KR20140074996A - 인간 유두종 바이러스 치료에 유용한 구아니디닐-치환된 폴리아미드 - Google Patents

인간 유두종 바이러스 치료에 유용한 구아니디닐-치환된 폴리아미드 Download PDF

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KR20140074996A
KR20140074996A KR1020147012415A KR20147012415A KR20140074996A KR 20140074996 A KR20140074996 A KR 20140074996A KR 1020147012415 A KR1020147012415 A KR 1020147012415A KR 20147012415 A KR20147012415 A KR 20147012415A KR 20140074996 A KR20140074996 A KR 20140074996A
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KR1020147012415A
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제임스 케이. 바쉬킨
테리 쥐. 에드워즈
크리스토퍼 피셔
죠지 디 해리스 제이알.
케빈 제이. 쾰러
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나노비르, 엘엘씨
더 큐레이터스 오브 더 유니버시티 오브 미주리
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    • C07K14/003—Peptide-nucleic acids (PNAs)

Abstract

테트라메틸구아니디닐 라디칼을 비롯하여 구아니디닐 라디칼을 포함하는 폴리아미드 조성물을 개시한다. 이들 폴리아미드는 인간 유두종 바이러스 감염의 치료와 같은 의학적 적용에 유용하다.

Description

인간 유두종 바이러스 치료에 유용한 구아니디닐-치환된 폴리아미드 {GUANIDINYL-SUBSTITUTED POLYAMIDES USEFUL FOR TREATING HUMAN PAPILLOMA VIRUS}
관련 출원에 대한 교차-참조
본 출원은, James K. Bashkin 등에 의해 2011년 10월 10일에 출원되었으며 그 명칭이 "인간 유두종 바이러스 치료에 유용한 구아니디닐-치환된 폴리아미드"인 미국 가출원 제61/545,311 호의 이득을 청구하며, 본 출원의 전체 개시내용은 모든 목적을 위해 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 포함된다.
연방 정부의 후원을 받은 연구 또는 개발에 관한 언급
본 발명은 미국 국립 보건원(National Institutes of Health) 산하 미국 국립 알레르기 및 전염병 연구소(National Institute of Allergy and Infectious Disease; NIAID)에 의해 수여된 NIH grant 2R42AI068159 하에 지원을 받았으며, 따라서, 미국 연방은 본 발명에 대해 소정의 권리를 가지고 있다.
공동 연구 동의서 상의 단체 명칭
없음.
컴팩트 디스크로 제출된 물질의 인용에 의한 보완
없음
기술분야
본 발명은 폴리아미드 화합물, 및 인간 유두종 바이러스(HPV)에 감염된 대상의 치료 요법과 같은 이러한 화합물의 치료적 용도에 관한 것이다.
인간 유두종 바이러스는, 피부, 경구 점막 및 생식기 점막과 같은 여러 가지 중층 상피(stratified epithelia)에서 대량 서식하며, 유두종 (사마귀) 또는 콘딜로마(condyloma)로서 알려진 자가-한정적인 양성 종양의 형성을 유발하는, 소형의 이중-가닥 DNA 바이러스이다. 이들 양성 종양 중 대부분은 숙주의 면역학적 방어 작용으로 인해 자연적으로 퇴화된다. 그러나, 일부 HPV는 종양 형성 능력을 가지고 있으며, 소정의 유형의 암과 관련이 있다. Lorincz et al., Obstetrics & Gynecology, 79:328-337 (1992); Beaudenon et al., Nature, 321:246-249 (1986); 및 Holloway et al., Gynecol. Onc., 41:123-128 (1991)을 참조한다.
HPV는 가장 일반적이며, 성적 접촉에 의해 전염되는 바이러스이다. 35종이 넘는 HPV 유전형이 성적 접촉으로 전염되는 것으로 알려져 있으나, 하위집합(subset)은 항문생식기 감염 대부분의 원인이다. 이들 가장 보편적인 HPV 유형 중 2가지 유형(HPV16 및 HPV18)은 암으로 진행시킬 위험도가 높으며, 다른 2가지 유형(HPV6 및 HPV11)은 대부분의 생식기 혹(genital warts)을 유발한다.
미국에서는 매년 약 550만명의 사람들이 HPV에 감염되며, 현재 약 2000만명의 미국인들이 감염된 상태이다 (Cates and et al., Lancet, 354, Suppl. SIV62, 1999). 남성 및 여성의 생식가능한 연령 집단 중 약 75%가 성적 접촉에 의해 HPV에 감염되지만, 여성의 경우 자궁경부암을 통해 주요 공중 보건의 위험에 노출되어 있다 (Koutsky, Am. J. Med., 102(5A), 3-8, 1997). 따라서, 미국에서만 매년 수백만 명의 사람들이 치료가 필요한 실정이다. PAP 스미어(PAP smear)가 세계에서 가장 광대한 공중 보건 스크리닝 프로그램이며, 이 테스트가 본질적으로 HPV 감염의 측정 방법임을 주지하는 것이 중요하다. 양성 PAP 스미어를 관리하는 현행의 표준은 "추적조사(follow up)"이다. 일반적으로, 진행 단계의 자궁경부 이형성(cervical dysplasia)이 관찰되지 않는 한, 그 어떤 치료법도 권고되지 않는다(CDC Sexually Transmitted Diseases Treatment Guidelines, 2002).
HPV 양성 대상의 경우, 효과적인 HPV 항바이러스 약물이 상당히 요구된다. 현재로서는, HPV 또는 사마귀에 대한 구체적인 치료법은 존재하지 않는다. 외부(external) 생식기 혹 치료에 사용되는 면역조절제인 AldaraTM (이미퀴모드(Imiquimod))는 시중에서 판매되는 가장 성공적인 치료제이다. 효과적이며 특정한 HPV 치료제는 더욱 개선되어, 이미퀴모드와 효과적으로 경쟁할 잠재력을 가진다.
인간 자궁경부 암종의 대부분(95%)은 HPV DNA를 포함 및 발현하며, 이 발현은 세포의 형질전환 및 형질전환된 상태의 유지에 중요한 것으로 여겨지는 2종의 바이러스 종양 단백질인 E6 및 E7의 발현이다. 구체적으로는, 4종의 HPV 유형 (HPV-16, HPV-18, HPV-31, 및 HPV-45)이 미국에서 자궁경부암 사례들 중 75% 내지 93%와 관련이 있다. 세계적으로 여성에서의 모든 암 사망률 중 약 20 퍼센트(20%)가 HPV와 연관된 암으로 인한 것으로 추정된다.
HPV는 또한, 항문암을 유발하는데, 모든 사례들 중 약 85%가 HPV-16에 의한 것이다. HPV 유형 16 및 18 또한, 질암, 회음부암 및 음경암 중 약 절반을 유발하는 것으로 확인되었다.
가장 최근에, HPV 감염은 연구개, 혓바닥, 및 편도선을 포함하는 목구멍(throat)의 중앙부인 구강인두(oropharynx)의 암을 유발하는 것으로 확인되었다. 미국에서, 구강인두암으로 진단받은 사례들 중 절반 이상이 HPV-16과 관련이 있다.
HPV는 이들의 DNA 서열의 독특성을 토대로 하는 유형들로 분류된다.
HPV는 또한, 이들이 관련된 임상적 병변, 또는 이들 병변이 암으로 진행되는 상대적인 경향을 토대로, 고위험군 또는 저위험군으로 분류될 수 있다. HPV 유형 HPV-1, HPV-2, HPV-3, HPV-4, HPV-5, HPV-7, HPV-8, 및 HPV-9과 같은 저위험군의 피부 유형은 보통 사마귀(common wart)(심상성 사마귀(verrucae vulgaris)), 무사마귀(plantar wart)(발바닥 사마귀(verrucae plantaris)), 모자이크 사마귀(mosaic wart), 편평한 사마귀(flat wart)(편평 사마귀(verrucae plane)), 및 부처 사마귀(butcher wart)를 유발한다. 더욱이, HPV-6 및 HPV-11인 HPV 유형은 외부 생식기, 항문 및 자궁경부에서 혹을 유발한다. HPV-16, HPV-18, HPV-31, HPV-33 및 HPV45와 같은 고위험군 유형은 특히, 상피내 암종, 신생물(neoplasia) 및 암에서 보편적이다. 특히, 2종의 HPV 유형인 HPV-16 및 HPV-18의 게놈은 약 70종의 침습성 자궁경부 암종 뿐만 아니라, 구강인두, 항문, 및 기타 점막 조직의 암과 관련이 있는 것으로 확인되었다.
현재 HPV 감염 치료는 극히 제한적이다. 관리는 보통, 감염된 조직의 수술적, 저온수술적, 화학적 또는 레이저 제거에 의해 혹(wart)을 물리적으로 파괴하는 것을 수반한다. 레이저 제거 및 수술과 같은 이들 현행 치료법들 중 일부는 비용이 많이 들고, 치료 부위를 무감각하게 만들기 위해 마취를 사용해야 한다. 저온수술적 제거는 특수한 장비의 사용을 필요로 한다. 더욱이, 대부분의 대상들은 처치 도중과 이후에 중간 정도의 통증(moderate pain)을 경험한다.
5-플루오로우라실, 이미퀴모드, 시도포비르(cidofovir), 포름알데하이드, 글루타랄(glutaral), 시메티딘(cimetidine), 트리클로로아세트산, 블레오마이신(bleomycin), 포도필록스(podofilox) 및 포도필룸(podophyllum) 제제와 같은 국소 크림 및 용액 또한, 사용된 바 있다(Reichman in Harrison's 7 Principles of Internal Medicine, 13th Ed. (Isselbacher et al., eds.); McGraw-Hill, Inc., NY (1993) pp. 801-803). 그러나, 아마도 바이러스가 숙주의 상피 세포 내에 잠복한 채로 남아 있는 이유로, 이러한 치료 후의 재발은 보편적이다. 따라서, 후속해서 반복 치료법이 사용되어야 하며, 이러한 반복은 건강한 조직을 파괴할 수 있다. 이들 치료법은 자궁경부 감염에 이용불가하거나 또는 승인되지 않은 상태이다.
인터페론이 또한, 지속적인 HPV 감염 및 사마귀의 치료제로서 사용된 바 있다. 그러나, 이의 효능은 제한적이다. Chang et al. (2002) Journal of Virology 76: 8864-74에 의하면, HPV 게놈으로 감염된 일부 세포들이 단지 몇 번의 적용 후 인터페론 치료에 대해 내성을 갖게 되는 것으로 밝혀졌다. Cowsert (1994) Intervirol. 37:226-230; Bornstein et al. (1993) Obstetrics Gynecol. Sur. 4504:252-260; Browder et al. (1992) Ann. Pharmacother. 26:42-45를 또한 참조한다.
따라서, 본원에서 열거되는 다수의 질환 및 상태를 치료하기 위한 치료제가 요구되고 있다.
본 발명은 폴리아미드, 폴리아미드-함유 조성물, HPV에 감염된 세포의 치료 방법, 및 HPV에 감염된 대상을 치료하는 방법을 제공한다. 일부 실시형태에서, 폴리아미드 항바이러스 제제는 후두 유두종증(laryngeal papillomatosis), 자궁경부 이형성과 암, 및 재발성 호흡기 유두종증(RRP)의 치료에 적합하다.
본 발명의 폴리아미드는 일반적으로, 도 1에 제시되는 바와 같은 복수의 카르복사미드 반복 단위, 및 분자 당 하나 이상의 구아니디닐 라디칼을 포함하는 중합체 또는 올리고머 분자로서 기술될 수 있다. 일 실시형태에서, 폴리아미드는, γ-아미노부티르산 (γ); (R) 또는 (S) 이성질체일 수 있으며, (알파 턴(alpha turn)을 형성하기 위해) 2-아미노기 또는 (감마 턴(gamma turn)을 형성하기 위해) 4-아미노기를 통해 폴리아미드의 백본에 결합될 수 있는, 2,4-디아미노부티르산 (γNH2); 또는 R이 -(CH2)3-N(CH3)-(CH2)3-NH2 (γNHR') 또는 -(CH2)3-N(CH3)2 (γNHR")인 H2N(CH2)2CH(NHC(=O)NHR)CO2H ((R) 또는 (S) 이성질체)로부터 선택되는 내부 단위(interior unit)를 포함하는 폴리아미드 백본과, 2,4-디아미노부티르산 (γNH2)에 대해 펜던트이며 및/또는 R이 -(CH2)3-N(CH3)-(CH2)3-NH2 (γNHR')인 H2N(CH2)2CH(NHC(=O)NHR)CO2H에 대해 펜던트이며, 및/또는 상기 폴리아미드 백본의 말단 위치에 존재하는 하나 이상의 구아니디닐 라디칼을 포함하는 화합물이다. 상기 화합물은 이러한 폴리아미드의 약학적으로 허용가능한 염일 수 있다. 본 발명의 맥락에서, "내부"는 말단 (종결) 위치가 아닌 중합체 백본 상의 위치 또는 말단 위치에 바로 인접한 위치를 의미한다. 폴리아미드 백본은 전술한 내부 단위 외에도, 4-아미노-2-카르보닐-N-메틸이미다졸 (Im), 4-아미노-2-카르보닐-N-메틸피롤 (Py) 및 β-알라닌 (β)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 복수의 단위 (예를 들어, 5 개 내지 30개, 7 개 내지 28 개, 9 개 내지 24 개, 11 개 내지 22 개, 15 개 내지 21개, 또는 16 개 내지 21개의 단위)를 포함한다.
본 발명의 일 태양에서, 구아니디닐 라디칼은 말단 4-아미노-2-카르보닐-N-메틸피롤 (Py) 단위에 결합되어 있다 (즉, Py 단위에 최초로 존재하는 1차 아민기는 구아니디닐 라디칼의 일부가 됨). 본 발명의 다른 태양에서, des-아미노이미다졸 (des-Im, 도 1의 화학식 XI)은 상기 분자의 아미노-말단을 형성하며, 구아니디닐 라디칼은 상기 분자에서 Ta 또는 γNH2 기와 같은 임의의 위치에서 아미노기에 결합된다.
본 발명의 다른 태양에서, 구아니디닐 라디칼은 비치환 또는 치환될 수 있다. 즉, 구아니디닐 라디칼에 존재하는 3개의 질소 원자는 수소가 아닌 치환기를 가질 수 있다. 이러한 치환기는 예를 들어, 알킬, 아르알킬 및/또는 아릴 기일 수 있다. 다양하게 치환된 이들 구아니디닐 라디칼 및 이들과 관련된 호변이성질체들의 예는 도 8a 및 8b에 나타나 있다. 본 발명의 일 실시형태에서, 2개의 질소 원자는 각각 C1-C4 알킬기와 같은 알킬기를 2개 가진다. 예를 들어, 구아니디닐 라디칼은 테트라메틸구아니디닐(TMG)일 수 있다.
이 화합물은 3,3'-디아미노-N-메틸디프로필아민(Ta) 또는 3-(디메틸아미노)프로필아민(Dp)으로부터 선택되는 C 말단 종결 기를 포함할 수 있다.
일부 실시형태에서, 본 발명은 하기 화학식의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하며:
Z-(X)n-γq-(X)m-A
상기 식에서,
M은 3 내지 16(또는 4 내지 15, 5 내지 14, 6 내지 13 또는 7 내지 12)이며;
N은 2 내지 14(또는 3 내지 13, 3 내지 12, 4 내지 12, 또는 4 내지 10)이며;
Z은 구아니디닐화된 4-아미노-2-카르보닐-N-메틸피롤, N-포르밀화된 4-아미노-2-카르보닐-N-메틸피롤, N-아세틸화된 4-아미노-2-카르보닐-N-메틸피롤, 또는 des-아미노이미다졸(des-Im, 도 1의 화학식 XI)이며;
X는 각각 독립적으로 4-아미노-2-카르보닐-N-메틸이미다졸(Im, 도 1의 화학식 II), 4-아미노-2-카르보닐-N-메틸피롤(Py, 도 1의 화학식 I) 또는 β-알라닌(β, 도 1의 화학식 III)으로부터 선택되며;
γq는 γ-아미노부티르산(γ, 도 1의 화학식 IV); 2,4-디아미노부티르산(γNH2, 2,4-디아미노부티르산이 (R) 이성질체이며 폴리아미드에의 결합이 γ 아미노기를 통해 이루어지는 경우, 도 1의 화학식 V에 상응함); 구아니디닐화된 2,4-디아미노부티르산; 또는 R이 -(CH2)3-N(CH3)-(CH2)3-NH2(γNHR', 도 1의 화학식 VIII), 구아니디닐화된 -(CH2)3-N(CH3)-(CH2)3-NH2, 또는 -(CH2)3-N(CH3)2(γNHR", 도 1의 화학식 IX)인 H2N(CH2)2CH(NHC(=O)NHR)CO2H이며;
A는 3,3'-디아미노-N-메틸디프로필아민(Ta, 도 1의 화학식 VII), 구아니디닐화된 3,3'-디아미노-N-메틸디프로필아민; 또는 3-(디메틸아미노)프로필아민(Dp, 도 1의 화학식 VI)이며;
상기 화합물은 구아니디닐화된 1차 아민기를 하나 이상 포함한다.
다른 실시형태에서, 본 발명은 하기 화학식의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하며:
G-(X)n-γq-(X)m-A
상기 식에서,
M은 5 내지 12이며;
n은 4 내지 10이며;
G는 구아니디닐 라디칼이며;
X는 각각 독립적으로 4-아미노-2-카르보닐-N-메틸이미다졸(Im, 도 1의 화학식 II), 4-아미노-2-카르보닐-N-메틸피롤(Py, 도 1의 화학식 I) 또는 β-알라닌(β, 도 1의 화학식 III)으로부터 선택되며;
γq는 γ-아미노부티르산(γ, 화학식 IV); 2,4-디아미노부티르산(γNH2, 2,4-디아미노부티르산이 (R) 이성질체이며 폴리아미드에의 결합이 γ 아미노기를 통해 이루어지는 경우, 화학식 V에 상응함); 또는 R이 -(CH2)3-N(CH3)-(CH2)3-NH2 (γNHR', 화학식 VIII) 또는 -(CH2)3-N(CH3)2(γNHR", 화학식 IX)인 H2N(CH2)2CH(NHC(=O)NHR)CO2H 이며; 및
A는 3,3'-디아미노-N-메틸디프로필아민(Ta, 화학식 VII) 또는 3-(디메틸아미노)프로필아민(Dp, 화학식 VI)이다.
소정의 실시형태에서, m은 10 또는 11이다. 다른 실시형태에서, m은 5, 6, 7, 8, 또는 9이다. 다른 실시형태에서, n은 7, 8, 또는 9이다. 다른 실시형태에서, n은 4, 5 또는 6이다. 또 다른 실시형태에서, 이 화합물은 Im 단위를 분자 당 2개 이하, 또는 1개 이하로 포함한다. 또 다른 실시형태에서, 상기 화합물은 구조 서열 -(X)m- 및/또는 구조 서열 -(X)n-에 Im 단위를 포함하지 않는다. 소정의 실시형태에서, 구조 서열 -(X)n-은 1, 2 또는 3개의 β 단위를 포함할 수 있다. 이 구조 서열 -(X)n- 또는 -(X)m-이 2개 이상의 β 단위를 포함하는 경우, 이러한 단위는 모두 하나 이상의 Im 및/또는 Py 단위에 의해 분리될 수 있다. 폴리아미드는 β 단위를 종결 기 A에 인접해서 포함할 수 있다. 폴리아미드는 Py 단위를 다른 종결 기 G에 인접해서 포함할 수 있다. 소정의 실시형태에서, 구조 서열 -(X)m-은 2, 3, 4 또는 5개의 β 단위를 포함할 수 있다. 본 발명의 소정의 실시형태에서, 폴리아미드 화합물은 서로 인접한 β 단위가 없는 것을 특징으로 할 수 있다.
다른 실시형태에서, 이 화합물은 하기의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 이들의 혼합물일 수 있다:
TMG-PyPyβPyPyβPyIm-γNH2-PyβPyPyβPyPyPyβPyPy-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPyIm-γNHR'-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPyIm-γNH2-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPy-γNHR'-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPyIm-γNH2-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Dp;
TMG-PyPyPyβPyPyβPy-γNH2-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPy-γNH2-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Dp;
TMG-PyβPyPyImβPyPy-γ-PyPyβPyPyPyβPyPyPyβ-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPy-γNH2"-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Dp;
TMG-PyβPyPyImβPyPy-γ-PyPyβPyPyPyβPyPyPyβ-Dp;
TMG-PyPyβPyPyPy-γ-PyPyβPyPyPyPyβ-Dp;
TMG-PyPyβPyPyPy-γ-PyPyβPyPyPyPyβ-Ta;
TMG-PyPyβPyPyImβPyPy-γ-PyPyβPyPyPyβPyPyPyβ-Ta;
TMG-PyPyβPyPyImβPyPy-γ-PyPyβPyPyPyβPyPyPyβ-Dp;
TMG-PyPyPyβPyPyβPyIm-γ-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPyIm-γ-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Dp;
TMG-PyPyβPyPyβPyIm-γ-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Dp;
TMG-PyPyβPyPyβPyIm-γ-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyβPyPyβPy-γNH2-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyβPyPyβPyIm-γNH2-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyβPyPyβPy-γ-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPy-γ-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta.
또 다른 실시형태에서, 본 발명은 전술한 1종 이상의 화합물 치료적 유효량과, 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 태양에서, 이 조성물은 항바이러스 제제를 추가로 포함한다. 이 항바이러스 제제는 예를 들어, 인터페론, 이미퀴모드, 시도포비르, 포름알데하이드, 글루타랄, 시메티딘, 5-플루오로우라실, 트리클로로아세트산, 블레오마이신, 포도필록스 또는 포도필룸일 수 있다.
또 다른 실시형태에서, 본 발명은, 결합이 발생할 수 있게 하는 조건 하에, 이중-가닥 DNA 내 DNA-표적 서열을 본원에서 기술되는 하나 이상의 화합물 중 DNA-결합 화합물과 접촉시키는 단계를 포함하는, 이중-가닥 DNA를 서열-특이적인 방식으로 결합시키는 방법을 제공한다. 이 방법은 생체 내, 시험관 내, 또는 생체 외에서 수행될 수 있다. 또한, 상기 방법은 세포에서 수행될 수 있으며, 이중 가닥 DNA는 세포에 대해 내인성이거나 또는 이종성일 수 있다.
폴리아미드 결합 친화성 및 서열 특이성은 당해 기술분야에 공지된 정성적 및 정량적 풋프린트 적정 실험(footprint titration experiment)을 통해 측정될 수 있다 (Brenowitz, M.; Senear, D. F.; Shea, M. A.; Ackers, G. K. Methods Enzymol. 1986, 130, 132; Mitra, S.; Shcherbakova, I. V.; Altman, R. B.; Brenowitz, M.; Laederach, A. Nucl. Acids Res. 2008, 36, e63; White, S.; Baird, E. E.; Dervan, P. B. Biochemistry 1996, 35, 12532; 및 White, S.; Baird, E. E.; Dervan, P. B. Chemistry & Biology 1997, 4, 569 참조; 참조 문헌 모두는 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 포함됨).
본 발명의 폴리아미드는, 특이적인 서열의 이중 가닥 DNA의 존재 여부를 진단 또는 예비 목적으로 검출하는 데 유용할 수 있다. 이중 가닥 DNA를 포함하는 샘플을 고체 기질에 결합된 폴리아미드와 접촉시켜, 목적하는 서열을 포함하는 DNA를 분리할 수 있다. 다르게는, 비오틴, 합텐, 방사성동위원소 또는 염료 분자와 같은 적절한 검출가능한 마커에 결합된 폴리아미드를, 이중 가닥 DNA를 포함하는 샘플과 접촉시킬 수 있다.
또 다른 실시형태에서, 본 발명은, 신생물 세포를 전술한 하나 이상의 화합물 유효량과 접촉시키는 단계를 포함하는, 신생물 세포의 증식을 감소 또는 저해하는 방법을 제공한다. 이들 신생물 세포는 결장암종 세포, 간세포암종 세포, 자궁경부 암종 세포, 폐 상피암종(lung epidermocarcinoma) 세포, 유선 샘암종(mammary gland adenocarcinoma) 세포, 췌장암종 세포, 전립선암종 세포, 골육종 세포, 흑색종 세포, 급성 전골수구성 백혈병(acute promyelocytic leukemia) 세포, 급성 림프구성 백혈병 세포, 간췌장 선암종(hepatocancreatico adenocarcinoma) 세포 및 버킷림프종(Burkitt's lymphoma) B 세포로 이루어진 군으로부터 선택되는 세포들을 비롯한 암세포일 수 있다.
본 발명은 또한, 바이러스에 감염된 세포를 본 발명에 따른 폴리아미드 유효량과 접촉시키는 단계를 포함하는, 바이러스에 감염된 세포의 치료 방법을 제공한다. 이 바이러스는 HPV, 또는 그외의 이중-가닥 DNA 바이러스일 수 있다. HPV에 감염된 대상은, 본원에서 기술되는 구조를 가진 폴리아미드 유효량을 대상에게 투여하는 단계를 포함하는 방법에 의해 치료될 수 있다. 폴리아미드 화합물은 상기 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학 조성물 형태로 투여될 수 있다.
또 다른 실시형태에서, 본 발명은 HPV에 감염된 세포를 본원에서 기술되는 화합물과 접촉시키는 단계를 포함하는, HPV에 감염된 세포의 치료 방법을 제공한다. 본 발명의 일 태양에서, 이 방법은 상기 세포를 항바이러스 제제와 접촉시키는 단계를 추가로 포함한다. 상기 항바이러스 제제는 예를 들어, 인터페론, 이미퀴모드, 시도포비르, 포름알데하이드, 글루타랄, 시메티딘, 5-플루오로우라실, 트리클로로아세트산, 블레오마이신, 포도필록스 또는 포도필룸일 수 있다.
또 다른 실시형태에서, 본 발명은, 본원에서 기술되는 화합물 또는 약학 조성물을 대상에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상에서 HPV에 감염된 세포를 치료하는 방법을 제공한다. 본 발명의 일 태양에서, 이 방법은 상기 세포를 항바이러스 제제와 접촉시키는 단계를 추가로 포함한다. 상기 항바이러스 제제는 예를 들어, 인터페론, 이미퀴모드, 시도포비르, 포름알데하이드, 글루타랄, 시메티딘, 5-플루오로우라실, 트리클로로아세트산, 블레오마이신, 포도필록스 또는 포도필룸일 수 있다. 다른 태양에서, HPV는 HPV1, HPV6, HPV11, HPV16, HPV18, HPV31, HPV33, HPV35, HPV39, HPV45, HPV51, HPV52, HPV56, HPV58, HPV59, HPV66 또는 HPV68일 수 있다.
다른 실시형태에서, 본 발명은 본원에서 기술되는 화합물을 대상에게 투여하는 단계를 포함하는, HPV16에 감염된 세포의 치료 방법을 제공한다.
다른 실시형태에서, 본 발명은 화학식 TMG-(X)n-γq-(X)m-A의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 대상에게 투여하는 단계를 포함하는, HPV16, HPV18 또는 HPV31에 감염된 세포의 치료 방법을 제공하며, 여기서, m은 5, 6, 7, 8, 9, 10 또는 11이며, n은 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 또는 11이고; 그외 치환기들은 전술한 바와 같다.
다른 실시형태에서, 본 발명은 하기 화합물들로부터 선택되는 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 이들의 혼합물을 유효량으로 대상에게 투여함으로써, 대상에서 HPV16, HPV18 및/또는 HPV31에 감염된 세포를 치료하는 방법을 제공한다:
TMG-PyPyβPyPyβPyIm-γNH2-PyβPyPyβPyPyPyβPyPy-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPyIm-γNHR'-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPyIm-γNH2-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPy-γNHR'-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPyIm-γNH2-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Dp;
TMG-PyPyPyβPyPyβPy-γNH2-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPy-γNH2-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Dp;
TMG-PyβPyPyImβPyPy-γ-PyPyβPyPyPyβPyPyPyβ-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPy-γNHR"-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Dp;
TMG-PyβPyPyImβPyPy-γ-PyPyβPyPyPyβPyPyPyβ-Dp;
TMG-PyPyβPyPyPy-γ-PyPyβPyPyPyPyβ-Dp;
TMG-PyPyβPyPyPy-γ-PyPyβPyPyPyPyβ-Ta;
TMG-PyPyβPyPyImβPyPy-γ-PyPyβPyPyPyβPyPyPyβ-Ta;
TMG-PyPyβPyPyImβPyPy-γ-PyPyβPyPyPyβPyPyPyβ-Dp;
TMG-PyPyPyβPyPyβPyIm-γ-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPyIm-γ-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Dp;
TMG-PyPyβPyPyβPyIm-γ-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Dp;
TMG-PyPyβPyPyβPyIm-γ-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyβPyPyβPy-γNH2-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyβPyPyβPyIm-γNH2-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyβPyPyβPy-γ-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPy-γ-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta.
실시형태의 소정의 태양에서, 전술한 방법은 항바이러스 제제의 투여 단계를 추가로 포함한다. 이 항바이러스 제제는 예를 들어, 인터페론, 이미퀴모드, 시도포비르, 포름알데하이드, 글루타랄, 시메티딘, 5-플루오로우라실, 트리클로로아세트산, 블레오마이신, 포도필록스 또는 포도필룸일 수 있다.
본 발명의 폴리아미드는, HPV에 대한 시험관 내 효능을 HPV-관련 질환의 치료를 위한 시도포비르 또는 인터페론보다 우수하게 발휘한다. 이들 질환으로는, 생식기 또는 피부 혹, HPV에 의해 유발되는 자궁경부 상피를 비롯한 경구 또는 생식기 조직의 HPV 감염, 항문암, 신생물 또는 과다증식성 병변, 결막 유두종, 콘딜로마 아쿠물라타(condyloma accumulata) 및 재발성 호흡기 유두종증(RRP)을 포함할 수 있다.
도 1은 본 발명의 폴리아미드에 존재할 수 있는 여러 가지 빌딩 블록의 구조를 예시한 것이다.
도 2는 본 발명에 따른 특정한 예시의 폴리아미드 (화합물 NV1096)의 구조를 예시한 것이다.
도 3은, 구아니디닐 라디칼이 테트라치환된, 본 발명에 따른 구아니디닐화된 폴리아미드를 제공하도록 적용될 수 있는 합성 경로를 예시한 것이다.
도 4는, 구아니디닐 라디칼이 비치환된(즉, 구아니디닐 라디칼 내 질소 원자 중 어느 것도 수소 이외의 치환기를 가지지 않는), 본 발명에 따른 구아니디닐화된 폴리아미드를 제공하도록 적용될 수 있는 합성 경로를 예시한 것이다.
도 5는, 구아니디닐 라디칼이 모노치환 또는 gem-디치환된, 본 발명에 따른 구아니디닐화된 폴리아미드를 제공하도록 적용될 수 있는 합성 경로를 예시한 것이다.
도 6은, 구아니디닐 라디칼이 N,N'-디치환, N,N,N'-트리치환, 또는 N,N,N',N'-테트라치환된, 본 발명에 따른 구아니디닐화된 폴리아미드를 제공하도록 적용될 수 있는 합성 경로를 예시한 것이다.
도 7은, 구아니디닐 라디칼이 N,N'-디치환 또는 N,N',N'-트리치환된, 본 발명에 따른 구아니디닐화된 폴리아미드를 제공하도록 적용될 수 있는 합성 경로를 예시한 것이다.
도 8a 및 8b는, 본 발명의 폴리아미드에 존재할 수 있는, 호변이성질체 및 서로 다른 치환 패턴을 포함하는, 여러 가지 유형의 구아니디닐 라디칼을 예시한 것이다.
도 9는 HPV16 서열(365 bp: 7662-122) 상에서의 NV1087의 풋프린팅 실험을 예시한 것이다. 모든 반응은 DMSO 및 CHAPS의 존재 하에 수행하였으며, 최종적인 DNA 농도는 200 pM이었다. 폴리아미드 농도는 다양하였다(2 nM 내지 5 nM). 반응물은 폴리아미드와 37℃에서 5 내지 6시간 동안 인큐베이션하였다. 대조군 피크와 비교한 피크 높이의 감소는, 폴리아미드 농도의 증가가 DNase I에 의한 분해로부터 DNA를 보호함을 의미하는 것으로 해석된다.
약어 및 정의
본 발명의 이해를 돕기 위해, 본원에 사용된 바와 같은 다수의 용어 및 약어가 하기와 같이 정의된다:
본원에서, 용어 "신생물 세포"는 정상보다 더 빠른 속도의 세포 증식에 의해 성장하는 비정상적인 세포를 지칭한다. 본 발명의 신생물 세포는 양성 신생물의 세포일 수 있거나 또는 악성 신생물의 세포일 수 있다. 본원에서, 용어 "신생물 질환(neoplastic disease)"은 환자에서 신생물 세포의 존재에 의해 유발되거나 또는 이와 관련된, 환자의 상태를 지칭한다. 암은 신생물 질환의 일례이다. 소정의 태양에서, 신생물 세포는 암세포이다. 암세포는 예를 들어, 암종, 흑색종, 백혈병, 육종 또는 림프종을 비롯하여 임의의 유형의 암일 수 있다.
용어 "암종"은 주변 조직에 침윤하여 전이를 유발할 경향이 있는, 상피 세포로 이루어진 악성의 새로운 성장물을 지칭한다. 본 발명의 환경적인 영향물질(environmental influencer)로 치료될 수 있는 암종으로는, 예를 들어, 세엽세포 암종(acinar carcinoma), 선방상 암종(acinous carcinoma), 선낭성 암종(adenocystic carcinoma), 선양낭포 암종(adenoid cystic carcinoma), 아데노마 암종(carcinoma adenomatosum), 부신 피질 암종, 폐포 암종, 폐포 세포 암종, 기저 세포 암종, 기저 세포 암종(carcinoma basocellulare), 기저 세포양 암종(basaloid carcinoma), 기저편평 세포 암종(basosquamous cell carcinoma), 기관지폐포 암종(bronchioalveolar carcinoma), 세기관지성 암종(bronchiolar carcinoma), 기관지원성 암종(bronchogenic carcinoma), 대뇌양 암종(cerebriform carcinoma), 담관세포 암종(cholangiocellular carcinoma), 융모막 암종(chorionic chorionic), 콜로이드 암종(colloid carcinoma), 코메도 암종(comedo carcinoma), 자궁체부 암종(corpus carcinoma), 크리브리폼 암종(cribriform carcinoma), 갑옷 암종(carcinoma en cuirasse), 피부 암종(carcinoma cutaneum), 원통형 암종(cylindrical carcinoma), 원통형 세포 암종(cylindrical cell carcinoma), 관 암종(duct carcinoma), 경성 암종(carcinoma durum), 배아 암종(embryonal carcinoma), 뇌양 암종(encephaolid carcinoma), 표피양 암종(epiermoid carcinoma), 상피 선양 암종(carcinoma epitheliale adenoides), 외방성 암종(exophytic carcinoma), 궤양 암종(carcinoma ex ulcere), 섬유성 암종(carcinoma fibrosum), 젤라티니포름 암종(gelatiniform carcinoma), 젤라틴성 암종(gelatinous carcinoma), 거대 세포 암종(giant cell carcinoma), 거대 세포성 암종(carcinoma gigantocellulare), 선 암종(glandular carcinoma), 과립막 세포 암종(granulosa cell carcinoma), 모-기질 암종(hair-matrix carcinoma), 혈액양 암종(hematoid carcinoma), 간세포암종, 휘르트레 세포 암종(Hurthle cell carcinoma), 유리질 암종(hyaline carcinoma), 하이퍼메프로이드 암종(hypemephroid carcinoma), 영아성 배아 암종(infantile embryonal carcinoma), 상피내 암종(carcinoma in situ), 표피내 암종(intraepidermal carcinoma), 상피내 암종, 크롬페처 암종(Krompecher's carcinoma), 쿨치츠키-세포 암종(Kulchitzky-cell carcinoma), 대세포 암종(large-cell carcinoma), 수정체 암종(lenticular carcinoma), 수정체성 암종(carcinoma lenticulare), 지방종성 암종(lipomatous carcinoma), 림프상피 암종(lymphoepithelial carcinoma), 수질성 암종(carcinoma medullare), 수질 암종(medullary carcinoma), 멜라닌 암종(melanotic carcinoma), 몰 암종(carcinoma molle), 점액 암종(mucinous carcinoma), 무시파룸 암종(carcinoma muciparum), 점액세포성 암종(carcinoma mucocellulare), 점막표피양 암종(mucoepidermoid carcinoma), 점액성 암종(carcinoma mucosum), 점액 암종(mucous carcinoma), 믹소마토데스 암종(carcinoma myxomatodes), 비인두 암종(nasopharyngeal carcinoma), 귀리 세포 암종(oat cell carcinoma), 골화성 암종(carcinoma ossificans), 유골 암종(osteoid carcinoma), 유두 암종(papillary carcinoma), 문맥주위 암종(periportal carcinoma), 전-침습성 암종(preinvasive carcinoma), 극세포 암종(prickle cell carcinoma), 풀타세우스 암종(pultaceous carcinoma), 신장의 신세포 암종, 예비 세포 암종(reserve cell carcinoma), 육종성 암종(carcinoma sarcomatodes), 시나이더 암종(schneiderian carcinoma), 경성 암종(scirrhous carcinoma), 음낭 암종(carcinoma scroti), 환세포 암종(signet ring cell carcinoma), 단순성 암종(carcinoma simplex), 소세포 암종, 솔라노이드 암종(solanoid carcinoma), 구상 세포 암종(spheroidal cell carcinoma), 방추 세포 암종(spindle cell carcinoma), 해면양 암종(carcinoma spongiosum), 편평 암종, 편평세포 암종, 스트링 암종(string carcinoma), 모세혈관 확장성 암종(carcinoma telangiectaticum), 모세혈관 확장형 암종(carcinoma telangiectodes), 이행 세포 암종(transitional cell carcinoma), 결절형 암종(carcinoma tuberosum), 결절성 암종(tuberous carcinoma), 우췌성 암종(verrucous carcinoma), 및 빌로숨 암종(carcinoma villosum)을 포함하나, 이로 한정되지 않는다.
본 발명의 목적을 위해, 화학 원소는 원소 주기율표(Periodic Table of the Elements), CAS version, Handbook of Chemistry and Physics, 75th Ed에 따라 확인된다. 추가적으로, 유기 화학의 일반적인 원리는 "Organic Chemistry", Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito: 1999, 및 "March's Advanced Organic Chemistry", 5th Ed., Ed.: Smith, M. B. and March, J., John Wiley & Sons, New York: 2001에 기술되어 있다.
본원에서, 유효량은 치료를 받는 대상에게 치료 효과를 부여하는 데 필요한 양으로서 정의되며, 전형적으로는 대상의 연령, 표면적, 체중 및 상태를 토대로 결정된다. (체표면 ㎡ 당 mg을 기준으로 한) 동물과 인간의 투여량들 간의 연관성은 Freireich et al., Cancer Chemother. Rep., 50: 219 (1966)에 기술되어 있다. 체표면적은 대상의 키와 체중으로부터 대략적으로 측정될 수 있다. 예를 들어, Scientific Tables, Geigy Pharmaceuticals, Ardsley, New York, 537 (1970)을 참조한다. 본원에서, "대상"은 인간을 비롯한 포유류와 같은 동물을 지칭한다.
다르게 명시되지 않는 한, 본원에서 도시되는 구조들은 또한, 그 구조의 이성질체(예를 들어, 거울상이성질체, 부분입체이성질체, 및 기하이성질체(또는 형태이성질체)) 형태; 예를 들어, 각각의 비대칭 중심에 대한 R 및 S 배열, (Z) 및 (E) 이중 결합 이성질체, 및 (Z) 및 (E) 형태이성질체를 모두 포함하는 것으로 의미된다. 따라서, 본 발명의 화합물의 단일 입체화학 이성질체뿐만 아니라 거울상이성질체, 부분입체이성질체, 및 기하이성질체(또는 형태이성질체)의 혼합물들도 본 발명의 범위에 포함된다. 다르게 명시되지 않는 한, 본 발명의 화합물의 모든 호변이성질체 형태는 본 발명의 범위에 포함된다. 부가적으로, 다르게 명시되지 않는 한, 본원에서 도시되는 구조들은 또한, 하나 이상의 동위원소 농축(isotopically enriched) 원자의 존재 하에서만 서로 상이한 화합물들을 포함하는 것으로도 의미된다. 예를 들어, 수소를 중수소 또는 삼중 수소로 치환하거나 또는 탄소를 13C- 또는 14C-농축 탄소로 치환한 것을 제외한, 본 발명의 구조를 가진 화합물들은 본 발명의 범위에 포함된다. 이러한 화합물들은 예를 들어, 생물학적 분석법에서 분석 툴이나 프로브로서 유용하다.
본원에서, "알킬"기는 1개 내지 8개(예를 들어, 1개 내지 6개, 또는 1개 내지 4개)의 탄소 원자를 포함하는 포화된 지방족 탄화수소 기를 지칭한다. 알킬기는 직쇄 또는 분지형일 수 있다. 알킬기의 예로는, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸, n-펜틸, n-헵틸 또는 2-에틸헥실을 포함하나, 이로 한정되지 않는다. 알킬기는, 할로; 지환족[예를 들어, 사이클로알킬 또는 사이클로알케닐]; 헤테로지환족[예를 들어, 헤테로사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알케닐]; 아릴; 헤테로아릴; 알콕시; 아로일; 헤테로아로일; 아실[예를 들어, (지방족)카르보닐, (지환족)카르보닐, 또는(헤테로지환족)카르보닐]; 니트로; 시아노; 아미도[예를 들어, (사이클로알킬알킬)카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 아르알킬카르보닐아미노, (헤테로사이클로알킬)카르보닐아미노, (헤테로사이클로알킬알킬)카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 헤테로아르알킬카르보닐아미노 알킬아미노카르보닐, 사이클로알킬아미노카르보닐, 헤테로사이클로알킬아미노카르보닐, 아릴아미노카르보닐, 또는 헤테로아릴아미노카르보닐]; 아미노[예를 들어, 지방족아미노, 지환족아미노, 또는 헤테로지환족아미노]; 설포닐[예를 들어, 지방족-S(O)2-]; 설피닐; 설파닐; 설폭시; 우레아; 티오우레아; 설파모일; 설파미드; 옥소; 카르복시; 카르바모일; 지환족옥시; 헤테로지환족옥시; 아릴옥시; 헤테로아릴옥시; 아르알킬옥시; 헤테로아릴알콕시; 알콕시카르보닐; 알킬카르보닐옥시; 또는 하이드록시와 같은 하나 이상의 치환기로 치환될 수 있다(즉, 선택적으로 치환될 수 있음). 한정 없이, 치환된 알킬들 중 일부의 예로는, 카르복시알킬(예컨대 HOOC-알킬, 알콕시카르보닐알킬, 및 알킬카르보닐옥시알킬); 시아노알킬; 하이드록시알킬; 알콕시알킬; 아실알킬; 아르알킬; (알콕시아릴)알킬; (설포닐아미노)알킬(예컨대 알킬-S(O)2-아미노알킬); 아미노알킬; 아미도알킬; (지환족)알킬; 또는 할로알킬을 포함한다.
본원에서, "아르알킬", "아르알콕시", 또는 "아릴옥시알킬"에서와 같이 보다 큰 모이어티의 일부로서 또는 단독으로 사용되는 "아릴" 기는, 모노사이클릭(예를 들어, 페닐); 바이사이클릭(예를 들어, 인데닐, 나프탈레닐, 테트라하이드로나프틸, 테트라하이드로인데닐); 및 트리사이클릭(예를 들어, 플루오레닐 테트라하이드로플루오레닐, 또는 테트라하이드로안트라세닐, 안트라세닐) 고리 시스템을 지칭하며, 여기서 모노사이클릭 고리 시스템은 방향족이거나 또는 바이사이클릭 또는 트리사이클릭 고리 시스템 내의 하나 이상의 고리들은 방향족이다. 바이사이클릭 및 트리사이클릭 기들은 벤조융합된 2 내지 3원 카르보사이클릭 고리를 포함한다. 예를 들어, 벤조융합된 기는 2개 이상의 C4-8 카르보사이클릭 모이어티와 융합된 페닐을 포함한다. 아릴은, 지방족[예를 들어, 알킬, 알케닐, 또는 알키닐]; 지환족; (지환족)지방족; 헤테로지환족; (헤테로지환족)지방족; 아릴; 헤테로아릴; 알콕시; (지환족)옥시; (헤테로지환족)옥시; 아릴옥시; 헤테로아릴옥시; (아르지방족)옥시; (헤테로아르지방족)옥시; 아로일; 헤테로아로일; 아미노; (벤조융합된 바이사이클릭 또는 트리사이클릭 아릴의 비-방향족 카르보사이클릭 고리 상의) 옥소; 니트로; 카르복시; 아미도; 아실[예를 들어, 지방족카르보닐, (지환족)카르보닐, ((지환족)지방족)카르보닐, (아르지방족)카르보닐, (헤테로지환족)카르보닐, ((헤테로지환족)지방족)카르보닐, 또는(헤테로아르지방족)카르보닐]; 설포닐[예를 들어, 지방족-S(O)2- 또는 아미노-S(O)2]; 설피닐[예를 들어, 지방족-S(O)- 또는 지환족-S(O)-]; 설파닐 [예를 들어, 지방족-S--]; 시아노; 할로; 하이드록시; 머캅토; 설폭시; 우레아; 티오우레아; 설파모일; 설파미드; 또는 카르바모일을 비롯한 하나 이상의 치환기로 선택적으로 치환된다. 다르게는, 아릴은 비치환될 수 있다.
치환된 아릴의 비-한정적 예로는, 할로아릴 [예를 들어, 모노-, 디-(예컨대 p, m-디할로아릴), 및 (트리할로)아릴]; (카르복시)아릴[예를 들어, (알콕시카르보닐)아릴, ((아르알킬)카르보닐옥시)아릴, 및 (알콕시카르보닐)아릴]; (아미도)아릴[예를 들어, (아미노카르보닐)아릴, (((알킬아미노)알킬)아미노카르보닐)아릴, (알킬카르보닐)아미노아릴, (아릴아미노카르보닐)아릴, 및 (((헤테로아릴)아미노)카르보닐)아릴]; 아미노아릴[예를 들어, ((알킬설포닐)아미노)아릴 또는 ((디알킬)아미노)아릴]; (시아노알킬)아릴; (알콕시)아릴; (설파모일)아릴[예를 들어, (아미노설포닐)아릴]; (알킬설포닐)아릴; (시아노)아릴; (하이드록시알킬)아릴; ((알콕시)알킬)아릴; (하이드록시)아릴, ((카르복시)알킬)아릴; (((디알킬)아미노)알킬)아릴; (니트로알킬)아릴; (((알킬설포닐)아미노)알킬)아릴; ((헤테로지환족)카르보닐)아릴; ((알킬설포닐)알킬)아릴; (시아노알킬)아릴; (하이드록시알킬)아릴; (알킬카르보닐)아릴; 알킬아릴; (트리할로알킬)아릴; p-아미노-m-알콕시카르보닐아릴; p-아미노-m-시아노아릴; p-할로-m-아미노아릴; 또는 (m-(헤테로지환족)-o-(알킬))아릴을 포함한다.
본원에서, "아르알킬" 기는, 아릴기로 치환된 알킬기(예를 들어, C1-4 알킬기)를 지칭한다. "알킬"과 "아릴" 둘 다 상기에서 정의되었다. 아르알킬기의 일례는 벤질이다. 아르알킬은, 지방족[예를 들어, 카르복시알킬, 하이드록시알킬, 또는 트리플루오로메틸과 같은 할로알킬을 비롯하여 알킬, 알케닐, 또는 알키닐]; 지환족[예를 들어, 사이클로알킬 또는 사이클로알케닐]; (사이클로알킬)알킬; 헤테로사이클로알킬; (헤테로사이클로알킬)알킬; 아릴; 헤테로아릴; 알콕시; 사이클로알킬옥시; 헤테로사이클로알킬옥시; 아릴옥시; 헤테로아릴옥시; 아르알킬옥시; 헤테로아르알킬옥시; 아로일; 헤테로아로일; 니트로; 카르복시; 알콕시카르보닐; 알킬카르보닐옥시; 아미도[예를 들어, 아미노카르보닐, 알킬카르보닐아미노, 사이클로알킬카르보닐아미노, (사이클로알킬알킬)카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 아르알킬카르보닐아미노, (헤테로사이클로알킬)카르보닐아미노, (헤테로사이클로알킬알킬)카르보닐아미노, 헤테로아릴카르보닐아미노, 또는 헤테로아르알킬카르보닐아미노]; 시아노; 할로; 하이드록시; 아실; 머캅토; 알킬설파닐; 설폭시; 우레아; 티오우레아; 설파모일; 설파미드; 옥소; 또는 카르바모일과 같은 하나 이상의 치환기로 선택적으로 치환된다.
HPV 표적
본 발명은 HPV 감염 및 기타 질환들을 치료하는 데 유용한 폴리아미드, 및 폴리아미드의 유사체를 제공한다. 특정한 이론으로 결부시키고자 하는 것은 아니지만, 본원에서 기술되는 폴리아미드의 항-HPV 활성은 모든 HPV 하위유형, 및 다른 이중-가닥 DNA 바이러스들에 대한 폴리아미드를 설계하기 위한 일반적인 규칙을 예측 및 개발하기 위한 정보를 제공한다. 방법론은, 어떤 폴리아미드 구조가 엡스타인-바르 바이러스, 헤르페스 바이러스, 아데노바이러스, BK 및 폭스 바이러스를 비롯한 그외의 이중-가닥 DNA 바이러스에 대해 광-스펙트럼의 항-바이러스 활성을 가지는지를 예측하는 데 유용하다.
본 발명의 폴리아미드의 항-HPV 작용의 경시적인 실험으로, 소정의 활성 분자가 약물 처리 후 30분째부터 인간 케라티노사이트 내 HPV DNA 수준을 >90%만큼 감소시킨다는 것이 밝혀졌다.
HPV DNA는 그 자체가 인간 염색체에 앵커(anchor)된다. 이에 대한 여러 가지 이유들로는, 세포 분열 동안 에피좀의 바이러스 복제와 핵 유지, 및 바이러스 에피좀의 딸세포로의 적절한 분할을 위해 인간 DNA 복제 요소에 근접해야 하는 필요성을 포함한다. 또한, 공정들이 잘 이해되지 않지만, 바이러스 게놈은 외래의, 또는 비-자가 DNA를 인지 및 제거하는 선천성 면역계를 피해야 한다.
이론으로 결부시키고자 하는 것은 아니지만, 본 발명의 폴리아미드가 숙주 염색체 유래의 환형 HPV 게놈을 치환하여 이들의 신속한 소실 및 에피좀의 분해를 초래할 수 있다는 것, 또는 폴리아미드의 바이러스 또는 핵 DNA에의 결합이 숙주 DNA 서열보다는 바이러스의 특이적인 제거를 초래하는 과정을 활성화시킨다는 것이 가능하다. 바이러스 DNA의 소실에 대한 한 가지 가능한 기전은, 첫째로 숙주 핵으로부터 HPV DNA의 유출(export) 및 두번째로 뉴클레아제 효소에 의한 HPV DNA의 신속한 효소적 분해를 초래하는, 세포성 염색체로부터의 에피좀의 치환을 포함할 수 있다. 또 다른 결론은, HPV DNA가 숙주 염색체에 결합(tethering)하는 주 원인은 이러한 분해 경로로부터 바이러스 DNA를 보호하기 위한 것이라는 것이다. 다르게는, 폴리아미드는 핵에서 에피좀 DNA의 물리적 특성을 변경시켜, 숙주 방어 기전에 의한 외래 DNA의 인지 및 제거를 유도할 수 있다. 이들 예측은, DNA 부홈에 결합하는 다른 약물까지 확대될 수 있으며, 이들은 에피좀 유지를 위해 유사하거나 관련된 전략을 이용하는 엡스타인 바르 바이러스를 비롯한 그외의 이중-가닥 DNA 바이러스까지 확대될 수 있다.
따라서, 이들 분자는, 결합이 발생할 수 있게 하는 조건 하에, 이중-가닥 DNA 내 DNA-표적 서열을 본원에서 기술된 DNA-결합 화합물과 접촉시키는 단계를 포함하여, 이중-가닥 DNA를 서열-특이적인 방식으로 결합시키는 데 유용할 수 있다. 이는 생체 내, 시험관 내 또는 생체 외에서 수행될 수 있다. 또한, 상기 방법은 세포에서 수행될 수 있으며, 이중 가닥 DNA는 세포에 대해 내인성 또는 이종성일 수 있다.
폴리아미드 결합 친화성 및 서열 특이성은 당해 기술분야에 공지된 정성적 및 정량적 풋프린트 적정 실험을 통해 측정될 수 있다(Brenowitz, M.; Senear, D. F.; Shea, M. A.; Ackers, G. K. Methods Enzymol. 1986, 130, 132; Mitra, S.; Shcherbakova, I. V.; Altman, R. B.; Brenowitz, M.; Laederach, A. Nucl. Acids Res. 2008, 36, e63; White, S.; Baird, E. E.; Dervan, P. B. Biochemistry 1996, 35, 12532; 및 White, S.; Baird, E. E.; Dervan, P. B. Chemistry & Biology 1997, 4, 569. 참조).
본 발명의 폴리아미드는 특이적인 서열의 이중 가닥 DNA의 존재를 진단 또는 예비 목적으로 검출하는 데 유용할 수 있다. 이중 가닥 DNA를 포함하는 샘플은 고형 기질에 결합된 폴리아미드와 접촉되어, 목적하는 서열을 포함하는 DNA가 분리될 수 있다. 다르게는, 비오틴, 합텐, 방사성동위원소 또는 염료 분자와 같은 적절한 검출가능한 마커에 결합된 폴리아미드는 이중 가닥 DNA를 포함하는 샘플과 접촉될 수 있다.
더욱이, 이들 분자는, 신생물 세포를 본원에서 기술되는 화합물 유효량과 접촉시키는 단계를 포함하는, 신생물 세포의 증식을 감소 또는 저해하는 방법에 유용할 수 있다. 상기 세포와 본 발명의 제제의 접촉으로, 신생물 세포와 관련된 유전자의 발현이 방해를 받을 수 있다. 이 제제는 상기 유전자를 코딩하는 DNA 서열에 결합함으로써, 상기 유전자의 발현을 감소 또는 저해한다.
본 발명의 방법의 일부 실시형태에서, 신생물 세포는 암세포일 수 있다. 상기 세포는 결장암종 세포, 간세포암종 세포, 자궁경부 암종 세포, 폐 상피암종 세포, 유선 샘암종 세포, 췌장암종 세포, 전립선암종 세포, 골육종 세포, 흑색종 세포, 급성 전골수구성 백혈병 세포, 급성 림프구성 백혈병 세포, 간췌장 선암종 세포 및 버킷림프종 B 세포를 포함할 수 있다. 효능은, 신생물 질환과 관련된 증상 또는 징후가 줄어드는지 검출함으로써 확인된다. 특정한 유형의 신생물 질환의 증상 및 징후들은 당해 기술분야의 임상의에게 잘 알려져 있으며, 상기 증상 및 상태들을 모니터링하는 방법 또한 잘 알려져 있다. 예를 들어, 본 발명의 방법에 따른 치료로 인해 종양 크기가 줄었는지 또는 크기가 보다 느린 속도로 커지는지 측정하는 데 영상 방법이 사용될 수 있다.
부가적으로는, 이들 분자는, 바이러스에 감염된 세포를 본원에서 기술되는 화합물 유효량과 접촉시키는 단계를 포함하는, 바이러스에 감염된 세포의 치료 방법에 유용할 수 있다. 상기 방법은 이중-가닥 DNA 바이러스에 의해 유발되는 기타 감염의 치료에도 유용할 수 있다.
HPV의 경우, 염색체에의 결합은 DNA 염기인 A 및 T의 긴 서열을 통해 발생하는 것으로 알려져 있다. 이들 AT 트랙(tract)은, DNA 결합에 사용되는 폴리아미드 구조의 부분적인 전구체인 것으로 간주될 수 있는 천연 생성물인 디스타마이신(Distamycin)에서 발견되는 바와 같이 피롤에 의한 AT 염기쌍의 인지로 인해, 피롤-함유 폴리아미드에 대한 표적이 된다. 디스타마이신은 AT-풍부한 DNA에 결합하나, 적당히 짧은 분자이면 되고, 디스타마이신을 끌어당기는 데 있어 너무 긴 AT 트랙은 필요하지 않으며: 길이가 단지 염기 5개인 AT-영역이 디스타마이신에 의한 인지에 충분하다.
소위 "취약 DNA(fragile DNA)"에서 DNA 중 AT-풍부한 영역은 디스타마이신의 분명한 표적이며, 디스타마이신 처리에 반응하여 세포에 의해 발현된다. 더욱이, 섬모충류 및 기타 미생물에서 발견되는 바와 같은 DNA 재배열 및 프로세싱의 모델 시스템에서, 게놈 재배열 동안 제거의 표적이 되는 것은 AT-풍부한 영역이며, 이는 상기 세포가 DNA의 프로세싱 및 제거를 위한 진화적으로 보존된 기전을 보유할 수 있으며, 수반되는 AT-풍부한 서열은 자연적으로 존재하는 폴리아미드 또는 합성 폴리아미드의 피롤에 의한 결합의 표적임을 제시한다.
본원에서 기술되는 발명들로부터, 당업자는 소위 선별성 지수(SI: TD50에 대한 IC50의 비율), 및 선별성 지수의 최적 범위를 결정하기 위한 일반적인 실험을 고려함으로써, HPV 하위유형과 같은 DNA 바이러스에 대한 유용한 약물을 개발할 수 있다. 디스타마이신 자체는 항-바이러스제로서의 적용들 대부분 또는 모두에서 독성이 너무 높으며, 한편 AT-풍부한 DNA 영역을 표적으로 하며 본 발명자들에 의해 설계 및 특별히 제조된 폴리아미드는 일반적으로 세포 배양물에서 매우 낮은 독성 및 매우 높은 SI를 가진다.
일부 실시형태에서, HPV 유형, 특히, HPV 1, 6, 11, 16, 18 및 31에 대해 항-HPV 활성을 나타내는 폴리아미드 서열은, 숙주 염색체로부터 HPV DNA를 치환 또는 제거하는 능력을 발휘하며, 이로써, HPV에 대한 광범위한 이용가능성이 수득될 수 있다. 이들로는, 생식기 혹 뿐만 아니라 호흡기 유두종증으로서 알려진 대체로 치명적인 질환에 부분적으로 관여하는 HPV11, 각각 외부 생식기, 항문 및 자궁경부의 일반 사마귀 및 사마귀들을 유발하는 HPV1 및 6, 및 항문암 및/또는 자궁경부암에 관여하는 HPV 16, 18 및 31을 포함한다.
화학적 배경
질소 헤테로사이클의 소정의 올리고머는 이중 가닥 DNA의 특정한 영역에 결합하는 데 사용될 수 있다. 특히, N-메틸 이미다졸(I), des-아미노-N-메틸 이미다졸(Im), 및 N-메틸 피롤(P)은 특정한 염기에 대해 특이적인 친화성을 가진다. 이러한 특이성은 이들 화합물이 결합되는 순서를 토대로 변형될 수 있다. G/C는 Im/P 또는 I/P에 의해 상보화되며, C/G는 P/Im 또는 P/I에 의해 상보화되고, A/T 및 T/A는 P/P에 의해 중복적으로 상보화되는(redundantly complemented), 특이성이 존재하는 것으로 확인되었다.
사실상, N-메틸 이미다졸 및 des-아미노-N-메틸 이미다졸은 구아닌과 연관되는 경향이 있으며, 한편 N-메틸 피롤은 시토신, 아데닌 및 티민과 연관이 있다. 헤테로사이클의 2개의 사슬을 1개 또는 2개의 분자로서 제공함으로써, 이중 가닥 DNA를 포함하는 2:1 복합체가 2개의 사슬과 함께 형성되며; 올리고머는 역평행으로서, G/C 쌍은 Im/P 또는 I/P를 병렬 상태로 가지며, C/G 쌍은 P/Im 또는 P/I를 병렬 상태로 가지며, T/A 쌍은 P/P를 병렬 상태로 가진다. 헤테로사이클 올리고머는 아미드(카르바밀) 기에 의해 결합되며, 이때, NH는 특히, 아데닌의 짝없는(unpaired) 질소 전자와의 수소 결합에 참여할 수 있다.
폴리아미드는, 감마-아미노부티르산(.감마.) 또는 감마- 아미노-베타-아미노부티르산(.감마.NH.sub.2)과 같은 화합물을 삽입함으로써 헤어핀 화합물을 형성하도록 합성될 수 있으며, 단일 폴리아미드가 DNA와 함께 복합체를 형성하도록 할 수 있다. 이러한 구조는 DNA의 표적 서열에 대한 폴리아미드의 결합 친화성을 상당히 증가시키는 것으로 확인되었다.
베타-알라닌(.베타.)은 AT 또는 TA 염기쌍이 표적 서열인 경우, 한 쌍의 N-메틸 피롤기 대신에 치환될 수 있다. 베타-알라닌의 가요성 부가(added flexibility)는 전체 폴리아미드가 DNA의 표적 서열에 "등록되어(in register)" 머무르는 데 일조할 수 있다.
일부 실시형태에서, 폴리아미드 분자는 구아노신에 대해 특이적인 친화성을 가지는 des-아미노-N-메틸 이미다졸로 시작된다. 다른 실시형태에서, 폴리아미드 분자는 3-(디메틸아미노) 프로필아민(Dp) 또는 3,3'-디아미노-N-메틸디프로필아민(Ta)으로 종결된다. 염료 분자는 .감마.-아미노-부티르산의 아미노기, Ta에 삽입될 수 있거나, 또는 둘 다 동일한 분자 내에서 이용가능하다면 이들 부위 모두에 삽입될 수 있다.
보다 최근에는, 새로운 방향족 아미노산인 3-하이드록시-N-메틸피롤(Hp)이 폴리아미드에 삽입되어 반대편의 Py와 쌍을 이루는 경우, 이 방향족 아미노산의 삽입은 A-T를 T-A와 구별하는 수단을 제공하는 것으로 밝혀졌다. White S., et al., Nature 391, 436-38 (1998). 놀랍게도, 피롤 상의 단일 수소 원자를 Hp/P 쌍의 하이드록시기로 치환하면, 폴리아미드의 친화성 및 특이성을 10배 조절한다. 6개의 방향족 아미노산 쌍(I/P, Im/P, P/Im, P/I, Hp/P 및 P/Hp)을 형성하기 위해 폴리아미드에 Hp를 P 및 Im 또는 I와 함께 사용하면, Hp가 분해되지 않는 환경에서 DNA의 부홈에 있는 4개의 왓슨-크릭 염기쌍 모두를 구별하는 코드(code)를 제공한다.
디스타마이신 및 네트롭신(netropsin)과 같이 자연적으로 존재하는 피롤-함유 폴리아미드, 뿐만 아니라 이들의 피롤/이미다졸-함유 합성 유사체는 DNA의 부홈에 높은 친화성으로 결합한다. 특이적인 폴리아미드-DNA 결합에 대한 직접적인 증거는 Dervan 그룹에 의해 X-선 결정학, NMR 구조 분석 및 정량적 친화성 절단 방법을 이용하여 폭넓게 보고된 바 있다(Baird and Dervan, 1998; Pilch et al., Biochemistry, 38, 2143-51, 1999; Pilch et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 93, 8306-11 1996; Wang, Ellervik, and Dervan, Bioorg. Med. Chem., 9, 653-7, 2001; White, Baird, and Dervan, Biochemistry, 35, 12532-27, 1996; White, Baird, and Dervan, Chem. Biol., 4, 569-78, 1997, 이들 모두는 원용에 의해 참조로서 본원에 제공됨). H-결합 도식으로 인해, 합성 폴리아미드는 특이적인 DNA 서열을 인지하도록 설계될 수 있다.
폴리아미드에 의한 DNA 인지의 규칙은 하기 단락에 요약되어 있다(White, Baird, and Dervan, Chem. Biol., 4, 569-78, 1997). 피롤 (전형적으로 Py 또는 P로 약칭됨)은 부홈 내 수소 결합 수용체를 제시하는 3개의 뉴클레오타이드, 또는 A, T 및 C에 결합한다(Kielkopf et al., Science, 282, 111-5, 1998; Kielkopf, et al., Nat. Struct. Biol., 5, 104-9, 1998; Melander, Herman, and Dervan, Chemistry, 6, 4487-97, 2000, 이들 모두는 원용에 의해 참조로서 본원에 제공됨). 이들 뉴클레오타이드는 부홈에 대해 수소 결합 수용체만을 제시하며: A 및 C는 각각 하나의 고립 전자쌍을 제공하며, T는 C2에 결합된 카르보닐 산소로부터 2개의 고립 전자쌍을 제공한다. 수소 결합 공여체는 헤어핀 피롤 아미노산의 아미드 NH이다. 따라서, 피롤 고리는, B-형 DNA에 위치하는 경우 A,C 및 T에 의해 제시되는 수소 결합 수용체의 패턴과 매치하는 올바른 거리 및 곡률(curvature)에서 아미드 NH를 제시하는 곡선형 스페이서(curved spacer)로서 작용한다. 이미다졸(하기 구조 II)은 전형적으로 I로 약칭된다.
폴리아미드
일반적인 구조
본 발명의 폴리아미드는 일반적으로, 복수의 카르복사미드 반복 단위 및 하나 이상의 구아니디닐 라디칼을 포함하는 중합체 분자 또는 올리고머 분자로서 특징지어질 수 있으며, 이는 상기 분자의 하나의 말단 또는 양 말단에 및/또는 상기 폴리아미드의 백본을 따라 존재할 수 있다. 폴리아미드는, γ-아미노부티르산 (γ); (R) 또는 (S) 이성질체일 수 있으며, 2-아미노기 또는 4-아미노기를 통해 폴리아미드 백본에 결합될 수 있는, 2,4-디아미노부티르산(γNH2); 또는 R은, 각각이 (R) 또는 (S) 이성질체일 수 있는 -(CH2)3-N(CH3)-(CH2)3-NH2(γNHR') 또는 -(CH2)3-N(CH3)2(γNHR")인 H2N(CH2)2CH(NHC(=O)NHR)CO2H로부터 선택되는 내부 단위를 포함하는 폴리아미드 백본, 및 2,4-디아미노부티르산(γNH2)에 펜던트이거나 또는 R이 -(CH2)3-N(CH3)-(CH2)3-NH2(γNHR')인 H2N(CH2)2CH(NHC(=O)NHR)CO2H에 펜던트이거나, 또는 상기 폴리아미드 백본의 말단 위치에 존재하는 하나 이상의 구아니디닐 라디칼을 포함하는 화합물일 수 있다. 상기 화합물은 이러한 폴리아미드의 약학적으로 허용가능한 염일 수 있다. 본 발명의 맥락에서, "내부"란, 말단 (종결) 위치 이외의 중합체 백본 상의 위치, 또는 말단 위치에 바로 인접한 위치를 의미한다. 폴리아미드 백본은 4-아미노-2-카르보닐-N-메틸이미다졸(Im), 4-아미노-2-카르보닐-N-메틸피롤(Py) 및 β-알라닌(β)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 단위를 복수 개(예를 들어, 5개 내지 30개, 7개 내지 28개, 9개 내지 24개, 11개 내지 22개, 15개 내지 21개, 또는 16개 내지 21개 단위)로 포함할 수 있다. 전형적으로, 폴리아미드의 수평균 분자량은 약 1000 내지 약 2900 또는 약 1200 내지 약 2700이다.
본 발명의 일 태양에서, 구아니디닐 라디칼은 말단 4-아미노-2-카르보닐-N-메틸피롤(Py) 단위에 연결된다. 구아니디닐 라디칼은 비치환(GUAN) 또는 치환될 수 있다. 즉, 구아니디닐 라디칼에 존재하는 3개의 질소 원자 중 어느 하나 또는 각각은 수소 이외의 치환기를 가질 수 있다. 이러한 치환기는 예를 들어, 알킬기, 아르알킬기 및/또는 아릴기일 수 있다. 본 발명의 일 실시형태에서, 질소 원자 중 2개가 각각 C1-C4 알킬기와 같은 알킬기를 2개씩 가진다. 예를 들어, 구아니디닐 라디칼은 테트라메틸구아니디닐(TMG)일 수 있다.
이러한 화합물은 3,3'-디아미노-N-메틸디프로필아민(Ta) 또는 3-(디메틸아미노)프로필아민(Dp)으로부터 선택되는 말단 기를 포함할 수 있다. Ta 말단 기의 1차 아민기는 구아니디닐 라디칼을 제공하도록 반응될 수 있다. 즉, 폴리아미드의 C 말단은 테트라메틸구아니디닐(TMG)과 같은 구아니디닐 라디칼로 종결될 수 있다.
본 발명에 따른 소정의 폴리아미드 화합물의 구조는 화학식 Z-(X)n-γq-(X)m-A 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염으로 기술될 수 있으며,
m은 3 내지 16 (또는 4 내지 15, 5 내지 14, 6 내지 13, 또는 7 내지 12)이며;
n은 2 내지 14 (또는 3 내지 13, 3 내지 12, 4 내지 12, 또는 4 내지 10)이며;
Z은 구아니디닐화된 4-아미노-2-카르보닐-N-메틸피롤, N-포르밀화된 4-아미노-2-카르보닐-N-메틸피롤, N-아세틸화된 4-아미노-2-카르보닐-N-메틸피롤, 또는 des-아미노이미다졸(des-Im, 도 1의 화학식 XI)이며;
X는 각각 독립적으로 4-아미노-2-카르보닐-N-메틸이미다졸(Im, 도 1의 화학식 II), 4-아미노-2-카르보닐-N-메틸피롤(Py, 도 1의 화학식 I) 또는 β-알라닌(β, 도 1의 화학식 III)으로부터 선택되며;
γq는 γ-아미노부티르산(γ, 도 1의 화학식 IV); 2,4-디아미노부티르산(γNH2, 2,4-디아미노부티르산이 (R) 이성질체이며 폴리아미드에의 결합이 γ아미노기를 통해 발생하는 경우, 도 1의 화학식 V에 상응함); 구아니디닐화된 2,4-디아미노부티르산; 또는 R이 -(CH2)3-N(CH3)-(CH2)3-NH2(γNHR', 도 1의 화학식 VIII), 구아니디닐화된 -(CH2)3-N(CH3)-(CH2)3-NH2, 또는 -(CH2)3-N(CH3)2(γNHR", 도 1의 화학식 IX)인 H2N(CH2)2CH(NHC(=O)NHR)CO2H이며;
A는 3,3'-디아미노-N-메틸디프로필아민(Ta, 도 1의 화학식 VII), 구아니디닐화된 3,3'-디아미노-N-메틸디프로필아민; 또는 3-(디메틸아미노)프로필아민(Dp, 도 1의 화학식 VI)이며;
상기 화합물은 구아니디닐화된 1차 아민기를 하나 이상 포함한다.
이러한 화합물에서, 화합물에 대한 전구체에 최초로 존재하는 하나 이상의 1차 아민기(-NH2)는 구아니디닐기(라디칼)로 전환되었다. 예를 들어, 4-아미노-2-카르보닐-N-메틸피롤 N-말단 종결 기, 3-(디메틸아미노)프로필아민 C-말단 종결 기, 또는 빌딩 블록인 γNHR'에 존재하는 -(CH2)3-N(CH3)-(CH2)3-NH2 기의 1차 아민기는 구아니디닐화될 수 있다.
본 발명의 일 태양에 따른 다른 특정한 폴리아미드 화합물의 구조는 화학식: G-(X)n-γq-(X)m-A에 의해 기술되어 있으며, 하기에 한정과 정의가 함께 제공된다.
이러한 폴리아미드 화합물에서, 폴리아미드 분자는 테트라메틸구아니디닐(TMG, 화학식 X) 라디칼과 같은 구아니디닐 라디칼로 시작된다. 구아니디닐 라디칼은 구조식 -N=C(NR1R2)(NR3R4) 및/또는 -NR5-C(NR1R2)(=NR3), 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염(예를 들어, 구아니디닐 라디칼은 구아니디늄 화학종의 형태일 수 있음)에 상응할 수 있으며, 여기서, R1-5는 동일 또는 상이할 수 있으며, H, 알킬(예를 들어, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸 등과 같은 C1-C4 알킬), 아릴(페닐, 피리딜, 이미다졸릴) 및 기타 5-원 또는 6-원 고리 아릴기 또는 헤테로아릴기, 아르알킬(예를 들어, 벤질) 및 이들의 다양하게 치환된 유도체로부터 선택될 수 있다. 다양한 유형의 적절한 구아니디닐 라디칼과 더불어 이들의 호변이성질체들이 도 8a 및 8b에 나타나 있다.
본 발명의 일 태양은 폴리아미드의 N-말단에 테트라메틸구아니디닐 라디칼(TMG, 화학식 X)을 사용한다. 이러한 테트라메틸구아니디닐 라디칼은 탄소-질소 이중 결합(이민) 결합을 통해 폴리아미드에 결합된다. 예를 들어, TMG 라디칼에 인접한 단위가 4-아미노-2-카르보닐-N-메틸피롤(Py)인 경우, 4-아미노-2-카르보닐-N-메틸피롤의 4-아미노기는 이민 결합에 관여하는 질소 원자를 제공한다.
본 발명의 다른 태양에서, 구아니디닐 라디칼은 비치환(GUAN), 모노치환, N,N'-디치환, gem-디치환, N,N,N'-트리치환, 또는 N,N,N',N'-테트라치환될 수 있다. 비치환, 모노치환, 디치환, 및 트리치환된 구아니디닐 라디칼은 호변이성질체로서 존재하며; 이러한 호변이성질체들은 도 8a 및 8b에 나타나 있다. 도 8a 및 8b에 예시한 바와 같이, 탄소-질소 이중 결합(이민)의 위치는 달라질 수 있다.
구아니디닐 라디칼에 대한 치환 패턴 및 관련된 호변이성질체의 광범위하지만 완벽하지 않은 세트는 도 8a 및 8b에 나타나 있다. H는 독립적으로 R1-5(독립적으로 알킬, 아릴, 아르알킬로부터 선택됨) 기로 치환될 수 있다. 도 8a 및 8b에 나타낸 각각의 구아니디닐 라디칼 구조에서, 수평 점선은, 구아니디닐 라디칼이 상기 수평 점선을 포함하는 결합을 통해 폴리아미드에 결합됨을 의미한다. 본 발명의 구아니디닐-치환된 화합물은 전술한 종류의 호변이성현상(tautomerism)을 나타낼 수 있는 것으로 이해되어야 한다. 또한, 본 발명은 다양하게 치환된 구아니디닐-치환된 폴리아미드의 모든 호변이성질체 형태 및 이들의 혼합물을 포함하며, 형식적인 도면에 기술된 하나의 호변이성질체 형태로 한정되지 않는 것으로 이해되어야 한다.
0.1% TFA 중 HPLC 및/또는 결정화에 의해 분리되어 세포, 조직 배양물, 또는 대상과 접촉해서 사용되는 바와 같이, 구아니딘의 높은 염기성은 일반적으로, 이들이 산 부가염, 즉, 이들의 양성자화된 형태로 제시되게 할 것이다. 본원에서 기술되는 모든 호변이성질체들의 약학적으로 허용가능한 염들은 본 발명의 일부이다.
화학식 G-(X)n-γq-(X)m-A에 상응하는 폴리아미드 분자는 3-(디메틸아미노) 프로필아민(Dp, 화학식 VI) 또는 3,3'-디아미노-N-메틸디프로필아민(Ta, 화학식 VII)으로 종결될 수 있다. 즉, 본 발명의 소정의 실시형태에서, 구아니디닐(G) 라디칼은 폴리아미드 분자의 N 말단에 존재하며, Dp 또는 Ta 단위 또는 다른 종결 기(전술한 화학식에서 "A")는 상기 분자의 C 말단에 존재한다. 구조 서열 -(X)n-에 의해 G 단위로부터 분리되며 구조 서열 -(X)m-에 의해 A 단위(Dp 또는 Ta)로부터 분리되는 γq 단위는 폴리아미드 백본의 내부 위치에 나타난다. γq 단위는 폴리아미드 화합물에 헤어핀 턴(turn)을 제공할 수 있다. 구조 서열 -(X)m- 및 -(X)n-은 4-아미노-2-카르보닐-N-메틸이미다졸(Im, 화학식 II), 4-아미노-2-카르보닐-N-메틸피롤(Py, 화학식 I), 및 β-알라닌(β, 화학식 III)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 다중 결합된 단위 X로 이루어진다.
단위 TMG, X, γq 및 A의 구조는 도 1에 나타나 있다. 본 발명의 폴리아미드 화합물에 대한 전술한 화학식의 용어들은 하기와 같이 정의된다.
TMG는 N-말단 캡핑 기일 수 있으며 테트라메틸구아니디닐(화학식 X)이다. 구아니디닐 라디칼이 N-말단에 위치하지 않는 경우, N-말단 캡핑 기는 도 1의 화학식 XI에서 나타낸 바와 같이 des-Im, 또는 des-아미노이미다졸일 수 있다.
X는, (화학식 I의 단위 Py를 제공하는) N-메틸피롤의 4-아미노-2-카르복실산 유도체, (화학식 III의 단위 β를 제공하는) 베타-알라닌, 및 (화학식 II의 단위 Im을 제공하는) N-메틸이미다졸의 4-아미노-2-카르복실산 유도체를 포함하는 하나 이상의 폴리아미드 빌딩 블록의 축합에 의해 수득되는 단위이다.
γq는, (화학식 IV의 단위 γ를 제공하는) 감마-아미노부티르산 빌딩 블록, ((R) 이성질체가 이용되고, 4 (γ) 위치의 아민기가 폴리아미드 중합체 백본에 반응한 경우, 화학식 V에 상응하는 단위 γNH2를 제공하는) (R)-2,4-디아미노부티르산 및 (S)-2,4-디아미노부티르산으로서 공지된 감마-아미노부티르산의 키랄 유사체, 및 R이 -(CH2)3-N(CH3)-(CH2)3-NH2(γNHR', 화학식 VIII) 또는 -(CH2)3-N(CH3)2(γNHR", 화학식 IX)인 H2N(CH2)2CH(NHC(=O)NHR)CO2H의 축합에 의해 수득되는 단위이다. 후자의 2개 단위는 또한, 이러한 화합물이 폴리아미드에 삽입된 후 2,4-디아미노부티르산의 아미노기와 적절한 반응물 또는 반응물들과의 반응에 의해 형성될 수도 있다. 예를 들어, γNHR'(화학식 VIII)는 우레아와 Ta(3,3'-디아미노-N-메틸디프로필아민)로 형성된 (R)-2,4-디아미노부티르산으로부터 생성될 수 있다. 단위 γNHR"(화학식 IX)는 우레아와 Dp(3-(디메틸아미노)프로필아민)로 형성된 (R)-2,4-디아미노부티르산으로부터 생성될 수 있다. 이들 단위(γNHR', γNHR")는 (R) 또는 (S) 입체화학을 가질 수 있다. 2,4-디아미노부티르산 빌딩 블록은, 2 (α) 위치에서 아민기의 (축합) 반응에 의해 폴리아미드에 삽입되어 알파 턴을 제공하거나, 또는 4 (γ) 위치에서 감마 턴을 제공할 수 있다. 본 발명의 문맥에서, "2,4-디아미노부티르산"은 (R) 이성질체뿐만 아니라 (S) 이성질체를 포함한다.
A는, (화학식 VI의 단위 Dp를 제공하는) 3-(디메틸아미노)프로필아민 또는 (화학식 VII의 Ta를 제공하는) 3,3'-디아미노-N-메틸디프로필아민의 축합에 의해 수득되는 단위일 수 있다.
본 발명의 소정의 실시형태에서, β-알라닌 단위는 -Py-β -Py-Py-β -Py-Py-Py-Py-β및 -Im-Py-Py-β로 예시되는 바와 같이 1개, 2개, 3개 또는 4개의 인접한 Py 및/또는 Im 빌딩 블록 다음에 생성된다. 폴리아미드는 예를 들어, 분자 당 β 단위를 2개 내지 7개, 또는 3개 내지 6개로 포함할 수 있다. 본 발명의 다양한 실시형태에서, 구조 서열 -(X)m-은 2개 내지 5개의 β 단위를 포함할 수 있다. 다른 실시형태에서, 구조 서열 -(X)n-은 1개 내지 3개의 β 단위를 포함할 수 있다.
본 발명의 소정의 실시형태에서, 폴리아미드는 분자 당 Im 단위를 0개, 1개 또는 2개로 포함한다.
본 발명의 폴리아미드는 예시 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함한다:
TMG-PyPyβPyPyβPyIm-γNH2-PyβPyPyβPyPyPyβPyPy-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPyIm-γNHR'-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPyIm-γNH2-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPy-γNHR'-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPyIm-γNH2-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Dp;
TMG-PyPyPyβPyPyβPy-γNH2-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPy-γNH2-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Dp;
TMG-PyβPyPyImβPyPyγPyPyβPyPyPyβPyPyPyβ-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPy-γNHR"-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Dp;
TMG-PyβPyPyImβPyPy-γ-PyPyβPyPyPyβPyPyPyβ-Dp;
TMG-PyβPyPyPy-γ-PyPyβPyPyPyPyβ-Dp;
TMG-PyβPyPyPy-γ-PyPyβPyPyPyPyβ-Ta;
TMG-PyPyβPyPyPy-γ-PyPyβPyPyPyPyβ-Dp;
TMG-PyPyβPyPyPy-γ-PyPyβPyPyPyPyβ-Ta;
TMG-PyPyβPyPyImβPyPy-γ-PyPyβPyPyPyβPyPyPyβ-Ta;
TMG-PyPyβPyPyImβPyPy-γ-PyPyβPyPyPyβPyPyPyβ-Dp;
TMG-PyPyPyβPyPyβPyIm-γ-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPyIm-γ-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Dp;
TMG-PyPyβPyPyβPyIm-γ-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Dp;
TMG-PyPyβPyPyβPyIm-γ-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyImβPyPy-γ-PyPyPyβPyPyPyβ-Ta;
TMG-PyPyβPyPyβPy-γNH2-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyβPyPyβPyIm-γNH2-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyβPyPyβPy-γ-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPy-γ-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyImPyIm-γ-PyPyPyPyβ-Ta;
TMG-PyImβIm-γ-PyβPyPyβ-Ta;
TMG-PyImPyIm-γ-PyβPyPyβ-Ta;
TMG-PyImβIm-γ-PyPyPyPyβ-Ta;
GUAN-PyImβIm-γ-PyβPyPyβ-Ta.
또 다른 실시형태에서, 폴리아미드는 세포내 배치를 확인하는 데 이용될 수 있는 FAM(5-카르복시형광), BIODIPY 또는 다른 화합물을 C-말단에 포함한다. 일부 실시형태에서, C-말단에 FITC를 포함하는 폴리아미드는 세포에 의해 보다 용이하게 취해진다. 본 발명의 형광 표지된 폴리아미드의 예는 예시적인 화합물을 포함하며:
TMG-PyPyPyβPyPyβPyIm-γ-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta-FAM;
상기 식에서, FAM은 5-카르복시형광을 나타낸다.
또 다른 실시형태에서, 폴리아미드는 HPV1, HPV6, HPV11, HPV18, HPV16, HPV31, HPV33, HPV35, HPV39, HPV45, HPV51, HPV52, HPV56, HPV58, HPV59, HPV66 또는 HPV68을 표적화한다.
다른 실시형태에서, 폴리아미드는, 엡스타인-바르 바이러스, 헤르페스 바이러스, 폭스 바이러스 및 기타 이중-가닥 DNA 바이러스를 포함하는 DNA 바이러스를 표적화한다. 이들 바이러스 내의 가능성 있는 표적들은 결합(tethering), 유지, 또는 복제에 필요한 서열을 포함할 수 있다.
일반적인 합성 도식
본원에서 기술되는 폴리아미드는 종래의 방법을 이용해 공지된 출발 물질들로부터 생성될 수 있다. 예를 들어, WO 05/033282, Belitsky et al., (2002) Bioorg. Med. Chem., 10, 2767-74; Zhang, et al. (2006) J. Am. Chem. Soc. 128:8766-76; Turner, et al. (2001) Organic Letters, 3:1201-03을 참조하며, 이들 모두는 원용에 의해 참조로서 본원에 포함된다.
폴리아미드는 수동 고체-상 합성뿐만 아니라 자동 고체-상 화학을 이용해 제조될 수 있다. 각각의 커플링은 HPLC 및 HPLC/질량 분석법에 따라 수행될 수 있다.
용액-상 폴리아미드 합성에서, 2개의 주요 아미드 결합 형성 경로인 (1) 할로포름(haloform) 반응 및 (2) (요구되는 경우) DCC, EDC, PyBOP 또는 HATU와 같은 커플링 제제의 존재 하에, 아민과 산의 반응이 이용될 수 있다. 본 발명에 이용되는 헤테로사이클릭 빌딩 블록의 경우, 할로포름 반응은 Xiao et al., (2000) Chin. J. Chem., 18:603-07 및 Xiao et al., (2000) J. Org. Chem., 65:5506-13에 기술된 방법에 의해 수행될 수 있으며, 이 두 문헌들은 모든 목적을 위해 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 포함된다.
니트로-치환된 헤테로사이클을 제공하는 할로포름 반응의 단계들에 이어, 예를 들어, H2 및 Pd/C를 사용한 니트로기의 환원 반응이 후속될 수 있다. 생성되는 유리 아미노기는 부가적인 빌딩 블록에 바로 커플링되거나 또는 보호될 수 있다. 폴리아미드의 경우 공통적인 빌딩 블록이 식별되어, 효율적인 용액 상 합성이 가능해진다: Py-Py 이량체는 대규모로 제조 및 정제된 다음, 바로 사용되거나 보다 복합적으로 되어 표적 서열의 주요 구획(section)들을 형성한 다음, 최종 생성물을 형성할 수 있다.
또 다른 합성 방법은, Boc-β알라닌-PAM 고체상 합성 수지 또는 시판중인 유사한 수지로 시작해서, 표적 서열에 필요한 빌딩 블록을 추가하여, 폴리아미드 올리고머를 제조하는 것이다.
화합물 내의 구아니디닐 라디칼은 예를 들어, 말단 Py 단위, Ta 말단 기, R이 -(CH2)3-N(CH3)-(CH2)3-NH2(γNHR')인 H2N(CH2)2CH(NHC(=O)NHR)CO2H 단위, 또는 2,4-디아미노부티르산(γNH2) 단위 상의 1차 아민기의 전환을 비롯한 적절한 방법에 의해 도입될 수 있다. 1차 아민을 반응시켜 구아니디닐을 형성하는 합성 방법은 당해 기술분야에 잘 알려져 있다. 이러한 방법의 예로는, 아민을 S-메틸 이소티오우로늄 염(라트케 구아니딘 합성(Rathke guanidine synthesis)), O-메틸이소우로늄 염 및 클로로포름아미디늄(빌스마이어(Vilsmeier)) 염과 반응시키는 단계를 포함한다.
테트라치환된 구아니디닐 라디칼[-N=C(NR2)2, 여기서 R기는 동일 또는 상이할 수 있으며 예를 들어, 알킬, 아르알킬 또는 아릴일 수 있음]은, 1차 아민기를 포함하는 탈보호화된, 수지-결합된 폴리아미드를 HATU [2-(7-아자-1H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 헥스플루오로포스페이트]와 같은 테트라치환된 우로늄 반응물로 처리함으로써, 폴리아미드의 N-말단에 도입될 수 있다. 도 3은 이러한 합성 경로를 예시한 것이다. 테트라치환된 구아니디닐 라디칼은 이 단락에서 제시되는 형태로만 존재한다. 하나 이상의 R이 수소인 모든 구아니디닐 라디칼은 도 8a 및 8b에 도시된 바와 같이, 다양한 호변이성질체 형태로 존재할 수 있다. 본 발명은 본원에서 기술되는 다양한 구아니디닐 라디칼의 모든 가능한 호변이성질체 형태 및 (산 부가염을 비롯한) 이의 염을 포함한다.
비치환된 구아니디닐 라디칼[-NH-C(=NH)NH2 또는 이의 호변이성질체]은, 1차 아민기를 포함하는 탈보호화된, 수지-결합된 폴리아미드를 시판의 N,N'-디-Boc-1H-피라졸-1-카르복사미드로 처리한 후, Boc를 제거함으로써, 폴리아미드의 N-말단 상에 도입될 수 있다. 이러한 합성 경로는 도 4에 예시되어 있다. Robinson et al., Tetetrahedron 1997, 53 (19), 6697을 참조한다.
모노치환 또는 gem-디치환된 구아니디닐 라디칼[-NH-C(=NH)NHR 또는 -NH-C(=NH)NR2, 여기서, R기는 동일 또는 상이할 수 있음]은, 1차 아민기를 포함하는 탈보호화된, 수지-결합된 폴리아미드를 시판의 디-(이미다졸-1-일)메탄이민으로 처리한 후, 1차 아민의 첨가(모노치환된 구아니디닐 라디칼을 제공함) 또는 2차 아민의 첨가(gem-디치환된 구아니디닐 라디칼을 제공함)에 의해, 폴리아미드의 N-말단 상에 도입될 수 있다. 이러한 합성 경로는 도 5에 예시되어 있다. Wu et al., J. Org. Chem. 2002, 67, 7553을 참조한다.
N,N'-디치환, N,N,N'-트리치환, 또는 N,N,N',N'-테트라치환된 구아니디닐기[-N=C(NHR)2, -N=C(NHR)(NR2), 또는-N=C(NR2)2, 여기서, 각 경우에 R 기는 동일 또는 상이할 수 있음]는, 1차 아민기를 포함하는 탈보호화된, 수지-결합된 폴리아미드를 시판의 디-(2-피리딜)티오노카르보네이트로 처리하여 중간 산물인 이소티오시아네이트를 수득함으로써, 폴리아미드의 N-말단 상에 도입될 수 있다. 후속적인 1차 또는 2차 아민의 첨가, 탈황, 및 다른 1차 또는 2차 아민의 첨가는, 도 6에 예시되는 바와 같이 목적하는 N,N'-디치환, N,N,N'-트리치환, 또는 N,N,N',N'-테트라치환된 구아니디닐화된 폴리아미드를 제공할 것이다. Kilburn, J.P.; Lau, J.; Jones, R.C.F. Tetrahedron 2002, 58, 1739 참조.
다르게는, N,N'-디치환 또는 N,N,N'-트리치환된 구아니디닐기[-N=C(NHR)2 또는 -N=C(NHR)(NR2), 여기서, 각 경우에 R 기는 동일 또는 상이할 수 있음]는, 1차 아민기를 포함하는 탈보호화된, 수지-결합된 폴리아미드를 (제1 R 기를 포함하는) 이소티오시아네이트로 처리함으로써, 폴리아미드의 N-말단 상에 도입될 수 있다. 탈황은 중간 산물인 카르보디이미드를 제공할 것이다. 1차 또는 2차 아민[제2의 R 기(들)를 포함함]의 카르보디이미드에의 첨가로, 도 7에 예시되는 바와 같이 목적하는 N,N'-디치환 또는 N,N',N'-트리치환된 구아니디닐화된 폴리아미드가 각각 수득될 것이다. Chemistry - A European Journal, 11(5), 1459-1466, 2005, 및 Kilburn et al. Tetrahedron 2002, 58, 1739 참조.
약학 조성물
제형
본 발명의 다른 태양에서, 약학적으로 허용가능한 조성물을 제공하며, 여기서, 이들 조성물은 본원에서 기술되는 폴리아미드 화합물을 포함하며, 선택적으로는 약학적으로 허용가능한 담체, 보강제 또는 비히클을 포함한다. 소정의 실시형태에서, 이들 조성물은 선택적으로 하나 이상의 부가적인 치료제를 추가로 포함한다.
폴리아미드는 트리플루오로아세테이트(TFA) 염뿐만 아니라 클로라이드, 숙시네이트, 아스코르베이트 염 등과 같이 약학적으로 허용가능한 염의 형태로 존재할 수 있다. 이들은 또한, PEG-400, 프로필렌 글리콜 등과 같은 부형제로 제형화될 수 있다.
안정성을 높이기 위해, 폴리아미드 약물은 아스코르브산, BHT 또는 BHA와 같은 항산화제가 포함된 수용액에 위치하여, 보다 안정적인 제형물(formula)이 개발될 수 있다(Mayers C. L., et al. (1993) Pharma Res, 10: 445-448, 및 Stuhar M., (1984) Farmaceuticky Obzor, 53; 499-504 참조, 이 두 문헌은 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 포함됨).
질 및 자궁 경부로의 전달을 위해, 폴리아미드는 용액, 에멀젼, 현탁액, 정제, 젤, 폼, 좌제, 필름, 스폰지 및 질내 고리(vaginal ring)로서 제형화될 수 있다. 제형으로는, 젤(예를 들어, 하이드록시 에틸 셀룰로스 및 폴리아크릴산과 같은 젤화제를 사용해 제조되는 젤, 예를 들어, 가교된 아크릴산 기재의 중합체, 예컨대 제품명 CARBOPOL 하에 판매되는 것들), 및 어플리케이터(applicator)에 의해 표적 부위에 투여될 수 있는 폴리비닐 알코올 필름을 포함한다. 다르게는, 저 점도의 액체 제형(예를 들어, PEG 용액)은 자궁 경부 주변의 영역에 폴리우레탄 스폰지를 이용해 전달될 수 있다. (Okada, (1991) in "Peptide and Protein Drug Delivery" V. H. Lee, ed., pp. 663-666, Marcel Dekker, NY; Garg, et al. (2001) Pharm. Tech. 25:14-24, 이 두 문헌은 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 포함됨). 폴리아미드의 전하때문에, 폴리아미드는 카르보머(예컨대 제품명 CARBOPOL 하에 판매되는 것들)를 사용함으로써 제어 전달 비히클에서 제형화될 수 있다. 폴리아미드가 +1 또는 +2의 전하를 가지는 경우, 제형의 이온 세기를 조정함으로써, 폴리아미드를 카르보머에 정전기적으로 결합시켜 방출 속도를 조절할 수 있다. 준고체 투여 형태에서, 방출 속도는 준고체 투여 형태로부터의 약물 분산에 대해 US Pharmacopeia(Dipiano, et al., PCT International Publication No. WO 04/064913, 이 문헌은 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 포함됨)에서 기술된 바와 같이 막 장치에서 평가될 수 있다. 폴리아미드는, 상당한 항복 응력을 나타내는 카르보머-기재의 젤에서 제형되며, 또한 잠재적인 생체접착성(boioadhesive) 특성을 가진다 (Kieweg, et al. (2004) J. Pharm Sci. 93, 2941-52, 이 문헌은 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 포함됨).
시판의 질내 제형에 사용되는 부형제들 중 임의의 부형제(Garg et al., 2001)는 본 발명의 폴리아미드 화합물과 함께 사용되도록 변형될 수 있다. PEG(폴리에틸렌 글리콜), PVA(폴리비닐 알코올) 및 Tween 계면활성제와 같이 보편적으로 사용되는 부형제들이 또한 다수 사용될 수 있다. 항산화제 외에도, 추가적인 융화제(compatibilizer) 또는 안정화제가 사용될 수 있다. 고형 형태(solid form)는 이들의 물리적인 상태로 인해, 장기간의 저장 수명을 가진 보다 안정적인 제형물이 생성될 수 있게 한다. 카르보머와 같은 중합체를 사용해 생체접착제로부터 제조되는 에멀젼이 유용할 수 있다. HPMC (하이드록시메틸프로필 셀룰로스), PVA 및 지질 복합체는 저 용해도 약물과 함께 사용될 수 있다. 그런 다음, 지질 시스템이 불용성 폴리아미드 전달용 점탄성 젤에 현탁될 수 있다.
보다 지속적이거나 효과적인 전달을 위해, 오랜 시간에 걸쳐 자궁 경부 부위에서 약물을 전달할 수 있는 다이어프램(diaphragm)과 같은 이용가능한 자궁경부 차단 장치가, 보다 더 인접한 질내 고리이거나 또는 느리게 방출되는 이식가능한 중합체 필름이 적용될 수 있는 전달에 사용될 수 있다. 또한, 질내 스폰지 기술 및 SILCS 다이어프램과 같이 임상 시험에서의 몇몇의 새로운 질내 전달 시스템, 자궁경부 및 질내 벽 둘 다에 약물을 전달할 수 있는 단일 크기 실리콘 장치(Cohen, (2004) The Microbiocide Quarterly, 2:15-19, 이 문헌은 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 포함됨)가 사용될 수 있다. 연장된 기간 동안 약물의 인접 전달을 향상시키기 위해, 질내 고리는 고리 합성물로부터의 약물의 서방(slow release)과 함께 이용가능하다(Cohen, 2004; Hussain and Ahsan, (2005), J. Controlled Release 103:301-13, 이 문헌은 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 포함됨). 질내 약물 전달 제어를 위해 개발된 다른 어플리케이터 및 제형물이 또한 상당수 존재한다(Robinson (1999) Proc. Of the 26th Intl. Symp. Controlled Release of Bioactive Materials, 26:2-3, 이 문헌은 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 포함됨; Hussain and Ahsan, 2005).
경피 전달용 제형은, 단백질 약제의 생식기 혹으로의 전달을 위한 지질-기재의 제형물(Foldvari et al., (1999), Biotech. Appl. Biochem. 30:129-37; Leigh (2003) Drugs and the Pharm. Sci., 126:791-800; Lee et al., (2004) Biomaterials, 26:205-10, 이들 모두는 원용에 의해 참조로서 본원에 제공됨), 생체접착성 제형(Bogataj and Mrhar (1998) Bioadhesive mucosal drug delivery systems, 49:445-57; Amaral et al. (1999) Contraception, 60:361-66; Barry, (1987) in "Drug Delivery systems", Johnson and Lloyd-Jones, eds, Ch. 11, Ellis Horwood, Chichester; Vermani, et al. (2002) Drug Dev. Indust. Pharm. 28:1133-46, 이들 모두는 원용에 의해 참조로서 본원에 제공됨) 및 신규 중합체 시스템을 포함한다. 신규 중합체는, 부분적으로 흡수가능한 생분해성 항바이러스 질내 고리(Shalaby, (2005) 미국 특허 출원 공개 2005/053639, 이 문헌은 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 포함됨), 자궁 경부에 직접 적용되는 이층(bilaminar)의 생체접착성 중합체성 필름(Sidhu et al., (1997) Br. J. Obstetrics and Gynaecology, 104:145-49, 이 문헌은 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 포함됨), 잠재적으로 훨씬 더 큰 생체접착성 및 투여 형태 체류의 이점을 가진 자궁경부 점막 및 열젤화 시스템(thermogelling system)의 신규의 서방성 중합체 디스크를 포함한다(Saltzman and Radomsky (1990) Polymer Preprints, 31:245-46; Edelman and Mark (1998) Nature Biotech, 16:136-37, 이 두 문헌 모두 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 포함됨). 폴리아미드는 또한, 세포막 침투성 펩타이드를 사용해 제형화될 수도 있다(Gupta, et al. (2005) Adv. Drug Del Rev. 57:637-51; Wadia and Dowdy (2005) Adv. Drug Del. Rev., 57:579-96, 이 두 문헌은 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 포함됨).
본 발명의 폴리아미드는 또한, 신장 청정(renal clearance) 전의 시간을 단축 또는 연장하도록 설계된 약학적으로-허용가능한 중합체로 제형화될 수 있다.
본 발명에 따른 폴리아미드는 또한, 폐, 입 또는 목구멍에 에어로졸 처치로 전달하기 위해 제형화될 수도 있다. HPV 병변에의 직접적인 주사는 외부 (피부) 또는 점막 피부의 감염의 경우에 이용될 수도 있다.
다른 질환 지표는 본 발명의 폴리아미드를 주사, 또는 부가적이거나 보편적이거나 또는 공지된 약물 전달 방법에 의해 전신 처치하는 것을 요구할 수 있다.
본 발명의 소정의 화합물은 처치를 위한 자유로운 형태, 또는 적절하다면 약학적으로 허용가능한 유도체 또는 이의 프로드럭으로서 존재할 수 있음을 또한 이해해야 할 것이다. 본 발명에 따르면, 약학적으로 허용가능한 유도체 또는 프로드럭으로는, 필요한 대상에게 투여 시, 본원에서 기술되는 화합물, 또는 이의 대사산물 또는 잔류물을 직접 또는 간접적으로 제공할 수 있는 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 이러한 에스테르의 염, 또는 기타 부가물 또는 유도체를 포함하나, 이로 한정되지 않는다.
본원에서, 용어 "약학적으로 허용가능한 염"은, 합리적인 의학적 판단 범위 내에서 독성, 자극, 알레르기 반응 등을 동반하지 않으면서 인간 및 저급 동물들의 조직과 접촉하여 사용되기에 적절하며, 합리적인 이득 대 위험 비율에 상응하는 염들을 지칭한다. "약학적으로 허용가능한 염"은 수여자에게 투여 시, 본 발명의 화합물 또는 이의 저해 활성 대사산물 또는 잔류물을 직접 또는 간접적으로 제공할 수 있는, 본 발명의 화합물의 에스테르의 염 또는 비-독성 염을 의미한다.
약학적으로 허용가능한 염은 당해 기술분야에 잘 알려져 있다. 예를 들어, S. M. Berge, et al.은, 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 포함된 J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19에서 약학적으로 허용가능한 염에 대해 상세히 기술하고 있다. 본 발명의 화합물의 약학적으로 허용가능한 염으로는, 적절한 무기산과 무기염기, 및 유기산과 유기염기로부터 유래되는 것들을 포함한다. 약학적으로 허용가능한, 비독성의 산 부가염의 예는, 염화수소산, 브롬화수소산, 인산, 황산 및 과염소산과 같은 무기산, 또는 트리플루오로아세트산을 비롯한 아세트산, 옥살산, 말레산, 타르타르산, 시트르산, 숙신산 또는 말론산과 같은 유기산으로 형성되거나, 또는 이온 교환과 같이 당해 기술분야에 사용되는 기타 방법들을 사용해 형성되는 아미노기의 염이다. 기타 약학적으로 허용가능한 염으로는, 아디페이트, 알기네이트, 아스코르베이트, 아스파테이트, 벤젠설포네이트, 벤조에이트, 바이설페이트, 보레이트, 부티레이트, 캄포레이트, 캄포설포네이트, 시트레이트, 사이클로펜탄프로피오네이트, 디글루코네이트, 도데실설페이트, 에탄설포네이트, 포르메이트, 푸마레이트, 글루코헵토네이트, 글리세로포스페이트, 글루코네이트, 헤미설페이트, 헵타노에이트, 헥사노에이트, 하이드로요오다이드, 2-하이드록시-에탄설포네이트, 락토비오네이트, 락테이트, 라우레이트, 라우릴 설페이트, 말레이트, 말레에이트, 말로네이트, 메탄설포네이트, 2-나프탈렌설포네이트, 니코티네이트, 니트레이트, 올레에이트, 옥살레이트, 팔미테이트, 파모에이트, 펙티네이트, 퍼설페이트, 3-페닐프로피오네이트, 포스페이트, 피크레이트, 피발레이트, 프로피오네이트, 스테아레이트, 숙시네이트, 설페이트, 타르트레이트, 티오시아네이트, p-톨루엔설포네이트, 운데카노에이트, 발레레이트 염 등을 포함한다. 적절한 염기로부터 유래되는 염으로는, 알칼리 금속, 알칼리 토금속, 암모늄 및 N+(C1-4 알킬)4 염을 포함한다. 본 발명은 또한, 본원에서 개시되는 화합물의 염기성 질소-함유 기의 4차화 반응을 고려하기도 한다. 수용성 또는 지용성 또는 분산성 생성물은 이러한 4차화 반응에 의해 수득될 수 있다. 대표적인 알칼리 금속염 또는 알칼리 토금속염으로는, 나트륨, 리튬, 칼륨, 칼슘, 마그네슘 등을 포함한다. 추가적인 약학적으로 허용가능한 염으로는, 적절하다면, 비독성의 암모늄, 4차 암모늄, 및 할라이드, 하이드록사이드, 카르복실레이트, 설페이트, 포스페이트, 니트레이트, 저급 알킬 설포네이트 및 아릴 설포네이트와 같은 반대 이온을 사용해 형성되는 아민 양이온을 포함한다.
전술한 바와 같이, 본 발명의 약학적으로 허용가능한 조성물은, 하나 이상의 폴리아미드 화합물 외에도, 본원에서 바람직한 특정한 투여 형태에 적절한 한, 임의의 모든 용매, 희석제, 또는 기타 액체 비히클, 분산 또는 현탁 보조제, 계면활성제, 등장성제, 증점제 또는 유화제, 방부제, 고체 결합제, 윤활제 등을 포함하는, 약학적으로 허용가능한 담체, 보강제, 또는 비히클을 포함한다. Remington's Pharmaceutical Sciences, Sixteenth Edition, E. W. Martin(Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1980)은, 약학적으로 허용가능한 조성물을 제형화하는 데 사용되는 다양한 담체, 및 공지된 이의 제조 기술을 개시하고 있다. 종래의 담체 매질이, 예를 들어 바람직하지 못한 생물학적 효과를 발휘하거나 또는 약학적으로 허용가능한 조성물의 임의의 다른 성분(들)과 유해한 방식으로 상호작용함으로써 본 발명의 화합물과 비융화성임을 제외하는 한에 있어서, 이의 사용은 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 고려된다. 약학적으로 허용가능한 담체로서 작용할 수 있는 물질의 일부 예로는, 이온 교환기, 알루미나, 알루미늄 스테아레이트, 레시틴, 인간 혈청 알부민과 같은 혈청 단백질, 포스페이트, 글리신, 소르브산 또는 포타슘 소르베이트와 같은 완충제 성분, 포화 식물 지방산, 물, 염 또는 전해질 예컨대 프로타민 설페이트, 디소듐 하이드로겐 포스페이트, 포타슘 하이드로겐 포스페이트, 소듐 클로라이드, 아연 염, 콜로이드성 실리카, 마그네슘 트리실리케이트, 폴리비닐 피롤리돈, 폴리아크릴레이트, 왁스, 폴리에틸렌-폴리옥시프로필렌-블록 중합체, 울 지방, 락토스, 글루코스 및 수크로스와 같은 당의 부분적인 글리세라이드 혼합물; 옥수수 전분 및 감자 전분과 같은 전분; 셀룰로스 및 이의 유도체, 예컨대 소듐 카르복시메틸 셀룰로스, 에틸 셀룰로스 및 셀룰로스 아세테이트; 분말형 트라가칸트; 맥아; 젤라틴; 탈크; 부형제, 예컨대 코코아 버터 및 좌제 왁스; 오일, 예컨대 땅콩 오일, 면씨유; 잇꽃 오일; 참기름; 올리브유, 옥수수유 및 대두유; 글리콜, 예컨대 프로필렌 글리콜 또는 폴리에틸렌 글리콜; 에스테르, 예컨대 에틸 올레에이트 및 에틸 라우레이트; 한천; 완충제, 예컨대 마그네슘 하이드록사이드 및 알루미늄 하이드록사이드; 알긴산; 발열성 물질 제거수(pyrogen-free water); 등장성 식염수; 링거액; 에틸 알코올, 및 인산염 완충액, 뿐만 아니라 기타 비-독성의 융화성 윤활제, 예컨대 소듐 라우릴 설페이트 및 마그네슘 설페이트, 및 착색제, 이형제, 코팅제, 감미제, 풍미제 및 착향제(perfuiming agent), 방부제 및 항산화제를 포함하나, 이로 한정되지 않으며, 이들은 제형자의 판단에 따라 본 발명의 조성물에 존재할 수도 있다.
본 발명에 따르면, 화합물 또는 약학적으로 허용가능한 조성물의 "유효량"은 HPV 감염을 치료하거나 또는 이의 중증도를 저하시키는 데 효과적인 양이다. 다른 징후들이 본원에서 기술되는 폴리아미드로 치료되고 있는 경우, "유효량"은 이들 질환의 치료 규범에 따라 정의될 것이다.
투여
본 발명의 방법에 따라, 약학 조성물은 만성 HPV 질환을 치료하거나 또는 이의 중증도를 저하시키기에 효과적인 투여량 및 투여 경로로 투여될 수 있다.
요구되는 정확한 양은 대상의 종(species), 연령, 성별, 체중, 식이요법, 의학적 증상 및 일반적인 상태, 감염의 중증도, 특정한 제제, 이의 투여 방식 등에 따라, 대상마다 다양할 것이다. 투여 양생법에 영향을 미치는 다른 인자들로는, 사용되는 화합물의 활성, 효능, 약물동력학 및 독성학 프로파일과 같은 약리학적 고려사항들과, 약물 전달 시스템이 사용되는지, 화합물이 다른 성분들과 함께 투여되는지 여부를 포함한다. 투여량은 당해 기술분야에 공지된 표준 방법을 이용해 일상적으로 결정될 수 있다. 따라서, 실제로 적용되는 투여 양생법은 치료되는 대상에 따라 광범위하게 다양할 수 있으며, 따라서 후술하는 예시적인 투여 양생법과 차이날 수도 있다. 본 발명의 화합물은 바람직하게는 투여의 용이성 및 투여량의 균일성을 위해 투여량 단위 형태로 제형화된다. 본원에서, "투여량 단위 형태"라는 표현은 치료를 받는 대상에게 적절한 제제의 물리적으로 분리된 단위를 지칭한다. 그러나, 본 발명의 화합물 및 조성물의 총 일일 사용량은 합리적인 의학적 판단의 범위 내에서 담당의사에 의해 결정될 것으로 이해해야 한다. 특정한 대상에 대한 특정한 유효 투여 수준은, 치료되는 장애 및 장애의 중증도; 사용되는 특정 화합물의 활성; 사용되는 특정 조성물; 대상의 연령, 체중, 일반적인 건강 상태, 성별 및 식이요법; 사용되는 특정 화합물의 투여 시간, 투여 경로 및 분비 속도; 치료 기간; 사용되는 특정 화합물과 병용되거나 또는 동시에 사용되는 약물, 및 의학 분야에 공지된 유사한 인자들을 비롯한 다양한 인자들에 따라 다를 것이다. 본원에서, 용어 "대상"은 인간을 비롯한 포유류와 같은 동물을 의미한다.
화합물의 투여는 1일 1회 투여, 1일이라는 전기간에 걸쳐 시간 간격을 둔 여러 번의 투여, 2일 1회 투여, 며칠에 한 번 투여를 요구하는 양생법, 또는 다른 적절한 양생법으로 수행될 수 있다.
예를 들어, 제형화된 폴리아미드는 질 어플리케이터(vaginal applicator)를 통해 예를 들어, 질 원개 후부(posterior fornix of the vagina)에 약 4 ml의 비히클 중 5 mg/mL의 최종 농도(약 2.5 mM의 농도)로 1일 1회 투여될 수 있다. 취침 전 저녁에 투여되는 경우 이동(ambulation) 부족으로 인해, 약물 대부분이 질관의 최고위부이면서 자궁 경부에 가장 근접한 곳에 남아 있을 것으로 예상된다. 일 실시형태에서, 폴리아미드 제형은 10일 동안 투여될 수 있다.
본 발명의 약학적으로 허용가능한 조성물은 치료를 받는 감염의 중증도에 따라, 경구, 직장내, 비경구, 수조내(intracisternally), 질내, 복강내, 국소(분말, 연고 또는 점적액으로서), 협측내(bucally), 경구 또는 비내 스프레이 등으로서 인간 및 기타 동물들에게 투여될 수 있다. 소정의 실시형태에서, 본 발명의 화합물은 매일 대상의 체중에 대해 약 0.01 mg/kg 내지 약 50 mg/kg, 바람직하게는 약 1 mg/kg 내지 약 25 mg/kg의 투여량 수준으로 1일 1회 이상 경구 또는 비경구로 투여되어, 목적하는 치료 효과가 수득될 수 있다.
경구 투여를 위한 액체 투여 형태로는, 약학적으로 허용가능한 에멀젼, 마이크로에멀젼, 용액, 현탁액, 시럽 및 엘릭서를 포함하나, 이로 한정되지 않는다. 활성 화합물 외에도, 액체 투여 형태는 당해 기술분야에서 보편적으로 사용되는 불활성 희석제, 예컨대 물 또는 기타 용매, 가용화제 및 유화제, 예컨대 에틸 알코올, 이소프로필 알코올, 에틸 카르보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸렌 글리콜, 디메틸포름아미드, 오일(특히, 면씨유, 땅콩유, 옥수수유, 배아유, 올리브유, 피마자유 및 참기름), 글리세롤, 테트라하이드로푸르푸릴 알코올, 폴리에틸렌 글리콜 및 소르비탄의 지방산 에스테르, 및 이들의 혼합물을 포함할 수 있다. 불활성 희석제 외에도, 경구 조성물은 또한, 습윤제, 유화제 및 현탁화제, 감미제, 풍미제, 및 착향제와 같은 보강제를 포함할 수도 있다.
멸균 주사용 수성 또는 유지성 현탁액과 같은 주사 제제는 적절한 분산제 또는 습윤제 및 현탁화제를 사용해 당해 기술분야에 따라 제형화될 수 있다. 멸균 주사 제제는 또한, 1,3-부탄디올 중 용액과 같이, 비독성의 비경구적으로 허용가능한 희석제 또는 용매 내의 멸균 주사액, 현탁액 또는 에멀젼일 수도 있다. 사용될 수 있는 허용가능한 비히클 및 용매 중에는, 물, 링거액, U.S.P. 및 등장성 염화나트륨 용액이 있다. 또한, 멸균된 고정유(fixed oil)가 통상적으로 용매 또는 현탁 매질로서 사용된다. 이를 위해, 합성 모노글리세라이드 또는 디글리세라이드를 비롯한 완화성 지방유(bland fixed oil)가 사용될 수 있다. 또한, 올레산과 같은 지방산이 주사제의 제조에 사용될 수 있다.
주사 제형은 예를 들어, 사용 전에 멸균수나 기타 멸균 주사 매질에서 용해 또는 분산될 수 있는 멸균 고체 조성물의 형태로 멸균제를 삽입함으로써, 멸균될 수 있다.
본 발명의 화합물의 효과를 연장시키기 위해, 피하 또는 근육내 주사로부터 화합물의 흡수를 지연시키는 것이 종종 바람직하다. 이는 수용성이 불량한 결정질 또는 비정질 물질의 액체 현탁액을 사용함으로써 달성될 수 있다. 이후, 화합물의 흡수율은 이의 용해 속도에 따라 다른데, 즉, 결정 크기 및 결정질 형태에 따라 다를 수 있다. 다르게는, 비경구로 투여되는 형태의 화합물의 지연된 흡수는 이 화합물을 오일 비히클에 용해 또는 현탁시킴으로써 달성된다. 주사형 데폿 형태(injectable depot form)는 폴리락타이드-폴리글리콜라이드와 같은 생분해성 중합체에서 화합물의 미세캡슐 매트릭스를 형성함으로써 제조된다. 중합체에 대한 화합물의 비율 및 사용되는 특정 중합체의 특성에 따라, 화합물의 방출 속도는 조절될 수 있다. 다른 생분해성 중합체의 예로는, 폴리(오르토에스테르) 및 폴리(무수물)을 포함한다. 데폿 주사 제형은 또한, 생체 조직과 융화성인 마이크로에멀젼 또는 리포좀에 화합물을 주입함으로서 제조되기도 한다.
직장 또는 질 투여용 조성물은, 본 발명의 화합물을, 주위 온도에서는 고체이지만 체온에서는 액체여서 직장 또는 질강에서 용융되어 활성 화합물을 방출하는 적절한 비-자극성 부형제 또는 담체, 예컨대 코코아 버터, 폴리에틸렌 글리콜, 또는 좌제 왁스와 혼합함으로써 제조될 수 있는 좌제일 수 있다.
경구 투여용 고체 투여 형태로는, 캡슐, 정제, 알약, 분말, 및 과립을 포함한다. 이러한 고체 투여 형태에서, 활성 화합물은 하나 이상의 불활성, 약학적으로 허용가능한 부형제 또는 담체, 예컨대 소듐 시트레이트 또는 디칼슘 포스페이트 및/또는 (a) 충전재 또는 확장제, 예컨대 전분, 락토스, 수크로스, 글루코스, 만니톨, 및 실릭산, (b) 결합제, 예컨대, 카르복시메틸셀룰로스, 알기네이트, 젤라틴, 폴리비닐피롤리돈, 수크로스, 및 아카시아, (c) 보습제, 예컨대 글리세롤, (d) 붕괴제, 예컨대 한천-한천, 칼슘 카르보네이트, 감자 또는 타피오카 전분, 알긴산, 소정의 실리케이트, 및 소듐 카르보네이트, (e) 용액 지연제, 예컨대 파라핀, (f) 흡수 가속화제, 예컨대 4차 암모늄 화합물, (g) 습윤제, 예컨대, 세틸 알코올 및 글리세롤 모노스테아레이트, (h) 흡수제, 예컨대 카올린 및 벤토나이트 클레이, 및 (i) 윤활제, 예컨대 탈크, 칼슘 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 고형 폴리에틸렌 글리콜, 소듐 라우릴 설페이트, 및 이들의 혼합물과 함께 혼합된다. 캡슐, 정제 및 알약의 경우, 투여 형태는 또한, 완충제를 포함할 수도 있다.
유사한 유형의 고체 조성물은 또한, 고분자량 폴리에틸렌 글리콜 등 뿐만 아니라 락토스 또는 유당과 같은 부형제를 사용해 연질-충전 및 경질-충전된 젤라틴 캡슐에서 충전재로서 사용될 수도 있다. 정제, 당제, 캡슐, 알약, 및 과립의 고체 투여 형태는 약학 제형 분야에 잘 알려져 있는 장용 코팅제 및 기타 코팅제와 같은 코팅제 및 쉘(shell)로 제조될 수 있다. 이들은 선택적으로는, 불투명화제를 포함할 수 있으며, 활성 성분(들)만 방출하거나, 또는 바람직하게는 장관 중 특정 부분에서 선택적으로는 지연된 방식으로 방출하는 조성물일 수 있다. 사용될 수 있는 포매(embedding) 조성물은 중합체 성분 및 왁스를 포함한다. 유사한 유형의 고체 조성물 또한, 고분자량 폴리에틸렌 글리콜 등 뿐만 아니라 락토스 또는 유당과 같은 부형제를 사용해 연성-충전 및 경성-충전된 젤라틴 캡슐에서 충전재로서 사용될 수도 있다.
활성 화합물은 또한, 전술한 바와 같은 하나 이상의 부형제와 함께 미세캡슐화된 형태로 존재할 수도 있다. 고체 투여 형태인 정제, 당제, 캡슐, 알약, 및 과립은, 장용 코팅제, 방출 조절형 코팅제 및 약학 제형 분야에 잘 알려진 기타 코팅제와 같은 코팅제 및 쉘로 제조될 수 있다. 이러한 고체 투여 형태에서, 활성 화합물은 하나 이상의 불활성 희석제, 예컨대 수크로스, 락토스 또는 전분과 함께 혼합될 수 있다. 이러한 투여 형태는 또한, 보편적인 시행에서처럼, 불활성 희석제 이외의 부가적인 성분들, 예를 들어, 마그네슘 스테아레이트 및 미세결정질 셀룰로스와 같은 정제 윤활제 및 기타 정제 보조제를 포함할 수도 있다. 캡슐, 정제 및 알약의 경우, 투여 형태는 또한, 완충제를 포함할 수도 있다. 이들은 선택적으로는 불투명화제를 포함할 수 있으며, 바람직하게는 장관 중 특정 부분에서 선택적으로는 지연된 방식으로, 활성 성분(들)만을 방출하는 조성물일 수 있다. 사용될 수 있는 포매 조성물의 예는 중합체성 성분 및 왁스를 포함한다.
본 발명의 화합물의 국소 또는 경피 투여를 위한 투여 형태로는, 연고, 페이스트, 크림, 로션, 젤, 분말, 용액, 스프레이, 흡입제 또는 패치를 포함한다. 활성 성분은 멸균 조건 하에, 약학적으로 허용가능한 담체, 및 요구될 수 있는 경우 필요한 방부제 또는 완충제와 함께 혼합된다. 안내 제형, 귀약, 및 안약 또한 본 발명의 범위 내에서 고려된다. 부가적으로, 본 발명은, 화합물을 신체에 조절형으로 전달하는 부가적인 이점을 가진 경피 패치의 사용도 고려한다. 이러한 투여 형태는 화합물을 적절한 배지에 용해 또는 현탁함으로써 제조된다. 흡수 증강제가 또한 사용되어, 피부를 통과하는 화합물의 유속을 증가시킬 수 있다. 이러한 속도는, 속도 조절 막을 제공하거나 또는 화합물을 중합체 매트릭스 또는 젤에 분산시킴으로써 조절될 수 있다.
일반적으로 전술한 바와 같이, 본 발명의 화합물은 만성 HPV 질환을 비롯한 HPV 질환의 치료제로서 유용하다.
본 발명의 2가지 이상의 화합물은 감염된 세포, 감염된 세포를 포함하는 조직, 또는 감염된 대상에게 개별적으로, 동시에, 또는 연속해서 투여될 수 있다.
본 발명의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 조성물은, 이러한 화합물 및 약학적으로 허용가능한 조성물이 하나 이상의 다른 바람직한 치료제 또는 의학적 처치와 동시에, 이전에, 또는 이후에 투여될 수 있는, 병용 치료법에 사용될 수 있는 것으로 또한 여겨질 것이다. 병용 양생법에 사용될 치료법(치료제 또는 처치)의 특정한 조합은, 바람직한 치료제 및/또는 처치의 융화성(compatibility), 및 달성하고자 하는 바람직한 치료 효과를 고려해야 한다. 또한, 사용되는 치료법이 동일한 장애에 대해 바람직한 효과를 달성할 수 있거나(예를 들어, 본 발명의 화합물이 동일한 장애를 치료하는 데 사용되는 또 다른 제제와 동시에 투여될 수 있음), 또한 서로 다른 효과(예를 들어, 부작용의 조절)를 달성할 수 있는 것으로 여겨질 것이다. 본원에서, 통상적으로 특정한 질환 또는 상태를 치료 또는 에방하고자 투여되는 부가적인 치료제는 "치료중인 질환 또는 상태에 적절한" 것으로 알려져 있다.
본 발명의 조성물에 존재하는 부가적인 치료제의 양은, 치료제를 유일한 활성제로서 포함하는 조성물에서 통상적으로 투여되는 양과 동일하거나 그보다 적어야 할 것이다. 바람직하게는, 본원에서 개시되는 조성물 내의 부가적인 치료제의 양의 범위는, 유일한 치료적 활성제로서 상기 제제만을 포함하는 조성물에 통상적으로 존재하는 양의 약 50% 내지 100%일 것이다.
본 발명의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 조성물은 또한, 보철물(prosthese), 인공 밸브, 혈관 이식물(graft), 스텐트 및 카테터와 같은 이식가능한 의료 장치를 코팅하기 위한 조성물에 혼입될 수도 있다. 따라서, 다른 태양에서, 본 발명은, 일반적으로 전술한 바와 같이, 본 발명의 화합물을 포함하며 이식가능한 장치를 코팅하기 위한 조성물, 및 본원의 클래스(class) 및 하위클래스(subclass)에서는 상기 이식가능한 장치의 코팅에 적절한 담체를 포함한다. 또 다른 태양에서, 본 발명은 일반적으로 전술한 바와 같이 본 발명의 화합물을 포함하는 조성물로 코팅된 이식가능한 장치, 및 본원의 클래스 및 하위클래스에서는 상기 이식가능한 장치의 코팅에 적절한 담체를 포함한다. 적절한 코팅제 및 코팅된 이식가능한 장치의 일반적인 제조는 미국 특허 제6,099,562 호; 제5,886,026 호; 및 제5,304,121 호에 기술되어 있다. 이러한 코팅제는 전형적으로 생체적합성 중합체 물질로서, 예를 들어, 하이드로겔 중합체, 폴리메틸디실록산, 폴리카프로락톤, 폴리에틸렌 글리콜, 폴리락트산, 에틸렌 비닐 아세테이트, 및 이들의 혼합물을 포함한다. 상기 코팅제는 선택적으로는, 플루오로실리콘, 다당류, 폴리에틸렌 글리콜, 인지질 또는 이들의 조합으로 구성된 적절한 탑코트(topcoat)에 의해 추가적으로 피복(cover)되어, 상기 조성물에 서방성 특징(controlled release characteristics)을 부여할 수 있다.
치료 방법
본 발명의 다른 태양은, 본원에서 기술되는 폴리아미드를 포함하는 약학 조성물을 대상(인간 또는 기타 동물)에게 투여하거나 또는 생물학적 샘플을 상기 조성물과 접촉시키는 단계를 포함하는, 바이러스 또는 기타 바이러스에 감염된 세포를 생물학적 샘플 또는 대상에서(예를 들어, 시험관 내 또는 생체 내에서) 치료하는 방법에 관한 것이다. 본원에서 기술되는 폴리아미드의 혼합물이 또한 사용될 수 있다. 본원에서, 용어 "생물학적 샘플"로는, 세포 배양물 또는 이의 추출물; 포유류로부터 수득되는 생검 재료 또는 이의 추출물; 및 혈액, 침, 소변, 대변, 정액, 눈물 또는 기타 체액 또는 이의 추출물을 포함하나, 이로 한정되지 않는다. 용어 "대상"으로는, 인간, 영장류, 개, 고양이, 말, 돼지, 소, 양 등과 같은 포유류를 비롯한 동물을 포함한다.
개체의 세포가 HPV에 노출되어 감염된 후, 다수의 HPV 에피좀 복사체가 이러한 감염된 세포 내에서 구축될 수 있다. HPV 에피좀은 세포가 분열함에 따라 추가로 복제되어, 각각의 새로운 세포에 HPV 에피좀 복사체를 대략 동일한 수로 생성한다(예를 들어, 세포 분열 시, 20개 내지 100개의 복사체를 포함하는 세포는 2개의 새로운 세포를 생성할 것이며, 이 새로운 세포는 각각 약 20개 내지 100개의 에피좀 복사체를 포함함). A/T-풍부한 영역을 표적으로 하도록 설계된 폴리아미드는 HPV 에피좀의 소거(clearance)를 촉진할 수 있다. 따라서, 본 발명의 방법은 또한, HPV를 치료하기 위한 치료 방법으로서 유익하게 이용될 수 있다.
HPV 또는 기타 유두종 바이러스의 치료에 사용되는 폴리아미드로는, 본원에서 기술된 것들을 포함하나, 이로 한정되지 않는다.
일 실시형태에서, 본 발명은, 세포를 본원에서 기술되는 화합물 또는 이러한 화합물들의 혼합물과 접촉시키는 단계를 포함하는, HPV에 감염된 세포의 치료 방법을 제공한다. 본 발명의 일 태양에서, 이러한 방법은, 상기 세포를 항바이러스 제제와 접촉시키는 단계를 추가로 포함한다. 항바이러스 제제는 인터페론, 이미퀴모드, 시도포비르, 포름알데하이드, 글루타랄, 시메티딘, 5-플루오로우라실, 트리클로로아세트산, 블레오마이신, 포도필록스 또는 포도필룸일 수 있다.
또 다른 실시형태에서, 본 발명은, 본원에서 기술되는 화합물 또는 약학 조성물을 대상에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상에서 HPV에 감염된 세포를 치료하는 방법을 제공하다. 본 발명의 일 태양에서, 이러한 방법은, 상기 세포를 항바이러스 제제와 접촉시키는 단계를 추가로 포함한다. 항바이러스 제제는 인터페론, 이미퀴모드, 시도포비르, 포름알데하이드, 글루타랄, 시메티딘, 5-플루오로우라실, 트리클로로아세트산, 블레오마이신, 포도필록스 또는 포도필룸일 수 있다. 다른 태양에서, HPV는 HPV 11, HPV16, HPV18, HPV1, HPV6 또는 HPV31일 수 있다.
다른 실시형태에서, 본 발명은, 본 발명에 따른 폴리아미드, 특히 화학식 Z-(X)n-γq-(X)m-A(여기서, Z, X, γq, A, m 및 n은 전술한 바와 같음)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 화학식 G-(X)n-γq-(X)m-A의 화합물(여기서, G, X, γq, A, m 및 n은 전술한 바와 같음) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 대상에게 투여하는 단계를 포함하는, HPV16, HPV18 또는 HPV31 에 감염된 세포를 치료하는 방법을 제공한다.
또 다른 실시형태에서, 본 발명은 하기의 화합물들로부터 선택되는 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염을 대상에게 투여함으로써, HPV에 감염된 세포, 예컨대 HPV16, HPV18 또는 HPV31에 감염된 세포를 치료하는 방법을 제공한다:
TMG-PyPyβPyPyβPyIm-γNH2-PyβPyPyβPyPyPyβPyPy-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPyIm-γNHR'-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPyIm-γNH2-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPy-γNHR'-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPyIm-γNH2-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Dp;
TMG-PyPyPyβPyPyβPy-γNH2-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPy-γNH2-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Dp;
TMG-PyβPyPyImβPyPy-γ-PyPyβPyPyPyβPyPyPyβ-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPy-γNHR"-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Dp;
TMG-PyβPyPyImβPyPy-γ-PyPyβPyPyPyβPyPyPyβ-Dp;
TMG-PyβPyPyPy-γ-PyPyβPyPyPyPyβ-Dp;
TMG-PyβPyPyPy-γ-PyPyβPyPyPyPyβ-Ta;
TMG-PyPyβPyPyPy-γ-PyPyβPyPyPyPyβ-Dp;
TMG-PyPyβPyPyPy-γ-PyPyβPyPyPyPyβ-Ta;
TMG-PyPyβPyPyImβPyPy-γ-PyPyβPyPyPyβPyPyPyβ-Ta;
TMG-PyPyβPyPyImβPyPy-γ-PyPyβPyPyPyβPyPyPyβ-Dp;
TMG-PyPyPyβPyPyβPyIm-γ-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPyIm-γ-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Dp;
TMG-PyPyβPyPyβPyIm-γωPyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Dp;
TMG-PyPyβPyPyβPyIm-γ-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyImβPyPy-γ-PyPyPyβPyPyPyβ-Ta;
TMG-PyPyβPyPyβPy-γNH2-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyβPyPyβPyIm-γNH2-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyβPyPyβPy-γ-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyPyPyβPyPyβPy-γ-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
TMG-PyImPyIm-γ-PyPyPyPyβ-Ta;
TMG-PyImβIm-γ-PyβPyPyβ-Ta;
TMG-PyImPyIm-γ-PyβPyPyβ-Ta;
TMG-PyImβIm-γ-PyPyPyPyβ-Ta;
GUAN-PyImβImγPyβPyPyβ-Ta.
이러한 실시형태의 태양에서, 이러한 방법은 항바이러스 제제를 투여하는 단계를 추가로 포함한다. 항바이러스 제제는 인터페론(예를 들어, 인터페론-y 및 인터페론-0), 이미퀴모드, 시도포비르, 포름알데하이드, 글루타랄, 시메티딘, 5-플루오로우라실, 트리클로로아세트산, 블레오마이신, 포도필록스, 포도필룸, 아사이클로비르 및 기타 헤르페스/사이토메갈로바이러스 약물, 및 항-HIV 약물이다. 폴리아미드는 또한, 광역학적 치료법(photodynamic therapy), 방사선 치료법 및 화학치료법과 함께 사용될 수도 있다.
본원에서 기술되는 발명을 보다 완벽하게 이해할 수 있도록, 하기의 실시예들을 나타낸다. 이들 실시예는 단지 예시를 목적으로 할 뿐, 본 발명을 임의의 방식으로 한정하는 것으로 의도되어서는 안됨을 이해해야 한다.
실시예
폴리아미드 올리고머는, Boc-β-알라닌-PAM 고체상 합성 수지, 또는 Fmoc-β-알라닌-Wang 수지와 같은 시판중인 유사한 수지로 출발하여, 표적 서열에 필요한 빌딩 블록을 첨가함으로써 합성할 수 있다. 구아니디닐화된 폴리아미드의 제조에서 최종 단계는 N-말단에서 테트라메틸구아니디닐(TMG)기를 삽입함으로써 예시된다. TMG-폴리아미드 합성은 HATU (2-(7-아자-1H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트)를 사용한 테트라메틸구아니디닐 라디칼의 배치(placement)를 수반한다.
표 1a는 본 발명에 따라 합성된 예시적인 폴리아미드를 다수 열거하고 있다. 표 1b에 주어진 HPLC/MW 값은, 평균 분자량이나 정확한 질량보다는 단일 동위원소이성질체(isotopomer)의 중간 정도로 정확한 질량값을 제공하는 저해상 고압 액체 크로마토그래피/질량 분석법(LR HPLC/MS)을 이용해 수득하였다. 화합물 NV1096의 전체 구조는 도 2에 나타나 있다. 표 2는 이들 HPV16, HPV18 및 HPV31에 대한 이들 폴리아미드 중 소정의 폴리아미드의 IC50 측정값의 요약을 나타낸 것이다. IC50은 시험관 내에서 바이러스 복제를 50% 저해하는 데 필요한 화합물의 농도이다. 폴리아미드를, HPV16, HPV18 또는 HPV31 DNA를 유지하는 세포에서 테스트하였다. 선별된 HPV를 유지하는 세포를 폴리아미드의 존재 하에 72시간 동안 배양하였다. 그런 다음, 바이러스 DNA를 실시간 PCR로 정량화하고, 비히클(DMSO)-처리 대조군 배양물과 비교하였다. 수득된 결과는, 테스트한 폴리아미드가 일반적으로, HPV16, HPV18 및 HPV31의 복제를 저해하는 효능을 나타내었음을 입증한다. 표 3은 HPV16, HPV18 및 HPV31에 대한 이들 폴리아미드 중 소정의 폴리아미드의 IC50 및 IC90 측정값의 요약을 나타낸 것이다. 결과는, 테스트한 폴리아미드가 HPV16, HPV18 및 HPV31의 복제를 저해하는 효능을 나타내었음을 추가로 입증한다.
[표 1a]
Figure pct00001
Figure pct00002
[표 1b]
Figure pct00003
Figure pct00004
[표 2]
Figure pct00005

표 2에서, "-"은, 최고 테스트 투여량(10 μM)에서 대조군과 비교해 측정가능한 항바이러스 반응이 수득되지 않았음을 나타낸다.
[표 3]
Figure pct00006

몇몇 다른 방법들을 사용하여, 바이러스 DNA에 대한 화합물의 효과를 확인할 수 있다. 이들 부가적인 절차로는, 총 DNA에 대한 정상화(normalization), DNeasy (Total Genomic DNA) Qiagen 스핀 컬럼을 비롯한 서로 다른 절차들에 의한 NDA의 제조, DNAzol 총 게놈 DNA 제조, 및 Hirt (저분자량 DNA 제조)(Hirt, (1967), J Mol Biol. 26:365-9)를 포함한다.
서던 블롯팅(southern blotting)을 사용하여, 실시간 PCR 기술을 사용하여 측정한 HPV DNA 농도에 대한 폴리아미드의 효과를 확인할 수 있다. 실험들은 기존에 기술된 바와 같이 수행할 수 있다(Gamer-Hamrick and Fisher, Virology, 301, 334-41, 2002).
HPV에 대해 활성인 것으로 밝혀진 폴리아미드 각각의 독성은 MTT 세포 생존률 분석법을 사용하여 정상적인 인간의 케라티노사이트에서 모니터링할 수 있다(Denizot and Lang, 1986).
기타 실시형태
본 발명은 전술한 상세한 설명과 함께 기술되긴 하였지만, 전술한 설명은 예시로서 의도된 것이며 첨부된 청구항의 범위로 정의되는 본 발명의 범위를 한정하려는 것이 아님을 이해해야 한다. 다른 이점들과 변형들은 하기 청구항의 범위에 속한다.

Claims (21)

  1. 화학식 G-(X)n-γq-(X)m-A의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염으로서,
    상기 식에서,
    m은 5 내지 12이며;
    n은 4 내지 10이며;
    G는 구아니디닐 라디칼이며;
    X는 각각 독립적으로 4-아미노-2-카르보닐-N-메틸이미다졸(Im), 4-아미노-2-카르보닐-N-메틸피롤(Py) 또는 β-알라닌(β)으로부터 선택되며;
    γq는 γ-아미노부티르산(γ); 2,4-디아미노부티르산(γNH2); 또는 H2N(CH2)2CH(NHC(=O)NHR)CO2H이며, 여기서, R은 -(CH2)3-N(CH3)-(CH2)3-NH2(γNHR') 또는 -(CH2)3-N(CH3)2(γNHR")이며; 및
    A는 3,3'-디아미노-N-메틸디프로필아민(Ta) 또는 3-(디메틸아미노)프로필아민 (Dp)인, 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  2. 제1항에 있어서,
    G가 테트라메틸구아니디닐(TMG)인, 화합물.
  3. 제1항에 있어서,
    하기 화합물들로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물, 및 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    TMG-PyPyβPyPyβPyIm-γNH2-PyβPyPyβPyPyPyβPyPy-Ta;
    TMG-PyPyPyβPyPyβPyIm-γNHR'-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
    TMG-PyPyPyβPyPyβPyIm-γNH2-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
    TMG-PyPyPyβPyPyβPy-γNHR'-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
    TMG-PyPyPyβPyPyβPyIm-γNH2-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Dp;
    TMG-PyPyPyβPyPyβPy-γNH2-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
    TMG-PyPyPyβPyPyβPy-γNH2-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Dp;
    TMG-PyβPyPyImβPyPy-γ-PyPyβPyPyPyβPyPyPyβ-Ta;
    TMG-PyPyPyβPyPyβPy-γNHR"-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Dp;
    TMG-PyβPyPyImβPyPy-γ-PyPyβPyPyPyβPyPyPyβ-Dp;
    TMG-PyβPyPyPy-γ-PyPyβPyPyPyPyβ-Dp;
    TMG-PyβPyPyPy-γ-PyPyβPyPyPyPyβ-Ta;
    TMG-PyPyβPyPyPy-γ-PyPyβPyPyPyPyβ-Dp;
    TMG-PyPyβPyPyPy-γ-PyPyβPyPyPyPyβ-Ta;
    TMG-PyPyβPyPyImβPyPy-γ-PyPyβPyPyPyβPyPyPyβ-Ta;
    TMG-PyPyβPyPyImβPyPy-γ-PyPyβPyPyPyβPyPyPyβ-Dp;
    TMG-PyPyPyβPyPyβPyIm-γ-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
    TMG-PyPyPyβPyPyβPyIm-γ-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Dp;
    TMG-PyPyβPyPyβPyIm-γ-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Dp;
    TMG-PyPyβPyPyβPyIm-γ-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
    TMG-PyImβPyPy-γ-PyPyPyβPyPyPyβ-Ta;
    TMG-PyPyβPyPyβPy-γNH2-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
    TMG-PyPyβPyPyβPyIm-γNH2-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
    TMG-PyPyβPyPyβPy-γ-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
    TMG-PyPyPyβPyPyβPy-γ-PyPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta;
    TMG-PyImPyIm-γ-PyPyPyPyβ-Ta;
    TMG-PyImβIm-γ-PyβPyPyβ-Ta;
    TMG-PyImPyIm-γ-PyβPyPyβ-Ta;
    TMG-PyImβIm-γ-PyPyPyPyβ-Ta;
    GUAN-PyImβImγPyβPyPyβ-Ta.
  4. 제1항에 있어서,
    γq가 (R)-2,4-디아미노부티르산(γNH2)인, 화합물.
  5. 제1항에 있어서,
    γq가 (S)-2,4-디아미노부티르산(γNH2)인, 화합물.
  6. 제1항에 따른 화합물의 치료적 유효량과 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학 조성물.
  7. 제1항에 있어서,
    형광성이거나 또는 형광 표지된, 화합물.
  8. 제7항에 있어서,
    화학식 TMG-PyPyPyβPyPyβPyIm-γ-PyβPyPyβPyPyPyβPyβ-Ta-FAM의 화합물, 및 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  9. 결합이 발생할 수 있게 하는 조건 하에, 이중-가닥 DNA 내 DNA-표적 서열을 제1항에 따른 DNA-결합 화합물과 접촉시키는 단계를 포함하는, 이중-가닥 DNA를 서열-특이적인 방식으로 결합시키는 방법.
  10. 제8항에 있어서,
    생체 내, 시험관 내 또는 생체 외에서 수행되는, 방법.
  11. 제8항에 있어서,
    세포에서 수행되는, 방법.
  12. 제8항에 있어서,
    상기 이중 가닥 DNA가 상기 세포에 대해 내인성인, 방법.
  13. 제8항에 있어서,
    상기 이중 가닥 DNA가 상기 세포에 대해 이종성인, 방법.
  14. 세포들을 제1항에 따른 화합물의 유효량과 접촉시키는 단계를 포함하는, 신생물 세포 또는 유두종 세포의 증식을 감소 또는 저해하는 방법.
  15. 제14항에 있어서,
    상기 신생물 세포가 암세포인, 방법.
  16. 제15항에 있어서,
    상기 암세포가 자궁경부암세포, 음경암세포, 항문암세포, 구강암세포, 인후암세포, 및 목암세포로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
  17. 바이러스에 감염된 세포를 제1항에 따른 화합물의 유효량과 접촉시키는 단계를 포함하는, 바이러스에 감염된 세포를 치료하는 방법.
  18. 제17항에 있어서,
    상기 감염이 이중-가닥 DNA 바이러스에 의해 유발되는, 방법.
  19. 제17항에 있어서,
    상기 감염이 HPV, 엡스타인-바르(Epstein-Barr) 바이러스, 헤르페스(herpes) 바이러스, 아데노바이러스, BK, 및 폭스(pox) 바이러스에 의해 유발되는, 방법.
  20. 제17항에 있어서,
    상기 감염이 HPV16, HPV31, 또는 HPV18에 의해 유발되는, 방법.
  21. 제1항에 따른 화합물의 유효량과 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학 조성물을 대상에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상에서 HPV를 치료하는 방법.
KR1020147012415A 2011-10-10 2012-10-10 인간 유두종 바이러스 치료에 유용한 구아니디닐-치환된 폴리아미드 KR20140074996A (ko)

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