KR20160049390A - 산알 배양용 조성물 및 이를 이용한 산알 배양 방법 - Google Patents
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Abstract
산알 배양용 조성물 및 이를 이용한 산알 배양 방법을 제공한다. 이를 이용하면, 산알을 안정적으로 배양할 수 있다.
Description
산알 배양용 조성물 및 이를 이용한 산알 배양 방법에 관한 것이다.
한의학의 기본이론 중 하나인 경락·경혈을 이용한 침구 치료의 효과가 여러 가지 임상연구에서 입증되었으며, 신경계 및 호르몬계와 유전자 발현을 통한 치료 기전들도 속속 밝혀지고 있다. 최근 경락과 관련하여, 기존의 해부학에서 존재하지 않는 것으로 알려져 있던 혈관 내와 림프관 내의 가는 관 다발 형태의 새로운 구조가 국내의 연구진에 의해 발견되었다. 이 새로운 구조는 장기와 장기를 잇고 있을 뿐 아니라 체표와 장기를 이어져 있는 것으로 확인되고 있다. 또한, 이러한 경락순환관은 프리모관(Primo Duct) 또는 봉한관(Bong Han Duct)으로 불리고, 프리모관은 인체의 제3 순환계라 할 수 있는 새로운 순환계로서 프리모 순환계 혹은 프리모 시스템(Primo Vascular System; PVS)으로의 가능성을 시사한다.
프리모관에 흐르는 산알(sanal 또는 primo microcell)은 DNA와 단백질을 포함하는 작은 세포이다. 최근, 프리모관에 면역세포가 많이 존재하고 줄기세포 표지인자가 관찰되었고, 프리모 시스템에 암과 관련된 줄기세포가 있을 가능성도 제기되고 있다. 이러한 연구들은 프리모 시스템의 연구가 단순하게 해부학적으로 시스템의 존재와 위치를 밝히는 수준을 넘어서 조직 재생 및 암, 당뇨와 같은 질병 치료와 관련된 연구가 활발히 진행되고 있음을 보여준다. 이에 따라 프리모 시스템에 존재하는 산알의 기능에 대한 관심이 집중되고 있다. 그러나, 프리모 시스템에 존재하는 산알을 수득하기 어렵고 수득된 산알의 양이 부족한 문제가 있다.
따라서, 산알을 안정적으로 배양하기 위한 배양액 및 이를 이용한 산알 배양 방법을 개발할 필요가 있다.
산알 배양용 조성물을 제공한다.
산알 배양 방법을 제공한다.
일 양상에 따르면, 리신, 타우린, 히알루론산, 또는 이들의 조합을 포함하는 산알 배양용 조성물이 제공된다.
상기 리신(lysine)은 화학식 H2NCH2CH2CH2CH2CH(NH2)COOH의 아미노산이다. 상기 리신은 예를 들어 L-리신일 수 있다. 상기 리신은 산알 배양용 조성물 중 약 150 mg/L 내지 약 300 mg/L, 약 160 mg/L 내지 약 290 mg/L, 약 170 mg/L 내지 약 280 mg/L, 약 180 mg/L 내지 약 270 mg/L, 약 190 mg/L 내지 약 260 mg/L, 약 200 mg/L 내지 약 250 mg/L, 약 210 mg/L 내지 약 240 mg/L, 또는 약 220 mg/L 내지 230 mg/L의 농도로 포함될 수 있다. 상기 산알 배양용 조성물의 농축 비율에 따라 상기 리신의 함량은 변경될 수 있다.
상기 타우린(taurine)은 2-아미노에탄술폰산(2-aminoethanesulfonic acid)이다. 상기 타우린은 예를 들어 L-타우린일 수 있다. 상기 타우린은 산알 배양용 조성물 중 약 100 mg/L 내지 약 300 mg/L, 약 110 mg/L 내지 약 290 mg/L, 약 120 mg/L 내지 약 280 mg/L, 약 130 mg/L 내지 약 270 mg/L, 약 140 mg/L 내지 약 260 mg/L, 약 150 mg/L 내지 약 250 mg/L, 약 160 mg/L 내지 약 240 mg/L, 약 170 mg/L 내지 약 230 mg/L, 약 180 mg/L 내지 약 220 mg/L, 약 180 mg/L 내지 약 210 mg/L, 약 180 mg/L 내지 약 200 mg/L, 또는 약 180 mg/L 내지 약 190 mg/L의 농도로 포함될 수 있다. 상기 산알 배양용 조성물의 농축 비율에 따라 상기 타우린의 함량은 변경될 수 있다.
상기 히알루론산(hyaluronic acid)은 글루쿠론산(glucuronic acid)과 N-아세틸 글루코사민(N-acetylglucosamine)의 2 종의 당이 반복된 구조를 갖는 글리코사미노글리칸이다. 상기 히알루론산은 산알 배양용 조성물 중 약 1 mg/L 내지 약 5 mg/L, 약 1.5 mg/L 내지 약 4.5 mg/L, 약 2 mg/L 내지 약 4 mg/L, 약 2 mg/L 내지 약 3.5 mg/L, 약 2 mg/L 내지 약 3.0 mg/L, 또는 약 2.5 mg/L의 농도로 포함될 수 있다. 상기 산알 배양용 조성물의 농축 비율에 따라 상기 히알루론산의 함량은 변경될 수 있다.
용어 "산알(sanal)"은 살아있는 알을 뜻하는 것으로 프리모 미소세포(primo microcell)로도 불린다. 산알은 DNA 뿐만 아니라 단백질도 포함하는 것으로 알려져 있다. 산알은 DNA 염색질을 포함하는 작은 세포로서 프리모관(primo duct) 또는 봉한관(Bong Han Duct)에 흘러 다니고, 프리모관과 프리모관 사이에 개재되어 있는 결절상 소체인 프리모 노드(primo node)에도 존재한다. 프리모관과 프리모 노드는 프리모 시스템(Primo Vascular System; PVS)을 형성한다. 프리모 시스템은 혈관, 림프관 및 심장 내강에 존재하는 내프리모 체계, 주로 내장의 표면에 분포하고 있는 내외프리모 체계, 혈관이나 신경을 따라 달리고 있는 외프리모 체계, 그리고 신경 조직에 분포하고 있는 프리모 체계 등 4 종류로 나뉠 수 있다. 상기 산알은 프리모 체계의 프리모관 또는 프리모 노드로부터 수득된 산알일 수 있다. 상기 프리모관 또는 프리모 노드는 내장의 표면에 위치한 것일 수 있다. 상기 내장은 대장일 수 있다.
용어 "배양용 조성물(culturing composition)"은 증식성 세포 또는 미소세포(microcell)에 영양을 공급하는 조성물을 의미한다. 상기 산알 배양용 조성물은 산알을 배양하기 위한 조성물일 수 있다. 상기 배양용 조성물은 보관을 위해 분말로 보관될 수 있고, 배양을 위해 물, 완충액 등으로 현탁될 수 있다. 상기 산알 배양용 조성물은 산알의 증식 또는 생존에 필요한 필수 및 비필수 아미노산, 비타민, 에너지원, 지질 및 미량 원소를 더 포함할 수 있다. 또한, 상기 산알 배양용 조성물은 호르몬 및 성장인자를 비롯하여, 산알의 증식 또는 생존을 최소 속도 이상으로 증강시키는 성분을 더 포함할 수 있다.
상기 산알 배양용 조성물은 히드록시프롤린, 아드레날린, 노르아드레날린, 환원당, 또는 이들의 조합을 더 포함할 수 있다.
상기 히드록시프롤린(hydroxyproline)은 단백질 비유래 아미노산(non-proteinogenic amino acid)이다. 상기 히드록시프롤린은 예를 들어 L-히드록시프롤린일 수 있다. 상기 히드록시프롤린은 산알 배양용 조성물 중 약 1 mg/L 내지 약 10 mg/L, 약 1 mg/L 내지 약 9 mg/L, 약 1 mg/L 내지 약 8 mg/L, 약 1 mg/L 내지 약 7 mg/L, 약 1 mg/L 내지 약 6 mg/L, 약 1 mg/L 내지 약 5 mg/L, 약 1 mg/L 내지 약 4 mg/L, 약 1 mg/L 내지 약 3 mg/L, 또는 약 1 mg/L 내지 약 2 mg/L의 농도로 포함될 수 있다. 상기 산알 배양용 조성물의 농축 비율에 따라 상기 L-히드록시프롤린의 함량은 변경될 수 있다.
상기 아드레날린(adrenaline)은 부신수질의 호르몬으로서 C9H13NO3의 화학식으로 기재되는 화합물이고, 에피네프린(epinephrine)으로도 불린다. 상기 아드레날린은 산알 배양용 조성물 중 약 50 ng/㎖ 내지 약 100 ng/㎖, 약 55 ng/㎖ 내지 약 95 ng/㎖, 약 60 ng/㎖ 내지 약 90 ng/㎖, 약 65 ng/㎖ 내지 약 85 ng/㎖, 약 70 ng/㎖ 내지 약 80 ng/㎖, 또는 약 75 ng/㎖ 내지 약 80 ng/㎖의 농도로 포함될 수 있다. 상기 산알 배양용 조성물의 농축 비율에 따라 상기 아드레날린의 함량은 변경될 수 있다.
상기 노르아드레날린(noradrenaline)은 호르몬으로서, C8H11NO3의 화학식으로 기재되는 화합물이고 부신으로부터 혈액으로 방출되는 스트레스 호르몬의 하나이다. 상기 노르아드레날린은 산알 배양용 조성물 중 약 100 ng/㎖ 내지 약 200 ng/㎖, 약 105 ng/㎖ 내지 약 190 ng/㎖, 약 110 ng/㎖ 내지 약 180 ng/㎖, 약 115 ng/㎖ 내지 약 170 ng/㎖, 약 120 ng/㎖ 내지 약 160 ng/㎖, 약 125 ng/㎖ 내지 약 150 ng/㎖, 약 130 ng/㎖ 내지 약 140 ng/㎖, 또는 약 135 ng/㎖ 내지 약 140 ng/㎖의 농도로 포함될 수 있다. 상기 산알 배양용 조성물의 농축 비율에 따라 상기 노르아드레날린의 함량은 변경될 수 있다.
용어 "환원당(reducing sugar)"은 환원성을 나타내는 당을 말하고, 염기성 용액에서 알데히드 또는 케톤을 형성하는 당을 말한다. 상기 환원당은 예를 들어, 단당류, 말토오스, 락토오스, 수크로오스, 및 프럭토오스일 수 있다. 상기 환원당은 예를 들어 글루코오스일 수 있다. 상기 환원당은 약 100 mg/L 내지 약 600 mg/L, 약 150 mg/L 내지 약 650 mg/L, 약 200 mg/L 내지 약 600 mg/L, 약 250 mg/L 내지 약 550 mg/L, 약 300 mg/L 내지 약 500 mg/L, 약 300 mg/L 내지 약 450 mg/L, 약 300 mg/L 내지 약 400 mg/L, 또는 약 355 mg/L의 농도로 포함될 수 있다. 상기 산알 배양용 조성물의 농축 비율에 따라 상기 환원당의 함량은 변경될 수 있다.
상기 산알 배양용 조성물은 최소 배지를 더 포함할 수 있다. 상기 최소 배지는 세포 또는 미소세포의 증식 또는 생존에 필요한 최소한의 영양소를 포함하는 합성 배지를 말한다. 상기 최소 배지는 MEM(Minimum Essential Media) 배지일 수 있다. MEM 배지는 상업적으로 입수 가능하다.
다른 양상에 따르면, 리신, 타우린, 히알루론산, 또는 이들의 조합을 포함하는 산알 배양용 조성물의 존재 하에서 산알을 배양하는 단계를 포함하는 산알 배양 방법이 제공된다.
상기 리신, 타우린, 히알루론산, 산알, 및 배양용 조성물은 상기 기재된 바와 같다.
상기 배양하는 단계는 산알 배양용 조성물의 존재 하에서 산알을 인큐베이션하는 것일 수 있다. 배양 온도는 약 25℃ 내지 약 45℃, 약 30℃ 내지 약 40℃, 약 35℃ 내지 40℃,또는 약 37℃일 수 있다. 배양 시간은 약 1 시간 이상, 약 6 시간 이상, 약 12 시간 이상, 약 1일 이상, 약 3일 이상, 또는 약 1 주 이상일 수 있다. 배지는 배양 중 주기적으로 신선한 배지로 교환될 수 있다.
상기 산알 배양용 조성물은 히드록시프롤린, 아드레날린, 노르아드레날린, 환원당, 또는 이들의 조합을 더 포함할 수 있다. 상기 산알 배양용 조성물은 최소 배지를 더 포함할 수 있다. 상기 히드록시프롤린, 아드레날린, 노르아드레날린, 환원당, 및 최소 배지는 상기 기재된 바와 같다.
산알 배양용 조성물 및 이를 이용한 산알 배양 방법을 이용하면, 산알을 안정적으로 증식 또는 생존하게 할 수 있다.
도 1은 장기 표면으로부터 채취된 프리모관과 프리모 노드의 사진이다.
도 2a는 프리모액 중의 아미노산의 조성 및 농도(mg/L)를 나타낸 그래프이고, 도 2b는 프리모액과 MEM 배양 배지 중 아미노산의 조성 및 농도(mg/L)를 비교한 그래프이고(빗금친 막대: 프리모액, 흰 막대: MEM 배양 배지), 도 2c는 프리모액과 프리모관과 프리모 노드의 세포 기질의 아미노산의 조성 및 농도(mg/L)를 나타낸 그래프이다(빗금친 막대: 프리모액, 흰 막대: 프리모액과 프리모관과 프리모 노드의 세포 기질).
도 3은 프리모액 중 히알루론산의 농도(mg/L)를 나타낸 그래프이다.
도 4는 프리모액, 소변, 혈장, 또는 림프액 중 아드레날린의 농도(ng/㎖)를 나타낸 그래프이다.
도 5는 프리모액, 소변, 혈장, 또는 림프액 중 노르아드레날린의 농도(ng/㎖)를 나타낸 그래프이다.
도 6은 프리모액 또는 림프액 중 글루코오스의 농도(mg/L)를 나타낸 그래프이다.
도 2a는 프리모액 중의 아미노산의 조성 및 농도(mg/L)를 나타낸 그래프이고, 도 2b는 프리모액과 MEM 배양 배지 중 아미노산의 조성 및 농도(mg/L)를 비교한 그래프이고(빗금친 막대: 프리모액, 흰 막대: MEM 배양 배지), 도 2c는 프리모액과 프리모관과 프리모 노드의 세포 기질의 아미노산의 조성 및 농도(mg/L)를 나타낸 그래프이다(빗금친 막대: 프리모액, 흰 막대: 프리모액과 프리모관과 프리모 노드의 세포 기질).
도 3은 프리모액 중 히알루론산의 농도(mg/L)를 나타낸 그래프이다.
도 4는 프리모액, 소변, 혈장, 또는 림프액 중 아드레날린의 농도(ng/㎖)를 나타낸 그래프이다.
도 5는 프리모액, 소변, 혈장, 또는 림프액 중 노르아드레날린의 농도(ng/㎖)를 나타낸 그래프이다.
도 6은 프리모액 또는 림프액 중 글루코오스의 농도(mg/L)를 나타낸 그래프이다.
이하 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 산알 배양액의 제조
1.1. 프리모관 및 프리모 노드의 채집
산알은 프리모관 및 프리모 노드 내부에 존재하므로, 프리모관 내의 프리모액과 유사한 조성을 갖는 배양액에서 산알이 배양될 수 있을 것이다. 프리모액의 아미노산과 당의 조성을 확인하기 위해, 쥐(rat) 내장의 표면에 분포된 프리모관 및 프리모 노드를 채집하였다.
실험용 쥐는 23℃의 온도와 60% 상대 습도를 일정하게 조절되는 항온 항습실에 갇히게 한 상태로 밝음과 어둠을 12시간씩 주기적으로 반복되도록 빛을 조사하였다. 실험 동물은 어떤 구속 없이 자유로 물과 먹이를 먹도록 하였고, 사육에 최적인 상태로 1996년에 제정된 서울대학교 실험동물 윤리규정을 따랐다. 해부 실험에 사용된 쥐들은 우레탄 1.5 g/㎏을 복막에 주사하여 마취시켰다. 모든 해부과정들은 일반적인 마취 환경 내에서 이루어졌다. 깊은 마취 상태에서 쥐의 복부를 절개하고, 해부 수술 중 건조함을 방지하기 위해 수시로 PBS(Phosphate Buffered Saline, pH 7.4, Invitrogen, USA)를 쥐의 장기에 뿌렸다. 쥐의 대장의 표면에 흰색 줄기를 이루는 프리모관 및 프리모 노드를 수득하였다.
수득된 프리모관과 프리모 노드에 0.5 ㎖의 PBS를 첨가하고, 1 ㎖ 주사기(Kovax-Syringe, Korea Vaccine Co., LTD)를 사용하여 잘랐다. 자른 프리모관과 프리모 노드를 25 ℃에서 10 분 동안 볼텍싱하고, 4 ℃에서 30 분 동안 20,000 x g의 속도로 원심분리하고 상층액을 수득하였다. 수득된 상층액을 아크로디스크 시린지 필터(Life Sciences, 0.2 ㎛ Supor Membrane)를 사용하여 여과시켜 프리모액을 수득하였다.
1.2.
프리모액
중 아미노산의 성분 분석
프리모액 중 아미노산의 조성을 하기의 방법으로 분석하였다.
구체적으로, 실시예 1.1에서 수득된 용액을 고속 액체 크로마토그래프 4 (Ultimate3000, Thermo dionex, USA)를 이용하여 고속 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography; HPLC) 및 나노 액체 크로마토그래피(liquid chromatography; LC) 방법으로 분석하였다. 고압의 펌프를 사용하여 시료를 빠른 유속으로 칼럼을 통과시켜, 시료를 칼럼 내의 비드와 시료의 물질들과의 친화도 차이에 따라 분리시켰다. 분리된 시료 중 아미노산들을 각각 적합한 검출기를 이용하여 검출하였다.
프리모액 중의 아미노산의 농도를 측정하고, 그 결과를 도 2a에 나타내었다. 또한, 프리모액과 MEM(Minimum Essential Media) 배지 중 아미노산의 조성 및 농도를 비교한 결과를 도 2b에 나타내었다(빗금친 막대: 프리모액, 흰 막대: MEM 배지).
또한, 프리모관과 프리모 노드의 세포질에 포함된 아미노산을 고속 액체 크로마토그래프 4(Ultimate3000, Thermo dionex, USA)를 이용하여 HPLC 및 나노 LC로 분석하고, 프리모액과 프리모관과 프리모 노드의 세포질의 아미노산의 조성과 비교한 결과를 도 2c에 나타내었다(빗금친 막대: 프리모액, 흰 막대: 프리모액과 프리모관과 프리모 노드의 세포질).
프리모액, 체액(interstitial fluid), 림프액(lymphatic fluid), 및 혈장 중 아미노산의 조성 및 농도를 비교한 결과를 하기 표 1에 나타내었다.
도 2a 및 도 2b에 나타난 바와 같이, 프리모액의 아미노산 조성은 MEM 배지의 아미노산 조성과 가장 유사하였다. 또한, 도 2c에 나타난 바와 같이, 프리모 관과 프리모 노드의 세포기질 속에 포함된 아미노산의 농도는 프리모 액에 비하여 상당히 적은 것으로 나타났지만 조성은 동일한 것으로 확인되었다. 아울러, 표 1에 나타난 바와 같이, 프리모액, 체액, 림프액, 및 혈장을 비교한 결과, 프리모액에는 리신과 타우린의 함량이 비교적 높았다.
1.3.
프리모액
중 히알루론산의 분석
프리모액 중 히알루론산의 농도를 하기의 방법으로 분석하였다.
구체적으로, 실시예 1.1에서 수득된 용액을 Quantikine ELISA Kit (Hyaluronan Immunoassay, Catalog Number DHYAL0)를 사용하여 반응시켰고 마이크로 플레이트 리더(Thermo Labsystems, Multiskan EX)를 사용하여 히알루론산의 농도를 측정하였다. 측정된 히알루론산의 농도를 도 3에 나타내었다.
도 3에 나타난 바와 같이, 프리모액 중 히알루론산의 농도는 약 2.5 mg/L임을 확인하였다.
1.4.
프리모액
중 아드레날린 및 노르아드레날린의 분석
프리모액 중 아드레날린 및 노르아드레날린의 농도를 하기의 방법으로 분석하였다.
구체적으로, 실시예 1.1에서 수득된 용액, 소변, 혈장, 및 림프액을 Epinephrine/Norepinephrine ELISA Kit (Abnova, Catalog Number KA1877)를 사용하여 반응시켰고 마이크로 플레이트 리더(Thermo Labsystems, Multiskan EX)를 사용하여 아드레날린 및 노르아드레날린의 농도를 측정하였다. 측정된 아드레날린 및 노르아드레날린의 농도를 각각 도 4 및 도 5에 나타내었다.
도 4에 나타난 바와 같이, 프리모액 중 아드레날린의 농도는 약 78 ng/㎖였다. 프리모액 중 아드레날린의 농도는 소변 및 혈장 중 아드레날린의 농도에 비해 약 15배 이상 높고, 림프액 중 아드레날린의 농도에 비해 약 4배 이상 높았다.
도 5에 나타난 바와 같이, 프리모액 중 노르아드레날린의 농도는 약 138 ng/㎖였다. 프리모액 중 노르아드레날린의 농도는 소변 중 노르아드레날린의 농도에 비해 약 13배 이상 높고, 혈장 중 노르아드레날린의 농도에 비해 약 6.5배 이상 높고 림프액 중 노르아드레날린의 농도에 비해 약 4배 이상 높았다.
따라서, 프리모액 중 아드레날린 및 노르아드레날린의 농도는 소변, 혈장, 및 림프액에 비해 현저히 높은 것으로 확인되었다.
1.5.
프리모액
중 환원당의 분석
프리모액 중 환원당의 아미노산의 조성을 하기의 방법으로 분석하였다.
구체적으로, 실시예 1.1에서 수득된 용액을 고속 액체 크로마토그래프 1(Ultimate3000, Thermo dionex, USA)를 사용하고 고압의 펌프를 사용하여 시료를 빠른 유속으로 칼럼을 통과시켜, 시료를 칼럼 내의 비드와 시료의 물질들과의 친화도 차이에 따라 분리시켰다.
프리모액과 림프액으로부터 측정된 환원당인 글루코오스의 농도를 도 6에 나타내었다. 도 6에 나타난 바와 같이, 프리모액의 글루코오스의 양은 약 355±93.30 ㎎/L이었고(n=3), 림프액의 글루코오스의 양은 약 119.68 ㎎/L이었다. 따라서, 프리모액 중 글루코오스의 농도가 림프액 중 글루코오스의 농도보다 약 3배 더 높았다.
Claims (15)
- 리신, 타우린, 히알루론산, 또는 이들의 조합을 포함하는 산알 배양용 조성물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 리신은 조성물 중 150 mg/L 내지 300 mg/L의 농도로 포함된 것인 산알 배양용 조성물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 타우린은 조성물 중 100 mg/L 내지 300 mg/L의 농도로 포함된 것인 산알 배양용 조성물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 히알루론산의 농도는 조성물 중 1 mg/L 내지 5 mg/L의 농도로 포함된 것인 산알 배양용 조성물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 조성물은 히드록시프롤린, 아드레날린, 노르아드레날린, 환원당, 또는 이들의 조합을 더 포함하는 것인 산알 배양용 조성물.
- 청구항 5에 있어서, 상기 히드록시프롤린의 농도는 조성물 중 1 mg/L 내지 10 mg/L의 농도로 포함된 것인 산알 배양용 조성물.
- 청구항 5에 있어서, 상기 아드레날린의 농도는 조성물 중 50 ng/㎖ 내지 100 ng/㎖의 농도로 포함된 것인 산알 배양용 조성물.
- 청구항 5에 있어서, 상기 노르아드레날린의 농도는 조성물 중 100 ng/㎖ 내지 200 ng/㎖의 농도로 포함된 것인 산알 배양용 조성물.
- 청구항 5에 있어서, 상기 환원당은 글루코오스인 것인 산알 배양용 조성물.
- 청구항 5에 있어서, 상기 환원당은 조성물 중 100 mg/L 내지 600 mg/L의 농도로 포함된 것인 산알 배양용 조성물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 조성물은 최소 배지를 더 포함하는 것인 산알 배양용 조성물.
- 청구항 11에 있어서, 상기 최소 배지는 MEM(Minimum Essential Media) 배지인 것인 산알 배양용 조성물.
- 리신, 타우린, 히알루론산, 또는 이들의 조합을 포함하는 산알 배양용 조성물의 존재 하에서 산알을 배양하는 단계를 포함하는 산알 배양 방법.
- 청구항 13에 있어서, 상기 산알 배양용 조성물은 히드록시프롤린, 아드레날린, 노르아드레날린, 환원당, 또는 이들의 조합을 더 포함하는 것인 산알 배양 방법.
- 청구항 13에 있어서, 상기 산알 배양용 조성물은 최소 배지를 더 포함하는 것인 산알 배양 방법.
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| KR100517817B1 (ko) | 2003-11-21 | 2005-09-28 | 김종흥 | 동물 및 사람 체외수정란의 배양배지용 ｓｗ 배양액 및 이를 이용한 수정란의 배양방법 |
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|---|---|---|---|---|
| KR20190067361A (ko) * | 2017-12-07 | 2019-06-17 | 상지대학교산학협력단 | 타켓 유전자, 타켓 유전자 관련 단백질 및 프리모관에서 발현되는 타켓 유전자를 확인하는 방법 |
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