KR20150051597A - 우엉추출물을 포함하는 간기능 개선용 식품 조성물 - Google Patents

우엉추출물을 포함하는 간기능 개선용 식품 조성물 Download PDF

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KR20150051597A
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Abstract

본 발명은 간기능 개선용 식품 조성물에 관한 것으로, 우엉 추출물(Arctiumlappa L.)을 주요 유효성분으로 하고, 간기능 개선 효과 증대를 위한 황칠나무 줄기 추출물 (Dendropanaxmorbiferus)과 마테 추출물 (I Ilex paraguarensis)을 더 포함하고, 또한, 항산화 효과증대를 위한 비타민C(L-Ascorbric acid)와 보존성 향상을 위한 황금추출물을 더 부가 성분으로 포함하는 간기능 개선용 식품 조성물에 관한 것이다.

Description

우엉추출물을 포함하는 간기능 개선용 식품 조성물{Food Composition for improving liver function containing extract of Arctiumlappa L.}
본 발명은 간기능 개선 효과를 가진 식품 조성물에 관한 기술로서, 특히, 우엉 추출물 등의 천연물질을 포함하는 간기능 개선 효과를 가지는 식품 조성물에 관한 기술이다.
간은 우리 몸에서 가장 큰 장기로서 지질 등의 대사 작용, 해독, 담즙의 배설, 각종 영양소의 저장, 조혈이나 혈액 응고 및 순환 혈액량의 조절 등 많은 기능을 갖기 때문에, 간에 장애가 발생하면 여러 가지 기능이 저하되며 최악의 경우에는 생명 유지가 곤란해질 정도로 매우 중요한 장기이다.
간의 기능을 보다 구체적으로 살펴보면, 첫째, 에너지 대사를 관리하는 기능이 있어 음식물에서 흡수된 모든 영양소들이 간에서 에너지를 생산할 수 있는 물질로 대사되어 전신에 공급되거나 저장된다. 둘째, 간은 약 2,000 여종의 효소, 알부민, 응고 인자들의 혈청단백질, 담즙산, 인지질, 콜레스테롤 등의 지방 등을 합성하고 저장하며 분배하는 기능이 있다. 셋째, 해독 및 분해기능으로서 약물, 술, 독성물질 등을 해독시키므로 간세포가 손상되기 쉽고, 따라서 약물성, 독성, 알코올성 간 질환 등이 흔히 발생하게 된다. 또한, 각종 대사산물을 십이지장으로 배설하는 기능 및 면역기능이 있어 생명유지에 중요한 역할을 하고 있다.
일반적으로 지적되는 간 질환의 원인으로는 바이러스에 의한 감염, 독물 또는 약제에 의한 중독, 음주나 포식, 영양장애 및 순환장애에서 스트레스와 같은 비교적 신변의 원인 등 여러 가지를 들 수 있다.
간장 장애에 대하여 임상적으로 효과가 인정되는 약물은 소수에 불과하므로 현재까지 간장 장애에 대한 유효한 천연 약물탐색은 많은 연구자에 의해 이루어지고 있다. 간장 장애에 대한 유효한 천연물탐색으로 사염화탄소(CCl4)에 의한 실질적 간장애에 기인하는 혈청 중의 GOT(glutamic-oxaloacetic transaminase), GPT(glutamic-pyruvic transaminase), LDH(Lactate dehydrogenase)의 급격한 증가에 대한 보호 효과를 지표로 하는 방법이 있다.
현재 간염, 간경화의 예방 및 치료를 위해 가장 일반적으로 사용되는 약제는 우르소데옥시콜린산, 면역자극제, 항바이러스제, 실리마린, 운지다당체, 메티오닌 등이 있으나, 아직까지 임상적으로 만족스러운 효과를 제공하는 약제가 없어 새로운 간질환 치료제가 강하게 요구되는 실정이다.
2009년 건강기능식품 히트 소재였던 헛개나무로 인해 인체의 가장 둔감한 장기인 간에 대한 관심이 높아졌다. 간기능 개선 제품의 정확한 국내외시장 규모는 알려져 있지 않으나, 2010년 기능성 원료 인정 현황에 따르면 전체 기능성 원료 중 간 건강 원료가 12건으로 2위를 차지하며 간 기능 개선을 위한 건강기능식품의 개발의 노력이 꾸준히 증가되었다는 것을 보여준다.
특허등록 제10-874113호 특허등록 제10-767974호 특허공개 제10-2011-131850호 특허공개 제10-2013-13950호
본 발명은 우엉 추출물(Arctiumlappa L.)을 포함하는 간기능 개선효과를 가지는 식품 조성물에 관한 기술로서, 인체 독성이 전혀 없고 다량 복용에도 부작용이 없으며, 다양한 제품으로 활용 가능한 간기능 개선 식품 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명에서는 상기와 같은 과제를 해결하기 위하여, 우엉 추출물을 유효성분으로 가지는 것을 특징으로 하는 간기능 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 바람직한 실시예에 따르면, 상기 조성물 총 100중량%에 대하여 우엉 추출물을 0.1 내지 90 중량%로 포함하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 바람직한 실시예에 따르면, 상기 기능성 조성물에 황칠나무 줄기 추출물, 마테 추출물, 비타민C 및 황금 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 성분을 더 포함할 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 따르면, 우엉 추출물 0.1 내지 90 중량%, 황칠나무 줄기 추출물 0.1 내지 40중량%, 마테 추출물 0.1 내지 40중량%, 비타민C 0.01 내지 10중량% 및 황금 추출물 0.01 내지 10중량%로 포함할 수 있다.
발명의 바람직한 일 실시예에 따르면, 상기 추출물들은 정제수, 주정 및 에탄올 중 어느 하나의 추출 용매를 사용하여 추출될 수 있다.
본 발명의 바람직한 일 실시예에 따르면, 상기 조성물은 액상, 분말 또는 과립 중 어느 하나의 제형일 수 있다.
본 발명의 간기능 개선용 식품 조성물은 우엉 추출물을 필수성분으로 하며, 선택성분으로서 황칠나무 줄기 추출물, 마테 추출물을 통하여 간기능 개선의 효과를 얻으며, 비타민C를 통화여 우엉 추출물의 갈변 현상을 방지하고, 황금 추출물을 통하여 전체 조성물의 보존성을 증가시킨다. 본 발명의 간기능 개선용 식품 조성물은 동물 실험을 통하여 인체 독성이 없고, 간기능을 향상시키는 효과를 확인 할 수 있었다.
도 1은 각 실험 군의 실험 동물의 혈액 림프구 비율을 flow cytometry analysis로 분석한 결과이다.
도 2는 각 실험 군의 실험 동물의 간에 있는 항산화 관련 유전자 비율을 semi-quantitative RT-PCR 방법으로 분석한 결과이다.
도 3은 각 실험 군의 실험 동물의 간 조직을 400배 확대한 사진이다.
이하에서는 본 발명을 보다 구체적으로 설명한다.
본 발명은 우엉 추출물을 필수성분으로 하며, 부가성분으로서 황칠나무 줄기 추출물, 마테 추출물, 비타민C 및 황금 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 한 종 이상의 추출물, 바람직하게는 상기 4종의 부가성분 모두를 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 간기능 개선용 식품 조성물에 관한 것이다.
우엉 추출물
본 발명의 주성인 우엉 추출물은 우엉에 정제수, 주정, 또는 에탄올을 이용한 액상 추출물로서, 우엉 뿌리의 고유한 향이 있는 옅거나 짙은 노란색 액체이다. 추출물을 농축하여 동결 건조 분말화함으로써, 붕해도가 뛰어나 찬물에서도 잘 녹고, 기능성 물질을 90% 이상 함유하는 과립형 분말 제제로 이용하며 물에 녹였을 경우 우엉 고유의 향이 살아나며 짙은 노란색이다.
우엉은 한국 식품의약안전처, 한방원료 등에 등록된 심품첨가제로, 섭취 시 소화 기능에 효과를 주는 것으로 알려져 있다. 우엉(Arctiumlappa L.)은 초롱꽃목국화과의 두해살이 풀로, 일반적으로는 뿌리를 식용으로 하고, 어린줄기잎도 먹는다. 야생종은 유럽, 시베리아, 만주 등지에 자생하며, 유럽에서는 간혹 어린 잎과 뿌리를 식용으로 하고, 중국에서는 종자를 우방자(牛蒡子)라 하여 이뇨제로 쓰고 있으나, 일본에서는 우엉이 채소로서 발달하였고, 우리나라에서도 채소로서의 용도로 그 재배가 점차 증가하고 있는 추세이다. 우엉의 열매에는 리그난 배당체인 아르커티인, 기름, 피토스테린, 비타민 B1, 사포닌, 쿠마린, 레몬산 등을 함유하고 있고, 뿌리에는 이눌린, 프로테인, 정유, 아르크테인, 카페인산, 탄닌, 알칼로이드 등이 함유되어 있는 것으로 알려져 있다. 우엉은 당질이 주성분으로 특유한 향기와 약리 효과가 있으며 섬유질은 많고 비타민은 적은 편이다. 하지만, 우엉은 다른 채소에 비하여 수분 함량이 적은 대신 당질의 함량이 높으며 그 대부분이 이눌린의 형태로 존재하므로 당뇨병 환자에게 매우 좋다고 알려져 있다. 또한, 우엉은 Trp-P-1 등 돌연변이원이 되는 여러 가지 아미노산 열분해 산물을 불활성화시키는 작용이 있으며, 이러한 작용은 우엉에 존재하는 열에 강한 리그닌(lignin) 유사물질로 알려져 있다.
본 발명에서 우엉 추출물은 전체 조성물 중 0.1 내지 90 중량%, 더욱 바람직하게는 40 내지 90중량%, 가장 바람직하게는 70 내지 90중량%로 사용될 수 있다.
황칠나무 줄기 추출물
본 발명의 부가성분 중 하나인 황칠나무 추출물의 황칠나무(Dendropanaxmorbiferus)는 최대 15m에 달하는 두룹나뭇과(Araliaceae)에 속하는 상록교목으로서 우리나라 남해안의 일부 도서지역에서 볼 수 있다. 황칠나무(Dendropanaxmorbiferus)는 높이는 15m에 달하고 어린 가지는 녹색이며 털이 없다. 그 잎은 달걀 모양 또는 타원형으로서 어긋나고, 잎 가장자리가 밋밋하지만 어린 나무에서는 3~5개로 갈라지고 톱니가 있다. 꽃은 연한 황록색으로 6월에 피고, 양성화이며 산형꽃차례에 달린다. 꽃줄기는 길이 3~5이고, 작은 꽃줄기는 길이 5~10이며, 꽃받침은 5개로 갈라지고 꽃잎과 수술은 5개씩이며 화반에 꿀샘이 있다. 암술머리는 5개로 갈라지고 핵과는 타원형이며 10월에 흑색으로 성숙하고 암술대가 남아 있다.
황칠나무의 수피에 상처를 내면 황칠이라는 황색의 액이 소량 분비되는 데 이는 안식향을 함유하여 예로부터 약리효과가 뛰어나 주목 받았고, 최근의 연구결과로는 항암, 항산화 효과, 간세포 재생, 당뇨치료, 경조직 세포 재생등에 효과적인 것으로 밝혀졌다. 이 외에도 황칠은 고혈압, 중풍, 치매 예방, 소화기 질환 치료, 강장 효과, 우울증 및 스트레스 해소 등에 효과적인 것으로 알려져 있다.
특히, 본 발명에서 황칠나무의 줄기 추출물을 사용하는데, 전체 조성물 중 0.1 내지 40중량%, 더욱 바람직하게는 1 내지 10중량% 사용될 수 있다.
마테 추출물
본 발명의 부가성분 중 하나인 마테는 아르헨티나, 우루과이, 파라과이와 브라질 남부에서 주로 소비되는 차음료로서 다년생 나무인 예르바마테(I Ilex paraguarensis)의 잎으로부터 제조된다.
마테는 감탕나무과의 상록 소교목으로 감탕나무과에 속하는 높이 6 m 정도의 식물로 남아메리카의 파라과이나 브라질 지역에 분포한다. 야생 상태에서는 본래 윗부분이 둥근 형태를 하고 있지만 재배할 경우에는 그 형태가 변형되어 줄기가 많은 관목이 되고 야생 상태보다 양질의 차잎을 재배할 수 있게 되며, 추수는 2년에 1번씩 한다. 마테의 꽃은 작고 잎겨드랑이에 달리며 4수이며 녹색이고, 열매는 적색 또는 적갈색이고 둥글며 지름 6 ㎜ 정도이다. 마테의 잎은 차로 음용되며, 잎은 10 ㎝ 내외로 달걀 또는 타원형모양으로 두꺼우며 가장 자리가 톱니모양을 닮았다. 잎에는 카페인 성분이 함유되어 있고(2% 내외), 향기가 좋다. 잎은 따로 추수하고 말려서 물에 우려낸 차로 음용된다. 마테는 칼슘과 철분 등 무기질이 많은 토양에서 자라기 때문에 철분 칼슘 마그네슘 등의 무기질이 많이 포함되어 있으며, 특히 철 함유량이 매우 높고, 녹차의 5배에 달하는 철 함유량을 가진다. 특히나 다른 차에는 철의 흡수를 방해하는 탄닌 성분이 들어있는데 반해 마테에는 탄닌이 거의 들어 있지 않다. 마테차는 마테의 잎을 말려서 부수어 만든 것으로서, 트리테르펜, 카페인 및 카페인-유사 화합물을 함유한다. 마테차는 변비, 비만, 어깨 결림, 두통 등의 치료에 효과가 있다고 알려져 있으며, 이러한 마테의 약학 활성은 카페오일퀸산 및 카페인-유사 폴리페놀에 기인한다.
마테차는 미국 식품의약국(FDA)에 의해 안전식품으로 인정되었으며, 별도의 독성검사나 안정성검사가 필요하지 않은 GRAS(Generally recognized As Safe)에 등재한 안전 식품이다. 마테차는 또한, 다목적 기능성 식품으로 맛이 좋아 식이요법에 유리하고 카페인, 테오필린, 티오브로민을 포함하는 크탄신알카로이드 복합화합물을 포함하고 있어 체력보강 에너지를 제공하는 것으로 알려져 있으며, 24가지의 비타민, 미네랄, 15가지의 아미노산, 강력한 항산화제를 함유하고, 간기능 개선 물질인 Cynarine을 함유하고 있는 것으로 알려져 있다.
본 발명에서 마테 추출물은 전체 조성물 중 0.1 내지 40 중량%, 더욱 바람직하게는 1 내지 15 중량% 포함할 수 있다.
비타민 C
본 발명의 부가성분 중 하나인 비타민C는 6개의 탄소로 이루어진 락톤(lactone)이며, 식물과 대부분의 동물은 체내에서 비타민C를 합성할 수 있지만, 사람, 영장류, 기니아피그, 큰 박쥐, 몇 종의 조류와 어류는 합성할 수 없으므로 반드시 식품의 형태로 섭취해야 한다.
비타민C는 6개의 탄소로 이루어진 락톤(lactone)이며 식물과 대부분의 동물은 체내에서 비타민C를 합성할 수 있지만, 사람, 영장류, 기니아피그, 큰 박쥐, 몇 종의 조류와 어류는 합성할 수 없으므로 반드시 식품의 형태로 섭취해야 한다. 비타민C라 함은 환원형의 아스코르빈산(ascorbic acid)과 산화형인 디하이드로아스코르빈산(dehydroascorbic acid)을 모두 포함하며, 이 두 물질은 상호 전환이 가능하다. 실제로 우리가 섭취하는 식품에는 2가지 형태가 모두 존재한다. 비타민C는 생체 내에서 여러 가지 효소 반응의 조효소로 쓰이며, 피부, 골격, 연골 등의 결합조직을 구성하는 주요 단백질인 콜라겐의 합성에 관여한다. 또한, 비타민C의 전자제공 기능은 활성산소종과 활성질소종 등의 자유기를 제거하는 항산화 활성을 띠게 한다. 또한, 비타민C는 소장관에서 철분을 환원형으로 전환함으로써, 헤모글로빈에 결합되어 있지 않은 식물성 철분의 흡수를 촉진한다.
비타민C는 생체 내에서 여러 가지 효소반응의 조효소로 쓰이며, 피부, 골격, 혈관, 연골 등의 결합조직을 구성하는 주요 단백질인 콜라겐의 합성에 관여한다. 비타민C의 전자제공 기능은 활성산소종(reactive oxygen species, ROS)과 활성질소종(reactive nitrogen species, RNS) 등의 자유기를 제거하는 항산화 활성을 지닌다. 비타민C의 라디칼은 다른 항산화제에 비해 반감기(half-life)가 5~10초로 비교적 긴 편이어서 안정적인 항산화제로 인정되고 있다. 또한, 비타민C는 소장관에서 철분을 환원형으로 전환시킴으로써 헤모글로빈에 결합되어 있지 않은 식물성 철분의 흡수를 촉진한다.
본 발명에서 비타민C는 전체 조성물 중 0.01 내지 10 중량%, 더욱 바람직하게는 0.01 내지 5 중량% 사용되는 것이 바람직하다.
황금 추출물
본 발명의 부가성분 중 하나인 황금 추출물의 황금(Scutellariabaicalensis)은 쌍떡잎식물 통화식물목 꿀풀과의 여러해살이풀이다. 산지의 풀밭에서 자라고, 꽃은 7~8월에 피며 자줏빛이 돌며 총상꽃차례로 한쪽으로 치우쳐서 달린다. 열매는 9월에 결실하며 둥근 모양으로 꽃받침 안에 들어 있다. 원뿌리는 원뿔형이고, 살이 황색이며, 한방에서 황금 뿌리를 해열, 이뇨, 지사, 이담 및 소염제로 이용하여 약용식물로 많이 재배한다.
황금은 염증과 산화 스트레스를 동반하는 다양한 질병을 치료하기 위한 약용 작물로 사용되어 오는데 황금추출물은 항염, 진통과 항부종 효과가 있다. 황금은 열을 내리고 해독 목적으로 자주 사용되는 약재로서 뿌리를 채취하여 뿌리 껍질을 벗겨보면 황금과 같이 노란 색깔을 띠며, 몸에 열독이 오르거나 오한 등이 잦은 것을 치료하는데, 주로 폐에 열로 인한 증상에 다용(多用)되고, 열로 인한 갈증과 황달, 이질, 설사, 소화불량, 황련과 마찬가지로 몸에 있는 종기나 종양, 더욱더 심해져서 생기는 등창들을 치료한다. 특이하게 일반적으로 쓰이고 차가운 약은 임산부에게는 금지하여야 할 약재로 분류되는데, 황금의 경우 볶으면 임신중 태동불안 등으로 괴로움을 겪을 때에도 좋은 치료 효과가 있는 것으로 알려있다.
황금 추출물은 항균력과 항염효과, 항알레르기 효과를 모두 가지고 있는 것으로 평가되며 아토피나 각종 다양한 습진성, 알레르기성 피부과 질환에 외용 분무제, 로션, 연고제 등 임상적으로 활용가치가 있을 것으로 평가되며, 황금추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 및 개선용 건강기능식품 등이 개발되고 있다.
본 발명에서의 황금추출물은 조성물의 유통기한연장에 따른 변질방지, 유해균의 번식억제 등의 목적으로 사용된다.
본 발명에서 황금추출물은 전체 조성물 중 0.01 내지 10중량%, 더욱 바람직하게는 0.01 내지 5 중량% 사용될 수 있다.
이하에서는 본 발명을 실시예에 의하여 더욱 상세히 설명한다. 그러나, 본 발명이 이하의 실시 예에 의하여 한정되는 것은 아니다.
<원료 제조예1 > 우엉 추출물
①원료준비
우엉을 슬라이스로 자른 후 40~50℃에서 24시간 건조하였다. 40~50℃에서 건조된 재료를 분쇄하여 열수추출 후 여과하여 4℃ 이하에서 보관하여 실험에 사용하였다.
②원료추출
가열 맨틀을 이용하여 조건별로 추출하였다. 우엉의 추출은 우엉 함량 1%, 3%, 5%, 10%, 15%부터 65%까지 추출에 필요한 우엉량을 증가시키고 추출시간은 30분이상 최대 700분까지 추출시간을 설정하였다. 주정 및 에탄올은 5%에서 최대 98%까지 사용하여 주정 추출물의 조성물을 얻었다.
③동결건조
동결건조기를 이용하여 농축액을 건조시켰다.
④ 과립 분말화
혼합된 분말에 약간의 수분을 첨가하여 반죽의 상태로 하여 과립화를 진행하였다. 원료액을 145~155℃에서 송풍펌프를 이용하여 더운 공기를 회전식으로 넣고 상부에서 혼합된 원료를 1mm 호스를 이용하여 공급하였다.
⑤우엉의 추출조건은 반응표면분석법(response surface methodology, RSM)을 이 용하여 최적의 추출조건의 예측과 추출물의 이화학적 특성을 모니터링 하였다. 추출조건의 최적화를 위한 실험계획은 중심합성계획법(central composite design, CCD)에 의하여 설계하며, 반응표면분석 회귀분석을 위해서는 SAS(statistical analysis system)프로그램을 사용하였다.
<원료 제조예2 > 황칠나무 줄기 추출물
①원료 준비
황칠나무 줄기를 슬라이스로 자른 후 40~50℃에서 24시간 건조하였다.
②원료 추출
가열 맨틀을 이용하여 조건별로 추출하였다. 황칠나무 줄기의 추출은 우엉 함량 1%, 3%, 5%, 10%, 15%부터 65%까지 추출에 필요한 줄기량을 증가시키고 추출시간은 30분에서 최대 700분까지 추출시간을 설정하였다. 주정 및 에탄올은 5%에서 최대 98%까지 사용하여 주정 추출물의 조성물을 얻고. 정제수와 주정 및 에탄올을 1:20 비율 등으로 설정하였다. 80℃ 내지 85℃, 12hr, 순환가열하였다.
③여과
추출액에 함유된 원료의 잔사를 1차로 60 메쉬망으로 1차 여과를 하였다.
미세한 필터(CP10, 25)를 통해 잔사를 완전히 제거하였다.
막대필터를 이용하여 강제 순환시켰다.
④농축
원료의 추출액을 농축기에 넣고 일정시간 가열 및 교반을 하여 진공상태를 유지하면서 농축하였다. 내부에서 발생되는 수증기는 콘덴서를 통해 냉각수에 의해 급속 냉각되어 응축수 탱크에 모여지고 추출액은 고상화 되어 농축액이 되었다.
⑤동결건조
동결건조기를 통해 농축액을 건조시켰다.
⑥과립 분말화
혼합된 분말에 약간의 수분을 첨가하여 반죽의 상태로 하여 과립화를 진행하였다. 원료액을 145~155℃에서 송풍펌프를 이용하여 더운 공기를 회전식으로 넣고 상부에서 혼합된 원료를 1mm 호스를 이용하여 공급하였다.
<원료 제조예3 > 마테추출물
①원료준비
마테추출물은 시판되는 마테차 잎을 사용하였다.
②원료 추출
가열 맨틀을 이용하여 조건별로 추출하였다.
마테의 추출은 마테 함량 1%, 3%, 5%, 10%, 15%부터 20%까지 추출에 필요한 마테량을 증가시키고 추출시간은 30분 이상 최대 720분까지 추출시간을 설정하였다. 90℃ 내지 97℃, 8hr, 순환가열하였다.
③여과
추출액에 함유된 원료의 잔사를 1차로 60 메쉬망으로 1차 여과를 하였다.
미세한 필터(CP10, 25)를 통해 잔사를 완전히 제거하였다.
막대필터를 이용하여 강제 순환시켰다.
④농축
원료의 추출액을 농축기에 넣고 일정시간 가열 및 교반을 하여 진공상태를 유지하면서 농축하였다. 내부에서 발생되는 수증기는 콘덴서를 통해 냉각수에 의해 급속 냉각되어 응축수가 탱크에 모이고,추출액은 고상화 되어 농축액이 되었다.
⑤동결건조
동결건조기를 통해 농축액을 건조시켰다.
⑥과립 분말화
혼합된 분말에 약간의 수분을 첨가하여 반죽의 상태로 하여 과립화를 진행하였다.
원료액을 145~155℃에서 송풍펌프를 이용하여 더운 공기를 회전식으로 넣고 상부에서 혼합된 원료를 1mm 호스를 이용하여 공급하였다.
< 실시예1 ~8> 간기능 개선용 식품 조성물
추출 및 농축과정을 거친 우엉 추출물, 황칠나무 줄기 추출물, 마테 추출물, 비타민C, 복합황금추출물을 표 1과 같은 비율로 혼합하여 본 발명의 간기능 개선 복합 조성물을 준비하였다.
[표 1]
간기능 개선 복합 조성물의 구성비
Figure pat00001

이하에서는 상기 실시예 중 실시예1(이하 실험예의 표에서 "AL-RO 2"이라 칭함)을 대상으로 하기의 실험을 진행하였다.
< 실험예 1>급성 간장해 모델에서 간기능 개선 효과 실험
실시예 1의 간기능 개선용 식품 조성물에 대하여 사염화탄소(CCl4)에 의해 유발된 급성 간장해 모델에서의 간기능 개선 효과를 확인하기 위하여 다음과 같이 실험을 진행하였다.
본 발명의 실험에 사용한 시험동물로는 (주)오리엔트사에서 공급받은 10주령의 특정병원체부재(specific pathogen free, SPE) 스프라그-돌리(Sprague-Dawley, SD)계 랫트(Rats)를 온도 23 ± 3℃, 상대습도 50 ± 10%, 환기횟수 13∼18회/hr, 조명시간 12시간(오전 7시∼오후 7시), 조도 150∼300 Lux의 일정한 조건에서 실험동물용 고형사료와, 1차 필터 한 상수도수를 자유섭취시키며 1주간 순화시킨 건강한 동물만을 실험용으로 하였다.
상기에서 준비한 시험 동물에 대한 본 발명의 조성물의 투여실험을 다음과 같이 진행하였다.
실험쥐에 급성 간장해를 유발시키는 사염화탄소(CCl4)만을 투여하는 CCl4 control(비교예 1), 물(DDW) 만을 투여하는 DDW control(비교예 2), 기존에 간기능 개선효과가 있다고 알려져 있는 실리마린(Silymarin)과 사염화탄소(CCl4)를 투여하는 실리마인 그룹 (비교예 3), 본 발명의 조성물(AL-RO 2)과 사염화탄소(CCl4)를 투여하는 테스트 그룹 (실시예 1)의 4개의 실험군으로 나누었다.
실험쥐는 10마리씩 1군으로 하여 1군에는 수컷 5마리 암컷 5마리가 포함되어 있다. 투여용량은 표 2에서 나타내는 것과 같이 사염화탄소(CCl4) 1ml/kg, 실리마린(Silymarin) 200mg/kg, 본 발명의 조성물(AL-RO 2) 400mg/kg 을 28일간 매일 경구 투여하였다.
급성간장해 모델에서 간기능 개선용 식품 조성물의 간기능 개선 평가
성별 동물수(마리) 동물번호 구성 투여경로
비교예 1
(CCl4control)
Male 5 1∼5 CCl4(1mL/kg) Oral
Female 5 6∼10
비교예 2
(DDW Control)
Male 5 11∼15 DDW Oral
Female 5 16∼20
실시예 1
(AL-RO 2 group)
Male 5 21∼25 AL-RO 2(400 mg/kg) + CCl4(1ml/kg) Oral
Female 5 26∼30
비교예 3
(Silymarin group)
Male 5 31∼35 Silymarin(200 mg/kg) + CCl4(1ml/kg) Oral
Female 5 35∼40
실험 동물의 혈청에서 간세포 관련 효소인 GGT , ALP , ALT 그리고 AST 의 측정
간 독성 측정을 위하여 실험동물의 혈청으로부터 혈청측정기 (Thermo Electron, Santa Cruz, CA)를 사용하여 GGT, ALP, ALT 및 AST를 측정하였다.
GGT(Gamma-glutamyltransferase)는 간세포내담관에 존재하는 효소로 담즙 배설 장애를 판단하는 데에 사용한다.
ALP(Alkaline phosphatease)는 간세포 내의 담관에 존재하는 효소로, 주로 담즙 배설 장애에서 빠르게 상승한다. 단, 간 이외에 뼈에도 많이 존재하므로 여러 뼈 질환에서도 증가할 수 있다.
ALT(Alanine aminotransferase(SGPT;serum glutamic pyruvate transaminase)) 및 AST(Aspartate aminotransferase (SGOT; serum glutamic oxalacetic transaminase))는 간에서 만들어지는 대사에 필요한 효소로, 간이 손상되었을 때 증가한다.
사염화탄소(CCL4)를 처리한 실험 동물(비교예1, 비교예3, 실시예1)에서 간 효소의 활성은 사염화탄소(CCL4)를 처리하지 않는 실험 동물(비교예2)과 비교하였을 때 높게 나왔다. 또한, 사염화탄소(CCL4)를 처리한 그룹을 비교하였을 때 본 발명의 기능성 조성물을 사용한 그룹(실시예1)에서 유의적으로 간효소 활성이 낮은 것으로 확인되었다.
그리고 GGT, ALP, ALT그리고 AST는 사염화탄소(CCL4)를 처리하지 않는 실험 동물군(비교예2)을 제외한 다른 군에서는 큰 차이를 보이지 않았고, 일부 혈청학적 수치(BUN, total protein (TP), Globulin 그리고 Ab/Gb)가 정상군에 비해 증가된 것으로 확인되었다.
혈청 검사결과 표 3에서 보여지는 것과 같이, 성별에 의한 차이는 크게 나타나지 않았으며, 실리마린(비교예3)과 본 발명의 기능성 조성물(실시예1)에 의한 간 효소 수치는 사염화탄소만을 처리한 군(비교예1)에 비해 유의적 감소를 보여 간 기능 개선 효능을 보였다.
경구 투여 후의 혈청 검사 결과
성별 혈청 비교예1
(CCL4control)
비교예2
(DDW Control)
실시예1
(CCL4+AL-RO 2)
비교예3
(CCL4+Silymarin)
암컷 ALP (IU/l) 199.50±84.07b 251.75±26.04ab 297.00±46.27a 270.80±56.16ab
GGT (IU/l) 4.60±1.14a 4.60±0.89a 4.80±1.92a 5.00±0.71a
GOT (IU/l) 218.40±147.38a 211.20±113.33a 170.20±88.94a 148.60±48.26a
GPT (IU/l) 42.40±19.45a 45.20±7.69a 43.00±5.96a 41.60±4.72a
Amylase (unit/l) 1262.40±151.72a 1070.25±435.88a 1356.80±100.64a 1216.80±132.64a
BUN (mg/dl) 21.10±3.52a 12.84±7.18b 17.28±2.96ab 18.40±2.05ab
Glucose (mg/dl) 184.60±36.93a 128.00±69.07a 184.40±30.17a 174.20±20.95a
Phosphorus (mg/dl) 7.56±1.86a 6.32±3.37a 8.64±1.05a 8.26±0.99a
Calcium (mg/dl) 9.23±0.28a 9.47±0.57a 9.08±0.77a 9.22±0.78a
Albumin (mg/ml) 3.34±0.35a 2.48±1.58a 3.42±0.16a 3.50±0.19a
Creatinine (mg/dl) 0.70±0.31a 0.62±0.26a 0.66±0.11a 0.70±0.07a
TP (mg/ml) 5.50±1.27b 6.24±0.40ab 6.54±0.21a 6.62±0.19a
Globulin (mg/ml) 2.05±1.05b 3.76±1.39a 3.12±0.23ab 3.12±0.26ab
BUN/Creatinine 35.42±16.97a 24.74±18.79a 27.54±10.07a 26.52±4.20a
Ab/Gb 2.60±2.41a 0.86±0.65b 1.12±0.13ab 1.14±0.15ab
수컷 ALP (IU/l) 198.60±59.24b 269.40±114.83ab 312.60±50.10a 234.80±62.21ab
GGT (IU/l) 3.60±1.14b 4.80±0.45a 5.20±1.10a 5.40±0.55a
GOT (IU/l) 66.20±7.09a 77.40±20.03a 61.50±7.05a 64.25±16.92a
GPT (IU/l) 27.40±5.13a 31.00±4.74a 32.25±6.95a 27.25±4.27a
Amylase (unit/l) 877.40±162.71b 1117.80±108.61a 1190.00±88.77a 1137.75±78.35a
BUN (mg/dl) 16.22±1.38a 19.38±1.88a 18.44±1.16a 18.32±3.54a
Glucose (mg/dl) 150.60±39.77a 173.40±40.25a 195.80±45.28a 168.60±37.02a
Phosphorus (mg/dl) 6.94±1.29a 6.74±1.05a 7.28±1.42a 6.35±1.16a
Calcium (mg/dl) 9.06±0.34a 9.48±0.73a 9.42±1.22a 9.30±0.47a
Albumin (mg/ml) 3.74±0.11a 3.80±0.21a 3.64±0.23a 3.44±0.77a
Creatinine (mg/dl) 0.74±0.05a 0.78±0.08a 0.78±0.08a 0.78±0.08a
TP (mg/ml) 6.62±0.20a 6.58±0.33a 6.12±0.83a 5.86±1.08a
Globulin (mg/ml) 2.88±0.25a 2.78±0.16a 2.50±0.62a 2.42±0.44a
BUN/Creatinine 21.98±1.66a 25.00±2.77a 23.82±2.74a 23.42±3.22a
Ab/Gb 1.30±0.14a 1.34±0.09a 1.54±0.44a 1.44±0.32a
ALP = alkalinephosphatase;
GGT = gamma-glutamyltransferase;
GOT = glutamyloxaloacetictransaminase;
GPT = glutamylpyruvictransaminase;
BUN = bloodureanitrogen;
TP = totalprotein;
Ab/Gb = albumin/globulinratio.
실험 동물의 말초 혈액에서 면역세포인 림프구( lymphocyte ) 함량 분석
실험 동물의 말초 혈액에서 면역과 관련된 림프구의 양을 유세포분석기(flow cytometry)를 통하여 확인하였다(도 1). 수컷 주의 실시예 1에서는 비교예1과 비교하였을 때, 혈액 내 림프구 양이 유의적인 차이를 보이지 않았지만, 암컷 쥐에서는 helper T lymphocytes가 증가한 것을 확인할 수 있었다.
경구 투여 후의 림프구 함량 분석
Group Proportion (%)
비교예1
(CCL4control)
비교예2
(DDW Control)
실시예1
(CCL4+AL-RO 2)
비교예3
(CCL4+Silymarin)
수컷 CD3+CD4+ 17.34±15.75a 13.36±14.52a 16.83±4.81a 14.53±2.68a
CD3+CD8a+ 7.87±7.00a 6.28±6.77a 7.62±3.54a 5.43±0.81a
CD45+IgM+ 15.47±13.26a 12.79±16.66a 17.85±5.36a 12.64±4.22a
암컷 CD3+CD4+ 19.45±1.64b 36.59±4.19a 30.90±12.57a 31.52±2.68a
CD3+CD8a+ 13.11±0.11b 18.49±3.10a 13.87±5.14b 13.78±2.47b
CD45+IgM+ 21.40±9.24a 16.83±1.99a 20.63±8.36a 26.37±9.80a
CD3+ CD4+ = Thelperlymphocytes;
CD3+ CD8a+ = cytotoxic Tlymphocytes;
CD45+ IgM+ = Blymphocytes
항산화 분석
간 조직의 항산화 효소 활성을 확인하기 위하여 -70℃에 보관된 간지조기 무게를 확인하고, Tris-HCl(5 mmol/L containing 2 mmol/l EDTA, pH 7.4)를 이용하여 분쇄하여 얻은 상층액의 SOD(superoxide dismutase), GSH(glutathione) 및 GSH-Px(glutathione peroxidase) (Randox Laboratories Ltd. kit.)를 측정하였다.
사염화탄소(CCl4)를 처리한 실험 쥐에서의 간 항산화 효소의 활성은 사염화탄소(CCl4)를 처리하지 않은 실험 쥐에 비해 유의적으로 낮은 것으로 확인되었고, 사염화탄소(CCl4)를 투여한 그룹들을 비교하였을 때 본 발명의 기능성 조성물을 처리한 그룹(실시예1)에서 가장 많이 증가한 것으로 확인되었다. 이러한 결과는 기능성 조성물을 투여하였을 때 항산화 효소가 증가하여 사염화탄소(CCl4)에 의한 간 손상을 예방효과를 보였다(표 5).
간 조직의 항산화 효소 활성
Groups SOD (%) GSH
(u mol NADPH/min/ugprotein)
GPH
(u mol NADPH/min/ugprotein)
비교예1
(CCL4control)
16.9±3.5a 12.1±3.3a 0.14±0.12a
비교예2
(DDW Control)
47.2±1.6b 62.3±9.9b 2.09±0.18b
실시예1
(CCL4+AL-RO 2)
47.2±8.4b 81.3±3.9b 1.85±0.23b
비교예3
(CCL4+Silymarin)
33.6±3.3b 39.8±9.7ab 1.87±0.52b
adifferent from control (P<0.05),bdifferent from CCl4 group(P<0.05)
간 조직에서 mRNA를 추출하여 간 효소와 관련된 유전자의 발현여부를 RT-PCR(reverse transcription-polymerase chain reaction) 방법으로 확인하였다. 관련 유전자로는 PPARα(Peroxisome Proliferator-Activated Receptor-alpha) 및 CYP4A1(cytochrome p450 4A1) 유전자를 사용하고, 항존유전자(housekeeping gene)로 베타엑틴(beta actin)을 사용하여 비교하였다.
PPARα는 사염화탄소(CCl4)만을 투여한 군(비교예 1)에서는 확인되지 않았으나, 실리마린과 기능성 조성물을 같이 투여한 군에서는 발현되었다. 한편, 사염화탄소(CCl4)를 투여하지 않은 군(비교예2)에서도 크게 발현되었다(도 2).
CYP4A1은 사염화탄소(CCl4)를 투여하였을 때 유의적으로 증가되는 것으로 확인 되었다(도 2).
실험 동물의 간의 조직병리학적 검사
실험 동물의 간의 조직병리학적 평가를 하였을 때 사염화탄소(CCl4)만 처리한 군의 간 조직에서 cell disruption 과 bile duct proliferation를 포함한 간 손상의 급격한 변화를 확인할 수 있었다. 반면 실리마린과 본 발명의 조성물을 처리한 군에서의 지방의 변화는 사염화탄소만을 처리한 군에 비해 적으며 정상군에 비해 큰 차이를 보이지 않는 것으로 확인되었다. 이러한 결과로 보아 사염화탄소는 간의 병리적인 변화를 유도하며, 실리마린과 본 발명의 조성물은 간의 병리학적인 변화를 예방하는 효과가 있는 것으로 확인 되었다(도 3).
< 실험예 2> 급성 간장해 모델에서의 독성 실험
본 발명의 실험에 사용한 시험동물로는 (주)오리엔트사에서 공급받은 10주령의 특정병원체부재(specific pathogen free, SPE) 스프라그-돌리(Sprague-Dawley, SD)계 랫트를 온도 23 ± 3℃, 상대습도 50 ± 10%, 환기횟수 13∼18회/hr, 조명시간 12시간(오전 7시∼오후 7시), 조도 150∼300 Lux의 일정한 조건에서 실험동물용 고형사료와, 1차 필터 한 상수도수를 자유섭취시키며 1주간 순화시킨 건강한 동물만을 실험용으로 하였다.
상기에서 준비한 시험 동물에 대한 본 발명의 조성물의 투여실험을 다음과 같이 진행하였다.
랫트에 급성 간장애를 유발시키는 사염화탄소(CCl4)만을 투여하는 CCl4 control(비교예 1), 물(DDW) 만을 투여하는 DDW control(비교예 2), 기존에 간기능 개선효과가 있다고 알려져 있는 실리마린(Silymarin)과 사염화탄소(CCl4)를 투여하는 실리마린 그룹 (비교예 3), 본 발명의 조성물(AL-RO 2)과 사염화탄소(CCl4)를 투여하는 테스트 그룹 (실시예 1)의 4개의 실험군으로 나누어 각군마다 암컷과 수컷을 각각 5마리씩 실험을 진행하였다.
투여 용량은 표 2에서 나타내는 것과 같이 사염화탄소(CCl4) 1ml/kg, 실리마린(Silymarin) 200mg/kg, 본 발명의 조성물(AL-RO 2) 400mg/kg을 28일간 매일 경구 투여하였다.
사염화탄소(CCl4)와 기능성 조성물을 28일간 경구 투여하며, 진전 (tremor, 보행시 몸이 떨림), 활동력 감소 (decreased activity), 하복부를 들거나 (pelvic elevation), 낮춤 (pelvic lowering) 자세로 보행, 유투 (lacrimation), 유연 (salivation), 몸의 긴장도 저하 (decreased body tone) 및 각막의 혼탁 (corneal opacity)등의 일반증상과, 실험 동물의 체중변화, 사망률을 관찰하여 조성물이 실험동물에 독성을 가지는지 관찰하였다.
관찰결과, 사망동물(표 6)은 없었으며,일반증상(표 7) 또한 보이지 않았고 조성물 투여에 따른 체중의 변화(표 8)도 보이지 않았다.
경구 투여 후의 실험 동물의 사망률
성별 경구투여 경과 일 (days) 최종
사망률
0 7 14 21 28
수컷 비교예1
(CCL4control)
0 0 0 0 0 0/5
비교예2
(DDW Control)
0 0 0 0 0 0/5
실시예1
(CCL4+AL-RO 2)
0 0 0 0 0 0/5
비교예3
(CCL4+Silymarin)
0 0 0 0 0 0/5
암컷 비교예1
(CCL4control)
0 0 0 0 0 0/5
비교예2
(DDW Control)
0 0 0 0 0 0/5
실시예1
(CCL4+AL-RO 2)
0 0 0 0 0 0/5
비교예3
(CCL4+Silymarin)
0 0 0 0 0 0/5
경구 투여 후의 실험 동물의 일반증상
성별 증상 경구투여 경과 일 (days)
0 7 14 21 28
수컷 비교예1
(CCL4control)
N 5 5 5 5 5
비교예2
(DDW Control)
N 5 5 5 5 5
실시예1
(CCL4+AL-RO 2)
N 5 5 5 5 5
비교예3
(CCL4+Silymarin)
N 5 5 5 5 5
암컷 비교예1
(CCL4control)
N 5 5 5 5 5
비교예2
(DDW Control)
N 5 5 5 5 5
실시예1
(CCL4+AL-RO 2)
N 5 5 5 5 5
비교예3
(CCL4+Silymarin)
N 5 5 5 5 5
경구 투여 후의 실험 동물의 체중변화
성별 경과일 체 중(g)
비교예1
(CCL4control)
비교예2
(DDW Control)
실시예1
(CCL4+AL-RO 2)
비교예3
(CCL4+Silymarin)
수컷 Day 0 226.6±5.0a 226.0±4.2a 228.4±5.7a 227.4±4.0a
Day 7 278.0±5.7a 279.8±6.5a 282.4±6.8a 279.4±7.4a
Day 14 327.4±10.9a 328.8±10.9a 328.2±5.9a 324.0±9.9a
Day 21 365.2±12.4a 374.2±15.2a 366.8±7.8a 361.0±12.3a
Day 28 398.8±12.0a 407.2±16.7a 399.8±7.0a 396.6±15.4a
AFCE 0.24a 0.25a 0.24a 0.24a
암컷 Day 0 166.8±4.3a 167.6±2.6a 168.2±4.6a 167.2±4.6a
Day 7 191.2±7.7a 194.2±7.6a 192.2±4.9a 192.0±3.2a
Day 14 211.4±14.4a 216.2±12.0a 214.0±5.7a 213.6±10.6a
Day 21 229.2±16.5a 228.2±16.0a 227.0±6.0a 228.2±4.0a
Day 28 236.8±18.5a 241.8±17.3a 237.2±7.8a 235.4±7.3a
AFCE 0.14a 0.15a 0.15a 0.14a
AFCE : average feed conversion efficiency
사염화탄소(CCl4)와 본 발명 조성물을 경구 투여시 실험쥐의 장기 무게 변화를 표 9에서 나타내고, 부검 후 육안으로 보이는 부검 소견은 표 10에서 나타내었다. 폐장의 암적 색조가 실리마린 군에서 관찰되었으나, 사망 및 기타 일반증상은 관찰되지 않았다. 그리고 조직의 무게 또한 군간의 차이가 없이 동일함을 관찰할 수 있었다
경구 투여 후의 장기 무게
Group 장기 무게 (g)
비교예1
(CCL4control)
비교예2
(DDW Control)
실시예1
(CCL4+AL-RO 2)
비교예3
(CCL4+Silymarin)
수컷 13.93±1.03 14.18±0.73ab 14.79±1.15a 12.98±0.93b
지라 0.92±0.09 0.92±0.08a 0.82±0.08a 0.82±0.09a
신장 3.54±0.43 3.15±0.18a 3.13±0.22a 3.21±0.25a
암컷 10.31±0.56a 10.99±1.66a 10.98±0.80a 10.26±0.97a
지라 0.59±0.03a 0.56±0.03a 0.62±0.07a 0.58±0.07a
신장 2.08±0.12a 2.08±0.06a 2.15±0.14a 2.03±0.10a
경구 투여 후의 부검소견 (육안소견)
성 별 육안 소견 Dose (mg/kg)
비교예1
(CCL4control)
비교예2
(DDW Control)
실시예1
(CCL4+AL-RO 2)
비교예3
(CCL4+Silymarin)
수 컷 실험 동물 수 5 5 5 5
방광 출혈 0 0 0 0
폐 :암적색조 0 0 0 1
폐 :명적색조 0 0 0 0
암 컷 실험 동물 수 5 5 5 5
방광 출혈 0 0 0 0
폐 :암적색조 0 0 0 1
폐 :명적색조 0 0 0 0
사염화탄소(CCl4)와 기능성 조성물을 28일간 경구 투여한 후의 혈액에서의 생화학적 수치와 소변 분석을 통하여 기능성 조성물의 독성에 대해서 알아보았다.
본 발명 조성물이 투여된 수컷 쥐의 경우 white blood cell(WBC), red blood cell(RBC) count, hematocrit hemoglobin, thrombocytes(THR), thrombocytocrit 및 Medn이 정상군보다 높았으며 반면, eosinophil, mean corpuscular volume(MCV), mean cell hemoglobin(MCH), uninfected thrombocytes(uTHR) 수치는 정상쥐에 비하여 낮은 것으로 확인되었지만, 암컷 쥐의 경우 모든 수치가 정상범위에 포함되어 있어 군간의 유의적 차이는 보이지 않았다(표 11 및 표 12 참조).
경구 투여 후의 수컷 실험 동물 혈액의 생화학적 수치
Item Groups
비교예1
(CCL4control)
비교예2
(DDW Control)
실시예1
(CCL4+AL-RO 2)
비교예3
(CCL4+Silymarin)
Leukocytes
WBC (1000/mm3) 4.46±2.99b 7.98±2.95ab 9.66±3.24a 7.58±2.55ab
Lymphocyte (%) 90.40±2.94a 88.36±1.75a 88.16±2.93a 90.00±0.83a
Monocyte (%) 3.28±1.61a 3.50±0.52a 3.84±1.08a 2.90±0.38a
Eosinophil (%) 0.66±0.44a 0.10±0.07b 0.32±0.36ab 0.06±0.09b
Basophil (%) 0.36±0.23a 0.44±0.13a 0.38±0.22a 0.38±0.20a
Others (%) 2.16±0.67a 1.52±0.23b 1.90±0.23ab 1.96±0.11ab
Erythrocytes
RBC (1000/mm3) 5.57±0.68b 6.48±0.45a 7.09±0.27a 6.96±0.27a
MCV (fl) 57.50±3.09a 55.76±1.89ab 53.62±1.26b 54.36±1.59b
Hematocrit (%) 32.02±4.05b 36.06±1.73a 37.98±1.76a 37.78±1.13a
MCH (pg) 22.22±0.85a 22.34±0.99a 20.58±0.36b 20.84±0.97b
MCHC (%) 38.74±3.07a 40.04±0.74a 38.46±1.14a 38.34±1.21a
Hemoglobin (g/dl) 12.38±1.30b 14.46±0.54a 14.58±0.58a 14.48±0.40a
uRBC (1000/mm3) 1.24±0.67a 1.28±0.47a 1.64±0.27a 1.48±0.59a
Thrombocytes
THR (1000/μl) 252.40±314.63b 477.40±386.54ab 658.00±301.65ab 876.40±78.28a
MPV (fl) 6.04±1.43a 6.44±2.73a 5.24±0.50a 4.96±0.22a
Thrombocytocrit (%) 0.14±0.17b 0.24±0.21b 0.32±0.13ab 0.46±0.05a
Medn 3.66±0.91b 4.24±0.32ab 4.38±0.28a 4.48±0.19a
PDW 8.48±2.08a 9.00±2.75a 7.80±0.79a 7.38±0.24a
uTHR (1000/μl) 18.28±5.43a 12.98±1.76b 13.70±2.21b 12.64±0.74b
경구 투여 후의 암컷 실험 동물 혈액의 생화학적 수치
Item Groups
비교예1
(CCL4control)
비교예2
(DDW Control)
실시예1
(CCL4+AL-RO 2)
비교예3
(CCL4+Silymarin)
Leukocytes
WBC (1000/mm3) 7.31±3.30a 3.87±2.98a 5.19±2.44a 4.28±2.50a
Lymphocyte (%) 88.52±2.11a 87.66±3.66a 88.86±3.86a 90.34±1.54a
Monocyte (%) 3.54±0.86a 2.86±0.88a 2.92±0.91a 2.80±0.59a
Eosinophil (%) 1.70±2.23a 0.04±0.05a 1.94±1.81a 0.64±0.65a
Basophil (%) 0.36±0.09a 0.26±0.24a 0.40±0.12a 0.22±0.08a
Others (%) 1.70±0.34a 3.84±3.11a 1.98±0.78a 1.64±0.88a
Erythrocytes
RBC (1000/mm3) 6.89±0.44a 6.19±0.88a 5.63±1.50a 6.14±0.74a
MCV (fl) 59.04±2.65a 58.36±1.40a 59.98±1.75a 59.50±1.13a
Hematocrit (%) 40.70±3.63a 36.14±5.38a 33.70±8.72a 36.56±4.39a
MCH (pg) 20.94±0.93a 20.72±0.95a 21.18±1.15a 21.20±0.42a
MCHC (%) 35.48±0.94a 35.56±1.74a 35.24±1.04a 35.64±0.44a
Hemoglobin (g/dl) 14.44±1.29a 12.80±1.73a 11.86±3.10a 13.06±1.72a
uRBC (1000/mm3) 0.62±0.35a 0.70±0.21a 0.58±0.13a 0.44±0.05a
Thrombocytes
THR (1000/μl) 474.80±321.91a 503.60±426.52a 461.60±398.97a 370.40±394.67a
MPV (fl) 4.93±0.23a 6.07±1.89a 5.60±0.93a 5.72±1.20a
Thrombocytocrit (%) 0.22±0.16a 0.24±0.22a 0.22±0.20a 0.18±0.20a
Medn 3.92±1.02a 3.90±0.60a 3.96±0.86a 3.98±0.73a
PDW 6.64±0.54a 8.24±1.97a 7.30±0.60a 7.58±0.91a
uTHR (1000/μl) 16.78±6.96a 15.22±3.73a 17.36±6.80a 15.30±3.49a
실험 동물의 소변에서는 비중(specific gravity), 산도(pH) 및 단백질의 유의적인 차이를 확인할 수 있으나, 정상 범위를 벗어나지 않으며 대부분의 수치는 각 실험군 및 성별에 따른 차이가 없는 것으로 확인 되었다(표 13 참조).
경구 투여 후의 암컷 실험 동물 의 소변 분석
성 별 수 컷 암 컷
Dosage (%) 비교예1
(CCL4control)
비교예2
(DDW Control)
실시예1
(CCL4+
AL-RO 2)
비교예3
(CCL4+
Silymarin)
비교예1
(CCL4control)
비교예2
(DDW Control)
실시예1
(CCL4+
AL-RO 2)
비교예3
(CCL4+
Silymarin)
Glucose negative 5 5 5 5 5 5 5 5
100mg/dL 0 0 0 0 0 0 0 0
250mg/dL 0 0 0 0 0 0 0 0
Bilirubin negative 5 5 5 5 5 5 5 5
+ 0 0 0 0 0 0 0 0
++ 0 0 0 0 0 0 0 0
Ketone negative 5 5 5 5 5 5 5 5
5mg/dL 0 0 0 0 0 0 0 0
15mg/dL 0 0 0 0 0 0 0 0
Specific Gravity 1.000 0 0 0 0 0 0 0 0
1.005 0 0 0 0 0 0 0 0
1.010 1 1 1 0 1 2 0 1
1.015 4 4 4 5 4 2 4 4
1.020 0 0 0 0 0 1 1 0
Blood negative 5 5 5 5 5 5 5 5
trace 0 0 0 0 0 0 0 0
++ 0 0 0 0 0 0 0 0
pH 6.0 0 0 0 0 0 0 0 0
6.5 0 0 0 0 0 0 1 0
7.0 1 1 0 0 2 1 2 0
7.5 1 0 2 1 3 0 1 0
8.0 3 3 3 4 0 2 1 5
8.5 0 1 0 0 0 2 0 0
Protein negative 0 0 1 1 1 0 1 1
<30mg/dL 5 5 4 4 4 5 4 4
30mg/dL 0 0 0 0 0 0 0 0
Urobilinogen 0.2mg/dL 5 5 5 5 5 5 5 5
1mg/dL 0 0 0 0 0 0 0 0
2mg/dL 0 0 0 0 0 0 0 0
Nitrite negative 5 5 5 5 5 5 5 5
positive 0 0 0 0 0 0 0 0
Leucocytes negative 5 5 5 5 5 5 5 5
15Leu/μL 0 0 0 0 0 0 0 0
70Leu/μL 0 0 0 0 0 0 0 0

Claims (5)

  1. 조성물 총 100중량%에 대하여 우엉 추출물을 0.1 내지 90 중량%로 포함하는 간기능 개선용 식품 조성물.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 조성물은 황칠나무 줄기 추출물, 마테 추출물, 비타민C 및 황금 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 간기능 개선용 식품 조성물.
  3. 제 2항에 있어서,
    상기 조성물은 우엉 추출물 0.1 내지 90 중량%, 황칠나무 줄기 추출물 0.1 내지 40중량%, 마테 추출물 0.1 내지 40중량%, 비타민C 0.01 내지 10중량% 및 황금추출물 0.01 내지 10중량%의 함량비로 포함하는 것을 특징으로 하는 간기능 개선용 식품 조성물.
  4. 제 2항에 있어서,
    상기 추출물들은 정제수, 주정 및 에탄올 중에서 선택되는 어느 하나의 추출 용매를 사용하여 추출된 것임을 특징으로 하는 간기능 개선용 식품 조성물.
  5. 제 1항에 있어서,
    상기 조성물은 액상, 분말 및 과립 중에서 선택되는 어느 하나의 제형인 것을 특징으로 하는 간기능 개선용 식품 조성물.


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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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KR20170006340A (ko) 2015-07-07 2017-01-18 재단법인 한국한방산업진흥원 우엉-시금치 복합발효추출물을 포함하는 조혈기능 개선 및 빈혈 예방용 조성물
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CN109091520A (zh) * 2018-08-03 2018-12-28 西南民族大学 牛蒡地上部分的用途
KR20200089528A (ko) * 2019-01-17 2020-07-27 건국대학교 글로컬산학협력단 마테 및 황칠 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 신경변성질환의 예방 또는 치료용 조성물

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20170006340A (ko) 2015-07-07 2017-01-18 재단법인 한국한방산업진흥원 우엉-시금치 복합발효추출물을 포함하는 조혈기능 개선 및 빈혈 예방용 조성물
KR20170006339A (ko) 2015-07-07 2017-01-18 재단법인 한국한방산업진흥원 우엉-시금치 복합발효추출물을 포함하는 면역기능 증강용 조성물
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