KR20150081955A - 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물 및 이를 이용한 파클리탁셀 추출방법 - Google Patents

파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물 및 이를 이용한 파클리탁셀 추출방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물 및 이를 이용한 파클리탁셀 추출방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 택서스속 바이오매스 유래 항암물질인 파클리탁셀의 추출효율을 현저하게 증가시킨 파클리탁셀 추출방법 및 이에 이용될 수 있는 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물에 관한 것이다.

Description

파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물 및 이를 이용한 파클리탁셀 추출방법{Biomass composition for paclitaxel extraction, and extraction method for paclitaxel using the same}
본 발명은 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물 및 이를 이용한 파클리탁셀 추출방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 택서스속 바이오매스 유래 항암물질인 파클리탁셀의 추출효율을 현저하게 증가시킨 파클리탁셀 추출방법 및 이에 이용될 수 있는 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물에 관한 것이다.
파클리탁셀은 주목 나무의 표피에서 발견된 항암물질로 난소암, 유방암, 카포시 종양(Kaposi's sarcoma), 비소세포성 폐암(non-small cell lung cancer, NSCLC) 치료에 대해 미국 FDA (U.S. Food and Drug Administration) 허가를 취득하여 현재 가장 많이 사용되고 있는 항암제로서, 현재 항암제 중 시장규모 1위, 주요 항암화학치료제 시장의 22% 정도를 점유하고 있다. 류마티스성 관절염, 알츠하이머 치료 등의 적용증이 계속 확대되고 있으며, 또한 여러 다른 치료 방법들과의 복합처방에 관한 임상실험이 진행 중에 있어 향후 파클리탁셀의 수요는 계속 늘어날 전망이다.
파클리탁셀의 주요 생산 방법에는 세 가지가 있다. 첫째, 주목나무에서 직접 추출하는 방법으로 원료의 계속적인 공급이 어렵고 추출 및 정제에도 많은 어려움이 있으며 환경보호수인 주목나무 보호에도 적합하지 않은 방식이다. 둘째, 주목나무의 잎에서 전구체(baccatin Ⅲ, 10-deacetylbaccatin Ⅲ, 10-deacetyl paclitaxel 등)를 얻어 사이드 체인(side chain)을 화학적으로 결합하는 반합성 방법이다. 이 방법 역시 전구체를 주목나무에서 직접 얻어야 하므로 직접 추출의 경우와 마찬가지인 문제점들을 가진다. 셋째, 주목나무에서 칼루스(callus)를 유도하고 종균배양 (seed culture)을 거쳐 주배양기(main bioreactor)에서 식물세포를 배양하여 얻는 방법이다. 이들 중 세 번째 방법은 기후, 환경 등의 외부 인자에 의한 영향을 받지 않고 생물반응기 내에서 안정적으로 생산할 수 있기 때문에 일정한 품질의 파클리탁셀을 대량 생산할 수 있다는 장점이 있다.
식물세포배양으로부터 항암물질 파클리탁셀의 분리 및 정제는 여러 단계의 추출 및 정제 공정을 거쳐 높은 순도 (>98%)의 제품을 생산하게 된다. 일반적으로 분리 및 정제 과정은 원료인 바이오매스로부터 파클리탁셀을 먼저 유기용매로 추출하고, 전 처리 공정을 거쳐 최종 정제를 통하여 제품을 생산하는 공정으로 이루어져 있는데, 이 과정에서 특히 전 처리 공정은 최종 정제 비용에 많은 영향을 미친다.
이에 대하여, 등록특허 10-0474228(공개일자: 2000년05월15일)에는 파크리탁셀과 세팔로만닌의 혼합물을 N-할로숙신이미드 존재하에서 지방족 알콜 또는 아민과 반응시켜 얻은 혼합물로부터 파크리탁셀을 분리하는 것을 특징으로 하는 파크리탁셀의 분리방법을 제안하고 있다.
상기 등록특허 및 종래 파클리탁셀 분리 및/또는 추출방법들은 파클리탁셀 정제를 위한 전 처리 공정으로 고가의 크로마토그래피를 이용하거나 전 처리 없이 추출을 거친 원료(crude) 파클리탁셀을 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC; high performance liquid chromatography)를 이용하여 최종 정제하는 방법이 통상적이였다.
그러나, 상기 통상의 파클리탁셀 분리 및/또는 정제방법은 HPLC 사용으로 인해 많은 양의 유기용매 사용, 컬럼에 팩킹된 원료(resin)의 수명 단축, 처리량 감소 등 경제적 측면에서 많은 문제가 있으며 또한 스케일업(scale-up) 및 대량생산에 많은 어려움이 있었다.
또한, 통상적인 파클리탁셀 추출방법 중 하나인 유기용매를 이용한 파클리탁셀 추출방법은 추출한 파클리탁셀의 순도가 0.5% 이하이며, 간단한 전처리 공정 후에도 10% 정도의 순도로 매우 낮은 문제점이 있었다.
본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로, 택서스속 바이오매스 유래 항암물질인 파클리탁셀의 추출효율을 현저하게 증가시킨 파클리탁셀 추출방법 및 이에 이용될 수 있는 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물을 제공하고자 한다.
본 발명은 택서스속(Taxus genus) 바이오매스, pH 1.0 ~ 6.0의 산성 용매 및 유기용매를 포함하는 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물을 제공한다.
본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 상기 택서스속 바이오매스는 택서스속 식물체, 이의 세포 및 이의 세포 배양액으로 이루어진 군 중 1종 이상을 포함할 수 있다.
본 발명의 바람직한 다른 일실시예에 따르면, 상기 산성용매는 염화수소(HCl), 황산(H2SO4) 및 초산(CH3COOH)으로 이루어진 군 중 1종 이상을 포함할 수 있다.
본 발명의 바람직한 또 다른 일실시예에 따르면, 상기 유기용매는 C1 ~ C4의 알콜 및 물로 이루어진 군 중 1종 이상을 포함할 수 있다.
본 발명의 바람직한 또 다른 일실시예에 따르면, 상기 조성물은 택서스속 바이오매스 100 중량부에 대하여 0.01 ~ 0.1 중량부의 산성용매 및 50 ~ 100 중량부의 유기용매를 포함할 수 있다.
또한, 본 발명은 상술한 바와 같은 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물을 혼합하여 혼합물을 제조하는 단계; 및 상기 혼합물에 마이크로웨이브(microwave) 처리 또는 용매 추출하여 파클리탁셀을 추출하는 단계;를 포함하는 파클리탁셀 추출방법을 제공한다.
본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 상기 마이크로웨이브 처리는 마이크로웨이브를 100 ~ 400 W로 처리하여 수행할 수 있다.
본 발명의 바람직한 다른 일실시예에 따르면, 상기 마이크로웨이브 처리는 30 ~ 47 ℃에서 4 ~ 10분 동안 수행할 수 있다.
본 발명의 바람직한 또 다른 일실시예에 따르면, 상기 용매 추출은 20 ~ 45 ℃에서 30분 ~ 2시간 동안 수행할 수 있다.
본 발명의 바람직한 또 다른 일실시예에 따르면, 상기 용매는 C1 ~ C4의 알콜 및 물로 이루어진 군 중 1종 이상을 포함할 수 있다.
본 발명의 바람직한 또 다른 일실시예에 따르면, 상기 파클리탁셀 추출방법은 90% 메탄올을 이용하여 30분 동안 4회 추출한 파클리탁셀의 회수율 대비 160 ~ 250 %의 추출효율을 가질 수 있다.
나아가, 본 발명은 상술한 바와 같은 파클리탁셀 추출방법으로 제조된 파클리탁셀을 포함하는 항암제용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명은 바이오매스로부터 현저하게 증가한 추출효율로 파클리탁셀을 추출하는 추출방법 및 이에 이용될 수 있는 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물을 제공하는 효과가 있다.
도 1은 본 발명의 바람직한 일구현예에 따른 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물의 교반에 사용될 수 있는 교반기의 모식도이다.
도 2는 실험예 1에서 계산한 실시예 1에서 수득한 파클리탁셀의 회수율 그래프이다.
도 3은 실험예 2에서 계산한 실시예 2 내지 4에서 수득한 파클리탁셀의 회수율 그래프이다.
도 4는 실험예 3에서 계산한 실시예 1 및 5 내지 7의 파클리탁셀 회수율 그래프이다.
도 5는 실험예 3에서 계산한 실시예 1 및 8 내지 11의 파클리탁셀 회수율 그래프이다.
도 6은 실험예 4에서 계산한 실시예 5 및 12 내지 14의 파클리탁셀 회수율 그래프이다.
도 7은 실험예 5에서 계산한 실시예 5, 실시예 15 및 비교예 1 내지 2의 파클리탁셀 회수율 그래프이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
상술한 바와 같이, 종래 파클리탁셀 분리 및/또는 정제방법은 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC; high performance liquid chromatography) 사용으로 인해 많은 양의 유기용매 사용, 컬럼에 팩킹된 원료(resin)의 수명 단축, 처리량 감소 등 경제적 측면에서 많은 문제가 있으며, 스케일업(scale-up) 및 대량생산에 많은 어려움이 있었다. 또한, 통상적인 파클리탁셀 추출방법 중 하나인 유기용매를 이용한 파클리탁셀 추출방법은 추출한 파클리탁셀의 순도가 0.5% 이하이며, 간단한 전처리 공정 후에도 10% 정도의 순도로 매우 낮은 문제점이 있었다.
이에 본 발명은 택서스속(Taxus genus) 바이오매스, pH 1.0 ~ 6.0의 산성 용매 및 유기용매를 포함하는 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물을 제공함으로써 상술한 문제의 해결을 모색하였다. 이를 통해 종래 파클리탁셀 분리 및/또는 정제방법 중 하나인 유기용매를 이용한 추출방법보다 현저하게 증가한 추출효율을 갖는 파클리탁셀 추출방법 및 이에 이용할 수 있는 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물을 제공하는 효과가 있다.
본 발명은 택서스속(Taxus genus) 바이오매스, pH 1.0 ~ 6.0의 산성 용매 및 유기용매를 포함하는 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물을 제공한다.
상기 택서스속 바이오매스는 택서스속 식물체, 이의 세포 및 이의 세포 배양액으로 이루어진 군 중 1종 이상을 포함할 수 있다.
상기 택서스속 식물체는 택서스 브레비폴리아(Taxus brevifolia), 택서스 카나덴시스(Taxus canadensis), 택서스 쿠스피다타(Taxus cuspidata), 택서스 바카타(Taxus baccata), 택서스 글로보사(Taxus globosa), 택서스 플로리다나(Taxus floridana), 택서스 월리치아나(Taxus wallichiana), 택서스 메디아(Taxus media) 또는 택서스 치넨시스(Taxus chinensis) 등이 포함될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 산성 용액은 pH 1.0 ~ 6.0의 용액이라면 특별히 제한하지 않으나, 바람직하게는 염화수소(HCl), 황산(H2SO4) 및 초산(CH3COOH)으로 이루어진 군 중 1종 이상을 포함할 수 있다.
만약, pH 1.0 미만의 산성 용액을 사용할 경우, 파클리탁셀이 분해되는 문제가 발생할 수 있으며, pH 6.0을 초과하는 산성 용액을 사용할 경우, 산성 용액 첨가로 인해 수득할 수 있는 효과를 얻기 힘든 문제가 발생할 수 있다.
상기 유기용매는 통상적으로 택서스속 바이오매스에서 파클리탁셀에 이용하는 용매라면 특별히 제한하지 않으나, 바람직하게는 C1 ~ C4의 알콜 및 물로 이루어진 군 중 1종 이상을 포함할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 메탄올 및 물을 포함할 수 있다.
구체적으로, 실험예 4 및 도면 6을 통해 확인할 수 있는 바와 같이, 88 ~ 92%의 메탄올을 사용하는 것이 택서스속 바이오매스로부터 파클리탁셀의 추출효율을 높이는 것을 확인할 수 있었다.
상기 조성물은 택서스속 바이오매스, 산성용매 및 유기용매를 포함하는 것이라면 그 함량비를 특별히 제한하지 않으나, 바람직하게는 택서스속 바이오매스 100 중량부에 대하여 0.01 ~ 0.1 중량부의 산성용매 및 50 ~ 100 중량부의 유기용매를 포함할 수 있다.
만약, 택서스속 바이오매스 100 중량부에 대하여 0.01 중량부 미만의 산성용매를 포함할 경우, 산성 용매 첨가로 인해 수득할 수 있는 이점을 얻기 힘든 문제가 발생할 수 있으며, 택서스속 바이오매스 100 중량부에 대하여 0.1 중량부를 초과하는 산성용매를 포함할 경우, 파클리탁셀이 분해되는 문제가 발생할 수 있다.
만약, 택서스속 바이오매스 100 중량부에 대하여 50 중량부 미만의 유기용매를 포함할 경우, 바이오매스와 유기 용매의 혼합이 어려운 문제가 발생할 수 있으며, 택서스속 바이오매스 100 중량부에 대하여 100 중량부를 초과하는 유기용매를 포함할 경우, 파클리탁셀의 추출효율이 낮아지는 문제가 발생할 수 있다.
또한, 본 발명은 상술한 바와 같은 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물을 혼합하여 혼합물을 제조하는 단계; 및 상기 혼합물에 마이크로웨이브(microwave) 처리 또는 용매 추출하여 파클리탁셀을 추출하는 단계; 를 포함하는 파클리탁셀 추출방법을 제공한다.
먼저, 상술한 바와 같은 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물을 혼합하여 혼합물을 제조한다.
상기 혼합은 통상적으로 고체와 액체를 혼합할 때 사용하는 방법이라면 특별히 제한하지 않으나, 바람직하게는 교반할 수 있다.
상기 교반은 바이오매스, 산성용매 및 유기용매 간의 균일한 분산을 위해 수행할 수 있으며, 교반 속도는 특별히 제한하지 않으나, 바람직하게는 100 ~ 300 rpm로 수행할 수 있다.
만약, 교반 속도가 100 rpm 미만일 경우, 바이오매스, 산성용매 및 유기용매 산의 균일한 혼합이 일어나지 않아 혼합물 수득이 어려운 문제가 발생할 수 있으며, 교반 속도가 300 rpm을 초과할 경우, 과도한 혼합으로 파클리탁셀 추출 공정이 어려운 문제가 발생할 수 있다.
다음, 상기 혼합물에 마이크로웨이브(microwave) 처리 또는 용매 추출하여 파클리탁셀을 추출한다.
상기 마이크로웨이브는 통상적으로 사용하는 강도의 마이크로웨이브라면 특별히 제한하지 않으나, 바람직하게는 100 ~ 400 W 마이크로웨이브를 처리하여 수행할 수 있다.
만약, 100 W 미만으로 처리할 경우, 낮은 온도로 인해 파클리탁셀의 추출 효율이 감소하는 문제가 발생할 수 있으며, 400 W를 초과하는 전력으로 처리할 경우, 과도한 온도 증가로 인해 파클리탁셀이 분해되는 문제가 발생할 수 있다.
또한, 상기 마이크로웨이브 처리는 통상적으로 마이크로웨이브를 이용하여 식물체에서 유효성분을 추출하는 방법에서 사용할 수 있는 조건이라면 특별히 제한하지 않으나, 바람직하게는 30 ~ 47 ℃에서 4 ~ 10분 동안 수행할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 35 ~ 45 ℃에서 5 ~ 9분 동안 수행할 수 있다.
만약, 30 ℃ 미만의 온도로 처리할 경우, 낮은 온도로 인해 파클리탁셀의 추출 효율이 감소하는 문제가 발생할 수 있으며, 47 ℃를 초과하는 온도로 처리할 경우, 높은 온도로 인해 파클리탁셀이 분해되는 문제가 발생할 수 있다.
만약, 4 분 미만으로 처리할 경우, 바이오매스에 포함되어 있는 파클리탁셀이 모두 추출되지 않아 파클리탁셀 추출 효율이 낮아지는 문제가 발생할 수 있으며, 10 분을 초과하는 시간으로 처리할 경우, 마이크로웨이브 에너지의 노출 시간이 과도하게 길어져 파클리탁셀이 분해되는 문제가 발생할 수 있다.
상기 용매 추출의 용매는 통상적으로 식물체에서 유효성분을 추출하기 위해 사용하는 것이라면 특별히 제한하지 않으나, 바람직하게는 C1 ~ C4의 알콜 및 물로 이루어진 군 중 1종 이상을 포함할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 메탄올 및 물의 혼합물을 포함할 수 있다.
나아가, 상기 용매 추출의 조건은 통상적으로 식물체에서 유효성분을 추출하는 방법에서 사용할 수 있는 조건이라면 특별히 제한하지 않으나, 바람직하게는 20 ~ 45 ℃에서 30 분 ~ 2 시간 동안 수행할 수 있다.
만약, 20 ℃ 미만의 온도로 처리할 경우, 낮은 온도로 인해 파클리탁셀의 추출 효율이 감소하는 문제가 발생할 수 있으며, 45 ℃를 초과하는 온도로 처리할 경우, 높은 온도로 인해 파클리탁셀이 분해되는 문제가 발생할 수 있다.
만약, 30 분 미만으로 처리할 경우, 바이오매스 내의 파클리탁셀이 모두 추출되지 않아 파클리탁셀의 추출효율이 낮아지는 문제가 발생할 수 있으며, 2 시간을 초과하는 시간으로 처리할 경우, 과도한 조업 시간으로 경제적인 문제가 발생할 수 있다.
더불어, 상기 용매 추출은 1회 내지 수회 반복 수행할 수 있으며, 바람직하게는 2회 이상, 더욱 바람직하게는 3 회 내지 5회 반복 수행할 수 있다.
상술한 바와 같은 파클리탁셀 추출방법은 종래 산성용액을 첨가하지 않고 마이크로웨이브 단독 처리 추출 또는 용매 추출 단독보다 향상된 추출효율을 보이는 것으로, 90% 메탄올을 이용하여 30분 동안 4회 추출한 파클리탁셀의 회수율 대비 160 ~ 250 %의 추출효율을 가질 수 있다.
구체적으로, 실험예 5에서 확인되는 바와 같이, 본 발명의 파클리탁셀 추출방법은 산성용액을 포함하지 않는 추출 용매로 마이크로웨이브 단독 처리에 의한 추출 및/또는 용매 추출 단독 처리에 의한 추출보다 1.7 내지 2.2배 높은 추출효율을 확인할 수 있었다.
나아가, 본 발명은 상술한 바와 같은 파클리탁셀 추출방법으로 제조한 파클리탁셀을 포함하는 항암제용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 항암제는 악성종양의 치료를 위하여 사용되는 화학요법제의 총칭으로, 대부분의 항암제는 암세포의 각종 대사경로에 개입하여 주로 핵산의 합성을 억제하거나 항암활성을 나타내는 약제이다. 정상세포를 손상하지 않고 종양세포만을 저해하는 것은 어렵기 때문에 작용 메커니즘이 여러 가지로 다른 각양각색의 약제가 많은 기업에 의하여 연구되어 왔다. 의약품에 관련된 생물공학의 응용 중 가장 주력하고 있는 분야이다. 현재 판매되고 있는 항암제는 작용 메커니즘에 따라 면역을 부활화하는 것, 대사길항작용이 있는 것, 종양세포를 직접 살상하는 항생물질의 세 가지 종류로 대별된다.
본 발명에 따른 파클리탁셀을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
상세하게는, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다.
경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 파클리탁셀에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose), 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다.
경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween)61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 파클리탁셀은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으나, 일반적으로 0.01 내지 500 mg/㎏의 양, 바람직하게는 0.1 내지 100 mg/㎏의 양을 일일 1회 내지 수회로 나누어 투여할 수 있다. 또한 파클리탁셀의 투여량은 투여경로, 질병의 정도, 성별, 체중, 나이 등에 따라서 증감될 수 있다. 따라서 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명하기로 한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
[ 실시예 ]
준비예 1: 바이오매스 준비.
바이오매스는 택서스종(Taxus chinensis)의 잎으로부터 얻은 세포주(cell line)를 배양하여 수득하였다.
구체적으로, 택서스종으로부터 얻은 현탁액 세포는 24 ℃ 암조건(darkness condition)에서 150 rpm으로 교반하여 배양하였다. 상기 현탁액 세포는 수정된 겜보르그 비5(Gamborg's B5) 배지, 30 g/ℓ 수크로오스(sucrose), 10 ㎛ 나프탈렌 아세트산(naphthalene acetic acid), 0.2 ㎛ 6-벤질 아미노 퓨린(6-benzylamino purine), 1 g/ℓ 카제인 가수분해물(casein hydrolysate) 및 1 g/ℓ 2-(엔-모르폴리노)에탄술폰산(2-(N-molpholino)ethane sulfonic acid)을 포함하는 배지에서 배양하였다.
세포 배양은 2주마다 새로운 배지로 갈아주었으며 생산과 배양을 연장시키기 위해 7일과 21일째 되는 날에 1 ~ 2%의 맥아당(maltose)를 첨가해주고 유도인자로서 배양 초기에 4 ㎛의 질산은(AgNO3)를 첨가했다. 상기 배양된 세포는 배양액으로부터 디캔터(웨스트팔리아사의 CA150 Claritying decanter사용) 및 고속원심분리기(알파-라발사의 BTPX205GD-35CDEEP 사용)를 이용하여 식물세포와 세포조각을 회수하였다. 회수한 식물세포와 세포조각을 합하여 바이오매스(biomass)로 사용하였다.
제조예 1. 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물 제조.
90% 메탄올 99 ㎖에 1M의 염화수소(HCl) 용액 1 ㎖를 첨가하여 추출용매로 사용하고, 상기 추출용매 100 ㎖에 준비예 1에서 수득한 바이오매스 33.3 g을 첨가하여 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물(HCl 1% 포함)을 제조하였다.
제조예 2.
90% 메탄올 95 ㎖에 1M의 염화수소(HCl) 용액 5 ㎖를 첨가한 것을 제외하고는 제조예 1과 동일한 방법으로 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물(HCl 5% 포함)을 제조하였다.
제조예 3.
90% 메탄올 90 ㎖에 1M의 염화수소(HCl) 용액 10 ㎖를 첨가한 것을 제외하고는 제조예 1과 동일한 방법으로 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물(HCl 10% 포함)을 제조하였다.
제조예 4.
90% 메탄올 80 ㎖에 1M의 염화수소(HCl) 용액 20 ㎖를 첨가한 것을 제외하고는 제조예 1과 동일한 방법으로 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물(HCl 20% 포함)을 제조하였다.
비교예 1. 용매 추출
준비예 1에서 수득한 바이오매스 100 g에 메탄올 100 ㎖를 첨가하고 25 ℃에서 30 분 동안 교반기를 이용하여 200 rpm 으로 혼합하며 추출하는데 4회 반복 추출하여 파클리탁셀을 수득하였다. 수득한 파클리탁셀은 필터 종이(filter paper, 15 ㎜, 와트만사 제품)로 감압 여과하여 파클리탁셀 여액을 회수하였다. 이후 상기 여액은 농축기(CCA-1100, 일본 소재 EYELA사 제품)로 농축하고, 진공오븐(UP-2000, EYELA, Japan)에서 24 시간 동안 건조한 후 메탄올에 용해/여과하였다.
실시예 1. 마이크로웨이브 처리
상기 제조예 1 내지 4에서 제조한 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물을 40 ℃에서 교반기를 이용하여 200 rpm 으로 혼합하며 300 와트의 마이크로웨이브로 처리하여 6 분 동안 파클리탁셀을 추출하였다. 상기 교반기는 도면 1에 나타낸 바와 같은 교반기를 사용하였다.
실험예 1. 추출한 파클리탁셀 분석 및 추출 효율 분석
비교예 1 및 실시예 1에서 수득한 파클리탁셀은 HPLC로 분석하였다.
구체적으로, 상기 HPLC는 HPLC system(SCL-10AVP, Shimadzu, Japan)을 사용하여 파클리탁셀의 함량을 분석하였다. 분석에 사용한 컬럼(column)은 Capcell Pak C18 UG 120 (250 ㎜ × 4.6 ㎜, Shiseido, Japan)이며, 이동상은 아세토니트릴/물(acetonitrile/water; 65/35 ~ 35/65, v/v gradient)을 사용하였다. 상기 이동상의 유속은 1.0 ㎖/분, 시료 주입량은 20 ㎕이며, UV (227 ㎚) detector를 사용하여 분석하였다. 파클리탁셀 표준물질은 Sigma-Aldrich 제품(순도: 95%)을 사용하였다.
비교예 1에서 수득한 파클리탁셀의 회수율을 100%로 하여 제조예 1 내지 4에서 제조한 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물을 이용하여 실시예 1에서 수득한 파클리탁셀 각각의 회수율을 계산하였다. 계산 결과는 도면 2에 나타냈다.
도 2에서 확인되는 바와 같이, 제조예 1 내지 2의 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물을 이용하여 추출한 파클리탁셀의 회수율이 제조예 3 내지 4의 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물을 이용하여 추출한 파클리탁셀의 회수율보다 현저히 높은 것을 확인할 수 있었다. 특히, 제조예 2의 HCl을 5% 포함하는 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물을 이용하여 추출한 파클리탁셀의 회수율이 종래 통상적인 용매 추출방법인 비교예 1의 회수율보다 약 1.5배 높은 것을 확인할 수 있었다.
실시예 2 ~ 4.
하기 표 1에 기재되어 있는 바와 같은 조건을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일한 방법으로 파클리탁셀을 추출하였다.
구분 추출 시간 추출 온도
실시예 2 3 분 40 ℃
실시예 3 9 분 40 ℃
실시예 4 12 분 40 ℃
실험예 2.
실시예 1 내지 4에서 수득한 파클리탁셀을 실험예 1과 동일한 방법으로 HPLC 분석하였다. 또한, 실험예 1과 동일하게 비교예 1에서 수득한 파클리탁셀 회수율을 100%로 하여 실시예 2 내지 4에서 수득한 파클리탁셀 각각의 회수율을 계산하였다. 계산 결과 는 도면 3에 나타냈다.
도 3에서 확인되는 바와 같이, 추출시간이 3분인 실시예 2, 9분 동안 추출한 실시예 3 및 12분 동안 추출한 실시예 4보다 6분 동안 추출한 실시예 1의 파클리탁셀 회수율이 월등히 높은 것을 확인할 수 있었다. 특히, 추출 시간이 6 분보다 길어질 경우, 바이오매스가 마이크로웨이브에 오랜 시간 노출되어 파클리탁셀이 분해되어 회수율이 감소하는 것으로 된다.
제조예 5 ~ 7.
하기 표 2에 기재되어 있는 추출용매과 준비예 1의 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물을 함량비로 혼합한 것을 제외하고는 제조예 2와 동일한 방법으로 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물을 제조하였다.
구분 추출 용매 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물
제조예 5 100 ㎖ 100 g
제조예 6 100 ㎖ 50 g
제조예 7 100 ㎖ 25 g
실시예 5 ~ 7.
제조예 5 내지 7의 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물을 이용한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일한 방법으로 파클리탁셀을 추출하였다.
실시예 8 ~ 11.
제조예 5의 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물을 이용하여 하기 표 3에 기재되어 있는 바와 같은 조건을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일한 방법으로 파클리탁셀을 추출하였다.
구분 추출 시간 추출 온도
실시예 8 6 분 30 ℃
실시예 9 6 분 35 ℃
실시예 10 6 분 45 ℃
실시예 11 6 분 50 ℃
실험예 3.
실시예 1 및 실시예 5 내지 11에서 수득한 파클리탁셀을 실험예 1과 동일한 방법으로 HPLC 분석하였다. 또한, 실험예 1과 동일하게 비교예 1에서 수득한 파클리탁셀 회수율을 100%로 하여 실시예 1 및 실시예 5 내지 11에서 수득한 파클리탁셀 각각의 회수율을 계산하였다. 계산 결과 중 실시예 1 및 5 내지 7의 파클리탁셀 회수율은 도면 4에, 실시예 1 및 8 내지 11의 파클리탁셀 회수율은 도면 5에 나타냈다.
도 4에서 확인되는 바와 같이, 추출 용매와 준비예 1의 바이오매스를 1:1(v/w)로 혼합하여 사용한 제조예 5의 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물을 이용한 실시예 5의 파클리탁셀 회수율이 실시예 6 내지 7의 파클리탁셀 회수율보다 월등히 높은 것을 확인할 수 있었다.
특히, 추출 용매와 바이오매스의 혼합비가 1:1(v/w) 미만일 경우, 추출 용매와 바이오매스의 혼합이 힘든 문제가 발생할 수 있어, 추출 용매와 바이오매스를 1:1(v/w)로 혼합하는 것이 가장 적합한 것을 알 수 있었다.
도 5에서 확인되는 바와 같이, 40 ℃에서 파클리탁셀을 추출한 실시예 1의 회수율이 30 ℃, 35 ℃, 45 ℃ 및 50 ℃에서 추출한 실시예 8 내지 11의 회수율보다 현저히 높은 것을 확인할 수 있었다.
특히, 45 ℃ 이후인 50 ℃에서 추출한 실시예 11의 파클리탁셀 회수율이 45 ℃에서 추출한 실시예 10의 회수율보다 급격히 감소한 것을 확인할 수 있는데, 이는 추출 온도가 증가함에 따라 바이오매스내 파클리탁셀의 분해에 기인한 것으로 판단된다.
제조예 8 ~ 10.
하기 표 4에 기재되어 있는 추출용매과 준비예 1의 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물을 함량비로 혼합한 것을 제외하고는 제조예 5와 동일한 방법으로 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물을 제조하였다.
구분 사용한 메탄올의 농도
제조예 8 100 % 메탄올
제조예 9 95% 메탄올
제조예 10 85% 메탄올
실시예 12 ~ 14.
제조예 8 내지 10의 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물을 이용한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일한 방법으로 파클리탁셀을 추출하였다.
실험예 4.
실시예 5 및 실시예 12 내지 14에서 수득한 파클리탁셀을 실험예 1과 동일한 방법으로 HPLC 분석하였다. 또한, 실험예 1과 동일하게 비교예 1에서 수득한 파클리탁셀 회수율을 100%로 하여 실시예 5 및 실시예 12 내지 14에서 수득한 파클리탁셀 각각의 회수율을 계산하였다. 계산 결과인 실시예 5 및 12 내지 14의 파클리탁셀 회수율은 도면 6에 나타냈다.
도 6에서 확인되는 바와 같이, 100 % 메탄올, 95 % 메탄올 또는 85 % 메탄올을 사용하여 추출하는 실시예 12 내지 14의 파클리탁셀 회수율보다 90 % 메탄올을 사용한 실시예 5의 파클리탁셀 회수율이 월등히 높은 것을 확인할 수 있었다.
비교예 2.
추출용매에 HCl을 첨가하지 않은 것을 제외하고는 실시예 5와 동일한 방법으로 파클리탁셀을 추출하였다.
실시예 15.
추출 용매로 메탄올 100 ㎖ 대신 90 % 메탄올 95 ㎖ 및 1M HCl 5 ㎖을 포함하는 용매를 사용한 것을 제외하고는 비교예 1과 동일한 방법으로 파클리탁셀을 추출하였다.
실험예 5.
실시예 5, 실시예 15 및 비교예 1 내지 2에서 수득한 파클리탁셀을 실험예 1과 동일한 방법으로 HPLC 분석하였다. 또한, 실험예 1과 동일하게 비교예 1에서 수득한 파클리탁셀 회수율을 100%로 하여 실시예 5, 실시예 15 및 비교예 2에서 수득한 파클리탁셀 각각의 회수율을 계산하였다. 계산한 파클리탁셀 회수율은 도면 7에 나타냈다.
도 7에서 확인되는 바와 같이, 산성 용매를 첨가하지 않고 추출하는 비교예 1 내지 2의 파클리탁셀 회수율은 산성 용매를 첨가하여 추출한 실시예 5 및 실시예 15의 파클리탁셀 회수율이 현저히 높은 것을 확인할 수 있었다. 산성 용매를 첨가하여 추출한 실시예 15가 산성 용매를 첨가하지 않고 추출한 비교예 1보다 1.7배 높은 회수율을 알 수 있었으며, 산성 용매를 첨가하여 추출한 실시예 5가 산성 용매를 첨가하지 않고 추출한 비교예 2보다 2.2배 높은 회수율을 알 수 있었다.
특히, 산성 용매 및 마이크로웨이브 처리하여 추출한 실시예 5의 파클리탁셀 회수율이 산성용매를 포함하는 추출 용매를 사용하여 추출한 실시예 13의 파클리탁셀 회수율보다 월등히 높은 것을 확인할 수 있었다. 이로 인해, 마이크로웨이브 처리 및 산성 용매를 첨가하여 추출하는 파클리탁셀 추출방법은 파클리탁셀 추출에서 가장 바람직한 것을 알 수 있었다.
실시예, 비교예 및 실험예를 통해 확인할 수 있는 바와 같이, 본 발명의 산성 용매를 포함하는 추출 용매를 이용하여 파클리탁셀을 추출하는 방법은 종래 용매 또는 마이크로웨이브를 이용하여 추출하는 방법보다 높은 파클리탁셀 회수율을 보였으며, 특히, 산성용매를 포함하는 추출용매 및 마이크로웨이브 처리를 이용한 추출방법의 파클리탁셀 회수율이 월등히 높은 것을 확인할 수 있었다. 따라서, 본 발명은 바이오매스로부터 현저하게 증가한 추출효율로 파클리탁셀을 추출하는 추출방법 및 이에 이용될 수 있는 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물을 제공하는 효과를 알 수 있었다.

Claims (12)

  1. 택서스속(Taxus genus) 바이오매스, pH 1.0 ~ 6.0의 산성 용매 및 유기용매를 포함하는 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 택서스속 바이오매스는 택서스속 식물체, 이의 세포 및 이의 세포 배양액으로 이루어진 군 중 1종 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 산성용매는 염화수소(HCl), 황산(H2SO4) 및 초산(CH3COOH)으로 이루어진 군 중 1종 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 유기용매는 C1 ~ C4의 알콜 및 물로 이루어진 군 중 1종 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물.
  5. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 택서스속 바이오매스 100 중량부에 대하여 0.01 ~ 0.1 중량부의 산성용매 및 50 ~ 100 중량부의 유기용매를 포함하는 것을 특징으로 하는 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 파클리탁셀 추출용 바이오매스 조성물을 혼합하여 혼합물을 제조하는 단계; 및
    상기 혼합물에 마이크로웨이브(microwave) 처리 또는 용매 추출하여 파클리탁셀을 추출하는 단계;
    를 포함하는 파클리탁셀 추출방법.
  7. 제6항에 있어서, 상기 마이크로웨이브 처리는 마이크로웨이브를 100 ~ 400 W로 처리하는 것을 특징으로 하는 파클리탁셀 추출방법.
  8. 제7항에 있어서, 상기 마이크로웨이브 처리는 30 ~ 47 ℃에서 4 ~ 10분 동안 수행하는 것을 특징으로 하는 파클리탁셀 추출방법.
  9. 제6항에 있어서, 상기 용매 추출은 20 ~ 45 ℃에서 30분 ~ 2시간 동안 수행하는 것을 특징으로 하는 파클리탁셀 추출방법.
  10. 제9항에 있어서, 상기 용매는 C1 ~ C4의 알콜 및 물로 이루어진 군 중 1종 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 파클리탁셀 추출방법.
  11. 제6항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 파클리탁셀 추출방법은 90% 메탄올을 이용하여 30분 동안 4회 추출한 파클리탁셀의 회수율 대비 160 ~ 250 %의 추출효율을 갖는 것을 특징으로 하는 파클리탁셀 추출방법.
  12. 제6항의 추출방법으로 제조된 파클리탁셀을 포함하는 항암제용 약학적 조성물.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100706983B1 (ko) * 1999-06-22 2007-04-11 챠이쳄 파마슈티컬즈 인터내셔널 천연 원료로부터의 파크리택셀의 추출 및 정제 방법

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Journal of Argicultural and Food Chemistry, 45, 4691-4696쪽(1997.)* *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20180005992A (ko) * 2016-07-07 2018-01-17 한국과학기술연구원 사마귀풀 추출물, 또는 그의 분획물을 유효 성분으로서 포함하는 피부 주름개선용 조성물 및 그의 용도

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