KR20170005865A - Ｎａｍｐｔ 억제제 및 방법 - Google Patents

Ｎａｍｐｔ 억제제 및 방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 본원에 개시된 바와 같은 화학식 (I), 화학식 (I)-A 및 화학식 (I)-B의 화합물, 및 합성, 치료, 진단 및 검정 방법들을 특징으로 한다.

Description

ＮＡＭＰＴ 억제제 및 방법{NAMPT INHIBITORS AND METHODS}
관련 출원과의 상호-참조
본 출원은 35 U.S.C. §119(e) 하에 개시내용의 전문이 본원에 포함되는 2014년 5월 22일에 출원된 미국 가출원 제62/001,905호에 대한 우선권을 주장한다.
기술 분야
본 발명은 일반적으로 제한 없이, 종양학적 장애, 면역학적 장애, 바이러스 감염 및 니코틴아미드 포스포리보실트랜스퍼라제(NAMPT)에 관한 장애를 포함하는 다양한 장애를 위한 치료제 및 치료에 관한 것이다.
2가지 NAMPT 억제제(FK866 및 CHS828)가 임상 시험을 시작하였다. 일반적으로, 문헌[Galli et al., "Medicinal Chemistry of Nicotinamide Phosphoribosetransferase (NAMPT) Inhibitors", J. Med. Chem. 2013 (56(16), pp 6279-6296]을 참조한다.
요약
본 발명은 특히 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다:
[화학식 I]
Figure pct00001
,
상기 식에서,
Y1은 -CR14- 또는 N이고,
Y2는 CR15 또는 N이고,
Y3은 -C(O)-이고,
Y4는 -CH2 또는 -N(R16)-이거나,
Y3 및 Y4는 함께 -C(R17)=C(R18)-이고,
X는 아릴, 헤테로아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴알킬 또는 아미드이고,
Z는 C2 이상의 알킬 또는 알콕실알킬이고,
R은 H 또는 C1-C6 알킬이고,
R1 내지 R18은 독립적으로 -H 또는 C1-C6 알킬이고,
Q는 C 또는 N이되; 단, Q가 N이고, R이 H인 경우, X는
Figure pct00002
이 아니다.
바람직하게는, X는 페닐 또는 치환된 페닐, 예를 들어, 플루오로페닐이고; R는 H이고; X는 피리디닐 또는 치환된 피리디닐, 예를 들어, 플루오로피리디닐 또는 메틸피리디닐이다. 또는, 바람직하게는, Y1은 C이고; Y1은 N이고; Y2는 C이고 Y2는 N이고; Y3은 -C(O)-이고; Y4는 -C(H)=이다. 또한, 바람직하게는 Z는 C2-C4 알킬 또는 프로필, 예를 들어, 이소프로필이다. 또한, 바람직하게는 Z는 알콕시알킬 또는 사이클로부틸메틸이다. 또한, 바람직하게는, R17 및 R18, 가장 바람직하게는 R1-R16도 또한 -H이다.
다른 바람직한 구현예에서, 화합물은 하기의 화학식 (I)-A 또는 (I)-B 중 하나를 갖는다:
[화학식 (I)-A]
Figure pct00003
[화학식 (I)-B]
Figure pct00004
상기 화합물은, 상기 화합물을 포함하는 조성물을 면역학적 질병의 치료적 조절을 위하여 활성화된 및/또는 증식성 B 세포의 억제를 필요로 하는 환자에게 투여함으로써, 면역학적 질병의 치료적 조절을 위하여 활성화된 및/또는 증식성 B 세포를 억제하는데 사용될 수 있다. 예를 들어, 면역학적 질병은 루푸스, 류마티스 관절염, 피부경화증, 건선, 쇼그렌 증후군, I형 당뇨병 또는 다발성 경화증일 수 있다. 상기 화합물은, 상기 화합물을 포함하는 조성물을 이식을 위한 면역억제의 유도, 조절 또는 유지를 필요로 하는 환자에게 투여함으로써 이식을 위한 면역억제의 유도, 조절 또는 유지를 위해 사용될 수 있다. 다른 의학적 용도는 치료적 생물제제, 예를 들어, 재조합 단백질, 핵산, 항체 또는 펩티드에 대한 면역 반응을 억제하거나 조절하는 것; 특히 NAPRT 결핍 종양 세포에 대하여 종양 세포 성장을 억제하는 것; 백혈병(예를 들어, 급성 림프구성 백혈병) 및 림프종을 치료하는 것; 바이러스 감염, 예를 들어, 인플루엔자, 호흡기 세포융합 바이러스(RSV), 단순 포진 바이러스(HSV), C형 간염 바이러스(HCV), B형 간염 바이러스(HBV), 인간 파필로마 바이러스(HPV), 인간 면역결핍 바이러스(HIV), 인간 사이토메갈로바이러스(CMV), 에볼라바이러스(EBOV) 및 엡스테인-바 바이러스(EBV)를 치료하는 것을 포함한다. 화합물에 대한 다른 용도는 B 세포를 화합물과 접촉시킴으로써 (예를 들어, 생체내에서 또는 시험관내에서) 형질 세포로의 B 세포의 분화를 억제하는 것을 포함한다. 시료(예를 들어, 화합물을 함유하는 것으로 의심되는 시료) 중 본 발명에 따른 화합물의 존재는 시료를 화합물에 결합하는 결합제와 접촉시키고, 화합물로의 결합제의 결합을 검출함으로써 검출될 수 있다. 화합물은 예를 들어, 그러한 검출을 용이하게 하기 위한 검출가능한 표지를 추가로 포함할 수 있다.
다른 양태에서, 본 발명은 벤조산 유도체와 카르보닐 디이미다졸 및 메탄아민 유도체를 반응시킴으로써 화합물을 합성하는 것을 특징으로 한다.
이들 화합물은 루프스, 류마티스 관절염, 쇼그렌 증후군, I형 당뇨병, 다발성 경화증, 이식 유도 및 유지, 피부경화증, 급성 림프구성 백혈병 및 암, 특히 NAPRT-결핍 고형 또는 액체 종양을 포함하나 이들에 한정되지 않는 다수의 면역학적 및 종양학적 질병을 위한 치료제로서 응용을 갖는다. 또한, 그들은 인플루엔자, RSV, HSV, HCV, HBV, HPV, HIV, CMV, EBOV 및 EBV를 포함하나 이들에 한정되지 않는 NAD-요구 바이러스 감염을 위한 치료제이다.
또한, 본 발명은 치료적 유효량의 그러한 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용되는 염을 환자에게 투여함에 의한 상기 질환의 치료 방법을 제공한다. 또한, 본 발명은 치료법에 사용하기 위한 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용되는 염의 용도 또는 제조를 제공한다. 또한, 본 발명은 본원에 참조된 질병의 치료에 사용하기 위한 그러한 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다.
특정 작용 메커니즘에 결부시키고자 하지 않고, 화합물은 T 세포를 남겨 두면서, 인간 일차 B 세포를 선택적으로 억제한다. 일반적으로, 화합물은 NAMPT를 표적화하고, 일차 인간 T 세포를 선택적으로 남겨 두면서, 일차 인간 B 세포 활성화 및 증식을 억제하고, 그들은 다양한 면역-매개의 질병 및 암, 특히 B-세포 악성종양, NAPRT-결핍 고형 또는 액체 종양을 포함하는 B 세포-매개의 증식성 장애, 및 인플루엔자, RSV, HSV, HCV, HBV, HPV, HIV, CMV, EBOV 및 EBV를 포함하나 이들에 한정되지 않는 NAD-요구 바이러스 감염을 치료하는데 유용하다.
본 발명의 하나 이상의 구현예의 상세사항은 첨부된 도면 및 하기의 설명에 기재되어 있다. 본 발명의 다른 특징, 목적 및 이점은 설명 및 도면으로부터, 그리고 청구범위로부터 명백할 것이다.
도 1은 본원에 기재된 화합물의 작용 메커니즘을 보여주는 그래프이다.
도 2는 랫트(rat)로의 정맥내 또는 경구 투여 후에 1'-이소프로필-3-메틸-6-(4-(3-(티아졸-5-일)프로파노일)페닐)스피로-[벤조[e][1,3]옥사진-2,4'-피페리딘]-4(3H)-온에 대한 평균 혈장 농도 대 시간을 보여주는 그래프이다.
도 3은 랫트로의 정맥내 또는 경구 투여 후에 4-(1'-이소프로필-4-옥소스피로[크로만-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((3-메틸이속사졸-5-일)메틸)벤즈아미드에 대한 평균 혈장 농도 대 시간을 보여주는 그래프이다.
도 4는 마우스로의 정맥내 또는 경구 투여 후에 4-(1'-이소프로필-4-옥소스피로[크로만-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((3-메틸이속사졸-5-일)메틸)벤즈아미드에 대한 평균 혈장 농도 대 시간을 보여주는 그래프이다.
도 5는 NALM6 백혈병 모델에서의 4-(1'-이소프로필-4-옥소스피로[크로만-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((3-메틸이속사졸-5-일)메틸)벤즈아미드의 생체내 검정 결과를 보여주는 그래프이다.
도 6은 HCT116 종양 모델에서의 4-(1'-이소프로필-4-옥소스피로[크로만-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((3-메틸이속사졸-5-일)메틸)벤즈아미드의 생체내 검정 결과를 보여주는 그래프이다.
도 7은 다른 HCT116 종양 모델에서의 4-(1'-이소프로필-4-옥소스피로[크로만-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((3-메틸이속사졸-5-일)메틸)벤즈아미드의 생체내 검정 결과를 보여주는 그래프이다.
I. 화합물
본 개시내용은 특히 상기 화학식 (I), 화학식 (I)-A 및 화학식 (I)-B의 화합물에 관한 것이다.
일반적 정의
명확을 기하기 위하여, 별도의 구현예의 맥락에서 기술되는 본 발명의 소정의 특징은 또한 단일 구현예와 조합하여 제공될 수 있는 것이 이해된다. 이와 대조적으로, 간략화를 위하여, 단일의 구현예의 맥락에서 기술되는 본 발명의 다양한 특징은 또한 개별적으로 또는 임의의 적합한 하위조합으로 제공될 수 있다.
용어 "예를 들어" 및 "와 같은" 및 그의 문법적 동등어에 대해서, "그리고 제한 없이"란 어구는 달리 명확하게 기술되지 않는 한 다음을 따름을 알 수 있다. 본원에 사용되는 단수형("a," "an," 및 "the")은 달리 문맥에서 명확히 언급하지 않는 한 복수의 지시대상을 포함한다. 본원에 사용되는 용어 "약"은 "대략"(예컨대, 표시된 값의 플러스 또는 마이너스 대략 10%)을 의미한다.
본원에 사용되는 어구 "임의로 치환된"은 비치환되거나 치환된 것을 의미한다. 본원에 사용되는 용어 "치환된"은 수소 원자가 제거되고, 치환기에 의해 대체되는 것을 의미한다. 일반적으로, 모든 모이어티는 다르게 나타내지 않는 한, 치환될 수 있다. 주어진 원자에서 치환이 원자가에 의해 제한되는 것이 이해되어야 한다. 정의 전체에서, 용어 "Cn -m"은 종점을 포함하는 범위를 나타내며, 여기서 n 및 m은 정수이고, 탄소수를 나타낸다. 그 예는 C1-4, C1-6 등을 포함한다.
용어 "n-원"(n-membered)(여기서, n은 정수임)은 전형적으로 고리-형성 원자의 수가 n인 모이어티에서의 당해 고리-형성 원자의 수를 기술한다. 예를 들어, 피페리디닐은 6-원 헤테로사이클로알킬 고리의 예이고, 피라졸릴은 5-원 헤테로아릴 고리의 예이며, 피리딜은 6-원 헤테로아릴 고리의 예이고, 1,2,3,4-테트라하이드로-나프탈렌은 10-원 사이클로알킬기의 예이다.
단독으로 또는 다른 용어와 조합되어 사용되는 본원에 사용되는 용어 "Cn -m 알킬"은 n 내지 m개의 탄소를 가진 직쇄 또는 분지쇄일 수 있는 포화 탄화수소기를 지칭한다. 일부 구현예에서, 알킬기는 1 내지 6개의 탄소 원자 또는 1 내지 4개의 탄소 원자 또는 1 내지 3개의 탄소 원자를 함유한다. 알킬 모이어티의 예는 화학기, 예를 들어, 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, s-부틸 및 t-부틸을 포함하지만 이들로 제한되는 것은 아니다.
단독으로 또는 다른 용어와 조합되어 사용되는 본원에 사용되는 용어 "Cn -m 알콕시"는 화학식 -O-알킬의 기를 지칭하며, 여기서 알킬기는 n 내지 m개의 탄소를 가진다. 알콕시기의 예는 메톡시, 에톡시 및 프로폭시(예를 들어, n-프로폭시 및 이소프로폭시)를 포함한다. 일부 구현예에서, 알킬기는 1 내지 3개의 탄소 원자를 가진다.
본원에 사용되는 "Cn -m 알케닐"은 1개 이상의 이중 탄소-탄소 결합과 n 내지 m개의 탄소를 갖는 알킬기를 지칭한다. 일부 구현예에서, 알케닐 모이어티는 2 내지 6개 또는 2 내지 4개의 탄소 원자를 함유한다. 알케닐기의 예는 에테닐, n-프로페닐, 이소프로페닐, n-부테닐, sec-부테닐 등을 포함하지만 이들로 제한되는 것은 아니다.
본원에 사용되는 "Cn -m 알키닐"은 1개 이상의 삼중 탄소-탄소 결합과 n 내지 m개의 탄소를 갖는 알킬기를 지칭한다. 알키닐기의 예는 에티닐, 프로핀-1-일, 프로핀-2-일 등을 포함하지만 이들로 제한되는 것은 아니다. 일부 구현예에서, 알키닐 모이어티는 2 내지 6개 또는 2 내지 4개의 탄소 원자를 함유한다.
본원에 사용되는 용어 "Cn -m 알킬아미노"는 화학식 -NH(알킬)의 기를 지칭하며, 여기서 알킬기는 n 내지 m개의 탄소 원자를 가진다. 일부 구현예에서, 알킬기는 1 내지 6개 또는 1 내지 4개의 탄소 원자를 가진다.
본원에 사용되는 용어 "디-Cn-m-알킬아미노"는 화학식 -N(알킬)2의 기를 지칭하며, 여기서 2개의 알킬기는 각각 독립적으로 n 내지 m개의 탄소 원자를 가진다. 일부 구현예에서, 각 알킬기는 독립적으로 1 내지 6개 또는 1 내지 4개의 탄소 원자를 가진다.
본원에 사용되는 용어 "Cn -m 알킬티오"는 화학식 -S-알킬의 기를 지칭하며, 여기서 알킬기는 n 내지 m개의 탄소 원자를 가진다. 일부 구현예에서, 알킬기는 1 내지 6개 또는 1 내지 4개의 탄소 원자를 가진다.
본원에 사용되는 용어 "아미노"는 화학식 -NH2의 기를 지칭한다.
단독으로 또는 다른 용어와 조합되어 사용되는 본원에 사용되는 용어 "아릴"은, 비제한적으로 페닐, 1-나프틸, 2-나프틸, 안트라세닐, 페난트레닐 등과 같은, 단환식 또는 다환식(예컨대, 2, 3 또는 4개의 융합된 고리를 지님) 방향족 탄화수소를 지칭한다. 일부 구현예에서, 아릴은 C6-10 아릴이다. 일부 구현예에서, 아릴기는 나프탈렌 고리 또는 페닐 고리이다. 일부 구현예에서, 아릴기는 페닐이다.
단독으로 또는 다른 용어와 조합되어 사용되는 본원에 사용되는 용어 "카르보닐"은 -C(O)- 기를 지칭한다.
단독으로 또는 다른 용어와 조합되어 사용되는 본원에 사용되는 용어 "사이클로알킬"은, 고리 구조의 일부로서 하나 이상의 알케닐렌기를 임의로 함유할 수 있는, 비방향족 환식 탄화수소 모이어티를 지칭한다. 사이클로알킬기는 단환식 또는 다환식(예컨대, 2, 3 또는 4개의 융합된 고리를 지님) 고리계를 포함할 수 있다. 또한 사이클로알킬의 정의에는 사이클로알킬 고리에 융합된(즉, 이와 공통인 결합을 지니는) 하나 이상의 방향족 고리를 가지는 모이어티, 예를 들어, 사이클로펜탄, 사이클로펜텐, 사이클로헥산 등의 벤조 유도체가 포함된다. 사이클로알킬기의 하나 이상의 고리-형성 탄소 원자는 산화되어 카르보닐 결합을 형성할 수 있다. 일부 구현예에서, 사이클로알킬은 단환식 또는 이환식인 C3-7 사이클로알킬이다. 예시적인 사이클로알킬기는 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헵틸, 사이클로펜테닐, 사이클로헥세닐, 사이클로헥사디에닐, 사이클로헵타트리에닐, 노보닐, 노피닐, 노카닐 등을 포함한다. 일부 구현예에서, 사이클로알킬기는 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸 또는 사이클로헥실이다.
본원에 사용되는 "Cn -m 할로알콕시"는 n 내지 m개의 탄소 원자를 가진 화학식 -O-할로알킬의 기를 지칭한다. 할로알콕시기의 예는 OCF3이다. 추가의 할로알콕시기의 예는 OCHF2이다. 일부 구현예에서, 할로알콕시기는 오직 플루오르화된다. 일부 구현예에서, 알킬기는 1 내지 6개 또는 1 내지 4개의 탄소 원자를 가진다.
본원에 사용되는 용어 "할로"는 F, Cl, I 또는 Br로부터 선택된 할로겐 원자를 지칭한다. 일부 구현예에서, "할로"는 F, Cl 또는 Br로부터 선택된 할로겐 원자를 지칭한다. 일부 구현예에서, 예시적인 할로기는 F이다.
단독으로 또는 다른 용어와 조합되어 사용되는 본원에 사용되는 용어 "Cn -m 할로알킬"은, 동일하거나 상이할 수 있는 1개의 할로겐 원자 내지 2s+1개의 할로겐 원자(여기서 "s"는 알킬기 내의 탄소 원자의 수임)를 가진 알킬기를 지칭하며, 여기서 알킬기는 n 내지 m개의 탄소 원자를 가진다. 일부 구현예에서, 할로알킬기는 오직 플루오르화된다. 일부 구현예에서, 할로알킬기는 플루오로메틸, 디플루오로메틸 또는 트리플루오로메틸이다. 일부 구현예에서, 할로알킬기는 트리플루오로메틸이다. 일부 구현예에서, 알킬기는 1 내지 6개 또는 1 내지 4개의 탄소 원자를 가진다.
단독으로 또는 다른 용어와 조합되어 사용되는 본원에 사용되는 용어 "헤테로아릴"은, 질소, 황 및 산소로부터 선택된 1개 이상의 헤테로원자 고리 구성원을 가진, 단환식 또는 다환식(예컨대, 2, 3 또는 4개의 융합된 고리를 가짐) 방향족 탄화수소 모이어티를 지칭한다. 일부 구현예에서, 헤테로아릴은, 단환식 또는 이환식이고, 질소, 황 및 산소로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 헤테로원자 고리 구성원을 가진 5- 내지 10-원 C1-9 헤테로아릴이다. 헤테로아릴기가 하나 초과의 헤테로원자 고리 구성원을 함유하는 경우, 헤테로원자는 동일하거나 상이할 수 있다. 헤테로아릴기의 고리(들) 내의 질소 원자는 산화되어 N-옥사이드를 형성할 수 있다. 예시적인 헤테로아릴기는, 피리딘, 피리미딘, 피라진, 피리다진, 피롤, 피라졸, 아졸릴, 옥사졸, 이속사졸, 티아졸, 이소티아졸, 이미다졸, 푸란, 티오펜, 트리아졸, 테트라졸, 티아디아졸, 퀴놀린, 이소퀴놀린, 인돌, 벤조티오펜, 벤조푸란, 벤즈이속사졸, 이미다조[1,2-b]티아졸, 푸린, 트리아진 등을 포함하지만 이들로 제한되는 것은 아니다.
5-원 헤테로아릴은 탄소와 N, O 및 S로부터 독립적으로 선택된 1개 이상(예컨대, 1, 2 또는 3개)의 고리 원자를 포함하는 5개의 고리 원자를 가진 헤테로아릴기이다. 예시적인 5-원 고리 헤테로아릴은 티에닐, 푸릴, 피롤릴, 이미다졸릴, 티아졸릴, 옥사졸릴, 피라졸릴, 이소티아졸릴, 이속사졸릴, 1,2,3-트리아졸릴, 테트라졸릴, 1,2,3-티아디아졸릴, 1,2,3-옥사디아졸릴, 1,2,4-트리아졸릴, 1,2,4-티아디아졸릴, 1,2,4-옥사디아졸릴, 1,3,4-트리아졸릴, 1,3,4-티아디아졸릴 및 1,3,4-옥사디아졸릴이다.
6-원 헤테로아릴은, 1개 이상(예컨대, 1, 2 또는 3개)의 고리 원자가 질소인 6개의 고리 원자를 가진 헤테로아릴기이다. 예시적인 6-원 고리 헤테로아릴은 피리딜, 피라지닐, 피리미디닐, 트리아지닐 및 피리다지닐이다.
단독으로 또는 다른 용어와 조합되어 사용되는 본원에 사용되는 용어 "헤테로사이클로알킬"은, 임의로 1개 이상의 알케닐렌 또는 알키닐렌기를 고리 구조의 일부로서 함유할 수 있고, 질소, 황 및 산소로부터 독립적으로 선택된 적어도 1개의 헤테로원자 고리 구성원을 가지는 비-방향족 고리계를 지칭한다. 헤테로사이클로알킬기가 1개 초과의 헤테로원자를 함유하는 경우, 헤테로원자는 동일하거나 상이할 수 있다. 헤테로사이클로알킬기는, 스피로 계를 비롯한, 단환식 또는 다환식(예컨대, 2, 3 또는 4개의 융합 고리를 가짐) 고리계를 포함할 수 있다. 또한, 헤테로사이클로알킬의 정의에는, 비-방향족 고리에 융합된(즉, 이와 공통인 결합을 지니는) 하나 이상의 방향족 고리를 가지는 모이어티, 예를 들어, 1,2,3,4-테트라하이드로-퀴놀린, 디하이드로벤조푸란 등이 포함된다. 헤테로사이클로알킬기의 고리(들) 내의 탄소 원자 또는 헤테로원자는 산화되어 카르보닐 또는 설포닐기(또는 다른 산화된 결합)를 형성할 수 있거나, 질소 원자는 사차화될 수 있다. 일부 구현예에서, 헤테로사이클로알킬은, 단환식 또는 이환식이고, 질소, 황 및 산소로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 헤테로원자 고리 구성원을 가진 5- 내지 10-원 C2-9 헤테로사이클로알킬이다. 헤테로사이클로알킬기의 예는 1, 2, 3, 4-테트라하이드로-퀴놀린, 디하이드로벤조푸란, 아제티딘, 아제판, 피롤리딘, 피페리딘, 피페라진, 모르폴린, 티오모르폴린 및 피란을 포함한다.
본원에 기재된 화합물은 비대칭(예를 들어, 하나 이상의 입체중심을 가짐)일 수 있다. 달리 표시되지 않는 한, 모든 입체이성질체, 예컨대, 거울상이성질체 및 부분입체이성질체가 의도된다. 비대칭적으로 치환된 탄소 원자를 함유하는 본 발명의 화합물은 광학적으로 활성인 형태 또는 라세미체로 단리될 수 있다. 예컨대, 라세미 혼합물의 분할에 의하거나 또는 입체선택적 합성에 의하여, 광학적으로 불활성인 출발 물질로부터 광학적으로 활성인 형태를 제조하는 방법은, 당업계에 공지되어 있다. 올레핀의 다수의 기하학적 이성질체, C=N 이중 결합 등은 또한 본원에 기재된 화합물에 존재할 수 있으며, 모든 이러한 안정적인 이성질체가 본 발명에 고려된다. 본 발명의 화합물의 시스 및 트랜스 기하학적 이성질체가 기술되고, 이성질체의 혼합물로서 또는 분리된 이성질체 형태로서 단리될 수 있다.
본 발명의 화합물이 키랄 중심을 함유하는 경우, 화합물은 가능한 입체이성질체 중 임의의 것일 수 있다. 단일의 키랄 중심을 갖는 화합물에서, 키랄 중심의 입체화학은 (R) 또는 (S)일 수 있다. 2개의 키랄 중심이 있는 화합물에서, 키랄 중심의 입체화학은 각각 독립적으로 (R) 또는 (S)일 수 있어서, 키랄 중심의 배치는 (R) 및 (R), (R) 및 (S); (S) 및 (R), 또는 (S) 및 (S)일 수 있다. 3개의 키랄 중심을 갖는 화합물에서, 3개의 키랄 중심의 각각의 입체화학은 각각 독립적으로, (R) 또는 (S)일 수 있어서, 키랄 중심의 배치는 (R), (R) 및 (R); (R), (R) 및 (S); (R), (S) 및 (R); (R), (S) 및 (S); (S), (R) 및 (R); (S), (R) 및 (S); (S), (S) 및 (R); 또는 (S), (S) 및 (S)일 수 있다.
화합물의 라세미 혼합물의 분할은 해당 분야에 알려져 있는 수많은 방법 중 임의의 것에 의해 수행될 수 있다. 예시적인 방법은 광학 활성 염-형성 유기산인 키랄 분할 산을 사용한 분별 재결정을 포함한다. 분별 재결정 방법에 적합한 분할 작용제는 예를 들어, 광학 활성 산, 예를 들어, D 및 L 형태의 타르타르산, 디아세틸타르타르산, 디벤조일타르타르산, 만델산, 말산, 락트산 또는 다양한 광학 활성 캄포르설폰산, 예를 들어, D-캄포르설폰산이다. 분별 재결정 방법에 적합한 다른 분할 작용제는 입체이성질체적으로 순수한 형태의 α-메틸벤질아민(예를 들어, S 및 R 형태 또는 부분입체이성질체적으로 순수한 형태), 2-페닐글리시놀, 노르에페드린, 에페드린, N-메틸에페드린, 사이클로헥실에틸아민, 1,2-디아미노사이클로헥산 등을 포함한다.
라세미 혼합물의 분할은 또한, 광학 활성 분할제(예를 들어, 디니트로벤조일페닐글리신)가 팩킹된 컬럼에서의 용리에 의해 수행될 수 있다. 적합한 용리 용매 조성은 당업자에 의해 결정될 수 있다.
또한, 본 발명의 화합물은 호변이성질체 형태를 포함한다. 호변이성질체 형태는 양성자의 동시 이동과 함께 단일 결합을 인접한 이중 결합으로 교환하는 것으로부터 초래된다. 호변이성질체 형태는 동일한 실험식 및 총 전하를 갖는 이성질체 양성자화 상태인 양성자성(prototropic) 호변이성질체를 포함한다. 예시적 양성자성 호변이성질체는 케톤 - 에놀 쌍, 아미드 - 이미드산 쌍, 락탐 - 락팀 쌍, 아미드 - 이미드산 쌍, 엔아민 - 이민 쌍, 및 환형 형태를 포함하며, 여기서 양성자는 복소환계, 예를 들어, 1H- 및 3H-이미다졸, 1H-, 2H- 및 4H-1,2,4-트리아졸, 1H- 및 2H- 이소인돌 및 1H- 및 2H-피라졸의 2개 이상의 위치를 점유할 수 있다. 호변이성질체 형태는 평형상태일 수 있거나 또는 적절한 치환에 의해 하나의 형태로 입체적으로 잠금될 수 있다.
본 발명의 화합물은 또한 중간생성물 또는 최종 화합물에서 발생하는 원자의 모든 동위원소를 포함할 수 있다. 동위원소는 원자 번호는 동일하지만 질량수는 상이한 원자들을 포함한다.
본원에 사용되는 용어 "화합물"은 도시된 구조의 모든 입체이성질체, 기하 이성질체, 호변이성질체 및 동위원소를 포함하는 것을 의미한다. 하나의 특정 호변이성질체 형태로서의 명칭 혹은 구조로 확인되는 본원의 화합물은 달리 특정되지 않는 한 다른 호변이성질체 형태를 포함하도록 의도된다(예컨대, 푸린 고리의 경우에, 달리 표시되지 않는 한, 화합물 명칭 또는 구조가 9H 호변이성질체를 갖는 경우, 7H 호변이성질체도 또한 포함되는 것이 이해된다).
모든 화합물 및 그의 약제학적으로 허용되는 염은 물 및 용매와 같은 다른 물질과 함께(예를 들어, 수화물 및 용매화물) 발견될 수 있거나 또는 단리될 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 화합물 또는 그의 염은 실질적으로 단리된다. "실질적으로 단리되는"은 화합물이 그것이 형성 또는 검출되는 환경으로부터 적어도 부분적으로 또는 실질적으로 분리되는 것을 의미한다. 부분적 분리는, 예를 들어, 본 발명의 화합물이 풍부한 조성물을 포함할 수 있다. 실질적 분리는 적어도 약 50 중량%, 적어도 약 60 중량%, 적어도 약 70 중량%, 적어도 약 80 중량%, 적어도 약 90 중량%, 적어도 약 95 중량%, 적어도 약 97 중량% 또는 적어도 약 99 중량%의 본 발명의 화합물 또는 그의 염을 함유하는 조성물을 포함할 수 있다. 화합물 및 그들의 염의 단리 방법은 당업계에서 통상적이다.
어구 "약제학적으로 허용되는"은 합리적인 이익/위험비에 상응하는, 타당한 의학적 판단의 범위 내에서 과도한 독성, 자극, 알러지 반응 또는 다른 문제 또는 합병증 없이 인간 및 동물의 조직과 접촉하여 사용하는데 적합한, 해당 화합물, 물질, 조성물 및/또는 투여형을 지칭하기 위해 사용된다.
본 명세서에 사용되는 표현 "주위 온도" 및 "실온"은 당업계에서 이해되며, 일반적으로 온도, 예컨대, 대략 반응이 수행되는 실내의 온도, 예를 들어, 약 20℃ 내지 약 30℃의 온도인 반응 온도를 지칭한다.
본 발명은 또한 본원에 기재된 화합물의 약제학적으로 허용되는 염을 포함한다. 본원에 사용되는 "약제학적으로 허용되는 염"은 개시된 화합물의 유도체를 지칭하며, 여기서 모 화합물은 존재하는 산 또는 염기 모이어티를 그의 염 형태로 전환함으로써 변형된다. 약제학적으로 허용되는 염의 예는 아민과 같은 염기성 잔기의 무기산 또는 유기산 염; 카르복실산과 같은 산성 잔기의 알칼리 또는 유기 염 등을 포함하지만 이들로 제한되는 것은 아니다. 본 발명의 약제학적으로 허용되는 염은, 예를 들어, 비-독성 무기산 또는 유기산으로부터 형성된 모 화합물의 통상의 비-독성 염을 포함한다. 본 발명의 약제학적으로 허용되는 염은 통상의 화학적 방법에 의해 염기성 또는 산성 모이어티를 함유하는 모 화합물로부터 합성될 수 있다. 일반적으로, 그러한 염은 이들 화합물의 유리산 또는 염기 형태를 수 중에서 또는 유기 용매 중에서, 또는 둘의 혼합물 중에서[일반적으로, 에테르, 에틸 아세테이트, 알코올(예컨대, 메탄올, 에탄올, 이소-프로판올 또는 부탄올) 또는 아세토니트릴(MeCN)과 같은 비수성 매질이 바람직함)] 화학량론적 양의 적절한 염기 또는 산과 반응시킴으로써 제조될 수 있다. 적합한 염의 목록은 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th Ed., (Mack Publishing Company, Easton, 1985), p. 1418], 문헌[Berge et al., J. Pharm. Sci., 1977, 66(1), 1-19] 및 문헌[Stahl et al., Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, (Wiley, 2002)]에서 발견된다. 일부 구현예에서, 본원에 기재된 화합물은 N-옥사이드 형태를 포함한다.
다음의 약어가 본원에 사용될 수 있다: AcOH(아세트산); Ac2O(무수 아세트산); aq.(수성); atm.(대기압(들)); Boc(t-부톡시카르보닐); br(브로드); Cbz(카르복시벤질); calc.(계산치); d(이중선); dd(이중선의 이중선); DCM(디클로로메탄); DIAD(N,N'-디이소프로필 아지도디카르복실레이트); DIPEA(N,N-디이소프로필에틸아민); DMF(N,N-디메틸포름아미드); Et(에틸); EtOAc(에틸 아세테이트); g(그램(들)); h(시간(들)); HATU(N,N,N',N'-테트라메틸-O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)우로늄 헥사플루오로포스페이트); HCl(염산); HPLC(고성능 액체 크로마토그래피); Hz(헤르츠); J(결합 상수); LCMS(액체 크로마토그래피 - 질량 분광분석법); m(다중선); M(몰농도); mCPBA(3-클로로퍼옥시벤조산); MgSO4(황산마그네슘); MS(질량 분광분석법); Me(메틸); MeCN(아세토니트릴); MeOH(메탄올); ㎎(밀리그램(들)); min.(분(들)); ㎖(밀리리터(들)); m㏖(밀리몰(들)); N(노르말); NaHCO3(중탄산나트륨); NaOH(수산화나트륨); Na2SO4(황산나트륨); NH4Cl(염화암모늄); NH4OH(수산화암모늄); nM(나노몰); NMR(핵 자기 공명 분광분석법); OTf(트리플루오로메탄설포네이트); Pd(팔라듐); Ph(페닐); pM(피코몰); POCl3(염화포스포릴); RP-HPLC(역상 고성능 액체 크로마토그래피); s(단일선); t(삼중선 또는 3급); TBS(3급-부틸디메틸실릴); tert(3급); tt(삼중선의 삼중선); t-Bu(3급-부틸); TFA(트리플루오로아세트산); THF(테트라하이드로푸란); ㎍(마이크로그램(들)); ㎕(마이크로리터(들)); μM(마이크로몰농도); 중량%(중량 백분율).
II. 합성
본 발명의 화합물(그의 염을 포함)은 공지된 유기 합성 기법을 사용하여 제조될 수 있고, 임의의 수많은 가능한 합성 경로에 따라 합성될 수 있다.
본 발명의 화합물을 제조하기 위한 반응은 유기 합성 분야의 당업자에 의해 용이하게 선택될 수 있는 적합한 용매 중에서 수행될 수 있다. 적합한 용매는 반응이 수행되는 온도, 예를 들어, 용매의 빙점으로부터 용매의 비등점까지의 범위일 수 있는 온도에서 출발 물질(반응물), 중간물질, 또는 생성물과 실질적으로 비반응성일 수 있다. 주어진 반응은 1종의 용매 또는 1종 초과의 용매의 혼합물 중에서 수행될 수 있다. 특정 반응 단계에 따라서, 특정 반응 단계를 위한 적합한 용매는 당업자에 의해 선택될 수 있다.
본 발명의 화합물의 제조는 다양한 화학적 기의 보호 및 탈보호를 수반할 수 있다. 보호 및 탈보호에 대한 필요, 및 적절한 보호기의 선택은 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다. 보호기의 화학은, 예를 들어, 그 전문이 본원에 참조로 포함되는 문헌[P. G. M. Wuts and T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, 4th Ed., Wiley & Sons, Inc., New York (2006)]에서 찾을 수 있다.
반응은 해당 분야에 알려져 있는 임의의 적합한 방법에 따라 모니터링될 수 있다. 예를 들어, 생성물 형성은 분광학적 수단, 예컨대, 핵자기 공명 분광법(예를 들어, 1H 또는 13C), 적외선 분광법, 분광광도법(예를 들어, UV-가시광), 질량분광분석법에 의해 또는 크로마토그래피 방법, 예컨대, 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC), 액체 크로마토그래피-질량 분광법(LCMS) 또는 박막 크로마토그래피(TLC)에 의해 모니터링될 수 있다. 화합물은 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)(본원에 전문이 참조로 포함되는 문헌["Preparative LC-MS Purification: Improved Compound Specific Method Optimization" Karl F. Blom, Brian Glass, Richard Sparks, Andrew P. Combs J. Combi . Chem . 2004, 6(6), 874-883]) 및 정상 실리카 크로마토그래피를 비롯한 다양한 방법에 의해 당업자에 의해 정제될 수 있다.
III. 구체적인 실시예
본 발명은 구체적인 실시예에 의해 더욱 상세하게 기재될 것이다. 이하의 실시예는 예시적 목적을 위해 제공되며, 어떠한 방식으로든 본 발명을 제한하도록 의도되지 않는다. 당업자라면 본질적으로 동일한 결과를 수득하기 위해 변화 또는 변형될 수 있는 다양한 비임계적인 파라미터를 용이하게 인식할 것이다.
실시예 1: 합성 방법
실시예 1- 1: 4 -(1'-이소프로필-4- 옥소스피로 [ 크로만 -2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((3-메틸이속사졸-5-일)메틸)벤즈아미드
Figure pct00005
DMF(2 ㎖) 중 4-(1'-이소프로필-4-옥소스피로[크로만-2,4'-피페리딘]-6-일)벤조산(100 ㎎)의 용액에, 1,1'-카르보닐디이미다졸(64 ㎎, 1.5 당량) 및 (3-메틸이속사졸-5-일)메탄아민(44 ㎎, 1.5 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 그 다음, 혼합물을 AcOEt로 희석하고, NaHCO3 포화 용액으로 켄칭시켰다. 유기상을 염수로 세척하고, MgSO4로 건조시켰다. 여과 후에, 잔류물을 진공 하에 증발시켜, 미정제 황색 폼(foam)을 제공하였다. 이 물질을 용매 DCM 중 0-20% MeOH의 기울기를 사용하여 실리카겔 카트리지에서 정제하였다. 4-(1'-이소프로필-4-옥소스피로[크로만-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((3-메틸이속사졸-5-일)메틸)벤즈아미드를 황색 폼(71.5 ㎎, 79%)으로 수득하였다, LCMS RT=3.34분.
실시예 1-2: N-((5- 플루오로피리딘 -3-일) 메틸 )-4-(1'-이소프로필-3- 메틸 -4-옥소-3,4-디하이드로스피로[벤조[e][1,3]옥사진-2,4'-피페리딘]-6-일)벤즈아미드
Figure pct00006
4-(1'-이소프로필-2-메틸-1-옥소-2,4-디하이드로-1H-스피로[이소퀴놀린-3,4'-피페리딘]-7-일)벤조산-염화리튬 염(100 ㎎, 0.263 mmole) 및 HATU(100 ㎎, 0.263 mmole)를 2 ㎖ DMF에서 합하였다. DIEA(0.09 ㎖)를 용액에 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 5분 동안 교반한 후에, (5-플루오로피리딘-3-일)메탄아민(0.289 mmole)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반한 후에, 혼합물을 NaHCO3 포화 용액을 사용하여 켄칭시키고, AcOEt로 희석하였다. 수상을 AcOEt로 추출한 후에, 합한 유기상을 Na2SO4를 사용하여 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 DCM 중 0-20% MeOH 기울기를 사용하여 플래시 크로마토그래피에서 정제하였다. 반응에 의해, 110 ㎎의 N-((5-플루오로피리딘-3-일)메틸)-4-(1'-이소프로필-3-메틸-4-옥소-3,4-디하이드로스피로[벤조[e][1,3]옥사진-2,4'-피페리딘]-6-일)벤즈아미드를 제공하였다.
실시예 1- 3: 3 - 플루오로 -4-(1'-이소프로필-4- 옥소스피로 [ 크로만 -2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((6-메틸피리딘-3-일)메틸)벤즈아미드
Figure pct00007
3-플루오로-4-(1'-이소프로필-4-옥소스피로[크로만-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((6-메틸피리딘-3-일)메틸)벤즈아미드를 실시예 1-1에 대해 기재된 것과 동일한 방법을 사용하여 수득하였다. (LCMS RT=2.65분, MH+251.4, m=30 ㎎, 수율=21%).
실시예 1- 4: 6 -(4-옥소-1'- 프로필스피로 [ 크로만 -2,4'-피페리딘]-6-일)-N-(티아졸-5-일메틸)니코틴아미드
Figure pct00008
6-(4-옥소스피로[크로만-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-(티아졸-5-일메틸)니코틴아미드(150 ㎎, 0.345 mmole)를 3 ㎖의 DMF 중 탄산세슘(135 ㎎, 0.41 mmole) 및 1-이도프로판(58.6 ㎎, 0.345 mmole)과 합하였다. 반응 혼합물을 실온에서 72시간 동안 교반하였다. 그 다음, 혼합물을 물로 켄칭하고, AcOEt로 희석하였다. AcOEt를 사용한 추출 후에, 합한 유기상을 염수로 세척하고, MgSO4를 사용하여 건조시켰다. 여과 후에, 용매를 진공 하에 제거하여, 갈색 반고체를 얻었다. 미정제 물질을 DCM 중 0-15% MeOH 기울기를 사용하여 실리카겔 카트리지에서 정제하였다. 요망되는 분획을 합하고, 증발시켜, 황갈색 고체를 얻었다(LCMS RT=3.07분, 49 ㎎, 29%).
실시예 1- 5: 6 -(1'-부틸-4- 옥소스피로 [ 크로만 -2,4'-피페리딘]-6-일)-N-(티아졸-5-일메틸)니코틴아미드
Figure pct00009
6-(1'-부틸-4-옥소스피로[크로만-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-(티아졸-5-일메틸)니코틴아미드를 실시예 1-4에 대해 기재된 것과 동일한 방법을 사용하여 수득하였다. (LCMS RT=3.25분, MH+490.8, m= 황갈색 고체로서 78 ㎎, 수율=48.4%).
실시예 1-6: N-((3- 메틸이속사졸 -5-일) 메틸 )-4-(4-옥소-1'- 프로필스피로 [ 크로만 -2,4'-피페리딘]-6-일)벤즈아미드
Figure pct00010
N-((3-메틸이속사졸-5-일)메틸)-4-(4-옥소-1'-프로필스피로[크로만-2,4'-피페리딘]-6-일)벤즈아미드를 실시예 1-1에 대해 기재된 것과 동일한 방법을 사용하여 수득하였다. (LCMS RT=3.27분, m= 11 ㎎, 수율=12%).
실시예 1-7: N-((3- 메틸이속사졸 -5-일) 메틸 )-6-(1'- 프로필스피로 [ 크로멘 -2,4'-피페리딘]-6-일)니코틴아미드
Figure pct00011
N-((3-메틸이속사졸-5-일)메틸)-6-(4-옥소-1'-프로필스피로[크로만-2,4'-피페리딘]-6-일)니코틴아미드(66 ㎎, 0.14 mmole)를 1.5 ㎖의 MeOH 중에 용해시켰다. 수소화붕소나트륨(33 ㎎, 0.87 mmole)을 한꺼번에 반응 혼합물에 첨가하였다. 수 분 동안 탈기시킨 다음, 황색을 띄는 혼합물은 무색이 되었다. 실온에서 3시간 후에, 반응이 완료된다. 혼합물을 물로 켄칭시키고, AcOEt로 희석하였다. 수상을 AcOEt로 추출하고, 합한 유기상을 염수로 2회 세척하였다. 그 다음, 유기상을 MgSO4를 사용하여 건조시키고, 진공 하에 농축하였다.
그 다음, 미정제 물질에 8 ㎖의 물 및 2 ㎖의 진한 H2SO4를 첨가하였다. 혼합물을 격렬하게 교반하고, 80℃에서 가열하였다. 이 온도에서 48시간 후에, 혼합물을 물로 희석하고, 고체 Na2CO3를 사용하여 염기성화시켰다. 수상을 AcOEt로 추출하고, 합한 유기상을 염수로 2회 세척하였다. 여과 및 증발 후에, 미정제 잔류물을 DCM 중 20% MeOH를 사용하여 실리카 겔 카트리지에서 정제하였다. 요망되는 분획을 합하고, 진공 하에 농축시켰다. N-((3-메틸이속사졸-5-일)메틸)-6-(1'-프로필스피로[크로멘-2,4'-피페리딘]-6-일)니코틴아미드를 백색 고체로 수득하였다(21 ㎎, 33.3%, LCMS RT=3.30분, MH+ 459.3).
실시예 1- 8: 6 -(1'- (3-메톡시프로필)스피로 [ 크로멘 -2,4'-피페리딘]-6-일)-N-(티아졸-5-일메틸)니코틴아미드
Figure pct00012
6-(1'-(3-메톡시프로필)스피로[크로멘-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-(티아졸-5-일메틸)니코틴아미드를 실시예 1-7에 대해 기재된 것과 동일한 방법을 사용하여 수득하였다.
실시예 1-9: 6-(1'-이소프로필-3-메틸-4-옥소-3,4-디하이드로스피로[벤조[e][1,3]옥사진-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((1-메틸-1H-피라졸-4-일)메틸)니코틴아미드
Figure pct00013
6-(1'-이소프로필-3-메틸-4-옥소-3,4-디하이드로스피로[벤조[e][1,3]옥사진-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((1-메틸-1H-피라졸-4-일)메틸)니코틴아미드를 실시예 1-2에 대해 기재된 것과 동일한 방법을 사용하여 수득하였다.
실시예 1- 10: 6 -(1'-이소프로필-3- 메틸 -4-옥소-3,4 디하이드로스피로 [ 벤조[e][1,3]옥사진 -2,4'-피페리딘]-6-일)-N-(티아졸-5-일메틸)니코틴아미드
Figure pct00014
6-(1'-이소프로필-3-메틸-4-옥소-3,4 디하이드로스피로[벤조[e][1,3]옥사진-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-(티아졸-5-일메틸)니코틴아미드를 실시예 1-2에 대해 기재된 것과 동일한 방법을 사용하여 수득하였다.
실시예 1- 11: 4 -(1'-이소프로필-4- 옥소스피로 [ 크로만 -2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((5-메틸이속사졸-3-일)메틸)벤즈아미드
Figure pct00015
4-(1'-이소프로필-4-옥소스피로[크로만-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((5-메틸이속사졸-3-일)메틸)벤즈아미드를 실시예 1-1에 대해 기재된 것과 동일한 방법을 사용하여 수득하였다. (LCMS RT=3.35분, m= 49.7 ㎎, 수율=39%).
실시예 1-12: 6-(1'-이소프로필-3-메틸-4-옥소-3,4-디하이드로스피로[벤조[e][1,3]옥사진-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((3-메틸이속사졸-5-일)메틸)니코틴아미드
Figure pct00016
6-(1'-이소프로필-3-메틸-4-옥소-3,4-디하이드로스피로[벤조[e][1,3]옥사진-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((3-메틸이속사졸-5-일)메틸)니코틴아미드를 실시예 1-2에 대해 기재된 것과 동일한 방법을 사용하여 수득하였다.
실시예 1-13: 화학식 (I)의 추가의 화합물
화학식 (I)의 추가의 화합물을 당업자에게 명백한 상기 기재된 것들과 유사한 방법에 따라 합성하였다. 이들 화합물은 하기 표 1에 요약되어 있다.
Figure pct00017
Figure pct00018
Figure pct00019
Figure pct00020
Figure pct00021
실시예 2: 시험관내 실험
실시예 2-1: NAMPT 효소 활성의 억제
재조합 NAMPT 효소(MBL)를 억제제의 존재 또는 부재 하에 간단히 사전-인큐베이션시킨 다음, 니코틴아미드를 첨가하였다. 효소 반응이 37℃에서 6시간 동안 진행되게 하였다. 반응을 종결시키고, NMN 반응 생성물을 문헌[Zhang RY, Qin Y, Lv XQ, Wang P, Xu TY, Zhang L, Miao CY., Anal. Biochem. 2011 May 1;412(1):18-25]에 기재된 바와 같은 방법을 사용하여 검출하였다.
50% 억제 농도(IC50)는 최대 활성의 50%가 억제되는 농도이다.
대표적인 화합물에 대한 이러한 검정으로부터의 결과는 하기 표 2에 제시되어 있다.
실시예 2-2: B-세포에서의 항-증식 활성
애널리티컬 바이올로지컬 서비스즈(Analytical Biological Services)(Wilmington, DE)로부터 수득된 신선한 일차 인간 B 세포를 AIM-V 배지(Invitrogen) 중에 ㎖당 1x10^6개 세포로 희석하고, 37℃/5% CO2에서 72시간 동안 억제제의 존재 또는 부재 하에 항-IgM(10 ㎍/㎖)(KPL)으로 자극한 후에, 제조처의 지침에 따라 CellTiterGlo(Promega)를 사용하여 생존력을 결정하였다.
50% 억제 농도(IC50)는 최대 활성의 50%가 억제되는 농도이다.
대표적인 화합물에 대한 이러한 검정으로부터의 결과는 하기 표 2에 제시되어 있다.
실시예 2-3: T 세포에서의 항-증식 활성
애널리티컬 바이올로지컬 서비스즈(Wilmington, DE)로부터 수득된 신선한 일차 인간 T 세포를 AIM-V 배지(Invitrogen) 중에 ㎖당 1x10^6개 세포로 희석하고, 37℃/5% CO2에서 72시간 동안 억제제의 존재 또는 부재 하에 CD3/CD28 비드(Invitrogen)로 자극한 후에, 제조처의 지침에 따라 CellTiterGlo(Promega)를 사용하여 생존력을 결정하였다.
50% 억제 농도(IC50)는 최대 활성의 50%가 억제되는 농도이다.
대표적인 화합물에 대한 이러한 검정으로부터의 결과는 하기 표 2에 제시되어 있다.
Figure pct00022
Figure pct00023
Figure pct00024
실시예 2-4: 다양한 세포주에서의 활성
백혈병/림프종 세포주(ATCC)를 판매사-권고된 배지 중에 희석하고, 37℃/5% CO2에서 72시간 동안 억제제의 존재 또는 부재 하에 인큐베이션시킨 후에, 제조처의 지침에 따라 CellTiterGlo(Promega)를 사용하여 생존력을 결정하였다. 연구된 인간 세포주는 급성 T-세포 백혈병(JURKAT), 만성 골수성 백혈병(K562) 및 B-세포 급성 림프구성 백혈병(NALM6 및 SUP-B15)을 포함한다.
이들 세포주에서의 선택된 화합물에 대한 항증식 활성은 하기 표 3에 제시되어 있다.
Figure pct00025
Figure pct00026
Figure pct00028
실시예 2-5: 작용 메커니즘
Sup-B15 세포(ATCC)를 37℃/5% CO2에서 72시간 동안 억제제의 존재 또는 부재 하에 200 μM 니코틴아미드 모노뉴클레오티드(NMN)(Sigma)가 결여되거나 이를 함유하는 배지에 인큐베이션시킨 후에, 제조처의 지침에 따라 CellTiterGlo(Promega)를 사용하여 생존력을 결정하였다.
화학적 단백질체학. Sup-B15 세포 추출물을 4-(1'-이소프로필-4-옥소스피로[크로만-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((3-메틸이속사졸-5-일)메틸)벤즈아미드의 비오티닐화 유도체와 인큐베이션시킨 다음, 스트렙트아비딘 비드(Invitrogen)를 사용하여 화합물/단백질 복합체를 수집하였다. 광범위한 세척 후에, 결합된 단백질을 유리 (비-비오티닐화) 4-(1'-이소프로필-4-옥소스피로[크로만-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((3-메틸이속사졸-5-일)메틸)벤즈아미드 또는 비활성 유사체를 사용하여 용리시켰다. SDS-PAGE 후에, 하나의 우세한 밴드를 절개하고, LC/MS에 의해 NAMPT로 확인하였다.
4-(1'-이소프로필-4-옥소스피로[크로만-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((3-메틸이속사졸-5-일)메틸)벤즈아미드의 분자 표적은 니코틴아미드 포스포리보실 트랜스퍼라제(NAMPT)이며, 그의 생성물은 니코틴아미드 모노뉴클레오티드(NMN)이다. 4-(1'-이소프로필-4-옥소스피로[크로만-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((3-메틸이속사졸-5-일)메틸)벤즈아미드의 항증식 활성은 NMN에 의해 상쇄되며, 4-(1'-이소프로필-4-옥소스피로[크로만-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((3-메틸이속사졸-5-일)메틸)벤즈아미드는 NAMPT 효소 활성을 강력하게 억제한다. 화학식 (I) 45 시리즈의 모든 구성원이 NMN으로 구제가능함에 따라 온-표적(On-target), 선택적 항증식 활성이 의약 화학 캠페인 내내 유지되었다(도 1).
실시예 2-6: 인플루엔자 및 RSV 감염 세포에서의 활성
호흡기 세포융합 바이러스(RSV) 억제를 결정하기 위하여, Vero 세포를 96 웰 플레이트에 80%의 컨플루언시까지 플레이팅한다. 화합물을 10 μM에서 시작하여, 3 nM까지 하프 로그 희석(half log dilution)으로 3벌로 첨가하고, 1시간 동안 세포와 인큐베이션되게 한다. 바이러스를 10의 MOI로 웰에 첨가하고, 72시간 동안 복제되게 한다. 바이러스 유도 세포변성 효과(CPE)로부터 보호된 생존가능한 세포를 형광 생체 염료를 사용하여 검출한다. CPE의 억제의 EC50을 강력한 핏트 방법을 사용하여 결정한다.
인플루엔자 바이러스 억제를 결정하기 위하여, MDCK 세포를 96 웰 플레이트에 80%의 컨플루언시까지 플레이팅한다. 화합물을 10 μM에서 시작하여, 3 nM까지 하프 로그 희석으로 3벌로 첨가하고, 1시간 동안 세포와 인큐베이션되게 한다. 바이러스를 10의 MOI로 웰에 첨가하고, 72시간 동안 복제되게 한다. 바이러스 유도 세포변성 효과(CPE)로부터 보호된 생존가능한 세포를 형광 생체 염료를 사용하여 검출한다. CPE의 억제의 EC50을 강력한 핏트 방법을 사용하여 결정한다.
실시예 3: 생체내 실험
실시예 3-1: 약동학적 연구
실시예 3-1-a: 스프라그 - 다울리 (Sprague- Dawley ) 랫트에서의 경구 및 정맥내 약동학
시험 화합물, 1'-이소프로필-3-메틸-6-(4-(3-(티아졸-5-일)프로파노일)페닐)스피로[벤조[e][1,3]옥사진-2,4'-피페리딘]-4(3H)-온 및 4-(1'-이소프로필-4-옥소스피로[크로만-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((3-메틸이속사졸-5-일)메틸)벤즈아미드의 경구(PO) 및 정맥내(IV) 약동학을 수컷 스프라그-다울리 랫트에서 평가하였다. 연구 설계의 개요는 하기 표 4에 제시되어 있다. 혈액 시료를 시험 화합물 투여 이전에 수집하였다. T0에 동물에 투여하고; 이후의 혈액 시료를 투여 후 2, 5, 15 및 30분 및 1, 2, 4, 6, 8 및 24시간에 수집하였다. 혈액 시료를 경정맥 캐뉼라를 통해 수집하였다. 시료를 4℃에서 13,000 rpm에서 5분 동안 원심분리하였다. 혈장 시료를 혈액 시료의 원심분리 후에 96-웰 플레이트 내로 수집하였다. 시험 화합물의 혈장 농도를 LC-MS/MS에 의해 분석하였다.
Figure pct00029
정맥내 및 경구 투여되는 시험 화합물 둘 모두는 내약성이 우수하였다. 불리한 신체 이상이 관찰되지 않았다. 시험 화합물에 대하여, 시간에 따라 측정시 정맥내 혈장 농도에 비한 경구 혈장 농도의 그래프 비교가 도 2 및 도 3에 제시되어 있다.
실시예 3-1-b: 마우스에서의 경구 및 정맥내 약동학
시험 화합물 4-(1'-이소프로필-4-옥소스피로[크로만-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((3-메틸이속사졸-5-일)메틸)벤즈아미드의 경구 및 정맥내 약동학을 암컷 NOD.Cg-PrkdcscidII2rgtm1WJI/SzJ 마우스에서 평가하였다. 연구 설계의 개요는 하기 표 5에 제시되어 있다. 시험 화합물 투여 이전에, 투여 이후 특정 시점에, 그리고 동물 희생 후에 혈액 시료를 수집하였다. 생전의 혈액 시료를 꼬리 절단 또는 안면 정맥에 의해 수집하고; 최종 혈액 시료를 흡입 마취 후에 심장 천자를 통해 수집하였다. 시료를 K2EDTA 튜브 내로 수집하고, 수집 1시간 내에 3000 g에서 5℃에서의 원심분리에 의해 혈장으로 처리될 때까지 젖은 얼음에 보관하였다. 혈장 시료를 원심분리 후에 96-웰 플레이트 내로 수집하고 -80℃에 보관하였다. 시험 화합물의 혈장 농도를 LC-MS/MS에 의해 분석하였다.
Figure pct00030
Figure pct00031
연구 과정 동안 유의미한 임상적 징후가 관찰되지 않았다. 시간에 따라 측정시, 시험 화합물에 대한 정맥내 혈장 농도에 비한 경구 혈장 농도의 그래프 비교는 도 4에 제시되어 있다.
실시예 3-2: 효능 연구
실시예 3-2-a: NALM6 백혈병 연구
4-(1'-이소프로필-4-옥소스피로[크로만-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((3-메틸이속사졸-5-일)메틸)벤즈아미드를 NALM6 백혈병 모델에서 시험하였다. 도 6에 나타낸 바와 같이, 4-(1'-이소프로필-4-옥소스피로[크로만-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((3-메틸이속사졸-5-일)메틸)벤즈아미드(GENZ-682945로도 알려져 있음)의 복강내 투여는, 이러한 이종이식 모델에서 치료 기준(클로파라빈(clofarabine))을 초과하여 유의미한 생존 이익을 야기하였다. 5x10^6개의 NALM-6 세포를 꼬리 정맥을 통해 암컷 CB17SCID/Crl 마우스(Charles River) 내로 주사하였다. 1주 후에, 4-(1'-이소프로필-4-옥소스피로[크로만-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((3-메틸이속사졸-5-일)메틸)벤즈아미드를 복강내 주사에 의해 35일 동안 1일 2회 투여하였다. 클로파라빈을 4주 동안 5일 동안 1일 1회의 복강내 주사에 의해 1일 1회 투여하였다. 연구 종점은 생존 시간이었으며, 중증 질병, 예를 들어, 마비 또는 악액질의 전신 징후의 출현시에 마우스를 희생시켰다. 결과는 도 5에 나타나 있다.
실시예 3-2-b: HCT116 종양 성장 연구
종양 성장 연구: 암컷 무흉선 누드 마우스(Crl:NU(Ncr)-Foxn1 nu , Charles River)(n=10/그룹)에 5 x 106개의 HCT116 세포를 주사하고, 100 ㎣의 평균 종양 크기에서 치료를 개시하였다. 4-(1'-이소프로필-4-옥소스피로[크로만-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((3-메틸이속사졸-5-일)메틸)벤즈아미드 및 비히클 대조군을 8일 동안 1일 2회 경구 투여하였다. 종양 크기를 캘리퍼(caliper)를 사용하여 주 2회 측정하였다.
종양 NAD 측정: 암컷 무흉선 누드 마우스(Crl:NU(Ncr)-Foxn1 nu , Charles River)(n=3/그룹)에 5 x 106개의 HCT116 세포를 주사하고, 250 내지 400 ㎣의 종양 크기에서 치료를 개시하였다. 4-(1'-이소프로필-4-옥소스피로[크로만-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((3-메틸이속사졸-5-일)메틸)벤즈아미드 및 비히클 대조군을 1.5일 동안 1일 2회 경구 투여하였다(3회 투여). 마지막 투여 후 6시간에, 종양을 절개하고, 세척하고, 섹션화하고, 칭량하고, 급속 동결시켰다. 종양 부분을 3개 사이클의 급속 동결/해동/초음파분해에 의해 에탄올/PBS(90:10) 중에서 추출한 후에, LC/MS에 의해 NAD 함량에 대하여 분석하였다. 데이터는 도 6에 제시되어 있다.
또한, 4-(1'-이소프로필-4-옥소스피로[크로만-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((3-메틸이속사졸-5-일)메틸)벤즈아미드를 HCT116 고형 종양 모델에서 시험하였다. 4-(1'-이소프로필-4-옥소스피로[크로만-2,4'-피페리딘]-6-일)-N-((3-메틸이속사졸-5-일)메틸)벤즈아미드의 1일 2회 경구 투여는 유의미한 종양 성장 지연을 야기하였으며(도 7), 이는 치료군에서 10% 사망률로 인하여 투여를 중단한 후에 적어도 1주 동안 지속되었다.
IV. 제형, 투여형 및 투여
약제로서 사용되는 경우, 본 발명의 화합물은 약제학적 조성물의 형태로 투여될 수 있다. 따라서, 본 개시내용은 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용되는 염 또는 그의 구현예 중 임의의 것 및 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 조성물을 제공한다. 이들 조성물은 약제 분야에서 널리 공지된 방식으로 제조될 수 있고, 국소 치료가 지시되는지 또는 전신 치료가 지시되는지에 따라 그리고 치료되어야 할 영역에 따라 다양한 경로에 의해 투여될 수 있다. 투여는 국부(경피, 표피, 눈 그리고 비강내, 질내 및 직장 전달을 비롯한 점막 포함), 폐 투여(예를 들어, 네불라이저(nebulizer)에 의한 것을 비롯한 에어로졸 또는 분말의 흡입 또는 통기에 의해; 기관내 또는 비강내), 경구 투여 또는 비경구 투여일 수 있다. 비경구 투여는 정맥내, 동맥내, 피하, 복강내 근육내 또는 주사 또는 주입; 또는 두개내, 예를 들어, 척추강내 또는 뇌실내, 투여를 포함한다. 비경구 투여는 단일 볼루스(bolus) 투여의 형태일 수 있거나, 예를 들어, 연속 관류 펌프에 의해 이루어질 수 있다. 국부 투여를 위한 약제학적 조성물 및 제형은 경피 패치, 연고, 로션, 크림, 겔, 점적제, 좌제, 스프레이, 액체 및 분말을 포함할 수 있다. 종래의 약제학적 담체, 수성, 분말 또는 유성 기제, 증점제 등은 필수적이거나 바람직할 수 있다.
또한 본 발명은 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 담체(부형제)와 조합하여, 활성 성분으로서, 본 발명의 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용되는 염을 함유한 약제학적 조성물을 포함한다. 일부 구현예에서, 조성물은 국부 투여에 적합하다. 본 발명의 조성물의 제조에서, 활성 성분은 전형적으로, 부형제와 혼합되거나, 부형제에 의해 희석되거나, 예를 들어, 캡슐, 사™ˆ(sachet), 종이, 또는 다른 용기의 형태의 그러한 담체 내에 내포된다. 부형제가 희석제로서 역할을 하는 경우, 상기 부형제는 고형, 반-고형, 또는 액상 물질일 수 있으며, 이는 활성 성분을 위한 비히클, 담체 또는 매질로서 작용한다. 따라서, 조성물은 정제, 알약, 분말, 로젠지(lozenge), 사™ˆ, 카™ˆ(cachet), 엘릭시르(elixir), 현탁액, 에멀젼, 용액, 시럽, 에어로졸(고체로서 또는 액상 매질에서), 예를 들어 최대 10 중량%의 활성 화합물을 함유한 연고, 연질 및 경질 젤라틴 캡슐, 좌제, 멸균 주사 용액, 및 멸균 포장 분말의 형태일 수 있다.
제형의 제조에서, 활성 화합물은 다른 성분과 조합하기 전에, 적절한 입자 크기를 제공하기 위해 분쇄될 수 있다. 활성 화합물이 실질적으로 불용성이라면, 이는 200 메시(mesh) 미만의 입자 크기로 분쇄될 수 있다. 활성 화합물이 실질적으로 수용성이라면, 입자 크기는 제형에서 실질적으로 균일한 분포를 제공하기 위해 분쇄됨으로써 조정될 수 있으며, 예를 들어, 약 40 메시이다.
본 발명의 화합물은 정제 형성에 적절한 그리고 다른 제형 유형에 적절한 입자 크기를 얻기 위해 공지된 분쇄 절차, 예를 들어, 습식 분쇄(wet milling)를 이용하여 분쇄될 수 있다. 본 발명의 화합물의 미분된(나노미립자) 제제는 해당 분야에 공지된 공정에 의해 제조될 수 있으며, 예를 들어, WO 2002/000196호를 참고한다.
적합한 부형제의 일부 예는 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 소르비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 검, 칼슘 포스페이트, 알기네이트, 트래거캔스, 젤라틴, 칼슘 실리케이트, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 및 메틸 셀룰로스를 포함한다. 제형은 추가로 다음을 포함할 수 있다: 윤활제, 예를 들어, 탈크, 마그네슘 스테아레이트, 및 광유; 습윤제; 유화제 및 현탁화제; 보존제, 예를 들어, 메틸- 및 프로필하이드록시-벤조에이트; 및 감미제 및 향미제. 해당 분야에 공지된 절차를 이용함으로써 환자에게 투여 후 활성 성분의 신속, 지속 또는 지연된 방출을 제공하도록 본 발명의 조성물이 제형화될 수 있다.
일부 구현예에서, 약제학적 조성물은 규화된 미정질 셀룰로스(SMCC) 및 본원에 기재된 적어도 하나의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용되는 염을 포함한다. 일부 구현예에서, 규화된 미정질 셀룰로스는 약 98 w/w% 미정질 셀룰로스 및 약 2 w/w% 이산화규소를 포함한다.
일부 구현예에서, 조성물은 본원에 기재된 적어도 하나의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용되는 염, 및 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 담체를 포함한 지속 방출형 조성물이다. 일부 구현예에서, 조성물은 본원에 기재된 적어도 하나의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용되는 염, 및 미정질 셀룰로스, 락토스 일수화물, 하이드록시프로필 메틸셀룰로스 및 폴리에틸렌 옥시드로부터 선택되는 적어도 하나의 성분을 포함한다. 일부 구현예에서, 조성물은 본원에 기재된 적어도 하나의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용되는 염, 및 미정질 셀룰로스, 락토스 일수화물, 및 하이드록시프로필 메틸셀룰로스를 포함한다. 일부 구현예에서, 조성물은 본원에 기재된 적어도 하나의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용되는 염, 및 미정질 셀룰로스, 락토스 일수화물, 및 폴리에틸렌 옥시드를 포함한다. 일부 구현예에서, 조성물은 마그네슘 스테아레이트 또는 이산화규소를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 미정질 셀룰로스는 Avicel PH102™이다. 일부 구현예에서, 락토스 일수화물은 Fast-flo 316™이다. 일부 구현예에서, 하이드록시프로필 메틸셀룰로스는 하이드록시프로필 메틸셀룰로스 2208 K4M(예를 들어, Methocel K4 M Premier™) 및/또는 하이드록시프로필 메틸셀룰로스 2208 K100LV(예를 들어, Methocel K00LV™)이다. 일부 구현예에서, 폴리에틸렌 옥시드는 폴리에틸렌 옥시드 WSR 1105(예를 들어, Polyox WSR 1105™)이다.
일부 구현예에서, 조성물을 생성하기 위하여 습식 과립화 공정이 이용된다.
일부 구현예에서, 조성물을 생성하기 위하여 건식 과립화 공정이 이용된다. 조성물은 단위 투여형으로 제형화될 수 있고, 각각의 투여량은 약 5 내지 약 1,000 ㎎(1 g), 더욱 통상적으로, 약 100 mg 내지 약 500 mg의 활성 성분을 함유한다. 일부 구현예에서, 각각의 투여량은 약 10 ㎎의 활성 성분을 함유한다. 일부 구현예에서, 각각의 투여량은 약 50 mg의 활성 성분을 함유한다.
일부 구현예에서, 각각의 투여량은 약 25 ㎎의 활성 성분을 함유한다. 용어 "단위 투여형"은 인간 대상체 및 다른 포유류에 대한 단일 투여량으로서 적합한 물리적으로 분리된 단위를 나타내고, 각각의 단위는 적합한 약제학적 부형제와 함께, 바람직한 치료 효과를 산출하기 위해 계산된 활성 물질의 예정된 양을 포함한다.
약제학적 조성물을 제형화하기 위해 사용되는 성분은 고순도이며, 잠재적으로 유해한 오염물질(예를 들어, 적어도 국가 식품 등급, 일반적으로 적어도 분석용 등급, 그리고 보다 전형적으로 적어도 약제학적 등급)이 실질적으로 없다.
특히 인간 소모용으로, 상기 조성물은 바람직하게, 미국 식품의약국의 적용가능한 규정에 정의된 바와 같은 우수 관리 실무 표준(Good Manufacturing Practice standard) 하에 제조 또는 제형화된다. 예를 들어, 적합한 제형은 멸균되고/거나 실질적으로 등장성이고/거나 미국 식품의약국의 우수 제조 실무 규정에 완전히 준수할 수 있다.
활성 화합물은 광범위한 투여량 범위에 걸쳐 효과적일 수 있고, 일반적으로는 치료적 유효량으로 투여된다. 그러나 실제로 투여되는 화합물의 양은 통상, 치료되는 질환, 선택된 투여 경로, 투여되는 실제 화합물, 개별 환자의 연령, 체중, 및 반응, 환자 증상의 중증도 등을 포함하는 관련된 환경에 따라, 전문의에 의해 결정될 것으로 이해될 것이다.
본 발명의 화합물의 치료적 투여량은 예를 들어, 치료가 이루어지는 특정 용도, 화합물의 투여 방식, 환자의 건강 및 상태 및 처방하는 전문의의 판단에 따라 달라질 수 있다. 약제학적 조성물 중 본 발명의 화합물의 비율 또는 농도는 투여량, 화학적 특징(예를 들어, 소수성) 및 투여 경로를 포함하는 다수의 인자에 따라 달라질 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 화합물은 비경구 투여를 위하여 약 0.1 내지 약 10 w/v%의 화합물을 함유하는 수성 생리학적 완충 용액에 제공될 수 있다. 일부 전형적인 용량 범위는 일마다 약 1 ㎍/㎏ 내지 약 1 g/㎏(체중)이다. 일부 구현예에서, 용량 범위는 일마다 약 0.01 ㎎/㎏ 내지 약 100 ㎎/㎏(체중)이다. 투여량은 아마도 질병 또는 장애의 유형 및 그의 진행 정도, 특정 환자의 전반적 건강 상태, 선택된 화합물의 상대적인 생물학적 효능, 부형제의 제형 및 그의 투여 경로와 같은 그러한 변수에 좌우될 것 같다. 유효 용량은 시험관내 또는 동물 모델 시험 시스템으로부터 유래된 용량-반응 곡선으로부터 추정될 수 있다.
고형 조성물, 예를 들어, 정제를 제조하기 위하여, 주요 활성 성분은 본 발명의 화합물의 균질 혼합물을 함유한 고형 예비제형 조성물(solid preformulation composition)을 형성하기 위해 약제학적 부형제와 혼합된다. 이들 예비제형 조성물이 균질한 것으로서 언급되는 경우, 활성 성분은 전형적으로, 조성물이 동일하게 효과적인 단위 투여형, 예를 들어, 정제, 알약 및 캡슐로 용이하게 세분될 수 있도록 조성물 전체에 고르게 분산된다. 그 다음, 이 고형 예비제형은 예를 들어, 약 0.1 내지 약 1000 ㎎의 본 발명의 활성 성분을 함유한 상기 기재된 유형의 단위 투여형으로 세분된다.
본 발명의 정제 또는 알약은 지속적 작용의 이점을 제공하는 투여형을 제공하기 위해 코팅되거나 그렇지 않으면 배합될 수 있다. 예를 들어, 정제 또는 알약은 내부 투여 성분 및 외부 투여 성분을 포함할 수 있고, 후자는 전자를 감싸는 형태이다. 두 성분은 위에서 분해에 저항하고 내부 성분이 십이지장 내로 온전하게 통과하도록 또는 방출을 지연시키도록 하는 역할을 하는 장용 층(enteric layer)에 의해 분리될 수 있다. 다양한 물질은 이러한 장용 층 또는 코팅에 이용될 수 있고, 그러한 물질은 다수의 폴리머산 그리고 셸락(shellac), 세틸 알코올, 및 셀룰로스 아세테이트와 같은 물질과 폴리머산의 혼합물을 포함한다.
본 발명의 화합물 및 조성물이 경구로 또는 주사에 의한 투여를 위해 혼입될 수 있는 액체 형태는 수성 용액, 적합하게 가향된 시럽, 수성 또는 오일 현탁액, 및 면실유, 참기름, 코코넛 오일, 또는 땅콩유와 같은 식용가능한 오일로 가향된 에멀젼, 및 엘릭시르 및 유사한 약제학적 비히클을 포함한다.
흡입 또는 통기를 위한 조성물은 약제학적으로 허용되는 수성 또는 유기 용매, 또는 그들의 혼합물 중 용액 및 현탁액, 및 분말을 포함한다. 액상 또는 고형 조성물은 상기 설명된 바와 같은 적합한 약제학적으로 허용되는 부형제를 함유할 수 있다. 일부 구현예에서, 조성물은 국소 또는 전신 효과를 위해 경구 또는 코 호흡 경로에 의해 투여된다. 조성물은 비활성 기체의 이용에 의해 분무될 수 있다. 분무된 용액은 분무 장치로부터 직접 호흡될 수 있거나 분무 장치는 페이스 마스크, 텐트(tent), 또는 간헐적 양압 호흡(intermittent positive pressure breathing) 기계에 부착될 수 있다. 용액, 현탁액, 또는 분말 조성물은 적절한 방식으로 제형을 전달하는 장치로부터 경구로 또는 비강 내로 투여될 수 있다. 국부 제형은 하나 이상의 종래의 담체를 함유할 수 있다. 일부 구현예에서, 연고는 물, 및 예를 들어, 액상 파라핀, 폴리옥시에틸렌 알킬 에테르, 프로필렌 글리콜, 백색 바셀린®(페트롤리움 젤리(petroleum jelly)) 등으로부터 선택된 하나 이상의 소수성 담체를 함유할 수 있다. 크림의 담체 조성물은 글리세롤 및 하나 이상의 다른 성분, 예를 들어, 글리세린모노스테아레이트, PEG-글리세린모노스테아레이트 및 세틸스테아릴 알코올과 조합하여 물에 기초될 수 있다. 겔은 예를 들어, 글리세롤, 하이드록시에틸 셀룰로스 등과 같은 다른 성분과 적합하게 조합하여, 이소프로필 알코올 및 물을 이용하여 제형화될 수 있다. 일부 구현예에서, 국부 제형은 적어도 약 0.1, 적어도 약 0.25, 적어도 약 0.5, 적어도 약 1, 적어도 약 2, 또는 적어도 약 5 wt%의 본 발명의 화합물을 함유한다. 국부 제형은 선택된 적응증, 예를 들어, 건선 또는 다른 피부 질환의 치료를 위한 설명서가 임의로 부착된, 예를 들어, 100 g의 튜브에 적합하게 포장될 수 있다.
환자에게 투여되는 화합물 또는 조성물의 양은 투여되는 것, 투여의 목적, 예를 들어, 예방 또는 치료, 환자의 상태, 투여 방식 등에 따라 달라질 것이다. 치료학적 응용에서, 조성물은 이미 질병을 앓고 있는 환자에게 질병 및 그의 합병증을 치유하거나 그의 증상을 적어도 부분적으로 저지하는 데 충분한 양으로 투여될 수 있다. 유효 용량은 질병의 중증도, 환자의 연령, 체중 그리고 전반적인 상태 등과 같은 요인에 따라 주치의의 판단에 의한 것뿐만 아니라 치료되는 질병 상태에 좌우될 것이다.
환자에게 투여되는 조성물은 상기 설명된 약제학적 조성물의 형태일 수 있다. 이들 조성물은 종래의 멸균 기술에 의해 멸균될 수 있거나, 멸균 여과될 수 있다. 수성 용액은 있는 그대로 이용되도록 포장될 수 있거나, 동결건조될 수 있으며, 동결건조된 제제는 투여 이전에 멸균 수성 담체와 조합된다. 화합물 제제의 pH는 전형적으로 3 내지 11, 더욱 바람직하게는 5 내지 9 그리고 가장 바람직하게는 7 내지 8일 것이다. 전술한 부형제, 담체, 또는 안정화제의 특정한 이용은 약제학적 염의 형성을 야기할 것으로 이해될 것이다.
본 발명의 화합물의 치료적 투여량은 예를 들어, 치료가 행해지는 특정한 용도, 화합물의 투여 방식, 환자의 건강 및 상태, 그리고 처방 전문의의 판단에 따라 달라질 수 있다. 약제학적 조성물 중 본 발명의 화합물의 비율 또는 농도는 투여량, 화학적 특징(예를 들어, 소수성), 및 투여 경로를 포함하는 다수의 요인에 따라 달라질 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 화합물은 비경구 투여를 위해 약 0.1 내지 약 10% w/v의 화합물을 함유한 수성 생리학적 완충 용액으로 제공될 수 있다. 일부 전형적인 용량 범위는 일마다 약 1 ㎍/㎏ 내지 약 1 g/㎏(체중)이다. 일부 구현예에서, 용량 범위는 일마다 약 0.01 ㎎/㎏ 내지 약 100 ㎎/㎏(체중)이다. 투여량은 질병 또는 장애의 유형 및 진행 정도, 특정 환자의 전반적인 건강 상태, 선택된 화합물의 상대적인 생물학적 효능, 부형제의 제형 및 그의 투여 경로와 같은 그러한 변수에 좌우되기 쉽다. 시험관내 또는 동물 모델 시험 시스템으로부터 유래된 용량-반응 곡선으로부터 유효 용량이 추정될 수 있다.
V. 표지된 화합물 및 검정 방법
본 발명의 화합물은 추가로 실시예 2: 시험관내 실험 및 실시예 3: 생체내 실험에 기재된 바와 같은 생물학적 과정의 조사에 유용할 수 있다. 따라서, 본 발명의 다른 양태는 인간을 포함하는 조직 시료 내 NAMPT를 국소화하고 정량화하기 위하여, 그리고 표지된 화합물의 결합 억제에 의해 NAMPT 리간드를 식별하기 위하여, 영상화(imaging) 기술에서뿐만 아니라 시험관내 및 생체내 검정 둘 모두에서 유용할 본 발명의 표지된 화합물(방사성-표지, 형광-표지 등)에 관한 것이다. 이에 따라, 본 발명은 그러한 표지된 화합물을 함유하는 NAMPT 검정을 포함한다.
본 발명은 동위원소-표지된 본 발명의 화합물을 추가로 포함한다. "동위원소" 또는 "방사성-표지된" 화합물은 하나 이상의 원자가 자연에서 전형적으로 발견되는(즉, 자연적으로 발생되는) 원자 질량 또는 질량 수와 상이한 원자 질량 또는 질량 수를 가진 원자로 대체되거나 치환된 본 발명의 화합물이다. 본 발명의 화합물에 혼입될 수 있는 적합한 방사성 핵종(즉, 방사성 동위원소)은 3H(또한 삼중 수소의 경우 T로 기재됨), 11C, 13C, 14C, 13N, 15N, 15O, 17O, 18O, 18F, 35S, 36Cl, 82Br, 75Br, 76Br, 77Br, 123I, 124I, 125I 및 131I를 포함하나 이들에 제한되지 않는다. 본 방사성-표지된 화합물에 혼입되는 방사성 핵종은 방사성-표지된 화합물의 특정 응용에 좌우될 것이다. 예를 들어, 시험관내 Pim 키나제 표지화 및 경쟁 검정의 경우, 3H, 14C, 82Br, 125I, 131I, 35S를 혼입시키는 화합물이 일반적으로 가장 유용할 것이다. 방사성-영상화 응용의 경우 11C, 18F, 125I, 123I, 124I, 131I, 75Br, 76Br 또는 77Br이 일반적으로 가장 유용할 것이다.
"방사성-표지된" 또는 "표지된 화합물"은 적어도 하나의 방사성 핵종을 혼입시킨 화합물인 것으로 이해된다. 일부 구현예에서, 방사성 핵종은 3H, 14C, 125I, 35S 및 82Br로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, 화합물은 1, 2, 또는 3개의 중수소 원자를 혼입시킨다. 유기 화합물 내로 방사성-동위원소를 혼입시키기 위한 합성 방법은 해당 분야에서 널리 공지되어 있다.
구체적으로, 본 발명의 표지된 화합물은 화합물을 확인하고/거나 평가하기 위해 스크리닝 검정에서 이용될 수 있다. 예를 들어, 새롭게 합성되거나 또는 확인된, 표지된 화합물(즉, 시험 화합물)은 표지화의 추적을 통하여, NAMPT와 접촉하는 경우 그의 농도 변화를 모니터링함으로써 NAMPT에 결합하는 그의 능력에 대해 평가될 수 있다. 예를 들어, (표지된) 시험 화합물은 NAMPT에 결합하는 것으로 공지된 또 다른 화합물(즉, 표준 화합물)의 결합을 감소시키는 그의 능력에 대해 평가될 수 있다. 이에 따라, NAMPT에 결합하기 위해 표준 화합물과 경쟁하는 시험 화합물의 능력은 이의 결합 친화성과 직접적으로 연관성이 있다. 대조적으로, 일부 다른 스크리닝 검정에서, 표준 화합물은 표지되고 시험 화합물은 표지되지 않는다. 이에 따라, 표지된 표준 화합물의 농도는 표준 화합물과 시험 화합물 사이의 경쟁을 평가하기 위하여 모니터링되고, 따라서 시험 화합물의 상대적인 결합 친화성이 확인된다.
VI. 키트
또한, 본 발명은 예를 들어, NAMPT-연관 질병 또는 장애, 예를 들어, 암의 치료 또는 예방에 유용한 약제학적 키트를 포함하며, 상기 키트는 치료적 유효량의 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 구현예 중 임의의 것을 포함하는 약제학적 조성물을 함유한 하나 이상의 용기를 포함한다. 그러한 키트는 당업자에게 명백할 것처럼, 다양한 종래의 약제학적 키트 성분 중 하나 이상, 예를 들어, 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 담체를 가진 용기, 추가의 용기 등을 추가로 포함할 수 있다. 삽입물 또는 표지로서, 투여되어야 할 성분의 양, 투여를 위한 지침, 및/또는 성분을 혼합하기 위한 지침을 명시한 설명서가 또한, 키트에 포함될 수 있다.
본 발명의 다수의 구현예가 기재된다. 그럼에도 불구하고, 본 발명의 목적 및 범주로부터 벗어나지 않고, 다양한 변형이 이루어질 수 있음이 이해될 것이다. 따라서, 다른 구현예가 하기의 청구범위의 범주 내에 있다.

Claims (36)

  1. 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용되는 염:
    [화학식 I]
    Figure pct00032

    (상기 식에서,
    Y1은 -CR14- 또는 N이고,
    Y2는 CR15 또는 N이고,
    Y3은 -C(O)-이고,
    Y4는 -CH2 또는 -N(R16)-이거나,
    Y3 및 Y4는 함께 -C(R17)=C(R18)-이고,
    X는 아릴, 헤테로아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴알킬 또는 아미드이고,
    Z는 C2 이상의 알킬 또는 알콕실알킬이고,
    R은 H 또는 C1-C6 알킬이고,
    R1 내지 R18은 독립적으로 -H 또는 C1-C6 알킬이고,
    Q는 C 또는 N이되; 단, Q가 N이고, R이 H인 경우, X는
    Figure pct00033
    이 아님).
  2. 제1항에 있어서, X가 페닐 또는 치환된 페닐인 화합물.
  3. 제2항에 있어서, X가 플루오로페닐인 화합물.
  4. 제1항에 있어서, R이 H인 화합물.
  5. 제1항에 있어서, X가 피리디닐 또는 치환된 피리디닐인 화합물.
  6. 제5항에 있어서, X가 플루오로피리디닐 또는 메틸피리디닐인 화합물.
  7. 제1항에 있어서, Y1이 CH인 화합물.
  8. 제1항에 있어서, Y1이 N인 화합물.
  9. 제1항에 있어서, Y2가 CH인 화합물.
  10. 제1항에 있어서, Y2가 N인 화합물.
  11. 제1항에 있어서, Y4가 -CH2-인 화합물.
  12. 제11항에 있어서, Y3 및 Y4가 함께 -C(R17)=C(R18)-인 화합물.
  13. 제1항에 있어서, Y3 및 Y4가 함께 -C(R17)=C(R18)-인 화합물.
  14. 제1항에 있어서, Z가 C2-C4 알킬인 화합물.
  15. 제1항에 있어서, Z가 프로필인 화합물.
  16. 제15항에 있어서, Z가 이소프로필인 화합물.
  17. 제1항에 있어서, Z가 알콕시알킬인 화합물.
  18. 제1항에 있어서, Z가 사이클로부틸메틸인 화합물.
  19. 제1항에 있어서, R1 내지 R18이 각각 -H인 화합물.
  20. 제1항에 있어서, R17 및 R18이 각각 -H인 화합물.
  21. 하기의 화학식을 갖는 화합물:
    Figure pct00034
    .
  22. 하기의 화학식을 갖는 화합물:
    Figure pct00035
    .
  23. 제1항, 제21항 또는 제22항의 화합물을 포함하는 조성물을 면역학적 질병의 치료적 조절을 위하여 활성화된 및/또는 증식성 B 세포의 억제를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 면역학적 질병의 치료적 조절을 위한 활성화된 B 세포 및/또는 증식성 B 세포의 억제 방법.
  24. 제23항에 있어서, 상기 면역학적 질병이 루푸스, 류마티스 관절염, 피부경화증, 건선, 쇼그렌 증후군, I형 당뇨병 또는 다발성 경화증인 방법.
  25. 제1항의 화합물을 포함하는 조성물을 이식을 위하여 면역억제의 유도, 조절 또는 유지를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 이식을 위한 면역억제의 유도, 조절 또는 유지 방법.
  26. 제1항의 화합물을 포함하는 조성물을 치료적 생물제제에 대한 면역반응의 억제 또는 조절을 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 치료적 생물제제에 대한 면역반응의 억제 또는 조절 방법.
  27. 제26항에 있어서, 상기 치료적 생물제제가 재조합 단백질, 핵산, 항체 또는 펩티드인 방법.
  28. 제1항의 화합물을 포함하는 조성물을 종양 세포 성장의 억제를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 종양 세포 성장의 억제 방법.
  29. 제28항에 있어서, 상기 종양 세포가 NAPRT 결핍인 방법.
  30. 제1항의 화합물을 포함하는 조성물을 백혈병 및 림프종의 치료를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 백혈병 및 림프종의 치료 방법.
  31. 제30항에 있어서, 상기 백혈병이 급성 림프구성 백혈병인 방법.
  32. 제1항의 화합물을 포함하는 조성물을 바이러스 감염의 치료를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 바이러스 감염의 치료 방법.
  33. 제32항에 있어서, 상기 바이러스 감염이 인플루엔자, RSV, HSV, HCV, HBV, HPV, HIV, CMV, EBOV 또는 EBV로부터 선택되는 방법.
  34. B 세포를 제1항, 제20항 또는 제21항의 화합물과 접촉시키는 단계를 포함하는 형질 세포로의 B 세포 분화의 억제 방법.
  35. 시료를 제1항, 제21항 또는 제22항의 화합물에 결합하는 결합제와 접촉시키는 단계 및 상기 화합물로의 상기 결합제의 결합을 검출하는 단계를 포함하는 시료 중 제1항, 제21항 또는 제22항의 화합물의 존재의 결정 방법.
  36. 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용되는 염:
    [화학식 I]
    Figure pct00036

    (상기 식에서,
    Y1은 -CR14- 또는 N이고,
    Y2는 CR15 또는 N이고,
    Y3은 -C(O)-이고,
    Y4는 -CH2 또는 -N(R16)-이거나,
    Y3 및 Y4는 함께 -C(R17)=C(R18)-이고,
    X는 아릴, 헤테로아릴, 아릴알킬, 헤테로아릴알킬 또는 아미드이고,
    Z는 C2 이상의 알킬 또는 알콕실알킬이고,
    R은 H 또는 C1-C6 알킬이고,
    R1 내지 R18은 독립적으로 -H 또는 C1-C6 알킬이고,
    Q는 C 또는 N이되; 단, Q가 N이고, R이 H인 경우, X는
    Figure pct00037
    이 아니고;
    화학식 (I) 내의 적어도 하나의 원자는 방사성 동위원소로 대체되거나, 화학식 (I) 내의 적어도 하나의 기는 형광기로 대체됨).
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