KR20150004807A

KR20150004807A - 18-메틸-15β,16β-메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온 시스템의 자궁내 용도, 18-메틸-15β,16β-메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온을 함유하는 자궁내 시스템, 및 피임 및 부인과 치료에서의 그의 용도

Info

Publication number: KR20150004807A
Application number: KR1020147029292A
Authority: KR
Inventors: 노르베르트 슈미스; 라르스 뢰스; 투울라 발로; 카트야 프렐레; 라인하르트 누베메이에르; 헨리이카 코로라이넨; 하리 유카라이넨
Original assignee: 바이엘 파마 악티엔게젤샤프트
Priority date: 2012-04-23
Filing date: 2013-04-19
Publication date: 2015-01-13
Also published as: AU2013254840A1; HK1205000A1; UY34758A; CA2871003A1; DOP2014000241A; CU20140121A7; AR090799A1; MA37444A1; CR20140490A; CN104254333A; ECSP14024250A; PE20142438A1; JP2015514791A; WO2013160213A1; CO7111255A2; MX2014012849A; TN2014000444A1; PH12014502372A1; US20150065472A1; BR112014026193A2

Abstract

본 발명은 피임 및 부인과 치료에서의 하기 화학식 1의 18-메틸-15β,16β-메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온의 자궁내 용도 뿐만 아니라 하기 화학식 1의 화합물을 함유하는 자궁내 시스템을 기재한다.
<화학식 1>

Description

18-메틸-15β,16β-메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온 시스템의 자궁내 용도, 18-메틸-15β,16β-메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온을 함유하는 자궁내 시스템, 및 피임 및 부인과 치료에서의 그의 용도 {INTRAUTERINE APPLICATION OF 18-METHYL-15β,16β-METHYLENE-19-NOR-20-SPIROX-4-EN-3-ONE SYSTEMS, INTRAUTERINE SYSTEMS CONTAINING 18-METHYL-15β,16β-METHYLENE-19-NOR-20-SPIROX-4-EN-3-ONE, AS WELL AS THE USE THEREOF IN CONTRACEPTION AND GYNAECOLOGICAL THERAPY}

본 발명은 특허청구범위에서 특징규명되는 대상, 즉 하기 화학식 1의 18-메틸-15β,16β-메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온의 자궁내 용도, 및 하기 화학식 1의 18-메틸-15β,16β-메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온을 포함하는 자궁내 시스템에 관한 것이다:

<화학식 1>

상기 식에서, R⁶ 및 R⁷은 수소 원자일 수 있거나 또는 함께 α-메틸렌 기일 수 있다.

따라서, 본 발명은 18-메틸-15β,16β-메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온 (하기 화합물 A) 또는 18-메틸-6α,7α,15β,16β-디메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온 (하기 화합물 B)의 자궁내 용도, 및 상기 화합물 중 하나를 포함하는 자궁내 시스템 (IUS)에 관한 것이다:

본 발명은 피임 및 부인과 치료에서의 물질 A 또는 B를 포함하는 IUS의 용도에 관한 것이다.

부인과 치료란, 예를 들어 [또한 과다월경증 또는 심한 월경 출혈 (HMB)로도 알려져 있는] 월경과다증 및 다른 형태의 자궁 출혈 장애의 치료에서의 용도를 제외한, 자궁내막증, 자궁내막 증식증, 자궁내막의 염증 (자궁내막염), 자궁에 기반한 통증 및 월경곤란증의 치료를 의미한다.

본 발명은 또한 피임 및 부인과 치료에서의 18-메틸-15β,16β-메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온 (화합물 A)의 용도에 관한 것이다.

본 발명에 따라 사용될 수 있는 프로게스틴인 18-메틸-15β,16β-메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온 (A) 또는 18-메틸-6α,7α,15β,16β-디메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온 (B), 및 이들의 제조법은 WO　2008/000521에 기술되어 있고, 전자의 화합물 A는 상기 문헌에 단지 중간체로만 개시되어 있다.

WO　2008/000521에 기술되어 있는 화합물 B 및 추가 물질은 피임용 제약 제제에, 및 월경전 호소증상, 예컨대 두통, 우울한 기분, 수분 저류 및 유방통의 치유적 치료에 사용된다. WO 2008/000521에는 경구 및 경피 투여 형태 이외에도 비경구 유성 주사 용액이 또한 개시되어 있다. 그러나, WO　2008/000521에는 자궁내 용도는 물론 자궁내 시스템 (IUS)에 사용되는 화합물도 기술되어 있지 않다.

호르몬 기반 피임제는 적용이 용이하고 피임 신뢰도가 높기 때문에 상기 피임제를 이용하는 접근법이 사용자에게 널리 허용되고 있다. 그 중에서도, 경구 피임제 (환제)가 다수 국가에서 무엇보다도 가장 빈번하게 사용되는 피임 방법이다. 그럼에도 불구하고, 호르몬 함유, 더욱 구체적으로 에스트로겐 함유 피임제의 잠재적인 위험 (예컨대, 혈전증, 성욕 상실, 오심 및 두통의 약간 증가한 위험)에 기인하여 그에 관한 비판적 논의가 공공연하게 및 문헌상에서 누차 일어나고 있다¹ (문헌 [Bitzer et al., Contraception 84 (2011) 342-356]).

유망한 신규의 피임 방법은 적절한 자궁내 시스템에 의해 호르몬을 자궁내 투여하는 것을 포함한다. 최대 5년간의 기간 동안에 걸쳐 활성 성분을 연속적으로 방출하는 레보노르게스트렐 함유 자궁내 시스템 (IUS)인 미레나(Mirena)^®가 선두에 있다. 상기 제품은 피임, 및 월경 출혈 증가 (월경과다증 또는 과다월경증)의 치료에 사용된다. 상기 제품은 특히 EP　0652738　B1 및 EP　0652737 B1에 기술되어 있다.

미레나^®의 피임 효과의 근간은 본질적으로 자궁경부 점액의 증점 및 레보노르게스트렐의 국부 작용이며, 이는 자궁내막에 대하여 강력한 항증식성 효과를 초래한다. 추가로, 레보노르게스트렐은 자궁난관 환경을 변경시키고, 정자의 운동성 및 기능을 손상시킨다.

비록 미레나^®의 피임 효과는 주로 국부 효과의 결과이기는 하지만, 레보노르게스트렐 (미레나^® 중의 활성 성분)의 전신 안정성이 비교적 높다는 것은 미레나^®가 또한 평균적으로 약 206 pg/ml의 활성 성분의 혈장 수준을 보인다는 것을 의미한다² (문헌 [Mirena March 2011 - DE/9]의 정보 보고서 참조). 비록 상기 값이 경구로 투여된 레보노르게스트렐 함유 피임제의 값보다는 작지만, 사용 첫 해에 사용자 중 약 20%에서 배란을 억제시키는 데, 및 공지된 전신 유해 사례, 예를 들어 여드름, 우울한 기분, 흉통 또는 성욕 감소를 유발하는 데에는 여전히 충분한 값이다³ (문헌 [Laehteenmaeki P. et al., Steroids 2000 65:693-697]).

일부 첫 사용자들은 또한 초기 단계에, 즉 IUS 삽입 후 즉시 (소위 "반점성 출혈"이라고 일컫는) 불규칙적인 출혈 패턴 문제를 가진다. 상기 반점성 출혈은 출혈이 전혀 발생하지 않은 상태 이전 또는 단지 극소수의 출혈이 저빈도로 발생하는 상태 이전에 최대 수개월까지 지속될 수 있다⁴ (문헌 [Suvisaari J, Laehteenmaeki P. - Contraception 1996 Oct; 54(4):201-8]).

양성 난소낭이 미레나^®의 추가의 일반적 유해 사례인 것으로 기술되어 있다⁵ (문헌 [Product monograph - Mirena 8th edition August 2009; Finland: Schering AG and Leiras Oy]).

상기 언급된 호르몬 (피임) 방법 이외에도, 매우 다양한 범위의 비-호르몬 기반 접근법 및 제품, 예컨대 천연 피임 방법 (예컨대, 호르몬 수준 측정 또는 온도 방법), 기계식 방법 (예컨대, 콘돔 또는 격막) 또는 화학적 방법 (예컨대, 살정자제)이 있다. 불행하게도, (비가역적 불임법을 제외한) 대안적 방법 중 어느 것도 호르몬 기반 방법에 의해 달성된 것과 동일한 수준의 신뢰도에 가깝게 피임을 제공하지는 못하고 있다.

따라서, 본 발명의 목적은 공지된 호르몬 기반 피임 방법에 의해 달성되는 바와 같이, 비교적 높은 수준의 신뢰도로 피임을 제공할 뿐만 아니라, 더욱더 우수한 상용성을 보이는 피임 방법을 제공하고자 하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 더욱 빠르게 규칙적인 출혈 패턴이 일어나도록, 즉 반점성 출혈이 더 적게 일어나도록 달성하는 것이다⁶ (문헌 [Andersson et al., Contraception 1994, 49:56-71]).

본 목적은 본 발명에 따라 하기 화학식 1의 화합물의 자궁내 용도에 의해, 즉 18-메틸-15β,16β-메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온 또는 18-메틸-6α,7α,15β,16β-디메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온의 자궁내 용도에 의해 달성된다:

<화학식 1>

상기 식에서, R⁶ 및 R⁷은 수소 원자이거나 또는 함께 α-메틸렌 기이다.

놀랍게도, 래트에서 18-메틸-15β,16β-메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온 또는 18-메틸-6α,7α,15β,16β-비스-메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온을 자궁내 사용하였을 때, 본 발명자들은 국부 (자궁) 효과와 전신 (말초 조직) 효과 사이의 차별화된 작용을 입증할 수 있었다.

이러한 효과는 자궁내 국부 효과 (중량 증가, 실시예 1 참조; 도 1/8 및 2/8) 및 전신 효과, 예를 들어 난소가 제거된 래트에서의 LH 수준 저하 (도 3/8 및 4/8)를 비교함으로써 입증되었다.

LNG (레보노르게스트렐)와 비교하였을 때, 상기 물질은 또한, 유전자 발현 실험에서 상응하는 마커 유전자의 강력한 유도로 제시되는 바와 같이, 국부 효력도 증가시켰다. 따라서, 게스타겐이 자궁에 미치는 항-에스트로겐 효과는 그 중에서도 특히 IGFBP-1에 의해 매개된다. 도 5/8 및 6/8에는 IGFBP-1 유전자 발현이 화합물 A에 의해서, 심지어는 레보노르게스트렐을 사용할 때보다도 대략 7x 더 낮은 IUS로부터의 방출 속도로 유도된다는 것이 제시되어 있다.

국부 대 전신의 뚜렷하게 강력한 해리 및 물질의 높은 게스타겐성 효능은 단지 국부 효과만으로도 그에 기인하여 피임 작용을 일으키는 데 충분하다. 따라서, 전신 유발된 부작용, 예컨대 다른 게스타겐의 사용으로 발생되는 부작용을 예방할 수 있거나 또는 적어도 크게 감소시킬 수는 있다. 가능하게는 국부 게스타겐 농도가 더 높기 때문에, 더욱 신속하게 개시되고 더욱 양호한 출혈 제어가 또한 예상될 수 있다.

비교 전사활성화 연구에서 추가로 입증된 바와 같이 (실시예 2 참조), 본 발명에 따라 사용되는 물질은 LNG와 비교하여 10배 이상 더 낮은 안드로겐성 효과를 가진다. 국부 대 전신의 뚜렷한 해리에 의해 훨씬 더 증진된 상기 특성은 레보노르게스트렐과 비교하여 매우 높은 용량으로 자궁에서 국부적으로 사용된 경우에도, 비록 미레나^® 사용시 레보노르게스트렐과 유사한 전신 농도가 존재하기는 하지만, 어떤 전신 안드로겐성 효과 (예컨대, 여드름)도 예상되지 않는 것으로 보인다.

언급된 물질 A 및 B의 특성에 기인하여, 후자의 것이 부인과 치료에서 뿐만 아니라, 특히 피임에서도 자궁내 용도에 매우 잘 적합화된다. 본원에서는 자궁내 시스템에 의한 자궁내 투여가 바람직하다.

사용될 수 있는 자궁내 시스템은, 예를 들어 미레나^®로 사용되는 바와 같이, 중합체 시스템이다.

당업자는, 예를 들어 EP 0 652　738 B1에 기술되어 있는 바와 같이 수행되는 IUS 제조법에 대해 잘 알고 있다.

따라서, 먼저 중합체 지지체 물질과 함께 활성 성분 A 또는 B를 중심 막대 (코어)로 제조한다. 활성 성분을 중합체 지지체 물질, 예를 들어 폴리디메틸실록산 (PDMS)과 임의의 비율로 혼합할 수 있다.

성형 공정을 수행한 후, 즉 가황 후, 제2 단계에서는 보통 상기 방식으로 제조된 코어를 중합체 기반 막으로 둘러쌈으로써 장기간 동안 균일한 용량으로 투여될 수 있도록 한다. 원하는 방출 속도는 중합체 선택을 통해 및 막 두께를 통해 제어할 수 있다.

막에 적합한 중합체는 원칙적으로 코어 (중심 막대)에 대한 것과 동일한 중합체이다. 본원에서는, 예를 들어 임의로 플루오린화될 수 있는 폴리디메틸실록산, 아니면 중합체의 다른 혼합물이 언급되어야 한다. 막 두께는 약 0.5　mm인 것이 바람직하다.

먼저 원하는 중합체로부터 제조된 배관 (막)을 용매 중에서 팽윤시킨 후, 활성 성분을 함유하는 코어를 계속해서 팽윤되어 있는 상태의 배관 내로 밀어 넣음으로써 막을 적용시킨다. 이어서, 사용시 "파열 효과"를 초래할 수 있는 배관 단부에서의 활성 성분 "출액"을 막기 위해 바람직하게는 또한 배관 단부를, 바람직하게는 배관/막과 동일한 물질로 구성된 마개로 밀봉한다. 또한 배관을 마개 대신 실리콘으로 접착시킬 수 있다.

1-500 ㎍ 범위의 1일 용량으로 특정 활성 성분 A 또는 B를 방출하는 시스템이 본 발명에 따라 사용될 수 있다.

활성 성분 A의 효능이 더 높기 때문에, 본원에서 활성 성분 A의 방출 속도는 활성 성분 B의 방출 속도의 ½이 되도록 선택될 수 있다.

따라서, 활성 성분 A에 대한 생성된 바람직한 용량 범위는 1-200　㎍/일이고, 특히 바람직하게는 1-100　㎍/일, 특히 2-50　㎍/일이다. 활성 성분 B에 대해 바람직한 용량 범위는 2-500　㎍/일이고, 특히 바람직하게는 2-200　㎍/일, 특히 5-100　㎍/일이다.

그러므로, 본 발명은 또한 활성 성분 A 또는 B를 포함하는 자궁내 시스템, 및 피임에서의 자궁내 시스템의 용도에 관한 것이다.

하기 실시예는 본 발명을 예시하는 역할을 한다.

본 발명에 따라 사용될 수 있는 프로게스틴인 18-메틸-15β,16β-메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온 (화합물 A) 또는 18-메틸-6α,7α,15β,16β-디메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온 (화합물 B)은 WO　2008/000521 (화합물 A: 실시예 14f; 화합물 B: 실시예 2)에 기술되어 있는 바와 같이 제조된다.

하기 기술되는 래트 실험에서 사용되는, 활성 성분이 충전된 막대를 제조하는 공정은, 예를 들어 인간에서 이용될 수 있는 IUS에 대해 기술된 바와 같이, 활성 성분 저장소를 제조하는 공정과 유사한 방식으로 수행하였다 (예를 들어, EP 0 652　738 B1 참조). 막대를 제조하는 데 사용될 수 있는 중합체는 폴리실록산 및 개질된 폴리실록산 중합체이다 (예를 들어, EP 0652738 B1, WO 00/29464 및 WO 00/00550 참조).

구체적으로, 먼저 Pt (0)-디비닐테트라메틸디실록산 촉매를 사용하여 폴리에틸렌 옥시드 블록-폴리디메틸실록산 공중합체 (PEO-b-PDMS), 폴리디메틸실록산 및 10 중량%의 활성 성분 (이 경우, 특정 프로게스틴 A 또는 B)의 혼합물을 가황시킴으로써 활성 성분이 충전된 코어를 제조하였다. 또한, PEO-b-PDMS 대신 폴리디메틸실록산 (PDMS)을 사용할 수도 있으며, 본원에서는 가황 촉매로서 비스(2,4-디클로로벤조일) 퍼옥시드가 사용되었다.

활성 성분을 함유하는 코어를 제조하기 위해, 상응하는 노즐 헤드가 장착된 수직 피스톤 유닛을 사용하였다. 노즐 헤드의 치수는 활성 성분을 함유하는 코어의 외경이 약 1 mm가 되도록 하였다.

이어서, 상기 방식으로 제조된 활성 성분을 함유하는 코어를, PDMS, 폴리트리플루오로프로필메틸실록산 (PTFPMS) 또는 PTFPMS/PDMS 엘라스토머 혼합물 (75% PTFPMS, 25% PDMS)로 구성된 막으로 코팅시킨다. 막 물질의 내경은 ~1 mm였고, 외경은 ~1.5　mm였다.

코어 및 막을 10-15 mm 길이로 절단하여 코팅을 수행하였는데, 여기서 코어가 삽입된 후, 막의 단부가 소형 마개로 밀봉될 수 있도록 하기 위해 막은 코어보다 (양단에서 각각 대략 1 mm씩) 약간 더 길었다. 코어가 막 내로 삽입될 수 있도록 하기 위해, 먼저 막을 시클로헥산 또는 아세톤-헥산 혼합물 중에서 팽윤시켰다. 이어서, 활성 성분을 함유하는 코어를 팽윤된 막 안으로 밀어 넣었다. 마지막으로, 배관 단부를 실리콘으로 접착시키거나, 또는 PTFPMS로 제조된 소형 마개로 밀봉하였다.

실시예 1

래트를 이용하는 연구에 기초하여, 전신 부작용 (해리)과 비교되는, 프로게스틴이 자궁에 미치는 국부 작용을 조사하였다. 난소가 제거된 래트의 자궁은 프로게스틴 함유 IUS (막대) 이식에 반응하여 탈락막화가 일어나고, 중량이 증가하게 된다. 프로게스틴의 국부 효과를 또한 유전자 발현 변화에 기초하여서도 측정하였다.

국부 투여된 프로게스틴의 전신 효과를 검출하기 위해 황체화 호르몬 (LH)의 혈청 수준을 사용하였다. 난소가 제거된 래트의 혈청-LH 기저 수준은 무손상 대조군 동물의 수준과 비교하였을 때 상승하였다. 자궁에 투여된 프로게스틴의 원치않는 전신 효능은 LH 수준 감소에 의해 검출할 수 있었다.

방법:

난소가 제거된 암컷 래트를 3일 동안 에스트라디올 (E2)로 처리하였다 (동물 1마리당 0.2　㎍/일, 피하 투여). 4일째, 각 동물의 우측 자궁각 내로 IUS (막대)를 이식하였다. 내부 비교를 위해 좌측 자궁각은 처리하지 않고 그대로 유지시켰다. 동물 1마리당 0.1　㎍의 1일 용량으로 E2를 계속해서 투여함으로써 (프로게스테론-수용체 발현을 유지하는) 자궁이 프로게스틴에 확실히 반응할 수 있도록 하였다. 4, 10 및 17일째 LH 수준 측정을 위해 채혈하였다.

유전자 발현 분석 수행:

프리셀리스24(Precellys24) 균질화기 (페클랩(Peqlab: 독일 에를랑겐); 2.8　mm 세마릭 비드; #91-PCS-CK28, 2 x 6,000　rpm)를 사용하여 자궁 조직을 800　㎕의 RLT 용해 완충제 (퀴아젠(Qiagen: 독일 힐덴); #79216) 중에서 균질화시켰다. 수득된 400　㎕의 균질물은, 자동화 샘플 제조용 퀴아심포니(QIAsymphony) SP 로보트 상의 퀴아심포니 RNA 키트 (퀴아젠, #931636)를 사용하여 전체 RNA를 단리시키는 데 사용하였다. 슈퍼스크립트(SuperScript) III 제1 가닥 합성 시스템 (인비트로젠(Invitrogen: 미국 칼스배드); #18080-051)을 사용하여 랜덤 육량체 절차에 따라 1　㎍ 내지 4 ㎍의 전체 RNA의 역전사를 수행하였다.

택맨(TaqMan) 프로브 (어플라이드 바이오시스템즈(Applied Biosystems); IGFBP-1 Rn00565713_m1, Cyp26a1 Rn00590308_m1, PPIA Rn00690933_m1) 및 패스트 블루 qPCR 마스터믹스 플러스(Fast Blue qPCR MasterMix Plus) (유로젠테크(Eurogentec: 벨기에 리에주); #RT-QP2X-03+FB)를 사용하여 SDS7900HT 리얼.타임(Real.time) PCR 시스템 (어플라이드 바이오시스템즈(미국 칼스배드)) 상에서 1회 반응당 50　ng 내지 200　ng의 cDNA를 이용함으로써 유전자 발현 분석을 수행하였다. 상대적인 정량화를 위해, 시클로필린 A (PPIA)를 내인성 대조군으로서 사용하였다. 비교 델타 델타 CT 방법에 따라 상대적인 발현 수준을 계산하였다.

결과:

18-메틸-15β,16β-메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온 (화합물 A) 및 18-메틸-6α,7α,15β,16β-디메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온 (화합물 B)은 IUS를 보유하는 자궁각에서 중량 증가에 의해 용량 의존적 국부 효능을 보였다 (도 1/8 및 2/8).

시험된 방출 범위 내에서 (화합물 A의 경우: 동물 1마리 및 1일당 0.6-10 ㎍, 및 화합물 B의 경우: 동물 1마리 및 1일당 1-45 ㎍) 두 프로게스틴은 모두 놀랍게도 어떤 LH 감소도 보이지 않았고, 따라서 동물 1마리 및 1일당 10 ㎍ 용량의 화합물 A를 제외하면, 어떤 전신 부작용도 없었다 (도 3/8 및 4/8).

18-메틸-15β,16β-메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온 및 18-메틸-6α,7α,15β,16β-디메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온의 약동학적 프로파일은 각각 모든 시험관내 대사 연구 (간)에서 뿐만 아니라, 생체내에서 연구된 모든 동물 종에서도 고도로 빠른 분해 속도를 나타내었다.

래트에서 IUS (막대)에 의해 국부 투여되었을 때, 화합물 A는 유전자 발현을 유도하는 데 있어서 방출 속도가 동일할 때, 레보노르게스트렐보다 4 내지 7배 더 높은 효력을 보였다 (도 5/8 및 6/8). 상기와 같이 더 높은 국부 효력은, 과정에서 전신 부작용은 유발하지 않으면서도, 자궁에 대해 더욱 빠르고 더욱 강력한 국부 게스타겐성 효과를 달성할 가능성이 있다는 것을 추가로 뒷받침한다.

그 결과, 상기 프로게스틴은 레보노르게스트렐에 대해 기술된 부작용이 여성에서 발생하지 않도록 하는 방식으로 국부 효능을 가지고 투여될 수 있다.

유사하게, 인간에 대하여 시험관내 (간)에서도 매우 신속한 분해 속도가 관찰되었다. 간에서의 신속한 시험관내 분해는 또한 신속한 생체내 분해를 나타낼 수 있으며, 그 결과 IUS를 통한 투여 후, 18-메틸-15β,16β-메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온 및 18-메틸-6α,7α,15β,16β-디메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온의 전신 노출량은 매우 낮은 값으로 계산된다. 예상 물질 수준 (Css = 정상 상태에서의 농도)은 IUS로부터의 방출 속도를 제거 속도로 나눔으로써 계산된다. 미레나의 것과 상응하는, 여성 1명 및 1일당 20 ㎍의 용량을 사용하였을 때, 18-메틸-15β,16β-메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온 및 18-메틸-6α,7α,15β,16β-디메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온에 대해 계산된 전신 노출량 (부하량)은 미레나^®와 비교하였을 때 30배 초과로 더 낮았다.

실시예 2

전사활성화 분석에 의해 인간 안드로겐 수용체 (hAR)에 대한 작용을 연구하였다. 본 연구를 위해, 인간 안드로겐 수용체를 안정하게 발현하는 세포에 상이한 농도의 시험 물질을 가하고, 리포터 유전자를 통해 안드로겐 수용체의 활성화를 검출할 수 있었다.

방법:

전사활성화 연구를 위해, hAR 및 MTV-luc 리포터 유전자로 안정하게 형질감염된 PC3 (인간 전립선 암종) 세포를 사용하였다. 사용된 배양 배지는 10% 소 태아 혈청 (FCS)을 함유하는 RPMI 배지 (L-글루타민 무함유; 페놀 레드 무함유) #E15-49 PAA L-글루타민 200 mM #25030-024 깁코(Gibco) BRL 100　U/100　㎍/ml 페니실린/스트렙토마이신 깁코 #15140-122였다. 세포를 37℃ 및 5% CO₂에서 배양하였다. 시험 배지는 배양 배지와 동일하였는데, 단 예외적으로, 10% FCS를 5% 활성 탄소-처리된 FCS (CCS)로 대체하였다. 세포를 2x10⁴개의 세포/웰/200　㎕의 시험 배지로 96 웰 플레이트 (팩커드(Packard) #6005180으로부터의 "컬쳐플레이트(CulturPlate)")의 웰에 시딩하였다. 세포를 상이한 농도의 시험 물질과 인큐베이션시키고, 퍼킨 엘머(Perkin Elmer)로부터의 "스테디라이트 HTS 리포터 진 어세이 시스템(Steadylite HTS Reporter Gene Assay System)"을 이용하여 80 ㎕의 기질을 측정하였다.

결과:

화합물 A (18-메틸-15β,16β-메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온) 및 화합물 B (18-메틸-6α,7α,15β,16β-비스-메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온)는 hAR 전사활성화에서 레보노르게스트렐의 것보다 10배 더 큰 EC50을 가진다는 결과를 얻었다: 화합물 A의 경우 EC50 값은 6.9 nM이고, 화합물 B의 경우 56 nM인 반면, 레보노르게스트렐의 EC50은 단지 0.5 nM에 불과하였다. 상기와 같이 해리가 레보노르게스트렐과 비교하여 >10배라는 것은, 미레나^® 사용시 레보노르게스트렐에 대하여 관찰되는 것과 같이 국부적으로 자궁에서 사용하여 전신 활성 성분 수준이 형성되더라도, 본 화합물이 사용될 때에는 어떤 전신 안드로겐성 효과도 예상되지 않는다는 것을 의미한다.

실시예 3

1% 농도의 2-히드록시프로필-β-시클로덱스트린 (2HPBCD) 용액 중 UV 검출을 이용하여 역상 액체 크로마토그래피에 의해 활성 성분 A 또는 B 방출량을 측정하였다. 도 7/8 및 8/8에 제시되어 있는 바와 같이, PTFPMS 막으로 둘러싸인 막대에 대한 시험관내 방출 속도를 측정하였다.

Claims

하기 화학식 1의 18-메틸-15β,16β-메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온의 자궁내 용도:
<화학식 1>

상기 식에서, R⁶ 및 R⁷은 수소 원자이거나 또는 함께 α-메틸렌 기이다.
하기 화학식 1의 18-메틸-15β,16β-메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온을 포함하는 자궁내 시스템:
<화학식 1>

상기 식에서, R⁶ 및 R⁷은 수소 원자이거나 또는 함께 α-메틸렌 기이다.
제2항에 있어서, 18-메틸-15β,16β-메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온을 포함하는 자궁내 시스템.
제2항에 있어서, 18-메틸-6α,7α,15β,16β-디메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온을 포함하는 자궁내 시스템.
제3항에 있어서, 1-200　㎍의 1일 용량의 18-메틸-15β,16β-메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온이 시스템으로부터 방출되는 것을 특징으로 하는 자궁내 시스템.
제5항에 있어서, 1-100　㎍의 1일 용량의 18-메틸-15β,16β-메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온이 시스템으로부터 방출되는 것을 특징으로 하는 자궁내 시스템.
제6항에 있어서, 2-50　㎍의 1일 용량의 18-메틸-15β,16β-메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온이 시스템으로부터 방출되는 것을 특징으로 하는 자궁내 시스템.
제4항에 있어서, 2-500 ㎍의 1일 용량의 18-메틸-6α,7α,15β,16β-디메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온이 시스템으로부터 방출되는 것을 특징으로 하는 자궁내 시스템.
제8항에 있어서, 2-200 ㎍의 1일 용량의 18-메틸-6α,7α,15β,16β-디메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온이 시스템으로부터 방출되는 것을 특징으로 하는 자궁내 시스템.
제9항에 있어서, 5-100　㎍의 1일 용량의 18-메틸-6α,7α,15β,16β-디메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온이 시스템으로부터 방출되는 것을 특징으로 하는 자궁내 시스템.
제2항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 피임에 사용하기 위한 자궁내 시스템.
제2항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 월경과다증 및 다른 자궁 출혈의 치료를 제외한 부인과 치료에 사용하기 위한 자궁내 시스템.
피임에서, 및 월경과다증 및 다른 자궁 출혈의 치료를 제외한 부인과 치료에서의 18-메틸-15β,16β-메틸렌-19-노르-20-스피록스-4-엔-3-온의 용도.