KR20140042886A - 피롤리딘 고리를 갖는 16,17 위치에서 응축된 항염증용 스테로이드 - Google Patents

Abstract

본 발명은 신규 항염증 및 항알러지 작용을 갖는 글루코코르티코 스테로이드 류의 화합물, 이들 화합물의 제조방법, 그들을 포함한 약제 조성물, 조합물 그리고 그들의 치료용도에 관한 것이다.
더욱이, 본 발명은 피롤리딘 유도체인 글루코코리티코 스테로이드에 관한 것이다.

Description

피롤리딘 고리를 갖는 16,17 위치에서 응축된 항염증용 스테로이드{Anti-inflammatory steroids condensed in position 16,17 with pyrrolidine ring}

본 발명은 글루코코르티코스테로이드 류의 신규 항염증 및 항알러지 작용을 갖는 화합물, 그들 화합물의 제조방법, 그들의 조합물과 치료용도에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 피롤리딘 유도체인 글루코코르티코스테로이드에 관한 것이다.

항염증제 활성인 코르티코스테로이드는 염증세포의 수, 효능 및 운동을 감소시킬 수 있다.

코르티코스테로이드는 흔히, 천식, 만성 폐쇄 폐질환(COPD), 알러지성 비염, 류마치스성 관절염, 염증성 장질환 및 자가면역 질환을 포함하는 만성 및 급성 염증 질환을 치료하는데 사용한다.

코르티코스테로이드는 글루코코르티코이드 수용체(GR)를 통하여 그들의 효과를 전달한다. 수용체(GR)에 대한 코르티코스테로이드의 결합은 그의 핵전위를 유도하며, 차례적으로, DNA-결합-의존성(예를 들면, 전사촉진) 및 DNA-결합-독립성(예를 들면, 전사억제) 기전을 통한 후속 경로에 영향을 미친다.

천식이나 COPD와 같은 폐의 만성염증 증상을 치료하는 코르티코스테로이드는 흡입을 통한 투여가 일반적이다. 흡입된 코르티코스테로이드(ICS)의 적용 이점 중 하나는, 조직에 부작용을 제한하며, 작용부위에 직접 약물을 투여할 수 있다는 것이며, 따라서 신속한 치료응답 및 높은 치료율을 얻을 수 있다는 것이다.

흡입된 코르티코스테로이드(ICS) 치료로 중요한 이점이 생길지라도, 특히 천식치료시, 만성투여와 연관된 원하지 않는 부작용의 발생과 심각성을 주는 ICS계 노출을 최소화하는 것이 중요하다. 더욱이, 임상적응용에 유용한 ICS 작용의 제한지연은 질환의 차선관리에 기여를 보인다. 흡입기술은 폐를 목표로 하여 중요한 반면, 코르티코스테로이드 분자물 유도체에 대한 치환체의 변형은 경구적 생물학적 동등성을 감소시키기 위하여 약물 동태 학적 및 약물역학적 성질의 선택에 중요하며, 폐(전구체 및 마약 약물) 중에서 유일하게 약물활성을 한정하기 위하여 그리고 조직의 치료율을 높이기 위하여 중요하다. 더욱이, 폐에 ICS의 하루 한번 투여로 아주 바람직하게 오래 지속되는 ICS 효능은 투여 빈도의 감소를 가져 올 수 있고, 따라서 환자의 순응을 대체적으로 개선시킬 수 있으며, 결과적으로, 질환을 관리하고 조절하는 것이 가능하다. 요컨대, 개선된 약물 동태 학적 및 약물역학적 성질을 갖는 ICS 개발의 필요성이 대두되었다.

플루티카손 푸로에이트(fluticasone furoate)는 증가된 친화력을 갖는 글루코코르티코이드의 예로, 약물역학 및 물리화학적 성질을 조합한 유일한 것으로 알러지성 비염을 국소적으로 치료하도록 개발된 것으로, 이 화합물은 폐에서 장시간 작용하며 조직의 부작용은 감소시키기 위하여 간성대사에 의하여 급히 불활성 되었다(샐터 등., 2007)

우리의 지식으로는, 글루코코르티코이드 피롤리딘 유도체는, PCT/EP2011/051537 계류중인 특허출원에 몇몇 피롤리딘 유도체가 기재된 것을 제외하고는 전혀 기재된바 없다.

놀랍게도, 본 발명의 화합물은 고유의 좋은 효능을 보여줬음이 확인되었다.

발명의 요약

본 발명은 일반구조식 (I) 화합물, 및 일반구조식 (I')의 대응하는 화합물에 관한 것으로, 여기서 몇몇 입체선택성 센터의 배위로 정해진 것이다. 본 발명은 또한 구조식 (I) 및 (I') 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염, 이들 화합물의 제조방법, β2-작용제, 항무스카린제, PDE4 억제제, P38 MAP 키나제 억제제 및 IKK2 억제제류 중에서 선택된 하나 또는 그 이상의 활성 화합물과의 조합물, 그들로 구성된 약제조성물 및 그들의 치료학적 용도에 관한 것이다.

발명의 상세한 설명

하나의 관점에서, 본 발명은 일반구조식 (I) 화합물 및 그들의 약제학적 허용가능한 염에 관한 것이다.

여기에서,

R₁은 (CH₂)_n-V-(CN₂)_n'-R₄이고, 여기서 n과 n'는 독립적으로 0 또는 1이며;

V는 부재 또는 -O-, -S- 및 -OC(O)- 중에서 선택되고;

R₄는 하기 군에서 선택되며;

- -H, -OH, -CN 또는 할로겐;

- (C₁-C₆)알킬로, 선택적으로 옥소, -CN, -SH 또는 할로겐에서 선택된 하나 또는 그 이상의 군으로 치환되며;

R₂는 (CH₂)_m-R₆으로, m=0 또는 1 내지 4의 정수이고;

R₆는 아릴 및 헤테로아릴로 이루어진 군에서 선택되며, 선택적으로 옥소, -OH, -CN, -COOH, (C₁-C₆)알콕시, (C₁-C₆)알킬, (C₁-C₆)할로알킬 및 할로겐에서 선택된 하나 또는 그 이상의 군으로 치환된다.

용어 중 "할로겐 원자"는 불소, 염소, 취소 및 요오드를 포함한다.

표현 "(C₁-C₆)알킬"은 선 또는 가지의 알킬군으로, 여기서, 구성된 탄소원자수는 1 내지 6의 범위이다. 알킬군의 예로는 메틸, 에틸, n-푸로필, 이소푸로필, t-부틸, n-펜틸 및 n-헥실이다.

용어 "(C₁-C₆)알콕시"는 알킬-옥시(예를 들면, 알콕시) 군으로, 위에서 정의한 바와 같은 알킬 부위를 갖는다. 상술한 군의 예에는 메톡시, 에톡시, n-푸로폭시, 이소푸로폭시, n-부톡시, 이소부톡시, 2급-부톡시, 3급-부톡시, 펜톡시, 헥소시 등이다.

표현 "(C₁-C₆)할로알킬"은 하나 또는 그 이상의 수소원자가 서로 같거나 다른 할로겐 원자로 대체된 (C₁-C₆)알킬이다. 전술한 (C₁-C₆)할로알킬의 예로는, 할로겐화된, 폴리-할로겐화된 및 모두 할로겐화된 알킬 군으로, 여기서 수소원자 모두 할로겐 원자로 대체된 것으로, 예를 들면 트리플루오로메틸 군이다.

표현 "아릴"은 단일, 이- 또는 삼-환고리계 화합물로 5-20 개의 고리원자를 갖으며, 바람직하게는 5~15의 고리원자를 갖으며, 적어도 고리 하나는 방향족이다.

적당한 아릴 단일환 화합물의 예에는 벤젠 등이 포함된다.

적당한 아릴 이환 화합물의 예에는 비페닐 등이 포함된다.

적당한 아릴 삼환 화합물의 예에는 플루오렌라디칼 등이 포함된다.

표현 "헤테로아릴"은 단일, 이- 또는 삼환고리계 화합물로 5-20 개의 고리원자를, 바람직하게는 5-15개의 고리원자를 갖으며, 적어도 하나의 고리는 방향족이고 적어도 하나의 고리원자는 헤테로원자 또는 N, NH, S 및 O에서 선택된 헤테로원자 군이다.

헤테로아릴 단일환 화합물의 예로는 티오펜, 피롤, 피라졸, 이미다졸, 이속사졸, 옥사졸, 이소티아졸, 티아졸, 피리딘, 이미다졸리딘, 피리미딘, 푸란 등이 포함된다.

헤테로아릴 이환 화합물의 예로는 나프탈렌, 푸린, 프테리딘, 벤조티리아졸, 벤조이미다졸, 퀴놀린, 이소퀴놀린, 인돌, 이소인돌, 벤조푸란, 벤조디옥산, 벤조티오펜 등이 포함된다.

선택적으로, 전술한 고리 중에는 아릴, 헤테로아릴이 포함되며, 하나 또는 그 이상의 수소원자가 할로겐 원자, -OH, -CN, (C₁-C₆)알킬, (C₁-C₆)할로알킬, (C₁-C₆)알콕시 및 옥소에서 선택된 군으로 대체될 수 있다.

구조식 (I) 화합물은 4a, 4b, 5, 6a, 6b, 9a, 10a, 10b 및 12 위치에서 비대칭 센터를 포함한다: 따라서 본 발명은 모든 가능한 그들의 입체이성체 및 그들의 혼합물을 포함한다.

바람직하게는, 입체적 센터의 배위가 정해지며; 4a위치에서의 탄소원자의 배위는 S이고, 4b위치에는 R이며, 5위치에는 S이고, 6a위치에는 S이며, 6b위치에는 S이고, 9a위치에는 R이며, 10a위치에는 S이고, 10b위치에는 S이며 그리고 12위치에서는 S로 고정되며, 하기 구조식 (I')로 나타낸다.

일반구조식 (I) 및 (I') 화합물은 무기 또는 유기산과 함께, 또는 알카리토류금속염과 같은 염기와 함께 산부가 염을 형성할 수 있다.

적당한 무기산에는 불산, 염산, 취산, 또는 요오드산과 같은 수소할로겐산, 질산, 황산, 인산이 포함되고; 적당한 유기산에는 개미산, 아세트산, 트리플루오로아세트산, 프로피온산과 같은 지방족 단일 카르복실산류; 유산, 구연산, 주석산 또는 말산과 같은 지방족 히드록시 산류; 말린산 또는 숙신산 같은 디카르복실산류; 벤조인산과 같은 방향족 카르복실산류; 방향족 히드록시산 및 설폰산류를 포함한다.

일반구조식 (I') 화합물의 바람직한 군의 화합물은, R₁이 (CH₂)_n-V-(CN₂)_n'-R₄이고, 여기서 n과 n'는 독립적으로 0 또는 1이며; V는 부재 또는 -O-, -S- 및 -OC(O)- 중에서 선택되고; R₄는 -H, -OH, -CN, 할로겐 및 (C₁-C₆)알킬로 이루어진 군에서 선택되며, 여기서 알킬군의 하나 또는 그 이상의 수소원자가 옥소, -CN, -SH 또는 할로겐에서 선택된 하나 또는 그 이상의 군으로 선택적으로 치환된 화합물이다.

일반구조식 (I') 화합물의 또다른 바람직한 군의 화합물은 R₁이 (CH₂)_n-V-(CN₂)_n'-R₄이고, 여기서 n이 0 또는 1이고, n'는 0이며; V는 -O-이고; R₄는 -H인 화합물이다.

일반구조식 (I') 화합물의 또다른 바람직한 군의 화합물은 R₁이 (CH₂)_n-V-(CN₂)_n'-R₄이고, 여기서 n이 0이고, V는 -S- 또는 -O-이며, n'는 1이고 R₄는 불소 또는 -CN인 화합물이다.

일반구조식 (I') 화합물의 또다른 바람직한 군의 화합물은, R₁이 (CH₂)_n-V-(CN₂)_n'-R₄로, 여기서 n은 1이고, V는 부재이며, n'는 0이고 R₄는 불소인 화합물이다.

일반구조식 (I') 화합물의 또다른 바람직한 군의 화합물은, R₁이 (CH₂)_n-V-(CH₂)_n'-R₄로, 여기서 n은 1이고, V는 -OC(O)이며, n'는 1이고 R₄는 -H인 화합물이다.

일반구조식 (I') 화합물의 더욱 바람직한 군의 화합물은, R₂가 (CH₂)_m-R₆로, 여기서 m = 0 또는 1 내지 4이며; R₆는 아릴 및 헤테로아릴로 이루어진 군에서 선택되며, 선택적으로 옥소, -OH, -CN, -C(O)OH, (C₁-C₆)알콕시, (C₁-C₆)알킬, (C₁-C₆)할로알킬 및 할로겐에서 선택된 하나 또는 그 이상 군으로 치환된 화합물이다.

일반구조식 (I') 화합물의 더욱더 바람직한 화합물은, R₂가 (CH₂)_m-R₆이고, 여기서 m = 0이고, R₆는 페닐, 벤조이미다졸릴 및 퀴놀리닐에서 선택되며, 이들은 선택적으로 하나 또는 그 이상의 염소원자로 치환된 화합물이다.

일반구조식 (I') 화합물의 더더욱 바람직한 군의 화합물은, R₂가 (CH₂)_m-R₆이고, 여기서 m = 1이고, R₆는 페닐, 퀴놀리닐 및 벤조티오페닐에서 선택되며, 선택적으로 하나 또는 그 이상의 염소원자 또는 메틸 군으로 치환된 화합물이다.

일반구조식 (I') 화합물의 더더욱 바람직한 군의 화합물은, R₂가 (CH₂)_m-R₆이고, 여기서 m = 3이고, R₆는 페닐인 화합물이다.

언제든지 가능하며, 화합물 중 모든 바람직한 화합물 군은 서로 조합, 병용될 수 있다.

본 발명은 또한 구조식 (I) 또는 (I') 화합물과 β2-작용제, 항무스카린제, PDE4 억제제, P38 MAP 키나제 억제제, IKK2 억제제에서 선택된 하나 또는 그 이상의 활성 성분으로 이루어진 조합물을 제공한다.

본 발명은 또한 구조식 (I) 또는 (I') 화합물과 카모테론, GSK-642444, 인다카테롤, 밀베테롤, 알포모테롤, 포모테롤, 살부타몰, 레브알부테롤, 터부탈린, AZD-3199, BI-1744-CL, LAS-100977, 밤부테롤, 이소프로테레놀, 프로카테롤, 클렌부테롤, 레프로테롤, 페노테롤 및 ASF-1020군에서 선택된 β2-작용제와의 조합물을 제공한다.

본 발명은 또한 구조식 (I) 또는 (I') 화합물과 아클리디니움, 티오트로피움, 이프라트로피움, 트로스피움, 글리코피로니움 및 옥시트로피움에서 선택된 항무스카린제와의 조합물을 제공한다.

본 발명은 또한 구조식 (I) 또는 (I') 화합물과 실로미라스트, 로프루미라스트, BAY19-8004, SCH-351591에서 선택된 PDE4 억제제와의 조합물을 제공한다.

바람직한 태양에서, 본 발명은 구조식 (I) 또는 (I') 화합물과 IKK2 억제제와의 조합물을 제공한다.

본 발명은 또한 약제로 사용하는 구조식 (I) 또는 (I') 화합물과 함께, 단독 또는 하나 또는 그 이상의 유효성분과의 조합하는 구조식 (I) 또는 (I') 화합물의 용도, 천식 및 COPD와 같은 기도폐쇄로 나타나는 특히, 호흡기관질환과 연관되는 염증세포 수, 효능 및 이동을 감소시키는 질환의 예방 또는 치료용 약제의 제조는 위한 용도를 제공하기 위함이다.

본 발명은 연관된 염증세포의 수, 활성 및 이동을 감소와 관련된 질환의 예방 및/또는 치료 방법을 제공하고자 하는 것이며, 일반구조식 (I) 또는 (I') 화합물 단독 또는 하나 또는 그 이상의 활성 화합물과의 화합물의 치료학적으로 유효량을 치료에 필요한 환자에게 투여하는 것으로 이루어진 방법이다.

질환의 예로는 천식과 COPD와 같은 기도폐쇄시 나타나는 호흡기관의 질환이 포함된다.

본 발명의 약제학적 제제는 흡입으로, 주사로, 경구 또는 비강으로 투여가 적당하다.

흡입제는 흡입분말, 추진체-포함 측정용 에어로졸 또는 추진체 없는 흡입용 제형이 포함된다.

본 발명은 또한 구조식 (I) 또는 (I') 화합물을 포함하는 단일- 또는 다용량 건조분말 흡입기, 측정용량 흡입기 또는 연무분무기 장치에 관한 것이다.

본 발명은 또한 구조식 (I) 또는 (I') 화합물과 단독 또는 조합 또는 혼합물로, 1종 또는 그 이상의 약제학적으로 허용가능한 담체 및/또는 부형제와의 약제 조성물과, 단일- 또는 다용량 건조분말흡입기, 측정용량흡입기 또는 연무분무기 장치로 이루어진 키트에 관한 것이다.

유리하게는 구조식 (I) 또는 (I') 화합물은 하루 0.001 내지 1000 mg/일, 바람직하게는 0.1 내지 500 mg/일로 이루어진 용량으로 투여하는 것이다.

흡입경로로 투여될 때에는, 용량이 0.01 내지 20 mg/일, 바람직하게는 0.1 내지 10 mg/일로 구성되는 것이 유리하다.

구조식 (I) 또는 (I') 화합물, 단독 또는 다른 활성성분과의 조합물은, 천식, 만성기관지염 및 만성폐쇄폐질환(COPD)과 같은 폐쇄성 호흡기 질환의 예방 및/또는 치료에 투여된다.

구조식 (I) 또는 (I') 화합물은 염증세포의 수, 활성 및 이동을 감소와 연관된 질환의 예방 및/또는 치료에 투여된다.

이와 같은 질환의 예로는 천식과 알러지성 장애, COPD, 급성비염과 같은 염증을 포함한 질환; 가역급성이식거부 및 선택된 자가면역 장애의 급성악화, 골수이식시 대숙주성 이식편병(graft-versus-host disease); 류마치스 및 다른 관절염과 같은 자가면역 장애; 조직의 홍반성 낭창, 조직의 피부근염, 건선과 같은 피부질환; 염증성 장질환, 염증성 안질환, 자가면역 혈액장애 및 다발성 경화급성악화; 신장, 간, 심장, 및 다른 장기 이식, 베체트 급성 눈증상, 내인성 포도막염, 아토피성 피부염, 및 신경성 증상; 호지킨씨 질환 및 비-호지킨씨 림프종, 다발성 골수종 및 만성 림프성 백혈병(CLL); 자가면역 용혈성 빈혈 및 CLL과 연관된 혈소판 감소증; 백혈병 및 악성 림프종 등이 속한다.

바람직하기로는 구조식 (I) 또는 (I') 화합물을 온화한 또는 급성의 심각한 천식 및 COPD 증상과 같은 호흡기계 질환의 예방 및/또는 치료에 사용한다.

본 발명의 바람직한 화합물은 하기와 같다:

구조식 (I') 화합물은 치환체 R₁과 R₂의 원료물질에 의존하여, 스킴에 기재된 별개의 방법에 따라 제조될 수 있다.

R₁이 (CH₂)_n-V-(CH₂)_n'-R₄이고, n=1, n'=0, V는 -O-이며, R₄는 H인 구조식 (I') 화합물은 경로 A에 따라 4단계 공정으로 제조될 수 있으며, 구조식 (III) 화합물과 N-벤질-N-(트리메틸실릴메틸)아미노메틸에텔(화합물 (IV), 아조메틴 이라이드 전구체로, 여기서 m=1이고 R₆=페닐)을 불포화 화합물인 1,3-양극 환부가제(1,3-DC)와 아조메틴 이라이드 조건하 반응을 개시하여 얻는다. 이라이드는 적당한 전구체, 예를 들면 화합물 (IV)부터 그대로 얻는다. 반응은 아조메틴 이라이드 전구체를 1 내지 7 당량 사용하고, THF, 디옥산, 톨루엔 또는 키실렌 같은 고비점 용매 중에서 통상 수행된다. 반응은 통상 1-5 시간에 걸쳐 50~150 ℃ 온도범위내에서 진행되며, 트리플루오아세트산, 트리메틸실릴 요다이드 또는 트리메틸실릴 트리플루오로메탄 설포네이트와 같은 산에 의하여 촉진된다. 소디움, 포타슘 또는 세슘 플루오라이드는 반응을 촉진시키는데 역시 효과적일 수 있다. 아조메틴 이라이드 전구체 (IV)는 상업적으로 유용하며, 또는 문헌에 기재된 바와 같이 수행하여 제조될 수 있는데, 예를 들면 J. Chem.- Soc., Perkin trans. 1, 1998, p 3867-3872에 기재된 방법을 따를 수 있다. 일반구조식 (III) 화합물은 문헌에 보고된 표준방법에 따라 편리하게 제조될 수 있다. 예를 들면 그들은 일반구조식 (II) 화합물을 포타슘 아세테이트와 같은 염기로 반응시켜 제조될 수 있다. 이 반응은 통상 적당한 극성 용매(예를 들면, 디메틸포름아미드 (DMF)) 중에서 실행되며, 0.5~4 시간에 걸쳐 80~110 ℃의 온도범위에서 전형적으로 진행된다. 구조식 (II) 화합물은 상업적으로 유용하며 또는 공지의 방법 (J. Med. Chem. 1982, 25, 1492-1495)으로 공지된 화합물에서 즉시 제조될 수 있다. 벤질 그룹은 아실클로라이드, 포스겐 동족체 또는 바람직하게는 비닐클로로포메이트와 같은 클로로포메이트로 3급 아민을 화학적 탈알킬화시켜 제거될 수 있다. 반응은 통상 디클로로메탄(DCM), 테트라히드로푸란(THF) 또는 아세토니트릴 같은 적당한 용매 중에서, 실온(RT) 내지 60 ℃ 온도범위에서 실행된다. 반응은 알카리카보네이트 또는 바이카보네이트와 같은 염기 또는 피리딘과 같은 유기염기 존재가 필요하고, 통상적으로 0.5 내지 2 시간에 걸쳐 수행된다. 반응 첫 단계에서 얻어진 카바메이트는 공지된 조건하 탈보호시켜(Wiley-VCH; Wuts Peter G. M./Greene, Theodora W. Greene's Protective Groups in Organic Synthesis p 503 등) 화합물 (VI)을 얻는다. 화합물 (VI)은 일반구조식 (I') 화합물을 얻기 위하여 추가적으로 쉽게 반응시킬 수 있다.

실제, 아릴 또는 헤테로아릴 그룹은 피롤리딘의 N-아릴화 반응에 따라 화합물 (VI)의 피롤리딘 고리의 질소원자에 도입될 수 있다. 구조식 (VI) 화합물은 금속촉매 아릴화 조건하 아릴보론산(aryl boronic acids)와 반응시킬 수 있다. 반응은 동(I 또는 II)염 니켈(II), 포스핀 착염, 팔라듐 착염으로 촉진될 수 있으며, 가끔 소디움 또는 포타슘 터부틸레이트 또는 트리에틸아민(TEA)과 같은 염기가 필요하다. 본 반응은 DMF, 디메틸아세트아미드(DMA), 아세토니트릴, 디옥산, THF, 톨루엔, 디클로로메탄(DCM), N-메틸피롤리돈(NMP)과 같은 용매 중에서, 20~200 ℃ 온도범위에서, 통상적인 열 가열 방법 또는 마이크로웨이브로 가열하면서 수행한다. 몇몇 경우에 있어서는, 반응은 20~150 ℃로 가열시키는데, 화합물 (VI)과, 할라이드 또는 트리플루오로메탄 설포네이트(트리플레이트)와 같은 적당한 아릴 또는 헤테로아릴 유도체의 용액을, 에탄올, 아세토니트릴, DMF, DMA, 디옥산 또는 NMP와 같은 용매 중에서, 0.5~24 시간 동안 반응시킨다.

변형적으로, 이들 화합물은 화합물 (VI)과 벤젠을 반응시켜 제조할 수 있다. 반응성이 좋은 화합물들은 문헌에 알려진 다음과 같은 방법에 따라 적당한 전구체에서 그대로 제조될 수 있다. 유용한 방법에는, 2-트리메틸실릴-페닐 트리플루오로메탄 설포네이트를 세슘 플루오라이드로 처리하는 방법이 포함된다. 반응은 실온에서 아세토니트릴과 같은 극성용매 중에서 수행하며, 시간은 1 내지 72 시간 걸친다. 벤젤고리에 있는 벤진전구체 치환 화합물의 경우에는, 반응은 두개의 레지오이성체(regioisomer) 혼합물을 얻는다.

화합물 (VI)의 알킬화는 피롤리딘의 알킬화를 위한 조건을 적용하여 실행할 수 있다. 이 반응은 아민 알킬화를 위해 적당한 알킬 할라이드, 메탄 설포네이트, 토실레이트 또는 다른 알킬유도체의 사용을 포함하며, 완전한 반응을 위해 TEA, DIPEA 또는 피리딘과 같은 염기 존재가 필요하다. 이 반응은 실온에서 100 ℃까지의 온도에서 1 내지 48 시간에 거쳐 DCM, THF, 아세토니트릴 또는 DMF 같은 적당한 용매 중에서 진행한다. 소디움 또는 포타슘 요다이드의 존재는 몇몇 케이스에서 반응율을 높일 수 있다. 유도체 중 몇몇 화합물 유도체는 환원성 아민화 반응조건하 화합물 (VI)과 적당한 알데히드를 아세토니트릴과 용매 중에서 반응시켜 얻을 수 있다.

이미 유도체는 통상 그대로 개미산 및 그의 염과 같은 환원제로 70~150 ℃ 온도범위에서 10-30 분에 걸쳐 환원시킨다.

모든 경우에서 스테로이드 골격의 6b 사이드체인 부위에 있는 아세톡시 부분을 특정적으로 갖는 제품을 얻었다. 이 반응성 모이어티는 물 중에 용해되거나 고체의 LiOH, NaOH, KOH 또는 K₂CO₃와 같은 염기로 처리하여, 메탄올, 에탄올 또는 THF와 같은 유기용매 중에서 또는 변형적으로 THF 또는 디옥산과 같은 적당한 유기용매 중에서 40-80 ℃에서 1 내지 8 시간에 걸쳐 산 수용성 용액(예를 들면 염산)으로 처리하여, 쉽게 가수분해 시킬 수 있다.

경로 B - 일반구조식 (I') 화합물(여기서, R₁은 (CH₂)_n-V-(CH₂)_n'-R₄이고, n=n'=1, V는 -OC(O)-이며, R₄는 -H인 화합물)을, 잘 알려진 산화조건하 반응시켜 일반구조식 (I') 화합물(여기서, R₁은 (CH₂)_n-V-(CH₂)_n'-R₄이고, n=n'=0, V는 -O-이며, R₄는 -H인 화합물)을 얻는다. 이 반응은 통상적으로 실온에서 12-48 시간에 걸쳐, THF 또는 디옥산과 같은 적당한 용매 중에서, 예를 들면 소디움 또는 포타슘 히드록시드와 같은 무기염기의 수용성 용액 존재하에서 수행한다.

경로 B1 - 일반구조식 (I')의 산(여기서, R₁은 (CH₂)_n-V-(CH₂)_n'-R₄이고, n=n'=0, V는 -O-이며, R₄는 -H인 화합물)을, 일반구조식 (I') 화합물(여기서, R₁은 (CH₂)_n-V-(CH₂)_n'-R₄이고, 여기서 n=0 및 n'=1이며, V는 -O-이고, R₄는 불소 또는 CN인 화합물)로 전환시키고, 일반구조식 (I')의 산(여기서, R₁은 (CH₂)_n-V-(CH₂)_n'-R₄이고, n=n'=0, V는 -O-이며, R₄는 -H인 화합물)을, 브로모플루오로메탄 또는 브로모아세토니트릴과 같은 알킬화제로, DMF와 같은 적당한 용매 중에서 실온에서, 소디움 카보네이트와 같은 무기염기 존재하 1-48 시간 동안 걸쳐 처리하여 얻을 수 있다. 이 반응은 유사한 화합물의 합성을 위한 문헌에 기재된 바와 같이 실행될 수 있음은 잘 알려져 있다. 잘 알려진 산화조건하 반응시켜 일반구조식 (I') 화합물(여기서, R₁은 (CH₂)_n-V-(CH₂)_n'-R₄이고, n=n'=0, V는 -O-이며, R₄는 -H인 화합물)을 얻는다. 이 반응은 통상적으로 실온에서 12-48 시간에 걸쳐, THF 또는 디옥산과 같은 적당한 용매 중에서, 예를 들면 소디움 또는 포타슘 히드록시드와 같은 무기염기의 수용성 용액 존재하에서 수행한다.

경로 B2 - 일반구조식 (I')의 산(여기서, R₁은 (CH₂)_n-V-(CH₂)_n'-R₄이고, n=n'=0, V는 -O-이며, R₄는 -H인 화합물)을, 일반구조식 (I') 화합물(여기서, R₁은 (CH₂)_n-V-(CH₂)_n'-R₄이고, 여기서 n=0, n'=1이며, V는 -S-이고, R₄는 불소인 화합물)로 전환시키고, 산(I')을 예를 들면 카보닐디이미다졸 또는 N-[(디메틸아미노)-1H-1,2,3-트리아졸로[4,5-b]피리딘-1-일메틸렌]-N-메틸메탄아미늄 헥사플루오로포스페이트 N-옥사이드(HATU)로 반응시킨 다음, 티오아세트산의 소디움 염 또는 소디움 하이드로겐 설파이드로 반응시킨다. 반응은 통상 활성화된 산의 용액에 반응성 용매 중에서 0~20 ℃ 온도범위에서 얻어진 염의 용액을 첨가하여 실행한다. 미리 제조된 구조식 (VII)의 티오산 화합물을 브로모플루오로메탄과 같은 알킬화제로 반응시키고 그대로 일반구조식 (I')의 티오에스텔을 얻었다.

경로 C - 본 발명의 바람직한 태양으로, 일반구조식 (I') 화합물(여기서, R₁은 (CH₂)_n-V-(CH₂)_n'-R₄이고, n=0, V는 부재이며, n'=1, R₄는 할라이드인 화합물)은, 다섯 단계를 걸쳐 제조될 수 있으며, 화합물 (VIII)의 6b 위치에 있는 2-히드록시 아세틸 반응물의 히드록실 그룹을 메탄설포닐 클로라이드 또는 p-톨루엔설포닐 클로라이드를 사용하여, 예를 들면 아세토니트릴의 적당한 용매 중에서 DIPEA와 같은 유기염기 존재하 이탈기(LG)로 먼저 전환시킨다(March's, "Advanced Organic Chemistry", Wiley-Interscience).

반응은 통상 실온에서 1-24 시간 동안에 걸쳐 수행하고 얻어진 활성 중간체 화합물은 할라이드 염과 같은 핵 친화성 약물을 사용하여 이탈기(LG)를 대체시켜 일반구조식 (IX) 화합물을 얻는다.

이 대체반응은 통상 예를 들면 TBAF 및/또는 포타슘 플루오리드의 부가한 상태에서 수행되며, 반응 혼합물을 24-48시간에 걸쳐 환류시킨다. 구조식 (VIII)의 화합물은 구조식 (III) 화합물을 예를 들면 Candida Antarctica (Sigma Aldrich) 고정화된 리파제와 같은 효소작용으로 반응시키는 것이다 (Tetrahedron 1994, Vol. 50, N°46, 13165-13172).

3단계는 일반구조식 (IXI 화합물을 위에서 열거된 바 있는 화합물 (IV)로 1-3 양극 환부가 반응시켜 일반구조식 (X) 화합물을 얻는다. 특히, 구조식 (IX) 화합물을 N-벤질-N-(트리메틸실릴메틸)아미노메틸 에텔 (즉, 아조메틴 일리드 전구체, 여기서 m=1이고 R₆=페닐이다)과, 불포화 화합물과 아조메틴 일리드의 1,3-양극 환부가 (1,3-DC) 조건하 반응시킬 수 있다. 일리드(ylide)는 적당한 전구체 즉 화합물 (IV)에서 그대로 만들어진다.

본 반응은 아조메틴 일리드 전구체를 1 내지 7 당량 사용을 포함하고, 일반적으로 디옥산 같은 고비점 용매 중에서 수행된다. 반응은 통상 50~150 ℃의 온도범위에서 1-5 시간 수행되며 트리플루오로아세트산과 같은 산에 의하여 촉진된다.

4단계는 3급 아민을 위에서 언급된 (경로 A) 비닐클로로포메이트와 같은 클로로포메이트로 탈알킬화시켜 중간체 (X)의 벤질 그룹을 제거하여 구조식 (XI) 화합물을 얻는 것이다. 이 반응은 통상 디클로로메탄 (DCM), 테트라히드로푸란(THF) 또는 아세토니트릴 같은 적당한 용매 중에서 실온 내지 60 ℃ 온도범위에서 수행된다. 이 반응을 알카리 카보네이트 또는 바이카보네이트와 같은 염기 또는 피리딘 같은 유기염기가 필요하며, 통산 0.5 내지 2 시간에 걸쳐 반응이 완료된다. 반응 1단계에서 얻어진 카바메이트는 알려진 조건하 (Wiley-VCH; Wuts, Peter G. M./Greene, Theodora W. Greene's Protective Groups in Organic Synthesis p 503 등) 탈보호시켜 중간체 화합물 (XI)을 얻는다.

마지막 단계는 화합물 (VI)을 전에 기재된 바와 같이 아릴화, 알킬화 또는 환원성 아민화 반응으로 중간체 (XI) 화합물을 반응시켜 일반구조식 (I') 화합물을 얻는다. 특히 아릴 또는 헤테로아릴 그룹을 다음과 같은 피롤리딘의 N-아릴화 반응을 위한 공정으로 화합물 (XI)의 피롤리딘 고리의 질소원자에 도입시킬 수 있다. 일반구조식 (XI) 화합물은 금속촉매 아릴화 조건하 아릴 보론산과 반응시킬 수 있다. 이 반응은 동(I 또는 II)염, 니켈(II) 포스핀 착염 및 팔라듐 착염으로 촉진되고, 가끔 소디움 또는 포타슘 터부틸레이트 또는 트리에틸아민(TEA)과 같은 염기가 필요하다. 이 반응은 DMF, 디메틸아세트아미드(DMA), 아세토니트릴, 디옥산, THF, 톨루엔, 디클로로메탄(DCM), N-메틸피롤리돈(NMP)과 같은 용매 중에서 20~200 ℃의 온도범위에서 통상적인 열 가열 또는 마이크로웨이브 가열에 의하여 수행된다. 몇몇에서 반응은 20~150 ℃로 단순가열시켜 일어나며, 구조식 (XI) 화합물과 할라이드 또는 트리플루오로메탄 설포네이트(트리플레이트)와 같은, 적당한 아릴 또는 헤테로아릴 유도체의 용액을 에탄올, THF, 아세토니트릴, DMF, DMA, 디옥산 또는 NMP와 같은 용매 중에서, 0.5 내지 24 시간 동안 수행한다. 변형적으로, 이 화합물은 화합물 (XI)과 벤젠을 반응시켜 제조된다. 이 아주 활성인 화합물은 2-트리메틸실릴-페닐트리플루오로메탄 설포네이트를 세슘 플루오라이드로 처리하여 그대로 제조한다. 본 반응은 아세토니트릴 같은 극성용매 중에서 실온에서 수행하고, 반응은 1 내지 72 시간에 걸쳐 완료된다. 벤젠고리에 연결된 벤젠 전구체 특정 치환체의 경우에서 반응은 두개의 레지오이성체 혼합물을 얻을 수 있다.

화합물 (XI)의 알킬화 반응은 피롤리딘 알킬화의 반응조건으로 적용하여 수행될 수 있다. 본 반응에는 알킬아민화에 적당한 알킬 할라이드, 메탄 설포네이트, 토실레이트 또는 알킬 유도체의 사용을 포함하고, 반응종료를 위하여 TEA, DIPEA 또는 피리딘과 같은 염기 존재가 필요하다. 반응은 실온내지 100 ℃의 온도에서 1-48 시간에 걸쳐 DCM, THF, 아세토니트릴 또는 DMT와 같은 적당한 용매 중에서 진행한다. 소디움 또는 포타슘 요다이드의 존재는 몇몇 예에서 반응율을 촉진시켰다. 유도체 다른 화합물은 구조식 (XI) 화합물을 환원성 아민화 반응 조건하 적당한 알데히드로 아세토니트릴 같은 용매 중에서 반응시켜 얻을 수 있다. 아민 중간체는 통상적으로 개미산과 그의 염과 같은 환원제로 70 내지 150 ℃의 온도범위에서 그대로 10-30 분간 처리하여 환원시킨다.

본 발명은 다음과 같은 실시예로 지금 추가로 기재될 것이다.

실시예 1

아세트산 2-((6S,8S,9R,10S,11S,13S,14S)-6,9- 디플루오로 -11-히드록시-10,13-디메틸-3-옥소-6,7,8,9,10,11,12,13,14,15- 데카히드로 -3H- 시클로펜타[a]페난트렌 -17-일)-2-옥소-에틸 에스텔 (중간체 2)의 제조.

무수 DMF (60 ml) 중에 용해시킨 부티르산 (6S,8S,9R,10S,11S,13S,14S,17R)-17-(2-아세톡시아세틸)-6,9-디플루오로-11-히드록시-10,13-디메틸-3-옥소-7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-도데카히드로-3H-시클로펜타[a]페난트렌-17-일 에스터 (중간체 I 화합물) (2.48 g, 4.88 mmol) 용액에 질소기류하, 포타슘 아세테이트 (3.83 g, 39.0 mmol)를 첨가시키고 반응혼합물을 100 ℃에서 1.5 시간 동안 저어주었다. 반응혼합물을 실온으로 냉각시키고 얼음과 소금물 (200 ml)에 넣고, 수용성층을 AcOEt (에틸아세테이트) (3 x 150 ml)로 추출하였다. 모은 유기 추출물을 물과 소금물로 세척한 다음, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고 농축시켜 원료 제목의 혼합물 2.55 g을 얻고, 추가 정제없이 다음 단계에 이용되었다.

LC-MS (ESI POS): 421.2 (MH+)

(6S,8S,9R,10S,11S,13S,14S)-6,9- 디플루오로 -11-히드록시-17-(2-히드록시-아세틸)-10,13-디메틸-6,7,8,9,10,11,12,13,14,15- 데카히드로 시클로펜타[a]페난트렌 -3-온 (중간체 3)의 제조.

에탄올 (100 ml)에 용해시킨 중간체 화합물 2 (2.55 g, 6.06 mmol) 용액에 캔디다 안탁티카 리파제 (2 U/mg) (510 mg, 6.06 mmol)를 첨가시키고, 반응혼합물을 37 ℃에서 밤새 저어주었다. 반응혼합물을 여과하고, 메탄올로 세척한 다음, 잔사를 실리카겔 상에서 DCM/AcOEt 90 : 10에서 DCM/AcOEt 50 : 50까지 구배용리하여 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 표제화합물을 얻었다 (1.62 g, 70.6 % 수율).

LC-MS (ESI POS): 379.2 (MH+)

실시예 2

아세트산 2-((4 aS ,4 bR ,5S,6 aS ,6 bS ,9 aR ,10 aS ,10 bS ,12S)-8-벤질-4b,12- 디플루오로 -5-히드록시-4a,6a-디메틸-2-옥소-2,4b,5,6,6a,7,8,9,9a,10,10a,10b,11,12- 테트라데카히드로 -4 aH -8- 아자 - 펜타레노[2,1-a]페난트렌 -6b-일)-2-옥소-에틸 에스텔 (중간체 4)의 제조.

질소기류하, 디옥산 중에 용해시킨 중간체 화합물 2 (3.63 g, 8.63 mmol)과 N-벤질-N-(트리메틸실릴메틸)아미노메틸 (10.25 g, 43.2 mmol)의 혼합물을 예열된 욕조 중 100 ℃에서 2 시간 동안 질소기류하 저어주었다. 용매를 증발시키고 잔사를 석유에텔과 함께 수회 분말로 하여 연황색 고체를 얻었다. 이 고체를 실리카겔 크로마트그래피 (AcOEt/석유에텔 1 : 1)로 정제하여 표제 중간체 화합물을 얻었다 (4.47 g, 수율 94 %).

LC-MS (ESI POS): 554.2 (MH+)

실시예 3

(4 aS ,4 bR ,5S,6 aS ,6 bS ,9 aR ,10 aS ,10 bS ,12S)-6b-(2- 아세톡시 -아세틸)-4b,12- 디플루오로 -5-히드록시-4a,6a-디메틸-2-옥소-2,4b,5,6,6a,6b,7,9,9a,10,10a,10b,11,12-테트라데카히드로-4 aH -8- 아자 - 펜타레노[2,1-a]페난트렌 -8- 카복실산 비닐 에스텔 (중간체 화합물 5)의 제조.

중간체 4 화합물 (1.95 g, 3.52 mmol)과 NaHCO₃ (0.592 g, 7.04 mmol)을 아세토니트릴 (30 ml) 중에 용해시키고 다음 비닐 클로로포메이트 (0.599 ml, 7.04 mmol)를 첨가하였다. 반응혼합물을 50 ℃에서 2 시간 동안 가열한다. 용액을 AcOEt와 소금물 사이에서 분획하였다. 유기상을 분리하고 수용성 용액을 AcOEt로 추출하였다. 유기상을 모으고 Na₂SO₄ 상에서 건조시킨 다음, 증발시켜 잔사를 얻고, 실리카겔 컬럼 크로마토그래피하여 정제하고, 석유에텔/AcOEt 6 : 4 내지 4 : 6으로 용리시켜, 표제중간체 화합물을 순수하게 얻었다 (1.1 g, 수율 58.5 %).

LC-MS (ESI POS) : 534.1 (MH+)

아세트산 2-((4 aS ,4 bR ,5S,6 aS ,6 bS ,9 aR ,10 aS ,10 bS ,12S)-4b,12- 디플루오로 -5-히드록시-4a,6a-디메틸-2-옥소-2,4b,5,6,6a,7,8,9,9a,10,10a,10b,11,12- 테트라데카히드로 -4 aH -8- 아자 - 펜타레노[2,1-a]페난트렌 -6b-일)-2-옥소-에틸 에스텔 히드로클로라이드 (중간체 6)의 제조.

중간체 5 화합물 (1.0 g, 1.874 mmol)을 디옥산 (3 ml) 중에 용해시키고, 디옥산 (5 ml, 1.874 mmol) 중에 용해시킨 염산 4.0 M을 첨가하였다. 용액을 실온에서 2 시간 저어준 다음, 용매를 증발시키고 잔사를 진공하 1 시간 건조시켰다. 고체를 메탄올 중에 용해시키고, 40 ℃로 1 시간 가열하였다. 메탄올을 증발시키고, 잔사를 디에칠에텔과 함께 분말화하여 표제 중간체 화합물을 얻었다 (0.93 g, 수율 99 %).

LC-MS (ESI POS): 464.0 (MH+)

실시예 4

아세트산 2-[(4 aS ,4 bR ,5S,6 aS ,6 bS ,9 aR ,10 aS ,10 bS ,12S)-4b,12- 디플루오로 -5-히드록시-4a,6a-디메틸-8-(3- 메틸 -벤질)-2-옥소-2,4b,5,6,6a,7,8,9,9a,10,10a,10b,11,12-테트라데카히드로-4 aH -8- 아자 - 펜타레노[2,1-a]페난트렌 -6b-일)-2-옥소-에틸 에스텔 (중간체 7)의 제조.

질소기류하, 중간체 6 화합물 (200 mg, 0.400 mmol)을 DCM (5 ml) 중에 용해시키고, 트리에틸아민 (166 μL, 1.20 mmol)과 1-(클로로메틸)-3-메틸벤젠 (79 μL, 0.60 mmol)을 첨가하고 혼합물을 40 ℃에서 2 시간, 실온에서 16 시간 가열하였다. 다음 트리에틸아민 (138 μL, 1.00 mmol)과 3-메틸벤질 브로마이드 (54 μL, 0.40 mmol)를 혼합물에 첨가하고 2 시간 동안 계속하여 저어 주었다. 반응혼합물을 물과 DCM 사이에서 분획하고 수용성층을 DCM (3 x 15 ml)으로 추출하고, 유기상을 모으고 농축시켰다. 조원료를 실리카겔 플래쉬 크로마트그래피 (용리제 DCM/MeOH 99 : 1)로 정제하여 표제화합물을 얻었다 (130 mg, 수율 57.2 %).

LC-MS (ESI POS): 568.3 MH+

표 1 중 화합물 8은 중간체 6을 상업적으로 유용한 4-메틸벤질브로마이드로 반응시켜 화합물 7을 제조한 실시예 4에 기재된 바와 같이 제조되었다.

표 1

실시예 5

(4 aS ,4 bR ,5S,6 aS ,6 bS ,9 aR ,10 aS ,10 bS ,12S)-4b,12- 디플루오로 -5-히드록시-6b-(2-히드록시-아세틸)-4a,6a-디메틸-8-(3- 메틸 -벤질)-4b,5,6,6a,6b,7,8,9,9a,10,10a,10b,11,12-테트라데카히드로-4 aH -8- 아자 - 펜타레노[2,1-a]페난트렌 -2-온 (화합물 9)의 제조.

화합물 7 (130 mg, 0.229 mmol)을 MeOH (8 ml)에 용해시키고, 혼합물을 질소로 15 분간 탈가스시켰다. 0 ℃로 냉각 후, K₂CO₃ (15.8 mg, 0.115 mmol)를 첨가하고 혼합물을 1 시간 동안 저어주었다. 반응혼합물을 5 % NaHCO₃ 용액과 AcOEt 사이에서 분획하였다. 유기층을 분리하고 Na₂SO₄ 상에서 건조시킨 다음 농축시켰다. 조원료를 실리카겔 플래쉬 크로마트그래피로 정제하여 (용리제 DCM/MeOH 99 : 1 내지 98 : 2) 표제화합물을 얻었다 (91 mg, 수율 76 %).

LC-MS (ESI POS): 526.30 MH+

+ 81.0 (c 0.33, MeOH)

표 2 중 화합물 10은 화합물 8로 출발하여, 화합물 9를 위한 실시예 5에 기재된 대로 제조하였다.

표 2

실시예 6

아세트산 2-((4 aS ,4 bR ,5S,6 aS ,6 bS ,9 aR ,10 aS ,10 bS ,12S)-4b,12- 디플루오로 -5-히드록시-4a,6a-디메틸-2-옥소-8-퀴놀린-2- 일메틸 -2,4b,5,6,6a,7,8,9,9a,10,10a,10b,11,12-테트라데카히드로-4 aH -8- 아자 - 펜타레노[2,1-a]페난트렌 -6b-일)-2-옥소-에틸 에스텔 (화합물 11)의 제조.

중간체 6 화합물 (200 mg, 0.400 mmol), 퀴놀린-2-카브알데히드 (251 mg, 1.600 mmol), 트리에틸아민 (61 mL, 0.440 mmol) 및 개미산 (263 μL, 3.20 mmol)을 아세토니트릴 (4 ml)에 녹인 용액을 마이크로웨이브 (130 ℃, 20 분간)로 방사선을 쬐었다. 반응혼합물을 AcOEt와 5 % NaHCO₃ 용액 사이에서 분획하였다. 다음 유기층을 소금물로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시킨 다음 여과하였다. 용매를 증발시키고 조원료를 실리카겔 크로마트그래피 (DCM/MeOH 99 : 1)로 정제시켜 화합물 11을 얻었다 (132 mg, 수율 54.6 %).

LC-MS (ESI POS): 605.3 MH+

(4 aS ,4 bR ,5S,6 aS ,6 bS ,9 aR ,10 aS ,10 bS ,12S)-4b,12- 디플루오로 -5-히드록시-6b-(2-히드록시-아세틸)-4a,6a-디메틸-8-퀴놀린-2- 일메틸 -4b,5,6,6a,6b,7,8,9,9a,10,10a,10b,11,12-테트라데카히드로-4 aH -8- 아자 - 펜타레노[2,1-a]페난트렌 -2-온 (화합물 12)의 제조.

표제화합물을 화합물 9의 합성을 위한 실시예 5에 기재된 방법에 따라 화합물 11 (130 mg, 0.215 mmol)로 부터 제조하였다. 화합물 12 (68 mg, 수율 56 %)를 얻었다.

LC-MS (ESI POS): 563.35 MH+

+ 76.1 (c 0.32, MeOH)

표 3에 기재된 화합물을 화합물 11을 위한 실시예 6에 기재된 방법으로 중간체 6 화합물과 적당한 상업적으로 유용한 알데히드로 출발하여 제조하였다.

표 3

표 4에 기재된 화합물 15를 화합물 9의 제조를 위한 실시예 5에 기재된 바와 같은 방법으로 화합물 13으로부터 제조되었다.

표 4

실시예 7

아세트산 2-((4 aS ,4 bR ,5S,6 aS ,6 bS ,9 aR ,10 aS ,10 bS ,12S)-4b,12- 디플루오로 -5-히드록시-4a,6a-디메틸-2-옥소-8-퀴놀린-2-일-2,4b,5,6,6a,7,8,9,9a,10,10a,10b,11,12-테트라데카히드로-4 aH -8- 아자 - 펜타레노[2,1-a]페난트렌 -6b-일)-2-옥소-에틸 에스텔 (화합물 16)의 제조.

중간체 6 화합물 (200 mg, 0.400 mmol)과 2-클로로퀴놀린 (131 mg, 0.800 mmol)을, EtOH (5 ml)를 넣은 마이크로웨이브 용기에 담고, 반응혼합물을 마이크로웨이브로 130 ℃에서 2 시간 가열하였다. 혼합물을 AcOEt과 NaHCO₃ (5 ml 용액) 사이에서 분획하였다. 유기상을 분리하고 Na₂SO₄ 상에서 건조시킨 다음 증발시켜 잔사를 얻고, 이를 실리카겔 카트리지 (DCM/MeOH 99 : 1 ~ 95 : 5)로 정제하여 표제화합물을 얻었다 (171 mg, 수율 72 %).

LC-MS (ESI POS): 591.3 (MH+)

(4 aS ,4 bR ,5S,6 aS ,6 bS ,9 aR ,10 aS ,10 bS ,12S)-4b,12- 디플루오로 -5-히드록시-6b-(2-히드록시-아세틸)-4a,6a-디메틸-8-퀴놀린-2-일-4b,5,6,6a,6b,7,8,9,9a,10,10a,10b,11,12-테트라데카히드로-4 aH -8- 아자 - 펜타레노[2,1-a]페난트렌 -2-온 (화합물 17)의 제조.

메탄올 (4 ml)에 용해시킨 화합물 16 (171 mg, 0.290 mmol) 용액을 실온에서 20 분간 질소가스를 버블시켜 탈가스화 시켰다. 0 ℃로 냉각 후 K₂CO₃ (12 mg, 0.087 mmol)를 첨가시킨 다음, 혼합물을 1 시간 저어주었다. 혼합물을 AcOEt와 소금물 사이에서 분획시켰다. 유기상을 분리하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시킨 다음 농축시켰다. 조원료를 분취 HPLC (CH₃CN/H₂O로 CF₃COOH 없음)로 정제하여 표제화합물을 얻었다 (45 mg, 수율 28 %)

LC-MS (ESI POS): 549.32 (MH+)

+ 37.3 (c 0.45, MeOH)

표 5 중 화합물 18을 중간체 6 화합물과 2-클로로-1H-벤조[d]이미다졸을 출발하여, 화합물 17을 위한 실시예 7에 기재된 2 단계 공정으로 제조하였다.

표 5

실시예 8

아세트산 2-[(4 aS ,4 bR ,5S,6 aS ,6 bS ,9 aR ,10 aS ,10 bS ,12S)-8-(1H- 벤조이미다졸 -2-일)-4b,12- 디플루오로 -5-히드록시-4a,6a-디메틸-2-옥소-2,4b,5,6,6a,7,8,9,9a,10,10a,10b,11,12-테트라데카히드로-4 aH -8- 아자 - 펜타레노[2,1-a]페난트렌 -6b-일]-2-옥소-에틸 에스텔 (중간체 19)의 제조.

디옥산 (45 ml)와 물 (15 ml)에 녹인 화합물 14 (800 mg, 1.375 mmol)과 6N 수용성 NaOH (1031 μl, 6.19 mmol) 용액을 실온에서 18 시간 공기에 노출시키며 저어주었다. 반응혼합물이 pH 4-5가 될 때까지 HCl 6N (1 ml)를 첨가시킨 다음, 유기용매를 증발시키고, 고체를 침전시킨 다음, 여과하여 회수하였다. 모액을 AcOEt로 추출하고, 얻은 유기화합물을 소금물로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고 농축시키고 건조시켜 고체를 얻은 다음, 이전에 얻은 것에 합하였다. 고체를 Et₂O와 분말화하여 표제 중간체 화합물을 얻었다 (667 mg, 수율 92 %).

LC-MS (ESI POS): 526.0 MH+

실시예 9

(4 aS ,4 bR ,5S,6 aS ,6 bS ,9 aR ,10 aS ,10 bS ,12S)-4b,12- 디플루오로 -5-히드록시-4a,6a-디메틸-2-옥소-8-(3- 페닐 -프로필)-2,4b,5,6,6a,7,8,9,9a,10,10a,10b,11,12-테트라데카히드로-4 aH -8- 아자 - 펜타레노[2,1-a]페난트렌 -6b- 카복실산 플루오로메틸 에스텔 (화합물 20)의 제조.

건조 DMF (4 ml)에 용해시킨 중간체 19 (150 mg, 0.285 mmol) 용액에 Na₂CO₃ (60.5 mg, 0.571 mmol)를 첨가하였고 현탁액을 실온에서 15 분간 저어준 다음 반응물을 0 ℃로 냉각시키고 브로모플루오로메탄 (285 μl, 0.571 mmol)을 첨가하였다. 0 ℃에서 밤새 저어준 후, Na₂CO₃ (181 mg, 1.707 mmol) 및 브로모플루오로메탄 (570 μl, 1.140 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 저어주었다. 반응물을 AcOEt로 희석시킨 다음, 소금물에 넣고 수용성층을 AcOEt로 2 회 추출한 다음, 모은 유기추출물을 소금물로 세척하였다. 용매를 제거한 후, 조원료를 실리카겔 크로마토그래피(DCM/AcOEt 85 : 15)로 정제하여 표제화합물을 얻었다 (60 mg, 수율 38 %).

LC-MS (ESI POS): 526.0 MH+

+ 56.52 (c 0.27, MeOH)

실시예 10

(4 aS ,4 bR ,5S,6 aS ,6 bS ,9 aR ,10 aS ,10 bS ,12S)-4b,12- 디플루오로 -5-히드록시-4a,6a-디메틸-8-(5-메틸-푸란-2- 일메틸 )-2-옥소-2,4b,5,6,6a,7,8,9,9a,10,10a,10b,11,12-테트라데카히드로-4 aH -8- 아자 - 펜타레노 [2, 1-a]페난트렌 -6b- 카복실산 시아노메틸 에스텔 (화합물 21)의 제조.

건조 DMF (4 ml)에 용해시킨 중간체 19 (151 mg, 0.287 mmol) 용액에 Na₂CO₃ (54.8 mg, 0.517 mmol)를 첨가하였고 현탁액을 실온에서 20 분간 저어주었다. 0 ℃로 냉각 후 2-브로모아세토니트릴 (0.018 ml, 0.259 mmol)을 첨가하고 혼합물을 3 시간 저어주었다. 그 다음, Na₂CO₃ (24 mg, 0.230 mmol)과 2-브로모아세토니트릴 (8.00 μl, 0.114 mmol)을 첨가한 다음, 혼합물을 48 시간 저어주었다. 반응물을 AcOEt로 희석시키고 소금물에 넣은 다음, 수용성층을 AcOEt로 2 회 추출한 다음, 합한 유기성 추출물을 소금물로 세척하였다. 용매를 제거한 후, 조원료를 실리카겔 크로마토그래피(DCM/AcOEt 3 : 1 내지 1 : 1)로 정제하여 표제화합물을 얻었다 (75 mg, 수율 46 %).

LC-MS (ESI POS): 565.29 MH+

+ 71.3 (c 0.29, MeOH)

실시예 11

아세트산 2-[(4 aS ,4 bR ,5S,6 aS ,6 bS ,9 aR ,10 aS ,10 bS ,12S)-8-(4- 클로로 - 페닐 )-4b,12-디 플 루오로-5-히드록시-4a,6a-디메틸-2-옥소-2,4b,5,6,6a,7,8,9,9a,10,10a,10b,11,12-테트라데카히드로-4 aH -8- 아자 - 펜타레노[2,1-a]페난트렌 -6b-일]-2-옥소-에틸 에스텔 (화합물 22)의 제조.

중간체 6 화합물 (250 mg, 0.500 mmol)과 4-클로로페닐보론산 (235 mg, 1.500 mmol)을, DCM (10 ml) 중에 용해시킨 다음, 트리에틸아민 (0.485 ml, 3.50 mmol) 및 동(II) 아세테이트 (91 mg, 0.500 ml)을 첨가하고, 반응혼합물을 실온에서 15 일간 저어주었다. 얻은 현탁액을 여과하고 용해를 증발시킨다. 조원료를 실리카겔 플래쉬 크로마토그래피 (용리 DCM/MeOH 99 : 1 ~ 98 : 2)로 정제하여 표제화합물을 얻었다 (35 mg, 12 %).

LC-MS (ESI POS): 574.3 MH+

(4 aS ,4 bR ,5S,6 aS ,6 bS ,9 aR ,10 aS ,10 bS ,12S)-8-(4- 클로로 - 페닐 )-4b,12- 디플루오로 -5-히드록시-6b-(2-히드록시-아세틸)-4a,6a-디메틸-4b,5,6,6a,6b,7,8,9,9a,10,10a,10b,11,12-테트라데카히드로-4 aH -8- 아자 - 펜타레노[2,1-a]페난트렌 -2-온 (화합물 23)의 제조.

화합물 22 (33 mg, 0.057 mmol)을 화합물 9 합성을 위한 실시예 5에 기재된 바와 같이 가수분해시켰다. 표제화합물 23 (24 mg, 78 %)을 실리카겔 플래쉬 크로마토그래피 (용리제 DCM/MeOH 99 : 1 ~ 98 : 2)로 분리하였다.

LC-MS (ESI POS): 532.28 MH+

+ 19.3 (c 0.26, MeOH)

표 6에 기재된 화합물 24를 중간체 6 화합물과 3-클로로페닐보론산을 출발로 하는, 화합물 23을 위한 실시예 11에 기재된 대로 2 단계로 제조되었다.

표 6

실시예 12

아세트산 2-((4 aS ,4 bR ,5S,6 aS ,6 bS ,9 aR ,10 aS ,10 bS ,12S)-4b,12- 디플루오로 -5-히드록시-4a,6a-디메틸-2-옥소-8- 페닐 -2,4b,5,6,6a,7,8,9,9a,10,10a,10b,11,12- 테트라데카히드로 -4 aH -8- 아자 - 펜타레노[2,1-a]페난트렌 -6b-일)-2-옥소-에틸 에스텔 (중간체 25)의 제조.

아세토니트릴 (4 ml) 중에 화합물 6 (150 mg, 0.300 mmol)을 질소기류하 현탁시키고, 2-(트리메틸실릴)페닐 트리플루오로메탄설포네이트 (0.146 ml, 0.600 mmol)과 CsF (182 mg, 1.200 mmol)를 첨가시켰다. 얻은 혼합물을 실온에서 45 시간 저어주었다. 부가적으로 CsF (137 mg, 0.900 mmol)(건조시키지 않은 것)를 첨가하고 혼합물을 5 시간 동안 저어준 후, 물에 담갔다. 아세토니트릴을 증발시키고, 반응혼합물을 물과 AcOEt 사이에서 분획하였다. 유기층을 Na₂SO₄ 상에서 분리 건조시킨 다음 농축시켰다. 조원료를 실리카겔 크로마토그래피 (용리제 DCM/MeOH 98 : 2)로 정제하여 표제 중간체 화합물을 얻었다 (49 mg, 수율 30.3 %).

LC-MS (ESI POS): 540.2 (MH+)

실시예 13

(4 aS ,4 bR ,5S,6 aS ,6 bS ,9 aR ,10 aS ,10 bS ,12S)-4b,12- 디플루오로 -5-히드록시-4a,6a-디메틸-2-옥소-8- 페닐 -2,4b,5,6,6a,7,8,9,9a,10,10a,10b,11,12- 테트라데카히드로 -4 aH -8- 아자 - 펜타레노[2,1-a]페난트렌 -6b- 카복실산 (화합물 26)의 제조.

중간체 25 화합물 (550 mg, 1.019 mmol)을 THF/물, 2/1 혼합물 (15 ml)에 용해시키고, 2M 수용성 NaOH (2.039 ml, 4.08 mmol)를 첨가한 다음 혼합물을 1.5 시간 공기에 노출상태에서 저어주었다. 반응혼합물에 3N 염산용액을 첨가시켜 중성화 시켰다. THF를 증발시키고, 혼합물을 AcOEt와 물 사이에서 분획하였다. 유기상을 Na₂SO₄ 상에서 건조시킨 다음 농축건조시켜 표제화합물을 얻었다 (493 mg, 정량적 수율).

LC-MS (ESI POS): 484.3 MH+

(4 aS ,4 bR ,5S,6 aS ,6 bS ,9 aR ,10 aS ,10 bS ,12S)-4b,12- 디플루오로 -5-히드록시-4a,6a-디메틸-2-옥소-8- 페닐 -2,4b,5,6,6a,7,8,9,9a,10,10a,10b,11,12- 테트라데카히드로 -4 aH -8- 아자 - 펜타레노[2,1-a]페난트렌 -6b- 카보티온산 S- 플루오로메틸 에스텔 (화합물 27)의 제조.

건조 DMF (7 ml)에 용해시킨 화합물 26 (493 mg, 1.019 mmol), HATU (387 mg, 1.1019 mmol) 및 N-메틸몰포린 (0.123 ml, 1.121 mmol)의 혼합물을 실온에서 질소기류하 40 분간 저어주었다. 다음 무수 소디움 하이드로겐 설파이드 (171 mg, 3.06 mmol)를 첨가하고, 용액을 실온에서 1 시간 저어주었다. 브로모플루오로메탄 (2.038 ml, 4.08 mmol, DMF 중 2M 용액)을 첨가한 다음 혼합물을 실온에서 2 시간 저어주었다. 반응혼합물을 농축시켜 건조시키고 조원료를 분취 HPLC (CH₃CN/H₂O, CF₃COOH 없음)로 정제하여 표제화합물을 얻었다 (158 mg, 수율 29 %).

LC-MS (ESI POS): 532.30 MH+

+ 12.4 (c 0.34, MeOH)

실시예 14

(6S,8S,9R,10S,11S,13S,14S)-6,9- 디플루오로 -17-(2- 플루오로아세틸 )-11-히드록시-10,13-디메틸-6,7,8,9,10,11,12,13,14,15- 데카히드로 -3H- 시클로펜타[a]페난트렌 -3-온 (중간체 28)의 제조.

질소기류하, 중간체 3 (100 mg, 0.264 mmol)을 아세토니트릴 (4 ml) 중에 용해시키고, Mesyl-Cl (32 μl, 0.411 mmol)과 DIPEA (78 μl, 0.447 mmol)을 첨가시켰다. 혼합물을 실온에서 30 분간 저어주었다. 포타슘 플루오라이드 (154 mg, 2.64 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 60 ℃에서 1 시간 저어주었다. THF (529 μl, 0.529 mmol)에 녹인 TBAF 1 몰을 첨가하고, 혼합물을 60 ℃에서 4 시간 저어주었다. 반응혼합물을 물과 AcOEt 사이에서 분획시키고, 유기층을 분리한 다음, Na₂SO₄ 상에서 건조시킨 다음 농축시켰다. 조원료를 실리카겔 플래쉬 크로마토그래피 (용리제 DCM/AcOEt = 1 : 1)로 정제하여 중간체 화합물 28을 얻었다 (62 mg, 수율 61.7 %).

LC-MS (ESI POS): 381.0 (MH+)

(4 aS ,4 bR ,5S,6 aS ,6 bS ,9 aR ,10 aS ,10 bS ,12S)-8-벤질-4b,12- 디플루오로 -6b-(2- 플루오로 -아세틸)-5-히드록시-4a,6a-디메틸-4b,5,6,6a,6b,7,8,9,9a,10,10a,10b,11,12-테트라데카히드로-4 aH -8- 아자 - 펜타레노 [ 2,1-a]페난트렌 -2-온 (중간체 29)의 제조.

밀봉된 용기 중에서 1,4-디옥산 (5 ml)에 용해시킨 중간체 28 (125 mg, 0.329 mmol)과 N-벤질-1-메톡시-N-((트리메틸실릴)메틸)메탄아민 (0.318 ml, 1.314 mmol)의 혼합물에, TFA (cat) 1 방울을 첨가하고, 혼합물을 100 ℃에서 1 시간 저어주었다. 반응혼합물을 농축시킨 다음, 실리카겔 플래쉬 크로마토그래피 (용리제 DCM/AcOEt 7 : 3)로 정제한 다음, 분취 HPLC로 정제하여 표제 중간체 화합물 (45 mg, 수율 26.7 %)을 얻었다.

LC-MS (ESI POS): 514.39 MH+

+ 84.2 (c 0.36 CHCl3)

실시예 15

(4 aS ,4 bR ,5S,6 aS ,6 bS ,9 aR ,10 aS ,10 bS ,12S)-4b,12- 디플루오로 -6b-(2- 플루오로 -아세틸)-5-히드록시-4a,6a-디메틸-2-옥소-2,4b,5,6,6a,6b,7,9,9a,10,10a,10b,11,12-테트라데카히드로-4 aH -8- 아자 - 펜타레노[2,1-a]페난트렌 -8- 카복실산 비닐 에스텔 (중간체 30)의 제조.

중간체 화합물 29 (614 mg, 1.196 mmol)과 NaHCO₃ (100 mg, 1.196 mmol)을 아세토니트릴 (12 ml) 중에 용해시킨 다음 비닐 클로로포메이트 (0.204 ml, 2.391 mmol)를 첨가하였다. 반응혼합물을 50 ℃에서 1 시간 가온하였다. 용액을 AcOEt와 물 사이에서 분획하였다. 유기상을 분리하고 수용성 용액을 AcOEt로 추출하였다. 모은 유기상을 Na₂SO₄ 상에서 건조시킨 다음 증발시켜 잔사를 얻고 이를 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 (용리제 AcOEt/석유에텔 2 : 8 내지 8 : 2)로 정제하여 순수한 표제화합물을 얻었다 (411 mg, 수율 69.7 %).

LC-MS (ESI POS): 494.0 MH+

(4 aS ,4 bR ,5S,6 aS ,6 bS ,9 aR ,10 aS ,10 bS ,12S)-4b,12- 디플루오로 -6b-(2- 플루오로 -아세틸)-5-히드록시-4a,6a-디메틸-4b,5,6,6a,6b,7,8,9,9a,10,10a,10b,11,12- 테트라데카히드로 -4 aH -8- 아자 - 펜타레노[2,1-a]페난트렌 -2-온 염산염 (중간체 31)의 제조.

중간체 30 화합물 (294 mg, 0.596 mmol)을 DCM (20 ml) 중에 용해시킨 다음 디옥산 (2.98 ml, 11.91 mmol)에 녹인 염산 4.0 M을 첨가하였다. 용액을 실온에서 5 시간 저어준 다음 용매를 증발시키고 잔사를 진공하 16 시간 건조시켰다. 다음 고체를 메탄올 (30 ml) 중에 용해시키고 45 ℃에서 20 분간 가온하였다. 메탄올을 증발시키고 표제 중간체 화합물을 얻었다 (274 mg, 수율 100 %).

LC-MS (ESI POS): 424.0 (MH+)

실시예 16

(4 aS ,4 bR ,5S,6 aS ,6 bS ,9 aR ,10 aS ,10 bS ,12S)-4b,12- 디플루오로 -6b-(2- 플루오로 -아세틸)-5-히드록시-4a,6a-디메틸-8- 페닐 -4b,5,6,6a,6b,7,8,9,9a,10,10a,10b,11,12-테트라데카히드로-4 aH -8- 아자 - 펜타레노[2,1-a]페난트렌 -2-온 (화합물 32)의 제조.

중간체 화합물 31 (307 mg, 0.667 mmol)을 아세토니트릴 (12 ml)에 현탁시키고, CsF (406 mg, 2.67 mmol), 2-(트리메틸실릴)페닐 트리플루오로메탄설포네이트 (239 mg, 0.194 mmol) 및 물 (1 방울)을 첨가한 다음 혼합물을 실온에서 24 시간 저어주었다. 반응혼합물을 물과 AcOEt 사이에서 분획하고, 유기층을 분리한 다음, 건조시키고 농축시킨다. 조원료를 실리카겔 플래쉬 크로마토그래피 (용리제 DCM/MeOH = 99 : 1)로 정제하여 표제화합물을 얻었다 (94 mg, 수율 28 %).

LC-MS (ESI POS): 500.31 MH+

+ 24.1 (c= 0.48, MeOH)

s = 단일항,

d = 이중항,

t = 삼중항,

q = 사중항,

dd = 이중항의 이중항,

m = 다중항

br = 폭

본 발명의 화합물의 약물 활성

생체 외 연구

실시예 17

글루코코르티코이드 수용체 ( GR ) 전위 분석 프로토콜

본 발명의 화합물의 GR 핵 전위의 정량측정을, DiscoveRx (Fremont, CA)에서 개발된 Enzyme Fragment Complementation (EFC) 포맷 중에서 신규 세포에 기초된 GR-전위 분석법을 통하여, Assay Drug Devel. Technol., 4(3), 263-272, 2006에 따라 수행되었다.

DiscoveRx 분석법에서는 설계된 CHO-KI 바이오센서 세포 중에서 GR-전위 지시약으로 b-갈락토시다제 (b-gal)의 EFC를 사용하였다. b-gal의 효소 수용체 (EA) 단편이 모핵 중에 잔류하고 있는바, 서열의 부가 및 조정의 전용 세트를 사용하도록 고안된 것이다.

b-gal의 적은 펩타이드 효소 공여자 (enzyme donor; ED)는 GR의 C-말단에 직접 연합되어지며, 신호하는 수용체의 부재하 세포질에 모인다. GR 배위자와의 결합에 따라, 복합체는 핵으로 전위되고, 손상 없는 효소활성은 보상에 의하여 회복되고 b-gal 효능을 검출하였다.

b-gal의 NLS-효소 수용체 단편 (EA) 및 b-gal의 GR-효소 공여자 (ED) 단편을 안정적으로 발현하는 CHO-K1 세포를 F12 배지 (Invitrogen, Carlsbad, CA)에서 5 % CO₂와 95 % 공기를 포함하는 습기 있는 대기하에서 유지되었다. 배지는 10 % FBS, 2 mM L-글루타민, 50 U/ml 페니실린, 50 ㎍/ml 스트렙토마이신 및 250 ㎍/ml 히그로마이신 및 500 ㎍/ml G418 (인비트로젠)을 포함한다.

GR-전위는 세포막 투과 시약과 베타-gal 기질 (DiscoveRX, Fremont, CA)을 포함하는 패스헌터 탐지 키트(PathHunter Detection Kit)를 사용하여 측정하였다. 모든 화합물은 10^-11 내지 10^-6 M의 농도범위를 사용하여 스크린 하였다. 분석은 48-웰 (105 세포/웰)로 수행되었다. 스크린 화합물의 접종은 37 ℃에서 2 시간 수행되었다. 검출은 DiscoveRx에 의하여 공급된 키트 중 검출 완충제를 첨가하고 실온에서 1 시간 접종하여 이루어진다. 발광은 CENTRO LB 960 마이크로플레이트 해독기(Berthold Technologies)를 사용하여 검출되었다. EC50의 통계적 분석과 측정은 프리즘-버젼 3.0 Graphpad 소프트웨어 (San Diego, CA)를 사용하여 수행되었다.

GR 전위 분석으로 분석된 화합물은 1 nM 내지 10 nM의 EC50을 보였다.

실시예 18

RAW 264.7 대식세포에서 LPS -유래 산화질소 생산의 억제.

대식세포 쥐세포선 RAW 264.7에 기초된 생체 외 실험모델을 본 발명의 코르티코스테로이드의 항염증효과를 실험하는데 사용하였다.

염증이 진행되는 동안, 산화질소 (NO)의 많은 량이 NO 합성효소 (iNOS)를 유도할 수 있는 이성체에 의하여 변화된다. 세균성 지질다당류(lipopolysaccharide; LPS)는 흔히 대식세포 중에서 염증 응답을 자극하기 위하여 실험적 준비에서 사용되었다.

세포들은 페놀레드가 없는 배양 배지에서 성장시켰다 (RPMI은 열-불활성화된 10 % 태아소혈청, 2 mM 글루타민, 100 U/ml 페니실린 및 0.1 mg/ml 스테렙토마이신으로 보충되었다). 세포자극은 최종농도범위가 100 ng/ml가 되도록 LPS로 24 시간 세균을 접종시켜 유도하였다.

본 발명의 화합물의 처치는 LPS 노출 15 분전 최종 바람직한 농도로 DMSO (0.1 % 최종농도) 중에 녹인 이들 화합물은 첨가시켜 수행되었다.

산화질소 생산 인덱스로서, 니트라이트 (nitrite)의 농도는 배지 중에서 Griess 색소반응기 (J. Neuroimmunol., 150, 29-36, 2004)를 사용하여 측정되었다.

IC₅₀의 통계분석과 결정은 프리즘-버전 3.0 Graphpad 소프트웨어 (San Diego, CA)를 사용하여 수행되었다. 본 발명에 따른 화합물에 대한 IC₅₀ 실험값은 0.16 내지 1 nM 사이로 이루어졌다.

Claims (15)

1. 일반구조식 (I) 화합물 및 그들의 약제학적 허용가능한 염.
   

   

   
   여기에서,
   R₁은 (CH₂)_n-V-(CN₂)_n'-R₄이고, 여기서 n과 n'는 독립적으로 0 또는 1이며;
   V는 부재 또는 -O-, -S- 및 -OC(O)- 중에서 선택되고;
   R₄는 하기와 같이 이루어진 군에서 선택되며;
   - -H, -OH, -CN 또는 할로겐;
   - (C₁-C₆)알킬로, 여기서 알킬 그룹의 수소원자 하나 또는 그 이상이 선택적으로 옥소, -CN, -SH 또는 할로겐 중에서 선택된 하나 또는 그 이상의 군으로 치환되고;
   R₂는 (CH₂)_m-R₆이며, 여기서 m=0 또는 1 내지 4의 정수이고;
   R₆는 아릴 및 헤테로아릴로 이루어진 군에서 선택되며, 선택적으로 옥소, -OH, -CN, -COOH, (C₁-C₆)알콕시, (C₁-C₆)알킬, (C₁-C₆)할로알킬 및 할로겐 중에서 선택된 하나 또는 그 이상의 군으로 치환된다.
2. 청구항 1에 있어서, 구조식 (I')를 갖는 화합물.
   

   

   
   여기서, 4a위치에서의 탄소원자의 배위는 S이고, 4b위치는 R이며, 5위치에는 S이고, 6a의 위치에서는 S이고, 6b의 위치에서는 S이며, 9a의 위치에는 R이고, 10a의 위치에서는 S이며, 10b의 위치에는 S이고 그리고 12위치에서는 S이며, 여기서, R₁과 R₂의 정의는 청구항 1의 기재와 같다.
3. 청구항 1 또는 2에 있어서, R₁이 (CH₂)_n-V-(CH₂)_n'-R₄이고, 여기서 n과 n'는 독립적으로 0 또는 1이며, V는 부재 또는 -O-, -S- 및 -OC(O)-에서 선택되고, R₄는 -H, -OH, -CN, 할로겐 및 (C₁-C₆)알킬로 이루어지는 군에서 선택되며, 여기서 알킬그룹의 수소원자 하나 또는 그 이상이 선택적으로 옥소, -CN, -SH 또는 할로겐에서 선택적으로 치환된 화합물.
4. 청구항 3에 있어서, R₁이 (CH₂)_n-V-(CH₂)_n'-R₄이고, 여기서 n이 0 또는 1이며, n'가 0이고; V가 -O-이며, R₄가 -H인 화합물.
5. 청구항 3에 있어서, R₁이 (CH₂)_n-V-(CH₂)_n'-R₄이고, 여기서 n이 0이며, V가 -S- 또는 -O-이고, n'는 1이며, R₄는 불소 또는 -CN인 화합물.
6. 청구항 3에 있어서, R₁이 (CH₂)_n-V-(CH₂)_n'-R₄이고, 여기서 n은 1이며, V는 부재이고, n'는 0이며, R₄는 불소인 화합물.
7. 청구항 3에 있어서, R₁이 (CH₂)_n-V-(CH₂)_n'-R₄이고, 여기서 n은 1이며, V는 -OC(O)-이고, n'는 1이며, R₄는 -H인 화합물.
8. 청구항 1 또는 2에 있어서, R₂가 (CH₂)_m-R₆로, 여기서 m = 0 또는 1 내지 4의 정수이며; R₆는 아릴 및 헤테로아릴로 이루어진 군에서 선택되며, 선택적으로 옥소, -OH, -CN, -C(O)OH, (C₁-C₆)알콕시, (C₁-C₆)알킬, (C₁-C₆)할로알킬 및 할로겐 중에서 선택된 하나 또는 그 이상의 군으로 치환된 화합물.
9. 청구항 8에 있어서, R₂가 (CH₂)_m-R₆이고, 여기서 m = 0이고, R₆는 페닐, 벤조이미다졸릴 및 퀴놀리닐 중에서 선택되며, 선택적으로 하나 또는 그 이상의 염소원자로 치환된 화합물.
10. 청구항 8에 있어서, R₂가 (CH₂)_m-R₆이고, 여기서 m = 1이고, R₆는 페닐, 퀴놀리닐 및 벤조티오페닐 중에서 선택되며, 선택적으로 하나 또는 그 이상의 염소원자 또는 메틸 군으로 치환된 화합물.
11. 청구항 8에 있어서, R₂가 (CH₂)_m-R₆이고, 여기서 m = 3이며, R₆는 페닐인 화합물.
12. 청구항 1 내지 11 중 어느 한 항에 정의된 화합물과 하나 또는 그 이상의 약제학적으로 허용가능한 담체 및/또는 부형제로 이루어진 약제학적 조성물.
13. 청구항 1 내지 11 중 어느 한 항에 정의된 화합물과 β2-작용제, 항무스카린제, PDE4 억제제, P38 MAP 키나제 억제제 및 IKK2 억제제 류에서 선택된 하나 또는 그 이상의 활성성분으로 조합된 조합물.
14. 약제로서 유용한 청구항 1 내지 11의 화합물.
15. 염증세포의 수, 활성 및 이동의 감소를 보이는 질환의 예방 또는 치료용 약제의 제조를 위한, 청구항 1 내지 11의 화합물과 하나 또는 그 이상의 활성성분으로 조합된 조합물의 용도.