KR20170032623A - Chionanthus retusa extract and cosmetic composition comprising the extract - Google Patents

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Abstract

Provided are a Chionanthus retusus Lindl. & Paxton extract for antioxidation, skin anti-aging, whitening, or moisturization, and a cosmetic composition containing the same. By containing a natural extract derived from plants as an active ingredient, the cosmetic composition is eco-friendly, and ensures excellent 2,2-diphenyl-1-picryhydrazyl radical (DPPH) reactive oxygen scavenging effects, collagen biosynthesis-promoting effects, effects of inhibiting collagenase expression, effects of inhibiting melanin production, and effects of promoting keratinocyte differentiation, thereby exhibiting outstanding antioxidative effects, skin anti-aging effects, whitening effects, or moisturizing effects.

Description

이팝나무 추출물 및 이를 포함하는 화장료 조성물{Chionanthus retusa extract and cosmetic composition comprising the extract}[0001] The present invention relates to an extract of Cinnamomum cassia L., and a cosmetic composition containing the extract,

본 발명은 이팝나무 추출물 및 이를 포함하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로 천연 성분을 이용하여 항산화 효과, 피부 노화 방지 효과, 미백 효과 또는 보습 효과를 갖는 이팝나무 추출물 및 이를 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.More particularly, the present invention relates to an extract of Euphorbiaceae having an antioxidative effect, a skin anti-aging effect, a whitening effect or a moisturizing effect using a natural component and a cosmetic composition containing the same will be.

활성산소는 세포구성 성분인 지질, 단백질, 당 및 DNA 등을 파괴함으로써 세포노화 또는 암을 비롯한 각종 질병을 일으키는 것으로 알려졌다. 또한, 상기 활성산소에 의한 지질과 산화의 결과로 생성되는 체내 과산화물도 세포에 대한 산화적 파괴를 일으켜 각종 기능장애를 야기한다. 따라서, 자유 라디칼을 소거할 수 있는 화합물(free radical scavengers) 또는 과산화물 생성 억제물질 등의 항산화제들이 각종 질환의 치료제로서 기대된다. Active oxygen is known to cause cellular diseases such as aging or cancer by destroying cellular components such as lipids, proteins, sugars and DNA. In addition, the body peroxide produced as a result of lipid oxidation by the active oxygen also causes oxidative destruction to cells, resulting in various functional disorders. Accordingly, antioxidants such as free radical scavengers or peroxidation-inhibiting substances are expected as therapeutic agents for various diseases.

피부의 노화는 피부의 주요 구성요소인 콜라겐과 엘라스틴이 변성되어 피부의 탄력성을 잃어가는 현상이다. 콜라게나아제(collagenase)와 엘라스타아제(elastase) 등의 기질메탈로 프로테아제(matrix metallo protease)의 발현으로 인하여 콜라겐과 엘라스틴이 분해되어 피부 내의 콜라겐 및 엘라스틴 함량이 줄어드는 현상이 나타난다. 콜라겐 및 엘라스틴의 감소를 억제하려는 목적으로 여러 가지 물질들이 개발되어 사용되고 있는데, 그 중 레티노이드는 탄력개선 효과를 나타내고(Dermatologytherapy, 1998, 16, 357~364), 레구미노사 종자(Leguminosae Seeds)에서 얻어진 단백질분획도 탄력증대 효과를 나타내는데 응용되고 있다(미국특허 제5,322,839호). 그러나, 상기 레티노이드는 소량만을 피부에 적용하여도 자극이 나타난다는 단점을 가지고 있다.Skin aging is a phenomenon in which collagen and elastin, the major components of the skin, are denatured and the elasticity of the skin is lost. Expression of matrix metalloproteases such as collagenase and elastase degrades collagen and elastin, resulting in reduced collagen and elastin content in the skin. (Dermatology Therapy, 1998, 16, 357-364), retinoids (Leguminosae Seeds), and retinoids have been used for the purpose of inhibiting collagen and elastin degradation. Fraction is also applied to show the effect of increasing the elasticity (U.S. Patent No. 5,322,839). However, the retinoid has a disadvantage in that irritation occurs even when only a small amount of the retinoid is applied to the skin.

사람의 피부색을 결정하는 데는 여러 가지 요인들이 관여하는데, 그 중에서도 멜라닌이라는 흑색 색소가 사람의 피부색을 결정하는 가장 중요한 요인이다. 상기 멜라닌 색소는 검은 색소와 단백질의 복합체 형태를 갖는 페놀계 고분자물질로서, 태양으로부터 조사되는 자외선을 차단하여 진피 이하의 피부기관을 보호해주는 동시에 피부 생체 내에 생겨난 자유 라디칼 등을 잡아주어 피부 내 단백질과 유전자들을 보호해주는 유용한 역할을 담당한다. There are many factors involved in determining human skin color, among which melanin, the most important factor in determining human skin color. The melanin pigment is a phenolic polymer substance having a complex form of a black pigment and a protein. It protects skin organs below the dermis by blocking ultraviolet rays irradiated from the sun, and at the same time, catches free radicals generated in the skin of the skin, It plays a useful role in protecting genes.

그러나, 외부의 스트레스 자극에 의해 생겨난 멜라닌은 스트레스가 사라져도 피부 각질화를 통해서 외부로 배출되기 전까지는 없어지지 않는 안정한 물질이다. 따라서, 멜라닌이 필요 이상으로 많이 생기게 되면 기미, 주근깨, 점 등과 같은 과색소 침착증을 유발하여 미용상으로 좋지 않은 결과를 가져오게 된다. 또한, 레저 인구의 증가로 외부에서 활동하는 것을 즐기는 사람들이 많아지면서 자외선에 의한 멜라닌 색소 침착을 막고자 하는 요구가 늘어나게 되었다. 이와 같은 요구에 부응하여 아스코르빈산, 코지산, 알부틴, 하이드로퀴논, 글루타치온 또는 타이로시나제 저해활성을 가진 물질들을 화장료나 의약품에 배합하여 사용하여 왔으나, 불충분한 미백효과, 피부에 대한 안전성 문제, 화장료에 배합 시 나타나는 제형 및 안정성의 문제로 인해 그 사용이 제한되고 있다.However, melanin, which is produced by external stress stimuli, is a stable substance that does not disappear until the skin is excreted through skin keratinization even if the stress disappears. Therefore, when melanin is produced more than necessary, it induces hypercholesterolemia such as spots, freckles, and dots, resulting in poor cosmetic results. In addition, as the number of people enjoying outdoor activities increased due to the increase in the leisure population, the demand for preventing melanin pigmentation due to ultraviolet rays increased. In response to such demands, substances having inhibitory activity against ascorbic acid, kojic acid, arbutin, hydroquinone, glutathione or tyrosinase have been used in cosmetics or medicines. However, inadequate whitening effect, , And the use thereof is limited due to the problem of formulation and stability in combination with cosmetics.

본 발명의 한 측면은 항산화 효과, 피부 노화 방지 효과, 미백 효과 또는 보습 효과를 갖는 천연 식물의 추출물을 제공하고자 한다.One aspect of the present invention is to provide an extract of a natural plant having an antioxidative effect, a skin aging-preventing effect, a whitening effect, or a moisturizing effect.

본 발명의 다른 측면은 항산화 효과, 피부 노화 방지 효과, 미백 효과 또는 보습 효과를 갖는 천연 식물의 추출물을 포함하는 화장료 조성물을 제공하고자 한다.Another aspect of the present invention is to provide a cosmetic composition comprising an extract of a natural plant having an antioxidant effect, a skin aging-preventing effect, a whitening effect, or a moisturizing effect.

본 발명의 일 실시예에 따르면, 항산화용, 피부 노화 방지용, 미백용 또는 보습용 이팝나무(Chionanthus retusa) 추출물을 제공한다.According to one embodiment of the present invention, an extract of Chionanthus retusa for antioxidation, skin aging prevention, whitening or moisturizing is provided.

상기 추출물은 잎, 꽃잎, 줄기, 수피, 열매, 종자 및 수액으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상으로부터 추출될 수 있다.The extract may be extracted from one or more selected from the group consisting of leaves, petals, stems, bark, fruits, seeds and sap.

본 발명의 다른 실시예에 따르면, 이팝나무 추출물을 유효 성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.According to another embodiment of the present invention, there is provided a cosmetic composition comprising an extract of Euphorbiaceae as an active ingredient.

상기 이팝나무 추출물은 잎, 꽃잎, 줄기, 수피, 열매, 종자 및 수액으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상일 수 있다. The extract may be at least one selected from the group consisting of leaf, petal, stem, bark, fruit, seed and sap.

상기 이팝나무 추출물은, 전체 조성물의 중량을 기준으로, 0.0001 내지 50 중량%의 함량으로 포함될 수 있다. The poppy tree extract may be contained in an amount of 0.0001 to 50% by weight based on the weight of the whole composition.

상기 조성물은 유연화장수, 영양화장수, 마사지크림, 영양크림, 팩, 젤, 피부 점착 타입, 경피 투여 타입, 로션, 연고, 겔, 크림, 패취 또는 분무제 제형으로 제형화될 수 있다.The composition may be formulated as a softening agent, a nutritional lotion, a massage cream, a nutritional cream, a pack, a gel, a skin sticking type, a transdermal administration type, a lotion, an ointment, a gel, a cream, a patch or a spray.

상기 조성물은 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기안료, 무기안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제 및 정제수로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 더 포함할 수 있다.The composition may further comprise at least one selected from the group consisting of a preservative, a moisturizer, an emollient, a surfactant, an organic pigment, an inorganic pigment, an organic powder, an ultraviolet absorber, an antiseptic, a bactericide, an antioxidant, a plant extract, a pH adjuster, An antiseptic agent, a cold agent, an antiperspirant agent, and purified water.

본 발명은 식물로부터 추출한 천연 추출물을 유효 성분으로 사용함으로써 자연친화적이면서도 우수한 DPPH 활성산소제거 효과, 콜라겐 생합성 촉진 효과, 콜라게나아제 발현 억제 효과, 멜라닌 생성 억제 효과 및 각질형성세포 분화 촉진 효과가 있으며, 이에 따라, 우수한 항산화 효과, 피부 노화 방지 효과, 미백 효과 또는 보습 효과를 발현할 수 있다.The use of natural extracts derived from plants as an active ingredient has natural, but excellent DPPH radical scavenging effect, collagen biosynthesis promoting effect, collagenase expression inhibiting effect, melanin formation inhibiting effect and keratinocyte differentiation promoting effect, Thus, it is possible to exhibit excellent antioxidative effect, skin aging prevention effect, whitening effect or moisturizing effect.

이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 바람직한 실시 형태를 설명한다. 그러나, 본 발명의 실시 형태는 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 이하 설명하는 실시 형태로 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, preferred embodiments of the present invention will be described with reference to the accompanying drawings. However, the embodiments of the present invention can be modified into various other forms, and the scope of the present invention is not limited to the embodiments described below.

본 발명의 일 실시예에 따르면, 항산화용, 피부 노화 방지용, 미백용 또는 보습용 이팝나무 추출물(Chionanthus retusa)을 제공할 수 있다.According to one embodiment of the present invention, it is possible to provide an antioxidant, an anti-aging skin, a whitening agent or a moisturizing antler seed extract (Chionanthus retusa).

본 발명의 유효성분인 이팝나무(Chionanthus retusa)는 높이가 약 20m이며, 나무껍질은 잿빛을 띤 갈색이고 어린 가지에 털이 약간 나고, 잎은 마주나고 잎자루가 길며 타원형이고 길이 3∼15cm, 나비 2.5∼6cm이다. 가장자리가 밋밋하지만 어린 싹의 잎에는 겹톱니가 있으며, 겉면은 녹색이고, 뒷면은 연두색이며 맥에는 연한 갈색 털이 난다. 꽃은 암수딴그루로서 5∼6월에 피는데, 가지 끝에 원뿔 모양 취산꽃차례로 달리며, 꽃받침과 화관은 4개로 갈라지고 꽃잎은 흰색이며 나비 3mm 정도이다. 작은 꽃자루는 길이 7∼10mm이고 마디가 있으며, 수술은 2개로서 화통(花筒)에 붙으며, 암술은 1개이다. 열매는 핵과로서 타원형이고 검은 보라색이며 10∼11월에 익으며, 번식은 종자나 꺾꽂이로 가능하다.Chionanthus retusa, the active ingredient of the present invention, is about 20 m in height, and the bark is ash-toned brown, with slightly hairs on the branches, with petioles facing each other, long petiole, oval, 3 ~ ~ 6cm. The leaf is flat but the leaf of young shoot has double sawtooth, the surface is green, the back is light green, and the vein has light brown hairs. Flowers are dioecious, bloomed in May-June, with conical flower buds at the end of branches. Calyxes and corolla are divided into 4, petals are white and butterflies are about 3mm long. The peduncle is 7 ~ 10mm long and has nodes. There are two stamens attached to a flower basket and one pistil. The fruit is oval, dark purple, ripening in October to November, and breeding is possible with seeds or bunches.

상기 추출물은 잎, 꽃잎, 줄기, 수피, 열매, 종자 및 수액으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상으로부터 추출되는 것이 바람직하며, 수액으로부터 추출되는 것이 더욱 바람직하다.The extract is preferably extracted from at least one selected from the group consisting of leaves, petals, stems, bark, fruits, seeds and sap, and is more preferably extracted from sap.

본 발명의 이팝나무 추출물은 당해 기술 분야에 알려진 적절한 방법에 의해 추출될 수 있으며, 예를 들어, 건조된 이팝나무의 잎, 꽃잎, 줄기, 수피, 열매 또는 종자에 유기 용매를 넣고 환류 추출한 후, 15℃에서 1일간 침적시킨 후, 여과포 여과와 원심분리를 통해 잔사와 여액을 분리하고, 분리된 여액을 감압 농축하면 이팝나무의 잎, 꽃잎, 줄기, 수피, 열매 또는 종자 추출물을 얻거나, 또는 이팝나무 수액을 채취하여 분무 건조하여 이팝나무의 수액 추출물을 얻을 수 있다.The extract of the present invention can be extracted by a suitable method known in the art. For example, an organic solvent is added to the leaves, petals, stems, bark, fruits, or seeds of dried poppy, After 1 day of immersion at 15 ° C, the residue and filtrate are separated by filtration and centrifugation through a filter cloth, and the separated filtrate is concentrated under reduced pressure to obtain leaf, petal, stem, bark, The sap is extracted and dried by spraying to obtain an extract of Sapporo japonicus.

상기 유기 용매는 특별히 제한되는 것은 아니며, C1 내지 C5의 저급 알코올, 에테르, 에틸아세테이트 또는 클로로포름일 수 있다. 상기 C1 내지 C5의 저급 알코올은, 예를 들어, 메탄올, 에탄올, 이소프로필알코올, n-프로필알코올, n-부탄올 및 이소부탄올로 이루어진 군에서 선택된 1종 또는 2종 이상의 혼합 용매일 수 있다. The organic solvent is not particularly limited and may be a C 1 to C 5 lower alcohol, ether, ethyl acetate or chloroform. The C 1 to C 5 lower alcohols may be used for mixing one or more kinds selected from the group consisting of methanol, ethanol, isopropyl alcohol, n-propyl alcohol, n-butanol and isobutanol .

본 발명의 다른 실시예에 따르면, 이팝나무 추출물을 유효 성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공할 수 있다. 하기 실시예에서 확인할 수 있는 바와 같이 본 발명의 화장료 조성물은 우수한 DPPH 활성산소제거 효과, 콜라겐 생합성 촉진 효과, 콜라게나아제 발현 억제 효과, 멜라닌 생성 억제 효과 및 각질형성세포 분화 촉진 효과가 있으므로, 이에 따라, 우수한 항산화 효과, 피부 노화 방지 효과, 미백 효과 또는 보습 효과를 발현할 수 있다.According to another embodiment of the present invention, it is possible to provide a cosmetic composition comprising an extract of Euphorbiaceae as an active ingredient. As can be seen in the following examples, the cosmetic composition of the present invention has an excellent DPPH active oxygen eliminating effect, collagen biosynthesis promoting effect, collagenase expression inhibiting effect, melanin formation inhibiting effect and keratinocyte differentiation promoting effect, , Excellent antioxidative effect, skin aging prevention effect, whitening effect or moisturizing effect can be exhibited.

상기 조성물에 포함되는 이팝나무 추출물은 잎, 꽃잎, 줄기, 수피, 열매, 종자 및 수액으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상으로부터 추출되는 것이 바람직하며, 수액으로부터 추출되는 것이 더욱 바람직하다.It is preferable that the ginseng extract contained in the composition is extracted from at least one selected from the group consisting of leaves, petals, stems, bark, fruits, seeds and sap, more preferably extracted from sap.

상기 이팝나무 추출물은, 전체 조성물의 중량을 기준으로, 0.0001 내지 50 중량%의 함량으로 포함되는 것이 바람직하며, 1 내지 20 중량%의 함량으로 포함되는 것이 더욱 바람직하다. 상기 이팝나무 추출물은, 전체 조성물의 중량을 기준으로, 0.0001 중량% 미만이면 이팝나무 추출물의 항산화 효과, 피부 노화 방지 효과, 미백 효과 또는 보습 효과가 충분하지 않은 문제가 있으며, 50 중량% 초과하면 변취 등 화장품 변성의 우려가 있고 화장품 제형의 점도 조절이 쉽지 않으며 에멀젼 제형 제조 시 전상이 일어나기 쉽기 때문에 화장료 제형으로서 개발하기 어렵고 생산 경제성도 떨어지게 된다.The extract is preferably contained in an amount of 0.0001 to 50% by weight, more preferably 1 to 20% by weight based on the weight of the whole composition. If the content of the extract is less than 0.0001% by weight based on the weight of the whole composition, the antioxidative effect, the anti-aging effect, the whitening effect or the moisturizing effect of the extract of Echinoderm are not sufficient. There is a fear of denaturation of cosmetics, etc., and it is difficult to control the viscosity of cosmetic formulations and it is difficult to develop cosmetic formulations because production of emulsion formulations is easy to take place.

본 발명의 화장료 조성물은 상술한 성분들을 유효 성분으로 포함하며, 목적하는 다양한 제형에 따라 유효 성분 이외의 다른 성분을 적절하게 배합하여 제조할 수 있다. The cosmetic composition of the present invention contains the above-mentioned ingredients as an active ingredient and may be prepared by appropriately blending ingredients other than the active ingredient according to various desired formulations.

보다 상세하게, 본 발명에 따른 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 상기 조성물은 유연화장수, 영양화장수, 마사지크림, 영양크림, 팩, 젤, 피부 점착 타입, 경피 투여 타입, 로션, 연고, 겔, 크림, 패취 또는 분무제 제형으로 제형화될 수 있다.More specifically, the cosmetic composition according to the present invention can be prepared in any form conventionally produced in the art. For example, the composition can be used as a softening agent, a nutritional lotion, a massage cream, a nutritional cream, a pack, Skin-adhesive type, transdermal type, lotion, ointment, gel, cream, patch or spray formulations.

또한, 본 발명의 조성물은 이팝나무 추출물과 더불어 필요에 따라 일반적인 화장료 조성물에 포함되는 성분을 배합할 수 있다. 이외에 포함되는 배합 성분은 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기안료, 무기안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제 및 정제수로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상일 수 있다.In addition, the composition of the present invention may be combined with the components contained in a general cosmetic composition, if necessary, together with the extract of Echinacea. The blending components contained in the composition may be selected from the group consisting of a preservative component, a moisturizer, an emollient, a surfactant, an organic pigment, an inorganic pigment, an organic powder, an ultraviolet absorber, an antiseptic, a bactericide, an antioxidant, a plant extract, A blood circulation accelerator, a cold agent, an antiperspirant agent, and purified water.

이하, 구체적인 실시예를 통해 본 발명을 보다 구체적으로 설명한다. 하기 실시예는 본 발명의 이해를 돕기 위한 예시에 불과하며, 본 발명의 범위가 이에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described more specifically by way of specific examples. The following examples are provided to aid understanding of the present invention, and the scope of the present invention is not limited thereto.

실시예Example

1. 이팝나무 추출물의 제조1. Manufacture of apple tree extract

[실시예 1][Example 1]

건조된 이팝나무의 잎 500g에 4L의 80% 메탄올으로 3회 환류 추출한 후, 15℃에서 1일간 침적시켰다. 그 후, 추출물을 여과포를 이용하여 여과한 후 원심분리를 통해 잔사와 여액을 분리하고, 분리된 여액을 감압 농축하여 추출물을 수득하였다.The extract was refluxed three times with 4 L of 80% methanol in 500 g of dried leafy leaves, and then immersed at 15 캜 for 1 day. Thereafter, the extract was filtered using a filter cloth, and the residue and the filtrate were separated by centrifugation, and the separated filtrate was concentrated under reduced pressure to obtain an extract.

[실시예 2][Example 2]

상기 실시예 1과 동일한 방법으로 추출물을 수득하되, 이팝나무 잎 대신 이팝나무 열매를 사용하였다.The extract was obtained in the same manner as in Example 1 except that the nip tree fruit was used instead of the euphorbiaceae leaf.

[실시예 3] [Example 3]

상기 실시예 1과 동일한 방법으로 추출물을 수득하되, 이팝나무 잎 대신 이팝나무 줄기를 사용하였다.The extract was obtained in the same manner as in Example 1, except that an apple tree trunk was used instead of the lobster.

[실시예 4] [Example 4]

상기 실시예 1과 동일한 방법으로 추출물을 수득하되, 이팝나무 잎 대신 이팝나무 수피를 사용하였다.The extract was obtained in the same manner as in Example 1 except that the bark bark was used instead of the bark.

[실시예 5][Example 5]

이팝나무로부터 수득한 수액 10ℓ를 80℃의 열풍으로 분무 건조시켜서 추출물을 수득하였다.10 L of the sap obtained from the poppy tree was spray-dried with hot air at 80 캜 to obtain an extract.

2. 항산화 효과 시험(DPPH test)2. Antioxidant effect test (DPPH test)

상기 실시예 1 내지 5로부터 수득한 추출물들에 대한 항산화 효과 시험은 DPPH(1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl) 활성산소제거 시험으로 측정하였다. The antioxidative effects of the extracts obtained from Examples 1 to 5 were measured by DPPH (1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl) active oxygen scavenging test.

DPPH 활성산소제거 시험은 유리 라디칼인 DPPH의 환원에 의해 발생되는 흡광도의 변화를 통해서 황산화능을 평가하는 방법이다. 100μM(in 에탄올) DPPH 용액 190㎕에 하기 표 1의 시험물질을 각각 10㎕ 넣어 반응액을 만들고 37℃에서 30분간 반응시킨 후 540nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때, 트롤록스는 대조 시료로 사용하였다. 실시예 1 내지 5 및 트롤록스의 DPPH 분석 결과를 하기 표 1에 나타내었으며, 여기서 IC50는 첨가한 시료에 의해 흡광도가 50% 감소했을 때의 시료 농도이다.The DPPH free radical scavenging test is a method of evaluating the sulfur oxidizing ability through the change of the absorbance generated by the reduction of the free radical DPPH. 10 μl each of the test substances listed in Table 1 below was added to 190 μl of 100 μM (in ethanol) DPPH solution to make a reaction solution, reacted at 37 ° C. for 30 minutes, and the absorbance was measured at 540 nm. At this time, Trolox was used as a control sample. The DPPH analysis results of Examples 1 to 5 and Trolox are shown in Table 1 below, wherein IC50 is a sample concentration when the absorbance is reduced by 50% by the added sample.

시료sample IC50 (ppm)IC50 (ppm) 실시예 1Example 1 7575 실시예 2Example 2 6464 실시예 3Example 3 4545 실시예 4Example 4 6565 실시예 5Example 5 3535 트롤록스Trolox 6565

상기 표 1에서 확인할 수 있는 바와 같이, 실시예 1 내지 5는 항산화제로 사용되는 트롤록스와 유사하거나 더 낮은 농도에서 유기 라디칼의 산화를 억제한다. 따라서, 본 발명에 따른 이팝나무 추출물이 우수한 항산화 효과를 가짐을 확인했다.As can be seen in Table 1 above, Examples 1-5 inhibit the oxidation of organic radicals at similar or lower concentrations than Trolox used as an antioxidant. Accordingly, it was confirmed that the extract of Echinacea according to the present invention has an excellent antioxidative effect.

3. 피부 노화 방지 효과 시험- 콜라겐 생합성 촉진 효과3. Anti-aging effect test - Promoting collagen biosynthesis

상기 실시예 1 내지 5로부터 수득한 추출물들에 대한 피부 노화방지 효과 시험은 콜라겐 생합성 촉진 효과 시험으로 측정하였다. The anti-aging effects of the extracts obtained from Examples 1 to 5 were measured by a collagen biosynthesis accelerating effect test.

인간섬유아세포(fibroblast)(PromoCell, Germany)를 24공(well)에 1공 당 105개씩 파종(seeding)한 후 90% 정도 자랄 때까지 배양하였다. 이를 24시간 동안 무혈청 DMEM(Dulbecco's modified Eagle's medium) 배지로 배양한 후, 상기 무혈청 배지에 하기 표 2의 시험물질을 각각 10-4 몰농도로 처리하고 24시간 동안 이산화탄소 배양기에서 배양하였다. 이때, 토코페롤과 EGCG(Epigallocatechin-3-gallate)는 양성 대조 시료로 사용하였다. 배양된 배지의 상층액을 떠내어 프로콜라겐 형(I) ELISA 키트(proc/; ollagen type(I))를 이용하여 프로콜라겐(procollagen)의 증감여부를 측정했다. 실시예 1 내지 5, 토코페롤 및 EGCG의 분석 결과를 하기 표 2에 나타내었으며, 여기서 합성능(%)은 비처리군을 100%로 하여 대비한 것이다.Human fibroblasts (PromoCell, Germany) were seeded at 10 5 per well in 24 wells and cultured until they grew to about 90%. The cells were cultured in a serum-free DMEM (Dulbecco's modified Eagle's medium) for 24 hours, and then the test substances in the following Table 2 were treated at 10 -4 mol / L in the serum-free medium and cultured in a carbon dioxide incubator for 24 hours. At this time, tocopherol and EGCG (Epigallocatechin-3-gallate) were used as positive control samples. The supernatant of the cultured medium was lifted and the procolagen (I) ELISA kit (proc / ollagen type (I)) was used to measure the increase or decrease of procollagen. The analytical results of Examples 1 to 5, tocopherol and EGCG are shown in Table 2 below, wherein the combined performance (%) is obtained by setting the untreated group to 100%.

시료sample 합성능 (%)Sum performance (%) 실시예 1Example 1 148148 실시예 2Example 2 155155 실시예 3Example 3 160160 실시예 4Example 4 145145 실시예 5Example 5 140140 토코페롤Tocopherol 118118 EGCGEGCG 125125 비처리군Untreated group 100100

상기 표 2에서 확인할 수 있는 바와 같이, 실시예 1 내지 5는, 양성 대조군인 토코페롤과 EGCG보다, 콜라겐의 생합성 촉진 효과가 우수하다. 따라서, 본 발명에 따른 이팝나무 추출물은 콜라겐 생합성을 효과적으로 촉진시킴으로써 우수한 피부 노화 방지 효과를 가짐을 확인했다.As can be seen from the above Table 2, Examples 1 to 5 are superior to the positive control groups of tocopherol and EGCG in promoting collagen biosynthesis. Accordingly, it has been confirmed that the extract of Echinosophora koreensis according to the present invention effectively promotes collagen biosynthesis, thereby having an excellent anti-aging effect on skin.

4. 피부 노화 방지 효과 시험- 콜라게나아제 발현 억제 효능 측정4. Anti-aging effect test - Measurement of inhibitory effect on collagenase expression

상기 실시예 1 내지 5로부터 수득한 추출물들에 대한 피부 노화방지 효과 시험은 콜라게나아제 발현 억제 효과 시험으로 측정하였다. The anti-aging effects of the extracts obtained from Examples 1 to 5 were measured by a collagenase inhibitory effect test.

2.5%의 우태아 혈청이 함유된 DMEM 배지가 들어있는 96공 평판배양기(96-well microtiter plate)에 인간의 섬유아세포를 5,000 세포/공(well)이 되도록 넣고, 90% 정도 자랄 때까지 배양하였다. 그 후 무혈청 DMEM 배지에서 24시간 배양하고, 상기 무혈청 DMEM 배지에 하기 표 3의 시험물질을 각각 10-4 몰농도로 24시간 동안 처리한 후, 세포배양액을 채취하였다. 이때, 토코페롤과 EGCG는 양성 대조시료로 사용하였다.Human fibroblasts were plated at 5,000 cells / well in a 96-well microtiter plate containing DMEM medium containing 2.5% fetal bovine serum, and cultured to a growth of about 90% . Then, the cells were cultured in a serum-free DMEM medium for 24 hours, treated with the test substances shown in the following Table 3 at a concentration of 10 -4 mol for 24 hours in the serum-free DMEM medium, and then the cell culture medium was collected. At this time, tocopherol and EGCG were used as positive control samples.

1차 콜라게나아제 항체가 균일하게 도포된 96-공 평판(96-well plate)에 채취된 세포 배양액을 넣고 3시간 동안 항원-항체 반응을 항온조에서 실시하였다. 3시간 후 발색단이 결합된 2차 콜라겐 항체를 96-공 평판(96-well plate)에 넣고 다시 15분간 반응시켰다. 15분 후 발색유발물질을 넣어 실온에서 15분간 발색을 유발시킨 후, 1M 황산을 넣어 반응(발색)을 중지시켰다. 이때, 반응액의 색깔은 노란색을 띠며 반응 진행의 정도에 따라 노란색의 정도가 다르게 나타났다. 노란색을 띠는 96-공 평판(96-well plate)의 흡광도를 흡광계(미국 아머샴파마샤 사)를 이용하여 405nm에서 측정하였고, 하기 수학식 1에 의해 콜라게나아제의 발현 정도를 계산하였으며, 여기서 비처리군의 반응 흡광도를 대조군의 흡광도로 하였다.Antibody-antibody reaction was performed in a thermostatic chamber for 3 hours by adding the cell culture medium collected in a 96-well plate uniformly coated with primary collagenase antibody. After 3 hours, the second collagen antibody bound to the chromophore was placed in a 96-well plate and reacted for another 15 minutes. After 15 minutes, the color development inducing substance was added to induce color development at room temperature for 15 minutes, and 1M sulfuric acid was added to stop the reaction (color development). At this time, the color of the reaction solution was yellow and the degree of yellow was different according to the progress of the reaction. The absorbance of a yellow 96-well plate was measured at 405 nm using a spectrophotometer (Amersham Pharmacia, USA) and the degree of expression of collagenase was calculated by the following equation , Where the reaction absorbance of the untreated group was determined as the absorbance of the control group.

[수학식][Mathematical Expression]

콜라게나아제 발현 정도(%) = A/B X 100Collagenase expression level (%) = A / B X 100

A: 시험물질이 처리된 세포군의 흡광도A: absorbance of the cell group treated with the test substance

B: 대조군의 흡광도B: Absorbance of the control group

실시예 1 내지 5, 토코페롤 및 EGCG의 콜라게나아제 발현 정도를 하기 표 3에 나타내었으며, 여기서 콜라게나아제 발현 정도(%)는 비처리군의 콜라게나아제 발현 정도를 100%로 하여 대비한 것이다.The degree of collagenase expression of Examples 1 to 5, tocopherol and EGCG is shown in Table 3 below, wherein the degree of collagenase expression (%) was prepared by setting the degree of collagenase expression in the untreated group to 100% .

시료sample 콜라게나아제 발현 정도 (%)Expression level of collagenase (%) 실시예 1Example 1 3030 실시예 2Example 2 3636 실시예 3Example 3 4646 실시예 4Example 4 4444 실시예 5Example 5 2626 토코페롤Tocopherol 7575 EGCGEGCG 6060 비처리군Untreated group 100100

상기 표 3에서 확인할 수 있는 바와 같이, 실시예 1 내지 5는, 양성 대조군인 토코페롤과 EGCG보다, 콜라게나아제 발현 억제 효과가 우수하다. 따라서, 본 발명에 따른 이팝나무 추출물은 콜라게나아제의 발현을 효과적으로 억제함으로써 우수한 피부 노화 방지능을 가짐을 알 수 있었다.As can be seen in Table 3, Examples 1 to 5 are superior to collagenase expression inhibiting effect than tocopherol and EGCG, which are positive control groups. Therefore, it was found that the extract of Echinochloa crus-galli according to the present invention effectively inhibited the expression of collagenase, thereby having excellent skin aging-preventing ability.

5. 미백 효과 시험 5. Whitening effect test

상기 실시예 1 내지 5로부터 수득한 추출물들에 대한 미백 효과 시험은 쥐의 색소세포를 이용한 멜라닌 생성 억제 효과 시험으로 측정하였다.The whitening effect tests on the extracts obtained from Examples 1 to 5 were performed by a test for inhibiting melanin production using mouse pigment cells.

C57BL/6 마우스 유래의 쥐의 색소세포(Mel-Ab 세포)(Dooley, T.P. et al, Skin pharmacol, 7, pp 188-200)를 DMEM 배지에 37℃, 5% 이산화탄소의 조건에서 배양하였다. 상기 DMEM 배지는 10% 우태반 혈청, 100nM 2-O-테트라데카노일포르빌(tetradecanoyphorbol)-13-아테이트, 1nM 콜레라 독소(cholera toxin)을 첨가한 배지이다. 상기 DMEM 배지에서 배양된 상기 Mel-Ab 세포를 0.25% 트립신-EDTA로 떼어내고, 24-웰 플레이트에 105세포/웰(cells/well)의 농도로 세포를 배양하였다. 그 후, 이틀째부터 3일 연속으로 하기 표 4의 시험물질을 각각 10ppm로 가하여 배양하였다. 이때, 하이드로퀴논은 양성 대조군으로 사용하였다. 배양이 끝나면 배양액을 제거하고 PBS로 세척한 후, 1N 수산화나트륨으로 세포를 녹여 400nm에서 흡광도를 측정하였고, 하기 수학식 3에 의해 멜라닌 생성 억제율(%)을 계산하였으며, 여기서 비처리군의 흡광도를 대조군의 흡광도로 하였다. 계산 결과를 표 4에 나타내었다(Dooley의 방법).(Dooley, TP et al, Skin pharmacol, 7, pp 188-200) derived from C57BL / 6 mice were cultured in DMEM medium at 37 ° C under 5% carbon dioxide. The DMEM medium is a medium supplemented with 10% fetal bovine serum, 100 nM 2-O-tetradecanoyphorbol-13-acetate, and 1 nM cholera toxin. The Mel-Ab cells cultured in the DMEM medium were removed with 0.25% trypsin-EDTA, and the cells were cultured at a concentration of 10 5 cells / well in a 24-well plate. Thereafter, the test substances of Table 4 were added at 10 ppm each for 3 consecutive days from the second day, followed by incubation. At this time, hydroquinone was used as a positive control. At the end of the incubation, the culture medium was removed, washed with PBS, and the cells were lysed with 1 N sodium hydroxide to measure the absorbance at 400 nm. The inhibition rate (%) of melanin production was calculated by the following equation (3) Absorbance of the control group. The calculation results are shown in Table 4 (Dooley's method).

[수학식 3]&Quot; (3) "

Figure pat00001
Figure pat00001

시료sample 멜라닌 생성 억제율 (%)Melanin production inhibition rate (%) 실시예 1Example 1 6868 실시예 2Example 2 5959 실시예 3Example 3 5858 실시예 4Example 4 6767 실시예 5Example 5 7474 하이드로퀴논Hydroquinone 5353 비처리군Untreated group 00

상기 표 4에서 확인할 수 있는 바와 같이, 실시예 1 내지 5는, 하이드로퀴논 보다, 멜라닌 생성 억제 효과가 우수하다. 따라서, 본 발명에 따른 이팝나무 추출물은 멜라닌 생성을 효과적으로 억제시킴으로써 우수한 피부 미백 효과를 가짐을 확인했다.As can be seen from the above Table 4, Examples 1 to 5 are superior to hydroquinone in the effect of inhibiting melanin formation. Thus, it has been confirmed that the extract of Echinacea according to the present invention effectively inhibits the production of melanin, thereby having an excellent skin whitening effect.

6. 보습 효과 시험 6. Moisturizing effect test

상기 실시예 1 내지 5로부터 수득한 추출물들에 대한 보습 효과 시험은 각질형성세포 분화 촉진 효과 시험으로 측정하였으며, 구체적으로, 각질형성세포의 분화시 생성되는 CE(Cornified Envelop)양을 흡광도를 이용하여 측정하였다.Moisturizing effect tests on the extracts obtained in Examples 1 to 5 were measured by a test for promoting keratinocyte differentiation. Specifically, the amount of CE (cornified envelope) produced upon differentiation of keratinocytes was measured using absorbance Respectively.

신생아의 표피로부터 분리해 일차 배양한 사람의 각질형성세포를 배양용 플라스크에 넣어 바닥에 부착시킨 후, 하기 표 5의 시험물질을 배양액에 각각 1ppm 농도로 처리한 후 세포가 바닥 면적의 70~80% 정도 자랄 때까지 5일간 배양하였다. 이때, 저칼슘(0.03mM) 처리군과 고칼슘(1.2mM) 처리군은 각각 음성 대조군 또는 양성 대조군으로 사용하였다. 상기 배양한 세포를 수확하여 PBS(Phophate buffered saline)로 세척한 후, 2% SDS(sodium dodecyl sulfate)와 20mM 농도의 DTT(Dithiothreitol)를 함유한 10mM 농도의 트리스-염산 완충액(Tris-HCl, pH 7.4) 1ml를 가하여 소니케이션(sonication)을 수행하고 난 후, 보일링(boiling)하였다. 이를 원심분리하여 분리한 침전물을 다시 PBS 1ml에 현탁시켜 340nm에서 흡광도를 측정하였다. 이와 별도로 상기 소니케이션 후의 용액을 일부 취하여 단백질 함량을 측정하고, 세포 분화 정도 평가시 기준으로 삼았으며, 그 결과를 하기 표 5에 나타내었다.The keratinized cells of the primary cultures isolated from the epidermis of the newborn infants were placed in a culture flask and adhered to the bottom. The test substances in the following Table 5 were each treated at a concentration of 1 ppm in the culture medium, % ≪ / RTI > until growth. At this time, low calcium (0.03 mM) and high calcium (1.2 mM) treatment groups were used as negative control or positive control, respectively. The cultured cells were harvested and washed with PBS (Phosphate Buffered Saline). Then, the cells were washed with 10 mM Tris-HCl buffer (Tris-HCl, pH (1)) containing 2% SDS (sodium dodecyl sulfate) and 20 mM DTT (Dithiothreitol) 7.4) was added to perform sonication, and then boiling was performed. The precipitate separated by centrifugation was suspended again in 1 ml of PBS and absorbance was measured at 340 nm. Separately, a part of the solution after the sonication was taken to measure the protein content and used as a standard for assessing the degree of cell differentiation. The results are shown in Table 5 below.

시험물질Test substance 각질형성세포에서의 분화능(%)The ability to differentiate in keratinocytes (%) 저칼슘(0.03mM) 용액 (음성 대조군)Low calcium (0.03 mM) solution (negative control) 100100 고칼슘(1.2mM) 용액 (양성 대조군)High calcium (1.2 mM) solution (positive control) 210210 실시예 1Example 1 146146 실시예 2Example 2 175175 실시예 3Example 3 142142 실시예 4Example 4 131131 실시예 5Example 5 126126

상기 표 5에서 확인할 수 있는 바와 같이, 실시예 1 내지 5는 각질형성세포에서의 분화를 촉진한다는 것을 확인했다. 따라서, 본 발명에 따른 이팝나무 추출물은 보다 뛰어난 피부 장벽 기능의 강화와 피부 보습 효과를 가짐을 확인했다.As shown in Table 5, it was confirmed that Examples 1 to 5 promoted differentiation in keratinocytes. Therefore, it has been confirmed that the extract of Echinacea according to the present invention has enhanced skin barrier function and skin moisturizing effect.

이상에서 본 발명의 실시예에 대하여 상세하게 설명하였지만 본 발명의 권리범위는 이에 한정되는 것은 아니고, 청구범위에 기재된 본 발명의 기술적 사상을 벗어나지 않는 범위 내에서 다양한 수정 및 변형이 가능하다는 것은 당 기술분야의 통상의 지식을 가진 자에게는 자명할 것이다.While the present invention has been particularly shown and described with reference to exemplary embodiments thereof, it is to be understood that the invention is not limited to the disclosed exemplary embodiments, but, on the contrary, It will be obvious to those of ordinary skill in the art.

Claims (7)

항산화용, 피부 노화 방지용, 미백용 또는 보습용 이팝나무(Chionanthus retusa) 추출물.
Antioxidant, anti-aging, whitening or moisturizing extract of Chionanthus retusa.
제 1항에 있어서,
상기 추출물은 잎, 꽃잎, 줄기, 수피, 열매, 종자 및 수액으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상으로부터 추출된 이팝나무 추출물.
The method according to claim 1,
Wherein the extract is extracted from at least one selected from the group consisting of leaf, petal, stem, bark, fruit, seed and sap.
이팝나무 추출물을 유효 성분으로 포함하는 화장료 조성물.
A cosmetic composition comprising an extract of Euphorbiaceae as an active ingredient.
제3항에 있어서,
상기 이팝나무 추출물은 잎, 꽃잎, 줄기, 수피, 열매, 종자 및 수액으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상으로부터 추출된 화장료 조성물.
The method of claim 3,
The cosmetic composition as described above is obtained from at least one selected from the group consisting of leaves, petals, stems, bark, fruits, seeds and sap.
제3항에 있어서,
상기 이팝나무 추출물은, 전체 조성물의 중량을 기준으로, 0.0001 내지 50 중량%의 함량으로 포함되는 화장료 조성물.
The method of claim 3,
The cosmetic composition according to claim 1, wherein the extract is from 0.0001 to 50% by weight based on the weight of the total composition.
제3항에 있어서,
상기 조성물은 유연화장수, 영양화장수, 마사지크림, 영양크림, 팩, 젤, 피부 점착 타입, 경피 투여 타입, 로션, 연고, 겔, 크림, 패취 또는 분무제 제형으로 제형화되는 화장료 조성물.
The method of claim 3,
Wherein the composition is formulated into a formulation of a softening agent, a nutritional lotion, a massage cream, a nutritional cream, a pack, a gel, a skin adhesive type, a transdermal type, a lotion, an ointment, a gel, a cream, a patch or a spray.
제3항에 있어서,
상기 조성물은 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기안료, 무기안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제 및 정제수로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 더 포함하는 화장료 조성물.
The method of claim 3,
The composition may further comprise at least one selected from the group consisting of a preservative, a moisturizer, an emollient, a surfactant, an organic pigment, an inorganic pigment, an organic powder, an ultraviolet absorbent, an antiseptic, a bactericide, an antioxidant, a plant extract, a pH adjuster, Wherein the cosmetic composition further comprises at least one selected from the group consisting of cold agents, antiperspirants and purified water.
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