KR20160001131A - COSMETIC COMPOSITION COMPRISING Aconogonum polymorphum EXTRACT FOR SKIN WHITENING - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 처진뽕나무(Morus alba for . pendula) 추출물 또는 싱아(Aconogonum polymorphum) 추출물을 포함하는 미백 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 처진뽕나무 추출물 또는 싱아 추출물로부터 유래한 미백 활성 성분을 포함하여 멜라닌 생성 기작에 중요한 효소인 티로시나제(tyrosinase)의 활성을 억제함으로써 멜라닌 생성을 억제할 수 있어, 우수한 미백 효과를 나타낼 수 있는 미백 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention is based on the finding that the morula alba for . pendula extract or Acinogonum The present invention relates to a whitening cosmetic composition comprising a mulberry extract and a polymorphum extract. More particularly, the present invention relates to a whitening cosmetic composition comprising a whitening active ingredient derived from a perennial mulberry extract or a Singai extract and inhibiting the activity of tyrosinase, To a whitening cosmetic composition capable of exhibiting an excellent whitening effect.
사람의 피부색은 크게 멜라닌의 양, 헤모글로빈, 카로틴 등에 의해 결정되는데 이 중에서 표피의 기저 세포층에 존재하는 멜라닌 형성 세포에 의해 합성되는 멜라닌이라는 퀴논복합체가 가장 중요한 역할을 한다. 멜라닌(melanin)은 유멜라닌(eumelanin)과 페오멜라닌(pheomelanin)으로 나뉠 수 있다. 유멜라닌(eumelanin)은 입자형 색소로 색깔이 더 진하고 어두운 흑갈색이며, 크기가 크고 동양인이나 흑인의 피부에 많다. 페오멜라닌(pheomelanin)은 분사형 색소로 적갈색(노란색)의 연한 색이고, 크기가 작으며 백인의 피부에 많다. 멜라닌은 표피의 기저층에 존재하는 멜라닌 세포에서 티로신(tyrosine)이 효소 및 비효소적 산화반응을 거쳐 생성된다. 멜라닌 생성 메커니즘은 세포 내의 티로신(tyrosine)을 기질로 하여 티로시나제(tyrosinase)라는 효소가 도파퀴논(DOPAquinone)을 생성시키며, 도파퀴논으로부터 자동산화 반응과 효소 반응을 거쳐 공중합체인 멜라닌이 생성된다.Human skin color is largely determined by the amount of melanin, hemoglobin, carotene, etc. Among them, melanin synthesized by melanin-forming cells in the basal cell layer of the epidermis plays the most important role. Melanin can be divided into eumelanin and pheomelanin. Eumelanin is a granular pigment that is darker in color and darker in color, larger in size and more abundant in Asian or African skin. Pheomelanin is a reddish brown (yellow) light color, small in size and abundant in white skin. Melanin is produced by enzymatic and nonenzymatic oxidation of tyrosine in melanocytes in the basal layer of the epidermis. The mechanism of melanogenesis is tyrosine, a tyrosine enzyme, which produces DOPAquinone, which undergoes autoxidation and enzymatic reaction from dopaquinone to produce melanin, a copolymer.
멜라닌 생성의 원인과 기작이 밝혀지면서, 멜라닌 생성 과정에 관여하는 효소인 티로시나제(tyrosinase)의 활성 저해효과를 갖는 물질들을 화장료에 배합하거나, 멜라닌 생성과정 중의 일부 반응을 저해함으로써 멜라닌의 생성을 감소시키는 방법이 일반적으로 사용되고 있다. 이러한 목적으로 사용되고 있는 대표적인 물질로는 아스코르빈산, 코직산, 히드로퀴논 및 상백피 추출물, 감초 추출물 등의 식물추출물이 있다. 그러나, 코직산의 경우, 우수한 티로시나제 활성 저해 작용을 갖는 반면 화장품에 배합 시 변색 및 경시 변화에 따른 역가 저하 등 안정성에 문제점이 있으며, 피부 자극이 커 사용상 한계가 있다. 아스코르빈산은 티로시나제 활성 저해 효과가 낮을뿐더러 분자 자체의 안정성이 낮아 멜라닌 생성 억제제로 적합하지 않으며, 히드로퀴논은 피부에 대한 자극이 높아 안전성 문제로현재 화장품 배합 시에 그 사용성이 제한되고 있다. As the causes and mechanisms of melanin production are revealed, it is possible to reduce the production of melanin by mixing substances having the inhibitory effect of tyrosinase, an enzyme involved in melanin production, in cosmetics or inhibiting some reactions during melanin production Methods are commonly used. Representative materials used for this purpose include plant extracts such as ascorbic acid, kojic acid, hydroquinone, and extracts of Cabbage and licorice. However, kojic acid has excellent tyrosinase activity inhibiting action, but has problems in stability such as discoloration and decrease in potency due to aging change when it is added to cosmetics, and skin irritation is high due to its use limit. Ascorbic acid has a low inhibitory effect on tyrosinase activity and is not suitable as an inhibitor of melanogenesis due to its low molecular stability. Hydroquinone has a high stimulation to the skin, which is a safety problem and its usability is limited at present in cosmetic formulations.
그러나, 설문조사에서 우리나라 여성들이 가장 먼저 해결하고 싶은 피부 고민 중 1위로 피부의 색소 침착을 꼽고 있을 정도로, 미백 화장품에 대한 여성들의 관심은 매우 높으며, 이에 따라, 미백효과가 우수하면서도 피부 자극이 적은 화장료 조성물의 개발이 시급하다. 이에 본 발명자들은 미백 활성 성분을 포함하는 식물 성분에 대해 검토하게 되었다. However, in the questionnaire survey, it is considered that women's interest in whitening cosmetics is so high that Korean women are ranked first among the skin troubles that they want to solve first, and that skin pigmentation is so high that the whitening effect is excellent, Development of a cosmetic composition is urgent. Accordingly, the inventors of the present invention have studied a plant component containing a whitening active ingredient.
우리나라에는 약 4,500여종의 식물이 자생하고 있으며 이들 자원 식물들은 작물로서 개발 가능성과 개발 필요성이 높은 식물들이 많이 있는데 최근 자연과학의 발달로 이들 자원식물들에 대한 관심이 증가되면서 인간이 유용하게 이용하기 위한 연구가 활발하게 이루어지고 있다. 본 발명자들은 우리나라에 자생하는 식물 중 처진뽕나무(Morus alba for . pendula) 및 싱아(Aconogonum polymorphum)의 미백 활성을 검토하여 그 효과를 확인함으로써 본 발명을 완성시키게 되었다.There are about 4,500 kinds of plants in Korea. These plants are crops, and many plants have high development potential and development necessity. Recently, with the development of natural science, interest in these resource plants has increased, Research is actively being carried out. The inventors of the present invention have found that, among the plants native to Korea, Morus alba for . pendula ) and Singh ( Aconogonum polymorphum) And confirming the effect thereof, thereby completing the present invention.
본 발명의 목적은 천연 식물 추출물을 이용한 미백 효과가 우수한 미백 화장료 조성물을 제공하고자 하는 것으로, 보다 구체적으로는 처진뽕나무 추출물 또는 싱아 추출물로부터 유래한 미백 활성 성분을 유효성분으로 포함하여, 저농도에서도 멜라닌 생성 기작에 중요한 효소인 티로시나제 효소를 억제하고, 멜라닌 생성을 억제하여 미백 효과를 나타낼 수 있는 미백 화장료 조성물을 제공하는 데 있다.It is an object of the present invention to provide a whitening cosmetic composition having excellent whitening effect using a natural plant extract, and more specifically, to provide a whitening cosmetic composition containing a whitening active ingredient derived from a perennial mulberry extract or Sinai extract as an active ingredient, The present invention provides a whitening cosmetic composition capable of inhibiting tyrosinase enzyme which is an important enzyme in a mechanism and inhibiting melanin production to exhibit a whitening effect.
상기 목적의 달성을 위하여, 본 발명은 처진뽕나무 추출물 또는 싱아 추출물로부터 유래한 미백 활성 성분을 유효성분으로 포함하는 미백 화장료 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a whitening cosmetic composition comprising, as an active ingredient, a whitening active ingredient derived from a perennial mulberry extract or Sinai extract.
본 발명의 미백 화장료 조성물은 처진뽕나무 또는 싱아 추출물로부터 유래한 미백 활성 성분을 유효성분으로 포함하므로, 멜라닌 생성 기작에 중요한 효소인 티로시나제(tyrosinase)의 활성을 억제하여 멜라닌 생성을 억제함으로써 현저한 미백 효과를 나타내므로, 미백 효과를 나타내는 화장품에 유용하게 사용될 수 있다. Since the whitening cosmetic composition of the present invention contains the whitening active ingredient derived from the dried mulberry or ssingae extract as an active ingredient, it inhibits the activity of tyrosinase, which is an important enzyme in the melanin production mechanism, and inhibits melanin production, thereby achieving a remarkable whitening effect Therefore, it can be usefully used in cosmetics showing a whitening effect.
도 1은 처진뽕나무 추출물에 의한 티로시나제 활성 억제율 결과를 나타낸 그래프이다.
도 2는 본 발명의 싱아 추출물에 의한 티로시나제 활성 억제율 결과를 나타낸 그래프이다
도 3은 본 발명의 처진뽕나무 추출물의 세포생존율 결과를 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 싱아 추출물의 세포생존율 결과를 나타낸 그래프이다.
도 5는 본 발명의 처진뽕나무 추출물에 의한 멜라닌 활성 억제율 결과를 나타낸 그래프이다.
도 6은 본 발명의 싱아 추출물에 의한 멜라닌 활성 억제율 결과를 나타낸 그래프이다.FIG. 1 is a graph showing the results of inhibition of tyrosinase activity by drooling mulberry extract. FIG.
2 is a graph showing the results of inhibition of tyrosinase activity by the extract of Singh of the present invention
3 is a graph showing the cell survival rate of the perennial mulberry extract of the present invention.
4 is a graph showing the cell survival rate of the extract of Sinai of the present invention.
5 is a graph showing the results of inhibition of melanin activity by the perennial mulberry extract of the present invention.
FIG. 6 is a graph showing the results of inhibition of melanin activity by the extract of Sinai of the present invention.
본 발명의 미백 화장료 조성물은 처진뽕나무(Morus alba for . pendula) 추출물 또는 싱아(Aconogonum polymorphum) 추출물로부터 유래한 미백 활성 성분을 유효성분으로 포함한다. The whitening cosmetic composition of the present invention can be used as a cosmetic ingredient for the skin of Morus alba for . pendula extract or Acinogonum polymorphum ) extract as an active ingredient.
상기의 미백 화장료 조성물은 처진뽕나무 추출물 또는 싱아 추출물을 유효성분으로 포함하여 미백 효과를 발휘할 수 있으며, 보다 구체적으로는 상기 처진뽕나무 추출물 또는 싱아 추출물로부터 유래한 미백 활성 성분을 유효성분으로 포함하므로, 현저한 티로시나제 활성 억제 효과를 나타내어 멜라닌 생합성 억제 효과를 나타낼 수 있다. The whitening cosmetic composition as described above can exhibit a whitening effect by containing a perennial mulberry extract or an extract of Singh as an active ingredient. More specifically, it contains a whitening active ingredient derived from the perennial mulberry extract or Sinai extract as an active ingredient, Thereby exhibiting an inhibitory effect on tyrosinase activity and exhibiting an effect of suppressing melanin biosynthesis.
상기 처진뽕나무(Morus alba for. pendula)는 그 잎이 난상 원형 또는 긴 타원상 난형이며 3~5개로 갈라지고 둔두 또는 첨두이며 깊은 심장저이고 길이 10cm로서 가장자리에 둔한 톱니가 있으며 끝이 뾰족하고 표면은 거칠거나 평활하며 뒷면 맥 위에 잔털이 있다. 엽병도 길이 2~2.5 cm로서 잔털이 있다. 열매는 액질(液質)이며 6월에 흑색으로 익는다. 과실 이삭은 구형 또는 타원형으로 길이 1~2.5 cm이다. 꽃은 이가화로서 6월에 피고 수꽃이삭은 새가지 밑부분의 엽액에서 밑으로 처지는 꼬리화서에 달리고 장타원형이며 암꽃이삭은 길이 5~10 mm이고 광타원형이고 꽃은 4개이며 화주(花柱)는 짧다. 자방은 털이 없다. 산뽕나무에 비해 화주가 짧다. 수피는 회갈색이다. 소지는 회갈색 또는 회백색이고 잔털이 있으나 점차 없어지고 가지가 밑으로 처졌다. 근피(根皮)를 상백피(桑白皮)라 한다. Morus alba for pendula is ovate or long ovate ovate with 3 ~ 5 branches, dull or peak, deep heart bottom, length 10cm, dull serrate on edge, pointed end, Is rough or smooth and has a hairs on the back vein. The petiole is 2 to 2.5 cm long and has fine hairs. The fruit is liquid (liquid quality) and ripens in black in June. Fruit ear is spherical or elliptical with a length of 1 to 2.5 cm. Flower is bloomed in June as an iris, and the flower of a male flower hangs on a tail horn that hangs down from the leaf of the lower part of a new branch. The female flower has a length of 5 ~ 10 mm, a light oval, 4 flowers, Is short. The nest is hairless. Shippers are shorter than mulberry trees. The bark is gray brown. The base is grayish brown or grayish white and has fine hairs, but gradually disappears and branches are bent downward. Mycosis (root skin) is called mallow white (桑 白皮).
상기 싱아(Aconogonum polymorphum)는 숭애·넓은잎싱아 라고도 한다. 산기슭에서 흔히 자라며 높이 약 1m이다. 전초는 굵고 곧게 선다. 가지가 많이 갈라지며 털이 없다. 잎은 어긋나고 바소꼴이며 길이 12∼15 cm이다. 양끝이 좁고 가장자리에 물결 모양의 톱니가 있다. 잎집처럼 생긴 턱잎은 막질(膜質:얇은 종이처럼 반투명한 것)이고 털과 맥이 있으며 곧 갈라진다. 꽃은 6∼8월에 흰색으로 피고 윗부분의 잎겨드랑이와 가지 끝에 커다란 원추꽃차례로 달린다. 포는 작고 각각 2∼3개의 꽃이 달리며 작은 꽃 자루 보다 길다. 화피갈래조각은 길이 약 3mm이다. 꽃받침은 5개이고 수술은 8개이다. 열매는 세모진 수과(瘦果)로서 길이 5mm 정도이고 화피 길이의 2배 정도이며 10월에 익는다. 번식은 종자나 포기나누기로 한다. 어린 대는 신맛이 있으며 날로 먹는다. 한국·중국에 분포한다. The above-mentioned Aconogonum polymorphum is also referred to as a peony leaf. It grows at the foot of the mountain and is about 1 meter high. The outpost is thick and straight. Branches are split a lot and have no hair. Leaves are slanting and small, 12 ~ 15 cm long. Both ends are narrow and wavy sawtooth on edge. The leaflet-like stipule is membranous (translucent like thin paper), with hair and veins, and soon split. Flowers bloom in June-August, white, with axilla on the upper part and a large conical flower on the end of the branch. Bracts are small and each have two or three flowers and are longer than small flower sacks. The shrub fragments are about 3mm in length. There are 5 calyxes and 8 stamens. The fruit is 3mm long and about 5mm long, about twice the length of the horn, ripened in October. Breeding is done by seeding or giving up. Childhood is sour and eats raw. It is distributed in Korea and China.
상기 처진뽕나무 추출물은 상기 처진 뽕나무의 전초 추출물, 잎 추출물, 줄기 추출물, 열매 추출물, 뿌리 추출물, 종자 추출물, 및 잔가지 추출물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있고, 바람직하게는 줄기 추출물, 잔가지 추출물, 또는 이들의 혼합물일 수 있다. The perennial mulberry extract may be at least one selected from the group consisting of plant extracts, leaf extracts, stem extracts, fruit extracts, root extracts, seed extracts and twigs extracts of the perennial mulberry, Or a mixture thereof.
상기 싱아 추출물은 상기 싱아의 전초 추출물, 잎 추출물, 줄기 추출물, 열매 추출물, 뿌리 추출물, 종자 추출물, 및 잔가지 추출물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있고, 바람직하게는 전초 추출물, 잔가지 추출물, 또는 이들의 혼합물일 수 있다. The Sinai extract may be at least one kind selected from the group consisting of a seedling extract, a leaf extract, a stem extract, a fruit extract, a root extract, a seed extract and a twig extract of the sina, ≪ / RTI >
상기 처진뽕나무 추출물 또는 싱아 추출물은, 물, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 헥산, 메틸렌클로라이드, 에틸아세테이트, 부탄올, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 디프로필렌글리콜, 클로로포름, 및 글리세린으로 이루어진 군에서 선택되는 1종의 용매 또는 2종 이상의 혼합 용매로 추출하여 얻어진 추출물일 수 있고, 바람직하게는 물, 메탄올, 에탄올, 헥산, 및 부틸렌글리콜로 이루어진 군에서 선택되는 1종의 용매 또는 2종 이상의 혼합 용매로 추출하여 얻어진 추출물일 수 있고, 더욱 바람직하게는 메탄올로 추출하여 얻어진 추출물일 수 있다. 특히, 메탄올로 추출하여 얻어진 추출물은 더욱 우수한 티로시나제 활성 저해효과를 나타낼 수 있다. The perennial mulberry extract or Sinai extract may be one selected from the group consisting of water, methanol, ethanol, propanol, hexane, methylene chloride, ethyl acetate, butanol, propylene glycol, butylene glycol, dipropylene glycol, chloroform, , Or an extract obtained by extracting with a mixed solvent of two or more kinds. Preferably, the extract may be extracted with one kind of solvent selected from the group consisting of water, methanol, ethanol, hexane, and butylene glycol, And more preferably, an extract obtained by extracting with methanol. Especially, the extract obtained by extracting with methanol can exhibit more excellent tyrosinase activity inhibiting effect.
상기 처진뽕나무 추출물 또는 싱아 추출물의 티로시나제 활성 저해 효과를 측정한 결과, 공지된 티로시나제 생성억제 효과를 가지는 알부틴과 비교하면, 저농도에서도 높은 티로시나제 활성 억제 효과를 구현할 수 있다. As a result of measuring the inhibitory effect of tyrosinase activity of the perennial mulberry extract or Sinai extract, it is possible to achieve a high tyrosinase activity inhibitory effect even at a low concentration as compared with arbutin having a known tyrosinase production inhibitory effect.
상기 처진뽕나무 추출물 또는 싱아 추출물은 상기한 용매를 추출용매로 하여 45 내지 120℃에서 30분 내지 24시간 가열하여 열수 추출하는 방법, 및 5 내지 40℃에서 30분 내지 15일간 침지하여 진탕 추출하는 방법 중에서 선택된 1종 이상의 추출 방법을 사용하여 추출될 수 있으며, 상기 방법을 이용하는 경우 추출물의 수율을 향상시킬 수 있으므로 바람직하다. The above-mentioned perennial mulberry extract or Sinai extract is prepared by heating the above-mentioned solvent at 45 to 120 ° C for 30 minutes to 24 hours with hot water extraction, and dipping at 5 to 40 ° C for 30 minutes to 15 days for shaking , And the use of the above method is preferable because the yield of the extract can be improved.
상기 추출용매의 사용량은 특별히 한정 되지는 않지만, 상기 처진뽕나무 추출물 또는 싱아인 식물 대비 과소량을 사용하면 추출물이 충분히 추출될 수 없고, 과다량을 사용하면 추출용매를 제거하고 건조 추출물을 얻는 데 시간과 비용이 많이 들게 된다. The amount of the extraction solvent to be used is not particularly limited. However, if the amount of the extraction solvent is too small compared to the above-mentioned perennial mulberry extract or Singhin plant, the extraction can not be sufficiently extracted. If an excessive amount is used, And it becomes costly.
이때, 열수 추출할 경우 처진뽕나무 시료가 충분히 포함되도록 하고, 추출 효율을 높이기 위해 가온된 상태로 추출을 행하는 것이 필요하다. 온도가 너무 낮으면 가온의 이점을 충분히 살리기 어렵고 추출에 많은 시간이 필요하며, 온도가 너무 높으면 미백 활성 물질과 같은 유용 물질의 분해가 생길 수 있다. 또한, 진탕 추출할 경우 상온에서 추출할 수 있으며, 분말 상태의 시료를 충분한 시간, 가령 3일 정도의 시간 동안 충분한 추출용매에 침지하여 추출이 충분히 이루어지도록 하며, 추출이 충분하지 못한 경우 반복 공정을 통하거나 추출 시간을 증가시켜 추출량을 늘릴 수도 있다.At this time, when hot water extraction is carried out, it is necessary to sufficiently include the suspended mulberry sample and perform extraction in a warmed state in order to increase the extraction efficiency. If the temperature is too low, it is difficult to fully utilize the advantage of warming, and it takes a long time for extraction. If the temperature is too high, decomposition of useful materials such as whitening active material may occur. In case of shaking, it can be extracted at room temperature. The sample in powder form is immersed in a sufficient extraction solvent for a sufficient time, for example, about 3 days, so that the extraction can be sufficiently performed. If the extraction is not sufficient, Or increase the extraction volume by increasing the extraction time.
상기와 같은 방법으로부터 추출된 처진뽕나무 추출물 또는 싱아 추출물은 미백 화장료 조성물의 총 중량에 대하여 0.001 내지 30 중량% 포함될 수 있다. The perennial mulberry extract or Sinai extract extracted from the above method may be contained in an amount of 0.001 to 30% by weight based on the total weight of the whitening cosmetic composition.
바람직하게는, 상기 처진뽕나무 추출물은 미백 화장료 조성물의 총 중량에 대하여 0.005 중량% 이상 포함될 수 있고, 상기 싱아 추출물은 미백 화장료 조성물의 총 중량에 대하여 0.01 중량% 이하 포함될 수 있으며, 더욱 바람직하게는 상기 처진뽕나무 추출물 및 싱아 추출물은 미백 화장료 조성물의 총 중량에 대하여 0.005 내지 0.01 중량% 포함될 수 있다. Preferably, the perennial mulberry extract may be contained in an amount of 0.005% by weight or more based on the total weight of the whitening cosmetic composition, and the extract of Singh can be contained in an amount of 0.01% by weight or less based on the total weight of the whitening cosmetic composition, The perennial extract of Mulberry and the extract of Sina may be contained in an amount of 0.005 to 0.01% by weight based on the total weight of the whitening cosmetic composition.
상기 처진뽕나무 추출물 또는 싱아 추출물이 각각 미백 화장료 조성물의 총 중량에 대하여 0.005 중량% 미만인 경우, 미백 활성 효과를 충분히 얻을 수 없기 때문에 피부 미백 화장료로서의 기능이 떨어지고, 0.01 중량%를 초과하는 경우에는 세포 독성에 의한 안전성의 문제점이 있다.If the perennial mulberry extract or the extract of Sinai is less than 0.005% by weight based on the total weight of the whitening cosmetic composition, the whitening activity effect can not be sufficiently obtained and the function as a skin whitening cosmetic is deteriorated. If it exceeds 0.01% by weight, There is a problem of safety due to the above.
상기와 같은 방법으로부터 제조된 처진뽕나무 추출물 또는 싱아 추출물은 미백 활성 성분을 포함하므로, 현저한 티로시나제 활성 억제 효과 및 멜라닌 생합성 억제 효과를 나타낼 수 있다. Since the perennial mulberry extract or Sinai extract prepared from the above method contains a whitening active ingredient, it can exhibit a remarkable effect of inhibiting tyrosinase activity and inhibiting melanin biosynthesis.
본 발명의 미백 화장료 조성물의 바람직한 제형은 특별히 제한되지 않지만, 바람직하게는 유연화장수, 영양화장수, 영양에센스, 영양크림, 바디크림, 및 팩으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나일 수 있다.
The preferred formulation of the whitening cosmetic composition of the present invention is not particularly limited, but may be any one selected from the group consisting of softening agent, nutritional lotion, nutritional essence, nutritional cream, body cream, and pack.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다. 본 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것이며, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. The present invention is intended to more specifically illustrate the present invention, and the scope of the present invention is not limited to these embodiments.
실시예Example
본 명세서 전체에 걸쳐, 특정 물질의 농도를 나타내기 위하여 사용되는 "%"는 별도의 언급이 없는 경우, 고체/고체는 (중량/중량) %, 고체/액체는 (중량/부피) %, 그리고 액체/액체는 (부피/부피) %이다.
Throughout this specification, "%" used to denote the concentration of a particular substance is intended to include solids / solids (wt / wt), solid / liquid (wt / The liquid / liquid is (vol / vol)%.
가. end.
처진뽕나무로부터From the drooping mulberry tree
유래된Derived
추출물 제조 Extract preparation
<< 실시예Example 1> 1> 열수Heat number 추출물 extract
처진뽕나무 줄기를 총 중량 대비 5배의 정제수에 넣고 105℃에서 5시간 열수 추출하였다. 추출공정이 종료되면 거름종이(Whatman paper No. 1)로 거르고, 0.45 ㎛의 멤브레인 필터(TF-450, 60173, PALL Life Sciences)로 재여과한 후 다음으로 물을 제거하기 위해 우선 회전 진공 증발기(rotary vacuum evaporator)로 농축하고 이어서 동결 건조하는 방법을 사용하였다. 이로써, 건조중량 기준 처진뽕나무 열수추출물 15.3 g을 수득할 수 있었다.
The stalks of drooping mulberry were placed in purified water of 5 times the total weight and subjected to hot water extraction at 105 ° C for 5 hours. When the extraction process is finished, it is filtered with Whatman paper No. 1, re-filtered through 0.45 ㎛ membrane filter (TF-450, 60173, PALL Life Sciences) rotary vacuum evaporator), followed by lyophilization. Thus, 15.3 g of dried mulberry hydrothermal extract based on dry weight was obtained.
<< 실시예Example 2> 메탄올 추출물 2> Methanol extract
처진뽕나무 줄기를 총 중량 대비 3배의 추출용매(80% 메탄올)를 가하여 25℃에서 72시간 동안 진탕 추출하는 공정을 3회 진행한 뒤 추출액을 거름종이로 여과하고 0.45 ㎛의 멤브레인 필터(Supor®-450, 60173, PALL Life Sciences)로 재 여과한 후, 회전 진공 증발기로 농축하고 동결 건조하여 건조 중량 기준 처진뽕나무 메탄올 추출물 20.04 g을 수득할 수 있었다.
The extracts were filtered with a filter paper and filtered through a 0.45 ㎛ membrane filter (Supor®). The filtrate was filtered through a filter paper, -450, 60173, PALL Life Sciences), concentrated using a rotary vacuum evaporator, and lyophilized to obtain 20.04 g of a methanol extract from the dried mugwort based on the dry weight.
<< 실시예Example 3> 에탄올 추출물 3> Ethanol extract
처진뽕나무 줄기를 총 중량 대비 3배의 추출용매(70% 에탄올)를 가하여 25℃에서 72시간 동안 진탕 추출하는 공정을 3회 진행한 뒤 추출액을 거름종이로 여과하고 0.45 ㎛의 멤브레인 필터(Supor®-450, 60173, PALL Life Sciences)로 재 여과한 후, 회전 진공 증발기로 농축하고 동결 건조하여 건조 중량 기준 처진뽕나무 에탄올 추출물 6.78 g을 수득할 수 있었다.
The extracts were filtered with filter paper and filtered through a 0.45 ㎛ membrane filter (Supor®). The extracts were washed three times with distilled water of distilled mulberry stem and extracted three times with 70% ethanol at 25 ° C for 72 hours. -450, 60173, PALL Life Sciences), concentrated using a rotary vacuum evaporator, and lyophilized to obtain 6.78 g of dried mulberry ethanol extract based on dry weight.
<< 실시예Example 4> 4> 부틸렌글리콜Butylene glycol 추출물 extract
처진뽕나무 줄기를 총 중량 대비 50배의 추출용매(30% 부틸렌글리콜)를 가하여 25℃에서 72시간 동안 진탕 추출하는 공정을 1회 진행한 뒤 추출액을 거름종이로 여과하고 0.45 ㎛의 멤브레인 필터(Supor®-450, 60173, PALL Life Sciences)로 재 여과 하였다.
The extracts were filtered through filter paper and filtered through a membrane filter (0.45 ㎛). The filtrate was filtered through a filter paper Supor®-450, 60173, PALL Life Sciences).
<< 실시예Example 5> 5> 프로필렌글리콜Propylene glycol 추출물 extract
처진뽕나무 줄기를 총 중량 대비 50배의 추출용매(50% 프로필렌렌글리콜)를 가하여 25℃에서 72시간 동안 진탕 추출하는 공정을 1회 진행한 뒤 추출액을 거름종이로 여과하고 0.45 ㎛의 멤브레인 필터(Supor®-450, 60173, PALL Life Sciences)로 재 여과 하였다.
(50% propylene glycol) was added to the stem of the perennial mulberry tree, and the mixture was shaken at 25 ° C for 72 hours. The extract was filtered through filter paper and filtered through a 0.45 ㎛ membrane filter Supor®-450, 60173, PALL Life Sciences).
나. I.
싱아로부터From Singh
유래된Derived
추출물 제조 Extract preparation
<< 실시예Example 6> 6> 열수Heat number 추출물 extract
싱아 전초를 총 중량 대비 5배의 정제수에 넣고 105℃에서 5시간 열수 추출하였다. 추출공정이 종료되면 거름종이(Whatman paper No. 1)로 거르고, 0.45 ㎛의 멤브레인 필터(TF-450, 60173, PALL Life Sciences)로 재여과한 후 다음으로 물을 제거하기 위해 우선 회전 진공 증발기로 농축하고 이어서 동결 건조하는 방법을 사용하였다. 이로써, 건조중량 기준 싱아 열수추출물 12.1 g을 수득할 수 있었다.
Sinai outpost was placed in purified water of 5 times the total weight and subjected to hot water extraction at 105 ° C for 5 hours. When the extraction process is completed, it is filtered with Whatman paper No. 1, re-filtered with 0.45 μm membrane filter (TF-450, 60173, PALL Life Sciences) and then firstly washed with a rotary vacuum evaporator Concentrated and then lyophilized. Thereby, 12.1 g of dry hot water extract was obtained.
<< 실시예Example 7> 메탄올 추출물 7> methanol extract
싱아 전초를 총 중량 대비 3배의 추출용매(80% 메탄올)를 가하여 25℃에서 72시간 동안 진탕 추출하는 공정을 3회 진행한 뒤 추출액을 거름종이로 여과하고 0.45 ㎛의 멤브레인 필터(Supor®-450, 60173, PALL Life Sciences)로 재 여과한 후, 회전 진공 증발기로 농축하고 동결 건조하여 건조 중량 기준 싱아 메탄올 추출물 17.2 g을 수득할 수 있었다.
The extracts were filtered with filter paper and filtered through a 0.45 μm membrane filter (Supor®- 450, 60173, PALL Life Sciences), concentrated using a rotary vacuum evaporator, and lyophilized to obtain 17.2 g of a methanol extract of Shinma based on the dry weight.
<< 실시예Example 8> 에탄올 추출물 8> Ethanol extract
싱아 전초를 총 중량 대비 3배의 추출용매(70% 에탄올)를 가하여 25℃에서 72시간 동안 진탕 추출하는 공정을 3회 진행한 뒤 추출액을 거름종이로 여과하고 0.45 ㎛의 멤브레인 필터(Supor®-450, 60173, PALL Life Sciences)로 재 여과한 후, 회전 진공 증발기로 농축하고 동결 건조하여 건조 중량 기준 싱아 에탄올 추출물 4.9 g을 수득할 수 있었다.
The extract was filtered through filter paper and filtered through a 0.45 ㎛ membrane filter (Supor-R). The filtrate was filtered through a filter paper, 450, 60173, PALL Life Sciences), concentrated using a rotary vacuum evaporator, and lyophilized to obtain 4.9 g of a pure ethanol extract on a dry weight basis.
<< 실시예Example 9> 9> 부틸렌글리콜Butylene glycol 추출물 extract
싱아 전초를 총 중량 대비 50배의 추출용매(30% 부틸렌글리콜)를 가하여 25℃에서 72시간 동안 진탕 추출하는 공정을 1회 진행한 뒤 추출액을 거름종이로 여과하고 0.45 ㎛의 멤브레인 필터(Supor®-450, 60173, PALL Life Sciences)로 재 여과 하였다.
The extract was filtered through filter paper and filtered through a 0.45 ㎛ membrane filter (Supor). The filtrate was filtered through a filter paper, ≪ / RTI > ®-450, 60173, PALL Life Sciences).
<< 실시예Example 10> 10> 프로필렌글리콜Propylene glycol 추출물 extract
싱아 전초를 총 중량 대비 50배의 추출용매(50% 프로필렌렌글리콜)를 가하여 25℃에서 72시간 동안 진탕 추출하는 공정을 1회 진행한 뒤 추출액을 거름종이로 여과하고 0.45 ㎛의 멤브레인 필터(Supor®-450, 60173, PALL Life Sciences)로 여과 하였다.
The extract was filtered through a filter paper and filtered through a 0.45 ㎛ membrane filter (Supor). The filtrate was filtered through a filter paper, ≪ - > 450, 60173, PALL Life Sciences).
<<
실험예Experimental Example
1> 1>
타이로시나아제Tyrosinase
활성 저해 효과에 따른 추출물 유효성 평가 Evaluation of efficacy of extracts according to active inhibition effect
1. 부위별 평가1. Evaluation by site
실시예 2와 실시예 7에서 제조된 처진뽕나무 및 싱아의 각 부위별 메탄올 추출물에 대하여, 타이로시나아제 활성 저해 효과를 측정하였다. 이때, 타이로시나아제(tyrosinase, T3824-50KU)는 버섯에서 분리 및 정제된 것으로서 시그마사에서 구입하여 사용하였다. The inhibitory effect of tyrosinase activity on the methanol extracts of the respective parts of the perennials and the birds produced in Example 2 and Example 7 was measured. At this time, tyrosinase (T3824-50KU) was isolated and purified from mushroom and purchased from Sigma.
실시예 1과 실시예 6 에서 제조된 처진뽕나무 및 싱아의 각 부위별 메탄올 추출물을 DMSO(dimethyl sulfoxide, Wako)로 용해시키고, 다시 완충용액(0.1M Phosphate buffer pH 6.5)에 희석하여 상기 농도별 시료를 조제하여 사용하였다. 이때, 대조구는 알부틴(arbutin)을 사용하였다. 96웰 플레이트에 완충용액을 넣고 기질용액(1.5 mM tyrosine solution)을 넣은 후, 여기에 추출물 시료액을 가하고 2000 U/㎖ 타이로시나아제를 넣은 후 37℃에서 1시간 동안 반응시켰다. 이때, 대조군은 각 추출물 대신 완충용액을 넣어 준비하였다. The methanol extract of each part of the perennial mulberry and syringe prepared in Example 1 and Example 6 was dissolved in DMSO (dimethyl sulfoxide, Wako), further diluted in a buffer solution (0.1 M Phosphate buffer pH 6.5) Were prepared and used. At this time, arbutin was used as a control. A buffer solution was added to a 96-well plate, and a substrate solution (1.5 mM tyrosine solution) was added. An extract sample solution was added thereto, 2000 U / ml tyrosinase was added, and the mixture was reacted at 37 ° C for 1 hour. At this time, the control group was prepared by adding buffer solution instead of each extract.
반응완료 후, 마이크로플레이트 기록기를 이용하여 파장 490 nm에서의 흡광도를 측정하였다. 하기의 수학식 1에 의해 농도별 추출물의 타이로시나아제 활성 저해 효과를 산출하였다.
After completion of the reaction, the absorbance at a wavelength of 490 nm was measured using a microplate recorder. The tyrosinase inhibitory effect of the extract by concentration was calculated by the following equation (1).
[수학식 1][Equation 1]
타이로시나아제 활성 저해율(%)= {1-(b-b')/(a-a')} × 100 (%) = {1- (b-b ') / (a-a')} 100
(이때, a : 공시료액의 반응 후의 흡광도, b : 시료액의 반응 후의 흡광도 및 a', b' : 타이로시나아제 대신 완충용액으로 대체하여 측정한 흡광도이다.)
(A: absorbance after the reaction of the blank solution, b: absorbance after reaction of the sample solution and a ', b': absorbance measured by replacing with buffer solution instead of tyrosinase)
하기 표 1에 상기 실시예 2에서 제조된 처진뽕나무의 부위별 메탄올 추출물에 대한 타이로시나아제 활성 저해율 평가 결과를 나타내었다.Table 1 below shows the inhibition rate of tyrosinase activity of the methanol extract of the perennial mulberry produced in Example 2 above.
상기 표 1의 결과로부터, 실시예 2에서 제조된 처진뽕나무의 메탄올 추출물 중에서 처진뽕나무 줄기 부위의 추출물이 가장 높은 타이로시나아제 활성 저해율을 보였다. 상기 결과는 대조구인 알부틴보다 현저히 낮은 농도에서 더 높은 타이로시나아제 활성 억제 효과를 보였다.From the results shown in the above Table 1, the methanol extract of the perennial mulberry produced in Example 2 showed the highest inhibition rate of tyrosinase activity in the extract of the stem of the mulberry stem. The above results showed that the tyrosinase activity was inhibited at a significantly lower concentration than that of the control arbutin.
하기 표 2에 상기 실시예 7에서 제조된 싱아의 부위별 메탄올 추출물에 대한 타이로시나아제 활성 저해율 평가 결과를 나타내었다. Table 2 shows the inhibition rate of tyrosinase activity of the methanol extract of each of the strains prepared in Example 7.
상기 표 2의 결과로부터, 실시예 7에서 제조된 싱아 부위별 메탄올 추출물에서 싱아의 전초 추출물이 가장 높은 타이로시나아제 활성 저해율을 보였다. 상기 결과는 대조구인 알부틴보다 현저히 낮은 농도에서 더 높은 타이로시나아제 활성 억제 효과를 보였다.
From the results shown in the above Table 2, the extruded extracts of Sinai showed the highest inhibition rate of tyrosinase activity in the methanol extracts of the Sinai region prepared in Example 7. The above results showed that the tyrosinase activity was inhibited at a significantly lower concentration than that of the control arbutin.
2. 추출용매별 평가2. Extraction solvent evaluation
상기 표 1에서 확인된 바와 같이, 처진뽕나무 부위별 추출물 중에서 타이로시나아제 활성 저해율이 가장 높은 줄기 부위에 대하여, 추출용매별로 타이로시나아제 활성 저해 효과를 측정하였다. As shown in the above Table 1, the inhibitory effect of tyrosinase activity on the stem portion having the highest inhibition rate of tyrosinase activity was determined by the extraction solvent.
하기 표 3에 처진뽕나무 줄기 부위의 추출용매에 따른 타이로시나아제 활성 저해율 평가 결과를 나타내었다. Table 3 shows the inhibition rate of tyrosinase activity according to the extraction solvent of the stem of the mulberry stem.
상기 결과로부터, 타이로시나아제 활성 저해율이 높은 처진뽕나무 줄기 부위는 메탄올을 추출용매로 사용하였을 경우, 가장 높은 타이로시나아제 활성 저해율을 보였다.
From the above results, when the methanol extract was used as the extraction solvent, the highest inhibitory activity of tyrosinase activity was observed at the stigmata of the succulent mulberry stem with high inhibition rate of tyrosinase activity.
상기 표 2에서 확인된 바와 같이, 싱아 추출물 중에서 타이로시나아제 활성 저해율이 높은 전초에 대하여 추출용매별로 타이로시나아제 활성 저해 효과를 측정하였다. As shown in the above Table 2, inhibition activity of tyrosinase activity was measured for each of the extractants for the outbreaks of tyrosinase activity inhibition rate in the extracts of Singh.
하기 표 4에 싱아 전초의 추출용매에 따른 타이로시나아제 활성 저해율 평가 결과를 나타내었다. Table 4 below shows the results of evaluation of the inhibition rate of tyrosinase activity according to the extraction solvent of the Sinai outpost.
상기 결과로부터, 타이로시나아제 활성 저해율이 높은 싱아 전초는 메탄올을 추출용매로 사용하였을 경우, 가장 높은 타이로시나아제 활성 저해율을 보였다.
From the above results, the syringe shoots having a high inhibition rate of tyrosinase activity showed the highest inhibition rate of tyrosinase activity when methanol was used as an extraction solvent.
3. 농도별 평가3. Evaluation by concentration
상기 실험예 1에서 가장 타이로시나아제 활성 저해율이 높은 처진뽕나무 줄기 부위의 메탄올 추출물에 대하여 농도별로 타이로시나아제 활성 저해 효과를 측정하였다. In
하기 표 5 및 도 1에 실시예 2의 처진뽕나무 줄기 부위의 메탄올 추출물의 농도별 타이로시나아제 활성 저해율을 나타내었다. 이때, 대조군으로서, 비교예 1의 알부틴의 경우, 농도 500 ㎍/㎖ 조건에서 타이로시나아제 활성 저해율 49%로 관찰되었다.Table 5 and FIG. 1 show inhibition rates of tyrosinase activity by concentration of methanol extracts at the stalks of the perennial mulberry stem of Example 2. At this time, in the case of arbutin of Comparative Example 1 as a control group, inhibition rate of tyrosinase activity was observed at 49% at a concentration of 500 占 퐂 / ml.
상기 표 5의 결과로부터, 종래 타이로시나아제 활성 억제물질인 비교예 1의 알부틴보다 현저히 낮은 농도에서도 우수한 타이로시나아제 활성 저해율을 나타내는 것을 확인하였다.From the results shown in Table 5, it was confirmed that the tyrosinase inhibitory activity was excellent even at a significantly lower concentration than that of the conventional tyrosinase inhibitory substance arbutin of Comparative Example 1.
또한, 하기 표 6 및 도 2에 실시예 7의 싱아 전초의 추출물의 농도에 따른 타이로시나아제 활성 저해율을 나타내었다. 이때, 대조군으로서, 비교예 1의 알부틴의 경우, 농도 500 ㎍/㎖ 조건에서 타이로시나아제 활성 저해율 45%로 관찰되었다.In addition, the inhibitory activity of tyrosinase activity was shown in Table 6 and FIG. 2 according to the concentration of the extract of Sinai outpost of Example 7. At this time, in the case of arbutin of Comparative Example 1 as a control group, a tyrosinase inhibiting rate of 45% was observed at a concentration of 500 占 퐂 / ml.
상기 표 6의 결과로부터, 종래 타이로시나아제 활성 억제물질인 비교예 1의 알부틴보다 현저히 낮은 농도에서도 우수한 타이로시나아제 활성 저해율을 나타내는 것을 확인 하였다.
From the results shown in Table 6, it was confirmed that the tyrosinase inhibitory activity was excellent even at a significantly lower concentration than that of the conventional tyrosinase inhibitory substance arbutin of Comparative Example 1.
<< 실험예Experimental Example 2> 멜라닌 생성 억제 효과에 따른 추출물 유효성 평가 2> Evaluation of efficacy of extracts according to the inhibitory effect on melanin formation
1. 세포독성검사1. Cytotoxicity test
상기 실시예의 중 추출공정 및 효율에 있어 가장 효과적이라 판단되는 실시예 2의 방법으로 얻어진 처진뽕나무 줄기 및 싱아 전초의 세포독성을 각각 측정하였다.The cytotoxicity of the perennial mulberry stem and the pupae obtained from the method of Example 2, which is considered to be the most effective in the extraction process and efficiency of the above examples, were measured.
본 발명에 따른 상기 추출물에 대한 세포독성을 알아보기 위하여, B16F1 멜라노마 셀(mouse melanoma cell)을 적정 농도로 하여 96-웰(well) 플레이트에 분주하여 37℃, CO2 인큐베이터에서 24시간 동안 배양하였다. 이때 배지는 소혈청 10%와 항생제 1%가 포함된 DMEM/high glucose(dulbeco's modified eagle medium, Hyclone)를 이용하였다. 배양한 후 상기 추출물을 농도별로 처리한 후 같은 배양 조건에서 72시간 배양하였다. 배양이 끝난 후 배양액을 제거하고 5 ㎎/㎖ Neutral red 시약을 첨가한 배양액을 넣고 2시간 동안 배양하였다. 그 후 배양액을 제거하고 1% CaCl2 및 포름알데하이드를 처리하고 수분간 100 내지 1000 rpm으로 흔들어 준 뒤 이를 다시 제거하였다. 그리고 1% 아세트산 및 50% 에탄올을 각 웰에 처리하고 5~20분간 잘 흔들어 준 다음 마이크로 플레이트 계수기(microplate reader)를 이용하여 570 nm/655 nm에서의 흡광도 측정으로 결과를 측정하였으며, 그 결과를 표 7 및 도 3에 기재하였다.In order to examine the cytotoxicity of the extract according to the present invention, B16F1 melanoma cells were dispensed in 96-well plates at an appropriate concentration, cultured in a CO 2 incubator at 37 ° C for 24 hours Respectively. At this time, DMEM / high glucose (dulbeco's modified eagle medium, Hyclone) containing 10% bovine serum and 1% antibiotics was used. After culturing, the extract was treated at different concentrations and cultured for 72 hours under the same culture conditions. After the culture was completed, the culture solution was removed and the culture solution containing 5 ㎎ / ㎖ of Neutral red reagent was added and cultured for 2 hours. The culture was then removed, treated with 1% CaCl 2 and formaldehyde, shaken at 100-1000 rpm for several minutes, and then discarded. Then, 1% acetic acid and 50% ethanol were added to each well, shaken well for 5 to 20 minutes, and then the absorbance at 570 nm / 655 nm was measured using a microplate reader. Are shown in Table 7 and Fig.
상기 표 7의 세포독성실험 결과, 처진뽕나무 줄기 부위의 메탄올 추출물은 100 ㎍/㎖ 이하의 농도에서 세포독성을 나타내지 않았다. As a result of the cytotoxicity test of Table 7, the methanol extract of the stigmatized mulberry stem showed no cytotoxicity at a concentration of 100 μg / ml or less.
상기와 동일한 실험방법으로 실시예 7의 싱아 전초의 메탄올 추출물을 DMSO에 용해시킨 후, 각 실험법에 맞는 추출용매에 농도별로 희석하여 사용한 세포독성 결과를 하기 표 8 및 도 4에 기재하였다. In the same experimental procedure as described above, the methanol extract of the Sinai outpost of Example 7 was dissolved in DMSO, and the cytotoxicity of the extract obtained by diluting the extractant according to each experimental method was shown in Table 8 and FIG.
상기 표 8의 세포독성실험 결과, 싱아 전초의 메탄올 추출물 역시 100 ㎍/㎖ 이하의 농도에서 세포독성을 나타내지 않았다.
As a result of the cytotoxicity test of the above Table 8, the methanol extract of the Sinai outpost also showed no cytotoxicity at a concentration of 100 μg / ml or less.
2. 멜라닌 생성 억제효과 측정2. Measurement of inhibition of melanin formation
B16F1 멜라노마 셀을 6웰 플레이트에 정정 농도로 24시간 배양 후 상기 추출물과 알부틴을 상기 표기된 농도의 시료를 시험 물질로 하여 B16F1 멜라노마 셀의 배양액에 첨가하여 3일간 배양하였다. 이때, 멜라닌 합성을 유도시키기 위한 의도로 적정 농도의 a-MSH(melanicyte stimulating hormone)를 처리하였고, 이를 처리하지 않은 경우와 멜라닌 합성을 억제시키는 효과를 나타내는 것으로 잘 알려진 알부틴 처리 한 것을 대조군으로 사용하였다. B16F1 melanoma cells were cultured in a 6-well plate at a correct concentration for 24 hours, and the extract and arbutin were added to the culture medium of B16F1 melanoma cells as a test substance at the indicated concentrations, and cultured for 3 days. At this time, melanocyte-stimulating hormone (a-MSH) was treated at an appropriate concentration to induce melanin synthesis, and arbutin-treated group, which is known to exhibit melanin synthesis inhibiting effect, was used as a control group .
48시간 배양 후 배양액을 제거하고 PBS세척 후 트립신(trypsin) 처리하여 튜브(ep-tube)에 옮겨 세포를 모두 회수하고 PBS로 세척 및 건조 후 1N NaOH와 10% DMSO 용액으로 세포를 녹이고, 96웰 플레이트에 옮긴 후 마이크로플레이트 기록기를 이용하여 파장 490 nm에서의 흡광도를 측정하였다. After culturing for 48 hours, the culture medium was removed, washed with PBS, treated with trypsin, transferred to a tube (ep-tube) to collect all cells, washed with PBS, dried and dissolved in 1N NaOH and 10% DMSO solution, After transferring to a plate, the absorbance at 490 nm was measured using a microplate recorder.
그 결과를 표 9 및 도 5에 기재하였다.The results are shown in Table 9 and FIG.
그 결과, 상기 표 9 및 도 5를 통하여 처진뽕나무 줄기 추출물은 농도 의존적으로 멜라닌 합성이 저해되고 있는 것을 확인하여 미백 효과를 나타냄을 알 수 있었다.As a result, it can be seen that the extract of the mulberry stem which is entrapped through Table 9 and FIG. 5 shows a whitening effect by confirming that the melanin synthesis is inhibited in a concentration-dependent manner.
상기와 동일한 실험방법으로 실시예 7의 싱아 전초의 메탄올 추출물을 DMSO에 용해시킨 후, 각 실험법에 맞는 추출용매에 농도별로 희석하여 사용한 멜라닌 생성 억제효과 결과를 표 10 및 도 6에 기재하였다. Table 10 and FIG. 6 show the results of inhibiting the melanin formation by dissolving the methanol extract of the Sinai herbaceous plant of Example 7 in DMSO and diluting it with the concentration of the extraction solvent according to each experimental method.
그 결과, 상기 표 10 및 도 6을 통하여 본 발명의 실시예 7의 싱아 전초 추출물에 의한 멜라닌 생성억제 실험 결과를 도시한 결과로서 위와 마차찬가지로 농도 의존적으로 멜라닌 합성이 저해되고 있는 것을 확인하여 미백 효과를 나타냄을 알 수 있었다
As a result, as shown in Table 10 and FIG. 6, it was confirmed that melanin synthesis inhibition was inhibited in a concentration-dependent manner as a result of showing the results of inhibition of melanin formation by the Singa outpost extract of Example 7 of the present invention, Respectively.
제형예Formulation Example
이하는 각 화장품 제형에 있어서 처진뽕나무 또는 싱아 추출물을 함유하여 미백 효과를 갖는 제형으로서의 화장료 조성예를 보여주며 제형예는 다음과 같다. 여기에서는 실시예 2의 처진뽕나무 줄기 추출물 또는 실시예 7의 싱아 전초 추출물을 사용하였다.
The following is an example of the composition of a cosmetic composition as a formulation having a whitening effect by containing sallow mulberry or sine extract in each cosmetic formulation. The formulation examples are as follows. Here, the perennial mulberry stem extract of Example 2 or the sine outpost extract of Example 7 was used.
제형예Formulation Example 1 : 유연화장수의 제조 1: Manufacture of softening longevity
상기 추출물을 함유한 화장료 중 유연화장수의 제형예의 조성은 다음 표 11과 같다.The composition of the formulation example of the softening longevity in the cosmetic containing the above extract is shown in Table 11 below.
제형예Formulation Example 2 : 영양화장수의 제조 2: Manufacture of nutrition lotion
상기 추출물을 함유한 함유한 화장료 중 영양화장수의 제형예의 조성은 다음 표 12와 같다.The composition of the formulation of the nutritional lotion among the cosmetic compositions containing the extract is shown in Table 12 below.
제형예Formulation Example 3 : 영양에센스의 제조 3: Manufacture of nutritional essence
상기 추출물을 함유한 화장료 중 영양에센스의 제형예는 다음 표 13과 같다.Formulation examples of nutritional essence among cosmetics containing the above extract are shown in Table 13 below.
제형예Formulation Example 4 : 영양크림의 제조 4: Manufacture of nutritional cream
상기 추출물을 함유한 화장료 중 영양크림의 제형예는 다음 표 14와 같다.Formulation examples of the nutritional cream among the cosmetics containing the above extract are shown in Table 14 below.
제형예Formulation Example 5 : 5: 바디크림의Body cream 제조 Produce
상기 추출물을 함유한 화장료 중 바디크림의 제형예는 다음 표 15과 같다.Formulation examples of the body cream in cosmetics containing the above extract are shown in Table 15 below.
제형예Formulation Example 6 : 팩의 제조 6: Manufacture of pack
상기 추출물을 함유한 화장료 중 팩의 제형예는 다음 표 16과 같다.Formulation examples of the cosmetic pack containing the above extract are shown in Table 16 below.
상기 in vitro 실험에서 나타난 미백 효과가 실제적으로 사람의 피부 미백에 도움을 주는지 확인하기 위하여 처방예 4의 영양크림에 대하여 인체 적용시험을 실시하였다.
In order to confirm whether the whitening effect shown in the above-mentioned in vitro test actually contributes to skin whitening of human beings, a human body application test was performed on the nutritional cream of Prescription Example 4.
<< 실험예Experimental Example 3> 피부 미백 효과 시험 3> Skin whitening effect test
1. 멜라닌 지수 측정1. Measurement of Melanin Index
멜라닌 지수는 Mexameter MX18을 이용하여 제품 사용 전, 사용 1주 후, 사용 2주 후, 사용 4주 후에 각각 측정하였다. melanin index가 낮을수록 멜라닌이 개선되었다고 평가한다. 본 연구에서는 동일한 부위의 피부표면에 매 측정시 3회씩 반복 측정한 값을 평균값으로 사용하였고 그 결과는 다음 표 17과 같다.
The melanin index was measured using Mexameter MX18 before use, 1 week after use, 2 weeks after use, and 4 weeks after use. The lower the melanin index, the better the melanin. In this study, repeated measurements of the skin surface at the same site three times in each measurement were used as average values. The results are shown in Table 17 below.
상기 추출물이 함유된 영양크림에 대한 멜라닌 지수를 측정한 결과, 2주차부터 멜라닌 지수가 감소되는 경향을 나타내어 멜라닌이 개선됨을 확인할 수 있었다.
As a result of measuring the melanin index of the nutritional cream containing the extract, the melanin index tended to decrease from the 2nd week of administration and it was confirmed that the melanin was improved.
2. 피부 밝기 측정2. Measure skin brightness
피부 밝기는 Spectrophotometer CM600d를 이용하여 제품 사용 전, 사용 1주 후, 사용 2주 후, 사용 4주 후에 각각 측정하였다. 피부 밝기는 L값으로 평가하며, L값이 높을수록 피부가 밝아졌다고 평가한다. 본 연구에서는 동일한 부위의 피부표면에 매 측정시 3회씩 반복 측정한 값을 평균값으로 사용하였고 그 결과는 다음 표 18과 같다.Skin brightness was measured before, after 1 week, 2 weeks and 4 weeks after using Spectrophotometer CM600d. The skin brightness is evaluated as the L value, and the higher the L value, the more the skin is brightened. In this study, repeated measurements of the skin surface of the same area three times at each measurement were used as average values. The results are shown in Table 18 below.
상기 추출물이 함유된 영양크림에 대한 피부 밝기를 측정한 결과, 2주차부터 L* 값이 증가하는 경향을 나타내어 피부 밝기가 개선됨을 확인할 수 있었다. As a result of measuring the brightness of the skin against the nutritional cream containing the extract, the L * value tended to increase from the 2nd week onwards, and the skin brightness was improved.
따라서, 상기 추출물이 함유된 영양크림은 멜라닌 지수는 감소시키고 피부 밝기는 증가시켜 피부 미백에 도움을 준다는 사실을 확인할 수 있었다.
Therefore, it was confirmed that the nutritional cream containing the extract reduced the melanin index and increased skin brightness to help skin whitening.
Claims (6)
Drifting Mulberry ( Morus alba for . pendula extract or Aconogonum polymorphum extract as an active ingredient.
상기 처진뽕나무 추출물은 상기 처진뽕나무의 줄기 추출물, 잔가지 추출물, 또는 이들의 혼합물이고,
상기 싱아 추출물은 상기 싱아의 전초 추출물, 잔가지 추출물, 또는 이들의 혼합물인, 미백 화장료 조성물.
The method according to claim 1,
The perennial mulberry extract is a stem extract, a twig extract, or a mixture thereof of the perennial mulberry,
Wherein the Sinai extract is an outpost extract, a twig extract, or a mixture thereof of the Sina.
상기 처진뽕나무 추출물 또는 싱아 추출물이 물 또는 알코올, 메탄올, 헥산, 메틸렌클로라이드, 에틸아세테이트, 부탄올, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 디프로필렌글리콜, 클로로포름, 글리세린 및 이들의 혼합 용매 중에서 선택된 용매로 추출하여 얻어진 추출물인, 미백 화장료 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the perennial mulberry extract or sine extract is obtained by extracting with water or a solvent selected from the group consisting of alcohol, methanol, hexane, methylene chloride, ethyl acetate, butanol, propylene glycol, butylene glycol, dipropylene glycol, chloroform, glycerin, Wherein the cosmetic composition is an extract.
상기 처진뽕나무 추출물 또는 싱아 추출물이 45 내지 120℃에서 30분 내지 24시간 가열하여 추출하는 방법, 및 5 내지 40℃에서 30분 내지 15일간 침지하여 진탕 추출하는 방법 중에서 선택된 1 종 이상의 추출 방법을 사용하여 추출된 것인, 미백 화장료 조성물.
The method according to claim 1,
A method of extracting the perennial mulberry extract or Sinai extract by heating at 45 to 120 ° C for 30 minutes to 24 hours and a method of extracting by shaking at 5 to 40 ° C for 30 minutes to 15 days is used ≪ / RTI >
상기 미백 화장료 조성물이 처진뽕나무 추출물 또는 싱아 추출물을 미백 화장료 조성물의 총 중량에 대하여 0.001 내지 30중량% 포함하는, 미백 화장료 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the whitening cosmetic composition comprises 0.001 to 30% by weight based on the total weight of the whitening cosmetic composition.
상기 미백 활성 성분이 티로시나제 활성 억제 효과 및 멜라닌 생합성 억제 효과를 갖는, 미백 화장료 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the whitening active ingredient has a tyrosinase activity inhibiting effect and a melanin biosynthesis inhibiting effect.
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