KR20140125677A - Composition for protection or treatment of methicillin-resistant Staphylococcus aureus infectious diseases comprising fraction from Vitis amurensis - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 왕머루포도나무(Vitis amurensis) 뿌리 추출물의 에틸아세테이트분획물을 유효성분으로 포함하는 메치실린 내성 포도상구균(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA) 감염증 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다. 또한 왕머루포도나무 뿌리 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 포함하는 메치실린 내성 포도상구균(MRSA) 감염증 예방 또는 개선용 의약외품 조성물 및 상기 약학적 조성물을 인간을 제외한 메치실린 내성 포도상구균(MRSA) 감염증 의심개체에 투여하는 단계를 포함하는, 인간을 제외한 동물의 메치실린 내성 포도상구균(MRSA) 감염증 치료 방법에 관한 것이다.
The present invention Vitis amurensis vine (Vitis The present invention relates to a pharmaceutical composition for preventing or treating methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) infectious disease, which comprises an ethyl acetate fraction of an amurensis root extract as an active ingredient. Also disclosed is a quasi-drug composition for the prevention or amelioration of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) infections comprising an ethyl acetate fraction of a root extract of a grape vine root as an active ingredient, and a pharmaceutical composition comprising said pharmaceutical composition for suspected methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) infectious disease in an animal other than a human, comprising administering to the individual a therapeutically effective amount of the compound.
황색포도상구균 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus)는 그람 양성 구균 중 임상검체에서 흔히 분리되는 세균으로 건강한 성인의 비강에서 약 40% 발견되며, 흔히 비장이나 피부 등에서 다른 사람에게 전파되며, 장 독소를 생산하는 대표적인 식중독균으로, 내열성 누클레아제와 응고효소를 생산하는 특징으로 가지고 있다. 수년 동안 스타필로코커스 종의 성장저해 효과는 프로폴리스나 허브 또는 다른 천연 물질에 의해 연구되어 왔고, 특히 식물에서 추출한 몇몇의 플라보노이드가 스타필로코커스 종의 성장을 저해하는 것으로 알려져 있으나, 저해 기작에 대한 연구는 아직 미비한 실정이다. Staphylococcus aureus Staphylococcus aureus is a bacterium frequently isolated from clinical specimens among Gram-positive strains. It is found in about 40% of healthy adult nasal passages, often spread to other people in the spleen or skin, . It is characterized by producing heat-resistant noclease and coagulase. The growth inhibitory effects of Staphylococcus sp. For years have been studied by propolis, herbs or other natural substances, and some flavonoids extracted from plants are known to inhibit the growth of Staphylococcus spp. Research is still lacking.
1960년대 초 황색포도상구균의 치료제로서 메치실린(methicillin)이 개발됨으로써 포도상구균에 의한 감염증은 치료가 가능하게 되었으나, 항생제의 무분별한 남용으로 인해 메치실린에 내성을 보이는 균인 MRSA(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus)가 나타났으며, 국내에서는 1980년대에 들어서면서 MRSA 발생이 보고되기 시작하여 이 후 계속적인 증가 추세에 있으며, 현재는 대표적인 병원감염 주요 원인균 중의 하나로 인식되고 있다. 이 균주는 메티실린에 대한 내성뿐만 아니라 세팔로스포린, 암피실린, 나프실린 등과 같은 베타 락탐(β-lactam) 계열 항생제를 비롯한 거의 모든 항생제에 내성을 가지고 있는 것으로 알려져 문제시 되고 있다. 따라서 한번 감염이 되면 현재 사용되는 항생제로는 치료가 어려워 환자가 사망하는 경우가 빈번히 일어나 이 균주에 대한 감염 예방 및 치료를 위한 새로운 항생제의 개발이 절실히 요구되고 있다.
In the early 1960s, the development of methicillin as a treatment for Staphylococcus aureus led to the treatment of infectious diseases caused by Staphylococcus aureus. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA), a methicillin- In Korea, MRSA has been reported to occur in the 1980s. Since then, MRSA has been continuously increasing and is now recognized as one of the major pathogens of major hospital infections. This strain is known to be resistant to almost all antibiotics, including beta-lactam antibiotics such as cephalosporin, ampicillin, naphthyline and the like, as well as resistance to methicillin. Therefore, once the infection has occurred, the patient is often killed due to the difficulty of treatment with the antibiotics currently in use, and development of a new antibiotic for the prevention and treatment of infection of this strain is urgently required.
왕머루포도나무(Vitis a murensis) 뿌리는 한의학에서 예전부터 풍습을 없앤다고 하여 배뇨장애, 복수 등의 치료에 사용되어 왔으며, 간염, 간경화, 부종, 신장염, 방광염, 맹장염 등에도 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 동의보감에 나와 있는 포도의 설명에 보면 '열매에는 자줏빛과 흰빛의 2가지가 있는데 자줏빛이 나는 것을 마유라 하고 흰빛이 나는 것을 수정이라고 한다.'고 하였으며, '뼈마디가 쑤시고 저리는 병(습비)과 임질을 치료하고 오줌이 잘 나가게 하며 기를 돕고 의지를 강하게 하며 살찌게 하고 건강하게 한다'고 알려져 있다. 또 포도뿌리는 '달여 그 물을 마시면 구역과 딸꾹질이 멎고 임신한 후 태기가 명치를 치밀 때에 마시면 곧 내려간다'하였다. 최근에는 왕머루포도나무 뿌리로부터 분리한 레스베라트롤(resveratrol) 올리고머(oligomer)들이 소염효과를 발현한다는 보고[Huang KS et al. Phytochemistry, vol. 58(2), pp. 357-362, 2001]도 있었고, 이외에 왕머루포도나무 뿌리의 추출물의 신경보호작용 또는 항암작용에 대한 연구는 이루어져 왔으나, 왕머루포도나무 뿌리의 추출물의 에틸아세테이트 분획물이 MRSA에 대한 항균활성을 가짐으로써 MRSA 감염증의 예방 또는 치료효능을 나타낸다는 연구는 아직까지 보고되어 있지 않다.
Vitis a murensis roots have been used in traditional medicine for the elimination of customs and have been used for the treatment of dysuria and ascites. It is also known to be effective for hepatitis, cirrhosis, edema, nephritis, cystitis and appendicitis. In the description of the grapes described in Donguibogam, "There are two kinds of fruit, purple and white, which are purplish, and they are said to be white.""Bones are tingling, It is known that it treats, makes urine go well, helps the diet, strengthens the will, makes it fat and makes it healthy. The grape roots, "the month and drink the water in the area and hiccups stop, after pregnancy, when the cooked rice cooked in the myeongchi when you go down," he said. Recently, it has been reported that resveratrol oligomers isolated from roots of vinegars have an anti-inflammatory effect [Huang KS et al. Phytochemistry, vol. 58 (2), pp. 357-362, 2001). In addition, the neuroprotective or anticancer effects of the extracts of the vine root have been studied. However, the ethyl acetate fraction of the extract of the vine root extracts has antimicrobial activity against MRSA, There is no report yet on the efficacy of preventing or treating infectious diseases.
이에 따라, 본 발명자들은 MRSA에 대한 항균활성을 가져 MRSA 감염증을 예방 또는 치료할 수 있는 식물 유래 화합물을 찾기 위해 노력한 결과, 왕머루포도나무 뿌리의 추출물의 에틸아세테이트 분획물이 MRSA에 대한 항균활성을 가짐을 확인하여, 상기 분획물의 MRSA 감염증의 예방, 치료 및 개선 용도를 밝혀내어 본 발명을 완성하였다.
Accordingly, the present inventors have made efforts to search for a plant-derived compound that has an antimicrobial activity against MRSA and can prevent or treat MRSA infection. As a result, it has been confirmed that the ethyl acetate fraction of the extract of royal vine root extract has antimicrobial activity against MRSA The present invention has been accomplished on the basis of these findings by studying the use of the fractions for the prevention, treatment and improvement of MRSA infection.
본 발명의 하나의 목적은, 왕머루포도나무(Vitis amurensis) 뿌리 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 포함하는 메치실린 내성 포도상구균(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA) 감염증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.One object of the present invention, Vitis amurensis Vine (Vitis Methicillin-resistant Staphylococcus , which contains the ethyl acetate fraction of the amurensis root extract as an active ingredient, aureus , and MRSA) infectious diseases.
본 발명의 다른 목적은, 왕머루포도나무 뿌리 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 포함하는 메치실린 내성 포도상구균(MRSA) 감염증의 예방 또는 개선용 의약외품 조성물을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a quasi-drug composition for preventing or ameliorating a methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) infection comprising an ethyl acetate fraction of a grape seed root extract as an active ingredient.
본 발명의 또 다른 목적은, 상기 약학적 조성물을 인간을 제외한 메치실린 내성 포도상구균(MRSA) 감염증 의심개체에 투여하는 단계를 포함하는, 인간을 제외한 동물의 메치실린 내성 포도상구균(MRSA) 감염증 치료 방법을 제공하는 것이다.
Another object of the present invention is to provide a method for treating methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) infections in an animal other than human, comprising administering the pharmaceutical composition to a subject suspected of having methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) Method.
상기의 목적을 달성하기 위한 하나의 양태로서, 본 발명은 왕머루포도나무(Vitis amurensis) 뿌리 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 포함하는 메치실린 내성 포도상구균(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA) 감염증 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
The present invention as an embodiment for achieving the above object is Vitis amurensis Vine (Vitis Methicillin-resistant Staphylococcus , which contains the ethyl acetate fraction of the amurensis root extract as an active ingredient, aureus , MRSA) for the prevention or treatment of infectious diseases.
구체적으로, 본 발명의 MRSA 감염증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물은 왕머루포도나무 뿌리 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 포함한다.Specifically, the pharmaceutical composition for preventing or treating MRSA infection according to the present invention comprises an ethyl acetate fraction of a grape seed root extract.
본 발명에서 용어, "왕머루포도나무(Vitis amurensis)"는 갈매나무속 포도과의 낙엽덩굴식물로 한국, 일본, 사할린 등지에 분포한다. 상기 왕머루포도나무의 약리학적 활성에 있어, 신경보호작용, 항산화작용, 항암작용 등을 가지는 것으로 알려져 있지만, 왕머루포도나무 뿌리 추출물의 에틸아세테이트 분획물의 MRSA 감염증 예방 또는 치료 용도에 대해서는 알려진 바 없으며, 본 발명자들에 의해 최초로 규명된 것이다. 본 발명에서 왕머루포도나무 뿌리는 상업적으로 판매되는 것을 구입하거나, 자연에서 채취 또는 재배된 것을 사용할 수 있다.In the present invention, the term " Vitis amurensis "is a deciduous vine plant of Grape vine that is distributed in Korea, Japan, Sakhalin, etc. Although it is known that it has neuroprotective activity, antioxidant activity and anti-cancer activity in the pharmacological activity of the above- In the present invention, grape roots of vinegars are commercially available or purchased from nature, and the roots of grape roots can be used as a raw material. Or cultivated.
본 발명에서 용어, "왕머루포도나무 뿌리 추출물"은 왕머루포도나무 뿌리를 추출하여 수득한 추출물을 의미한다. 상기 왕머루포도나무 뿌리 추출물은 왕머루포도나무 뿌리 분쇄물을 건조 중량의 약 2 내지 20배, 바람직하게는 약 3 내지 5배에 달하는 부피의 물, 메탄올, 에탄올 및 부탄올 등과 같은 탄소수 1(C1) 내지 4(C4)의 저급 알콜의 극성 용매 또는 이들의 약 1:0.1 내지 1:10의 혼합비를 갖는 혼합용매를 용출 용매로써 사용하고, 더욱 바람직하게는 80% 메탄올을 사용할 수 있으며, 추출 온도는 20 내지 100℃, 바람직하게는 실온에서, 추출 기간은 약 12시간 내지 4일, 바람직하게는 3일 동안 열수 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출 또는 초음파 추출 등의 추출방법을 사용하여 추출할 수 있으니, 이제 제한되지 않는다. 바람직하게는 냉침추출로 1회 내지 5회 연속 추출하여 감압여과하고, 그 여과추출물을 진공회전농축기로 20 내지 100℃, 더욱 바람직하게는 실온에서 감압 농축하여 물, 저급 알콜 또는 이들의 혼합용매에 가용한 왕머루포도나무 뿌리 조추출물을 수득한 결과물이 될 수 있으나, 이에 제한되지는 않고, 추출액, 추출액의 희석액 또는 농축액, 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 또는 이들 조정제물 또는 정제물을 모두 포함한다. 상기 왕머루포도나무 뿌리 추출물은 천연, 잡종, 변종식물로부터 추출될 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서는 왕머루포도나무 뿌리의 한약재에 메탄올을 넣고 감압농축하여 추출하였다(제조예 1).In the present invention, the term "royal grape vine root extract" means an extract obtained by extracting roots of royal vine grapes. The vinegrowth root extract is prepared by mixing the vinegared root powder with about 2 to 20 times, preferably about 3 to 5 times the dry weight of water, a 1 (C 1 ) carbon number such as methanol, ethanol and butanol, To 4 (C 4 ) lower alcohol, or a mixed solvent having a mixing ratio of about 1: 0.1 to 1:10 of them, may be used as an elution solvent, more preferably 80% methanol may be used, May be extracted using an extraction method such as hot water extraction, cold extraction, reflux cooling extraction, or ultrasonic extraction for 20 to 100 ° C, preferably at room temperature, and for an extraction time of about 12 hours to 4 days, preferably 3 days Now, it is not limited. Preferably, the extract is continuously extracted one to five times by cold extraction and filtered under reduced pressure. The filtrate is concentrated under reduced pressure at 20 to 100 占 폚, more preferably at room temperature, in a vacuum rotary condenser to prepare water, a lower alcohol or a mixed solvent thereof But the present invention is not limited thereto and includes a dried product obtained by drying an extract, a diluted solution or concentrate of an extract, an extract, or any of these adjusted products or purified products. The vinegars root extract can be extracted from natural, hybrid, and variant plants. In one embodiment of the present invention, methanol was added to the medicinal herbs of the grapevine roots, and the mixture was concentrated under reduced pressure to extract (Production Example 1).
본 발명에서 용어, "분획물"은 다양한 구성성분을 포함하는 혼합물로부터 특정 성분 또는 특정 그룹을 분리하는 분획방법에 의하여 얻어진 결과물을 의미한다. 본 발명의 왕머루포도나무 뿌리의 분획물은 왕머루포도나무 뿌리의 추출물을 물로 현탁한 후, n-헥산, 에틸아세테이트와 같은 비극성 용매를 사용하여 분획함으로써 극성 용매 분획물과 비극성 용매 분획물을 각각 수득할 수 있다. 구체적으로, 왕머루포도나무 뿌리의 조추출물을 증류수에 현탁한 후, 현탁액의 약 1 내지 100배, 바람직하게는 약 1 내지 5배 부피의 n-헥산, 에틸아세테이트와 같은 비극성 용매를 가하여 1회 내지 10회, 바람직하게는 2회 내지 5회에 걸쳐 비극성 용매 가용층을 추출, 분리하여 수득할 수 있다. 또한 추가로 통상의 분획 공정을 수행할 수도 있다(Harborne J.B. Plant Pathology, 1998, 3rd Ed. p6-7,). 보다 구체적으로, 상기 분획물은 (a) 왕머루포도나무 뿌리 추출 건조물을 물에 용해시키고, 상기 용해물에 n-헥산을 혼합하여 물층과 n-헥산층을 분리하는 단계; (b) 상기 n-헥산층을 분리 및 제거하는 단계; (c) 상기 n-헥산층이 제거되고 남은 물층에 에틸아세테이트를 혼합하여 물층과 에틸아세테이트층을 분리하는 단계; (d) 상기 에틸아세테이트층을 분리 및 회수하는 단계; 및 (e) 상기 회수된 에틸아세테이트층에서 용매를 제거하고 이를 농축하여 메치실린 내성 포도상구균(MRSA)에 대한 항균 활성 분획물을 수득하는 단계를 포함한다. 본 발명의 일 실시예에서는 왕머루포도나무 뿌리의 조추출물을 물에 현탁하여, 에틸아세테이트 분획물을 수득하였다(제조예 2 및 도 1).
The term "fraction" in the present invention means a product obtained by a fractionation method for separating a specific component or a specific group from a mixture containing various constituents. The fractions of the vine root of the present invention can be obtained by suspending the extract of the vine root in water with water and then fractionating using a nonpolar solvent such as n -hexane or ethyl acetate to obtain a polar solvent fraction and a nonpolar solvent fraction, respectively . Specifically, a crude extract of a grape vine root is suspended in distilled water, and a non-polar solvent such as n -hexane or ethyl acetate at a rate of about 1 to 100 times, preferably about 1 to 5 times, And then extracting and separating the non-polar solvent soluble layer over 10 times, preferably 2 to 5 times. Further, a conventional fractionation process may be performed (Harborne JB Plant Pathology, 1998, 3rd Ed. P6-7). More specifically, the fraction is obtained by (a) dissolving dried waxy vine root extract in water, and separating the water layer and the n - hexane layer by mixing n - hexane to the melt; (b) separating and removing the n -hexane layer; (c) separating the water layer and the ethyl acetate layer by mixing the remaining water layer with ethyl acetate to remove the n -hexane layer; (d) separating and recovering the ethyl acetate layer; And (e) removing the solvent from the recovered ethyl acetate layer and concentrating it to obtain an antimicrobial active fraction for methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). In one embodiment of the present invention, crude extract of roots of vinegars was suspended in water to give an ethyl acetate fraction (Production Example 2 and Fig. 1).
본 발명의 왕머루포도나무 뿌리 추출물의 에틸아세테이트 분획물은 메치실린 내성 포도상구균(MRSA) 감염증의 예방 또는 치료에 효과적으로 사용될 수 있다.The ethyl acetate fraction of the royal vine root extract of the present invention can be effectively used for the prevention or treatment of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) infection.
본 발명에서 용어. "메치실린"은 페니실린나아제(penicillinase)에 의해 거의 분해되지 않는 페니실린 계열 항생제들 중의 하나로서, 많은 종류의 그램 음성(Gram-negative) 박테리아가 생산하는 베타-락타마아제의 활성을 억제하고, 배지에의 첨가시 그램 양성(Gram-positive) 박테리아의 오염을 억제하며, 대장균의 세포막을 거의 통과하지 못하여 대장균의 세포안으로는 침투할 수 없는 것으로 보고되고 있다.The term in the present invention. "Methicillin" is one of the penicillin antibiotics that is hardly degraded by penicillinase and inhibits the activity of beta-lactamase produced by many kinds of Gram-negative bacteria, It has been reported that the addition to the medium inhibits the contamination of Gram-positive bacteria and can not penetrate the cell membrane of Escherichia coli and penetrate into the cells of Escherichia coli.
본 발명에서 용어, "메치실린 내성 포도상구균(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)"은 메치실린(methicillin)에 대한 내성을 가진 균으로서, β-락탐 계열 항생물질과의 결합력이 약한 새로운 세포벽 합성효소(penicillin binding protein, PBP)의 생산에 의해서 내성이 일어나는 것으로 알려져 있다. 상기 균에 감염될 경우 나타나는 MRSA 감염증은, 입원환자, 의료종사자의 비강 내에서 검출되는 경우가 많고, 외상, 수술, 화상, 면역 저하 등으로 신체 방어 기전에 손상이 있을 때 주로 감염을 일으킨다. 또한 감염된 환자나 보균하고 있는 의료 종사자의 손을 통한 접촉을 통해 전파되거나 의료기구, 침대 등의 환경으로부터 전파될 수도 있다. MRSA에 감염되면, 패혈증, 심내막염, 뇌수막염, 폐렴, 골수염 등의 전신 감염을 일으킬 수 있으며, 얼굴이 빨갛게 붓고, 발열 등의 증상을 보이며, 심할 경우 사망에까지 이르게 된다.The term "Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA)" in the present invention is a microorganism resistant to methicillin, which is a new cell wall synthetase having weak binding ability to? -Lactam antibiotics (penicillin binding protein, PBP). MRSA infections that occur when the bacteria are infected are often detected in the nasal cavities of hospitalized patients and medical practitioners, and are mainly infected when there is damage to the body defense mechanism due to trauma, surgery, burns, or immune degradation. It may also spread through contact with infected patients or by the hands of health care workers, or may spread from environments such as medical devices and beds. Infection with MRSA can cause systemic infections such as sepsis, endocarditis, meningitis, pneumonia, osteomyelitis, redness of the face, symptoms such as fever, and even death.
본 발명에서 용어, "예방"은 상기 조성물의 투여로 MRSA 감염증의 발병을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미하며, "치료"는 상기 조성물에 의해 MRSA 감염증에 의한 증세가 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.In the present invention, the term "prevention" means any action that inhibits or delays the onset of MRSA infection by administration of the composition, and "treatment" .
본 발명의 왕머루포도나무 뿌리의 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 포함하는 약학적 조성물은, 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형체 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다. 이때, 상기 조성물에 포함되는 왕머루포도나무 뿌리의 추출물의 에틸아세테이트 분획물의 함량은 특별히 이에 제한되지 않으나, 조성물 총 중량에 대하여 0.0001 중량% 내지 99.9 중량%로, 바람직하게는 0.001 중량% 내지 10 중량%를 포함할 수 있다.The pharmaceutical composition comprising the ethyl acetate fraction of the extract of the vine root of the present invention may further comprise an appropriate carrier, adduct or diluent conventionally used in the production of a pharmaceutical composition. In this case, the content of the ethyl acetate fraction of the extract of grapevine root roots contained in the composition is not particularly limited but may be in the range of 0.0001 to 99.9% by weight, preferably 0.001 to 10% by weight, . ≪ / RTI >
상기 약학적 조성물은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결 건조제 및 좌제으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가질 수 있으며, 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 하나 이상의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용된다. 경구투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.The pharmaceutical composition may be any one selected from the group consisting of tablets, pills, powders, granules, capsules, suspensions, solutions, emulsions, syrups, sterilized aqueous solutions, nonaqueous solvents, suspensions, emulsions, And may be oral or parenteral formulations of various forms. In the case of formulation, a diluent or excipient such as a filler, an extender, a binder, a wetting agent, a disintegrant, or a surfactant is usually used. Solid formulations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, capsules, and the like, which may contain one or more excipients such as starch, calcium carbonate, sucrose or lactose lactose, gelatin and the like. In addition to simple excipients, lubricants such as magnesium stearate, talc, and the like may also be used. Liquid preparations for oral administration include suspensions, solutions, emulsions, syrups and the like. Various excipients such as wetting agents, sweeteners, fragrances, preservatives and the like may be included in addition to water and liquid paraffin, which are simple diluents commonly used. have. Formulations for parenteral administration include sterilized aqueous solutions, non-aqueous solutions, suspensions, emulsions, freeze-dried preparations, and suppositories. Propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil, injectable ester such as ethyl oleate, and the like can be used as the non-aqueous solvent and suspension agent. Examples of the suppository base include witepsol, macrogol, tween 61, cacao paper, laurin, glycerogelatin and the like.
본 발명의 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여할 수 있다.The composition of the present invention may be administered in a pharmaceutically effective amount.
본 발명에서 용어, "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 개체 종류 및 중증도, 연령, 성별, 질병의 종류, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다. 그리고 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물 형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르며, 적합한 총 1일 사용량은 올바른 의학적 판단범위 내에서 처치의에 의해 결정될 수 있으나, 일반적으로 0.001 내지 1000 mg/kg의 양, 바람직하게는 0.05 내지 200 mg/kg, 보다 바람직하게는 0.1 내지 100 mg/kg의 양을 일일 1회 내지 수회로 나누어 투여할 수 있다. 상기 조성물은 MRSA 감염증의 예방 또는 치료를 목적으로 하는 개체이면 특별히 한정되지 않고, 어떠한 것이든 적용가능하다. 예를 들면, 원숭이, 개, 고양이, 토끼, 모르모트, 랫트, 마우스, 소, 양, 돼지, 염소 등과 같은 비인간동물, 인간, 조류 및 어류 등 어느 것이나 사용할 수 있으며, 투여의 방식은 당업계의 통상적인 방법이라면 제한없이 포함한다. 예를 들어, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관 내 주사에 의해 투여될 수 있다.The term "pharmaceutically effective amount" as used herein means an amount sufficient to treat a disease at a reasonable benefit / risk ratio applicable to medical treatment, and the effective dose level will vary depending on the species and severity, age, sex, The type of drug, the activity of the drug, the sensitivity to the drug, the time of administration, the route of administration and the rate of release, the duration of the treatment, factors including co-administered drugs, and other factors well known in the medical arts. The composition of the present invention may be administered as an individual therapeutic agent or in combination with another therapeutic agent, and may be administered sequentially or simultaneously with a conventional therapeutic agent. And can be administered singly or multiply. It is important to take into account all of the above factors and to administer the amount in which the maximum effect can be obtained in a minimal amount without adverse effect, and can be easily determined by those skilled in the art. The preferred dosage of the composition of the present invention will depend on the condition and the weight of the patient, the degree of disease, the type of drug, the route of administration and the period of time, and the appropriate total daily dose may be determined by treatment, Generally, an amount of 0.001 to 1000 mg / kg, preferably 0.05 to 200 mg / kg, more preferably 0.1 to 100 mg / kg, can be administered in a single dose, divided into several times a day. The composition is not particularly limited as long as it is an object for the prevention or treatment of MRSA infection, and any composition can be applied. For example, any non-human animal such as a monkey, a dog, a cat, a rabbit, a guinea pig, a rat, a mouse, a cattle, a sheep, a pig or a goat can be used. Including, without limitation, methods. For example, by oral, rectal or intravenous, intramuscular, subcutaneous, intra-uterine dural or intracerebral injection.
본 발명의 일 실시예에서는 왕머루포도나무 뿌리의 메탄올 추출물과 이의 n-헥산, 에틸아세테이트, n-부탄올 및 물 분획물의 항균활성을 Disc diffusion assay를 통하여 확인한 결과, MRSA에 대한 에틸아세테이트 분획물의 항균활성이 높음을 확인할 수 있었다(실험예 1 및 도 2). 따라서 본 발명의 왕머루포도나무 뿌리의 추출물의 에틸아세테이트 분획물은 MRSA 감염증의 예방 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
In an embodiment of the present invention, the antimicrobial activity of the methanol extract of the vine root, its n - hexane, ethyl acetate, n - butanol and water fractions was examined by Disc diffusion assay. As a result, the antimicrobial activity of ethyl acetate fraction (Experimental Example 1 and Fig. 2). Therefore, the ethyl acetate fraction of the extract of the vine root of the present invention can be effectively used for the prevention or treatment of MRSA infection.
또 하나의 양태로서, 본 발명은 왕머루포도나무 뿌리 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 포함하는 메치실린 내성 포도상구균(MRSA) 감염증의 예방 또는 개선용 의약외품 조성물을 제공한다.
In another aspect, the present invention provides a quasi-drug composition for preventing or ameliorating methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) infection comprising an ethyl acetate fraction of a grape seed root extract as an active ingredient.
구체적으로, 본 발명의 왕머루포도나무 뿌리 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 MRSA 감염증의 예방 또는 개선을 목적으로 의약외품 조성물에 첨가할 수 있다.Specifically, the ethyl acetate fraction of the vine root extract of the present invention can be added to the quasi-drug composition for the purpose of preventing or improving MRSA infection.
상기 왕머루포도나무, 이의 뿌리 추출물, 분획물 및 메치실린 내성 포도상구균 감염에 대해서는 상기에서 설명한 바와 같다.The above-mentioned grape vine, its root extract, fractions, and methicillin-resistant Staphylococcal infection have been described above.
본 발명에서의 용어, "개선"은 상기 조성물을 이용하여 MRSA 감염증의 의심 및 발병 개체의 증상이 호전되거나 이롭게 되는 모든 행위를 말한다.The term "improvement" in the present invention refers to any action that alleviates the suspicion of a MRSA infection and symptoms of an infectious disease by using the composition.
본 발명에서 용어, "의약외품"은 사람이나 동물의 질병을 치료, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용되는 섬유, 고무제품 또는 이와 유사한 것, 인체에 대한 작용이 약하거나 인체에 직접 작용하지 않으며, 기구 또는 기계가 아닌 것과 이와 유사한 것, 감염 예방을 위하여 살균, 살충 및 이와 유사한 용도로 사용되는 제제 중 하나에 해당하는 물품으로서, 사람이나 동물의 질병을 진단, 치료, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것 및 사람이나 동물의 구조와 기능에 약리학적 영향을 줄 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것을 제외한 물품을 의미하며, 피부 외용제 및 개인위생용품도 포함한다.The term "quasi-drug" in the present invention means a fiber, a rubber product or the like used for the purpose of treating, alleviating, treating or preventing a disease of a human or an animal, a weak action on the human body, Or products similar to those which are not machinery, preparations used for sterilization, insecticides and similar uses for the prevention of infections, for the purpose of diagnosis, treatment, alleviation, treatment or prevention of diseases of human beings or animals Machinery, or apparatus, and that is not an apparatus, machine, or apparatus of an article used for the purpose of giving pharmacological effects to the structure or function of a person or animal, It also includes supplies.
본 발명의 조성물을 MRSA 감염증의 예방 또는 개선을 목적으로 의약외품 조성물에 첨가할 경우, 상기 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 의약외품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효 성분의 혼합량은 사용 목적에 따라 적합하게 결정할 수 있다.When the composition of the present invention is added to a quasi-drug composition for the purpose of preventing or ameliorating MRSA infection, the composition may be added as it is or may be used together with other quasi-drugs, and may be suitably used according to a conventional method. The amount of the active ingredient to be mixed can be appropriately determined depending on the purpose of use.
상기 피부외용제는 특별히 이에 제한되지 않으나, 바람직하게는 연고제, 로션제, 스프레이제, 패치제, 크림제, 산제, 현탁제, 젤제 또는 젤의 형태로 제조되어 사용될 수 있다. 상기 개인위생용품에는 특별히 이에 제한되지 않으나, 바람직하게는 비누, 화장품, 물티슈, 휴지, 샴푸, 피부 크림, 얼굴 크림, 치약, 립스틱, 향수, 메이크업, 파운데이션, 볼터치, 마스카라, 아이섀도우, 선크림 로션, 모발손질 제품, 에어프레쉬너 젤 또는 세정 젤일 수 있다. 또한, 본 발명의 의약외품 조성물의 또 다른 예로 소독청결제, 샤워폼, 가그린, 물티슈, 세제비누, 핸드워시, 가습기 충진제, 마스크, 연고제 또는 필터충진제가 있다.
The external preparation for skin is not particularly limited, but may be preferably used in the form of an ointment, a lotion, a spray, a patch, a cream, a powder, a suspension, an gel or a gel. Such personal care products include but are not limited to soap, cosmetics, wet tissue, tissue paper, shampoo, skin cream, face cream, toothpaste, lipstick, perfume, makeup, foundation, ball touch, mascara, eye shadow, , A hair care product, an air freshner gel or a cleaning gel. Further, another example of the quasi-drug composition of the present invention is a disinfectant cleaner, a shower foam, a gagrin, a wet tissue, a detergent soap, a hand wash, a humidifier filler, a mask, an ointment agent or a filter filler.
또 하나의 양태로서, 본 발명은 상기 약학적 조성물을 인간을 제외한 MRSA 감염증 의심개체에 투여하는 단계를 포함하는, 인간을 제외한 동물의 MRSA 감염증의 치료 방법을 제공한다.
In another aspect, the present invention provides a method for treating a MRSA infection in an animal other than a human, comprising administering the pharmaceutical composition to a suspected MRSA infection susceptible individual other than a human.
본 발명에서 상기 MRSA 감염증의 의심 개체는 MRSA 감염증이 발병하였거나 발병할 수 있는 인간을 포함한 모든 동물을 의미하며, 본 발명의 왕머루포도나무 뿌리 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 포함하는 약학적 조성물을 MRSA 감염증 의심 개체에 투여함으로써, 개체를 효율적으로 치료할 수 있다. 상기 MRSA 감염증에 대해서는 상기에서 설명한 바와 같다.In the present invention, the suspected MRSA infectious disease refers to all animals including humans, which may or may not have developed MRSA infection. The pharmaceutical composition comprising the ethyl acetate fraction of the walnut vine root extract of the present invention may be used for suspected MRSA infection By administering to an individual, the individual can be treated efficiently. The MRSA infection is described above.
본 발명에서 용어, "투여"는 어떠한 적절한 방법으로 MRSA 감염증 의심 개체에게 본 발명의 약학적 조성물을 도입하는 것을 의미하며, 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 경구 또는 비경구의 다양한 경로를 통하여 투여될 수 있다.The term "administering" in the present invention means introducing the pharmaceutical composition of the present invention to a suspected MRSA infectious subject by any appropriate method, and the administration route may be determined by various routes of oral or parenteral routes, ≪ / RTI >
본 발명의 치료 방법은 왕머루포도나무 뿌리 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 포함하는 약학적 조성물을 약학적 유효량으로 투여하는 것을 포함할 수 있다. 적합한 총 1일 사용량은 올바른 의학적 판단범위 내에서 처치의에 의해 결정될 수 있으며, 일반적으로 0.001 내지 1000 mg/kg의 양, 바람직하게는 0.05 내지 200 mg/kg, 보다 바람직하게는 0.1 내지 100 mg/kg의 양을 일일 1회 내지 수회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나 본 발명의 목적상, 특정 환자에 대한 구체적인 치료적 유효량은 달성하고자 하는 반응의 종류와 정도, 경우에 따라 다른 제제가 사용되는지의 여부를 비롯한 구체적 조성물, 환자의 연령, 체중, 일반 건강 상태, 성별 및 식이, 투여 시간, 투여 경로 및 조성물의 분비율, 치료기간, 구체적 조성물과 함께 사용되거나 동시 사용되는 약물을 비롯한 다양한 인자와 의약 분야에 잘 알려진 유사 인자에 따라 다르게 적용하는 것이 바람직하다.
The method of treatment of the present invention may comprise administering a pharmaceutically effective amount of a pharmaceutical composition comprising an ethyl acetate fraction of a grape seed root extract. Suitable total daily doses may be determined by the treatment within the scope of sound medical judgment and are generally in the range of 0.001 to 1000 mg / kg, preferably 0.05 to 200 mg / kg, more preferably 0.1 to 100 mg / kg can be administered once or several times a day. For purposes of the present invention, however, the specific therapeutically effective amount for a particular patient will depend upon the nature and extent of the reaction to be achieved, the particular composition, including whether or not other agents are used, the age, weight, Sex and diet of the patient, the time of administration, the route of administration and the rate of administration of the composition, the duration of the treatment, the drugs used or concurrently used with the specific composition, and similar factors well known in the medical arts.
본 발명에 따른 조성물은 메치실린 내성 포도상구균(MRSA) 감염증의 예방, 치료 또는 개선용으로 유용하게 사용할 수 있으며, 본 발명의 유효성분인 왕머루포도나무 뿌리의 추출물의 에틸아세테이트 분획물은 분리한 천연물 유래의 조성물로서, 합성 의약품에 비하여 부작용의 염려가 없는 안전한 치료제를 제공할 수 있다.
The composition according to the present invention can be usefully used for the prevention, treatment or improvement of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) infectious disease. The ethyl acetate fraction of the extract of the vine root root, which is an effective ingredient of the present invention, Which can provide a safe therapeutic agent that is free of side effects as compared with synthetic drugs.
도 1은 본 발명의 왕머루포도나무 뿌리의 추출물 및 이의 분획물의 분리도를 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명의 왕머루포도나무 뿌리의 메탄올 추출물을 비롯하여 이의 n-헥산, 에틸아세테이트, n-부탄올 및 물 분획물의 메치실린 내성 포도상구균(MRSA)에 대한 항균활성을 측정하기 위한 Disc diffusion assay를 한 결과를 나타낸 도이다. FIG. 1 shows the isolation of the extract of walnut vine root and fractions thereof according to the present invention.
2 is a Disc diffusion assay for measuring the antimicrobial activity of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) of n -hexane, ethyl acetate, n -butanol and water fractions thereof, as well as the methanol extract of the vine root of the present invention Fig.
이하, 본 발명을 하기 실시예 및 실험예에서 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 이들 예는 본 발명의 이해를 돕기 위한 것일 뿐, 이들에 의해 본 발명이 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail in the following Examples and Experimental Examples. However, these examples are provided only to aid understanding of the present invention, and the present invention is not limited thereto.
제조예Manufacturing example
1: 왕머루포도나무 뿌리 추출물의 제조 1: Preparation of vine root extract
왕머루포도나무 뿌리의 한약재 건조중량 500g과 3배(v/v)의 80% 메탄올(MeOH)을 첨가하여 실온에서 24시간 3회 반복하여 침지하였다. 이후 와트만(Whatman) No.2 여과지로 3회 여과하였다. 추출액은 회전진공농축기(rotary vacuum evaporator, Eyela Tokyo Rikakikai Co.)로 40℃에서 감압농축하여 용매를 완전히 제거하였다. 최종적으로 농축물은 20% DMSO 용액을 용매로 하여 사용하였다.
500 g of the dry weight of the medicinal herbs of the vine root and 3 times (v / v) of 80% methanol (MeOH) were added, and the mixture was immersed three times at room temperature for 24 hours. And then filtered three times with Whatman No.2 filter paper. The extract was concentrated under reduced pressure at 40 ° C with a rotary vacuum evaporator (Eyela Tokyo Rikakikai Co.) to completely remove the solvent. Finally, the concentrate was used as a solvent in a 20% DMSO solution.
제조예Manufacturing example
2: 왕머루포도나무 뿌리 추출물의 2: of vine root extract
분획물의Fraction
제조 Produce
상기 왕머루포도나무 뿌리의 80% 메탄올 추출물을 감압농축하여 용매를 완전히 제거한다. 물에 현탁된 추출시료를 저극성용매인 n-헥산(n-hexane)으로 먼저 추출한 후, 수용층을 다시 에틸아세테이트(EtOAc)와 n-부탄올(n-BuOH)을 이용하여 각각 순차적으로 3회 반복하여 분획물을 추출하였다. 상기 분획물을 회전진공농축기(rotary vacuum evaporator)로 40℃에서 감압농축하여 용매를 완전히 제거하였다. The 80% methanol extract of the vine roots is concentrated under reduced pressure to completely remove the solvent. The extracted sample is suspended in water, low-polarity solvent is n-hexane (n -hexane), first extracted, re-ethyl acetate (EtOAc) and the receiving layer n-butanol, using the (n -BuOH) was repeated three times in each sequence And the fractions were extracted. The fractions were concentrated under reduced pressure at 40 < 0 > C using a rotary vacuum evaporator to completely remove the solvent.
각 용매추출 분획을 감압농축하여 건조시킨 후, n-헥산 가용분획(0.31g), 에틸아세테이트 가용분획(8.53g), n-부탄올 가용분획(2.46g), 물 가용분획(4.17g)을 각각 얻었다(도 1). 이 때, Fraction collector는 Eyela DC-1200(Tokyo, Japan)을 사용하였다.
The solvent-extracted fractions were concentrated to dryness under reduced pressure, and then the fraction containing the n -hexane soluble fraction (0.31 g), the ethyl acetate soluble fraction (8.53 g), the n -butanol soluble fraction (2.46 g) and the water soluble fraction (Fig. 1). At this time, the fraction collector was an Eyela DC-1200 (Tokyo, Japan).
실험예Experimental Example
1: 왕머루포도나무 뿌리 추출물 및 1: Grape Root Extract and
분획물의Fraction
항균활성 측정 실험 - Disc Antibacterial activity measurement experiment - Disc
diffusiondiffusion
assayassay
왕머루포도나무 뿌리 추출물 및 이의 분획물의 항균활성은 디스크확산법(Disc diffusion method)로 측정되었다. 액체 배지에서 배양하여 활성화시킨 메치실린 내성 포도상구균(MRSA) 배양액 200㎕를 멸균 면봉으로 평판배지에 균을 고르게 도말하여 균을 흡수시킨다. 그 후, 배지의 표면에 멸균된 8mm paper disc(diameter 8mm, Adantec Co., Japan)를 올려놓은 다음 20% DMSO(dimethylsulfoxide, Junsei, Japan)에 1mg/㎖의 농도로 용해시키고, membrane filter(0.2㎛ Whatman, USA)로 제균시킨 각 추출물 또는 분획물을 30㎕씩 주입하여 완전히 흡수시킨다. 이후 배양기(incubator)에서 배양시켜 paper disc의 직경을 포함한 주위의 inhibition zone의 직경을 측정하였다.
The antimicrobial activity of the vine root extract and its fractions was measured by Disc diffusion method. 200 μl of the methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) culture, which is cultured and activated in a liquid medium, is uniformly plated on a plate medium with a sterilized cotton swab to absorb the bacteria. Thereafter, sterilized 8 mm paper disc (diameter 8 mm, Adantec Co., Japan) was placed on the surface of the culture medium and dissolved in 20% DMSO (dimethylsulfoxide, Junsei, Japan) at a concentration of 1 mg / (Whatman, USA) was inoculated with 30 ㎕ of each extract or fraction. After incubation in an incubator, the diameter of the surrounding inhibition zone including the diameter of the paper disc was measured.
상기와 같은 방법으로 20% DMSO 용액을 대조군(control)(A)으로 하여, 왕머루포도나무 뿌리의 80% 메탄올 추출물(B)과 이들의 n-헥산 분획물(C), 에틸아세테이트 분획물(D), n-부탄올 분획물(E), 물 분획물(F)을 각각 20% DMSO에 1mg/㎖의 농도로 용해시킨 후 항균활성을 측정하였다.The 80% methanol extract (B), the n -hexane fraction (C), the ethyl acetate fraction (D) and the ethyl acetate fraction (B) of the vinegared roots were used as a control (A) The n - butanol fraction (E) and the water fraction (F) were dissolved in 20% DMSO at a concentration of 1 mg / ml.
그 결과, 도 2에서 제시한 바와 같이 왕머루포도나무 뿌리의 에틸아세테이트 분획물에서 가장 높은 항균활성을 나타내었으며, 메치실린 내성 포도상구균(MRSA)에서 14mm로 높은 항균활성을 확인할 수 있었다.
As a result, as shown in FIG. 2, the highest antimicrobial activity was obtained in the ethyl acetate fraction of the vine root, and the antimicrobial activity of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) was as high as 14 mm.
실험예Experimental Example
2: 최소저해농도( 2: Minimum inhibitory concentration (
MinimumMinimum
inhibitoryinhibitory
concentrationconcentration
; ;
MICMIC
) 측정) Measure
왕머루포도나무 뿌리의 80% 메탄올 추출물과 에틸아세테이트 분획물의 최소생육저해농도(MIC)는 96-well plate와 Muller-Hinton 배지를 이용한 표준 2배 희석 방법으로 측정하였다. Muller-Hinton broth 1ℓ를 기준으로 하여 1M의 CaCl2·2H2OThe minimum inhibitory concentration (MIC) of 80% methanol extract and ethylacetate fractions of walnut vine roots was measured by standard 2-fold dilution method using 96-well plate and Muller-Hinton medium. Based on 1 L of Muller-Hinton broth, 1 M CaCl 2 .2H 2 O
5㎖와 1M의 MgCl2·6H2O 2.5㎖를 첨가한 후, 2배 연속 희석법을 이용하여 제조한다. 이 후, 96-well plate에 농도별로 200㎕를 분주한다. 분주한 후 획득한 균주배양액And 2.5 ml of 1 M MgCl 2 .6H 2 O, followed by two-fold serial dilution. Subsequently, 200 μl of each concentration is dispensed into a 96-well plate. After culturing, the obtained culture medium
을 10배 희석하여 Microtube에 분주하여 놓고, 최종 104CFU/well이 되도록 분주하고 하루 배양한 후, 생육이 저해된 최저 농도를 MIC로 결정하였다. 모든 실험은 최소 3회 반복 실시하였다.
Was diluted 10-fold and placed in a microtube. After the cells were divided into 10 4 CFU / well and cultured for one day, the lowest concentration at which growth was inhibited was determined as MIC. All experiments were repeated at least 3 times.
왕머루포도나무 뿌리의 80% 메탄올 추출물과 에틸아세테이트 분획물의 MRSA에 대한 최소저해농도 측정 결과는 하기 표 1에 나타낸 것과 같다.The results of the measurement of the minimum inhibitory concentrations of the 80% methanol extract and the ethyl acetate fraction of MRSA in the vine root of MRSA were as shown in Table 1 below.
80% 메탄올 추출물에 대하여 메치실린 내성 포도상구균(MRSA)에서 16㎍/㎖의 MIC를 확인할 수 있었다. 에틸아세테이트 분획물에 대하여는 메치실린 내성 포도상구균(MRSA)에서 8㎍/㎖의 MIC를 확인할 수 있었다.For 80% methanol extract, MIC of 16 ㎍ / ㎖ was detected in methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). For ethyl acetate fraction, MIC of 8 ㎍ / ㎖ was detected in methicillin - resistant Staphylococcus aureus (MRSA).
이로써, 80% 메탄올 추출물, 에틸아세테이트 분획물이 MRSA에 항균활성을 가지며, 특히 에틸아세테이트 분획물이 더 강한 항균활성을 가짐을 알 수 있었다.Thus, it was found that the 80% methanol extract and ethyl acetate fraction had antimicrobial activity against MRSA, and the ethyl acetate fraction had stronger antimicrobial activity.
Claims (9)
A pharmaceutical composition for the prevention or treatment of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) infection, which comprises a fraction of a root extract of vinegar root as an active ingredient.
[2] The composition according to claim 1, wherein the vine root extract is extracted with water, an alcohol having 1 to 4 carbon atoms (C4), or a mixed solvent thereof.
The composition of claim 1, wherein the extract is a dry extract of methanol.
The composition of claim 1, wherein said fraction is an ethyl acetate fraction.
(a) 왕머루포도나무 뿌리 추출 건조물을 물에 용해시키고, 상기 용해물에 n-헥산을 혼합하여 물층과 n-헥산층을 분리하는 단계;
(b) 상기 n-헥산층을 분리 및 제거하는 단계;
(c) 상기 n-헥산층이 제거되고 남은 물층에 에틸아세테이트를 혼합하여 물층과 에틸아세테이트층을 분리하는 단계;
(d) 상기 에틸아세테이트층을 분리 및 회수하는 단계; 및
(e) 상기 회수된 에틸아세테이트층에서 용매를 제거하고 이를 농축하여 메치실린 내성 포도상구균(MRSA)에 대한 항균 활성 분획물을 수득하는 단계;
를 포함하는 방법에 의해 얻어지는 것인 조성물.
The method of claim 1,
(a) dissolving dried waxy vine root extract in water, and separating the water layer and the n - hexane layer by mixing n - hexane to the melt;
(b) separating and removing the n -hexane layer;
(c) separating the water layer and the ethyl acetate layer by mixing the remaining water layer with ethyl acetate to remove the n -hexane layer;
(d) separating and recovering the ethyl acetate layer; And
(e) removing the solvent from the recovered ethyl acetate layer and concentrating it to obtain an antimicrobial active fraction for methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA);
≪ / RTI >
A quasi-drug composition for preventing or ameliorating methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) infections comprising fractions of a root extract of a grape vine root as an active ingredient.
The composition according to claim 6, wherein the vine root extract is extracted with water, an alcohol having 1 to 4 carbon atoms, or a mixed solvent thereof.
7. The composition of claim 6, wherein the fraction is an ethyl acetate fraction.
A method for treating methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) infections in an animal other than human, comprising administering the composition of any one of claims 1 to 5 to a suspected individual with a methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) infection other than a human. Way.
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|---|---|---|---|
| KR20130043809A KR20140125677A (en) | 2013-04-19 | 2013-04-19 | Composition for protection or treatment of methicillin-resistant Staphylococcus aureus infectious diseases comprising fraction from Vitis amurensis |
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| KR20130043809A KR20140125677A (en) | 2013-04-19 | 2013-04-19 | Composition for protection or treatment of methicillin-resistant Staphylococcus aureus infectious diseases comprising fraction from Vitis amurensis |
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20200116324A (en) * | 2019-04-01 | 2020-10-12 | 고려대학교 산학협력단 | Composition for controlling bacterial spot disease of tomato comprising grape root extract and or its isolated compound as an active ingredient |
-
2013
- 2013-04-19 KR KR20130043809A patent/KR20140125677A/en not_active Application Discontinuation
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| KR20200116324A (en) * | 2019-04-01 | 2020-10-12 | 고려대학교 산학협력단 | Composition for controlling bacterial spot disease of tomato comprising grape root extract and or its isolated compound as an active ingredient |
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