KR20170017845A - 국소 화장품 조성물들 - Google Patents

Abstract

본 발명은 센텔라 아시아티카 추출물, 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물 또는 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물, 헤스피리딘 메틸 칼콘, 피숨 사티붐 추출물, 시트러스 그랜디스 껍질 추출물, 매그놀리아 비온디 꽃 추출물, 디펩타이드-2, 팔미토일 테트라펩타이드-7, 트리펩타이드-1, 및 선택적으로 센텔라 아시아티카 분열조직 세포 배양물을 포함하는 국소 조성물 및 이들의 사용 및 생성 방법들에 유용한 방법들 및 조성물들에 관한 것이다.

Description

국소 화장품 조성물들{TOPICAL COSMETIC COMPOSITIONS}

본 출원은 2015년 8월 7일 출원된 미국 임시 출원 번호 62/202,568의 우선권을 주장하고, 이의 내용은 본 출원에 참조로서 통합된다.

본 발명은 일반적으로 피부의 상태 및/또는 시각적 외관(appearance)을 개선시키는데 사용될 수 있는 국소 조성물들에 관한 것이다. 일 실시예에서, 본 발명의 조성물들은 예를 들어, 피부 경도(firmness) 및 탄력(elasticity) 증가, 피부 결(texture) 및 투명도(clarity) 개선, 피부의 염증(inflammation) 감소, 피부의 색소 침착 감소, 피부의 붉은 반점들(red blotches) 감소, 미세주름(fine lines) 및/또는 주름(wrinkles) 감소, 눈 밑 부종(under-eye puffiness) 감소, 눈 밑 다크써클(under-eye dark circles) 감소, 주름(crepiness) 감소, 및 처짐(sagging) 감소, 피부 밝게함, 주사(rosacea) 치료, 눈가의 전반적인 외관을 개선, 및 피부 및/또는 모발을 촉촉하게 하는 성분들의 조합물에 포함될 수 있다. 성분들의 조합물은 광범위한 제품 제형들(예를 들면, 세럼, 아이크림, 토너, 젤, 마스크, 등.)에 포함될 수 있다.

노화, 부정적인 환경 요인들에 만성적 노출, 영양실조, 피로, 등은 피부의 시각적 외관, 물리적 특성들(physical properties), 또는 생리적인 기능들을 시각적으로 바람직하지 않은(undesirable) 것으로 간주하는 방식으로(in ways that are considered) 변화시킬 수 있다. 가장 눈에 띄고 명백한 변화들은 미세주름 및 주름의 발달, 탄력의 상실, 증가된 처짐, 경도의 상실, 컬러 균등도(color evenness) 또는 톤(tone)의 상실, 거친 표면 결, 및 얼룩덜룩한 색소 침착을 포함한다. 피부를 노화시키거나 만성 환경적 손상을 견디는 것으로 발생하는 덜 명백하지만 측정 가능한 변화들은 세포 및 조직 활력의 일반적인 감소, 세포 복제율(replication rates) 감소, 감소된 피부의 혈액 흐름, 감소된 수분 함량, 구조 및 기능에서 축적된 에러들(errors), 일반적 생화학 경로들의 정상적 조절의 변화(alterations), 및 피부 그 자체의 개조(remodel) 및 복구 능력의 감소를 포함한다. 외관 및 피부 기능들의 많은 변화들이 피부의 외부 표피(epidermal)층에서의 변화들에 의해 야기되는 반면, 다른 것들은 더 아래쪽의 진피(dermis)에서의 변화들에 의해 야기된다.

많은 요인들이 피부 노화 및 외관의 노화, 예를 들면, 사람의 실제 나이, 환경적 요인들의 노출량 (예를 들면, 햇빛, 오염, 화학 물질, 연기, 등.), 및 사람이 그들의 피부를 얼마나 잘 신경썼는지와 같은, 에 기여한다. 특히, 피부 노화는 두 과정에 관한 것이다 - 내적 노화(intrinsic aging), 이것은 자연적 과정 및 유전적 영향들에 관련되고, 및 외적 노화(extrinsic aging), 이것은 환경적 요인들로 인해 축적된 손상이다.

세포들 및 피부에서 내적 노화 과정은 생화학적 경로들을 유지하는 피부의 적절한 기능의 상실에 관련될 수 있다. 이러한 경로들은 피부에서 산화/환원 환경의 균형, 세포 분열 및 세포막 보전(integrity)의 조절, 및 피부의 수분 균형 유지를 조절할 수 있다. 피부의 적절한 기능의 상실은 피부 경도의 상실, 증가된 피부 불균일(unevenness), 증가된 미세주름 및 주름, 및 건조 피부를 야기할 수 있다. 일례로, 내적 노화는 단백질 라민 A(Lamin A)의 기능에 기인할 수 있고, 이것은 이것이 뉴클레아제(nuclease)의 막 구조체를 제공하므로 세포 분열 동안 중요하다. 기능성 라민 A 없이, 핵 막하층(nuclear lamina)은 구조적 지지체가 결핍된 비정상 핵막(nuclear envelope)을 생성한다. 이것은 비정상적인 형태의 핵막을 유도할 수 있고 이는 세포분열을 제한한다. 라민 A의 약화된(muted) 형태는, 프로저린(progerin)으로 알려짐, 질병 조로증(progeria)과 관련되고 여기서 환자들은 가속화된 노화로부터 고통 받고, 피부에서 노화의 사인들(signs)은 빠르면 2세에 나타나며, 그리고 급격히 짧은 수명을 갖는다(A muted form of Lamin A, known as progerin, is associated with the disease progeria where patients suffer from accelerated aging, displaying signs of aging in skin as early as 2 years of age, and have a sharply shortened lifespan).이것, 및 다른 피부의 적절한 기능의 상실들은 피부 경도의 상실, 증가된 피부 불균일, 증가된 미세주름 및 주름, 증가된 산화 손상, 및 건조 피부를 유도할 수 있다.

외적 요인들은 자외선, 자극물(irritants), 및 오염 노출을 포함할 수 있다. 자외선은, 해 노출 또는 자외선 램프(예를 들어, 태닝 베드(tanning beds))의 사용을 통해, 산화 스트레스, 염증, 멜라닌의 생성, 및 심지어 피부 손상을 유도하는 유전적 돌연변이들을 포함할 수 있다.

자유 라디컬 형성을 통한 산화 스트레스의 축적은 피부 단백질들을 손상시킬 수 있고 이것은 피부 노화로 이어지며, 이는 탄력의 상실, 피부 단백질들(dermal proteins)의 상실, 주름(lines) 및 주름(wrinkles), 및 비정상적 색소 침착을 포함한다.

염증은 또한 UV 및 환경적 손상의 특징이다. 염증은 TNF-α, VEGF, IL-1β, IL-6, 등과 같은 염증성 사이토카인들(cytokines)이나 사이클로옥시게나아제(cyclooxygenase) (예를 들면, COX-1)와 같은 염증성 경로에 기여하는 효소들을 통해 발생할 수 있다. 염증이 지속되는 동안에, 기질 금속단백질분해효소(matrix metalloproteinase)-1 (MMP1), 기질 금속단백질분해효소-3 (MMP3), 기질 금속단백질분해효소-9 (MMP9)와 같은 효소들이 피부 단백질들의 파괴(breakdown)에 관련되고, 이것은 면역 세포들이 이동하도록 한다. 라미닌(laminin), 엘라스틴(elastin), 및 콜라겐(collagen)과 같은 피부 단백질들에서의 이 파괴는 피부 노화를 유도할 수 있다.

외적 요인들에 노출될 때, 케라티노사이트(keratinocyte) (세포의 가장 바깥쪽 세포)는 신호분자들을, 예를 들면, α-멜라노사이트-자극 호르몬(α-melanocyte-stimulating hormone) (α-MSH) 및 염증성 사이토카인들과 같은, 방출한다. 이들 호르몬들은 멜라노사이트들이 멜라닌을 생성하도록 한다 (멜라닌 생성). 전형적인 색소 침착은 피부의 고르고(even), 균일한(uniform) 착색에 의해 특징된다. 그러나, 외적 요인들을 통한 멜라닌 생성은 피부의 색의 변화들을 야기할 수 있다. 예를 들면, 사람의 피부는 누르스름한 톤(sallow tone), 과색소 침착된 스팟들(hyperpigmented spots), 노인성흑점(senile lentigo)과 같은 다크 스팟들(dark spots) 또는 원치 않는 주근깨, 기미(liver spots), 기미(melasma), 갈색 또는 검버섯(brown or age spots), 백반(vitiligo), 일광화상(sunburn) 색소 침착, 찰과상(abrasion)에 의한 염증 후 과색소 침착(post-inflammatory hyperpigmentation), 화상(burns), 상처(wounds) 또는 피부염(dermatitis), 광독성 반응(phototoxic reaction) 및 다른 유사 저분자, 고정된 색소 병변(pigmented lesions)을 가질 수 있다. 이들 영역들을 밝게하거나 피부의 불규칙적으로 침착된 영역들의 외관을 안정시키는 것이 종종 바람직하다. 개인들(individuals)은 또한 흼(fairness)을 증가시키거나 피부의 색소 침착의 전반적인 수준을 감소시키고 싶어할 수 있다(may wish to). 어느 경우에도(In either case), 과색소 침착은 일반적으로 미용적으로 바람직하지 않다고 생각되고 개인들은 종종 피부를 밝게하고자 한다(often wish to). 기존의 탈색(depigmenting)제들, 예를 들면, 하이드로퀴논(hydroquinone), 코르티코스테로이드(corticosteroids), 및 코지산(kojic acid)은 장기간 노출함에 따른 몇 가지 안전 문제들을 제기할 수 있다 (예를 들면, 조직흑갈병(ochronosis), 위축(atrophy), 발암(carcinogenesis), 및 다른 부분 또는 전신 부작용들) (Talwar 1993).

외적 요인들은 또한 피부의 수분을 감소시킬 수 있다. 화학물질, 용매, 세척액(washing), 화장품, 직물(fabrics), 또는 건조 환경에 노출은 피부가 수분을 잃을 수 있는 많은 방법들 중 일부이다. 수분의 상실은 피부에서 미세주름 및 주름 또는 파괴로 이어질 수 있다. 피부 및/또는 모발의 수분 유지는 피부 및 모발에서 일부 원치 않은 변화들을 극복하는데 도움이 된다. 그러나, 피부의 수분 유지는 거친(harsh) 외적 요인들에 매일 노출로 어려울 수 있다. 보습제(Moisturizers)는 이러한 어려움들을 해결하려고 시도하기 위해 설계되었다. 피부 및 모발 보습제는 피부의 외부층들 (표피)을 부드럽고 더 유연하게(pliable) 만들기 위해 특별히 설계된 화학 약품들의 복합 혼합물들이다. 그들은 증발은 감소시켜 피부의 수화 (물 함량)를 증가시킨다. 자연적으로 발생하는 피부 지질들 및 스테롤들, 인공적 또는 자연적 오일들뿐만 아니라, 습윤제(humectants), 연화제(emollients), 윤활유(lubricants) 등, 은 상업적 피부 보습제의 조성물의 일부분일 수 있다. 그들은 일반적으로 화장품 및 치료 용도용 상업 제품으로서 구매 가능하지만, 또한 일반적인 제약 성분들을 사용하여 집에서 만들어질 수도 있다. 그러나, 보습제는 완벽하지 않다. 보습제와 관련된 일부 문제들은 불쾌한 촉감(tactile) 특성들 (예를 들면, 무거운, 기름진, 또는 끈적 끈적한 느낌), 불안정성(instability), 피부-자극, 또는 불충분한 보습 능력들을 포함한다.

내적 및 외적 요인들의 조합은 결국 노화의 가시적인 사인들로 이어진다. 현재 시장 제품들 또한 효과적으로 노화의 원인들 또는 사인들 또는 피부에서 외적 요인들의 효과를 해결하지 못하고/하거나 그들은 피부 자극 효과들을 갖는다. 예를 들어, 현재 제품들은 피부 경도의 상실, 색소 침착 문제들, 미세주름 또는 주름의 외관, 및/또는 수분의 상실을 해결하지 못할 수 있다.

하기 참조들은, 본 명세서에 기재된 예시적 절차(exemplary procedural) 또는 다른 세부 사항을 부가 제공하는 정도로, 명확히 참조로서 본 명세서에 통합되었다. Cosmetic Ingredient Dictionary, Third Edition, CTFA, 1982 International Cosmetic Ingredient Dictionary, Fourth edition, CTFA, 1991 International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook, Tenth Edition, CTFA, 2004 International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook, Twelfth Edition, CTFA, 2008

본 발명자는 피부의 외관 및/또는 상태를 변화시키는 외적 요인들에 노출 및 노화의 효과들의 일부를 중화하기 위한 현재 제품들과 관련된 문제들에 대한 해결책을 확인했다. 해결책은 성분들의 조합물에 있고, 이것은 센텔라 아시아티카(Centella asiatica) 추출물, 센텔라 아시아티카 분열조직 세포 배양물(meristem cell culture), 매그놀리아 그랜디플로라(Magnolia grandiflora) 껍질(bark) 추출물, 매그놀리아 오피시날리스(Magnolia officinalis) 껍질 추출물, 피숨 사티붐(Pisum sativum) 추출물, 시트러스 그랜디스(Citrus grandis) 껍질(peel) 추출물, 매그놀리아 비온디(Magnolia biondii) 꽃 추출물, 트리펩타이드-1(tripeptide-1), 및/또는 헤스피리딘 메틸 칼콘(hesperidin methyl chalcone), 디펩타이드-2(dipeptide-2), 및팔미토일 테트라펩타이드-7(palmitoyl tetrapeptide-7)의 조합물의 임의의 조합물일 수 있고 이것은 효과적으로 피부 경도 및 탄력을 증가시키고, 피부 결 및 투명도를 개선하며, 피부의 염증을 감소시키고, 피부의 색소 침착을 감소시키며, 피부에 붉은 반점들을 감소시키고, 미세주름들 및/또는 주름들을 감소시키며, 눈 밑 부종을 감소시키고, 눈 밑 다크 써클을 감소시키며, 주름(crepiness)을 감소시키고, 그리고 처짐을 감소시키며, 피부를 밝게하고, 주사를 치료하며, 그리고 눈가 영역의 전반적인 영역을 개선하기 위한 국소 피부 조성물을 생성하는데 사용될 수 있다. 성분들의 조합물은 효과적으로 히알루론산(hyaluronic acid) 합성을 증가시키고, 라미닌(laminin) 자극을 증가시키며, 피브로넥틴(fibronectin) 자극을 증가시키고, 콜라겐 자극을 증가시키며, 엘라스타아제(elastase)를 억제하고, MMP1을 억제하며, 멜라닌 생성을 억제하고, 티로시나아제(tyrosinase)를 억제하며, 내피 관(endothelial tube) 형성을 억제하고, TNF-α를 억제하며, IL-1β를 억제하고, IL-6를 억제하며, IL-10을 억제하고, IL-2를 억제하며, COX-1을 억제하고, VEGF를 억제하며, 그리고 항산화 능력(antioxidant capacity)을 제공하기 위한 국소 피부 조성물을 생성하는데 이용될 수 있다.

일 측면에서, 본 발명은 국소 피부 조성물을 개시한다. 일 실시예에서 상기 국소 피부 조성물은 센텔라 아시아티카 추출물, 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물 또는 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물, 헤스피리딘 메틸 칼콘, 피숨 사티붐, 매그놀리아 비온디 꽃 추출물, 디펩타이드-2, 말미토일 테트라펩타이드-7, 및 트리펩타이드-1의 임의의 하나, 임의의 조합, 또는 모두를 포함한다. 일부 측면들에서, 상기 센텔라 아시아티카 추출물은 에탄올 추출물(ethanolic extract)이다. 일부 측면들에서, 상기 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물은 알코올 추출물(alcohol extract)이다. 일부 측면들에서, 상기 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물은 적어도 하나의 리그닌(lignin)을 포함한다. 일부 측면들에서, 상기 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물은 초임계 유체 - CO₂ 추출물(supercritical fluid - CO₂ extract)이다. 일부 측면들에서, 상기 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물은 마그놀롤(magnolol) 및 호노키올(honokiol)을 포함한다. 일부 측면들에서, 상기 파숨 사티붐 추출물은 수성 추출물(aqueous extract)이다. 일부 측면들에서, 상기 시트러스 그랜디스 껍질 추출물은 알코올 추출물이다. 일부 측면들에서, 상기 일부 측면들에서, 상기 시트러스 그랜디스 껍질 추출물은 플라본(flavone)을 포함한다. 일부 측면들에서, 상기 매그놀리아 비온디 꽃 추출물은 물/프로필렌 글리콜 추출물(water/propylene glycol extract)이다. 일부 측면들에서, 상기 매그놀리아 비온디 꽃 추출물은 리그난(lignan)을 포함한다.

상기 조성물 내에 상기 성분들의 양은 다양할 수 있다(예를 들면, 양은 최소 0.000001% 내지 최대 98% w/w 또는 그 안의 임의의 범위일 수 있다). 일부 측면들에서, 상기 조성물은 히알루론산 합성을 신장(boost), 라미닌 생성을 증가, 멜라닌 생성을 억제, 및/또는 티로시나아제(tyrosinase) 활성을 감소시키는 센텔라 아시아티카 추출물의 유효량을 포함한다. 일부 측면들에서, 상기 조성물은 TNFα을 억제, 항산화(anti-oxidant) 능력을 제공, 라미닌 생성을 증가, 및/또는 멜라닌 생성을 억제시키는 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물의 유효량을 포함한다. 일부 측면들에서, 상기 조성물은 항산화 능력을 제공, 멜라닌 생성을 억제, 염증성 사이토카인(inflammatory cytokines)의 발현을 억제, TNF-α를 억제, IL-1β를 억제, IL-6를 억제, IL-10를 억제, IL-2를 억제, 및/또는 COX-1를 억제하는 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물의 유효량을 포함한다. 일부 측면들에서, 상기 조성물은 항산화 능력을 제공, 콜라겐 I(collagen I)을 증가, 엘라스타아제(elastase)를 억제, 및/또는 피브로넥틴(fibronectin) 생성을 증가시키는 피숨 사티붐 추출물의 유효량을 포함한다. 일부 측면들에서, 라미닌 생성을 증가, 및/또는 내피 관(endothelial tube) 형성을 방해하는 시트러스 그랜디스 껍질 추출물의 유효량을 포함한다. 일부 측면들에서, VEGF를 억제, 및/또는 내피 관 형성을 방해하는 매그놀리아 비온디 꽃 추출물의 유효량을 포함한다. 일부 측면들에서, 콜라겐 I 생성을 증가, 및/또는 히알루론산 생성을 증가시키는 트리펩타이드-1의 유효량을 포함한다. 일부 측면들에서, 항산화 능력을 제공, 라미닌 생성을 증가, 및/또는 MMP1을 억제하는 헤스피리딘 메틸 칼콘, 디펩타이드-2, 및 팔미토일 테트라펩타이드-7의 조합물의 유효량을 포함한다. 일 실시예에서 상기 조성물은 0.01중량% 내지 1중량%의 센텔라 아시아티카 추출물, 0.01중량% 내지 1중량%의 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물 또는 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물, 0.01중량% 내지 1중량%의 헤스피리딘 메틸 칼콘, 0.001중량% 내지 0.5중량%의 피숨 사티붐 추출물, 0.001중량% 내지 0.5중량%의 시트러스 그랜디스 껍질 추출물, 0.0005중량% 내지 0.1중량%의 매그놀리아 비온디 꽃 추출, 0.0001중량% 내지 0.1중량%의 디펩타이드-2, 0.00001중량% 내지 0.01중량%의 팔미토일 테트라펩타이드-7, 및 0.000001중량% 내지 0.001중량%의 트리펩타이드-1을 포함한다.

다른 실시예에서, 상기 조성물은 센텔라 아시아티카 분열조직 세포 배양물을 더 포함한다. 일부 측면들에서, 상기 조성물은 히알루론산 생성을 증가, 및/또는 티로시나아제 활성을 감소시키는 센틸라 아시아티카 분열조직 세포 배양물의 유효량을 포함한다. 또 다른 측면들에서, 상기 조성물은 0.0005중량% 내지 0.1중량% 센텔라 아시아티카 분열조직 세포 배양물을 포함한다.

일 실시예에서, 상기 조성물을 물을 더 포함한다. 일 실시예에서, 상기 조성물은 35중량% 내지 70중량%의 물을 포함한다. 다른 실시예에서, 상기 조성물은 글리세린, 바셀린(petrolatum), 미네랄 오일, 수소화된 폴리데센(hydrogenated polydecene), 세틸 에스테르(cetyl esters), 비스-디글리세릴 폴리아실아디페이트-2(bis-diglyceryl polyacyladipate-2), 부틸렌 글리콜(butylene glycol), 수소화된 폴리이소부텐(hydrogenated polyisobutene), 소르비탄 올리베이트(sorbitan olivate), 세테아릴 올리베이트(cetearyl olivate), 세틸 팔미테이트(cetyl palmitate), 및 세테아릴 알코올을 더 포함한다. 또 다른 실시예에서, 상기 조성물은 5중량% 내지 20중량%의 글리세린, 1중량% 내지 15중량%의 바셀린, 1중량% 내지 15중량%의 미네랄 오일, 1중량% 내지 10중량%의 수소화된 폴리데센, 1중량% 내지 10중량%의 세틸 에스테르, 1중량% 내지 10중량%의 비스-디글리세릴 폴리아실아디페이트-2, 0.5중량% 내지 5중량%의 부틸렌 글리콜, 0.5중량% 내지 5중량%의 수소화된 폴리이소부텐, 0.5중량% 내지 5중량%의 소르비탄 올리베이트, 0.5중량% 내지 5중량%의 세테아릴 올리베이트, 0.1중량% 내지 5중량%의 세틸 팔미테이트, 및 0.1중량% 내지 5중량%의 세테아릴 알코올을 포함한다. 일 실시예에서, 상기 조성물은 소르비탄 팔미테이트(sorbitan palmitate), 테트라헥실데실 아스코르베이트(tetrahexyldecyl ascorbate), 실리카(silica), 세테아레스-20(ceteareth-20), 디아졸리디닐 우레아(diazolidinyl urea), 토코페릴 아세테이트(tocopheryl acetate), 트리에탄올아민(triethanolamine), 아크릴레이트/C10-30 알킬 아크릴레이트 크로스폴리머(acrylates/C10-30 alkyl acrylate crosspolymer), 및 프로필렌 글리콜(propylene glycol)을 더 포함한다. 다른 실시예에서, 상기 조성물은 0.1중량% 내지 3중량%의 소르비탄 팔미테이트, 0.1중량% 내지 3중량%의 테트라헥실데실 아스코르베이트, 0.1중량% 내지 3중량%의 실리카, 0.05중량% 내지 1중량%의 세테아레스-20, 0.05중량% 내지 1중량%의 아졸리디닐 우레아, 0.05중량% 내지 1중량%의 토코페릴 아세테이트, 0.05중량% 내지 1중량%의 트리에탄올아민, 0.01중량% 내지 1중량%의 아크릴레이트/C10-30 알킬 아크릴레이트 크로스폴리머, 및 0.01중량% 내지 1중량%의 프로필렌 글리콜을 포함한다. 또 다른 실시예에서, 상기 조성물은 오푼시아 투나(Opuntia tuna) 열매(fruit) 추출물을 더 포함한다. 일 실시예에서, 상기 조성물은 0.00001중량% 내지 0.01중량%의 오푼시아 투나 열매 추출물을 포함한다. 상기 조성물은 본 명세서에서 설명된 성분들의 하나 또는 그 이상을 더 포함할 수 있다. 예를 들어, 상기 조성물은 하나 또는 그 이상의 컨디셔닝제(conditioning agents), 보습제(moisturizing agents), pH 조정제(pH adjusters), 구조화제(structuring agents), 무기염(inorganic salts), 및 보존제(preservatives)로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 또는 그 이상의 추가적인 성분들을 포함할 수 있다.

다른 측면에서, 상기 국소 피부 조성물은 에멀젼(emulsion)일 수 있다. 일 실시예에서, 상기 조성물은 수중유(oil-in-water)이다. 다른 실시예에서, 상기 조성물은 크림으로 제형화된다. 또 다른 실시예에서, 상기 조성물은 아이크림으로 제형화된다.

또한 본 명세서에 개시된 조성물들을 사용하는 방법들을 개시한다. 일부 측면들에서, 피부 및/또는 모발의 외관 또는 상태를 개선하는 방법이 개시되고, 상기 방법은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 이들이 필요한 피부 및/또는 모발에 도포함을 포함한다. 일 측면에서, 상기 개시된 조성물들은 피부 및/또는 모발에 도포되고 상기 피부 및/또는 모발에 남겨지거나, 또는 대안적으로 일정 시간 후 피부 및/또는 모발로부터 제거된다.

다른 측면에서, 상기 개시된 조성물들은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포하여 피부 경도를 증가시키는데 이용되고, 여기서 상기 피부의 경도는 증가된다. 또 다른 측면에서, 상기 개시된 조성물은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포하여 미세주름 및/또는 주름의 외관을 감소시키는데 이용되고, 여기서 상기 피부의 미세주름 및/또는 주름의 외관은 감소된다. 일 측면에서, 본 명세서에 개시된 조성물들은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포함을 포함하여 피부 결을 개선하는데 이용되고, 여기서 피부 결은 개선된다. 다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 조성물들은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포함을 포함하여 눈 밑 부종을 감소시키는데 이용되고, 여기서 눈 밑 부종은 감소된다. 또 다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 조성물들은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포함을 포함하여 피부 처짐을 감소시키는데 이용되고, 여기서 피부 처짐은 감소된다. 일 측면에서, 본 명세서에 개시된 조성물들은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포함을 포함하여 피부 주름(crepiness)을 감소시키는데 이용되고, 여기서 피부 주름은 감소된다. 다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 조성물들은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포함을 포함하여 피부의 탄력을 증가시키는데 이용되고, 여기서 피부의 탄력은 증가된다.

일 측면에서, 상기 개시된 조성물은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포하여 피부를 밝게하는데 이용되고, 여기서 상기 피부의 밝기는 증가된다. 다른 측면에서, 상기 개시된 조성물들은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포하여 피부의 색소 침착을 감소시키는데 이용되고, 여기서 피부의 색소 침착은 감소된다. 또 다른 측면에서, 상기 개시된 조성물은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포하여 피부에서 멜라닌 생성을 억제하는데 이용되고, 여기서 멜라닌 생성은 억제된다. 일 측면에서, 상기 개시된 조성물은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포하여 피부의 붉은 반점을 감소시키는데 이용되고, 여기서 상기 피부의 붉은 반점은 감소된다. 다른 측면에서, 상기 개시된 조성물은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포하여 주사를 치료하는데 이용되고, 여기서 주사는 감소된다. 또 다른 측면에서, 상기 개시된 조성물은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 눈가 피부에 도포하여 눈가 피부 및/또는 그 아래 다크 써클을 감소시키는데 이용되고, 여기서 상기 눈 및/또는 그 아래 다크 써클은 감소된다. 일 측면에서, 상기 개시된 조성물은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포하여 피부 투명도를 개선하는데 이용되고, 여기서 피부 투명도는 개선된다. 다른 측면에서, 상기 개시된 조성물은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 눈가 피부에 도포하여 눈가 피부의 전반적인 외관을 개선하는데 이용되고, 여기서 눈가 피부의 전반적인 외관은 개선된다. 또 다른 측면에서, 상기 개시된 조성물은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부 및/또는 모발에 도포하여 피부 및/또는 모발에 수분을 공급하는데 이용되고, 여기서 피부 및/또는 모발은 수분이 공급된다.

다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 조성물들은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포함을 포함하여 피부의 염증을 감소시키는데 이용되고, 여기서 피부의 염증은 감소된다.

일 측면에서, 본 명세서에 개시된 조성물들은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포함을 포함하여 피부에서 티로시나아제를 억제하는데 이용되고, 여기서 피부에서 티로시나아제는 억제된다. 또 다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 조성물들은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포함을 포함하여 혈관 형성(angiogenesis)을 억제하는데 이용되고, 여기서 혈관 생성은 억제된다. 일 측면에서, 본 명세서에 개시된 조성물들은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포함을 포함하여 피부에서 히알루론산 생성을 증가시키는데 이용되고, 여기서 히알루론산 생성은 증가된다. 다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 조성물들은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포함을 포함하여 피부에서 라미닌 생성을 증가시키는데 이용되고, 여기서 라미닌 생성은 증가된다. 또 다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 조성물들은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포함을 포함하여 피부에서 피브로넥틴 생성을 증가시키는데 이용되고, 여기서 피브로넥틴 생성을 증가된다. 일 측면에서, 본 명세서에 개시된 조성물들은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포함을 포함하여 피부에서 콜라겐 자극을 증가시키는데 이용되고, 여기서 피부에서 콜라겐 자극은 증가된다. 다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 조성물들은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포함을 포함하여 피부에서 엘라스타아제 활성을 억제하는데 이용되고, 여기서 피부에서 엘라스타아제 활성은 억제된다. 또 다른 측면에서, 본 명세서에서 개시된 조성물들은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포함을 포함하여 피부에서 MMP1을 억제하는데 이용되고, 여기서 MMP1은 피부에서 억제된다.

다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 조성물들은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포함을 포함하여 피부에서 TNF-α를 억제하는데 이용되고, 여기서 TNF-α는 피부에서 억제된다. 다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 조성물들은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포함을 포함하여 피부에서 VEGF를 억제하는데 이용되고, 여기서 VEGF는 피부에서 억제된다. 일부 측면들에서, 본 명세서에 개시된 조성물들은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포함을 포함하여 피부에서 IL-1β를 억제하는데 이용되고, 여기서 IL-1β는 피부에서 억제된다. 일부 측면들에서, 본 명세서에 개시된 조성물들은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포함을 포함하여 피부에서 IL-6를 억제하는데 이용되고, 여기서 IL-6는 피부에서 억제된다. 일부 측면들에서, 본 명세서에 개시된 조성물들은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포함을 포함하여 피부에서 IL-10을 억제하는데 이용되고, 여기서 IL-10은 피부에서 억제된다. 일부 측면들에서, 본 명세서에 개시된 조성물들은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포함을 포함하여 피부에서 IL-2를 억제하는데 이용되고, 여기서 IL-2는 피부에서 억제된다. 일부 측면들에서, 본 명세서에 개시된 조성물들은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포함을 포함하여 피부에서 COX-1을 억제하는데 이용되고, 여기서 COX-1은 피부에서 억제된다. 또 다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 조성물들은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부에 도포함을 포함하여 피부 및/또는 모발에서 및/또는 내에서 산화체(oxidant)를 감소시키는데 이용되고, 여기서 산화체는 피부에서 억제된다. 일 측면에서, 본 명세서에 개시된 조성물들은 본 명세서에 개시된 조성물들의 임의의 하나를 피부 및/또는 모발에 도포함을 포함하여 산화체에 의한 피부 및/또는 모발의 산화적 손상을 방지하는데 이용되고, 여기서 산화체에 의한 피부 및/또는 모발의 산화적 손상은 방지된다.

특정 측면들에서, 본 발명의 조성물들은 국소 피부 및/또는 모방 조성물로서 제형화된다. 상기 조성물은 화합물들, 조성물들 및 추출물들을 위하 피부과학적으로 허용 가능한 비히클(vehicle) 또는 캐리어(carrier)를 가질 수 있다. 상기 조성물은 보습제(moisturizing agent) 또는 습윤제(humectant), 계면활성제(surfactant), 화합물들을 포함하는 실리콘, UV제, 오일, 및/또는 공지된 것들(those known in the art) 또는 본 명세서에서 정의된 다른 성분들을 더 포함할 수 있다. 상기 조성물은 로션, 크림, 젤(gel), 세럼, 에멀젼 (예를 들면, 수중유(oil-in-water), 유중수(water-in-oil), 수중실리콘(silicone-in-water), 실리콘중수(water-in-silicone), 수중유중수(water-in-oil-in-water), 유중수중유(oil-in-water-in-oil), 실리콘중수중유(oil-in-water-in-silicone), 등.), 용액 (예를 들면, 수성 또는 하이드로-알코올성 용액들), 무수 베이스 (예를 들면, 립스틱 또는 파우더), 연고, 유제(milk), 풀(paste), 에어로졸(aerosol), 고체 형태(solid forms), 아이 젤리(eye jellies), 등일 수 있다. 상기 조성물은 파우더 형태일 수 있다 (예를 들면, 건조(dried), 냉동건조(lyophilized), 미립자(particulate), 등). 상기 조성물은 적어도 사용 중 하루에 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7번, 또는 그 이상 국소 피부 도포(application)를 위해 제형화될 수 있다. 본 발명의 다른 측면들에서, 조성물들은 보관 안정적(storage stable) 또는 색 안정적(color stable), 또는 모두 일 수 있다. 또한 상기 조성물의 점도 원하는 결과를 달성하기 위해 선택될 수 있음을 고려한다, 예를 들면, 원하는 조성물의 유형에 따라, 이러한 조성물의 점도는 약 1 cps부터 100만 cps를 훨씬 넘거나 또는 임의의 범위 또는 그 안에서 유도 가능한(derivable therein) 정수 (예를 들면, 2 cps, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 2000, 3000, 4000, 5000, 6000, 7000, 8000, 9000, 10000, 20000, 30000, 40000, 50000, 60000, 70000, 80000, 90000, 100000, 200000, 300000, 400000, 500000, 600000, 700000, 800000, 900000, 1000000, 2000000, 3000000, 4000000, 5000000, 10000000, cps, 등, 25℃, 2.5 rpm에서 TC 스핀들을 사용하여 Brookfield Viscometer에서 측정).

본 발명의 조성물들은 또한 원하는 산소 라디칼 흡수 능력(oxygen radical absorbance capacity) (ORAC) 값을 갖도록 변형될 수 있다. 특정 비제한적 측면들에서, 본 발명의 조성물들 또는 본 명세서를 통해 정의된 이들의 성분(component) 또는 추출물들(extracts)은 mg 당 적어도 약 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 95, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 2000, 3000, 4000, 5000, 6000, 7000, 8000, 9000, 10000, 15000, 20000, 30000, 50000, 100000 또는 그 이상 또는 그 안에서 유도 가능한 임의의 범위의 ORAC 값을 갖도록 변형될 수 있다.

상기 조성물들은 비제한적 측면들에서 약 6 내지 약 9의 pH를 가질 수 있다. 다른 측면들에서, pH는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 또는 14일 수 있다. 상기 조성물은 트리글리세리드(triglyceride)를 포함할 수 있다. 비제한적 실시예들은 작은(small), 중간(medium), 및 큰(large) 사슬 트리글리세리드들을 포함한다. 특정 측면들에서, 상기 트리글리세리드는 중간 사슬 트리글리세리드이다 (예를 들면, 카프릴릭 카프릭 트리글리세리드(caprylic capric triglyceride)). 상기 조성물들은 또한 보존제를 포함할 수 있다. 보존제의 비제한적 실시예들은 메틸파라벤(methylparaben), 프로필파라벤(propylparaben), 또는 메틸파라벤 및 프로필파라벤의 혼합물을 포함한다. 일부 실시예들에서, 상기 보존제는 파라벤이 아니다.

본 발명의 조성물들은 UVA 및 UVB 흡수 특성들을 가질 수 있다. 상기 조성물들은 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 또는 그 이상, 또는 임의의 정수 또는 그 안의 유도되는 자외선 차단 지수(sun protection factor) (SPF)를 가질 수 있다. 상기 조성물은 자외선 차단(sunscreen) 로션, 스프레이, 또는 크림일 수 있다.

본 발명의 조성물들은 또한 하기 추가적인 성분들의 임의의 하나, 임의의 조합물, 또는 전부를 포함할 수 있다: 물, 킬레이트제(chelating agent), 보습제, 보존제, 증점제, 실리콘 함유 화합물, 에션셀 오일, 구조화제, 비타민, 제약성분, 또는 항산화제, 또는 이러한 성분들의 임의의 조합물 또는 이러한 성불들의 혼합물. 특정 측면들에서, 상기 조성물은 이전 문장에서 정의된 이러한 추가적인 성분들의 적어도 둘, 셋, 넷, 다섯, 여섯, 일곱, 여덟, 아홉, 열, 또는 전부를 포함할 수 있다. 이들 성분들의 비제한적 실시예들은 본 명세서를 통해 확인되고, 이 섹션에 참조로서 통합된다. 이러한 성분들의 양은 조성물의 중량 또는 부피의 0.0001% 내지 99.9% 범위, 또는 임의의 정수 또는 본 명세서의 다른 섹션들에서 개시된 사이의 범위일 수 있고, 이것은 본 단락에 참조로서 통합된다.

또한 본 발명의 조성물들을 포함하는 키트(Kits)를 고려한다. 특정 실시예들에서, 상기 조성물은 용기(container)에 포함된다. 상기 용기는 병(bottle), 디스펜서(dispenser), 또는 패키지(package)일 수 있다. 상기 용기는 조성물의 선결정된 양을 제공할 수 있다. 특정 측면들에서, 상기 조성물들은 스프레이(spray), 미스트(mist), 한덩이(dollop), 또는 액체(liquid)로 제공된다. 상기 용기는 그 표면에 표시(indicia)를 포함할 수 있다. 상기 표시는 글자, 약어, 사진, 또는 상징일 수 있다.

본 명세서를 통해 개시된 조성물들이 리브온(leave-on) 또는 린스오프(rinse-off) 조성물로서 사용될 수 있음을 또한 고려한다. 예로서, 리브온 조성물은 피부에 국소적으로 도포되고 일정 기간 동안 (예를 들면, 적어도 5, 6, 7, 8, 9, 10, 20, 또는 30 분, 또는 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 또는 24 시간, 또는 밤새(overnight) 또는 하루 종일(throughout the day)) 피부에 남아있는 것일 수 있다. 대안적으로, 린스오프 조성물은 피부에 도포되고 그 다음 예를 들면 5, 4, 3, 2, 또는 1분 보다 적은 일정 기간 내에 피부로부터 제거되거나 세척되도록 (예를 들면, 물로) 의도되는 제품일 수 있다. 린스오프 조성물의 예는 피부 클렌져(cleanser), 샴푸, 컨디셔너(conditioner), 또는 비누일 수 있다. 리브온 조성물의 예는 피부 보습제(moisturizer), 자외선 차단제(sunscreen), 마스크(mask), 오버나이트 크림(overnight cream), 또는 데이 크림(day cream)일 수 있다.

본 명세서에서 논의된 임의의 실시예는 본 발명의 임의의 방법 또는 조성물, 및 그 반대(vice versa)에 대하여 시행될 수 있다는 것을 고려한다. 뿐만 아니라, 본 발명의 조성물들은 본 발명의 방법들을 달성하는데 사용될 수 있다.

일 실시예에서, 본 발명의 조성물들은 제약적 또는 화장용으로 우수(elegant)할 수 있거나 쾌적한 촉감 특성들(pleasant tactile properties)을 가질 수 있다. "제약적 우수(Pharmaceutically elegant)" , "화장용 우수(cosmetically elegant)", 및/또는 "쾌적한 촉감 특성들"는 피부에 쾌적함을 느끼는 특정 촉감 특성들을 갖는 조성물을 설명한다 (예를 들면, 너무 묽거나 또는 기름지지 않는 조성물들, 실키한 질감을 갖는 조성물들, 진득하지 않거나 또는 끈적이지 않는 조성물들, 등). 제약적 또는 화장용 우수는 또한 상기 조성물의 크림성(creaminess) 또는 윤활 특성에 관련되거나 또는 상기 조성물의 수분 유지 특성들에 관련될 수 있다.

또한 본 발명의 조성물을 포함하는 제품을 고려한다. 비제한적 측면들에서, 상기 제품은 화장품 제품일 수 있다. 상기 화장품 제품은 본 명세서의 다른 섹션들에서 설명된 것들 일 수 있거나 당업자에게 공지된 것들 일 수 있다. 제품들의 비제한적 실시예들은 보습제, 크림, 로션, 스킨 소프트너(skin softener), 젤, 자외선 차단제, 마스크, 안티에이징 제품, 데오도란트(deodorant), 발한 억제제(antiperspirant), 향수(perfume), 향수(cologne), 등을 포함한다.

또한 본 발명은 하기 본 발명의 실시예 1 내지 29를 개시한다. 실시예 1은 피부의 외관 또는 상태를 개선하는 방법으로, 여기서 경도가 증가되고, 밝기가 증가되며, 색소 침착이 감소되고, 멜라닌 생성이 억제되며, 붉은 반점이 감소되고, 주사가 감소되며, 다크 써클이 감소되고, 투명도가 개선되며, 미세주름 및/또는 주름의 외관이 감소되고, 결이 개선되며, 눈 밑 부종이 감소되고, 처짐이 감소되며, 주름(crepiness)이 감소되고, 탄력이 증가되며, 염증이 감소되고, 및/또는 눈가 피부의 전반적인 외관이 개선되며, 상기 방법은 국소 조성물을 피부에 도포함을 포함하고, 상기 국소 조성물은; 센텔라 아시아티카; 매그놀리아 그랜디플로라(Magnolia grandiflora) 껍질(bark) 추출물 또는 매그놀리아 오피시날리스(Magnolia officinalis) 껍질 추출물; 헤스피리딘 메틸 칼콘(hesperidin methyl chalcone); 피숨 사티붐(Pisum sativum) 추출물; 시트러스 그랜디스(Citrus grandis) 껍질(peel) 추출물; 매그놀리아 비온디(Magnolia biondii) 꽃 추출물; 디펩타이드-2(dipeptide-2); 팔미토일 테트라펩타이드-7(palmitoyl tetrapeptide-7); 및 트리펩타이드-1(tripeptide-1)를 포함한다. 실시예 2는 실시예 1에 있어서, 상기 센텔라 아시아티카 추출물은 에탄올 추출물이고, 상기 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물은 알코올 추출물이며, 상기 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물은 초임계 유체 - CO₂ 추출물이고, 상기 파숨 사티붐 추출물은 수성 추출물이며, 상기 시트러스 그랜디스 껍질 추출물은 알코올 추출물이고 플라본을 포함하며, 및/또는 상기 매그놀리아 비온디 꽃 추출물은 물/프로필렌 글리콜 추출물이고 리그난(lignan)을 포함하는 방법이다. 실시예 3은 실시예 1 및 2 중 어느 하나에 있어서, 여기서 티로시나아제가 억제, 혈관 형성이 억제, 히알루론산 생성이 증가, 라미닌 생성이 증가, 피브로넥티 생성이 증가, 콜라겐 자극이 증가, 엘라스타아제 활성이 억제, MMP1이 억제, TNF-α가 억제, VEGF가 억제, IL-1β이 억제, IL-6이 억제, IL-10이 억제, IL-2이 억제, COX-1이 억제, 및/또는 산화체에 의한 피부의 산화적 손상이 방지되는 방법이다. 실시예 4는 실시예 1 내지 3 중 어느 하나에 있어서, 상기 조성물은; 히알루론산 합성을 신장, 라미닌 생성을 증가, 멜라닌 생성을 억제, 및/또는 티로시나아제 활성을 감소시키는 센텔라 아시아티카 추출물; TNFα을 억제, 항산화 능력을 제공, 라미닌 생성을 증가, 및/또는 멜라닌 생성을 억제시키는 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물; 항산화 능력을 제공, 멜라닌 생성 억제, 염증성 사이토카인의 발현을 억제, TNF-α를 억제, IL-1β를 억제, IL-6를 억제, IL-10를 억제, IL-2를 억제, 및/또는 COX-1를 억제하는 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물; 항산화 능력을 제공, 콜라겐 I을 증가, 엘라스타아제를 억제, 및/또는 피브로넥틴 생성을 증가시키는 피숨 사티붐 추출물; 라미닌 생성을 증가, 및/또는 내피 관 형성을 방해하는 시트러스 그랜디스 껍질 추출물; VEGF를 억제, 및/또는 내피 관 형성을 방해하는 매그놀리아 비온디 꽃 추출물; 콜라겐 I 생성을 증가, 및/또는 히알루론산 생성을 증가시키는 트리펩타이드-1; 및/또는 항산화 능력을 제공, 라미닌 생성을 증가, 및/또는 MMP1을 억제하는 헤스피리딘 메틸 칼콘, 디펩타이드-2, 및 팔미토일 테트라펩타이드-7의 조합물의 유효량을 포함하는 방법이다. 실시예 5는 실시예 1 내지 4 중 어느 하나에 있어서, 상기 조성물은; 0.01중량% 내지 1중량%의 센텔라 아시아티카 추출물; 0.01중량% 내지 1중량%의 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물 또는 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물; 0.01중량% 내지 1중량%의 헤스피리딘 메틸 칼콘; 0.001중량% 내지 0.5중량%의 피숨 사티붐 추출물; 0.001중량% 내지 0.5중량%의 시트러스 그랜디스 껍질 추출물; 0.0005중량% 내지 0.1중량%의 매그놀리아 비온디 꽃 추출물; 0.0001중량% 내지 0.1중량%의 디펩타이드-2; 0.00001중량% 내지 0.01중량%의 팔미토일 테트라펩타이드-7; 및 0.000001중량% 내지 0.001중량%의 트리펩타이드-1을 포함하는 방법이다. 실시예 6은 실시예 1 내지 5 중 어느 하나에 있어서, 상기 조성물이 센텔라 아시아티카 분열조직 세포 배양물을 더 포함하는 방법이다. 실시예 7은 실시예 6에 있어서, 상기 조성물이 히알루론산 생성을 증가, 및/또는 티로시나아제 활성을 감소시키는 센틸라 아시아티카 분열조직 세포 배양물의 유효량을 포함하는 방법이다. 실시예 8은 실시예 6 또는 7에 있어서, 상기 조성물이 0.0005중량% 내지 0.1중량% 센텔라 아시아티카 분열조직 세포 배양물을 포함하는 방법이다. 실시예 9는 실시예 1 내지 8 중 어느 하나에 있어서, 상기 조성물이 물을 더 포함하는 방법이다. 실시예 10은 실시예 9에 있어서, 상기 조성물이 35중량% 내지 70중량%의 물을 포함하는 방법이다. 실시예 11은 실시예 1 내지 10 중 어느 하나에 있어서, 상기 조성물이 오푼시아 투나 열매 추출물을 더 포함하는 방법이다. 실시예 12는 실시예 11에 있어서, 상기 조성물이 0.00001중량% 내지 0.01중량%의 오푼시아 투나 열매 추출물을 포함하는 방법이다. 실시예 13은 실시예 1 내지 12 중 어느 하나에 있어서, 상기 조성물이 에멀젼인 방법이다. 실시예 14는 실시예 1 내지 13 중 어느 하나에 있어서, 상기 조성물이 수중유 에멀젼인 방법이다. 실시예 15는 실시예 1 내지 14 중 어느 하나에 있어서, 상기 조성물이 아이크림으로서 제형화된 방법이다. 실시예 16은 센텔라 아시아티카; 매그놀리아 그랜디플로라(Magnolia grandiflora) 껍질(bark) 추출물 또는 매그놀리아 오피시날리스(Magnolia officinalis) 껍질 추출물; 헤스피리딘 메틸 칼콘(hesperidin methyl chalcone); 피숨 사티붐(Pisum sativum) 추출물; 시트러스 그랜디스(Citrus grandis) 껍질(peel) 추출물; 매그놀리아 비온디(Magnolia biondii) 꽃 추출물; 디펩타이드-2(dipeptide-2); 팔미토일 테트라펩타이드-7(palmitoyl tetrapeptide-7); 및 트리펩타이드-1(tripeptide-1)를 포함하는 피부의 외관 또는 상태를 개선하기 위해 제형화된 국소 조성물이다. 실시예 17은 실시예 16에 있어서, 상기 조성물은; 히알루론산 합성을 신장, 라미닌 생성을 증가, 멜라닌 생성을 억제, 및/또는 티로시나아제 활성을 감소시키는 센텔라 아시아티카 추출물; TNFα을 억제, 항산화 능력을 제공, 라미닌 생성을 증가, 및/또는 멜라닌 생성을 억제시키는 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물; 항산화 능력을 제공, 멜라닌 생성 억제, 염증성 사이토카인의 발현을 억제, TNF-α를 억제, IL-1β를 억제, IL-6를 억제, IL-10를 억제, IL-2를 억제, 및/또는 COX-1를 억제하는 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물; 항산화 능력을 제공, 콜라겐 I을 증가, 엘라스타아제를 억제, 및/또는 피브로넥틴 생성을 증가시키는 피숨 사티붐 추출물; 라미닌 생성을 증가, 및/또는 내피 관 형성을 방해하는 시트러스 그랜디스 껍질 추출물; VEGF를 억제, 및/또는 내피 관 형성을 방해하는 매그놀리아 비온디 꽃 추출물; 콜라겐 I 생성을 증가, 및/또는 히알루론산 생성을 증가시키는 트리펩타이드-1; 및/또는 항산화 능력을 제공, 라미닌 생성을 증가, 및/또는 MMP1을 억제하는 헤스피리딘 메틸 칼콘, 디펩타이드-2, 및 팔미토일 테트라펩타이드-7의 조합물의 유효량을 포함하는 국소 조성물이다. 실시예 18은 실시예 16 또는 17에 있어서, 0.01중량% 내지 1중량%의 센텔라 아시아티카 추출물; 0.01중량% 내지 1중량%의 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물 또는 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물; 0.01중량% 내지 1중량%의 헤스피리딘 메틸 칼콘; 0.001중량% 내지 0.5중량%의 피숨 사티붐 추출물; 0.001중량% 내지 0.5중량%의 시트러스 그랜디스 껍질 추출물; 0.0005중량% 내지 0.1중량%의 매그놀리아 비온디 꽃 추출물; 0.0001중량% 내지 0.1중량%의 디펩타이드-2; 0.00001중량% 내지 0.01중량%의 팔미토일 테트라펩타이드-7; 및 0.000001중량% 내지 0.001중량%의 트리펩타이드-1을 포함하는 조성물이다. 실시예 19는 실시예 16 내지 18 중 어느 하나에 있어서, 상기 센텔라 아시아티카 추출물은 에탄올 추출물이고, 상기 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물은 알코올 추출물이며, 상기 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물은 초임계 유체 - CO₂ 추출물이고, 상기 파숨 사티붐 추출물은 수성 추출물이며, 상기 시트러스 그랜디스 껍질 추출물은 알코올 추출물이고 플라본(flavone)을 포함하며, 및/또는 상기 매그놀리아 비온디 꽃 추출물은 물/프로필렌 글리콜 추출물(water/propylene glycol extract)이고 리그난(lignan)을 포함하는 조성물이다. 실시예 20은 실시예 16 내지 19 중 어느 하나에 있어서, 센텔라 아시아티카 분열조직 세포 배양물을 더 포함하는 조성물이다. 실시예 21은 실시예 20에 있어서, 히알루론산 생성을 증가, 및/또는 티로시나아제 활성을 감소시키는 센틸라 아시아티카 분열조직 세포 배양물의 유효량을 포함하는 조성물이다. 실시예 22는 실시예 20 또는 21에 있어서, 0.0005중량% 내지 0.1중량% 센텔라 아시아티카 분열조직 세포 배양물을 포함하는 조성물이다. 실시예 23은 실시예 16 내지 22 중 어느 하나에 있어서, 물을 더 포함하는 조성물이다. 실시예 24는 실시예 23에 있어서, 35중량% 내지 70중량%의 물을 포함하는 조성물이다. 실시예 25는 실시예 16 내지 24 중 어느 하나에 있어서, 오푼시아 투나 열매 추출물을 더 포함하는 조성물이다. 실시예 26은 실시예 25에 있어서, 0.00001중량% 내지 0.01중량%의 오푼시아 투나 열매 추출물을 포함하는 조성물이다. 실시예 27은 실시예 16 내지 26 중 어느 하나에 있어서, 상기 조성물이 에멀젼인 조성물이다. 실시예 28은 실시예 27에 있어서, 상기 조성물이 수중유 에멀젼인 조성물이다. 실시예 29는 실시예 28에 있어서, 상기 조성물이 아이크림으로서 제형화된 조성물이다.

"국소 도포(Topical application)"는 각질 조직 또는 입술 표면 위에 조성물을 도포(apply) 또는 도포(spread)함을 의미한다. "국소 피부 조성물"은 각질 조직 또는 입술 위에 국소 도포에 적합한 조성물들을 포함한다. 이러한 조성물들은 일반적으로 피부 또는 입술에 도포되었을 때 과도한 독성, 부적합성, 불안정성, 알레르기 반응, 및 이와 같은 것을 가지고 있지 않은 피부과학적으로 허용 가능한 것이다. 본 발명의 국소 피부 케어 조성물은 피부에 도포된 후 상당한 떨어짐(dripping) 또는 고임(pooling)을 피하기 위해 선택된 점도를 가질 수 있다.

"각질 조직"은 포유 동물의 가장 바깥을 보호하는 덮개로서 배치된 케라틴 함유 층들을 포함하고, 입술, 피부, 털(hair) 및 손톱을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.

용어 "약(about)"또는 "대략(approximately)"은 당업자에 의해 이해될 수 있을 만큼 근접한 것으로 정의되고, 일 비제한적 실시예에서 상기 용어들은 10% 이내, 바람직하게는 5% 이내, 보다 바람직하게는 1% 이내, 및/또는 가장 바람직하게는 0.5% 이내로 정의된다.

용어 "실질적으로(substantially)" 및 이의 변형들은 당업자에 의해 이해되는 것으로서 특정되는 주로 그러나 반드시 전적으로는 아닌 것으로서 정의되고, 일 비제한적 실시예에서 실질적으로는 10% 이내, 5% 이내, 1% 이내, 또는 0.5% 이내의 범위로 간주한다.

용어들 "억제(inhibiting)" 또는 "감소(reducing)" 또는 이들 용어들의 임의의 변형은 임의의 측정 가능한 감소 또는 원하는 결과를 달성하기 위한 완전한 억제를 포함한다. 용어들 "촉진하다(promote)" 또는 "증가시키다(increase)" 또는 이들 용어들의 임의의 변형은 임의의 측정 가능한 증가 또는 원하는 결과를 달성하기 위한 단백질 또는 분자의 생성 (예를 들면, 피브로넥티, 라미닌, 콜라겐, 또는 엘라스틴과 같은 기질 단백질들 또는 히알루론산과 같은 분자들)을 포함한다.

용어 "유효(effective)"는 본 명세서 및/또는 청구범위들에서 사용되는 용어로서, 원하거나, 예상되거나, 또는 의도된 결과를 달성하기 위해 충분한 것을 의미한다.

단어 "하나(a)" 또는 "하나(an)"의 사용은 청구범위 및/또는 본 명세서에서 용어 "포함하는(comprising)"과 함께 사용될 때 "하나(one)"를 의미할 수 있지만, 또한 "하나 또는 그 이상(one or more),""적어도 하나(at least one),"및 "하나 또는 하나 이상(one or more than one)"의 의미와 일치한다.

본 명세서 또는 청구범위(들)에서 사용된 것과 같이, 단어들 "포함하는(comprising)" (및 "포함하다(comprise)" 및 "포함하다(comprises)"와 같은 포함하는(comprising)의 임의의 형태), "가지는(having)" (및 "가지다(have)" 및 "가지다(has)"와 같은 가지는(having)의 임의의 형태 ), "포함하는(including)" (및 "포함하다(includes)" 및 "포함하다(include)"와 같은 포함하는(including)의 임의의 형태), 또는 "포함하는(containing)" (및 "포함하다(contains)" 및 "포함하다(contain)"와 같은 포함하는(containing)의 임의의 형태)은 포괄적이거나 또는 제한(open-ended)을 두지 않으며, 추가적인, 인용되지 않은 구성요소들 또는 방법 단계들을 배제하지 않는다.

상기 조성물들 및 그들을 사용하기 위한 방법들은 본 명세서를 통해 개시된 임의의 성분들 또는 단계들을 "포함하다(comprise)," "주로 구성되다(consist essentially of)," 또는 "구성되다(consist of)"일 수 있다.

본 발명의 다른 목적들, 특징들 및 장점들은 하기 상세한 설명으로부터 명백해질 것이다. 그러나, 상세한 설명 및 실시예들은 본 발명의 특정 실시예들을 나타내는 동안, 단지 예시적으로서 주어진 것으로 이해되어야 한다. 또한, 본 발명의 사상 및 범위 내에서 변경 및 수정은 본 발명의 상세한 설명으로부터 당업자에게 명백해질 것이라는 것이 고려된다.

상기에서 언급한 바와 같이, 본 발명의 독특한 여러 측면들은 센텔라 아시아티카 추출물, 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물, 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물, 피숨 사티붐 추출물, 시트러스 그랜디스 껍질 추출물, 매그놀리아 비온디 꽃 추출물, 트리펩타이드-1, 및/또는 헤스피리딘 메틸 칼콘, 디펩타이드-2, 및 팔미토일 테트라펩타이드-7의 조합물, 및 선택적으로 센텔라 아시아티카 분열조직 세포 배양물의 하나 또는 그 이상을 포함하는 국소 피부 조성물에 결합하기 위한 것이다. 이것은 피부 경도 및 탄력 증가, 피부 결 및 투명도 개선, 피부의 염증 감소, 피부의 색소 침착 감소, 피부의 붉은 반점 감소, 미세주름 및/또는 주름 감소, 눈 밑 부종 감소, 눈 밑 다크 써클 감소, 주름(crepiness) 감소, 및 처짐 감소, 피부 밝게함, 주사 치료, 및 눈가 영역의 전반적인 외관 개선의 장점들을 가능하게 한다. 추가적인 장점들은: 히알루론산 합성 증가, 라미닌 자극 증가, 피브로넥틴 자극 증가, 콜라겐 자극 증가, 엘라스타아제 억제, MMP1 억제, 멜라닌 생성 억제, 티로시나아제 억제, 내피 관 형성 억제, TNF-α 억제, IL-1β 억제, IL-6 억제, IL-10 억제, IL-2 억제, COX-1 억제, VEGF 억제를 포함하고, 항산화 능력을 갖는 조성물을 제공한다.

하기 명세서는 더 상세하게 본 발명의 비제한적 측면들을 설명한다.

본 발명의 특정 조성물은 아이 크림 조성물로서 작용하도록 설계될 수 있다. 일 실시예에서, 상기 아이 크림은 피부를 단단하게 하는 것을 도울 수 있고 또한 다크 써클의 외관을 감소시키는 동안 아이 백(eye bags)의 외관을 감소시키기 위해 미소 순환(microcirculation)을 증가시키는 것을 돕는다. 상기 조성물은 센텔라 아시아티카 추출물, 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물, 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물, 헤스피리딘 메틸 칼콘, 피숨 사티붐 추출물, 시트러스 그랜디스 껍질 추출물, 매그놀리아 비온디 꽃 추출물, 디펩타이드-2, 팔미토일 테트라펩타이드-7, 트리펩타이드-1, 및 센텔라 아시아티카 분열조직 세포 배양물, 및 보다 선택적으로 오푼시아 투나 열매 추출물의 임의의 하나, 임의의 조합물, 또는 전부의 특정한 조합물을 필요로 한다. 이러한 조성물의 예는 실시예 1, 표 1에 제공된다.

상기 조성물들은 피부 또는 모발에 도포될 수 있고 일정 기간 (예를 들면, 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 10, 20, 30, 또는 60 분 또는 그 이상) 동안 피부 또는 모발에 남아있을 수 있다. 그 후, 상기 조성물은, 필요하다면, 피부로부터 세척될 수 있거나 피부로부터 벗겨낼 수 있다.

A. 활성 성분들

본 발명은 활성 성분들의 조합물-센텔라 아시아티카 추출물, 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물 또는 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물, 헤스피리딘 메틸 칼콘, 피숨 사티붐 추출물, 시트러스 그랜디스 껍질 추출물, 매그놀리아 비온디 꽃 추출물, 디펩타이드-2, 팔미토일 테트라펩타이드-7, 트리펩타이드-1, 및 센텔라 아시아티카 분열조직 세포 배양물-의 결정이 전제되고 이것은 효과적은 피부 경도 및 탄력을 증가시킬 수 있고, 피부 결 및 투명도를 개선할 수 있으며, 피부의 염증을 감소시킬 수 있고, 피부의 색소 침착을 감소시킬 수 있으며, 피부의 붉은 반점을 감소시킬 수 있고, 미세주름 및/또는 주름 감소시킬 수 있으며, 눈 밑 부종을 감소시킬 수 있고, 눈 밑 다크 써클을 감소시킬 수 있으며, 주름을 감소시킬 수 있고, 그리고 처짐을 감소시킬 수 있고, 피부를 밝게 할 수 있으며, 주사를 치료할 수 있고, 눈가 영역의 전반적인 외관을 개선시킬 수 있다. 상기 성분들의 조합물은 또한 효과적으로 히알루론산 합성을 증가시킬 수 있고, 라미닌 자극을 증가시킬 수 있으며, 피브로넥틴 자극을 증가시킬 수 있고, 콜라겐 자극을 증가시킬 수 있으며, 엘라스타아제를 억제할 수 있고, MMP1을 억제할 수 있으며, 멜라닌 생성을 어제할 수 있고, 티로시나아제를 억제할 수 있으며, 내피 관 형성을 억제할 수 있고, TNF-α를 억제할 수 있으며, IL-1β를 억제할 수 있고, IL-6를 억제할 수 있으며, IL-10를 억제할 수 있고, IL-2를 억제할 수 있으며, COX-1를 억제할 수 있고, VEGF를 억제할 수 있으며, 그리고 항산화 능력을 제공할 수 있다. 상기 성분들의 조합물은 다양한 피부 상태들을 치료하기 위한 다른 제품들에서 사용될 수 있다. 예로서, 아이 크림은 피부를 탄탄하게 하도록 도울 수 있고 또한 다크써클의 외관을 감소시키는 동안 눈가 영역의 전반적인 영역을 개선하도록 도울 수 있다.

본 발명의 조성물들 및 제형들은 주름(lines), 주름(wrinkles), 및/또는 주름(crepiness)이 발전하기 시작한 피부에 특별히 유익할 수 있다. 노화 과정을 방해할 뿐만 아니라, 상기 성분들의 조합물은 피부를 수화하고, 단단하게 하고, 그리고 밝게 한다.

센텔라 아시아티카는 작은 초본 일년생 식물이고 이것은 인도, 스리랑카, 북부 오스트레일리아, 인도네시아, 및 아시아의 일부에서 자생한다. 이 식물의 추출물들은 (상기 추출물이 식물 전체, 꽃, 잎, 줄기, 씨앗, 또는 뿌리로부터 얻어지는 것이든) 광범위한 소스들로부터 상업적으로 구매 가능하고 (참조 International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook, 12^th edition, volume 1, pages 458-60 (2008), 이것은 참조로서 통합됨), 이들 모두는 본 발명의 문맥에서 사용될 수 있다. 일부 측면들에서, 센텔라 아시아티카 추출물은 에탄올 추출물이다. 특정 측면들에서, 센텔라 아시아티카 분열조직 세포 배양물이 사용될 수 있고, 이것은 상품명 Centella Asiatic Stems G™로 Instituto di Ricerche Biotecnologiche (이탈리아)로부터 상업적으로 구매 가능하다. 일부 측면들에서, 센텔라 아시아티카 추출물은 히알루론산 합성을 신장, 라미닌 생성을 증가, 멜라닌 생성을 억제, 및/또는 티로시나아제 활성을 감소시킬 수 있다. 일부 측면들에서, 센텔라 아시아티카 분열조직 세포 배양물은 히알루론산 생성을 증가 및/또는 티로시나아제 활성을 감소시킬 수 있다.

매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물은 매그놀리아 그랜디플로라 나무의 껍질로부터 얻어진다. 일부 측면들에서, 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물은 알코올 추출물이다. 일부 측면들에서, 매그놀라이 그랜디플로라 껍질 추출물은 파우더 추출물(powdered extract)이다. 일부 측면들에서 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물은 마그놀롤 및 호노키올을 포함한다. 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물은 예를 들어, Premier Specialties, Inc. 및/또는 DSM (북아메리카)와 같은 공급자들로부터 상업적으로 구매 가능하다. International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook, 12^th edition, volume 2, pages 1499-50 (2008)를 참조하고, 이것은 참조로서 통합된다. 일부 측면들에서, 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물은 종양 괴사 인자(tumor necrosis factor) 알파 (TNFα)를 억제, 항산화 능력을 제공, 라미닌 생성을 증가, 및/또는 멜라닌 생성을 억제할 수 있다.

매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물은 매그놀리아 오피시날리스 나무의 껍질로부터 얻어진다. 일부 측면들에서, 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물은 초임계 유체 - CO₂ 추출물이다. 일부 측면들에서, 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물은 초임계 CO₂ 유체 추출물이다. 일부 측면들에서, 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물은 마그놀롤 및 호노키올을 포함한다. 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물은 Coast Southwest, Inc와 같은 공급자들로부터 상업적으로 구매 가능하다. International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook, 12^th edition, volume 2, pages 1499-50 (2008)을 참조하고, 이것은 참조로서 통합된다. 일부 측면들에서, 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추춤물은 항상화 능력 제공, 멜라닌 생성을 억제, 염증성 사이토카인의 발현을 억제, TNF-α를 억제, IL-1β를 억제, IL-6를 억제, IL-10를 억제, IL-2를 억제, 및/또는 COX-1를 억제할 수 있다.

매그놀리아 비온디 꽃 추출물은 매그놀리아 비온디 나무의 꽃 및 봉오리(buds)로부터 얻어진다. 일부 측면들에서, 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물은 리그난을 포함한다. 일부 측면들에서, 매그놀리아 비온디 꽃 추출물은 물/프로필렌 글리콜 추출물이다. 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물은 Carrubba Inc와 같은 공급자들로부터 상업적으로 구매 가능하다. International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook, 12^th edition, volume 2, pages 1499-50 (2008)를 참조하고, 이것은 참조로서 통합된다. 일부 측면들에서, 매그놀리아 비온디 꽃 추출물은 혈관내피증식인자(vascular endothelial growth factor) (VEGF)를 억제 및/또는 내피 관 형성을 방해할 수 있다.

피숨 사티붐, 또한 완두(garden pea), 잉글리시 완두(English pea), 및 그린 완두(green pea)로서 알려짐,은 작은 식용 씨앗들을 생성하는 일년생 식물이다. 일부 측면들에서, 피숨 사티붐 추출물은 수성 추출물이다. 피숨 사티붐 추출물은 Cognis (상품명 PROTEASYL™)와 같은 공급자들로부터 상업적으로 구매 가능하다. International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook, 12^th edition, volume 2, page 2042 (2008)를 참조하고, 이것은 참조로서 통합된다. 일부 측면들에서, 피숨 사티붐 추출물은 항산화 능력을 제공, 콜라겐 I을 증가, 엘라스타아제를 억제, 및/또는 피브로넥틴 생성을 증가시킬 수 있다.

시트러스 그랜디스 껍질 추출물은 시트러스 그랜디 (자몽)의 껍질로부터 얻어진다. 일부 측면들에서, 시트러스 그랜디스 껍질 추출물은 알코올 추출물이다. 일부 측면들에서, 시트러스 그랜디스 껍질 추출물은 플라본을 포함한다. 시트러스 그랜디스 껍질 추출물은 J. L. PRO SOURCING와 같은 공급자들로부터 상업적으로 구매 가능하다. 또한 International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook, 12^th edition, volume 1, page 610 (2008)를 참조하고, 이것은 참조로서 통합된다. 일부 측면들에서, 시트러스 그랜디스 껍질 추출물은 라미닌 생성 및/또는 내피 관 형성을 방해할 수 있다.

트리펩타이드-1은 글리신(glycine), 히스티딘(histidine), 및 리신(lysine)을 포함하는 합성 펩타이드이다. 이것은 피부에 수분을 공급하는 능력을 갖는다. 이 성분은 광범위한 소스들로부터 상업적으로 구매 가능하다 (참조 International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook, 12^th edition, volume 1, pages 458-60 (2008), 이것은 참조로서 통합됨). 특정 실시예들에서, 제품, KOLLAREN (Unipex Innovations (캐나다)로부터 구매 가능함)이 사용 될 수 있고, 이것은 물 및 덱스트란이 결합한 트리펩타이드-1이다. 일부 측면들에서, 트리펩타이드-1은 콜라겐 I 생성을 증가 및/또는 히알루론산 생성을 증가시킬 수 있다.

헤스피리딘 메틸 칼콘은 광범위한 소스들로부터 상업적으로 구입 가능한 (참조 International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook, 12^th edition, volume 1, page 1146 (2008), 이것은 참조로서 통합됨) 화학 화합물이다. 일 측면에서, 상기 성분은 Sederama SAS's (프랑스) 혼합물 고체 상품명 Eyeliss™, 이것은 물, 글리세린, 헤스피리딘 메틸 칼콘, 스테아레스-20, 디펩티드-2 (발릴-트립토판(valyl-tryptophane)), 및 팔미토일 테트라펩타이드-7 (Pal-GQPR)의 조합물임,을 이용하여 얻어질 수 있다. 일부 측면들에서, 헤스피리딘 메틸 칼콘, 디펩타이드-2, 및 팔미토일 테트라펩타이드-7의 조합물은 항산화 능력을 제공, 라미닌 생성을 증가, 및/또는 기질 금속단백질분해효소-1 (MMP1)을 억제한다.

디펩타이드-2는 발린(valine) 및 트립토판(tryptophan)을 포함하는 합성 펩타이드이다. 이것은 광범위한 소스들로부터 상업적으로 구매 가능하다 (참고 International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook, 12^th edition, volume 1, page 855 (2008), 이것은 참조로서 통합됨). 일 측면에서, 상기 성분은 Sederama SAS's (프랑스) 혼합물 고체 상품명 Eyeliss™를 이용하여 얻어질 수 있다. 일부 측면들에서, 헤스피리딘 메틸 칼콘, 디펩타이드-2, 및 팔미토일 테트라펩타이드-7의 조합물은 항산화 능력을 제공, 라미닌 생성을 증가, 및/또는 기질 금속단백질분해효소-1 (MMP1)을 억제한다.

팔미토일 테트라펩타이드-7은 팔미트산(palmitic acid)의 반응 생성물이고 글리신(glycine), 글루타민(glutamine), 프롤린(proline), 및 아르기닌(arginine)을 포함하는 합성 펩타이드이며, 광범위한 소스들로부터 상업적으로 구매 가능하다 (참조 International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook, 12^th edition, volume 2, page 1767 (2008), 이것은 참조로서 통합됨). 일 측면에서, 상기 성분은 Sederama SAS's (프랑스) 혼합물 고체 상품명 Eyeliss™를 이용하여 얻어질 수 있다. 일부 측면들에서, 헤스피리딘 메틸 칼콘, 디펩타이드-2, 및 팔미토일 테트라펩타이드-7의 조합물은 항산화 능력을 제공, 라미닌 생성을 증가, 및/또는 기질 금속단백질분해효소-1 (MMP1)을 억제한다.

본 명세서에서 설명된 추출물들은 당업자에게 공지된 추출 방법들을 통해 추출물을 제조할 수 있고 이들의 조합물들을 제조할 수 있다. 추출 방법들의 비제한적 예들은 액체-액체 추출(liquid-liquid extraction), 고상 추출, 수성 추출, 에틸 아세테이트, 알코올, 아세톤, 오일, 초임계 이산화탄소, 열, 압력, 압력 강하 추출(pressure drop extraction), 초음파 추출, 등의 사용을 포함한다. 추출물들은 액체, 고체, 건조액체, 재부유된 고체(re-suspended solid), 등일 수 있다.

B. 성분들의 양

본 발명의 조성물들이 본 명세서에서 논의된 성분들의 임의의 양을 포함할 수 있음이 고련된다. 상기 조성물들은 또한 본 명세서를 통해 설명된 추가적인 성분들의 임의의 수의 조합물들을 포함할 수 있다 (예를 들면, 색소(pigments), 또는 추가적인 화장 또는 제약 성분들). 상기 조성물들 내에서 임의의 성분의 농도는 다양할 수 있다. 비제한적 실시예에서, 예를 들어, 상기 조성물들은 본 명세서 및 청구범위를 통해 언급된 성분들의 적어도 하나의, 예를 들어, 적어도 약 0.0001%, 0.0002%, 0.0003%, 0.0004%, 0.0005%, 0.0006%, 0.0007%, 0.0008%, 0.0009%, 0.0010%, 0.0011%, 0.0012%, 0.0013%, 0.0014%, 0.0015%, 0.0016%, 0.0017%, 0.0018%, 0.0019%, 0.0020%, 0.0021%, 0.0022%, 0.0023%, 0.0024%, 0.0025%, 0.0026%, 0.0027%, 0.0028%, 0.0029%, 0.0030%, 0.0031%, 0.0032%, 0.0033%, 0.0034%, 0.0035%, 0.0036%, 0.0037%, 0.0038%, 0.0039%, 0.0040%, 0.0041%, 0.0042%, 0.0043%, 0.0044%, 0.0045%, 0.0046%, 0.0047%, 0.0048%, 0.0049%, 0.0050%, 0.0051%, 0.0052%, 0.0053%, 0.0054%, 0.0055%, 0.0056%, 0.0057%, 0.0058%, 0.0059%, 0.0060%, 0.0061%, 0.0062%, 0.0063%, 0.0064%, 0.0065%, 0.0066%, 0.0067%, 0.0068%, 0.0069%, 0.0070%, 0.0071%, 0.0072%, 0.0073%, 0.0074%, 0.0075%, 0.0076%, 0.0077%, 0.0078%, 0.0079%, 0.0080%, 0.0081%, 0.0082%, 0.0083%, 0.0084%, 0.0085%, 0.0086%, 0.0087%, 0.0088%, 0.0089%, 0.0090%, 0.0091%, 0.0092%, 0.0093%, 0.0094%, 0.0095%, 0.0096%, 0.0097%, 0.0098%, 0.0099%, 0.0100%, 0.0200%, 0.0250%, 0.0275%, 0.0300%, 0.0325%, 0.0350%, 0.0375%, 0.0400%, 0.0425%, 0.0450%, 0.0475%, 0.0500%, 0.0525%, 0.0550%, 0.0575%, 0.0600%, 0.0625%, 0.0650%, 0.0675%, 0.0700%, 0.0725%, 0.0750%, 0.0775%, 0.0800%, 0.0825%, 0.0850%, 0.0875%, 0.0900%, 0.0925%, 0.0950%, 0.0975%, 0.1000%, 0.1250%, 0.1500%, 0.1750%, 0.2000%, 0.2250%, 0.2500%, 0.2750%, 0.3000%, 0.3250%, 0.3500%, 0.3750%, 0.4000%, 0.4250%, 0.4500%, 0.4750%, 0.5000%, 0.5250%, 0.0550%, 0.5750%, 0.6000%, 0.6250%, 0.6500%, 0.6750%, 0.7000%, 0.7250%, 0.7500%, 0.7750%, 0.8000%, 0.8250%, 0.8500%, 0.8750%, 0.9000%, 0.9250%, 0.9500%, 0.9750%, 1.0%, 1.1%, 1.2%, 1.3%, 1.4%, 1.5%, 1.6%, 1.7%, 1.8%, 1.9%, 2.0%, 2.1%, 2.2%, 2.3%, 2.4%, 2.5%, 2.6%, 2.7%, 2.8%, 2.9%, 3.0%, 3.1%, 3.2%, 3.3%, 3.4%, 3.5%, 3.6%, 3.7%, 3.8%, 3.9%, 4.0%, 4.1%, 4.2%, 4.3%, 4.4%, 4.5%, 4.6%, 4.7%, 4.8%, 4.9%, 5.0%, 5.1%, 5.2%, 5.3%, 5.4%, 5.5%, 5.6%, 5.7%, 5.8%, 5.9%, 6.0%, 6.1%, 6.2%, 6.3%, 6.4%, 6.5%, 6.6%, 6.7%, 6.8%, 6.9%, 7.0%, 7.1%, 7.2%, 7.3%, 7.4%, 7.5%, 7.6%, 7.7%, 7.8%, 7.9%, 8.0%, 8.1%, 8.2%, 8.3%, 8.4%, 8.5%, 8.6%, 8.7%, 8.8%, 8.9%, 9.0%, 9.1%, 9.2%, 9.3%, 9.4%, 9.5%, 9.6%, 9.7%, 9.8%, 9.9%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 16%, 17%, 18%, 19%, 20%, 21%, 22%, 23%, 24%, 25%, 26%, 27%, 28%, 29%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 또는 99% 또는 그 안에서 유도 가능한 임의의 범위를 그들의 마지막 형태에서 포함할 수 있거나, 주로 구성될 수 있거나, 구성될 수 있다. 비제한적 측면들에서, 상기 백분율은 전체 조성물의 중량 또는 부피에 의해 계산될 수 있다. 당업자는 주어진 조성물에서 성분들의 추가, 치환, 및/또는 감산에 따라 농도들이 변할 수 있음을 이해할 것이다.

C. 비히클들(Vehicles)

본 발명의 조성물들은 모든 유형의 비히클들 및 캐리어들로 통합될 수 있거나 포함할 수 있다. 상기 비히클 또는 캐리어는 약학적으로 또는 피부과학적으로 허용 가능한 비히클 또는 캐리어일 수 있다. 비히클들 또는 캐리어들의 비제한적 예들은 물, 글리세린, 알코올, 오일, 실리콘 함유 화합물, 실리콘 화합물, 및 왁스를 포함한다. 변형들 및 다른 적절한 비히클들은 당업자에게 명백할 것이고 본 발명에서 사용하는데 적합하다. 특정 측면들에서, 화합물들, 성분들, 및 화학 약품들의 조합물 및 농도들은 상기 조합물들이 화학적으로 호환 가능하고, 최종 생성물로부터 침전하는 복합체들을 형성하지 않는 그런 방법으로부터 선택될 수 있다.

D. 구조

본 발명의 조성물들은 다양한 다른 형태들로 제형화될 수 있거나 구조화될 수 있다. 비제한적 예들은 에멀젼 (예를 들면, 유중수, 수중유중수, 수중유, 수중실리콘(siliconein-water), 실리콘중수(water-in-silicone), 유중수중유(oil-in-water-in-oil), 실리콘중수중유(oil-in-water-in-silicone) 에멀전), 크림, 로션, 용액 (수성 및 하이드로 알코올성 둘 다), 무수 베이스 (립스틱 또는 파우더와 같은), 젤, 마스크, 필(peels) 및 연고를 포함한다. 변형들 및 다른 구조들은 당업자에게 명백할 것이고 본 발명에 사용하는데 적합하다.

E. 추가적인 성분들

본 발명자에 의해 개시된 성분들의 조합뿐만 아니라, 상기 조성물들은 또한 화장품 성분들 및 제약 활성 성분들과 같은 추가적인 성분들을 포함할 수 있다. 이들 추가적인 성분들의 비제한적 예들은 하기 명세서에서 설명된다.

1. 화장품 성분들

CTFA International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook (2004 및 2008)은 본 발명의 문맥에서 사용될 수 있는 광범위한 비제한적 화장품 성분들을 설명한다. 이들 성분 분류들의 예들은: 향료제(fragrance agents) (인공 및 자연; 예를 들면, 글루콘산(gluconic acid), 페녹시에탄올(phenoxyethanol), 및 트리에탄올아민(triethanolamine)), 염료 및 색 성분들 (예를 들면, Blue 1, Blue 1 Lake, Red 40, 티타늄 다이옥사이드, D&C blue no. 4, D&C green no. 5, D&C orange no. 4, D&C red no. 17, D&C red no. 33, D&C violet no. 2, D&C yellow no. 10), 및 D&C yellow no. 11), 착향료(flavoring agents)/아로마제(aroma agents) (예를 들면, 스테비아 리바우디아나(Stevia rebaudiana) (노린재나무(sweetleaf)) 추출물, 및 메탄올), 흡수제, 윤활유(lubricants), 용매, 보습제 (예를 들면, 피부의 자연적인 보습 메커니즘에 영향을 미치는 연화제(emollients), 습윤제(humectants), 피막형성제(filmformers), 차단제(occlusive agents), 및 약품(agents)을 포함), 수분 방수제(water-repellants), UV 흡수제 (파라아미노벤조산 ("PABA") 및 대응하는 PABA 유도체들, 티타늄 다이옥사이드, 징크 옥사이드, 등과 같은 물리적 및 화학적 흡수제), 에센셜 오일, 비타민 (예를 들면, A, B, C, D, E, 및 K), 미량금속(trace metals) (예를 들면, 아연, 칼슘 및 셀레늄), 항자극제(anti-irritants) (예를 들면, 스테로이드 및 비스테로이드계 항염증제), 식물성 추출물(botanical extracts) (예를 들면, 알로에베라, 카모마일, 오이 추출물, 은행나무(ginkgo biloba), 인삼, 및 로즈마리), 항균제, 항산화제 (예를 들면, BHT 및 토코페롤), 킬레이트 시약 (예를 들면, 디소듐 EDTA 및 테트라소듐 EDTA), 보존제 (예를 들면, 메틸파라벤 및 프로필렌파라벤), pH 조정제 (예를 들면, 수산화나트륨 및 시트르산), 흡착제 (예를 들면, 알루미늄스타치옥테닐썩시네이트(aluminum starch octenylsuccinate), 고령토(kaolin), 옥수수 녹말, 오트 녹말, 사이클로덱스트린(cyclodextrin), 운모(talc), 및 제올라이트), 피부 표백(bleaching)제 및 피부 미백(lightening)제 (예를 들면, 하이드로퀴논(hydroquinone) 및 나이아신아미드 젖산(niacinamide lactate)), 습윤제 (예를 들면, 소르비톨, 우레아, 메틸 글루세스-20(methyl gluceth-20), 및 만니톨), 각질제거제(exfoliants), 방수제(waterproofing agents) (예를 들면, 마그네슘/알루미늄 하이드록시 스테아레이트), 피부 컨디셔닝제 (예를 들면, 알로에 추출물, 알란토인(allantoin), 비사보롤(bisabolol), 세라마이드, 디메티콘, 히알루론산, 바이오사카라이드 검-1(biosaccharide gum-1), 에틸헥실글리세린, 펜틸렌 글리콜, 수소화된 폴리데센, 옥틸도데실 올리에이트(octyldodecyl oleate), 및 디포타슘 글리시리제이트(dipotassium glycyrrhizate)). 이러한 성분들의 일부의 비제한적 예들은 하기 명세서에서 제공된다.

a. UV 흡수제

본 발명의 조성물들과 함께 조합하여 사용될 수 있는 UV 흡수제는 화학적 및 물리적 자외선 차단제(sunblocks)를 포함한다. 사용될 수 있는 화학적 자외선 차단제의 비제한적 예들은 파라아미노벤조산 (PABA), PABA 에스테르 (글리세릴 PABA, 아밀디메틸 PABA, 및 옥틸디메틸 PABA), 부틸 PABA, 에틸 PABA(ethyl PABA), 에틸디하이드록시프로필 PABA, 벤조페논 (옥시벤존, 설리소벤존, 벤조페논, 및 12를 통한 벤조페논-1(benzophenone-1 through 12)), 신나메이트(cinnamates) (옥틸 메톡시신나메이트(octyl methoxycinnamate), 이소아밀p-메톡시신나메이트(isoamyl pmethoxycinnamate), 옥틸메톡시 신나메이트(octylmethoxy cinnamate), 시녹세이트(cinoxate), 디이소프로필 메틸 신나메이트(diisopropyl methyl cinnamate), DEA-메톡시신나메이트(DEA-methoxycinnamate), 에틸 디이소프로필신나메이트(ethyl diisopropylcinnamate), 글리세릴 옥타노에이트 디메톡시신나메이트(glyceryl octanoate dimethoxycinnamate) 및 에틸 메톡시신나메이트(ethyl methoxycinnamate)), 신나메이트 에스테르(cinnamate esters), 살리실산(salicylates) (호모메틸 살리실산(homomethyl salicylate), 벤질살리실산(benzyl salicylate), 글리콜 살리실산(glycol salicylate), 이소프로필벤질 살리실산(isopropylbenzyl salicylate), 등), 안트라닐산염(anthranilates), 에틸 우로카닌산(ethyl urocanate), 호모살레이트(homosalate), 옥티살레이트(octisalate), 디벤조닐메탄 유도체(dibenzoylmethane derivatives) (예를 들면, 아보벤존(avobenzone)), 옥토크릴렌(octocrylene), 옥틸 트리아존(octyl triazone), 디갈로일 트리올리에이트(digalloy trioleate), 글리세릴 아미노벤조에이트(glyceryl aminobenzoate), 디하이드록시아세톤(dihydroxyacetone)과 라손(lawsone), 에틸헥실 트리아존(ethylhexyl triazone), 디톡실 부타미도 트리아존(dioctyl butamido triazone), 벤질리덴 말로네이트 폴리실록산(benzylidene malonate polysiloxane), 테레프탈리덴 디캠퍼 설폰산(terephthalylidene dicamphor sulfonic acid), 디소듐 페닐 디벤즈이미다졸 테트라설포네이트(disodium phenyl dibenzimidazole tetrasulfonate), 디에틸아미노 하이드록시벤졸 헥실 벤조에이트(diethylamino hydroxybenzoyl hexyl benzoate), 비스 디에틸아미노 하이드록시벤졸 벤조에이트(bis diethylamino hydroxybenzoyl benzoate), 비스 벤조사졸릴페닐 에틸헥실이미노 트리아진(bis benzoxazoylphenyl ethylhexylimino triazine), 드로메트리졸 트리실록산(drometrizole trisiloxane), 메틸렌 비스-벤조트리아졸릴 테트라메틸부틸페놀(methylene bis-benzotriazolyl tetramethylbutylphenol), 및 비스-에틸헥실옥시페놀 메톡시페닐트리아진(bis-ethylhexyloxyphenol methoxyphenyltriazine), 4-메틸벤질리덴 캠퍼(4-methylbenzylidene camphor), 및 이소펜틸 4-메톡시신나메이트(isopentyl 4-methoxycinnamate)를 포함한다. 물리적 자외선차단제(sunblocks)의 비제한적 예들은 고령토, 운모, 바셀린(petrolatum) 및 금속산화물 (예를 들면, 티타늄 다이옥사이드 및 징크 옥사이드)을 포함한다.

b. 보습제

본 발명의 조성물들과 함께 사용될 수 있는 보습제의 비제한적 예들은 아미노산, 콘드로이틴 설페이트, 디글리세린, 에리스리톨(erythritol), 프락토오스, 글루코스, 글리세린, 글라이세롤 폴리머, 글리콜, 1,2,6-헥산트리올, 꿀, 히알루론산, 수소화된 꿀(hydrogenated honey), 수소화된 녹말 가수분해물(hydrogenated starch hydrolysate), 이노시톨, 락티톨, 말티톨, 말토오스, 만니톨, 천연 보습 인자(natural moisturizing factor), PEG-15 부탄디올, 폴리글리세릴 소르비톨, 피롤리돈 카르복실산의 염(salts of pyrolidone carboxylic acid), 포타슘 PCA, 프로필렌 글리콜, 소듐 글루쿠론네이트(sodium glucuronate), 소듐 PCA, 소르비톨, 수크로오스, 트레할로오스(trehalose), 우레아, 및 자일리톨을 포함한다.

다른 예들은 아세틸화한 라놀린(lanolin), 아세틸화된 라놀린 알코올, 알라닌, 조류 추출물(algae extract), 알로에 바르바덴시스(Aloe barbadensis), 알로에-바르바덴시스(Aloe barbadensis) 추출물, 알로에 바르바덴시스(Aloe barbadensis) 젤, 알시아 오피시날리스(Althea officinalis) 추출물, 살구(apricot) (푸루너스 아르메니아카(Prunus armeniaca)) 커넬(kernel) 오일, 아르기닌, 아르기닌 아스파르테이트(arginine aspartate), 아르니카 몬타나(Arnica montana) 추출물, 아스파르트산(aspartic acid), 아보카도 (페르시아 그라티시마(Persea gratissima)) 오일, 스핑고지질막(barrier sphingolipids), 부틸 알코올, 비즈왁스, 베헤닐 알코올, 베타-시토스테롤, 자작나무(birch) (베툴라 알바(Betula alba)) 나무껍질(bark) 추출물, 보리지(borage) (보리고 오피시날리스(Borago officinalis)) 추출물, 부처브룸(butcherbroom) 루스쿠스 아굴레아투스(Ruscus aculeatus) 추출물, 부틸렌 글리콜, 카렌듈라 오피시날리스(Calendula officinalis) 추출물, 카렌듈라 오피시날리스(Calendula officinalis) 오일, 칸데릴라(candelilla) (유포르비아 세리페라(Euphorbia cerifera)) 왁스, 카놀라 오일, 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드, 카르다몬(cardamom) (엘레타리아 카다멈(Elettaria cardamomum)) 오일, 카나우바(carnauba) (코페르니시아 세리페라(Copernicia cerifera)) 왁스, 당근 (다우커스 캐로타 사티바(Daucus carota sativa)) 오일, 피마자(castor) (리시너스 커뮤니스(Ricinus communis)) 오일, 세라마이드, 세레신, 세테아레스-5(ceteareth-5), 세테아레스-12, 세테아레스-20, 세테아릴 옥타노에이트(cetearyl octanoate), 세테스-20(ceteth-20), 세테스-24, 세틸 아세테이트, 세틸 옥타노에이트, 세틸 팔미테이트(cetyl palmitate), 카모마일(안테미스 노빌리스(Anthemis nobilis)) 오일, 콜레스테롤, 콜레스테롤 에스테르, 콜레스테롤 하이드록시스테아레이트(cholesteryl hydroxystearate), 시트르산(citric acid), 클레어리(clary) (살비아 스칼레아(Salvia sclarea)) 오일, 코코아(디오브로마 카카오(Theobroma cacao)) 버터, 코코카프릴레이트/카프레이트(cococaprylate/caprate), 코코넛 (코코스 누시페라(Cocos nucifera)) 오일, 콜라겐, 콜라겐 아미노산, 옥수수 (제아 메이스(Zea mays))오일, 지방산, 데실 올리에이트(decyl oleate), 디메티콘 코폴리올(dimethicone copolyol), 티메티콘올(dimethiconol), 디옥틸 아디페이트(dioctyl adipate), 디옥틸 썩시네이트(dioctyl succinate), 디펜타에리스리틸헥사카프릴레이트/헥사카프레이트(dipentaerythrityl hexacaprylate/hexacaprate), DNA, 에리스리톨, 에톡시디글리콜, 에틸 리놀리에이트, 유칼립투스 글로버러스(Eucalyptus globulus) 오일, 달맞이꽃(evening primrose) (오에노테라 비엔니스(Oenothera biennis)) 오일, 지방산, 제라늄 마쿨라텀(Geranium maculatum) 오일, 글루코사민, 글루코스 글루타메이트, 글루탐산, 글리세레스-26(glycereth-26), 글리세린, 글리세롤, 글리세릴 디스테아레이트(glyceryl distearate), 글리세릴 하이드록시스테아레이트(glyceryl hydroxystearate), 글리세릴 라우레이트(glyceryl laurate), 글리세릴 리놀리에이트, 글리세릴 미리스테이트(glyceryl myristate), 글리세릴 올리에이트, 글리세릴 스테아레이트, 글리세롤 스테아레이트 SE, 글리신, 글리콜 스테아레이트, 글리콜 스테아레이트 SE, 글리코사미노글리칸(glycosaminoglycans), 포도 (비티스 비니페라(Vitis vinifera)) 씨 오일, 헤이즐(hazel) (코릴러스 아메리카나(Corylus americana)) 넛(nut) 오일, 헤이즐 (코릴러스 아벨라나(Corylus avellana)) 넛 오일, 헥실렌 글리콜, 히알루론산, 잡종 홍화(hybrid safflower) (카르타머스 틴토리어스(Carthamus tinctorius)) 오일, 수소화된 피마자 오일, 수소화된 코코-글리세라이드, 수소화된 코코넛 오일, 수소화된 라놀린, 수소화된 레시틴, 수소화된 팜글리세라이드, 수소화된 팜 커넬 오일, 수소화된 대두 오일, 수소화된 탈로우 글리세라이드(tallow glyceride), 수소화된 식물성 오일, 가수분해된 콜라겐, 가수분해된 엘라스틴, 가수분해된 글리코사미노글리칸, 가수분해된 케라틴, 가수분해된 콩 단백질, 하이드록실레이트 라놀린, 하이드록시프롤린, 이소세틸 스테아레이트, 이소세틸 스테아로일 스테아레이트, 이소데실 올리에이트, 이소프로필 이소스테아레이트, 이소프로필 라놀레이트, 이소프로필 미리스테이트, 이소프로필 팔미테이트, 이소프로필 스테아레이트, 이소스테아라마이드 DEA, 이소스테아르산, 이소스테아릴 락테이트, 이소스테아릴 네오펜타노에이트(isostearyl neopentanoate), 자스민 (자스미넘 오피시날(Jasminum officinale)) 오일, 호호바(jojoba) (벅서스 차이넨시스(Buxus chinensis)) 오일, 켈프(kelp), 쿠쿠이(kukui) (알레유리테스 몰루카나(Aleurites moluccana)) 넛] 오일, 락타마이드 MEA(lactamide MEA), 라네스-16(laneth-16), 라네스-10 아세테이트, 라놀린, 라놀린산, 라놀린 알코올, 라놀린오일, 라놀린 왁스, 라벤더 (라벤듈라 안거스티폴리아(Lavandula angustifolia)) 오일, 레시틴, 레몬 (시트러스 메디카 리모넘(Citrus medica limonum)) 오일, 리놀레산(linoleic acid),리놀렌산(linolenic acid), 마카다미아 테르니폴리아 넛(Macadamia ternifolia nut) 오일, 말티톨, 카모마일(matricaria) (카모밀라 레쿠티타(Chamomilla recutita)) 오일, 메틸 글루코스 스퀴스테아레이트(methyl glucose sesquistearate), 메틸실라놀 PCA(methylsilanol PCA), 미네랄 오일, 밍크 오일, 모티에렐라(mortierella) 오일, 미리스틸 락테이트(myristyl lactate), 미리스틸 미리스테이트, 미리스틸 프로피오네이트, 네오펜틸 글리콜 디카프릴레이트/디카프레이트, 옥틸도데칸올(octyldodecanol), 옥틸도데실 미리스테이트, 옥틸도데실 스테아로일 스테아레이트, 옥틸 하이드록시스테아레이크, 옥틸 팔미테이트, 옥틸 살리실레이트, 옥틸 스테아레이트, 올리산(oleic acid), 올리브 (올리아 유로파에아(olea europaea)) 오일, 오렌지 (시트러스 아우라티엄듈시스(Citrus aurantium dulcis)) 오일, 팜 (엘래이스 귀닌시스(Elaeis guineensis)) 오일, 팔미트산, 판테테인(pantethine), 판테놀(panthenol), 판테닐 에틸 에테르, 파라핀, PCA, 복숭아(푸루너스 페르시카(Prunus persica)) 커넬 오일, 땅콩 (아르아키스 하이포가이아(Arachis hypogaea)) 오일, PEG-8 C12-18 에스테르, PEG-15 코카민(PEG-15cocamine), PEG-150 디스테아레이트, PEG-60 글리세릴 이소스테아레이트, PEG-5 글리세릴 스테아레이트, PEG-30 글리세릴 스테아레이트, PEG-7 수소화된 피마자 오일, PEG-40 수소화된 피마자 오일, PEG-60 수소화된 피마자 오일, PEG-20 메틸 글루코스 세스퀴스테아레이트, PEG-40 소르비탄 페롤리에이트, PEG-5 콩 스테롤, PEG-10 콩 스테롤, PEG-2 스테아레이트, PEG-8 스테아레이트, PEG-20 스테아레이트, PEG-32 스테아레이트, PEG-40 스테아레이트, PEG-50 스테아레이트, PEG-100 스테아레이트, PEG-150 스테아레이트, 펜타데카락톤(pentadecalactone), 페퍼민트 (멘타 피페리타(Mentha piperita)) 오일, 페트롤라툼(petrolatum), 인지질, 폴리아미노 당 축합물(polyamino sugar condensate), 폴리글리세릴-3 디이소스테아레이트, 폴리쿼터늄-24(polyquaternium-24), 폴리소르베이트 20(polysorbate 20), 폴리소르베이트 40, 폴리소르베이트 60, 폴리소르베이트80, 폴리소르베이트 85, 포타슘 미리스테이트, 포타슘 팔미테이트, 프로필렌 글리콜(propylene glycol), 프로필렌 글리콜 디카프릴레이트/디카프레이트, 프로필렌 글리콜 디옥타노에이트, 프로필렌 글리콜 디펠라고네이트(propylene glycol dipelargonate), 프로필렌 글리콜 라우레이트, 프로필렌 글리콜 스테아레이트, 프로필렌 글리콜 스테아레이트 SE, PVP, 피리오독신 디팔미테이트(pyridoxine dipalmitate), 레티놀(retinol), 레티닐 팔미테이트(retinyl palmitate), 쌀 (오리자 사티바(Oryza sativa)) 겨(bran) 오일, RNA, 로즈마리 (로즈마리너스 오피시날리스(Rosmarinus officinalis)) 오일, 장미오일, 홍화(safflower) (카르타머스 틴토리어스(Carthamus tinctorius)) 오일, 세이지(sage) (살비아 오피시날리스(Salvia officinalis)) 오일, 샌들우드 (산탈럼 알범(Santalum album)) 오일, 세린, 혈청 단백질, 참깨 (세사멈 인디컴(Sesamum indicum)) 오일, 쉐어버터 ((부티로스퍼멈 팔키(Butyrospermum parkii)), 실크파우더(silk powder), 소듐 콘드로이틴 설페이트, 소듐 히알루로네이트, 소듐 락테이트, 소듐 팔미테이트, 소듐 PCA, 소듐 폴리글루타메이트, 수용성 콜라겐, 소르비탄 라우레이트, 소르비탄 올리에이트, 소르비탄 팔미테이트, 소르비탄 세스퀴올리에이트, 소르비탄 스테아레이트, 소르비톨, 대두 (글리신 소자(Glycine soja)) 오일, 스핑고지질, 스쿠알란, 스쿠알렌, 스테아라마이드 MEA-스테아레이트, 스테아르산(stearic acid), 스테아록시 디메티콘(stearoxy dimethicone), 스테아록시트리메틸실란, 스테아릴 알코올(stearyl alcohol), 스테아릴 글리시레티네이트, 스테아릴 헵타노에이트, 스테아릴 스테아레이트, 해바라기 (헬리아터스 아너스(Helianthus annuus)) 씨 오일, 스위트 아몬드(푸루너스 아미그달러스 듈시스(Prunus amygdalus dulcis)) 오일, 합성 비즈왁스, 토코페롤, 토포페릴 아세테이트, 토코페릴 리놀리에이트, 트리베헤닌(tribehenin), 트리데실 네오펜타노에이트, 트리데실 스테아레이트, 트리에탄올아민, 트리스테아린, 우레아, 식물성 오일, 물, 왁스, 밀 (트리티쿰 불가르(Triticum vulgare)) 싹(germ) 오일, 및 일랑일랑(ylang ylang) (카난가 오도라타(Cananga odorata)) 오일을 포함한다.

c. 항산화제

본 발명의 조성물들과 함께 사용될 수 있는 항산화제의 비제한적 예들은 아세틸 시스테인, 아스코르브산 폴리펩티드, 아스코르빌 디팔미테이트, 아스코르빌 메틸실라놀 펙티네이트(ascorbyl methylsilanol pectinate), 아스코르빌 팔미테이트, 아스코르빌 스테아레이트, BHA, BHT, t-부틸 하이드로퀴논, 시스테인, 시스테인 HCI, 디아밀하이드로퀴논, 디-t-부틸하이드로퀴논, 디세틸 티오디프로피오네이트, 디올레일 토코페릴 메틸실란올(dioleyl tocopheryl methylsilanol), 디소듐 아스코르빌 설페이트, 디스테아릴 티오디프로피오네이트, 디트리데실 티오디프로피오네이트, 도데실 갈레이트(dodecyl gallate), 에리소르빈산, 에리소르빈산 에스테르, 에틸 페룰레이트(ethyl ferulate), 페룰린산(ferulic acid), 갈산 에스테르, 하이드로퀴논, 이소옥틸 티오글리콜산, 코직산, 마그네슘 아스코르베이트, 마그네슘 아스코르빌 포스페이트, 메틸실란올 아스코르베이트, 녹차(green tea) 또는 포도씨 추출물과 같은 천연 식물성 항산화제, 노르디하이드로구아이아레트산(nordihydroguaiaretic acid), 옥 갈레이트, 페닐티오글리콜산, 포타슘 아스코르빌 토로페릴 포스페이트, 포타슘 설페이트, 프로필 갈레이트, 퀴논, 로즈마리산, 소듐 아스코르베이트, 소듐 바이설파이트(sodium bisulfite), 소듐 에리스로베이트, 소듐 메타바이설파이트, 소듐 설파이트, 과산화물제거효소(superoxide dismutase), 소듐 티오글리콜산, 소르비틸 푸르푸랄(sorbityl furfural), 티오디글리콜, 티오디글리콜아마이드, 티오디글리콜산, 티오글리콜산, 티오락트산, 티오살리실산, 토코페레스-5(tocophereth-5), 토코페레스-10, 토코페레스-12, 토코페레스-18, 토코페레스-50, 토코페롤, 토코페솔란(tocophersolan), 토코페릴 아세테이트, 토코페릴 리놀리에이트, 토코페릴 니코티네이트, 토코페릴 썩시네이트, 및 트리스(노닐페닐)포스파이트(tris(nonylphenyl)phosphite)를 포함한다.

d. 구조화제

다른 비제한적 측면들에서, 본 발명의 조성물들은 구조화제를 포함할 수 있다. 구조화제는, 특정 측면에서, 조성물의 안정성에 기여하는 조성물의 유동적 특성을 제공하는데 도움이 된다. 다른 측면들에서, 구조화제는 또한 유화제 또는 계면활성제(surfactant)로서 기능할 수 있다. 구조화제의 비제한적 예들은 스테아르산, 팔미트산, 스테아릴 알코올, 세틸 알코올, 베헤닐 알코올, 스테아르산, 팔미트산, 평균 약 1 내지 약 21 에틸렌 옥시드 유닛(ethylene oxide units)을 가지는 스테아릴 알코올의 폴리에틸렌 글리콜 에테르, 평균 약 1 내지 약 5 에틸렌 옥시드 유닛을 가지는 세틸 알코올의 폴리에틸렌 글리콜 에테르, 및 이들의 혼합물을 포함한다.

e. 유화제

본 발명의 특정 측면들에서, 상기 조성물들은 유화제를 포함하지 않는다. 다른 측면들에서, 그러나, 상기 조성물은 하나 또는 그 이상의 유화제를 포함할 수 있다. 유화제는 상들(phases) 사이의 계면 장력(interfacial tension)을 감소시킬 수 있고, 에멀젼의 제형 및 안정성을 향상시킬 수 있다. 유화제는 비이온성(nonionic), 양이온성(cationic), 음이온성(anionic), 및 쌍성이온성(zwitterionic) 유화제일 수 있다 (참조 McCutcheon's (1986); 미국 특허 번호 5,011,681; 4,421,769; 3,755,560). 비제한적 예들은 글리세린의 에스테르, 프로필렌 글리콜의 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜의 지방산 에스테르, 폴리프로필렌 글리콜의 지방산 에스테르, 소르비톨의 에스테르, 소르비탄 무수물의 에스테르, 카르복실산 코폴리머, 글루코스의 에테르 및 에스테르, 에톡시레이티드 에테르(ethoxylated ethers), 에톡시레이티드 알코올, 알킬 포스페이트, 폴리에틸렌 지방산 에테르 포스페이트(polyoxyethylene fatty ether phosphates), 지방산 아미드, 아실 락틸레이트(acyl lactylates), 비누(soaps), TEA 스테아레이트, DEA 올리스-3 포스페이트(DEA oleth-3 phosphate), 폴리에틸렌 글리콜 20 소르비탄 모노라우레이트(polyethylene glycol 20 sorbitan monolaurate) (폴리소르베이트 20), 폴리에틸렌 글리콜 5 소야 스테롤(polyethylene glycol 5 soya sterol), 스테아레스-2, 스테아레스-20, 스테아레스-21, 세테아레스-20, 세테아릴 글루코시드(cetearyl glucoside), 세테아릴 알코올(cetearyl alcohol), C12-C14 파레스-3(C12-13 pareth-3), PPG-2 메틸 글루코스 에테르 디스테아레이트(PPG-2 methyl glucose ether distearate), PPG-5-세테스-20(PPG-5-ceteth-20), 비스-PEG/PPG-20/20 디메티콘(bis-PEG/PPG-20/20 dimethicone), 세테스-10, 폴리소르베이트 80, 세틸 포스페이트, 포타슘 세틸 포스페이트(potassium cetyl phosphate), 디에탄올아민 세틸 포스페이트(diethanolamine cetyl phosphate), 폴리소르베이트 60, 글리세릴 스테아레이트, PEG-100 스테아레이트, 아라키딜 알코올(arachidyl alcohol), 아라키딜 글루코시드(arachidyl glucoside), 및 이들의 혼합물을 포함한다.

f. 실리콘 함유 화합물

비제한적 측면들에서, 실리콘 함유 화합물은 실리콘 원자에 부착된 사이드기와 실리콘 및 산소 원자가 교대로 중합되는 분자 백본(molecular backbone)을 갖는 중합성 생성물(polymeric products) 패밀리의 임의의 구성원을 포함한다. 변화하는 -Si-O- 사슬 길이, 사이드기, 및 가교 결합(crosslinking)에 의해, 실리콘들은 광범위한 물질들로 합성될 수 있다. 그들은 액체 내지 젤 내지 고체까지 농도가 다양할 수 있다.

본 발명의 문맥에서 사용될 수 있는 실리콘 함유 화합물은 본 명세서에서 설명된 것들 또는 당업자에게 공지된 것들을 포함한다. 비제한적 예들은 실리콘 오일 (예를 들면, 휘발성 및 비휘발성 오일), 젤, 및 고체를 포함한다. 다른 측면에서, 실리콘 함유 화합물은 폴리오가노실록산(polyorganosiloxane)과 같은 실리콘 오일을 포함한다. 폴리오가노실록산(polyorganosiloxane)의 비제한적 예들은 디메티콘, 싸이클로메티콘, 폴리실리콘-11, 페닐 트리메티콘, 트리메틸실릴아모디메티콘(trimethylsilylamodimethicone), 스테아록시트리메틸실란(stearoxytrimethylsilane), 또는 이들의 혼합물 및 다른 오가노실록산 물질들을 의도된 도포 (예를 들면, 피부, 털, 또는 눈과 같은 특정한 부분에)에 따른 도포 특성들 및 원하는 농도를 달성하기 위하여 주어진 임의의 비율로 포함한다. "휘발성 실리콘 오일"은 낮은 증발열을 가진 실리콘 오일을 포함한다, 예를 들어, 일반적으로 실리콘 오일의 g당 약 50 cal 이하. 휘발성 실리콘 오일의 비제한적 예들은 하기 성분들을을 포함한다: Dow Corning 344 Fluid, Dow Corning 345 Fluid, Dow Corning 244 Fluid, 및 Dow Corning 245 Fluid, Volatile Silicon 7207 (Union Carbide Corp, Danbury, Conn.)과 같은 사이클로메티콘; 낮은 점도 디메티콘, 예를 들어, 약 50 cst 또는 그 이하의 점도를 가지는 디메티콘 (예를 들면, Dow Corning 200-0.5 cst Fluid와 같은 디메티콘). 이 Dow Corning Fluid는 Dow Corning Corporation, Midland, Michigan으로부터 구입 가능하다. 사이클로메티콘 및 디메티콘은 각각 트리메틸실록시 유닛(trimethylsiloxy units)으로 말단-차단된(endblocked) 완전히 메틸화된 선형 실록산 폴리머의 혼합물 및 사이클린 디메틸 폴리실록산 화합물로서 Third Edition of the CTFA Cosmetic Ingredient Dictionary(참조로 통합됨)에서 설명된다. 본 발명의 문맥에서 사용될 수 있는 다른 비제한적 휘발성 실리콘 오일은 General Electric Co., Silicone Products Div., Waterford, N.Y. 및 SWS Silicones Div. of Stauffer Chemical Co., Adrian, Michigan으로부터 구입 가능한 것을 포함한다.

g. 에센셜 오일

에센셜 오일은 허브, 꽃, 나무, 및 다른 식물로부터 유도된 오일을 포함한다. 이러한 오일은 일반적으로 식물의 세포들 사이의 작은 방울(tiny droplets)로서 나타나고, 당업자에게 알려진 다양한 방법 (예를 들면, 증기증류법, 냉침 (예를 들어, 지방을 사용한 추출), 해리(maceration), 용매추출, 또는 기계적 압착법)에 의해 추출될 수 있다. 이러한 종류의 오일을 공기 중으로 노출시킬 때 그들은 증발(evaporate)하는 경향이 있다 (예를 들어, 휘발성 오일). 결과적으로, 많은 에센셜 오일들은 무색이지만, 시간이 지남에 따라 산화될 수 있고 어두워질 수 있다. 에센셜 오일은 물에 불용성이고, 알코올, 에테르, 고정 오일(식물성), 및 다른 유기 용매에 가용성이다. 에센셜 오일에서 발견된 일반적인 물리적 특성은 약 160 ℃ 내지 240 ℃로 다양한 끓는점 및 약 0.759 내지 1.096 범위의 밀도를 포함한다.

에센셜 오일은 일반적으로 오일이 발견된 식물로부터 명명된다. 예를 들어, 장미 오일 또는 페퍼민트 오일은 각각 장미 또는 페퍼민트 식물로부터 유래된다. 본 발명의 문맥에서 사용될 수 있는 에센셜 오일의 비제한적인 예들은 참깨 오일, 마카다미아넛 오일, 티트리 오일, 달맞이꽃 오일, 스패니쉬 세이지 오일, 스패니쉬 로즈마리 오일, 고수 오일(coriander oil), 티미 오일(thyme oil), 피멘토 열매 오일(pimento berries oil), 장미 오일, 아니스 오일(anise oil), 발삼 오일(balsam oil), 버가모트 오일(bergamot oil), 로즈우드 오일, 세다 오일(cedar oil), 카모마일 오일, 세이지 오일, 클레어리 세이지 오일, 정향 오일(clove oil), 사이프러스 오일, 유칼립투스 오일, 회향 오일(fennel oil), 바다 회향 오일, 유향 오일(frankincense oil), 제라늄 오일, 생강 오일, 자몽 오일, 자스민 오일, 주니퍼 오일, 라벤더 오일, 레몬 오일, 레몬그라스 오일, 라임 오일, 만다린 오일, 마죠람 오일(marjoram oil), 몰약 오일(myrrh oil), 등화 오일(nerolioil), 오렌지 오일, 파출리 오일(patchouli oil), 후추 오일, 흑후추 오일, 페티그레인 오일(petitgrain oil), 소나무 오일, 장미 오또 오일(rose otto oil), 로즈마리 오일, 샌들우드 오일, 스피아민트 오일, 감송 오일, 베티버(vetiver) 오일, 윈터그린 오일(wintergreen oil), 또는 일랑일랑(ylang ylang)을 포함한다. 당업자에게 알려진 다른 에센셜 오일들 또한 본 발명의 문맥에서 유용한 것으로 고려된다.

h. 증점제

증점제(thickener) 또는 겔화제(gelling agents)를 포함하는 증점제(Thickening agents)는 조성물의 점도를 증가시킬 수 있는 물질들(substances)을 포함한다. 증점제는 조성물 내의 활성 성분들의 효능을 실질적으로 변형시키지 않는 조성물의 점도를 증가시킬 수 있는 것들을 포함한다. 증점제는 또한 본 발명의 조성물들의 안정성을 증가시킬 수 있다. 본 발명의 특정 측면들에서, 증점제는 수소화된 폴리이소부텐(hydrogenated polyisobutene), 트리하이드록시스테아린(trihydroxystearin), 암모늄 아크릴로일디메틸타우레이트/vp 코폴리머(ammonium acryloyldimethyltaurate/vp copolymer), 또는 그들의 혼합물을 포함한다.

본 발명의 문맥에서 사용될 수 있는 추가적인 증점제의 비제한적 예들은 카르복실산 폴리머, 교차결합된 폴리아크릴레이트 폴리머(crosslinked polyacrylate polymers), 폴리아크릴아마이드 폴리머(polyacrylamide polymers), 다당류(polysaccharides), 및 검류(gums)를 포함한다. 카르복실산 폴리머의 예들은 아크릴산, 치환된 아크릴산, 및 이들 아크릴산 및 치환된 아크릴산의 에스테르들 및 염들로부터 유도된 하나 또는 그 이상의 모노머를 포함하는 교차결합 된 화합물 포함하고, 여기서 가교제(crosslinking agent)는 둘 또는 그 이상의 탄소-탄소 이중 결합을 포함하고 다가 알코올로부터 유도된다 (참조 미국특허 번호 5,087,445; 4,509,949; 2,798,053; CTFA International Cosmetic Ingredient Dictionary, Fourth edition, 1991, 12 및 80 페이지). 상업적으로 구입 가능한 카르복실산 폴리머의 실시예들은 수크로오스 또는 펜타에리스리톨 알릴 에테르와 교차결합된 아크릴산의 동종중합체(homopolymers)인 카보머(carbomers)을 포함한다 (예를 들면, B. F. Goodrich사의 Carbopol™ 900 series).

교차결합된 폴리아크릴레이트 폴리머의 비제한적 예들은 양이온성 및 비이온성 폴리머를 포함한다. 실시예들은 미국특허 번호 5,100,660; 4,849,484; 4,835,206; 4,628,078; 4,599,379에서 설명된다.

폴리아크릴아마이드 폴리머 (치환 분지 또는 비분지 폴리머를 포함하는 비이온성 폴리아크릴아마이드 폴리머 포함)의 비제한적 예들은 폴리아크릴아마이드, 이소파라핀 및 라우레스-7, 아크릴산 및 치환된 아크릴산과 아크릴아마이드 및 치환된 아크릴아마이드의 다중-블럭(multi-block) 코폴리머를 포함한다.

다당류의 비제한적 예들은 셀룰로오스, 카복시메틸 하이드록시에틸셀룰로오스, 셀룰로오스 아세테이트 프로피오네이트 카르복실레이트, 하이드록시에틸셀룰로오스, 하이드록시에틸 에틸셀룰로오스, 하이드록시프로필셀룰로오스, 하이드록시프로필 메틸셀룰로오스, 메틸 하이드록시에틸셀룰로오스, 마이크로크리스탈린 셀룰로오스(microcrystalline cellulose), 소듐 셀룰로오스 설페이트, 및 이들의 혼합물을 포함한다. 또 다른 실시예는 에테르 결합을 통해 C10-C30 직쇄 또는 분지쇄 알킬기로 더 변형된 하이드록시알킬화된 셀룰로오스를 형성하기 위해 셀룰로오스 폴리머의 하이드록시기가 하이드록시알킬화된 (바람직하게는 하이드록시 에틸화 또는 하이드록시 프로필화 된) 알킬 치환된 셀룰로오스이다. 일반적으로 이들 폴리머들은 하이드록시알킬셀룰로오스와 C10-C30 직쇄 또는 분지쇄 알코올의 에테르들이다. 다른 유용한 다당류는 (1-6) 결합된 글루코스 매 3유닛과 (1-3) 연결글루코스 유닛의 직쇄(linear chain)를 포함하는 스클레로글루칸(scleroglucans)을 포함한다.

본 발명과 함께 사용될 수 있는 검류의 비제한적 예들은 아카시아, 아가(agar), 알긴, 알긴산, 암모늄 알지네이트, 아밀로펙틴, 칼슘 알지네이트, 칼슘 카라기닌(calcium carrageenan), 카르니틴(carnitine), 카라기난(carrageenan), 덱스트린, 젤라틴, 젤란검(gellan gum), 구아검(guar gum), 구아 하이드록시프로필트리모늄 클로라이드(guar hydroxypropyltrimonium chloride), 헥토라이트(hectorite), 히알루론산, 실리카 수화물(hydrated silica), 하이드로프로필 키토산, 하이드로프로필 구아, 카라야검(karaya gum), 켈프, 로커스트 콩 검(locust bean gum), 나토검(natto gum), 포타슘 알지네이트, 포타슘 카라기난, 프로필렌 글리콜 알지네이트, 스크렐로티움검(sclerotium gum), 소듐 카르복시메틸 덱스트란, 소듐 카라기난, 트라가칸트검(tragacanth gum), 잔탄검(xanthan gum), 및 이들의 혼합물을 포함한다.

i. 보존제

본 발명의 문맥에서 사용될 수 있는 보존제의 비제한적 예들은 폴리쿼터늄-1(polyquaternium-1) 및 벤잘코늄 할라이드(benzalkonium halides) (예를 들면, 벤잘코늄 클로라이드"BAC" 및 벤잘코늄 브로마이드)와 같은 제4기 암모늄 보존제(quaternary ammonium preservatives), 파라벤 (예를 들면, 메틸파라벤 및 프로필파라벤), 페녹시에탄올, 벤질알코올, 클로로부탄올, 페놀, 소르브산, 티메로살 또는 이들의 조합을 포함한다.

2. 제약 성분들

제약 활성제는 또한 본 발명의 조성물들과 함께 유용하게 사용되는 것으로 고려된다. 제약 활성제의 비제한적 예들은 항여드름제(antiacne agents), 주사(rosacea) 치료하는데 사용되는 약품(agents), 진통제(analgesics), 마취제(anesthetics), 아노렉탈(anorectals), 항히스타민제, 비스테로이드성 항염증약물을 포함하는 항-염증제, 항생제(antibiotics), 항진균제, 항바이러스제, 항균제, 항암 활성제(anti-cancer actives), 옴치료제(scabicides), 이치료제(pediculicides), 항암제(antineoplastics), 발한억제제(antiperspirants), 항소양제(antipruritics), 항건선제(antipsoriatic agents), 항지루제(antiseborrheic agents), 생리활성단백질 및 펩티드, 화상치료제, 소작제(cauterizing agents), 미백제(depigmenting agents), 제모제(depilatories), 기저귀 발진 치료제, 효소, 모발성장촉진제, DFMO 및 그 염들 및 유사체들을 포함하는 모발성장지연제, 지혈제, 각질용해제, 구내염 치료제, 입술 발진 치료제, 치아 및 치주 치료제, 감광활성제, 피부 보호제/차단제, 호르몬 및 코르티코스테로이드를 포함하는 스테로이드), 일광화상 치료제, 자외선차단제, 경피 활성제(transdermal actives), 코 활성제(nasal actives), 질 활성제(vaginal actives), 무사마귀(wart) 치료제, 상처치료제(wound treatment agents), 상처 치유제(wound healing agents), 등을 포함한다.

F. 키트

키트는 또한 본 발명의 특정 측면에서 사용될 수 있는 것으로 고려된다. 예를 들어, 본 발명의 조성물들은 키트에 포함될 수 있다. 키트는 용기(container)를 포함할 수 있다. 용기는 병, 금속관, 라미네이트관, 플라스틱관, 디스펜서(dispenser), 압력 용기(pressurized container), 차단 용기(barrier container), 패키지(package), 칸막이(compartment), 립스틱 용기, 소형 용기(compact container), 화장용 조성물을 유지할 수 있는 화장용 팬(cosmetic pans), 또는 내부에 분산물 또는 조성물 또는 원하는 병, 디스펜서, 또는 패키지가 유지되는 사출 또는 블로우 성형된 플라스틱 용기와 같은 다른 유형들의 용기를 포함할 수 있다. 키트 및/또는 용기는 표면에 표시(indicia)을 포함할 수 있다. 예를 들어, 표시는 문자, 구문(phrase), 약어, 사진, 또는 상징일 수 있다.

상기 용기는 조성물의 선결정된 양을 제공할 수 있다. 다른 실시예들에서, 용기는 원하는 조성물의 양을 제공하기 위해 압착(squeezed)될 수 있다 (예를 들면, 금속, 라미네이트 또는 플라스틱 관). 상기 조성물은 스프레이, 에어로졸, 액체, 플루이드, 또는 반고체(semi-solid)로 제공될 수 있다. 상기 용기는 스프레이, 펌프, 또는 압착 메카니즘(squeeze mechanisms)을 가질 수 있다. 키트는 또한 키트 구성물을 이용하기 위한 설명뿐만 아니라 용기에 포함된 다른 임의의 조성물의 사용법을 포함할 수 있다. 설명(Instructions)은 조성물을 유지, 사용, 및 도포하는 방법의 설명서(explanation)을 포함할 수 있다.

실시예

하기 실시예들은 본 발명의 바람직한 실시예들을 설명하기 위해 포함된다. 실시예들에서 기술들이 개시됨은 당업자에 의해 인식되어야 하고, 이를 본 발명의 실시(practice)에서 잘 기능하도록 발명자에 의해 발견된 대표적인 기술들이 뒤따르며, 따라서 그 실시에 바람직한 방식을 구성하는 것으로 간주될 수 있다. 그러나, 당업자는 본 발명에서 개시된 특정 실시예들에서 변화가 이루어질 수 있고, 여전히 본 발명의 사상 및 범주로부터 벗어나지 않는 동일하거나 또는 유사한 결과를 얻을 수 있다는 것을 인식해야 한다.

실시예 1

본 명세서에 개시된 성분들을 포함하는 제형들을 국소 피부 및/또는 모발 조성물들로서 준비하였다. 비제한적 예로서, 표 1의 제형은 아이 크림으로서 준비하였다.

본 명세서에 청구되고 개시된 조성물들 모두는 본원의 개시를 고려하여 과도한 실험 없이 실행될 수 있고 제조될 수 있다. 본 발명의 조성물들 및 방법들이 바람직한 실시예들의 측면에서 설명되는 동안, 당업자에게 변형들이 조성물들 및/또는 방법들 및 본 발명의 개념, 사상 및 범주로부터 벗어나지 않는 본 명세서에서 설명된 방법의 단계들의 연속(sequence) 또는 단계들 및 조성물에 적용될 수 있다는 것이 명백할 것이다. 보다 구체적으로, 화학적 및 생리적으로 모두 관련된 특정 제제들은 동일하거나 유사한 결과들이 달성되는 동안 본 명세서에서 설명된 제제들을 대체할 수 있음이 명백할 것이다. 당업자에게 명백한 이러한 모든 유사한 대체물들 및 변형물들은 첨부된 청구범위들에 의해 정의된 바와 같이 본 발명의 개념, 사상 및 범주 내에 있는 것으로 간주된다.

성분	% 농도 (중량)
물	48
글리세린	11
바셀린	8
미네랄 오일	8
수소화된 폴리데센	5
세틸 에스테르	4
비스-디글리세릴 폴리아실아디페이트-2	3
부틸렌 글리콜	2
수소화된 폴리이소부텐	2
소르비탄 올리베이트	2
세테아릴 올리베이트	2
세틸 팔미테이트	1
세테아릴 알코올	1
소르비탄 팔미테이트	0.8
테트라헥실데실 아스코르베이트	0.5
실리카	0.5
세테아레스-20	0.3
디아졸리디닐 우레아	0.3
토코페릴 아세테이트	0.2
트리에탄올아민	0.2
아크릴레이트/C10-30 알킬 아크릴레이트 크로스폴리머	0.1
프로필렌 글리콜	0.1
센텔라 아시아티카 추출물	0.1
매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물 또는 매그놀리아 오피날리스 껍질 추출물	0.06
헤스피리딘 메틸 칼콘	0.05
피숨 사티붐 추출물	0.02
시트러스 그랜디스 껍질 추출물	0.01
센텔라 아시아티카 분열조직 세포 배양물 (선택적)	0.002
매그놀리아 비온디 꽃 추출물	0.002
디펩타이드-2	0.001
팔미토일 테트라펩타이드-7	0.0003
트리펩타이드-1	0.00005
오푼시아 투나 열매 추출물 (선택적)	0.0005
첨가제(Excipients)**	적량

*제형은 비커에서 70-75 ℃ 열 하에서 균일해질 때까지 성분들을 혼합하여 준비될 수 있다. 그 후, 상기 제형은 실온으로 냉각될 수 있다 (20-25 ℃). 또한, 그리고 원한다면, 추가적인 성분들이, 예를 들어, 조성물의 유동적 특성들을 변형시키기 위해 첨가될 수 있다.

**첨가제들은 예를 들어, 조성물의 유동적 특성들을 변형시키기 위해 첨가될 수 있다. 대안적으로, 물의 양은 조성물 내의 물의 양이 적어도 35% w/w, 및 바람직하게는 40 내지 60% w/w 사이이기만 하면 변화될 수 있다.

실시예 2

(생체 외( In Vitro ) 활성 성분들의 효능)

성분들의 효능(efficacy)은 하기 방법들에 의해 결정된다. 하기는 본 발명의 문맥에서 사용될 수 있는 비제한적 분석들(assays)이다. 다른 테스트 절차들이 사용될 수 있음이 인식되어야 하고, 이는 예를 들어, 객관적이고 주관적인 절차들을 포함한다.

센텔라 아시아티카 추출물은 히알루론산 합성을 증가시카고, 라미닌 생성을 증가시키며, 멜라닌 생성을 억제하고, 그리고 티로시나아제 활성을 감소시킴이 결정되었다. 또한 센텔라 아시아티카 분열조직 세포 배양물은 히알루론산 생성을 증가시키고 티로시나아제 활성을 감소시킴이 결정되었다. 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물은 종양 괴사 인자 알파 (TNFα)를 억제하고, 항상화 능력을 가지며, 라미닌 생성을 증가시키고, 그리고 멜라닌 생성을 억제함이 결정되었다. 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물은 항산화 능력을 제공하고, 멜라닌 생성을 억제하며, 염증성 사이토카인의 발현을 억제하고, TNF-α를 억제하며, IL-1β를 억제하고, IL-6를 억제하며, IL-10을 억제하고, IL-2를 억제하며, 그러고 COX-1을 억제함이 결정되었다. 피숨 사티붐 추출물은 항산화 능력을 가지고, 콜라겐 I을 증가시키며, 엘라스타아제를 억제하고, 그리고 피브로넥틴 생성을 증가시킴이 결정되었다. 시트러스 그랜디스 껍질 추출물은 라미닌 생성을 증가시키고 내피 관 형성을 방해함이 결정되었다. 매그놀리아 비온디 꽃 추추물은 혈관내피증식인자 (VEGF)를 억제하고 내피 관 형성을 방해함이 결정되었다. 헤스피리딘 메틸 칼콘, 디펩타이드-2, 및 팔미토일 테트라펩타이드-1의 조합물은 항산화 능력을 가지고, 라미닌 생성을 증가시키며, 그리고 기질 금속단백질분해효소-1 (MMP1)을 억제함이 결정되었다. 트리펩타이드-1은 콜라겐 I 생성을 증가시키고 히알루론산 생성을 증가시킴이 결정되었다.

정량적 생체 외(in vitro) 결과들의 요약은 표 2에서 발견되고 성분들의 특성들을 결정하는데 이용된 방법들은 하기에 제공된다.

분석(Assay)	성분	활성(Activity)
히알루론산 합성	센틸라 아시아티카 추출물 트리펩타이드-1 센틸라 아시아티카 분열조직 세포 배양물	+91% +93% +48%
라미닌 분비	센틸라 아시아티카 추출물 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물 시트러스 그랜디 껍질 추출물 헤스피리딘 메틸 칼콘, 디펩타이드-2, 팔미토일 테트라펩타이드-7의 조합물	+117% +95% +132% +117%
피브로넥틴 분비	피숨 사티붐 추출물	+31%
콜라겐 자극	피숨 사티붐 추출물 트리펩타이드-1	+46% +20%
엘라스타아제의 억제	피숨 사티붐 추출물	-20%
MMP1의 억제	헤스피리딘 메틸 칼콘, 디펩타이드-2, 팔미토일 테트라펩타이드-7의 조합물	-23%
멜라닌 생성의 억제	센틸라 아시아티카 추출물 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물	-28% -37% -63%
티로시나아제의 억제	센틸라 아시아티카 추출물 센틸라 아시아티카 분열조직 세포 배양물	-25% -55%
내피 관 형성	센틸라 아시아티카 추출물 시트러스 그랜디 껍질 추출물 매그놀리아 비온디 꽃 추출물	억제 억제 억제
TNF-α의 억제	매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물	-98% -93%
VEGF의 억제	매그놀리아 비온디 꽃 추출물	-26%
IL-1β의 억제	매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물	-100%
IL-6의 억제	매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물	-95%
IL-10의 억제	매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물	-88%
IL-2의 억제	매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물	-100%
COX-1의 억제	매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물	-61%
항산화 능력	매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물 피숨 사티붐 추출물 헤스피리딘 메틸 칼콘, 디펩타이드-2, 팔미토일 테트라펩타이드-7의 조합물	85% (ORAC) (가짐) 34% (AO) 47% (AO)

히알루론산 생성 자극 - 센텔라 아시아티카 추출물, 트리펩타이드-1, 및 센텔라 아시아티카 분열조질 세포 배양물은 각각 진피 섬유아세포(dermal fibroblasts)에서 히알루론산 (HA)의 생성을 촉진하는 것으로 나타났다. HA는 기질(matrix)의 구조의 안정화에 관련된 다당류이고 조직 및 세포들에 팽창(turgor) 압력 제공에 관련된다. 처리된 및 비처리된 성인 인간 진피 섬유아세포 (HDFa) 세포들에서 HA 생성은 R&D Systems의 Hyaluronan DuoSet ELISA 키트 (DY3614)를 사용하여 결정하였다. 이것은 센텔라 아시아티카 추출물, 트리펩타이드-1, 및 센텔라 아시아티카 분열조직 세포 배양물이 진피 섬유아세포에서 각각 +91%, +93%, 및 +48%로 HA의 생성을 자극함을 결정하였다.

샘플들에서, Cascade Biologics (C-13-5C)의 서브컨플루언트(subconfluent) HDFa 세포들은 37 ℃ 및 10% CO₂의 기아 배지(starvation medium) (Dulbecco's Modified Eagle Medium의 0.15%의 소태아혈청(fetal bovine serum) 및 1% 페니실린 스트렙토마이신(Penicillin Streptomycin) 용액)에서 72시간 동안 처리 전에 배양하였다. 세포들은 그 다음 테스트 처리, 양성 대조군 (Sigma-Aldrich의 포르볼 12-미리스테이트 13-아세테이트(phorbol 12-myristate 13-acetate) (P1585) 및 Sigma-Aldrich의 혈소판 유래 성장 인자 (P3201), 또는 무첨가로 24시간 동안 새로운 기아 배지로 배양하였다. 배지는 회수하였고 -80 ℃에서 ELISA 분석에서 사용할 때까지 냉동시켰다.

간단히 말하면, ELISA 분석은 정략적 샌드위치 효소 면역분석 기술을 이용하고 여기서 HA 특이적 포획(capture) 항체는 마이크로 플레이트 위에 미리 코팅되었다. 표준(Standards), 처리된 세포들 및 비처리된 세포들로부터 배지를 마이크로플레이트 웰들(wells)에 임의의 HA 존재가 비이동화된 항체에 의해 결합되도록 파이펫으로 옮겼다. 임의의 미결합된 물질들이 세척한 후, HA에 특이적인 효소-연결된 감지 항체를 웰들에 첨가하였다. 임의의 미결합된 항체-효소 시약(reagent)을 제거하기 위해 세척한 후, 기질(substrate) 용액을 초기 단계에서 결합된 HA의 양에 비례하여 발색(color development)하도록 웰들에 첨가하였다. 발색은 특정 시간에서 중단되었고 450 nm에서 색의 강도(intensity)는 마이크로플레이트 리더(reader)를 사용하여 측정하였다.

라미닌, 피브로넥틴, 및 콜라겐 자극 분석 - 센텔라 아시아티카 추출물, 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물, 시트러스 그랜디스 껄집 추출물, 및 헤스피리딘 메틸 칼콘, 디펩타이드-2, 및 팔미토일 테트라펩타이드-7의 조합물은 라미닌 분비를 증가시키는 것으로 나타났다. 피숨 사티붐 추출물은 피브로넥틴 분비를 증가시키는 것으로 나타났다. 피숨 사티붐 추출물 및 트리펩타이드-1은 프로콜라겐 펩타이드(procollagen peptide) (콜라겐 전구체(precursor) 분비를 증가시키는 것으로 나타났다. 라미닌 및 피브로넥틴은 진피-상피 접합(dermal-epidermal junction) (DEJ) (또한 기저막(basement membrane)으로 나타냄)에서 주요한 단백질들이다. DEJ는 망융선(rete ridges)라고 불리는 손가락유사 돌기들(fingerlike projections)을 형성하는 진피(dermal) 및 표피(epidermal) 맞물림들(interlocks) 사이에 위치한다. 표피의 세포들은 그들의 영양분들을 진피의 혈관으로부터 받는다. 망윤선은 혈관에 노출되고 영양분이 필요한 표피의 표면적을 증가시킨다. DEJ는 두 조직 구획들(compartments)의 부착을 제공하고 피부의 구조적 강도를 결정한다. 라미닌 및 피브로넥틴은 DEJ에 위치하는 두 구조적 당단백질들(glycoproteins)이다. 세포들을 서로 붙잡는 접착제(glue)를 고려하면(Considered the glue that holds the cells together), 2-라미닌 및 피브로넥틴은 DEJ로 향하는 표피의 세포내(intra-cellular) 및 세포간(inter-cellular) 부착 촉진을 돕도록 진피 섬유아세포에 의해 분비된다. 콜라겐은 피부 구조에 결정적인 세포외 기질 단백질이다. 증가된 콜라겐 합성은 피부 경도 및 탄력을 개선하는 것을 돕는다. 라미닌, 피브로넥틴, 및 프로콜라겐 펩타이드 분비를 배양된 인간 섬유아세포에서 효소 결합 면역 흡착 검사(enzyme linked immuno-sorbant assay) (ELISA)에서 각 단백질에 대해 지시된(directed against) 면역형광 항체들을 이용하여 모니터하였다. 이것은 센텔라 아시아티카 추출물, 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물, 시트러스 그랜디스 껍질 추출물, 및 헤스피리딘 메틸 칼콘, 디펩타이드-2, 및 팔미토일 테트라펩타이드-7의 조합물이 라미닌 분비를 각각 +117%, +95%, +132%, 및 +117% 증가시킴을 결정하였다. 이것은 피숨 사티붐 추출물이 피브로넥틴 분비를 +31% 증가시킴을 결정하였다. 이것은 또한 피숨 사티붐 추출물 및 트리펩타이드-1이 프로콜라겐 분비를 각각 +46% 및 +20% 증가시킴을 결정하였다.

간단히 말하면, 라미닌, 피브로넥틴, 및 프로콜라겐 분비를 37 ℃의 10% CO₂에서 10% 소태아혈청 (Mediatech)을 갖는 표준 DMEM 성장 배지에서 3일 동안 테스트 성분(들)의 1.0%의 최종 농도로 처리되거나 처리되지 않은 서브컨플루언트(subconfluent) 정상 인간 성인 표피 섬유아세포 (Cascade Biologics)의 세포 상등액에서 이들 단백질들의 정량화에 의해 모니터하였다. 배양 후, 라미닌, 피브로넥티, 및 프로콜라겐 함량은 효소 결합 면역 흡착 검사 (ELISA)에서 각 단백질에 대해 지시된 면역형광 항체들을 이용하여 측정하였다. 측정은 세포 대사 활성에 대해, 3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-5-(3-카복시메톡시페닐)-2-(4-설포페닐)-2H-테트라졸륨(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium) (MTS) 생물학적 변환(bioconversion)에 의해 결정된 것과 같이 표준화되었다.

엘라스타아제 활성의 억제 - 피숨 사티붐 추출물은 엘라스타아제 활성을 억제하는 것으로 나타났다. 엘라스타아제는 엘라스틴(elastin)을 분해하는 효소이다. 피숨 사티붐 추출물 엘라스타아제 활성 억제는 Molecular Probes (Eugene, Oregon USA)로부터 ENZCHEK® Elastase Assay (Kit# E-12056)를 이용하여 결정되었다. 이 키트는 엘라스타아제 활성의 억제를 측정하기 위한 생체외 효소 억제 분석으로 사용되었다. 이것은 피숨 사티붐 추출물이 엘라스타아제 활성을 20%로 억제함을 결정하였다.

간단히 말하면, ENZCHEK® 키트는 공액의 형광성(conjugate's fluorescence)이 소광되는 염료(dye)로 표지된 용해성 소목 인대 엘라스틴을 포함한다. 비형광 소목 인대 엘라스틴 기질은 고도로 형광 단편들을 수득하기 위해 엘라스타아제 또는 다른 프로테아제(proteases)에 의해 소화된다. 형광의 초래된 증가(resulting increase in fluorescence)는 형광 마이크로플레이트 리더로 모니터하였다. 엘라스틴 기질의 소화 산물들은 ~505 nm에서 최대 흡수를 갖고 ~515 nm에서 최대 형광 발광을 갖는다. 피숨 사티붐 추출물 또는 비처리물(no treatment)을 엘라스타아제의 억제를 결정하기 위해 소화 반응으로 첨가하였다. 양성 대조군으로, N-메톡시숙시닐-Ala-Ala-Pro-Val- 클로로메틸(N-methoxysuccinyl-Ala-Ala-Pro-Val- chloromethyl) 케톤을 엘라스타아제 활성의 선택적, 회수적 억제제로 이용하였다.

기질 금속단백질분해효소 1 효소 (MMP1)의 억제 - 헤스피리딘 메틸 칼콘, 디펩타이드-2, 및 팔미토일 테트라펩타이드-7의 조합물은 MMP1을 억제하는 것으로 나타났다. MMP들은 그들의 넓은 기질 특이성 덕분에 많은 정상 및 질병 상태에서 역할을 하는 세포외 프로테아제이다. MMP1 기질들은 콜라겐 IV를 포함한다. 헤스피리딘 메틸 칼콘, 디펩타이드-2, 및 팔미토일 테트라펩타이드-7의 조합물의 존재 또는 부재에서 MMP1의 활성은 Molecular Probes Enz/Chek Gelatinase/ Collagenase Assay 키트 (#E12055)를 사용하여 결정되었다. 이것은 헤스피리딘 메틸 칼콘, 디펩타이드-2, 및 팔미토일 테트라펩타이드-7의 조합물이 MMP1 활성을 23%로 억제함을 결정하였다.

간단히 말하면, 상기 키트는 생체외 MMP1 프로테아제 활성을 검출하기 위한 형광원(fluorogenic) 젤라틴 기질을 활용한다. 형광원 젤라틴 기질의 단백질분해성 절단(proteolytic cleavage)에 따라, 밝은 그린 형광이 나타나고 효소적 활성을 측정하기 위해 형광 마이크로플레이트 리더를 이용하여 모니터하였다. 테스트 물질들 또는 대조군 시약들은 그들의 프로테아제 억제제 능력을 결정하기 위해 정제된 효소 및 기질의 존재 또는 부재에서 배양되었다.

B16 색소 침착 분석 - 센텔라 아시아티카 추출물, 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물, 및 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물은 멜라닌 형성을 억제하는 것으로 나타났다. 멜라닌 형성은 멜라닌 형성 세포(melanocytes)가 멜라닌, 피부, 모발, 및 눈에 색을 부여하는 자연적으로 생성된 색소,을 생성하는 과정이다. 멜라닌 형성 억제는 피부의 다크닝(darkening)을 방지하고 노화와 관련된 다크 스팟들을 밝게하는데 도움이 된다. B16 세포에서 멜라닌 형성은 센텔라 아시아티카 추출물 및 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물의 존재 또는 부재에서 멜라닌 분비 측정에 의해 결정되었다. 이것은 센텔라 아시아티카 추출물, 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물, 및 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물이 멜라닌 형성을 각각 28%, 37%, 및 63%로 억제함을 결정하였다.

멜라닌 형성은 B16-F1 멜라닌 형성세포 (ATCC), 무한증식 마우스 흑색종 세포계(immortalized mouse melanoma cell line)를 이용하여 결정되었다. 이 분석의 종료점(endpoint)은 멜라닌 생성 및 세포 생존력의 분광광도 측정(spectrophotometric measurement)이다. B16-F1 멜라닌 형성 세포는 10% 소태아혈청 (Mediatech)을 갖는 표준 DMEM 생장 배지에서 37 ℃의 10% CO₂에서 배양되었고 그 다음 테스트된 추출물들로 6일 동안 처리 또는 비처리되었다. 배양 후, 멜라닌 분비는 405 nm에서 흡광도에 의해 측정되었고 세포 생존력은 정량화되었다.

버섯 티로시나아제 활성 분석 - 센텔라 아시아티카 추출물 및 센텔라 아시아티카 분열조직 세포 배양물은 티로시나아제 활성을 억제하는 것으로 나타났다. 포유류의 세포에서, 티로시나아제는 티로신으로부터 (및 도파크롬(dopachrome)의 중합으로부터) 멜라닌 색소의 다중 단계 생합성의 두 단계를 촉매한다. 티로시나아제는 멜라닌 형성 세포에 위치하고 피부, 모발, 및 눈에 색을 부여하는 멜라닌 (방향족 퀴논 화합물)을 생성한다. 센텔라 아시아티카 추출물 및 센텔라 아시아티카 분열조직 세포 배양물의 존재 또는 부재에서 이의 기질 L-도파(L-Dopa)의 티로시나아제 활성은 비색 버섯 티로시나아제 활성 분석을 이용하여 결정되었다. 이것은 센텔라 아시아티카 추출물 및 센텔라 아시아티카 분열조직 세포 배양물이 티로시나아제를 각각 25% 및 55%로 억제함을 결정하였다.

티로시나아제 활성은 이의 기질, L-도파 (Fisher)을 산화하는 정제된 버섯 티로시나아제 (Sigma)의 능력을, 센텔라 아시아티카 추출물 및 센텔라 아시아티카 분열조직 세포 배양물의 존재 또는 부재에서 측정하여 분석하였다. 티로시나아제에 의한 L-도파의 산화는 색소를 생성하였고 이를 490 nm에서 비색 플레이트 리더에 의해 계산하였다. 버섯 티로시나아제 활성의 억제 백분율을 계산하였고 정제된 효소의 활성을 억제하는 테스트 성분들의 능력을 결정하기 위해 비처리된 대조군들과 비교하였다. 테스트 억제는 티로시나아제 억제제로 잘 알려진 코지산(kojic acid) (Sigma)과 비교하였다.

내피 관 형성 - 센텔라 아시아티카 추출물, 시트러스 그랜디스 껍질 추출물, 및 매그놀리아 비온디 꽃 추출물은 내피 관 형성을 억제하는 것으로 나타났다. 내피 관 형성은 혈관 형성 및 미세-혈관 모세관(micro-vessel capillary) 형성에 관련된다. 모세관 형성 및 혈관 형성은 피부의 붉기(redness) 및 주사에 기열할 수 있다. 테스트 추출물들 및 화합물들의 존재 또는 부재에서 관들을 형성하는 내피 세포의 능력은 세포 배양 시스템에서 미리 형성된 일차 인간 제대정맥혈관내피세포(human umbilical vein endothelial cells) (HUVEC)와 함께 모세소관붕괴분석(capillary tubule disruption assay)을 이용하여 결정하였다. 이것은 센텔라 아시아티카 추출물, 시트러스 그랜디스 껍질 추출물, 및 매그놀리아 비온디 꽃 추출물이 내피 관 형성을 억제함을 결정하였다.

간단히 말하면, HUVEC들은 세포외 기질에서 생체외 배양하였고, 이것은 모세관 유사 내강(capillary-like lumen) 구조들을 형성하기 위해 내피 세포의 관 형태형성(tubular morphogenesis) 및 부착을 자극한다. 이 생체외 형성된 모세관들(capillary tubules)은 인간 혈관 모세관들과 많은 측면들에서 유사하다. 상기 모세관(capillary tube) 분석은 이러한 현상에 근거하고 잠재적 맥관 구조(vasculature) 목적 제제들(targeting agents)의 평가에 이용하였다.

HUVEC 배양물들은 5% CO₂ 37 ℃ 세포 배양기(incubator)에서 생장하였다. HUVEC들을 위한 완전 생장 배지(full growth medium)는 2% 소태아혈청 (FBS), 12 μg /ml 소 뇌 추출물, 1 μg /ml 하이드로코르티존(hydrocortisone), 및 1 μg/ml GA-1000 (겐타마이신-암포테리신(gentamicin-amphothericin))이 보충된 Endothelial Cell Basal Medium (EBM)이다. 3 내지 8 관 사이의 HUVEC 배양물들(HUVEC cultures between passage 3 and 8) 모든 분석 실험들에 사용되었다.

HUVEC들은 형광 제 Calcein AM으로 미치 표지되었고 그들의 완전 배양 배지를 갖는 세포외 기질 코팅된 96-웰(96-well) 배양 플레이트에 심었다. 형태형성 과정의 약 4시간 후, 내피 모세관들이 형성되었다. 그 다음, 50μl 부피의 설계된 용량의 테스트 제(test agent)를 처리 조건들과 같이 형성된 모세관 배양물로 적용하였다. 비처리 대조군을 테스트 제들의 비히클에 첨가하였다. 수텐트(Sutent), FDA 승인된 항-혈광형성성 약물 일 농도(one concentration)가 분석 성능 대조군으로서 포함되었다. 처리 약 6시간 후, 각 웰에서 내피관 형태는 현미경, 각 웰들이 촬영된 이미지들에 의해 조사되었고, 처리 조건들 하에서 모세관 방해 활동들이 정량적으로 분석되었다. 각 테스트 조건들은 한쌍의(duplicate) 웰들에서 수행되었고, 대조군들을 포함한다.

종양 괴사 인자 알파 (TNF-α)의 억제 - 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물 및 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물은 케라틴 생성 세포에서 TNF-α 생성을 억제하는 것으로 나타났다. TNF-α는 TNF 수퍼패밀리(superfamily)의 기본형 리간드(prototype ligand)이다. 이것은 염증에서 중심 역할을 하는 다면 발현성(pleiotropic) 사이토카인이다. 이의 발현의 증가는 염증전 활성의 상향 조절(up regulation)과 관련된다. 바이오분석(bioassay)이 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물의 효과를 분석하기 위해 사용되었고 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물은 TNF-α 및 세포 생존력의 존재를 반영하는 분광광도 측정을 사용하였다. 이것은 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물이 케라틴 생성 세포에서 TNF-α 생성을 98% 억제하고 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물은 케라틴 생성 세포에서 TNF-α 생성을 93% 억제함을 결정하였다.

서브컨플루언트(Subconfluent) 정상 인간 성인 케라틴 생성 세포 (Cascade Biologics)는 EpiLife 표준 생장 배지 (Cascade Biologics)에서 5% CO₂ 37 ℃로 배양하였고, 포르볼 12-미리스테이트 13-아세테이트(phorbol 12-myristate 13-acetate) (PMA , 10ng/ml, Sigma Chemical, #P1585-1MG) 및 또한 추출물 (처리된 샘플들) 또는 추가적인 처리 없이 (비처리된 샘플)로 6시간 동안 처리하였다. PMA는 TNF-α 분비에서 처리 후 6 시간에서 피크인 극적인 증가를 야기한다. 배양 후, 세포 배양 배지는 회수되었고 TNF-α 분비량은 R&D Systems (#DTA00C)의 샌드위치 효소 결합 면역 흡착 검사 (ELISA)를 이용하여 정량화하였다.

간단히 말하면, ELISA 분석은 정략적 샌드위치 효소 면역분석 기술을 이용하고 여기서 TNF-α 특이적 단클론 항체(monoclonal antibody)가 마이크로 플레이트 위에 미리 코팅되었다. 표준(Standards) 및 처리되고 비처리된 샘플들은 마이크로플레이트 웰들(wells)에 임의의 TNF-α 존재가 비이동화된 항체에 의해 결합되도록 파이펫으로 옮겼다. 임의의 미결합된 물질들을 세척한 후, TNF-α 특이적인 효소-연결된 다클론 항체(polyclonal antibody)를 웰들에 첨가하였다. 임의의 미결합된 항체-효소 시약(reagent)을 제거하기 위해 세척 후, 기질(substrate) 용액을 초기 단계에서 결합된 TNF-α의 양에 비례하여 발색(color development)하도록 웰들에 첨가하였다. 발색은 특정 시간에서 중단되었고 450 nm에서 색의 강도(intensity)는 마이크로플레이트 리더를 사용하여 측정하였다.

사이클로옥시게나아제 (COX) 분석: 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물은 생체외 COX-1 억제 분석에서 사이클로옥시게나아제-1 (COX-1)을 억제하는 것으로 나타났다. COX는 염증과 관련된 사이클로옥시게나아제 및 페록시다아제(peroxidase) 활성들을 모두 나타내는 이기능성(bifunctional) 효소이다. 사이클로옥시게나아제 활성은 아라키돈산(arachidonic acid)을 하이드로퍼옥시(hydroperoxy) 엔도페록시드(endoperoxide) (프로스타글란딘 G2(Prostaglandin G2); PGG2)로 변환하고 페록시다아제 함량은 엔도페록시드 (프로스타글란딘 H2(Prostaglandin H2); PGH2)을 대응하는 알코올, 프로스타글란딘의 전구체, 트롬복산(thromboxanes), 및 프로스타사이클린(prostacyclins)으로 환원한다. 이것은 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물이 COX-1 효소적 활성을 61% 억제함을 결정하였다.

COX 억제제 스크리닝 분석(COX Inhibitor screening assay)은 사이클로옥시게나아제의 페록시다아제의 함량을 측정한다. 페록시다아제 활성은 산화된 N,N,N',N'-테트라메틸-p-페닐렌디아민(N,N,N',N'-tetramethyl-p-phenylenediamine) (TMPD)의 출현을 모니터링하여 비색적으로 분석하였다. 비색 COX (양(ovine)) 억제제 스크리닝 분석 (#760111, Cayman Chemical)이 정제된 사이클로옥시게나아제-1 효소 (COX-1)의 활성에서 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물의 효과를 분석하는데 사용되었다. 제조업체 지침(manufacturer instructions)에 따라, 정제된 효소, 헴(heme) 및 테스트 추출물은 분석 버퍼(buffer)에서 혼합되고 실온에서 15분 동안 흔들면서 배양되었다. 배양 후, 아라키돈산 및 비색 기질이 반응을 개시하고 위해 첨가되었다. 색 진행(Color progression)은 590 nm에서 비색 플레이트 리딩(reading)에 의해 측정되었다. COX-1 활성의 억제 백분율은 정제된 효소의 활성을 억제하는 테스트 추출물들의 능력을 결정하도록 비처리된 대조군과 비교하여 계산되었다.

사이토카인 분석 (VEGF, IL-1β, IL-6, IL-10, 및 IL-2 포함): 매그놀리아 비온디 꽃 추출물은 VEGF 생성을 억제하는 것으로 나타났다. 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물은 염증 및 항염증 반응과 관련된 사이토카인, IL-1β, IL-6, IL-10, 및 IL-2를 억제하는 것으로 나타났다. VEGF는 혈관 형성(vasculogenesis) 및 혈관 형성(angiogenesis)을 자극하는 사이토카인이고 염증, 붉기, 및 주사에 기여할 수 있다. IL-1β, IL-2, 및 IL-6는 염증에 기여할 수 있는 사이토카인이고, 반면 IL-10은 일반적으로 항-염증 사이토카인으로 간주되지만, 일부 연구들에서 염증에 기여하는 것으로 나타났다. VEGF, IL-1β, IL-6, IL-10, 및 IL-2 생성의 억제는 항체들의 검출을 위한 다양한 사이토카인들에 대한 바이오티닐화(biotinylated) 항체들을 이용하여 단백질 검출 분석으로 결정되었다. 이것은 매그놀리아 비온디 꽃 추출물이 VEGF 생성을 26% 억제하고 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물이 IL-1β 100%, IL-6 95%, IL-10 88%의 발현, 및 IL-2 생성을 100% 억제함을 결정하였다.

간단히 말하면, 인간 표피 케라틴 생성 세포는 70-80% 컨플루언시(cofluency)로 배양되었다. 플레이트의 배지는 흡입되었고 0.025% 트립신/EDTA를 첨가하였다. 세포들이 둥글어질(rounded) 때, 배양 접시를 세포들을 방출하도록 서서히 두드렸다. 트립신/EDTA 함유 세포들은 배양 접시로부터 제거되었고 중화되었다. 세포들을 5분 동안 180 x g에서 원심분리하였다. 세포들은 펠렛(pellet)을 형성하였고 상등액은 흡입되었다. 결과 펠렛은 EPILIFE^TM 배지 (Cascade Biologics)에 재부유시켰다. 세포들은 약 10-20% 컨플루언시(confluency)로 6-웰 플레이트에 심었다. 세포들이 대략 80% 컨플루언트(confluent)가 된 후, 배지를 흡입하였고 1.0 ml의 EPILIFE^TM, 포르볼 13-미리스테이트 12-아세테이트 ("PMA") (염증의 공지된 유도물질(inducer))와 함께 그리고 테스트 조성물 희석물들은 두 복제 웰들에 첨가하였다 (예를 들면, 1.0% (100 μl의 100X 스톡) 및 0.1% (10 μl의 100X 스톡) 테스트 조성물들은 1 ml EpiLife 생장 배지의 최종 부피로 희석되었다). 배지는 서서히 충분한 혼합물이 되도록 소용돌이치게 하였다. 게다가, 1.0 ml의 EPILIFE^TM를 대조군 웰들에, 추가적인 PMA와 함께 또는 없이 첨가하였다. 플레이트는 그 다음 37±1 ℃ 및 5.0±1% CO₂에서 투여(dosing) 후 약 5시간 동안 배양하였다. 5시간 배양 후, 모든 배지는 원뿔형 튜브들(conical tubes)에 수집되었고 -70 ℃에서 얼렸으며 얼린 배지는 그 후 드라이 아이스에 정착시켰다.

분석 날에, 16-패드 혼성 챔버(hybridization chamber)가 16 항-사이토카인 항체들 (VEGF, IL-1β, IL-6, IL-10, 및 IL-2 포함) 플러스 실험적 대조군들 (Whatman BioSciences)로 세겹(triplicate)으로 배열된 16-패드 FAST 슬라이드들에 부착되었고, 슬라이드들은 공정 동안 FASTFrame (프레임당 4 슬라이드들)에 배치된다. 어레이들(Arrays)은 15분 동안 실온에서 70 ml S&S 단백질 어레이 블로킹 버퍼(S&S Protein Array Blocking buffer) (Whatman Schleicher and Scheull)를 사용하여 차단된다. 블로킹 버퍼는 제거되고 70 ml의 각각 상등액 샘플들이 각각의 어레이(Array)에 첨가되었다. 어레이들은 3시간 동안 실온에서 조심스러운 교반(gentle agitation)과 함께 배양되었다. 어레이들은 TBS-T로 3회 세척되었다. 어레이들은 70 ml의 항체 칵테일, 각각의 배열된 포획 항체들에 대응하는 하나의 바이오티닐화 항체를 포함,로 처리되었다. 어레이들은 1시간 동안 실온에서 조심스러운 교반과 함께 배양되었다. 어레이들은 TBS-T로 3회 세척되었다. 어레이들은 스트렙타아비딘-Cy5(streptavidin-Cy5) 공액(conjugate)을 포함하는 70 ml의 용액으로 1시간 동안 실온에서 조심스러운 교반과 함께 배양되었다. 에레이들은 TBS-T로 3회 세척되었고, 빠르게 탈 이온수(de-ionized)로 세척되었고, 건조되었다.

슬라이드들은 Perkin-Elmer ScanArray 4000 공초점 형광 이미징 시스템(confocal fluorescent imaging system)으로 이미지화되었다. 어레이 이미지들은 Imaging Research ArrayVision 소프트웨어를 사용하여 저장되었고 분석되었다. 요약하면, 스팟 강도들(spot intensities)은 배경 신호를 제거하여 결정되었다. 샘플 조건의 스팟 복제들(spot replicates)은 평균화되었고 그 다음 적절한 대조군들과 비교하였다.

항상화 (AO) 분석: 피숨 사티붐 추출물 및 헤스피리딘 메틸 칼콘, 디펩타이드-2, 팔미토일 테트라펩타이드-7의 조합물은 항산화 능력을 갖는 것으로 나타났다. 생물(living organisms)의 항산화 시스템은 과산화물 제거효소(superoxide dismutase), 카탈라아제, 및 글루타티온 페록시다아제(peroxidase)와 같은 효소; 알부민, 세룰로플라스민(ceruloplasmin), 및 페리틴(ferritin)과 같은 거대 분자(macromolecules); 및 아스코르브산, α-토코페롤, β-카로틴, 환원된 글루타티온, 요산, 및 빌리루빈(bilirubin)을 포함하는 다수의 작은 분자를 포함한다. 내생적(endogenous) 및 식품 유래 항산화제들의 합계(sum)는 세포외 유체(extracellular fluid)의 총 항산화 능력을 나타낸다. 모든 다른 항산화제들의 협력은 임의의 단일 화합물 단독보다 활성 산소 또는 질소 라디칼들의 공격에 대한 더 우수한 보호를 제공한다. 따라서, 전반적인 항산화 능력은 원형질(plasma) 및 체액에서 나타나는 모든 항산화제의 축적효과(cumulative effect)를 고려하여, 개별적 성분들(component)의 측정에 의해 얻어진 것과 비교하여 보다 더 타당한 생물학적 정보를 제공할 수 있다. 테스트 화합물들 및 추출물들의 항산화 능력은 Cayman Chemical (Ann Arbor, Michigan USA)의 항산화 능력 키트 # 709001을 사용하여 총 테스트 화합물들 및 추출물들의 항산화 능력을 측정하는 생체외 바이오분석에서 모니터되었다. 이것은 피숨 사티붐 추출물이 트롤록스(Trolox)의 34%의 항산화 능력을 가지고 헤스피리딘 메틸 칼콘, 디펩타이드-2, 팔미토일 테트라펩타이드-7의 조합물이 트롤록스의 47%의 항산화 능력을 가짐을 결정하였다.

요약하면, Cayman Chemical (Ann Arbor, Michigan USA)의 항산화 능력 키트 # 709001는 메트미오글로빈(metmyoglobin)에 의한 ABTS (2,2'-아지노-디-[3-에틸벤즈티아졸린술포네이트](2,2'-azino-di-[3-ethylbenzthiazoline sulphonate]))에서 ABTS®^˙+로의 산화를 억제하는 샘플들에서 항사화제의 능력에 의존한다. 샘플에서 항산화제의 능력은 트롤록스, 수용성 토코페롤 유사체와 비교되고, 몰랄 Trolox 당량(molar Trolox equivalents)으로 정량화된다. 이 프로토콜(protocol)은 제조업체의 권장 사항에 따라 따라질 수 있다.

항산화 능력 (ORAC) - 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물 및 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물은 항산화 능력을 갖는 것으로 나타났다. 생물의 항산화 시스템은 과산화물 제거효소, 카탈라아제, 및 글루타티온 페록시다아제와 같은 효소; 알부민, 세룰로플라스민, 및 페리틴과 같은 거대 분자; 및 아스코르브산, α-토코페롤, β-카로틴, 환원된 글루타티온, 요산, 및 빌리루빈을 포함하는 다수의 작은 분자를 포함한다. 내생적 및 식품 유래 항산화제들의 합계는 세포외 유체의 총 항산화 능력을 나타낸다. 모든 다른 항산화제들의 협력은 임의의 단일 화합물 단독보다 활성 산소 또는 질소 라디칼들의 공격에 대한 더 우수한 보호를 제공한다. 따라서, 전반적인 항산화 능력은 원형질 및 체액에서 나타나는 모든 항산화제의 축적효과를 고려하여, 개별적 성분들의 측정에 의해 얻어진 것과 비교하여 보다 더 타당한 생물학적 정보를 제공할 수 있다. 이것은 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물이 트롤록스의 85%의 항산화 능력을 가짐을 결정하였고 또한 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물이 대조군들 이상으로 증가된 항산화 능력을 가졌으며, 이것은 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물 및 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물이 산화제 (산화체(oxidants))를 환원할 수 있음을 나타낸다.

항산화 능력은 산소 라디칼 흡수 (또는 흡광도) 능력 (ORAC) 분석에 의해 결정하였다. 이 분석은 산화제, 예를 들면, 산소 라디칼들, 세포들 (예를 들어, 피부 세포들)의 손상을 야기하는 것으로 알려짐, 의 활동을 억제하는데 걸리는 시간의 길이와 정도를 정량화한다. 대조군 및 추출물들의 ORAC 값은 Zen-Bio ORAC Anti-oxidant Assay 키트 (#AOX-2)에 의해 결정하였다. 요약하면, 이 분석은 AAPH (2,2'-악소비스-2-메틸 프로판이미드아마이드,디하이드로클로라이드(2,2'-axobis-2-methyl propanimidamide, dihydrochloride))의 파괴(breakdown)에 의한 페록실-라디칼(peroxyl-radical) 형성으로 인한 플루오레세인(fluorescein) 형광 초과 시간의 상실을 설명한다. 트롤렉스, 수용성 비타민 E 유사체는 투여량 의존적 방식에서 플루오레세인 감쇠 억제 양성 대조군의 역할을 한다.

실시예 3

(조성물들의 임상 효능(CLINICAl Efficacy))

눈가 피부의 상태 및 외관 - 표 1에서 설명된 조성물은 지원 대상들(volunteer subjects)의: 피부 경도 및 탄력 증가; 피부 결 및 투명도 개선; 미세주름/주름, 눈 밑 부종, 눈 밑 다크 써클, 주름(crepiness), 및 처짐 감소; 및 눈가 영역의 전반적인 외관 개선하는 것으로 나타났다. 이 실험의 목적은 눈 영역에서 노화된/광노화된 피부에 표 1의 조성물의 유효성을 평가하는 것이었다. 이 실험은 시각적 등급(visual grading) 및 생체 계측기(bioinstrumentation) 측정들 모두를 통해 평가하였다. 이것은 표 1의 조성물이 통계적으로 처리 4주 후 경도를 증가시켰음을 결정하였고, 이는 또한 12 주에서 증가가 검출될 수 있다. 피부의 네트 탄력(net elasticity of the skin)은 또한 통계적으로 8주에서 증가되었다. 12주 후, 상당한 개선이 기준선(baselines)과 비교하여: 개선된 피부 결 및 투명도; 감소된 미세주름/주름, 눈 밑 부종, 눈 밑 다크 써클, 주름(crepiness), 및 처짐; 개선된 눈가 영역의 전반적인 외관에서 관찰되었다.

요약하면, 지원 인간 대상들은 눈가 영역에 사용되는 경우 표 1의 조성물의 12주, 단항 평가에 참여하였다. 지원자들은 테스트 제품을 그들의 눈가 영역 피부에 12주 동안 사용 방법에 따라 도포하였다. 0 내지 9 스케일(scale)을 사용한 시각적 등급은 모든 시각적 평가들에 대해: 0 = 없음(none), 가장 좋은 상태(most favorable condition); 1-3 = 적당(mild); 4-6 = 중간(moderate); 및 7-9 = 심각한(severe), 가장 좋지 않은 상태(least favorable condition). 큐토메터(cutometer)가 피부 탄력 및 경도를 측정하는데 사용되었다. 5-Flash Imaging Station이 각각의 대상자들의 얼굴의 고해상도, 평행 편광, 교파 편광, 블루 형광, 및 자외선 이미지들을 평가를 위해 캡쳐(capture)하는데 이용되었다.

실시예 4

(추가적인 분석들)

본 명세서 및 청구범위들을 통해 개시된 상기 성분들의 임의의 조합을 갖는 조성물들 또는 성분들의 임의의 조합 또는 성분들의 임의의 하나이 효능을 결정하기 위해 사용될 수 있는 분석들은 당업자에게 공지된 방법들에 의해 결정될 수 있다. 하기는 본 발명의 문맥에서 사용될 수 있는 비제한적 분석들이다. 다른 테스트 절차들, 예를 들어, 객관적 및 주관절 절차들을 포함, 이 사용될 수 있음은 인식되어야 한다.

엘라스틴 자극 분석: 엘라스틴은 피부가 스트레칭(stretching) 또는 수축(contracting) 후 형태를 다시 회복하도록 돕는 결합조직(connective tissue) 단백질이다. 엘라스틴은 또한 기계적 에너지를 저장하도록 요구되는 곳에서 사용되는 중요한 하중(load-bearing) 단백질이다. 엘라스틴은 많은 용해성 트로포엘라스틴(tropoelastin) 분자들이 연결함에 의해 형성되고, 반응은 리실 산화효소(lysyl oxidase)에 의해 촉매된다. 엘라스틴 분비 및 엘라스틴 섬유들은 배양된 인간 섬유아세포에서 엘라스틴에 대해 지시된 면역형광 항체들을 이용한 배양된 인간 섬유아세포들의 스테이닝(staining)에 의해 모니터될 수 있다.

기질 금속단백질분해효소 3 및 9 효소 활성 (MMP3; MMP9) 분석: 생체외(in vitro) 기질 금속단백분해효소(matrix metalloprotease) (MMP) 억제 분석. MMP들은 그들의 넓은 기질 특이성 덕분에 많은 일반 및 질병 상태들에서 역할을 하는 세포 외 단백질 분해효소이다. MMP3 기질들은 콜라겐, 피브로넥틴(fibronectins) 및 라미닌을 포함한다; 반면 MMP9 기질들은 콜라겐 VII, 피브로넥틴, 및 라미닌을 포함한다. BioMol International사의 MMP3 (AK-400) 및 MMP-9 (AK-410)에 대한 Colorimetric Drug Discovery 키트를 사용하여, 이 분석은 색소생산(chromogenic) 기질 Ac-PLG-[2-메르캅토-4-메틸-펜탄오일]-LG-OC2H5)5,6으로서 티오펩티드를 사용하여 MMP들의 단백질분해 활성을 측정하기 위해 설계된다. MMP 분열 사이트(cleavage site) 펩티드 결합은 티오펩티드(thiopeptide)의 티오에스테르 결합(thioester bond)에 의해 대체된다. MMP에 의한 이 결합의 가수분해는 설프하이드릴기(sulfhydryl group)를 생산하고, 이것은 2-니트로-5- 티오벤조산을 형성하기 위해 DTNB [5,5'-디티오비스(2- 니트로벤조산), Ellman의 시약]과 반응하며, 이것은 412 nm에서의 흡광도로 검출될 수 있다 (pH 6.0 및 7이상에서 ε=13,600 M-1cm-1). 본 명세서에 개시된 활성 성분들의 각각, 성분들의 조합물의 임의의 하나, 또는 상기 조합물들을 갖는 조성물들이 분석될 수 있다.

사이클로옥시게나아제 (COX) 분석: 생체외 사이클로옥시게나아제-1 및 -2 (COX-1, -2) 억제 분석. COX는 사이클로옥시게나아제 및 페록시다아제 활성을 둘 다 나타내는 이기능성 효소(bifunctional enzyme)이고 염증 반응에 관련된다. 사이클로옥시게나아제 활성은 아라키돈산(arachidonic acid)을 하이드로퍼옥시 엔도페록사이드(hydroperoxy endoperoxide) (프로스타글란딘 G2; PGG2)로 변환하고, 페록시다아제 성분은 엔도페록사이드 (프로스타글란딘 H2; PGH2)를 대응하는 알코올, 프로스타글란딘의 전구체, 트롬복산(thromboxanes), 및 프로스타사이클린(prostacyclins)으로 환원한다(reduce). 이 COX 억제제(COX Inhibitor) 스크리닝 분석은 사이클로옥시게나아제의 페록시다아제 성분을 측정한다. 페록시다아제 활성은 산화된 N,N,N',N'-테트라메틸-p-페닐렌디아민 (TMPD)의 발현 모니터링에 의해 비색적으로 분석된다. 이 억제 스크리닝 분석은 동위효소 특이적 억제제(isozyme-specific inhibitors)를 스크린하기 위하여 COX-1 및 COX-2 효소를 둘 다를 포함할 수 있다. 비색 COX (양) 억제제 스크리닝 분석 (#760111, Cayman Chemical)이 정제된 사이클로옥시게나아제 효소 (COX-1 또는 COX-2)의 활성에서 본 명세서에 개시된 활성 성분들의 각각, 성분들의 조합물의 임의의 하나, 또는 상기 조합물들을 갖는 조성물들의 효과를 분석하는데 사용될 수 있다. 제조업체 지침에 따라, 정제된 효소, 헴 및 테스트 추출물은 분석 버퍼에서 혼합될 수 있고 실온에서 15분 동안 흔들면서 배양될 수 있다. 배양 후, 아라키돈산 및 비색 기질이 반응을 개시하기 위해 첨가될 수 있다. 색 진행은 590 nm에서 비색 플레이트 리딩(reading)에 의해 측정될 수 있다. COX-1 또는 COX-2 활성의 억제 백분율은 정제된 효소의 활성을 억제하는 테스트 추출물들의 능력을 결정하도록 비처리된 대조군과 비교하여 계산될 수 있다.

리폭시게나아제 (LO) 분석: 생체외 리폭시게나아제(lipoxygenase)(LO) 억제 분석. LO는 지방산으로 산소 분자의 첨가를 촉매하는 비헴 철 함유 다이옥시게나아제(non-heme iron-containing dioxygenases)이다. 리놀리에이트 및 아라키도네이트(arachidonate)는 식물 및 동물에서 LO의 중요한 기질이다. 아라키돈산은 그 다음, 하이드록시에이코사테트라엔산(hydroxyeicosotrienenoic acid) (HETE) 유도체로 변환될 수 있고, 이것은 그 후에 류코트리엔(leukotirenes), 유력한 염증 매개체(inflammatory mediator),로 변환된다. 이 분석은 아라키돈산과 리폭시게나아제 (5-, 12-, 또는 15-LO)의 배양으로부터 생성된 하이드로페록사이드(hydroperoxides)를 측정하여 리폭시게나아제 억제제를 스크리닝하는 정확하고 편리한 방법을 제공한다. 비색 LO 억제제 스크리닝 키트 (#760700, Cayman Chemical)는 효소 활성을 억제하는 본 명세서에서 개시된 활성 성분들의 각각, 성분들의 조합, 또는 상기 조합들을 갖는 조성물들의 임의의 하나의 능력을 결정하는데 사용될 수 있다. 정제된 15-리폭시게나아제 및 테스트 성분들은 분석 버퍼에서 혼합될 수 있고, 실내 온도에서 10분 동안 진탕배양 될 수 있다. 배양 다음, 아라키돈산이 반응을 시작하기 위해 첨가될 수 있고, 혼합물은 실내 온도에서 추가적인 10분 동안 배양되었다. 비색 기질은 촉매 반응을 종료하기 위해 첨가될 수 있고, 색 진행은 490 nm에서 형광 플레이트 리딩에 의해 평가되었다. 리폭시게나아제 활성 억제백분율은 정제된 효소의 활성을 억제하는 본 명세서에서 개시된 활성 성분들의 각각, 성분들의 조합, 또는 상기 조합들을 갖는 조성물들의 임의의 하나의 능력을 결정하기 위해 비처리된 대조군과 비교하여 계산될 수 있다.

오일 컨트롤 분석: 피지샘에서 피지 분비의 감소 및/또는 피지샘에서 피지 생산의 감소를 측정하기 위한 분석은 당업자에게 공지된 표준 기술들을 이용하여 분석될 수 있다. 일 실시예에서, 이마(forehead)가 사용될 수 있다. 본 명세서에서 개시된 활성 성분들의 각각, 성분들의 조합, 또는 상기 조합들을 갖는 조성물들의 임의의 하나가 정해진 기간 (예를 들면, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14일, 또는 그 이상) 동안 하루에 1회 또는 2회 이마의 한쪽 부위(portion)에 도포될 수 있고, 반면 이마의 다른 부위는 상기 조성물로 처리되지 않는다. 정해진 기간이 종료된 후, 그 다음 피부 분비는 우수한 압지(Blotting paper)를 처리 및 비처리 된 이마 피부에 적용(application)하여 분석될 수 있다. 이것은 먼저 촉촉 및 마른 천들로 처리 및 비처리 된 영역에서 모든 피지를 제거하여 수행된다. 그 다음 압지가 이마의 처리 및 비처리 된 영역들에 적용될 수 있고, 피부 위의 압지를 부드럽게 누르기 위해 고무 밴드(elastic band)가 이미 주위에 배치될 수 있다. 2시간 후 압지는 제거될 수 있고, 건조되도록 할 수 있으며, 그 다음 강한 광선이 투과(transilluminated)될 수 있다. 어두운 압지는 더 많은 피지 분비와 상관관계가 있다 (또는 밝은 압지는 감소된 피지 분비와 상관관계가 있다.

홍반(Erythema) 분석: 피부 홍조의 감소를 측정하기 위한 분석은 Minolta Chromometer를 사용하여 평가될 수 있다. 피부 홍반은 대상의 팔뚝에 소듐 도데실 설페이트(sodium dodecyl sulfate) 0.2% 용액을 도포하여 유도될 수 있다. 상기 영역은 24시간 동안 폐색 패치(occlusive patch)에 의해 보호하였다. 24시간 후, 상기 패치를 제거하였고, 자극-유도된 홍조는 Minolta Chroma Meter의 a* 값을 사용하여 산정될 수 있다. 상기 a* 값은 홍조 영역에서 피부 색 변화를 측정한다. 리딩 후 즉각적으로, 상기 영역을 본 명세서에서 개시된 상기 조합물들을 갖는 활성 성분들, 성분들의 조합물의 임의의 하나, 또는 조성물들로 처리하였다. 반복 측정은 홍조 및 자극 감소에 대한 제형(formula)의 능력을 결정하기 위해 일정한 간격으로 수행될 수 있다.

피부 보습/수화(moisture/hydration) 분석: 피부 보습/수화 혜택(benefits)은 Nova Dermal Phase Meter로 임피던스(impedance) 측정을 사용하여 측정될 수 있다. 상기 임피던스 메터는 피부 수분 함량 변화를 측정한다. 피부의 바깥쪽 층은 구별되는 전기적 특성들을 갖는다. 피부가 건조할 때 피부는 전기를 매우 낮게 전도한다. 피부가 더 수화됨에 따라 전도성 증가가 발생한다. 따라서, 피부 임피던스의 변화 (전도성에 관련됨)는 피부 수화의 변화를 산정하는데 사용될 수 있다. 단위는 각 테스트 일의 장비 사용(instruction)에 따라 조정될 수 있다. 또한 온도 및 관련된 습도의 표시도 될 수 있다. 대상들은 하기와 같이 평가될 수 있다: 측정 전 정의된 습도 (예를 들면, 30-50%) 및 온도 (예를 들면 68-72℃)의 방에서 평형화될 수 있다. 세 개의 별도 임피던스 리딩은 얼굴의 각 부위에서 수행될 수 있고, 기록될 수 있으며, 평균화될 수 있다. T5 세팅은 매 5초마다 얼굴 적용의 임피던스 값(the impedance values of every five seconds application to the face)을 평균화 하는 임피던스 메터에서 사용될 수 있다. 변화는 통계적 변화와 유의로 보고될 수 있다. 본 명세서에 개시된 활성 성분들의 각각, 성분들의 조합물의 임의의 하나, 또는 상기 조합물들을 갖는 조성물들이 이 과정에 따라 분석될 수 있다.

피부 투명성 및 반점 및 검버섯(Freckles and Age Spots)의 감소 분석: 피부 투명성 및 반점 및 검버섯의 감소는 Minolta Chromometer를 사용하여 평가될 수 있다. 피부 색 변화는 the Minolta Chroma Meter의 a*값을 사용하여 제품 처리로 인한 자극 가능성을 결정하기 위해 산정될 수 있다. a*값은 홍조 영역에서 피부 색 변화를 측정한다. 이것은 본 명세서에 개시된 활성 성분들의 각각, 성분들의 조합물의 임의의 하나, 또는 상기 조합물들을 갖는 조성물들이 자극을 감소시키는지 아닌지 결정하는데 사용된다. 상기 측정은 피부의 각 측면(side)에서 될 수 있고, 왼쪽 및 오른쪽 얼굴 값들로서 평균화될 수 있다. 또한 피부 투명성은 Minolta Meter를 사용하여 측정될 수 있다. 상기 측정은 Minolta Meter의 a*, b 및 L 값들의 조합이고, 이것은 피부 밝기에 관련되며, 피부 부드러움 및 수분과 밀접한 상관관계가 있다. 피부 리딩은 상기와 같이 수행된다. 일 비제한적 측면에서, 피부 투명성은 L/C로서 설명될 수 있고, 여기서 C는 채도이고, (a²+b²)^1/2로서 정의된다.

피부 건조, 표면 잔주름, 피부 부드러움, 및 피부 톤 분석: 피부 건조함, 표면 잔주름, 피부 부드러움, 및 피부톤은 임상적 등급 기술들로 평가될 수 있다. 예를 들어, 피부 건조함의 임상적 등급은 5점 표준 Kligman Scale에 의해 결정될 수 있다: (0) 피부가 부드럽고 촉촉함; (1) 피부가 가시적인(visible) 건조가 없고 일반적으로 보임; (2) 피부가 가시적인 각질이 없고 터치하면 약간 건조하게 느껴짐; (3) 피부가 건조하고, 거칠게 느껴지고, 일부 비늘(scaling)과 약간 희끄무레한(whitish) 외관을 가짐; 및 (4) 피부가 매우 건조하고, 거칠게 느껴지고, 비늘과 약간 희끄무레한 외관을 가짐. 평가는 두 임상들에 의해 독립적으로 될 수 있고 평균화될 수 있다.

피부 톤의 임상적 등급 분석: 피부 톤의 임상적 등급은 10점 아날로그 수치 척도(analog numerical scale)를 통해 수행될 수 있다: (10) 균일한 피부(even skin of uniform), 핑크빛 브라운 색(pinkish brown). 손으로 잡는 확대경(hand held magnifying lens)으로 검사 시 어두움, 홍반성, 또는 비늘성 패치들(scaly patches)이 없음. 터치 시 피부의 미세구조(Microtexture)가 매우 균일; (7) 확대(magnification) 없이 관찰된 고른 피부 톤. 비늘성 영역이 없으나, 약간의 색소 침착이나 홍반으로 인한 변색. 직경 1 cm 이상의 변색 없음; (4) 피부 변색 및 고르지 않은 질감을 둘 다 쉽게 발견 가능. 약간 비늘(scaliness)이 있음. 일부 영역에서 거친 피부 촉감; 및 (1) 고르지 않은 피부 색 및 촉감. 많은 영역의 비늘(scaliness), 변색, 또한 저색소, 홍반성 또는 검은 점들. 넓은 영역의 직경 1cm 이상 고르지 않은 색. 평가는 두 임상들에 의해 독립적으로 될 수 있고, 평균화될 수 있다.

피부 부드러움의 임상적 등급 분석: 피부 부드러움의 임상적 등급은 10점 아날로그 수치 척도를 통해 분석될 수 있다: (10) 부드러움, 피부는 촉촉하고 윤기가 흐름, 표면을 가로질러 손가락 드래깅(dragging) 시 저항이 없음; (7) 어느 정도 부드러움, 약간 저항; (4) 거침, 눈에 띄게 변화됨, 문지를 시 마찰; 및 (1) 거침, 각질, 고르지 않은 표면. 평가는 두 임상들에 의해 독립적으로 될 수 있고, 평균화될 수 있다.

Packman 외. (1978)에 개시된 방법들과 피부 부드러움 및 주름 감소 분석: 피부 부드러움 및 주름 감소는 Packman 외. (1978)에 개시된 방법들을 사용하여 가시적으로 평가될 수 있다. 예를 들어, 각 대상 방문에서, 각 대상의 표면상의 얼굴 주름들 (SFLs)의 깊이, 얕기 및 총 수는 신중하게 수치를 매기고 기록될 수 있다. 수치적 점수는 깊이/넓이/길이 인자 곱하기 숫자 인자의 곱셈으로(by multiplying a number factor times a depth/width/length factor) 얻었다. 수치들은 눈가 및 입가 (왼쪽 및 오른쪽)에 대해 얻었고, 총 주름 수로 함께 더해졌다.

Hargens Ballistometer와 피부 경도 분석: 피부 경도는 작은 바디를 피부 위에 떨어뜨리고, 처음 및 두 번째 리바운드 피크를 기록하여 피부의 경도 및 탄력을 평가하는 장치인 Hargens ballistometer를 사용하여 측정될 수 있다. 볼리스토메트리(ballistometry)는 비교적 무딘 팁 (4 평방 mm-접촉면)을 갖는 작은 경량의 프로브이다. 프로브는 피부로 약간 뚫고 들어가고, 각질층 및 바깥 표피 및 일부 진피층을 포함하는 피부의 바깥 층들의 특성에 의존하는 측정을 야기한다.

Gas Bearing Electrodynamometer와 피부 연성/유연함 분석: 피부 연성(softness)/유연함(suppleness)은 피부의 압박/압력(stress/strain) 특성들을 측정하는 장비인, Gas Bearing Electrodynamometer를 사용하여 평가할 수 있다. 피부의 점탄성(viscoelastic) 특성들은 피부 수분과 상관관계가 있다. 측정은 뺨 영역의 선결정 된 영역에 양면 테이프로 피부 표면에 프로브를 부착하여 얻을 수 있다. 대략 3.5 gm의 힘이 피부 표면에 평항하게 적용될 수 있고, 피부 변위(skin displacement)가 정확하게 측정된다. 그 다음 피부 유연함이 계산될 수 있고, DSR(Dynamic Spring Rate in gm/mm)로 표현된다.

리프리카(Replicas)와 외관의 주름(lines) 및 주름(wrinkles) 분석: 피부에서 외관의 선 및 주름들은 피부의 표면의 본(impression)인 리프리카를 사용하여 평가될 수 있다. 실리콘 고무와 같은 물질이 사용될 수 있다. 리프리카는 이미지 분석에 의해 분석될 수 있다. 선 및 주름의 눈에 띄는 변화는 대상의 얼굴로부터 실리콘 리플리카를 형성하고, 컴퓨터 이미지 분석 시스템을 사용하여 리플리카 이미지 분석을 통해 객관적으로 정량화될 수 있다. 리플리카는 눈 영역 및 목 영역에서 수행될 수 있으며, 낮은 앵글 입사광을 사용하는 디지털 카메라로 촬영될 수 있다. 디지털 이미지들은 이미지 처리 프로그램으로 분석될 수 있으며, 주름 또는 잔주름으로 뒤덮인 리플리카의 영역이 결정된다.

프로필라미터/스타일러스 방법과 피부의 표면 윤곽(contour) 분석: 피부의 표면 윤곽은 프로필라미터/스타일러스 방법(profilometer/Stylus method)을 사용하여 측정될 수 있다. 이것은 빛을 내거나 또는 리플리카 표면을 가로질러 스타일러스를 드래깅 하는 것을 포함한다. 스타일러스의 수직적 변위(displacement)는 거리 변환기(transducer)를 통해 컴퓨터로 입력될 수 있고, 리플리카의 고정된 길이를 스캐닝한 후 피부 횡단면 분석 프로파일은 이차원 곡선으로 발생될 수 있다. 이러한 스캔은 피부의 시뮬레이션 된 3-D 사진이 발생하도록 고정된 축을 따라 임의의 횟수만큼 반복될 수 있다. 스타일러스 기술을 이용한 리플리카의 10 무작위 섹션들이 얻어질 수 있고, 평균 값들이 발생하도록 조합될 수 있다. 관심값(values of interest)은 평균 프로파일 높이에 대해 프로파일 높이를 적분하여 계산된 모든 거칠기 (높이) 값들의 산술적 평균인 Ra를 포함한다. Rt는 가장 높은 피크 및 가장 낮은 골(trough) 사이의 최대 수직 거리이고, Rz는 평균 진폭 높이를 뺀 평균 피크 진폭이다. 값들은 mm의 조정된 값으로 주어진다. 장비는 각각 사용하기 전에 알고있는 값의 금속 표준을 스캐닝하여 표준화되어야 한다. Ra 값은 하기 방정식으로 계산될 수 있다: Ra = 표준화 거칠기; lm = 트래버스 (스캔) 길이; 및 y = 평균 프로파일 높이 (x-축)에 대해 프로파일의 위치의 절대값.

MELANODERM ^TM 분석: 일 비제한적 측면에서, 본 명세서에 개시된 활성 성분들의 각각, 성분들의 조합물의 임의의 하나, 또는 상기 조합물들을 갖는 조성물들의 효능은 예를 들어, MELANODERM^TM과 같은 피부 아날로그(analog)를 사용하여 평가될 수 있다. 멜라닌세포, 피부 아날로그의 세포들 중 하나,는 멜라닌의 전구체인 L-다이하이드록시페닐 알라닌 (L-DOPA)에 노출되었을 때 양성적으로 염색된다(stain). 피부 아날로그, MELANODERM^TM, 은 본 명세서에 개시된 활성 성분들의 각각, 성분들의 조합물의 임의의 하나, 또는 상기 조합물들을 갖는 조성물들을 포함하는 다양한 베이스들 또는 대조군으로서 베이스 단독으로 처리될 수 있다. 대안적으로 피부 아날로그의 비처리 샘플은 대조군으로서 사용될 수 있다.

필라그린(filaggrin)의 생성: 본 명세서 개시된 활성 성분들의 각각, 성분들의 조합물의 임의의 하나, 또는 상기 조합물들을 갖는 조성물들에 의한 케라틴 생성 세포들에서 필라그린 생성의 변화들이 측정될 수 있다. 필라그린은 피부의 자연 보습 인자(Natural Moisturizing Factor) (NMF)의 전구체이다. 증가된 NMF는 피부의 수분 함량을 증가시킨다. 처리 및 비처리된 케라틴 생성 세포에서 필라그린 생성은 케라틴 생성 세포 용해물에서 필라그린 농도를 분석하는 바이오분석을 이용하여 결정될 수 있다. 필라그린 생성을 정량화하는데 이용될 수 있는 바이오분석의 비제한적 예는 PROTEINSIMPLE® Simon™ 웨스턴 블랏 프로토콜(western blotting protocol)이다. 각각 샘플들에 대해, 정상 인간 표피 케라틴 생성 세포 (NHEK)는 Life Technologies의 칼슘을 갖는 EPI-200 ®Mattek EPILIFE 생장 배지 (M-EP-500-CA)에서 성장된다. NHEK는 생장 배지에서 밤새 5% CO₂ 37 ℃에서 처리전에 배양된다. NHEK는 그 다음 생장 배지에서 1% 테스트 화합물/추출물 또는 화합물/추출물 없이 (음성 대조군) 24 내지 36시간 동안 배양된다. NHEK는 그 다음 세척될 수 있고, 수집될 수 있고, 그리고 용해(lysis) 버퍼 및 초음파 처리하여 아이스에서 용해될 때까지 아이스 또는 차가운 곳(colder)에 저장될 수 있다. 샘플들의 단백질 농도들이 결정되었고 샘플들을 정상화하는데 사용될 수 있다. 용해물은 -80℃에서 정량분석에 사용할 때까지 저장될 수 있다.

PROTEINSIMPLE® Simon™ 웨스턴 블랏 바이오분석 분석은 테스트 샘플들에서 필라그린을 정량적으로 검출하는 필라그린 특이적 항체를 이용한 정량적 웨스턴 블랏 면역분석 기술을 사용한다. 세포 샘플들은 단백질 농도를 위해 용해되고 정상화된다. 정상화 샘플들 및 분자량 표준들은 그 다음 로드될 수 있고 모세관 전기영동을 사용하는 변질된 단백질 분리 겔에서 작동될 수 있다. 겔의 단백질들은 고정화되고 필라그린에 대한 1차 항체를 사용하여 면역탐침된다. 고정된 단백질들은 그 다음 1차 항체에 연결하는 효소 연결 검출 항체로 면역탐침될 수 있다. 화학발광 기질 용액이 그 다음 고정화 필라그린 결합량에 비례하여 화학발광 발달(chemiluminescent development)하도록 고정된 단백질들에 첨가될 수 있다. 화학발광 발달은 특정 시간에서 정지되었고 화학발광 시그널의 강도는 측정될 수 있고 양성 및 음성 대조군들과 비교될 수 있다.

오클루딘(Occludin)의 생성: 본 명세서 개시된 활성 성분들의 각각, 성분들의 조합물의 임의의 하나, 또는 상기 조합물들을 갖는 조성물들에 의한 케라틴 생성 세포들에서 오클루딘 생성의 변화들이 측정될 수 있다. 오클루딘은 피부의 수분 장벽 기능 및 밀착연접(tight junction)의 형성에 매우 중요한 단백질이다. 처리 및 비처리된 케라틴 생성 세포에서 오클루딘 생성 방법의 비제한적 예는 케라틴 생성 세포 용해물에서 오클루딘 농도를 분석하는 바이오분석의 사용하여 결정될 수 있다. 바이오분석은 PROTEINSIMPLE® Simon™ 웨스턴 블랏 프로토콜을 사용하여 수행될 수 있다. 예를 들어, Life Technologies의 성인 인간 표피 케라틴 생성 세포 (HEKa) (C-005-5C)는 Life Technologies의 케라틴 생성 세포 생장 보충물 (HKGS) (S-101-5)이 보충된 Life Technologies의 Epilife 생장 배지 (M-EP-500-CA)에서 37 ℃ 및 5% CO₂에서 24시간 동안 배양될 수 있다. HEKa는 그 다음 테스트 화합물/추출물, 음성 대조군으로 화합물/추출물 없이, 또는 양성 대조군으로 1mM CaCl₂을 갖는 생장 배지에서 24 내지 48시간 동안 배양된다. HEKa는 그 다음 세척되었고, 수집되었으며, 그리고 용해 버퍼 및 초음파 처리하여 아이스에서 용해될 때까지 아이스 또는 차가운 곳(colder)에 저장될 수 있다. 샘플들의 단백질 농도들이 결정되었고 샘플들을 정상화(normalize)하는데 사용될 수 있다. 용해물은 -80℃에서 정량분석에 사용할 때까지 저장될 수 있다.

PROTEINSIMPLE® Simon™ 웨스턴 블랏 바이오분석 분석은 테스트 샘플들에서 오클루딘을 정량적으로 검출하는 오클루딘 특이적 항체를 이용한 정량적 웨스턴 블랏 면역분석 기술을 사용한다. 세포 샘플들은 단백질 농도를 위해 용해되고 정상화된다. 정상화 샘플들 및 분자량 표준들은 그 다음 로드될 수 있고 모세관 전기영동을 사용하는 변질된 단백질 분리 겔에서 작동될 수 있다. 겔의 단백질들은 고정화되고 오클루딘에 대한 1차 항체를 사용하여 면역탐침된다. 고정된 단백질들은 그 다음 1차 항체에 연결하는 효소 연결 검출 항체로 면역탐침될 수 있다. 화학발광 기질 용액이 그 다음 고정화 오클루딘 결합량에 비례하여 화학발광 발달(chemiluminescent development)하도록 고정된 단백질들에 첨가될 수 있다. 화학발광 발달은 특정 시간에서 정지되었고 화학발광 시그널의 강도는 측정될 수 있고 양성 및 음성 대조군들과 비교될 수 있다.

케라틴 생성 세포 단층 투과성(Keratinocyte Monolayer Permeability): 본 명세서 개시된 활성 성분들의 각각, 성분들의 조합물의 임의의 하나, 또는 상기 조합물들을 갖는 조성물들에 의한 케라틴 생성 세포 단층의 투과성의 변화들이 측정될 수 있다. 케라틴 생성 세포 단층 투과성은 피부 장볍 강도의 척도이다. 처리 및 비처리된 케라틴 생성 세포에서 케라틴 생성 세포 단층 투과성은 , 비제한적 예로, Millipore (ECM642)에 의한 생체외 혈관 투과성(Vascular Permeability) 분석을 사용하여 결정될 수 있다. 이 분석은 내피 세포(endothelial cell) 흡수, 수송, 및 투과성을 분석한다. 요약하면, Life Technologies의 성인 인간 표피 케라틴 생성 세포 (C-005-5C)가 회수 웰 내에 다공성 콜라겐 고팅된 막 위에 심어질 수 있다. 케라틴 생성 세포는 그 다음 케라틴 생성 세포 생장 보충물 (HKGS)이 보충된 Life Technologies의 칼슘을 갖는 Epilife 생장 배지 (M-EP-500-CA) 24시간 동안 37 ℃ 및 5% CO₂에서 배양된다. 이 배양 시간은 세포들이 단층을 형성하고 막 구멍을 폐쇄(occlude)하도록 한다. 배지는 그 다음 테스트 화합물들/추출물들을 갖거나 (테스트 샘플) 갖지 않는 (비처리 대조군) 신선한 배지로 교체되고 케라틴 생성 세포는 추가적인 48시간 동안 37 ℃ 및 5% CO₂에서 배양된다. 테스트 화합물/추출물로/없이 배양 후 케라틴 생성 세포 단층의 투과성을 결정하기 위해, 배지는 고분자량 플루오레세인 이소티오시아네이트-덱스트란((FITC)-Dextran)을 포함하는 새로운 배지로 교체하였고 4시간 동안 37 ℃ 및 5% CO₂에서 배양된다. 4시간 배양 동안, FITC는 케라틴 생성 세포 단층 및 다공성 막을 통해 단층의 투과성에 비례하는 속도로 웰로 통과할 수 있다. 4시간 배양 후, 회수 웰들에서 세포 생존력 및 FITC의 함량이 결정될 수 있다. FITC 함량에 대해, 회수 웰에서 배지는 수집되고 배지의 형광은 520 nm에서 여기될 때 480 m (Em)에서 결정되었다. 비처리 대조군들과 비교하여 투과성 백분율 및 변화 백분율은 하기 식들에 의해 결정되었다: 투과성 백분율 = ((테스트 샘플의 Ex/Em 평균)/비처리 대조군의 Ex/Em 평균)*100; 변화 백분율 = 테스트 샘플의 투과성 백분율 - 비처리 대조군의 투과성 백분율.

히알루로니다아제(Hyaluronidase) 활성 억제: 본 명세서 개시된 활성 성분들의 각각, 성분들의 조합물의 임의의 하나, 또는 상기 조합물들을 갖는 조성물들에 의한 히알루로니다아제의 활성의 변화들이 측정될 수 있다. 히알루로니다아제는 HA를 분해하는 효소이다. HA는 기질의 구조의 안정성에 관련된 다당류이고 조직 및 세포들에 대한 팽압(turgor pressure) 제공과 관련된다. 일 비제한적 예로서, 히알루로니다아제 활성은 Sigma-Aldrich protocol # EC 3.2.1.35의 변형된 생체외 프로토콜을 사용하여 결정될 수 있다. 요약하면, Sigma-Aldrich의 히알루로니다아제 형 1-S (H3506)가 테스트 화합물 또는 대조군들을 포함하는 마이크로플레이트 반응 웰들에 첨가된다. 탄닌산(tannic acid)가 양성 대조군 억제제로서 이용될 수 있고, 테스트 화합물이 대조군 효소에 첨가되지 않을 수 있으며, 테스트 화합물 또는 양성 대조군을 갖지만 히알루로니다아제를 갖지 않는 웰들이 배경 음성 대조군으로서 이용될 수 있다. 상기 웰들은 기질 (HA) 첨가 이전에 37 ℃에서 10분 동안 배양될 수 있다. 기질은 첨가되고 상기 반응물을 37 ℃에서 45분 동안 배양하였다. 각각 반응 용액의 일부는 그 다음 이동되고 반응의 일부 (중지된 웰들)를 중지하기 위해 서서히 소듐 아세테이트(sodium acetate) 및 아세트산(acetic acid) pH 3.75 용액에 혼합된다. 중지된 웰들 및 반응 웰들은 모두 반응 용액의 일부를 중지된 웰들에 첨가한 후 동일한 용액의 부피를 포함해야한다. 반응 웰들 및 중지된 웰들 모두는 10분 동안 실온에서 배양된다. 600 nm에서 흡광도는 그 다음 반응 웰들 및 중지된 웰들 모두에서 측정된다. 억제는 하기의 식들을 사용하여 계산될 수 있다: 억제제 (또는 대조군) 활성 = (600 nm에서 억제제 중지된 웰들 흡광도 - 600 nm에서 억제제 반응 웰들 흡광도); 초기 활성 = 600 nm에서 대조군 효소 흡광도; 억제 백분율 = [(초기 활성/억제제 활성)*100]-100.

페록시좀 증식체 활성화 수용체 감마(Peroxisome Proliferator-Activated Receptor Gamma) (PPAR-γ) 활성: 본 명세서 개시된 활성 성분들의 각각, 성분들의 조합물의 임의의 하나, 또는 상기 조합물들을 갖는 조성물들에 의한 PPAR-γ의 활성의 변화들이 측정될 수 있다. PPAR-γ는 피지(sebum) 생성에 중요한 수용체이다. 일비제한적 예로서, PPAR-γ의 활성은 리간드의 결합을 억제하는 테스트 화합물 또는 종성물의 능력을 분석하는 바이오분석을 사용하여 결정될 수 있다. 요약하면, 형광 작은 분자 판-PPAR 리간드(fluorescent small-molecule pan-PPAR ligand), FLUORMONE™ Pan-PPAR Green, Life Technologies로부터 구매 가능함 (PV4894), 가 테스트 화합물들 또는 조성물들이 PPAR-γ에 대한 리간들의 결합을 억제할 수 있는 경우 결정하는데 이용될 수 있다. 상기 샘플 웰들은 PPAR-γ 및 형광 리간드 및 둘 다를 포함한다: 테스트 화합물 또는 조성물 (테스트); 참조 억제제, 로시글리타존(rosiglitazone) (양성 대조군); 또는 테스트 화합물 없음 (음성 대조군). 상기 웰들은 리간드가 PPAR-γ에 결합하는 기회를 주도록 일정시간 동안 배양된다. 각각 샘플의 형광 편광이 측정될 수 있고 테스트 화합물 또는 조성물에 의한 억제 백분율을 결정하기 위해 음성 대조군 웰과 비교될 수 있다.

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본 명세서에 청구되고 개시된 조성물들 모두는 본원의 개시를 고려하여 과도한 실험 없이 실행될 수 있고 제조될 수 있다. 본 발명의 조성물들 및 방법들이 바람직한 실시예들의 측면에서 설명되는 동안, 당업자에게 변형들이 조성물들 및/또는 방법들 및 본 발명의 개념, 사상 및 범주로부터 벗어나지 않는 본 명세서에서 설명된 방법의 단계들의 연속(sequence) 또는 단계들 및 조성물에 적용될 수 있다는 것이 명백할 것이다. 보다 구체적으로, 화학적 및 생리적으로 모두 관련된 특정 제제들은 동일하거나 유사한 결과들이 달성되는 동안 본 명세서에서 설명된 제제들을 대체할 수 있음이 명백할 것이다. 당업자에게 명백한 이러한 모든 유사한 대체물들 및 변형물들은 첨부된 청구범위들에 의해 정의된 바와 같이 본 발명의 개념, 사상 및 범주 내에 있는 것으로 간주된다.

Claims (10)

1. 피부의 외관 또는 상태를 개선하는 방법으로, 여기서 경도(firmness)가 증가되고, 밝기(brightness)가 증가되며, 색소 침착(pigmentation)이 감소되고, 멜라닌 생성(melanogenesis)이 억제되며, 붉은 반점(red blotch)이 감소되고, 주사(rosacea)가 감소되며, 다크 써클(dark circle)이 감소되고, 투명도(clarity)가 개선되며, 미세주름(fine line) 및/또는 주름(wrinkle)의 외관(appearance)이 감소되고, 결(texture)이 개선되며, 눈 밑 부종(under-eye puffiness)이 감소되고, 처짐(sagging)이 감소되며, 주름(crepiness)이 감소되고, 탄력(elasticity)이 증가되며, 염증(inflammation)이 감소되고, 및/또는 눈가 피부의 전반적인 외관이 개선되며, 상기 방법은 국소 조성물을 피부에 도포함을 포함하고, 상기 국소 조성물은;
   센텔라 아시아티카(Centella asiatica) 추출물 또는 센텔라 아시아티카 추출물 및 센텔라 아시아티카 분열조직 세포 배양물(meristem cell culture)의 조합물;
   매그놀리아 그랜디플로라(Magnolia grandiflora) 껍질(bark) 추출물 또는 매그놀리아 오피시날리스(Magnolia officinalis) 껍질 추출물;
   헤스피리딘 메틸 칼콘(hesperidin methyl chalcone);
   피숨 사티붐(Pisum sativum) 추출물;
   시트러스 그랜디스(Citrus grandis) 껍질(peel) 추출물;
   매그놀리아 비온디(Magnolia biondii) 꽃 추출물;
   디펩타이드-2(dipeptide-2);
   팔미토일 테트라펩타이드-7(palmitoyl tetrapeptide-7); 및
   트리펩타이드-1(tripeptide-1)를 포함하는, 방법.
   
2. 제1항에 있어서,
   상기 센텔라 아시아티카 추출물은 에탄올 추출물(ethanolic extract)이고, 상기 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물은 알코올 추출물(alcohol extract)이며, 상기 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물은 초임계 유체 - CO₂ 추출물(supercritical fluid - CO₂ extract)이고, 상기 파숨 사티붐 추출물은 수성 추출물(aqueous extract)이며, 상기 시트러스 그랜디스 껍질 추출물은 알코올 추출물이고 플라본(flavone)을 포함하며, 및/또는 상기 매그놀리아 비온디 꽃 추출물은 물/프로필렌 글리콜 추출물(water/propylene glycol extract)이고 리그난(lignan)을 포함하는, 방법.
   
3. 제1항에 있어서,
   상기 조성물은;
   히알루론산 합성을 신장(boost), 라미닌 생성을 증가, 멜라닌 생성을 억제, 및/또는 티로시나아제(tyrosinase) 활성을 감소시키는 센텔라 아시아티카 추출물;
   히알루론산 생성을 증가, 및/또는 티로시나아제 활성을 감소시키는 센틸라 아시아티카 분열조직 세포 배양물;
   TNFα을 억제, 항산화(anti-oxidant) 능력을 제공, 라미닌 생성을 증가, 및/또는 멜라닌 생성을 억제시키는 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물;
   항산화 능력을 제공, 멜라닌 생성 억제, 염증성 사이토카인(inflammatory cytokines)의 발현을 억제, TNF-α를 억제, IL-1β를 억제, IL-6를 억제, IL-10를 억제, IL-2를 억제, 및/또는 COX-1를 억제하는 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물;
   항산화 능력을 제공, 콜라겐 I(collagen I)을 증가, 엘라스타아제(elastase)를 억제, 및/또는 피브로넥틴(fibronectin) 생성을 증가시키는 피숨 사티붐 추출물;
   라미닌 생성을 증가, 및/또는 내피 관(endothelial tube) 형성을 방해하는 시트러스 그랜디스 껍질 추출물;
   VEGF를 억제, 및/또는 내피 관 형성을 방해하는 매그놀리아 비온디 꽃 추출물;
   콜라겐 I 생성을 증가, 및/또는 히알루론산 생성을 증가시키는 트리펩타이드-1;
   및/또는 항산화 능력을 제공, 라미닌 생성을 증가, 및/또는 MMP1을 억제하는 헤스피리딘 메틸 칼콘, 디펩타이드-2, 및 팔미토일 테트라펩타이드-7의 조합물의 유효량을 포함하는, 방법.
   
4. 제1항에 있어서,
   상기 조성물은;
   0.01중량% 내지 1중량%의 센텔라 아시아티카 추출물 또는 0.01중량% 내지 1중량%의 센텔라 아시아티카 추출물 및 0.0005중량% 내지 0.1중량% 센텔라 아시아티카 분열조직 세포 배양물의 조합물;
   0.01중량% 내지 1중량%의 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물 또는 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물;
   0.01중량% 내지 1중량%의 헤스피리딘 메틸 칼콘;
   0.001중량% 내지 0.5중량%의 피숨 사티붐 추출물;
   0.001중량% 내지 0.5중량%의 시트러스 그랜디스 껍질 추출물;
   0.0005중량% 내지 0.1중량%의 매그놀리아 비온디 꽃 추출물;
   0.0001중량% 내지 0.1중량%의 디펩타이드-2;
   0.00001중량% 내지 0.01중량%의 팔미토일 테트라펩타이드-7; 및
   0.000001중량% 내지 0.001중량%의 트리펩타이드-1을 포함하는, 방법.
   
5. 센텔라 아시아티카 추출물 또는 센텔라 아시아티카 추출물 및 센텔라 아시아티카 분열조직 세포 배양물의 조합물;
   매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물 또는 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물;
   헤스피리딘 메틸 칼콘;
   피숨 사티붐 추출물;
   시트러스 그랜디스 껍질 추출물;
   매그놀리아 비온디 꽃 추출물;
   디펩타이드-2;
   팔미토일 테트라펩타이드-7; 및
   트리펩타이드-1을 포함하는, 피부의 외관 또는 상태를 개선하기 위해 제형화된 국소 조성물.
   
6. 제5항에 있어서,
   상기 조성물은;
   히알루론산 합성을 신장, 라미닌 생성을 증가, 멜라닌 생성을 억제, 및/또는 티로시나아제 활성을 감소시키는 센텔라 아시아티카 추출물;
   히알루론산 생성을 증가, 및/또는 티로시나아제 활성을 감소시키는 센틸라 아시아티카 분열조직 세포 배양물;
   TNFα을 억제, 항산화 능력을 제공, 라미닌 생성을 증가, 및/또는 멜라닌 생성을 억제시키는 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물;
   항산화 능력을 제공, 멜라닌 생성 억제, 염증성 사이토카인의 발현을 억제, TNF-α를 억제, IL-1β를 억제, IL-6를 억제, IL-10를 억제, IL-2를 억제, 및/또는 COX-1를 억제하는 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물;
   항산화 능력을 제공, 콜라겐 I을 증가, 엘라스타아제를 억제, 및/또는 피브로넥틴 생성을 증가시키는 피숨 사티붐 추출물;
   라미닌 생성을 증가, 및/또는 내피 관 형성을 방해하는 시트러스 그랜디스 껍질 추출물;
   VEGF를 억제, 및/또는 내피 관 형성을 방해하는 매그놀리아 비온디 꽃 추출물;
   콜라겐 I 생성을 증가, 및/또는 히알루론산 생성을 증가시키는 트리펩타이드-1;
   및/또는 항산화 능력을 제공, 라미닌 생성을 증가, 및/또는 MMP1을 억제하는 헤스피리딘 메틸 칼콘, 디펩타이드-2, 및 팔미토일 테트라펩타이드-7의 조합물의 유효량을 포함하는, 조성물.
   
7. 제5항에 있어서,
   상기 조성물은;
   0.01중량% 내지 1중량%의 센텔라 아시아티카 추출물 또는 0.01중량% 내지 1중량%의 센텔라 아시아티카 추출물 및 0.0005중량% 내지 0.1중량% 센텔라 아시아티카 분열조직 세포 배양물의 조합물;
   0.01중량% 내지 1중량%의 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물 또는 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물;
   0.01중량% 내지 1중량%의 헤스피리딘 메틸 칼콘;
   0.001중량% 내지 0.5중량%의 피숨 사티붐 추출물;
   0.001중량% 내지 0.5중량%의 시트러스 그랜디스 껍질 추출물;
   0.0005중량% 내지 0.1중량%의 매그놀리아 비온디 꽃 추출물;
   0.0001중량% 내지 0.1중량%의 디펩타이드-2;
   0.00001중량% 내지 0.01중량%의 팔미토일 테트라펩타이드-7; 및
   0.000001중량% 내지 0.001중량%의 트리펩타이드-1을 포함하는, 조성물.
   
8. 제5항에 있어서,
   상기 센텔라 아시아티카 추출물은 에탄올 추출물이고, 상기 매그놀리아 그랜디플로라 껍질 추출물은 알코올 추출물이며, 상기 매그놀리아 오피시날리스 껍질 추출물은 초임계 유체 - CO₂ 추출물이고, 상기 파숨 사티붐 추출물은 수성 추출물이며, 상기 시트러스 그랜디스 껍질 추출물은 알코올 추출물이고 플라본(flavone)을 포함하며, 및/또는 상기 매그놀리아 비온디 꽃 추출물은 물/프로필렌 글리콜 추출물(water/propylene glycol extract)이고 리그난(lignan)을 포함하는, 조성물.
   
9. 제5항에 있어서,
   35중량% 내지 70중량%의 물을 더 포함하는, 조성물.
   
10. 제5항에 있어서,
    상기 조성물은 수중유 에멀젼(oil-in-water emulsion) 또는 유중수 에멀젼(water-in-oil emulsion)인, 조성물.