KR20170004906A

KR20170004906A - 펩티도미메틱(peptidomimetic) 화합물을 함유하는 류마티스 관절염 예방 및 치료용 약학적 조성물

Info

Publication number: KR20170004906A
Application number: KR1020160083990A
Authority: KR
Inventors: 이경림; 유재상
Original assignee: 이화여자대학교 산학협력단
Priority date: 2015-07-02
Filing date: 2016-07-04
Publication date: 2017-01-11
Also published as: KR101830838B1

Abstract

본 발명은 특정 펩티도미메틱 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것으로, 구체적으로, 본 발명에 따른 펩티도미메틱 화합물들이 관련 물질의 분비 억제 등의 작용을 하여 류마티스 관절염 예방 및 치료에 효과가 있음을 실험을 통해 규명함으로써 류마티스 관절염 치료제로 유용하게 사용할 수 있음을 확인한 것이다.

Description

펩티도미메틱(peptidomimetic) 화합물을 함유하는 류마티스 관절염 예방 및 치료용 약학적 조성물{Pharmaceutical composition comprising peptidomimetic compounds for preventing and treating rheumatoid arthritis}

본 발명은 펩티도미메틱(peptidomimetic) 화합물을 유효성분으로 함유하는 류마티스 관절염 예방 및 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.

면역체계는 림프구와 면역 전달물질이 관여하는 매우 복잡하고 정교한 자기 방어 체계이다. 그런데 최근 수십년 사이 외부 항원이 아닌 정상 세포를 적으로 오인해 공격하는 자가 면역 질환이 눈에 띄게 늘어나고 있다. 외부 항원에만 반응하고 자기 몸에 대해서는 반응하지 않아야 할 면역 반응 체계에 문제가 생긴 것인데, 이와 관련된 대표적인 질환이 류마티스 관절염이다.

류마티스 관절염은 관절 활막의 지속적인 염증반응을 특징으로 하는 만성 염증성 전신질환이다. 활막의 지속적인 만성 염증반응으로 인하여 관절의 연골 손상, 골 미란(얇게 까지듯이 손상을 입는 것)이 일어나며, 결국은 관절의 파괴가 일어나 기능의 장애를 초래하는 것이 주요한 임상적 특징이다. 어느 연령에서도 발병할 수 있지만 35~50세 사이에 가장 흔하게 나타나며, 남녀 비율은 1:3 정도로 여성에서 더욱 많다. 이 질병의 경과는 경한 소수 관절염부터 심한 기능적 장애를 수반하는 진행성 다기관 침범의 형태까지 매우 다양하다. 또한 질병 발생 10년 정도 경과 후에는 환자의 50%에서 일상생활에 장애를 갖게 된다.

류마티스 관절염은 자가면역질환의 하나로 림프구가 우리 몸의 일부인 활막을 공격하여 일어나는 것으로 알려져 있다. 일반적으로 외부에서 침입하는 미생물 등으로부터 우리 몸을 보호하는 기능을 하는 림프구가, 우리 몸의 일부를 외부에서 침입하는 이물로 잘못 인식할 경우 여러 가지 질환이 생기게 되는데, 이를 자가면역질환이라고 한다. 류마티스 관절염은 이러한 자가면역질환의 하나로 분류된다.

류마티스 관절염이 발생하면, 림프구는 활막의 여러 세포들을 자극하고 그 과정에서 염증을 일으키는 여러 사이토카인이 생성된다. 이러한 사이토카인에는 종양괴사인자와 인터루킨-1(IL-1)이 대표적인데, 이들은 관절과 관절 주위의 뼈를 파괴하며, 피로감, 발열, 식욕감퇴, 체중감소 등의 전신적인 증세의 원인이 된다.

한편, 호염기구(basophil)의 히스타민 등 방출과 관련된 TCTP(translationally controlled tumor protein)가 후기 알레르기 반응을 유발할 수 있다고 알려져 있으나(MacDonald et al., Science, 269, 688-690, 1995) 그 기전 등은 명확하지 않고, IgE-의존적 히스타민 분비인자(IgE-dependant hintamine releasing factor, HRF)가 특이한 세포막 수용체에 결합하여 작용함을 제시하였으나, 아직 HRF의 구체적인 작용에 대해서는 밝혀진 바가 없다(Bheekha-Escura et al., Blood, 96, 2191-2198, 2000).

이에, 본 발명자들은 TCTP 이량체가 HRF임을 확인하였고, 세포 외로 분비된 HRF가 호염기구 세포 내에서 히스타민 등의 분비를 촉진하는 작용기전도 규명하였다. 이러한 연구결과들을 바탕으로, HRF에 결합하는 펩타이드 및 이의 활성을 증진시킨 펩티도미메틱(peptidomimetic) 화합물이 류마티스 관절염을 예방 또는 치료할 수 있을 것이라는 사실에 착안하였다. 그에 따라, HRF에 결합하는 펩타이드의 활성을 증진시킨 펩티도미메틱 화합물을 연구하던 중, 특정 화학구조를 갖는 펩티도미메틱 화합물이 염증성 사이토카인과 히스타민 분비 저해율이 탁월함을 확인하고, 류마티스 관절염 모델에서 실험을 한 결과 류마티스 관절염에 대한 예방 및 치료 효과가 있음을 규명함으로써 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 목적은 IgE-dependent histamine releasing factor(HRF)에 결합하는 펩타이드로부터 활성을 증진시킨 특정 펩티도미메틱(peptidomimetic) 화합물을 제작하여 류마티스 관절염 예방 및 치료용도로 사용할 수 있도록 상기 펩티도미메틱 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 함유하는 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 펩타이드, 이의 단편 및 이들의 유사체로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나에서, 상기 서열번호 1의 첫번째 아미노산인 트립토판 자리에 아실기(acyl group)가 도입되거나, 상기 서열번호 1의 네번째 아미노산인 타이로신이 아실기가 연결된 디아미노프로피오닉 산(Diaminopropionic acid)으로 치환되거나, 또는 상기 서열번호 1의 첫번째 아미노산인 트립토판 자리에 아실기가 도입되고 상기 서열번호 1의 네번째 아미노산인 타이로신이 아실기가 연결된 디아미노프로피오닉 산으로 치환된, 펩티도미메틱 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.

아울러, 본 발명은 상기 펩티도미메틱 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

본 발명의 펩티도미메틱 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 자가면역반응에 관여하는 사이토카인 및 히스타민의 분비를 억제하는 등 류마티스 관절염 동물 모델에서 우수한 예방 및 치료 효과를 나타내며, 종래의 증상회복 위주의 치료와 달리 류마티스 관절염을 유발하는 경로를 차단함으로써 다양한 부작용을 봉쇄할 수 있어 유용하게 사용될 수 있다.

도 1은 펩티도미메틱 화합물을 합성하기 위한 단계적 모식도를 나타낸 것이다.
도 2는 HPLC로 확인한 Mtt 보호기의 선택적 제거를 나타낸 것이다.
도 3은 실시예 3을 통해 제조된 화합물을 Dpr site 를 중심으로 NH₂ 말단의 테트라머(tetramer) 와 COOH 말단의 테트라머(tetramer), 2개의 부분으로 나누는 모식도를 나타낸 것이다.
도 4는 실시예 3을 통해 제조된 화합물 중 dTBP2 보다 효과적으로 나온 화합물들 선정하여 나타낸 것이다.
도 5는 실시예 2에서 제조한 화합물의 인터루킨-8 분비 억제 정도를 나타낸 것이다.
도 6은 실시예 3에서 제조한 화합물의 인터루킨-8 분비 억제 정도를 나타낸 것이다.
도 7은 실시예 4에서 제조한 화합물과 실시예 5에서 제조한 화합물 사이의 상대적인 활성을 비교한 것이다.
도 8은 실시예 6에서 제조한 화합물의 인터루킨-8 분비 억제 정도를 나타낸 것이다.
도 9는 실시예 2를 통하여 제조된 화합물의 in situ 경합측정(competition assay) 결과를 나타낸 것이다.
도 10은 류마티스 관절염 마우스 모델에서 실시예 <6-2>의 화합물(122) 투여를 통한 관절염 중증도 임상점수를 나타낸 것이다.
도 11은 류마티스 관절염 마우스 모델에서 실시예 <6-3>의 화합물(123) 투여를 통한 관절염 중증도 임상점수를 나타낸 것이다.
도 12는 류마티스 관절염 마우스 모델에서 실시예 <6-9>의 화합물(129) 투여를 통한 관절염 중증도 임상점수를 나타낸 것이다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

본 발명은 서열번호 1의 아미노산 서열(Trp-Tyr-Val-Tyr-Pro-Ser-Met)을 포함하는 펩타이드, 이의 단편 및 이들의 유사체로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나에서, 상기 서열번호 1의 첫 번째 아미노산인 트립토판, 네 번째 아미노산인 타이로신, 또는 둘 모두가 변형된 신규한 펩티도미메틱(peptidomimetic) 화합물, 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 이들의 용도에 관한 것이다.

구체적으로, 본 발명은 서열번호 1의 아미노산 서열(Trp-Tyr-Val-Tyr-Pro-Ser-Met)을 포함하는 펩타이드, 이의 단편 및 이들의 유사체로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나에서, 상기 서열번호 1의 첫번째 아미노산인 트립토판 자리에 아실기(acyl group)가 도입되거나, 상기 서열번호 1의 네번째 아미노산인 타이로신이 아실기가 연결된 디아미노프로피오닉 산(Diaminopropionic acid)으로 치환되거나, 또는 상기 서열번호 1의 첫번째 아미노산인 트립토판 자리에 아실기가 도입되고 상기 서열번호 1의 네번째 아미노산인 타이로신이 아실기가 연결된 디아미노프로피오닉 산으로 치환된 것으로서, 류마티스 관절염 또는 알레르기 질환에 대하여 예방 또는 치료 활성을 나타내는 펩티도미메틱 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.

또한, 본 발명은 서열번호 1의 아미노산 서열(Trp-Tyr-Val-Tyr-Pro-Ser-Met)을 포함하는 펩타이드, 이의 단편 및 이들의 유사체로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나에서, 상기 서열번호 1의 첫 번째 아미노산인 트립토판, 네 번째 아미노산인 타이로신 또는 둘 모두가 변형된 펩티도미메틱(peptidomimetic) 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 함유하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.

구체적으로, 본 발명은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 펩타이드, 이의 단편 및 이들의 유사체로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나에서, 상기 서열번호 1의 첫번째 아미노산인 트립토판 자리에 아실기(acyl group)가 도입되거나, 상기 서열번호 1의 네번째 아미노산인 타이로신이 아실기가 연결된 디아미노프로피오닉 산(Diaminopropionic acid)으로 치환되거나, 또는 상기 서열번호 1의 첫번째 아미노산인 트립토판 자리에 아실기가 도입되고 상기 서열번호 1의 네번째 아미노산인 타이로신이 아실기가 연결된 디아미노프로피오닉 산으로 치환된, 펩티도미메틱 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

상기 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 펩타이드는, 본 발명자들이 제조하여(실시예 1 참조) dTBP2[dTCTP(dimerized translationally controlled tumor protein) binding peptide 2]로 명명한 헵타머(heptamer)로서, dTCTP의 작용을 억제함으로써 확인하였다. 또한, dTCTP는 인터루킨(IL)-8, IL-5 등을 포함하는 사이토카인 및 히스타민의 분비에 관여하는 바, dTBP2는 dTCTP에 의해 유도될 수 있는 류마티스 관절염 완화시키는 데 관여하게 됨을 확인하였다. dTBP2의 화학구조는 아래와 같다.

[dTBP2의 화학구조]

이에, 본 발명자들은 dTCTP와 그의 수용체 간의 결합을 억제하는 것을 목적으로 하여 dTBP2에 다양한 변화를 시도한 펩티도미메틱 화합물을 합성하였으며, 이들 화합물들에 대해서 생물학적 활성을 측정하여 효능을 확인하였다.

상기 펩티도미메틱 화합물을 합성하기에 앞서, 우선 dTBP2 의 아미노산 잔기들을 하나씩 알라닌으로 치환한 변이체들을 제조하여 그 활성을 평가함으로써(alanine scanning mutagenesis), dTCTP-dTBP2 결합에 관련된 dTBP2의 필수적 잔기가 무엇인지 확인하였다.

(W는 트립토판(tryptophane), Y는 타이로신(tyrosine), V는 발린(valine), P는 프롤린(proline), S는 세린(serine), M은 메티오닌(methionine), A는 알라닌(alanine))

상기 표 1과 같이, 첫번째 아미노산인 트립토판과 네번째 아미노산인 타이로신의 경우 알라닌으로 치환하더라도 dTBP2 의 활성이 동등하게 유지되었다. 따라서, 본 발명에서는 위 트립토판 또는 타이로신을 변형시켜, 그 활성 및 생체이용능이 보다 증진된 dTBP2의 펩티도미메틱 화합물을 설계하였다.

우선, N 말단의 아미노산인 트립토판에 아실기를 도입하고, 이 중 효과가 잘 나타나는 화합물을 선택하였다. 상기 화합물들은 dTCTP에 대한 결합력이 증가하였다. 또한, 본 발명자들은 alanine scanning mutagenesis로부터 가장 필수적이지 않은 것으로 밝혀진 네번째 아미노산 자리에 위치한 타이로신을 디아미노산 잔기[diamino-acid, 예컨대, Diaminopropionic acid (Dpr)]로 변경 후 산(acid)과 커플링 시켰다(도 1 참조).

이와 같이 새로 도입된 기능성 그룹은 추가적인 결합 부위를 제공할 수 있고, 내부의 타이로신과 같은 느슨한 결합 잔기를 단단한 결합으로 바꿈으로써 dTCTP-dTBP2의 결합력을 현저히 증가시킨 것을 확인할 수 있었다(실험예 1 내지 실험예 4 참조).

따라서, 본 발명에서 제공하는 신규 펩티도미메틱 화합물의 일 예는, 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 펩타이드, 이의 단편 및 이들의 유사체로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나에서, 상기 서열번호 1의 첫번째 아미노산인 트립토판 자리에 아실기(acyl group)를 도입되거나, 네번째 아미노산인 타이로신을 Dpr 또는 아실기가 연결된 Dpr로 치환한, 펩티도미메틱 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염일 수 있다.

또한, 본 발명에서 제공하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물의 일 예는, 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 펩타이드, 이의 단편 및 이들의 유사체로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나에서, 상기 서열번호 1의 첫번째 아미노산인 트립토판 자리에 아실기(acyl group)를 도입되거나, 네번째 아미노산인 타이로신을 Dpr 또는 아실기가 연결된 Dpr로 치환한, 펩티도미메틱 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 함유하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물일 수 있다.

상기 단편은,

상기 서열번호 1의 아미노산 서열 중 네 개의 아미노산으로 이루어지며 C-말단이 메티오닌인 펩타이드 단편이고, 상기 서열번호 1의 네번째 아미노산에 해당하는 타이로신이 아실기가 연결된 디아미노프로피오닉 산으로 치환된 펩티도미메틱 화합물;

상기 서열번호 1의 N-말단부터 네 개의 아미노산으로 이루어지는 단편이고, 상기 서열번호 1의 첫번째 아미노산인 트립토판 자리에 아실기가 도입되고 상기 서열번호 1의 네번째 아미노산에 해당하는 타이로신이 아실기가 연결된 디아미노프로피오닉 산으로 치환된 펩티도미메틱 화합물; 및

상기 서열번호 1의 아미노산 중 세 개 또는 네 개의 아미노산으로 이루어지며 C-말단이 세린인 펩타이드 단편이고, 상기 서열번호 1의 네번째 아미노산에 해당하는 타이로신이 아실기가 연결된 디아미노프로피오닉 산으로 치환된 펩티도미메틱 화합물로 구성되는 군으로부터 선택되는 어느 하나 또는 둘 이상인 것일 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다.

또한, 상기 Dpr 은 벤조일기, 신나밀기, 카르복실기, 아세틸기, 헥시노일기, 오로틸기, 나프토일기, 니코티닐기, 헥사디엔오일기, 글리옥실기, 푸로일기, 헥사노일기, 퀴나딜기, 타이글라일기, 트롤록실기, 헤테로알킬 및 아릴헤테로알킬로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 포함하는 아실기-함유 치환기와 연결될 수 있다.

보다 바람직하게는, 하기 화학식 1의 구조를 포함하는 펩티도미메틱 화합물, 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 이들을 유효성분으로 함유하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물일 수 있다.

여기서 R₁은

,

,

또는

이고, WYVYPSM은 서열번호 1의 아미노산 서열이다.

상기 화학식 1 은 구체적으로 다음의 화학구조로 나타낼 수 있다:

상기 펩티도미메틱 화합물은 서열번호 1의 첫번째 아미노산인 트립토판 자리에 이소니코티닐기가 도입된 것일 수 있다.

더욱 구체적으로, 상기 화합물은 2-메틸헥사노일-트립토판-타이로신-발린-타이로신-프롤린-세린-메티오닌, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-타이로신-프롤린-세린-메티오닌, 알파-시아노-4-하이드록시신나밀-트립토판-타이로신-발린-타이로신-프롤린-세린-메티오닌, 또는 5-니트로-3-피라졸카복실일-트립토판-타이로신-발린-타이로신-프롤린-세린-메티오닌일 수 있다.

다른 일 예로, 본 발명은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 펩타이드, 이의 단편 및 이들의 유사체로 구성되는 군에서 선택되는 어느 하나에서, 상기 서열번호 1의 첫번째 아미노산인 트립토판 자리에 아실기가 도입되고 상기 서열번호 1의 네번째 아미노산인 타이로신이 아실기(acyl 그룹)가 연결된 디아미노프로피오닉 산(Diaminopropionic acid, Dpr)으로 치환된 펩티도미메틱 화합물, 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 이들을 유효성분으로 함유하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물일 수 있다.

상기 펩티도미메틱 화합물은 서열번호 1의 첫번째 아미노산인 트립토판 자리에는 이소니코티닐기가 도입된 것이 바람직하다.

보다 바람직하게는, 하기 화학식 2의 구조를 포함하는 펩티도미메틱 화합물, 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 이들을 유효성분으로 함유하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물일 수 있다 :

(W는 트립토판(Tryptophan)이고, Y는 타이로신(Tyrosine)이며, V는 발린(Valine)이고, P는 프롤린(Proline)이며, S는 세린(Serine)이고, M은 메티오닌(Methionine)이며, Dpr은 디아미노프로피오닉 산이고,

R₂는

탄소수 1 내지 20의 비치환된 또는 치환된 선형, 가지형 또는 고리형 알킬;

탄소수 1 내지 10의 비치환된 또는 치환된 알콕시;

비치환 또는 치환된 아릴;

N, O 또는 S를 포함하는 비치환 또는 치환된 헤테로아릴; 및

N, O 또는 S를 포함하는 비치환 또는 치환된 헤테로사이클로 구성되는 군으로부터 선택되는 어느 하나이다).

상기 화학식 2는 구체적으로 다음의 화학구조로 나타낼 수 있다:

.

더욱 구체적으로, 상기 펩티도미메틱 화합물은 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(3,5-디메틸벤조일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(3,5-디메틸벤조일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(알파-시아노-4-하이드록시신나밀)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(알파-시아노-4-하이드록시신나밀)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(4-펜틸바이사이클로[2.2.2]옥테인-1-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(4-펜틸바이사이클로[2.2.2]옥테인-1-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-(2-시아노페닐티오)벤조일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-(2-시아노페닐티오)벤조일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(페녹시아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(페녹시아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-헥시노일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-헥시노일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(오로틸)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(오로틸)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(4-벤질옥시벤조일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(4-벤질옥시벤조일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-나프토일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-나프토일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-피라진카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-피라진카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-클로로니코티닐)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-클로로니코티닐)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2,4-헥사디엔오일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2,4-헥사디엔오일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(바이페닐-4-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(바이페닐-4-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(페닐글리옥실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(페닐글리옥실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-플루오로페닐아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-플루오로페닐아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(트랜스-신나밀)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(트랜스-신나밀)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(1-나프토일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(1-나프토일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(5-니트로-2-푸로일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(5-니트로-2-푸로일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(베타-나프톡시아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(베타-나프톡시아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(3-페녹시벤조일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(3-페녹시벤조일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(7-메톡시-1-벤조퓨란-2-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(7-메톡시-1-벤조퓨란-2-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-메톡시헥사노일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-메톡시헥사노일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(3-클로로벤조[b]티오펜-2-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(3-클로로벤조[b]티오펜-2-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(퀴날딜)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(퀴날딜)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(타이글라일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(타이글라일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(이소니코티닐)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(이소니코티닐)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(5-클로로인돌-2-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(5-클로로인돌-2-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(5-페닐-2-푸로일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(5-페닐-2-푸로일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(5-니트로-3-피라졸카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(5-니트로-3-피라졸카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr((R)-(+)-트롤록실)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr((R)-(+)-트롤록실)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr((R)-(+)-2-피롤리돈-5-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr((R)-(+)-2-피롤리돈-5-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(1-시아노-1-사이클로프로페인카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(1-시아노-1-사이클로프로페인카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(로다닌-3-아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(로다닌-3-아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(7-하이드록시쿠마린-4-아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(7-하이드록시쿠마린-4-아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-(4-메틸페닐설폰아미도)아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-(4-메틸페닐설폰아미도)아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(1-아세틸피페리딘-4-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(1-아세틸피페리딘-4-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(1-페닐-5-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(1-페닐-5-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-티오펜아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-티오펜아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(벤조트리아졸-5-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(벤조트리아졸-5-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(4-옥소-4H-크로멘-3-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(4-옥소-4H-크로멘-3-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(4-메틸-2-옥소-2H-크로멘-7-일옥시)아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 산화형 및 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(4-메틸-2-옥소-2H-크로멘-7-일옥시)아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형으로 구성되는 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 펩티도미메틱 화합물, 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 이들을 함유하는 류마티스 관절염 예방 및 치료용 약학적 조성물일 수 있다.

다른 일예로, 본 발명은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 펩타이드 단편에서, 상기 단편은 네 개의 아미노산으로 이루어지며 C-말단이 메티오닌인 펩타이드 단편이고, 상기 서열번호 1의 네번째 아미노산에 해당하는 타이로신이 아실기(acyl group)가 연결된 디아미노프로피오닉 산(Diaminopropionic acid, Dpr)으로 치환된 펩티도미메틱 화합물, 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 이들을 유효성분으로 함유하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물일 수 있다.

보다 바람직하게, 상기 Dpr 은 벤조일기, 신나밀기, 카르복실기, 아세틸기, 오로틸기, 퀴나딜기, 타이글라일기, 트롤록실기, 헤테로알킬 및 아릴헤테로알킬로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 포함하는 아실기-함유 치환기와 연결될 수 있다.

보다 바람직하게, 본 발명은 하기 화학식 3의 구조를 포함하는 펩티도미메틱 화합물, 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 이들을 유효성분으로 함유하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물일 수 있다 :

(Dpr은 디아미노프로피오닉 산이고, P는 프롤린이며, S는 세린이고, M은 메티오닌이며,

R₃는

탄소수 1 내지 10의 비치환된 또는 치환된 알콕시;

비치환 또는 치환된 아릴;

N, O 또는 S를 포함하는 비치환 또는 치환된 헤테로아릴; 및

상기 화학식 3은 구체적으로 다음의 화학구조로 나타낼 수 있다:

.

상기 화학식 3의 구조를 포함하는 펩티도미메틱 화합물은 바람직하게 Dpr(4-펜틸바이사이클로[2.2.2]옥탄-1-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, Dpr(4-펜틸바이사이클로[2.2.2]옥탄-1-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, Dpr(타이글라일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, Dpr(타이글라일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, Dpr(5-클로로인돌-2-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, Dpr(5-클로로인돌-2-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, Dpr(2-(2-시아노페닐티오)벤조일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, Dpr(2-(2-시아노페닐티오)벤조일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, Dpr(퀴날딜)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, Dpr(퀴날딜)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, Dpr(2-플루오로페닐아세틸)-프롤린-세린-메티오닌, Dpr(7-메톡시-1-벤조퓨란-2-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌, Dpr(오로틸)-프롤린-세린-메티오닌, Dpr(1-시아노-1-사이클로프로판카복실일)-프롤린-세린-메티오닌, Dpr(알파-시아노-4-하이드록시신나밀)-프롤린-세린-메티오닌, Dpr(3,5-디메틸벤조일)-프롤린-세린-메티오닌, Dpr((R)-(+)-트롤록실)-프롤린-세린-메티오닌, Dpr(2-(4-메틸페닐설폰아미도)아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 및 Dpr(5-니트로-3-피라졸카복실일)-프롤린-세린-메티오닌으로 구성되는 군으로부터 선택되는 어느 하나일 수 있다.

다른 일 예로, 본 발명은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 펩타이드 단편에서, 상기 단편은 상기 서열번호 1의 N-말단부터 네 개의 아미노산으로 이루어지는 단편이고, 상기 서열번호 1의 첫번째 아미노산인 트립토판 자리에 아실기가 도입되고 상기 서열번호 1의 네번째 아미노산에 해당하는 타이로신이 아실기(acyl group)가 연결된 디아미노프로피오닉 산(Diaminopropionic acid, Dpr)으로 치환된, 펩티도미메틱 화합물, 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 이들을 유효성분으로 함유하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물일 수 있다.

보다 바람직하게, 서열번호 1의 첫번째 아미노산인 트립토판 자리에는 이소니코티닐기가 도입된 것일 수 있다.

또한, 상기 Dpr 은 벤조일기, 카르복실기, 아세틸기, 오로틸기, 퀴나딜기, 타이글라일기, 트롤록실기, 헤테로알킬 및 아릴헤테로알킬로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 포함하는 아실기-함유 치환기와 연결될 수 있다.

보다 바람직하게, 본 발명은 하기 화학식 4의 구조를 포함하는 펩티도미메틱 화합물, 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 이들을 유효성분으로 함유하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물일 수 있다:

(W는 트립토판이고, Y는 타이로신이며, V는 발린이고, Dpr은 디아미노프로피오닉 산이며,

R₄는

탄소수 1 내지 10의 비치환된 또는 치환된 알콕시;

비치환 또는 치환된 아릴;

N, O 또는 S를 포함하는 비치환 또는 치환된 헤테로아릴; 및

상기 화학식 4 는 구체적으로 다음의 화학구조로 나타낼 수 있다:

.

상기 화학식 4의 구조를 포함하는 펩티도미메틱 화합물은 바람직하게 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(오로틸), 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(3,5-디메틸벤조일), 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(7-메톡시-1-벤조퓨란-2-카복실일), 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-(2-시아노페닐티오)벤조일), 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr((R)-(+)-트롤록실), 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(1-시아노-1-사이클로프로판카복실일), 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(로다닌-3-아세틸), 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-플루오로페닐아세틸), 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(4-펜틸바이사이클로[2.2.2]옥탄-1-카복실일), 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(퀴날딜), 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(타이글라일), 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(5-클로로인돌-2-카복실일), 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(5-니트로-3-피라졸카복실일) 및 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-(4-메틸페닐설폰아미도)아세틸)으로 구성되는 군으로부터 선택되는 어느 하나일 수 있다.

다른 일 예로, 본 발명은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 펩타이드 단편 또는 이의 유사체에서, 상기 단편 또는 이의 유사체는 세 개 또는 네 개의 아미노산으로 이루어지며 C-말단이 세린인 펩타이드 단편이고, 상기 서열번호의 네번째 아미노산에 해당하는 타이로신이 아실기(acyl group)가 연결된 디아미노프로피오닉 산으로 치환된, 펩티도미메틱 화합물, 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 이들을 유효성분으로 함유하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물일 수 있다.

보다 바람직하게, 상기 Dpr 은 벤조일기, 카르복실기, 아세틸기, 오로틸기, 헤테로알킬 및 아릴헤테로알킬로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 포함하는 아실기-함유 치환기와 연결될 수 있다.

보다 바람직하게, 하기 화학식 5 또는 화학식 6의 구조를 포함하는 펩티도미메틱 화합물, 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 이들을 유효성분으로 함유하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물일 수 있다:

(P는 프롤린이고, S는 세린이며, Dpr은 디아미노프로피오닉 산이고,

R₅는

탄소수 1 내지 10의 비치환된 또는 치환된 알콕시;

비치환 또는 치환된 아릴;

N, O 또는 S를 포함하는 비치환 또는 치환된 헤테로아릴; 및

상기 화학식 5 는 구체적으로 다음의 화학구조로 나타낼 수 있다:

.

(V 는 발린이고, P는 프롤린이며, S는 세린이고, Dpr 은 디아미노프로피오닉 산이며,

R₆는

탄소수 1 내지 10의 비치환된 또는 치환된 알콕시;

비치환 또는 치환된 아릴;

N, O 또는 S를 포함하는 비치환 또는 치환된 헤테로아릴; 및

상기 화학식 6 은 구체적으로 다음의 화학구조로 나타낼 수 있다:

.

상기 화학식 5 또는 화학식 6의 구조를 포함하는 펩티도미메틱 화합물은 바람직하게 Dpr(오로틸)-프롤린-세린, Dpr(7-메톨시-1-벤조퓨란-2-카복실일)-프롤린-세린, Dpr(3,5-디메틸벤조일)-프롤린-세린, Dpr(5-클로로인돌-2-카복실일)-프롤린-세린, Dpr(2-플루오로페닐아세틸)-프롤린-세린, 발린-Dpr(오로틸)-프롤린-세린, 발린-Dpr(7-메톡시-1-벤조퓨란-2-카복실일)-프롤린-세린, 발린-Dpr(3,5-디메틸벤조일)-프롤린-세린, 발린-Dpr(5-클로로인돌-2-카복실일)-프롤린-세린 및 발린-Dpr(2-플루오로페닐아세틸)-프롤린-세린으로 구성되는 군으로부터 선택되는 어느 하나일 수 있다.

본 발명에 따른 화합물의 치환기에서, 알킬 그룹은 1 내지 20 개의 탄소원자를 가질 수 있다. 알킬 그룹은 1 내지 10 개의 탄소원자들을 가지는 중간 크기의 알킬일 수도 있다. 알킬 그룹은 1 내지 6 개의 탄소원자들을 가지는 저급 알킬일 수도 있다. 전형적인 알킬 그룹에는 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, t-부틸, 펜틸, 헥실, 에테닐, 프로페닐, 부테닐 등이 포함되지만, 이들 만으로 한정되는 것은 아니다. 예를 들어, C₁-C₄-알킬은 알킬쇄에 1 내지 4 개의 탄소원자를 가지며, 메틸, 에틸, 프로필, 이소-프로필, n-부틸, 이소-부틸, sec-부틸 및 t-부틸로 이루어진 그룹에서 선택될 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.

알콕시는 1 내지 10 개의 탄소원자를 가지는 알킬옥시인 것일 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.

사이클로알킬에는 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 등이 포함되지만, 이들 만으로 한정되는 것은 아니다.

아릴은 공유 파이 전자계를 가지는 적어도 하나의 링을 포함하며, 예를 들어 모노사이클릭 또는 융합환 폴리사이클릭(즉, 탄소원자들의 인접한 쌍들을 나눠 가지는 링들) 그룹을 포함한다. 즉, 본 명세서에서 아릴은 달리 정의하지 않는 한 페닐, 나프틸 등을 포함하는 4~10원, 바람직하게는 6~10원 방향족 모노사이클릭 또는 멀티사이클릭환을 의미하나, 이에 한정되지 않는다.

헤테로아릴은 N, O 및 S로 이루어진 그룹에서 선택된 1 내지 3 개의 헤테로 원자를 포함하고, 벤조 또는 C₃-C₈ 사이클로알킬과 융합될 수 있는 방향족 3~10원 환, 바람직하게는 4~8원 환, 더욱 바람직하게는 5~6원 환을 의미하나 이에 한정되지 않으며, 모노사이클릭 헤테로아릴의 예로는 티아졸, 옥사졸, 티오펜, 퓨란, 피롤, 이미다졸, 이소옥사졸, 이소티아졸, 피라졸, 트리아졸, 트리아진, 티아디아졸, 테트라졸, 옥사디아졸, 피리딘, 피리다진, 피리미딘, 피라진 및 이와 유사한 그룹을 들 수 있으나 이들로 제한되는 것은 아니다. 비사이클릭 헤테로아릴의 예로는 인돌, 인돌린, 벤조티오펜, 벤조퓨란, 벤즈이미다졸, 벤족사졸, 벤즈이속사졸, 벤즈티아졸, 벤즈티아디아졸, 벤즈트리아졸, 퀴놀린, 이소퀴놀린, 퓨린, 퓨로피리딘 및 이와 유사한 그룹을 들 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.

헤테로사이클은 달리 정의하지 않는 한 N, O 및 S로 이루어진 그룹에서 선택된 1 내지 3개의 헤테로 원자를 포함하며, 벤조 또는 C₃-C₈ 사이클로알킬과 융합될 수 있고, 포화되거나 1 또는 2 개의 이중결합을 포함하는 3~10원 환, 바람직하게는 4~8원 환, 더욱 바람직하게는 5~6원 환을 의미한다. 헤테로사이클의 예로는 피롤린, 피롤리딘, 이미다졸린, 이미다졸리딘, 피라졸린, 피라졸리딘, 피란, 피페리딘, 모폴린, 티오모폴린, 피페라진, 하이드로퓨란 등을 들 수 있지만, 이들만으로 한정되는 것은 아니다.

기타 본 명세서에서 사용된 용어와 약어들은 달리 정의되지 않는 한 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자에게 통상적으로 이해되는 의미로서 해석될 수 있다.

또 다른 본 발명의 일구현예로서, 본 발명은 상기 신규한 펩티도미메틱 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 류마티스 관절염의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.

본 발명에서 제공하는 펩티도미메틱 화합물은 dTBP2 의 생물학적 활성을 나타내면서 그 활성 및 생체이용능이 증진된 특징이 있으므로, 류마티스 관절염을 포함하여, dTBP2에 의하여 완화, 개선, 예방, 억제 또는 치료가 가능한 모든 질환에 대한 의약 용도로 적용될 수 있다. 일예로, 본 발명의 펩티도미메틱 화합물은 dTCTP의 작용을 억제함으로써 완화, 개선, 예방, 억제 또는 치료가 가능한 모든 자가면역성 질환, 알레르기성 질환들에 대한 의약 용도로 적용될 수 있다. 다른 일예로, 본 발명의 펩티도미메틱 화합물은 IL-8, IL-5 등을 포함하는 사이토카인 및 히스타민의 분비를 억제함으로써 완화, 개선, 예방, 억제 또는 치료가 가능한 모든 질환들에 대하여 치료적 목적으로 사용될 수 있다.

구체적으로, 상기 자가면역성 질환은 류마티스 관절염, 하시모토 갑상선염, 자가면역성 용혈성 빈혈, 악성 빈혈과 관련된 자가면역성 위축성 위염, 자가면역성 뇌척수염, 자가면역성 고환염, 굳패스처(Goodpasture) 질환, 자가면역성 혈소판 감소증, 교감성 안염, 중증근무력증, 그레이브스(Graves) 병, 일차성 담즙성 간경변, 만성공격성 간염, 궤양성 대장염 및 막성 사구체병증, 전신성 홍반성 루푸스, 쇼그렌(Sjogren) 증후군, 라이터(Reiter) 증후군, 다발성 근염/피부근염, 전신성 경화증, 결절성 다발동맥염, 다발성 경화증 및 유전포창 등이 있으나 이에 한정되지 않고, 상기 알레르기성 질환은 천식, 비염, 담마진, 아나필락시스, 알레르기성 기관지 확장증, 알레르기성 결막염, 두드러기 또는 아토피성 피부염일 수 있으나, 이에 국한되는 것은 아니며, dTCTP와 그의 수용체 간의 상호작용, 또는 IL-8, IL-5 등을 포함하는 사이토카인 및 히스타민의 분비에 의해 유도될 수 있는 모든 질환이 본 발명의 범위에 포함된다.

또한, 본 발명의 펩티도미메틱 화합물, 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 이들을 포함하는 약학적 조성물은 경구 및 비경구 투여 경로 모두 가능하며, 바람직하게는 비경구 투여될 수 있다.

본 발명의 목적상, 특정 환자에 대한 구체적인 약학적 유효량은 달성하고자 하는 반응의 종류와 정도, 경우에 따라 다른 제제가 사용되는지의 여부를 비롯한 구체적 조성물, 환자의 연령, 체중, 일반 건강 상태, 성별 및 식이, 투여 시간, 투여 경로 및 조성물의 분비율, 치료 기간, 구체적 조성물과 함께 사용되거나 동시 사용되는 약물을 비롯한 다양한 인자와 의약 분야에 잘 알려진 유사 인자에 따라 다르게 적용하는 것이 바람직하다.

또한, 비경구 투여로서, 주사용 제형으로는 등장성 수용액 또는 현탁액 등이 있으며, 적합한 분산제 또는 습윤제 및 현탁화제를 사용하여 당 업계에 공지된 기술에 따라 제조할 수 있다. 예를 들면, 각 성분을 식염수 또는 완충액에 용해시켜 주사용으로 제형화할 수 있다. 또한, 경구 투여용 제형으로는 이에 한정되지는 않으나, 분말, 과립, 정제, 환약, 에멀젼, 시럽 및 캡슐 등이 있다.

또한, 본 발명의 펩티도미메틱 화합물, 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 이들을 유효성분으로 함유하는 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체를 더 포함할 수 있다. 약학적으로 허용가능한 담체란 생물체를 상당히 자극하지 않고 투여 화합물의 생물학적 활성 및 특성을 저해하지 않는 담체 또는 희석제를 말한다.

또한, 본 발명의 펩티도미메틱 화합물, 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 이들을 유효성분으로 함유하는 조성물은 일반적인 의약품 제제의 형태로 사용될 수 있다. 즉, 본 발명의 조성물은 실제 임상 투여 시에 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있는데, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제 및 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있으나 이에 한정되지 않는다. 경구 투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제 및 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 본 발명의 약학적 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스, 락토오스 및 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있으나 이에 한정되지 않는다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있으나 이에 한정되지 않는다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 및 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제 및 보존제 등이 포함될 수 있으나 이에 한정되지 않는다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제 및 좌제가 포함되나 이에 한정되지 않는다. 비수성용제와 현탁용제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있으나 이에 한정되지 않는다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤 및 젤라틴 등이 사용될 수 있으나 이에 한정되지 않는다. 본 발명의 조성물은 비경구 투여시 관절강내 주사, 피내주사, 피하주사, 정맥주사, 근육 주사, 복강내 주사, 직장내 주사, 자궁내 경막주사, 뇌혈관내 주사, 흉부내 주사, 경막외 주사, 척수내 주사, 심장내 주사, 동맥내 주사, 골내 주사, 비강, 직장 및 기관지 투여, 경피 투여, 점안제 및 스프레이 제제 형태 등으로 투여될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

투약 단위는, 예를 들면 개별 투약량의 1, 2, 3 또는 4배를 함유하거나 또는 1/2, 1/3 또는 1/4배를 함유할 수 있다. 개별 투약량은 바람직하기로는 유효 약물이 1회에 투여되는 양을 함유하며, 이는 통상 1일 투여량의 전부, 1/2, 1/3 또는 1/4배에 해당한다. 본 발명의 조성물의 유효용량은 0.001 ~ 10,000 mg/㎏이고, 바람직하기로는 0.1 g ~ 5 g/kg이며, 하루 1 ~ 6회 투여될 수 있다. 그러나, 투여 경로, 질병의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라서 증감될 수 있으므로 상기 투여량이 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.

이하, 본 발명을 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예 및 실험예에 한정되는 것은 아니다.

< 실시예 1> Trp- Tyr -Val- Tyr -Pro- Ser -Met 서열로 이루어진 펩타이드(dTBP2) 의 합성

<1-1> 왕 레진 (Wang Resin) LL 에서의 Fmoc -Met-OH 로딩(loading)

필터가 설치된 20 mL TORVIQ PP 시린지(syringe)에 왕 레진(Wang resin) LL (100-200 mesh, 300 mg, 0.44 mmol/g, 0.13 mmol)을 넣고 무수 다이메틸포름아마이드(dimethylformamide, DMF)를 넣어 30분간 팽윤시킨 후 배수하였다.

Fmoc(Fluorenylmethyloxycarbonyl chloride)-Met-OH (10.0 당량, 483.0 mg, 1.3 mmol)을 50 mL pear형 플라스크(flask)에 넣고 아르곤 가스로 치환한 후, 무수 다이클로로메탄(CH₂Cl₂) (7 mL)와 무수 다이메틸포름아마이드 (DMF, 약 20방울)를 첨가하였다. DIC (5.0 당량, 0.1 mL, 0.65 mmol)를 상기 혼합물에 첨가한 후 0℃에서 20분간 교반하였다. 상온에서 감압 증류한 후 남은 suspension을 최소량의 무수 DMF (7.0 mL)에 녹이고, DMAP (0.1 당량, 1.6 mg, 0.013 mmol)을 무수 DMF (0.1 mL)에 녹여서 두 용액을 순서대로 팽윤 시킨 레진에 첨가하여 상온에서 1시간 동안 회전형 진탕기(orbital shaker, 130 r.p.m.)를 사용하여 혼합하고 용매를 배수한 후 DMF, iPrOH와 CH₂Cl₂로 세척하였다 (각각 10 mL X 1 min X 3). UV 분광측정(Spectrometry)을 이용하여 standard Fmoc 정량(quantification)을 실시하여 loading level을 확인하였다 (99.9%).

<1-2> Fmoc -base SPPS

Fmoc(Fluorenylmethyloxycarbonyl chloride) 그룹을 제거하기 위해 상기 레진(300 mg, 0.13 mmol)을 무수 DMF에 30분간 팽윤시킨 후, 20% piperidine/무수 DMF (6.0 mL, resin 100 mg당 2 mL)를 첨가하여 10분간 상온에서 orbital shaker (130 r.p.m.)를 사용하여 혼합하고 용매를 배수한 후 DMF, iPrOH와 CH₂Cl₂으로 세척하였다 (10 mL × 1 min × 3). 30분간 aspirator를 사용하여 건조시킨 후 Kaiser test를 이용하여 반응이 완결되었음을 확인하였다. Serine을 Methionine과 커플링 시키기 위해, HBTU(o-(benzotriazol-1-yl)-N,N,N′,N′-tetramethyluronium hexafluorophosphate) (8.0 당량, 394.5 mg, 1.04 mmol), HOBt(Hydroxybenzotriazole).H₂O (8.0 당량, 159.3 mg, 1.04 mmol), Fmoc-Ser(tBu)-OH (8.0 당량, 398.8 mg, 1.04 mmol)와 DIPEA (8.0 당량, 0.18 mL, 1.04 mmol)를 무수 DMF (6.0 mL)에 녹인 후 3분간 교반하여, DMF에 30분간 팽윤시킨 resin (300 mg, 0.13 mmol)에 첨가한 후 orbital shaker (130 r.p.m.)를 사용하여 2시간 동안 혼합시켰다. 2 시간 경과 후, 용매를 배수하고 DMF, iPrOH와 CH₂Cl₂으로 세척하였다 (각각 10 mL × 1min × 3). 30분간 aspirator를 이용하여 건조시킨 후 Kaiser test를 이용하여 반응이 완결되었음을 확인하였다.

상기 보호기 제거 및 커플링 방법으로, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Tyr(tBu)-OH, Fmoc-Val-OH, Fmoc-Tyr(tBu)-OH, 그리고 Fmoc-Trp(Boc)-OH을 순서대로 커플링 하여 dTBP2, Trp-Tyr-Val-Tyr-Pro-Ser-Met을 합성하였다. Proline의 보호기인 Fmoc 그룹을 제거했을 때 와 proline 에 tyrosine을 커플링 하였을 때에는 Chloranil test 로 반응이 완결되었음을 확인하였다.

<1-3> 절단(Cleavage)

상기 1-2에서 만들어진 펩타이드 (30 mg, 0.013 mmol) 를 1 mL Micro Bio-Spin chromatography column 에 넣은 후, 20% piperidine/무수 DMF (0.6 mL)를 사용하여 Fmoc 그룹을 제거하고, degassed 94% TFA cocktail (TFA:H₂O:EDT:TIS, 94%:2.5%:2.5%:1%, 0.6 mL)를 첨가하여 상온에서 1시간 동안 반응시킨 후 여과하여 여액을 받았다. Resin을 다시 TFA 용액으로 세척하여 (0.3 mL × 2) 그 여액을 받았다. 위 여액들을 합하여 증발기(evaporator)를 이용하여 TFA를 제거한 후, 차가운 에테르(ether)를 사용하여 3회 디캔테이션(decantation)하였다. 이때 생성된 화합물의 손실을 막기 위해 원심 분리기를 이용하였으며, 건조시킨 후 semi-preparative HPLC (binary solvent system, solvent A: 0.1% TFA/H₂O, solvent B: 0.1% TFA/CH₃CN, 5-73% B over 30 min)를 이용하여 분리하고 동결 건조한 후 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

Trp-Tyr-Val-Tyr-Pro-Ser-Met (dTBP2)

99.9% purity. Rt 19.9 min. MALDI m/z calculated for C₄₇H₆₁N₈O₁₁S⁺ [M+H]⁺ 945.42, found 945.58.

< 실시예 2> Acyl -Trp- Tyr -Val- Tyr -Pro- Ser -Met의 합성

결합 부위에 있어, NH₂ 말단과 중앙에 위치한 tyrosine 주변의 공간을 확인하기 위해 acid library를 만들어서, NH₂ 말단을 아실화한 후 in situ로 스크리닝 하였고, 합성 방법으로는 solid phase protocol을 사용하였다. HOOC-TentaGel resin과 dTBP2는 S-S linker로 연결하여 합성하였고, 이러한 방법은 S-S linker 가 DTT-Tris (Dithiothreitol-Tris(2-carboxyethyl)phosphine HCl) buffer 로 쉽게 끊어지고 또한 정제 과정 없이 바로 screening 할 수 있기 때문에 유용하고 효과적인 실험 방법이다. 상기 방법을 이용하여 88 개의 NH₂ 말단이 아실화된 펩티도미메틱 화합물들을 96 웰-필터플레이트(filter plate) 에서 아래와 같이 합성하였다.

상기와 같은 합성에 의해 제조된 화합물의 COOH 말단에는 S-S 결합이 끊어진 후 NHCH₂CH₂SH 가 붙어있고 또한 cleavage cocktail과 혼합된 상태로 assay 를 했기 때문에, hit 화합물에 대한 validation이 필요했다. 그리하여 경합측정(competition assay)의 결과를 토대로, 화합물 4개를 선정하여 NHCH₂CH₂SH 가 붙어있지 않게 하는 방법으로, 즉 Fmoc-based solid phase peptide synthesis (SPPS) protocol 에 따라 개별적으로 재합성하여 정제하였다 (Scheme 2).

Solid support 로서, Wang resin LL on polystyrene 을 선택하였고, DCC 를 사용하여 Fmoc-Met-OH 을 Fomc-methionine anhydride로 만든 후, DMAP을 촉매로 한 esterification으로 Fmoc-methionine 을 Wang resin 에 loading 하였다.

이어서, HCTU 를 이용하여 dTBP2의 나머지 아미노산들을 순차적으로 붙여나갔으며, 각각의 커플링 전에 30% piperidine in DMF 를 사용하여 Fmoc 보호기를 제거하였다. Fmoc보호기의 제거와 아미노산 커플링 반응이 잘 진행되었는지를, 매 step 마다 Kaiser test 또는 Chloranil test 로 확인하였다. 4개의 hit acids (isonicotinic acid, 2-methylhexanoic acid, α-cyano-4-hydroxy cinnamic acid, and 5-nitro-3-pyrazolecarboxylic acid) 의 커플링 반응에는 PyBOP 을 이용하였으며, 1,2-ethanedithiol and triisopropylsilane (TIS) 을 함유하는 94% TFA 를 사용하여 아미노산 잔기들의 보호기 (side-chain protecting 그룹) 들과 Wang resin 을 제거하였다. 마지막으로 HPLC 를 사용하여 분석하고 (analysis) 분리한 (purification) 후, 동결 건조하여 MALDI-TOF 로 물질을 확인하였다.

<2-1> 2- 메틸헥사노일 - 트립토판- 타이로신 -발린- 타이로신 -프롤린-세린-메티오닌(2-Methylhexanoyl-Trp-Tyr-Val-Tyr-Pro-Ser-Met)의 합성

상기 실시예 1의 dTBP2와 동일한 방법으로 Trp-Tyr-Val-Tyr-Pro-Ser-Met을 고체상으로 합성한 후, 펩타이드-레진(50 mg, 0.022 mmol) 를 30% piperidine/무수 DMF (1.0 mL)를 사용하여 Fmoc 그룹을 제거하고, PyBOP (10.0 당량, 114.5 mg, 0.22 mmol), HOBt.H₂O (10.0 당량, 33.7 mg, 0.22 mmol), 2-Methylhexanoic acid (10.0 당량, 28.6 mg, 0.22 mmol) 와 NMM (20 당량, 48.4 uL, 0.44 mmol)를 무수 DMF (0.6 mL)에 녹인 후 3분간 교반하여, DMF에 30분간 팽윤시킨 resin (500 mg, 0.22 mmol)에 첨가한 후 orbital shaker (130 r.p.m.)를 사용하여 2시간 동안 혼합시켰다. 2 시간 경과 후, 2-Methylhexanoic acid 를 커플링 하였다. 이렇게 만들어진 레진 (50 mg, 0.022 mmol)을 필터가 설치된 3 mL TORVIQ PP syringe에 넣은 후, degassed 94% TFA cocktail (TFA:H₂O:EDT:TIS, 94%:2.5%:2.5%:1%, 1.0 mL)를 첨가하여 상온에서 1시간 동안 반응시킨 후 여과하여 여액을 받았다. Resin을 다시 TFA 용액으로 세척하여(0.5 mL × 2) 그 여액을 받았다. 위 여액들을 합하여 evaporator를 이용하여 TFA를 제거한 후, cold ether를 사용하여 3회 decantation하였다. 이때 생성된 화합물의 손실을 막기 위해 원심 분리기를 이용하였으며, 건조시킨 후 semi-preparative HPLC (binary solvent system, solvent A: 0.1% TFA/H₂O, solvent B: 0.1% TFA/CH₃CN, 5-100% B over 30 min )를 이용하여 분리하고 동결 건조한 후 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다 (84.1% Purity. Rt 20.5 min. MALDI m/z calcd for C₅₄H₇₂N₈NaO₁₂S⁺ [M+Na]⁺ 1079.49, found 1079.50.).

<2-2> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- 타이로신 -프롤린-세린-메티오닌(Isonicotinyl-Trp- Tyr-Val-Tyr-Pro-Ser-Met) 의 합성

상기 2-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 산(acid)으로 isonicotinic acid를 사용하여 커플링 하였으며, 합성 후 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다 (94.3% Purity. Rt 15.9 min. MALDI m/z calculated for C₅₃H₆₃N₉NaO₁₂S⁺ [M+Na]⁺ 1072.42, found 1072.41.).

<2-3> 알파- 시아노 -4- 하이드록시신나밀 - 트립토판- 타이로신 -발린- 타이로신 -프롤린-세린-메티오닌(α-Cyano-4-hydroxycinnamyl-Trp-Tyr-Val-Tyr-Pro-Ser-Met) 의 합성

상기 2-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 산(acid)으로 α-Cyano-4-hydroxycinnamic acid를 사용하여 커플링 하였으며, 합성 후 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다 (99.2 % Purity. Rt 19.3 min. MALDI m/z calculated for C₅₇H₆₅N₉NaO₁₃S⁺ [M+Na]⁺ 1138.43, found 1138.37.).

<2-4> 5-니트로-3- 피라졸카복실일 -- 트립토판- 타이로신 -발린- 타이로신 -프롤린-세린-메티오닌(5-Nitro-3-pyrazolecarboxylyl-Trp-Tyr-Val-Tyr-Pro-Ser-Met)의 합성

상기 2-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 산(acid)으로 5-nitro-3-pyrazolecarboxylic acid를 사용하여 커플링 하였으며, 합성 후 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 화합물을 확인하였다 (85.3% Purity. R_t 19.0 min. MALDI m/z calculated for C₅₁H₆₁N₁₁NaO₁₄S⁺ [M+Na]⁺1106.41, found 1106.40.).

< 실시예 3> Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr ( acyl )-Pro- Ser -Met의 합성

NH₂ 말단의 추가 binder를 확인한 후, 알라닌 스캐닝 돌연변이유발(alanine scanning mutagenesis) 의 결과에 따라 약한 결합력을 갖는 타이로신(tyrosine) 부분에 변화를 주었다. 결합력을 높이기 위해 타이로신(tyrosine) 위치에 링커(linker)를 도입하기로 결정하고, 이를 디아민(Diamine) 중 하나의 아민(amine)이 4-메틸트리틸(4-Methyltrityl, Mtt) 그룹으로 보호되어 있는 디아미노프로피오닉 산(Diaminopropionic acid) (Fmoc-Dpr(Mtt)-OH) 으로 바꾸었다. 4-메틸트리틸(4-Methyltrityl, Mtt) 그룹은 1% TFA in CH₂Cl₂ 와 같은 온화한 산 조건에서 쉽게 제거될 수 있다. 제거 조건을 확립하기 위해, 동일 조건의 탈보호 과정을 5회 반복하면서 각각의 여과액에 남아있는 Mtt-OH 의 양을 HPLC 로 확인하였다(Figure 8). 이때 내부 표준 물질 (internal standard)로서 디부틸에테르(Butylated hydroxytoluene, BHT, 2,6-di-tert-butyl-4-methylphenol)를 첨가하였다. 5회 절단하였을 때, Mtt-OH 는 각각 61.7%, 28.6%, 8.5%, 1.1%, 0.1%가 제거되었음을 확인할 수 있었으며, 제거율은 내부표준(internal standard), BHT의 면적에 대한 비율로서 측정하였다 (표 2). 그 결과 1%TFA 로 3번 처리하면 아미노산 잔기들의 보호기 (protecting 그룹)들은 유지하면서 98.8%의 Mtt 그룹이 선택적으로 제거됨을 확인할 수 있었다. 이때 떨어져 나온 Mtt 그룹 의 양이온(cation)을 안정화하기 위해 1% TFA 용액에 TIS (triisopropylsilane)( Sigma-Aldrich) 를 넣어주었다.

Mtt 보호기의 선택적 제거 방법을 확립한 후, 왕 레진(Wang resin) 을 이용한 Fmoc-based SPPS 방법으로 합성하였다. 생산성을 높이기 위해 일부 실험 조건, 즉 커플링 reagents 및 이들의 당량, 반응 시간 등을 조정하였다. 특히 HCTU 또는 PyBOP 대신에 HBTU 사용하였는데, HBTU 를 사용하였을 때 부산물이 적게 생기는 것을 HPLC 시스템 상에서 확인할 수 있었기 때문이다.

Met, Ser, Pro, Fmoc-Dpr(Mtt)-OH, Val, Tyr, Trp, 및 이소니코티닉산(isonicotinic acid), 8개의 잔기들을 순차적으로 왕 레진(Wang resin)에 로딩(loading)한 후, Dpr 잔기의 Mtt 그룹을 1% TFA & 5% TIS in CH₂Cl₂ 로 처리하여 제거하고, 보호기가 제거된 아민을 44개의 acids 로 아실화하였다. 이어서 펩타이드의 모든 보호기와 resin 을 94% TFA 로 처리하여 제거한 후, 합성된 화합물들을 HPLC 로 분석하였다. HPLC 상에서 두 개의 peak 가 관찰되었고, MALDI-TOF 로 확인한 결과, 앞의 peak는 Met의 황이 산화된 화합물의 것이고, 뒤의 peak는 산화되지 않은, 화합물 이었다.

상기와 같은 방법으로 모두 82개의 화합물을 합성하였으며(6 내지 87), 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, 일부 화합물에 대해서는 ¹H NMR를 이용하여 추가로 확인하였다.

<3-1> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (3,5- 디메틸벤조일 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (3,5- dimethylbenzoyl )- Pro- Ser -Met(O))

실시예 1의 dTBP2 합성과 동일한 방법으로 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(3,5-디메틸벤조일)-프롤린-세린-메티오닌을 고체상으로 합성한 후, Diaminopropionic acid 의 보호기를 제거하기 위해 필터가 설치된 1 mL Micro Bio-Spin chromatography column에 resin (25mg, 0.011 mmol)을 넣고 CH₂Cl₂ 에 30분간 팽윤시킨 후, 아르곤 가스 압력을 이용하여 CH₂Cl₂ 을 제거하고, 여기에 degassed 1% TFA (TFA:TIS:DCM, 1:5:94, 0.66 mL)를 첨가한 후 2분간 orbital shaker (130 r.p.m.)를 사용하여 혼합하고, 아르곤 가스 압력을 이용하여 1% TFA 용액을 제거하였으며, 이 과정을 3회 반복하였다. 반응이 끝난 resin을 CH₂Cl₂으로 3회, 무수 DMF로 1회 세척한 후, 무수 DMF로 30분간 팽윤시켰다.

디아미노프로피오닉 산(Diaminopropionic acid) 의 Mtt 그룹이 제거된 아민에 3,5-dimethylbenzoic acid를 커플링 시키기 위해, HBTU (8.0 당량, 33.4 mg, 0.088 mmol), HOBt.H₂O (8.0 당량, 13.5 mg, 0.088 mmol), 3,5-dimethylbenzoic acid (8.0 당량, 13.2 mg, 0.088mmol), DIPEA (8.0 당량, 15.4μL, 0.088 mmol)와 무수 DMF (0.5 mL)혼합액을 사용하여 실시예 1-2 방법에 따라 커플링 하였다. 이렇게 만들어진 펩타이드 (25 mg, 0.011 mmol)에 degassed 94% TFA cocktail (0.5 mL)를 첨가하여 상온에서 1시간 동안 혼합한 후 여과하여 여액을 받고, 다시 TFA (0.3 mL × 2)로 세척하여 그 여액을 받았다. 위 여액들을 합하여 evaporator를 이용하여 TFA를 제거한 후, cold ether를 사용하여 3회 decantation하였다. 이 때 생성된 화합물의 손실을 막기 위해 원심 분리기를 이용하였으며, high vacuum dry 후 semi-preparative HPLC (binary solvent system, solvent A: 0.1% TFA/H₂O, solvent B: 0.1% TFA/CH₃CN, 5-100% B over 42 min)를 이용하여 분리 및 정제하고 동결 건조한 후 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR를 이용하여 추가로 확인하였다.

97.0% Purity. Rt 22.6 min. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.73 (d, 1H, J = 2.0), 9.10 (s, 1H), 8.78 (d, 1H, J = 8.4), 8.67 (dd, 2H, J = 4.4, J = 1.6), 8.33 (t, 1H, J = 6.0), 8.21 (d, 2H, J = 8.0), 8.06 (dd, 1H, J = 7.6, J = 3.6), 8.00 (dd, 1H, J = 7.6, J = 3.2), 7.80 (d, 1H, J = 8.4), 7.65 (d, 1H, J = 8.0), 7.63 (dd, 2H, J = 4.4, J = 1.6), 7.45 (s, 2H), 7.29 (d, 1H, J = 8.0), 7.14 (d, 1H, J = 2.0), 7.13 (s, 1H), 7.03 (t, 1H, J = 8.0), 7.01 (d, 2H, J = 8.4), 6.95 (t, 1H, J = 8.0), 6.57 (d, 2H, J = 8.4), 4.75-4.67 (m, 2H), 4.52 (td, 1H, J = 8.4, J = 4.0), 4.42 (m, 1H), 4.31-4.25 (m, 2H), 4.21 (dd, 1H, J = 8.4, J = 7.2 ), 3.68-3.54 (m, 4H), 3.47 (m, 1H), 3.38-3.23 (m, 2H), 3.15 (dd, 1H, J = 14.4, J = 4.0), 3.05 (dd, 1H, J = 14.4, J = 10.4), 2.91 (dd, 1H, J = 13.6, J = 4.0), 2.80-2.57 (m, 3H), 2.51 (s, 3H), 2.27 (s, 6H), 2.13-1.86 (m, 5H), 1.84-1.79 (m, 2H), 0.84 (d, 3H, J = 6.8), 0.81 (d, 3H, J = 6.8). MALDI m/z calculated for C₅₆H₆₈N₁₀NaO₁₃S⁺ [M+Na]⁺ 1143.46, found 1143.43.

<3-2> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (3,5- 디메틸벤조일 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (3,5- dimethylbenzoyl )- Pro-Ser-Met)

상기 3-1과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR를 이용하여 추가로 확인하였다.

98.0% Purity. Rt 24.8 min. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.70 (brs, 1H), 10.73 (d, 1H, J = 2.0), 9.10 (brs, 1H), 8.82 (d, 1H, J = 8.8), 8.70 (d, 2H, J = 5.6), 8.32 (t, 1H, J = 6.4), 8.22 (d, 1H, J = 8.0), 8.20 (d, 1H, J = 6.8), 8.08 (d, 1H, J = 8.0), 7.93 (d, 1H, J = 8.0), 7.79 (d, 1H, J = 8.4), 7.68 (dd, 2H, J = 5.6, J = 1.6), 7.66 (d, 1H, J = 8.0), 7.45 (s, 2H), 7.29 (d, 1H, J = 8.0), 7.14 (d, 1H, J = 2.0), 7.13 (s, 1H), 7.03 (t, 1H, J = 8.0), 7.01 (d, 2H, J = 8.4), 6.95 (t, 1H, J = 8.0), 6.57 (d, 2H, J = 8.4), 4.73 (m, 1H), 4.66 (q, 1H, J = 6.8), 4.52 (td, 1H, J = 8.8, J = 4.0), 4.43 (dd, 1H, J = 8.0, J = 4.0), 4.34-4.28 (m, 2H), 4.20 (dd, 1H, J = 8.4, J = 7.2), 3.63-3.43 (m, 7H), 3.16 (dd, 1H, J = 14.8, J = 4.0), 3.05 (dd, 1H, J = 14.8, J = 10.8), 2.91 (dd, 1H, J = 14.0, J = 4.0), 2.72 (dd, 1H, J = 14.0, J = 9.6), 2.52-2.38 (m, 2H), 2.27 (s, 6H), 2.07-1.75 (m, 7H), 2.00 (s, 3H), 0.84 (d, 3H, J = 6.8), 0.82 (d, 3H, J = 6.8). MALDI m/z calculated for C₅₆H₆₈N₁₀NaO₁₂S⁺ [M+Na]⁺ 1127.46, found 1127.43.

<3-3> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (알파- 시아노 -4- 하이드록시신나밀 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (α- cyano -4-hydroxycinnamyl)-Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 알파-시아노-4-하이드록시신남산(α-cyano-4-hydroxycinnamic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR를 이용하여 추가로 확인하였다.

99.9% Purity. Rt 17.2 min. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆): δ12.84 (brs, 1H), 10.73 (s, 1H), 10.59 (brs, 1H), 9.10 (brs, 1H), 8.80 (d, 1H, J = 8.4), 8.69 (dd, 2H, J = 4.4, J = 1.6), 8.28-8.22 (m, 2H), 8.19 (d, 1H, J = 6.8), 8.10 (s, 1H), 8.05-8.01 (m, 2H), 7.86 (d, 2H, J = 8.8), 7.80 (d, 1H, J = 8.8), 7.67 (dd, 2H, J = 4.4, J = 1.6), 7.65 (d, 1H, J = 8.0), 7.29 (d, 1H, J =8.0), 7.14 (d, 1H, J = 2.0), 7.04 (t, 1H, J = 8.0), 7.03 (d, 2H, J = 8.0), 6.95 (t, 1H, J = 8.0), 6.91 (d, 2H, J = 8.8), 6.56 (d, 2H, J = 8.0), 4.75-4.65 (m, 2H), 4.52 (td, 1H, J = 8.4, J = 4.0), 4.42-4.32 (m, 2H), 4.28-4.18 (m, 2H), 3.64-3.45 (m, 7H), 3.15 (dd, 1H, J = 14.4, J = 4.0), 3.05 (m, 1H), 2.93 (dd, 1H, J = 14.4, J = 4.0), 2.80-2.60 (m, 3H), 2.53 (s, 3H), 2.15-1.75 (m, 7H), 0.85 (d, 3H, J = 6.8), 0.82 (d, 3H, J = 6.8). MALDI m/z calculated for C₅₇H₆₅N₁₁NaO₁₄S⁺

[M+Na]⁺1182.43, found 1182.32.

<3-4> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (알파- 시아노 -4- 하이드록시신나 밀)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (α- cyano -4-hydroxycinnamyl)-Pro-Ser-Met)

상기 3-3과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR를 이용하여 추가로 확인하였다.

99.9% Purity. Rt 19.3 min. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.73 (brs, 1H), 10.73 (s, 1H), 10.59 (brs, 1H), 9.10 (brs, 1H), 8.80 (d, 1H, J = 8.0), 8.69 (d, 2H, J = 4.4), 8.28-8.22 (m, 2H), 8.18 (d, 1H, J = 6.8), 8.10 (s, 1H), 8.04 (d, 1H, J = 7.6), 7.91 (d, 1H, J = 7.6), 7.86 (d, 2H, J = 8.8), 7.81 (d, 1H, J = 8.8), 7.67-7.65 (m, 3H), 7.29 (d, 1H, J = 8.0), 7.14 (d, 1H, J = 2.0), 7.04 (t, 1H, J = 8.0), 7.01 (d, 2H, J = 8.4), 6.95 (t, 1H, J = 8.0), 6.91 (d, 2H, J = 8.8), 6.57 (d, 2H, J = 8.4), 4.75-4.67 (m, 2H), 4.52 (m, 1H), 4.40 (dd, 1H, J = 8.0, J = 3.6), 4.34 (m, 1H), 4.27 (m, 1H), 4.20 (dd, 1H, J = 8.8, J = 6.8), 3.64-3.35 (m, 7H), 3.15 (dd, 1H, J = 15.2, J = 3.6), 3.05 (dd, 1H, J = 15.2, J = 10.4), 2.92 (dd, 1H, J = 14.0, J = 4.4), 2.73 (dd, 1H, J = 14.0, J = 10.4), 2.52-2.38 (m, 2H), 2.03 (s, 3H), 2.02-1.93 (m, 3H), 1.91-1.75 (m, 4H), 0.85 (d, 3H, J = 6.8), 0.82 (d, 3H, J = 6.8). MALDI m/z calculated for C₅₇H₆₅N₁₁NaO₁₃S⁺ [M+Na]⁺ 1166.44, found 1166.38.

<3-5> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (4- 펜틸바이사이클로[2.2.2]옥테인 -1-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (4-pentylbicyclo [2.2.2] octane-1- carboxylyl )-Pro- Ser -Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 4-펜틸바이사이클로[2.2.2]옥테인-1-카복실산(4-pentylbicyclo [2.2.2] octane-1-carboxylic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR를 이용하여 추가로 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 27.2 min. ¹H NMR (400 MHz, DMSO- _d ₆): δ 12.86 (brs, 1H), 10.73 (s, 1H), 9.09 (brs, 1H), 8.82 (d, 1H, J = 8.4), 8.70 (dd, 2H, J = 4.4, J = 1.6), 8.23 (d, 1H, J = 8.0), 8.08 (d, 1H, J = 6.4), 8.03 (d, 1H, J = 6.4), 7.92 (dd, 1H, J = 8.0, J = 4.0), 7.79 (d, 1H, J = 8.8), 7.68 (dd, 2H, J = 4.4, J = 1.6), 7.66 (d, 1H, J = 8.0), 7.29 (d, 1H, J = 8.0), 7.27 (t, 1H. J = 6.0). 7.14 (d, 1H, J = 2.4), 7.04 (t, 1H, J = 8.0), 7.03 (d, 2H, J = 8.4), 6.96 (t, 1H, J = 8.0), 6.57 (d, 2H, J = 8.4), 4.73 (m, 1H), 4.60-4.51 (m, 2H), 4.38-4.30 (m, 2H), 4.25 (m, 1H), 4.19 (dd, 1H, J = 8.8, J = 6.4), 3.62-3.37 (m, 7H), 3.16 (dd, 1H, J = 14.4, J = 7.6), 3.05 (dd, 1H, J = 14.4, J = 10.4), 2.93 (dd, 1H, J = 13.6, J = 4.0), 2.83-2.60 (m, 3H), 2.52 (s, 3H), 2.12 (m, 1H), 2.02-1.80 (m, 6H), 1.60-1.56 (m, 6H), 1.29-1.20 (m, 8H), 1.18-1.06 (m, 4H), 1.00-0.96 (m, 2H), 0.84 (d, 3H, J = 6.8), 0.83 (t, 3H, J = 6.8), 0.82 (d, 3H, J = 6.8). MALDI m/z calculated for C₆₁H₈₂N₁₀NaO₁₃S⁺ [M+Na]⁺ 1217.57, found 1217.38.

<3-6> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (4- 펜틸바이사이클로[2.2.2]옥테인 -1-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (4-pentylbicyclo [2.2.2] octane-1- carboxylyl )-Pro- Ser -Met)

상기 3-5와 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR를 이용하여 추가로 확인하였다.

99.9% Purity. Rt 29.9 min. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.76 (brs, 1H), 10.73 (d, 1H, J = 2.0), 9.10 (brs, 1H), 8.81 (d, 1H, J = 8.0), 8.70 (dd, 2H, J = 4.4, J = 1.6), 8.23 (d, 1H, J = 8.0), 8.08 (d, 1H, J = 6.4), 7.94 (d, 2H, J = 8.0), 7.79 (d, 1H, J = 8.8), 7.68 (dd, 2H, J = 4.4, J = 1.6), 7.66 (d, 1H, J = 7.6), 7.29 (d, 1H, J = 7.6), 7.26 (t, 1H, J = 6.4), 7.14 (d, 1H, J = 2.0), 7.04 (t, 1H, J = 7.6), 7.03 (d, 2H, J = 8.8), 6.95 (t, 1H, J = 7.6), 6.58 (d, 2H, J = 8.8), 4.73 (m, 1H), 4.58-4.51 (m, 2H), 4.38-4.31 (m, 2H), 4.26 (m, 1H), 4.19 (dd, 1H, J = 8.4, J = 6.4), 3.64-3.35 (m, 7H), 3.16 (dd, 1H, J = 14.8, J = 3.2), 3.05 (dd, 1H, J = 14.8, J = 10.4), 2.93 (dd, 1H, J = 14.4, J = 3.6), 2.74 (dd, 1H, J = 14.4, J = 10.4), 2.52-2.40 (m, 2H), 2.02 (s, 3H), 2.00-1.78 (m, 7H), 1.61-1.57 (m, 6H), 1.29-1.22 (m, 8H), 1.19-1.05 (m, 4H), 1.01-0.97 (m, 2H), 0.84 (d, 3H, J = 6.8), 0.83 (t, 3H, J = 7.2), 0.82 (d, 3H, J = 6.8). MALDI m/z calculated for C₆₁H₈₂N₁₀NaO₁₂S+ [M+Na]+ 1201.57, found 1201.43.

<3-7> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (2-(2- 시아노페닐티오 ) 벤조일 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (2-(2-cyanophenylthio)benzoyl)-Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 2-(2-시아노페닐티오)벤조산(2-(2-cyanophenylthio)benzoic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR를 이용하여 추가로 확인하였다.

99.9% Purity. Rt 23.4 min. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.89 (brs, 1H), 10.73 (d, 1H, J = 2.0), 9.10 (brs, 1H), 8.83 (d, 1H, J = 8.0), 8.70 (d, 2H, J = 6.0), 8.45 (t, 1H, J = 6.0), 8.25 (d, 2H, J = 8.0), 8.05 (d, 1H, J = 8.4), 7.98 (dd, 1H, J = 8.0, J = 2.0), 7.93 (dd, 1H, J = 8.0, J = 0.8), 7.81 (d, 1H, J = 8.8), 7.68 (dd, 2H, J = 6.0, J = 2.0), 7.66-7.64 (m, 2H), 7.63 (d, 1H, J = 7.2), 7.53 (t, 1H, J = 8.0), 7.45 (dd, 1H, J = 8.0, J = 0.8), 7.39-7.32 (m, 2H), 7.29 (d, 1H, J = 8.0), 7.14 (d, 1H, J = 2.0), 7.03 (t, 1H, J = 8.0), 7.02 (d, 2H, J = 8.4), 6.97-6.93 (m, 2H), 6.58 (d, 2H, J = 8.4), 4.81-4.71 (m, 2H), 4.53 (td, 1H, J = 8.8, J = 4.0), 4.40 (m, 1H), 4.34 (m, 1H), 4.29-4.23 (m, 2H), 3.69-3.30 (m, 7H), 3.17 (dd, 1H, J = 14.8, J = 4.0), 3.06 (dd, 1H, J = 14.8, J = 10.4), 2.93 (dd, 1H, J = 14.4, J = 4.0), 2.82-2.59 (m, 3H), 2.51 (s, 3H), 2.11 (m, 1H), 2.03-1.93 (m, 3H), 1.91-1.77 (m, 3H), 0.85 (d, 3H, J = 6.8), 0.83 (d, 3H, J = 6.8). MALDI m/z calculated for C₆₁H₆₇N₁₁NaO₁₃S2+ [M+Na]+ 1248.43, found 1248.44.

<3-8> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (2-(2- 시아노페닐티오 ) 벤조 일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (2-(2-cyanophenylthio)benzoyl)-Pro-Ser-Met)

상기 3-7과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR를 이용하여 추가로 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 25.4 min. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆): δ 12.73 (brs, 1H), 10.73 (d, 1H, J = 2.0), 9.09 (brs, 1H), 8.82 (d, 1H, J = 8.4), 8.70 (d, 2H, J = 6.0), 8.44 (t, 1H, J = 6.0), 8.30-8.22 (m, 2H), 8.00 (d, 1H, J = 8.0), 7.95 (d, 1H, J = 8.0), 7.93 (d, 1H, J = 8.0), 7.81 (d, 1H, J = 8.8), 7.67 (dd, 2H, J = 6.0, J = 1.6), 7.66-7.64 (m, 2H), 7.63 (td, 1H, J = 7.6, J = 1.6), 7.53 (td, 1H, J = 8.0, J = 1.2), 7.44 (d, 1H, J = 8.0), 7.37 (td, 1H, J = 7.6, J = 1.6), 7.33 (dd, 1H, J = 8.0, J = 1.2), 7.29 (d, 1H, J = 8.0), 7.14 (d, 1H, J = 2.0), 7.04 (t, 1H, J = 8.0), 7.03 (d, 2H, J = 8.0), 6.99-6.93 (m, 2H), 6.58 (d, 2H, J = 8.0), 4.80-4.71 (m, 2H), 4.53 (td, 1H, J = 8.8, J = 4.0), 4.40 (dd, 1H, J = 8.4, J = 3.6), 4.33 (m, 1H), 4.29-4.23 (m, 2H), 3.68-3.63 (m, 2H), 3.62-3.45 (m, 5H), 3.17 (dd, 1H, J = 14.8, J = 3.6), 3.06 (dd, 1H, J = 14.8, J = 10.4), 2.93 (dd, 1H, J = 14.4, J = 3.6), 2.73 (dd, 1H, J = 14.4, J = 10.0), 2.52-2.39 (m, 2H), 2.36-1.94 (m, 3H), 2.01 (s, 3H), 1.88-1.76 (m, 4H), 0.85 (d, 3H, J = 6.8), 0.83 (d, 3H, J = 6.8). MALDI m/z calculated for C₆₁H₆₇N₁₁NaO₁₂S₂ ⁺ [M+Na]⁺ 1232.43, found 1232.53.

<3-9> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr ( 페녹시아세틸 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 (Isonicotinyl-Trp-Tyr-Val-Dpr(phenoxyacetyl)-Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 페녹시아세트산(phenoxyacetic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 15.8 min (5-100% B over 36 min). MALDI m/z calculated for C₅₅H₆₆N₁₀NaO₁₄S⁺[M+Na]⁺ 1145.44, found 1145.03.

<3-10> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr ( 페녹시아세틸 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr ( phenoxyacetyl ) -Pro- Ser -Met)

상기 3-9와 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 17.7 min (5-100% B over 36 min). MALDI m/z calculated for C₅₅H₆₆N₁₀NaO₁₃S⁺ [M+Na]⁺1129.44, found 1129.08.

<3-11> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (2- 헥시노일 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 (Isonicotinyl-Trp-Tyr-Val-Dpr(2-hexynoyl)-Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 2-헥신산(2-hexynoic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

97.4% Purity. R_t 15.5 min (5-100% B over 36 min). MALDI m/z calculated for C₅₃H₆₆N₁₀NaO₁₃S⁺ [M+Na]⁺ 1105.44, found 1105.15.

<3-12> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (2- 헥시노일 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 (Isonicotinyl-Trp-Tyr-Val-Dpr(2-hexynoyl)-Pro-Ser-Met)

상기 3-11과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 17.4 min (5-100% B over 36 min). MALDI m/z calculated for C₅₃H₆₆N₁₀NaO₁₂S⁺ [M+Na]⁺ 1089.45, found 1089.51.

<3-13> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr ( 오로틸 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 (Isonicotinyl-Trp-Tyr-Val-Dpr(orotyl)-Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 오로트산(orotic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

88.0% Purity. R_t 12.9 min (5-100% B over 36 min). MALDI m/z calculated for C₅₂H₆₂N₁₂NaO₁₅S⁺[M+Na]⁺ 1149.41, found 1149.37.

<3-14> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr ( 오로틸 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 (Isonicotinyl-Trp-Tyr-Val-Dpr(orotyl)-Pro-Ser-Met)

상기 3-13과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

93.6% Purity. R_t 14.8 min (5-100% B over 36 min). MALDI m/z calculated for C₅₂H₆₂N₁₂NaO₁₄S⁺ [M+Na]⁺1133.41, found 1133.39.

<3-15> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (4- 벤질옥시벤조일 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (4- benzyloxybenzoyl ) -Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 4-벤질옥시벤조산(4-benzyloxybenzoic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 17.9 min (5-100% B over 36 min). MALDI m/z calculated for C₆₁H₇₀N₁₀NaO₁₄S⁺ [M+Na]⁺ 1221.47, found 1221.41.

<3-16> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (4- 벤질옥시벤조일 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (4- benzyloxybenzoyl ) -Pro-Ser-Met)

상기 3-15와 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 19.7 min (5-100% B over 36 min). MALDI m/z calculated for C₆₁H₇₀N₁₀NaO₁₃S⁺ [M+Na]⁺ 1205.47, found 1205.42.

<3-17> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (2- 나프토일 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 (Isonicotinyl-Trp-Tyr-Val-Dpr(2-naphthoyl)-Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 2-나프토에산(2- naphthoic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 16.5 min (5-100% B over 36 min). MALDI m/z calculated for C₅₈H₆₆N₁₀NaO₁₃S⁺ [M+Na]⁺ 1165.44, found 1165.42.

<3-18> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (2- 나프토일 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 (Isonicotinyl-Trp-Tyr-Val-Dpr(2-naphthoyl)-Pro-Ser-Met)

상기 3-17과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 18.3 min (5-100% B over 36 min). MALDI m/z calculated for C₅₈H₆₆N₁₀NaO₁₂S⁺ [M+Na]⁺ 1149.45, found 1149.40.

<3-19> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (2- 피라진카복실일 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (2- pyrazine carboxylyl ) -Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 2-피라진카복실산(2-pyrazine carboxylic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 13.7 min (5-100% B over 36 min). MALDI m/z calculated for C₅₂H₆₂N₁₂NaO₁₃S⁺ [M+Na]⁺ 1117.42, found 1117.39.

<3-20> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (2- 피라진카복실일 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (2- pyrazine carboxylyl ) -Pro-Ser-Met)

상기 3-19와 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 15.5 min (5-100% B over 36 min). MALDI m/z calculated for C₅₂H₆₂N₁₂NaO₁₂S⁺ [M+Na]⁺ 1101.42, found 1101.39.

<3-21> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (2- 클로로니코티닐 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (2- chloronicotinyl ) -Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 2-클로로니코틴산(2- chloronicotinic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 16.1 min. MALDI m/z calculated for C₅₃H₆₂ClN₁₁NaO₁₃S⁺ [M+Na]⁺ 1150.38, found 1150.24.

<3-22> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (2- 클로로니코티닐 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (2- chloronicotinyl ) -Pro-Ser-Met)

상기 3-21과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 18.2 min. MALDI m/z calculated for C₅₃H₆₂ClN₁₁NaO₁₂S⁺ [M+Na]⁺ 1134.39, found 1134.28.

<3-23> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (2,4- 헥사디엔오일 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (2,4- hexadienoyl ) -Pro- Ser -Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 2,4-소르브산(sorbic acid, 2,4-hexadienoic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 17.5 min. MALDI m/z calculated for C₅₃H₆₆N₁₀NaO₁₃S⁺ [M+Na]⁺ 1105.44, found 1105.40.

<3-24> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (2,4- 헥사디엔오일 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (2,4- hexadienoyl ) -Pro-Ser-Met)

상기 3-23과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 19.6 min. MALDI m/z calculated for C₅₃H₆₆N₁₀NaO₁₂S⁺ [M+Na]⁺ 1089.45, found 1089.43.

<3-25> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr ( 바이페닐 -4- 카복실일 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (biphenyl-4-carboxylyl) -Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 바이페닐-4-카복실산(biphenyl-4-carboxylic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 24.8 min. MALDI m/z calculated for C₆₀H₆₈N₁₀NaO₁₃S⁺ [M+Na]⁺ 1191.46, found 1191.46.

<3-26> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr ( 바이페닐 -4- 카복실일 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (biphenyl -4-carboxylyl)-Pro-Ser-Met)

상기 3-25와 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 27.0 min. MALDI m/z calculated for C₆₀H₆₈N₁₀NaO₁₂S⁺ [M+Na]⁺ 1175.46, found 1175.46.

<3-27> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr ( 페닐글리옥실일 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr ( phenylglyoxylyl ) -Pro- Ser -Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 페닐글리옥실산(phenylglyoxylic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 21.5 min. MALDI m/z calculated for C₅₅H₆₄N₁₀NaO₁₄S⁺ [M+Na]⁺ 1143.42, found 1143.44.

<3-28> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr ( 페닐글리옥실일 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr ( phenylglyoxylyl ) -Pro-Ser-Met)

상기 3-27과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 23.8 min. MALDI m/z calculated for C₅₅H₆₄N₁₀NaO₁₃S⁺ [M+Na]⁺ 1127.43, found 1127.51.

<3-29> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (2- 플루오로페닐아세틸 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (2- fluorophenylacetyl ) -Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 2-플루오로페닐아세트산(2-fluorophenylacetic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 21.5 min. MALDI m/z calculated for C₅₅H₆₅FN₁₀NaO₁₃S⁺ [M+Na]⁺ 1147.43, found 1147.51.

<3-30> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (2- 플루오로페닐아세틸 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (2-fluorophenylacetyl)-Pro-Ser-Met)

상기 3-29와 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 23.5 min. MALDI m/z calculated for C₅₅H₆₅FN₁₀NaO₁₂S⁺ [M+Na]⁺ 1131.44, found 1131.53.

<3-31> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (트랜스- 신나밀 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr ( trans - cinnamyl ) -Pro- Ser -Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 트랜스-신남산(trans-cinnamic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 22.2 min. MALDI m/z calculated for C₅₆H₆₆N₁₀NaO₁₃S⁺ [M+Na]⁺ 1141.44, found 1141.51.

<3-32> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (트랜스- 신나밀 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr ( trans - cinnamyl ) -Pro- Ser -Met)

상기 3-31과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 24.3 min. MALDI m/z calculated for C₅₆H₆₆N₁₀NaO₁₂S⁺ [M+Na]⁺ 1125.45, found 1125.57.

<3-33> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (1- 나프토일 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (1- naphthoyl )-Pro- Ser -Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 1-나프토에산(1-naphtoic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 21.9 min. MALDI m/z calculated for C₅₈H₆₆N₁₀NaO₁₃S⁺ [M+Na]⁺ 1165.44, found 1165.53.

<3-34> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (1- 나프토일 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 (Isonicotinyl-Trp-Tyr-Val-Dpr(1-naphthoyl)-Pro-Ser-Met)

상기 3-33과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 24.4 min. MALDI m/z calculated for C₅₈H₆₆N₁₀NaO₁₂S⁺ [M+Na]⁺ 1149.45, found 1149.64.

<3-35> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (5-니트로-2- 푸로일 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (5-nitro-2- furoyl ) -Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 5-니트로-2-푸로산(5-nitro-2-furoic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

93.1% Purity. R_t 20.9 min. MALDI m/z calculated for C₅₂H₆₁N₁₁NaO₁₆S⁺ [M+Na]⁺ 1150.39, found 1150.17.

<3-36> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (5-니트로-2- 푸로일 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (5-nitro-2- furoyl ) -Pro-Ser-Met)

상기 3-35와 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 22.9 min. MALDI m/z calculated for C₅₂H₆₁N₁₁NaO₁₅S⁺ [M+Na]⁺ 1134.40, found 1134.23.

<3-37> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (베타- 나프톡시아세틸 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (β- naphthoxyacetyl ) -Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 베타-나프톡시아세트산(β-naphthoxyacetic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 23.7 min. MALDI m/z calculated for C₅₉H₆₈N₁₀NaO₁₄S⁺ [M+Na]⁺ 1195.45, found 1195.18.

<3-38> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (베타- 나프톡시아세틸 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (β- naphthoxyacetyl ) -Pro-Ser-Met)

상기 3-37과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 25.7 min. MALDI m/z calculated for C₅₉H₆₈N₁₀NaO₁₃S⁺ [M+Na]⁺ 1179.46, found 1179.32.

<3-39> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (3- 페녹시벤조일 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (3- phenoxybenzoyl ) -Pro- Ser -Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 3-페녹시벤조산(3-phenoxybenzoic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

97.3% Purity. R_t 24.3 min. MALDI m/z calculated for C₆₀H₆₈N₁₀NaO₁₄S⁺ [M+Na]⁺ 1207.45, found 1207.24.

<3-40> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (3- 페녹시벤조일 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (3- phenoxybenzoyl ) -Pro-Ser-Met)

상기 3-39와 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

98.2% Purity. R_t 26.3 min. MALDI m/z calculated for C₆₀H₆₈N₁₀NaO₁₃S⁺ [M+Na]⁺ 1191.46, found 1191.30.

<3-41> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (7- 메톡시 -1- 벤조퓨란 -2- 카복실일 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (7- methoxy -1-benzofuran-2-carboxylyl)-Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 7-메톡시-1-벤조퓨란-2-카복실산(7-methoxy-1-benzofuran-2-carboxylic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

97.6% Purity. R_t 22.3 min. MALDI m/z calculated for C₅₇H₆₆N₁₀NaO₁₅S⁺ [M+Na]⁺ 1185.43, found 1185.34.

<3-42> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (7- 메톡시 -1- 벤조퓨란 -2- 카복실일 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (7-methoxy-1-benzofuran-2-carboxylyl)-Pro-Ser-Met)

상기 3-41과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 24.4 min. MALDI m/z calculated for C₅₇H₆₆N₁₀NaO₁₄S⁺ [M+Na]⁺ 1169.44, found 1169.40.

<3-43> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (2- 메톡시헥사노일 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (2- methylhexanoyl ) -Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 2-메톡시 헥사노익산(2-methylhexanoic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

95.7% Purity. R_t 22.4 min. MALDI m/z calculated for C₅₄H₇₂N₁₀NaO₁₃S⁺ [M+Na]⁺ 1123.49, found 1123.53.

<3-44> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (2- 메톡시헥사노일 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (2- methylhexanoyl ) -Pro-Ser-Met)

상기 3-43과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 24.8 min. MALDI m/z calculated for C₅₄H₇₂N₁₀NaO₁₂S⁺ [M+Na]⁺ 1107.49, found 1107.53.

<3-45> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (3- 클로로벤조[b]티오펜 -2-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (3-chlorobenzo[b]thiophene-2-carboxylyl)-Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 3-클로로벤조[b]티오펜-2-카복실산(3-chlorobenzo[b]thiophene-2-carboxylic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 23.1 min. MALDI m/z calculated for C₅₆H₆₃ClN₁₀NaO₁₃S₂ ⁺ [M+Na]⁺ 1205.36, found 1205.36.

<3-46> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (3- 클로로벤조[b]티오펜 -2-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (3-chlorobenzo[b]thiophene-2-carboxylyl)-Pro-Ser-Met)

상기 3-45와 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 25.1 min. MALDI m/z calculated for C₅₆H₆₃ClN₁₀NaO₁₂S₂ ⁺ [M+Na]⁺ 1189.36, found 1189.47.

<3-47> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr ( 퀴날딜 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr ( quinaldyl )-Pro- Ser -Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 퀴나딜산(quinaldic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 22.3 min. MALDI m/z calculated for C₅₇H₆₅N₁₁NaO₁₃S⁺ [M+Na]⁺ 1166.44, found 1166.47.

<3-48> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr ( 퀴날딜 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 (Isonicotinyl-Trp-Tyr-Val-Dpr(quinaldyl)-Pro-Ser-Met)

상기 3-47과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 24.0 min. MALDI m/z calculated for C₅₇H₆₅N₁₁NaO₁₂S⁺ [M+Na]⁺ 1150.44, found 1150.47.

<3-49> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr ( 타이글라일 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr ( tiglyl )-Pro- Ser -Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 티글린산(tiglic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.2% Purity. R_t 20.4 min. MALDI m/z calculated for C₅₂H₆₇N₁₀O₁₃S⁺ [M+H]⁺ 1071.46, found 1071.56.

<3-50> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr ( 타이글라일 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 (Isonicotinyl-Trp-Tyr-Val-Dpr(tiglyl)-Pro-Ser-Met)

상기 3-49와 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 22.3 min. MALDI m/z calculated for C₅₂H₆₆N₁₀NaO₁₂S⁺ [M+Na]⁺ 1077.45, found 1077.51.

<3-51> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr ( 이소니코티닐 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr ( isonicotinyl )-Pro- Ser -Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 이소니코틴산(isonicotinic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 18.0 min. MALDI m/z calculated for C₅₃H₆₃N₁₁NaO₁₃S⁺ [M+Na]⁺ 1116.42, found 1116.49.

<3-52> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr ( 이소니코티닐 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr ( isonicotinyl )-Pro- Ser -Met)

상기 3-51과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 19.9 min. MALDI m/z calculated for C₅₃H₆₃N₁₁NaO₁₂S⁺ [M+Na]⁺ 1100.43, found 1100.48.

<3-53> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (5- 클로로인돌 -2- 카복실일 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (5- chloroindole -2-carboxylyl)-Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 5-클로로인돌-2-카복실산(5-chloroindole-2-carboxylic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

89.3% Purity. R_t 23.3 min. MALDI m/z calculated for C₅₆H₆₄ClN₁₁NaO₁₃S⁺ [M+Na]⁺ 1188.40, found 1188.44.

<3-54> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (5- 클로로인돌 -2- 카복실일 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (5- chloroindole -2-carboxylyl)-Pro-Ser-Met)

상기 3-53과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 25.6 min. MALDI m/z calculated for C₅₆H₆₄ClN₁₁NaO₁₂S⁺ [M+Na]⁺ 1172.40, found 1172.47.

<3-55> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (5-페닐-2- 푸로일 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (5-phenyl-2- furoyl ) -Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 5-페닐-2-푸로산(5-phenyl-2-furoic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 23.0 min. MALDI m/z calculated for C₅₈H₆₆N₁₀NaO₁₄S⁺ [M+Na]⁺ 1181.44, found 1181.44.

<3-56> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (5-페닐-2- 푸로일 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (5-phenyl-2- furoyl ) -Pro-Ser-Met)

상기 3-55와 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 25.2 min. MALDI m/z calculated for C₅₈H₆₆N₁₀NaO₁₃S⁺ [M+Na]⁺ 1165.44, found 1165.48.

<3-57> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (5-니트로-3- 피라졸카복실일 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (5-nitro-3- pyrazolecarboxylyl)-Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 5-니트로-3-피라졸카복실산(5-nitro-3- pyrazolecarboxylic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 20.4 min. MALDI m/z calculated for C₅₁H₆₁N₁₃NaO₁₅S⁺ [M+Na]⁺ 1150.40, found 1150.54.

<3-58> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (5-니트로-3- 피라졸카복실일 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (5-nitro-3- pyrazolecarboxylyl)-Pro-Ser-Met)

상기 3-57과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 22.3 min. MALDI m/z calculated for C₅₁H₆₁N₁₃NaO₁₄S⁺ [M+Na]⁺ 1134.41, found 1134.51.

<3-59> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr ((R)-(+)- 트롤록실 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (( R )-(+)- troloxyl ) -Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 6-히드록시-2,5,7,8-테트라메칠크로만-2-카복실산 (trolox)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 22.6 min. MALDI m/z calculated for C₆₁H₇₆N₁₀NaO₁₅S⁺ [M+Na]⁺ 1243.51, found 1243.49.

<3-60> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr ((R)-(+)- 트롤록실 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (( R )-(+)- troloxyl ) -Pro-Ser-Met)

상기 3-59와 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 24.7 min. MALDI m/z calculated for C₆₁H₇₆N₁₀NaO₁₄S⁺ [M+Na]⁺ 1227.52, found 1227.51.

<3-61> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (( R )-(+)-2- 피롤리돈 -5- 카복실일 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (( R )-(+)-2- pyrrolidone-5-carboxylyl)-Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 (R)-(+)-2-피롤리돈-5-카복실산 ((R)-(+)-2-pyrrolidone-5-carboxylic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 18.4 min. MALDI m/z calculated for C₅₂H₆₅N₁₁NaO₁₄S⁺ [M+Na]⁺ 1122.43, found 1122.34.

<3-62> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (( R )-(+)-2- 피롤리돈 -5- 카복실일 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (( R )-(+)-2- pyrrolidone-5-carboxylyl)-Pro-Ser-Met)

상기 3-61과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 20.5 min. MALDI m/z calculated for C₅₂H₆₅N₁₁NaO₁₃S⁺ [M+Na]⁺ 1106.44, found 1106.45.

<3-63> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (1- 시아노 -1- 사이클로프로 페인카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (1-cyano-1-cyclopropanecarboxylyl)-Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 1-시아노-1-사이클로프로페인카복실산 (1-cyano-1-cyclopropanecarboxylic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 19.9 min. MALDI m/z calculated for C₅₂H₆₃N₁₁NaO₁₃S⁺ [M+Na]⁺ 1104.42, found 1104.43.

<3-64> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (1- 시아노 -1- 사이클로프로페인카복실일 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (1-cyano-1-cyclopropanecarboxylyl)-Pro-Ser-Met

상기 3-63과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 22.3 min. MALDI m/z calculated for C₅₂H₆₃N₁₁NaO₁₂S⁺ [M+Na]⁺ 1088.43, found 1088.47.

<3-65> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr ( 로다닌 -3-아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr ( rhodanine -3-acetyl) -Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 로다닌-3-아세트산 (rhodanine-3-acetic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 20.6 min. MALDI m/z calculated for C₅₂H₆₃N₁₁NaO₁₄S₃ ⁺ [M+Na]⁺ 1184.36, found 1184.36.

<3-66> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr ( 로다닌 -3-아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr ( rhodanine -3-acetyl) -Pro-Ser-Met)

상기 3-65와 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 23.1 min. MALDI m/z calculated for C₅₂H₆₃N₁₁NaO₁₃S₃ ⁺ [M+Na]⁺ 1168.37, found 1168.43.

<3-67> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (7-하이드록시쿠마린-4-아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (7-hydroxycoumarine-4-acetyl)-Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 7-하이드록시쿠마린-4-아세트산 (7-hydroxycoumarine-4-acetic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

98.0% Purity. R_t 20.0 min. MALDI m/z calculated for C₅₈H₆₆N₁₀NaO₁₆S⁺ [M+Na]⁺ 1213.43, found 1213.35.

<3-68> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (7-하이드록시쿠마린-4-아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (7-hydroxycoumarine-4-acetyl)-Pro-Ser-Met)

상기 3-67과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

96.3% Purity. R_t 22.0 min. MALDI m/z calculated for C₅₈H₆₆N₁₀NaO₁₅S⁺ [M+Na]⁺ 1197.43, found 1197.43.

<3-69> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (2-(4- 메틸페닐설폰아미도 )아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (2- (4-methylphenylsulfonamido)acetyl)-Pro-Ser-Met(O)

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 2-(4-메틸페닐설폰아미도)아세트산 (2-(4-methylphenylsulfonamido)acetic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

96.7% Purity. R_t 21.9 min. MALDI m/z calculated for C₅₆H₆₉N₁₁NaO₁₅S₂ ⁺ [M+Na]⁺ 1222.43, found 1222.45.

<3-70> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (2-(4- 메틸페닐설폰아미도 )아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (2- (4-methylphenylsulfonamido)acetyl)-Pro-Ser-Met)

상기 3-69와 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

97.5% Purity. R_t 24.3 min. MALDI m/z calculated for C₅₆H₆₉N₁₁NaO₁₄S₂ ⁺ [M+Na]⁺ 1206.44, found 1206.49.

<3-71> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (1- 아세틸피페리딘 -4- 카복실일 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (1-acetylpiperidine-4-carboxylyl)-Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 1-아세틸피페리딘-4-카복실산 (1-acetylpiperidine-4-carboxylic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

98.1% Purity. R_t 18.7 min. MALDI m/z calculated for C₅₅H₇₁N₁₁NaO₁₄S⁺ [M+Na]⁺ 1164.48, found 1164.57.

<3-72> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (1- 아세틸피페리딘 -4- 카복실일 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (1-acetylpiperidine-4-carboxylyl)-Pro-Ser-Met)

상기 3-71과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 20.7 min. MALDI m/z calculated for C₅₅H₇₁N₁₁NaO₁₃S⁺ [M+Na]⁺ 1148.48, found 1148.57.

<3-73> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (1-페닐-5-( 트리플루오로메틸 )-1 H -피라졸-4-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val-Dpr(1-phenyl-5-(trifluoromethyl)-1 H -pyrazole-4-carboxylyl)-Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 1-페닐-5-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-카복실산 (1-phenyl-5-(trifluoromethyl)-1H-pyrazole-4-carboxylic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

94.9% Purity. R_t 23.0 min. MALDI m/z calculated for C₅₈H₆₅F₃N₁₂NaO₁₃S⁺ [M+Na]⁺ 1249.44, found 1249.50.

<3-74> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (1-페닐-5-( 트리플루오로메틸 )-1 H -피라졸-4-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val-Dpr(1-phenyl-5-(trifluoromethyl)-1 H -pyrazole-4-carboxylyl)-Pro-Ser-Met(O))

상기 3-73과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 25.3 min. MALDI m/z calculated for C₅₈H₆₅F₃N₁₂NaO₁₂S⁺ [M+Na]⁺ 1233.44, found 1233.52.

<3-75> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (2- 티오펜아세틸 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (2- thiopheneacetyl ) -Pro- Ser -Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 2-티오펜아세트산 (2-thiopheneacetic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

95.6% Purity. R_t 20.9 min. MALDI m/z calculated for C₅₃H₆₄N₁₀NaO₁₃S₂ ⁺ [M+Na]⁺ 1135.40, found 1135.40.

<3-76> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (2- 티오펜아세틸 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (2- thiopheneacetyl ) -Pro-Ser-Met)

상기 3-75와 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

97.0% Purity. R_t 23.1 min. MALDI m/z calculated for C₅₃H₆₄N₁₀NaO₁₂S₂ ⁺ [M+Na]⁺ 1119.40, found 1119.41.

<3-77> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr ( 벤조트리아졸 -5- 카복실일 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr ( benzotriazole -5- carboxylyl)-Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 벤조트리아졸-5-카복실산 (benzotriazole-5-carboxylic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

97.4% Purity. R_t 19.0 min. MALDI m/z calculated for C₅₄H₆₃N₁₃NaO₁₃S⁺ [M+Na]⁺ 1156.43, found 1156.55.

<3-78> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr ( 벤조트리아졸 -5- 카복실일 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr ( benzotriazole -5- carboxylyl)-Pro-Ser-Met)

상기 3-77과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 21.2 min. MALDI m/z calculated for C₅₄H₆₃N₁₃NaO₁₂S⁺ [M+Na]⁺ 1140.43, found 1140.50.

<3-79> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (4-옥소-4 H - 크로멘 -3- 카복 실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (4- oxo -4 H - chromene-3-carboxylyl)-Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 4-옥소-4H-크로멘-3-카복실산 (4-oxo-4H-chromene-3-carboxylic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

98.4% Purity. R_t 21.4 min. MALDI m/z calculated for C₅₇H₆₄N₁₀NaO₁₅S⁺ [M+Na]⁺ 1183.42, found 1183.48.

<3-80> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (4-옥소-4 H - 크로멘 -3- 카복실일 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (4- oxo -4 H - chromene-3-carboxylyl)-Pro-Ser-Met)

상기 3-79와 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 23.5 min. MALDI m/z calculated for C₅₇H₆₄N₁₀NaO₁₄S⁺ [M+Na]⁺ 1167.42, found 1167.57.

<3-81> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (4- 메틸 -2-옥소-2 H - 크로멘 -7-일옥시)아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr ((4-methyl-2-oxo-2 H -chromen-7-yloxy)acetyl)-Pro-Ser-Met(O))

상기 3-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였으며, 커플링을 위한 산(acid)으로 4-메틸-2-옥소-2H-크로멘-7-일옥시)아세트산 (4-methyl-2-oxo-2H-chromen-7-yloxy)acetic acid)을 사용하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 21.0 min. MALDI m/z calculated for C₅₉H₆₈N₁₀NaO₁₆S⁺ [M+Na]⁺ 1227.44, found 1227.51.

<3-82> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (4- 메틸 -2-옥소-2 H - 크로멘 -7-일옥시)아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr ((4-methyl-2-oxo-2 H -chromen-7-yloxy)acetyl)-Pro-Ser-Met)

상기 3-81과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

96.4% Purity. R_t 23.0 min. MALDI m/z calculated for C₅₉H₆₈N₁₀NaO₁₅S⁺ [M+Na]⁺ 1211.45, found 1211.54.

< 실시예 4> Dpr ( acyl )-Pro- Ser -Met의 합성

상기 실시예 3을 통해 제조된 화합물들의 7개 아미노산 잔기들이 모두 동일한 결합강도로 또는 필수적으로 peptide-dTCTP binding 에 기여하는 것은 아니므로, tight binding residues는 남겨두고 loose binding residues 는 잘라낸다면, 활성에 큰 영향 없이 화합물의 크기를 최소화 할 수 있을 것이라는 판단아래, 이를 위해 Dpr site 를 중심으로 NH₂ 말단의 테트라머(tetramer) 와 COOH 말단의 테트라머(tetramer), 2개의 부분으로 나누었다 (도 3).

실시예 3을 통해 제조된 화합물 중, dTBP2 보다 효과적으로 나온 화합물들을 살펴보면, 4개의 acid 구조는 공통적이었고, 나머지 11개의 구조는 어느 한쪽에서 효과적인 것으로 나타났다(도 4). 따라서 15개의 acids 를 선정하여 실시예 4 및 5의 화합물을 합성하였다.

Wang resin에 Fmoc-based SPPS을 이용하여 15개의 산(acid)이 커플링된 COOH 말단의 tetramer를 합성하였으나, rhodanine-3-acetic acid를 제외한 14개의 화합물과 Methione 잔기의 sulfur가 산화된 5개의 화합물이 만들어졌다. 산화형과 비산화형의 생성 비율은 1:2.3 에서부터 1:5.6까지 다양하게 나타났다. 결과적으로 총 19개의 화합물이 합성되었다 (88-106).

<4-1> Dpr (4- 펜틸바이사이클로[2.2.2]옥탄 -1- 카복실일 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Dpr (4- pentylbicyclo[2.2.2]octane -1- carboxylyl )-Pro- Ser -Met(O))

상기 실시예 3과 동일한 방법으로 Dpr(4-펜틸바이사이클로[2.2.2]옥탄-1-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌을 고체상으로 합성한 후, resin (25 mg, 0.011 mmol)를 필터가 설치된 1 mL Micro Bio-Spin chromatography column에 넣고, 20% piperidine/무수 DMF (0.5 mL)를 사용하여 Fmoc 그룹을 제거하고, degassed 94% TFA cocktail (0.5 mL)을 첨가하여 상온에서 1시간 동안 혼합한 후 여과하여 여액을 받고, 다시 TFA 용액 (0.3 mL X 2)으로 세척하여 그 여액을 받았다. 위 여액들을 합하여 evaporator를 이용하여 TFA를 제거한 후, cold ether를 사용하여 3회 decantation하였다. 이때 생성된 화합물의 손실을 막기 위해 원심 분리기를 이용하였으며, 건조시킨 후 semi-preparative HPLC (binary solvent system, solvent A: 0.1% TFA/H₂O, solvent B: 0.1% TFA/CH₃CN, 5-100% B over 42 min)를 이용하여 분리 및 정제하고 동결 건조한 후 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 24.8 min. MALDI m/z calculated for C₃₀H₅₂N₅O₈S⁺ [M+H]⁺642.35, found 642.38

<4-2> Dpr (4- 펜틸바이사이클로[2.2.2]옥탄 -1- 카복실일 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Dpr (4- pentylbicyclo[2.2.2]octane -1- carboxylyl )-Pro- Ser -Met)

상기 4-1과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR과 ¹³C NMR을 이용하여 추가로 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 27.4 min. ¹H NMR (400 MHz, D₂O): δ 4.62-4.56 (m, 2H), 4.52-4.47 (m, 2H), 3.97-3.89 (m, 2H), 3.80-3.73 (m, 2H), 3.67-3.59 (m, 2H), 2.66-2.52 (m, 2H), 2.40 (m, 1H), 2.21 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 2.07-1.92 (m, 4H), 1.79-1.70 (m, 6H), 1.46-1.39 (m, 6H), 1.32-1.08 (m, 8H), 0.85 (t, 3H, J = 6.8). ¹³C NMR (100 MHz, D₂O): δ 182.2, 175.2, 173.2, 171.5, 167.0, 61.3, 60.8, 56.0, 52.1, 51.1, 48.3, 41.4, 40.0, 39,4, 33.0, 30.8, 30.6, 30.3, 29.9, 29.7, 28.6, 24.8, 23.5, 22.7, 14.8, 14.0. MALDI m/z calculated for C₃₀H₅₂N₅O₇S⁺ [M+H]⁺ 626.36, found 626.38.

<4-3> Dpr ( 타이글라일 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Dpr ( tiglyl )-Pro- Ser -Met(O))

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 Dpr(타이글라일)-프롤린-세린-메티오닌 을 고체상으로 합성한 후, 상기 실시예 4-1과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 12.2 min. MALDI m/z calculated for C₂₁H₃₆N₅O₈S⁺ [M+H]⁺518.23, found 518.27.

<4-4> Dpr ( 타이글라일 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Dpr ( tiglyl )-Pro-Ser -Met)

상기 4-3과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR과 ¹³C NMR을 이용하여 추가로 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 16.8 min. ¹H NMR (400 MHz, D₂O): δ 6.57 (q, 1H, J = 7.2), 4.63-4.55 (m, 3H), 4.46 (t, 1H, J = 5.6), 3.97-3.88 (m, 3H), 3.81 (m, 1H), 3.75-3.68 (m, 2H), 2.74-2.53 (m, 2H), 2.40 (m, 1H), 2.22 (m, 1H), 2.13 (s, 3H), 2.12-1.98 (m, 4H), 1.86 (s, 3H), 1.81 (d, 3H, J = 7.2). ¹³C NMR (125 MHz, D₂O): δ 175.7, 173.8, 173.7, 171.6, 166.6, 135.2, 130.0, 61.1, 60.8, 56.0, 52.3, 52.2, 48.2, 39.5, 30.4, 29.7, 29.5, 24.9, 14.3, 13.7, 11.6. MALDI m/z calculated for C₂₁H₃₆N₅O₇S⁺ [M+H]⁺502.23, found 502.30.

<4-5> Dpr (5- 클로로인돌 -2- 카복실일 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Dpr (5-chloroindole-2-carboxylyl)-Pro-Ser-Met(O))

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 Dpr(5-클로로인돌-2-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌을 고체상으로 합성한 후, 상기 실시예 4-1과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 19.4 min. MALDI m/z calculated for C₂₅H₃₄ClN₆O₈S⁺[M+H]⁺613.18, found 613.22.

<4-6> Dpr (5- 클로로인돌 -2- 카복실일 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 (Dpr(5-chloroindole-2-carboxylyl)-Pro-Ser-Met)

상기 4-5와 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR과 ¹³C NMR을 이용하여 추가로 확인하였다.

97.3% Purity. R_t 22.5 min. ¹H NMR (400 MHz, D₂O): δ 7.74 (d, 1H, J = 2.0), 7.50 (dd, 1H, J = 8.8, J = 0.4), 7.33 (dd, 1H, J = 8.8, J = 2.0), 7.07 (s, 1H), 4.70-4.63 (m, 2H), 4.48-4.42 (m, 2H), 4.00 (td, 1H, J = 14.8, J = 5.6), 3.96 (td, 1H, J = 14.8, J = 5.6), 3.91 (d, 2H, J = 5.6), 3.83 (m, 1H), 3.72 (m, 1H), 2.51-2.37 (m, 3H), 2.12-2.01 (m, 4H), 1.99 (s, 3H), 1.94 (m, 1H). ¹³C NMR (125 MHz, D₂O): δ 175.7, 173.8, 171.5, 166.8, 164.3, 135.4, 130.8, 128.1, 125.8, 125.3, 121.4, 113.8, 104.6, 61.0, 60.9, 56.0, 52.4, 52.0, 48.4, 39.2, 30.3, 29.7, 29.5, 24.9, 14.2. MALDI m/z calculated for C₂₅H₃₄ClN₆O₇S⁺[M+H]⁺597.19, found 597.26.

<4-7> Dpr (2-(2- 시아노페닐티오 ) 벤조일 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 (Dpr(2-(2-cyanophenylthio)benzoyl)-Pro-Ser-Met(O))

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 Dpr(2-(2-시아노페닐티오)벤조일)-프롤린-세린-메티오닌을 고체상으로 합성한 후, 상기 실시예 4-1과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 19.0 min. MALDI m/z calculated for C₃₀H₃₇N₆O₈S₂ ⁺[M+H]⁺673.21, found 673.31.

<4-8> Dpr (2-(2- 시아노페닐티오 ) 벤조일 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 (Dpr(2-(2-cyanophenylthio)benzoyl)-Pro-Ser-Met)

상기 4-7와 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR과 ¹³C NMR을 이용하여 추가로 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 22.1 min. ¹H NMR (400 MHz, D₂O): δ 7.85 (d, 1H, J = 8.0), 7.67-7.35 (m, 7H), 4.66 (t, 1H, J = 5.2), 4.60 (t, 1H, J = 7.2), 4.47 (dd, 1H, J = 8.8, J = 4.8), 4.38 (t, 1H, J = 5.6), 3.92-3.71 (m, 6H), 2.59-2.34 (m, 4H), 2.20- 1.93 (m, 5H), 2.07 (s, 3H). ¹³C NMR (125 MHz, D₂O): δ 175.4, 173.6, 172.1, 171.5, 166.5, 138.7, 136.1, 134.7, 134.4, 133.8, 133.2, 132.5, 132.1, 128.9, 128.8, 128.5, 117.9, 114.5, 61.1, 60.9, 55.9, 52.1, 52.0, 48.4, 39.6, 30.3, 29.6, 29.5, 24.9, 14.3. MALDI m/z calculated for C₃₀H₃₇N₆O₇S₂ ⁺[M+H]⁺657.22, found 657.33.

<4-9> Dpr ( 퀴날딜 )-프롤린-세린-메티오닌 산화형 ( Dpr ( quinaldyl ) -Pro- Ser -Met(O))

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 Dpr(퀴나딜)-프롤린-세린-메티오닌을 고체상으로 합성한 후, 상기 실시예 4-1과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 16.2 min. MALDI m/z calculated for C₂₆H₃₅N₆O₈S⁺[M+H]⁺591.22, found 591.25.

<4-10> Dpr ( 퀴날딜 )-프롤린-세린-메티오닌 비산화형 ( Dpr ( quinaldyl ) -Pro-Ser-Met)

상기 4-9와 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 19.8 min. ¹H NMR (400 MHz, D₂O): δ 8.61 (d, 1H, J = 8.8), 8.15 (d, 1H, J = 8.4), 8.12 (d, 1H, J = 8.8), 8.09 (d, 1H, J = 8.4), 7.95 (t, 1H, J = 8.4), 7.79 (t, 1H, J = 8.4), 4.74 (t, 1H, J = 5.6), 4.63 (m, 1H), 4.44-4.39 (m, 2H), 4.08-4.06 (m, 2H), 3.87-3.83 (m, 4H), 2.49-2.33 (m, 3H), 2.12-2.00 (m, 4H), 1.98 (s, 3H), 1.90 (m, 1H). ¹³C NMR (125 MHz, D₂O): δ 175.1, 173.6, 171.5, 167.8, 166.7, 148.3, 145.6, 140.0, 131.8, 129.7, 129.3, 128.5, 128.3, 118.8, 61.0, 55.9, 52.1, 51.8, 51.7, 48.4, 39.4, 30.1, 29.7, 29.4, 24.9, 14.2. MALDI m/z calculated for C₂₆H₃₅N₆O₇S⁺[M+H]⁺575.23, found 575.28.

<4-11> Dpr (2- 플루오로페닐아세틸 )-프롤린-세린-메티오닌 ( Dpr (2-fluorophenylacetyl)-Pro-Ser-Met)

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 Dpr(2-플루오로페닐아세틸)-프롤린-세린-메티오닌을 고체상으로 합성한 후, 상기 실시예 4-1과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR과 ¹³C NMR을 이용하여 추가로 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 19.1 min. ¹H NMR (400 MHz, D₂O): δ 7.43-7.33 (m, 2H), 7.24-7.17 (m, 2H), 4.61-4.54 (m, 3H), 4.46 (t, 1H, J = 5.6), 3.94-3.61 (m, 8H), 2.66-2.51 (m, 2H), 2.38 (m, 1H), 2.21 (m, 1H), 2.09 (s, 3H), 2.07-1.94 (m, 4H). ¹³C NMR (100 MHz, D₂O): δ 175.4, 175.1, 173.4, 171.3, 166.3, 160.9 (d, J _C _-F = 242.2), 131.9 (d, J _C _-F = 3.8), 129.6 (d, J _C _-F = 7.7), 124.5 (d, J _C _-F = 3.9), 121.2 (d, J _C _-F = 16.2), 115.3 (d, J _C _-F = 20.9), 60.9, 60.6, 55.6, 51.7, 48.0, 39.2, 35.5, 35.4, 30.0, 29.4, 29.3, 24.6, 13.9. MALDI m/z calculated for C₂₄H₃₅FN₅O₇S⁺[M+H]⁺556.22, found 556.29.

<4-12> Dpr (7- 메톡시 -1- 벤조퓨란 -2- 카복실일 )-프롤린-세린-메티오닌 ( Dpr (7-methoxy-1-benzofuran-2-carboxylyl)-Pro-Ser-Met)

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 Dpr(7-메톡시-1-벤조퓨란-2-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌을 고체상으로 합성한 후, 상기 실시예 4-1과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR과 ¹³C NMR을 이용하여 추가로 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 20.5 min. ¹H NMR (400 MHz, D₂O): δ 7.57 (s, 1H), 7.39 (dd, 1H, J = 8.0, J = 0.8), 7.34 (t, 1H, J = 8.0), 7.14 (dd, 1H, J = 8.0, J = 0.8), 4.70 (dd, 1H, J = 6.0, J = 4.8), 4.62 (dd, 1H, J = 8.8, J = 5.6), 4.45 (d, 1H, J = 6.0), 4.44 (dd, 1H, J = 5.2, J = 2.0), 4.05 (s, 3H), 4.02-3.95 (m, 2H), 3.89 (d, 2H, J = 5.6), 3.86-3.77 (m, 2H), 2.52-2.37 (m, 3H), 2.15-2.05 (m, 4H), 2.02 (s, 3H), 1.91 (m, 1H). ¹³C NMR (100 MHz, D₂O): δ 174.9, 173.4, 171.2, 166.3, 161.8, 146.8, 144.9, 144.3, 128.5, 124.9, 115.2, 112.2, 109.6, 60.8, 60.7, 56.1, 55.6, 51.8, 51.6, 48.1, 38.8, 29.9, 29.3, 29.1, 24.6, 13.9. MALDI m/z calculated for C₂₆H₃₆N₅O₉S⁺[M+H]⁺594.22, found 594.35.

<4-13> Dpr ( 오로틸 )-프롤린-세린-메티오닌 ( Dpr ( orotyl )-Pro- Ser -Met)

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 Dpr(오로틸)-프롤린-세린-메티오닌을 고체상으로 합성한 후, 상기 실시예 4-1과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR과 ¹³C NMR을 이용하여 추가로 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 13.8 min. ¹H NMR (400 MHz, D₂O): δ 6.37 (s, 1H), 4.69 (dd, 1H, J = 6.0, J = 3.2), 4.62 (dd, 1H, J = 8.4, J = 6.4), 4.59 (dd, 1H, J = 9.2, J = 4.4), 4.48 (dd, 1H, J = 6.4, J = 5.2), 4.11(dd, 1H, J = 15.2, J = 4.4), 3.96-3.81 (m, 4H), 3.74 (m, 1H), 2.65-2.50 (m, 2H), 2.41 (m, 1H), 2.26-2.13 (m, 2H), 2.11 (s, 3H), 2.10-1.95 (m, 3H). ¹³C NMR (125 MHz, D₂O): δ 175.5, 173.9, 171.6, 166.9, 166.0, 162.6, 152.3, 144.8, 101.6, 61.0, 60.8, 56.2, 52.2, 52.1, 48.2, 39.1, 30.4, 29.6, 29.5, 25.0, 14.2. MALDI m/z calculated for C₂₁H₃₂N₇NaO₉S⁺[M+Na]⁺580.18, found 580.22.

<4-14> Dpr (1- 시아노 -1- 사이클로프로판카복실일 )-프롤린-세린-메티오닌 (Dpr(1-cyano-1-cyclopropanecarboxylyl)-Pro-Ser-Met)

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 Dpr(1-시아노-1-사이클로프로판카복실일)-프롤린-세린-메티오닌을 고체상으로 합성한 후, 상기 실시예 4-1과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR과 ¹³C NMR을 이용하여 추가로 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 15.8 min. ¹H NMR (400 MHz, D₂O): δ 4.63-4.56 (m, 3H), 4.51 (t, 1H, J = 6.0), 3.97 (dd, 1H, J = 14.8, J = 3.6), 3.93 (m, 1H), 3.90 (dd, 1H, J = 11.6, J = 6.0), 3.83-3.72 (m, 2H), 3.67 (dd, 1H, J = 14.8, J = 7.2), 2.69-2.54 (m, 2H), 2.40 (ddd, 1H, J = 11.6, J = 8.0, J = 6.0), 2.23 (m, 1H), 2.13 (s, 3H), 2.12-1.95 (m, 4H), 1.79-1.69 (m, 4H). ¹³C NMR (100 MHz, D₂O): δ 177.9, 176.0, 174.0, 172.2, 168.5, 122.5, 63.4, 63.0, 58.2, 54.5, 54.4, 50.5, 42.2, 32.6, 31.9, 31.8, 27.2, 20.9, 20.8, 16.5, 16.4. MALDI m/z calculated for C₂₁H₃₃N₆O₇S⁺[M+H]⁺513.21, found 513.23.

<4-15> Dpr (알파- 시아노 -4- 하이드록시신나밀 )-프롤린-세린-메티오닌 ( Dpr (α-cyano-4-hydroxycinnamyl)-Pro-Ser-Met)

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 Dpr(알파-시아노-4-하이드록시신나밀)-프롤린-세린-메티오닌을 고체상으로 합성한 후, 상기 실시예 4-1과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR과 ¹³C NMR을 이용하여 추가로 확인하였다.

83.7% Purity. R_t 18.4 min. ¹H NMR (400 MHz, D₂O): δ 8.12 (s, 1H), 7.94 (d, 2H, J = 8.8), 7.03 (d, 2H, J = 8.8), 4.80-4.60 (m, 2H), 4.53-4.46 (m, 2H), 3.99 (dd, 1H, J = 15.2, J = 4.4), 3.91-3.87 (m, 2H), 3.86-3.75 (m, 3H), 2.55-2.39 (m, 3H), 2.14-2.07 (m, 2H), 2.06 (s, 3H), 2.04-1.96 (m, 3H). ¹³C NMR (100 MHz, D₂O): δ 173.6, 171.6, 166.5, 165.6, 161.1, 153.9, 134.0, 123.9, 117.1, 116.5, 116.1, 99.6, 61.0, 60.9, 55.9, 51.9, 51.8, 48.3, 39.8, 30.2, 29.6, 29.4, 24.9, 14.2. MALDI m/z calculated for C₂₆H₃₅N₆O₈S⁺ [M+H]⁺591.22, found 591.22.

<4-16> Dpr (3,5- 디메틸벤조일 )-프롤린-세린-메티오닌 ( Dpr (3,5- dimethyl benzoyl)-Pro-Ser-Met)

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 Dpr(3,5-디메틸벤조일)-프롤린-세린-메티오닌을 고체상으로 합성한 후, 상기 실시예 4-1과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 21.1 min. MALDI m/z calculated for C₂₅H₃₈N₅O₇S⁺[M+H]⁺552.25, found 552.28.

<4-17> Dpr ((R)-(+)- 트롤록실 )-프롤린-세린-메티오닌 ( Dpr ((R)-(+)-troloxyl) -Pro- Ser -Met)

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 Dpr((R)-(+)-트롤록실)-프롤린-세린-메티오닌을 고체상으로 합성한 후, 상기 실시예 4-1과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 21.3 min. MALDI m/z calculated for C₃₀H₄₆N₅O₉S⁺[M+H]⁺652.30, found 652.40.

<4-18> Dpr (2-(4- 메틸페닐설폰아미도 )아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 ( Dpr (2- (4-methylphenylsulfonamido)acetyl)-Pro-Ser-Met)

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 Dpr(2-(4-메틸페닐설폰아미도)아세틸)-프롤린-세린-메티오닌을 고체상으로 합성한 후, 상기 실시예 4-1과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 20.0 min. MALDI m/z calculated for C₂₅H₃₉N₆O₉S₂ ⁺[M+H]⁺631.22, found 631.34.

<4-19> Dpr (5-니트로-3- 피라졸카복실일 )-프롤린-세린-메티오닌 ( Dpr (5-nitro-3-pyrazolecarboxylyl)-Pro-Ser-Met)

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 Dpr(5-니트로-3-피라졸카복실일)-프롤린-세린-메티오닌을 고체상으로 합성한 후, 상기 실시예 4-1과 동일한 방법으로 합성하였으며, 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR과 ¹³C NMR을 이용하여 추가로 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 17.2 min. ¹H NMR (400 MHz, D₂O): δ 7.56 (s, 1H), 4.71 (dd, 1H, J = 6.4, J = 4.0), 4.65 (dd, 1H, J = 8.8, J = 6.0), 4.53 (dd, 1H, J = 8.8, J = 4.4), 4.49 (t, 1H, J = 5.6), 4.09 (dd, 1H, J = 14.8, J = 4.0), 3.96-3.82 (m, 4H), 3.75 (m, 1H), 2.63-2.48 (m, 2H), 2.35 (m, 1H), 2.18 (m, 1H), 2.09 (s, 3H), 2.07-1.97 (m, 4H). ¹³C NMR (125 MHz, D₂O): δ 175.9, 173.9, 171.4, 166.3, 160.5, 155.8, 138.6, 102.6, 61.1, 60.8, 56.1, 52.6, 52.1, 48.3, 38.9, 30.5, 29.7, 29.5, 25.0, 14.2. MALDI m/z calculated for C₂₀H₃₁N₈O₉S⁺[M+H]⁺559.19, found 559.18.

< 실시예 5> Isonicotinic -Trp- Tyr -Val- Dpr(acyl)의 합성

전반적으로 Isonicotinic-Trp-Tyr-Val-Dpr(acyl)의 합성은 상기 실시예 4의 조건을 따랐으나, Mtt 보호기의 size가 크기 때문에, DMAP/DIC를 이용하여 Fmoc-Dpr(Mtt) anhydride를 만들어서 resin에 loading 하는 것 (79.2%) 보다는 HBTU를 커플링 reagent로 사용하여 2번에 걸쳐 loading 하는 것 (85.8%) 이 더욱 효과적이어서 후자의 방법으로 loading 하였다.

Isonicotinic-Trp-Tyr-Val-Dpr(acyl)의 합성 역시 왕 레진(Wang resin)에 Fmoc-based SPPS를 이용하였고 (Scheme 5), 15개의 acid 중에서 α-cyano-4-hydroxy cinnamic acid 를 제외한 14개의 산(acid)이 커플링 된 화합물을 얻었다 (107-120).

<5-1> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr ( 오로틸 ) ( Isonicotinyl -Trp- Tyr-Val-Dpr(orotyl)

필터가 설치된 20 mL TORVIQ PP syringe에 Wang resin LL(100-200 mesh, 500 mg, 0.44 mmol/g, 0.22 mmol)을 넣고 무수 DMF를 넣어 30분간 팽윤 시킨 후 배수시켰다. Fmoc-Dpr(Mtt)-OH(5.0 당량, 614.0 mg, 1.1 mmol), HBTU(5.0 당량, 417 mg, 1.1 mmol), HOBt.H₂O (5.0 당량, 169 mg, 1.1 mmol), DIPEA (10.0 당량, 0.38 mL, 2.2 mmol) 를 무수 DMF(10.0 mL)에 녹인 후 3분간 교반하여 팽윤한 resin에 첨가한 후 3시간 동안 orbital shaker (130 r.p.m.)를 사용하여 혼합하고 용매를 배수한 후 DMF, iPrOH와 CH₂Cl₂으로 세척하였다 (각각 15 mL x 1m x 3). UV Spectroptometry를 이용하여 Fmoc quantification한 결과, loading level은 71.7%로 나타났다. Loading level을 높이기 위해 상기 반응을 2회 반복하였다(85.8%).

Loading level을 90%로 계산하여 resin의 농도를 0.4 mmol이라 가정하고, 상기 실시예 3과 동일한 방법으로 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(오로틸)을 고체상으로 합성한 후, 이렇게 만들어진 resin (35 mg, 0.0154 mmol)에 degassed 94% TFA cocktail (0.7 mL)를 첨가하여 상온에서 1시간 동안 혼합한 후 여과하여 여액을 받고, 다시 TFA 용액으로 세척하여 (0.4 mL X 2) 그 여액을 받았다. 위 여액들을 합하여 evaporator를 이용하여 TFA를 제거한 후, cold ether를 사용하여 3회 decantation하였다. 이때 생성된 화합물의 손실을 막기 위해 원심 분리기를 이용하였으며, high vacuum dry 후 semi-preparative HPLC (binary solvent system, solvent A: 0.1% TFA/H₂O, solvent B: 0.1% TFA/CH₃CN, 5-100% B over 42 min)를 이용하여 분리 및 정제하고 동결 건조한 후 mass spectrometry 로 확인하였고 ¹H NMR과 ¹³C NMR를 이용하여 추가로 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 19.2 min. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆): δ 11.34 (brs, 1H), 10.75 (brs, 1H), 10.74 (brs, 1H), 8.81 (d, 1H, J = 8.4), 8.77 (t, 1H, J = 5.6), 8.71 (brs, 2H), 8.27 (d, 1H, J = 7.6), 8.24 (d, 1H, J = 8.4), 7.92 (d, 1H, J = 8.0), 7.69 (d, 2H, J = 5.2), 7.65 (d, 1H, J = 7.6), 7.29 (d, 1H, J = 7.6), 7.15 (d, 1H, J = 2.0), 7.05 (m, 1H), 7.03 (d, 2H, J = 8.4), 6.95 (t, 1H, J = 7.6), 6.57 (d, 2H, J = 8.4), 6.04 (s, 1H), 4.74 (m, 1H), 4.57 (m, 1H), 4.46 (td, 1H, J = 7.6, J = 6.8), 4.18 (t, 1H, J = 8.0), 3.65-3.55 (m, 2H, identified from HSQC), 3.17 (dd, 1H, J = 14.4, J = 3.6), 3.06 (dd, 1H, J = 14.4, J = 10.4), 2.94 (dd, 1H, J = 14.0, J = 3.6), 2.73 (dd, 1H, J = 14.0, J = 8.4), 2.00 (m, 1H), 0.89 (d, 3H, J = 6.4), 0.86 (d, 3H, J = 6.4). ¹³C NMR (100 MHz, DMSO-d ₆): δ 171.4, 171.3, 171.2, 170.9, 164.4, 164.3, 160.5, 155.7, 150.8, 149.5, 145.0, 141.6, 136.0, 130.2, 127.8, 127.2, 123.6, 121.7, 120.9, 118.5, 118.2, 114.8, 111.3, 110.3, 100.1, 57.8, 54.2, 54.1, 51.3, 40.3, 36.3, 30.6, 27.3, 19.1, 18.1. MALDI m/z calculated for C₃₉H₄₁N₉NaO₁₀ ⁺ [M+Na]⁺818.29, found 818.58.

<5-2> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (3,5- 디메틸벤조일 ) (Isonicotinyl-Trp-Tyr-Val-Dpr(3,5-dimethyl benzoyl))

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(3,5-디메틸벤조일)을 고체상으로 합성하였으며, 상기 실시예 5-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR과 ¹³C NMR을 이용하여 추가로 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 24.7 min. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆): δ 10.74 (d, 1H, J = 2.0), 8.87 (d, 1H, J = 8.0), 8.74 (brs, 2H), 8.40 (t, 1H, J = 5.6), 8.29 (d, 1H, J = 6.8), 8.21 (d, 1H, J = 8.0), 7.86 (d, 1H, J = 8.8), 7.72 (d, 2H, J = 5.6), 7.66 (d, 1H, J = 7.6), 7.41 (s, 2H), 7.29 (d, 1H, J = 7.6), 7.15 (d, 1H, J = 2.0), 7.13 (s, 1H), 7.04 (t, 1H, J = 7.6), 7.01 (d, 2H, J = 8.4), 7.00 (t, 1H, J = 7.6), 6.57 (d, 2H, J = 8.4), 4.75 (m, 1H), 4.55 (m, 1H), 4.43 (q, 1H, J = 6.8), 4.23 (dd, 1H, J = 8.8, J = 6.8), 3.64-3.57 (m, 2H), 3.17 (dd, 1H, J = 14.8, J = 4.0), 3.06 (dd, 1H, J = 14.8, J = 10.4), 2.93 (dd, 1H, J = 14.0, J = 4.0), 2.73 (dd, 1H, J = 14.0, J = 9.6), 2.29 (s, 6H), 2.00 (m, 1H), 0.88 (d, 3H, J = 6.4), 0.85 (d, 3H, J = 6.4). ¹³C NMR (100 MHz, DMSO-d ₆): δ 171.7, 171.2, 171.0, 170.8, 167.1, 164.3, 155.7, 149.1, 141.9, 137.4, 136.0, 134.3, 132.6, 130.1, 127.8, 127.2, 125.0, 123.6, 121.9, 120.9, 118.5, 118.2, 114.8, 111.3, 110.4, 57.4, 54.2 (2C, identified from HSQC), 52.2, 40.3 (identified from HSQC), 36.2, 30.9, 27.2, 20.8, 19.1, 18.0. MALDI m/z calculated for C₄₃H₄₇N₇NaO₈ ⁺ [M+Na]⁺812.34, found 812.67.

<5-3> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (7- 메톡시 -1- 벤조퓨란 -2- 카 복실일) (Isonicotinyl-Trp-Tyr-Val-Dpr(7-methoxy-1-benzofuran-2-carboxylyl))

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(7-메톡시-1-벤조퓨란-2-카복실일)을 고체상으로 합성하였으며, 상기 실시예 5-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR과 ¹³C NMR을 이용하여 추가로 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 24.3 min. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆): δ 10.73 (s, 1H), 8.85 (d, 1H, J = 8.0), 8.73 (brs, 2H), 8.66 (t, 1H, J = 5.6), 8.35 (d, 1H, J = 7.2), 8.21 (d, 1H, J = 8.0), 7.86 (d, 1H, J = 8.4), 7.71 (d, 2H, J = 4.0), 7.66 (d, 1H, J = 7.6), 7.50 (s, 1H), 7.29 (d, 2H, J = 7.6), 7.23 (t, 1H, J = 7.6), 7.14 (d,1H, J = 1.6), 7.06-7.01 (m, 2H), 6.99 (d, 2H, J = 8.8), 6.95 (t, 1H, J = 7.6), 6.56 (d, 2H, J = 8.8), 4.74 (m, 1H), 4.54 (m, 1H), 4.45 (q, 1H, J = 7.2), 4.23 (dd, 1H, J = 8.4, J = 6.8), 3.94 (s, 3H), 3.70-3.60 (m, 2H, identified from HSQC), 3.16 (dd, 1H, J = 14.8, J = 3.6), 3.06 (dd, 1H, J = 14.8, J = 9.8), 2.93 (dd, 1H, J = 13.6, J = 4.0), 2.72 (dd, 1H, J = 13.6, J = 9.2), 2.00 (m, 1H), 0.87 (d, 3H, J = 6.8), 0.84 (d, 3H, J = 6.8). ¹³C NMR (100 MHz, DMSO-d ₆): δ 171.6, 171.2, 170.9, 170.8, 164.3, 158.3, 155.7, 149.2, 148.9, 145.2, 143.6, 141.8, 136.0, 130.1, 128.6, 127.8, 127.2, 124.6, 123.6, 121.8, 120.9, 118.5, 118.2, 114.8, 114.5, 111.3, 110.4, 110.2, 108.8, 57.4, 55.7, 54.2 (2C, identified from HSQC), 52.0, 35.9 (identified from HSQC), 36.3, 30.9, 27.2, 19.1, 18.0. MALDI m/z calculated for C₄₄H₄₅N₇NaO₁₀ ⁺ [M+Na]⁺854.31, found 854.67.

<5-4> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (2-(2- 시아노페닐티오 ) 벤조 일) (Isonicotinyl-Trp-Tyr-Val-Dpr(2-(2-Cyanophenylthio)benzoyl))

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-(2-시아노페닐티오)벤조일)을 고체상으로 합성하였으며, 상기 실시예 5-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR과 ¹³C NMR을 이용하여 추가로 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 25.5 min. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆): δ 12.70 (brs, 1H), 10.73 (d, 1H, J = 2.0), 9.10 (brs, 1H), 8.83 (d, 1H, J = 8.4), 8.70 (brs, 2H), 8.53 (t, 1H, J = 5.6), 8.28 (d, 1H, J = 7.6), 8.22 (d, 1H, J = 7.6), 7.92 (dd, 1H, J = 8.0, J = 1.2), 7.85 (d, 1H, J = 8.8), 7.68-7.64 (m, 4H), 7.56-7.51 (m, 2H), 7.44 (d, 1H, J = 8.0), 7.40-7.33 (m, 2H), 7.29 (d, 1H, J = 7.6), 7.15 (d, 1H, J = 2.0), 7.05-6.99 (m, 2H), 7.02 (d, 2H, J = 8.0), 6.96 (t, 1H, J = 7.6), 6.57 (d, 2H, J = 8.0), 4.74 (m, 1H), 4.55 (m, 1H), 4.46 (q, 1H, J = 7.2), 4.25 (dd, 1H, J = 8.8, J = 6.8), 3.62-3.56 (m, 2H), 3.17 (dd, 1H, J = 14.8, J = 4.0), 3.07 (dd, 1H, J = 14.8, J = 10.4), 2.94 (dd, 1H, J = 14.4, J = 4.0), 2.74 (dd, 1H, J = 14.4, J = 9.6), 2.02 (m, 1H), 0.89 (d, 3H, J = 6.8), 0.86 (d, 3H, J = 6.8). ¹³C NMR (100 MHz, DMSO-d ₆): δ 171.6, 171.3, 171.0, 170.8, 167.4, 164.5, 155.7, 149.7, 141.3, 138.7, 136.8, 136.0, 134.4, 134.1, 133.8, 133.5, 131.0, 130.5, 130.1, 128.8, 128.5, 127.9, 127.2, 127.1, 123.6, 121.6, 120.9, 118.5, 118.2, 117.0, 115.0, 114.8, 111.3, 110.4, 57.4, 54.2 (2C, identified from HSQC), 51.9, 40.0 (identified from HSQC), 36.3, 30.9, 27.2, 19.2, 18.0. MALDI m/z calculated for C₄₈H₄₆N₈NaO₈S ⁺ [M+Na]⁺917.31, found 917.72.

<5-5> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr ((R)-(+)- 트롤록실 ) (Isonicotinyl-Trp-Tyr-Val-Dpr((R)-(+)-troloxyl))

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr((R)-(+)-트롤록실)을 고체상으로 합성하였으며, 상기 실시예 5-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR과 ¹³C NMR을 이용하여 추가로 확인하였다.

91.3% Purity. R_t 25.0 min. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆): δ 10.73 (d, 1H, J = 2.4), 8.87 (d, 1H, J = 8.0), 8.74 (brs, 2H), 8.31 (d, 1H, J = 7.2), 8.25 (d, 1H, J = 8.0), 7.83 (d, 1H, J = 8.8), 7.73 (d, 2H, J = 6.0), 7.66 (d, 1H, J = 8.0), 7.53 (dd, 1H, J = 6.8, J = 5.6), 7.29 (d, 1H, J = 8.0), 7.15 (d, 1H, J = 2.4), 7.03 (m, 1H), 7.02 (d, 2H, J = 8.4), 6.96 (t, 1H, J = 8.0), 6.57 (d, 2H, J = 8.4), 4.75 (m, 1H), 4.55 (m, 1H), 4.27 (q, 1H, J = 7.2), 4.20 (dd, 1H, J = 8.8, J = 6.4), 3.55 (m, 1H), 3.34 (m, 1H), 3.17 (dd, 1H, J = 14.4, J = 4.0), 3.06 (dd, 1H, J = 14.4, J = 9.6), 2.94 (dd, 1H, J = 14.4, J = 4.0), 2.73 (dd, 1H, J = 14.4, J = 9.6), 2.54-2.41 (m, 2H), 2.08 (s, 3H), 2.07 (m, 1H), 2.06 (s, 3H), 2.02 (s, 3H), 1.96 (m, 1H), 1.75 (m, 1H), 1.31 (s, 3H), 0.88 (d, 3H, J = 6.8), 0.84 (d, 3H, J = 6.8). ¹³C NMR (100 MHz, DMSO-d ₆): δ 173.9, 171.6, 171.2, 170.9, 170.8, 164.2, 155.7, 149.0, 145.9, 143.7, 142.1, 136.0, 130.1, 127.8, 127.2, 123.6, 122.7, 121.9, 121.3, 120.9, 120.2, 118.5, 118.2, 117.0, 114.8, 111.3, 110.3, 77.1, 57.3, 54.2 (2C, identified from HSQC), 52.0, 39.5 (identified from HSQC), 36.3, 31.1, 29.3, 27.2, 23.3, 19.9, 19.0, 18.0, 12.8, 12.0, 11.8. MALDI m/z calculated for C₄₈H₅₅N₇NaO₁₀ ⁺ [M+Na]⁺912.39, found 912.74.

<5-6> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (1- 시아노 -1- 사이클로프로판카복실일 ) ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (1- cyano -1- cyclopropanecarboxylyl ))

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(1-시아노-1-사이클로프로판카복실일)을 고체상으로 합성하였으며, 상기 실시예 5-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR과 ¹³C NMR을 이용하여 추가로 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 21.4 min. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆): δ 10.74 (d, 1H, J = 1.2), 8.87 (d, 1H, J = 8.4), 8.74 (brs, 2H), 8.24 (d, 2H, J = 7.2), 8.13 (t, 1H, J = 6.0), 7.85 (d, 1H, J = 8.8), 7.73 (d, 2H, J = 4.4), 7.67 (d, 1H, J = 7.6), 7.29 (d, 1H, J = 7.6), 7.15 (d, 1H, J = 1.2), 7.04 (m, 1H), 7.03 (d, 2H, J = 8.0), 6.96 (t, 1H, J = 7.6), 6.57 (d, 2H, J = 8.0), 4.75 (m, 1H), 4.56 (m, 1H), 4.34 (q, 1H, J = 7.2), 4.20 (dd, 1H, J = 8.8, J = 6.8), 3.51-3.40 (m, 2H), 3.17 (dd, 1H, J = 14.8, J = 4.0), 3.07 (dd, 1H, J = 14.8, J = 10.4), 2.96 (dd, 1H, J = 14.0, J = 4.4), 2.76 (dd, 1H, J = 14.0, J = 9.6), 2.00 (m, 1H), 1.57-1.51 (m, 2H), 1.50-1.44 (m, 2H), 0.89 (d, 3H, J = 6.4), 0.85 (d, 3H, J = 6.4). ¹³C NMR (100 MHz, DMSO-d ₆): δ 171.5, 171.2, 170.9, 170.8, 165.6, 164.3, 155.7, 149.1, 142.0, 136.0, 130.1, 127.8, 127.2, 123.6, 121.9, 120.9, 119.9, 118.5, 118.2, 114.8, 111.3, 110.4, 57.4, 54.2 (2C, identified from HSQC), 51.7, 40.5, 36.3, 30.9, 27.2, 19.1, 18.0, 16.8, 16.7, 13.6. MALDI m/z calculated for C₃₉H₄₂N₈NaO₈ ⁺ [M+Na]⁺773.30, found 773.57.

<5-7> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr ( 로다닌 -3-아세틸) (Isonicotinyl-Trp-Tyr-Val-Dpr(rhodanine-3-acetyl))

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(로다닌-3-아세틸)을 고체상으로 합성하였으며, 상기 실시예 5-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR과 ¹³C NMR을 이용하여 추가로 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 22.3 min. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆): δ 10.73 (d, 1H, J = 1.6), 8.84 (d, 1H, J = 8.4), 8.72 (brs, 2H), 8.28 (t, 1H, J = 6.0), 8.24 (d, 1H, J = 8.0), 8.20 (d, 1H, J = 7.6), 7.83 (d, 1H, J = 8.0), 7.69 (d, 2H, J = 4.0), 7.66 (d, 1H, J = 7.6), 7.29 (d, 1H, J = 7.6), 7.14 (d, 1H, J = 1.6), 7.04 (m, 1H), 7.03 (d, 2H, J = 8.4), 6.96 (t, 1H, J = 7.6), 6.57 (d, 2H, J = 8.4), 4.74 (m, 1H), 4.55 (m, 1H), 4.49 (s, 2H), 4.31 (s, 2H), 4.29 (m, 1H), 4.20 (dd, 1H, J = 8.0, J = 6.8), 3.44-3.33 (m, 2H, identified from HSQC), 3.16 (dd, 1H, J = 14.8, J = 3.6), 3.06 (dd, 1H, J = 14.8, J = 10.4), 2.97 (dd, 1H, J = 14.0, J = 3.6), 2.76 (dd, 1H, J = 14.0, J = 9.6), 2.00 (m, 1H), 0.88 (d, 3H, J = 6.8), 0.85 (d, 3H, J = 6.8). ¹³C NMR (100 MHz, DMSO-d ₆): δ 202.8, 173.9, 171.5, 171.3, 171.1, 170.8, 165.2, 164.5, 155.7, 149.5, 141.6, 136.1, 130.1, 127.9, 127.2, 123.6, 121.7, 120.9, 118.5, 118.2, 114.9, 111.3, 110.4, 57.5, 54.2, 54.1, 51.9, 45.9, 39.5, 36.2, 36.0, 30.9, 27.3, 19.2, 18.0. MALDI m/z calculated for C₃₉H₄₂N₈NaO₉S₂ ⁺ [M+Na]⁺853.24, found 853.52.

<5-8> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (2- 플루오로페닐아세틸 ) (Isonicotinyl-Trp-Tyr-Val-Dpr(2-fluorophenylacetyl))

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-플루오로페닐아세틸)을 고체상으로 합성하였으며, 상기 실시예 5-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 23.3 min. MALDI m/z calculated for C₄₂H₄₄FN₇NaO₈ ⁺ [M+Na]⁺816.31, found 816.63.

<5-9> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (4- 펜틸바이사이클로[2.2.2]옥탄 -1-카복실일) ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (4- pentylbicyclo[2.2.2]octane -1-carboxylyl))

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(4-펜틸바이사이클로[2.2.2]옥탄-1-카복실일)을 고체상으로 합성하였으며, 상기 실시예 5-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 31.1 min. MALDI m/z calculated for C₄₈H₆₁N₇NaO₈ ⁺ [M+Na]⁺886.45, found 886.80.

<5-10> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr ( 퀴날딜 ) ( Isonicotinyl - Trp-Tyr-Val-Dpr(quinaldyl))

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(퀴나딜)을 고체상으로 합성하였으며, 상기 실시예 5-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 24.4 min. MALDI m/z calculated for C₄₄H₄₄N₈NaO₈ ⁺ [M+Na]⁺835.32, found 835.66

<5-11> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr ( 타이글라일 ) ( Isonicotinyl -Trp-Tyr-Val-Dpr(tiglyl))

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(타이글라일)을 고체상으로 합성하였으며, 상기 실시예 5-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 22.1 min. MALDI m/z calculated for C₃₉H₄₅N₇NaO₈ ⁺[M+Na]⁺762.32, found 762.72.

<5-12> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (5- 클로로인돌 -2- 카복실일 ) (Isonicotinyl-Trp-Tyr-Val-Dpr(5-chloroindole-2-carboxylyl))

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(5-클로로인돌-2-카복실일)을 고체상으로 합성하였으며, 상기 실시예 5-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

96.2% Purity. R_t 25.7 min. MALDI m/z calculated for C₄₃H₄₃ClN₈NaO₈ ⁺ [M+Na]⁺857.28, found 857.62.

<5-13> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (5-니트로-3- 피라졸카복실일 ) ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (5-nitro-3- pyrazolecarboxylyl ))

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(5-니트로-3-피라졸카복실일)을 고체상으로 합성하였으며, 상기 실시예 5-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

87.7% Purity. R_t 21.5 min. MALDI m/z calculated for C₃₈H₄₀N₁₀NaO₁₀ ⁺ [M+Na]⁺819.28, found 819.68

<5-14> 이소니코티닐 -트립토판- 타이로신 -발린- Dpr (2-(4- 메틸페닐설폰아미도 )아세틸) ( Isonicotinyl -Trp- Tyr -Val- Dpr (2-(4- methylphenylsulfonamido )acetyl))

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-(4-메틸페닐설폰아미도)아세틸)을 고체상으로 합성하였으며, 상기 실시예 5-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 23.7 min. MALDI m/z calculated for C₄₃H₄₈N₈NaO₁₀S⁺ [M+Na]⁺891.31, found 891.59.

< 실시예 6> Val- Dpr ( acyl )-Pro- Ser / Dpr ( acyl )-Pro- Ser의 합성

잘려진 (truncated) 펩티도미메틱 화합물들의 생물학적 활성이 좋은 것으로 나타났으므로, 또 다른 잘려진 펩티도미메틱 화합물, 즉 COOH 말단이 Serine 인 trimer 와 tetramer 로 이루어진 화합물의 합성을 설계하였다.

도 7에서 보는바와 같이, 실시예 4 및 5에서 합성된 대부분의 화합물들이 dTBP2 보다 효과적이었으므로, 5개의 산(acids, (2,6-dioxo-1,2,3,6-tetrahydropyrimidine-4-carboxylic acid, 7-methoxy-1-benzofuran-2-carboxylic acid, 3,5-dimethylbenzoic acid, 5-chloroindol-2-carboxylic acid and 2-fluorophenylacetic acid) 을 선정하여, 상기 언급한 실시예 3에서의 합성 방법에 따라 화합물을 합성하였다 (121-130).

<6-1> 발린- Dpr ( 오로틸 )-프롤린-세린 (Val- Dpr ( orotyl )-Pro- Ser )

필터가 설치된 20 mL TORVIQ PP syringe에 Wang resin LL(100-200 mesh, 320 mg, 0.44 mmol/g, 0.141 mmol)을 넣고 무수 DMF를 넣어 30분간 팽윤 시킨 후 배수시켰다. Fmoc-Ser(tBu)-OH(10.0 equiv., 541 mg, 1.41 mmol)을 50 mL pear shape flask에 넣고 아르곤 가스로 치환한 후, 무수 CH₂Cl₂ (4 mL) 에 녹였다. DIC (5.0 당량, 0.11 mL, 0.705 mmol)를 상기 혼합물에 첨가한 후 0℃에서 20분간 교반하였다 (white solid 생성). 상온에서 감압 증류한 후 남은 suspension을 최소량의 무수 DMF (4.5 mL)에 녹이고, DMAP (0.1 당량, 1.7 mg, 0.014 mmol)을 무수 DMF (0.1 mL)에 녹여서 두 용액을 순서대로 팽윤 시킨 resin에 첨가하여 상온에서 1시간 동안 orbital shaker(130 r.p.m.)를 사용하여 혼합하고 용매를 배수한 후 DMF, iPrOH와 CH₂Cl₂으로 세척하였다 (각각 10 mL X 1 min X 3). UV Spectrometry를 이용하여 Fmoc quantification한 결과, loading level은 97.0%로 나타났다.

Fmoc 그룹을 deprotection 하기 위해 상기 resin (200 mg, 0.088 mmol)을 무수 DMF에 30분간 팽윤시킨 후, 20% piperidine/무수 DMF (4.0 mL)을 첨가하여 10분간 상온에서 orbital shaker(130 r.p.m.)를 사용하여 혼합하고 용매를 배수한 후 DMF, iPrOH와 CH₂Cl₂으로 세척하였다 (10 mL X 1 min X 3). 30분간 aspirator를 사용하여 vacuum dry 한 후 Kaiser test를 이용하여 반응이 완결되었음을 확인하였다.

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 발린-Dpr(오로틸)-프롤린-세린을 고체상으로 합성한 후, resin (40 mg, 0.018 mmol) 을 필터가 설치된 3 mL TORVIQ PP syringe에 넣고, 20% piperidine/무수 DMF (0.8 mL)를 사용하여 Fmoc 그룹을 deprotection하고, degassed 94% TFA cocktail (0.8 mL)을 첨가하여 상온에서 1시간 동안 혼합한 후 여과하여 여액을 받고, 다시 TFA (0.4 mL X 2)로 세척하여 그 여액을 받았다. 위 여액들을 합하여 evaporator를 이용하여 TFA를 제거한 후, cold ether를 사용하여 3회 decantation하였다. 이때 생성된 화합물의 손실을 막기 위해 원심 분리기를 이용하였으며, high vacuum dry 후 semi-preparative HPLC (binary solvent system, solvent A: 0.1% TFA/H₂O, solvent B: 0.1% TFA/MeOH, 10-90% B over 31 min)를 이용하여 분리 및 정제한 후 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR과 ¹³C NMR을 이용하여 추가로 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 13.7 min. ¹H NMR (400 MHz, D₂O): δ 6.23 (s, 1H), 5.08 (dd, 1H, J = 7.2, J = 5.2), 4.59-4.54 (m, 2H), 4.02 (dd, 1H, J = 12.0, J = 4.4), 3.94-3.84 (m, 4H), 3.78 (m, 1H), 3.68 (dd, 1H, J = 14.0, J = 7.6), 2.36 (m, 1H), 2.24 (m, 1H), 2.11-1.98 (m, 3H), 1.03 (d, 3H, J = 6.8), 1.02 (d, 3H, J = 6.8). ¹³C NMR (100 MHz, D₂O): δ 174.0, 173.4, 169.4, 169.0, 166.9, 162.2, 152.3, 145.2, 101.3, 61.2, 60.7, 58.5, 55.0, 51.2, 48.4, 40.5, 30.1, 29.6, 24.8, 17.7, 16.9. MALDI m/z calculated for C₂₁H₃₂N₇O₉ ⁺[M+H]⁺526.23, found 526.34.

<6-2> 발린- Dpr (7- 메톡시 -1- 벤조퓨란 -2- 카복실일 )-프롤린-세린 (Val- Dpr (7-methoxy-1-benzofuran-2-carboxylyl)-Pro-Ser)

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 발린-Dpr(7-메톡시-1-벤조퓨란-2-카복실일)-프롤린-세린을 합성하였으며, 상기 실시예 6-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR과 ¹³C NMR을 이용하여 추가로 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 25.8 min. ¹H NMR (400 MHz, D₂O): δ 7.56 (s, 1H), 7.38 (dd, 1H, J = 8.0, J = 1.2), 7.33 (t, 1H, J = 8.0), 7.13 (dd, 1H, J = 8.0, J = 1.2), 5.09 (dd, 1H, J = 7.2, J = 5.6), 4.57 (dd, 1H, J = 8.8, J = 6.4), 4.55 (t, 1H, J = 4.4), 4.03 (s, 3H), 4.10-3.77 (m, 7H), 2.37 (m, 1H), 2.23 (m, 1H), 2.11-1.99 (m, 3H), 1.03 (d, 6H, J = 7.2). ¹³C NMR (100 MHz, D₂O): δ 173.8, 173.5, 169.4, 169.3, 161.5, 147.2, 145.1, 144.4, 128.7, 125.0, 115.2, 112.0, 109.5, 61.3, 60.8, 58.6, 56.2, 55.1, 51.6, 48.4, 39.9, 30.1, 29.5, 24.8, 17.7, 17.0. MALDI m/z calculated for C₂₆H₃₆N₅O₉ ⁺[M+H]⁺562.25, found 562.32.

<6-3> 발린- Dpr (3,5- 디메틸벤조일 )-프롤린-세린 (Val- Dpr (3,5- dimethylbenzoyl)-Pro-Ser)

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 발린-Dpr(3,5-디메틸벤조일)-프롤린-세린 을 합성하였으며, 상기 실시예 6-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR과 ¹³C NMR을 이용하여 추가로 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 26.9 min. ¹H NMR (400 MHz, D₂O): δ 7.44 (s, 2H), 7.34 (s, 1H), 5.05 (t, 1H, J = 6.4), 4.57 (dd, 1H, J = 8.4, J = 5.6), 4.49 (t, 1H, J = 4.4), 3.96 (dd, 1H, J = 11.6, J = 4.8), 3.90-3.80 (m, 5H), 3.72 (m, 1H), 2.37 (m, 1H), 2.36 (s, 6H), 2.24 (m, 1H), 2.06-1.95 (m, 3H), 1.04 (d, 3H, J = 6.8), 1.03 (d, 3H, J = 6.8). ¹³C NMR (100 MHz, D₂O): δ 173.9, 173.3, 171.7, 169.6, 169.3, 139.3, 134.1, 133.0, 124.9, 61.2, 60.7, 58.5, 55.1, 51.7, 48.4, 40.3, 30.1, 29.5, 24.8, 20.4, 17.6, 17.0. MALDI m/z calculated for C₂₅H₃₈N₅O₇ ⁺[M+H]⁺520.28, found 520.38.

<6-4> 발린- Dpr (5- 클로로인돌 -2- 카복실일 )-프롤린-세린 (Val- Dpr (5-chloroindole-2-carboxylyl)-Pro-Ser)

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 발린-Dpr(5-클로로인돌-2-카복실일)-프롤린-세린을 합성하였으며, 상기 실시예 6-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR과 ¹³C NMR을 이용하여 추가로 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 28.8 min. ¹H NMR (400 MHz, D₂O): δ 7.61 (d, 1H, J = 2.0), 7.42 (d, 1H, J = 8.8), 7.26 (dd, 1H, J = 8.8, J = 2.0), 6.97 (s, 1H), 5.00 (t, 1H, J = 6.8), 4.60-4.56 (m, 2H), 4.01 (dd, 1H, J = 11.6, J = 4.8), 3.93-3.73 (m, 5H), 3.67 (m, 1H), 2.36 (dd, 1H, J = 15.2, J = 6.8), 2.24 (td, 1H, J = 13.6, J = 6.8), 2.02-1.94 (m, 3H), 1.03 (d, 6H, J = 7.2). ¹³C NMR (100 MHz, D₂O): δ 173.7, 173.3, 169.3, 169.1, 163.6, 134.9, 130.7, 127.7, 125.4, 124.8, 120.9, 113.4, 104.0, 61.0, 60.5, 58.3, 55.0, 51.4, 48.2, 39.7, 29.9, 29.3, 24.6, 17.4, 16.7. MALDI m/z calculated for C₂₅H₃₃ClN₆NaO₇ ⁺[M+Na]⁺587.20, found 587.31.

<6-5> 발린- Dpr (2- 플루오로페닐아세틸 )-프롤린-세린 (Val- Dpr (2- fluorophenyl acetyl)-Pro- Ser )

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 발린-Dpr(2-플루오로페닐아세틸)-프롤린-세린을 합성하였으며, 상기 실시예 6-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

96.3% Purity. R_t 22.2 min. MALDI m/z calculated for C₂₄H₃₄FN₅NaO₇ ⁺[M+Na]⁺546.23, found 546.32.

<6-6> Dpr ( 오로틸 )-프롤린-세린 ( Dpr ( orotyl )-Pro- Ser )

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 Dpr(오로틸)-프롤린-세린을 합성하였으며, 상기 실시예 6-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR과 ¹³C NMR을 이용하여 추가로 확인하였다.

93.9% Purity. R_t 10.8 min. ¹H NMR (400 MHz, D₂O): δ 6.29 (s, 1H), 4.69 (dd, 1H, J = 6.4, J = 3.2), 4.63 (dd, 1H, J = 8.0, J = 5.6), 4.57 (t, 1H, J = 4.4), 4.08-4.00 (m, 2H), 3.94-3.75 (m, 4H), 2.41 (m, 1H), 2.16-2.00 (m, 3H). ¹³C NMR (100 MHz, D₂O): δ 173.6, 173.5, 166.6, 165.8, 162.5, 152.1, 144.5, 101.4, 61.1, 60.7, 55.3, 51.9, 48.0, 39.0, 29.2, 24.7. MALDI m/z calculated for C₁₆H₂₃N₆O₈ ⁺[M+H]⁺427.16, found 427.27.

<6-7> Dpr (7- 메톨시 -1- 벤조퓨란 -2- 카복실일 )-프롤린-세린 ( Dpr (7- methoxy -1-benzofuran-2-carboxylyl)-Pro-Ser)

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 Dpr(7-메톨시-1-벤조퓨란-2-카복실일)-프롤린-세린을 합성하였으며, 상기 실시예 6-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 24.7 min. MALDI m/z calculated for C₂₁H₂₇N₄O₈ ⁺[M+H]⁺463.18, found 463.28.

<6-8> Dpr (3,5- 디메틸벤조일 )-프롤린-세린 ( Dpr (3,5- dimethylbenzoyl ) -Pro-Ser)

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 Dpr(3,5-디메틸벤조일)-프롤린-세린을 합성하였으며, 상기 실시예 6-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR과 ¹³C NMR을 이용하여 추가로 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 25.9 min. ¹H NMR (400 MHz, D₂O): δ 7.46 (s, 2H), 7.36 (s, 1H), 4.70 (dd, 1H, J = 6.0, J = 4.0), 4.63 (m, 1H), 4.40 (t, 1H, J = 4.0), 4.04 (dd, 1H, J = 15.2, J = 4.0), 3.93 (dd, 1H, J = 15.2, J = 4.8), 3.90 (dd, 1H, J = 15.2, J = 6.0), 3.84 (m, 1H), 3.77-3.70 (m, 2H), 2.41 (m, 1H), 2.38 (s, 6H), 2.09-1.99 (m, 3H). ¹³C NMR (125 MHz, D₂O): δ 173.5, 173.2, 172.0, 166.2, 139.1, 134.0, 132.4, 124.8, 60.9, 60.6, 54.9, 52.1, 48.0, 39.3, 29.2, 24.7, 20.2. MALDI m/z calculated for C₂₀H₂₉N₄O₆ ⁺[M+H]⁺421.21, found 421.30.

<6-9> Dpr (5- 클로로인돌 -2- 카복실일 )-프롤린-세린 ( Dpr (5- chloroindole -2- carboxylyl)-Pro-Ser)

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 Dpr(5-클로로인돌-2-카복실일)-프롤린-세린을 합성하였으며, 상기 실시예 6-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였고, ¹H NMR과 ¹³C NMR을 이용하여 추가로 확인하였다.

99.9% Purity. R_t 28.3 min. ¹H NMR (400 MHz, D₂O): δ 7.73 (d, 1H, J = 2.0), 7.50 (d, 1H, J =8.8), 7.33 (dd, 1H, J = 8.8, J =2.0), 7.09 (s, 1H), 4.68 (dd, 1H, J = 6.0, J = 4.0), 4.64 (dd, 1H, J = 8.4, J = 6.0), 4.46 (dd, 1H, J = 4.8, J = 4.0), 4.04 (dd, 1H, J = 15.2, J = 4.0), 3.93 (dd, 1H, J = 15.2, J = 4.8), 3.92-3.71 (m, 4H), 2.42 (dd, 1H, J = 8.4, J = 6.0), 2.12-1.99 (m, 3H). ¹³C NMR (100 MHz, D₂O): δ 173.7, 173.6, 166.4, 164.3, 135.3, 130.7, 128.0, 125.7, 125.2, 121.2, 113.8, 104.6, 61.2, 60.9, 55.5, 52.3, 48.3, 39.1, 29.5, 24.9. MALDI m/z calculated for C₂₀H₂₅ClN₅O₆ ⁺[M+H]⁺466.15, found 466.23.

<6-10> Dpr (2- 플루오로페닐아세틸 )-프롤린-세린 ( Dpr (2- fluorophenylacetyl ) -Pro-Ser)

상기 실시예 3과 동일한 방식으로 Dpr(2-플루오로페닐아세틸)-프롤린-세린 을 합성하였으며, 상기 실시예 6-1과 동일한 방법을 이용하여 합성하였다. 질량분석계(mass spectrometry, MS)로 생성된 화합물을 확인하였다.

91.0% Purity. R_t 21.4 min. MALDI m/z calculated for C₁₉H₂₆FN₄O₆ ⁺[M+H]⁺425.18, found 425.24.

< 실험예 1> 인터루킨-8 분비 억제 측정 (IL-8 release inhibition assay)

상기 실시예를 통해 수득한 펩티도미메틱 화합물들이 인터루킨-8의 분비를 억제함을 확인함으로써, 상기 펩티도미메틱 화합물들이 류마티스 관절염 또는 알레르기 질환의 예방 및 치료 용도로 사용될 수 있음을 규명하였다.

<1-1> 실시예 2에서 제조한 화합물의 인터루킨-8 분비 억제 정도 확인

실시예 1의 dTBP2 및 실시예 2에서 제조한 화합물들의 인터루킨-8 분비 억제정도를 측정하였다. 구체적으로, dTBP2 및 화합물들을 75 nM 농도로 15분 동안 BEAS-2B 세포(인간기관지상피세포)에 처리하고, 75 nM의 dTCTP 를 넣은 후 18 시간 후에 상등액을 취하였다. 취한 상등액은 4 ^oC에서 10,000 x g 으로 원심분리하고 분리된 상층액으로 IL-8 분석을 수행하였다. IL-8 분석에서는, PIERCE 사의 IL-8 ELISA kit 를 이용하여 제조자의 프로토콜에 따라 IL-8 분비 억제 정도를 확인하였다.

그 결과, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-타이로신-프롤린-세린-메티오닌(3) 뿐만 아니라 2-메틸헥사노일- 트립토판-타이로신-발린-타이로신-프롤린-세린-메티오닌(2), 알파-시아노-4-하이드록시신나밀- 트립토판-타이로신-발린-타이로신-프롤린-세린-메티오닌(4), 및 5-니트로-3-피라졸카복실일-- 트립토판-타이로신-발린-타이로신-프롤린-세린-메티오닌(5) 3 개의 화합물 모두 dTBP2 보다 효과적으로 나타나는 것을 확인할 수 있었다(도 5).

<1-2> 실시예 3에서 제조한 화합물의 인터루킨-8 분비 억제 정도 확인

실시예 1의 dTBP2 및 실시예 3에서 제조한 화합물들의 인터루킨-8 분비 억제정도를 측정하였으며, 측정은 상기 실험예 1-1과 동일한 방법을 사용하였다. 측정결과, 41개의 비산화형 화합물 중 9개와 산화형 화합물 41 개 중 10개, 총 29개의 화합물이 dTBP2보다 강한 활성을 갖는 것으로 나타났다(도 6). 이는, 이소니코티닐 그룹(isonicotinyl 그룹)을 잔여 결합 잔기(extra binding residue)로서 도입하고, 느슨한 결합 잔기(loose binding residue)인 타이로신을 단단한 결합 잔기(tight binding residue)로 바꿈으로써, dTBP2-dTCTP 결합 및 인터루킨-8 분비 억제 활성을 높인 것으로 생각되었다.

<1-3> 실시예 4에서 제조한 화합물의 인터루킨-8 분비 억제 정도 확인

실시예 4를 통해서 제조된 19개의 화합물 중 비산화형을 제외한 14개의 화합물에 대해서 인터루킨-8 분비 억제정도를 측정한 결과, 14개 화합물 모두 dTBP2 보다 효과적인 것으로 나타났다. 측정 결과는 하기 표 3와 같다.

<1-4> 실시예 5에서 제조한 화합물의 인터루킨-8 분비 억제 정도 확인

실시예 5를 통해서 제조된 14개의 화합물에 대해 인터루킨-8 분비 억제정도를 측정한 결과, 4개 중 10개의 화합물들이 dTBP2 보다 효과적인 것으로 나타났다(표 4).

또한, 잘려진 (truncated) 펩티도미메틱 화합물들로 이루어진 실시예 4에서제조한 화합물과 실시예 5에서 제조한 화합물 사이의 상대적인 활성을 비교하기 위해서 같은 배지에서 생물학적 검정(bioassay)을 실시하였다 (도 7). 이로부터 실시예 4에서 제조한 화합물과 실시예 5에서 제조한 화합물 중 24개가 dTBP2 보다 강한 활성을 보임을 알 수 있었다. 또한 실시예 4 및 5에서 제조된 상위 4개 화합물들을 살펴보면, 실시예 4의 93, 99, 103, 100 그리고 실시예 5 의 107, 109, 108, 114 의 산(acid) 들 중 3개 화합물의 산(acid) (7-methoxy-1-benzofuran-2-carboxylic acid, 3,5-dimethylbenzoic acid, and 2,6-dioxo-1,2,3,6-tetrahydropyrimidine-4-carboxylic acid) 은 상기 실시예 4 및 5 모두에서 효과적인 것으로 나타났다 (99/109, 103/108, 100/107).

<1-5> 실시예 6에서 제조한 화합물의 인터루킨-8 분비 억제 정도 확인

이들에 대한 생물학적 활성 검사 (IL-8 Release Inhibition Assay)를 실시한 결과 10개 중 8개의 화합물들이 dTBP2 보다 효과적인 것으로 확인되었다 (표 5, 도 8).

< 실험예 2> 경합측정법(competition assay)을 이용한 생물학적 활성 검사

dTBP2 를 근간으로 하여 실시예 2 내지 6을 통해 펩티도미메틱 화합물을 설계하고 합성하였다. 이들 화합물이 실험예 1에서 인터루킨-8 분비 억제 활성이 뛰어난 것은 dTCTP 와의 결합에 기인한 것으로 판단하였다. 따라서 상기와 같은 사항을 확인하기 위하여 실시예 2 내지 6을 통해 합성된 모든 펩티도미메틱 화합물에 대하여 경합측정(competition assay)를 실시하였으며, 하기 표 6에는 10μM 농도에서 실시한 경합측정의 상위32개의 화합물들을 나타내었다. 또한, 도 9는 실시예 2를 통하여 제조된 화합물의 in situ 경합측정(competition assay) 결과를 나타낸 것이다. 상기 도 9에 나타난 결과로부터 이소니코티닉 산(isonicotinic acid)로 아실화된 화합물 하나를 찾아내었다.

< 실험예 3> 인터루킨-8 분비 억제 활성에 대한 IC ₅₀ 값 측정

상기 실험예 1 및 2의 결과를 토대로하여 보다 활성이 강한 화합물이 어느 것인지를 확인하기 위해, 상위 66개의 화합물들을 선정하여 IC₅₀값을 측정하였다. 이들 중 22개의 화합물들의 IC₅₀값이 dTBP2 (IC₅₀ = 960 nM) 보다 낮은 것으로 나타났으며, 특히 110 은 가장 낮은 IC₅₀값을 가지는 것을 확인하였다(표 7).

< 실험예 4> 본 발명의 펩티도미메틱 화합물에 의한 히스타민 분비 억제 측정

pRSET-A 벡터에 PCR로 클로닝된 래트 IgE-dependant histamine releasing factor(HRF) 전장 서열(Chitpatima 등, 1988)을 클로닝한 후, E. coli에서 과발현시켰다. 발현된 재조합 단백질을 His-결합 Ni 칼럼(Novagen)을 이용하여 정제하고 RBL-2H3 세포를 자극하기 위해 사용하였다. RBL-2H3을 1×10⁶ 세포로 24-웰에서 증식시킨 후, 래트 IgE 항체(0.2 ㎍/㎖, Serotec)로 45∼60 분간 감작시키고 재조합 HRF 단백질을 20 ㎍/㎖로 처리하였다(양성 대조군). 상기와 같이 준비한 세포에 상기 펩티도미메틱 화합물을 용량-의존적 방법으로 처리하였다.

상기에서 얻은 샘플을 RIA-분석 키트(Immunotech, 프랑스)를 이용하여 아실화된 히스타민으로 제조한 후 ¹²⁵I-아실화된 히스타민과 모노클로날 항체에 경쟁 결합시켰다. 이 샘플을 다시 γ-계수기에서 측정하였다. 그 결과 상기 펩티도미메틱 화합물을 RBL-2H3 세포에 가한 경우, 0.01 ㎍/㎖에서부터 HRF에 의한 히스타민 분비가 억제됨을 확인하였다.

< 실험예 5> 류마티스 관절염 동물 모델에서의 펩티도미메틱 화합물의 류마티스성 관절염 치료 효과 확인

본 발명자들은 상기 <실험예 4>에서 본 발명의 펩티도미메틱 화합물이 HRF의 활성을 저해하거나 HRF 또는 그 수용체에 영향을 미치는 것을 확인함으로써 류마티스성 관절염에 대한 예방 효과가 있음을 확인하였다. 류마티스 관절염 연구에는 다양한 동물모델이 이용되고 있는데, 이중 가장 광범위하게 사용되는 것은 콜라겐 유도 관절염 (collagen-induced arthritis, CIA) 마우스 모델이다. 본 발명자들은 상기 실시예에서 제작한 펩티도미메틱 화합물 중 실시예 <6-2>, <6-3> 및 <6-9>의 "발린-Dpr(7-메톡시-1-벤조퓨란-2-카복실일)-프롤린-세린 (Val-Dpr (7-methoxy-1-benzofuran-2-carboxylyl)-Pro-Ser)", "발린-Dpr(3,5-디메틸벤조일)-프롤린-세린 (Val-Dpr(3,5- dimethylbenzoyl)-Pro-Ser)" 및 "Dpr(5-클로로인돌-2-카복실일)-프롤린-세린 (Dpr(5-chloroindole-2- carboxylyl)-Pro-Ser)" 화합물이 콜라겐 유도 관절염 마우스에서의 관절염 예방 효과를 확인하기 위해 하기와 같은 실험을 수행하였다.

구체적으로, CIA를 유도하기 위하여, 7주령의 수컷 DBA1/j 마우스를 구입하여 1주 이상 적응기를 가진 뒤 1차로 bovine 제2형 콜라겐(Type2 collagen 2 mg/ml, Chondrex)과 동일한 농도의 complete Freund's Adjuvant(CFA containing 2 mg/ml M. tuberculosis, Chondrex)를 1:1로 혼합하여 150 μl를 꼬리의 기저부에서 2 cm 아래쪽의 피내를 통해 천천히 주입하였다(0일차). 3주 후 2차 주사를 시행하였는데 CFA 대신 incomplete Freund’s adjuvant(IFA)와 Bovine 제2형 콜라겐 용액을 역시 1：1의 비율로 혼합하여 혼합액 100 uL를 꼬리의 기저부 피내를 통해 천천히 주입하였다(21일차). 그 후 대조군(vehicle만 투여한 군), 본 발명의 펩티도미메틱 화합물 25 mg/kg을 투여할 군(각 n=6)으로 구별하여 관절염 유발 이후부터(2nd immunization 이후 다음날부터) 실험 종료 시까지 주 3회 복강 투여하였다. 상기 실시예 <6-2>, <6-3> 및 <6-9>의 펩티도미메틱 화합물은 PBS 1 ml 당 1.5 mg씩 용해하여 투여하였다. 투여 후 약 35-45일 걸쳐 관절염의 발생 및 진행양상을 육안적으로 관찰하면서 임상점수를 평가하였다. 구체적인 관절염의 육안적 평가 방법은 관절염의 중증도 점수를 통해 각각의 다리에 대해서 다음의 0~4 단계(점수)로 평가하였으며, 그 관절염 점수는 하기와 같다:

0, 부종이나 종창이 없는 경우;

1, 발가락이나 발목 관절에 국한된 경한 부종과 발적이 있는 경우;

2, 발목 관절에서 발가락에 걸친 중등도의 부종과 발적이 있는 경우;

3, 발목에서 발가락 전체에 걸쳐 심한 부종과 발적이 있는 경우;

4: 발목에서 발가락 전체에 걸쳐 극심한 부종과 발적 혹은 관절강직이 동반된 경우.

상기 관절염 점수는 총 4개의 발에서 각 발당 0-4점의 관절염 점수를 부여하여 한 마리당 0-16점의 범위에서 관절염 점수를 배정하였고 전체 실험군에서의 관절염 점수의 평균값과 표준 오차 값을 그래프로 표시하였다.

그 결과, 도 10 내지 12에 나타낸 바와 같이 상기 실시예 <6-2>, <6-3> 및 <6-9>의 펩티도미메틱 화합물 25 mg/kg을 투여한 군은 대조군(vehicle만 투여한 군)보다 임상 증상이 개선되어 류마티스성 관절염 치료 효과가 있음을 확인하였다. 시간이 경과할수록 펩티도미메틱 화합물 25 mg/kg을 투여한 군이 대조군(vehicle만 투여한 군)보다 발병률이 억제됨을 알 수 있었다. 본 발명의 펩티도미메틱 화합물이 류마티스 관절염 치료효과를 나타냄을 확인할 수 있었다.

<110> Ewha University - Industry Collaboration Foundation <120> Pharmaceutical composition comprising peptidomimetic compounds for preventing and treating rheumatoid arthritis <130> 2016P-06-066 <150> KR 10-2015-0094598 <151> 2015-07-02 <160> 1 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> dTBP2 protein <400> 1 Trp Tyr Val Tyr Pro Ser Met 1 5

Claims

서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 펩타이드, 이의 단편 및 이들의 유사체로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나에서, 상기 서열번호 1의 첫번째 아미노산인 트립토판 자리에 아실기(acyl group)가 도입되거나, 상기 서열번호 1의 네번째 아미노산인 타이로신이 아실기가 연결된 디아미노프로피오닉 산(Diaminopropionic acid)으로 치환되거나, 또는 상기 서열번호 1의 첫번째 아미노산인 트립토판 자리에 아실기가 도입되고 상기 서열번호 1의 네번째 아미노산인 타이로신이 아실기가 연결된 디아미노프로피오닉 산으로 치환된, 펩티도미메틱 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 펩티도미메틱 화합물은
상기 서열번호 1의 첫 번째 아미노산인 트립토판 자리에 아실기가 도입된 펩티도미메틱 화합물;
상기 서열번호 1의 네 번째 아미노산인 타이로신이 아실기가 연결된 디아미노프로피오닉산으로 치환된 펩티도미메틱 화합물;
상기 서열번호 1의 첫 번째 아미노산인 트립토판 자리에 아실기가 도입되고 상기 서열번호 1의 네 번째 아미노산인 타이로신이 아실기가 연결된 디아미노프로피오닉산으로 치환된 펩티도미메틱 화합물;
상기 서열번호 1의 아미노산 서열 중 네 개의 아미노산으로 이루어지며 C-말단이 메티오닌인 펩타이드 단편이고, 상기 서열번호 1의 네번째 아미노산에 해당하는 타이로신이 아실기가 연결된 디아미노프로피오닉 산으로 치환된 펩티도미메틱 화합물;
상기 서열번호 1의 N-말단부터 네 개의 아미노산으로 이루어지는 단편이고, 상기 서열번호 1의 첫번째 아미노산인 트립토판 자리에 아실기가 도입되고 상기 서열번호 1의 네번째 아미노산에 해당하는 타이로신이 아실기가 연결된 디아미노프로피오닉 산으로 치환된 펩티도미메틱 화합물; 및
상기 서열번호 1의 아미노산 중 세 개 또는 네 개의 아미노산으로 이루어지며 C-말단이 세린인 펩타이드 단편이고, 상기 서열번호 1의 네번째 아미노산에 해당하는 타이로신이 아실기가 연결된 디아미노프로피오닉 산으로 치환된 펩티도미메틱 화합물로 구성되는 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 펩티도미메틱 화합물은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 것으로서, 하기 화학식 1의 구조를 포함하는 것을 특징으로 하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물:
[화학식 1]

(상기 화학식 1에서 R₁은
,
,
또는
이고, WYVYPSM은 서열번호 1의 아미노산 서열이다).
제 1항에 있어서, 상기 펩티도미메틱 화합물은 서열번호 1의 첫번째 아미노산인 트립토판 자리에 이소니코티닐기가 도입된 것을 특징으로 하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 펩티도미메틱 화합물은 하기 화학식 2의 구조를 포함하는 것을 특징으로 하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물:
[화학식 2]

(W는 트립토판(Tryptophan)이고, Y는 타이로신(Tyrosine)이며, V는 발린(Valine)이고, P는 프롤린(Proline)이며, S는 세린(Serine)이고, M은 메티오닌(Methionine)이며, Dpr은 디아미노프로피오닉 산이고,
R₂는
탄소수 1 내지 20의 비치환된 또는 치환된 선형, 가지형 또는 고리형 알킬;
탄소수 1 내지 10의 비치환된 또는 치환된 알콕시;
비치환 또는 치환된 아릴;
N, O 또는 S를 포함하는 비치환 또는 치환된 헤테로아릴; 및
N, O 또는 S를 포함하는 비치환 또는 치환된 헤테로사이클로 구성되는 군으로부터 선택되는 어느 하나이다).
제 5항에 있어서, 상기 펩티도미메틱 화합물은 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(3,5-디메틸벤조일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(3,5-디메틸벤조일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(알파-시아노-4-하이드록시신나밀)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(알파-시아노-4-하이드록시신나밀)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(4-펜틸바이사이클로[2.2.2]옥테인-1-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(4-펜틸바이사이클로[2.2.2]옥테인-1-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-(2-시아노페닐티오)벤조일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-(2-시아노페닐티오)벤조일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(페녹시아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(페녹시아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-헥시노일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-헥시노일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(오로틸)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(오로틸)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(4-벤질옥시벤조일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(4-벤질옥시벤조일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-나프토일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-나프토일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-피라진카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-피라진카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-클로로니코티닐)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-클로로니코티닐)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2,4-헥사디엔오일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2,4-헥사디엔오일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(바이페닐-4-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(바이페닐-4-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(페닐글리옥실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(페닐글리옥실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-플루오로페닐아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-플루오로페닐아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(트랜스-신나밀)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(트랜스-신나밀)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(1-나프토일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(1-나프토일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(5-니트로-2-푸로일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(5-니트로-2-푸로일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(베타-나프톡시아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(베타-나프톡시아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(3-페녹시벤조일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(3-페녹시벤조일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(7-메톡시-1-벤조퓨란-2-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(7-메톡시-1-벤조퓨란-2-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-메톡시헥사노일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-메톡시헥사노일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(3-클로로벤조[b]티오펜-2-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(3-클로로벤조[b]티오펜-2-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(퀴나딜)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(퀴나딜)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(타이글라일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(타이글라일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(이소니코티닐)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(이소니코티닐)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(5-클로로인돌-2-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(5-클로로인돌-2-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(5-페닐-2-푸로일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(5-페닐-2-푸로일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(5-니트로-3-피라졸카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(5-니트로-3-피라졸카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr((R)-(+)-트롤록실)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr((R)-(+)-트롤록실)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr((R)-(+)-2-피롤리돈-5-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr((R)-(+)-2-피롤리돈-5-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(1-시아노-1-사이클로프로페인카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(1-시아노-1-사이클로프로페인카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(로다닌-3-아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(로다닌-3-아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(7-하이드록시쿠마린-4-아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(7-하이드록시쿠마린-4-아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-(4-메틸페닐설폰아미도)아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-(4-메틸페닐설폰아미도)아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(1-아세틸피페리딘-4-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(1-아세틸피페리딘-4-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(1-페닐-5-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(1-페닐-5-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-티오펜아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-티오펜아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(벤조트리아졸-5-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(벤조트리아졸-5-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(4-옥소-4H-크로멘-3-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(4-옥소-4H-크로멘-3-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(4-메틸-2-옥소-2H-크로멘-7-일옥시)아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 산화형 및 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(4-메틸-2-옥소-2H-크로멘-7-일옥시)아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형으로 구성되는 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 펩티도미메틱 화합물은 하기 화학식 3의 구조를 포함하는 것을 특징으로 하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물:
[화학식 3]

(Dpr은 디아미노프로피오닉 산이고, P는 프롤린이며, S는 세린이고, M은 메티오닌이며,
R₃는
탄소수 1 내지 20의 비치환된 또는 치환된 선형, 가지형 또는 고리형 알킬;
탄소수 1 내지 10의 비치환된 또는 치환된 알콕시;
비치환 또는 치환된 아릴;
N, O 또는 S를 포함하는 비치환 또는 치환된 헤테로아릴; 및
N, O 또는 S를 포함하는 비치환 또는 치환된 헤테로사이클로 구성되는 군으로부터 선택되는 어느 하나이다).
제 7항에 있어서, 상기 펩티도미메틱 화합물은, Dpr(4-펜틸바이사이클로[2.2.2]옥탄-1-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, Dpr(4-펜틸바이사이클로[2.2.2]옥탄-1-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, Dpr(타이글라일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, Dpr(타이글라일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, Dpr(5-클로로인돌-2-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, Dpr(5-클로로인돌-2-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, Dpr(2-(2-시아노페닐티오)벤조일)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, Dpr(2-(2-시아노페닐티오)벤조일)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, Dpr(퀴나딜)-프롤린-세린-메티오닌 산화형, Dpr(퀴나딜)-프롤린-세린-메티오닌 비산화형, Dpr(2-플루오로페닐아세틸)-프롤린-세린-메티오닌, Dpr(7-메톡시-1-벤조퓨란-2-카복실일)-프롤린-세린-메티오닌, Dpr(오로틸)-프롤린-세린-메티오닌, Dpr(1-시아노-1-사이클로프로판카복실일)-프롤린-세린-메티오닌, Dpr(알파-시아노-4-하이드록시신나밀)-프롤린-세린-메티오닌, Dpr(3,5-디메틸벤조일)-프롤린-세린-메티오닌, Dpr((R)-(+)-트롤록실)-프롤린-세린-메티오닌, Dpr(2-(4-메틸페닐설폰아미도)아세틸)-프롤린-세린-메티오닌 및 Dpr(5-니트로-3-피라졸카복실일)-프롤린-세린-메티오닌으로 구성되는 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제 4항에 있어서, 상기 펩티도미메틱 화합물은 하기 화학식 4의 구조를 포함하는 것을 특징으로 하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물:
[화학식 4]

(W는 트립토판이고, Y는 타이로신이며, V는 발린이고, Dpr은 디아미노프로피오닉 산이며,
R₄는
탄소수 1 내지 20의 비치환된 또는 치환된 선형, 가지형 또는 고리형 알킬;
탄소수 1 내지 10의 비치환된 또는 치환된 알콕시;
비치환 또는 치환된 아릴;
N, O 또는 S를 포함하는 비치환 또는 치환된 헤테로아릴; 및
N, O 또는 S를 포함하는 비치환 또는 치환된 헤테로사이클로 구성되는 군으로부터 선택되는 어느 하나이다).
제 9항에 있어서, 상기 펩티도미메틱 화합물은, 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(오로틸), 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(3,5-디메틸벤조일), 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(7-메톡시-1-벤조퓨란-2-카복실일), 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-(2-시아노페닐티오)벤조일), 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr((R)-(+)-트롤록실), 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(1-시아노-1-사이클로프로판카복실일), 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(로다닌-3-아세틸), 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-플루오로페닐아세틸), 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(4-펜틸바이사이클로[2.2.2]옥탄-1-카복실일), 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(퀴나딜), 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(타이글라일), 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(5-클로로인돌-2-카복실일), 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(5-니트로-3-피라졸카복실일) 및 이소니코티닐-트립토판-타이로신-발린-Dpr(2-(4-메틸페닐설폰아미도)아세틸)으로 구성되는 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 펩티도미메틱 화합물은 하기 화학식 5의 구조를 포함하는 것을 특징으로 하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물:
[화학식 5]

(P는 프롤린이고, S는 세린이며, Dpr은 디아미노프로피오닉 산이고,
R₅는
탄소수 1 내지 20의 비치환된 또는 치환된 선형, 가지형 또는 고리형 알킬;
탄소수 1 내지 10의 비치환된 또는 치환된 알콕시;
비치환 또는 치환된 아릴;
N, O 또는 S를 포함하는 비치환 또는 치환된 헤테로아릴; 및
N, O 또는 S를 포함하는 비치환 또는 치환된 헤테로사이클로 구성되는 군으로부터 선택되는 어느 하나이다).
제 11항에 있어서, 상기 화학식 5의 펩티도미메틱 화합물은,
Dpr(오로틸)-프롤린-세린, Dpr(7-메톨시-1-벤조퓨란-2-카복실일)-프롤린-세린, Dpr(3,5-디메틸벤조일)-프롤린-세린, Dpr(5-클로로인돌-2-카복실일)-프롤린-세린 및 Dpr(2-플루오로페닐아세틸)-프롤린-세린으로 구성되는 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 펩티도미메틱 화합물은 하기 화학식 6의 구조를 포함하는 것을 특징으로 하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물:
[화학식 6]

(V 는 발린이고, P는 프롤린이며, S는 세린이고, Dpr 은 디아미노프로피오닉 산이며,
R₆는
탄소수 1 내지 20의 비치환된 또는 치환된 선형, 가지형 또는 고리형 알킬;
탄소수 1 내지 10의 비치환된 또는 치환된 알콕시;
비치환 또는 치환된 아릴;
N, O 또는 S를 포함하는 비치환 또는 치환된 헤테로아릴; 및
N, O 또는 S를 포함하는 비치환 또는 치환된 헤테로사이클로 구성되는 군으로부터 선택되는 어느 하나이다).
제 13항에 있어서, 상기 펩티도미메틱 화합물은, 발린-Dpr(오로틸)-프롤린-세린, 발린-Dpr(7-메톡시-1-벤조퓨란-2-카복실일)-프롤린-세린, 발린-Dpr(3,5-디메틸벤조일)-프롤린-세린, 발린-Dpr(5-클로로인돌-2-카복실일)-프롤린-세린 및 발린-Dpr(2-플루오로페닐아세틸)-프롤린-세린으로 구성되는 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 류마티스 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물.