KR20140034160A - 담배 근친교배 식물체 albex1f 및 albex1ms - Google Patents

담배 근친교배 식물체 albex1f 및 albex1ms Download PDF

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KR20140034160A
KR20140034160A KR1020137025263A KR20137025263A KR20140034160A KR 20140034160 A KR20140034160 A KR 20140034160A KR 1020137025263 A KR1020137025263 A KR 1020137025263A KR 20137025263 A KR20137025263 A KR 20137025263A KR 20140034160 A KR20140034160 A KR 20140034160A
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albex1ms
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둥메이 쉬
마크 닐선
옌신 선
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알트리아 클라이언트 서비시스 인코포레이티드
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Abstract

본 발명은 담배 근친교배 식물체 ALBEX1F 및 ALBEX1MS를 제공한다. 본 발명은 또한 이러한 식물체의 일부분 및 이들 일부분으로 제조된 제품을 제공한다. 본 발명은 또한 제공된 식물체의 잡종을 비롯한 자손을 포함한다.

Description

담배 근친교배 식물체 ALBEX1F 및 ALBEX1MS {TOBACCO INBRED PLANTS ALBEX1F AND ALBEX1MS}
관련 출원에 대한 교차-참조
본 출원은 35 U.S.C. § 119 하에 2011년 2월 28일자로 출원된 미국 가출원 제61/447,487호 (계류 중) 및 2011년 7월 14일자로 출원된 미국 가출원 제61/507,732호 (계류 중)의 우선권을 주장하며, 이들 각각은 그 각각의 서열목록을 비롯하여 그 전체내용이 본원에 참고로 포함된다.
서열목록 삽입
본 출원은 그 전체내용이 본원에 참고로 포함되는 서열목록을 포함하고 있다. 전자적 등가 종이 사본/컴퓨터 판독가능 형태의 서열목록이 본원에서 EFS-웹을 통해 전자적으로 제출되며, 이는 크기가 16,384 바이트 (윈도우 XP에서 측정)이고, 2012년 2월 23일에 생성되었으며, 그 전체내용이 본원에 참고로 포함되는 것인 파일명 "P33794US02_seqlist.txt"의 파일을 포함하고 있다.
발명의 분야
본 발명은 담배 근친교배 식물체 ALBEX1F 및 ALBEX1MS를 제공한다. 본 발명은 또한 이러한 식물체의 일부분 및 이들 일부분으로 제조된 제품을 제공한다. 본 발명은 또한 제공된 식물체의 잡종을 비롯한 자손을 포함한다.
담배 (니코티아나 타바쿰 엘.(Nicotiana tabacum L.))는 미국뿐만 아니라 다른 나라에서도 중요한 상업적 작물이다. 담배 식물체에서, 니코틴의 N-탈메틸화는 노르니코틴을 생성시키는데, 이는 건조처리된 잎에서의 N-니트로소노르니코틴 ("NNN") 형성에 대한 전구물질로 알려진 2차 알칼로이드이다. NNN은 건조처리된 잎의 원치않는 성분이다.
상업적 담배 변종에서 발견되는 우세한 알칼로이드는, 전형적으로 전체 알칼로이드 풀(pool)의 90-95％를 차지하는 니코틴이다. 나머지 알칼로이드 부분은 주로 3가지 추가적인 피리딘 알칼로이드: 노르니코틴, 아나바신 및 아나타빈으로 구성된다. 노르니코틴은 효소 니코틴 N-데메틸라제의 활성을 통해 니코틴으로부터 직접적으로 생성된다. 노르니코틴은 보통 전체 피리딘 알칼로이드 풀의 5％ 미만에 해당하지만, "전환"으로 지칭되는 과정을 통해, 처음에는 매우 적은 양의 노르니코틴을 생성하던 담배 식물체가 큰 비율의 잎 니코틴을 노르니코틴으로 대사 "전환"시키는 자손을 만들어 내게 된다. 유전적으로 전환된 담배 식물체 ("전환체"로 지칭됨)에서, 대부분의 노르니코틴 생성은 성숙한 잎의 노화 및 건조처리 동안 발생한다 (문헌 [Wernsman and Matzinger (1968) Tob. Sci. 12:226-228]). 벌리(Burley) 담배가 특히 유전적으로 전환되기 쉬운데, 일부 품종에서 관찰되는 세대당 20％만큼이나 높은 비율로 그러하다.
담배 잎의 건조처리 및 가공 동안, 노르니코틴의 일부는 실험실 동물에서 발암성인 것으로 주장되어 온 담배-특이 니트로사민 (TSNA)인, 화합물 NNN으로 대사된다 (문헌 [Hecht and Hoffmann (1990) Cancer Surveys 8:273-294]; [Hoffmann et al. (1994) J. Toxicol. Environ. Health 41:1-52]; [Hecht (1998) Chem. Res. Toxicol. 11:559-603]). 열풍-건조처리 담배에서, 대개 TSNA는 전통적인 건조처리 창고에서 발견되는 직화 가열 시스템에 의해 형성된 연소 가스에 존재하는 극미량의 질소 산화물과 알칼로이드의 반응을 통해 형성되는 것으로 밝혀져 있다 (문헌 [Peele and Gentry (1999) "Formation of Tobacco-specific Nitrosamines in Flue-cured Tobacco," CORESTA Meeting, Agro-Phyto Groups, Suzhou, China]). 이들 건조처리 창고에 열-교환기를 새로 장착함으로써, 건조처리 공기와 연소 가스의 혼합을 사실상 제거하였고, 이 방식으로 건조처리된 담배에서의 TSNA 형성을 극적으로 감소시켰다 (문헌 [Boyette and Hamm (2001) Rec. Adv. Tob, Sci. 27:17-22]). 반면에 자연풍-건조처리 벌리 담배에서는, 주로 TSNA 형성이 잎-매개 미생물에 의해 촉진되는 과정인 아질산염과 담배 알칼로이드의 반응을 통해 진행된다 (문헌 [Bush et al. (2001) Rec. Adv. Tob. Sci, 27:23-46]). 지금까지, 허용가능한 품질 기준을 유지하면서 건조처리 조건의 변형을 통해 TSNA를 감소시키려는 시도가 자연풍-건조처리 담배에 대해 성공적인 것으로 입증된 적은 없었다.
발명의 개요
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 알트리아 클라이언트 서비시스 인코포레이티드(Altria Client Services Inc.)를 대신하여 2011년 2월 28일자로 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁된 것인 담배 품종 ALBEX1F의 종자를 포함한다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 종자를 성장시킴으로써 생성된 담배 식물체 또는 그의 일부분을 포함한다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 종자를 성장시킴으로써 생성된 담배 식물체 또는 그의 일부분의 수확된 잎을 포함한다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 종자를 성장시킴으로써 생성된 담배 식물체 또는 그의 일부분의 수확된 잎을 포함하며, 여기서 상기 잎은 유사한 조건 하에서 성장시킨 TN 90 또는 대부분의 다른 상업적 벌리 담배 품종으로부터의 잎에 비하여 감소된 양의 노르니코틴 및/또는 N'-니트로소노르니코틴 (NNN) 및/또는 보다 안정적으로 낮은 니코틴 전환율을 갖는다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 종자를 성장시킴으로써 생성된 담배 식물체의 수확된 잎을 포함하며, 여기서 상기 잎은 유사한 조건 하에서 성장시킨 TN 90 또는 대부분의 다른 상업적 벌리 담배 품종으로부터의 잎에 비하여 감소된 양의 노르니코틴 및/또는 N'-니트로소노르니코틴 (NNN) 및/또는 보다 안정적으로 낮은 니코틴 전환율을 갖고, 감소된 양의 노르니코틴 및/또는 N'-니트로소노르니코틴 (NNN)은, 상기 잎으로부터 생성된 연기 흐름 내에서, 유사한 조건 하에서 성장시킨 TN 90 또는 대부분의 다른 상업적 벌리 담배 품종으로부터의 잎에 비하여 감소된 것이다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 종자를 성장시킴으로써 생성된 담배 식물체 또는 그의 일부분으로 제조된 담배 제품을 포함하며, 여기서 상기 제품은 파이프 담배, 엽궐련 담배, 궐련 담배, 씹는 담배, 잎 담배, 썬 담배 및 살담배로 이루어진 군으로부터 선택된다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 종자를 성장시킴으로써 생성된 담배 식물체 또는 그의 일부분으로 제조된 담배 제품을 포함하며, 여기서 상기 제품은 파이프 담배, 엽궐련 담배, 궐련 담배, 씹는 담배, 잎 담배, 썬 담배 및 살담배로 이루어진 군으로부터 선택되고, 가는 엽궐련, 비-환기 공간 필터 궐련, 환기 공간 필터 궐련, 엽궐련, 코담배 및 씹는 담배로 이루어진 군으로부터 추가로 선택된다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 종자를 성장시킴으로써 생성된 담배 식물체 또는 그의 일부분으로 제조된 담배 제품을 포함하며, 여기서 상기 제품은 파이프 담배, 엽궐련 담배, 궐련 담배, 씹는 담배, 잎 담배, 썬 담배 및 살담배로 이루어진 군으로부터 선택되고, 가는 엽궐련, 비-환기 공간 필터 궐련, 환기 공간 필터 궐련, 엽궐련, 코담배 및 씹는 담배로 이루어진 군으로부터 추가로 선택되며, 유사한 조건 하에서 성장시키고 가공한 TN 90 또는 대부분의 다른 상업적 벌리 담배 품종으로 제조된 제품에 비하여 감소된 양의 노르니코틴 및/또는 N'-니트로소노르니코틴 (NNN) 및/또는 보다 안정적으로 낮은 니코틴 전환율을 갖는다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 종자를 성장시킴으로써 생성된 식물체의 일부분을 포함하며, 여기서 식물체 일부분은 잎, 화분, 배주, 배아, 떡잎, 배축, 분열조직 세포, 원형질체, 뿌리, 뿌리 끝, 암술, 꽃밥, 꽃, 싹, 줄기, 꼬투리 및 잎자루로 이루어진 군으로부터 선택된다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 종자를 성장시킴으로써 생성된 식물체로부터의 원형질체 또는 세포로부터 생성된 조직 배양물을 포함하며, 여기서 상기 조직 배양물의 세포 또는 원형질체는 잎, 화분, 배아, 떡잎, 배축, 분열조직 세포, 뿌리, 뿌리 끝, 암술, 꽃밥, 꽃, 싹, 줄기, 꼬투리 및 잎자루로 이루어진 군으로부터 선택된 식물체 일부분으로부터 생성된 것이다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 종자를 성장시킴으로써 생성된 식물체로부터의 원형질체 또는 세포로부터 생성된 조직 배양물로부터 재생된 담배 식물체를 포함하며, 여기서 상기 조직 배양물의 세포 또는 원형질체는 잎, 화분, 배아, 떡잎, 배축, 분열조직 세포, 뿌리, 뿌리 끝, 암술, 꽃밥, 꽃, 싹, 줄기, 꼬투리 및 잎자루로 이루어진 군으로부터 선택된 식물체 일부분으로부터 생성된 것이고, 식물체는 유사한 조건 하에서 성장시킨 ALBEX1F 품종의 본질적으로 모든 형태학적 및 생리학적 특징을 갖는다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 알트리아 클라이언트 서비시스 인코포레이티드를 대신하여 2011년 2월 28일자로 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁된 것인 담배 품종 ALBEX1MS의 종자를 포함한다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1MS의 종자를 성장시킴으로써 생성된 담배 식물체 또는 그의 일부분을 제공한다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1MS의 종자를 성장시킴으로써 생성된 담배 식물체 또는 그의 일부분의 수확된 잎을 제공한다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1MS의 종자를 성장시킴으로써 생성된 담배 식물체 또는 그의 일부분의 수확된 잎을 제공하며, 여기서 상기 잎은 유사한 조건 하에서 성장시킨 TN 90 또는 대부분의 다른 상업적 벌리 담배 품종으로부터의 잎에 비하여 감소된 양의 노르니코틴 및/또는 N'-니트로소노르니코틴 (NNN) 및/또는 보다 안정적으로 낮은 니코틴 전환율을 갖는다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1MS의 종자를 성장시킴으로써 생성된 담배 식물체 또는 그의 일부분의 수확된 잎을 제공하며, 여기서 상기 잎은 감소된 양의 노르니코틴 및/또는 N'-니트로소노르니코틴 (NNN)을 갖고, 상기 감소된 양의 노르니코틴 및/또는 N'-니트로소노르니코틴 (NNN)은, 상기 잎으로부터 생성된 연기 흐름 내에서, 유사한 조건 하에서 성장시킨 TN 90 또는 대부분의 다른 상업적 벌리 담배 품종으로부터의 잎에 비하여 감소된 것이다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1MS의 종자를 성장시킴으로써 생성된 담배 식물체 또는 그의 일부분으로 제조된 담배 제품을 제공하며, 여기서 상기 제품은 파이프 담배, 엽궐련 담배, 궐련 담배, 씹는 담배, 잎 담배, 썬 담배 및 살담배로 이루어진 군으로부터 선택된다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1MS의 종자를 성장시킴으로써 생성된 담배 식물체 또는 그의 일부분으로 제조된 담배 제품을 제공하며, 여기서 상기 제품은 파이프 담배, 엽궐련 담배, 궐련 담배, 씹는 담배, 잎 담배, 썬 담배 및 살담배로 이루어진 군으로부터 선택되고, 가는 엽궐련, 비-환기 공간 필터 궐련, 환기 공간 필터 궐련, 엽궐련, 코담배 및 씹는 담배로 이루어진 군으로부터도 선택된다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1MS의 종자를 성장시킴으로써 생성된 담배 식물체 또는 그의 일부분으로 제조된 제품을 제공하며, 여기서 상기 제품은 파이프 담배, 엽궐련 담배, 궐련 담배, 씹는 담배, 잎 담배, 썬 담배 및 살담배로 이루어진 군으로부터 선택되고, 상기 제품은 가는 엽궐련, 비-환기 공간 필터 궐련, 환기 공간 필터 궐련, 엽궐련, 코담배 및 씹는 담배로 이루어진 군으로부터도 선택되며, 유사한 조건 하에서 성장시킨 TN 90 또는 대부분의 다른 상업적 벌리 담배 품종으로 제조된 제품에 비해 감소된 양의 노르니코틴 및/또는 N'-니트로소노르니코틴 (NNN) 및/또는 보다 안정적으로 낮은 니코틴 전환율을 갖는다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1MS의 종자를 성장시킴으로써 생성된 식물체의 일부분을 제공하며, 여기서 식물체의 일부분은 잎, 화분, 배주, 배아, 떡잎, 배축, 분열조직 세포, 원형질체, 뿌리, 뿌리 끝, 암술, 꽃밥, 꽃, 싹, 줄기, 꼬투리 및 잎자루로 이루어진 군으로부터 선택된다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1MS의 종자를 성장시킴으로써 생성된 식물체로부터의 원형질체 또는 세포로부터 생성된 조직 배양물을 제공하며, 여기서 상기 조직 배양물의 세포 또는 원형질체는 잎, 화분, 배아, 떡잎, 배축, 분열조직 세포, 뿌리, 뿌리 끝, 암술, 꽃밥, 꽃, 싹, 줄기, 꼬투리 및 잎자루로 이루어진 군으로부터 선택된 식물체 일부분으로부터 생성된다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1MS의 종자를 성장시킴으로써 생성된 식물체로부터의 원형질체 또는 세포로부터 생성된 조직 배양물로부터 재생된 담배 식물체를 제공하며, 여기서 상기 조직 배양물의 세포 또는 원형질체는 잎, 화분, 배아, 떡잎, 배축, 분열조직 세포, 뿌리, 뿌리 끝, 암술, 꽃밥, 꽃, 싹, 줄기, 꼬투리 및 잎자루로 이루어진 군으로부터 선택된 식물체 일부분으로부터 생성되고, 식물체는 유사한 조건 하에서 성장시킨 품종 ALBEX1MS의 본질적으로 모든 형태학적 및 생리학적 특징을 갖는다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 F1 자손 식물체를 포함한다.
대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 F1 자손 식물체에서, 상기 F1 식물체는 웅성 불임 (MS)이다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1MS의 F1 자손 식물체를 포함한다.
한 측면에서, 본 발명은 2종의 담배 식물체를 교배하고 생성된 담배 종자를 수확하는 것을 포함하는 담배 종자의 생성 방법을 제공하며, 여기서 1종 이상의 담배 식물체는 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 담배 식물체이다.
한 측면에서, 본 발명은 2종의 담배 식물체를 교배하고 생성된 담배 종자를 수확하는 것을 포함하는 담배 종자의 생성 방법을 제공하며, 여기서 1종 이상의 담배 식물체는 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 담배 식물체이고, 상기 ALBEX1F 식물체는 자성(female)친이다.
한 측면에서, 본 발명은 2종의 담배 식물체를 교배하고 생성된 담배 종자를 수확하는 것을 포함하는 담배 종자의 생성 방법을 제공하며, 여기서 1종 이상의 담배 식물체는 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 담배 식물체이고, 다른 담배 식물체는 웅성 불임 (MS)이다.
한 측면에서, 본 발명은 2종의 담배 식물체를 교배하고 생성된 담배 종자를 수확하는 방법에 의해 생성된 F1 자손 종자를 제공하며, 여기서 1종 이상의 담배 식물체는 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 담배 식물체이고, 다른 담배 식물체는 웅성 불임 (MS)이다.
한 측면에서, 본 발명은 2종의 담배 식물체를 교배하고 생성된 담배 종자를 수확하는 방법에 의해 생성된 F1 자손 종자의 용기를 제공하며, 여기서 1종 이상의 담배 식물체는 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 담배 식물체이고, 다른 담배 식물체는 웅성 불임 (MS)이다.
한 측면에서, 본 발명은 2종의 담배 식물체를 교배하고 생성된 담배 종자를 수확하는 방법에 의해 생성된 종자를 성장시킴으로써 생성된 F1 자손 식물체를 제공하며, 여기서 1종 이상의 담배 식물체는 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 담배 식물체이고, 다른 담배 식물체는 웅성 불임 (MS)이다.
한 측면에서, 본 발명은 2종의 담배 식물체를 교배하고 생성된 담배 종자를 수확하는 방법에 의해 생성된 종자를 성장시킴으로써 생성된 F1 자손 식물체의 담배 식물체 또는 그의 일부분의 수확된 잎을 제공하며, 여기서 1종 이상의 담배 식물체는 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 담배 식물체이고, 다른 담배 식물체는 웅성 불임 (MS)이다.
한 측면에서, 본 발명은 2종의 담배 식물체를 교배하고 생성된 담배 종자를 수확하는 방법에 의해 생성된 종자를 성장시킴으로써 생성된 F1 자손 식물체의 수확된 잎을 제공하며, 여기서 1종 이상의 담배 식물체는 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 담배 식물체이고, 다른 담배 식물체는 웅성 불임 (MS)이며, 상기 잎은 유사한 조건 하에서 성장시킨 TN 90 또는 대부분의 다른 상업적 벌리 담배 품종으로부터의 잎에 비하여 감소된 양의 노르니코틴 및/또는 N'-니트로소노르니코틴 (NNN) 및/또는 보다 안정적으로 낮은 니코틴 전환율을 갖는다.
한 측면에서, 본 발명은 2종의 담배 식물체를 교배하고 생성된 담배 종자를 수확하는 방법에 의해 생성된 종자를 성장시킴으로써 생성된 F1 자손 식물체의 수확된 잎을 제공하며, 여기서 1종 이상의 담배 식물체는 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 담배 식물체이고, 다른 담배 식물체는 웅성 불임 (MS)이며, 상기 잎은 유사한 조건 하에서 성장시킨 TN 90 또는 대부분의 다른 상업적 벌리 담배 품종으로부터의 잎에 비하여 감소된 양의 노르니코틴 및/또는 N'-니트로소노르니코틴 (NNN) 및/또는 보다 안정적으로 낮은 니코틴 전환율을 갖고, 상기 감소된 양의 노르니코틴 및/또는 N'-니트로소노르니코틴 (NNN)은, 상기 잎으로부터 생성된 연기 흐름 내에서, 유사한 조건 하에서 성장시킨 TN 90 또는 대부분의 다른 상업적 벌리 담배 품종으로부터의 잎에 비하여 감소된 것이다.
한 측면에서, 본 발명은 2종의 담배 식물체를 교배하고 생성된 담배 종자를 수확하는 방법에 의해 생성된 종자를 성장시킴으로써 생성된 F1 자손 식물체로 제조된 담배 제품을 제공하며, 여기서 1종 이상의 담배 식물체는 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 담배 식물체이고, 다른 담배 식물체는 웅성 불임 (MS)이며, 상기 제품은 파이프 담배, 엽궐련 담배, 궐련 담배, 씹는 담배, 잎 담배, 썬 담배 및 살담배로 이루어진 군으로부터 선택된다.
한 측면에서, 본 발명은 2종의 담배 식물체를 교배하고 생성된 담배 종자를 수확하는 방법에 의해 생성된 종자를 성장시킴으로써 생성된 F1 자손 식물체로 제조된 담배 제품을 제공하며, 여기서 1종 이상의 담배 식물체는 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 담배 식물체이고, 다른 담배 식물체는 웅성 불임 (MS)이며, 상기 제품은 파이프 담배, 엽궐련 담배, 궐련 담배, 씹는 담배, 잎 담배, 썬 담배 및 살담배로 이루어진 군으로부터 선택되고, 가는 엽궐련, 비-환기 공간 필터 궐련, 환기 공간 필터 궐련, 엽궐련, 코담배 및 씹는 담배로 이루어진 군으로부터 추가로 선택된다.
한 측면에서, 본 발명은 2종의 담배 식물체를 교배하고 생성된 담배 종자를 수확하는 방법에 의해 생성된 종자를 성장시킴으로써 생성된 F1 자손 식물체로 제조된 담배 제품을 제공하며, 여기서 1종 이상의 담배 식물체는 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 담배 식물체이고, 다른 담배 식물체는 웅성 불임 (MS)이며, 상기 제품은 파이프 담배, 엽궐련 담배, 궐련 담배, 씹는 담배, 잎 담배, 썬 담배 및 살담배로 이루어진 군으로부터 선택되고, 가는 엽궐련, 비-환기 공간 필터 궐련, 환기 공간 필터 궐련, 엽궐련, 코담배 및 씹는 담배로 이루어진 군으로부터 추가로 선택되며, 유사한 조건 하에서 성장시킨 TN 90 또는 대부분의 다른 상업적 벌리 담배 품종에 비하여 감소된 양의 노르니코틴 및/또는 N'-니트로소노르니코틴 (NNN) 및/또는 보다 안정적으로 낮은 니코틴 전환율을 갖는다.
한 측면에서, 본 발명은 2종의 담배 식물체를 교배하고 생성된 담배 종자를 수확하는 것을 포함하는 담배 종자의 생성 방법을 제공하며, 여기서 1종 이상의 담배 식물체는 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 담배 식물체이고, 다른 담배 식물체는 웅성 불임 (MS)이며, 상기 MS 식물체는 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1MS의 식물체이다.
한 측면에서, 본 발명은 (a) 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F, 및 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 식물체로부터 번식될 수 있는 조직을 수집하는 단계; (b) 상기 조직을 재배하여 증식된 싹을 수득하는 단계; 및 (c) 증식된 싹을 뿌리 내리게 하여 뿌리가 내린 소식물체를 수득하는 단계를 포함하는, 담배 품종의 식물체의 영양 번식 방법을 포함한다.
한 측면에서, 본 발명은 (a) 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 ALBEX1F, 및 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 식물체로부터 번식될 수 있는 조직을 배양하여 증식된 싹을 수득하는 단계; 및 (b) 증식된 싹을 뿌리 내리게 하여 뿌리 내린 소식물체를 수득하는 단계를 포함하며, 상기 뿌리 내린 소식물체로부터 식물체를 성장시키는 단계를 추가로 포함하는, 담배 품종의 식물체의 영양 번식 방법을 포함한다.
한 측면에서, 본 발명은 (a) 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 ALBEX1F 및 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있는 것인 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 식물체를 원하는 특성을 포함하는 제2 담배 식물체와 교배하여 F1 자손 종자를 생성하는 단계; (b) F1 자손 종자를 성장시키고 원하는 특성을 포함하는 F1 자손 식물체를 선택하는 단계; (c) 선택된 F1 자손 식물체를 ALBEX1F 및 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 식물체와 교배하여 역교배 F2 자손 종자를 생성하는 단계; (d) F2 자손 종자를 성장시키고 원하는 특성을 포함하는 역교배 F2 자손 식물체를 선택하는 단계; 및 (e) 단계 (c) 및 (d)를 3회 이상 연속으로 반복하여 ALBEX1F 및 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 본질적으로 모든 생리학적 및 형태학적 특징 및 원하는 특성을 포함하는 선택된 네 번째 또는 그 이상의 역교배 자손을 생성하는 단계를 포함하는, 원하는 특성을 담배 품종으로 도입시키는 방법을 포함한다.
한 측면에서, 본 발명은 (a) 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 ALBEX1F 및 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있는 것인 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 식물체를 원하는 특성을 포함하는 제2 담배 식물체와 교배하여 F1 자손 종자를 생성하는 단계; (b) F1 자손 종자를 성장시키고 원하는 특성을 포함하는 F1 자손 식물체를 선택하는 단계; (c) 선택된 F1 자손 식물체를 ALBEX1F 및 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 식물체와 교배하여 역교배 F2 자손 종자를 생성하는 단계; (d) F2 자손 종자를 성장시키고 원하는 특성을 포함하는 역교배 F2 자손 식물체를 선택하는 단계; 및 (e) 단계 (c) 및 (d)를 3회 이상 연속으로 반복하여 ALBEX1F 및 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 본질적으로 모든 생리학적 및 형태학적 특징 및 원하는 특성을 포함하는 선택된 네 번째 또는 그 이상의 역교배 자손을 생성하는 단계를 포함하며, 상기 특성이 웅성 불임 (MS)인, 원하는 특성을 담배 품종으로 도입시키는 방법을 제공한다.
한 측면에서, 본 발명은 (a) 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 ALBEX1F 및 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있는 것인 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 식물체를 원하는 특성을 포함하는 제2 담배 식물체와 교배하여 F1 자손 종자를 생성하는 단계; (b) F1 자손 종자를 성장시키고 원하는 특성을 포함하는 F1 자손 식물체를 선택하는 단계; (c) 선택된 F1 자손 식물체를 ALBEX1F 및 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 식물체와 교배하여 역교배 F2 자손 종자를 생성하는 단계; (d) F2 자손 종자를 성장시키고 원하는 특성을 포함하는 역교배 F2 자손 식물체를 선택하는 단계; 및 (e) 단계 (c) 및 (d)를 3회 이상 연속으로 반복하여 ALBEX1F 및 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 본질적으로 모든 생리학적 및 형태학적 특징 및 원하는 특성을 포함하는 선택된 네 번째 또는 그 이상의 역교배 자손을 생성하는 단계를 포함하며, 상기 특성이 웅성 불임 (MS)이고, 추가로 상기 MS 특성이 니코티아나 수아베올렌스(Nicotiana suaveolens)의 세포질로부터 수득되는 것인, 원하는 특성을 담배 품종으로 도입시키는 방법을 제공한다.
한 측면에서, 본 발명은 (a) 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 ALBEX1F 및 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있는 것인 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 식물체를 원하는 특성을 포함하는 제2 담배 식물체와 교배하여 F1 자손 종자를 생성하는 단계; (b) F1 자손 종자를 성장시키고 원하는 특성을 포함하는 F1 자손 식물체를 선택하는 단계; (c) 선택된 F1 자손 식물체를 ALBEX1F 및 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 식물체와 교배하여 역교배 F2 자손 종자를 생성하는 단계; (d) F2 자손 종자를 성장시키고 원하는 특성을 포함하는 역교배 F2 자손 식물체를 선택하는 단계; 및 (e) 단계 (c) 및 (d)를 3회 이상 연속으로 반복하여 ALBEX1F 및 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 본질적으로 모든 생리학적 및 형태학적 특징 및 원하는 특성을 포함하는 선택된 네 번째 또는 그 이상의 역교배 자손을 생성하는 단계를 포함하며, 상기 특성이 웅성 불임 (MS)이고, 추가로 상기 MS 특성이 니코티아나 수아베올렌스의 세포질로부터 수득되며, 추가로 상기 제2 담배 식물체가 MS TN 90인, 원하는 특성을 담배 품종으로 도입시키는 방법을 제공한다.
한 측면에서, 본 발명은 (a) 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 ALBEX1F 및 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있는 것인 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 식물체를 원하는 특성을 포함하는 제2 담배 식물체와 교배하여 F1 자손 종자를 생성하는 단계; (b) F1 자손 종자를 성장시키고 원하는 특성을 포함하는 F1 자손 식물체를 선택하는 단계; (c) 선택된 F1 자손 식물체를 ALBEX1F 및 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 식물체와 교배하여 역교배 F2 자손 종자를 생성하는 단계; (d) F2 자손 종자를 성장시키고 원하는 특성을 포함하는 역교배 F2 자손 식물체를 선택하는 단계; 및 (e) 단계 (c) 및 (d)를 3회 이상 연속으로 반복하여 ALBEX1F 및 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 본질적으로 모든 생리학적 및 형태학적 특징 및 원하는 특성을 포함하는 선택된 네 번째 또는 그 이상의 역교배 자손을 생성하는 단계를 포함하며, 상기 특성이 웅성 불임 (MS)인, 원하는 특성을 담배 품종으로 도입시키는 방법에 의해 생성된 담배 식물체를 제공한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 (a) 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 ALBEX1F 및 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있는 것인 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 식물체를 원하는 특성을 포함하는 또 다른 담배 품종의 식물체와 교배하여 자손 식물체를 생성하며, 여기서 원하는 특성은 제초제 저항성, 해충 저항성, 질병 저항성, 고수율, 고등급 인덱스, 건조처리성(curability), 건조처리 품질, 기계적 수확성, 보유 능력(holding ability), 잎 품질, 높이, 식물체 성숙, 조기 성숙, 조기 내지 중기 성숙, 중기 성숙, 중기 내지 후기 성숙, 후기 성숙; 작은 줄기대, 중간 줄기대, 큰 줄기대, 식물체 당 잎의 수, 식물체 당 5-10개의 잎, 식물체 당 11-15개의 잎, 식물체 당 16-21개의 잎, 및 이의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되고, 이로써 F1 자손 종자를 생성하는 단계; (b) F1 자손 종자를 F1 자손 식물체로 성장시키고 원하는 특성을 갖는 F1 자손 식물체를 선택하는 단계; (c) 선택된 F1 자손 식물체를 ALBEX1F 및 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 식물체와 교배하여 역교배 자손 식물체 종자를 생성하는 단계; (d) 역교배 자손 식물체 종자를 역교배 자손 식물체로 성장시키고 원하는 특성을 포함하는 역교배 자손 식물체를 선택하는 단계; 및 (e) 단계 (c) 및 (d)를 1회 이상 연속으로 반복하여 유사한 조건 하에서 성장시킨 ALBEX1F 및 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 본질적으로 모든 생리학적 및 형태학적 특징 및 원하는 특성을 포함하는 선택된 네 번째 또는 그 이상의 역교배 자손을 생성하는 단계를 포함하는, 원하는 특성을 담배 품종에 도입시키는 방법을 포함한다.
한 측면에서, 본 발명은 (a) 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 ALBEX1F 및 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있는 것인 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 식물체를 원하는 특성을 포함하는 또 다른 담배 품종의 식물체와 교배하여 자손 식물체를 생성하며, 여기서 원하는 특성은 제초제 저항성, 해충 저항성, 질병 저항성, 고수율, 고등급 인덱스, 건조처리성, 건조처리 품질, 기계적 수확성, 보유 능력, 잎 품질, 높이, 식물체 성숙, 조기 성숙, 조기 내지 중기 성숙, 중기 성숙, 중기 내지 후기 성숙, 후기 성숙; 작은 줄기대, 중간 줄기대, 큰 줄기대, 식물체 당 잎의 수, 식물체 당 5-10개의 잎, 식물체 당 11-15개의 잎, 식물체 당 16-21개의 잎, 및 이의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되고, 이로써 F1 자손 종자를 생성하는 단계; (b) F1 자손 종자를 F1 자손 식물체로 성장시키고 원하는 특성을 갖는 F1 자손 식물체를 선택하는 단계; (c) 선택된 F1 자손 식물체를 ALBEX1F 및 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 식물체와 교배하여 역교배 자손 식물체 종자를 생성하는 단계; (d) 역교배 자손 식물체 종자를 역교배 자손 식물체로 성장시키고 원하는 특성을 포함하는 역교배 자손 식물체를 선택하는 단계; 및 (e) 단계 (c) 및 (d)를 1회 이상 연속으로 반복하여 유사한 조건 하에서 성장시킨 ALBEX1F 및 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 본질적으로 모든 생리학적 및 형태학적 특징 및 원하는 특성을 포함하는 선택된 네 번째 또는 그 이상의 역교배 자손을 생성하는 단계를 포함하며, 식물체가 상기 원하는 특성을 갖는 것인, 원하는 특성을 담배 품종에 도입시키는 방법에 의해 생성된 담배 식물체를 포함한다.
한 측면에서, 본 발명은 (a) 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 ALBEX1F 및 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있는 것인 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 식물체를 원하는 특성을 포함하는 또 다른 담배 품종의 식물체와 교배하여 자손 식물체를 생성하며, 여기서 원하는 특성은 제초제 저항성, 해충 저항성, 질병 저항성, 고수율, 고등급 인덱스, 건조처리성, 건조처리 품질, 기계적 수확성, 보유 능력, 잎 품질, 높이, 식물체 성숙, 조기 성숙, 조기 내지 중기 성숙, 중기 성숙, 중기 내지 후기 성숙, 후기 성숙; 작은 줄기대, 중간 줄기대, 큰 줄기대, 식물체 당 잎의 수, 식물체 당 5-10개의 잎, 식물체 당 11-15개의 잎, 식물체 당 16-21개의 잎, 및 이의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되고, 이로써 F1 자손 종자를 생성하는 단계; (b) F1 자손 종자를 F1 자손 식물체로 성장시키고 원하는 특성을 갖는 F1 자손 식물체를 선택하는 단계; (c) 선택된 F1 자손 식물체를 ALBEX1F 및 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 식물체와 교배하여 역교배 자손 식물체 종자를 생성하는 단계; (d) 역교배 자손 식물체 종자를 역교배 자손 식물체로 성장시키고 원하는 특성을 포함하는 역교배 자손 식물체를 선택하는 단계; 및 (e) 단계 (c) 및 (d)를 1회 이상 연속으로 반복하여 유사한 조건 하에서 성장시킨 ALBEX1F 및 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 본질적으로 모든 생리학적 및 형태학적 특징 및 원하는 특성을 포함하는 선택된 네 번째 또는 그 이상의 역교배 자손을 생성하는 단계를 포함하며, 식물체가 원하는 특성을 갖고, 원하는 특성이 제초제 저항성인, 원하는 특성을 담배 품종에 도입시키는 방법에 의해 생성된 담배 식물체를 포함한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 서열 1에 기재된 서열을 갖는 제1 담배 식물체를 확인하는 단계; 제1 담배 식물체를 제2 담배 식물체와 교배하고 F1 종자를 수집하는 단계; F1 종자로부터 성장된 식물체를 제3 담배 식물체에 대해 교배하는 단계; 및 서열 1에 기재된 서열에 동형접합성인 담배 식물체를 확인하는 단계를 포함하는, 감소된 니코틴 전환율을 갖는 담배 식물체의 생성 방법을 포함한다.
한 측면에서, 본 발명은 서열 1에 기재된 서열을 갖는 제1 담배 식물체를 확인하는 단계; 제1 담배 식물체를 제2 담배 식물체와 교배하고 F1 종자를 수집하는 단계; F1 종자로부터 성장된 식물체를 제3 담배 식물체에 대해 교배하는 단계; 및 서열 1에 기재된 서열에 동형접합성인 담배 식물체를 확인하는 단계를 포함하며, 여기서 상기 제2 담배 식물체는 서열 1에 기재된 서열을 갖는 것인, 감소된 니코틴 전환율을 갖는 담배 식물체의 생성 방법을 포함한다.
한 측면에서, 본 발명은 서열 1에 기재된 서열을 갖는 제1 담배 식물체를 확인하는 단계; 제1 담배 식물체를 제2 담배 식물체와 교배하고 F1 종자를 수집하는 단계; F1 종자로부터 성장된 식물체를 제3 담배 식물체에 대해 교배하는 단계; 및 서열 1에 기재된 서열에 동형접합성인 담배 식물체를 확인하는 단계를 포함하며, 여기서 상기 제2 담배 식물체는 서열 1에 기재된 서열을 가지지 않고, 상기 제3 담배 식물체는 서열 1에 기재된 서열을 갖는 담배 식물체인, 감소된 니코틴 전환율을 갖는 담배 식물체의 생성 방법을 포함한다.
한 측면에서, 본 발명은 서열 1에 기재된 서열을 갖는 제1 담배 식물체를 확인하는 단계; 제1 담배 식물체를 제2 담배 식물체와 교배하고 F1 종자를 수집하는 단계; F1 종자로부터 성장된 식물체를 제3 담배 식물체에 대해 교배하는 단계; 및 서열 1에 기재된 서열에 동형접합성인 담배 식물체를 확인하는 단계를 포함하며, 여기서 상기 제1 담배 식물체는 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 ALBEX1F 및 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있는 것인 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 식물체인, 감소된 니코틴 전환율을 갖는 담배 식물체의 생성 방법을 포함한다.
한 측면에서, 본 발명은 서열 1에 기재된 서열을 갖는 제1 담배 식물체를 확인하는 단계; 제1 담배 식물체를 제2 담배 식물체와 교배하고 F1 종자를 수집하는 단계; F1 종자로부터 성장된 식물체를 제3 담배 식물체에 대해 교배하는 단계; 및 서열 1에 기재된 서열에 동형접합성인 담배 식물체를 확인하는 단계를 포함하며, 여기서 상기 제1 담배 식물체는 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 ALBEX1F 및 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있는 것인 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 식물체이고, 상기 제3 담배 식물체는 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 ALBEX1F 및 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있는 것인 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 식물체인, 감소된 니코틴 전환율을 갖는 담배 식물체의 생성 방법을 포함한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 (a) 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 ALBEX1F 및 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있는 것인 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 식물체로부터 번식될 수 있는 조직을 수집하는 단계; 및 (b) 원하는 특성을 부여하는 트랜스진을 조직으로 도입시키는 단계를 포함하는, 추가의 원하는 특성을 갖는 ALBEX1F 및 ALBEX1MS로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 품종의 식물체의 생성 방법을 포함한다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 종자를 성장시킴으로써 생성된 담배 식물체를 트랜스진으로 형질전환시키는 것을 포함하며, 여기서 트랜스진은 이미다졸리논, 시클로헥산디온, 술포닐우레아, 글리포세이트, 글루포시네이트, 페녹시 프로프리온산, L-포스피노트리신, 트리아진 및 벤조니트릴로 이루어진 군으로부터 선택된 제초제에 대한 저항성을 부여하는 것인, 제초제 저항성 담배 식물체의 생성 방법을 포함한다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 종자를 성장시킴으로써 생성된 담배 식물체를 트랜스진으로 형질전환시키는 것을 포함하며, 여기서 트랜스진은 이미다졸리논, 시클로헥산디온, 술포닐우레아, 글리포세이트, 글루포시네이트, 페녹시 프로프리온산, L-포스피노트리신, 트리아진 및 벤조니트릴로 이루어진 군으로부터 선택된 제초제에 대한 저항성을 부여하는 것인, 제초제 저항성 담배 식물체의 생성 방법에 의해 생성된 제초제 저항성 담배 식물체를 포함한다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 종자에 의해 생성된 담배 식물체를 해충 또는 곤충 저항성을 부여하는 트랜스진으로 형질전환시키는 것을 포함하는, 해충 또는 곤충 저항성 담배 식물체의 생성 방법을 포함한다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 종자에 의해 생성된 담배 식물체를 해충 또는 곤충 저항성을 부여하는 트랜스진으로 형질전환시킴으로써 생성된 해충 또는 곤충 저항성 담배 식물체를 포함한다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 종자에 의해 생성된 담배 식물체를 해충 또는 곤충 저항성을 부여하는 트랜스진으로 형질전환시킴으로써 생성되며, 여기서 트랜스진은 바실러스 튜린기엔시스(Bacillus thuringiensis) (BT) 내독소를 코딩하는 것인, 해충 또는 곤충 저항성 담배 식물체를 포함한다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 종자를 성장시킴으로써 생성된 담배 식물체를 질병 저항성을 부여하는 트랜스진으로 형질전환시키는 것을 포함하는, 질병 저항성 담배 식물체의 생성 방법을 포함한다.
한 측면에서, 본 발명은 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 종자를 성장시킴으로써 생성된 담배 식물체를 질병 저항성을 부여하는 트랜스진으로 형질전환시킴으로써 생성된 질병 저항성 담배 식물체를 포함한다.
서열의 간단한 설명
서열 1은 cyp82e4 W329Stop 뉴클레오티드 서열을 기재한다.
서열 2는 cyp82e4 W329Stop 아미노산 서열을 기재한다.
서열 3은 CYP82E4 야생형 뉴클레오티드 서열을 기재한다.
서열 4는 CYP82E4 야생형 아미노산 서열을 기재한다.
ALBEX1F
본 발명은 ALBEX1F로부터의 담배 품종 및 그의 일부분을 포함하며, 상기 품종의 대표적인 샘플 종자는 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있다. 또 다른 측면에서, 본 발명은 ALBEX1F의 종자를 성장시킴으로써 생성된 담배 식물체 또는 그의 일부분을 포함한다. 본 발명의 식물체는 유사한 조건 하에서 성장시킨 ALBEX1F 품종의 본질적으로 모든 형태학적 및 생리학적 특징을 갖는 식물체를 포함할 수 있다.
방법에 의해 제한되지는 않지만, ALBEX1F는 돌연변이된 CYP84 유전자의 테네시(Tennessee) 90 (비 LC) ("TN 90") 품종 내 도입의 결과이다. 상기 유전자는 2006년 12월 15일자로 출원되고 2007년 8월 23일자로 US 2007/0199097로 공개된 미국 특허 출원 제11/611,782호에서 4246으로 언급된 돌연변이된 CYP82E4 유전자이다 (cyp82e4 W329Stop를 기재하는 서열 1은 그 전체내용이 본원에 참고로 포함됨). 돌연변이는 끝이 잘린(truncated) 단백질을 생성한다.
ALBEX1F는 반복친으로서 TN 90과의 5회 역교배 및 2회 자가생식에 의해 생성된다. ALBEX1F는 cyp82e4 W329Stop에 대해 동형접합성이다. 다시 한번, 임의의 특정 과학적 이론에 의해 제한되지는 않으나, cyp82e4 W329Stop는 열성이다. cyp82e4 W329Stop는 니코틴을 노르니코틴으로 전환시키는 능력이 감소되거나 제거된 단백질을 코딩한다. ALBEX1F는 TN 90과 95％ 이상, 97％ 이상, 98％ 이상, 또는 99％ 이상 유사한 유전적 배경을 갖는다. ALBEX1FC는 낮은 NNN을 나타내고 높은 NNN으로 전환되지 않는다.
ALBEX1MS
본 발명은 또한 ALBEX1MS로부터의 담배 품종 및 그의 일부분을 제공하며, 상기 품종의 대표적인 샘플 종자는 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있다. 본 발명은 또한 ALBEX1MS의 종자를 성장시킴으로써 생성된 담배 식물체 또는 그의 일부분을 포함한다. 본 발명의 식물체는 유사한 조건 하에서 성장시킨 ALBEX1MS 품종의 본질적으로 모든 형태학적 및 생리학적 특징을 갖는 식물체를 포함할 수 있다. 방법에 의해 제한되지는 않지만, ALBEX1MS는 BC5F1 TN 90으로부터의 cyp82e4 W329Stop 돌연변이 도입의 결과이고 TN 90 웅성 불임 ("MS")에 대한 웅성친으로서 교배되어 MS F1 자손 식물체를 생성한다.
BC5F1 × MS TN 90 교배의 MS F1 자손 식물체는 웅성 불임이다. 상기 MS F1 자손 식물체 (예를 들어, BC6F1 MS)를 cyp82e4 W329Stop 돌연변이에 대해 선별한다. 유사하게, BC5F1을 TN 90과 교배하여 가임성 BC6F1 식물체를 수득하며, 이를 돌연변이에 대해 선별한다. 돌연변이를 갖는 것으로 확인된 MS F1 자손 식물체는, 또한 돌연변이를 갖는 가임성 웅성친 BC6F1과의 후속 교배에서 자성친이다. 상기 교배의 자손 (예를 들어, BC7F1 MS 자손)은 웅성 불임이고, cyp82e4 W329Stop 돌연변이에 대한 동형접합성인 것은 유전자형에 의해 확인되어 ALBEX1MS로 명시된다. 계통을 유지하기 위해, ALBEX1MS 식물체 계통의 식물체를 ALBEX1F 식물체로 수분시킨다. ALBEX1MS는 TN 90과 95％ 이상, 97％ 이상, 98％ 이상, 또는 99％ 이상 유사한 유전적 배경을 갖는다. ALBEX1MS는 낮은 NNN을 나타내고 높은 NNN으로 전환되지 않는다.
기타 식물체
본원의 자손 식물체는 양친 식물을 교배함으로써 또는 편친 자가 생식에 의해 얻어지는 F1, F2, F3, F4 또는 그 이후 세대의 식물체일 수 있다.
본원에서 정의된 유사한 조건 하는 유사한 환경적 조건 하 또는 유사한 실험실 조건 하일 수 있다.
본 발명은 적어도 편친 담배 식물체가 ALBEX1F인 양친 담배 식물체를 교배하고 생성된 담배 종자를 수확함으로써 생성된 담배 종자를 포함한다. 한 측면에서, ALBEX1F는 자성친 식물체이다. 또 다른 측면에서, ALBEX1MS는 웅성친 식물체이다. 본 발명의 한 측면은 TN 90과 75％, 80％, 85％, 90％, 95％, 98％, 또는 99％ 초과의 유전적 배경을 공유하는 서열 1에 대한 cyp82e4 유전자 좌에서 동형접합성인 담배 식물체를 제공한다. 한 측면에서, 50％, 75％ 초과 또는 100％ 또는 그에 근접한 자손의 유전적 특징이 서열 1에 대한 cyp82e4 유전자 좌에서 동형접합성인 본 발명의 식물체에 의해 제공된다. 한 측면에서, 본 발명의 식물체는 TN 90과 95％ 이상, 97％ 이상, 98％ 이상, 또는 99％ 이상 유사한 유전적 배경을 갖는다. 또 다른 측면에서, 본 발명의 식물체는 낮은 NNN을 나타내고 높은 NNN으로 전환되지 않는다. 한 측면에서, 본 발명의 식물체는 시들음병(Fusarium wilt) 저항성인 자성친 또는 웅성친 식물체의 자손 식물체이다.
한 측면에서, 본 발명의 식물체는 적당히 높은 잠재 수율의 중-후기 성숙 변종이다. 또 다른 측면에서, 본 발명의 식물체는 넓은 범위의 중요한 작물학적 특징을 제공한다. 추가의 측면에서, 본 발명의 식물체는 역병에 대한 보통의 저항성, 푸른 곰팡이에 대한 약간의 저항성, 흑근부병 저항성, 및 통상의 바이러스 질병에 대한 저항성을 포함하는 특성 중 1개, 2개, 3개, 4개 또는 그 이상을 갖는다. 또 다른 측면에서, 본 발명의 식물체는 푸른 곰팡이 저항성, 및 역병 및 높은 근부병 저항성의 두 종류 다에 대한 4등급 저항성을 갖는다. 한 측면에서, 본 발명의 식물체, 예컨대 ALBEX1F 또는 ALBEX1MS는 시들음병 저항성이 결핍된다. 또 다른 측면에서, 본 발명의 식물체는 시들음병 저항성이다.
한 측면에서, 본 발명의 식물체는 유사한 조건 하에서 성장시킨 TN 90 또는 대부분의 다른 상업적 벌리 담배 품종과 비교하여 니코틴을 노르니코틴으로 전환시키는 능력이 감소되거나 제거되어 있다. 한 측면에서, 니코틴 전환 백분율은 TN90에서 관측되는 것의 75％, 70％, 60％, 50％ 또는 25％ 미만이다. ALBEX1F 및 ALBEX1MS를 비롯한 본 발명의 식물체에서 니코틴 전환율은 약 4％, 3-1％, 3-0.5％, 2-0.5％, 약 2％, 약 1％ 미만일 수 있다. 바람직한 측면에서, 니코틴 전환 백분율은 cyp82e4 W329Stop 돌연변이가 없는 TN 90에서 관측되는 것의 25％, 10％, 5％ 또는 2％ 미만이다. 한 측면에서, 본 발명의 담배 식물체의 니코틴 전환율은 3.5, 3.25, 3.0 또는 2.75％ 또는 그 이하이다. 또 다른 측면에서, 본 발명의 담배 식물체의 니코틴 전환율은 2.9, 2.8, 2.7, 2.6, 2.5, 2.4, 2.3, 2.2, 2.1, 2.0, 1.9, 1.8, 1.7, 1.6, 1.5, 1.4, 1.3, 1.2, 1.1, 1.0, 0.9, 0.8, 0.7, 0.6％ 또는 그 이하일 수 있다. 또 다른 측면에서, 니코틴 전환율은 0.5 내지 0.9％, 0.5 내지 1.5％, 0.5 내지 2.0％, 0.5 내지 2.5％, 0.5 내지 2.75％, 및 0.5 내지 3.0％일 수 있다. 또 다른 측면에서, 니코틴 전환율은 1.0 내지 1.5％, 1.0 내지 1.75％, 1.0 내지 2.0％, 1.0 내지 2.5％, 1.0 내지 2.75％, 및 1.0 내지 3.0％일 수 있다. 또 다른 측면에서, 본 발명의 식물체의 니코틴 전환율은 2.9, 2.75, 2.5, 2.25, 2.0, 1.9, 1.8, 1.7, 1.6, 1.5, 1.4, 1.3, 1.2, 1.1 또는 1.0％ 미만일 수 있다. 한 측면에서, 본 발명의 담배 식물체의 니코틴 전환율은 3.5, 3.25, 3.0 또는 2.75％ 또는 그 이하이다. 또 다른 측면에서, 본 발명의 담배 식물체의 니코틴 전환율은 2.9, 2.8, 2.7, 2.6, 2.5, 2.4, 2.3, 2.2, 2.1, 2.0, 1.9, 1.8, 1.7, 1.6, 1.5, 1.4, 1.3, 1.2, 1.1, 1.0, 0.9, 0.8, 0.7, 0.6％ 또는 그 이하일 수 있다. 또 다른 측면에서, 니코틴 전환율은 0.5 내지 0.9％, 0.5 내지 1.5％, 0.5 내지 2.0％, 0.5 내지 2.5％, 0.5 내지 2.75％, 및 0.5 내지 3.0％일 수 있다. 또 다른 측면에서, 니코틴 전환율은 1.0 내지 1.5％, 1.0 내지 1.75％, 1.0 내지 2.0％, 1.0 내지 2.5％, 1.0 내지 2.75％, 및 1.0 내지 3.0％일 수 있다. 또 다른 측면에서, 본 발명의 식물체의 니코틴 전환율은 2.9, 2.75, 2.5, 2.25, 2.0, 1.9, 1.8, 1.7, 1.6, 1.5, 1.4, 1.3, 1.2, 1.1 또는 1.0％ 미만일 수 있다.
또 다른 측면에서, 본 발명의 담배 식물체는 전형적으로 유사한 조건 하에서 성장시키고 가공한 TN 90 또는 대부분의 다른 상업적 벌리 담배 품종과 비교하여 약 0.10％ 건조 중량 미만의 감소된 양의 노르니코틴을 갖는다. 예를 들어, 이러한 식물체 내의 노르니코틴 함량은 1.2, 1.0, 0.7, 0.5, 0.4, 0.2, 0.1, 0.075, 0.05, 0.025, 0.01, 0.009, 0.0075, 0.005, 0.0025, 0.001, 0.0009, 0.00075, 0.0005, 0.00025, 0.0001％ 건조 중량일 수 있거나 검출되지 않을 수 있다. 또 다른 측면에서, 노르니코틴 함량은 1.2, 1.0, 0.7, 0.5, 0.4, 0.2, 0.1, 0.075, 0.05, 0.025, 0.01, 0.009, 0.0075, 0.005, 0.0025, 0.001, 0.0009, 0.00075, 0.0005, 0.00025, 0.0001％ 건조 중량 미만일 수 있다. 또 다른 측면에서, 이러한 식물체 내의 노르니코틴 함량은 1.2-1.0, 0.7-0.5, 0.4-0.2, 0.1-0.075, 0.05-0.025, 0.01-0.0075, 0.005-0.0025, 0.001-0.00075, 0.0005-0.00025, 또는 0.0005-0.0001％ 건조 중량일 수 있다. 본 발명의 식물체에서, 노르니코틴은 TN 90의 상업적 종자소집단(seedlot)과 비교하여 식물체 내 총 알칼로이드의 비교적 작은 백분율을 차지한다. 본 발명의 식물체 내의 노르니코틴은 총 알칼로이드 백분율의 2-1％, 3％ 미만, 약 2％, 약 1.5％, 약 1％, 또는 0.75％일 수 있다. 유사한 조건 하에서 성장시키고 가공한 TN 90 또는 대부분의 다른 상업적 벌리 담배 품종으로 제조된 제품과 비교하여 감소된 양의 니트로사민 함량 및/또는 보다 안정적으로 낮은 니코틴 전환율을 갖는 담배 제품을 본 발명의 식물체 및 식물체 일부분으로부터의 담배 식물체를 사용하여 제조할 수 있다. 담배 제품은 전형적으로 약 3 mg/g 미만의 감소된 양의 노르니코틴을 갖는다. 예를 들어, 이러한 제품 내 노르니코틴 함량은 3.0 mg/g, 2.5 mg/g, 2.0 mg/g, 1.5 mg/g, 1.0 mg/g, 750 μg/g, 500 pg/g, 250 pg/g, 100 pg/g, 75 pg/g, 50 pg/g, 25 pg/g, 10 pg/g, 7.0 pg/g, 5.0 pg/g, 4.0 pg/g, 2.0 pg/g, 1.0 pg/g, 0.5 pg/g, 0.4 pg/g, 0.2 pg/g, 0.1 pg/g, 0.05 pg/g, 0.01 pg/g일 수 있거나 검출되지 않을 수 있다. 담배 제품은 전형적으로 약 10 pg/g 미만의 감소된 양의 NNN을 갖는다. 예를 들어, 이러한 제품 내 NNN 함량은 약 10 pg/g, 7.0 pg/g, 5.0 pg/g, 4.0 pg/g, 2.0 pg/g, 1.0 pg/g, 0.5 pg/g, 0.4 pg/g, 0.2 pg/g, 0.1 pg/g, 0.05 pg/g, 0.01 pg/g일 수 있거나 검출되지 않을 수 있다. 본 발명의 식물체에 함유된 총 알칼로이드 함량에 대한 2차 알칼로이드의 백분율은 TN90의 상업적 종자소집단과 통계상 상이하지 않을 수도 있다.
2종의 근친교배 담배 변종 또는 2종의 잡종 담배 변종 사이의 차이는 통계적 접근법을 사용하여 평가할 수 있다. 통계적 분석은 평균값의 계산, 변동 요인의 통계적 유의성 결정, 및 적절한 분산 성분의 계산을 포함한다. 통계적 유의성을 결정하는 방법은 당업계에 공지되어 있다. 통계 소프트웨어, 예를 들어, SAS의 PROC GLM 함수가 이용가능하다. 유의성은 일반적으로 "p-값"으로 나타내어진다. 통계적으로 유의한 p-값은 0.10 미만이다. 바람직한 측면에서, p-값은 0.05보다 작거나 같다. 또 다른 측면에서, p-값은 0.04 이하, 0.03 이하, 0.02 이하이다. 또 다른 측면에서, 통계적으로 유의한 값은 0.01 미만이다. 또 다른 측면에서, 이는 0.009 미만, 0.008 미만, 0.007 미만, 0.006 미만, 0.005 미만, 0.004 미만, 0.003 미만, 0.002 미만 또는 0.001 미만일 수 있다.
cyp82e4 W329Stop 대립 유전자에 대해 동형접합성인 본 발명의 담배 식물체는 야생형 니코틴 데메틸라제 CYP82E4 유전자를 갖는 상응하는 대조군 TN 90 식물체보다 통계적으로 유의하게 낮은 복귀율을 갖는다. 또한, 동형접합성 CYP82E4 돌연변이 담배 식물체의 노르니코틴으로의 전환율 ％는 3％ 미만, 예를 들어, 1 내지 3％, 2 내지 3％, 1.8 내지 3.15％, 1.8 내지 2.0％, 또는 1.0 내지 2.0％이다. 본 발명의 식물체는 또한 2006년 12월 15일자로 출원되어 2007년 8월 23일자로 US 2007/0199097로 공개된, 그 전체내용이 본원에 참고로 포함되는 미국 특허 출원 제11/611,782호에 설명된 바와 같은 복귀율이 감소된 비-전환체일 수도 있다.
니코틴 및 노르니코틴은 당업계에 공지된 방법 (예를 들어, 기체 크로마토그래피)을 사용하여 에틸렌-처리된 잎에서 측정할 수 있다. 샘플 중 ％ 니코틴 탈메틸화는 샘플 중 측정된 노르니코틴의 수준을 니코틴 및 노르니코틴의 합한 수준으로 나누고, 100을 곱하여 계산한다. 본 발명의 식물체로부터의 샘플 중 니코틴 탈메틸화 ％는 TN 90의 상업적 종자소집단으로부터 성장시킨 개별 식물체로부터의 샘플의 50, 40, 30, 20, 10％이다.
한 측면에서, 본 발명의 담배 식물체의 USDA 품질 지수는 약 65이다. 또 다른 측면에서, 품질 지수는 적어도 약 55, 60, 62.5 또는 그 이상일 수 있다. 또 다른 측면에서, 본 발명의 담배 식물체의 품질 지수는 60-65, 60-65, 60-65, 60-70, 62.5-65, 62.5-70, 또는 65-70일 수 있다.
ALBEX1F 및 ALBEX1MS를 비롯한 본 발명의 식물체는 높은 잠재 수율 (예를 들어, 3000 lbs/A 초과), 중간 정도로 높은 잠재 수율 (예를 들어, 2200-3000 lbs/A), 및 보통의 잠재 수율 (예를 들어, 2000 lbs/A 미만)을 비롯한 임의의 수율을 가질 수 있다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 또한 종자에 대해 성장시킨 담배 식물체로부터 얻어지는 알칼로이드 중 노르니코틴이 감소된 ALBEX1F 또는 ALBEX1MS 식물체의 종자로부터 성장시킨 식물체, 뿐만 아니라 이러한 식물체로부터의 식물체 일부분 및 조직 배양물을 제공하며, 상기 품종의 대표적인 샘플 종자는 ATCC에 각각 ATCC 수탁번호 PTA-11716 및 PTA-11717로 기탁되어 있다.
본 발명의 한 측면은 ALBEX1F 및 ALBEX1MS 품종의 일부분을 제공한다. 예를 들어, ALBEX1F 및 ALBEX1MS 품종의 잎, 화분, 배아, 떡잎, 배축, 뿌리, 뿌리 끝, 꽃밥, 꽃, 배주, 싹, 줄기, 줄기대, 골속 및 삭, 조직, 캘러스, 세포 또는 원형질체를 포함하는 조직 배양물을 제공한다. 또 다른 측면에서, 본 발명은 ALBEX1F 및 ALBEX1MS 품종을 양친 또는 선조로서 갖는 잡종으로부터의 일부분, 및 ALBEX1F 및 ALBEX1MS 유래 담배 식물체를 제공한다. 또 다른 측면에서, 본 발명은 상기 식물체 및 조직 배양물의 (예를 들어, 통상적인 육종 또는 유전 공학 기법에 의해) 유전적으로 변형된 형태로부터의 일부분을 제공한다.
본 발명의 추가 측면은 담배를 포함하는 제품을 제공하며, 여기서 담배는 본 발명의 식물체로부터의 담배 및 그의 일부분을 추가로 포함한다. 본 발명의 다른 측면은 건조처리된 식물체 잎 및 다른 식물체 일부분을 제공한다. 따라서, 일부 측면에서, 건조처리된 식물체 일부분으로는 잎, 화분, 배주, 배아, 떡잎, 배축, 분열조직 세포, 원형질체, 뿌리, 뿌리 끝, 암술, 꽃밥, 꽃, 싹, 줄기, 꼬투리, 잎자루 등, 및 이들의 조합이 포함되나, 이에 제한되지는 않는다.
따라서, 일부 측면에서, 본 발명은 ALBEX1F로 명시된 담배 식물체의 잎을 포함하는 건조처리된 담배를 제공하며, 상기 품종의 대표적인 샘플 종자는 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있다. 또 다른 측면에서, 본 발명은 ALBEX1MS로 명시된 담배 식물체의 잎을 포함하는 건조처리된 담배를 제공하며, 상기 품종의 대표적인 샘플 종자는 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있다.
따라서, 일부 측면에서, 본 발명은 ALBEX1F로 명시된 담배 식물체의 줄기를 포함하는 건조처리된 담배를 제공하며, 상기 품종의 대표적인 샘플 종자는 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있다. 또 다른 측면에서, 본 발명은 ALBEX1MS로 명시된 담배 식물체의 줄기를 포함하는 건조처리된 담배를 제공하며, 상기 품종의 대표적인 샘플 종자는 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 ALBEX1F 및 ALBEX1MS로 명시된 담배 식물체의 잎 및 줄기를 포함하는 건조처리된 담배를 제공하며, 이들 품종의 대표적인 샘플 종자는 ATCC에 각각 ATCC 수탁번호 PTA-11716 및 PTA-11717로 기탁되어 있다.
본 발명은 또한 본 발명의 ALBEX1F 또는 ALBEX1MS 종자 또는 다른 종자의 용기를 제공하며, 여기서 50％ 초과의 종자로부터 성장시킨 담배 식물체로부터 수득된 알칼로이드에는 노르니코틴이 감소되어 있다. 또 다른 측면에서, 용기 중의 55％, 60％, 65％, 70％, 75％, 80％, 85％, 90％, 95％ 초과의 종자로부터 성장시킨 본 발명의 ALBEX1F 또는 ALBEX1MS 식물체 또는 다른 식물체로부터 수득된 알칼로이드에는 노르니코틴이 감소되어 있으며, 이들 품종의 대표적인 샘플 종자는 ATCC에 각각 ATCC 수탁번호 PTA-11716 및 PTA-11717로 기탁되어 있다.
본 발명의 ALBEX1F 또는 ALBEX1MS 종자 또는 다른 종자의 용기는 임의의 수, 중량 또는 부피의 종자를 함유할 수 있다. 예를 들어, 용기는 적어도 약 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1500, 2000, 2500, 3000, 3500, 4000 또는 그 이상을 넘는 종자를 함유할 수 있다. 별법으로, 용기는 적어도 약 1 온스, 5 온스, 10 온스, 1 파운드, 2 파운드, 3 파운드, 4 파운드, 5 파운드 또는 그 이상을 넘는 종자를 함유할 수 있다. ALBEX1F 및 ALBEX1MS 품종의 대표적인 샘플 종자는 ATCC에 각각 ATCC 수탁번호 PTA-11716 및 PTA-11717로 기탁되어 있다.
본 발명의 ALBEX1F 또는 ALBEX1MS 종자 또는 다른 종자의 용기는 당업계에서 입수가능한 임의의 용기일 수 있다. 비제한적인 예로서, 용기는 박스, 봉투, 패킷(packet), 파우치, 테이프 롤, 들통(pail), 포일, 또는 튜브일 수 있으며, 이들 품종의 대표적인 샘플 종자는 ATCC에 기탁되어 있다. ALBEX1F 및 ALBEX1MS 품종의 대표적인 샘플 종자는 ATCC에 각각 ATCC 수탁번호 PTA-11716 및 PTA-11717로 기탁되어 있다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 또한 본 발명의 ALBEX1F 또는 ALBEX1MS 종자 또는 다른 종자의 50％ 초과에서 노르니코틴이 감소되어 있는 ALBEX1F 또는 ALBEX1MS의 용기를 제공하며, 이들 품종의 대표적인 샘플 종자는 ATCC에 기탁되어 있다. ALBEX1F 및 ALBEX1MS 품종의 대표적인 샘플 종자는 ATCC에 각각 ATCC 수탁번호 PTA-11716 및 PTA-11717로 기탁되어 있다.
한 측면에서, 본 발명은 종자로부터 성장시킨 식물체가 웅성 불임인 본 발명의 ALBEX1F 또는 ALBEX1MS 식물체 또는 다른 식물체의 종자를 제공한다. ALBEX1F 및 ALBEX1MS 품종의 대표적인 샘플 종자는 ATCC에 각각 ATCC 수탁번호 PTA-11716 및 PTA-11717로 기탁되어 있다.
본 발명의 담배 계통, 변종 또는 잡종으로부터 수득된 담배 재료는 제한 없이 궐련 제품 (예를 들어, 궐련 및 비디(bidi) 궐련), 엽궐련 제품 (예를 들어, 엽궐련 랩핑 담배 및 가는 엽궐련), 파이프 담배 제품, 무연 궐련 제품, 무연 담배 제품 (예를 들어, 습윤 코담배, 건조 코담배 및 씹는 담배), 필름, 씹을 수 있는 형태, 탭(tab), 성형 부분, 겔, 소비가능한 단위, 불용성 매트릭스, 중공형 등을 비롯한 담배 제품을 제조하는데 사용될 수 있다. 예를 들어, 그 전체내용이 본원에 참고로 포함되는 미국 특허 공개 번호 US 2006/0191548을 참조한다.
본 발명의 식물체로부터 유도된 담배 제품에는 또한 궐련 및 다른 흡연 제품, 특히 필터 성분을 포함하는 흡연 제품이 포함되며, 흡연가능한 물질의 막대는 담배 블렌드 내에 건조처리된 담배를 포함한다. 한 측면에서, 담배 제품은 파이프 담배, 엽궐련 담배, 궐련 담배, 씹는 담배, 잎 담배, 썬 담배 및 살담배일 수 있다.
한 측면에서, 본 발명의 담배 제품은 블렌딩된 담배 제품일 수 있다. 본 발명의 다른 측면에서, 본 발명의 담배 제품은 유사한 조건 하에서 성장시키고 가공한 TN 90 또는 대부분의 다른 상업적 벌리 담배 품종으로 제조된 제품에 비하여 니코틴이 감소된 담배 제품일 수 있다. 또 다른 측면에서, 본 발명의 담배 제품은 유사한 조건 하에서 성장시키고 가공한 TN 90 또는 대부분의 다른 상업적 벌리 담배 품종으로 제조된 제품에 비하여 감소된 니코틴 함량을 갖는 블렌딩된 담배 제품일 수 있다. 따라서, 본 발명의 담배 제품은 유사한 조건 하에서 성장시키고 가공한 TN 90 또는 대부분의 다른 상업적 벌리 담배 품종으로 제조된 제품에 비하여 니코틴이 감소된 블렌딩된 담배 제품일 수 있다. 담배 제품 재료는 본 발명으로부터의 담배 재료의 블렌드를 포함하며, 여기서 블렌드는 담배 재료의 건조 중량을 기준으로 약 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 또는 95 중량％ 이상의 건조처리된 담배를 포함한다. US 2008/0245377의 전체내용이 블렌드 혼합물에 대해 본원에 참고로 포함된다.
한 측면에서, 유사한 조건 하에서 성장시키고 가공한 TN 90 또는 대부분의 다른 상업적 벌리 담배 품종으로 제조된 제품에 비하여 감소된 양의 니트로사민 함량 및/또는 보다 안정적으로 낮은 니코틴 전환율을 갖는 담배 제품이, 본 발명의 식물체 및 식물체 일부분으로부터의 담배 식물체 재료를 사용하여 제조될 수 있다. 담배 제품은 전형적으로 약 3 mg/g 미만의 감소된 양의 노르니코틴을 갖는다. 예를 들어, 이러한 제품 중 노르니코틴 함량은 3.0 mg/g, 2.5 mg/g, 2.0 mg/g, 1.5 mg/g, 1.0 mg/g, 750 μg/g, 500 pg/g, 250 pg/g, 100 pg/g, 75 pg/g, 50 pg/g, 25 pg/g, 10 pg/g, 7.0 pg/g, 5.0 pg/g, 4.0 pg/g, 2.0 pg/g, 1.0 pg/g, 0.5 pg/g, 0.4 pg/g, 0.2 pg/g, 0.1 pg/g, 0.05 pg/g, 0.01 pg/g일 수 있거나 검출되지 않을 수 있다. 담배 제품은 전형적으로 약 10 pg/g 미만의 감소된 양의 NNN을 갖는다. 예를 들어, 이러한 제품 중 노르니코틴 함량은 약 10 pg/g, 7.0 pg/g, 5.0 pg/g, 4.0 pg/g, 2.0 pg/g, 1.0 pg/g, 0.5 pg/g, 0.4 pg/g, 0.2 pg/g, 0.1 pg/g, 0.05 pg/g, 0.01 pg/g일 수 있거나 검출되지 않을 수 있다. 본 발명의 식물체에 함유된 총 알칼로이드 함량에 대한 2차 알칼로이드의 백분율은 TN90 LC의 상업적 종자소집단과 통계적으로 상이하지 않을 수도 있다.
cyp82e4 W329Stop 대립유전자를 함유하는 ALBEX1F 또는 ALBEX1MS로 명시된 본 발명의 담배 식물체는 유용한 계통, 품종, 변종, 자손, 근친교배체 및 잡종을 생성하기 위한 식물체 육종 프로그램에서 사용될 수 있다. 따라서, 일부 측면에서, cyp82e4 W329Stop 대립유전자를 함유하는 F1, F2, F3 또는 그 이후 세대 담배 식물체를 제2 니코티아나 식물체와 교배하고, cyp82e4 W329Stop 대립유전자가 존재하는 교배 자손을 확인한다. 제2 니코티아나 식물체는, 임의로는 하기 언급된 제초제 저항성과 같은 추가의 바람직한 특성을 갖는 ALBEX1F 또는 ALBEX1MS일 것임을 인지할 것이다. 또한, 제2 TN90 또는 TN90 LC 니코티아나 식물체도 cyp82e4 W329Stop 대립유전자를 함유할 것임을 인지할 것이다.
또 다른 측면에서, 본 발명의 방법은 본 발명의 웅성 불임 잡종과 같은 본 발명의 자손의 생성에서 사용될 수 있는 화분 공여체와 웅성 불임 화분 수용체의 수분 또는 자가-수분을 추가로 포함한다. 웅성 불임 화분 수용 식물체 또는 화분 공여 식물체는 cyp82e4 W329Stop와 같은 니코틴 디메틸라제 유전자 좌에서 1개 이상의 돌연변이 대립유전자를 갖는다. 한 측면에서, 니코틴 디메틸라제 유전자 좌에서의 대립유전자는 식물체를 cyp82e4 W329Stop에 대해 동형접합성으로 만드는 돌연변이 대립유전자이다.
육종은 공지된 임의의 절차를 통해 수행될 수 있다. DNA 핑거프린팅, SNP 또는 유사한 기법이 니코틴 디메틸라제 유전자의 돌연변이 대립유전자를 다른 담배로 전달하거나 육종하는 마커-보조 선택 (MAS) 육종 프로그램에서 사용될 수 있다. 예를 들어, 육종자는 농경학적으로 바람직한 유전자형을 갖는 cyp82e4 W329Stop 대립유전자를 함유하는 유전자형의 교잡으로부터 분리 집단을 생성할 수 있다. F2 또는 역교배 세대에서의 식물체를 당업계에 공지되거나 본원에 열거된 기법 중 하나를 사용하여, cyp82e4 W329Stop 대립유전자 또는 이들의 단편으로부터 개발한 마커를 사용하여 선별할 수 있다. cyp82e4 W329Stop 대립유전자를 보유하는 것으로 확인된 식물체를 역교배하거나 자가-수분하여 선별할 제2 집단을 생성할 수 있다. 예상되는 유전 패턴 또는 사용되는 MAS 기법에 따라, 원하는 개별 식물체의 확인을 돕기 위해 각각의 역교배 사이클 전에 선택된 식물체를 자가-수분하는 것이 필요할 수도 있다. 반복친의 원하는 표현형이 회복될 때까지 역교배 또는 다른 육종 절차를 반복할 수 있다. 본 발명에서 반복친은 ALBEX1F 또는 TN 90일 수 있다. 다른 육종 기법은, 예를 들어 그 전체내용이 본원에 참고로 포함되는 문헌 [Wernsman, E. A., and Rufty, R. C. 1987. Chapter Seventeen. Tobacco. Pages 669-698 In: Cultivar Development. Crop Species. W. H. Fehr (ed.), MacMillan Publishing Go., Inc., New York, N.Y.]에서 찾을 수 있다.
니코티아나 타바쿰과 육종 화합성을 나타내는 니코티아나 종에는 니코티아나 암플렉시카울리스(Nicotiana amplexicaulis) PI 271989; 니코티아나 벤타미아 나(Nicotiana benthamiana) PI 555478; 니코티아나 비겔로비(Nicotiana bigelovii) PI 555485; 니코티아나 뎁네이(Nicotiana debneyi); 니코티아나 엑셀시어(Nicotiana excelsior) PI 224063; 니코티아나 글루티노사(Nicotiana glutinosa) PI 555507; 니코티아나 굿스피디(Nicotiana goodspeedii) PI 241012; 니코티아나 고쎄이(Nicotiana gossei) PI 230953; 니코티아나 헤스페리스(Nicotiana hesperis) PI 271991; 니코티아나 나이티아나(Nicotiana knightiana) PI 555527; 니코티아나 마리티마(Nicotiana maritima) PI 555535; 니코티아나 메갈로시폰(Nicotiana megalosiphon) PI 555536; 니코티아나 누디카울리스(Nicotiana nudicaulis) PI 555540; 니코티아나 패니큘라타(Nicotiana paniculata) PI 555545; 니코티아나 플럼바기니폴리아(Nicotiana plumbaginifolia) PI 555548; 니코티아나 레판다(Nicotiana repanda) PI 555552; 니코티아나 루스티카(Nicotiana rustica); 니코티아나 수아베올렌스 PI 230960; 니코티아나 실베스트리스(Nicotiana sylvestris) PI 555569; 니코티아나 토멘토사(Nicotiana tomentosa) PI 266379; 니코티아나 토멘토시포르미스(Nicotiana tomentosiformis); 및 니코티아나 트리고노필라(Nicotiana trigonophylla) PI 555572가 포함된다. 또한, 그 전체내용이 본원에 참고로 포함되는 문헌 [Compendium of Tobacco Diseases published by American Phytopathology Society] 또는 [The Genus Nicotiana Illustrated, published by Japan Tobacco Inc]를 참조한다.
본원에 기재된 돌연변이 담배 식물체를 사용하는 식물체 육종 프로그램의 결과에는 유용한 계통, 품종, 변종, 자손, 근친교배체, 및 잡종이 포함된다. 본원에서 사용되는 바와 같은 용어 '변종'은 동일한 종의 다른 식물체와 이들을 구별하는 일정한 특징을 공유하는 식물체의 집단을 지칭한다. 변종은 항상 그런 것은 아니지만 종종 상업적으로 시판된다. 변종은 하나 이상의 구별되는 특성을 보유하는 한편, 변종 내의 개체 사이에서 매우 적은 전반적인 변이를 또한 특징으로 한다. '순계' 변종은 조직 또는 세포 배양 기법을 사용하여 편친으로부터 여러 세대의 자가-수분 및 선택 또는 영양 번식에 의해 생성될 수 있다. 변종은 또 다른 계통 또는 변종으로부터 본질적으로 유도될 수도 있다. 신 식물 변종의 보호를 위한 국제 조약(International Convention for the Protection of New Varieties of Plants (1961년 12월 2일, 제네바에서 1972년 11월 10일, 1978년 10월 23일 및 1991년 3월 19일에 개정됨))에 의해 정의된 바와 같이, a) 초기 변종의 유전자형 또는 이들의 조합으로부터 생성되는 본질적인 특징의 발현을 유지하면서, 초기 변종으로부터 주로 유도되는 변종으로부터, 또는 초기 변종으로부터 주로 유도되는 경우; b) 초기 변종과 분명히 구별가능한 경우; 및 c) 유도의 작용으로 인한 차이를 제외하고, 초기 변종의 유전자형 또는 이들의 조합으로부터 생성된 본질적인 특징의 발현에서 초기 변종에 일치하는 경우, 변종은 초기 변종으로부터 '본질적으로 유도된' 것이다. 본질적으로 유도된 변종은, 예를 들어 천연 또는 유발된 돌연변이, 체세포 변이체, 초기 변종, 역교배 또는 형질전환의 식물체로부터의 변이 개체의 선택에 의해 얻어질 수 있다. 변종과 구별되는 '계통'은 매우 빈번하게, 예를 들어 식물체 연구에서 비상업적으로 사용되는 식물체의 군을 가리킨다. 계통은 전형적으로 개체 사이에서 하나 이상의 중요한 특성에 대해 전반적인 변형을 거의 나타내지 않지만, 다른 특성에 대해서는 개체 사이에서 일부 변이가 존재할 수도 있다.
잡종 담배 변종은 제1 변종의 자성친 식물체 (즉, 종자친)의 자가-수분을 방지하고, 제2 변종의 웅성친 식물체로부터의 화분을 자성친 식물체로 수정시키고, F1 잡종 종자를 자성 식물체 상에 형성시킴으로써 생성될 수 있다. 자성 식물체의 자가-수분은 꽃 발생의 초기 단계에서 꽃을 무력화시킴으로써 방지할 수 있다. 별법으로, 화분 형성은 웅성 불임의 형태를 사용하여 자성친 식물체 상에서 방지될 수 있다. 예를 들어, 웅성 불임은 웅성 불임 (MS), 또는 트랜스제닉 웅성 불임에 의해 생성될 수 있으며, 여기서 트랜스진은 소포자형성 및/또는 화분 형성, 또는 자가-비화합성을 억제한다. MS를 함유하는 자성친 식물체가 특히 유용하다. 자성친 식물체가 MS인 측면에서는, 화분을 웅성 가임 식물체로부터 수확하여 MS 자성친 식물체의 암술머리에 손으로 적용하고, 생성된 F1 종자를 수확한다.
식물체는 단일-교배 담배 F1 잡종을 형성하는 데 사용될 수 있다. 이러한 측면에서는, 변종친 식물체를 실질적으로 균일한 인접 집단으로서 성장시켜 웅성친 식물체로부터 자성친 식물체로의 천연 타화-수분을 촉진시킬 수 있다. 자성친 식물체 상에 형성된 F1 종자는 통상의 수단에 의해 선택적으로 수확된다. 또한, 양친 식물체 변종을 대량으로 성장시켜, 자가-수분의 결과로서 자성친 상에 형성된 F1 잡종 종자 및 웅성친 상에 형성된 종자의 블렌드를 수확할 수도 있다. 별법으로, 단일-교배 F1 잡종을 자성친으로 사용하여 상이한 웅성친과 교배시키는 3방향 교배를 수행할 수 있다. 또 다른 별법으로서, 상이한 두 단일-교배의 F1 자손을 자가 교배시켜 이중-교배 잡종을 생성시킬 수 있다. 자가-비화합성은 이중-교배 잡종의 형성 시 자성친의 자가-수분을 방지하는 데 특히 유리하게 사용될 수 있다.
성공적인 교배는, 가임이고 cyp82e4 W329Stop 대립유전자를 가지며 원하는 경우 ALBEX1F 또는 TN 90과 같은 양친 중 하나와 역교배시킬 수 있는 F1 식물체를 생성시킨다. 일부 측면에서는, F2 세대에서의 식물체 집단을 cyp82e4 W329Stop 대립유전자에 대해 선별한다. 선택된 식물체는 양친 중 하나와 교배시킬 수 있고, 제1 역교배 (BC1) 세대 식물체는 자가-수분시켜, 변이체 니코틴 디메틸라제 유전자 발현 (예를 들어, 무효 형태의 니코틴 디메틸라제 유전자)에 대해 다시 선별되는 BC1 F2 집단을 생성시킨다. 최종 선별 과정이 반복친과 상당히 유사한 가임 식물체를 생성할 때까지 역교배, 자가-수분 및 선별의 과정을 예를 들어 4회 이상 반복한다. 원하는 경우, 이러한 식물체를 자가-수분하고, 이어서 자손을 다시 선별하여 식물체가 ALBEX1F와 동일하게 낮은 니코틴 전환 표현형을 나타내는지 확인한다. 예를 들어 필드 검사, 니코틴 디메틸라제에 대한 무효 상태의 확인, 알칼로이드의 수준을 측정하기 위한 건조처리된 잎의 화학적 분석 및/또는 노르니코틴 대 니코틴+노르니코틴의 비율을 측정하기 위한 건조처리된 잎의 화학적 분석을 비롯한 표준 방법을 사용하여 선택된 식물체의 육종자의 종자를 생성시킨다.
한 측면에서, F1 자손은 웅성 불임인 F1 자손을 생성하기 위한 ALBEX1F와 ALBEX1MS 사이의 교배의 결과이다. 웅성 불임 담배 식물체는 당해 분야의 공지된 임의의 방법에 의해 생성될 수 있다. 웅성 불임 담배를 생성하는 방법은 문헌 [Wernsman, E. A., and Rufty, R. C. 1987. Chapter Seventeen. Tobacco. Pages 669-698 In: Cultivar Development. Crop Species. W. H. Fehr (ed.), MacMillan Publishing Go., Inc., New York, N. Y. 761 pp]에 기재되어 있다.
본 발명은 추가로 ALBEX1F 및 ALBEX1MS 품종 중 하나를 자가로 또는 상이한 담배 계통과 교배함으로써 담배 식물체를 생성하는 방법을 제공한다. 본 발명은 추가로 ALBEX1F 및 ALBEX1MS 품종의 식물체와 제2 담배 식물체를 교배하고 자손 종자를 성장시켜 ALBEX1F- 또는 ALBEX1MS-유래 담배 식물체를 수득함으로써 다른 담배 품종을 생성하거나 ALBEX1F 및 ALBEX1MS 품종으로부터 유래한 계통을 육종하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 추가의 측면은 본 발명의 품종과 하나 이상의 트랜스진을 함유하는 제2 품종을 교배시켜, 교배로부터 생성된 자손의 유전 물질이 하나 이상의 조절 요소에 임의로 작동적으로 연결된 트랜스진(들)을 포함하도록 자손을 생성시키는 것을 포함하는, 유전 물질에 하나 이상의 트랜스진을 함유하는 담배 식물체를 위한 방법을 제공한다. 한 측면에서, 제2 품종은 하나 이상의 트랜스진으로 형질전환시킨 ALBEX1F 또는 ALBEX1MS 품종으로부터 유래한 식물체일 수 있다.
본 발명은 추가로 ALBEX1F 및 ALBEX1MS 품종의 식물체, 이의 잡종 및 자손의 영양 번식을 제공한다. 한 측면에서, 본 발명은 ALBEX1F 및 ALBEX1MS 품종의 식물체로부터 번식될 수 있는 조직을 수집하고, 상기 조직을 재배하여 증식된 싹을 수득하고, 증식된 싹을 뿌리 내리게 하여 뿌리가 내린 소식물체를 수득하는 것을 포함하는, 담배 품종의 식물체의 영양 번식 방법을 제공한다. 또 다른 측면에서, 식물체 조직은 ALBEX1F 및 ALBEX1MS 품종의 식물체의 F1 잡종으로부터 수집할 수 있다. 한 측면에서, 식물체 조직은 ALBEX1F 및 ALBEX1MS 품종의 식물체를 육종시킴으로써 수득되는 F2, F3, F4 또는 그 이후의 자손 식물체로부터 수집할 수 있다.
니코틴 데메틸라제 유전자에서의 돌연변이를 포함하는 식물체는 돌연변이를 일으킨 식물체 물질, 또는 이의 자손을 선택 또는 선별함으로써 확인할 수 있다. 이러한 선별 및 선택 방법론은 당업자에게 공지되어 있다. 선별 및 선택 방법론의 예는 서던 분석, 폴리뉴클레오티드의 검출을 위한 PCR 증폭, 노던 블롯, RNase 보호, 프라이머-연장, RNA 전사체 검출을 위한 RT-PCR 증폭, 폴리펩티드 및 폴리뉴클레오티드의 효소 또는 리보자임 활성을 검출하기 위한 효소 분석, 및 단백질 겔 전기영동, 웨스턴 블롯, 면역침강, 및 폴리펩티드를 검출하기 위한 효소-연결 면역분석을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 또한, 동일 계(in situ) 혼성화, 효소 염색 및 면역염색과 같은 다른 기술을 폴리펩티드 및/또는 폴리뉴클레오티드의 존재 또는 발현을 검출하는데 사용할 수 있다. 참고된 모든 기술을 수행하는 방법은 공지되어 있다.
ALBEX1F 및 ALBEX1MS를 포함하는 본 발명의 담배 식물체는 당업계에 공지되어 있는 기술을 사용하여 유전적 작제물 또는 트랜스진에 의해 형질전환될 수 있는 것으로 이해된다. 제한 없이, 원하는 특성의 예는 제초제 저항성, 해충 저항성, 질병 저항성, 고수율, 고등급 인덱스, 건조처리성; 건조처리 품질; 기계적 수확성, 보유 능력; 잎 품질; 높이, 식물체 성숙 (예를 들어, 조기 성숙, 조기 내지 중기 성숙, 중기 성숙, 중기 내지 후기 성숙, 또는 후기 성숙); 줄기대 크기 (예를 들어, 작거나, 중간이거나, 또는 큰 줄기대); 또는 식물체 당 잎의 수 (예를 들어, 잎의 수가 적거나 (예를 들어, 5 내지 10개 잎), 중간이거나 (예를 들어, 11 내지 15개 잎), 또는 많음 (예를 들어, 16 내지 21개)), 또는 임의의 조합이다. 본 발명의 임의의 식물체는 조직 배양, 재생, 형질전환, 또는 이들 중 임의의 조합에 대한 기초로 사용될 수 있다. 한 측면에서, 조직 배양, 형질전환, 또는 둘 다에 의해 유도된 본 발명의 식물체는 유사한 조건 하에서 성장시킨 ALBEX1F 또는 ALBEX1MS 품종의 본질적으로 모든 형태학적 및 생리학적 특징을 갖는다.
이제까지 본 발명을 일반적으로 설명하였고, 이는 예시로서 제공되며 명시되지 않는 한 본 발명을 한정하고자 하는 것이 아닌 하기 실시예의 참고를 통하여 더 쉽게 이해될 것이다.
실시예
실시예 1
TN 90 배경에 대한 동형접합성 cyp82e4 W329Stop 돌연변이 식물체의 육종
ALBEX1F는 니코틴 데메틸라제 효소를 암호화하는 것으로 이전에 기록되어 있는 유전자인 cyp82e4에 도입된 유해한 돌연변이를 보유하고 있는 벌리 담배 품종 TN 90의 역교배-유래 버전이다. ALBEX1F를 생성시키기 위해, TN 90의 산업적 종자소집단으로부터 성장시킨 개별 식물체를 선택하여 온실에서 처음으로 식물체 4246-8과 교배시켰다. 4246-8은 cyp82e4 W329Stop 돌연변이에 대해 이형접합성인 담배 품종이다. 다수의 F1 식물체를 cyp82e4 W329Stop 돌연변이의 존재에 대해 선별하였다. 개별적인 F1 식물체를 선택하여 온실에서 TN 90에 대해 역교배시켜 BC1F1 자손을 생성시켰다. 다수의 BC1F1 자손을 선별하여 cyp82e4 W329Stop 돌연변이에 대해 이형접합성인 개별 식물체를 확인하였다. 선택된 이형접합성 BC1F1 식물체를 온실에서 TN 90에 대해 역교배시켜 BC2F1 종자를 생성시켰다. 다수의 BC2F1 식물체를 cyp82e4 W329Stop 돌연변이의 존재에 대해 선별하여, 이후의 역교배 육종 라운드를 위한 이형접합성 자손 식물체를 확인하였다. 이러한 역교배 절차를 사용하여, cyp82e4 W329Stop 돌연변이를 갖는 개별적인 이형접합성 식물체를 BC3F1, BC4F1 및 BC5F1 자손에서 확인하였다.
cyp82e4 W329Stop 돌연변이에 대해 동형접합성인 식물체를 생성시키기 위해, BC5F1 자손 식물체를 cyp82e4 W329Stop 돌연변이에 대해 선별하여 이형접합성 식물체를 확인하였다. cyp82e4 W329Stop 돌연변이에 대해 이형접합성인 개별 식물체를 자가-수분하여 BC5F2 종자를 생성시켰다. 다수의 BC5F2 자손을 유전자형 검사하여 cyp82e4 W329Stop 돌연변이에 대해 동형접합성인 개체를 확인하였다. 4개의 개별적인 BC5F2 자손 식물체를 자가-수분하여 4개의 BC5F3 자손 계통을 생성시켰다. BC5F3은 CYP82E4 W329Stop 돌연변이에 대해 동형접합성이었다.
실시예 2
웅성 불임 계통의 생성
웅성 불임 (MS) 계통을 생성시키기 위해, cyp82e4 W329Stop 돌연변이에 대해 이형접합성인 (상기에 기재된) 실시예 1에서 생성시킨 BC5F1의 자손 식물체를 선택하여 MS TN 90에 대한 화분친으로서 교배시켰다. BC5F1 × MS TN 90 교배의 MS F1 자손 식물체는 웅성 불임이었다. 이러한 MS F1 자손 식물체 (예를 들어, BC6F1 MS)를 cyp82e4 W329Stop 돌연변이에 대해 선별하였다. 유사하게, BC5F1을 TN 90과 교배시켜 가임성 BC6F1 식물체를 수득하였고, 이를 돌연변이에 대해 선별하였다. 돌연변이를 갖는 것으로 확인된 MS F1 자손 식물체는, 또한 돌연변이를 갖는 가임성 웅성친 BC6F1과의 후속 교배에서 자성친이다. 상기 교배의 자손 (예를 들어, BC7F1 MS 자손)은 웅성 불임이고 cyp82e4 W329Stop 돌연변이에 대한 동형접합성인 것은 유전자형에 의해 확인되어 ALBEX1MS로 명시되었다. 계통을 유지하기 위해, ALBEX1MS 식물체 계통의 식물체를 ALBEX1F 식물체로 수분시켰다.
실시예 3
ALBEX1MS 잡종의 필드 검사
2010년 동안 블랙스톤 필드 연구 장소에서 건조처리된 잎 화학, 수율 및 물리적 품질의 평가를 위한 3회 반복의 무작위 완전 블록 디자인에서 4개의 ALBEX1MS 자손 계통으로부터의 식물체를 성장시켰다. 각각의 반복된 블록은 플롯당 25개의 식물체를 갖는 2열 플롯이다. 식물체가 성숙하면 줄기대를 잘라 자연풍 건조처리하고 이전의 USDA 담배 등급분류기에 의해 평가한다. 에이커 당 수율을 측정하는 데 플롯 중량을 사용하였다. 12개의 상이한 검사 식물체의 맨 위로부터 네 번째 잎을 수집하여 각 플롯으로부터의 50그램 복합 잎 샘플을 제작하였다. 복합 샘플을 기체 크로마토그래피에 의해 니코틴, 노르니코틴, 아나타빈 및 아나바신의 퍼센트에 대해 분석하였다.
ALBEX1MS 잡종의 분석
기체 크로마토그래피 알칼로이드 분석의 결과를 표 1에 제시하였다. 기체 크로마토그래피 결과는 JMP 통계 소프트웨어를 사용하여 분석하고 일원 분산분석을 수행하였다. ALBEX1MS 잡종은 니코틴, 노르니코틴, 아나바신, 아나타빈, 니코틴 전환율, 총 알칼로이드에 대한 제2 알칼로이드의 비율, 수율 또는 건조처리된 잎 품질의 차이가 유의하게 상이하지 않은 것으로 밝혀졌다.
Figure pct00001
기탁 정보
상기 개시되고 첨부한 특허청구범위에서 언급된 소유한 근친교배 식물체 계통의 최소 2500개 종자가 버지니아주 20110 마나사스 10801 유니버시티 불러바드에 소재한 아메리칸 타입 컬쳐 컬렉션 (ATCC)에 기탁되었다. 알트리아 클라이언트 서비시스 인코포레이티드를 대신한 ALBEX1F 및 ALBEX1MS에 대한 기탁일은 둘 다에 대해 2011년 2월 28일이었다. 각각의 변종에 대한 2500개 종자의 기탁이 본 출원의 출원일 전 이래로 유지되어 온 동일한 기탁으로부터 취해졌다. 특허권 발급 시에는, 기탁에 대한 모든 제한이 없어질 것이고, 기탁은 37 C.F.R. § 1.801-1.809의 모든 요건을 만족시킨 것으로 여겨진다. 근친교배 계통 ALBEX1F 및 ALBEX1MS에 대한 ATCC 수탁번호는 각각 PTA-11716 및 PTA-11717이다. 이들 기탁은 30년, 또는 가장 최근의 요청 후 5년의 기간, 또는 특허 유효 기간 중에서 어느 기간이든 더 긴 기간 동안 기탁기관에서 유지될 것이며, 이 기간 동안 필요에 따라 교체될 것이다. 본 출원인은 본 특허 하에 또는 식물품종보호법(Plant Variety Protection Act (7 U.S.C. 2321 et seq.)) 하에 부여된 출원인의 권리에 대한 어떠한 침해도 묵인하지 않는다.
아메리칸 타입 컬쳐 컬렉션 PTA-11716 20110228 아메리칸 타입 컬쳐 컬렉션 PTA-11717 20110228
SEQUENCE LISTING <110> XU, DONGMEI NIELSEN, MARK T. SHEN, YANXIN <120> TOBACCO INBRED PLANTS ALBEX1F AND ALBEX1MS <130> P33794US02/25633.220 <140> <141> <150> 61/447,487 <151> 2011-02-28 <150> 61/507,732 <151> 2011-07-14 <160> 4 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 1751 <212> DNA <213> Nicotiana tabacum <400> 1 aaggaagttg ccgatagtta tattctcaac ttcttatcta aaaatccata atgctttctc 60 ccatagaagc cattgtagga ctagtaacct tcacatttct cttcttcttc ctatggacaa 120 aaaaatctca aaaaccttca aaacccttac caccgaaaat ccccggagga tggccggtaa 180 tcggccatct tttccacttc aatgacgacg gcgacgaccg tccattagct cgaaaactcg 240 gagacttagc tgacaaatac ggccccgttt tcacttttcg gctaggcctt ccccttgtct 300 tagttgtaag cagttacgaa gctgtaaaag actgtttctc tacaaatgac gccatttttt 360 ccaatcgtcc agcttttctt tacggcgatt accttggcta caataatgcc atgctatttt 420 tggccaatta cggaccttac tggcgaaaaa atcgaaaatt agttattcag gaagttctct 480 ccgctagtcg tctcgaaaaa ttcaaacacg tgagatttgc aagaattcaa gcgagcatta 540 agaatttata tactcgaatt gatggaaatt cgagtacgat aaatttaact gattggttag 600 aagaattgaa ttttggtctg atcgtgaaga tgatcgctgg aaaaaattat gaatccggta 660 aaggagatga acaagtggag agatttaaga aagcgtttaa ggattttatg attttatcaa 720 tggagtttgt gttatgggat gcatttccaa ttccattatt taaatgggtg gattttcaag 780 ggcatgttaa ggctatgaaa aggactttta aagatataga ttctgttttt cagaattggt 840 tagaggaaca tattaataaa agagaaaaaa tggaggttaa tgcagaaggg aatgaacaag 900 atttcattga tgtggtgctt tcaaaaatga gtaatgaata tcttggtgaa ggttactctc 960 gtgatactgt cattaaagca acggtgttta gtttggtctt ggatgcagca gacacagttg 1020 ctcttcacat aaattgagga atggcattat tgataaacaa tcaaaaggcc ttgacgaaag 1080 cacaagaaga gatagacaca aaagttggta aggacagatg ggtagaagag agtgatatta 1140 aggatttggt atacctccaa gctattgtta aagaagtgtt acgattatat ccaccaggac 1200 ctttgttagt accacacgaa aatgtagaag attgtgttgt tagtggatat cacattccta 1260 aagggacaag attattcgca aacgtcatga aactgcaacg tgatcctaaa ctctggtctg 1320 atcctgatac tttcgatcca gagagattca ttgctactga tattgacttt cgtggtcagt 1380 actataagta tatcccgttt ggttctggaa gacgatcttg tccagggatg acttatgcat 1440 tgcaagtgga acacttaaca atggcacatt tgatccaagg tttcaattac agaactccaa 1500 atgacgagcc cttggatatg aaggaaggtg caggcataac tatacgtaag gtaaatcctg 1560 tggaactgat aatagcgcct cgcctggcac ctgagcttta ttaaaaccta agatctttca 1620 tcttggttga tcattgtata atactcctaa atggatattc atttaccttt tatcaattaa 1680 ttgtcagtac gagtttttct aatttggtac atttgtaata ataagtaaag aataattgtg 1740 ctaatatata a 1751 <210> 2 <211> 328 <212> PRT <213> Nicotiana tabacum <400> 2 Met Leu Ser Pro Ile Glu Ala Ile Val Gly Leu Val Thr Phe Thr Phe 1 5 10 15 Leu Phe Phe Phe Leu Trp Thr Lys Lys Ser Gln Lys Pro Ser Lys Pro 20 25 30 Leu Pro Pro Lys Ile Pro Gly Gly Trp Pro Val Ile Gly His Leu Phe 35 40 45 His Phe Asn Asp Asp Gly Asp Asp Arg Pro Leu Ala Arg Lys Leu Gly 50 55 60 Asp Leu Ala Asp Lys Tyr Gly Pro Val Phe Thr Phe Arg Leu Gly Leu 65 70 75 80 Pro Leu Val Leu Val Val Ser Ser Tyr Glu Ala Val Lys Asp Cys Phe 85 90 95 Ser Thr Asn Asp Ala Ile Phe Ser Asn Arg Pro Ala Phe Leu Tyr Gly 100 105 110 Asp Tyr Leu Gly Tyr Asn Asn Ala Met Leu Phe Leu Ala Asn Tyr Gly 115 120 125 Pro Tyr Trp Arg Lys Asn Arg Lys Leu Val Ile Gln Glu Val Leu Ser 130 135 140 Ala Ser Arg Leu Glu Lys Phe Lys His Val Arg Phe Ala Arg Ile Gln 145 150 155 160 Ala Ser Ile Lys Asn Leu Tyr Thr Arg Ile Asp Gly Asn Ser Ser Thr 165 170 175 Ile Asn Leu Thr Asp Trp Leu Glu Glu Leu Asn Phe Gly Leu Ile Val 180 185 190 Lys Met Ile Ala Gly Lys Asn Tyr Glu Ser Gly Lys Gly Asp Glu Gln 195 200 205 Val Glu Arg Phe Lys Lys Ala Phe Lys Asp Phe Met Ile Leu Ser Met 210 215 220 Glu Phe Val Leu Trp Asp Ala Phe Pro Ile Pro Leu Phe Lys Trp Val 225 230 235 240 Asp Phe Gln Gly His Val Lys Ala Met Lys Arg Thr Phe Lys Asp Ile 245 250 255 Asp Ser Val Phe Gln Asn Trp Leu Glu Glu His Ile Asn Lys Arg Glu 260 265 270 Lys Met Glu Val Asn Ala Glu Gly Asn Glu Gln Asp Phe Ile Asp Val 275 280 285 Val Leu Ser Lys Met Ser Asn Glu Tyr Leu Gly Glu Gly Tyr Ser Arg 290 295 300 Asp Thr Val Ile Lys Ala Thr Val Phe Ser Leu Val Leu Asp Ala Ala 305 310 315 320 Asp Thr Val Ala Leu His Ile Asn 325 <210> 3 <211> 1751 <212> DNA <213> Nicotiana tabacum <400> 3 aaggaagttg ccgatagtta tattctcaac ttcttatcta aaaatccata atgctttctc 60 ccatagaagc cattgtagga ctagtaacct tcacatttct cttcttcttc ctatggacaa 120 aaaaatctca aaaaccttca aaacccttac caccgaaaat ccccggagga tggccggtaa 180 tcggccatct tttccacttc aatgacgacg gcgacgaccg tccattagct cgaaaactcg 240 gagacttagc tgacaaatac ggccccgttt tcacttttcg gctaggcctt ccccttgtct 300 tagttgtaag cagttacgaa gctgtaaaag actgtttctc tacaaatgac gccatttttt 360 ccaatcgtcc agcttttctt tacggcgatt accttggcta caataatgcc atgctatttt 420 tggccaatta cggaccttac tggcgaaaaa atcgaaaatt agttattcag gaagttctct 480 ccgctagtcg tctcgaaaaa ttcaaacacg tgagatttgc aagaattcaa gcgagcatta 540 agaatttata tactcgaatt gatggaaatt cgagtacgat aaatttaact gattggttag 600 aagaattgaa ttttggtctg atcgtgaaga tgatcgctgg aaaaaattat gaatccggta 660 aaggagatga acaagtggag agatttaaga aagcgtttaa ggattttatg attttatcaa 720 tggagtttgt gttatgggat gcatttccaa ttccattatt taaatgggtg gattttcaag 780 ggcatgttaa ggctatgaaa aggactttta aagatataga ttctgttttt cagaattggt 840 tagaggaaca tattaataaa agagaaaaaa tggaggttaa tgcagaaggg aatgaacaag 900 atttcattga tgtggtgctt tcaaaaatga gtaatgaata tcttggtgaa ggttactctc 960 gtgatactgt cattaaagca acggtgttta gtttggtctt ggatgcagca gacacagttg 1020 ctcttcacat aaattgggga atggcattat tgataaacaa tcaaaaggcc ttgacgaaag 1080 cacaagaaga gatagacaca aaagttggta aggacagatg ggtagaagag agtgatatta 1140 aggatttggt atacctccaa gctattgtta aagaagtgtt acgattatat ccaccaggac 1200 ctttgttagt accacacgaa aatgtagaag attgtgttgt tagtggatat cacattccta 1260 aagggacaag attattcgca aacgtcatga aactgcaacg tgatcctaaa ctctggtctg 1320 atcctgatac tttcgatcca gagagattca ttgctactga tattgacttt cgtggtcagt 1380 actataagta tatcccgttt ggttctggaa gacgatcttg tccagggatg acttatgcat 1440 tgcaagtgga acacttaaca atggcacatt tgatccaagg tttcaattac agaactccaa 1500 atgacgagcc cttggatatg aaggaaggtg caggcataac tatacgtaag gtaaatcctg 1560 tggaactgat aatagcgcct cgcctggcac ctgagcttta ttaaaaccta agatctttca 1620 tcttggttga tcattgtata atactcctaa atggatattc atttaccttt tatcaattaa 1680 ttgtcagtac gagtttttct aatttggtac atttgtaata ataagtaaag aataattgtg 1740 ctaatatata a 1751 <210> 4 <211> 517 <212> PRT <213> Nicotiana tabacum <400> 4 Met Leu Ser Pro Ile Glu Ala Ile Val Gly Leu Val Thr Phe Thr Phe 1 5 10 15 Leu Phe Phe Phe Leu Trp Thr Lys Lys Ser Gln Lys Pro Ser Lys Pro 20 25 30 Leu Pro Pro Lys Ile Pro Gly Gly Trp Pro Val Ile Gly His Leu Phe 35 40 45 His Phe Asn Asp Asp Gly Asp Asp Arg Pro Leu Ala Arg Lys Leu Gly 50 55 60 Asp Leu Ala Asp Lys Tyr Gly Pro Val Phe Thr Phe Arg Leu Gly Leu 65 70 75 80 Pro Leu Val Leu Val Val Ser Ser Tyr Glu Ala Val Lys Asp Cys Phe 85 90 95 Ser Thr Asn Asp Ala Ile Phe Ser Asn Arg Pro Ala Phe Leu Tyr Gly 100 105 110 Asp Tyr Leu Gly Tyr Asn Asn Ala Met Leu Phe Leu Ala Asn Tyr Gly 115 120 125 Pro Tyr Trp Arg Lys Asn Arg Lys Leu Val Ile Gln Glu Val Leu Ser 130 135 140 Ala Ser Arg Leu Glu Lys Phe Lys His Val Arg Phe Ala Arg Ile Gln 145 150 155 160 Ala Ser Ile Lys Asn Leu Tyr Thr Arg Ile Asp Gly Asn Ser Ser Thr 165 170 175 Ile Asn Leu Thr Asp Trp Leu Glu Glu Leu Asn Phe Gly Leu Ile Val 180 185 190 Lys Met Ile Ala Gly Lys Asn Tyr Glu Ser Gly Lys Gly Asp Glu Gln 195 200 205 Val Glu Arg Phe Lys Lys Ala Phe Lys Asp Phe Met Ile Leu Ser Met 210 215 220 Glu Phe Val Leu Trp Asp Ala Phe Pro Ile Pro Leu Phe Lys Trp Val 225 230 235 240 Asp Phe Gln Gly His Val Lys Ala Met Lys Arg Thr Phe Lys Asp Ile 245 250 255 Asp Ser Val Phe Gln Asn Trp Leu Glu Glu His Ile Asn Lys Arg Glu 260 265 270 Lys Met Glu Val Asn Ala Glu Gly Asn Glu Gln Asp Phe Ile Asp Val 275 280 285 Val Leu Ser Lys Met Ser Asn Glu Tyr Leu Gly Glu Gly Tyr Ser Arg 290 295 300 Asp Thr Val Ile Lys Ala Thr Val Phe Ser Leu Val Leu Asp Ala Ala 305 310 315 320 Asp Thr Val Ala Leu His Ile Asn Trp Gly Met Ala Leu Leu Ile Asn 325 330 335 Asn Gln Lys Ala Leu Thr Lys Ala Gln Glu Glu Ile Asp Thr Lys Val 340 345 350 Gly Lys Asp Arg Trp Val Glu Glu Ser Asp Ile Lys Asp Leu Val Tyr 355 360 365 Leu Gln Ala Ile Val Lys Glu Val Leu Arg Leu Tyr Pro Pro Gly Pro 370 375 380 Leu Leu Val Pro His Glu Asn Val Glu Asp Cys Val Val Ser Gly Tyr 385 390 395 400 His Ile Pro Lys Gly Thr Arg Leu Phe Ala Asn Val Met Lys Leu Gln 405 410 415 Arg Asp Pro Lys Leu Trp Ser Asp Pro Asp Thr Phe Asp Pro Glu Arg 420 425 430 Phe Ile Ala Thr Asp Ile Asp Phe Arg Gly Gln Tyr Tyr Lys Tyr Ile 435 440 445 Pro Phe Gly Ser Gly Arg Arg Ser Cys Pro Gly Met Thr Tyr Ala Leu 450 455 460 Gln Val Glu His Leu Thr Met Ala His Leu Ile Gln Gly Phe Asn Tyr 465 470 475 480 Arg Thr Pro Asn Asp Glu Pro Leu Asp Met Lys Glu Gly Ala Gly Ile 485 490 495 Thr Ile Arg Lys Val Asn Pro Val Glu Leu Ile Ile Ala Pro Arg Leu 500 505 510 Ala Pro Glu Leu Tyr 515

Claims (21)

  1. 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 종자를 성장시킴으로써 생성된 담배 식물체 또는 그의 일부분으로 제조된 담배 제품.
  2. 제1항에 있어서, 가는 엽궐련, 비-환기 공간 필터 궐련, 환기 공간 필터 궐련, 엽궐련, 코담배, 파이프 담배, 엽궐련 담배, 궐련 담배, 잎 담배, 썬 담배, 살담배 및 씹는 담배로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 제품.
  3. 제2항에 있어서, 감소된 양의 노르니코틴을 갖는 담배 제품.
  4. 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1MS의 종자를 성장시킴으로써 생성된 담배 식물체 또는 그의 일부분으로 제조된 담배 제품.
  5. 제4항에 있어서, 가는 엽궐련, 비-환기 공간 필터 궐련, 환기 공간 필터 궐련, 엽궐련, 코담배, 파이프 담배, 엽궐련 담배, 궐련 담배, 잎 담배, 썬 담배, 살담배 및 씹는 담배로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 제품.
  6. 제5항에 있어서, 감소된 양의 노르니코틴을 갖는 담배 제품.
  7. 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 종자.
  8. 제7항의 종자를 성장시킴으로써 생성된 담배 식물체 또는 그의 일부분.
  9. 제8항의 담배 식물체 또는 그의 일부분의 수확된 잎.
  10. 제9항에 있어서, 감소된 양의 노르니코틴을 갖는 수확된 잎.
  11. 제10항에 있어서, 상기 감소된 양의 노르니코틴이 상기 잎으로부터 생성된 연기 흐름 내에서 감소된 것인 수확된 잎.
  12. 제8항에 있어서, 잎, 화분, 배주, 배아, 떡잎, 배축, 분열조직 세포, 원형질체, 뿌리, 뿌리 끝, 암술, 꽃밥, 꽃, 싹, 줄기, 꼬투리 및 잎자루로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 식물체의 일부분.
  13. 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1MS의 종자.
  14. 제13항의 종자를 성장시킴으로써 생성된 담배 식물체 또는 그의 일부분.
  15. 제14항의 담배 식물체 또는 그의 일부분의 수확된 잎.
  16. 제15항에 있어서, 감소된 양의 노르니코틴을 갖는 수확된 잎.
  17. 제16항에 있어서, 상기 감소된 양의 노르니코틴이 상기 잎으로부터 생성된 연기 흐름 내에서 감소된 것인 수확된 잎.
  18. 제14항에 있어서, 잎, 화분, 배주, 배아, 떡잎, 배축, 분열조직 세포, 원형질체, 뿌리, 뿌리 끝, 암술, 꽃밥, 꽃, 싹, 줄기, 꼬투리 및 잎자루로 이루어진 군으로부터 선택된 담배 식물체의 일부분.
  19. 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11716으로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1F의 F2 자손 식물체.
  20. 대표적인 샘플 종자가 ATCC에 ATCC 수탁번호 PTA-11717로 기탁되어 있는 것인 담배 품종 ALBEX1MS의 F2 자손 식물체.
  21. 제19항에 있어서, 웅성 불임 (MS)인 F2 자손 식물체.
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