JP2017516774A - Ｎａｍｐｔ阻害剤および方法 - Google Patents

Abstract

本発明は、本明細書に開示した式（Ｉ）、式（Ｉ）−Ａおよび式（Ｉ）−Ｂの化合物、ならびに合成方法、治療方法、診断方法およびアッセイ方法に関する。【化１】

Description

関連出願の相互参照
本出願は、その全体が本明細書に組み込まれている、２０１４年５月２２日に出願した米国仮出願第６２／００１９０５号の３５ Ｕ．Ｓ．Ｃ．§１１９（ｅ）の下に優先権を主張するものである。

本発明は、全般的に、腫瘍性障害、免疫性障害、ウイルス感染症、ニコチンアミドホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＮＡＭＰＴ）に関連する障害を含むが、これらに限定されない様々な障害の治療薬および治療に関する。

２つのＮＡＭＰＴ阻害剤（ＦＫ８６６およびＣＨＳ８２８）は、臨床試験に入った。非特許文献１を全般的に参照。

Ｇａｌｌｉら、「Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｎｉｃｏｔｉｎａｍｉｄｅ Ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｂｏｓｅｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ（ＮＡＭＰＴ）Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ」、Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．、２０１３年（５６（１６）、６２７９〜６２９６頁

本発明は、とりわけ、式（Ｉ）：

［式中、
Ｙ_１は−ＣＲ_１４−またはＮであり、
Ｙ_２はＣＲ_１５またはＮであり、
Ｙ_３は−Ｃ（Ｏ）−であり、
Ｙ_４は−ＣＨ_２もしくは−Ｎ（Ｒ_１６）−であるか、または
Ｙ_３およびＹ_４は一緒になって−Ｃ（Ｒ_１７）＝Ｃ（Ｒ_１８）−であり、
Ｘはアリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルまたはアミドであり、
ＺはＣ_２以上のアルキルまたはアルコキシアルキルであり、
ＲはＨまたはＣ_１〜Ｃ_６アルキルであり、
Ｒ_１〜Ｒ_１８は独立に−ＨまたはＣ_１〜Ｃ_６アルキルであり、
ＱはＣまたはＮであり；ただし、ＱがＮであり、ＲがＨであるとき、Ｘは

ではない］
の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。

好ましくは、Ｘはフェニルまたは置換フェニル、例えば、フルオロフェニルであり；ＲはＨであり；Ｘはピリジニルまたは置換ピリジニル、例えば、フルオロピリジニルまたはメチルピリジニルである。さらに好ましくは、Ｙ_１はＣであり；Ｙ_１はＮであり；Ｙ_２はＣであり；Ｙ_２はＮであり；Ｙ_３は−Ｃ（Ｏ）−であり；Ｙ_４は−Ｃ（Ｈ）＝である。さらに好ましくは、ＺはＣ_２〜Ｃ_４アルキルまたはプロピル、例えば、イソプロピルである。さらに好ましくは、Ｚはアルコキシアルキルまたはシクロブチルメチルである。さらに好ましくは、Ｒ_１７およびＲ_１８は−Ｈであり、最も好ましくはＲ_１〜Ｒ_１６も同様に−Ｈである。

他の好ましい実施形態において、化合物は、以下の式（Ｉ）−Ａまたは（Ｉ）−Ｂ：

の一つを有する。

上の化合物は、化合物を含む組成物を、それを必要とする患者に投与することにより、免疫性疾患の治療的調節のために、活性化および／または増殖Ｂ細胞を阻害するために使用できる。例えば、免疫性疾患は、紅斑性狼瘡、リウマチ性関節炎、強皮症、乾癬、シェーグレン症候群、１型糖尿病または多発性硬化症であり得る。化合物は、化合物を含む組成物を、それを必要とする患者に投与することにより、移植片の免疫抑制を誘導するか、調節するか、または維持するために使用できる。他の医学的用途としては、組換えタンパク質、核酸、抗体またはペプチドのような治療用バイオ医薬品に対する免疫反応の抑制または調節；腫瘍細胞、特にＮＡＰＲＴ欠損腫瘍細胞の増殖の阻害；白血病（例えば、急性リンパ性白血病）およびリンパ腫の治療；インフルエンザ、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、ヒトサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、エボラウイルス（ＥＢＯＶ）およびエプスタインバーウイルス（ＥＢＶ）のようなウイルス感染症の治療が挙げられる。化合物の他の用途としては、Ｂ細胞と化合物とを接触させることによる、（例えば、インビボまたはインビトロでの）Ｂ細胞の形質細胞への分化の阻害が挙げられる。サンプル（例えば、化合物を含有すると思われるサンプル）中での本発明による化合物の存在は、サンプルと、化合物に結合する結合剤とを接触させ、結合剤の化合物への結合を検出することにより検出できる。化合物は、例えば、このような検出を促進するための検出可能標識をさらに含み得る。

別の態様において、本発明は、安息香酸誘導体と、カルボニルジイミダゾールおよびメタンアミン誘導体とを反応させることにより化合物を合成することを特徴とする。

これらの化合物は、紅斑性狼瘡、リウマチ性関節炎、シェーグレン症候群、１型糖尿病、多発性硬化症、移植片の導入および維持、強皮症、急性リンパ性白血病、ならびに癌、特にＮＡＰＲＴ欠損固形または液性腫瘍を含むがこれらに限定されない、複数の免疫学的および腫瘍学的疾患の治療薬としての用途を有する。さらに、それらは、インフルエンザ、ＲＳＶ、ＨＳＶ、ＨＣＶ、ＨＢＶ、ＨＰＶ、ＨＩＶ、ＣＭＶ、ＥＢＯＶおよびＥＢＶを含むがこれらに限定されない、ＮＡＤを必要とするウイルス感染症の治療薬である。

本発明は、治療有効量のこのような化合物またはその薬学的に許容される塩を患者に投与することにより、上の状態を治療する方法も提供する。本発明は、治療法での使用のための、化合物またはその薬学的に許容される塩の使用または製造も提供する。本発明は、本明細書において参照される疾患の治療での使用のための、このような化合物またはその薬学的に許容される塩も提供する。

特定の作用機構に拘束されることは望まないが、化合物は、Ｔ細胞を温存しながら、初代ヒトＢ細胞を選択的に阻害する。一般に、化合物は、ＮＡＭＰＴを標的とし、初代ヒトＴ細胞を選択的に温存しながら、初代ヒトＢ細胞の活性化および増殖を阻害するので、化合物は、様々な免疫介在性疾患、および癌、特にＢ細胞悪性腫瘍、ＮＡＰＲＴ欠損固形または液性腫瘍を含むＢ細胞介在性および増殖性障害、ならびにインフルエンザ、ＲＳＶ、ＨＳＶ、ＨＣＶ、ＨＢＶ、ＨＰＶ、ＨＩＶ、ＣＭＶ、ＥＢＯＶおよびＥＢＶを含むがこれらに限定されないＮＡＤを必要とするウイルス感染症の治療に有用である。

本発明の１つまたはそれ以上の実施形態の詳細は、以下の添付の図面および説明に記載されている。本発明の他の特徴、目的および利点は、説明および図面、ならびに特許請求の範囲から明らかになるであろう。

本明細書に記載の化合物の作用機構を示す図である。 ラットへの静脈内または経口投与後の１’−イソプロピル−３−メチル−６−（４−（３−（チアゾール−５−イル）プロパノイル）フェニル）スピロ−［ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−２，４’−ピペリジン］−４（３Ｈ）−オンの平均血漿濃度対時間を示すグラフである。 ラットへの静脈内または経口投与後の４−（１’−イソプロピル−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）メチル）ベンゾアミドの平均血漿濃度対時間を示すグラフである。 マウスへの静脈内または経口投与後の４−（１’−イソプロピル−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）メチル）ベンゾアミドの平均血漿濃度対時間を示すグラフである。 ＮＡＬＭ６白血病モデルにおける４−（１’−イソプロピル−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）メチル）ベンゾアミドのインビボアッセイの結果を示すグラフである。 ＨＣＴ１１６腫瘍モデルにおける４−（１’−イソプロピル−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）メチル）ベンゾアミドのインビボアッセイの結果を示すグラフである。 別のＨＣＴ１１６腫瘍モデルにおける４−（１’−イソプロピル−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）メチル）ベンゾアミドのインビボアッセイの結果を示すグラフである。

Ｉ．化合物
本発明の開示内容は、とりわけ、上の式（Ｉ）、式（Ｉ）−Ａおよび式（Ｉ）−Ｂの化合物に関する。

一般的定義
明確性のために別個の実施形態の文脈で記載される本発明のある種の特徴を、単一の実施形態における組み合わせで提供してもよいことが認識される。逆に、簡潔化のために単一の実施形態の文脈で記載される本発明の様々な特徴を、別個にまたは任意の適当な部分的組み合わせで提供してもよい。

「例えば（ｅ．ｇ．）」および「のような（ｓｕｃｈ ａｓ）」という用語およびこれらの文法的等価物に関しては、別段の明確な記述がない限り「これらに限定されない」という語句が後に続くことが理解される。本明細書で使用する単数形「１つの（ａ、ａｎ）」および「その（ｔｈｅ）」は、別段の文脈による明確な指示がない限り、複数の支持対象を含む。本明細書で使用する「約（ａｂｏｕｔ）」という用語は、「およそ（ａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ）」（例えば、示された値の±約１０％）を意味する。

本明細書で使用する「場合により置換されている」という用語は、置換されていないことまたは置換されていることを意味する。本明細書で使用する「置換されている」という用語は、水素原子が置換基で除去され、置き換えられていることを意味する。一般に、すべての部分は、別段の指示がない限り、置換されている。所与の原子での置換は、原子価により限定されることを理解されたい。定義を通じて、「Ｃ_ｎ〜ｍ」という用語は、端点を含む範囲を示し、そこでｎおよびｍは正数であり、炭素数を示す。例としては、Ｃ_１〜４、Ｃ_１〜６などが挙げられる。

ｎが整数である「ｎ員」という用語は、環形成原子数がｎである部分の環形成原子数を典型的には示す。例えば、ピペリジニルは、６員ヘテロシクロアルキル環の一例であり、ピラゾリルは、５員ヘテロアリール環の一例であり、ピリジルは、６員ヘテロアリール環の一例であり、１，２，３，４−テトラヒドロナフタレンは、１０員シクロアルキル基の一例である。

本明細書で使用する単独でまたは他の用語と組み合わせて用いられる「Ｃ_ｎ〜ｍアルキル」という用語は、ｎ〜ｍ個の炭素を有する、直鎖または分枝であってよい、飽和炭化水素基を指す。いくつかの実施形態において、アルキル基は、１〜６個の炭素原子、１〜４個の炭素原子または１〜３個の炭素原子を含有する。アルキル部分の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓ−ブチルおよびｔ−ブチルのような化学基が挙げられるが、これらに限定されない。

本明細書で使用する単独でまたは他の用語と組み合わせて用いられる「Ｃ_ｎ〜ｍアルコキシ」という用語は、アルキル基がｎ〜ｍ個の炭素を有する、式−Ｏ−アルキルの基を指す。例示的なアルコキシ基としては、メトキシ、エトキシおよびプロポキシ（例えば、ｎ−プロポキシおよびイソプロポキシ）が挙げられる。いくつかの実施形態において、アルキル基は、１〜３個の炭素原子を有する。

本明細書で使用する「Ｃ_ｎ〜ｍアルケニル」とは、１つまたはそれ以上の二重炭素−炭素結合を有し、ｎ〜ｍ個の炭素を有するアルキル基を指す。いくつかの実施形態において、アルケニル部分は２〜６個または２〜４個の炭素原子を含有する。例示的なアルケニル基としては、エテニル、ｎ−プロペニル、イソプロペニル、ｎ−ブテニル、ｓｅｃ−ブテニルなどが挙げられるが、これらに限定されない。

本明細書で使用する「Ｃ_ｎ〜ｍアルキニル」は、１つまたはそれ以上の三重炭素−炭素結合を有し、ｎ〜ｍ個の炭素を有するアルキル基を指す。例示的なアルキニル基としては、エチニル、プロピン−１−イル、プロピン−２−イルなどが挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、アルキニル部分は２〜６個または２〜４個の炭素原子を含有する。

本明細書で使用する「Ｃ_ｎ〜ｍアルキルアミノ」という用語は、アルキル基がｎ〜ｍ個の炭素原子を有する、式−ＮＨ（アルキル）の基を指す。いくつかの実施形態において、アルキル基は、１〜６個または１〜４個の炭素原子を有する。

本明細書で使用する「ジ−Ｃ_ｎ〜ｍ−アルキルアミノ」という用語は、２つのアルキル基各々が、独立に、ｎ〜ｍ個の炭素原子を有する、式−Ｎ（アルキル）_２の基を指す。いくつかの実施形態において、各アルキル基は、独立に、１〜６個または１〜４個の炭素原子を有する。

本明細書で使用する「Ｃ_ｎ〜ｍアルキルチオ」という用語は、アルキル基がｎ〜ｍ個の炭素原子を有する、式−Ｓ−アルキルの基を指す。いくつかの実施形態において、アルキル基は、１〜６個または１〜４個の炭素原子を有する。

本明細書で使用する「アミノ」という用語は、式−ＮＨ_２の基を指す。

本明細書で使用する単独でまたは他の用語と組み合わせて用いられる「アリール」という用語は、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、アントラセニル、フェナントレニルなどであるが、これらに限定されない、（例えば、２、３または４つの縮合環を有する）単環式または多環式芳香族炭化水素を指す。いくつかの実施形態において、アリールは、Ｃ_６〜１０アリールである。いくつかの実施形態において、アリール基は、ナフタレン環またはフェニル環である。いくつかの実施形態において、アリール基は、フェニルである。

本明細書で使用する単独でまたは他の用語と組み合わせて用いられる「カルボニル」という用語は、−Ｃ（Ｏ）−基を指す。

本明細書で使用する単独でまたは他の用語と組み合わせて用いられる「シクロアルキル」という用語は、１つまたはそれ以上のアルケニレン基を環構造の一部として場合により含有し得る、非芳香環状炭化水素部分を指す。シクロアルキル基は、（例えば、２、３または４つの縮合環を有する）単環式または多環式環系を含み得る。シクロアルキル環に縮合した（すなわち、それと共通の結合を有する）１つまたはそれ以上の芳香環を有する部分、例えば、シクロペンタン、シクロペンテン、シクロヘキサンなどのベンゾ誘導体も、シクロアルキルの定義に含まれる。シクロアルキル基の１個またはそれ以上の環形成炭素原子を酸化させて、カルボニル結合を形成することができる。いくつかの実施形態において、シクロアルキルは、単環式または二環式のＣ_３〜７シクロアルキルである。例示的なシクロアルキル基としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロヘキサジエニル、シクロヘプタトリエニル、ノルボルニル、ノルピニル、ノルカルニルなどが挙げられる。いくつかの実施形態において、シクロアルキル基は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルまたはシクロヘキシルである。

本明細書で使用する「Ｃ_ｎ〜ｍハロアルコキシ」という用語は、ｎ〜ｍ個の炭素原子を有する、式−Ｏ−ハロアルキルの基を指す。例示的なハロアルコキシ基としてはＯＣＦ_３がある。さらなる例示的なハロアルコキシ基としてはＯＣＨＦ_２がある。いくつかの実施形態において、ハロアルコキシ基は、フッ素化しか受けない。いくつかの実施形態において、アルキル基は１〜６個または１〜４個の炭素原子を有する。

本明細書で使用する「ハロ」という用語は、Ｆ、Ｃｌ、ＩまたはＢｒから選択されるハロゲン原子を指す。いくつかの実施形態において、「ハロ」は、Ｆ、ＣｌまたはＢｒから選択されるハロゲン原子を指す。いくつかの実施形態において、例示的なハロ基としてはＦがある。

本明細書で使用する単独でまたは他の用語と組み合わせて用いられる「Ｃ_ｎ〜ｍハロアルキル」という用語は、同じでもまたは異なってもよい、１個のハロゲン原子から２ｓ＋１個のハロゲン原子までを有するアルキル基を指し、そこで「ｓ」はアルキル基の炭素原子の数であり、アルキル基はｎ〜ｍ個の炭素原子を有する。いくつかの実施形態において、ハロアルキル基は、フッ素化しか受けない。いくつかの実施形態において、ハロアルキル基は、フルオロメチル、ジフルオロメチルまたはトリフルオロメチルである。いくつかの実施形態において、ハロアルキル基は、トリフルオロメチルである。いくつかの実施形態において、アルキル基は、１〜６個または１〜４個の炭素原子を有する。

本明細書で使用する単独でまたは他の用語と組み合わせて用いられる「ヘテロアリール」という用語は、窒素、硫黄および酸素から選択される１つまたは複数のヘテロ原子環員を有する、（例えば、２、３または４つの縮合環を有する）単環式または多環式芳香族炭化水素部分を指す。いくつかの実施形態において、ヘテロアリールは、単環式または二環式であり、窒素、硫黄および酸素から独立に選択される１、２、３または４個のヘテロ原子環員を有する、５〜１０員Ｃ_１〜９ヘテロアリールである。ヘテロアリール基が、１個を超えるヘテロ原子環員を含有するとき、ヘテロ原子は同じでもまたは異なってもよい。ヘテロアリール基の環（複数可）の窒素原子を酸化させて、Ｎオキシドを形成することができる。例示的なヘテロアリール基としては、ピリジン、ピリミジン、ピラジン、ピリダジン、ピロール、ピラゾール、アゾリル、オキサゾール、イソオキサゾール、チアゾール、イソチアゾール、イミダゾール、フラン、チオフェン、トリアゾール、テトラゾール、チアジアゾール、キノリン、イソキノリン、インドール、ベンゾチオフェン、ベンゾフラン、ベンゾイソオキサゾール、イミダゾ［１，２−ｂ］チアゾール、プリン、トリアジンなどが挙げられるが、これらに限定されない。

５員ヘテロアリールは、炭素を含む５個の環原子、ならびにＮ、ＯおよびＳから独立に選択される１個またはそれ以上（例えば、１、２または３個）の環原子を有するヘテロアリール基である。例示的な５員環のヘテロアリールとしては、チエニル、フリル、ピロリル、イミダゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、ピラゾリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、１，２，３−トリアゾリル、テトラゾリル、１，２，３−チアジアゾリル、１，２，３−オキサジアゾリル、１，２，４−トリアゾリル、１，２，４−チアジアゾリル、１，２，４−オキサジアゾリル、１，３，４−トリアゾリル、１，３，４−チアジアゾリルおよび１，３，４−オキサジアゾリルがある。

６員ヘテロアリールは、１個またはそれ以上（例えば、１、２または３個）の環原子が窒素である、６個の環原子を有するヘテロアリール基である。例示的な６員環のヘテロアリールとしては、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、トリアジニルおよびピリダジニルがある。

本明細書で使用する単独でまたは他の用語と組み合わせて用いられる「ヘテロシクロアルキル」という用語は、１つまたはそれ以上のアルケニレンまたはアルキニレン基を環構造の一部として場合により含有し得、窒素、硫黄および酸素から独立に選択される少なくとも１個のヘテロ原子環員を有する、非芳香環系を指す。ヘテロシクロアルキル基が、１個を超えるヘテロ原子を含有するとき、ヘテロ原子は同じでもまたは異なってもよい。ヘテロシクロアルキル基は、スピロ系を含む（例えば、２、３または４つの縮合環を有する）単環式または多環式環系を含み得る。非芳香環に縮合した（すなわち、それと共通の結合を有する）１つまたはそれ以上の芳香環を有する部分、例えば、１，２，３，４−テトラヒドロキノリン、ジヒドロベンゾフランなどもヘテロシクロアルキルの定義に含まれる。ヘテロシクロアルキル基の環（複数可）の炭素原子またはヘテロ原子を酸化させて、カルボニルまたはスルホニル基（または他の酸化結合）を形成してもよく、または窒素原子を四級化してもよい。いくつかの実施形態において、ヘテロシクロアルキルは、単環式または二環式であり、窒素、硫黄および酸素から独立に選択される１、２、３または４個のヘテロ原子環員を有する、５〜１０員Ｃ_２〜９ヘテロシクロアルキルである。ヘテロシクロアルキル基の例としては、１，２，３，４−テトラヒドロキノリン、ジヒドロベンゾフラン、アゼチジン、アゼパン、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、チオモルホリンおよびピランが挙げられる。

本明細書に記載の化合物は、非対称であり得る（例えば、１つまたはそれ以上の立体中心を有する）。別段の指示がない限り、鏡像異性体およびジアステレオ異性体のようなすべての立体異性体が意図される。不斉置換炭素原子を含有する本発明の化合物は、光学活性体またはラセミ体で単離できる。光学活性体を光学不活性の出発物質からどのように製造するかについての方法は、ラセミ混合物の分解または立体選択的合成のように当技術分野で公知である。オレフィンの多くの幾何異性体、Ｃ＝Ｎ二重結合なども、本明細書に記載の化合物中に存在し得、このような安定な異性体はすべて本発明で企図される。本発明の化合物のシスおよびトランス幾何異性体が、記載されており、異性体の混合物として、または分離した異性体型として単離できる。

本発明の化合物が、キラル中心を含有するとき、化合物は、可能な立体異性体のいずれかであってよい。単一のキラル中心を有する化合物において、キラル中心の立体化学は、（Ｒ）または（Ｓ）であり得る。２つのキラル中心を有する化合物において、キラル中心の立体化学は各々独立に（Ｒ）または（Ｓ）であり得、したがって、キラル中心の配置は、（Ｒ）および（Ｒ）、（Ｒ）および（Ｓ）；（Ｓ）および（Ｒ）、または（Ｓ）および（Ｓ）であり得る。３つのキラル中心を有する化合物において、３つのキラル中心各々の立体化学は、各々独立に（Ｒ）または（Ｓ）であり得、したがって、キラル中心の配置は、（Ｒ）、（Ｒ）および（Ｒ）；（Ｒ）、（Ｒ）および（Ｓ）；（Ｒ）、（Ｓ）および（Ｒ）；（Ｒ）、（Ｓ）および（Ｓ）；（Ｓ）、（Ｒ）および（Ｒ）；（Ｓ）、（Ｒ）および（Ｓ）；（Ｓ）、（Ｓ）および（Ｒ）；または（Ｓ）、（Ｓ）および（Ｓ）であり得る。

化合物のラセミ混合物の分割は、当技術分野で公知の多数の方法のいずれかにより実行できる。例示的な方法としては、光学的に活性な塩形成性有機酸であるキラル分割酸を用いる分別再結晶化が挙げられる。分別再結晶化法に適した分割剤としては、例えば、ＤおよびＬ型の酒石酸、ジアセチル酒石酸、ジベンゾイル酒石酸、マンデル酸、リンゴ酸、乳酸のような光学活性酸、またはＤ−カンファースルホン酸のような様々な光学活性カンファースルホン酸がある。分別再結晶化法に適した他の分割剤としては、立体異性的に純粋な形態のαメチルベンジルアミン（例えば、ＳおよびＲ型、またはジアステレオ異性体的に純粋な形態）、２−フェニルグリシノール、ノルエフェドリン、エフェドリン、Ｎ−メチルエフェドリン、シクロヘキシルエチルアミン、１，２−ジアミノシクロヘキサンなどが挙げられる。

ラセミ混合物の分割は、光学活性分割剤（例えば、ジニトロベンゾイルフェニルグリシン）を用いて充填したカラムでの溶出によっても実行できる。当業者であれば、適当な溶出溶媒組成物を決定できる。

本発明の化合物は、互変異性型も含む。互変異性型は、プロトンの付随する移動と一緒に、単結合を隣接する二重結合と交換することからもたらされる。互変異性型としては、同じ実験式および全電荷を有する、異性体プロトン化状態である、プロトン互変異性体が挙げられる。例示的なプロトン互変異性体としては、ケト−エノール対、アミド−イミド酸対、ラクタム−ラクチム対、アミド−イミド酸対、エナミン−イミン対、ならびにプロトンがヘテロ環系の２つ以上の位置を占有できる環状型、例えば、^１Ｈ−および^３Ｈ−イミダゾール、^１Ｈ−、^２Ｈ−および^４Ｈ−１，２，４−トリアゾール、^１Ｈ−および^２Ｈ−イソインドール、^１Ｈ−および^２Ｈ−ピラゾールが挙げられる。互変異性型は、平衡状態であってもよく、または互変異性体を適当な置換により１つの形態に立体的に固定してもよい。

本発明の化合物は、中間体または最終化合物中で生じる原子のすべての同位体も含み得る。同位体は、同じ原子番号を有するが、異なる質量数を有する原子を含む。

本明細書で使用する「化合物」という用語は、示された構造のすべての立体異性体、幾何異性体、互変異性体および同位体を含むことを意味する。名称または構造により、１つの特定の互変異性型として本明細書で特定される化合物は、別段の明記がない限り、他の互変異性型を含むことが意図される（例えば、プリン環の場合、別段の指示がない限り、化合物名または構造が、９Ｈ互変異性体を有するとき、７Ｈ互変異性体も含むと理解される）。

すべての化合物、その薬学的に許容される塩は、水および溶媒のような他の物質（例えば、水和物および溶媒和物）と一緒に見出されるか、または単離される。

いくつかの実施形態において、本発明の化合物またはその塩は、実質的に単離される。「実質的に単離される」とは、化合物が、それが形成されたか、または検出された環境から少なくとも部分的にまたは実質的に分離されることを意味する。部分的分離は、例えば、本発明の化合物中で富化された組成物を含み得る。実質的分離は、本発明の化合物またはその塩を少なくとも約５０重量％、少なくとも約６０重量％、少なくとも約７０重量％、少なくとも約８０重量％、少なくとも約９０重量％、少なくとも約９５重量％、少なくとも約９７重量％または少なくとも約９９重量％含有する組成物を含み得る。化合物およびその塩を単離する方法は、当技術分野で通例である。

「薬学的に許容される」という語句は、正常な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応または他の問題もしくは合併症なしに、妥当なベネフィット／リスク比に見合った、ヒトおよび動物の組織との接触における使用に適した、化合物、物質、組成物および／または剤形を指すために本明細書で用いられる。

本明細書で使用する「周囲温度」および「室温」という表現は、当技術分野で理解されており、温度、例えば、反応が行われる部屋のおおよその温度、例えば、約２０℃〜約３０℃の温度である反応温度を一般に指す。

本発明は、本明細書に記載の化合物の薬学的に許容される塩も含む。本明細書で使用する「薬学的に許容される塩」は、既存の酸または塩基部分をその塩形態に変換することにより、親化合物を修飾する、開示される化合物の誘導体を指す。薬学的に許容される塩の例としては、アミンのような塩基性残留物の鉱または有機酸塩；カルボン酸のような酸性残留物のアルカリまたは有機塩などが挙げられるが、これらに限定されない。本発明の薬学的に許容される塩は、例えば、非毒性の無機または有機酸から形成される、親化合物の従来の非毒性塩を含む。本発明の薬学的に許容される塩は、従来の化学方法により、塩基性または酸性部分を含有する親化合物から合成できる。一般に、このような塩は、これらの化合物の遊離酸または塩基型と、化学量論量の適当な塩基または酸とを、水中もしくは有機溶媒中、または２つの混合物中で反応させることにより製造できる；一般に、エーテル、酢酸エチル、アルコール（例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノールまたはブタノール）またはアセトニトリル（ＭｅＣＮ）などの非水性媒体が好ましい。適当な塩の一覧は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１７版（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｅａｓｔｏｎ、１９８５年）１４１８頁、Ｂｅｒｇｅら、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．、１９７７年、６６（１）、１〜１９およびＳｔａｈｌら、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ Ｕｓｅ（Ｗｉｌｅｙ、２００２年）に見出される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の化合物は、Ｎオキシド形態を含む。

本明細書では以下の略号を使用し得る：ＡｃＯＨ（酢酸）；Ａｃ_２Ｏ（無水酢酸）；ａｑ．（水性）；ａｔｍ．［気圧（複数可）］；Ｂｏｃ（ｔ−ブトキシカルボニル）；ｂｒ（広い）；Ｃｂｚ（カルボキシベンジル）；ｃａｌｃ．（計算値）；ｄ（ダブレット）；ｄｄ（ダブレットのダブレット）；ＤＣＭ（ジクロロメタン）；ＤＩＡＤ（Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルアジドジカルボキシレート）；ＤＩＰＥＡ（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン）；ＤＭＦ（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド）；Ｅｔ（エチル）；ＥｔＯＡｃ（酢酸エチル）；ｇ［グラム（複数可）］、ｈ［時間（複数可）］、ＨＡＴＵ（Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）ウロニウムヘキサフルオロホスフェート）；ＨＣｌ（塩酸）；ＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィ）；Ｈｚ（ヘルツ）；Ｊ（結合定数）；ＬＣＭＳ（液体クロマトグラフィ質量分析）；ｍ（マルチプレット）；Ｍ（モル）；ｍＣＰＢＡ（３−クロロ過安息香酸）；ＭｇＳＯ_４（硫酸マグネシウム）；ＭＳ（質量分析）；Ｍｅ（メチル）；ＭｅＣＮ（アセトニトリル）；ＭｅＯＨ（メタノール）；ｍｇ［ミリグラム（複数可）］、ｍｉｎ．［分（複数可）］：ｍＬ［ミリリットル（複数可）］；ｍｍｏｌ［ミリモル（複数可）］；Ｎ（規定）；ＮａＨＣＯ_３（重炭酸ナトリウム）；ＮａＯＨ（水酸化ナトリウム）；Ｎａ_２ＳＯ_４（硫酸ナトリウム）；ＮＨ_４Ｃｌ（塩化ナトリウム）；ＮＨ_４ＯＨ（水酸化アンモニウム）；ｎＭ（ナノモル）；ＮＭＲ（核磁気共鳴分光学）；ＯＴｆ（トリフルオロメタンスルホネート）；Ｐｄ（パラジウム）；Ｐｈ（フェニル）；ｐＭ（ピコモル）；ＰＯＣｌ_３（塩化ホスホリル）；ＲＰ−ＨＰＬＣ（逆相高速液体クロマトグラフィ）；ｓ（シングレット）；ｔ（トリプレットまたは第３級）；ＴＢＳ（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）；ｔｅｒｔ（第３級）；ｔｔ（トリプレットのトリプレット）；ｔ−Ｂｕ（ｔｅｒｔ−ブチル）；ＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）；ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）；μｇ［マイクログラム（複数可）］；μＬ［マイクロリットル（複数可）］；μＭ（マイクロモル）；ｗｔ％（重量パーセント）。

ＩＩ．合成
その塩を含む本発明の化合物は、公知の有機合成技法を用いて製造でき、多数の可能な合成経路のいずれかにしたがって合成できる。

本発明の化合物を製造するための反応は、有機合成分野の専門家であれば容易に選択できる適当な溶媒中で行うことができる。適当な溶媒は、反応が行われる温度、例えば、溶媒の凍結温度から溶媒の沸騰温度までの範囲にあり得る温度で、出発物質（反応物）、中間体または生成物と実質的に非反応性であり得る。所与の反応は、１つの溶媒または１つを超える溶媒の混合物中で行うことができる。特定の反応工程に応じて、当業者であれば特定の反応工程に適した溶媒を選択できる。

本発明の化合物の製造は、様々な化学基の保護および脱保護を含み得る。保護および脱保護の必要性、ならびに適当な保護基の選択は、当業者であれば容易に決定できる。保護基の化学は、例えば、その全体が参照によって本明細書に組み入れられている、Ｐ．Ｇ．Ｍ．ＷｕｔｓおよびＴ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、第４版、Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（２００６年）に見出すことができる。

反応は、当技術分野で公知の任意の適当な方法に従って監視できる。例えば、生成物の形成は、核磁気共鳴分光法（例えば、^１Ｈまたは^１３Ｃ）、赤外分光法、分光測光法（例えば、紫外可視）、質量分析法のような分光手段により、または高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）、液体クロマトグラフィ質量分析（ＬＣＭＳ）もしくは薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣ）のようなクロマトグラフ法により監視できる。当業者であれば、高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）［その全体が参照によって本明細書に組み入れられている「Ｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅ ＬＣ−ＭＳ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ：Ｉｍｐｒｏｖｅｄ Ｃｏｍｐｏｕｎｄ Ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｍｅｔｈｏｄ Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ」、Ｋａｒｌ Ｆ．Ｂｌｏｍ、Ｂｒｉａｎ Ｇｌａｓｓ、Ｒｉｃｈａｒｄ Ｓｐａｒｋｓ、Ａｎｄｒｅｗ Ｐ．Ｃｏｍｂｓ、Ｊ．Ｃｏｍｂｉ．Ｃｈｅｍ.２００４年、６（６）、８７４〜８８３］および順相シリカクロマトグラフィを含む様々な方法により、化合物を精製できる。

ＩＩＩ．具体的実施例
本発明を具体的実施例のためにさらに詳細に説明する。以下の実施例は、例示のためだけに提供するものであって、いかなる方法によっても本発明を限定することを意図するものではない。当業者は、変更または修正して、本質的に同じ結果を得ることができる、様々な重要でないパラメーターを容易に認識するであろう。

合成方法
実施例１−１：４−（１’−イソプロピル−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）メチル）ベンゾアミド

ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４−（１’−イソプロピル−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）安息香酸（１００ｍｇ）の溶液に、１，１’−カルボニルジイミダゾール（６４ｍｇ、１．５等量）および（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）メタンアミン（４４ｍｇ、１．５等量）を添加した。混合物を室温で終夜撹拌した。次いで、混合物をＡｃＯＥｔで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液でクエンチした。有機相を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥した。濾過後、残留物を真空下で蒸発させ、粗製黄色泡状物を得た。この物質をＤＣＭ中０〜２０％ＭｅＯＨの溶媒勾配を用いてシリカゲルカートリッジで精製した。４−（１’−イソプロピル−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）メチル）ベンゾアミドを、黄色泡状物（７１．５ｍｇ、７９％）として得た。ＬＣＭＳ ＲＴ＝３．３４分。

実施例１−２：Ｎ−（（５−フルオロピリジン−３−イル）メチル）−４−（１’−イソプロピル−３−メチル−４−オキソ−３，４−ジヒドロスピロ［ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）ベンゾアミド

４−（１’−イソプロピル−２−メチル−１−オキソ−２，４−ジヒドロ−１Ｈ−スピロ［イソキノリン−３，４’−ピペリジン］−７−イル）安息香酸−塩化リチウム塩（１００ｍｇ、０．２６３ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１００ｍｇ、０．２６３ｍｍｏｌ）をＤＭＦ２ｍＬ中で合わせた。ＤＩＥＡ（０．０９ｍＬ）を溶液に添加した。混合物を室温で５分間撹拌した後、（５−フルオロピリジン−３−イル）メタンアミン（０．２８９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液を用いてクエンチし、ＡｃＯＥｔで希釈する前に、室温で終夜撹拌した。水相をＡｃＯＥｔで抽出した後、合わせた有機相を、Ｎａ_２ＳＯ_４を用いて乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。残留物を、ＤＣＭ中０〜２０％ＭｅＯＨの勾配を用いてフラッシュクロマトグラフィで精製した。反応から、Ｎ−（（５−フルオロピリジン−３−イル）メチル）−４−（１’−イソプロピル−３−メチル−４−オキソ−３，４−ジヒドロスピロ［ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）ベンゾアミド１１０ｍｇが生成された。

実施例１−３：３−フルオロ−４−（１’−イソプロピル−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（６−メチルピリジン−３−イル）メチル）ベンゾアミド

３−フルオロ−４−（１’−イソプロピル−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（６−メチルピリジン−３−イル）メチル）ベンゾアミドを、実施例１−１に記載されているのと同じ方法を用いて得た。（ＬＣＭＳ ＲＴ＝２．６５分、ＭＨ＋２５１．４、ｍ＝３０ｍｇ、収率＝２１％）

実施例１−４：６−（４−オキソ−１’−プロピルスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（チアゾール−５−イルメチル）ニコチンアミド

６−（４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（チアゾール−５−イルメチル）ニコチンアミド（１５０ｍｇ、０．３４５ｍｍｏｌ）を炭酸セシウム（１３５ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）および１−ヨードプロパン（５８．６ｍｇ、０．３４５ｍｍｏｌ）とＤＭＦ３ｍＬ中で合わせた。反応混合物を室温で７２時間撹拌した。次いで、混合物を水でクエンチし、ＡｃＯＥｔで希釈した。ＡｃＯＥｔを用いて抽出した後、合わせた有機相を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４を用いて乾燥した。濾過後、溶媒を真空除去し、茶色の半固体を得た。原料をＤＣＭ中０〜１５％ＭｅＯＨの勾配を用いてシリカゲルカートリッジで精製した。所望の画分を合わせ、蒸発させ、褐色の固体を得た（ＬＣＭＳ ＲＴ＝３．０７分、４９ｍｇ、２９％）。

実施例１−５：６−（１’−ブチル−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（チアゾール−５−イルメチル）ニコチンアミド

６−（１’−ブチル−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（チアゾール−５−イルメチル）ニコチンアミドを実施例１−４に記載されているのと同じ方法を用いて得た。（ＬＣＭＳ ＲＴ＝３．２５分、ＭＨ＋４９０．８、褐色の固体としてｍ＝７８ｍｇ、収率＝４８．４％）

実施例１−６：Ｎ−（（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）メチル）−４−（４−オキソ−１’−プロピルスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）ベンゾアミド

Ｎ−（（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）メチル）−４−（４−オキソ−１’−プロピルスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）ベンゾアミドを実施例１−１に記載されているのと同じ方法を用いて得た。（ＬＣＭＳ ＲＴ＝３．２７分、ｍ＝１１ｍｇ、収率＝１２％）

実施例１−７：Ｎ−（（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）メチル）−６−（１’−プロピルスピロ［クロメン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）ニコチンアミド

Ｎ−（（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）メチル）−６−（４−オキソ−１’−プロピルスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）ニコチンアミド（６６ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ１．５ｍＬに溶解した。水素化ホウ素ナトリウム（３３ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ）を１回分の反応混合物に添加した。数分間脱気した後、黄色がかった混合物が無色になった。室温で３時間後、反応を終了した。混合物を水でクエンチし、ＡｃＯＥｔで希釈した。水相をＡｃＯＥｔで抽出し、合わせた有機相を塩水で２回洗浄した。次いで、有機相を、ＭｇＳＯ_４を用いて乾燥し、真空下で濃縮した。

次いで、原料に水８ｍＬおよび濃縮Ｈ_２ＳＯ_４２ｍＬを添加した。混合物を勢いよく撹拌し、８０℃で加熱した。この温度で４８時間後、混合物を水で希釈し、固体Ｎａ_２ＣＯ_３を用いて塩基性化した。水相をＡｃＯＥｔで抽出し、合わせた有機相を塩水で２回洗浄した。濾過および蒸発後、粗製残留物を、ＤＣＭ中２０％ＭｅＯＨを用いてシリカゲルカートリッジで精製した。所望の画分を合わせ、真空下で濃縮した。Ｎ−（（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）メチル）−６−（１’−プロピルスピロ［クロメン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）ニコチンアミドを白色固体として得た（２１ｍｇ、３３．３％、ＬＣＭＳ ＲＴ＝３．３０分、ＭＨ＋４５９．３）。

実施例１−８：６−（１’−（３−メトキシプロピル）スピロ［クロメン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（チアゾール−５−イルメチル）ニコチンアミド

６−（１’−（３−メトキシプロピル）スピロ［クロメン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（チアゾール−５−イルメチル）ニコチンアミドを実施例１−７に記載されているのと同じ方法を用いて得た。

実施例１−９：６−（１’−イソプロピル−３−メチル−４−オキソ−３，４−ジヒドロスピロ［ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル）ニコチンアミド

６−（１’−イソプロピル−３−メチル−４−オキソ−３，４−ジヒドロスピロ［ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル）ニコチンアミドを実施例１−２に記載されているのと同じ方法を用いて得た。

実施例１−１０：６−（１’−イソプロピル−３−メチル−４−オキソ−３，４−ジヒドロスピロ［ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（チアゾール−５−イルメチル）ニコチンアミド

６−（１’−イソプロピル−３−メチル−４−オキソ−３，４−ジヒドロスピロ［ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（チアゾール−５−イルメチル）ニコチンアミドを実施例１−２に記載されているのと同じ方法を用いて得た。

実施例１−１１：４−（１’−イソプロピル−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（５−メチルイソオキサゾール−３−イル）メチル）ベンゾアミド

４−（１’−イソプロピル−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（５−メチルイソオキサゾール−３−イル）メチル）ベンゾアミドを実施例１−１に記載されているのと同じ方法を用いて得た。（ＬＣＭＳ ＲＴ＝３．３５分、ｍ＝４９．７ｍｇ、収率＝３９％）。

実施例１−１２：６−（１’−イソプロピル−３−メチル−４−オキソ−３，４−ジヒドロスピロ［ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）メチル）ニコチンアミド

６−（１’−イソプロピル−３−メチル−４−オキソ−３，４−ジヒドロスピロ［ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）メチル）ニコチンアミドを実施例１−２に記載されているのと同じ方法を用いて得た。

実施例１−１３：式（Ｉ）の追加化合物
式（Ｉ）の追加化合物を、当業者には容易に明らかになる、上に記載されているものと同様の方法に従って合成した。これらの化合物を以下の表１に要約する。

インビトロ実験
実施例２−１：ＮＡＭＰＴ酵素活性の阻害
組換えＮＡＭＰＴ酵素（ＭＢＬ）を、阻害剤の不在下または存在下で簡単にプレインキュベートした後、ニコチンアミドを添加した。酵素反応を３７℃で６時間進行させた。反応を終了し、ＮＭＮ反応生成物を、Ｚｈａｎｇ ＲＹ、Ｑｉｎ Ｙ、Ｌｖ ＸＱ、Ｗａｎｇ Ｐ、Ｘｕ ＴＹ、Ｚｈａｎｇ Ｌ、Ｍｉａｏ ＣＹ．、Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２０１１年５月１日；４１２（１）：１８〜２５に記載の方法を用いて検出した。

５０％阻害濃度（ＩＣ_５０）は、最大活性５０％が阻害された濃度である。

代表的な化合物に対するこのアッセイの結果を以下の表２に示す。

実施例２−２：Ｂ細胞に対する抗増殖活性
製造業者説明書に従ってＣｅｌｌＴｉｔｅｒＧｌｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を用いて生存率を決定する前に、Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ（Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ、ＤＥ）から得た新鮮な初代ヒトＢ細胞をＡＩＭ−Ｖ培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）中１ｍｌ当たり１×１０^６細胞まで希釈し、抗ＩｇＭ（１０μｇ／ｍｌ）（ＫＰＬ）で、阻害剤の不在下または存在下で、３７℃／５％ＣＯ_２で、７２時間刺激し
た。

５０％阻害濃度（ＩＣ_５０）は、最大活性５０％が阻害された濃度である。

代表的な化合物に対するこのアッセイの結果を以下の表２に示す。

実施例２−３：Ｔ細胞に対する抗増殖活性
製造業者説明書に従ってＣｅｌｌＴｉｔｅｒＧｌｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を用いて生存率を決定する前に、Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ（Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ、ＤＥ）から得た新鮮な初代ヒトＴ細胞をＡＩＭ−Ｖ培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）中１ｍｌ当たり１×１０^６細胞まで希釈し、ＣＤ３／ＣＤ２８ビーズ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で、阻害剤の不在下または存在下で、３７℃／５％ＣＯ_２で、７２時間刺激した。

５０％阻害濃度（ＩＣ_５０）は、最大活性５０％が阻害された濃度である。

代表的な化合物に対するこのアッセイの結果を以下の表２に示す。

実施例２−４：様々な細胞株に対する活性
製造業者説明書に従ってＣｅｌｌＴｉｔｅｒＧｌｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を用いて生存率を決定する前に、白血病／リンパ腫細胞株（ＡＴＣＣ）を業者推奨の培地中で希釈し、阻害剤の不在下または存在下で、３７℃／５％ＣＯ_２で、７２時間インキュベートした。研究したヒト細胞株としては、急性Ｔ細胞白血病（ＪＵＲＫＡＴ）、慢性骨髄性白血病（Ｋ５６２）およびＢ細胞急性リンパ性白血病（ＮＡＬＭ６およびＳＵＰ−Ｂ１５）が挙げられる。

選択した化合物のこれらの細胞株に対する抗増殖活性を以下の表３に示す。

実施例２−５：作用機構
製造業者説明書に従ってＣｅｌｌＴｉｔｅｒＧｌｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を用いて生存率を決定する前に、Ｓｕｐ−Ｂ１５細胞（ＡＴＣＣ）を、２００μＭニコチンアミドモノヌクレオチド（ＮＭＮ）（Ｓｉｇｍａ）欠損または含有培地中で、阻害剤の不在下または存在下で、３７℃／５％ＣＯ_２で、７２時間インキュベートした。

化学プロテオミクス。Ｓｕｐ−Ｂ１５細胞抽出物を、４−（１’−イソプロピル−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）メチル）ベンゾアミドのビオチン化誘導体でインキュベートした後、ストレプトアビジンビーズ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で化合物／タンパク質複合体を回収した。徹底的な洗浄後、結合タンパク質を、遊離（非ビオチン化）４−（１’−イソプロピル−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）メチル）ベンゾアミドまたは不活性類似体を用いて溶出した。ＳＤＳ−ＰＡＧＥ後、１つの顕著なバンドを切り取り、ＬＣ／ＭＳによりＮＡＭＰＴと同定した。

４−（１’−イソプロピル−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）メチル）ベンゾアミドの分子標的は、ニコチンアミドホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＮＡＭＰＴ）であり、その生成物はニコチンアミドモノヌクレオチド（ＮＭＮ）である。４−（１’−イソプロピル−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）メチル）ベンゾアミドの抗増殖活性は、ＮＭＮにより中和され、４−（１’−イソプロピル−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）メチル）ベンゾアミドはＮＡＭＰＴ酵素活性を強く阻害する。式（Ｉ）の４５シリーズのメンバーすべてをＮＭＮでレスキューできるため（図１）、オンターゲットの選択的抗増殖活性が、医薬品化学活動を通じて維持された。

実施例２−６：インフルエンザおよびＲＳＶ感染細胞に対する活性
呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）の阻害を決定するために、ベロ細胞を９６ウェルプレートに８０％の密集度まで撒いた。化合物を、１０μＭで始まり３ｎＭに至る半対数希釈で、３重反復で添加し、細胞と１時間インキュベートさせた。ウイルスをウェルに１０のＭＯＩで添加し、７２時間複製させた。ウイルス誘導細胞変性効果（ＣＰＥ）から保護された生存細胞を、蛍光生体染色色素を用いて検出した。ＣＰＥの阻害のＥＣ_５０を、ロバストフィット法を用いて決定した。

インフルエンザウイルスの阻害を決定するために、ＭＤＣＫ細胞を９６ウェルプレートに８０％の密集度で撒いた。化合物を、１０μＭで始まり３ｎＭに至る半対数希釈で、３重反復で添加し、細胞と１時間インキュベートさせた。ウイルスをウェルに１０のＭＯＩで添加し、７２時間複製させた。ウイルス誘導細胞変性効果（ＣＰＥ）から保護された生存細胞を、蛍光生体染色色素を用いて検出した。ＣＰＥの阻害のＥＣ_５０を、ロバストフィット法を用いて決定した。

インビボ実験
実施例３−１：薬物動態研究
実施例３−１−ａ：Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットの経口および静脈内薬物動態
試験化合物である１’−イソプロピル−３−メチル−６−（４−（３−（チアゾール−５−イル）プロパノイル）フェニル）スピロ［ベンゾ［ｅ］［１，３］オキサジン−２，４’−ピペリジン］−４（３Ｈ）−オンおよび４−（１’−イソプロピル−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）メチル）ベンゾアミドの経口（ＰＯ）および静脈内（ＩＶ）薬物動態をオスのＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットで評価した。研究計画の概要を以下の表４に示す。試験化合物を投与する前に血液サンプルを採取した。動物にＴ_０で投与した；次の血液サンプルを、投与の２、５、１５および３０分後ならびに１、２、４、６、８および２４時間後に採取した。血液サンプルを頸動脈カニューレから採取した。サンプルを１３，０００ｒｐｍ、４℃で５分間遠心分離した。血液サンプルの遠心分離後、血漿サンプルを９６ウェルプレートに採取した。試験化合物の血漿濃度をＬＣ−ＭＳ／ＭＳで分析した。

静脈内および経口の両方で投与された試験化合物はよく耐えた。不都合な身体的異常は観察されなかった。試験化合物に関して経時的に測定したときの静脈血漿濃度と比較した経口血漿濃度のグラフによる比較を、図２および図３に示す。

実施例３−１−ｂ：マウスでの経口および静脈内薬物動態
試験化合物である４−（１’−イソプロピル−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）メチル）ベンゾアミドの経口および静脈内薬物動態を、メスのＮＯＤ．Ｃｇ−Ｐｒｋｄｃ^ｓｃｉｄＩＩ２^{ｒｇｔｍ１ＷＪＩ}／ＳｚＪマウスで評価した。研究計画の概要を以下の表５に示す。血液サンプルを、試験化合物の投与前、投与後の指定した時点、および動物の屠殺後に採取した。生存中血液サンプルを、尾部の切れ目または顔面静脈から採取した；末期血液サンプルを、吸入麻酔後に、心穿刺により採取した。サンプルをＫ２ＥＤＴＡ管に採取し、３０００ｇ、５℃、採取１時間以内の遠心分離により血漿になるまで、湿った氷上に保管した。遠心分離および−８０℃での保管後、血漿サンプルを９６ウェルプレートに採取した。試験化合物の血漿濃度をＬＣ−ＭＳ／ＭＳで分析した。

顕著な臨床兆候は研究期間中観察されなかった。試験化合物に関して経時的に測定したときの静脈血漿濃度と比較した経口血漿濃度のグラフによる比較を図４に示す。

実施例３−２：効能研究
実施例３−２−ａ：ＮＡＬＭ６白血病研究
４−（１’−イソプロピル−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）メチル）ベンゾアミドを、ＮＡＬＭ６白血病モデルで試験した。図６に示すように、（ＧＥＮＺ−６８２９４５としても知られる）４−（１’−イソプロピル−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（３−メチルイソオキサゾール５−イル）メチル）ベンゾアミドの腹腔内投与により、ケア（クロファラビン）の標準を超えて、この異種移植モデルで顕著な生存利益が得られた。５×１０^６ＮＡＬＭ−６細胞を、メスＣＢ１７ＳＣＩＤ／Ｃｒｌマウス（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ）に尾静脈から注射した。１週間後、４−（１’−イソプロピル−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）メチル）ベンゾアミドを、１日２回を３５日間腹腔内注射することにより投与した。クロファラビンを、１日１回を５日間４週間腹腔内注射することにより１日１回投与した。研究の終点は生存期間であり、麻痺またはカヘキシーのような重症の全身兆候が出現した時点で、マウスを屠殺した。結果を図５に示す。

実施例３−２−ｂ：ＨＣＴ１１６腫瘍増殖研究
腫瘍増殖研究：メスの無胸腺マウス（Ｃｒｌ：ＮＵ（Ｎｃｒ）−Ｆｏｘｎ１_ｎｕ、Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ）（ｎ＝１０／群）に５×１０^６ＨＣＴ１１６細胞を注射し、１００ｍｍ^３の平均的な腫瘍サイズで治療を開始した。４−（１’−イソプロピル−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）メチル）ベンゾアミドおよびビヒクル対照を、１日２回を８日間経口投与した。腫瘍サイズをカリパスで週２回測定した。

腫瘍ＮＡＤ測定：メスの無胸腺マウス（Ｃｒｌ：ＮＵ（Ｎｃｒ）−Ｆｏｘｎ１_ｎｕ、Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ）（ｎ＝３／群）に５×１０^６ＨＣＴ１１６細胞を注射し、２５０〜４００ｍｍ^３の腫瘍サイズで治療を開始した。４−（１’−イソプロピル−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）メチル）ベンゾアミドおよびビヒクル対照を、１日２回を１．５日間経口投与した（３用量）。最後の用量の６時間後、腫瘍を摘出し、洗浄し、切断し、秤量し、瞬間冷凍した。ＬＣ／ＭＳでのＮＡＤ含有量の分析前に、腫瘍部分を、急速冷凍／解凍／超音波処理の３サイクルでエタノール／ＰＢＳ（９０：１０）に抽出した。データを図６に示す。

４−（１’−イソプロピル−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）メチル）ベンゾアミドをＨＣＴ１１６固体腫瘍モデルでも試験した。４−（１’−イソプロピル−４−オキソスピロ［クロマン−２，４’−ピペリジン］−６−イル）−Ｎ−（（３−メチルイソオキサゾール−５−イル）メチル）ベンゾアミドの１日２回の経口投与により、腫瘍増殖が著しく遅延し（図７）、これは投与後少なくとも１週間は存続し、治療群の死亡率１０％によりストップした。

ＩＶ．製剤、剤形および投与
本発明の化合物は、医薬品として用いられるとき、医薬組成物の形態で投与される。したがって、本発明の開示内容は、式（Ｉ）の化合物もしくはその薬学的に許容される塩を含む組成物、またはその実施形態のいずれか、および少なくとも１種の薬学的に許容される担体を提供する。これらの組成物は、医薬分野で周知の方式で製造でき、局所的または全身的治療が指示されるかどうか、および治療すべき領域に応じて、様々な経路で投与できる。投与は、局所（経皮、表皮、眼内、ならびに鼻腔内、膣内および直腸送達を含む経粘膜を含む）、肺（例えば、噴霧器によるものを含む、粉末またはエアロゾルの吸入またはガス注入によって；気管内または鼻腔内）、経口または非経口であってよい。非経口投与としては、静脈内、動脈内、皮下、腹腔内、筋肉内、注射もしくは注入；または頭蓋内、例えば、クモ膜下腔内もしくは脳室内投与が挙げられる。非経口投与は、単回ボーラス用量の形態であってもよく、または例えば、連続灌流ポンプによるものであってもよい。局所投与のための医薬組成物および製剤としては、経皮パッチ、軟膏、ローション、クリーム、ゲル、ドロップ、坐剤、スプレー、液体および粉末を挙げることができる。従来の医薬担体、水性、粉末または油性基材、増粘剤などが必要であるか、または望ましい場合もある。

本発明は、活性成分として、本発明の化合物またはその薬学的に許容される塩を、１つまたはそれ以上の薬学的に許容される担体（賦形剤）と組み合わせて含有する、医薬組成物も含む。いくつかの実施形態において、組成物は局所投与に適している。本発明の組成物の製造において、活性成分を、典型的には、賦形剤と混合するか、賦形剤で希釈するか、または例えば、カプセル、サシェ、紙もしくは他の容器の形態のこのような担体内に封入する。賦形剤を希釈剤として利用するとき、それは、活性成分のビヒクル、担体または媒体として作用する固体、半固体または液体物質であってよい。したがって、組成物は、錠剤、丸剤、粉末、ロゼンジ、サシェ、カシェ、エリキシル、懸濁液、エマルジョン、溶液、シロップ、エアロゾル（固体としてまたは液体媒体中）、例えば、活性化合物を最大１０重量％含有する軟膏、軟および硬ゼラチンカプセル、坐剤、滅菌注射溶液および滅菌包装化粉末の形態であってよい。

、
製剤の製造において、他の成分と合わせる前に、活性化合物を粉砕して、適当な粒径にすることができる。活性化合物が実質的に不溶性である場合、２００メッシュ未満の粒径に粉砕できる。活性化合物が実質的に水溶性である場合、粒径を粉砕により調節し、例えば、約４０メッシュの製剤において、実質的に均一な分布を得ることができる。

本発明の化合物を、湿式粉砕のように公知の粉砕手順を使用して粉砕し、錠剤の形態および他の製剤型に適した粒径を得ることができる。本発明の化合物の微粉化（ナノ粒子）調製品は、当技術分野で公知の方法で製造できる。例えば、国際公開第２００２／０００１９６号パンフレットを参照。

適当な賦形剤のいくつかの例としては、乳糖、デキストロース、ショ糖、ソルビトール；マンニトール、デンプン、アカシアガム、リン酸カルシウム、アルギン酸塩、トラガカント、ゼラチン、ケイ酸カルシウム、微結晶セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、水、シロップおよびメチルセルロースが挙げられる。製剤としては、タルク、ステアリン酸マグネシウムおよび鉱物油のような潤滑剤；湿潤剤；乳化剤および懸濁化剤；安息香酸メチルおよびヒドロキ安息香酸プロピルのような保存剤；ならびに甘味剤および香味剤をさらに挙げることができる。本発明の組成物を、当技術分野で公知の手順を用いて患者に投与した後、活性成分の迅速、持続または遅延放出がもたらされるように製剤化してもよい。

いくつかの実施形態において、医薬組成物は、ケイ化微結晶セルロース（ＳＭＣＣ）および本明細書に記載の少なくとも１つの化合物、またはその薬学的に許容される塩を含む。いくつかの実施形態において、ケイ化微結晶セルロースは、微結晶セルロースを約９８％（ｗ／ｗ）および二酸化ケイ素を約２％（ｗ／ｗ）含む。

いくつかの実施形態において、組成物は、本明細書に記載の少なくとも１つの化合物、またはその薬学的に許容される塩、および少なくとも１つの薬学的に許容される担体を含む、持続放出組成物である。いくつかの実施形態において、組成物は、本明細書に記載の少なくとも１つの化合物、またはその薬学的に許容される塩、ならびに微結晶セルロース、ラクトース一水和物、ヒドロキシプロピルメチルセルロースおよびポリエチレンオキシドから選択される少なくとも１つの成分を含む。いくつかの実施形態において、組成物は、本明細書に記載の少なくとも１つの化合物、またはその薬学的に許容される塩、ならびに微結晶セルロース、ラクトース一水和物、およびヒドロキシプロピルメチルセルロースを含む。いくつかの実施形態において、組成物は、本明細書に記載の少なくとも１つの化合物、またはその薬学的に許容される塩、ならびに微結晶セルロース、ラクトース一水和物、およびポリエチレンオキシドを含む。いくつかの実施形態において、組成物は、ステアリン酸マグネシウムまたは二酸化ケイ素をさらに含む。いくつかの実施形態において、微結晶セルロースは、Ａｖｉｃｅｌ ＰＨ１０２（商標）である。いくつかの実施形態において、ラクトース一水和物は、Ｆａｓｔ−ｆｌｏ３１６（商標）である。いくつかの実施形態において、ヒドロキシプロピルメチルセルロースは、ヒドロキシプロピルメチルセルロース２２０８Ｋ４Ｍ［例えば、Ｍｅｔｈｏｃｅｌ Ｋ４Ｍ Ｐｒｅｍｉｅｒ（商標）］および／またはヒドロキシプロピルメチルセルロース２２０８Ｋ１００ＬＶ［例えば、Ｍｅｔｈｏｃｅｌ Ｋ００ＬＶ（商標）］である。いくつかの実施形態において、ポリエチレンオキシドは、ポリエチレンオキシドＷＳＲ１１０５［例えば、Ｐｏｌｙｏｘ ＷＳＲ１１０５（商標）］である。

いくつかの実施形態において、湿式造粒法を使用して組成物を製造する。

いくつかの実施形態において、乾式造粒法を使用して組成物を製造する。組成物は単位剤形に製剤化でき、各投与量は、活性成分を約５〜約１０００ｍｇ（１ｇ）、より通常は約１００ｍｇ〜約５００ｍｇ含有する。いくつかの実施形態において、各投与量は、活性成分を約１０ｍｇ含有する。いくつかの実施形態において、各投与量は、活性成分を約５０ｍｇ含有する。

いくつかの実施形態において、各投与量は、活性成分を約２５ｍｇ含有する。「単位剤形」という用語は、ヒト対象および他の哺乳動物のための単位投与量として適した物理的に分離した単位を指し、各単位は、適当な医薬賦形剤に関連して所望の治療効果が得られるように計算された、既定量の活性物質を含有する。

医薬組成物を製剤化するために用いられる成分は、高純度であり、潜在的に有害な混入物を実質的に含まない（例えば、少なくともＮａｔｉｏｎａｌ Ｆｏｏｄグレード、一般に少なくとも分析グレード、およびより典型的には少なくとも医薬品グレード）。

特にヒト消費に関して、組成物は、好ましくは、米国食品医薬品局の適当な規定に定義されているＧｏｏｄ Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ Ｐｒａｃｔｉｃｅ基準に基づき製造されるか、または製剤化される。例えば、適当な製剤は、滅菌であり得るか、および／または実質的に等張性であり得るか、および／または米国食品医薬品局のＧｏｏｄ Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ Ｐｒａｃｔｉｃｅ規制すべてに完全に適合し得る。

活性化合物は、広範な投与範囲にわたって有効であり得、一般に治療有効量で投与される。しかし、実際に投与される化合物の量は、治療すべき状態、選択した投与経路、投与される実際の化合物、個々の患者の年齢、体重および応答、患者の症候の重篤度などを含む、当該状況に従って、医師により通常決定されることが理解されるであろう。

本発明の化合物の治療投与量は、例えば、治療を行うための特定の用途、化合物の投与方式、患者の健康および状態、ならびに担当医の判断により変化し得る。医薬組成物中の本発明の化合物の割合または濃度は、投与量、化学特性（例えば、疎水性）および投与経路を含む、いくつかの要因に応じて変化し得る。例えば、本発明の化合物は、非経口投与のために化合物を約０．１〜約１０％（ｗ／ｖ）含有する生理学的緩衝水溶液中で得ることができる。いくつかの典型的な用量範囲は、１日当たり体重の約１μｇ／ｋｇ〜約１ｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態において、用量範囲は、１日当たり体重の約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇである。投与量は、疾患または障害の種類および進行の程度、特定の患者の全体的な健康状態、選択した化合物の生物学的効果比、賦形剤の配合、およびその投与経路のような可変要素に依存する可能性が高い。有効な用量は、インビトロまたは動物モデル試験系からの用量反応曲線から外挿できる。

錠剤のような固体組成物を製造するために、主活性成分を医薬賦形剤と混合し、本発明の化合物の均質な混合物を含有する固体予備処方組成物を形成する。これらの予備処方組成物を均質と称するとき、組成物を、錠剤、丸剤およびカプセルのような均等に有効な単位剤形に容易に細分できるように、活性成分は、典型的には、組成物全体にわたって均一に分散されている。次いで、この固体予備処方組成物を、本発明の活性成分を例えば、約０．１〜約１０００ｍｇ含有する、上に記載の種類の単位剤形に細分する。

本発明の錠剤または丸剤を被覆するか、または他の方法で調合して、持効性作用の利点を与える剤形を提供することができる。例えば、錠剤または丸剤は、内側投与成分と外側投与成分を含み得、後者は、前者の外被の形態である。２つの成分は、胃での崩壊に耐え、内側成分を無傷の状態で十二指腸に到達させるか、またはその放出を遅延させる働きをする、腸溶性層によって分離される。様々な物質が、このような腸溶性層またはコーティング用に使用でき、このような物質は、多くのポリマー酸およびポリマー酸とシェラック、セチルアルコールおよび酢酸セルロースのような物質との混合物を含む。

本発明の化合物および組成物を経口または注射による投与のために組み込むことができる液体形態としては、水溶液、適当に香味をつけたシロップ剤、水性または油性懸濁液、綿実油、ゴマ油、ココナッツ油またはピーナッツ油のような食用油で香味をつけたエマルジョン、ならびにエリキシルおよび同様の医薬ビヒクルが挙げられる。

吸入またはガス注入のための組成物は、薬学的に許容される水性もしくは有機溶媒またはそれらの混合物中の溶液および懸濁液、ならびに粉末を含む。液体または固体組成物は、上に記載の適当な薬学的に許容される賦形剤を含有し得る。いくつかの実施形態において、組成物は、局所または全身効果のために、経口または経鼻呼吸経路によって投与される。組成物を、不活性ガスの使用により噴霧してもよい。噴霧溶液を、噴霧デバイスから直接吸入してもよく、または噴霧デバイスを顔用マスク、テントまたは間欠的陽圧呼吸装置に取り付けてもよい。溶液、懸濁液または粉末組成物は、製剤を適当な方式で送達するデバイスから、経口または経鼻投与できる。局所製剤は、１つまたはそれ以上の従来の担体を含有し得る。いくつかの実施形態において、軟膏は、水、および液体パラフィン、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、プロピレングリコール、白色ワセリン（登録商標）（ワセリン）などから選択される、１つまたはそれ以上の疎水性担体を含有し得る。クリームの担体組成物は、水をベースに、グリセリンおよび１つまたはそれ以上の他の成分、例えば、モノステアリン酸グリセリン、ＰＥＧ−モノステアリン酸グリセリンおよびセチルステアリルアルコールと組み合わせることができる。ゲルは、グリセリン、ヒドロキシエチルセルロースなどの他の成分と適切には組み合わせて、イソプロピルアルコールおよび水を用いて製剤化できる。いくつかの実施形態において、局所製剤は、本発明の化合物を少なくとも約０．１重量％、少なくとも約０．２５重量％、少なくとも約０．５重量％、少なくとも約１重量％、少なくとも約２重量％または少なくとも約５重量％含有する。局所製剤は、選択される適応症、例えば、乾癬または他の皮膚状態の治療のための指示書を場合により伴って、例えば、１００ｇ用のチューブ内に適切にパッケージできる。

患者に投与される化合物または組成物の量は、投与されているもの、予防または治療のような投与目的、患者の状況、投与方式などに応じて変化する。治療用途において、組成物は、疾患をすでに患っている患者に、疾患の症候およびその合併症を治癒するか、または少なくとも部分的に抑えるのに十分な量で投与される。有効な用量は、疾患の重篤度、患者の年齢、体重および全身状態などのような要因に応じて、治療している病態ならびに担当医の判断に依存する。

患者に投与される組成物は、上に記載の医薬組成物の形態であってよい。これらの組成物を、従来の滅菌技法により滅菌してもよく、または滅菌濾過してもよい。水溶液を、そのまままたは凍結乾燥して使用のためにパッケージすることができ、凍結乾燥調製品は、投与前に滅菌水性担体と合わせられる。配合調製品のｐＨは、典型的には３〜１１、より好ましくは５〜９、最も好ましくは７〜８である。前記の賦形剤、担体または安定剤の一定の使用により、医薬塩が形成されることが理解されるであろう。

本発明の化合物の治療投与量は、例えば、治療を行うための特定の用途、化合物の投与方式、患者の健康および状態、ならびに担当医の判断により変化し得る。医薬組成物中の本発明の化合物の割合または濃度は、投与量、化学特性（例えば、疎水性）および投与経路を含む、いくつかの要因に応じて変化し得る。例えば、本発明の化合物は、非経口投与のために化合物を約０．１〜約１０％（ｗ／ｖ）含有する生理学的緩衝水溶液中で得ることができる。いくつかの典型的な用量範囲は、１日当たり体重の約１μｇ／ｋｇ〜約１ｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態において、用量範囲は、１日当たり体重の約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇである。投与量は、疾患または障害の種類および進行の程度、特定の患者の全体的な健康状態、選択した化合物の生物学的効果比、賦形剤の配合、およびその投与経路のような可変要素に依存する可能性が高い。有効な用量は、インビトロまたは動物モデル試験系からの用量反応曲線から外挿できる。

Ｖ．標識化合物およびアッセイ方法
本発明の化合物は、実施例２：インビトロ実験および実施例３：インビボ実験に記載の生物学的方法の検討でさらに有用であり得る。したがって、本発明の別の態様は、撮像技法においてだけでなく、ヒトを含む、組織サンプル中のＮＡＭＰＴを位置特定し、定量化するため、および標識化合物の阻害結合によりＮＡＭＰＴリガンドを同定するための、インビトロとインビボ両方のアッセイでも有用である、本発明の標識（放射性標識、蛍光標識など）化合物に関する。したがって、本発明は、このような標識化合物を含有する、ＮＡＭＰＴアッセイを含む。

本発明は、本発明の同位体標識化合物をさらに含む。「同位体標識」または「放射性標識」化合物は、１個またはそれ以上の原子が、典型的には自然界で見出される（すなわち、自然発生の）原子質量または質量数とは異なる原子質量または質量数を有する原子によって置き換えられているか、または置換されている本発明の化合物である。本発明の化合物中に組み込むことができる適当な放射性核種（すなわち、放射性同位体）としては、^３Ｈ（トリチウムのＴとしても表記される）、^１１Ｃ、^１３Ｃ、^１４Ｃ、^１３Ｎ、^１５Ｎ、^１５Ｏ、^１７Ｏ、^１８Ｏ、^１８Ｆ、^３５Ｓ、^３６Ｃｌ、^８２Ｂｒ、^７５Ｂｒ、^７６Ｂｒ、^７７Ｂｒ、^１２３Ｉ、^１２４Ｉ、^１２５Ｉおよび^１３１Ｉが挙げられるが、これらに限定されない。本発明の放射性標識化合物に組み込まれる放射性核種は、放射性標識化合物の特定の用途に依存する。例えば、インビトロＰｉｍキナーゼ標識および競合アッセイには、^３Ｈ、^１４Ｃ、^８２Ｂｒ、^１２５Ｉ、^１３１Ｉ、^３５Ｓを組み込む化合物が一般に最も有用である。放射性造影用途には、^１１Ｃ、^１８Ｆ、^１２５Ｉ、^１２３Ｉ、^１２４Ｉ、^１３１Ｉ、^７５Ｂｒ、^７６Ｂｒまたは^７７Ｂｒが一般に最も有用である。

「放射性標識」または「標識化合物」は、少なくとも１つの放射性核種を組み込んだ化合物であることを理解されたい。いくつかの実施形態において、放射性核種は、^３Ｈ、^１４Ｃ、^１２５Ｉ、^３５Ｓおよび^８２Ｂｒからなる群から選択される。いくつかの実施形態において、化合物は、１、２または３個のジュウテリウム原子を組み込む。有機化合物に放射性同位体を組み込む合成方法は当技術分野で公知である。

具体的には、本発明の標識化合物をスクリーニングアッセイに使用して、化合物を同定および／または評価することができる。例えば、標識される、新たに合成されたか、または同定された化合物（すなわち、試験化合物）は、標識の追跡から、ＮＡＭＰＴと接触したときのその濃度変化を監視することにより、ＮＡＭＰＴを結合するその能力について評価できる。例えば、試験化合物（標識）は、ＮＡＭＰＴに結合することが知られる別の化合物（即ち、標準化合物）の結合を低減するその能力について評価できる。したがって、ＮＡＭＰＴへの結合に対して標準化合物と競合する試験化合物の能力は、その結合親和性に直接相関する。逆に、いくつかの他のスクリーニングアッセイにおいて、標準化合物が標識され、試験化合物は標識されない。したがって、標識された標準化合物の濃度を監視して、標準化合物と試験化合物との間の競合を評価し、このようにして試験化合物の相対的結合親和性を確認する。

ＶＩ．キット
本発明の開示内容は、治療有効量の式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物を含有する１つもしくはそれ以上の容器を含む、例えば、癌のような、ＮＡＭＰＴ関連疾患もしくは障害の治療もしくは予防で有用な医薬キット、またはその実施形態のいずれかも含む。このようなキットが、例えば、１つまたはそれ以上の薬学的に許容される担体を有する容器、追加の容器などの、様々な従来の医薬キット構成要素の１つまたはそれ以上をさらに含み得ることは、当業者には容易に明らかになるであろう。投与される成分の量、投与のためのガイドライン、および／または成分を混合するためのガイドラインを示す、挿入物またはラベルのいずれかとしての使用説明書もキットに含まれる。

本発明のいくつかの実施形態を記載したが、本発明の精神および範囲を逸脱せず、様々な変形をなし得ることが理解されるであろう。したがって、他の実施形態は、以下の特許請求の範囲内である。

Claims (36)

1. 式（Ｉ）：
   

   

   ［式中、
   Ｙ_１は−ＣＲ_１４−またはＮであり、
   Ｙ_２はＣＲ_１５またはＮであり、
   Ｙ_３は−Ｃ（Ｏ）−であり、
   Ｙ_４は−ＣＨ_２もしくは−Ｎ（Ｒ_１６）−であるか、または
   Ｙ_３およびＹ_４は一緒になって−Ｃ（Ｒ_１７）＝Ｃ（Ｒ_１８）−であり、
   Ｘはアリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルまたはアミドであり、
   ＺはＣ_２以上のアルキルまたはアルコキシアルキルであり、
   ＲはＨまたはＣ_１〜Ｃ_６アルキルであり、
   Ｒ_１〜Ｒ_１８は独立に−ＨまたはＣ_１〜Ｃ_６アルキルであり、
   ＱはＣまたはＮであり；ただし、ＱがＮであり、ＲがＨであるとき、Ｘは
   

   

   ではない］
   の化合物またはその薬学的に許容される塩。
2. Ｘはフェニルまたは置換フェニルである、請求項１に記載の化合物。
3. Ｘはフルオロフェニルである、請求項２に記載の化合物。
4. ＲはＨである、請求項１に記載の化合物。
5. Ｘはピリジニルまたは置換ピリジニルである、請求項１に記載の化合物。
6. Ｘはフルオロピリジニルまたはメチルピリジニルである、請求項５に記載の化合物。
7. Ｙ_１はＣＨである、請求項１に記載の化合物。
8. Ｙ_１はＮである、請求項１に記載の化合物。
9. Ｙ_２はＣＨである、請求項１に記載の化合物。
10. Ｙ_２はＮである、請求項１に記載の化合物。
11. Ｙ_４は−ＣＨ_２−である、請求項１に記載の化合物。
12. Ｙ_３およびＹ_４は一緒になって−Ｃ（Ｒ_１７）＝Ｃ（Ｒ_１８）−である、請求項１１に記載の化合物。
13. Ｙ_３およびＹ_４は一緒になって−Ｃ（Ｒ_１７）＝Ｃ（Ｒ_１８）−である、請求項１に記載の化合物。
14. ＺはＣ_２〜Ｃ_４アルキルである、請求項１に記載の化合物。
15. Ｚはプロピルである、請求項１に記載の化合物。
16. Ｚはイソプロピルである、請求項１５に記載の化合物。
17. Ｚはアルコキシアルキルである、請求項１に記載の化合物。
18. Ｚはシクロブチルメチルである、請求項１に記載の化合物。
19. Ｒ_１〜Ｒ_１８は各々−Ｈである、請求項１に記載の化合物。
20. Ｒ_１７およびＲ_１８は各々−Ｈである、請求項１に記載の化合物。
21. 以下の式
    

    

    を有する化合物。
22. 以下の式
    

    

    を有する化合物。
23. 免疫性疾患の治療的調節のための活性化および／または増殖Ｂ細胞の阻害方法であって、請求項１、請求項２１または請求項２２に記載の化合物を含む組成物を、それを必要とする患者に投与することを含む、前記方法。
24. 免疫性疾患は紅斑性狼瘡、リウマチ性関節炎、強皮症、乾癬、シェーグレン症候群、１型糖尿病または多発性硬化症である、請求項２３に記載の方法。
25. 移植片の免疫抑制の誘導、調節または維持方法であって、請求項１に記載の化合物を含む組成物を、それを必要とする患者に投与することを含む、前記方法。
26. 治療用バイオ医薬品に対する免疫反応の抑制または調節方法であって、請求項１に記載の化合物を含む組成物を、それを必要とする患者に投与することを含む、前記方法。
27. 治療用バイオ医薬品は組換えタンパク質、核酸、抗体またはペプチドである、請求項２６に記載の方法。
28. 腫瘍細胞の増殖の阻害方法であって、請求項１に記載の化合物を含む組成物を、それを必要とする患者に投与することを含む、前記方法。
29. 腫瘍細胞はＮＡＲＰＴ欠損である、請求項２８に記載の方法。
30. 白血病およびリンパ腫の治療方法であって、請求項１に記載の化合物を含む組成物を、それを必要とする患者に投与することを含む、前記方法。
31. 白血病は急性リンパ性白血病である、請求項３０に記載の方法。
32. ウイルス感染症の治療方法であって、請求項１に記載の化合物を含む組成物を、それを必要とする患者に投与することを含む、前記方法。
33. ウイルス感染症は、インフルエンザ、ＲＳＶ、ＨＳＶ、ＨＣＶ、ＨＢＶ、ＨＰＶ、ＨＩＶ、ＣＭＶ、ＥＢＯＶまたはＥＢＶから選択される、請求項３２に記載の方法。
34. Ｂ細胞の形質細胞への分化の阻害方法であって、Ｂ細胞と請求項１、請求項２０または請求項２１に記載の化合物とを接触させることを含む、前記方法。
35. サンプル中の請求項１、請求項２１または請求項２２に記載の化合物の存在の決定方法であって、サンプルと、化合物に結合する結合剤とを接触させ、結合剤の化合物への結合を検出することを含む、前記方法。
36. 式（Ｉ）：
    

    

    ［式中、
    Ｙ_１は−ＣＲ_１４−またはＮであり、
    Ｙ_２はＣＲ_１５またはＮであり、
    Ｙ_３は−Ｃ（Ｏ）−であり、
    Ｙ_４は−ＣＨ_２もしくは−Ｎ（Ｒ_１６）−であるか、または
    Ｙ_３およびＹ_４は一緒になって−Ｃ（Ｒ_１７）＝Ｃ（Ｒ_１８）−であり、
    Ｘはアリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルまたはアミドであり、
    ＺはＣ_２以上のアルキルまたはアルコキシアルキルであり、
    ＲはＨまたはＣ_１〜Ｃ_６アルキルであり、
    Ｒ_１〜Ｒ_１８は独立に−ＨまたはＣ_１〜Ｃ_６アルキルであり、
    ＱはＣまたはＮであり；ただし、ＱがＮであり、ＲがＨであるとき、Ｘは
    

    

    ではない］
    の化合物またはその薬学的に許容される塩であって、式（Ｉ）の少なくとも１個の原子が、放射性同位体で置き換えられているか、または式（Ｉ）の少なくとも１つの基が、蛍光基で置き換えられている、前記化合物またはその薬学的に許容される塩。

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