KR20160012992A

KR20160012992A - 소도 신생 펩티드 및 이의 유사체를 사용하는 조성물 및 방법

Info

Publication number: KR20160012992A
Application number: KR1020157029362A
Authority: KR
Inventors: 리핑 류; 루 바이
Original assignee: 센젠 하이타이드 바이오파마슈티컬 리미티드
Priority date: 2013-03-15
Filing date: 2014-03-14
Publication date: 2016-02-03
Also published as: RU2015143655A3; BR112015022469A2; US20160039877A1; US9738695B2; EP3473642A2; JP7075918B2; AU2018241212B2; RU2015143655A; NZ711958A; AU2014231444A1; AU2020280993A1; EP3473642A3; CA2906240A1; RU2685958C2; US20180009861A1; JP2016512205A; AU2018241212A1; US9388215B2; US20200347106A1; US20220348618A1

Abstract

본 발명은 펩티드, 및 INGAP 및 HIP 펩티드의 유사체에 관한 것이다. 펩티드 및 유사체는 다양한 질병 및 증상을 치료하기 위한 방법에서 사용될 수 있다. 이러한 질병 및 증상은 손상된 췌장 기능, 대사성 질병, 예를 들면, 당뇨병, 유형 1 및 유형 2 당뇨병 둘 다의 치료, 이식을 위한 소도 유도, 팽창 및 증식, 신경보호 또는 신경 재생의 촉진, 간 재생의 촉진, 또는 염증 저해를 포함할 수 있다.

Description

소도 신생 펩티드 및 이의 유사체를 사용하는 조성물 및 방법{COMPOSITIONS AND METHODS OF USING ISLET NEOGENESIS PEPTIDES AND ANALOGS THEREOF}

본 발명은 일반적으로 의학 및 약학 분야에 관한 것이고, 더욱 구체적으로 당뇨병 및 기타 질병을 치료하기 위한 펩티드 치료법에 관한 것이다.

진성 당뇨병(DM: diebetes mellitus)으로 인해 전 세계적으로 3억명 이상의 사람들이 고통받는다. DM의 2가지 주요 유형이 존재한다: 유형 1 DM(T1D) 및 유형 2 DM(T2D). T1D는 인슐린을 생산하는 신체의 결함으로부터 일어나고 환자는 매일 인슐린을 투여해야만 한다. T2D는 세포가 인슐린을 적절히 사용하지 못하는 증상인 인슐린 저항성으로 인해 발생된다. T2D에 대하여 많은 승인된 비-인슐린 치료법이 존재한다. 그러나, 대다수의 후기 단계 T2D 환자들은 질병이 진행됨에 따라 β-세포 기능의 손실로 인하여 인슐린 투여가 요구된다.

당뇨병의 진행은 췌장 소도 질량의 상당한 손실과 연관된다. 진단시에, 90% 이상의 소도 질량이 T1D 환자에서 손실되었고, 대략 50%가 T2D 환자에서 손실되었다. T1D 및 T2D 둘 다를 위한 최적의 치료로서 고려되는 소도 신생을 위한 강력한 자극제를 찾기 위해 많은 시도들이 있었다.

최근에, 연구자들은 햄스터로부터의 소도 신생-연관된 단백질(INGAP: islet neogenesis-associated protein), 인간 전구소도 펩티드(HIP: human proIslet peptide), 글루카곤 유사 펩티드-1(GLP-1), 소도 내분비 신경펩티드 혈관작용 장 펩티드(VIP: vasoactive intestinal peptide), 상피 성장 인자 및 가스트린(gastrin), 및 기타 물질이 췌장의 비-내분비 부분에 위치된 췌장의 간세포(progenitor cell)를 유도하여 다양한 동물 모델에서 완전한 기능성 소도로 분화시킬 수 있음을 보여주었다. 이러한 화합물들중, INGAP 펩티드(INGAP-PP), 즉 INGAP의 서열로부터 아미노산 104 내지 118에서 유래된 15량체 펩티드는 다수의 동물 모델에서 소도 신생을 유도하고, 마우스에서 스트렙토조토신(STZ: streptozotocin) 유도된 당뇨병을 역전시키며, T1D 환자에서 C-펩티드 분비를 증가시키고, T2D 환자에서 혈당 조절을 개선시키는 것으로 제시되었다. INGAP-PP의 추가적인 생물학적 효과가 보고되었고, β-세포 집단의 팽창, β-세포 복제, 감소된 β-세포 아폽토시스(apoptosis), 및 증가된 인슐린 분비에 대한 용량 의존적 자극이 포함된다. 인간 연구에서, 글루코스 항상성이 개선되는 효과가 있었고, 이는T2D를 앓는 환자에서 90일째 HbAlc의 감소, 및 T1D을 앓는 환자에서 C-펩티드 분비의 유의적 증가에 의해 확인되었다. 그러나, INGAP-PP의 짧은 혈장 반감기 및 고 용량으로 투여할 필요성이 이러한 펩티드의 임상적 적용을 상당히 제한하였다.

인간의 재생 소도-유래된 3 알파(REG3A) 유전자의 일부에 의해 인코딩된 생물활성 펩티드인 HIP는 INGAP 펩티드의 인간 동족체이다. 이전의 연구는 인간 췌장관 조직을 HIP로 치료하면 인슐린 생산을 자극함을 제시하였다. HIP의 투여는 당뇨병 마우스에서 혈당 조절을 개선시키고 소도 수를 증가시켰다. HIP의 안정화된 형태는 단일 증진 용량 임상 실험에서 내인성, 안전성 및 약물동력학을 탐구할 목적으로 시험되었다. INGAP-PP와 유사하게, 고 용량이 HIP에 대해 요구되었고, 따라서 모 HIP 펩티드의 임상적 적용이 크게 제한된다.

이와 같이, 당뇨병 또는 손상된 췌장 기능과 연관된 다른 질병을 치료하기 위한 추가적인 약물을 개발해야 할 필요가 있다. 본 발명은 이러한 요구를 다루고, 또한 관련된 이점을 제공한다.

본 발명은 펩티드, 및 INGAP 및 HIP 펩티드의 유사체를 제공한다. 펩티드 및 유사체는 손상된 췌장 기능과 연관된 다양한 질병 및 증상을 치료하고, 당뇨병(유형 1 및 유형 2 당뇨병 둘다), 전당뇨병, 및 대사성 증후군을 비롯한 대사성 질병을 치료하기 위해 사용될 수 있다. 펩티드 및 유사체는 또한 이식을 위한 소도의 유도, 확장 및 증식, 신경보호 촉진, 신경 재생 촉진, 간 재생 촉진 및 염증 저해를 위해 사용될 수 있다.

도 1은 100 nM의 INGAP 스크램블드(Scrambled) PP 1(펩티드 3), INGAP-PP(펩티드 1), 및 선택된 펩티드 유사체, 펩티드 7(표 2 참조)의 존재하에서의 ARIP 세포(래트 췌장관 세포주) 증식의 비교를 보여준다.
도 2는 INGAP-PP(펩티드 1) 및 선택된 펩티드 유사체, 펩티드 7 및 펩티드 8(표 2 참조)의 배양 배지에서의 안정성 비교를 보여준다.
도 3은 INGAP-PP(펩티드 1) 및 선택된 펩티드 유사체, 펩티드 12, 펩티드 16 및 펩티드 29(표 2 참조)의 마우스 혈장에서의 안정성 비교를 보여준다.
도 4는 INGAP-PP(펩티드 1) 및 선택된 펩티드 유사체, 펩티드 12 및 펩티드 16(표 2 참조)의 인간 혈장에서의 안정성 비교를 보여준다.
도 5는 HIP(펩티드 2) 및 선택된 펩티드 유사체, 펩티드 52 및 펩티드 54(표 3 참조)의 마우스 혈장에서의 안정성 비교를 보여준다.
도 6a 내지 6c는 STZ 유도된 당뇨병 마우스 모델에서의 INGAP-PP(펩티드 1), INGAP 스크램블드 PP 1(펩티드 3) 및 선택된 펩티드 유사체, 펩티드 7(표 2 참조)의 효능 비교를 보여준다. 도 6a: 치료 21 일 후 혈당(BG: blood glucose); 도 6b: 치료 21 일 후 공복 인슐린 수준; 도 6c: 치료 21 일 후 글루코스 경구 부하 시험(OGTT: oral glucose tolerance test)에서 측정된 글루코스의 곡선하 면적(AUC: area under curve).
도 7은 고유 및 펩티드 3, 펩티드 1 또는 펩티드 7로 치료된 동물의 경우 동일한 무작위 선택된 영역(n≥7)에 대한 면적 범위[임의적인 형태분류측정(morphometric) 단위]에 의해 한정된 소도의 수를 보여준다.
도 8은 선택된 펩티드(10 μg/㎖), 펩티드 12, 펩티드 16 및 펩티드 1(표 2 참조)의 공동-항온처리의 존재 또는 부재하의 소도의 글루코스-자극된 인슐린 분비의 증가를 보여준다. 100 nM 글루카곤 유사 펩티드-1(GLP-1)과의 공동-항온처리는 양성 대조군으로서 포함되었다.
도 9a 내지 9c는 INGAP-PP 또는 INGAP-PP 유사체의 투여에 대한 생물학적 효과를 보여준다. 도 9a는 치료 10 일 후 암컷 C57BL/6J 마우스에서의 여분의 소도 군집(EIC: extra islet cluster)의 수를 보여준다. 도 9b는 치료 10 일 후 암컷 C57BL/6J 마우스에서의 EIC의 총 면적을 보여준다. 도 9c는 INGAP-PP 펩티드 또는 INGAP-PP 유사체를 투여한 후 췌장에서의 대표적인 관 연관된 EIC를 보여준다.
도 10은 췌장 소도 크기 분포에 의해 반영되는 바와 같이 소도 신생에 미치는 INGAP-PP 펩티드 및 INGAP-PP 유사체의 효과를 보여준다.
도 11은 배양 배지에서의 INGAP-PP 및 INGAP-PP 유사체의 안정성을 보여준다.
도 12는 래트 혈장에서의 INGAP-PP 및 INGAP-PP 유사체의 안정성을 보여준다.
도 13은 래트 혈장에서의 HIP 및 HIP 유사체의 안정성을 보여준다.
도 14는 마우스 혈장에서의 INGAP-PP 및 INGAP-PP 유사체의 안정성을 보여준다.
도 15는 인간 혈장에서의 INGAP-PP 및 INGAP-PP 유사체의 안정성을 보여준다.
도 16은 플루로닉(Pluronic) F127이 함유된 하이드로겔의 대표적인 시험관내 INGAP-PP(펩티드 1) 방출 곡선을 보여준다.
도 17은 제파민(Jeffamine) ED-2003이 함유된 하이드로겔의 대표적인 시험관내 INGAP-PP(펩티드 1) 방출 곡선을 보여준다.
도 18은 SABER 겔 시스템의 대표적인 시험관내 INGAP-PP(펩티드 1) 방출 곡선을 보여준다.

본 발명은 다양한 질병 및 증상, 특별하게는 당뇨병과 관련된 질병 및 증상을 치료하기 위해 유용한 특성을 나타내는 화합물, 특별히 펩티드 및 펩티드 유사체를 제공한다. 본 발명의 펩티드 및 유사체는 손상된 췌장 기능의 치료, 대사성 질병의 치료, 생체외 소도 유도, 이식을 위한 확장 및 증식, 생체내 이식된 소도의 생존 증가, 신경보호 또는 신경 재생의 촉진, 간 재생의 촉진, 및 염증 저해에 추가적으로 유용하다.

본원에 개시된 바와 같이, 본 발명은 야생형 펩티드(표 2 및 3 참조)와 필적할만하거나 이에 비해 개선된 안정성 및 활성을 갖는 일련의 INGAP-PP 및 HIP 유사체를 제공한다. 이들 펩티드 유사체의 개선된 약학 특성은 이들이 특별하게는 임상적 개발에 적합하도록 만든다. 본 발명은 또한 본 발명에 따른 화합물을 포함하는 약학 조성물, 및 대사성 질병, 예컨대 제한되지 않지만 유형 1 당뇨병(TID) 및 유형 2 당뇨병(T2D)을 치료하기 위한 약제의 제조에 있어서, 본 발명에 따른 화합물의 용도를 제공한다. 본 발명은 추가로 지효성 방출 제형을 비롯한 적합한 제형으로 본 발명의 조성물을 제공한다.

이전에 기재된 바와 같이, 췌장 소도 신생을 촉진시키는 햄스터 단백질이 확인되었고 소도 신생 연관된 단백질(INGAP)로 지칭되었다(미국 특허 제5,834,590호 참조). 본원에 INGAP-PP로 지칭된 INGAP의 펜타데카펩티드 단편이 기재되었고, 마우스 모델에서 당뇨병을 역전시키는 것으로 제시되었다[로젠버그(Rosenberg) 등의 문헌 "Ann. Surg. 240:875-884 (2004)"; 미국 특허출원공개 제2006/0009516호; 또한 미국 특허출원공개 제2008/0171704호 참조; 카푸르(Kapur) 등의 문헌 "Islets 4: 1-9 (2012)"; 창(Chang) 등의 문헌 "Mol. Cell. Endocrinol. 335: 104-109 (2011)"; 보렐리(Borelli) 등의 문헌 "Regulatory Peptide 131:97-102 (2005)"; 던간(Dungan) 등의 문헌 "Diabetes/Metabolism Res. Rev. 25:558-565 (2009)"; 자(Zha) 등의 문헌 "J. Endocrinol. Invest. 35:634-639 (2012)"; 왕(Wang) 등의 문헌 "J. Cell. Physiol. 224:501-508 (2010)"; 페트로파블로브스카야(Petropavlovskaia) 등의 문헌 "J. Endocrinol. 191 :65-81 (2006)"; 테일러-피쉬위크(Taylor-Fishwick) 등의 문헌 "Pancreas 39:64-70 (2010)"; 로젠버그(Rosenberg)의 문헌 "Diabetologia 39:256-262 (1996)"; 마드리드(Madrid) 등의 문헌 "Regulatory Peptides 157:25-31 (2009)"; 및 테일러-피쉬위크 등의 문헌 "J. Endocrinol. 190:729-737 (2006)" 참조]. 인간 전구 소도 펩티드(HIP)로 지칭되는 인간 펩티드가 또한 기재되었다[레베탄(Levetan) 등의 문헌 "Endocrin. Pract. 14: 1075-1083 (2008)"; 미국 특허출원공개 제2011/0280833호]. 본 발명은 INGAP-PP 및 HIP 펩티드의 유사체를 제공하고, 예컨대 제한되지 않지만 표 2 및 3에 열거된 것들, 또는 모 INGAP-PP 또는 HIP 펩티드가 아닌 본원에 개시된 다른 화합물, 예컨대 본원에 개시된 화학식이 포함된다. 본 발명의 펩티드 및 유사체는 모 INGAP-PP 또는 HIP 펩티드에 비해 우수한 예상외의 유리한 특성을 나타낸다.

본원에 사용될 경우, 용어 "펩티드"는 2개 이상의 아미노산의 중합체를 지칭한다. 펩티드는, 펩티드가 적어도 2개의 아미노산의 중합체를 포함하는 한, 유사체, 유도체, 기능성 모방체, 의사펩티드 등을 포함하는 것으로 수정될 수 있다. 용어 "펩티드"의 의미는 당분야의 숙련가에게 공지되어 있다. 일반적으로, 펩티드는 1개의 아미노산 잔기의 카복실 기 및 인접한 아미노산 잔기의 아미노 기 사이의 아미드 결합에 의해 연결된 2개 이상의 아미노산을 포함한다. 본원에 기재된 바와 같이, 펩티드는 천연적으로 발생되는 아미노산 또는 비-천연적으로 발생되는 아미노산을 포함할 수 있다.

본원에 사용될 경우, 용어 "유사체"는 모 분자, 예를 들면, 모 펩티드의 변형체를 지칭한다. 예를 들면, 모 펩티드의 유사체는 하나 이상의 아미노산이 모 펩티드에 대하여 치환되는 변형체를 포함할 수 있다. 유사체는 또한 모 펩티드의 개질을 포함할 수 있고, 예컨대 제한되지 않지만, 비-천연적으로 발생되는 아미노산, D 아미노산, 개질된 아미노- 및/또는 카복시-말단(N- 또는 C-말단) 아미노산, 특별히 N-말단 상의 아미노 기의 개질 및/또는 C-말단에서의 카복실 기의 개질, 지방산 개질, 에스테르화, 펩티도미메틱(peptidomimetic), 의사펩티드 등이 본원에 개시된 바와 같이 포함된다. 예시적인 개질은 아래에 더욱 상세히 기재된다.

본원에 사용될 경우, "손상된 췌장 기능"이라는 구절은 췌장과 연관된 질병 또는 증상을 지칭하고, 여기서 췌장은 정상적이거나 건강한 개별체의 췌장과 비교하여 감소된 기능을 나타낸다. 손상된 췌장 기능과 연관된 예시적인 질병 또는 증상으로는, 제한되지 않지만, 유형 1 당뇨병, 유형 2 당뇨병, 성인의 지연형 자가면역 당뇨병(LADA: latent autoimmune diabetes in adults), 공복 혈당 장애, 내당능 장애, 인슐린 결핍, 공복 과인슐린혈증, 인슐린 저항성, 공복 인슐린 수준 장애, 부상 또는 염증에 기인한 부분적 췌장절개술, 또는 이들의 조합이 포함된다. 이러한 질병 및 증상은 아래에 더욱 상세히 논의된다.

본원에 기재된 바와 같이, 본 발명은 INGAP-PP 및 HIP 펩티드의 펩티드 유사체를 제공한다. 표 1은 INGAP-PP 및 HIP 펩티드의 서열, 뿐만 아니라 본원에 기재된 실험에서 음성 대조군으로서 사용되거나 INGAP-PP, HIP 또는 본 발명의 펩티드 유사체에 의한 비교 연구에서 음성 대조군으로서 사용될 수 있는 펩티드의 다양한 스크램블드 형태를 제시한다.

[표 1]

INGAP-PP 및 HIP 펩티드 및 대조 스크램블드 펩티드

본원에 기재된 바와 같이, INGAP-PP의 다양한 유사체는 본 발명의 펩티드 또는 유사체로서 제공된다. 본 발명의 예시적인 INGAP-PP 펩티드 유사체는 표 2에 제공된다.

[표 2]

예시적인 INGAP-PP 유사체

본원에 기재된 바와 같이, HIP의 다양한 유사체는 본 발명의 펩티드 또는 유사체로서 제공된다. 본 발명의 예시적인 HIP 펩티드 유사체는 표 3에 제공된다.

[표 3]

예시적인 HIP 유사체

본 발명은 INGAP-PP의 유사체인 펩티드 또는 이의 유사체를 제공한다. 하나의 실시태양에서, 본 발명은 IGLHDPSHGTLPAGS(서열번호 7); 및 IGLHDPSHGTLPAG(서열번호 73)로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하는 펩티드 또는 이의 유사체를 제공한다. 예를 들면, 펩티드 또는 유사체는: IGLHDPSHGTLPAGS(서열번호 7); IGLHDPSHGTLPAG(서열번호 73); IGLHDPSHGTLPAGSK(서열번호 9); IGLHDPSHGTLP(Aib)GS(서열번호 10); IGLHDPSHGTLP(N-메틸-L-Ala)GS(서열번호 11); Ac-IGLHDPSHGTLPAGS(서열번호 12); (D-Ile)GLHDPSHGTLPAGS(서열번호 13); (L-NorVal)GLHDPSHGTLPAGS(서열번호 14); (L-NorLeu)GLHDPSHGTLPAGS(서열번호 15); IGLHDPSHGTLPAG-NH2(서열번호 28); Ac-IGLHDPSHGTLPAGS-NH2(서열번호 29); Ac-IGLHDPSHGTLPAG-NH2(서열번호 30); IGLHDPSHGTLPAGS-NH2(서열번호 41); IGLHDPSHGTLPAGSC(서열번호 42); Ac-IGLHDPSHGTLPAGSC(서열번호 43); IGLHDPSHGTLPAGSC-NH2(서열번호 44); Ac-IGLHDPSHGTLPAGSC-NH2(서열번호 45); IGLHDPSHGTLPAGC(서열번호 46); Ac-IGLHDPSHGTLPAGC(서열번호 47); IGLHDPSHGTLPAGC-NH2(서열번호 48); 및 Ac-IGLHDPSHGTLPAGC-NH2(서열번호 49)로부터 선택된 펩티드 또는 유사체를 포함할 수 있다.

본 발명의 특별한 실시태양에서, 펩티드 또는 이의 유사체는: IGLHDPSHGTLPAGS(서열번호 7); IGLHDPSHGTLPAG(서열번호 73); IGLHDPSHGTLPAGSK(서열번호 9); IGLHDPSHGTLP(Aib)GS(서열번호 10); IGLHDPSHGTLP(N-메틸-L-Ala)GS(서열번호 11); Ac-IGLHDPSHGTLPAGS(서열번호 12); (D-Ile)GLHDPSHGTLPAGS(서열번호 13); (L-NorVal)GLHDPSHGTLPAGS(서열번호 14); (L-NorLeu)GLHDPSHGTLPAGS(서열번호 15); IGLHDPSHGTLPAG-NH2(서열번호 28); Ac-IGLHDPSHGTLPAGS-NH2(서열번호 29); Ac-IGLHDPSHGTLPAG-NH2(서열번호 30); IGLHDPSHGTLPAGS-NH2(서열번호 41); IGLHDPSHGTLPAGSC(서열번호 42); Ac-IGLHDPSHGTLPAGSC(서열번호 43); IGLHDPSHGTLPAGSC-NH2(서열번호 44); Ac-IGLHDPSHGTLPAGSC-NH2(서열번호 45); IGLHDPSHGTLPAGC(서열번호 46); Ac-IGLHDPSHGTLPAGC(서열번호 47); IGLHDPSHGTLPAGC-NH2(서열번호 48); 또는 Ac-IGLHDPSHGTLPAGC-NH2(서열번호 49)로 구성될 수 있다.

본 발명의 또 다른 실시태양에서, 추가의 INGAP-PP 유사체가 제공된다. 본원에 제공된 본 발명의 한 실시태양으로는: Ac-IGLHDPSHGTLPNGS(서열번호 16); (D-Ile)GLHDPSHGTLPNGS(서열번호 17); Ac-IGLHDPSHGTLPNGS-NH2(서열번호 31); IGLHDPSHGTLPNGS-NH2(서열번호 32); IGLHDPSHGTLPNGSC(서열번호 33); Ac-IGLHDPSHGTLPNGSC(서열번호 34); IGLHDPSHGTLPNGSC-NH2(서열번호 35); Ac-IGLHDPSHGTLPNGSC-NH2(서열번호 36); IGLHDPSHGTLPNGC(서열번호 37); Ac-IGLHDPSHGTLPNGC(서열번호 38); IGLHDPSHGTLPNGC-NH2(서열번호 39); Ac-IGLHDPSHGTLPNGC-NH2(서열번호 40); IGLHDPSHGTLPNG(서열번호 74); Ac-IGLHDPSHGTLPNG(서열번호 75); IGLHDPSHGTLPNG-NH2(서열번호 76); Ac-IGLHDPSHGTLPNG-NH2(서열번호 77); H-IGLHDPSHGTLPQGS-OH(서열번호 78); H-IGLHDPSHGTLPDGS-OH(서열번호 79); H-IGLHDPSHGTLPEGS-OH(서열번호 80); H-IGLHEPSHGTLPNGS-OH(서열번호 81); H-IGLHQPSHGTLPNGS-OH(서열번호 82); H-IGLHNPSHGTLPNGS-OH(서열번호 83); H-IGLHEPSHGTLPAGS-OH(서열번호 84); H-IGLHQPSHGTLPAGS-OH(서열번호 85); H-IGLHNPSHGTLPAGS-OH(서열번호 86); H-IGLHDPSHGTLPQGSC-OH(서열번호 87); H-IGLHDPSHGTLPDGSC-OH(서열번호 88); H-IGLHDPSHGTLPEGSC-OH(서열번호 89); H-IGLHEPSHGTLPNGSC-OH(서열번호 90); H-IGLHQPSHGTLPNGSC-OH(서열번호 91); H-IGLHNPSHGTLPNGSC-OH(서열번호 92); H-IGLHDPSHGTLPQG-OH(서열번호 93); H-IGLHDPSHGTLPDG-OH(서열번호 94); H-IGLHDPSHGTLPEG-OH(서열번호 95); H-IGLHEPSHGTLPNG-OH(서열번호 96); H-IGLHQPSHGTLPNG-OH(서열번호 97); H-IGLHNPSHGTLPNG-OH(서열번호 98); H-IGLHEPSHGTLPAG-OH(서열번호 99); H-IGLHQPSHGTLPAG-OH(서열번호 100); H-IGLHNPSHGTLPAG-OH(서열번호 101); H-IGLHDPSHGTLPQGE-OH(서열번호 102); H-IGLHDPSHGTLPDGE-OH(서열번호 103); H-IGLHDPSHGTLPEGE-OH(서열번호 104); H-IGLHEPSHGTLPNGE-OH(서열번호 105); H-IGLHQPSHGTLPNGE-OH(서열번호 106); H-IGLHNPSHGTLPNGE-OH(서열번호 107); H-IGLHEPSHGTLPAGE-OH(서열번호 108); H-IGLHQPSHGTLPAGE-OH(서열번호 109); 및 H-IGLHNPSHGTLPAGE-OH(서열번호 110)로 이루어진 군으로부터 선택된 펩티드 또는 유사체를 포함하는 펩티드 또는 이의 유사체가 포함된다.

본 발명의 특별한 실시태양에서, 펩티드 또는 이의 유사체는: Ac-IGLHDPSHGTLPNGS(서열번호 16); (D-Ile)GLHDPSHGTLPNGS(서열번호 17); Ac-IGLHDPSHGTLPNGS-NH2(서열번호 31); IGLHDPSHGTLPNGS-NH2(서열번호 32); IGLHDPSHGTLPNGSC(서열번호 33); Ac-IGLHDPSHGTLPNGSC(서열번호 34); IGLHDPSHGTLPNGSC-NH2(서열번호 35); Ac-IGLHDPSHGTLPNGSC-NH2(서열번호 36); IGLHDPSHGTLPNGC(서열번호 37); Ac-IGLHDPSHGTLPNGC(서열번호 38); IGLHDPSHGTLPNGC-NH2(서열번호 39); Ac-IGLHDPSHGTLPNGC-NH2(서열번호 40); IGLHDPSHGTLPNG(서열번호 74); Ac-IGLHDPSHGTLPNG(서열번호 75); IGLHDPSHGTLPNG-NH2(서열번호 76); Ac-IGLHDPSHGTLPNG-NH2(서열번호 77); H-IGLHDPSHGTLPQGS-OH(서열번호 78); H-IGLHDPSHGTLPDGS-OH(서열번호 79); H-IGLHDPSHGTLPEGS-OH(서열번호 80); H-IGLHEPSHGTLPNGS-OH(서열번호 81); H-IGLHQPSHGTLPNGS-OH(서열번호 82); H-IGLHNPSHGTLPNGS-OH(서열번호 83); H-IGLHEPSHGTLPAGS-OH(서열번호 84); H-IGLHQPSHGTLPAGS-OH(서열번호 85); H-IGLHNPSHGTLPAGS-OH(서열번호 86); H-IGLHDPSHGTLPQGSC-OH(서열번호 87); H-IGLHDPSHGTLPDGSC-OH(서열번호 88); H-IGLHDPSHGTLPEGSC-OH(서열번호 89); H-IGLHEPSHGTLPNGSC-OH(서열번호 90); H-IGLHQPSHGTLPNGSC-OH(서열번호 91); H-IGLHNPSHGTLPNGSC-OH(서열번호 92); H-IGLHDPSHGTLPQG-OH(서열번호 93); H-IGLHDPSHGTLPDG-OH(서열번호 94); H-IGLHDPSHGTLPEG-OH(서열번호 95); H-IGLHEPSHGTLPNG-OH(서열번호 96); H-IGLHQPSHGTLPNG-OH(서열번호 97); H-IGLHNPSHGTLPNG-OH(서열번호 98); H-IGLHEPSHGTLPAG-OH(서열번호 99); H-IGLHQPSHGTLPAG-OH(서열번호 100); H-IGLHNPSHGTLPAG-OH(서열번호 101); H-IGLHDPSHGTLPQGE-OH(서열번호 102); H-IGLHDPSHGTLPDGE-OH(서열번호 103); H-IGLHDPSHGTLPEGE-OH(서열번호 104); H-IGLHEPSHGTLPNGE-OH(서열번호 105); H-IGLHQPSHGTLPNGE-OH(서열번호 106); H-IGLHNPSHGTLPNGE-OH(서열번호 107); H-IGLHEPSHGTLPAGE-OH(서열번호 108); H-IGLHQPSHGTLPAGE-OH(서열번호 109); 또는 H-IGLHNPSHGTLPAGE-OH(서열번호 110)로 이루어진다.

추가의 INGAP-PP 펩티드 유사체가 본원에 제공된다. 여전히 또 다른 실시태양에서, 본 발명은: IGLHAPSHGTLPNGS(서열번호 6); IGLHAPSHGTLPAGS(서열번호 8); IGLHDPSHGTEPNGS(서열번호 18); IGLHDPSQGTLPNGS(서열번호 19); IGLHDPTHGTLPNGS(서열번호 20); IGLHDPSHGTLPNGE(서열번호 21); IGLHDPSHGTLPNGK(서열번호 22); IGLHDPSHGTLPAGK(서열번호 23); IGLHDPSHGTEPAGS(서열번호 24); IGLHDPSQGTLPAGS(서열번호 25); IGLHDPTHGTLPAGS(서열번호 26); 및 IGLHDPSHGTLPAGE(서열번호 27)로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하는 펩티드 또는 이의 유사체를 제공한다.

예를 들면, 본 발명은: IGLHAPSHGTLPNGS(서열번호 6); IGLHAPSHGTLPAGS(서열번호 8); IGLHDPSHGTEPNGS(서열번호 18); IGLHDPSQGTLPNGS(서열번호 19); IGLHDPTHGTLPNGS(서열번호 20); IGLHDPSHGTLPNGE(서열번호 21); IGLHDPSHGTLPNGK(서열번호 22); IGLHDPSHGTLPAGK(서열번호 23); IGLHDPSHGTEPAGS(서열번호 24); IGLHDPSQGTLPAGS(서열번호 25); IGLHDPTHGTLPAGS(서열번호 26); 및 IGLHDPSHGTLPAGE(서열번호 27)로 이루어진 군으로부터 선택된 펩티드 또는 유사체를 포함하는 펩티드 또는 이의 유사체를 제공한다. 또 다른 실시태양에서, 본 발명은: IGLHAPSHGTLPNGS(서열번호 6); IGLHAPSHGTLPAGS(서열번호 8); IGLHDPSHGTEPNGS(서열번호 18); IGLHDPSQGTLPNGS(서열번호 19); IGLHDPTHGTLPNGS(서열번호 20); IGLHDPSHGTLPNGE(서열번호 21); IGLHDPSHGTLPNGK(서열번호 22); IGLHDPSHGTLPAGK(서열번호 23); IGLHDPSHGTEPAGS(서열번호 24); IGLHDPSQGTLPAGS(서열번호 25); IGLHDPTHGTLPAGS(서열번호 26); 또는 IGLHDPSHGTLPAGE(서열번호 27)로 이루어진 펩티드 또는 이의 유사체를 제공한다.

본 발명은 추가적으로 HIP 유사체를 제공한다. 본 발명의 한 실시태양에서, 본 발명은 IGLHDPTQGTEPAGE(서열번호 50)의 서열을 포함하는 펩티드 또는 이의 유사체를 제공한다. 본 발명의 한 실시태양에서, 펩티드 또는 유사체는: IGLHDPTQGTEPAGE(서열번호 50); IGLHDPTQGTEP(Aib)GE(서열번호 51); Ac-IGLHDPTQGTEPAGE(서열번호 52); (D-Ile)GLHDPTQGTEPAGE(서열번호 53); Ac-IGLHDPTQGTEPAG-NH2(서열번호 60); Ac-IGLHDPTQGTEPAGE-NH2(서열번호 62); IGLHDPTQGTEPAGE-NH2(서열번호 68); IGLHDPTQGTEPAGC(서열번호 69); Ac-IGLHDPTQGTEPAGC(서열번호 70); IGLHDPTQGTEPAGC-NH2(서열번호 71); 및 Ac-IGLHDPTQGTEPAGC-NH2(서열번호 72)로부터 선택된 펩티드 또는 유사체를 포함할 수 있다. 하나의 특별한 실시태양에서, 펩티드 또는 이의 유사체는: IGLHDPTQGTEPAGE(서열번호 50); IGLHDPTQGTEP(Aib)GE(서열번호 51); Ac-IGLHDPTQGTEPAGE(서열번호 52); (D-Ile)GLHDPTQGTEPAGE(서열번호 53); 및 Ac-IGLHDPTQGTEPAG-NH2(서열번호 60); Ac-IGLHDPTQGTEPAGE-NH2(서열번호 62); IGLHDPTQGTEPAGE-NH2(서열번호 68); IGLHDPTQGTEPAGC(서열번호 69); Ac-IGLHDPTQGTEPAGC(서열번호 70); IGLHDPTQGTEPAGC-NH2(서열번호 71); 또는 Ac-IGLHDPTQGTEPAGC-NH2(서열번호 72)로 이루어진다.

또 다른 실시태양에서, 본 발명은 추가적인 HIP 펩티드 유사체를 제공한다. 예를 들면, 본 발명은: Ac-IGLHDPTQGTEPNGE(서열번호 54); (D-Ile)GLHDPTQGTEPNGE(서열번호 55); Ac-IGLHDPTQGTEPNGE-NH2(서열번호 61); IGLHDPTQGTEPNGE-NH2(서열번호 63); IGLHDPTQGTEPNGC(서열번호 64); Ac-IGLHDPTQGTEPNGC(서열번호 65); IGLHDPTQGTEPNGC-NH2(서열번호 66); 및 Ac-IGLHDPTQGTEPNGC-NH2(서열번호 67)로 이루어진 군으로부터 선택된 펩티드 또는 유사체를 포함하는 펩티드 또는 이의 유사체를 제공한다. 하나의 특별한 실시태양에서, 펩티드 또는 이의 유사체는: Ac-IGLHDPTQGTEPNGE(서열번호 54); (D-Ile)GLHDPTQGTEPNGE(서열번호 55); Ac-IGLHDPTQGTEPNGE-NH2(서열번호 61); IGLHDPTQGTEPNGE-NH2(서열번호 63); IGLHDPTQGTEPNGC(서열번호 64); Ac-IGLHDPTQGTEPNGC(서열번호 65); IGLHDPTQGTEPNGC-NH2(서열번호 66); 또는 Ac-IGLHDPTQGTEPNGC-NH2(서열번호 67)로 구성될 수 있다.

본 발명의 또 다른 실시태양에서, 펩티드 또는 이의 유사체는: IGLHDPTQGTEPNGS(서열번호 56); IGLHDPTQGTEPAGS(서열번호 57); IGLHDPTQGTLPNGE(서열번호 58); 및 IGLHDPTQGTLPAGE(서열번호 59)로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함할 수 있다. 예를 들면, 펩티드 또는 이의 유사체는: IGLHDPTQGTEPNGS(서열번호 56); IGLHDPTQGTEPAGS(서열번호 57); IGLHDPTQGTLPNGE(서열번호 58); 및 IGLHDPTQGTLPAGE(서열번호 59)로부터 선택된 펩티드 또는 유사체를 포함할 수 있다. 하나의 특별한 실시태양에서, 펩티드 또는 이의 유사체는: IGLHDPTQGTEPNGS(서열번호 56); IGLHDPTQGTEPAGS(서열번호 57); IGLHDPTQGTLPNGE(서열번호 58); 또는 IGLHDPTQGTLPAGE(서열번호 59)로 구성될 수 있다.

하나의 특별한 실시태양에서, 본 발명은 Ac-IGLHDPSHGTLPAGS(서열번호 12)를 포함하는 펩티드 또는 이의 유사체를 제공한다. 또 다른 특별한 실시태양에서, 본 발명은 Ac-IGLHDPSHGTLPAGS(서열번호 12)로 이루어진 펩티드 또는 이의 유사체를 제공한다. 여전히 추가의 실시태양에서, 본 발명은 Ac-IGLHDPSHGTLPNGS-NH2(서열번호 31)를 포함하는 펩티드 또는 이의 유사체를 제공한다. 여전히 또 다른 추가의 실시태양에서, 본 발명은 Ac-IGLHDPSHGTLPNGS-NH2(서열번호 31)로 이루어진 펩티드 또는 이의 유사체를 제공한다. 모 INGAP-PP 펩티드와 비교하여, 서열번호 12 및 서열번호 31의 펩티드는 혈장 및 배양 배지에서의 안정성이 유의적으로 개선되었고, 약물동력학적 특성이 유의적으로 개선되었으며, 글루코스 자극된 인슐린 분비에 유의적으로 더 큰 영향을 미쳤고, 소도 세포를 유의적으로 더욱 효과적으로 유도하였으며, 유의적으로 더 강한 소도 신생 효과를 나타내었다. 본원에 개시된 바와 같이, 서열번호 12 및 서열번호 31의 펩티드는 모 INGAP-PP 펩티드에 비해 더 높은 효능을 나타내었다(실시예 VIII 참조). 작은 소도 크기로의 전이는 서열번호 12 및 서열번호 31의 펩티드에 의해 모 INGAP-PP 펩티드의 1/100의 용량에서 달성되었다(실시예 IX 참조). 서열번호 12 및 서열번호 31의 펩티드는, AUC 및 C_최대값에서의 유의적인 증가에 의해서 및 모 INGAP-PP 펩티드에 비교하여 증가된 혈장 및 췌장 농도에 의해서 입증되는 바와 같이, 개선된 약물동력학적 특성을 추가적으로 나타내었다(실시예 X 참조). 서열번호 12 및 서열번호 31의 펩티드는 또한 배양 배지 및 래트, 마우스 및 햄스터 혈장에서 증가된 안정성을 나타내었다(실시예 XI 참조). 그러므로, 서열번호 12 및 서열번호 31의 펩티드는 모 INGAP-PP 펩티드에 비해 상당한 이점을 갖는다. 본 발명의 펩티드 또는 유사체는 다양한 적용분야에서, 예컨대 제한되지 않지만, 췌장 소도 세포 성장을 자극하거나, 생체외 또는 생체내에서 췌장 소도 세포의 개체군을 생산하거나, 인간에서 췌장 소도 세포의 수를 증가시키거나, 췌장 기능이 손상된 질병 또는 증상, 예컨대 진성 당뇨병을 치료하는 데에 유용하다. 더욱 구체적으로, 췌장 기능이 손상된 질병 또는 증상으로는, 제한되지 않지만, 유형 1 당뇨병, 유형 2 당뇨병, 성인의 지연형 자가면역 당뇨병(LADA), 공복 혈당 장애, 내당능 장애, 인슐린 결핍, 공복 과인슐린혈증, 인슐린 저항성, 공복 인슐린 수준 장애, 및 부상 또는 염증에 기인한 부분적 췌장절개술이 포함된다. 본 발명의 펩티드 또는 유사체는 모 INGAP-PP 펩티드에 비해 훨씬 낮은 투여량 수준으로 환자에게 투여될 수 있고, 이로써 치료 과정 동안 개선된 효능 및/또는 감소된 부작용을 초래한다. 바람직한 실시태양에서, 본 발명의 펩티드 또는 유사체는 환자에게 매번 10 mg/kg 이하, 5 mg/kg 이하, 1 mg/kg 이하, 0.5 mg/kg 이하, 또는 0.1 mg/kg 이하로 투여된다. 다른 바람직한 실시태양에서, 본 발명의 펩티드 또는 유사체는 환자에게 1 일당 0.1 내지 100 mg, 1 일당 1 내지 50 mg, 1 일당 5 내지 100 mg, 1 일당 5 내지 50 mg, 1 일당 0.1 내지 10 mg, 또는 1 일당 0.1 내지 1 mg의 용량 범위로 투여된다.

또 다른 실시태양에서, 본 발명은 다음의 화학식을 갖는 펩티드 또는 유사체를 제공한다: X¹GLHX²PX³X⁴GTX⁵PX⁶GS, 여기서 X¹은 이소류신(I), D-이소류신, L-노르발린, 또는 L-노르류신으로부터 선택되고; X²는 알라닌(A), 또는 아스파르트산(D)으로부터 선택되고; X³은 세린(S), 또는 트레오닌(T)으로부터 선택되고; X⁴는 히스티딘(H), 또는 글루타민(Q)으로부터 선택되고; X⁵는 류신(L), 또는 글루탐산(E)으로부터 선택되고; X¹이 이소류신(I)이고, X²가 아스파르트산(D)이며, X³이 세린(S)이고, X⁴가 히스티딘(H)이며, X⁵가 류신(L)인 경우, X⁶은 알라닌(A), α-아미노-이소부티르산, 또는 N-메틸-L-알라닌으로부터 선택되고; 다르게는, X⁶은 알라닌(A), 아스파라긴(N), α-아미노-이소부티르산, 또는 N-메틸-L-알라닌으로부터 선택된다. 하나의 특별한 실시태양에서, 상기 화학식의 펩티드 또는 유사체는 H-IGLH APSHGTLPNGS-OH(서열번호 6), H-IGLHDPSHGTLP(Aib)GS-OH(서열번호 10), H-IGLHDPSHGTLP(N-메틸-L-알라닌)GS-OH(서열번호 11), H-(D-이소류신)GLHDPSHGTLPNGS-OH(서열번호 17), H-IGLHDPSHGTEPNGS-OH(서열번호 18), H-IGLHDPSQGTLPNGS-OH(서열번호 19), 및 H-IGLHDPTHGTLPNGS-OH(서열번호 20)로부터 선택될 수 있다. 또 다른 특별한 실시태양에서, 상기 화학식의 펩티드 또는 유사체는 H-IGLHDPSHGTLPAGS-OH(서열번호 7), H-IGLHAPSHGTLPAGS-OH(서열번호 8), H-(D-이소류신)GLHDPSHGTLPAGS-OH(서열번호 13), H-(L-노르발린)GLHDPSHGTLPAGS-OH(서열번호 14), H-(L-노르류신)GLHDPSHGTLPAGS-OH(서열번호 15), H-IGLHDPSHGTEPAGS-OH(서열번호 24), H-IGLHDPSQGTLPAGS-OH(서열번호 25), 및 H-IGLHDPTHGTLPAGS-OH(서열번호 26)로부터 선택될 수 있다.

역시 또 다른 실시태양에서, 본 발명은 다음의 화학식을 갖는 펩티드 또는 유사체를 제공한다: R¹-IGLHDPSHGTLPNGX¹(C)_m-R², 여기서 m은 0 또는 1이고; R¹은 -H 또는 -Ac로부터 선택되고; R²는 -OH 또는-NH₂로부터 선택되고; R¹이 -H이고, R²가 -OH이며, m이 0인 경우, X¹은 글루탐산(E), 시스테인(C), 또는 라이신(K)으로부터 선택되고; 다르게는, X¹은 세린(S), 글루탐산(E), 시스테인(C), 또는 라이신(K)으로부터 선택된다. 특별한 실시태양에서, 상기 화학식의 펩티드 또는 유사체는 H-IGLHDPSHGTLPNGE-OH(서열번호 21), 및 H-IGLHDPSHGTLPNGK-OH(서열번호 22)로부터 선택될 수 있다. 또 다른 특별한 실시태양에서, 상기 화학식의 펩티드 또는 유사체는 Ac-IGLHDPSHGTLPNGS-NH₂(서열번호 31), H-IGLHDPSHGTLPNGS-NH₂(서열번호 32), 및 Ac-IGLHDPSHGTLPNGS-OH(서열번호 16)로부터 선택될 수 있다. 여전히 또 다른 특별한 실시태양에서, 상기 화학식의 펩티드 또는 유사체는 H-IGLHDPSHGTLPNGC-OH(서열번호 37), Ac-IGLHDPSHGTLPNGC-OH(서열번호 38), H-IGLHDPSHGTLPNGC-NH₂(서열번호 39), 및 Ac-IGLHDPSHGTLPNGC-NH₂(서열번호 40)로부터 선택될 수 있다. 여전히 추가의 특별한 실시태양에서, 상기 화학식의 펩티드 또는 유사체는 H-IGLHDPSHGTLPNGSC-OH(서열번호 33), Ac-IGLHDPSHGTLPNGSC-OH(서열번호 34), H-IGLHDPSHGTLPNGSC-NH₂(서열번호 35), 및 Ac-IGLHDPSHGTLPNGSC-NH₂(서열번호 36)로부터 선택될 수 있다. 역시 또 다른 특별한 실시태양에서, 상기 화학식의 펩티드 또는 유사체는 H-IGLHDPSHGTLPNG-OH(서열번호 74), Ac-IGLHDPSHGTLPNG-OH(서열번호 75), H-IGLHDPSHGTLPNG-NH₂(서열번호 76), 및 Ac-IGLHDPSHGTLPNG-NH₂(서열번호 77)로부터 선택될 수 있다.

역시 또 다른 실시태양에서, 본 발명은 다음의 화학식을 갖는 펩티드 또는 유사체를 제공한다: R¹-IGLHDPSHGTLPAG(X¹)_m-R²; 여기서 m은 0 또는 1이고; R¹은 -H 또는 -Ac로부터 선택되고; R²는 -OH 또는-NH₂로부터 선택되고; R¹이 -H이고, R²가 -OH이며, m이 1인 경우, X¹은 글루탐산(E), 시스테인(C), 또는 라이신(K)으로부터 선택되고; 다르게는, X¹은 세린(S), 글루탐산(E), 시스테인(C), 또는 라이신(K)으로부터 선택된다. 하나의 특별한 실시태양에서, 상기 화학식의 펩티드 또는 유사체는 H-IGLHDPSHGTLPAGE-OH(서열번호 27), 및 H-IGLHDPSHGTLPAGK-OH(서열번호 23)로부터 선택될 수 있다. 또 다른 특별한 실시태양에서, 상기 화학식의 펩티드 또는 유사체는 Ac-IGLHDPSHGTLPAGS-NH₂(서열번호 29), H-IGLHDPSHGTLPAGS-NH₂(서열번호 41), 및 Ac-IGLHDPSHGTLPAGS-OH(서열번호 12)로부터 선택될 수 있다. 여전히 또 다른 특별한 실시태양에서, 상기 화학식의 펩티드 또는 유사체는 H-IGLHDPSHGTLPAGC-OH(서열번호 46), Ac-IGLHDPSHGTLPAGC-OH(서열번호 47), H-IGLHDPSHGTLPAGC-NH₂(서열번호 48), 및 Ac-IGLHDPSHGTLPAGC-NH₂(서열번호 49)로부터 선택될 수 있다. 역시 또 다른 특별한 실시태양에서, 상기 화학식의 펩티드 또는 유사체는 H-IGLHDPSHGTLPAG-OH(서열번호 73), H-IGLHDPSHGTLPAG-NH₂(서열번호 28), 및 Ac-IGLHDPSHGTLPAG-NH₂(서열번호 30)로부터 선택될 수 있다.

또 다른 실시태양에서, 본 발명은 다음의 화학식을 갖는 펩티드 또는 유사체를 제공한다: R¹-IGLHDPSHGTLPAGSX²-R², 여기서 X²는 라이신(K) 또는 시스테인(C)으로부터 선택되고, R¹은 -H 또는 -Ac로부터 선택되고, R²는 -OH 또는 -NH₂로부터 선택된다. 하나의 특별한 실시태양에서, 상기 화학식의 펩티드 또는 유사체는 H-IGLHDPSHGTLPAGSK-OH(서열번호 9), H-IGLHDPSHGTLPAGSC-OH(서열번호 42), Ac-IGLHDPSHGTLPAGSC-OH(서열번호 43), H-IGLHDPSHGTLPAGSC-NH₂(서열번호 44), 및 Ac-IGLHDPSHGTLPAGSC-NH₂(서열번호 45)로부터 선택될 수 있다.

또 다른 실시태양에서, 본 발명은 다음의 화학식을 갖는 펩티드 또는 유사체를 제공한다: X¹GLHDPTQGTX²PX³GE, 여기서 X¹은 이소류신(I) 또는 D-이소류신으로부터 선택되고; X¹은 글루탐산(E) 또는 류신(L)으로부터 선택되고; X¹이 이소류신(I)이고 X²가 글루탐산(E)인 경우, X³은 알라닌(A), 또는 α-아미노-이소부티르산으로부터 선택되고; 다르게는, X³은 알라닌(A), 아스파라긴(N), 또는 α-아미노-이소부티르산으로부터 선택된다. 하나의 특별한 실시태양에서, 상기 화학식의 펩티드 또는 유사체는 H-IGLHDPTQGTEP(Aib)GE-OH(서열번호 51), H-(D-이소류신)GLHDPTQGTEPNGE-OH(서열번호 55), 및 H-IGLHDPTQGTLPNGE-OH(서열번호 58)로부터 선택될 수 있다. 또 다른 특별한 실시태양에서, 상기 화학식의 펩티드 또는 유사체는 H-IGLHDPTQGTEPAGE-OH(서열번호 50), H-(D-이소류신)GLHDPTQGTEPAGE-OH(서열번호 53), 및 H-IGLHDPTQGTLPAGE-OH(서열번호 59)로부터 선택될 수 있다.

또 다른 실시태양에서, 본 발명은 다음의 화학식을 갖는 펩티드 또는 유사체를 제공한다: R¹-IGLHDPTQGTEPNGX¹-R², 여기서 R¹은 -H 또는 -Ac로부터 선택되고; R²는 -OH 또는-NH₂로부터 선택되고; R¹이 -H이고 R²가 -OH인 경우, X¹은 세린(S), 또는 시스테인(C)으로부터 선택되고; 다르게는, X¹은 세린(S), 글루탐산(E), 또는 시스테인(C)으로부터 선택된다. 하나의 특별한 실시태양에서, 상기 화학식의 펩티드 또는 유사체는 Ac-IGLHDPTQGTEPNGE-OH(서열번호 54), Ac-IGLHDPTQGTEPNGE-NH₂(서열번호 61), 및 H-IGLHDPTQGTEPNGE-NH₂(서열번호 63)로부터 선택될 수 있다. 또 다른 특별한 실시태양에서, 상기 화학식의 펩티드 또는 유사체는 H-IGLHDPTQGTEPNGS-OH(서열번호 56), H-IGLHDPTQGTEPNGC-OH(서열번호 64), Ac-IGLHDPTQGTEPNGC-OH(서열번호 65), H-IGLHDPTQGTEPNGC-NH₂(서열번호 66), 및 Ac-IGLHDPTQGTEPNGC-NH₂(서열번호 67)로부터 선택될 수 있다.

또 다른 실시태양에서, 본 발명은 다음의 화학식을 갖는 펩티드 또는 유사체를 제공한다: R¹-IGLHDPTQGTEPAG(X¹)_n-R², 여기서 R¹은 -H 또는 -Ac로부터 선택되고; R²는 -OH 또는 -NH₂로부터 선택되고; n은 0, 또는 1이고; X¹은 세린(S), 또는 시스테인(C)으로부터 선택된다. 하나의 특별한 실시태양에서, 상기 화학식의 펩티드 또는 유사체는 H-IGLHDPTQGTEPAGS-OH(서열번호 57), Ac-IGLHDPTQGTEPAG-NH₂(서열번호 60), H-IGLHDPTQGTEPAGC-OH(서열번호 69), Ac-IGLHDPTQGTEPAGC-OH(서열번호 70), H-IGLHDPTQGTEPAGC-NH₂(서열번호 71), 및 Ac-IGLHDPTQGTEPAGC-NH₂(서열번호 72)로부터 선택될 수 있다. 또 다른 특별한 실시태양에서, 상기 화학식의 펩티드 또는 유사체는 Ac-IGLHDPTQGTEPAGE-OH(서열번호 52), Ac-IGLHDPTQGTEPAGE-NH₂(서열번호 62), 및 H-IGLHDPTQGTEPAGE-NH₂(서열번호 68)로부터 선택될 수 있다.

본원에 기재된 바와 같이, 본 발명의 펩티드 또는 유사체로는 20개의 표준의 천연적으로 발생되는 아미노산, 뿐만 아니라 다른 천연적으로 및/또는 비-천연적으로 발생되는 아미노산을 갖는 펩티드일 수 있는 INGAP-PP 및 HIP의 유사체가 포함된다. 본원에 기재된 바와 같은 펩티드는 일반적으로 종래의 명명법을 사용한다. 예를 들면, 몇몇 펩티드는 H-XXX-OH로 지정되고, 당분야의 숙련가라면 이들이 개질되지 않은 아미노-(H-) 또는 카복시-(-OH) 말단을 지정할 수 있음을 이해한다. 아미노산 서열은 또한 아미노- 또는 카복시-말단 상의 개질을 지시하지 않고 표시될 수 있다. 당분야의 숙련가라면 본원에 기재된 펩티드는, 특정한 개질이 N- 또는 C-말단 상에 지시되지 않는 한, 특정화된 아미노산 서열 또는 펩티드 유사체를 포함하는 펩티드 상에 개질되지 않거나 개질된 아미노- 및/또는 카복시-말단을 포함할 수 있음을 이해한다. 이와 같이, 지정된 아미노산 서열을 포함하는 펩티드 또는 유사체는 N- 및/또는 C-말단 상의 추가적인 아미노산 뿐만 아니라 지정된 서열의 개질된 아미노산을 포함할 수 있다. 지정된 펩티드 또는 유사체를 포함하는 펩티드 또는 유사체는, N- 및/또는 C-말단이 아미노산의 첨가를, 예를 들면 펩티드 결합을 통해 불가능하게 하는 개질을 포함하지 않는 한, 유사하게 개질된 아미노산 및/또는 추가적인 아미노산을 포함할 수 있다. 이러한 개질은, 예를 들면, 아세틸화된 N-말단 및/또는 아미드화된 C-말단을 포함한다.

본원에 기재된 바와 같이, 본 발명의 펩티드 또는 유사체는 개질을 포함할 수 있다. 당분야의 숙련가라면 다수의 개질이 펩티드 또는 유사체에 이루어질 수 있음을 이해한다. 예시적인 개질로는, 제한되지 않지만, 아세틸화된 N-말단, 아미드화된 C-말단, D 아미노산, 개질된 아미노산, 지방산 개질, 에스테르화, 또는 이들의 조합이 포함된다. 펩티드 또는 아미노산의 다수의 공지된 개질중 임의의 개질이 본 발명의 펩티드 또는 유사체에 포함될 수 있다. 예를 들면, 유도체는 폴리펩티드의 화학적 개질, 예컨대 에스테르화, 알킬화, 아실화, 카바밀화, 요오드화, 또는 폴리펩티드를 유도체화하는 임의의 개질을 포함할 수 있다. 펩티드 또는 유사체의 개질은 개질된 아미노산, 예를 들면, 하이드록시프롤린 또는 카복시글루타메이트를 포함할 수 있고, 펩티드 결합에 의해 연결되지 않는 아미노산을 포함할 수 있다.

당분야의 숙련가라면 다수의 공지된 방법중 임의의 방법이 이용되어 본 발명의 펩티드 또는 유사체를 생성할 수 있음을 이해한다[예를 들면, 문헌 "Protein Engineering: A practical approach (IRL Press 1992)"; 보단스즈키(Bodanszky)의 문헌 "Principles of Peptide Synthesis (Springer-Verlag 1984)"; 로이드-윌리암스(Lloyd-Williams) 등의 문헌 "Tetrahedron 49: 11065-11133 (1993)"; 켄트(Kent)의 문헌 "Ann. Rev. Biochem. 57:957-989 (1988)"; 메리필드(Merrifield)의 문헌 "J. Am. Chem. Soc, 85:2149-2154 (1963)"; 메리필드의 문헌 "Methods Enzymol. 289:3-13 (1997)" 참조]. 본 발명의 펩티드 또는 유사체를 생산하는 특별히 유용한 방법은 펩티드 합성의 공지된 방법을 사용하는 화학적 합성을 통한 것이다. 화학적 합성은 비-천연적으로 발생되는 아미노산, 개질된 아미노산 및/또는 개질된 N-및/또는 C-말단을 도입하기 위해 특별히 유용하다. 예를 들면, 본 발명의 펩티드 또는 유사체를 제조하기 위해 화학적 합성을 사용하는 이점은, 원할 경우, (D)-아미노산이 (L)-아미노산 대신 치환될 수 있다는 것이다. 하나 이상의 (D)-아미노산은, 예를 들면, 시험관내 또는, 특별하게는, 생체내에서 펩티드의 추가적인 안정성을 부여할 수 있는데, 이는 내생성 엔도프로테아제(endoproteases)가 일반적으로 (D)-아미노산을 함유하는 펩티드에 대해 비효과적이기 때문이다. D 아미노산을 갖는 펩티드는 또한 아미노산에 대한 상응하는 단일 문자 코드에 대한 소문자의 공지된 명명법을 사용하여 본원에서 지정될 수 있다.

원할 경우, 본 발명의 펩티드 또는 유사체에서 하나 이상의 아미노산의 반응성 측쇄 기는 개질될 수 있거나, 아미노산 유도체가 펩티드내로 혼입될 수 있다. 펩티드 또는 유사체의 반응성 기의 선택적 개질은 요망되는 특징을 펩티드 또는 유사체에 부여할 수 있다. 이러한 개질을 포함하는 선택은, 부분적으로, 펩티드에 대해 요구되는 특징에 의해 결정된다. 예를 들면, 펩티드 또는 유사체는 자유 카복실 말단을 가질 수 있거나, C-말단이 아미드화되도록 개질될 수 있다(표 2 및 3 참조). 유사하게, 펩티드 또는 유사체는 자유 아미노 말단을 가질 수 있거나, N-말단이 아세틸화되도록 개질될 수 있다(표 2 및 3). 또한, 본 발명의 펩티드 또는 유사체는 임의적으로 C-말단 상에서 아미드화되고 N-말단 상에서 아세틸화될 수 있다. 펩티드 또는 유사체의 N- 및/또는 C-말단의 다른 개질은 또한 개질의 의미 내에 포함될 수 있다.

본 발명의 펩티드 또는 유사체의 다른 개질은, 제한되지 않지만, 2-아미노아디프산(Aad); 3-아미노아디프산(bAad); 베타-알라닌, 베타-아미노프로피온산(bAla); 2-아미노부티르산(Abu); 4-아미노부티르산, 피페리딘산(4Abu); 6-아미노카프로산(Acp); 2-아미노헵탄산(Ahe); 2-아미노이소부티르산(Aib); 3-아미노이소부티르산(bAib); 2-아미노피멜산(Apm); 2,4-디아미노부티르산(Dbu); 데스모신(Des); 2,2'-디아미노피멜산(Dpm); 2,3-디아미노프로피온산(Dpr); N-에틸글리신(EtGly); N-에틸아스파라긴(EtAsn); 하이드록시라이신(Hyl); 알로-하이드록시라이신(aHyl); 3-하이드록시프롤린(3Hyp); 4-하이드록시프롤린(4Hyp); 이소데스모신(Ide); 알로-이소류신(aIle); N-메틸글리신[MeGly; 사르코신(sarcosine)]; N-메틸이소류신(MeIle); 6-N-메틸라이신(MeLys); N-메틸발린(MeVal); 노르발린(Nva); 노르류신(Nle); 및 오르니틴(Orn)을 포함한다. 모든 개질된 알파-아미노산은 상응하는 베타-, 감마- 또는 오메가-아미노산으로 치환될 수 있음을 이해한다.

본 발명의 펩티드 또는 유사체의 또 다른 개질로는 지방산 개질이 포함된다. 이와 같이, 본 발명의 펩티드 또는 유사체는 C2, C4, C6, C8, C1O, C12, C14, C16, C18, C20 또는 그 이상의 쇄 길이를 포함하는 지방족 기에 의한 아실화에 의해 개질될 수 있다. 펩티드 또는 유사체는 또한 이소프레닐화 및/또는 포스파티딜이노시톨(PI: phosphatidylinositol)에 의해 개질될 수 있다. 본 발명의 펩티드 또는 유사체의 추가적인 개질로는 에스테르화가 포함된다. 예를 들면, 카복실 기는 산 촉매화된 에스테르화 또는 알코올과의 축합에 의해 개질될 수 있다. 역으로, 알코올 기는 카복실산 또는 다른 산과의 축합에 의해 개질될 수 있다. 본 발명의 펩티드 또는 유사체의 추가적인 개질로는 환형화가 포함될 수 있다. 예를 들면, 헤드-투-테일(head-to-tail) 환형화를 통한 입체배좌적 구속을 도입함으로써 이들의 선형 대응물에 비해 펩티드 안정성을 개선하고, 그러므로 펩티드 작용의 기간을 연장시킨다. 입체배좌적 가요성을 구속함으로써, 환형 펩티드는 고유의 단백질에 제공된 바와 같은 활성 서열의 입체배좌를 더욱 가깝게 모방하는 입체배좌를 채택하는 것으로 고려된다[예를 들면, 두타(Dutta)의 문헌 "Chem. Br. 25: 159(1989)"; 코플레(Kopple)의 문헌 "J. Am. Chem. Soc. 94-973-981 (1972)"; 브루게(Brugghe) 등의 문헌 "Int. J. Peptide Protein Res. 43 : 166-170 (1994)" 참조]. 이들 및 다른 아미노산, 펩티드 또는 단백질 개질은 당분야의 숙련가에게 공지되어 있다[예를 들면, 글레이저(Glazer) 등의 문헌 "Chemical modifications of Proteins: Selected Methods andanalytical procedures, Elsevier Biomedical Press, Amsterdam (1975)" 참조]. 이러한 개질은 본 발명의 펩티드 또는 유사체에 단일 개질로서 또는 하나의 펩티드 또는 유사체 분자중의 하나 이상의 개질의 조합으로서 포함될 수 있음을 이해한다.

본 발명은 또한 펩티도미메틱으로도 지칭되는 본원에 개시된 펩티드 또는 유사체의 모방체를 포함한다. 모방체는 펩티드의 작용을 모방하는 화학 잔기를 함유하는 화학물질을 내포한다. 예를 들면, 펩티드가 작용 활성을 갖는 2개의 하전된 화학 잔기를 함유한다면, 모방체는 2개의 하전된 화학 잔기를 공간적 배향으로 위치시키고 구조을 구속하여 하전된 화학적 작용이 3차원 공간에서 유지되도록 한다. 이와 같이, 모방체는 본 발명의 펩티드 또는 유사체의 작용기를 펩티드 또는 유사체의 작용 활성이 보유되도록 배향한다.

모방체 또는 펩티도미메틱으로는 화학적으로 개질된 펩티드, 비천연적으로 발생되는 아미노산이 함유된 펩티드-유사 분자, 펩토이드(peptoid) 등이 포함될 수 있고, 펩티도미메틱이 유래되는 펩티드 또는 유사체의 작용 활성을 갖는다[예를 들면, 문헌 "Burger's Medicinal Chemistry and Drug Discovery 5th ed., vols. 1 to 3 (ed. M. E. Wolff; Wiley Interscience 1995)" 참조]. 펩티도미메틱을 식별하기 위한 방법이 당분야에 공지되어 있고, 예를 들면, 잠재적 펩티도미메틱의 라이브러리를 포함하는 데이터베이스의 스크리닝[알렌(Allen) 등의 문헌 "Acta Crystallogr. Section B, 35:2331 (1979)"] 또는 분자 모델링(modeling)의 사용[루신코(Rusinko) 등의 문헌 "J. Chem. Inf. Comput. Sci. 29:251 (1989)"]이 포함된다. 모방체 또는 펩티도미메틱은 요망되는 특성, 예컨대 더 큰 안정성을, 예를 들면, 피험체에게 투여될 경우, 예컨대 소화관을 통해 통과하는 동안 제공할 수 있고, 그러므로 경구 투여에 유용할 수 있다.

다양한 모방체 또는 펩티도미메틱이 당분야에 공지되어 있고, 예컨대, 제한되지 않지만, 구속된 아미노산을 함유하는 펩티드-유사 분자, 펩티드 2차 구조를 모방하는 비-펩티드 성분, 또는 아미드 결합 등배전자체가 포함된다. 구속된, 비-천연적으로 발생되는 아미노산을 함유하는 모방체 또는 펩티도미메틱으로는, 제한하지 않고, α-메틸화된 아미노산; α-, α-디알킬글리신 또는 α-아미노사이클로알칸 카복실산; ^Nα-^cα-환형화된 아미노산; ^Nα-메틸화된 아미노산; β- 또는 γ-아미노 사이클로알칸 카복실산; α,β-불포화된 아미노산; β,β-디메틸 또는 β-메틸 아미노산; β-치환된-2,3-메타노 아미노산; N--Cδ 또는 ^cα-^cδ 환형화된 아미노산; 치환된 프롤린 또는 또 다른 아미노산 모방체가 포함될 수 있다. 펩티드 2차 구조를 모방하는 모방체 또는 펩티도미메틱으로는, 제한하지 않고, 비펩티드성 β-턴 미믹(turn mimic); γ-턴 미믹; 또는 나선형 구조의 미믹이 포함되고, 이들 각각은 당분야에 공지되어 있다. 비-제한적인 예로서, 펩티도미메틱은 또한 등배전자체, 예컨대 레트로-리버소(retro-inverso) 개질; 환원된 아미드 결합; 메틸렌티오에테르 또는 메틸렌-설폭사이드 결합; 메틸렌 에테르 결합; 에틸렌 결합; 티오아미드 결합; 트랜스-올레핀 또는 플루오로올레핀 결합; 1,5-디치환된 테트라졸 고리; 케토메틸렌 또는 플루오로케토메틸렌 결합 또는 또 다른 아미드 등배전자체를 함유하는 펩티드-유사 분자일 수 있다. 당분야의 숙련가라면 본 발명의 펩티드 또는 유사체의 이들 및 다른 모방체 또는 펩티도미메틱이 사용될 수 있음을 이해한다.

본 발명은 또한 본 발명의 펩티드 또는 유사체의 의사펩티드 유도체를 제공한다. 의사펩티드는 펩티드에서 펩티드 결합(아미드 결합)이 아미드 결합 대용물로 개질되는 펩티드로서 당분야에 공지되어 있다[예를 들면, 쿠딕(Cudic) 및 스타위코우스키(Stawikowski)의 문헌 "Mini-Rev Organic Chem. 4:268-280 (2007)"; 앤더슨(Anderson)의 문헌 "Neuropeptide Protocols, Brent and Carvell, eds. 73 :49-60 (1996)" 참조]. 예시적인 아미드 결합 대용물로는, 제한되지 않지만, 펩티도설폰아미드, 포스포노펩티드, 뎁시드 및 뎁시펩티드, 올리고우레아, 아자펩티드 및 펩토이드[쿠딕 및 스타위코우스키의 상기 문헌(2007) 참조] 뿐만 아니라 메틸렌 아미노, 티오에테르 및 하이드록시에틸렌 유도체 등[앤더슨 등의 상기 문헌(1996)]이 포함된다.

본 발명의 펩티드 또는 유사체는 본원에 기재된 바와 같이, 펩티드 합성의 공지된 방법을 사용하는 펩티드 또는 유사체의 화학적 합성을 비롯하여, 당분야의 숙련가에게 공지된 방법을 사용하여 생산될 수 있다. 이와 같이, 펩티드 또는 유사체가 하나 이상의 비-표준 아미노산을 포함하는 경우, 이들은 화학적 합성 방법에 의해 더욱 쉽게 생산될 것이다. 펩티드 또는 유사체의 화학적 합성 방법을 사용하는 것에 추가로, 펩티드 또는 유사체는 핵산을 인코딩하여 발현시킴으로써 생산될 수 있다. 이는 특별하게는 천연적으로 발생되는 아미노산만을 포함하는 펩티드 또는 유사체의 경우에 유용하다. 이러한 경우에, 펩티드 서열을 인코딩하는 핵산은 공지된 방법을 사용하여 제조될 수 있다[샘브룩(Sambrook) 등의 문헌 "Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Third Ed., Cold Spring Harbor Laboratory, New York (2001)"]; 어수벨(Ausubel) 등의 문헌 "Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley and Sons, Baltimore, MD (1999)" 참조]. 일반적으로 이러한 핵산은 적절한 숙주 유기체, 예컨대 박테리아, 효모, 포유동물 또는 곤충 세포 등에서 재조합적으로 발현될 것이다. 박테리아에서의 생산은 특별하게는 본 발명의 펩티드 또는 유사체의 대규모 생산시에 유용할 수 있다. 펩티드는 유기체에서 발현되고 공지된 정제 기법을 사용하여 정제될 수 있다.

본 발명의 펩티드 또는 유사체를 인코딩하는 핵산 분자는 적절한 벡터, 특별하게는 발현 벡터내로 클로닝될 수 있고, 인코딩된 펩티드 또는 유사체는 숙주 세포에서 또는 시험관내 전사/번역 반응을 사용하여 발현되어, 대량의 펩티드 또는 유사체를 수득하는 수단을 제공할 수 있다. 임의적으로, 재조합 펩티드는 식별 및 정제를 돕기 위해 태그, 예컨대 His 태그와 융합물로서 생산될 수 있다. 적합한 벡터, 숙주 세포, 시험관내 전사/번역 시스템, 및 태그 서열은 당분야에 공지되어 있고 상업적으로 입수가능하다.

펩티드 또는 유사체는 단일 복사물로서 다시스트론성(polycistronic) 발현 벡터에서 발현될 수 있거나, 임의적으로 펩티드 서열의 다수의 복사물과 함께 단일 개방 판독 프레임(open reading frame)으로서 발현될 수 있다. 이러한 경우에, 펩티드는 펩티드 서열의 다수의 복사물을 함유하는 단일 개방 프레임을 발현함으로써 수득되어, 펩티드의 다수의 복사물과 함께 폴리펩티드를 발현할 수 있다. 폴리펩티드는, 예를 들면, 펩티드 복사물 사이에 적절한 단백질 가수분해성 분할 자리를 조작하고 폴리펩티드를 본 발명의 펩티드 또는 유사체로 분할함으로써, 번역후에 본 발명의 펩티드 또는 유사체로 가공될 수 있다. 이러한 재조합 방법은 일반적으로 본 발명의 펩티드 또는 유사체가 단지 천연적으로 발생되는 아미노산만을 함유하는 펩티드인 경우에 사용될 것이지만, 이러한 방법이 비-천연적으로 발생되는 아미노산을 발현하기 위해 적합하게 조작된 발현 숙주에 의해 사용될 수 있음을 또한 이해한다. 추가적으로, 재조합적으로 발현되는 펩티드 또는 유사체가 임의적으로 화학적으로 개질되어 원하는 아미노산 개질 또는 N- 및/또는 C-말단 개질을 공지된 화학 개질 방법에 의해 도입할 수 있음을 이해한다[글레이저 등의 상기 문헌(1975) 참조].

이와 같이, 본 발명은 추가적으로 본 발명의 펩티드 또는 유사체를 인코딩하는 핵산을 제공한다. 이러한 핵산으로는, 예를 들면, 서열번호 6 내지 73의 아미노산 서열중 임의의 서열을 인코딩하는 핵산이 포함된다. 이와 같이, 유사체가 표준 아미노산에 의한 단지 하나 이상의 치환을 포함하는 경우, 유사체는, 본원에 개시된 바와 같이, 공지된 방법을 사용하여 발현 벡터로부터 발현될 수 있다.

본 발명의 펩티드 또는 유사체는 본원에 개시된 바와 같은 서열, 또는 펩티드 또는 유사체를 포함할 수 있다. 아미노산 서열 또는 펩티드를 포함하는 펩티드 또는 유사체의 경우, 펩티드는 일반적으로 20개 이하의 아미노산 길이를 가질 것이다. 예를 들면, 펩티드 또는 유사체는 19개 이하의 아미노산 길이, 18개 이하의 아미노산 길이, 17개 이하의 아미노산 길이를 가질 수 있다. 이와 같이, 본 발명의 펩티드 또는 유사체는, 본원에 개시된 바와 같이, 10개 아미노산, 11개 아미노산, 12개 아미노산, 13개 아미노산, 14개 아미노산(펩티드 73, 펩티드 74 참조), 15개 아미노산, 16개 아미노산, 17개 아미노산, 18개 아미노산, 19개 아미노산, 또는 20개 아미노산의 길이를 가질 수 있다. 더 짧은 펩티드의 경우, 당분야의 숙련가라면, 예를 들면 개시된 펩티드 또는 유사체의 N-및/또는 C-말단 상의 하나 이상의 아미노산을 결실시킴으로써, 본원에 개시된 바와 같이 작용 활성, 예컨대 제한되지 않지만 본 발명의 펩티드 및 유사체의 하나 이상의 생물학적 활성을 보유하는 개시된 펩티드 또는 유사체의 단편을 더 짧은 펩티드가 포함함을 이해한다. 그럼에도 불구하고, 펩티드는 펩티드 또는 유사체의 작용 활성이 보유되는 한, 더 긴 아미노산 길이를 포함할 수 도 있다. 이와 같이, 펩티드 또는 유사체는 150개 잔기 미만, 130개 잔기 미만, 120개 잔기 미만, 110개 잔기 미만, 100개 잔기 미만, 90개 잔기 미만, 80개 잔기 미만, 70개 잔기 미만, 60개 잔기 미만, 50개 잔기 미만, 45개 잔기 미만, 40개 잔기 미만, 35개 잔기 미만, 30개 잔기 미만, 25개 잔기 미만, 24개 잔기 미만, 23개 잔기 미만, 22개 잔기 미만, 21개 잔기 미만, 20개 잔기 미만, 19개 잔기 미만, 18개 잔기 미만, 또는 17개 잔기 미만의 길이를 가질 수 있다. 당분야의 숙련가라면 본 발명의 펩티드 또는 유사체가 공지된 더 긴 서열, 예컨대 야생형 전장 단백질에서 발견되는 서열을 포함하는 경우, 본 발명의 펩티드 또는 유사체는 구체적으로 이러한 전장 서열을 배제함을 이해한다.

본 발명은 또한 당분야의 숙련가에게 공지된 약학적으로 허용가능한 염 형태로 본 발명의 펩티드 및 유사체를 제공한다. 특별히 유용한 염 형태는 아세테이트 또는 하이드로클로라이드 염 형태이다. 그럼에도 불구하고, 당분야의 숙련가라면 다수의 적합한 염 형태중 임의의 형태가 이용가능함을 이해한다. 본 발명의 펩티드 또는 유사체가 산성 또는 염기성 잔기를 함유하는 경우, 이는 약학적으로 허용가능한 염으로서 제공될 수 있다[예를 들면, 베르게(Berge) 등의 문헌 "J. Pharm. Sci. 1977, 66, 1-19"; 및 문헌 "Handbook of Pharmaceutical Salts, Properties, and Use; Stahl and Wermuth, Ed.; Wiley-VCH and VHCA: Zurich, Switzerland, 2002" 참조].

약학적으로 허용가능한 염의 제조에 사용하기에 적합한 산으로는, 제한되지 않지만, 아세트산, 2,2-디클로로아세트산, 아실화된 아미노산, 아디프산, 알긴산, 아스코르브산, L-아스파르트산, 벤젠설폰산, 벤조산, 4-아세트아미도벤조산, 붕산, (+)-캄포산, 캄포설폰산, (+)-(1S)-캄포-10-설폰산, 카프르산, 카프로산, 카프릴산, 신남산, 시트르산, 사이클람산, 사이클로헥산설팜산, 데옥시콜산, 도데실황산, 도코사헥사노산, 에이코사펜타에노산, 에탄-1,2-디설폰산, 에탄설폰산, 2-하이드록시-에탄설폰산, 폼산, 푸마르산, 갈락타르산, 겐티스산, 글루코헵톤산, D-글루콘산, D-글루쿠론산, L-글루탐산, α-옥소글루타르산, 글리콜산, 히푸르산, 브롬화수소산, 염산, 요오드화수소산, (+)-L-락트산, (±)-DL-락트산, 락토비온산, 라우르산, 말레산, (-)-L-말산, 말론산, (±)-DL-만델산, 메탄설폰산, 나프탈렌-2-설폰산, 나프탈렌-1,5-디설폰산, 1-하이드록시-2-나프토산, 니코틴산, 질산, 올레산, 오로트산, 옥살산, 팔미트산, 파모산, 과염소산, 인산, L-피로글루탐산, 당산, 살리실산, 4-아미노-살리실산, 세박산, 스테아르산, 석신산, 황산, 탄닌산, (+)-L-타르타르산, 티오시안산, p-톨루엔설폰산, 운데실렌산, 우르솔산, 및 발레르산이 포함된다.

약학적으로 허용가능한 염의 제조에 사용하기에 적합한 염기로는, 제한되지 않지만, 무기 염기, 예컨대 수산화 마그네슘, 수산화 칼슘, 수산화 칼륨, 수산화 아연, 또는 수산화 나트륨; 및 유기 염기, 예컨대 1급, 2급, 3급 및 4급 지방족 및 방향족 아민, 예로서 L-아르기닌, 베네타민, 벤자틴, 콜린, 데아놀, 디에탄올아민, 디에틸아민, 디메틸아민, 디프로필아민, 디이소프로필아민, 2-(디에틸아미노)-에탄올, 에탄올아민, 에틸아민, 에틸렌디아민, 이소프로필아민, N-메틸-글루카민, 하이드라민, 1H-이미다졸, L-라이신, 모폴린, 4-(2-하이드록시에틸)-모폴린, 메틸아민, 피페리딘, 피페라진, 프로필아민, 피롤리딘, 1-(2-하이드록시에틸)-피롤리딘, 피리딘, 퀴누클리딘, 퀴놀린, 이소퀴놀린, 2급 아민, 트리에탄올아민, 트리메틸아민, 트리에틸아민, N-메틸-D-글루카민, 2-아미노-2-(하이드록시메틸)-1,3-프로판디올, 및 트로메타민이 포함된다.

본 발명은 본 발명의 펩티드 및 유사체를 조성물로 제공한다. 예를 들면, 표 2 또는 3의 펩티드 또는 유사체, 또는 본원에 개시된 다른 펩티드 또는 유사체, 또는 본원에 개시된 화학식은, 본원에 개시된 바와 같이 조성물로 제공될 수 있다. 하나의 특별한 실시태양에서, 조성물은 서열번호 12 또는 서열번호 31의 펩티드 또는 유사체를 포함할 수 있다. 조성물은 임의적으로 약학적으로 허용가능한 담체에 의해 제형화되어 약학 조성물을 생성하고, 이는 인간 또는 다른 포유동물일 수 있는 개별체에게 투여될 수 있다. 약학적으로 허용가능한 담체는, 예를 들면, 물, 인산 나트륨 완충액, 인산염 완충된 염수, 정상 염수, 또는 링거(Ringer) 용액 또는 다른 생리학적 완충된 염수, 또는 다른 용매 또는 비히클, 예컨대 글리콜, 글리세롤, 오일, 예컨대 올리브 오일 또는 주사가능한 유기 에스테르일 수 있다.

약학적으로 허용가능한 담체는, 예를 들면, 본 발명의 펩티드 또는 유사체의 흡수를 안정화시키거나 증가시키는 작용을 하는 생리학적으로 허용가능한 화합물을 함유할 수 있다. 이러한 생리학적으로 허용가능한 화합물로는, 예를 들면, 탄수화물, 예컨대 글루코스, 수크로스 또는 덱스트란; 항산화제, 예컨대 아스코르브산 또는 글루타티온; 킬레이트화제, 예컨대 에틸렌디아민 테트라아세트산(EDTA)(이는 미생물 막을 파열시킴); 2가 금속 이온, 예컨대 칼슘 또는 마그네슘; 저 분자량의 단백질; 또는 다른 안정화제 또는 부형제가 포함된다. 당분야의 숙련가는 생리학적으로 허용가능한 화합물을 비롯하여, 약학적으로 허용가능한 담체의 선택이, 예를 들면, 조성물의 투여 경로에 좌우됨을 알 것이다. 적합한 담체 및 이들의 제형은 당분야에 공지되어 있다[예를 들면, 문헌 "Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19th ed., ed. A. R. Gennaro, Mack Publishing Company, Easton, PA (1995)"; 및 "Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th ed., Mack Publishing Company, Easton PA (1990)" 참조]. 전형적으로, 적절한 양의 약학적으로-허용가능한 염은 제형을 등장성으로 만들기 위해 제형에 사용된다. 용액의 pH는 일반적으로 약 4 내지 약 8.5, 예를 들면, 약 4 내지 약 5, 약 5 내지 약 6, 약 6 내지 약 7, 약 4.5 내지 약 8, 약 5 내지 약 8, 약 5 내지 약 7.5, 약 5.5 내지 약 8, 약 5.5 내지 약 7.5, 약 6 내지 약 8, 약 6.5 내지 약 8, 약 7 내지 약 8, 약 7.5 내지 약 8, 또는 약 7 내지 약 7.5이다.

약학 담체는 당분야의 숙련가에게 공지되어 있다. 이들은 가장 전형적으로 인간에게 약물을 투여하기 위한 표준 담체일 것이고, 상기 기재된 바와 같이, 용액, 예컨대 멸균수, 염수, 및 생리학적 pH로 완충된 용액이 포함된다. 약학 조성물은 선택 분자, 예컨대 본 발명의 펩티드 또는 유사체에 더하여, 담체, 증점제, 희석제, 완충제, 보존제, 표면 활성제 등을 포함할 수 있다. 약학 조성물은 하나 이상의 활성 구성성분, 예컨대 항미생물제, 소염제, 마취제 등을 포함할 수 있다.

추가의 담체는 지효성 또는 제어된 방출 제제, 예컨대 펩티드 또는 유사체에 공유적으로 또는 비공유적으로 결합된 고체 소수성 중합체의 반투과성 매트릭스(이러한 매트릭스는 성형된 제품, 예를 들면, 필름, 리포솜(liposome), 비-리포솜 지질 착체 또는 미립자 등의 형태임), 또는 당분야의 숙련가에게 공지된 다른 생물화합성 중합체를 포함한다(예를 들면, 미국 특허 제6,824,822호 및 제8,329,648호 참조). 인지질 또는 다른 지질로 이루어진 리포솜은 제조 및 투여가 비교적 간단한 무독성의, 생리학적으로 허용가능하고 대사가능한 담체이다[그레고리아디스(Gregoriadis)의 문헌 "Liposome Technology, Vol. 1 (CRC Press, Boca Raton Fla., 1984"]. 다양한 약물 전달 방법은 당분야의 숙련가에게 공지되어 있다[랭거(Langer)의 문헌 "Nature 392(Suppl):5-10 (1998)"; 랭거 등의 문헌 "Nature 428:487-492 (2004)"]. 특정 담체가, 예를 들어 투여 경로 및 투여되는 조성물의 농도에 따라 선택될 수 있음은 당분야의 숙련가에게 명백할 것이다.

본원에 개시된 바와 같이, 본 발명의 펩티드 또는 유사체는 지효성 또는 제어된 방출 제형으로서 제조될 수 있다. 실시예 XII에 기재된 바와 같이, 본 발명의 펩티드 또는 유사체의 긴 작용 방출 투여형의 실현가능성을 입증한 다양한 지효성 방출 조성물이 생성될 수 있다. 예시적인 제형은 생물화합성 중합체, 예컨대 제한되지 않지만, 폴리(에틸렌 글리콜)(PEG), 비이온성 계면활성제 폴리올[폴록사머(poloxamer)로도 공지됨, 이는 폴리옥시프로필렌 및 폴리옥시에틸렌(폴리(에틸렌 옥사이드))의 공중합체임], 폴리에테르아민[이는 에틸렌 옥사이드(EO), 프로필렌 산화물(PO), EO/PO 혼합물, 또는 폴리테트라메틸렌 글리콜(PTMEG)에 기초할 수 있음], 주로 PEG 주쇄에 기초한 폴리에테르 디아민 등을 함유한 중합체가 포함된다. 예시적인 폴록사머로는, 제한되지 않지만, 플루로닉(등록상표) F127, 플루로닉(등록상표) F38, 플루로닉(등록상표) F68, 플루로닉(등록상표) F87, 플루로닉(등록상표) F108, 플루로닉(등록상표) 10R5, 플루로닉(등록상표) 17R2, 플루로닉(등록상표) 17R4, 플루로닉(등록상표) 25R2, 플루로닉(등록상표) 25R4, 플루로닉(등록상표) 31R1, 플루로닉(등록상표) F 108 캐스트 솔리드 서팩타(Cast Solid Surfacta), 플루로닉(등록상표) F 108 NF, 플루로닉(등록상표) F 108 파스틸레(Pastille), 플루로닉(등록상표) F 108NF 프릴 폴록사머(Prill Poloxamer) 338, 플루로닉(등록상표) F 127 NF, 플루로닉(등록상표) F 127 NF 500 BHT 프릴, 플루로닉(등록상표) F 127 NF 프릴 폴록사머 407, 플루로닉(등록상표) F 38 파스틸레, 플루로닉(등록상표) F 68 LF 파스틸레, 플루로닉(등록상표) F 68 NF, 플루로닉(등록상표) F 68 NF 프릴 폴록사머 188, 플루로닉(등록상표) F 68 파스틸레, 플루로닉(등록상표) F 77, 플루로닉(등록상표) F 77 마이크로파스틸레(Micropastille), 플루로닉(등록상표) F 87 NF, 플루로닉(등록상표) F 87 NF 프릴 폴록사머 237, 플루로닉(등록상표) F 88, 플루로닉(등록상표) F 88 파스틸레, 플루로닉(등록상표) F 98, 플루로닉(등록상표) FT L 61, 플루로닉(등록상표) L 10, 플루로닉(등록상표) L 101, 플루로닉(등록상표) L 121, 플루로닉(등록상표) L 31, 플루로닉(등록상표) L 35, 플루로닉(등록상표) L 43, 플루로닉(등록상표) L 61, 플루로닉(등록상표) L 62, 플루로닉(등록상표) L 62 LF, 플루로닉(등록상표) L 62D, 플루로닉(등록상표) L 64, 플루로닉(등록상표) L 81, 플루로닉(등록상표) L 92, 플루로닉(등록상표) L44 NF INH 서팩턴트 폴록사머(surfactant Poloxamer) 124, 플루로닉(등록상표) N 3, 플루로닉(등록상표) P 103, 플루로닉(등록상표) P 104, 플루로닉(등록상표) P 105, 플루로닉(등록상표) P 123 서팩턴트, 플루로닉(등록상표) P 65, 플루로닉(등록상표) P 84, 플루로닉(등록상표) P 85 등이 포함된다. 예시적인 폴리에테르아민으로는, 제한되지 않지만, 제파민(등록상표) ED-2003, 제파민(등록상표) D-2000, 제파민(등록상표) D-230, 제파민(등록상표) D-400, 제파민(등록상표) EDR-176, 제파민(등록상표) SD-2001, 제파민(등록상표) T-403, 제파민(등록상표) T-5000이 포함된다. 추가적인 성분들로는, 예를 들면, 사이클로덱스트린, 예컨대 알파-, 베타- 및 감마-사이클로덱스트린이 포함될 수 있다. 당분야에 공지된 방법이 사용되어 지효성 방출 제형을 생성할 수 있다. 성분들은 원하는 농도 및 비율로, 예컨대 제한되지 않지만, 0.1% 내지 30%, 예를 들면, 0.5%(중량/중량) 내지 20%, 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 16%, 17%, 18%, 19%, 20% 등(조성물의 총 중량의 중량/중량)으로 제형화될 수 있다. 당분야에 공지된 다른 지효성 방출 펩티드 전달 시스템은, 예를 들면, 폴리(락틱-코-글리콜산)[PLGA: poly(lactic-co-glycolic acid)], 폴리락티드(PLA: polylactide), PEG/PLGA, 및 리포솜을 포함하는 나노입자 제형을 포함하고, 이는 지효성 방출 제형을 생산하기 위해 사용될 수 있다. 지효성 방출 제형은 당분야에 공지되어 있다[예를 들면, 문헌 "Remington's Phamaceutical Sciences, 18th ed., Mack Publishing Company, Easton PA (1990)" 참조]. 지효성 방출 제형은 본 발명의 펩티드 또는 유사체의 일정한 및/또는 연속적 투여량을 제공하고/하거나 반복적인 투여를 방지하기 위해 유용하다.

약학 조성물은 국소 치료가 요망되는지 또는 전신 치료가 요망되는지의 여부에 따라서, 및 치료되는 영역에 따라서 다수의 방식으로 투여될 수 있다. 다양한 투여 경로가 본 발명의 펩티드, 유사체 및 방법에 유용함을 이해한다. 이러한 경로는 전신 및 국소 투여를 내포하고, 제한하지 않고, 정맥내 주사, 복강내 주사, 근육내 주사, 피하 주사, 경피 전달, 경피 확산 또는 전기영동, 흡인성 투여, 경구 투여, 국소 주사, 공동내(intracavity), 및 국소적으로 이식된 복효성 전달 장치(extended release delivery device), 예컨대 생물침식성(bioerodible) 또는 저장소형(reservoir-based) 이식물을 비롯한 복효성 전달 장치가 포함된다. 투여는 국부적으로(눈으로, 질내로, 직장으로, 비강내로 포함), 경구적으로, 흡인에 의해, 또는 비경구적으로, 예를 들면 정맥내 드립(drip), 피하, 복강내 또는 근육내 주사일 수 있다. 지효성 방출 제형은 제자리 형성 이식물을 통해 전달될 수 있다. 더욱이, 본 발명의 펩티드 또는 유사체는 원하는 효과를 달성하기 위해 매일 단일 투여로, 다수 회 1 일 투여로, 연속적이거나 간헐적으로 지효성 방출 제형으로, 비-연속적 투여로, 비-연속적인 날짜에 간헐적으로 등등으로 투여될 수 있음을 이해한다.

비경구 투여를 위한 제제는 멸균 수용액 또는 비-수성 용액, 현탁액, 및 유화액을 포함한다. 비-수성 용매의 예는 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 식물성 오일, 예컨대 올리브유, 및 주사가능한 유기 에스테르, 예컨대 에틸 올리에이트이다. 수성 담체로는 물, 알코올성/수성 용액, 유화액 또는 현탁액, 예컨대 염수 및 완충된 매질이 포함된다. 비경구 비히클은 염화 나트륨 용액, 링거(Ringer)의 덱스트로즈, 덱스트로즈, 및 염화 나트륨, 락트산화된 링거, 또는 고정유를 포함한다. 정맥내 비히클은 유체 및 영양 보충제, 전해질 보충제(예컨대 링거의 덱스트로즈에 기초한 것들) 등을 포함한다. 보존제 및 다른 첨가제 또한 존재할 수 있고, 예를 들면, 항생제, 항산화제, 킬레이트화제, 및 불활성 기체 등이다. 인슐린은 공지된 펩티드 치료제이므로, 인슐린 전달을 위해 사용된 방법은 본 발명의 펩티드 또는 유사체를 위한 전달 방법으로서 특별히 수용가능하고, 예컨대 제한되지 않지만 주사기, 펜, 주입 펌프, 흡인기, 구강 스프레이, 환제 등이 포함된다.

본 발명의 펩티드 또는 유사체를 위한 적절한 용량에 대한 지침은 던간(Dungan) 등의 문헌[Diabetes Metab. Res. Rev., 25:558-565 (2009)]에 제공된다. 특별히, INGAP 펩티드에 의한 인간 임상 실험은 본 발명의 펩티드 또는 유사체에 적합한 가능한 용량에 대한 지표를 제공한다. 본 발명의 펩티드 또는 유사체가 모 INGAP 펩티드에 비해 개선된 효능을 나타내므로(실시예 참조), 본 발명의 펩티드 또는 유사체는 INGAP에 대해 사용되는 용량에 비해 더 낮은 효과적 용량에서 투여될 수 있다. 본 발명의 펩티드 또는 유사체에 대한 예시적인 용량은, 제한되지 않지만, 1 일당 0.01 내지 1000 mg, 예를 들면, 1 일당 0.01, 0.02, 0.03, 0.04, 0.05, 0.06, 0.07, 0.08, 0.09, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, 1, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, 300, 310, 320, 330, 340, 350, 360, 370, 380, 390, 400, 410, 420, 430, 440, 450, 460, 470, 480, 490, 500, 510, 520, 530, 540, 550, 560, 570, 580, 590, 600, 610, 620, 630, 640, 650, 660, 670, 680, 690, 700, 710, 720, 730, 740, 750, 760, 770, 780, 790, 800, 810, 820, 830, 840, 850, 860, 870, 880, 890, 900, 910, 920, 930, 940, 950, 960, 970, 980, 990 또는 1000 mg을 포함한다. 하나의 특별한 실시태양에서, 펩티드 용량은 1 일당 약 1 내지 100 mg, 예를 들면, 1 일당 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 또는 100 mg이다. 예시적인 용량 범위는, 제한되지 않지만, 0.01 내지 1000, 0.1 내지 1000, 1 내지 1000, 10 내지 1000, 100 내지 1000, 0.01 내지 500, 0.1 내지 500, 1 내지 500, 10 내지 500, 100 내지 500, 0.01 내지 400, 0.1 내지 400, 1 내지 400, 10 내지 400, 100 내지 400, 0.01 내지 300, 0.1 내지 300, 1 내지 300, 10 내지 300, 100 내지 300, 0.01 내지 200, 0.1 내지 200, 1 내지 200, 10 내지 200, 100 내지 200, 0.01 내지 100, 0.1 내지 100, 1 내지 100, 10 내지 100, 1 내지 90, 1 내지 80, 1 내지 70, 1 내지 60, 1 내지 50, 1 내지 40, 1 내지 30, 1 내지 20, 1 내지 10, 5 내지 100, 5 내지 90, 5 내지 80, 5 내지 70, 5 내지 60, 5 내지 50, 5 내지 40, 5 내지 30, 5 내지 20, 5 내지 10, 10 내지 100, 10 내지 90, 10 내지 80, 10 내지 70, 10 내지 60, 10 내지 50, 10 내지 40, 10 내지 30, 10 내지 20, 15 내지 100, 15 내지 90, 15 내지 80, 15 내지 70, 15 내지 60, 15 내지 50, 15 내지 40, 15 내지 30, 15 내지 20, 20 내지 100, 20 내지 90, 20 내지 80, 20 내지 70, 20 내지 60, 20 내지 50, 20 내지 40, 20 내지 30, 25 내지 100, 25 내지 90, 25 내지 80, 25 내지 70, 25 내지 60, 25 내지 50, 25 내지 40, 25 내지 30, 30 내지 100, 30 내지 90, 30 내지 80, 30 내지 70, 30 내지 60, 30 내지 50, 30 내지 40, 35 내지 100, 35 내지 90, 35 내지 80, 35 내지 70, 35 내지 60, 35 내지 50, 35 내지 40, 35 내지 30, 40 내지 100, 40 내지 90, 40 내지 80, 40 내지 70, 40 내지 60, 40 내지 50, 45 내지 100, 45 내지 90, 45 내지 80, 45 내지 70, 45 내지 60, 45 내지 50, 50 내지 100, 50 내지 90, 50 내지 80, 50 내지 70, 50 내지 60, 55 내지 100, 55 내지 90, 55 내지 80, 55 내지 70, 55 내지 60, 60 내지 100, 60 내지 90, 60 내지 80, 60 내지 70, 65 내지 100, 65 내지 90, 65 내지 80, 65 내지 70, 70 내지 100, 70 내지 90, 70 내지 80, 75 내지 100, 75 내지 90, 75 내지 80, 80 내지 100, 80 내지 90, 90 내지 100 등, 또는 상기 열거된 용량의 임의의 용량 증분을 포함한다. 당분야의 숙련가라면 본 발명의 펩티드 및 유사체의 용량이 일반적으로 1 일당 피험체에게 투여되는 용량으로서 제공됨을 이해한다. 추가로 당분야의 숙련가, 뿐만 아니라 당분야의 의사 또는 임상의라면 피험체의 반응성, 피험체의 체중 등에 따라 용량을 증가 또는 감소시킴으로써 용량이 조정될 수 있음을 이해한다. 표 2 또는 3의 펩티드 또는 유사체, 또는 본원에 개시된 다른 펩티드 또는 유사체 또는 본원에 개시된 화학식은, 본원에 개시된 바와 같이, 지시된 용량으로 조성물에 제공될 수 있다. 하나의 특별한 실시태양에서, 조성물은 서열번호 12 또는 서열번호 31의 펩티드 또는 유사체를 지시된 용량으로 포함할 수 있다.

본원에 기재된 바와 같이, 본 발명의 펩티드 및 유사체는 특정 질병 및 질환을 치료하는데 특별히 유용하다. 예를 들면, 본 발명의 펩티드 또는 유사체는 손상된 췌장 기능의 치료, 대사성 질병의 치료, 신경보호 또는 신경 재생의 촉진, 간 재생의 촉진, 및 염증 저해에 사용될 수 있다. 이와 같이, 본 발명은 추가적으로 손상된 췌장 기능의 치료, 대사성 질병의 치료, 신경보호 또는 신경 재생의 촉진, 간 재생의 촉진, 및 염증 저해를 위한 본 발명의 조성물을 조성물 제공한다. 이러한 조성물은 펩티드 또는 유사체, 예컨대 표 2 또는 3에 개시된 것들, 또는 본원에 개시된 다른 펩티드 또는 유사체 또는 본원에 개시된 화학식을 포함할 수 있다. 하나의 특별한 실시태양에서, 조성물은 서열번호 12 또는 서열번호 31의 펩티드 또는 유사체를 포함할 수 있다. 이러한 치료 적용분야에서 본 발명의 펩티드 및 유사체의 사용은 아래에 더욱 상세히 기재된다.

원할 경우, 본 발명의 펩티드 또는 유사체는 조합하여 투여될 수 있다. 예를 들면, 2개 이상의 본 발명의 펩티드 또는 유사체, 예컨대 본원에 개시되고 표 2 및 3에 제시된 것들, 또는 본원에 개시된 다른 펩티드 또는 유사체 또는 본원에 개시된 화학식, 예를 들면, 서열번호 12 또는 서열번호 31의 펩티드 또는 유사체의 조합물이 본원에 개시된 바와 같은 치료 방법을 위해 투여될 수있다. 이러한 조합물은, 투여되는 펩티드, 및 본 발명의 펩티드 또는 유사체를 위한 제형의 화합성에 따라서, 별도의 제형으로 또는 동일한 제형으로 조합되어 동시에 투여될 수 있다. 다르게는, 2개 이상의 본 발명의 펩티드 또는 유사체는 동일한 날짜에 또는 별도의 날짜에 시차를 두고 순차적으로 투여될 수 있다.

더욱이, 당분야의 숙련가라면 본 발명의 펩티드 및 유사체는 임의적으로 증상을 치료하기 위한 약물 또는 치료제와 함께 투여될 수 있음을 이해한다. 예를 들면, 당뇨병 또는 관련된 증상을 치료하는 경우에, 다른 항당뇨병 약물이 본 발명의 펩티드 또는 유사체와 함께 투여될 수 있다. 이러한 공동-투여는 투여되는 약물, 및 본 발명의 펩티드 또는 유사체를 위한 제형의 화합성에 따라서 별도의 제형으로 또는 동일한 제형으로 조합되어 동시에 투여될 수 있음을 이해한다. 다르게는, 공동-투여는 동일한 날짜에 또는 별도의 날짜에 시차를 두고 순차적으로 일어날 수 있다. 당분야의 숙련가라면 또 다른 약물 또는 치료제와 함께 본 발명의 펩티드 또는 유사체의 효과적인 전달에 적합한 적절한 투여 섭생을 이해할 것이다. 추가로 펩티드 또는 유사체의 투여가 간헐적일 수 있음을 이해한다.

인슐린 또는 관련된 질환을 치료하는 경우, 적합한 항당뇨성 약물로는, 제한되지 않지만, 인슐린, 프람린티드(pramlintide), GLP-1 수용체 작용물질, 경구 항당뇨병 제제 등이 포함된다. 예시적인 항당뇨병 약물로는, 제한되지 않지만, 인슐린, 메글리티니드(meglitinide), 예를 들면, 레파글리니드(repaglinide)[프란딘(Prandin: 상표명)] 및 나테글리니드(nateglinide)[스탈릭스(Starlix: 상표명)]; 설포닐우레아, 예를 들면, 글리피지드(glipizide)[글루코트롤(Glucotrol: 상표명)], 글리메피리드(glimepiride)[아마릴(Amaryl: 상표명)], 및 글리부리드(glyburide)[디아베타(DiaBeta: 상표명), 글리나제(Glynase: 상표명)]; 디펩티딜 펩티다아제-4(DPP-4) 저해제, 예를 들면, 삭사글립틴(saxagliptin)[온글라이자(Onglyza: 상표명)], 시타글립틴(sitagliptin)[자누비아(Januvia: 상표명)], 및 리나글립틴(linagliptin)[트라드젠타(Tradjenta: 상표명)]; 비구아니드(biguanide), 예를 들면, 메트포르민(metformin)[포르타메트(Fortamet: 상표명), 글루코파게(Glucophage: 상표명)]; 티아졸리딘디온, 예를 들면, 로시글리타존(rosiglitazone)[아반디아(Avandia: 상표명)] 및 피오글리타존(pioglitazone)[악토스(Actos: 상표명)]; 알파-글루코시다아제 저해제, 예를 들면, 아카르보스(acarbose)[프레코스(Precose: 상표명)] 및 미글리톨(miglitol)[글라이세트(Glyset: 상표명)]; 아밀린 모방체, 예를 들면, 프람린티드(pramlintide)[사임린(Symlin: 상표명)]; 및 인크레틴(incretin) 모방체, 예를 들면, 엑세나티드(exenatide)[바이에타(Byetta: 상표명)] 및 리라글루티드(liraglutide)[빅토자(Victoza: 상표명)]가 포함된다. 이와 같이, 당뇨병 또는 관련된 증상을 치료하기 위한 본 발명의 방법 및 용도에서, 항당뇨병 약물은 본 발명의 펩티드 또는 유사체와 함께 투여될 수 있다. 유형 2 당뇨병의 경우, 소도 신생제, 예컨대 본 발명의 펩티드 또는 유사체는 생활 방식의 개선을 통해 또는 항당뇨병 제제, 예컨대 상기 기재된 바와 같은 메트포르민, 티아졸리딘디온, GLP-1, 인슐린 등과 조합하여 양호한 수준의 당 조절을 갖는 환자에서 이용되어, 새롭게 형성된 소도의 성숙을 허용할 수 있다.

유형 1 당뇨병 및 성인의 지연형 자가면역 당뇨병(LADA)은 둘 다 자가면역 질병이다. 그러므로, 유형 1 당뇨병 또는 LADA를 앓는 피험체의 경우, 본 발명의 펩티드 또는 유사체와 함께 투여될 수 있는 또 다른 치료제는, 예를 들면, 면역 조절제일 수 있다. 면역조절제는 자가면역과 연관된 베타 세포 또는 신생 소도의 파괴를 차단하거나 감소시키기 위해 사용될 수 있다. 예시적인 면역조절제로는, 제한되지 않지만, 시롤리무스(sirolimus)[라파마이신(rapamycin), 라파뮨(Rapamune: 상표명)], 타크롤리무스(tacrolimus)[FK 506, 프로그라프(Prograf: 상표명)], 리소필린(lisofylline), 항흉선세포 글로불린, 바실릭시맵(basiliximab)[시뮬렉트(Simulect: 상표명)], 디아프렙(DiaPep)277(상표명) 등이 포함된다. 소도는 글루코스 독성, 지질독성, 및 면역 공격(T1D의 경우)을 받는 것으로 공지되어 있다. 유형 1 당뇨병의 경우, 소도 신생제, 예컨대 본 발명의 펩티드 또는 유사체는 새롭게 만들어진 소도를 면역 공격으로부터 보호하기 위해 혈당 조절이 양호하고 면역 조절제 치료가 조합된 환자에서 이용될 수 있다.

본원에 기재된 바와 같이, 본 발명의 펩티드 및 유사체는, 모 INGAP-PP 또는 HIP 펩티드가 아닌 표 2 및 3의 펩티드 및 유사체를 비롯하여, 모 INGAP-PP 및 HIP 펩티드를 뛰어 넘는 예기치 못한 특성을 나타낸다. 본원에 개시된 바와 같이, 본 발명의 펩티드 및 유사체는 모 펩티드에 비해 배양 배지 및 혈장에서 개선된 안정성을 나타낸다(실시예 III 및 XI 참조). 본 발명의 펩티드 유사체는 또한 혈당, 공복 인슐린 및 경구 내당능을 유의적으로 개선시키는데 효과적이었다(실시예 IV 참조). 본 발명의 펩티드 유사체는 모 펩티드에 비해 유의적으로 증가된 소도 신생 효과를 나타낸다(실시예 V, 실시예 VIII 및 실시예 IX 참조). 추가로, 본 발명의 펩티드 유사체는 주요 췌장 소도 세포에서 인슐린 분비를 자극하는 능력이 유의적으로 증가하였다(실시예 VI 참조). 추가적으로, 본 발명의 펩티드 유사체는 우수한 약물동력학적 특성을 나타내었다(실시예 VII 및 X 참조). 본 발명의 펩티드 및 유사체의 다수의 예상치 못한 우수한 특성으로부터, 모 INGAP-PP 또는 HIΡ 펩티드가 아닌 표 2 및 3의 펩티드 및 유사체, 본원에 개시된 다른 펩티드 또는 유사체 또는 본원에 개시된 화학식을 비롯한 본 발명의 펩티드 및 유사체, 예를 들면, 서열번호 12 또는 서열번호 31은 치료학적 적용을 위해 이용될 수 있음을 알 수 있다.

또한, 본 발명의 펩티드 및 유사체는 여분의 소도 인슐린 양성 β-세포 군집을 유도하는 것으로 밝혀졌다(실시예 VIII 참조). 펩티드 유사체는 모 INGAP-PP 펩티드의 1/10 용량에서 효과적이었다. 또한, 펩티드 유사체의 소도 신생 효과는 췌장 소도 크기 분포에 의해 반영되는 바와 같이 결정되었다(실시예 IX 참조). 펩티드 유사체는 모 INGAP-PP 펩티드의 1/100 용량에서 효과적이었다. 이와 같이, 본 발명의 펩티드 및 유사체는 모 INGAP-PP 또는 HIP 펩티드에 비해 더 큰 효력을 나타낼 수 있다. 신생 소도가 췌장관 또는 선포 세포로부터 유래될 수 있음은 당분야에 공지되어 있다[야토(Yatoh) 등의 문헌 "Diabetes 56: 1802-1809 (2007)"; 립세트(Lipsett) 및 파인굿(Finegood)의 문헌 "Diabetes 51: 1834-1841 (2002)" 참조]. 이와 같이, 본 발명의 펩티드 및 유사체는 췌장관 및/또는 선포 세포로부터 신생 소도를 생산하기 위해 사용될 수 있다.

추가의 실시태양에서, 본 발명은 본 발명의 펩티드 또는 유사체를 투여함을 포함하는, 손상된 췌장 기능과 연관된 징후 또는 증후를 개선하는 방법을 제공한다. 이러한 본 발명의 펩티드 또는 유사체는, 예를 들면, 표 2 또는 3의 펩티드 또는 유사체, 뿐만 아니라 본원에 개시된 다른 펩티드 또는 유사체, 또는 본원에 개시된 화학식일 수 있다. 하나의 특별한 실시태양에서, 본 발명은 서열번호 12 또는 서열번호 31의 펩티드 또는 유사체를 투여함을 포함하는, 손상된 췌장 기능과 연관된 징후 또는 증후를 개선하는 방법을 제공한다. 손상된 췌장 기능과 연관된 질병 또는 증상으로는, 제한되지 않지만, 유형 1 당뇨병, 유형 2 당뇨병, 성인의 지연형 자가면역 당뇨병(LADA), 공복 혈당 장애, 내당능 장애, 인슐린 결핍, 공복 과인슐린혈증, 인슐린 저항성, 또는 공복 인슐린 수준 장애, 또는 이들의 조합이 포함된다. 췌장은 혈당을 조절하기 위해 인슐린을 생산한다. 증상, 예컨대 유형 1 및 유형 2 당뇨병 및 LADA에서, 신체는 글루코스 생산에 정상적으로 반응할 수 없어서, 다수의 관련된 증상을 이끈다[문헌 "Cecil Textbook of Medicine, Bennett and Plum, eds., 20th ed., W.B. Saunders, Philadelphia (1996)"; 문헌 "Harrison's Principles of Internal Medicine, Fauci et al, eds., 14th ed., McGraw-Hill, New York (1998)" 참조]. 당분야의 숙련가라면 췌장의 감소된 기능과 상관된 이러한 증상이 손상된 췌장 기능의 의미내에 포함됨을 이해한다.

진성 당뇨병은 혈당의 만성적으로 상승된 수준의 존재로 정의되는 심각한 대사성 질병이다(고혈당증). 고혈당증의 이러한 상태는 펩티드 호르몬인 인슐린의 활성이 상대적으로 또는 절대적으로 부족하여 일어난 결과이다. 인슐린은 췌장의 β-세포에 의해 생산되고 분비된다. 인슐린은 글루코스 이용성, 단백질 합성, 및 글리코겐으로서의 탄수화물 에너지의 형성 및 저장을 촉진시킨다. 글루코스는 중합체화된 글루코스의 형태인 글리코겐으로서 신체에 저장되고, 이러한 글리코겐은 대사작용 요구조건을 충족시키기 위해 글루코스로 역으로 전환될 수 있다. 정상적인 조건하에, 인슐린은 기저 속도로, 및 글루코스 자극 후 상승된 속도로 분비되고, 이들 모두는 글루코스의 글리코겐으로의 전환에 의해 대사성 항상성을 유지시키기 위해서이다.

용어 진성 당뇨병은 몇몇 상이한 고혈당 상태를 내포한다. 이러한 상태는 유형 1(인슐린-의존성 진성 당뇨병 또는 IDDM) 및 유형 2(비-인슐린 의존성 진성 당뇨병 또는 NIDDM) 당뇨병을 포함한다. 유형 1 당뇨병을 앓는 개별체에 존재하는 고혈당증은 생리학적 범위내로 혈당 수준을 유지시키기에 불충분한 인슐린의 결핍되거나, 감소되거나 존재하지 않는 수준과 연관된다. 유형 1 당뇨병의 치료는 일반적으로 비경구 경로에 의한 인슐린의 대체 용량의 투여를 포함한다. 유형 2 당뇨병을 앓는 개별체에 존재하는 고혈당증은 초기에는 인슐린의 정상적 또는 상승된 수준과 연관되지만; 이들 개별체는, 말초 조직 및 간에서의 인슐린 저항성의 상태에 기인하여, 및 질병이 진행됨에 따라, 인슐린의 분비에 책임이 있는 췌장 β 세포의 진행성 악화에 기인하여 대사성 항상성을 유지할 수 없다. 이와 같이, 유형 2 당뇨병의 초기 치료법은 경구 저혈당제, 예컨대 설포닐우레아에 의한 치료법에 의해 증대되는 식이 및 생활방식 변화에 기초할 수 있다. 그러나, 고혈당증을 일부 제어하고 질병의 합병증을 최소화하기 위해서 특히 질병의 후자의 상태에서, 인슐린 치료법이 종종 요구된다. 유형 2 당뇨병에서, 베타 세포는 글루코스 독성, 지질독성, 만성 산화 스트레스 및 이들의 조합에 감수성이고; 유형 1 당뇨병에서, β 세포는 주로 면역 공격 및 글루코스 독성을 겪는 것으로 공지되어 있다. 상대적으로 안정한 혈당 및 지질 수준은 유형 2 당뇨병 환자의 경우 신생 소도가 성숙하고 기능적인 소도로 성장하는 더욱 건강한 환경을 제공할 수 있고, 유형 1 당뇨병의 경우, 추가적인 면역 조절제는 신생 소도의 성장을 위해 요망되는 생리학적 환경을 제공할 수 있다.

본 발명은 추가적으로 본 발명의 펩티드 또는 유사체를 피험체에게 투여함을 포함하는, 피험체에서 대사성 질병과 연관된 징후 또는 증후를 개선하는 방법을 제공한다. 이러한 대사성 질병으로는, 제한되지 않지만, 당뇨병, 전당뇨병 또는 대사성 증후군이 포함된다. 이러한 본 발명의 펩티드 또는 유사체는, 예를 들면, 표 2 또는 3의 펩티드 또는 유사체, 뿐만 아니라 본원에 개시된 다른 펩티드 또는 유사체, 또는 본원에 개시된 화학식일 수 있다. 하나의 특별한 실시태양에서, 본 발명은 서열번호 12 또는 서열번호 31의 펩티드 또는 유사체를 투여함을 포함하는, 피험체에서 대사성 질병과 연관된 징후 또는 증후를 개선하는 방법을 제공한다.

전당뇨병은 혈당 수준이 정상보다 높지만 유형 2 당뇨병으로 분류되기에 충분히 높지 않은 증상이다. 대사성 증후군은 함께 발생되고 관상 동맥 질환, 졸중, 및 유형 2 당뇨병에 대한 위험을 증가시키는 위험 인자의 군에 대한 명칭이다. 대사성 증후군에 대한 2개의 중요한 위험 인자는 신체의 중심 및 상부 부분 둘레의 과체중(소위 "사과-형태"의 복부 비만) 및 인슐린 저항성이고, 여기서 신체는 정상보다 덜 효과적으로 인슐린을 사용한다. 인슐린은 신체에서 당의 양을 조절함을 돕기위에 필요하다. 결과로서, 혈당 및 지방 수준은 상승한다. 대사성 증후군은 피험체가 하기 징후중 3가지 이상을 갖는 경우 존재하는 것으로 고려된다: 130/85 mmHg 이상의 혈압; 100 mg/㎗ 이상의 공복 혈당(글루코스); 큰 허리 둘레(허리 주변의 길이)(남성, 40 인치 이상; 여성 35 인치 이상); 낮은 HDL 콜레스테롤(남성, 40 mg/㎗ 미만; 여성, 50 mg/㎗ 미만); 150 mg/㎗ 이상의 트리글리세라이드.

당분야의 숙련가라면 손상된 췌장 기능과 연관된 증상 또는 질병 및/또는 대사성 질병과 연관된 징후 또는 증후의 개선에 있어서, 본 발명의 펩티드 또는 유사체의 효능의 적절한 지시자를 쉽게 이해할 것이고 쉽게 결정할 수 있다. 예를 들면, 유형 1 및 유형 2 당뇨병은 둘 다 질병의 진행을 진단 및/또는 모니터링하고/하거나 치료법의 효능을 모니터링하기 위한 다수의 공지된 매개변수를 갖는 특정화된 질병이다. 이러한 매개변수로는, 제한되지 않지만, 혈장 글루코스 수준, 공복 글루코스 수준, 글루코스 경구 부하 시험(OGTT), 인슐린 수준, 공복 인슐린 수준, 글리코실화된 헤모글로빈 수준 등이 포함된다.

본 발명의 펩티드 또는 유사체는 그러므로 손상된 췌장 기능 및/또는 대사성 질병과 연관된 하나 이상의 징후 또는 증후를 개선하기 위해 사용될 수 있다. 당뇨병의 경우, 이러한 징후 또는 증후로는, 제한되지 않지만, 내당능 장애, 증가된 혈당(특별히 200 mg/㎗ 이상), 증가된 공복 혈당(특별히 140 mg/㎗ 이상), 증가된 식후(섭취후) 혈당, 인슐린 결핍, 공복 과인슐린혈증, 인슐린 저항성, 공복 인슐린 수준 장애, 증가된 글리코실화된 헤모글로빈(HbAlc) 등이 포함된다. 이러한 징후 또는 증후는 당분야의 숙련가에게 공지되어 있고 당분야의 숙련가에 의해 의학 시험소를 통해 이용가능한 시험을 포함하여 루틴하게 결정될 수 있다. 본 발명의 한 실시태양에서, 본 발명은 본 발명의 펩티드 또는 유사체를 투여함으로써, 증상, 예컨대 당뇨병과 연관된 징후 또는 증후를 감소시키는 방법, 예를 들면, 내당능 장애, 혈당, 특별히 1 일 평균 혈당 농도, 공복 혈당, 식후(섭식후) 혈당, 인슐린 결핍, 공복 과인슐린혈증, 인슐린 저항성, 공복 인슐린 수준 장애, 글리코실화된 헤모글로빈(HbAlc), 아르기닌-자극된 C-펩티드, 진전된 당화반응 최종 생성물(AGE: advanced glycation end product), 또는 이들의 조합을 감소시키는 방법을 제공한다. 이 방법은 본 발명의 펩티드 또는 유사체를 이용한다. 이러한 본 발명의 펩티드 또는 유사체는 예를 들면, 표 2 또는 3의 펩티드 또는 유사체, 뿐만 아니라 본원에 개시된 다른 펩티드 또는 유사체, 또는 본원에 개시된 화학식일 수 있다. 하나의 특별한 실시태양에서, 본 발명은 서열번호 12 또는 서열번호 31의 펩티드 또는 유사체를 투여함으로써, 증상, 예컨대 당뇨병과 연관된 징후 또는 증후를 감소시키는 방법, 예를 들면, 내당능 장애, 혈당, 특별히 1 일 평균 혈당 농도, 공복 혈당, 식후(섭식후) 혈당, 인슐린 결핍, 공복 과인슐린혈증, 인슐린 저항성, 공복 인슐린 수준 장애, 글리코실화된 헤모글로빈(HbAlc), 아르기닌-자극된 C-펩티드, 진전된 당화반응 최종 생성물(AGE), 또는 이들의 조합을 감소시키는 방법을 제공한다. 당뇨병을 치료하기 위한 약물의 효능을 모니터링하는 방법은 당분야의 숙련가에게 공지되어 있다[예를 들면, 문헌 "Cecil Textbook of Medicine, supra; Harrison's Principles of Internal Medicine supra, Dungan et al, Diabetes/Metabolism Res. Rev. 25:558-565 (2009)"; 미국 특허 제8,329,648호 참조]. 이와 같이, 본 발명은 본 발명의 펩티드 또는 유사체를 당뇨병 피험체에게 투여함으로써, 당뇨병 피험체에서 내당능 장애, 혈당, 공복 혈당, 식후 혈당, 인슐린 결핍, 공복 과인슐린혈증, 인슐린 저항성, 공복 인슐린 수준 장애, 글리코실화된 헤모글로빈(HbAlc), 아르기닌-자극된 C-펩티드, 진전된 당화반응 최종 생성물(AGE), 또는 이들의 조합을 감소시키는 방법을 제공한다. 이러한 본 발명의 펩티드 또는 유사체는, 예를 들면, 표 2 또는 3의 펩티드 또는 유사체, 뿐만 아니라 본원에 개시된 다른 펩티드 또는 유사체, 또는 본원에 개시된 화학식일 수 있다. 하나의 특별한 실시태양에서, 본 발명은 서열번호 12 또는 서열번호 31의 펩티드 또는 유사체를 투여함으로써, 당뇨병 피험체에서 내당능 장애, 혈당, 공복 혈당, 식후 혈당, 인슐린 결핍, 공복 과인슐린혈증, 인슐린 저항성, 공복 인슐린 수준 장애, 글리코실화된 헤모글로빈(HbAlc), 아르기닌-자극된 C-펩티드, 진전된 당화반응 최종 생성물(AGE), 또는 이들의 조합을 감소시키는 방법을 제공한다.

본원에 개시된 바와 같이, 본 발명의 펩티드 및 유사체는 특별하게는 췌장 소도 세포 성장 및 β-세포 군집의 유도를 자극하는데에 효과적이었다(실시예 V, 실시예 VIII 및 실시예 IX 참조). 본 발명의 예시적인 펩티드 및 유사체는 모 펩티드에 비해 개선된 소도 신생 효과를 나타내었다(실시예 V, 실시예 VIII 및 실시예 IX).

이와 같이, 본 발명은 추가적으로 췌장 소도 세포를 시험관내에서 본 발명의 펩티드 또는 유사체와 접촉시켜 췌장 소도 세포의 증식을 자극함으로써 췌장 소도 세포 성장을 자극하는 방법을 제공한다. 이러한 본 발명의 펩티드 또는 유사체는, 예를 들면, 표 2 또는 3의 펩티드 또는 유사체, 뿐만 아니라 본원에 개시된 다른 펩티드 또는 유사체, 또는 본원에 개시된 화학식일 수 있다. 하나의 특별한 실시태양에서, 본 발명은 췌장 소도 세포를 시험관내에서 서열번호 12 또는 서열번호 31의 펩티드 또는 유사체와 접촉시킴으로써 췌장 소도 세포 성장을 자극하는 방법을 제공한다. 또 다른 실시태양에서, 본 발명은 하나 이상의 췌장 소도 세포를 시험관내에서 본 발명의 펩티드 또는 유사체와 접촉시켜, 하나 이상의 췌장 소도 세포의 증식을 자극하고 췌장 소도 세포의 개체군을 생산함으로써 췌장 소도 세포의 개체군을 생산하는 방법을 제공한다. 이러한 본 발명의 펩티드 또는 유사체는, 예를 들면, 표 2 또는 3의 펩티드 또는 유사체, 뿐만 아니라 본원에 개시된 다른 펩티드 또는 유사체, 또는 본원에 개시된 화학식일 수 있다. 하나의 특별한 실시태양에서, 본 발명은 하나 이상의 췌장 소도 세포를 시험관내에서 서열번호 12 또는 서열번호 31의 펩티드 또는 유사체와 접촉시킴으로써 췌장 소도 세포의 개체군을 생산하는 방법을 제공한다. 본 발명의 방법은 본 발명의 펩티드 또는 유사체를 이용하여 이식을 위한 생체외 소도 유도, 팽창 및 증식을 위해, 및 이식된 소도의 생체내 생존을 증가시키기 위해 사용될 수 있다. 이러한 본 발명의 펩티드 또는 유사체는, 예를 들면, 표 2 또는 3의 펩티드 또는 유사체, 뿐만 아니라 본원에 개시된 다른 펩티드 또는 유사체, 또는 본원에 개시된 화학식일 수 있다. 하나의 특별한 실시태양에서, 본 발명은 서열번호 12 또는 서열번호 31의 펩티드 또는 유사체를 이용하여 이식을 위한 생체외 소도 유도, 팽창 및 증식을 위해, 및 이식된 소도의 생체내 생존을 증가시키기 위해 사용될 수 있다.

본 발명의 방법은 추가적으로 본 발명의 펩티드 또는 유사체를 사용하여 단리된 소도 세포를 보존하기 위해 사용될 수 있다. 이러한 본 발명의 펩티드 또는 유사체는, 예를 들면, 표 2 또는 3의 펩티드 또는 유사체, 뿐만 아니라 본원에 개시된 다른 펩티드 또는 유사체, 또는 본원에 개시된 화학식일 수 있다. 하나의 특별한 실시태양에서, 본 발명은 서열번호 12 또는 서열번호 31의 펩티드 또는 유사체를 사용하여 단리된 소도 세포를 보존하기 위한 방법을 제공한다. 이와 같이, 본 발명은 소도 세포를 시험관내에서 접촉시키고, 소도 세포 수를 증가시키고, 임의적으로 이식을 위해 세포를 사용함으로써, 본 발명의 펩티드 또는 유사체를 사용하여 이식을 위한 생체외 소도를 팽창시키고 증식시키는 방법을 제공한다. 이러한 본 발명의 펩티드 또는 유사체는, 예를 들면, 표 2 또는 3의 펩티드 또는 유사체, 뿐만 아니라 본원에 개시된 다른 펩티드 또는 유사체, 또는 본원에 개시된 화학식일 수 있다. 하나의 특별한 실시태양에서, 본 발명은 소도 세포를 시험관내에서 접촉시키고, 소도 세포의 수를 증가시키고, 임의적으로 세포를 서열번호 12 또는 서열번호 31의 펩티드 또는 유사체와 접촉시킴으로써 이식을 위한 세포를 사용함으로써, 본 발명의 펩티드 또는 유사체를 사용하여 이식을 위해 생체외 소도를 팽창시키고 증식시키는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 본 발명의 펩티드 또는 유사체를 피험체에게 투여함으로써 이식된 소도의 생체내 생존을 증가시키는 방법을 제공하고, 여기서 피험체는 이식된 소도 세포의 수여자이다. 이러한 본 발명의 펩티드 또는 유사체는, 예를 들면, 표 2 또는 3의 펩티드 또는 유사체, 뿐만 아니라 본원에 개시된 다른 펩티드 또는 유사체, 또는 본원에 개시된 화학식일 수 있다. 하나의 특별한 실시태양에서, 본 발명은 서열번호 12 또는 서열번호 31의 펩티드 또는 유사체를 피험체에게 투여함으로써 이식된 소도의 생체내 생존을 증가시키는 방법을 제공한다. 본 발명의 펩티드 또는 유사체는 시험관내 및 생체외 방법을 사용하여 이식을 위한 세포를 생성할 뿐만 아니라 이식된 소도 세포의 생존을 증가시키기 위해 사용될 수 있다. 이러한 이식된 세포는 본 발명의 펩티드 또는 유사체를 사용하여 시험관내 방법으로부터 또는 소도 세포의 전통적인 이식 공급원, 예컨대 사체로부터 수득될 수 있다. 본 발명의 방법은 본 발명의 펩티드 또는 유사체를 투여함으로써 손실 또는 손상된 췌장 기능을 갖는 환자를 치료하기 위해 추가로 사용될 수 있다. 이러한 췌장 기능의 손실 또는 손상은, 예를 들면, 예컨대 부상, 염증, 신생물, 과인슐린혈증, 저혈당증 등에 의한 부분적인 췌장 절제술로부터, 또는 췌장 기능에 영향을 주는 증상, 예컨대 낭포성 섬유증으로부터 초래될 수 있다. 이러한 본 발명의 펩티드 또는 유사체는, 예를 들면, 표 2 또는 3의 펩티드 또는 유사체, 뿐만 아니라 본원에 개시된 다른 펩티드 또는 유사체, 또는 본원에 개시된 화학식일 수 있다. 하나의 특별한 실시태양에서, 본 발명은 서열번호 12 또는 서열번호 31의 펩티드 또는 유사체를 투여함으로써 췌장 기능이 손실되거나 손상된 환자를 치료하는 방법을 제공한다.

하나의 특별한 실시태양에서, 하나 이상의 췌장 소도 세포를 피험체로부터 수득하였다. 췌장 소도 세포의 증식을 자극함으로써 생산된 췌장 소도 세포의 개체군은, 예를 들면, 피험체내로 이식하기 위해서 및 췌장 소도 세포의 복원을 위해 사용될 수 있다. 이와 같이, 본 발명의 방법은 췌장 소도 세포의 개체군을 피험체내로 이식하는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 하나의 특별한 실시태양에서, 하나 이상의 췌장 세포는, 췌장 소도 세포의 개체군이 이식되어지는 피험체로부터 수득된다. 다르게는, 이식될 췌장 소도 세포는 화합성 혈액형을 갖는 적합한 공여자로부터 수득된다.

췌장 소도의 이식은 이전에 기재되었다[예를 들면, 사피로(Shapiro) 등의 문헌 "N. Engl. J. Med. 343 :230-238 (2000)" 참조]. 췌장 소도 세포는 피험체로부터 수득될 수 있거나, 다르게는, 사체로부터 수거된 소도 세포를 비롯하여 적합한 공여자로부터 수득될 수 있다. 일반적으로, 소도 세포의 거부를 감소시키기 위해 이식 수여자에게 면역억제 약물이 투여된다(예를 들면, 본원에 기재된 면역억제 약물). 적합한 면역억제 약물의 사용은 기관 또는 세포 이식 분야에 공지되어 있다. 췌장 소도 세포가 자극되어 시험관내 증식되어 췌장 소도 세포의 개체군을 생산하는 본 발명의 방법에서, 이러한 개체군은 췌장 소도 세포 이식의 공지된 방법을 사용하여 피험체내로 이식될 수 있다. 또한, 본 발명의 펩티드 또는 유사체는 소도 세포, 특별히 베타-세포로의 췌장관 세포의 분화를 유도하기 위해 사용될 수 있다[야토(Yatoh) 등의 문헌 "Diabetes 56: 1802-1809 (2007)" 참조]. 이와 같이, 본 발명은 췌장관 세포를 본 발명의 펩티드 또는 유사체와 접촉시킴으로써 췌장관 세포를 소도 세포로 분화시키는 방법을 추가로 제공한다. 이러한 본 발명의 펩티드 또는 유사체는, 예를 들면, 표 2 또는 3의 펩티드 또는 유사체, 뿐만 아니라 본원에 개시된 다른 펩티드 또는 유사체, 또는 본원에 개시된 화학식일 수 있다. 하나의 특별한 실시태양에서, 본 발명은 췌장관 세포를 서열번호 12 또는 서열번호 31의 펩티드 또는 유사체와 접촉시킴으로써 췌장관 세포를 소도 세포로 분화시키는 방법을 제공한다. 췌장관 세포가 시험관내 접촉되는 경우 이 방법이 수행될 때, 분화된 췌장관 세포의 개체군은, 본원에 기재된 바와 같이 생성되고 이식을 위해 사용될 수 있다.

본 발명은 본 발명의 펩티드 또는 유사체를 피험체에게 투여함을 포함하는, 피험체에서 췌장 소도 세포의 수를 증가시키는 방법을 추가로 제공한다. 이러한 본 발명의 펩티드 또는 유사체는, 예를 들면, 표 2 또는 3의 펩티드 또는 유사체, 뿐만 아니라 본원에 개시된 다른 펩티드 또는 유사체, 또는 본원에 개시된 화학식일 수 있다. 하나의 특별한 실시태양에서, 본 발명은 서열번호 12 또는 서열번호 31의 펩티드 또는 유사체를 투여함을 포함하는, 피험체에서 췌장 소도 세포의 수를 증가시키는 방법을 제공한다. 본 발명의 펩티드 또는 유사체를 사용하는 치료학적 처리의 이러한 방법은, 개별체로부터 췌장 세포를 수거하거나 적합한 공여자를 식별할 필요 없이, 그리고 피험체가 복잡한 이식 절차를 겪을 필요 및 환자로부터 수득되지 않는 공여자 세포를 사용하는 경우 면역억제제를 빈번히 사용할 필요 없이, 개별체에서 췌장 소도 세포를 증가시키기 위해 사용될 수 있다.

이전에 기재된 바와 같이, INGAP 펩티드는 당뇨병 마우스 모델에서 신경 기능을 개선시키고 선경 재생을 향상시키는 것으로 제시되었다[탐(Tam) 등의 문헌"FASEB J. 18: 1767-1769 (2004)"]. INGAP 펩티드는 또한 배근 신경절에서 신경돌기 성장을 향상시키는 것으로 제시되었다[탐 등의 문헌 "Biochem. Biophys. Res. Communic. 291 :649-654 (2002)"; 탐 등의 문헌 "NeuroReport 17: 189-193 (2006)"]. 본원에 기재된 바와 같이, 본 발명의 펩티드 및 유사체는 INGAP 모 펩티드에 비해 유의적으로 더욱 활성이고, INGAP에 비해 유사하지만 더욱 강력한 활성을 갖는 것으로 기대된다. 이와 같이, 본 발명은 신경 세포를 본 발명의 펩티드 또는 유사체와 접촉시킴으로써 신경보호 및/또는 신경 재생을 자극하여 신경보호 또는 신경 재생을 촉진시키는 방법을 제공한다. 이러한 본 발명의 펩티드 또는 유사체는, 예를 들면, 표 2 또는 3의 펩티드 또는 유사체, 뿐만 아니라 본원에 개시된 다른 펩티드 또는 유사체, 또는 본원에 개시된 화학식일 수 있다. 하나의 특별한 실시태양에서, 본 발명은 신경 세포를 서열번호 12 또는 서열번호 31의 펩티드 또는 유사체와 접촉시킴으로써 신경보호 또는 신경 재생을 촉진시키는 방법을 제공한다. 신경 세포와의 접촉은 생체내 또는 시험관내에서 초래될 수 있다. 신경 세포가 생체내 접촉될 경우, 본 발명의 펩티드 또는 유사체는 본원에 개시된 다른 치료 방법에 의해 피험체에게 투여된다. 신경 세포가 시험관내 접촉될 경우, 신경보호된 세포는 생체외 적용에서 사용될 수 있고 세포는 피험체에 투여된다. 이식에 의해 신경 세포를 도입하는 이러한 방법은 당분야의 숙련가에게 공지되어 있다[예를 들면, 던네트(Dunnett) 등의 문헌 "Brit. Med. Bulletin 53 :757-776 (1997)" 참조]. 이러한 이식은 신경학적 증상, 예컨대 파킨슨(Parkinson)병 및 헌팅톤(Huntington)병을 치료하기 위해 수행되었다.

HIP 펩티드는 간 재생을 가속화하는 것으로 기재되었다[리에우(Lieu) 등의 문헌 "Hepatol. 42:618-626 (2005)"]. 본원에 기재된 바와 같이, 본 발명의 펩티드 및 유사체는 HIP 모 펩티드에 비해 유의적으로 더욱 활성이고, HIP에 비해 유사하지만 더욱 강력한 활성을 갖는 것으로 기대된다. 이와 같이, 본 발명은 또한 간 세포를 본 발명의 펩티드 또는 유사체와 접촉시킴으로써 간 재생을 촉진시키는 방법을 제공한다. 이러한 본 발명의 펩티드 또는 유사체는, 예를 들면, 표 2 또는 3의 펩티드 또는 유사체, 뿐만 아니라 본원에 개시된 다른 펩티드 또는 유사체, 또는 본원에 개시된 화학식일 수 있다. 하나의 특별한 실시태양에서, 본 발명은 간 세포를 서열번호 12 또는 서열번호 31의 펩티드 또는 유사체와 접촉시킴으로써 간 재생을 촉진시키는 방법을 제공한다. 간 세포와의 접촉은 생체내 또는 시험관내에서 초래될 수 있다. 간 세포가 생체내 접촉되는 경우, 본 발명의 펩티드 또는 유사체는 본원에 개시된 다른 치료 방법에 의해 피험체에게 투여된다. 간 세포가 시험관내 접촉될 경우, 간 세포는 증식하도록 유도되어, 예를 들면, 간 세포의 개체군을 형성한다. 간 세포의 개체군은 생체외 적용에서 사용될 수 있고 세포는 피험체에 투여된다. 간 세포를 피험체의 간으로 이식하거나 그라프팅하는 방법은 당분야의 숙련가에게 공지되어 있다. 이식된 세포는 손상되거나, 대사적으로 결함이 있는 간 조직을 재구성하기 위해 사용될 수 있다. 간 세포는, 세포가 간으로 이동되어 지고 영구 체류를 수용하며 정상적인 간 대사 기능을 수행하는 간문맥 또는 비장으로 주입될 수 있다[예를 들면, 칸(Khan) 등의 문헌 "Cell Transplant. 19:409-418 (2010)"].

HIP 단백질[또한 췌장염-연관된 단백질(PAP: Pancreatitis-associated protein)로서 또한 지칭됨]은 소염 활성을 생체내 및 시험관내에서 나타내는 것으로 밝혀졌다[클로사(Closa) 등의 문헌 "World J. Gastroenterol. 13: 170-174 (2007)"]. 그러므로, 본 발명의 펩티드 및 유사체는 소염 활성을 나타낼 것으로 기대된다. 그러므로, 본 발명은 본 발명의 펩티드 또는 유사체를 투여함으로써 염증을 저해하는 방법을 추가로 제공한다. 이러한 본 발명의 펩티드 또는 유사체는, 예를 들면, 표 2 또는 3의 펩티드 또는 유사체, 뿐만 아니라 본원에 개시된 다른 펩티드 또는 유사체, 또는 본원에 개시된 화학식일 수 있다. 하나의 특별한 실시태양에서, 본 발명은 서열번호 12 또는 서열번호 31의 펩티드 또는 유사체를 투여함으로써 염증을 저해하는 방법을 제공한다.

본 발명은 또한 피험체에서 손상된 췌장 기능을 치료하거나, 대사성 질병을 치료하거나, 신경보호 또는 신경 재생을 촉진시키거나, 간 재생을 촉진시키거나, 염증을 저해하기 위한 약제의 제조에 있어서, 본 발명의 펩티드 또는 유사체의 용도를 제공한다. 이러한 본 발명의 펩티드 또는 유사체는, 예를 들면, 표 2 또는 3의 펩티드 또는 유사체, 뿐만 아니라 본원에 개시된 다른 펩티드 또는 유사체, 또는 본원에 개시된 화학식일 수 있다. 하나의 특별한 실시태양에서, 본 발명은 피험체에서 손상된 췌장 기능을 치료하거나, 대사성 질병을 치료하거나, 신경보호 또는 신경 재생을 촉진시키거나, 간 재생을 촉진시키거나, 염증을 저해하기 위한 약제의 제조에 있어서, 서열번호 12 또는 서열번호 31의 펩티드 또는 유사체의 용도를 제공한다.

본 발명은 추가적으로 피험체에서 손상된 췌장 기능을 치료하거나, 대사성 질병을 치료하거나, 신경보호 또는 신경 재생을 촉진시키거나, 간 재생을 촉진시키거나, 염증을 저해하기 위한 약제의 제조에 있어서, 본 발명의 펩티드 또는 유사체의 용도를 제공한다. 이러한 용도는, 예를 들면, 본원에 개시된 본 발명의 방법을 실행하기 위해서일 수 있다. 이러한 본 발명의 펩티드 또는 유사체는, 예를 들면, 표 2 또는 3의 펩티드 또는 유사체, 뿐만 아니라 본원에 개시된 다른 펩티드 또는 유사체, 또는 본원에 개시된 화학식일 수 있다. 하나의 특별한 실시태양에서, 본 발명은 피험체에서 손상된 췌장 기능을 치료하거나, 대사성 질병을 치료하거나, 신경보호 또는 신경 재생을 촉진시키거나, 간 재생을 촉진시키거나, 염증을 저해하기 위한 약제의 제조에 있어서, 서열번호 12 또는 서열번호 31의 펩티드 또는 유사체의 용도를 제공한다.

본원에 기재된 바와 같이, 본 발명의 펩티드 및 유사체는 다양한 방법으로 사용될 수 있다. 이러한 방법으로는, 제한되지 않지만, 손상된 췌장 기능을 치료하거나, 대사성 질병을 치료하거나, 신경보호 또는 신경 재생을 촉진시키거나, 간 재생을 촉진시키거나, 염증을 저해하는 방법이 포함된다. 치료학적 적용을 위한 본 발명의 많은 적용에서, 본 발명의 펩티드 또는 유사체가 투여된다. 그러나, 대안의 방식은, 펩티드를 인코딩하는 핵산이 함유된 적합한 유전자 치료법 벡터를 피험체에게 투여함으로써 본 발명의 펩티드를 발현하는 유전자 치료법을 사용하는 것임을 이해한다. 이러한 유전자 치료법은 아래에 상세히 기재되고 당분야의 숙련가에게 공지되어 있다[예를 들면, 앤더슨(Anderson)의 문헌 "Nature 392 (Supp.):25-30 (1998)" 참조].

유전자 전달 비히클은 삽입된 폴리뉴클레오티드를 숙주 세포내로 전달할 수 있는 분자를 지칭한다. 유전자 전달 비히클의 예는 리포솜, 미셀(micell) 생물화합성 중합체, 예컨대 천연 중합체 및 합성 중합체; 지질단백질; 폴리펩티드; 다당류; 지질다당류; 인공 바이러스 막; 금속 입자; 및 박테리아, 또는 바이러스, 예컨대 바큘로바이러스(baculovirus), 아데노바이러스(adenovirus) 및 레트로바이러스(retrovirus), 박테리오파아지(bacteriophage), 코스미드(cosmid), 플라스미드, 균류 벡터 및 당분야에서 전형적으로 사용되는 다른 재조합 비히클이고, 이는 다양한 진핵 및 원핵 숙주에서 발현에 대해 기재되었고, 유전자 치료법 뿐만 아니라 단순 단백질 발현을 위해 사용될 수 있다.

본 발명의 펩티드 또는 유사체는 유전자 전달 비히클을 사용하여 세포 또는 조직에 전달될 수 있다. 유전자 전달, 유전자 이입, 형질도입 등은, 본원에 사용될 경우, 도입하기 위해 사용된 방법과 무관하게, 외래성 폴리뉴클레오티드(때때로 전이유전자로 지칭됨)를 숙주 세포내로 도입함을 지칭하는 용어이다. 이러한 방법으로는 다양한 공지된 기법, 예컨대 벡터-중재된 유전자 이입(예를 들어, 바이러스성 감염/형질감염, 또는 다양한 다른 단백질-기제 또는 지질-기제 유전자 전달 착체에 의함) 뿐만 아니라 "네이키드(naked)" 폴리뉴클레오티드의 전달을 촉진시키는 기법(예컨대 전기천공, "유전자 건(gene gun)" 전달 및 폴리뉴클레오티드의 도입을 위해 사용되는 다양한 다른 기법)이 포함된다. 도입된 폴리뉴클레오티드는 숙주 세포에서 안정하게 또는 일시적으로 유지될 수 있다. 적합한 유지는 전형적으로 도입된 폴리뉴클레오티드가 숙주 세포와 화합성인 복제 기원을 함유하거나 숙주 세포의 레플리콘(replicon), 예컨대 염색체외 레플리콘(예를 들어, 플라스미드) 또는 핵 또는 미토콘드리아 염색체내로 통합됨을 필요로 한다. 다수의 벡터는, 당분야에 공지된 바와 같이, 포유동물 세포로의 유전자의 이입을 중재할 수 있는 것으로 공지되어 있다.

바이러스성 벡터는 생체내, 생체외 또는 시험관내에서 숙주 세포로 전달되는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 재조합적으로 생산된 바이러스 또는 바이러스성 입자를 지칭한다. 바이러스성 벡터의 예로는 레트로바이러스성 벡터, 아데노바이러스 벡터, 아데노-연관된 바이러스 벡터, 알파바이러스 벡터 등이 포함된다. 알파바이러스 벡터, 예컨대 셈리키 포레스트(Semliki Forest) 바이러스-기제의 벡터 및 신드비스(Sindbis) 바이러스-기제의 벡터가 또한 유전자 치료법 및 면역치료법에 사용하기 위해 개발되었다[슐레신거(Schlesinger) 및 두벤스카이(Dubensky)의 문헌 " Curr. Opin. Biotechnol. 5:434-439 (1999)" 및 윙(Ying) 등의 문헌 "Nat. Med. 5(7):823-827 (1999)" 참조].

유전자 이입이 레트로바이러스성 벡터에 의해 중재되는 경우의 양태에서, 벡터 구조물은 레트로바이러스성 게놈 또는 이의 일부, 및 치료 유전자를 포함하는 폴리뉴클레오티드를 지칭한다. 본원에 사용될 경우, 레트로바이러스성 중재된 유전자 이입 또는 레트로바이러스성 형질도입은 동일한 의미를 갖고, 세포를 진입시키고 그의 게놈을 숙주 세포 게놈 내로 통합시키는 바이러스에 의해 유전자 또는 핵산 서열이 숙주 세포내로 안정하게 이입되는 방법을 지칭한다. 바이러스는 그의 정상적인 감염 기작을 통해 숙주 세포에 진입하거나, 이것이 상이한 숙주 세포 표면 수용체 또는 리간드에 결합되어 세포에 진입하도록 개질될 수 있다. 본원에 사용될 경우, 레트로바이러스성 벡터는 바이러스 또는 바이러스-유사 진입 기작을 통해 세포내로 외래성 핵산을 도입할 수 있는 바이러스 입자를 지칭한다. 레트로바이러스는 그의 유전 정보를 RNA 형태로 운반하지만; 일단 바이러스가 세포를 감염시키면, RNA는 DNA 형태로 역전사되고, 이는 감염된 세포의 게놈 DNA로 통합된다. 통합된 DNA 형태를 프로바이러스(provirus)로 칭한다.

유전자 이입이 DNA 바이러스 벡터, 예컨대 아데노바이러스(Ad) 또는 아데노-연관된 바이러스(AAV)에 의해 중재되는 양태에서, 벡터 구조물은 바이러스성 게놈 또는 이의 일부, 및 전이유전자를 포함하는 폴리뉴클레오티드를 지칭한다. 아데노바이러스(Ad)는 바이러스의 비교적 잘 특징지워진 균질한 군으로, 50개 이상의 혈청형을 포함한다(예를 들면, 국제 특허출원공개 제WO 95/27071호 참조). Ad는 숙주 세포 게놈내로의 통합을 필요로 하지 않는다. 재조합 Ad 유래된 벡터, 특별하게는 야생형 바이러스의 생성 및 재조합에 대한 가능성을 감소시키는 벡터가 또한 작성되었다(예를 들면, 국제 특허출원공개 제WO 95/00655호 및 제WO 95/11984호 참조). 야생형 AAV는 숙주 세포의 게놈내로 통합되는 높은 특이성 및 감염성을 갖는다[예를 들면, 헤르모나트(Hermonat) 및 무자이크츠카(Muzyczka)의 문헌 "Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81 :6466-6470 (1984)" 및 레브코우스키(Lebkowski) 등의 문헌 "Mol. Cell. Biol. 8:3988-3996 (1988)" 참조].

폴리뉴클레오티드가 작동적으로 연결될 수 있는 클로닝 자리 및 프로모터 둘 다를 함유한 벡터는 당분야에 공지되어 있다. 이러한 벡터는 RNA를 시험관내 또는 생체내에서 전사시킬 수 있고, 공급원, 예컨대 스트라타겐(Stratagene)(미국 캘리포니아주 라호야) 및 프로메가 바이오텍(Promega Biotech)(미국 위스콘신주 매디슨)으로부터 상업적으로 입수가능하다. 발현 및/또는 시험관내 전사를 최적화시키기 위해, 여분의 잠재적인 비적절한 교대 번역 개시 코돈, 또는 발현을 간섭하거나 감소시킬 수 있는 다른 서열을 전사 또는 번역 수준에서 제거하도록 클론의 5' 및/또는 3' 미번역 부분을 제거, 첨가 또는 변경할 필요가 있을 수 있다. 다르게는, 컨센서스(consensus) 리보솜 결합 자리는 출발 코돈의 5'에 바로 삽입되어 발현을 향상시킬 수 있다.

유전자 전달 비히클은 또한 DNA/리포솜 착체, 미셀 및 표적화된 바이러스 단백질-DNA 착체를 포함한다. 표적화 항체 또는 이의 단편을 포함하는 리포솜은 본 발명의 방법에서 사용될 수 있다. 세포로의 전달을 향상시키기 위해, 본 발명의 핵산 또는 단백질은 췌장 소도 세포 상에서 발견되는 세포 표면 항원, 예를 들면 세포 표면 마커에 결합하는 항체 또는 이의 결합 단편에 공액될 수 있다.

역시 또 다른 실시태양에서, 본 발명은 본 발명의 펩티드 또는 유사체를 인코딩하는 핵산과 세포를 접촉시킴으로써 본 발명의 펩티드 또는 유사체를 피험체내로 도입하는 방법을 제공한다. 핵산과 세포의 접촉은 시험관내(생체외 적용을 위해), 또는 생체내에서 초래될 수 있다. 이러한 방법은 종종 유전자 치료법으로서 지칭된다. 세포가 시험관내에서 접촉될 경우, 폴리뉴클레오티드를 발현하는 세포는 피험체에게 투여될 수 있다. 이러한 방법은 치료학적 적용을 위해, 치료 단백질 또는 펩티드, 예컨대 본 발명의 펩티드 또는 유사체의 발현을 허용한다. 이러한 치료학적 적용은 다양한 질병 및 증상을 치료하기 위해, 예컨대 제한되지 않지만, 본원에 개시된 바와 같이, 손상된 췌장 기능을 치료하거나, 대사성 질병을 치료하거나, 신경보호 또는 신경 재생을 촉진시키거나, 간 재생을 촉진시키거나, 염증을 저해하기 위해 사용될 수 있다.

본 발명의 다양한 실시태양의 활성에 실질적으로 영향을 주지 않는 개질은 또한 본원에 제공된 본 발명의 정의내에 제공됨을 이해한다. 따라서, 하기 실시예는 예시하기 위한 것으로, 본 발명을 제한하지 않고자 한다.

실시예 I

펩티드 및 펩티드 유사체의 생산

본 실시예는 펩티드 및 펩티드 유사체의 생산을 기술한다.

9-플루오레닐메톡시 카보닐(Fmoc) 화학성을 사용하여 고체 상 펩티드 합성에 의해 연구에 사용된 모든 펩티드를 합성하였다. 간단히, 미리 칭량된 양의 2-클로로트리틸 클로라이드 수지(1.6 밀리몰/g)를 디클로로메탄(DCM) 중에서 팽윤시켰다. 아미드화된 C-말단을 갖는 펩티드의 경우, 링크(Rink) 아미드 수지를 2-클로로트리틸 클로라이드 수지 대신 사용하였다. Fmoc-예비활성화된 아미노산을, 하이드록시벤조트리아졸[시그마 케미칼 코포레이션(Sigma Chemical Co.), 미국 몬타나주 세인트 루이스]의 존재하에 디메틸포름아미드(DMF) 중에서 커플링 반응을 위해 사용하였다. 과량의 아미노산을 합성 전체를 통해 사용하였다. 쇄 연장 반응을 DMF중 20% 피페리딘에서 Fmoc 보호제거 이후 수행하였다. 쇄 연장 반응이 완료되었을 때, Fmoc 보호기를 DMF중 25% 피페리딘에 의해 펩티드의 N 말단으로부터 제거한 후, DMF로 4회 세척하였다. 아세틸화된 N-말단을 갖는 펩티드의 경우, 트리플루오로아세트산(TFA)을 분할하기 전, DMF에 용해된 20%의 무수 아세트산 용액을 7 ㎖/g 수지의 비율로 첨가하고, 30 분 동안 반응시킨 후, DMF 및 DCM로 4회 세척하였다. DMF 및 DCM으로 4회 세척한 후, 수지를 진공하에 건조시켰다. 후속적으로, 제조된 펩티드를 5% H₂0를 갖는 TFA에서 표준 TFA 분할 절차에 따라 수지로부터 분할한 후, 에테르로 다수 회 추출하였다. 액체 크로마토그래프로 수행되는 역상 고압 액체 크로마토그래피에 의해 모든 합성 펩티드를 >95%로 정제하였다. 펩티드를 질량 분석법으로 분석하여 신원 및 순도를 확인하였다.

시험관내 및 생체외 연구의 경우, 상기 제조된 펩티드를 2차 증류수에 용해시켜 스톡(stock) 용액을 제조하였고, 생체내 효능 연구에서는, 이들을 멸균 정상 염수에서 재구성시켜 원하는 농도로 도달시켰다. 최종 펩티드 용액을 멸균시키기 위해 이를 0.22 ㎛ 막을 통해 여과하였다.

펩티드 및 유사체는 또한 다른 공지된 방법을 사용하여 생산될 수 있고, 예컨대 원하는 펩티드 또는 펩티드 유사체를 코딩하는 핵산을 발현시키거나 펩티드 합성 방법을 사용하여 펩티드를 제작한다. 이와 같이, 유사체가 하나 이상의 비-표준 아미노산을 포함하는 경우, 이들은 화학 합성 방법에 의해 생산될 가능성이 더 높다. 펩티드가 단지 표준 아미노산에 의한 하나 이상의 치환기를 포함하는 경우, 펩티드는 공지된 발현 방법을 사용하여 발현 벡터로부터 발현될 수 있다.

아래의 실험에서 사용된 특별한 펩티드는 표 1 내지 3에서 찾아볼 수 있다.

실시예 II

세포 증식에 미치는 펩티드의 자극 효과

본 실시예는 췌장 세포 성장에 미치는 펩티드 및 유사체의 효과를 기술한다.

세포 증식을 측정하기 위해, 브로모데옥시유리딘(BrdU: bromodeoxyuridine) ELISA 검정을 수행하였다. 간단히, ARIP 세포[미국 종균 협회(ATCC: American Type Culture Collection), 미국 버지니아주 마나사스], 래트 췌장관 세포주를 10% 소 태아 혈청[FBS; 하이클론(HyClone), 써모 피셔 사이언티픽 인코포레이티드(Thermo Fisher Scientific Inc.); 미국 매사추세츠주 왈탐], 100 μg/㎖의 스트렙토마이신 및 100 μg/㎖의 페니실린이 함유된 F-12K 배지[깁코(Gibco)-BRL, 미국 매릴랜드주 게이터스버그] 중에서 세포 항온기에서 배양하였다. ARIP 세포를 96-웰 배양 플레이트에 8000 또는 0(블랭크 대조군) 세포/웰로 50 ㎕의 세포 배양액 배지의 부피로 접종하고, 후속 실험을 위해 하룻밤 항온처리하였다. 이틀째, 배지를 혈청이 없는 배지로 대체하고, 시험 펩티드를 일련의 농도(최종 농도는 10 μΜ, 5 μΜ, 1 μΜ, 500 nM, 100 nM, 50 nM, 10 nM 및 1 nM임)로 함유하는 50 ㎕의 혈청-부재 세포 배양 배지를 접종된 세포에 첨가하였다. 화합물이 없는 배지를 음성 대조군 및 배경 대조군 웰에 첨가하였다. 배지를 각각 24 시간 및 48 시간째 신선한 배지로 대체하였다. 69 시간째, 브로모데옥시유리딘(BrdU) 세포 증식 ELISA 키트[로슈 어플라이드 사이언스(Roche Applied Science); 미국 인디애나주 인디애나폴리스]로부터의 10 ㎕의 BrdU 표지화 용액(배경 대조군 웰 제외)으로 배지를 보충하고, 추가적인 3 시간 동안 항온처리하였다. 72 시간째, 표지화 배지를 제거하고, 200 ㎕/웰의 픽스데나트(FixDenat) 용액을 첨가하였다. 30 분 동안 항온처리한 후, 픽스데나트 용액을 철저히 제거하고 100 ㎕/웰의 항-BrdU 항체 작용 용액을 첨가하고 실온(RT)에서 90 분 동안 항온처리하였다. 항체 컨주게이트(conjugate)를 제거하고 웰을 250 ㎕/웰의 세척 용액(1× PBS)으로 3회 세정하였다. 세척 용액을 제거한 후, 100 ㎕/웰의 기질 용액을 첨가하고 RT에서 15 분 동안 항온처리한 다음, 25 ㎕/웰의 1M H₂S0₄를 첨가하고, 철저히 혼합하기 위해 플레이트를 약 1 분 동안 진탕기 상에서 항온처리하였다. 정지 용액 첨가 후 5 분 이내에 엔 비전(En Vision: 상표명) 플레이트 판독기[퍼킨 엘머(Perkin Elmer), 미국 매사추세츠주 보스턴] 상에서 450 nm(참고 파장 690 nm)에서의 흡광도를 측정하였다.

세포 생존력에 대해 시험하기 위해, 셀타이터-글로(CellTiter-Glo: 상표명)(CTG) 검정[프로메가(Promega), 미국 위스콘신주 매디슨]을 수행하였다. 간단히, ARIP 세포(ATCC, 카탈로그 번호 CRL-1674)를 10% 소 태아 혈청(FBS; 하이클론), 100 μg/㎖의 스트렙토마이신 및 100 μg/㎖의 페니실린이 함유된 F-12K 배지(깁코-BRL) 중에서 세포 항온기에서 배양하였다. ARIP 세포를 96-웰 배양 플레이트에 8000 및 0(블랭크 대조군) 세포/웰로 50 ㎕의 세포 배양액 배지의 부피로 접종하고, 후속 실험을 위해 하룻밤 항온처리하였다. 이틀째, 배지를 혈청이 없는 배지로 대체하고, 시험 펩티드를 일련의 농도(최종 농도는 10 μΜ, 5 μΜ, 1 μΜ, 500 nM, 100 nM, 50 nM, 10 nM 및 1 nM임)로 함유하는 50 ㎕의 혈청-부재 세포 배양 배지를 접종된 세포에 첨가하였다. 화합물이 없는 배지를 음성 대조군 및 배경 대조군 웰에 첨가하였다. 배지를 각각 24 시간 및 48 시간째 신선한 배지로 대체하였다. 72 시간째, 25 ㎕의 셀타이터-글로(등록상표) 시약을 각각의 웰에 첨가하고 2 분 동안 회전 진탕기 상에서 혼합하였다. 실온에서 10 분 항온처리한 후 발광 신호를 엔 비전(상표명) 플레이트 판독기 상에서 정량화하였다.

도 1은 100 nM의 INGAP 스크램블드 PP 1(펩티드 3), INGAP-PP(펩티드 1), 및 펩티드 7(표 2에 제시된 펩티드)의 존재하에서의 ARIP 세포 증식 비교를 보여준다. 도 1은 100 nM의 펩티드 농도에서 세포 수가 증가하였음을 보여준다. 펩티드 7은 INGAP 스크램블드 펩티드, 음성 대조군, 및 INGAP-PP 펩티드에 비해 세포 수에 있어서 유의적으로 더 높은 백분율 증가를 나타내었다.

실시예 III

펩티드 안정성 연구

본 실시예는 다양한 조건에서의 펩티드의 안정성 연구를 기술한다.

배양 배지에서 펩티드의 안정성을 결정하기 위해, 특정량의 선택된 펩티드를 정확히 칭량하고 저장 용액으로서 증류수에서 5 mg/㎖로 용해시켰다. 저장 용액을 작업 용액으로서 F-12K 배지(깁코-BRL, 미국 매릴랜드주 게이터스버그)에 의해 0.25 mg/㎖로 희석시켰다. 100 ㎕ 부피의 각각의 작업 용액을 개별적 샘플 바이알로 옮겼다. 샘플 바이알을 37℃ 항온기에서 0, 24, 48 및 72 시간 동안 항온처리한 후, HPLC에 의해 분석하고 정량화하였다.

도 2는 배양 배지에서의 화합물의 안정성을 보여준다. 특별히, 도 2는 INGAP-PP(펩티드 1) 및 선택된 펩티드 유사체, 펩티드 7 및 펩티드 8(표 2 참조)의 배양 배지에서의 안정성 비교를 보여준다. 도 2에서 볼 수 있듯이, 펩티드 유사체, 펩티드 7 및 펩티드 8은 배양 배지에서 INGAP-PP 펩티드에 비해 유의적으로 더욱 안정하였다.

펩티드의 안정성을 마우스 및 인간 혈장에서 시험하였다. 간단히, 특정량의 펩티드 및 유카트로핀(eucatropine) 분말(양성 대조군)을 정확히 칭량하였다. 시험 화합물을 50% 메탄올-물 용액중에 용해시키고 20 mg/㎖로 희석하고, 유카트로핀을 디메틸 설폭사이드(DMSO)에 용해시키고 10mM로 저장 용액으로서 희석시켰다. 유카트로핀 저장 용액을 작업 용액으로서 DMSO에 의해 0.2mM로 희석시켰다. 아세토니트릴중 200 ng/㎖의 미다졸람(midazolam) 및 톨부타미드(tolbutamide)가 함유된 정지 시약을 제조하였다. 300 ㎕ 부피의 정지 용액을 미리 얼음 상에 위치된 96-웰 딥-웰 플레이트의 각각의 웰에 첨가하였다.

안정성 연구를 위해, 펩티드 및 유카트로핀을 각각 혈장내로 섞어 넣고, 잘 혼합한 다음, 100 ㎕의 각각의 혼합 용액을 0 시점 샘플로서 예냉된 정지 시약내로 넣었다. 남은 혼합물을 37℃ 수욕에서 100 rpm으로 진탕하에 항온처리하였다(n = 2). 최종 항온처리 농도는 유카트로핀의 경우 1 μΜ이었고, 모든 시험 화합물의 경우 100 μg/㎖였다.

원하는 시점에서, 100 ㎕의 항온처리 혼합물을 정지 시약에 넣어 단백질을 침전시켰다. 샘플을 와동시키고 RCF 5000 × g에서 10 분 동안 원심분리하고, 상청액을 시험 플레이트로 옮겼다. 샘플을 LC-MS/MS에 의해 분석하였다.

시간 및 시험 화합물의 잔여량의 백분율의 자연 로그를 플로팅하여 기울기를 계산하고, 하기 수학식에 따라서 T_1/2를 계산하였다.

마우스 혈장에서의 안정성을 위해, 항온처리 시간은 펩티드 1 및 유카트로핀의 경우 0, 5, 15, 30 및 60 분이었고; 펩티드 12, 펩티드 16 및 펩티드 29의 경우 0, 15, 30, 60, 120, 240 및 480 분이었다. 도 3은 마우스 혈장에서의 화합물의 안정성을 보여준다. 특별히, 도 3은 INGAP-PP(펩티드 1) 및 선택된 펩티드 유사체, 펩티드 12, 펩티드 16 및 펩티드 29(표 2 참조)의 마우스 혈장에서의 안정성 비교를 보여준다. 도 3에서 볼 수 있듯이, 펩티드 유사체, 펩티드 12, 펩티드 16 및 펩티드 29는 마우스 혈장에서 양호한 안정성을 나타내었고, INGAP-PP(펩티드 1)에 비해 더욱 안정하였다.

마우스 혈장에서의 또 다른 안정성 연구에서, 항온처리 시간은 펩티드 2 및 유카트로핀의 경우 0, 30, 60 및 120 분이었고; 펩티드 52 및 펩티드 54의 경우 0, 30, 60, 120, 240 및 960 분이었다. 도 5는 마우스 혈장에서의 화합물의 안정성을 보여준다. 특별히, 도 5는 HIP(펩티드 2) 및 선택된 펩티드 유사체, 펩티드 52 및 펩티드 54(표 3 참조)의 마우스 혈장에서의 안정성 비교를 보여준다. 도 5에서 볼 수 있듯이, 펩티드 유사체, 펩티드 52 및 펩티드 54는 마우스 혈장에서 양호한 안정성을 나타내었고, HIP(펩티드 2)에 비해 유의적으로 더 안정하였다.

인간 혈장에서의 안정성을 위해, 항온처리 시간은 펩티드 1, 펩티드 12, 펩티드 16 및 유카트로핀의 경우 0, 30, 60 및 120 분이었다. 도 4는 인간 혈장에서의 화합물의 안정성을 보여준다. 특별히, 도 4는 INGAP-PP(펩티드 1) 및 선택된 펩티드 유사체, 펩티드 12 및 펩티드 16(표 2 참조)의 인간 혈장에서의 안정성 비교를 보여준다. 도 4에서 볼 수 있듯이, 펩티드 유사체, 펩티드 12 및 펩티드 16은 인간 혈장에서 양호한 안정성을 나타내었고, INGAP-PP(펩티드 1)에 비해 유의적으로 더 안정하였다

이들 결과는 다양한 펩티드 유사체가 배양 배지 및 마우스와 인간 혈장을 비롯한 다양한 조건하에 양호한 안정성을 나타내고, INGAP-PP 및 HIP 펩티드에 비해 우수한 안정성을 나타냄을 입증하였다.

실시예 IV

당뇨병 마우스 모델에서의 펩티드 유사체의 효능

본 실시예는 스트렙토조토신(STZ) 유도된 당뇨병 마우스 모델을 사용하는 생체내 효능 연구를 기술한다.

1 주 동안 동물 시설에서 환경순응시킨 후, 6 내지 8 주령의 C57BL/6J 마우스에게 낮은 용량의 STZ를 시트레이트 완충액중 40 mg/kg으로 연속 5 일 동안 투여하여 T1D 동물 모델을 확립하였다. 마지막 STZ 주사 후 5 일째 16.7 밀리몰/ℓ 보다 혈당이 높은 마우스를 연구에 포함시켰다. 이어서 이들 마우스를 INGAP-PP(펩티드 1) 또는 펩티드 7에 의해 5 mg/kg[2.5 mg/kg, bid(1 일 2회)] 또는 25 mg/kg(12.5 mg/kg, bid)의 용량으로 20 일 동안 치료한 후 희생시켰다. 당뇨병 마우스의 2개의 추가적인 군에게 대조군으로서 펩티드 1로부터의 아미노산의 스크램블드 서열로 이루어진 펩티드(펩티드 3) 또는 염수를 투여하였다. 시험 제제의 마지막 투약 후 20 일째 혈당 및 인슐린 수준을 측정하고, 펩티드 1 및 펩티드 7의 효과를 결정하기 위해 6 시간 동안 단식된 동물에서 글루코스 경구 부하 시험(OGTT)을 수행하였다. 글루코스 결정을 위해 꼬리를 잘라 수득된 혈액 샘플을 ACCU-CHEK(상표명) 혈당측정기[로슈(Roche), ACCU-CHEK(등록상표) 액티브(Active)]에 의해 검출하고, 인슐린 수준을 래트/마우스 인슐린 엘리사(Elisa) 키트[밀리포어(Millipore), 미국 매사추세츠주 빌레리카]에 의해 결정하였다. OGTT의 경우, 기선 글루코스 농도의 측정(T = - 30 분) 이후, 마우스는 2 g/kg으로 경구 글루코스 챌린지(challenge)를 받았고, 글루코스 값을 0, 15, 30, 60, 90 및 120 분에 혈당측정기로 결정하였다.

도 6은 STZ 유도된 당뇨병 마우스 모델에서의 INGAP-PP(펩티드 1), INGAP 스크램블드 PP 1(펩티드 3) 및 펩티드 7의 효능 비교를 보여준다. 도 6a는 치료 21 일째의 혈당(BG, mM)을 보여준다. 도 6b는 치료 21 일째의 공복 인슐린 수준(ng/㎖)을 보여준다. 도 6c는 치료 21 일째의 글루코스 경구 부하 시험(OGTT)에서 측정된 글루코스의 곡선하 면적(AUC)(T₀ _{-120 분})을 보여준다.

20 일 동안의 펩티드 1 및 펩티드 7(5 mg/kg 또는 25 mg/kg)의 투여는 체중 또는 췌장 중량에 영향을 주지 않았다. 혈당 수준에서의 유의적인 차이가 펩티드 7 및 염수 대조군을 투여받은 마우스 군 사이에서 입증되었다(도 6a). 더욱이, 가장 충격적인 결과중 하나는 20 일 기간의 종료시 펩티드 7로 치료된 동물(25 mg/kg 용량 군)의 혈장 인슐린 수준이 염수 대조군과 유의적으로 상이하고 고유의 군의 수준으로 거의 회복되었다는 것이다(도 6b). 또한, 펩티드 7로 치료된 군은 개선된 내당능 또한 나타내었다(도 6c).

이들 결과는, 대표적인 펩티드 유사체, 펩티드 7이 당뇨병 마우스 모델에서 당뇨병의 징후 및 증후를 개선하는데 효과적이었음을 입증한다.

실시예 V

작은 β-세포 군집의 유도에 미치는 펩티드의 효과

본 실시예는 정상 C57BL/6J 마우스에서 작은 β-세포 군집의 유도에 미치는 펩티드의 효과를 기술한다.

1 주 동안의 환경순응 이후, C57BL/6J 암컷 마우스를 무작위적으로 4개의 군으로 나누었다. 2개의 대조군에게 lO ㎖/kg의 멸균 정상 염수(n=4) 또는 스크램블드 펩티드(펩티드 3, 25 mg/kg)(n=5)를 피하주사를 통해 10 일 동안 공급하였다. 다른 2개의 군에게 INGAP-PP(펩티드 1) 또는 INGAP-PP 유사체 펩티드 7을 각각 1 일당 25 mg/kg의 용량으로(군 당 n=7) 동일한 기간 동안 공급하였다. 체중 및 6 시간 공복 혈당을 치료 전 및 치료의 마지막 투약 후 측정하였다. 혈장 및 췌장 인슐린을 또한 연구 종료시에 측정하였다. 11 일째, 췌장을 각각의 동물로부터 제거하고, 지방 및 림프절을 세척하고, 칭량하고, 10% 중성 완충된 포르말린(NBF)에서 24 시간 이하 동안 고정시킨 후, 형태분류측정 분석을 위해 처리하였다.

염수 군과 비교하여, 펩티드 3, 펩티드 1, 또는 펩티드 7을 정상 마우스에 10 일 동안 투여한 결과 체중, 혈당, 혈장 인슐린, 췌장 인슐린, 또는 췌장 중량에 영향을 주지 않았다. 췌장 소도 크기 분포를 결정하기 위해 면역조직화학 분석을 사용하였다. 도 7은 펩티드 치료 10 일째의 암컷 C57BL/6J 마우스에서의 췌장 소도 크기 분포를 보여준다. 4.9 내지 2.3 범위의 소도 크기(Log [㎛²]으로서 표현됨)의 경우 각각의 군 간에 차이가 없었지만, 2.1 내지 0.7 범위의 소도 크기의 경우, 펩티드 7로 처리된 마우스에서 유의적으로 수가 증가하였다(고유/대조군에 대해 p<0.05 또는 0.01)(도 7). 펩티드 1로 치료된 마우스에서의 증가는 단지 2.1의 소도 크기에서 관찰되었다(고유/대조군에 대해 p<0.05).

이들 결과는 고안된 INGAP-PP 유사체의 개선된 소도 신생 효과를 지시하였다. 측정된 모든 매개변수들 사이에, 정상 염수 또는 스크램블드 펩티드로 치료된 마우스의 경우 차이가 없었음을 주지한다.

실시예 VI

글루코스-자극된 인슐린 분비에 미치는 펩티드의 효과

본 실시예는 글루코스-자극된 인슐린 분비(GSIS)에 미치는 펩티드의 효과를 기술한다.

췌장을 수컷 성체 스크라그-돌리(SD: Sprague-Dawley) 래트로부터 얻었다. 7일 동안의 환경순응 후, 동물을 경추 탈골에 의해 희생시키고, 전체 췌장을 제거하고 콜라게나아제(collagenase)로 분해하여 소도를 단리하였다. 분해 후, 37℃에서 습윤 분위기(5% C0₂/95% 0₂)하에 10%(v/v) 소 태아 혈청, 1% 페니실린/스트렙토마이신, 및 10mM 글루코스가 함유된 RPMI 1640(미국 캘리포니아주 칼스바드)(pH 7.4) 중에서, 임의의 화합물(대조군)의 첨가 없이, 또는 하기 표 4에 요약된 바와 같이 100 nM 글루카곤 유사 펩티드-1(GLP-1); 또는 10μg/㎖ 펩티드 1, 펩티드 12, 또는 펩티드 16의 첨가하에 소도를 유지시켰다.

[표 4]

글루코스-자극된 인슐린 분비(GSIS)에 대해 시험된 다양한 군의 매개변수

C0₂/0₂(5/95%)의 혼합물로 미리 탈기된 크렙스-링거(Krebs-Ringer) 중탄산염 완충액(KRB)(pH 7.4)에서 배양된 소도를 세정하고, 0.5%(w/v) BSA 및 1.5mM 글루코스가 함유된 1.0 ㎖의 KRB 중에서 37℃에서 45 분 동안 예비-항온처리하였다. 이 기간 후, 5개 소도의 군을 1.5 또는 12.0mM 글루코스가 첨가되고, 펩티드가 첨가되거나 첨가되지 않은 0.6 ㎖의 KRB 중에서 60 분 동안 항온처리하였다. 항온처리 기간의 종료시, 분취량의 배지를 인슐린 정량화를 위해 수집하였다.

인슐린 정량화 결과가 도 8에 제시된다. 도 8은 선택된 펩티드(10 μg/㎖), 펩티드 12, 펩티드 16 및 펩티드 1의 공동-항온처리의 존재 또는 부재하에 소도의 글루코스-자극된 인슐린 분비의 증가를 보여준다. 1OOnM 글루카곤 유사 펩티드-1(GLP-1)과의 공동-항온처리는 양성 대조군으로서 포함되었다. 12.0mM 글루코스 농도에서, 펩티드 GLP-1, 펩티드 12 및 펩티드 16과 함께 배양된 췌장 소도는 펩티드의 첨가 없이 배양된 소도에 비해 유의적으로 더 많은 인슐린을 방출하였다. 특별히, INGAP-PP 유사체 펩티드 12 및 펩티드 16은 GLP-1에 비해 인슐린 분비를 2 내지 3배 더 자극하였다. 대조적으로, INGAP-PP(펩티드 1)의 첨가에 의해서는 자극이 관찰되지 않았다(도 8).

이들 결과는 INGAP-PP 유사체가 췌장 소도 세포로부터의 인슐린 분비를 자극하였음을 입증하였다.

실시예 VII

래트 및 마우스에서의 펩티드의 약물동력학적 특성

본 실시예는 래트 및 마우스에서의 펩티드의 생체내 약물동력학적(PK) 특성을 기술한다.

7 일의 환경순응 후, 210 내지 250 g 중량의 수컷 스크라그-돌리(SD) 래트, 또는 19 내지 24 g 중량의 수컷 C57BL/6 마우스를 연구에 사용하였다. 펩티드 1, 펩티드 12 및 펩티드 16을 멸균 정상 염수에 용해시키고, 이어서 이들을 피하(sc) 일시주사 또는 정맥내(iv) 일시주사를 통해 25 mg/kg의 용량 수준으로 주사하였다. 각각의 군에서 3마리의 동물을 사용하여 투약 후 5 분, 15 분, 30 분, 1 시간, 2 시간, 4 시간, 6 시간, 8 시간 및 24 시간의 시점에 혈액을 수집하였다. 혈액 샘플(대략 400 ㎕)을 수집하고 EDTA-K2가 함유된 관으로 옮기고, 8000 rpm에서 6 분 동안 4℃에서 원심분리하여 샘플로부터 혈장을 분리하였다. 생성된 혈장을 분석할 때까지 -80℃에서 동결 저장하였다.

펩티드의 혈장 농도를 이중 질량 분광계(tandem mass spectrometry)(LC-MS/MS) 분석을 사용하여 결정하였다. 윈놀린(WinNonlin: 등록상표) 프로페셔널(Professional) 5.2[파르사이트(Pharsight); 미국 미주리주 세인트 루이스]의 비-구획 모듈을 사용하여 PK 매개변수를 계산하였다. 선택된 PK 매개변수가 하기 표 5에 제시된다. 약자 AUC_(0-t)는 투약 시간으로부터 마지막 관찰 시간까지의 곡선하 면적을 나타내고, AUC_(0-∞)는 투약 시간으로부터 무한까지의 곡선하 면적을 나타내며, C_최대값은 검출된 최대 농도를 나타낸다.

[표 5]

치료된 마우스 및 래트에서의 약물동력학적 매개변수

INGAP-PP(펩티드 1)에 비하여, 펩티드 유사체, 펩티드 12 및 펩티드 16은, 마우스 및 래트에서 혈장 농도-시간 곡선하 면적(AUC) 및 최대 농도(C_최대값)에 있어서, 유의적인 증가에 의해 입증된, 현저히 개선된 PK 특성을 나타내었다.

이들 결과는 INGAP-PP 펩티드 유사체가 INGAP-PP에 비해 유의적으로 개선된 약물동력학적 특성을 나타내었음을 입증한다.

실시예 VIII

여분의 소도 인슐린 양성 β 세포 군집의 유도에 미치는 펩티드의 효과

본 실시예는 정상 C57BL/6J 마우스에서 여분의 소도 인슐린 양성 β 세포 군집의 유도에 미치는 펩티드의 효과를 기술한다.

1 주 동안의 환경순응 이후, C57BL/6J 암컷 마우스를 무작위적으로 6개의 군으로 나누었다(군 당 n=5). 대조군에게 lO ㎖/kg의 멸균 정상 염수를 피하주사를 통해 연속 10 일 동안 공급하였다. 다른 5개의 군에게 INGAP-PP(펩티드 1) 또는 INGAP-PP 유사체 펩티드 12, 펩티드 16, 펩티드 29 또는 펩티드 31을 각각 1 일당 50 mg/kg 또는 5mg/kg의 용량으로 동일한 기간 동안 공급하였다. 11 일째, 췌장을 각각의 동물로부터 제거하고, 지방 및 림프절을 세척하고, 칭량하고, 10% 중성 완충된 포르말린(NBF)에서 24 시간 이하 동안 고정시킨 후, 형태분류측정 분석을 위해 처리하였다.

면역조직화학 분석을 사용하여, 치료 10 일 후 각각의 개별적 군으로부터 수거된 췌장 조직의 여분의 소도 인슐린 양성 β 세포 군집(EIC)의 수 및 면적을 측정함으로써 펩티드의 소도 신생 활성을 평가하였다. EIC는 앞서 립세트(Lipsett) 및 파인굿(Finegood)의 문헌[Diabetes 51: 1834-1841 (2002)]에 기재된 바와 같이, 소도 신생의 지표이다.

염수로 치료된 군에 비하여, 펩티드로 치료된 군에서 EIC의 수 및 면적의 유의적인 증가가 있었다. 도 9a는 치료 10 일 후 암컷 C57BL/6J 마우스에서의 EIC의 수를 보여준다. 도 9b는 치료 10 일 후 암컷 C57BL/6J 마우스에서의 EIC의 총 면적을 보여준다. 도 9c는 INGAP-PP 펩티드 또는 INGAP-PP 유사체의 투여 후 췌장에서 대표적인 관 연관된 EIC를 보여준다. INGAP-PP 또는 INGAP-PP 유사체로 치료된 군은 염수로 치료된 군에 비하여 EIC 수 및 EIC 면적에 있어서 유의적인 증가를 나타내었다. 펩티드 31(5 mg/kg)로 치료된 군에서의 EIC 수 및 면적이 INGAP-PP(펩티드 1)(50 mg/kg) 로 치료된 군에 비해 통계학적으로 더 크다(p<0.05)는 사실은 주목할 만 하다.

이 결과는 치료 10 일 후 정상 마우스에서 소도 신생을 자극함에 있어서 INGAP-PP 및 그의 유사체의 생물학적 활성을 입증하였다. 중요하게는, 펩티드 12 또는 펩티드 31로 치료된 군의 경우, 필적할만한 또는 개선된 효능이 INGAP-PP의 10분의 1의 용량에서 달성되었고, 이는 INGAP-PP 유사체의 개선된 효력을 나타낸다.

실시예 IX

췌장 소도 크기 분포에 의해 반영된 소도 신생에 미치는 펩티드의 효과

본 실시예는 정상 C57BL/6J 마우스에서 췌장 소도 크기 분포에 의해 반영된 소도 신생에 미치는 펩티드의 효과를 기술한다.

1 주 동안의 환경순응 이후, C57BL/6J 암컷 마우스를 무작위적으로 4개의 군으로 나누었다(군 당 n=6). 대조군에게 lO ㎖/kg의 멸균 정상 염수를 피하주사를 통해 연속 10 일 동안 공급하였다. 다른 3개의 군에게 INGAP-PP(펩티드 1)를 25 mg/kg/일의 용량으로, 또는 INGAP-PP 유사체 펩티드 12 또는 펩티드 31을 0.25 mg/kg/day 용량으로 각각 동일한 기간 동안 공급하였다. 상이한 용량의 INGAP-PP 또는 INGAP-PP 유사체를, 당분야에 공지된 INGAP-PP의 효과적 용량 및 INGAP-PP 유사체의 약물동력학적 특징에 기초한 연구에 사용하였다. 11 일째, 췌장을 각각의 동물로부터 제거하고, 지방 및 림프절을 세척하고, 칭량하고, 10% 중성 완충된 포르말린(NBF)에서 24 시간 이하 동안 고정시킨 후, 형태분류측정 분석을 위해 처리하였다. 인슐린 염색된 양성 구간을 추적하고 영상 분석 소프트웨어[이미지-프로 플러스(Image-Pro Plus) 소프트웨어 버전 6.0이 구비된 컴퓨터에 비디오 카메라에 의해 연결된 올림푸스(Olympus) DP70 현미경]를 사용하여 정량화하고, 소도 크기 분포 분석을 실행하였다.

염수로 치료된 군에 비하여, INGAP-PP 또는 INGAP-PP 유사체로 10 일 동안 치료된 마우스는 도 10에 제시된 바와 같이 작은 소도 크기로 전이되었다. 특별히, 펩티드로 치료된 군에서 1000 ㎛² 보다 더 작은 소도 크기에 대하여 약 50% 증가한 반면(펩티드로 치료된 군에서 소도 개체군의 60% 대 염수 군에서 40%), 1000 및 5000 ㎛² 사이의 소도 크기의 경우 차이가 없었고, 5000 ㎛² 보다 더 큰 소도 크기의 경우 약 50% 감소하였다(펩티드로 치료된 군에서 소도 개체군의 약 10% 대 염수 군에서 20%).

이들 결과는 INGAP-PP 및 INGAP-PP 유사체가 작은 소도 크기로 전이를 나타내었음을 보여준다. 또한 시험된 INGAP-PP 유사체는 INGAP-PP의 1/100 투여량에서 활성을 나타내었다.

실시예 X

SD 래트에서의 펩티드의 약물동력학적 특성

본 실시예는 SD 래트에 단일 피하(sc) 투여 후 펩티드의 생체내 약물동력학적(PK) 특성을 기술한다.

7 일 동안의 환경순응 후, 시노-브리티쉬(Sino-British) SIPPR/BK 랩 애니멀 리미티드(Lab Animal Ltd)(중국 상하이)로부터의 양호한 건강 상태의 총 15 마리의 수컷 스프라그-돌리(SD) 래트(체중: 230 내지 270 g)를 연구에 사용하였다. 모든 펩티드, 펩티드 1, 펩티드 12, 펩티드 16, 펩티드 29 또는 펩티드 31을 각각 멸균 정상 염수에 용해시켜 원하는 최종 농도를 산출하였고, 단일 피하(sc) 투약을 통해 투여하였다. 약물동력학적 연구에 대한 상세한 정보는 표 6에 제시된다.

[표 6]

약물동력학적(PK) 연구에 대한 군 및 투약 정보

각각의 군중 3마리의 동물을 사용하여 투약 후 5 분, 15 분, 30 분, 1 시간, 2 시간, 4 시간, 6 시간, 8 시간 및 24 시간의 시점에 혈액을 수집하였다. 혈액 샘플(대략 400 ㎕)을 수집하고, EDTA-K2(이칼륨 에틸렌 디아민 테트라아세트산)이 함유된 관으로 옮기고, 8000 rpm에서 6 분 동안 4℃하에 원심분리하여 샘플로부터 혈장을 분리하였다. 생성된 혈장을 분석할 때까지 -80℃에서 동결 저장하였다.

펩티드의 혈장 농도를 이중 질량 분광계(LC-MS/MS) 분석을 사용하여 결정하였다. 윈놀린(등록상표) 프로페셔널 5.2(파르사이트; 미국 미주리주 세인트 루이스)의 비-구획 모듈을 사용하여 PK 매개변수를 계산하였다. 선택된 PK 매개변수가 하기 표 7에 제시된다. AUC_(0-t)는 투약 시간으로부터 마지막 관찰 시간까지의 곡선하 면적을 나타내고, AUC_(0-∞)는 투약 시간으로부터 무한까지의 곡선하 면적을 나타내며, C_최대값은 검출된 최대 농도를 나타낸다.

[표 7]

피하 투여후 스프라그-돌리 래트에서의 선택된 약물동력학적 매개변수

INGAP-PP(펩티드 1)에 비하여, 유사체 펩티드 12, 펩티드 16, 펩티드 29 및 펩티드 31은 동일한 성별 및 동일한 용량 수준을 갖는 SD 래트에서 AUC 및 C_최대값의 상당한 증가에 의해 입증되는 바와 같이 개선된 PK 특성을 보여주었다.

펩티드의 약물동력학적(PK) 특성을 추가로 특징짓기 위해, 췌장(표적 기관)에서의 펩티드 농도를 투약 후 30 분에 결정하였다. 간단히, INGAP-PP(펩티드 1), 펩티드 12, 또는 펩티드 31을 멸균 정상 염수에 용해시키고, 이어서 피하(sc) 일시주사를 통해 25 mg/kg의 용량 수준으로 수컷 스프라그-돌리(SD) 래트에 투여하였다. 각각의 군에서 5마리의 동물을 사용하여 투약 후 30 분의 시점에 혈액 및 췌장을 수집하였다. 혈액 샘플(대략 400 ㎕)을 수집하고, EDTA-K2가 함유된 관으로 옮기고, 8000 rpm에서 6 분 동안 4℃하에 원심분리하여 샘플로부터 혈장을 분리하였다. 혈액을 추출하고 동물을 희생시킨 후, 췌장을 각각의 동물로부터 즉시 제거하고, 지방 및 림프절을 세척하고, 칭량하고, 단백질분해효소 저해제 칵테일(cocktail)[메르크 밀리포어(Merck Millipore), 카탈로그 번호 539137]을 갖는 5배 부피의 빙냉된 멸균 정상 염수에 넣어 균질기로 균질화하였다.

혈장 및 췌장 균질물의 펩티드 농도를 이중 질량 분광계(LC-MS/MS) 분석을 사용하여 즉시 결정하였고, 결과는 표 8에 제시된다.

[표 8]

혈장 및 췌장에서의 펩티드 농도

INGAP-PP(펩티드 1)에 비하여, 펩티드 유사체, 펩티드 12 및 펩티드 31은 혈장 및 췌장 농도에서 유의적인 증가로 입증된 개선된 PK 특성을 보여주었다.

이들 결과는, INGAP-PP에 비하여 INGAP-PP 펩티드 유사체가 유의적으로 개선된 생체내 약물동력학적 특성을 나타내었음을 입증하였다.

실시예 XI

펩티드 안정성 연구

도 11은 배양 배지에서의 화합물의 안정성을 보여준다. 특별히, 도 11은 INGAP-PP(펩티드 1) 및 선택된 펩티드 유사체, 펩티드 12 및 펩티드 16의 배양 배지에서의 안정성 비교를 보여준다. 도 11에서 볼 수 있듯이, 펩티드 유사체, 펩티드 12 및 펩티드 16은 배양 배지에서 INGAP-PP 펩티드에 비해 유의적으로 더욱 안정하였다.

펩티드의 안정성을 또한 래트, 마우스 및 인간 혈장에서 시험하였다. 간단히, 특정량의 펩티드 및 유카트로핀 분말(양성 대조군)을 정확히 칭량하였다. 시험 화합물을 50% 메탄올-물 용액중에 용해시키고 20 mg/㎖로 희석하고, 유카트로핀을 디메틸 설폭사이드(DMSO)에 용해시키고 10mM로 저장 용액으로서 희석시켰다. 유카트로핀 저장 용액을 작업 용액으로서 DMSO에 의해 0.2mM로 희석시켰다. 아세토니트릴중 200 ng/㎖의 미다졸람 및 톨부타미드가 함유된 정지 시약을 제조하였다. 300 ㎕ 부피의 정지 용액을 미리 얼음 상에 위치된 96-웰 딥-웰 플레이트의 각각의 웰에 첨가하였다.

수학식 1

T_1/2 = 0.693/-기울기

래트 혈장에서의 안정성을 위해, 항온처리 시간은 펩티드 1 및 유카트로핀의 경우 0, 15, 30, 60 및 120 분이었고, 펩티드 12, 펩티드 16, 펩티드 29 및 펩티드 31의 경우 0, 15, 30, 60, 120, 및 240 분이었다. 도 12는 래트 혈장에서의 화합물의 안정성을 보여준다. 특별히, 도 12는 INGAP-PP(펩티드 1) 및 선택된 펩티드 유사체, 펩티드 12, 펩티드 16, 펩티드 29 및 펩티드 31의 래트 혈장에서의 안정성 비교를 보여준다. 도 12에서 볼 수 있듯이, 펩티드 유사체, 펩티드 12, 펩티드 16, 펩티드 29 및 펩티드 31은 래트 혈장에서 양호한 안정성을 나타내었고 INGAP-PP(펩티드 1)에 비해 더 안정하였다.

래트 혈장에서의 또 다른 안정성 연구에서, 항온처리 시간은 펩티드 2, 펩티드 52, 펩티드 64 및 유카트로핀의 경우 0, 30, 60 120 및 240 분이었다. 도 13은 래트 혈장에서의 화합물의 안정성을 보여준다. 특별히, 도 13은 HIP(펩티드 2) 및 선택된 펩티드 유사체, 펩티드 52 및 펩티드 62의 래트 혈장에서의 안정성 비교를 보여준다. 도 13에서 볼 수 있듯이, 펩티드 유사체, 펩티드 52 및 펩티드 62는 래트 혈장에서 양호한 안정성을 나타내었고 HIP(펩티드 2)에 비해 유의적으로 더 안정하였다.

마우스 혈장에서의 안정성을 위해, 항온처리 시간은 펩티드 1 및 유카트로핀의 경우 0, 15, 30, 60 및 120 분이었고; 펩티드 31의 경우 0, 15, 30, 60, 120, 및 240 분이었다. 도 14는 마우스 혈장에서의 화합물의 안정성을 보여준다. 특별히, 도 14는 INGAP-PP(펩티드 1) 및 펩티드 31의 마우스 혈장에서의 안정성 비교를 보여준다. 도 14에서 볼 수 있듯이, 펩티드 31은 마우스 혈장에서 양호한 안정성을 나타내었고, INGAP-PP(펩티드 1)에 비해 더 안정하였다.

인간 혈장에서의 안정성을 위해, 항온처리 시간은 펩티드 1, 펩티드 29, 펩티드 31 및 유카트로핀의 경우 0, 15, 30, 60, 120 및 240 분이었다. 도 15는 인간 혈장에서의 화합물의 안정성을 보여준다. 특별히, 도 15는 INGAP-PP(펩티드 1) 및 선택된 펩티드 유사체, 펩티드 29 및 펩티드 31의 인간 혈장에서의 안정성 비교를 보여준다. 도 15에서 볼 수 있듯이, 펩티드 유사체, 펩티드 29 및 펩티드 31은 인간 혈장에서 양호한 안정성을 나타내었고, INGAP-PP(펩티드 1)에 비해 유의적으로 더 안정하였다.

완충액에서의 펩티드 안정성을 INGAP-PP 및 선택된 유사체에 대해 시험하였다. 1O mg/㎖의 펩티드 1, 펩티드 12, 펩티드 16, 펩티드 29 또는 펩티드 31을 pH가 4.0 내지 8.0 범위인 등장성 완충액에 용해시켰다. 펩티드 1과 유사하게, 펩티드 16 및 펩티드 31은 pH가 4.0 내지 6.0 범위인 완충액에서 더 안정한 반면, 펩티드 12 및 펩티드 29는 pH가 6.0 내지 8.0 범위인 완충액에서 더 안정한 것으로 밝혀졌다. 완충액에서의 펩티드 안정성을 평가하기 위한 추가의 연구로부터, 펩티드 16 및 펩티드 31이 등장성 아세테이트 완충액(pH 5.0)에서 90 일 이하 동안 4℃ 하에, 및 7 일 미만 동안 25℃ 하에 안정함을 알 수 있었다. 펩티드 12 및 펩티드 29는 등장성 포스페이트 완충액(pH 7.4)에서 90 일 이상 동안 4℃ 하에(90 일째 샘플 검토 시점에 분해의 징후는 없었음), 및 60 일 동안 25℃ 하에 안정하였다.

이들 결과는, 다양한 펩티드 유사체가 배양 배지, 래트, 마우스 및 인간 혈장을 비롯한 다양한 조건하에 양호한 안정성을 나타내고, INGAP-PP 및 HIP 펩티드에 비해 우수한 안정성을 나타냄을 입증하였다.

실시예 XII

장기간-작용 전달을 위한 지효성 방출 시스템

본 실시예는 INGAP-PP 및 유사체의 임상적 적용을 위하여 INGAP-PP 및 유사체의 지효성 방출 시스템을 개발하기 위해 다양한 생물화합성 및 생물분해성 물질의 용법을 기술한다.

조성물의 최종 중량의 0.5%(중량/중량) 내지 20%(중량/중량)의 농도의 폴리(에틸렌 글리콜)(PEG) 부분, 조성물의 최종 중량의 5%(중량/중량) 내지 15%(중량/중량)의 α-사이클로덱스트린, 조성물의 최종 중량의 0.1%(중량/중량) 내지 20%(중량/중량)의 INGAP-PP 및/또는 그의 유사체, 및 포스페이트 완충액 염수(PBS)를 함유한 생물화합성 중합체를 평가하였다. PEG 부분을 함유한 생물화합성 중합체, 예를 들면, 플루로닉 F127, 플루로닉 F38, 플루로닉 F68, 플루로닉 F87, 플루로닉 F108, 제파민 ED-2003, 및 유사체를 또한 혼입하여 초분자 하이드로겔 시스템을 형성하였다. PEG 부분, 및 α-사이클로덱스트린이 함유된 PEG, 생물화합성 중합체를 단독으로 또는 예비혼합 형태로 용해시키고, INGAP-PP 및/또는 그의 유사체를 PBS에 직접 분산시킨 다음, PEG 혼합물과 혼합하였다. 이어서 혼합된 용액을 음파처리하여 하이드로겔을 형성하였다. 도 16은 플루로닉 F127이 함유된 하이드로겔의 대표적인 시험관내 INGAP-PP(펩티드 1) 방출 곡선을 보여준다. 도 17은 제파민 ED-2003이 함유된 하이드로겔의 대표적인 시험관내 INGAP-PP(펩티드 1) 방출 곡선을 보여준다.

수크로스 아세테이트 이소부티레이트(SAIB), INGAP-PP 및/또는 그의 유사체, 및 용매의 조성물로 이루어진 지효성 방출 시스템을 또한 평가하였다. 유용한 제형은 SAIB를 조성물의 최종 중량의 45%(중량/중량) 내지 85%(중량/중량)의 농도로, INGAP-PP 및/또는 그의 유사체를 조성물의 최종 중량의 0.1%(중량/중량) 내지 20%(중량/중량)로, 및 용매를 나머지 부분으로 포함한다. 용매를 에탄올, 아세톤, 에틸 아세테이트, 또는 SAIB를 용해시킬 수 있는 임의의 다른 용매로부터 선택할 수 있다. 도 18은 SABER 겔 시스템의 대표적인 시험관내 INGAP-PP(펩티드 1) 방출 곡선을 보여준다.

상기 기재된 지효성 방출 시스템은 INGAP-PP 또는 그의 유사체의 장기간의 작용 방출 투여형의 실효성을 입증하였다.

본원을 통해 다양한 문헌이 참고되었다. 이들 문헌의 개시내용은 본 발명이 속하는 분야의 상황을 더욱 자세히 설명하기 위해 그의 전체가 본원에 참고로 혼입된다. 본 발명이 상기 제공된 실시예를 참고하여 설명되었지만, 본 발명의 취지로부터 벗어나지 않고 다양하게 변형될 수 있음을 이해해야 한다.

SEQUENCE LISTING <110> SHENZHEN HIGHTIDE BIOPHARMACEUTICAL, LTD. <120> COMPOSITIONS AND METHODS OF USING ISLET NEOGENESIS PEPTIDES AND ANALOGS THEREOF <130> 224994-600001 <140> PCT/CN2014/073483 <141> 2014-03-14 <150> PCT/CN2013/072771 <151> 2013-03-15 <160> 110 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 15 <212> PRT <213> Cricetulus sp. <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 1 Ile Gly Leu His Asp Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Asn Gly Ser 1 5 10 15 <210> 2 <211> 15 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 2 Ile Gly Leu His Asp Pro Thr Gln Gly Thr Glu Pro Asn Gly Glu 1 5 10 15 <210> 3 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 3 Ser His Pro Asn Gly Ser Gly Thr Ile Gly Leu His Asp Pro Leu 1 5 10 15 <210> 4 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> 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Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term Ac <220> <223> C-term NH2 <400> 40 Ile Gly Leu His Asp Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Asn Gly Cys 1 5 10 15 <210> 41 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term NH2 <400> 41 Ile Gly Leu His Asp Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Ala Gly Ser 1 5 10 15 <210> 42 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 42 Ile Gly Leu His Asp Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Ala Gly Ser Cys 1 5 10 15 <210> 43 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term Ac <220> <223> C-term OH <400> 43 Ile Gly Leu His Asp Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Ala Gly Ser Cys 1 5 10 15 <210> 44 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term NH2 <400> 44 Ile Gly Leu His Asp Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Ala Gly Ser Cys 1 5 10 15 <210> 45 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term Ac <220> <223> C-term NH2 <400> 45 Ile Gly Leu His Asp Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Ala Gly Ser Cys 1 5 10 15 <210> 46 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 46 Ile Gly Leu His Asp Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Ala Gly Cys 1 5 10 15 <210> 47 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term Ac <220> <223> C-term OH <400> 47 Ile Gly Leu His Asp Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Ala Gly Cys 1 5 10 15 <210> 48 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term NH2 <400> 48 Ile Gly Leu His Asp Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Ala Gly Cys 1 5 10 15 <210> 49 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term Ac <220> <223> C-term NH2 <400> 49 Ile Gly Leu His Asp Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Ala Gly Cys 1 5 10 15 <210> 50 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 50 Ile Gly Leu His Asp Pro Thr Gln Gly Thr Glu Pro Ala Gly Glu 1 5 10 15 <210> 51 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <221> MOD_RES <222> (13)..(13) <223> Aib <220> <223> C-term OH <400> 51 Ile Gly Leu His Asp Pro Thr Gln Gly Thr Glu Pro Xaa Gly Glu 1 5 10 15 <210> 52 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term Ac <220> <223> C-term OH <400> 52 Ile Gly Leu His Asp Pro Thr Gln Gly Thr Glu Pro Ala Gly Glu 1 5 10 15 <210> 53 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> D-Isoleucine <220> <223> C-term OH <400> 53 Ile Gly Leu His Asp Pro Thr Gln Gly Thr Glu Pro Ala Gly Glu 1 5 10 15 <210> 54 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term Ac <220> <223> C-term OH <400> 54 Ile Gly Leu His Asp Pro Thr Gln Gly Thr Glu Pro Asn Gly Glu 1 5 10 15 <210> 55 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> D-Isoleucine <220> <223> C-term OH <400> 55 Ile Gly Leu His Asp Pro Thr Gln Gly Thr Glu Pro Asn Gly Glu 1 5 10 15 <210> 56 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 56 Ile Gly Leu His Asp Pro Thr Gln Gly Thr Glu Pro Asn Gly Ser 1 5 10 15 <210> 57 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 57 Ile Gly Leu His Asp Pro Thr Gln Gly Thr Glu Pro Ala Gly Ser 1 5 10 15 <210> 58 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 58 Ile Gly Leu His Asp Pro Thr Gln Gly Thr Leu Pro Asn Gly Glu 1 5 10 15 <210> 59 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 59 Ile Gly Leu His Asp Pro Thr Gln Gly Thr Leu Pro Ala Gly Glu 1 5 10 15 <210> 60 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term Ac <220> <223> C-term NH2 <400> 60 Ile Gly Leu His Asp Pro Thr Gln Gly Thr Glu Pro Ala Gly 1 5 10 <210> 61 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term Ac <220> <223> C-term NH2 <400> 61 Ile Gly Leu His Asp Pro Thr Gln Gly Thr Glu Pro Asn Gly Glu 1 5 10 15 <210> 62 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term Ac <220> <223> C-term NH2 <400> 62 Ile Gly Leu His Asp Pro Thr Gln Gly Thr Glu Pro Ala Gly Glu 1 5 10 15 <210> 63 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term NH2 <400> 63 Ile Gly Leu His Asp Pro Thr Gln Gly Thr Glu Pro Asn Gly Glu 1 5 10 15 <210> 64 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 64 Ile Gly Leu His Asp Pro Thr Gln Gly Thr Glu Pro Asn Gly Cys 1 5 10 15 <210> 65 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term Ac <220> <223> C-term OH <400> 65 Ile Gly Leu His Asp Pro Thr Gln Gly Thr Glu Pro Asn Gly Cys 1 5 10 15 <210> 66 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term NH2 <400> 66 Ile Gly Leu His Asp Pro Thr Gln Gly Thr Glu Pro Asn Gly Cys 1 5 10 15 <210> 67 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term Ac <220> <223> C-term NH2 <400> 67 Ile Gly Leu His Asp Pro Thr Gln Gly Thr Glu Pro Asn Gly Cys 1 5 10 15 <210> 68 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term NH2 <400> 68 Ile Gly Leu His Asp Pro Thr Gln Gly Thr Glu Pro Ala Gly Glu 1 5 10 15 <210> 69 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 69 Ile Gly Leu His Asp Pro Thr Gln Gly Thr Glu Pro Ala Gly Cys 1 5 10 15 <210> 70 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term Ac <220> <223> C-term OH <400> 70 Ile Gly Leu His Asp Pro Thr Gln Gly Thr Glu Pro Ala Gly Cys 1 5 10 15 <210> 71 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term NH2 <400> 71 Ile Gly Leu His Asp Pro Thr Gln Gly Thr Glu Pro Ala Gly Cys 1 5 10 15 <210> 72 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term Ac <220> <223> C-term NH2 <400> 72 Ile Gly Leu His Asp Pro Thr Gln Gly Thr Glu Pro Ala Gly Cys 1 5 10 15 <210> 73 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 73 Ile Gly Leu His Asp Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Ala Gly 1 5 10 <210> 74 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 74 Ile Gly Leu His Asp Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Asn Gly 1 5 10 <210> 75 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term Ac <400> 75 Ile Gly Leu His Asp Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Asn Gly 1 5 10 <210> 76 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> C-term NH2 <400> 76 Ile Gly Leu His Asp Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Asn Gly 1 5 10 <210> 77 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term Ac <220> <223> C-term NH2 <400> 77 Ile Gly Leu His Asp Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Asn Gly 1 5 10 <210> 78 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 78 Ile Gly Leu His Asp Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Gln Gly Ser 1 5 10 15 <210> 79 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 79 Ile Gly Leu His Asp Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Asp Gly Ser 1 5 10 15 <210> 80 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 80 Ile Gly Leu His Asp Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Glu Gly Ser 1 5 10 15 <210> 81 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 81 Ile Gly Leu His Glu Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Asn Gly Ser 1 5 10 15 <210> 82 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 82 Ile Gly Leu His Gln Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Asn Gly Ser 1 5 10 15 <210> 83 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 83 Ile Gly Leu His Asn Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Asn Gly Ser 1 5 10 15 <210> 84 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 84 Ile Gly Leu His Glu Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Ala Gly Ser 1 5 10 15 <210> 85 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 85 Ile Gly Leu His Gln Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Ala Gly Ser 1 5 10 15 <210> 86 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 86 Ile Gly Leu His Asn Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Ala Gly Ser 1 5 10 15 <210> 87 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 87 Ile Gly Leu His Asp Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Gln Gly Ser Cys 1 5 10 15 <210> 88 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 88 Ile Gly Leu His Asp Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Asp Gly Ser Cys 1 5 10 15 <210> 89 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 89 Ile Gly Leu His Asp Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Glu Gly Ser Cys 1 5 10 15 <210> 90 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 90 Ile Gly Leu His Glu Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Asn Gly Ser Cys 1 5 10 15 <210> 91 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 91 Ile Gly Leu His Gln Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Asn Gly Ser Cys 1 5 10 15 <210> 92 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 92 Ile Gly Leu His Asn Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Asn Gly Ser Cys 1 5 10 15 <210> 93 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 93 Ile Gly Leu His Asp Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Gln Gly 1 5 10 <210> 94 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 94 Ile Gly Leu His Asp Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Asp Gly 1 5 10 <210> 95 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 95 Ile Gly Leu His Asp Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Glu Gly 1 5 10 <210> 96 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 96 Ile Gly Leu His Glu Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Asn Gly 1 5 10 <210> 97 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 97 Ile Gly Leu His Gln Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Asn Gly 1 5 10 <210> 98 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 98 Ile Gly Leu His Asn Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Asn Gly 1 5 10 <210> 99 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 99 Ile Gly Leu His Glu Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Ala Gly 1 5 10 <210> 100 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 100 Ile Gly Leu His Gln Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Ala Gly 1 5 10 <210> 101 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 101 Ile Gly Leu His Asn Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Ala Gly 1 5 10 <210> 102 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 102 Ile Gly Leu His Asp Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Gln Gly Glu 1 5 10 15 <210> 103 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 103 Ile Gly Leu His Asp Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Asp Gly Glu 1 5 10 15 <210> 104 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 104 Ile Gly Leu His Asp Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Glu Gly Glu 1 5 10 15 <210> 105 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 105 Ile Gly Leu His Glu Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Asn Gly Glu 1 5 10 15 <210> 106 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 106 Ile Gly Leu His Gln Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Asn Gly Glu 1 5 10 15 <210> 107 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 107 Ile Gly Leu His Asn Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Asn Gly Glu 1 5 10 15 <210> 108 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 108 Ile Gly Leu His Glu Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Ala Gly Glu 1 5 10 15 <210> 109 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 109 Ile Gly Leu His Gln Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Ala Gly Glu 1 5 10 15 <210> 110 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <223> N-term H <220> <223> C-term OH <400> 110 Ile Gly Leu His Asn Pro Ser His Gly Thr Leu Pro Ala Gly Glu 1 5 10 15

Claims

IGLHDPSHGTLPAGS(서열번호 7); 및 IGLHDPSHGTLPAG(서열번호 73)로 이루어진 군으로부터 선택되는 서열을 포함하는 펩티드 또는 이의 유사체.
제1항에 있어서,
IGLHDPSHGTLPAGS(서열번호 7);
IGLHDPSHGTLPAG(서열번호 73);
IGLHDPSHGTLPAGSK(서열번호 9);
IGLHDPSHGTLP(Aib)GS(서열번호 10);
IGLHDPSHGTLP(N-메틸-L-Ala)GS(서열번호 11);
Ac-IGLHDPSHGTLPAGS(서열번호 12);
(D-Ile)GLHDPSHGTLPAGS(서열번호 13);
(L-NorVal)GLHDPSHGTLPAGS(서열번호 14);
(L-NorLeu)GLHDPSHGTLPAGS(서열번호 15);
IGLHDPSHGTLPAG-NH2(서열번호 28);
AC-IGLHDPSHGTLPAGS-NH2(서열번호 29);
Ac-IGLHDPSHGTLPAG-NH2(서열번호 30);
IGLHDPSHGTLPAGS-NH2(서열번호 41);
IGLHDPSHGTLPAGSC(서열번호 42);
Ac-IGLHDPSHGTLPAGSC(서열번호 43);
IGLHDPSHGTLPAGSC-NH2(서열번호 44);
Ac-IGLHDPSHGTLPAGSC-NH2(서열번호 45);
IGLHDPSHGTLPAGC(서열번호 46);
Ac-IGLHDPSHGTLPAGC(서열번호 47);
IGLHDPSHGTLPAGC-NH2(서열번호 48); 및
Ac-IGLHDPSHGTLPAGC-NH2(서열번호 49)
로 이루어진 군으로부터 선택되는 펩티드 또는 유사체를 포함하는 펩티드 또는 이의 유사체.
제1항 또는 제2항에 있어서,
IGLHDPSHGTLPAGS(서열번호 7);
IGLHDPSHGTLPAG(서열번호 73);
IGLHDPSHGTLPAGSK(서열번호 9);
IGLHDPSHGTLP(Aib)GS(서열번호 10);
IGLHDPSHGTLP(N-메틸-L-Ala)GS(서열번호 11);
Ac-IGLHDPSHGTLPAGS(서열번호 12);
(D-Ile)GLHDPSHGTLPAGS(서열번호 13);
(L-NorVal)GLHDPSHGTLPAGS(서열번호 14);
(L-NorLeu)GLHDPSHGTLPAGS(서열번호 15);
IGLHDPSHGTLPAG-NH2(서열번호 28);
Ac-IGLHDPSHGTLPAGS-NH2(서열번호 29);
Ac-IGLHDPSHGTLPAG-NH2(서열번호 30);
IGLHDPSHGTLPAGS-NH2(서열번호 41);
IGLHDPSHGTLPAGSC(서열번호 42);
Ac-IGLHDPSHGTLPAGSC(서열번호 43);
IGLHDPSHGTLPAGSC-NH2(서열번호 44);
Ac-IGLHDPSHGTLPAGSC-NH2(서열번호 45);
IGLHDPSHGTLPAGC(서열번호 46);
Ac-IGLHDPSHGTLPAGC(서열번호 47);
IGLHDPSHGTLPAGC-NH2(서열번호 48); 또는
Ac-IGLHDPSHGTLPAGC-NH2(서열번호 49)
로 이루어진 펩티드 또는 이의 유사체.
서열 IGLHDPTQGTEPAGE(서열번호 50)를 포함하는 펩티드 또는 이의 유사체.
제4항에 있어서,
IGLHDPTQGTEPAGE(서열번호 50);
IGLHDPTQGTEP(Aib)GE(서열번호 51);
Ac-IGLHDPTQGTEPAGE(서열번호 52);
(D-Ile)GLHDPTQGTEPAGE(서열번호 53);
Ac-IGLHDPTQGTEPAG-NH2(서열번호 60);
Ac-IGLHDPTQGTEPAGE-NH2(서열번호 62);
IGLHDPTQGTEPAGE-NH2(서열번호 68);
IGLHDPTQGTEPAGC(서열번호 69);
Ac-IGLHDPTQGTEPAGC(서열번호 70);
IGLHDPTQGTEPAGC-NH2(서열번호 71); 및
Ac-IGLHDPTQGTEPAGC-NH2(서열번호 72)
로 이루어진 군으로부터 선택되는 펩티드 또는 유사체를 포함하는 펩티드 또는 이의 유사체.
제4항 또는 제5항에 있어서,
IGLHDPTQGTEPAGE(서열번호 50);
IGLHDPTQGTEP(Aib)GE(서열번호 51);
Ac-IGLHDPTQGTEPAGE(서열번호 52);
(D-Ile)GLHDPTQGTEPAGE(서열번호 53);
Ac-IGLHDPTQGTEPAG-NH2(서열번호 60);
Ac-IGLHDPTQGTEPAGE-NH2(서열번호 62);
IGLHDPTQGTEPAGE-NH2(서열번호 68);
IGLHDPTQGTEPAGC(서열번호 69);
Ac-IGLHDPTQGTEPAGC(서열번호 70);
IGLHDPTQGTEPAGC-NH2(서열번호 71); 또는
Ac-IGLHDPTQGTEPAGC-NH2(서열번호 72)
로 이루어진 펩티드 또는 이의 유사체.
Ac-IGLHDPSHGTLPNGS(서열번호 16);
(D-Ile)GLHDPSHGTLPNGS(서열번호 17);
Ac-IGLHDPSHGTLPNGS-NH2(서열번호 31);
IGLHDPSHGTLPNGS-NH2(서열번호 32);
IGLHDPSHGTLPNGSC(서열번호 33);
Ac-IGLHDPSHGTLPNGSC(서열번호 34);
IGLHDPSHGTLPNGSC-NH2(서열번호 35);
Ac-IGLHDPSHGTLPNGSC-NH2(서열번호 36);
IGLHDPSHGTLPNGC(서열번호 37);
Ac-IGLHDPSHGTLPNGC(서열번호 38);
IGLHDPSHGTLPNGC-NH2(서열번호 39);
Ac-IGLHDPSHGTLPNGC-NH2(서열번호 40);
IGLHDPSHGTLPNG(서열번호 74);
Ac-IGLHDPSHGTLPNG(서열번호 75);
IGLHDPSHGTLPNG-NH2(서열번호 76);
Ac-IGLHDPSHGTLPNG-NH2(서열번호 77);
H-IGLHDPSHGTLPQGS-OH(서열번호 78);
H-IGLHDPSHGTLPDGS-OH(서열번호 79);
H-IGLHDPSHGTLPEGS-OH(서열번호 80);
H-IGLHEPSHGTLPNGS-OH(서열번호 81);
H-IGLHQPSHGTLPNGS-OH(서열번호 82);
H-IGLHNPSHGTLPNGS-OH(서열번호 83);
H-IGLHEPSHGTLPAGS-OH(서열번호 84);
H-IGLHQPSHGTLPAGS-OH(서열번호 85);
H-IGLHNPSHGTLPAGS-OH(서열번호 86);
H-IGLHDPSHGTLPQGSC-OH(서열번호 87);
H-IGLHDPSHGTLPDGSC-OH(서열번호 88);
H-IGLHDPSHGTLPEGSC-OH(서열번호 89);
H-IGLHEPSHGTLPNGSC-OH(서열번호 90);
H-IGLHQPSHGTLPNGSC-OH(서열번호 91);
H-IGLHNPSHGTLPNGSC-OH(서열번호 92);
H-IGLHDPSHGTLPQG-OH(서열번호 93);
H-IGLHDPSHGTLPDG-OH(서열번호 94);
H-IGLHDPSHGTLPEG-OH(서열번호 95);
H-IGLHEPSHGTLPNG-OH(서열번호 96);
H-IGLHQPSHGTLPNG-OH(서열번호 97);
H-IGLHNPSHGTLPNG-OH(서열번호 98);
H-IGLHEPSHGTLPAG-OH(서열번호 99);
H-IGLHQPSHGTLPAG-OH(서열번호 100);
H-IGLHNPSHGTLPAG-OH(서열번호 101);
H-IGLHDPSHGTLPQGE-OH(서열번호 102);
H-IGLHDPSHGTLPDGE-OH(서열번호 103);
H-IGLHDPSHGTLPEGE-OH(서열번호 104);
H-IGLHEPSHGTLPNGE-OH(서열번호 105);
H-IGLHQPSHGTLPNGE-OH(서열번호 106);
H-IGLHNPSHGTLPNGE-OH(서열번호 107);
H-IGLHEPSHGTLPAGE-OH(서열번호 108);
H-IGLHQPSHGTLPAGE-OH(서열번호 109); 및
H-IGLHNPSHGTLPAGE-OH(서열번호 110)
로 이루어진 군으로부터 선택되는 펩티드 또는 유사체를 포함하는 펩티드 또는 이의 유사체.
제7항에 있어서,
Ac-IGLHDPSHGTLPNGS(서열번호 16);
(D-Ile)GLHDPSHGTLPNGS(서열번호 17);
Ac-IGLHDPSHGTLPNGS-NH2(서열번호 31);
IGLHDPSHGTLPNGS-NH2(서열번호 32);
IGLHDPSHGTLPNGSC(서열번호 33);
Ac-IGLHDPSHGTLPNGSC(서열번호 34);
IGLHDPSHGTLPNGSC-NH2(서열번호 35);
Ac-IGLHDPSHGTLPNGSC-NH2(서열번호 36);
IGLHDPSHGTLPNGC(서열번호 37);
Ac-IGLHDPSHGTLPNGC(서열번호 38);
IGLHDPSHGTLPNGC-NH2(서열번호 39);
Ac-IGLHDPSHGTLPNGC-NH2(서열번호 40);
IGLHDPSHGTLPNG(서열번호 74);
Ac-IGLHDPSHGTLPNG(서열번호 75);
IGLHDPSHGTLPNG-NH2(서열번호 76);
Ac-IGLHDPSHGTLPNG-NH2(서열번호 77);
H-IGLHDPSHGTLPQGS-OH(서열번호 78);
H-IGLHDPSHGTLPDGS-OH(서열번호 79);
H-IGLHDPSHGTLPEGS-OH(서열번호 80);
H-IGLHEPSHGTLPNGS-OH(서열번호 81);
H-IGLHQPSHGTLPNGS-OH(서열번호 82);
H-IGLHNPSHGTLPNGS-OH(서열번호 83);
H-IGLHEPSHGTLPAGS-OH(서열번호 84);
H-IGLHQPSHGTLPAGS-OH(서열번호 85);
H-IGLHNPSHGTLPAGS-OH(서열번호 86);
H-IGLHDPSHGTLPQGSC-OH(서열번호 87);
H-IGLHDPSHGTLPDGSC-OH(서열번호 88);
H-IGLHDPSHGTLPEGSC-OH(서열번호 89);
H-IGLHEPSHGTLPNGSC-OH(서열번호 90);
H-IGLHQPSHGTLPNGSC-OH(서열번호 91);
H-IGLHNPSHGTLPNGSC-OH(서열번호 92);
H-IGLHDPSHGTLPQG-OH(서열번호 93);
H-IGLHDPSHGTLPDG-OH(서열번호 94);
H-IGLHDPSHGTLPEG-OH(서열번호 95);
H-IGLHEPSHGTLPNG-OH(서열번호 96);
H-IGLHQPSHGTLPNG-OH(서열번호 97);
H-IGLHNPSHGTLPNG-OH(서열번호 98);
H-IGLHEPSHGTLPAG-OH(서열번호 99);
H-IGLHQPSHGTLPAG-OH(서열번호 100);
H-IGLHNPSHGTLPAG-OH(서열번호 101);
H-IGLHDPSHGTLPQGE-OH(서열번호 102);
H-IGLHDPSHGTLPDGE-OH(서열번호 103);
H-IGLHDPSHGTLPEGE-OH(서열번호 104);
H-IGLHEPSHGTLPNGE-OH(서열번호 105);
H-IGLHQPSHGTLPNGE-OH(서열번호 106);
H-IGLHNPSHGTLPNGE-OH(서열번호 107);
H-IGLHEPSHGTLPAGE-OH(서열번호 108);
H-IGLHQPSHGTLPAGE-OH(서열번호 109); 또는
H-IGLHNPSHGTLPAGE-OH(서열번호 110)
로 이루어진 펩티드 또는 이의 유사체.
Ac-IGLHDPTQGTEPNGE(서열번호 54);
(D-Ile)GLHDPTQGTEPNGE(서열번호 55);
Ac-IGLHDPTQGTEPNGE-NH2(서열번호 61);
IGLHDPTQGTEPNGE-NH2(서열번호 63);
IGLHDPTQGTEPNGC(서열번호 64);
Ac-IGLHDPTQGTEPNGC(서열번호 65);
IGLHDPTQGTEPNGC-NH2(서열번호 66); 및
Ac-IGLHDPTQGTEPNGC-NH2(서열번호 67)
로 이루어진 군으로부터 선택되는 펩티드 또는 유사체를 포함하는 펩티드 또는 이의 유사체.
제9항에 있어서,
Ac-IGLHDPTQGTEPNGE(서열번호 54);
(D-Ile)GLHDPTQGTEPNGE(서열번호 55);
Ac-IGLHDPTQGTEPNGE-NH2(서열번호 61);
IGLHDPTQGTEPNGE-NH2(서열번호 63);
IGLHDPTQGTEPNGC(서열번호 64);
Ac-IGLHDPTQGTEPNGC(서열번호 65);
IGLHDPTQGTEPNGC-NH2(서열번호 66); 또는
Ac-IGLHDPTQGTEPNGC-NH2(서열번호 67)
로 이루어진 펩티드 또는 이의 유사체.
IGLHAPSHGTLPNGS(서열번호 6);
IGLHAPSHGTLPAGS(서열번호 8);
IGLHDPSHGTEPNGS(서열번호 18);
IGLHDPSQGTLPNGS(서열번호 19);
IGLHDPTHGTLPNGS(서열번호 20);
IGLHDPSHGTLPNGE(서열번호 21);
IGLHDPSHGTLPNGK(서열번호 22);
IGLHDPSHGTLPAGK(서열번호 23);
IGLHDPSHGTEPAGS(서열번호 24);
IGLHDPSQGTLPAGS(서열번호 25);
IGLHDPTHGTLPAGS(서열번호 26);
IGLHDPSHGTLPAGE(서열번호 27);
IGLHDPTQGTEPNGS(서열번호 56);
IGLHDPTQGTEPAGS(서열번호 57);
IGLHDPTQGTLPNGE(서열번호 58); 및
IGLHDPTQGTLPAGE(서열번호 59)
로 이루어진 군으로부터 선택되는 서열을 포함하는 펩티드 또는 이의 유사체.
제11항에 있어서,
IGLHAPSHGTLPNGS(서열번호 6);
IGLHAPSHGTLPAGS(서열번호 8);
IGLHDPSHGTEPNGS(서열번호 18);
IGLHDPSQGTLPNGS(서열번호 19);
IGLHDPTHGTLPNGS(서열번호 20);
IGLHDPSHGTLPNGE(서열번호 21);
IGLHDPSHGTLPNGK(서열번호 22);
IGLHDPSHGTLPAGK(서열번호 23);
IGLHDPSHGTEPAGS(서열번호 24);
IGLHDPSQGTLPAGS(서열번호 25);
IGLHDPTHGTLPAGS(서열번호 26);
IGLHDPSHGTLPAGE(서열번호 27);
IGLHDPTQGTEPNGS(서열번호 56);
IGLHDPTQGTEPAGS(서열번호 57);
IGLHDPTQGTLPNGE(서열번호 58); 및
IGLHDPTQGTLPAGE(서열번호 59)
로 이루어진 군으로부터 선택되는 펩티드 또는 유사체를 포함하는 펩티드 또는 이의 유사체.
제11항 또는 제12항에 있어서,
IGLHAPSHGTLPNGS(서열번호 6);
IGLHAPSHGTLPAGS(서열번호 8);
IGLHDPSHGTEPNGS(서열번호 18);
IGLHDPSQGTLPNGS(서열번호 19);
IGLHDPTHGTLPNGS(서열번호 20);
IGLHDPSHGTLPNGE(서열번호 21);
IGLHDPSHGTLPNGK(서열번호 22);
IGLHDPSHGTLPAGK(서열번호 23);
IGLHDPSHGTEPAGS(서열번호 24);
IGLHDPSQGTLPAGS(서열번호 25);
IGLHDPTHGTLPAGS(서열번호 26);
IGLHDPSHGTLPAGE(서열번호 27);
IGLHDPTQGTEPNGS(서열번호 56);
IGLHDPTQGTEPAGS(서열번호 57);
IGLHDPTQGTLPNGE(서열번호 58); 또는
IGLHDPTQGTLPAGE(서열번호 59)
로 이루어진 펩티드 또는 이의 유사체.
제1항, 제2항, 제4항, 제5항, 제7항, 제9항, 제11항 및 제12항중 어느 한 항에 있어서,
개질을 포함하는 펩티드 또는 이의 유사체.
제14항에 있어서,
개질이 아세틸화된 N-말단, 아미드화된 C-말단, D 아미노산, 개질된 아미노산, 지방산 개질, 에스테르화 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 펩티드 또는 이의 유사체.
제1항, 제2항, 제4항, 제5항, 제7항, 제9항, 제11항 및 제12항중 어느 한 항에 있어서,
20개 이하의 아미노산의 길이를 갖는 펩티드 또는 이의 유사체.
제1항 내지 제16항중 어느 한 항에 따른 펩티드 또는 이의 유사체를 포함하는 조성물.
제17항에 있어서,
약학적으로 허용가능한 담체를 추가로 포함하는 조성물.
제17항 또는 제18항에 있어서,
손상된 췌장 기능을 치료하거나, 대사성 질병을 치료하거나, 신경보호 또는 신경 재생을 촉진시키거나, 간 재생을 촉진시키거나, 염증을 저해하기 위한 조성물.
제1항 내지 제16항중 어느 한 항에 따른 펩티드 또는 이의 유사체를 투여함을 포함하는, 손상된 췌장 기능과 연관된 징후 또는 증후를 개선하는 방법.
제20항에 있어서,
손상된 췌장 기능이 유형 1 당뇨병, 유형 2 당뇨병, 성인의 지연형 자가면역 당뇨병(LADA: latent autoimmune diabetes in adults), 공복 혈당 장애, 내당능 장애, 인슐린 결핍, 공복 과인슐린혈증, 인슐린 저항성, 공복 인슐린 수준 장애 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 방법.
제20항 또는 제21항에 있어서,
항당뇨병 약물을 투여하는 방법.
췌장 소도 세포를 제1항 내지 제16항중 어느 한 항에 따른 펩티드 또는 이의 유사체와 접촉시킴으로써 췌장 소도 세포의 증식을 자극함을 포함하는, 췌장 소도 세포 성장을 자극하는 방법.
하나 이상의 췌장 소도 세포를 시험관내에서 제1항 내지 제16항중 어느 한 항에 따른 펩티드 또는 이의 유사체와 접촉시킴으로써 하나 이상의 췌장 소도 세포의 증식을 자극하고 췌장 소도 세포의 개체군을 생산하는 단계를 포함하는, 췌장 소도 세포의 개체군을 생산하는 방법.
제24항에 있어서,
하나 이상의 췌장 소도 세포를 피험체로부터 수득하는 방법.
제24항 또는 제25항에 있어서,
췌장 소도 세포의 개체군을 피험체내로 이식하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
제26항에 있어서,
하나 이상의 췌장 세포를 췌장 소도 세포의 개체군이 이식되어질 피험체로부터 수득하는 방법.
제1항 내지 제16항중 어느 한 항에 따른 펩티드 또는 이의 유사체를 투여함을 포함하는, 피험체에서 췌장 소도 세포의 수를 증가시키는 방법.
제1항 내지 제16항중 어느 한 항에 따른 펩티드를 투여함을 포함하는, 피험체에서 대사성 질병과 연관된 징후 또는 증후를 개선하는 방법.
제29항에 있어서,
대사성 질병이 당뇨병, 전당뇨병 또는 대사성 증후군인 방법.
제1항 내지 제16항중 어느 한 항에 따른 펩티드 또는 이의 유사체를 당뇨병 피험체에게 투여함으로써, 내당능 장애, 혈당, 공복 혈당, 식후 혈당, 인슐린 결핍, 공복 과인슐린혈증, 인슐린 저항성, 공복 인슐린 수준 장애, 글리코실화된 헤모글로빈(HbAlc), 아르기닌-자극된 C-펩티드(AUC) 또는 이들의 조합을 당뇨병 피험체에서 감소시키는 방법.
신경 세포를 제1항 내지 제16항중 어느 한 항에 따른 펩티드 또는 이의 유사체와 접촉시킴을 포함하는, 신경보호 또는 신경 재생을 촉진시키는 방법.
간 세포를 제1항 내지 제16항중 어느 한 항에 따른 펩티드 또는 이의 유사체와 접촉시킴을 포함하는, 간 재생을 촉진시키는 방법.
제32항 또는 제33항에 있어서,
접촉을 시험관내에서 일으키는 방법.
제32항 또는 제33항에 있어서,
접촉을 생체내에서 일으키는 방법.
제1항 내지 제16항중 어느 한 항에 따른 펩티드 또는 이의 유사체를 투여함을 포함하는, 염증을 저해하는 방법.
Ac-IGLHDPSHGTLPAGS(서열번호 12); 및 Ac-IGLHDPSHGTLPNGS-NH2(서열번호 31)로 이루어진 군으로부터 선택되는 서열을 포함하는 펩티드 또는 이의 유사체.
제37항에 있어서,
Ac-IGLHDPSHGTLPAGS(서열번호 12); 또는 Ac-IGLHDPSHGTLPNGS-NH2(서열번호 31)로 이루어진 펩티드 또는 이의 유사체.
제37항에 있어서,
개질을 포함하는 펩티드 또는 이의 유사체.
제37항 내지 제39항중 어느 한 항에 따른 펩티드 또는 이의 유사체, 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학 조성물.
췌장 기능이 손상된 인간 환자를 치료하기 위한 약제의 제조에 있어서, 제1항 내지 제16항 및 제37항 내지 제39항중 어느 한 항에 따른 펩티드 또는 이의 유사체의 용도.
제41항에 있어서,
췌장 기능이 손상된 인간 환자가 유형 1 당뇨병, 유형 2 당뇨병, 성인의 지연형 자가면역 당뇨병(LADA), 공복 혈당 장애, 내당능 장애, 인슐린 결핍, 공복 과인슐린혈증, 인슐린 저항성, 공복 인슐린 수준 장애 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 질병 또는 증상을 앓는 펩티드 또는 이의 유사체의 용도.
췌장 소도 세포 성장을 자극하기 위한 약제의 제조에 있어서, 제1항 내지 제16항 및 제37항 내지 제39항중 어느 한 항에 따른 펩티드 또는 이의 유사체의 용도.
췌장 소도 세포의 개체군을 생산하기 위한 약제의 제조에 있어서, 제1항 내지 제16항 및 제37항 내지 제39항중 어느 한 항에 따른 펩티드 또는 이의 유사체의 용도.
인간에서 췌장 소도 세포의 수를 증가시키기 위한 약제의 제조에 있어서, 제1항 내지 제16항 및 제37항 내지 제39항중 어느 한 항에 따른 펩티드 또는 이의 유사체의 용도.
대사성 질병을 앓는 인간 환자를 치료하기 위한 약제의 제조에 있어서, 제1항 내지 제16항 및 제37항 내지 제39항중 어느 한 항에 따른 펩티드 또는 이의 유사체의 용도.
제46항에 있어서,
대사성 질병이 당뇨병, 전당뇨병 또는 대사성 증후군인 펩티드 또는 이의 유사체의 용도.
내당능 장애, 상승된 혈당, 상승된 공복 혈당, 상승된 식후 혈당, 인슐린 결핍, 공복 과인슐린혈증, 인슐린 저항성, 공복 인슐린 수준 장애, 글리코실화된 헤모글로빈(HbAlc), 아르기닌-자극된 C-펩티드(AUC) 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 증상을 당뇨병 피험체에서 치료하기 위한 약제의 제조에 있어서, 제1항 내지 제16항 및 제37항 내지 제39항중 어느 한 항에 따른 펩티드 또는 이의 유사체의 용도.
신경보호를 촉진시키거나, 신경 재생을 촉진시키거나, 간 재생을 촉진시키거나, 염증을 저해하기 위한 약제의 제조에 있어서, 제1항 내지 제16항 및 제37항 내지 제39항중 어느 한 항에 따른 펩티드 또는 이의 유사체의 용도.
부분적 췌장 절제술을 받은 인간 환자를 치료하기 위한 약제의 제조에 있어서, 제1항 내지 제16항 및 제37항 내지 제39항중 어느 한 항에 따른 펩티드 또는 이의 유사체의 용도.