KR20170008700A - 신규한 시아닌 염료 - Google Patents
신규한 시아닌 염료 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20170008700A KR20170008700A KR1020160089124A KR20160089124A KR20170008700A KR 20170008700 A KR20170008700 A KR 20170008700A KR 1020160089124 A KR1020160089124 A KR 1020160089124A KR 20160089124 A KR20160089124 A KR 20160089124A KR 20170008700 A KR20170008700 A KR 20170008700A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- group
- substituted
- unsubstituted
- dye compound
- acid
- Prior art date
Links
- 239000000975 dye Substances 0.000 title abstract description 46
- ANRHNWWPFJCPAZ-UHFFFAOYSA-M thionine Chemical compound [Cl-].C1=CC(N)=CC2=[S+]C3=CC(N)=CC=C3N=C21 ANRHNWWPFJCPAZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 title abstract 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 33
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 claims abstract description 21
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 13
- 238000002372 labelling Methods 0.000 claims abstract description 10
- 210000005061 intracellular organelle Anatomy 0.000 claims abstract description 9
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims abstract description 9
- -1 acyl azide Chemical class 0.000 claims description 36
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 18
- 125000003396 thiol group Chemical class [H]S* 0.000 claims description 16
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 14
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 11
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 claims description 9
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 claims description 9
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 8
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 claims description 8
- 125000004104 aryloxy group Chemical group 0.000 claims description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 8
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 8
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 claims description 7
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 7
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 claims description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 6
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 6
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 claims description 6
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 claims description 6
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 claims description 6
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 claims description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 6
- 125000001453 quaternary ammonium group Chemical group 0.000 claims description 6
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 5
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 5
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 5
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 claims description 5
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical group OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 4
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N Thiophosphoric acid Chemical group OP(O)(S)=O RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N acetaldehyde Diethyl Acetal Natural products CCOC(C)OCC DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000002777 acetyl group Chemical class [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 claims description 4
- 150000001263 acyl chlorides Chemical class 0.000 claims description 4
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000004183 alkoxy alkyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000005160 aryl oxy alkyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 claims description 4
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 claims description 4
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 150000007942 carboxylates Chemical class 0.000 claims description 4
- 239000012948 isocyanate Substances 0.000 claims description 4
- 150000002513 isocyanates Chemical class 0.000 claims description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 229920000233 poly(alkylene oxides) Polymers 0.000 claims description 4
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 4
- BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M sulfonate Chemical compound [O-]S(=O)=O BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 4
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 150000003923 2,5-pyrrolediones Chemical class 0.000 claims description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 claims description 3
- 150000001350 alkyl halides Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000002540 isothiocyanates Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 3
- IHDBZCJYSHDCKF-UHFFFAOYSA-N 4,6-dichlorotriazine Chemical class ClC1=CC(Cl)=NN=N1 IHDBZCJYSHDCKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M Bisulfite Chemical compound OS([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N Deuterium Chemical compound [2H] YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N 0.000 claims description 2
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 claims description 2
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 claims description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000001266 acyl halides Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000001345 alkine derivatives Chemical class 0.000 claims description 2
- 229940045714 alkyl sulfonate alkylating agent Drugs 0.000 claims description 2
- 150000008052 alkyl sulfonates Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 2
- 125000006615 aromatic heterocyclic group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000002029 aromatic hydrocarbon group Chemical group 0.000 claims description 2
- 150000001502 aryl halides Chemical class 0.000 claims description 2
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 claims description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000000852 azido group Chemical group *N=[N+]=[N-] 0.000 claims description 2
- 150000001541 aziridines Chemical class 0.000 claims description 2
- 125000005621 boronate group Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 claims description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 claims description 2
- 229910052805 deuterium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims description 2
- AFOSIXZFDONLBT-UHFFFAOYSA-N divinyl sulfone Chemical compound C=CS(=O)(=O)C=C AFOSIXZFDONLBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 2
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 claims description 2
- 150000002118 epoxides Chemical class 0.000 claims description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 125000001188 haloalkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 claims description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 claims description 2
- 229940042795 hydrazides for tuberculosis treatment Drugs 0.000 claims description 2
- 150000002429 hydrazines Chemical class 0.000 claims description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 claims description 2
- 150000002463 imidates Chemical class 0.000 claims description 2
- 229910001410 inorganic ion Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 claims description 2
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 claims description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 2
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims description 2
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 claims description 2
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 claims description 2
- UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-M phosphonate Chemical compound [O-]P(=O)=O UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 150000008300 phosphoramidites Chemical class 0.000 claims description 2
- LFGREXWGYUGZLY-UHFFFAOYSA-N phosphoryl Chemical group [P]=O LFGREXWGYUGZLY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 2
- 150000003457 sulfones Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000003460 sulfonic acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000003461 sulfonyl halides Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 claims description 2
- 150000007970 thio esters Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000003555 thioacetals Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000003568 thioethers Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000003053 toxin Substances 0.000 claims description 2
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 claims description 2
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 claims description 2
- 125000001273 sulfonato group Chemical class [O-]S(*)(=O)=O 0.000 claims 3
- HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N Acrylamide Chemical compound NC(=O)C=C HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229910001412 inorganic anion Inorganic materials 0.000 claims 1
- 150000008039 phosphoramides Chemical class 0.000 claims 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 5
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 abstract description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 abstract 1
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- QGKMIGUHVLGJBR-UHFFFAOYSA-M (4z)-1-(3-methylbutyl)-4-[[1-(3-methylbutyl)quinolin-1-ium-4-yl]methylidene]quinoline;iodide Chemical compound [I-].C12=CC=CC=C2N(CCC(C)C)C=CC1=CC1=CC=[N+](CCC(C)C)C2=CC=CC=C12 QGKMIGUHVLGJBR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- RUVJFMSQTCEAAB-UHFFFAOYSA-M 2-[3-[5,6-dichloro-1,3-bis[[4-(chloromethyl)phenyl]methyl]benzimidazol-2-ylidene]prop-1-enyl]-3-methyl-1,3-benzoxazol-3-ium;chloride Chemical compound [Cl-].O1C2=CC=CC=C2[N+](C)=C1C=CC=C(N(C1=CC(Cl)=C(Cl)C=C11)CC=2C=CC(CCl)=CC=2)N1CC1=CC=C(CCl)C=C1 RUVJFMSQTCEAAB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 6
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- OGXRXFRHDCIXDS-UHFFFAOYSA-N methanol;propane-1,2,3-triol Chemical compound OC.OCC(O)CO OGXRXFRHDCIXDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 4
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 4
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 4
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 4
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 230000008045 co-localization Effects 0.000 description 3
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 150000003871 sulfonates Chemical class 0.000 description 3
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MZRVEZGGRBJDDB-UHFFFAOYSA-N N-Butyllithium Chemical compound [Li]CCCC MZRVEZGGRBJDDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091005461 Nucleic proteins Proteins 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 2
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 238000002189 fluorescence spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000004896 high resolution mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 2
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 2
- 238000002531 positive electrospray ionisation time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 2
- 229910052714 tellurium Inorganic materials 0.000 description 2
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FLHJIAFUWHPJRT-UHFFFAOYSA-N 2,3,3-trimethylindole Chemical compound C1=CC=C2C(C)(C)C(C)=NC2=C1 FLHJIAFUWHPJRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GGZQLTVZPOGLCC-UHFFFAOYSA-N 2-(2-bromoethyl)-1,3-dioxolane Chemical compound BrCCC1OCCO1 GGZQLTVZPOGLCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IHXWECHPYNPJRR-UHFFFAOYSA-N 3-hydroxycyclobut-2-en-1-one Chemical compound OC1=CC(=O)C1 IHXWECHPYNPJRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VWGKEVWFBOUAND-UHFFFAOYSA-N 4,4'-thiodiphenol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1SC1=CC=C(O)C=C1 VWGKEVWFBOUAND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- 229910017008 AsF 6 Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N Benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910020366 ClO 4 Inorganic materials 0.000 description 1
- XFXPMWWXUTWYJX-UHFFFAOYSA-N Cyanide Chemical compound N#[C-] XFXPMWWXUTWYJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000010222 PCR analysis Methods 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M Propionate Chemical compound CCC([O-])=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910018286 SbF 6 Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-M Thiocyanate anion Chemical compound [S-]C#N ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 150000003926 acrylamides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001338 aliphatic hydrocarbons Chemical group 0.000 description 1
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052787 antimony Inorganic materials 0.000 description 1
- WATWJIUSRGPENY-UHFFFAOYSA-N antimony atom Chemical compound [Sb] WATWJIUSRGPENY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940092714 benzenesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 229960004365 benzoic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000000298 carbocyanine Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000013256 coordination polymer Substances 0.000 description 1
- XLJMAIOERFSOGZ-UHFFFAOYSA-M cyanate Chemical compound [O-]C#N XLJMAIOERFSOGZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000002059 diagnostic imaging Methods 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 125000006575 electron-withdrawing group Chemical group 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000005281 excited state Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000003473 flash photolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000011503 in vivo imaging Methods 0.000 description 1
- 210000004020 intracellular membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- DZVCFNFOPIZQKX-LTHRDKTGSA-M merocyanine Chemical compound [Na+].O=C1N(CCCC)C(=O)N(CCCC)C(=O)C1=C\C=C\C=C/1N(CCCS([O-])(=O)=O)C2=CC=CC=C2O\1 DZVCFNFOPIZQKX-LTHRDKTGSA-M 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- OIRDBPQYVWXNSJ-UHFFFAOYSA-N methyl trifluoromethansulfonate Chemical compound COS(=O)(=O)C(F)(F)F OIRDBPQYVWXNSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002493 microarray Methods 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 1
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N nicotinic acid Natural products OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 1
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N p-toluenesulfonic acid Substances CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003973 paint Substances 0.000 description 1
- VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N perchloric acid Substances OCl(=O)(=O)=O VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-M periodate Chemical compound [O-]I(=O)(=O)=O KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- PBKBURVPAHHUIK-AVUWLFEKSA-N phenyl-[(e)-3-phenyliminoprop-1-enyl]azanium;chloride Chemical compound Cl.C=1C=CC=CC=1N\C=C\C=NC1=CC=CC=C1 PBKBURVPAHHUIK-AVUWLFEKSA-N 0.000 description 1
- 238000007699 photoisomerization reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000243 photosynthetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000004850 protein–protein interaction Effects 0.000 description 1
- 238000006862 quantum yield reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004065 semiconductor Substances 0.000 description 1
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09B—ORGANIC DYES OR CLOSELY-RELATED COMPOUNDS FOR PRODUCING DYES, e.g. PIGMENTS; MORDANTS; LAKES
- C09B23/00—Methine or polymethine dyes, e.g. cyanine dyes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09B—ORGANIC DYES OR CLOSELY-RELATED COMPOUNDS FOR PRODUCING DYES, e.g. PIGMENTS; MORDANTS; LAKES
- C09B23/00—Methine or polymethine dyes, e.g. cyanine dyes
- C09B23/0091—Methine or polymethine dyes, e.g. cyanine dyes having only one heterocyclic ring at one end of the methine chain, e.g. hemicyamines, hemioxonol
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
Abstract
본 발명은 하기 [화학식 Ⅰ] 또는 [화학식 Ⅱ]로 표시되는 염료 화합물에 관한 것으로서, 종래 시아닌 염료에 비하여 양자효율이 현저히 개선된 효과를 가지고, 높은 형광강도를 가져서 다양한 생물학적 시스템에 대한 프로브 등으로 광범위한 분야에서 유효하게 활용할 수 있다. 특히, 미토콘드리아의 표지하여 추적할 수 있는 Mitotracker로 활용할 수 있어 생체 또는 세포조직에서 미토콘드리아를 정량적으로 영상화할 수 있으며, 미토콘드리아 등과 같은 세포 내 소기관의 점도를 정량적으로 측정할 수 있어 이와 관련된 질병의 예측 또는 진단에 활용할 수 있다.
[화학식 Ⅰ]
[화학식 Ⅱ]
[화학식 Ⅰ]
[화학식 Ⅱ]
Description
본 발명은 신규한 염료 화합물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 우수한 광특성을 갖는 것을 특징으로 하는 신규한 시아닌 염료 화합물에 관한 것이다.
형광은 생명 과학 분야에서 비파괴적으로 생물학적 분자를 추적 또는 분석하는데 가장 일반적으로 사용되는 기법이다. 자체 발광하는 프로테인이나 자체 발광하는 분자들도 있지만, 일반적으로 단백질(proteins), 핵산(nucleic acids), 지질(lipids), 작은 분자에 발광특성을 가지는 염료를 표지(labeling)하면, 광학적 추적 및 분석이 가능하다. 단순한 발광특성이나, 발광 특성 변화를 이용한 영상화, 에너지 트렌스퍼, 주변 환경 변화에 따른 발광 특성 변화, 화학 반응에 따른 구조 변화에 의한 발광 특성 변화 등 다양한 화학적 광학적 특성들의 변화를 분석함으로써, 생명 과학 분야에 유용한 정보를 얻을 수 있다.
이러한 현상 분석을 위한 장비로는 세포 관찰을 위한 형광현미경, 공초점현미경, 유세포분석기, 마이크로어레이, 중합효소 연쇄반응장치, 핵산이나 단백질의 분리를 위한 전기영동장치, 실시간 생체내 영상 장비, 면역 분석 기법, DNA 서열 분석, PCR 분석, 핵산 및 단백질 진단 키트 및 진단 장비, 의료 영상 수술을 위한 내시경 장비 등의 진단 및 치료를 위한 장비, 최근에는 새로운 응용 분야 및 보다 정확하고 쉽게 분석 가능한 다양한 장비가 계속해서 개발되고 있다.
분석 기술에 적합한 형광 염료로 사용되기 위해서는 생체 분자들이 존재하는 매질, 즉, 수용성 매질에서 고 휘도 특성, 다양한 pH 조건에서 안정성, 광 안전성, 형광 장비에 맞는 여기 및 발광 파장 특성 등이 요구된다. 이러한 요구 조건에 부합하는 형광 염료로, 잔텐(xanthane) 계열의 플로세인 및 로다민과, 폴리메틴(polymethine) 계열의 시아닌 유도체 염료 화합물들이 많이 알려져 있다. 특히, 시아닌 발색단을 갖는 형광 염료는 대표적인 염료의 카테고리에 속하는 것으로 널리 활용되고 있다.
다만, 현재 알려져 있는 인도카르보시아닌, 인도디카르보시아닌 및 인도트리카르보시아닌 골격을 가진 카르보시아닌은 높은 몰 흡광 계수를 가지나, 낮은 형광 양자 효율을 갖는 것으로 알려져 있다.
따라서, 상기와 같은 문제점이 개선되어 보다 강한 형광을 나타내어 유효하게 광학 영상을 얻을 수 있는 새로운 염료에 대한 개발이 필요한 실정이다.
또한, 폴리메틴 시아닌 염료는 1856년 이래로, 염료가 적용되는 다양한 분야들에서 독보적인 위치를 차지 하고 있으며, 이러한 주제에 대해서는 다양한 영역들에서 매년 수 많은 적용예들이 보고되고 있다.
일반적으로, 시아닌 염료들은 두 개의 질소 중심으로 구성되는 바, 그 중 하나는 양으로 대전되어 홀수 개의 탄소 원자들로 이루어진 접합 사슬에 의해서 다른 질소 원자에 연결된다. 이러한 특징은 "푸쉬-풀" 알켄으로 연구된 바 있으며, 폴리메틴 염료의 기초를 형성하기도 하는 바, 폴리메틴 염료는 발색단으로서 스트렙토폴리메틴 단위를 포함한다. 스트렙토폴리메틴 단위의 전하에 따라서, 이러한 염료 들은 하기와 같이 분류된다.
양이온성 스트렙토폴리메틴시아닌 및 헤미시아닌 염료 (1), 음이온성 스트렙토폴리메틴 옥소놀 염료 (2), 중성 스트렙토폴리메틴메로시아닌 염료 (3), 양쪽대전성 스쿠아레인계 시아닌 염료 (4).
일반적으로 상기 염료들은 안정한 형태에서 올-트랜스 기하학을 갖는다. 때때로, 이러한 염료들은 광이성질체화 (photoisomerization) 과정을 거친다. 이러한 종들의 생성은 섬광 광분해 (flash photolysis), 일시적 흡수 (transient absorption), 및 피코초 시간-분해 스펙트로스코피 (picoseconds time-resolved spectroscopy)와 같은 다양한 기술들을 사용하여 연구할 수 있다. 또한, 상기 염료 들은 할로겐화 은 포토그래피 및 밴드-갭 반도체 물질에서의 스펙트럼 증감제, 광 디스크에서 기록 매체, 태양에너지를 포획하기 위한 산업용 페인트, 레이저 물질, 광합성의 광포획 시스템, 광굴절 물질, 항암제 및 생물학적 시스템에 대한 프로브 등으로 광범위한 분야에서 활용되고 있다.
일반적으로 상기 염료들은 높은 몰흡광계수를 가지기 때문에 진한 색을 보인다. 하지만 양자효율(Quantum yield)이 떨어진다는 치명적인 단점이 있다. 그 이유는 시아닌 염료는 rotational, translational, vibrational mode 들이 있어서 들뜬 상태의 에너지를 형광이 아닌 non-radiative process로 손실 되기 때문에다.(D. F. O'Brien, T. M.Kelly, and L. F. Costa (1974). Excited state Properties of some Carbocyanine dyes and the energy transfer mechanism of spectral sensitisation. Photogr. Sci. Eng. 18(1), 76-84.)
따라서, 본 발명의 발명자들은 이런 형광 손실을 줄이기 위해 시아닌 염료의 폴리 메틴 체인을 Rigid하게 디자인 함으로써 형광양자효율을 현저하게 증가시키고자 한다.
또한, 상용화된 mitotracker 염료들은 양전하로 하전되어 있기 때문에 세포 내 미토콘드리아에 선택적으로 결합하는 특성을 가지고 있고, 밝은 형광과 뛰어난 광 안정성은 Mitotracker로 사용하기에 적합하며, 미토콘드리아를 labeling 하기 위해 간단한 Incubation 과정만으로도 충분히 염색이 된다.
그러나, 이후 특정 실험에서는 세포를 formaldehyde 와 같은 시약으로 fixation시키는 작업이 필요한데 이 과정에서 상용화 되어있는 몇몇 Mitotracker는 형광이 유지되지 못하는 단점을 갖고 있다.
<Thermo Fisher Scientific사에서 판매하는 MitoTracker 제품>
따라서, 본 발명의 발명자들은 Fixation 과정 후에도 형광이 안정하게 유지되는 염료를 개발하고자 하고, 또한 다양한 파장의 형광으로 디자인하여 원하는 파장의 Mitotracker를 선택할 수 있는 염료를 개발하고자 한다.
사용자가 사용하는 다른 Probe들과 형광의 파장이 겹치면 분석이 안되기 때문에 좁은 Bandwith를 가진 다양한 형광파장의 재료가 중요한 요소로 작용하므로, 다양한 파장을 가진 Mitotracker를 개발하고자 한다.
또한, 세포 내 점도는 신호전달 및 생체분자간의 상호작용을 주관하는데 매우 중요한 인자이다. 이는 세포 내 막의 단백질-단백질 상호작용에 영향을 주기 때문에 실제로 동맥경화, 당뇨병, 알츠하이머 질환 및 심지어 세포 악성종양의 주요 표지 인자로서 작용할 수 있다. 특히, 미토콘드리아 매트릭스 점도의 변화가 대사 분산을 조절할 수 있는 것으로 알려져 있어 이를 정량적으로 측정할 수 있다면, 이와 관련된 질병을 예측할 수 있게 된다.
따라서, 본 발명의 발명자들은 상기와 같은 문제를 해결하기 위하여, 보다 강한 형광을 나타내어 유효하게 광학 영상을 얻을 수 있는 새로운 화합물을 제공하고자 한다.
또한, 종래 Mitotracker가 갖고 있는 문제점인 Fixation 과정 후에도 형광이 안정하게 유지되는 염료와 다양한 파장의 형광으로 디자인하여 원하는 파장의 Mitotracker를 선택 활용할 수 있는 화합물을 제공하자고 한다.
또한, 세포 내 소기관의 점도를 정량화할 수 있어 세포 내 소기관과 관련된 질병을 예측 또는 진단할 수 있는 염료 화합물을 제공하고자 한다.
본 발명은 상기 과제를 해결하기 위하여, 하기 [화학식 Ⅰ] 또는 [화학식 Ⅱ]로 표시되는 염료 화합물을 제공한다.
[화학식 Ⅰ]
[화학식 Ⅱ]
상기 [화학식 Ⅰ] 또는 [화학식 Ⅱ]의 치환기에 대한 구체적인 설명은 후술한다.
또한, 본 발명은 상기 염료 화합물과 표지 대상 물질을 결합시키는 단계를 포함하는 화합물 표지방법을 제공한다.
본 발명에 따른 염료 화합물은 종래 시아닌 염료에 비하여 양자효율이 현저히 개선된 효과를 가지고, 높은 형광강도를 가져서 다양한 생물학적 시스템에 대한 프로브 등으로 광범위한 분야에서 유효하게 활용할 수 있다. 특히, 미토콘드리아를 하여 추적할 수 있는 Mitotracker로 활용할 수 있어 생체 또는 세포 조직에서 미토콘드리아를 정량적으로 영상화할 수 있으며, 나아가서 세포 내 소기관의 점도를 정량적으로 측정할 수 있어 이와 관련된 질병의 예측 또는 진단에 활용할 수 있다.
도 1a는 용매 점도(메탄올-글리세롤 시스템) 변화에 따른 [화학식 1]의 흡수 스펙트럼이다.
도 1b는 용매 점도(메탄올-글리세롤 시스템) 변화에 따른 [화학식 1]의 형광 스펙트럼이다.
도 2a는 본 발명에 따른 화학식 1로 표지된 헬라 A431 세포의 영상 이미지로서, 여기 파장은 638 nm이고, 670 - 720 nm 방출파장에서 획득하였다.
도 2b는 MTG(Mitotracker Green FM)으로 표지된 헬라 A431세포의 영상 이미지로서, 여기 파장은 488 nm이고, 500 - 550 nm 방출파장에서 획득하였다.
도 2c는 도 2a 및 도 2b를 합친 영상이고, 피어슨의 동시국소화(co-localization) 효율을 나타내는 계수 (A=0.81)는 LAS AF 소프트웨어를 사용하여 계산된 값이다.
도 1b는 용매 점도(메탄올-글리세롤 시스템) 변화에 따른 [화학식 1]의 형광 스펙트럼이다.
도 2a는 본 발명에 따른 화학식 1로 표지된 헬라 A431 세포의 영상 이미지로서, 여기 파장은 638 nm이고, 670 - 720 nm 방출파장에서 획득하였다.
도 2b는 MTG(Mitotracker Green FM)으로 표지된 헬라 A431세포의 영상 이미지로서, 여기 파장은 488 nm이고, 500 - 550 nm 방출파장에서 획득하였다.
도 2c는 도 2a 및 도 2b를 합친 영상이고, 피어슨의 동시국소화(co-localization) 효율을 나타내는 계수 (A=0.81)는 LAS AF 소프트웨어를 사용하여 계산된 값이다.
이하, 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다.
본 발명은 하기 [화학식 Ⅰ] 또는 [화학식 Ⅱ]로 표시되는 신규한 염료 화합물에 관한 것이며, 이에 대해서 구체적으로 설명한다.
[화학식 Ⅰ]
[화학식 Ⅱ]
상기 [화학식 Ⅰ] 또는 [화학식 Ⅱ]에서,
X는 S, O, Se, Te, Po, NR1, -N-NR2R3, CR4R5, SiR6R7, GeR8R9, PR10 및 BR11 중에서 선택되는 어느 하나이다.
Z는 단일결합 또는 S, O, Se, Te, Po, NR1, -N-NR2R3, CR4R5, SiR6R7, GeR8R9, PR10 및 BR11 중에서 선택되는 어느 하나이다.
A는 비존재이거나, 치환 또는 비치환된 아릴기 또는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴기이다.
Y는 C, CR12 또는 CR13R14이고, 서로 인접한 두 개의 Y는 서로 연결되어 단일결합 또는 이중결합을 형성한다.
상기 R, R1 내지 R14는 서로 동일하거나 상이하며, 각각 독립적으로 수소, 중수소, 치환 또는 비치환된 알킬, 치환 또는 비치환된 알케닐, 치환 또는 비치환된 알키닐, 치환 또는 비치환된 아릴, 치환 또는 비치환된 헤테로아릴, 치환 또는 비치환된 아릴알킬, 치환 또는 비치환된 아릴옥시, 치환 또는 비치환된 아릴옥시알킬, 치환 또는 비치환된 알콕시, 치환 또는 비치환된 알콕시알킬, 치환 또는 비치환된 아미노, 치환 또는 비치환된 아마이드, 시아노, 니트로, 할로겐, 아민, 하이드록시, 알데하이드, 히드라진, 아세탈, 케탈, 에터, 티오아세탈, 티오에터, 티오에스터, 다이설파이드, 포스포릴, 포스페이트, 포스포네이트, 설포히드록시, 설포닐, 설포네이트, 설페이트, 카르복실레이트, 아미드, 아지도, 구아니디움, 카르보닐, 카르복실, 카르복실산, 케톤, 설프하이드릴, 아실클로라이드, 설폰산, 에스터, 폴리알킬렌옥사이드, 폴리에틸렌글리콜 및 4차 암모늄 중에서 선택되는 어느 하나이다.
상기 R, R1 내지 R14가 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 헤테로아릴, 아릴알킬, 아릴옥시, 아릴옥시알킬, 알콕시 및 알콕시알킬 중에서 선택되는 어느 하나인 경우 1종 이상의 치환기로 더 치환될 수 있으며, 상기 1종 이상의 치환기는 할로겐, 시아노, 니트로, 할로겐, 아민, 하이드록시, 알데하이드, 아미노, 아마이드, 히드라진, 티올, 아세탈, 케탈, 포스포릴, 포스페이트, 포스포네이트, 술포히드록시, 술포닐, 술포네이트, 설페이트, 카르복실레이트, 아미드, 아지도, 구아니디움, 카르보닐, 카르복실, 카르복실산, 케톤, 설프하이드릴, 아실클로라이드, 설폰산, 에스터, 폴리알킬렌옥사이드, 폴리에틸렌글리콜 및 4차 암모늄 중에서 선택된다.
W--는 유기 또는 무기 이온으로서, 특별히 제한되지 않으며, 용도에 따라 유기용제 내에서 본 발명에 따른 염료의 용해성이나, 안정성의 관점에서 적절하게 선택하면 되고, 또한, 음이온 이나 필요에 따라서는 양이온 W+일 수도 있다.
일반적으로 포스포릭산 육플루오라이드 이온, 할로겐 이온, 포스포릭산 이온, 과염소산 이온, 과요오드산 이온, 안티몬 육플루오라이드 이온, 주석산 육플루오라이드 이온, 플루오로보릭산 이온, 사플루오르 이온 등과 같은 무기산 음이온이 될 수도 있고, 티오시안산 이온, 벤젠술포닉산 이온, 나프탈렌술포닉산 이온, p-톨루엔술포닉산 이온, 알킬술포닉산 이온, 벤젠카르복실릭산 이온, 알킬카르복실릭산 이온, 삼할로알킬카르복실릭산 이온, 알킬술포닉산 이온, 삼할로알킬술포닉산 이온, 니코틴산 이온 등과 같은 유기산 이온이 될 수도 있으며, 비스페닐디톨, 티오비스페놀 킬레이트, 비스디올-α-디켄톤 등과 같은 금속 화합물 이온일 수도 있다. 또한, 소듐 및 포타슘 등과 같은 금속 이온과 4차 암모늄 이온일 수도 있다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 할로겐 이온, -SO4 2-, -S2O3 2 -, -SO3-, -ClO4 -, -BF4-, -PF6-, -SbF6 -, -BiCl5 -, -AsF6 -, -SbCl6 -, -SnCl6 -, -COO-, -HSO4 -, -SO3CH3 -, Na+, K+, 4차 암모늄 이온, 아세테이트, 프로피오네이트 및 사이아네이트 중에서 선택되는 1종 이상일 수 있으며, 양이온과 치환된 음이온의 수에 따라서 W-는 존재 또는 비존재할 수 있다.
n은 0 내지 5의 정수이다.
한편, 본 발명에 따른 [화학식 Ⅰ] 또는 [화학식 Ⅱ]의 염료 화합물에서, R, R1 내지 R14 및 이들의 치환기는 상술한 바와 같이 표지 대상 물질과 결합할 수 있도록 반응성 치환기를 포함 할 수 있으며, 물에 대한 용해도 증가 및 형광 염료간의 상호작용과 염료와 다양한 표지인자 간의 원하지 않는 표지발생을 방지하기 위해서 극성과 전하를 가지는 치환기를 포함할 수 있다.
본 발명의 바람직한 일 실시예에 의하면, R, R1 내지 R14 및 이들의 치환기 중에서 적어도 하나는 아민, 티올, 알코올, 알데하이드, 케톤 등의 치환기를 갖는 표지 대상 물질과 컨쥬게이션(conjugation)할 수 있다.
상기 표지 대상 물질은 생체분자, 나노입자 또는 유기화합물 등으로서, 특별히 제한되지 않지만, 항체(antibody); 항원(antigen); 지질(lipid); 단백질(protein); 펩타이드(peptide); 탄수화물(carbohydrate); 덱스트란(dextran); 지방산(fatty acid); 인지질(phospholipid); 리포다당류(lipopoly saccharide); 아미노기, 설프하이드릴기, 카르보닐기, 하이드록실기, 카르복실기, 티올기, 인산기 및 티오인산기 중에서 하나 이상을 포함하거나, 또는 포함하도록 유도화된 뉴클레오타이드(nucleotides) 또는 올리고뉴클레오타이드(oligonucleotide); 아미노기, 설프하이드릴기, 카르보닐기, 하이드록실기, 카르복실기, 티올기, 포스페이트기 및 티오포스페이트기 중에서 하나 이상을 포함하거나, 또는 포함하도록 유도화된 옥시폴리핵산(oxypolynuceotide) 또는 데옥시폴리핵산(deoxypolynuceotide); 미생물; 약물; 호르몬; 세포; 세포막; 및 독소(toxins);로 이루어진 군 중에서 선택되는 어느 하나 이상일 수 있다.
구체적으로, 본 발명에 따른 반응성 치환기는 활성에스테르(activated esters), 카르복실(carboxyl), 아마이드(amide), 아크릴아마이드(acrylamides), 아자이드(azide), 아실아자이드(acyl azides), 아실할라이드(acyl halides), 알카인(alkyne), 아민(amine), 알데하이드(aldehydes), 케톤(ketones), 알킬할라이드(alkyl halides), 알킬설포네이트(alkyl sulfonates), 아릴할라이드(aryl halides), 아지리딘(aziridines), 보로네이트(boronates), 다이아조알칸(diazoalkanes), 에폭사이드(epoxides), 할로플래티네이트(할로백금산염, haloplatinate), 할로트리아진(halotriazines), 이미도에스테르(imido esters), 이소시아네이트(isocyanates), 실릴할라이드(silyl halides), 설포네이트에스테르(sulfonate esters), 설포닐할라이드(sulfonyl halides), 숙신이미딜에스테르(succinimidyl ester), 설포-숙신이미딜에스테르(sulpho-succinimidyl ester), 무수물(anhydrides), 산할로겐화물(산 할라이드, acid halides), 이소티오시아네이트(isothiocyanate), 비닐설폰(vinylsulphone), 디클로로트리아진(dichlorotriazines), 할로아세트아미드(haloacetamides), 말레이미드(maleimides), 카르보다이이미드(carbodiimide), 포스포라미다이트(phosphoramidites), 하이드라진(hydrazines), 하이드라자이드(hydrazide) 등일 수 있고, 바람직하게는 카르복실산의 숙신이미딜에스테르, 이소티오시아네이트, 말레이미드, 할로아세트아미드 등일 수 있다.
상기 활성에스테르는 본 발명이 속하는 기술분야에서, 치환반응에서 우수한 이탈 그룹기인 R을 갖는 구조식 -COR'로서, 상기 R'은 예를 들면, 숙신이미딜옥시(succinimidyloxy, -OC4H4O2), 술포숙신이미딜옥시(sulfosuccinimidyloxy, -OC4H3O2-SO3H), 또는 -1-옥시벤조벤조트리아졸일(-1-oxybenzotriazolyl, -OC6H4N8)이거나; 아릴옥시 또는 전자끌기 그룹에 속하는 니트로, 할로겐, 시아노, 할로겐알킬 등을 1종 이상 포함하는 아릴옥시이거나; 무수물(anhydrides, -OCORa 또는 -OCNRaNHRb)을 구성하는 카르보디이미드(carbodiimide)에 의해서 활성화된 카르복실산(carboxylic acid)일 수 있고, 상기 Ra 또는 Rb는 탄소수 1 내지 6의 알킬, 탄소수 1 내지 6의 알콕시, 시클로헥실, 3-디메틸아미노프로필, N-모폴리노에틸 등이다.
또한, 본 발명에 따른 반응성 치환기(RX)는 다양한 링커(L)에 공유결합으로 연결되어, RX-L- 구조일 수 있다.
이러한 링커는 단일결합이거나, 또는 바람직하게 탄소(C), 질소(N), 산소(O) 및 황(S) 원자로 구성되는 군에서 선택된 원자가 1 내지 20개 연결된 직쇄 또는 분지쇄의 사슬일 수 있고, 지방족 탄화수소 고리, 방향족 탄화수소 고리, 지방족 헤테로 고리 또는 방향족 헤테로 고리일 수도 있다. 또한, 이러한 링커는 + 또는 - 전하를 가질 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 [화학식 Ⅰ] 또는 [화학식 Ⅱ]로 표시되는 염료 화합물은 하기 [화학식 1] 내지 [화학식 35] 중에서 선택되는 어느 하나일 수 있으며, 다만 본 발명에 따른 염료 화합물의 범위가 하기 구체적인 화합물에 한정되지 않는다.
본 발명에 따른 염료 화합물은 세포 내 미토콘드리아를 선택적으로 염색하여 영상화할 수 있으므로 미토콘드리아 표지 및 추적 프로브(Mitotracker)로 적용할 수 있다.
특히, 다양한 파장의 형광으로 설계할 수 있기 때문에 사용자가 원하는 파장을 선택하여 Mitotracker로 활용할 수 있을 수 있다. 이와 같은 다양한 파장을 가진 Mitotracker가 필요한 이유는 사용자가 사용하는 다른 Probe들과 형광의 파장이 겹치면 분석이 안되므로, 좁은 밴드폭를 가진 다양한 형광 파장으로 선택적으로 설계할 수 있는 것은 상업적으로 매우 중요한 요소이다.
또한, 본 발명에 따른 염료 화합물은 하기 실시예에서 확인할 수 있는 바와 같이, 형광강도의 비율이 세포 내 미토콘드리아의 점도와 우수한 선형적 비례 관계에 있어, 미토콘드리아 등과 같은 세포 내 소기관의 점도를 정량적으로 측정할 수 있고, 이에 의해서 이와 관련된 질병의 예측 또는 진단에 활용할 수 있다.
이하에서는 본 발명에 따른 구체적인 염료 화합물의 합성방법과, 실시예 및 비교 실험을 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명한다. 그러나, 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위를 한정하고자 하는 것이 아니다.
합성예 1 : [화학식 1]의 합성
[반응식1-1] [중간체 1-a]의 합성
[중간체 1-a]
질소 분위기하, 반응기에 2,3,3-트리메틸인돌레닌 33.8 g (212 mmol)과 테트라하이드로퓨란 338 mL 를 투입하고, 상온에서 교반하였다. -78 ℃로 냉각한 후, 노르말-부틸리튬 용액 146 mL (1.6M, 233 mmol)를 적가하였다. 상온으로 승온한 후, 1시간 동안 교반한 다음, 2-(2-브로모에틸)-1,3-다이옥솔란 50.0 g (276 mmol) 과 테트라하이드로퓨란 169 mL를 섞은 용액을 적가하였다. 12시간 동안 환류시킨 후, 상온으로 냉각한 다음, 물을 투입하였다. 에틸아세테이트를 사용하여, 유기층을 추출한 후, 감압농축하였다. 여기에 다이에틸에테르 104 mL, 노르말 헵탄 104 mL 를 투입하고, 상온에서 교반하였다. 메틸 트리플루오로메탄설포네이트 13.1 g (79.8 mmol) 과 다이에틸에테르 69 mL를 섞은 용액을 적가하였다. 상온에서 1시간 동안 교반한 다음, 여과하였다. 에탄올 87 mL, 노르말 헵탄 87 mL를 투입하고 20분 동안 교반한 후, 여과한 다음, 컬럼크로마토그래피를 이용하여 [중간체 1-a] 23.0 g (54.3 mmol, 25.6%)을 얻었다.
1H NMR (900MHz, CDCl3) : 7.70-7.65 (m, 1H), 7.57 (t, J = 3.6 Hz, 2H), 7.55-7.51 (m, 1H), 4.95 (t, J = 4.1 Hz, 1H), 3.99 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.87 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.24 (t, J = 9.0 Hz, 2H), 1.97-1.90 (m, 2H), 1.89-1.83 (m, 2H), 1.61 (s, 6H)
13C NMR (225MHz, CDCl3) : 197.5, 141.8, 141.2, 130.3, 129.6, 122.8, 120.7(q, J CF = 320 Hz), 115.3, 103.1, 65.0, 54.8, 35.5, 32.8, 27.4, 22.4, 20.6
HR-MS (TOF-MS ES+, m/z) : calcd. for C17H24NO2 : 274.1807, found : 274.1802, (TOF-MS ES-, m/z) : calcd. for CO3F3S : 148.9520, found : 148.9520
[반응식1-2] [화학식 1]의 합성
[중간체 1-a]
[중간체 1-a']
[화학식 1]
반응기에 [중간체 1-a] 1.56 g (3.69 mmol), 말론알데하이드 다이아닐라이드 하이드로클로라이드 1.44 g (5.56 mmol), 피리딘 7.8 mL, 아세틱언하이드라이드 7.8 mL를 투입하고, 70 ℃로 승온한 다음, 4시간 동안 교반하였다. 감압농축한 다음 문헌(Nucleic Acids Research, 40(14), e108;2012)을 참고하여 합성한 [중간체 1-a'] 1.00 g (2.58 mmol), 피리딘 10 mL를 투입하고, 상온에서 1시간 동안 교반한 다음, 감압농축하였다. 클로로포름 100 mL, 50 % 황산 수용액 3 mL를 투입하고, 상온에서 20분 동안 교반하였다. 메틸렌클로라이드를 사용하여, 유기층을 추출한 후, 감압농축한다음, 컬럼크로마토그래피를 이용하여, [화학식 1] 668 mg (1.09 mmol, 29.5 %)을 얻었다.
1H NMR (900MHz, CDCl3) : 7.78 (s,1H), 7.71 (s,1H), 7.40 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 7.37-7.26 (m,4H), 7.25 (d, J = 8.1Hz, 1H), 7.17 (t, J = 6.3 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.65 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.53 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 4.15 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 4.02 (s, 3H), 3.88 (t, J = 12.2 Hz, 1H), 2.97 (d, J = 15.3 Hz, 1H), 2.86 (t, J = 13.1 Hz, 1H), 2.60 (d, J = 10.8 Hz), 2.42 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 2.05-1.97 (m, 1H), 1.83-1.62 (m, 13 H)
13C NMR (225MHz, CDCl3) : 177.1, 164.8, 147.2, 143.5, 141.9, 141.1, 140.2, 128.8, 128.4, 128.2, 126.2, 124.6, 122.3, 121.9, 121.0(q, J CF = 320 Hz), 113.8, 112.0, 110.8, 109.3, 72.5, 70.2, 51.4, 48.6, 41.0, 38.4, 28.9, 28.4, 27.7, 27.0, 26.9, 26.5, 25.9
HR-MS (TOF-MS ES+, m/z) : calcd. for C32H35N2O : 463.2749, found : 463.2750, (TOF-MS ES-, m/z) : calcd. for CO3F3S : 148.9520, found : 148.9520
실험예 1
본 발명에 따른 [화학식 1]의 용매 점도(메탄올-글리세롤 시스템) 변화에 따른 흡수스펙트럼과 형광 강도의 변화를 확인하였다.
하기 도 1a는 용매 점도(메탄올-글리세롤 시스템) 변화에 따른 [화학식 1]의 흡수 스펙트럼이고, 하기 도 1b는 용매 점도(메탄올-글리세롤 시스템) 변화에 따른 [화학식 1]의 형광 스펙트럼이다.
하기 도 1a 내지 도 1b 및 [표 1]에서 보는 바와 같이, 본 발명에 따른 [화학식 1]의 흡수 스펙트럼의 경우 550 nm에서 서서히 증가하여 670 nm 전, 후에서 Maximum을 나타내고, 글리세롤과 메탄올의 비율을 달리하여 점도가 증가함에 따라 형광 세기가 증가하는 것을 확인할 수 있다.
또한, 본 발명에 따른 [화학식 1]은 85% 글리세롤의 높은 점도에서 높은 형광을 보이며, 0.31의 양자효율을 나타낸다.
이와 같이, 본 발명에 따른 염료 화합물은 미토콘드리아 등의 세포 내 소기관의 점도를 정량화할 수 있어 세포 내 소기관의 점도 측정용 프로브에 활용될 수 있으며, 나아가서 미토콘드리아 등과 같은 세포 소기관 관련 질병의 예측 및 진단에도 활용할 수 있다.
구분 | 용매 | lmax abs | lmax fl | Viscosity(CP) | Q.Y. |
화학식 1 |
85% Glycerol in MeOH | 678 | 695 | 453.17 | 0.31 |
50% Glycerol in MeOH | 674 | 693 | 55.01 | 0.077 | |
Only MeOH | 669 | 689 | 0.59 | 0.016 |
실험예 2 본 발명에 따른 화합물의 미토콘드리아 선택성
본 발명에 따른 [화학식 1]의 미토콘드리아에 특이한 선택성을 나타내는지 확인하기 위하여, 헬라 A431 세포를 [화학식 1]과 상용화된 미토콘드리아 마커(MTG, 0.2μM MitoTracker Green FM for Mitochondria)를 이용하여 동시국소화(Co-localization) 실험을 실시하였다.
Thermo Fisher Scientific사의 MitoTracker Green FM의 구조식은 아래와 같다.
OPM 영상은 각각 500 - 550 nm (MTG, λex = 488 nm) 및 670 - 720 nm(화학식 1, λex = 638 nm)에서 획득하였으며, 이의 영상을 각각 하기 도 2a, 도 2b에 나타내었다. 또한, 하기 도 2c는 도 2a 및 도 2b를 합친 영상이고, 도 2d는 밝은-필드(bright-field)의 이미지다. 피어슨의 동시국소화(co-localization) 효율을 나타내는 계수 (A)는 LAS AF 소프트웨어를 사용하여 계산하였다.
[MTG] = 1 μM for 30min incubation, λ ex = 488 nm
[화학식 1] = 0.5 μM for 30min incubation, λ ex = 638 nm
그 결과, MTG(Mitotracker Green FM)과 [화학식 1]을 같이 염색해서 각각의 이미지를 겹쳐보았을 때 겹쳐지는 정도가 A=0.81이 나와 미토콘드리아에 우세하게 나타나는 것을 확인할 수 있다. 이는 본 발명에 따른 염료 [화학식 1]이 세포 내 여러 소기관 중 미토콘드리아에 선택적으로 염색이 되어 미토콘드리아를 정확하게 영상화함을 알 수 있다.
Claims (12)
- 하기 [화학식 Ⅰ] 또는 [화학식 Ⅱ]로 표시되는 염료 화합물:
[화학식 Ⅰ]
[화학식 Ⅱ]
상기 [화학식 Ⅰ] 또는 [화학식 Ⅱ]에서,
X는 -S-, -O-, -Se-, -Te-, -Po-, -NR1-, -N-NR2R3-, -CR4R5-, -SiR6R7-, -GeR8R9-, -PR10- 및 -BR11- 중에서 선택되는 어느 하나이고,
Z는 단일결합이거나, 또는 -S-, -O-, -Se-, -Te-, -Po-, -NR1-, -N-NR2R3-, -CR4R5-, -SiR6R7-, -GeR8R9-, -PR10- 및 -BR11- 중에서 선택되는 어느 하나이며,
A는 비존재이거나, 치환 또는 비치환된 아릴기 또는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴기이고,
Y는 -C-, -CR12- 또는 -CR13R14-이며, 서로 인접한 두 개의 Y는 서로 연결되어 단일결합 또는 이중결합을 형성하고,
상기 R, R1 내지 R14는 서로 동일하거나 상이하며, 각각 독립적으로 수소, 중수소, 치환 또는 비치환된 알킬, 치환 또는 비치환된 알케닐, 치환 또는 비치환된 알키닐, 치환 또는 비치환된 아릴, 치환 또는 비치환된 헤테로아릴, 치환 또는 비치환된 아릴알킬, 치환 또는 비치환된 아릴옥시, 치환 또는 비치환된 아릴옥시알킬, 치환 또는 비치환된 알콕시, 치환 또는 비치환된 알콕시알킬, 치환 또는 비치환된 아미노, 치환 또는 비치환된 아마이드, 시아노, 니트로, 할로겐, 아민, 하이드록시, 알데하이드, 히드라진, 아세탈, 케탈, 에터, 티오아세탈, 티오에터, 티오에스터, 다이설파이드, 포스포릴, 포스페이트, 포스포네이트, 설포히드록시, 설포닐, 설포네이트, 설페이트, 카르복실레이트, 아미드, 아지도, 구아니디움, 카르보닐, 카르복실, 카르복실산, 케톤, 설프하이드릴, 아실클로라이드, 설폰산, 에스터, 폴리알킬렌옥사이드, 폴리에틸렌글리콜 및 4차 암모늄 중에서 선택되는 어느 하나이고,
상기 R, R1 내지 R14가 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 헤테로아릴, 아릴알킬, 아릴옥시, 아릴옥시알킬, 알콕시 및 알콕시알킬 중에서 선택되는 어느 하나인 경우 1종 이상의 치환기로 더 치환될 수 있으며, 상기 1종 이상의 치환기는 할로겐, 시아노, 니트로, 할로겐, 아민, 하이드록시, 알데하이드, 아미노, 아마이드, 히드라진, 티올, 아세탈, 케탈, 포스포릴, 포스페이트, 포스포네이트, 술포히드록시, 술포닐, 술포네이트, 설페이트, 카르복실레이트, 아미드, 아지도, 구아니디움, 카르보닐, 카르복실, 카르복실산, 케톤, 설프하이드릴, 아실클로라이드, 설폰산, 에스터, 폴리알킬렌옥사이드, 폴리에틸렌글리콜 및 4차 암모늄 중에서 선택되고,
W--는 유기 또는 무기 이온으로서, 음이온 또는 W+로 표시되는 양이온이고, A-는 존재 또는 비존재할 수 있으며,
n은 0 내지 5의 정수이다. - 제1항에 있어서,
상기 R, R1 내지 R14 및 이들의 치환기는 상기 염료 화합물이 표지되는 표지 대상 물질에 결합하는 반응성 치환기(RX)로서,
상기 반응성 치환기(RX)는 활성에스테르(activated esters), 카르복실(carboxyl), 아마이드(amide), 아크릴아마이드(acrylamides), 아자이드(azide), 아실아자이드(acyl azides), 아실할라이드(acyl halides), 알카인(alkyne), 아민(amine), 알데하이드(aldehydes), 케톤(ketones), 알킬할라이드(alkyl halides), 알킬설포네이트(alkyl sulfonates), 아릴할라이드(aryl halides), 아지리딘(aziridines), 보로네이트(boronates), 다이아조알칸(diazoalkanes), 에폭사이드(epoxides), 할로플래티네이트(할로백금산염, haloplatinate), 할로트리아진(halotriazines), 이미도에스테르(imido esters), 이소시아네이트(isocyanates), 실릴할라이드(silyl halides), 설포네이트에스테르(sulfonate esters), 설포닐할라이드(sulfonyl halides), 숙신이미딜에스테르(succinimidyl ester), 설포-숙신이미딜에스테르(sulpho-succinimidyl ester), 무수물(anhydrides), 산할로겐화물(산 할라이드, acid halides), 이소티오시아네이트(isothiocyanate), 비닐설폰(vinylsulphone), 디클로로트리아진(dichlorotriazines), 할로아세트아미드(haloacetamides), 말레이미드(maleimides), 카르보다이이미드(carbodiimide), 포스포라미다이트(phosphoramidites), 하이드라진(hydrazines) 및 하이드라자이드(hydrazide) 중에서 선택되는 어느 하나이고,
상기 활성에스테르는 -COR'이고, 상기 R'는 숙신이미딜옥시(succinimidyloxy, -OC4H4O2), 술포숙신이미딜옥시(sulfosuccinimidyloxy, -OC4H3O2-SO3H), 또는 -1-옥시벤조벤조트리아졸일(-1-oxybenzotriazolyl, -OC6H4N8)이거나; 비치환된 아릴옥시 또는 니트로, 할로겐, 시아노 및 할로겐알킬 중에서 선택된 1종 이상으로 치환된 아릴옥시이거나; 또는 카르복실산인 것을 특징으로 하는 염료 화합물. - 제2항에 있어서,
상기 반응성 치환기(RX)는 링커(L)에 공유결합으로 연결된 -L-RX 구조이고, 상기 L은 단일결합이거나, 탄소(C), 질소(N), 산소(O) 및 황(S) 원자로 구성되는 군에서 선택된 원자가 1 내지 20개 연결된 직쇄 또는 분지쇄의 사슬이거나, 지방족 탄화수소 고리, 방향족 탄화수소 고리, 지방족 헤테로 고리 및 방향족 헤테로 고리에서 선택된 어느 하나이고, 상기 L은 + 또는 - 전하를 가질 수 있는 것을 특징으로 하는 염료 화합물. - 제2항에 있어서,
상기 표지 대상 물질은 아미노기, 설프하이드릴기, 카르보닐기, 하이드록실기, 카르복실기, 티올기, 인산기 및 티오인산기 중에서 선택되는 1종 이상을 포함하는 생체분자, 나노입자 또는 유기화합물이고,
상기 생체분자는 항체(antibody); 항원(antigen); 지질(lipid); 단백질(protein); 펩타이드(peptide); 탄수화물(carbohydrate); 덱스트란(dextran); 지방산(fatty acid); 인지질(phospholipid); 리포다당류(lipopoly saccharide); 아미노기, 설프하이드릴기, 카르보닐기, 하이드록실기, 카르복실기, 티올기, 인산기 및 티오인산기 중에서 하나 이상을 포함하거나, 또는 포함하도록 유도화된 뉴클레오타이드(nucleotides) 또는 올리고뉴클레오타이드(oligonucleotide); 아미노기, 설프하이드릴기, 카르보닐기, 하이드록실기, 카르복실기, 티올기, 포스페이트기 및 티오포스페이트기 중에서 하나 이상을 포함하거나, 또는 포함하도록 유도화된 옥시폴리핵산(oxypolynuceotide) 또는 데옥시폴리핵산(deoxypolynuceotide); 미생물; 약물; 호르몬; 세포; 세포막; 및 독소(toxins);로 이루어진 군 중에서 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 염료 화합물. - 제1항에 있어서,
상기 염료 화합물은 세포 내 미토콘드리아에 선택적으로 염색되는 것을 특징으로 하는 염료 화합물. - 제1항에 있어서,
상기 염료 화합물은 점도에 따라 형광의 세기가 변하는 것을 특징으로 하는 염료 화합물. - 제1항에 있어서,
상기 염료 화합물은 세포 내 소기관의 점도에 따라 형광의 세기가 변하는 것을 특징으로 하는 염료 화합물. - 제5항에 있어서,
상기 세포 내 소기관은 미토콘드리아인 것을 특징으로 하는 염료 화합물. - 제1항에 따른 염료 화합물을 포함하고, 세포 내 미토콘드리아의 점도 측정용 프로브.
- (a) 표지 대상 물질을 포함하는 시료에 제1항에 따른 염료 화합물을 주입하고, 인큐베이팅하는 단계;를 포함하는 화합물 표지방법.
- 제11항에 있어서,
(b) 상기 표지 대상 물질과 결합된 염료 화합물의 형광 발광을 측정하는 단계;를 더 포함하여, 형광 세기에 따라 표지 대상 물질을 정량화하는 것을 특징으로 하는 화합물 표지방법.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020150099666 | 2015-07-14 | ||
KR20150099666 | 2015-07-14 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
KR20170008700A true KR20170008700A (ko) | 2017-01-24 |
Family
ID=57993110
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020160089124A KR20170008700A (ko) | 2015-07-14 | 2016-07-14 | 신규한 시아닌 염료 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
KR (1) | KR20170008700A (ko) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN113979917A (zh) * | 2021-09-24 | 2022-01-28 | 南京大学 | 三甲川菁染料、合成方法及用途 |
-
2016
- 2016-07-14 KR KR1020160089124A patent/KR20170008700A/ko not_active Application Discontinuation
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN113979917A (zh) * | 2021-09-24 | 2022-01-28 | 南京大学 | 三甲川菁染料、合成方法及用途 |
CN113979917B (zh) * | 2021-09-24 | 2023-11-17 | 南京大学 | 三甲川菁染料、合成方法及用途 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6815038B2 (ja) | 染料化合物 | |
Hou et al. | A retrievable and highly selective fluorescent probe for monitoring sulfide and imaging in living cells | |
US9315465B2 (en) | Photostable AIE luminogens for specific mitochondrial imaging and its method of manufacturing thereof | |
JP5924939B2 (ja) | 新規の蛍光性ホウ素で置換されたジピロメテン及び診断へのその使用 | |
DE3881735T2 (de) | Diagnostischer Fluoreszenztest, Testbestandteile und Konjugate. | |
CA2734273C (en) | Fluorochromes for organelle tracing and multi-color imaging | |
EP1283855A1 (de) | Stabile nir-marker-farbstoffe auf der basis von benzopyrylium-polymethinen | |
WO2005085811A1 (ja) | 蛍光プローブ | |
JPH05232119A (ja) | 生体試料中の蛋白質指示薬としてのメロシアニン及びニトロ又はニトロソ置換ポリハロゲン化フェノールスルホンフタレイン | |
CN107056769A (zh) | 一种l‑半胱氨酸荧光探针及其制备方法 | |
US20100256399A1 (en) | Fluorescent dyes and complexes | |
CN111056985B (zh) | 一种部花菁类衍生物荧光探针及其制备方法和应用 | |
CN113620963B (zh) | 一种线粒体粘度探针及其制备方法和应用 | |
JP5592057B2 (ja) | 標識遷移金属錯体 | |
KR20170008700A (ko) | 신규한 시아닌 염료 | |
KR20180081285A (ko) | 염료 화합물 | |
CN114539222B (zh) | 一种七甲川菁-萘酰亚胺杂合体的合成和作为近红外荧光探针在检测谷胱甘肽中的应用 | |
DE102013114848A1 (de) | Markerfarbstoffe für UV- und kurzwellige Anregung mit hohem Stokes Shift auf der Basis von Benzoxazolen | |
Peng et al. | Near-infrared fluorescent probes based on a quinoxaline skeleton for imaging nucleic acids in mitochondria | |
EP1759204B1 (en) | Luminescent compounds having a functionalised linker arm used in the bioconjugation and labelling of biomolecules | |
CN114836202B (zh) | 一种基于TPE的Bola型两亲性AIE荧光探针在检测牛血清白蛋白中的应用 | |
CN114621172B (zh) | 一种高尔基体靶向亚铁离子荧光探针及其制备方法和应用 | |
WO2020045529A1 (ja) | 新規な蛍光色素並びにそれを用いた脂肪滴染色用組成物及び細胞内脂肪滴のイメージング方法 | |
DE102020109362A1 (de) | Fluoreszenzfarbstoffe mit hohem Stokes Shift auf der Basis von verbrückten Benzopyryliumsalzen | |
CN112341411A (zh) | 一种类罗非昔布衍生物、制备的有机荧光染料骨架及用途 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
E902 | Notification of reason for refusal |