디칼의 소거활성이 증가됨을 확인하였다.
실험예
3:
디프테로카퍼스
옵터시포리어스
추출물의 SOD 활성
상기 제조예의 추출물에 대한 항산화 활성을 확인하기 위하여 다른 유해활성산소류의 전구물질로 작용하는 수퍼옥사이드 라디칼의 소거활성을 측정하였다. 이 수퍼옥사이드 라디칼 소거활성은 수퍼옥사이드를 디스뮤테이션(dismutation) 시킴으로써 수퍼옥사이드를 소거하는 효소인 수퍼옥사이드 디스뮤타제(SOD)의 활성을 측정하여 검색할 수 있는데, 본 발명에서는 Dojindo사의 SOD kit를 이용하였다. 구체적으로 각 농도별 시료(10, 20, 40, 80 또는 160 ㎍/㎖)를 96웰 플레이트에 분주하고, 수퍼옥사이드 라디칼과 반응하는 수용성 WST-1(2-(4-인도페닐)-3-(4-나이트로페닐)-5-(2,4-디썰포페닐)-2H-테트라졸리움)을 넣은 후, SOD효소용액을 넣고 37도에서 20분간 반응시킨 후, 반응액의 흡광도를 마이크로플레이트 측정기로 450nm에서 측정하였다. 각 시료의 수퍼옥사이드 라디칼 소거활성을 대조군에 대한 WST의 환원 감소 정도로써 산출하였다. 이때, DMSO를 처리한 군을 음성대조군으로, 합성 항산화제인 BHA를 처리한 군을 양성대조군으로 사용하였다.
그 결과, 도 3에서 보는 바와 같이 라저스트로미아 오바리폴리아 추출물의 수퍼옥사이드 라디칼 소거능이 추출물의 농도의존적임을 확인하였다. 또한 10㎍/㎖의 농도로 BHA와 추출물을 처리했을 때 수퍼옥사이드 라디칼 소거능이 각각 34.79±2.70 %(BHA)와 47.92±0.39 %(추출물)을 나타냄으로써, 라저스트로미아 오바리폴리아 추출물이 수퍼옥사이드 라디칼 소거능에서는 양성대조군에 비해 월등히 높은 활성을 나타냄을 확인하였다.
실험예
4:
라저스트로미아
오바리폴리아
분획물의
자유라디칼
소거 활성 평가
상기 제조예의 분획물에 대한 항산화 활성을 확인하기 위하여 각 분획물을 에 대한 DPPH 및 ABTS 자유라디칼 소거능을 실험예1과 2의 방법으로 측정하였다.
또한, 라저스트로미아 오바리폴리아가 천연물이므로, 양성대조군으로 천연물 항산화제인 비타민 E와 비타민 C를 사용하였으며 40μg/ml의 농도로 시료를 처리하였다.
| ㎍/㎖ | DPPH 라디칼소거능 (%) | ABTS 라디칼소거능 (%) | |
| 메탄올 추출물 헥산층 클로로포름층 에틸아세테이트층 부탄올층 비타민 E 비타민 C |
40 40 40 40 40 40 40 |
24.22 ± 1.05 7.27 ± 1.00 9.22 ± 1.20 15.05 ± 0.70 30.36 ± 0.73 38.50 ± 2.20 57.55 ± 1.90 |
34.07 ± 0.15 11.16 ± 0.09 18.34 ± 1.19 25.32 ± 0.45 38.20 ± 0.64 52.36 ± 6.64 100.10 ± 0.09 |
그 결과, 표 1에서 보는바와 같이 라저스트로미아 오바리폴리아 메탄올추출물의 라디칼 소거능이 각각 24.22 ± 1.05% (DPPH), 34.07 ± 0.15 % (ABTS)인 반면 이로부터 분획한 부탄올층의 라디칼 소거능이 각각 30.36 ± 0.73 % (DPPH), 38.20 ± 0.64 % (ABTS)으로 더 높은 항산화활성을 나타냄을 확인하였다.
Claims (3)
- 라저스트로미아 오바리폴리아(Lagerstroemia ovalifolia)를 탄소수 1 내지 4의 알콜 또는 상기 알콜과 물의 혼합용매를 사용하여 추출한 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화용 건강기능식품.
- 라저스트로미아 오바리폴리아(Lagerstroemia ovalifolia)를 탄소수 1 내지 4의 알콜 또는 상기 알콜과 물의 혼합용매를 사용하여 추출한 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화용 화장료 조성물.
- 제2항에 있어서,
유연 화장수, 수렴 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 로션, 젤, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 연고, 스틱, 패취, 스프레이 또는 파우더에 포함되는 것인, 항산화용 화장료 조성물.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020150118046A KR101613681B1 (ko) | 2015-08-21 | 2015-08-21 | 라저스트로미아 오바리폴리아 추출물을 포함하는 항산화 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020150118046A KR101613681B1 (ko) | 2015-08-21 | 2015-08-21 | 라저스트로미아 오바리폴리아 추출물을 포함하는 항산화 조성물 |
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| KR1020120040007A Division KR20130117158A (ko) | 2012-04-17 | 2012-04-17 | 라저스트로미아 오바리폴리아 추출물을 포함하는 항산화 조성물 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20150102911A KR20150102911A (ko) | 2015-09-09 |
| KR101613681B1 true KR101613681B1 (ko) | 2016-04-19 |
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| KR20150102911A (ko) | 2015-09-09 |
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