KR20160085401A - A feed additive including immunity induced silkworm and manufacturing method thereof - Google Patents

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KR20160085401A
KR20160085401A KR1020150002086A KR20150002086A KR20160085401A KR 20160085401 A KR20160085401 A KR 20160085401A KR 1020150002086 A KR1020150002086 A KR 1020150002086A KR 20150002086 A KR20150002086 A KR 20150002086A KR 20160085401 A KR20160085401 A KR 20160085401A
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silkworm
feed composition
feed
powder
weight
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이상훈
김인덕
정로덕
이상철
김주섭
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그린테코 주식회사
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Abstract

Disclosed are a feed composition containing silkworms with increased antibacterial peptides, and a manufacturing method thereof. The manufacturing method of a feed composition containing silkworms with increased antibacterial peptides comprises the following steps: preparing silkworms inoculated with an immunity inducer; and manufacturing the feed composition using the silkworms. The feed composition is fed to an animal., and the result of feeding shows that the feed composition has various effects such as productivity enhancement, health maintenance, inhibition of harmful enteric bacteria, immunity control, etc. The feed composition shows an equal or excellent result in comparison with a growth promoting antibiotic, and thus can be used as a novel antibiotic substitute in the future.

Description

면역유도된 누에를 함유하는 사료 조성물 및 그 제조 방법{A feed additive including immunity induced silkworm and manufacturing method thereof}[0001] The present invention relates to a feed composition containing an immunologically-induced silkworm,

본 발명은 면역유도된 누에를 함유하는 사료 조성물 및 그 제조 방법에 관련된다.
The present invention relates to a feed composition containing an immunologically-induced silkworm and a method of preparing the same.

최근 소비자의 경제 수준 향상으로 인해 건강에 대한 관심이 고조되면서 축산물의 양적 측면 보다 질적 측면이 강조되고 있으며, 축산물의 품질 향상 및 안전성 확보는 국내 축산업의 경쟁력 확보는 물론 국민 건강을 위해 더욱 중요시되고 있다. 또한 지속가능한 친환경 순환식 축산의 중요성이 더욱 커지면서 유휴 농산물 및 국내 부존자원 이용을 통해 축산업의 긍정적 모습을 부각시킬 필요가 있다. 이로 인해 최근 국내 부존자원을 활용한 고품질 안전 축산물을 생산하기 위한 연구가 활발히 진행되고 있다. Recently, as the consumer's interest in health has increased due to the improvement of the economic level, the qualitative aspect of livestock products has been emphasized more than the quantitative aspect, and improvement of quality and safety of livestock products has become more important for national health as well as securing competitiveness of domestic livestock industry . In addition, sustainable environmentally friendly circulation-type livestock becomes more important, and it is necessary to highlight the positive aspect of livestock industry through the use of idle agricultural products and domestic resources. As a result, researches for producing high quality safe livestock products utilizing domestic resources have been actively conducted.

국내 잠업은 1976년을 정점으로 급격히 감소하였으며 1995년을 기점으로 누에고치 생산을 거의 중단되고, 현재는 건조 누에나 동충하초 등의 기능성 양잠산물 생산으로 전환하여 잠업을 유지하고 있다. 그러나 국내 누에 사육/생산 기술 및 잠재력은 타 곤충에 비해 축적되어 있어 안정적인 생산시장 확보 및 고부가가치 상품 개발시 안정적인 생산 및 공급이 가능하다. 대한민국 공개특허 제10-2000-0025517호를 참조하면, 누에의 배설물을 이용하여 사료 조성물을 제조하는 기술이 개시된다. Domestic silkworms abruptly declined to the peak of 1976. Since 1995, silkworm cocoon production has almost ceased and now it has been converted into production of functional silkworms such as dried silkworms and Chinese caterpillar fungus. However, domestic silkworm breeding / production technology and potential are accumulated compared to other insects, so it is possible to produce and supply stable when securing stable production market and developing high value-added products. Korean Patent Publication No. 10-2000-0025517 discloses a technique for producing a feed composition using silkworm excrement.

하지만, 축산 분야에서는 누에나 누에 유래 항균 펩타이드를 가축에 적용한 사례 및 연구가 많지 않아 실제로 적용하기가 어려워 그 이용가치 및 활용범위가 낮은 실정이다. However, in the field of livestock, there are not many examples and researches on application of antimicrobial peptides derived from silkworm nematode to livestock.

전술한 배경기술은 발명자가 본 발명의 도출을 위해 보유하고 있었거나, 본 발명의 도출 과정에서 습득한 기술 정보로서, 반드시 본 발명의 출원 전에 일반 공중에게 공개된 공지기술이라 할 수는 없다.
The above-described background technology is technical information that the inventor holds for the derivation of the present invention or acquired in the process of deriving the present invention, and can not necessarily be a known technology disclosed to the general public prior to the filing of the present invention.

본 발명은 생산성 향상, 건강 유지, 장내 유해균 억제, 면역 조절 등 다양한 효과를 가지는 항균펩타이드가 강화된 누에를 함유하는 사료 조성물 및 그 제조 방법을 제공한다.        The present invention provides a feed composition containing silkworm-strengthened antimicrobial peptides having various effects such as productivity improvement, health maintenance, suppression of intestinal harmful bacteria, immunity control, and a preparation method thereof.

본 발명이 제시하는 이외의 기술적 과제들은 하기의 설명을 통해 쉽게 이해될 수 있을 것이다.
The technical problems other than the present invention can be easily understood from the following description.

본 발명의 일 측면에 따르면, 면역 유도 물질을 주입한 누에를 준비하는 단계; 및 상기 누에를 첨가하여 사료 조성물을 제조하는 단계를 포함하는 항균펩타이드가 강화된 누에를 함유하는 사료 조성물 제조 방법이 제공된다.       According to an aspect of the present invention, there is provided a method of preparing a silkworm comprising: preparing a silkworm injected with an immunity inducing substance; And a step of adding the silkworms to produce a feed composition, wherein the silkworm peptide-enriched silkworm-containing feed composition is provided.

여기서, 상기 사료 조성물은 부형제를 더 포함하며, 전체 사료 조성물 100 중량부에 대하여, 상기 누에 1 내지 50중량부, 상기 부형제 50 내지 99중량부가 될 수 있다.        Here, the feed composition may further comprise an excipient, and 1 to 50 parts by weight of the silkworm and 50 to 99 parts by weight of the excipient may be added to 100 parts by weight of the entire feed composition.

또한, 상기 부형제는 말분, 석회석, 분쇄옥수수속대, 옥수수글루텐피드 및 대두 중 어느 하나 이상을 포함할 수 있다.        In addition, the excipient may include any one or more of horse chestnut, limestone, ground cornstarch, corn gluten feed, and soybean.

여기서, 상기 누에는 분말 또는 액상으로 상기 사료 조성물에 첨가될 수 있으며, 상기 사료 조성물은 분말 또는 팰렛 형상이 될 수 있다.        Here, the silkworm may be added to the feed composition in powder or liquid form, and the feed composition may be in powder or pellet form.

여기서, 상기 누에를 준비하는 단계는, 마이크로웨이브를 이용하여 상기 누에를 건조하는 단계를 더 포함할 수 있다.        Here, preparing the silkworm may further include drying the silkworm using microwaves.

여기서, 상기 사료 조성물은 닭, 오리, 거위, 꿩, 돼지, 소, 염소, 개 및 고양이 중 어느 하나 이상의 동물의 사료가 될 수 있다.        Here, the feed composition may be a feed for animals of one or more of chicken, duck, goose, pheasant, pig, cow, goat, dog and cat.

또한, 상기 누에는 전체 사료 조성물의 질량 대비 0.005 내지 0.05%의 비율로 상기 사료에 첨가될 수 있다. In addition, the silkworm may be added to the feed at a rate of 0.005 to 0.05% of the mass of the whole feed composition.

전술한 것 외의 다른 측면, 특징, 이점이 이하의 도면, 특허청구범위 및 발명의 상세한 설명으로부터 명확해질 것이다.
Other aspects, features, and advantages will become apparent from the following drawings, claims, and detailed description of the invention.

본 발명에서 개발한 항균펩타이드가 강화된 누에를 함유하는 사료 조성물을 닭에 첨가 급여한 결과 생산성 향상, 건강 유지, 장내 유해균 억제, 면역 조절 등 다양한 효과가 있었으며, 성장촉진용 항생제와 비교할 때 대등하거나 우수한 결과를 보임으로 추후 신규 항생제 대체물질로서의 사용이 가능하다.
The feed composition containing the antimicrobial peptide-enriched silkworm peptide, which was developed in the present invention, was added to chicken to give various effects such as improvement of productivity, maintenance of health, inhibition of intestinal bacteria, immunity control, It can be used as a new antibiotic substitute in the future with excellent results.

도 1은 본 발명의 실시예에 따른 항균펩타이드가 강화된 누에를 함유하는 사료 조성물의 제조 방법을 나타낸 흐름도.
도 2는 본 발명의 실시예에 따른 항균펩타이드가 강화된 누에 분말을 열풍 건조법으로 제조시 온도 및 시간별 중량변화를 나타낸 그래프.
도 3은 본 발명의 실시예에 따른 항균펩타이드가 강화된 누에 분말을 마이크로웨이브 건조법으로 제조시 시간별 중량변화를 나타낸 그래프.
도 4는 본 발명의 실시예에 따른 항균펩타이드가 강화된 누에 분말 건조 방법에 따른 누에 분말 항균 활성 비교 도면.
BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS FIG. 1 is a flow chart illustrating a method for preparing a feed composition containing silkworm peptide-enriched silkworms according to an embodiment of the present invention. FIG.
FIG. 2 is a graph showing changes in weight of a silkworm powder enriched with an antimicrobial peptide according to an embodiment of the present invention by temperature and time during manufacture by hot air drying.
FIG. 3 is a graph showing changes in weight of a silkworm powder enriched with an antimicrobial peptide according to an embodiment of the present invention when the powder was produced by microwave drying.
Figure 4 is a comparison of silkworm powder antibacterial activity according to the drying method of silkworm powder enriched with an antibacterial peptide according to an embodiment of the present invention.

본 발명은 다양한 변경을 가할 수 있고 여러 가지 실시예를 가질 수 있는 바, 특정 실시예들을 도면에 예시하고 상세한 설명에 상세하게 설명하고자 한다. 그러나 이는 본 발명을 특정한 실시 형태에 대해 한정하려는 것이 아니며, 본 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 변경, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다.       While the invention is susceptible to various modifications and alternative forms, specific embodiments thereof are shown by way of example in the drawings and will herein be described in detail. It is to be understood, however, that the invention is not to be limited to the specific embodiments, but includes all modifications, equivalents, and alternatives falling within the spirit and scope of the invention.

제1, 제2 등과 같이 서수를 포함하는 용어는 다양한 구성요소들을 설명하는데 사용될 수 있지만, 상기 구성요소들은 상기 용어들에 의해 한정되지는 않는다. 상기 용어들은 하나의 구성요소를 다른 구성요소로부터 구별하는 목적으로만 사용된다.         Terms including ordinals, such as first, second, etc., may be used to describe various elements, but the elements are not limited to these terms. The terms are used only for the purpose of distinguishing one component from another.

어떤 구성요소가 다른 구성요소에 "연결되어" 있다거나 "접속되어" 있다고 언급된 때에는, 그 다른 구성요소에 직접적으로 연결되어 있거나 또는 접속되어 있을 수도 있지만, 중간에 다른 구성요소가 존재할 수도 있다고 이해되어야 할 것이다.         It is to be understood that when an element is referred to as being "connected" or "connected" to another element, it may be directly connected or connected to the other element, .

본 명세서에서 사용한 용어는 단지 특정한 실시예를 설명하기 위해 사용된 것으로, 본 발명을 한정하려는 의도가 아니다. 단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한, 복수의 표현을 포함한다. 본 명세서에서, "포함하다" 또는 "가지다" 등의 용어는 명세서상에 기재된 특징, 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것이 존재함을 지정하려는 것이지, 하나 또는 그 이상의 다른 특징들이나 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것들의 존재 또는 부가 가능성을 미리 배제하지 않는 것으로 이해되어야 한다.        The terminology used herein is for the purpose of describing particular embodiments only and is not intended to be limiting of the invention. The singular expressions include plural expressions unless the context clearly dictates otherwise. In this specification, the terms "comprises" or "having" and the like refer to the presence of stated features, integers, steps, operations, elements, components, or combinations thereof, But do not preclude the presence or addition of one or more other features, integers, steps, operations, elements, components, or combinations thereof.

또한, 명세서에 기재된 "…부", "…모듈", "…수단" 등의 용어는 적어도 하나의 기능이나 동작을 처리하는 단위를 의미하며, 이는 하드웨어나 소프트웨어 또는 하드웨어 및 소프트웨어의 결합으로 구현될 수 있다.        The term " part, "" module," " means, "or the like, which is described in the specification, refers to a unit for processing at least one function or operation and may be implemented by hardware or software or a combination of hardware and software .

또한, 첨부 도면을 참조하여 설명함에 있어, 도면 부호에 관계없이 동일한 구성 요소는 동일한 참조부호를 부여하고 이에 대한 중복되는 설명은 생략하기로 한다. 본 발명을 설명함에 있어서 관련된 공지 기술에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명을 생략한다. In the following description of the present invention with reference to the accompanying drawings, the same components are denoted by the same reference numerals regardless of the reference numerals, and redundant explanations thereof will be omitted. DETAILED DESCRIPTION OF THE PREFERRED EMBODIMENTS Hereinafter, exemplary embodiments of the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings. In the following description, well-known functions or constructions are not described in detail since they would obscure the invention in unnecessary detail.

도 1은 본 발명의 실시예에 따른 항균펩타이드가 강화된 누에를 함유하는 사료 조성물의 제조 방법을 나타낸 흐름도이다. 본 실시예의 사료 조성물은 닭, 오리, 거위, 꿩, 돼지, 소, 염소, 개 및 고양이 등 동물의 사료가 될 수 있다.         1 is a flow chart showing a method for producing a feed composition containing silkworm peptide-enriched silkworm according to an embodiment of the present invention. The feed composition of this embodiment can be animal feed such as chicken, duck, goose, pheasant, pig, cattle, goat, dog and cat.

누에에는 세크로핀(cecropin), 가바(γ-aminobutyric acid, GABA), 루틴(rutin) 등 다양한 성분의 생리활성물질이 존재하며, 항균, 항산화, 간 및 신장 기능 개선, 독성 방지, 피로 회복, 신경 안정 등 다양한 생리활성효과를 발휘한다. 특히 누에의 항균 펩타이드 성분인 세크로핀, 엔보신(enbocin) 등의 항균, 항산화, 항바이러스, 살충, 세포재생, 면역조절 효과는 커서 그 산업적 이용가치가 매우 크다.     The silkworm has various physiologically active substances such as cecropin, γ-aminobutyric acid (GABA), and rutin, and it has antibacterial, antioxidant, liver and kidney function improvement, toxicity prevention, And a variety of physiological effects such as nervous stability. Especially, antimicrobial, antioxidant, antiviral, insecticidal, cell regeneration and immunomodulating effects of the antimicrobial peptide component of silkworm, secrophin and enbocin, are great, and their industrial utility value is very high.

또한, 본 실시예에 따른 사료 조성물은 분말 또는 소정의 부피를 가진 팰렛 형상으로 구현될 수 있으며, 누에는 분말 또는 액상으로 사료 조성물에 첨가될 수 있다. 이하에서는 누에가 분말화되어 사료 조성물에 첨가되는 경우를 중심으로 설명한다.         In addition, the feed composition according to the present embodiment may be implemented in the form of a powder or a pellet having a predetermined volume, and the silkworm may be added to the feed composition in powder or liquid form. Hereinafter, the case where silkworm is powdered and added to the feed composition will be mainly described.

이하에서 서술할 각 단계는 사료 조성물 제조 장치가 주체가 되어 수행할 수 있다. 각 단계별로 기술되는 과정은 반드시 시계열적인 순서대로 수행될 필요는 없으며, 각 단계의 수행 순서가 바뀌어도 본 발명의 요지를 충족한다면 이러한 과정은 본 발명의 권리범위에 속할 수 있음은 물론이다.         Each step to be described below can be performed as a feed composition manufacturing apparatus. It is needless to say that the processes described in each step need not necessarily be performed in a time series order, and the process may be included in the scope of the present invention if the order of the steps is changed but the gist of the present invention is satisfied.

단계 S110에서, 면역 유도 물질을 주입한 누에를 분말화한다. 여기서, 누에 면역유도를 위한 주사제 개발을 위해서 병원성 그람양성균과 유사한 세포벽 구조를 지닌 유산균 Lactobacillus plantarum을 배양하여 사용하였다. 즉, 면역 유도원 후보 물질로 L. plantarum 생균, L. plantarum cell wall 추출물(pCW) 및 세포막 성분인 lipoteichoic acid(LTA)가 포함된 L. plantarum n-butanol 추출물(pLTA)을 제조하여 누에 면역유도 물질 선발에 사용하였다.        In step S110, the silkworm injected with the immunity inducing substance is pulverized. Here, Lactobacillus plantarum, a cell wall structure similar to pathogenic Gram-positive bacteria, was cultured for the development of injections for silkworm immunity induction. That is, L. plantarum n-butanol extract (pLTA) containing L. plantarum live cells, L. plantarum cell wall extract (pCW) and lipoteichoic acid (LTA) Were used for selection.

L. plantarum cell wall(pCW)은 다음 방식에 따라 제조하였다. 먼저, 동결 건조된 균주를 살균된 증류수에 녹인 후 100℃에서 20분간 가열한 다음 1,500g에서 10분간 원심 분리하여 파괴되지 않은 균을 제거하였고, 상등액을 다시 6,500g에서 30분간 원심 분리하였다. 침전된 cell wall을 수집하여 증류수로 3회 세척한 다음 동결 건조하였고, 이 후 LTA 추출 및 누에 면역유도 시험에 사용하였다.        L. plantarum cell wall (pCW) was prepared according to the following method. First, the lyophilized strain was dissolved in sterilized distilled water, heated at 100 ° C for 20 minutes, and centrifuged at 1,500g for 10 minutes to remove unbroken bacteria. The supernatant was centrifuged again at 6,500g for 30 minutes. The precipitated cell wall was collected, washed three times with distilled water, and lyophilized, and then used for LTA extraction and silkworm immunity induction test.

또한, L. plantarum LTA 추출물(pLTA)은 다음 방식에 따라 제조하였다. L. plantarum cell well로부터 n-butanol 추출법을 사용하여 LTA가 함유된 추출물을 제조하였다. 동결 건조된 cell well을 0.1M sodium citrate buffer(pH 4.7)에 녹인 후 초음속파쇄기로 분쇄하였고, 동일한 양의 n-butanol을 첨가한 다음 실온에서 30분간 교반을 통하여 추출하였다. 추출 후 10,000 rpm에서 30분간 원심 분리한 다음 상등액을 회수하였고, evaporate 및 살균된 증류수로 투석한 다음 동결 건조하였다. 동결 건조된 LTA가 함유된 추출물은 무게를 측정한 다음, 살균된 식염수에 녹여 누에 면역유도 시험에 사용하였다.        In addition, L. plantarum LTA extract (pLTA) was prepared according to the following method. Extracts containing LTA were prepared using n-butanol extraction from L. plantarum cell wells. The lyophilized cell wells were dissolved in 0.1 M sodium citrate buffer (pH 4.7), pulverized with a supersonic crusher, and the same amount of n-butanol was added thereto, followed by stirring at room temperature for 30 minutes. After extraction, centrifugation was carried out at 10,000 rpm for 30 min. The supernatant was recovered, dialyzed with evaporate and sterilized distilled water, and lyophilized. The extract containing lyophilized LTA was weighed and then dissolved in sterile saline to be used for silkworm immunity induction test.

도 2를 참조하면, 다양한 농도의 L. plantarum 생균, cell wall 추출물(pCW) 및 LTA 추출물(pLTA)이 함유된 50ul 수용액을 5령 5일 누에(금옥잠) 체강에 주사 접종한 다음, 면역유도시간(6시간, 10시간, 22시간)별 누에 체액을 채취하여 대장균에 대한 항균활성을 검정하였다.        2, 50 μl aqueous solution containing various concentrations of L. plantarum live cells, cell wall extract (pCW) and LTA extract (pLTA) was inoculated in a 5-day-old 5-day silkworm The antibacterial activity against Escherichia coli was examined by collecting body silkworms with time (6 hours, 10 hours, 22 hours).

항균활성 분석 결과, 생균 주사 접종의 경우 대체로 매우 낮은 항균활성을 나타냈었으며, cell well 주사 면역유도에서는 주사 농도가 0.5mg/ml 이상인 경우 높은 치사율을 보였으며 0.5mg/ml 이하 농도에서는 치사율은 감소하였지만 낮은 항균활성을 나타냈었다. pLTA 주사 접종시 5~10mg/ml 주사 농도에서 10시간 경과 후 가장 높은 항균활성을 보였다. 따라서 누에 면역유도를 위한 유도물질로 L. plantarum LTA 추출물(pLTA)이 가장 우수한 것으로 확인되었다.         Antibacterial activity analysis showed a very low antimicrobial activity in the case of inoculation with live bacteria. In case of cell-injected immunization induction, high mortality was observed at 0.5 mg / But showed low antimicrobial activity. The highest antimicrobial activity was observed after 10 hours at 5 ~ 10mg / ml injection concentration of pLTA injection. Therefore, L. plantarum LTA extract (pLTA) was the most effective inducer for silkworm immunity induction.

도 3을 참조하면, 최적의 누에 면역유도 조건을 수립하기 위해서 선정된 L. plantarum LTA 추출물(pLTA)의 접종농도 및 유도시간에 따른 항균활성을 검정하였다. 10, 5, 1, 0.5mg/ml 농도로 누에 체강에 주사 접종하였으며 면역유도 후 6, 10, 18, 22시간 경과에 따라 누에 혈림프를 채취하여 대장균에 대한 항균활성 검정에 사용하였다. 항균활성 분석에서 5mg/ml 와 1mg/ml 농도에서 가장 우수한 항균활성을 보였으며 주사 접종 후 18시간 면역 유도된 시료에서 가장 높은 항균활성을 나타냈었다. 따라서 누에 면역유도를 위한 주사조건으로 주사농도는 1mg/ml, 면역유도 시간은 10시간 초과 22시간 미만으로 결정할 수 있다.         3, the antimicrobial activity of the selected L. plantarum LTA extract (pLTA) according to inoculation concentration and induction time was examined to establish optimal silkworm immunity induction conditions. 10, 5, 1, and 0.5 mg / ml. The silkworms were harvested at 6, 10, 18, and 22 hours after immune induction and used for the antimicrobial activity test for E. coli. The antimicrobial activity showed the highest antimicrobial activity at the concentration of 5 mg / ml and 1 mg / ml. Therefore, the injection concentration for silkworm immunity induction can be determined to be 1 mg / ml, and the immunity induction time can be determined to be more than 10 hours but less than 22 hours.

면역유도 물질은 성장하고 있는 누에 애벌레에 주입될 수 있다. 본 실시예는 누에 애벌레에 면역유도 물질을 주입하기 위한 장치를 구비할 수 있다. 예를 들면, 주입 장치는 주사액이 주입될 애벌레가 놓이는 부분인 애벌레 지지부, 애벌레 지지부에 놓인 애벌레에 면역유도 물질을 포함하는 주사액을 주입하는 주사액 주입부, 애벌레에게 주사액을 주입시키기 편리하도록 애벌레를 비활성화시키는 애벌레 비활성화부, 주사액 주입부에 의해 주사액이 주입되어, 주입 처리가 완료된 애벌레를 보관하는 수단인 애벌레 저장부를 포함할 수 있다.         Immune inducers can be injected into growing silkworm larvae. This embodiment may include a device for injecting an immunoinducing substance into silkworm larvae. For example, the infusion device may include a larval support, which is the portion of the larva where the injection is to be injected, an injection infusion section that injects the infusion containing the immunoinducing substance into the larva placed on the larval support, A caterpillar inactivating section for inserting the cryoprotectant into the cryoprotecting section, and a larva storing section which is a means for storing the caterpillar into which the injecting liquid is injected by the injecting liquid injecting section and has been injected.

여기서, 애벌레 비활성화부는 차가운 물을 담은 수조가 될 수 있으며, 애벌레는 차가운 물에 담기는 경우 순간적으로 기절하는 등 비활성화되므로, 애벌레 지지부는 움직임이 둔한 애벌레는 수월하게 지지할 수 있다.         Here, the caterpillar deactivating portion can be a water tank containing cold water, and when the caterpillar is contained in cold water, it is inactivated such as instantaneously stunning, so that the caterpillar supporting portion can easily support the dull caterpillar.

단계 S112에서, 면역 유도 물질을 주입한 누에는 열풍 건조법으로 건조시킬 수 있다. 열풍 건조법은 소정의 온도를 가진 열풍을 이용하여 누에를 건조시키는 방법이다. In step S112, the silkworm injected with the immunity inducing substance may be dried by a hot air drying method. In the hot air drying method, silkworm is dried by using hot air having a predetermined temperature.

또한, 다른 실시예에 따르면, 단계 S114에서, 면역 유도 물질을 주입한 누에는 마이크로웨이브 건조법으로 건조시킬 수 있다.         Further, according to another embodiment, in step S114, the silkworm injected with the immunity inducing substance may be dried by the microwave drying method.

열풍기의 온도별(60℃, 70℃, 80℃, 90℃)과 마이크로웨이브오븐을 이용하여 누에(1.8kg)를 투입하여 매시간 질량을 측정하여 더 이상 중량의 변화가 없는 상태(평형점)의 최종 시간과 중량을 측정한 후, 온도별 일반성분의 차이 분석(분석항목 : 수분, 회분, 조지방, 조단백, 조섬유)과 항균력시험을 시행하였다.A silkworm (1.8kg) was charged by the temperature of the hot air (60 ° C, 70 ° C, 80 ° C, 90 ° C) and microwave oven to measure the mass every hour. After the final time and weight were measured, the difference of general components by temperature was analyzed (analysis items: moisture, ash, crude fat, crude protein, crude fiber) and antibacterial test.

도 4를 참조하면, 열풍건조법에 의한 온도별(60℃, 70℃, 80℃, 90℃) 누에 상태를 비교하였다. 초기 중량 1800g의 누에를 열풍건조 하였을 때, 평형점이 나타난 시점은 60℃에서 대략 34시간의 시간이 소요되었으며, 70℃에서 26시간, 80℃ 25시간, 90℃에서는 24시간이 소요된 것으로 나타났다. 또한, 평형점에 도달하였을 시, 그 중량은 60℃에서 319.9g, 70℃에서 329g, 80℃에서 323g, 90℃에서 315g인 것으로 나타났다. 이는 총중량 1800g에서 평형점에 도달하였을 시, 평균 중량이 17%임을 나타낸다.        Referring to FIG. 4, silkworm states by temperature (60 ° C, 70 ° C, 80 ° C and 90 ° C) by hot air drying were compared. When the initial weight of 1800 g of silkworm was subjected to hot air drying, it took about 34 hours at 60 ° C for equilibrium point, 26 hours at 70 ° C, 25 hours at 80 ° C and 24 hours at 90 ° C. When the equilibrium point was reached, the weight was 319.9 g at 60 캜, 329 g at 70 캜, 323 g at 80 캜, and 315 g at 90 캜. This indicates that when the equilibrium point is reached at a total weight of 1800 g, the average weight is 17%.

도 5를 참조하면, 마이크로웨이브를 이용할 때 평형점이 나타난 시점은 대략 40분 정도이다. 또한, 온도별 열풍건조와 마이크로웨이브오븐을 이용한 건조누에의 일반성분을 분석해본 결과 그 유의차가 나타나지 않았다. 따라서 단기간에 가장 효율적인 건조방법은 마이크로웨이브를 활용한 방법인 것으로 분석된다.        Referring to FIG. 5, when the microwave is used, the point at which the equilibrium point appears is about 40 minutes. In addition, the general components of dried silkworms using microwave ovens and hot air drying by temperature were analyzed and the difference was not significant. Therefore, the most efficient drying method in a short period of time is analyzed as a microwave-assisted method.

표 1과 표 2를 참조하면, 일정시간이 지난 후, 건조누에의 일반성분을 분석한 결과(유의차검정), 조성 비율 간 유의차가 없는 것으로 나타났다. 이는 누에의 열풍 건조 시 시간과 건조비용을 고려할 시 60℃의 낮은 온도보다 90℃에 시행되는 누에건조가 경제성이 높은 것으로 나타난 것임을 알 수 있고, 종합적으로는 열풍 보다 마이크로웨이브를 활용한 건조가 더 효율적이라는 것을 알 수 있었다. 수분보정 후의 성분분석에서도 비슷한 결과를 나타낸다.        As shown in Table 1 and Table 2, after a certain period of time, there was no significant difference between the composition ratios of the general components of dried silkworms (significant differences). Considering the time and drying cost of the hot air drying of the silkworm, it can be seen that the silkworm drying at 90 ° C is more economical than the lower temperature of 60 ° C. In general, Efficient. Analysis of the components after moisture correction shows similar results.

시료명Name of sample 수분(%)moisture(%) 회분(%)Ashes (%) 조지방(%)Crude fat (%) 조단백(%)Crude protein (%) 조섬유(%)Crude fiber (%) 마이크로웨이브Microwave 5.025.02 5.675.67 14.7114.71 68.0268.02 4.854.85 60도-건조60 degrees - drying 4.674.67 5.705.70 14.5814.58 68.9968.99 4.124.12 70도-건조70 degrees - drying 7.547.54 5.805.80 14.1914.19 66.2066.20 4.324.32 80도-건조80 degrees - drying 4.014.01 6.126.12 14.0814.08 69.9669.96 4.384.38 90도-건조90 degrees - drying 2.532.53 6.206.20 14.4314.43 70.0770.07 4.524.52

시료명Name of sample 수분(%)moisture(%) 회분(%)Ashes (%) 조지방(%)Crude fat (%) 조단백(%)Crude protein (%) 조섬유(%)Crude fiber (%) 마이크로웨이브Microwave -- 5.975.97 15.6415.64 71.6271.62 5.115.11 60도-건조60 degrees - drying -- 5.985.98 15.2915.29 72.3772.37 4.324.32 70도-건조70 degrees - drying -- 6.276.27 15.1415.14 71.6071.60 4.674.67 80도-건조80 degrees - drying -- 6.386.38 15.0415.04 72.8872.88 4.564.56 90도-건조90 degrees - drying -- 6.366.36 15.4115.41 71.8971.89 4.644.64

또한, 각 분말 시료 0.5g에 0.3% 아세트산 5ml을 첨가하고, 실온에서 1시간 동안 교반한 후 10,000rmp, 4℃ 조건에서 20분간 원심분리 후 상등액 분리하고, 상등액을 1ml로 농축한 다음 항균활성검정을 수행하였다. Then, 5 ml of 0.3% acetic acid was added to 0.5 g of each powder sample. The mixture was stirred at room temperature for 1 hour, centrifuged at 10,000 rpm at 4 ° C for 20 minutes, and the supernatant was separated. The supernatant was concentrated to 1 ml, Respectively.

항균활성검정은 방사선 확산 분석법(RDA)을 통하여 병원성 대장균(E. coli ML35)에 대한 항균활성 분석하였으며, 항균활성 비교 분석을 위해서, 병원균 생육억제를 나타내는 Inhibition zone의 크기로 비교 분석하였다.         Antimicrobial activity assay was carried out by using radioactive diffusivity analysis (RDA). The antimicrobial activity of E. coli ML35 was compared with that of the inhibition zone indicating inhibition of pathogen growth.

도 6을 참조하면, Zone 크기를 비교 분석한 결과 마이크로웨이브(MW)로 건조한 시료에서 항균활성이 가장 높고 열풍건조에 따른 시료는 온도에 따라 다른 결과를 나타내었다.         6, the antimicrobial activity of the samples dried by microwave (MW) was the highest, and the samples subjected to the hot air drying showed different results depending on the temperature.

상술한 바에 따르면, 누에의 건조에 열풍을 활용할 경우, 누에 분말의 항균활성을 높이려면 낮은 온도로 적용을 해야 하지만, 건조시간이 길어져 건조비용의 증가를 초래할 수 있다. 하지만, 마이크로웨이브를 활용할 경우, 누에분말의 항균활성이 높게 나타나고, 건조시간도 열풍과 비교하여 크게 감소하는 바, 열풍건조보다 마이크로웨이브를 이용한 누에건조가 더 효율적이라고 분석된다.         According to the above description, when hot air is used for drying the silkworm, the application of the silkworm powder at a low temperature is required to increase the antibacterial activity of the silkworm powder, but the drying time may increase and the drying cost may increase. However, when the microwave is used, the silkworm powder has a high antimicrobial activity and the drying time is greatly reduced as compared with the hot wind. Therefore, it is analyzed that the microwave - drying silkworm is more efficient than the hot wind drying.

단계 S120에서, 분말화된 누에를 사료에 첨가하여 사료 조성물을 제조한다. 이 경우 누에 분말은 미량원료를 사료에 군일하게 첨가하기 위하여 예비 배합하는데 쓰이는 물질인 부형제(carrier, 浮衡劑)와 섞일 수 있다. 여기서, 부형제는 약제에 적당한 굳기나 형상을 주기 위해서, 또는 주제(主劑)의 양이 적은 경우에 일정 용량, 중량을 주어 취급하기 쉬운 크기로 할 목적으로 첨가되는 성분으로서, 말분, 석회석, 분쇄옥수수속대, 옥수수글루텐피드, 대두 mill run 등이 될 수 있다. In step S120, the powdered silkworm is added to the feed to produce the feed composition. In this case, the silkworm powder may be mixed with a carrier, a substance used for preliminary blending to add the trace materials to the feed. Here, the excipient is a component added for the purpose of imparting a suitable hardness or shape to the medicament, or to make it easy to handle with a certain volume and weight when the amount of the main agent is small, such as horse chestnut, limestone, Corn cob, corn gluten feed, soybean mill run, and the like.

여기서, 전체 사료 조성물 100 중량부에 대하여, 누에 1 내지 50중량부, 부형제 50 내지 99중량부가 포함될 수 있다.         Here, 1 to 50 parts by weight of silkworm and 50 to 99 parts by weight of excipient may be included relative to 100 parts by weight of the whole feed composition.

이상에서 항균펩타이드가 강화된 누에를 함유하는 사료 조성물의 제조 방법을 설명하였으며, 이하에서는 첨부 도면을 참조하여, 본 발명에 따른 항균펩타이드가 강화된 누에를 함유하는 사료 조성물을 함유하는 사료 조성물의 효과를 실험한 결과를 설명한다. 본 발명이 이러한 실시예에 한정되지 않음은 물론이다.
Hereinafter, a method for producing a feed composition containing silkworm-enhanced silkworm peptide was described. Hereinafter, with reference to the accompanying drawings, the effect of the feed composition containing the silkworm-containing feed composition containing the antimicrobial peptide according to the present invention The results are shown in Fig. It goes without saying that the present invention is not limited to these embodiments.

본 실시예에 따른 사료 조성물의 성능을 시험하기 위하여, 닭에 대한 누에 유래 항균 펩타이드 함유 사료조성물 첨가급여를 시험하였다. 닭에 대해 개발된 누에 분말 함유 사료조성물의 첨가 급여 효과를 조사하기 위하여 1일령 육계 병아리를 대상으로 5주간 사양시험을 실시하였다. 비교예 1은 항생제 무첨가구, 비교예 2는 항생제(아빌라마이신 10ppm+살리노마이신 60ppm) 첨가구, 실시예는 일반 누에 분말을 0.01, 0.05, 0.10 또는 0.50% 수준으로 첨가한 실시예 1, 2, 3, 4와 면역 유도 물질을 주입하여 항균 펩타이드를 생산을 유도한 누에 분말을 .01, 0.05, 0.10 또는 0.50% 수준으로 첨가한 실시예 5, 6, 7, 8을 두었다. 모든 실시예에는 사료용 항생제 및 항콕시듐제를 첨가하지 않았다.
In order to test the performance of the feed composition according to the present example, feeding of a silkworm-derived antimicrobial peptide-containing feed composition to chicken was tested. To investigate the effect of addition of the silkworm powder - containing feed composition developed for chicken on the 1 - day - old broiler chickens, a 5 - week specification test was conducted. In Comparative Example 1, no antibiotics were added, in Comparative Example 2, antibiotics (aviramycin 10 ppm + salinomycin 60 ppm), and in Examples 1, 2, and 3 in which general silkworm powder was added at a level of 0.01, 0.05, 5, 6, 7 and 8 in which silkworm powder inducing the production of an antimicrobial peptide was injected at a level of 0.01, 0.05, 0.10 or 0.50% by injecting an immunopotentiating substance. All of the examples did not include feed antibiotics and anticoccidials.

구분division 항생제Antibiotic 처리내용Processing contents 비교예 1Comparative Example 1 ×× 무첨가No additives 비교예 2Comparative Example 2 항생제(아빌라마이신 10ppm+살리노마이신 60ppn)첨가사료Feed supplemented with antibiotics (avilamycin 10ppm + salinomycin 60ppn) 실시예 1Example 1 ×× 일반 누에 분말 0.01중량% 첨가 사료Feed of 0.01% by weight of general silkworm powder 실시예 2Example 2 ×× 일반 누에 분말 0.05중량% 첨가 사료Feed of 0.05% by weight of general silkworm powder 실시예 3Example 3 ×× 일반 누에 분말 0.10중량% 첨가 사료Feeding 0.10% by weight of general silk powder 실시예 4Example 4 ×× 일반 누에 분말 0.50중량% 첨가 사료Feeding 0.50% by weight of general silk powder 실시예 5Example 5 ×× 면역 유도 누에 분말 0.01 중량% 첨가 사료0.01% by weight of immuno-inducing silkworm powder 실시예 6Example 6 ×× 면역 유도 누에 분말 0.05 중량% 첨가 사료Immune-induced silkworm powder 0.05 wt% 실시예 7Example 7 ×× 면역 유도 누에 분말 0.10 중량% 첨가 사료Immune-inducing silkworm Powder 0.10% by weight Added feed 실시예 8Example 8 ×× 면역 유도 누에 분말 0.50 중량% 첨가 사료0.50% by weight of immunostimulatory silkworm powder

표 4는 육계 생산성을 비교한 것이다. 모든 실시예에서 비교예 1에 비해 5주 종료체중 및 증체량이 0.95~3.54 % 증가하였다. 특히 면역 유도에 의해 항균펩타이드가 과발현된 실시예 5, 6, 7, 8의 경우 일반 누에 분말의 급여한 실시예 1, 2, 3, 4에 비해 높은 체중 증가 효과가 나타났다. 사료요구율 역시 비교예 1에 비해 누에 분말을 급여한 모든 실시예에서 2.82~5.08 %가량 개선되었다. 이를 통해 본 발명에 따른 누에 유래 항균 펩타이드 함유 사료조성물은 증체량 및 사료요구율 개선을 통해 생산성 향상 효과가 우수하며, 생산성 측면에서 적정 첨가수준은 일반 누에 분말은 0.01~0.50 %, 면역 유도 누에 분말은 0.01~0.05 % 내외인 것을 확인할 수 있었다.
Table 4 compares broiler productivity. In all of the examples, the body weight and weight gain at the end of 5 weeks increased by 0.95 to 3.54% as compared to Comparative Example 1. [ In particular, Examples 5, 6, 7 and 8, in which the antimicrobial peptide was overexpressed by immunization induction, showed a higher weight gain effect than Examples 1, 2, 3 and 4 in which the general silkworm powder was fed. The feed conversion ratio was also improved by 2.82-5.08% in all the examples in which the silkworm powder was fed as compared with Comparative Example 1. [ Accordingly, the feed composition containing the silkworm-derived antimicrobial peptide according to the present invention has an excellent productivity improvement effect by improving the amount of feed and the feed conversion ratio. In terms of productivity, the optimum addition level is 0.01-0.50% for general silkworm powder, 0.01 To about 0.05%.

비교예1Comparative Example 1 비교예2Comparative Example 2 실시에1Implementation 1 실시예2Example 2 실시예3Example 3 실시예4Example 4 실시예5Example 5 실시예6Example 6 실시예7Example 7 실시예8Example 8 개시체중(g)Starting weight (g) 44.444.4 44.044.0 44.144.1 44.144.1 44.144.1 44.544.5 44.344.3 44.444.4 44.444.4 44.144.1 종료체중(g)Finished weight (g) 2202.02202.0 2416.42416.4 2229.42229.4 2222.92222.9 2227.92227.9 2240.62240.6 2280.02280.0 2254.22254.2 2273.62273.6 2225.92225.9 증체량(g)Weight gain (g) 전기(0~21일)Electricity (0 to 21 days) 917.1917.1 995.6995.6 925.7925.7 919.9919.9 927.7927.7 953.5953.5 964.5964.5 964.4964.4 965.1965.1 964.5964.5 후기(21~35)The latter (21 ~ 35) 1284.91284.9 1420.81420.8 1303.81303.8 1303.01303.0 1300.21300.2 1287.11287.1 1315.51315.5 1348.91348.9 1314.01314.0 1287.81287.8 전기간(0~35일)Before (0 ~ 35 days) 2157.62157.6 2372.52372.5 2185.32185.3 2178.82178.8 2183.82183.8 2196.22196.2 2235.72235.7 2209.92209.9 2229.32229.3 2181.92181.9 사료섭취량(g)Feed intake (g) 전기(0~21일)Electricity (0 to 21 days) 1268.21268.2 1316.31316.3 1088.21088.2 1094.11094.1 1101.91101.9 1161.21161.2 1131.71131.7 1076.51076.5 1146.81146.8 1177.01177.0 후기(21~35)The latter (21 ~ 35) 2587.32587.3 2813.72813.7 2744.72744.7 2701.82701.8 2635.32635.3 2664.42664.4 2680.92680.9 2733.32733.3 2687.02687.0 2654.52654.5 전기간(0~35일)Before (0 ~ 35 days) 3812.73812.7 4057.04057.0 3703.63703.6 3693.33693.3 3670.13670.1 3773.33773.3 3744.53744.5 3681.43681.4 3765.03765.0 3682.53682.5 사료요구율Feed rate 전기(0~21일)Electricity (0 to 21 days) 1.451.45 1.381.38 1.231.23 1.251.25 1.251.25 1.271.27 1.231.23 1.231.23 1.341.34 1.281.28 후기(21~35)The latter (21 ~ 35) 2.022.02 1.981.98 2.112.11 2.082.08 2.032.03 2.072.07 2.042.04 2.062.06 2.132.13 2.052.05 전기간(0~35일)Before (0 ~ 35 days) 1.771.77 1.711.71 1.701.70 1.701.70 1.681.68 1.721.72 1.681.68 1.681.68 1.691.69 1.691.69

육계에 대한 누에 및 면역 유도 누에 분말의 생체안전성을 확인하기 위해 장기의 상대적 중량과 혈액 생화학 조성을 조사한 결과, 육계에 5주간 0.01~0.50% 수준으로 사료 내 첨가 급여하여도 간, 신장 등 주요 장기 발달과 혈액 내 간 및 손상지표에 영향을 미치지 않는다는 것을 확인할 수 있었다.        In order to confirm the biosafety of silkworm and immunity inducing silkworm powder on broiler chickens, the relative weight and biochemical composition of organs were investigated. As a result, it was found that, when fed in broiler chickens for 0.01 to 0.50% And liver and damage index in the blood.

표 5는 육계 주요 장기의 상대적 중량을 비교한 것이다. 일반 누에분말 및 면역유도 누에분말의 사료 내 첨가 급여가 육계의 주요 장기 발달(간, 비장, 췌장, 신장, F낭)에 미치는 영향을 조사한 결과, 비교예 1, 2를 비롯한 전 실시예에서 차이가 관찰되지 않았으며, 육계에 일반 누에분말 및 면역유도 누에분말을 5주간 사료 내 0.01~0.50% 수준으로 첨가 급여하여도 주요 장기 발달에는 영향을 미치지 않는다는 것을 확인할 수 있었다.
Table 5 compares the relative weights of the major organs of broilers. The effects of dietary supplementation of common silkworm powder and immunostimulatory silkworm powder on the development of major organs (liver, spleen, pancreas, kidney, and follicle) of broiler chickens were examined. As a result, And that the addition of normal silkworm powder and immunostimulatory silkworm powder to the broiler chickens at the level of 0.01 ~ 0.50% in the feed for 5 weeks did not affect the major organ development.


비교예1Comparative Example 1 비교예2Comparative Example 2 실시예1Example 1 실시예2Example 2 실시예3Example 3 실시예4Example 4 실시예5Example 5 실시예6Example 6 실시예7Example 7 실시예8Example 8
---------- g/100g 생체중 -------------------- g / 100g live weight ---------- liver 2.122.12 1.971.97 1.921.92 1.851.85 2.022.02 1.901.90 1.901.90 2.162.16 1.831.83 1.851.85 비장spleen 0.140.14 0.100.10 0.100.10 0.120.12 0.110.11 0.100.10 0.110.11 0.120.12 0.120.12 0.110.11 췌장Pancreas 0.220.22 0.230.23 0.210.21 0.220.22 0.200.20 0.210.21 0.250.25 0.230.23 0.260.26 0.230.23 신장kidney 0.350.35 0.340.34 0.350.35 0.370.37 0.360.36 0.380.38 0.330.33 0.350.35 0.340.34 0.360.36 F낭F Sack 0.090.09 0.080.08 0.080.08 0.070.07 0.060.06 0.070.07 0.070.07 0.070.07 0.060.06 0.060.06

표 6은 혈액 내 생화학 조성을 비교한 것이다. 간 및 신장의 손상 여부를 나타내고 신규 (사료첨가제의 독성 여부를 판단할 수 있는 지표로 이용되는 요소질소(BUN, blood urea nitrogen), 크레아티닌(creatinine), 총단백질(total protein), 알부민(albumin), 글로불린(globulin), AST(aspartate aminotransferase)를 조사한 결과, 실시예에 있어서 비교예 1에 비해 간 및 신장 손상 지표인 AST 및 ALT 수치가 감소하였다. 그 외 요소질소, 크레아티닌, 총단백질, 알부민, 글로불린에서는 큰 차이가 관찰되지 않았다. 이를 통해 누에 유래 항균 펩타이드 함유 사료조성물이 항산화, 항염증 작용을 통해 세포 및 조직의 손상을 감소시키는 한편 생체면역반응을 조절하고 가축에 독성이나 부작용 역시 나타내지 않아 사료첨가제로서 사용할 수 있음을 확인할 수 있었다.
Table 6 compares the biochemical composition in the blood. (BUN, creatinine, total protein, albumin), which is used as an index to determine toxicity of feed additive, Globulin, and aspartate aminotransferase (AST), the levels of AST and ALT, which are liver and kidney damage indexes, were decreased in the Examples in comparison with Comparative Example 1. Other elements such as urea nitrogen, creatinine, total protein, albumin, The results showed that the feed composition containing the antibacterial peptide derived from silkworm reduced the cell and tissue damage through antioxidant and antiinflammatory action and regulated the bioimmune response and did not show any toxicity or side effects on the livestock, It can be used as an additive.

비교예1Comparative Example 1 비교예2Comparative Example 2 실시예1Example 1 실시예2Example 2 실시예3Example 3 실시예4Example 4 실시예5Example 5 실시예6Example 6 실시예7Example 7 실시예8Example 8 요소실조(mg/dL)Elemental failure (mg / dL) 1.251.25 1.191.19 1.121.12 1.111.11 1.091.09 1.181.18 1.221.22 1.171.17 1.131.13 1.211.21 크레아티닌(mg/dL)Creatinine (mg / dL) 0.270.27 0.260.26 0.280.28 0.270.27 0.270.27 0.260.26 0.280.28 0.260.26 0.260.26 0.290.29 총단백질(mg/dL)Total protein (mg / dL) 3.363.36 3.433.43 3.333.33 3.213.21 3.213.21 3.433.43 3.273.27 3.383.38 3.493.49 3.483.48 알부민(mg/dL)Albumin (mg / dL) 1.581.58 1.601.60 1.491.49 1.501.50 1.471.47 1.541.54 1.481.48 1.531.53 1.571.57 1.591.59 글로불린(mg/dL)Globulin (mg / dL) 1.781.78 1.831.83 1.841.84 1.711.71 1.741.74 1.891.89 1.791.79 1.841.84 1.921.92 1.891.89 알부민/글로불린Albumin / globulin 0.940.94 0.850.85 0.790.79 0.940.94 0.840.84 0.880.88 0.740.74 0.890.89 0.780.78 0.880.88 AST(U/L)AST (U / L) 299.7299.7 274.3274.3 271.2271.2 271.3271.3 276.2276.2 269.9269.9 268.4268.4 273.2273.2 265.1265.1 257.3257.3 ALT(U/L)ALT (U / L) 3.893.89 3.913.91 3.333.33 3.893.89 3.113.11 3.443.44 3.113.11 3.113.11 2.782.78 3.113.11

표 7은 맹장 내 미생물총 변화를 비교한 결과이다. 장내 유해균인 대장균 및 살모넬라 수가 일반 누에 분말 및 면역 유도 누에 분말 함유 사료조성물을 첨가 급여한 모든 실시예에서 비교예 1에 비해 감소하는 것을 확인하였다. 또한 장내 유익균인 젖산 생성균에는 영향을 미치지 않아 장내 미생물총 안정화에 긍정적인 영향을 미치는 것을 확인할 수 있었다.
Table 7 compares the total microorganism changes in the cecum. It was confirmed that Escherichia coli and Salmonella, which are pathogenic bacteria in the intestines, were reduced in all the examples in which feed composition containing common silkworm powder and immunity-inducing silkworm powder was added, as compared with Comparative Example 1. In addition, it was confirmed that lactic acid-producing bacteria, which are beneficial bacteria in the intestines, are not affected, thus positively affecting total intestinal microbial stability.

비교예1Comparative Example 1 비교예2Comparative Example 2 실시예1Example 1 실시예2Example 2 실시예3Example 3 실시예4Example 4 실시예5Example 5 실시예6Example 6 실시예7Example 7 실시예8Example 8 ---------- log10 cfu/g -------------------- log10 cfu / g ---------- 종균Seed bacteria 8.5118.511 8.1188.118 8.3858.385 8.1788.178 8.2128.212 8.1588.158 8.1588.158 8.1798.179 8.0648.064 8.0158.015 대장균Escherichia coli 6.1656.165 5.8175.817 5.9875.987 5.9595.959 5.9885.988 6.0146.014 5.8985.898 5.8255.825 5.8785.878 5.8105.810 살모넬라Salmonella 4.4164.416 3.3453.345 4.3454.345 4.2544.254 4.1384.138 4.2254.225 3.9853.985 3.7253.725 3.5783.578 3.6613.661 젖산 생성균Lactic acid-producing bacteria 7.4057.405 7.1527.152 7.3967.396 7.4087.408 7.2657.265 7.5217.521 7.3587.358 7.4527.452 7.2577.257 7.4027.402

표 8은 혈액 내 항산화 및 스트레스 관련 인자를 비교한 결과이다. 혈액 총항산화 활성은 모든 실시예가 비교예에 비해 높은 활성을 보였으며 누에 분말의 첨가수준이 증가할수록 총항산화 활성 증가하는 경향을 나타냈다. 대표적인 스트레스 호르몬으로 알려진 코티졸 함량을 분석한 결과, 비교예 1에 비해 모든 실시예에서 감소하는 결과를 확인할 수 있었다. 스트레스, 질병 감염, 염증 반응시 다량 분비되는 코티졸은 기초 대사율, 단백질 합성 및 분해, 면역반응, 체내항상성 등에 영향을 미쳐 가축 건강은 물론 장기적으로 생산성에도 부정적인 영향을 미칠 수 있다. 누에 분말은 항생제와 유사하게 혈액 내 코티졸 함량을 낮추어 가축 건강은 물론 생산성에 긍정적인 영향을 미친다는 것과 스트레스 제어 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
Table 8 compares the antioxidant and stress-related factors in the blood. Total antioxidative activities of blood were higher than those of the comparative examples, and total antioxidant activity tended to increase as the level of silkworm powder was increased. Analysis of the content of cortisol, which is known as a representative stress hormone, results in a decrease in all the examples compared to Comparative Example 1. Cortisol, which is secreted during stress, disease infections, and inflammatory responses, can affect basal metabolic rate, protein synthesis and degradation, immune response, and body homeostasis, which can negatively impact productivity in the long term as well as in animal health. It was found that silkworm powder has a positive effect on productivity as well as animal health by lowering cortisol content in blood similar to antibiotics and stress control effect.

비교예1Comparative Example 1 비교예2Comparative Example 2 실시예1Example 1 실시예2Example 2 실시예3Example 3 실시예4Example 4 실시예5Example 5 실시예6Example 6 실시예7Example 7 실시예8Example 8 종항산화활성
(mM TEAC/mL)
End antioxidant activity
(mM TEAC / mL)
48.9748.97 50.8450.84 50.2750.27 49.0349.03 50.0150.01 50.3950.39 49.6549.65 49.8849.88 50.7250.72 51.5351.53
코티졸(ng/mL)Cortisol (ng / mL) 12.6512.65 6.226.22 8.818.81 7.347.34 8.048.04 8.028.02 7.957.95 7.367.36 6.966.96 7.337.33

누에 분말 첨가 급여가 육계 백혈구 조성에 미치는 영향을 표 9에 제시하였다. 급성 감염이나 염증 반응시 증가하는 다핵구(heterophil)는 물론 스트레스 지표로 사용되는 다핵구/림프구 비율은 일반 누에분말 및 면역 유도 누에분말을 첨가 급여한 실시예에서 항생제 무첨가구인 비교예 1에 비해 유의하게 감소하거나 감소하는 경향을 보였다. 본 발명에 따른 누에 유래 항균 펩타이드 함유 사료조성물은 장관 내 대장균, 살모넬라 등의 유해균 증식 및 이들의 독소 분비를 억제하여 이들에 대한 생체면역반응을 감소시킨 것으로 판단된다.
Table 9 shows the effect of the addition of silkworm powder on the composition of leukocyte in broiler chickens. The ratio of polynuclear core / lymphocyte used as a stress index as well as the heterophil which increases in acute infection or inflammation reaction is significantly higher than that of Comparative Example 1 in which the addition of general silkworm powder and immunostimulatory silkworm powder is added , Respectively. The feed composition containing the silkworm-derived antimicrobial peptide according to the present invention is believed to suppress the bio-immune response to these by inhibiting the growth of harmful microorganisms such as Escherichia coli and Salmonella in the intestinal tract and their toxin secretion.

비교예1Comparative Example 1 비교예2Comparative Example 2 실시예1Example 1 실시예2Example 2 실시예3Example 3 실시예4Example 4 실시예5Example 5 실시예6Example 6 실시예7Example 7 실시예8Example 8 백혈구 (K/㎕)Leukocytes (K / l) 23.0423.04 20.5820.58 23.1223.12 23.7223.72 22.4622.46 24.3624.36 24.3624.36 26.6426.64 24.3424.34 29.4229.42 다핵구(K/㎕)The polynuclear spheres (K / L) 8.168.16 7.057.05 7.697.69 7.937.93 7.097.09 7.637.63 7.637.63 7.827.82 7.107.10 9.109.10 림프구(K/㎕)Lymphocytes (K / l) 11.9411.94 11.4511.45 11.8811.88 12.1612.16 11.1311.13 12.7412.74 12.7412.74 13.4813.48 12.8312.83 15.2215.22 다핵구/림프구Polynuclear cavity / lymphocyte 0.680.68 0.620.62 0.650.65 0.650.65 0.640.64 0.600.60 0.600.60 0.580.58 0.550.55 0.600.60

그 외 본 발명의 실시예에 따른 항균펩타이드가 강화된 누에를 함유하는 사료 조성물 및 그 제조 방법에 대한 구체적인 사료 구성물, 제조 장치 등에 대한 구체적인 설명은 본 발명이 속하는 기술 분야의 통상의 지식을 가진자에게 자명한 사항이므로 생략하기로 한다.        Other specific examples of the feed composition containing the silkworm-enhanced silkworm peptide according to the embodiment of the present invention and the specific feed composition, the manufacturing apparatus, and the like for the method of preparing the silkworm peptide composition are described in the description of the present invention, It will be omitted.

상기한 바에서, 각 실시예에서 설명한 각 구성요소 및/또는 기능은 서로 복합적으로 결합하여 구현될 수 있으며, 해당 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 하기의 특허 청구의 범위에 기재된 본 발명의 사상 및 영역으로부터 벗어나지 않는 범위 내에서 본 발명을 다양하게 수정 및 변경시킬 수 있음을 이해할 수 있을 것이다.         In the above description, the respective components and / or functions described in the embodiments may be combined and combined, and those skilled in the art will understand that the present invention It will be understood by those skilled in the art that various changes in form and details may be made therein without departing from the spirit and scope of the invention.

Claims (9)

면역 유도 물질을 주입한 누에를 준비하는 단계; 및
상기 누에를 첨가하여 사료 조성물을 제조하는 단계를 포함하는 항균펩타이드가 강화된 누에를 함유하는 사료 조성물 제조 방법.
Preparing a silkworm injected with an immunity inducing substance; And
And adding the silkworm to produce a feed composition. ≪ RTI ID = 0.0 > 21. < / RTI >
청구항 1에 있어서,
상기 사료 조성물은 부형제를 더 포함하며, 전체 사료 조성물 100 중량부에 대하여, 상기 누에 1 내지 50중량부, 상기 부형제 50 내지 99중량부인 것을 특징으로 하는 항균펩타이드가 강화된 누에를 함유하는 사료 조성물 제조 방법.
The method according to claim 1,
Wherein the feed composition further comprises an excipient and 1 to 50 parts by weight of the silkworm and 50 to 99 parts by weight of the excipient are added to 100 parts by weight of the total feed composition. Way.
청구항 2에 있어서,
상기 부형제는 말분, 석회석, 분쇄옥수수속대, 옥수수글루텐피드 및 대두 중 어느 하나 이상을 포함하는 항균펩타이드가 강화된 누에를 함유하는 사료 조성물 제조 방법.
The method of claim 2,
Wherein the excipient comprises silkworm-enriched silkworm-containing silkworm comprising at least one of horse chestnut, limestone, ground cornstarch, corn gluten feed, and soybean.
청구항 1에 있어서,
상기 누에는 분말 또는 액상으로 상기 사료 조성물에 첨가되는 것을 특징으로 하는 항균펩타이드가 강화된 누에를 함유하는 사료 조성물 제조 방법.
The method according to claim 1,
Wherein the silkworm is added to the feed composition in powder or liquid form.
청구항 1에 있어서,
상기 사료 조성물은 분말 또는 팰렛 형상인 것을 특징으로 하는 항균펩타이드가 강화된 누에를 함유하는 사료 조성물 제조 방법.
The method according to claim 1,
Wherein the feed composition is in powder or pellet form. ≪ RTI ID = 0.0 > 21. < / RTI >
청구항 1에 있어서,
상기 누에를 준비하는 단계는,
마이크로웨이브를 이용하여 상기 누에를 건조하는 단계를 더 포함하는 항균펩타이드가 강화된 누에를 함유하는 사료 조성물 제조 방법.
The method according to claim 1,
Wherein preparing the silkworm comprises:
And drying the silkworm by using a microwave.
청구항 1에 있어서,
상기 사료 조성물은 닭, 오리, 거위, 꿩, 돼지, 소, 염소, 개 및 고양이 중 어느 하나 이상의 동물의 사료인 것을 특징으로 하는 항균펩타이드가 강화된 누에를 함유하는 사료 조성물 제조 방법.
The method according to claim 1,
Wherein the feed composition is feed of an animal of any one or more of chicken, duck, goose, pheasant, pig, cow, goat, dog, and cat.
청구항 1에 있어서,
상기 누에는 전체 사료 조성물의 질량 대비 0.005 내지 0.05%의 비율로 상기 사료에 첨가되는 것을 특징으로 하는 항균펩타이드가 강화된 누에를 함유하는 사료 조성물 제조 방법.
The method according to claim 1,
Wherein the silkworm is added to the feed at a rate of 0.005 to 0.05% of the mass of the whole feed composition.
제1항 내지 제8항 중 어느 하나에 기재된 항균펩타이드가 강화된 누에를 함유하는 사료 조성물 제조 방법에 의해 제조된 사료 조성물.
A feed composition prepared by the method for producing a feed composition containing silkworm peptide-enriched silkworm according to any one of claims 1 to 8.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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KR20210055988A (en) * 2019-11-08 2021-05-18 대한민국(농촌진흥청장) Vaccine composition of the inactivated-pathogenic Escherichia coli whole cells using extracts of silk worm induced an immune response
WO2021135088A1 (en) * 2019-12-31 2021-07-08 南京坤牧有机农业有限公司 Feed for improving fish immunity and preparation method therefor

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