CN103562393A - 烟草近交植物albex1f和albex1ms - Google Patents

烟草近交植物albex1f和albex1ms Download PDF

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Abstract

本发明提供了烟草近交植物ALBEX1F和ALBEX1MS。本发明还提供了这些植物的一部分和从那些部分制得的产品。本发明还包括所提供植物的后代，包括杂种。

Description

烟草近交植物ALBEX1F和ALBEX1MS
相关申请的交叉参考
本申请依据35U.S.C.§119要求2011年2月28日提交的U.S.临时申请No.61／447,487(未决)和2011年7月14日提交的U.S.临时申请No.1／507,732(未决)的权益，在此将每篇申请全部按引用并入本文中，包括其各自的序列表。
序列表的并入
本申请含有序列表，在此将其全部按引用并入本文中。通过EFS-Web与本申请一起电子提交了序列表的电子等效纸件副本／计算机可读形式并且含有名为“P33794US02_seqlist.txt”的文件，其是16,384个字节大小(在Windows XP中测量的)，其在2012年2月23日形成，并且在此将其全部按引用并入本文中。
发明领域
本发明提供了烟草近交植物ALEBX1F和ALBEX1MS。本发明还提供了这些植物的部分以及从那些部分制得的产品。本发明还包括所提供植物的后代，包括杂种。
发明背景
烟草(Nicotiana tabacum L.)是美国以及其他国家中的重要经济作物。在烟草植物中，烟碱的N-脱甲基化作用形成了去甲烟碱，它是干烟叶中已知是作为用于形成N-亚硝基去甲烟碱(“NNN”)的前体的次要生物碱。NNN是不希望存在于干烟叶中的成分。
商业烟草品种中发现的主要生物碱是烟碱，通常占据总生物碱集合的90-95％。剩余的生物碱部分主要由三种其他吡啶生物碱组成：去甲烟碱、假木贼碱(anabasine)和新烟草碱(anatabine)。去甲烟碱通过烟碱N-脱甲基酶的活性从烟碱直接产生。去甲烟碱通常占总吡啶生物碱集合的低于5％，但通过称为“转化”的过程，最初产生非常低量的去甲烟碱的烟草植物产生了通过代谢将大比例的烟叶烟碱“转化”成去甲烟碱的后代。在遗传上发生转化的烟草植物(称为“转化体”)中，大部分的去甲烟碱的产生发生在成熟烟叶的衰老和晾干的过程中(Wernsman和Matzinger(1968)Tob.Sci.12：226-228)。白菜(burley)烟特别容易遗传转化，其中在一些栽培品种中观察到每代高达20％的比例。
在烟叶晾干和加工过程中，一部分的去甲烟碱代谢成化合物NNN，这是已经宣称在实验室动物中致癌的烟草特异性亚硝胺(TSNA)(Hecht和Hoffmann(1990)Cancer Surveys8：273-294；Hoffmann等(1994)J.Toxicol.Environ.Health41：1-52；Hecht(1998)Chem.Res.Toxicol.11：559-603)。在烤烟中，发现TSNA主要通过生物碱与传统烤房中发现的直接火焰加热系统形成的燃烧气体中存在的微量氮氧化物的反应来形成(Peele和Gentry(1999)“Formation of Tobacco-specific Nitrosaminesin Flue-cured Tobacco(烤烟中烟草特异性亚硝胺的形成)”，CORESTAMeeting，Agro-Phyto Groups，Suzhou，China)。用热交换器改装这些烤房实质性地消除了燃烧气体与风干空气的混合并且显著地降低了以这种方式风干的烟草中的TSNA的形成(Boyette和Hamm(2001)Rec.Adv.Tob.Sci.27：17-22)。相反，在风干的白菜烟中，TSNA形成主要通过烟草生物碱与亚硝酸盐的反应来进行，该过程是通过烟叶携带的微生物来催化的(Bush等，(2001)，Rec.Adv.Tob.Sci.27：23-46)。迄今为止，对于风干的烟草，通过改变晾干条件来降低TSNA同时保持可接受的质量标准的尝试尚未成功。
发明概述
在一个方面中，本发明包括烟草栽培品种ALBEX1F的种子，该栽培品种的代表性样品种子已经于2011年2月28日以Altria Client ServicesInc.的名义以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏。
在一个方面中，本发明包括通过种植烟草栽培品种ALBEX1F的种子产生的烟草植物或其部分，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏。
在一个方面中，本发明包括通过种植烟草栽培品种ALBEX1F的种子产生的烟草植物或其部分的采收烟叶，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏。
在一个方面中，本发明包括通过种植烟草栽培品种ALBEX1F的种子产生的烟草植物或其部分的采收烟叶，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏，其中与相似条件下种植的TN90或大部分其他商业白莱烟栽培品种的烟叶相比，所述烟叶具有降低量的去甲烟碱和／或N’-亚硝基去甲烟碱(NNN)和／或更稳定的低烟碱转化。
在一个方面中，本发明包括通过种植烟草栽培品种ALBEX1F的种子产生的烟草植物的采收烟叶，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏，其中与相似条件下种植的TN90或大部分其他商业白菜烟栽培品种的烟叶相比，所述烟叶具有降低量的去甲烟碱和／或N’-亚硝基去甲烟碱(NNN)和／或更稳定的低烟碱转化，其中与相似条件下种植的TN90或大部分其他商业白菜烟栽培品种的烟叶相比，所述降低量的去甲烟碱和／或N-亚硝基去甲烟碱(NNN)在由所述烟叶产生的烟雾流中降低。
在一个方面中，本发明包括从通过种植烟草栽培品种ALBEX1F的种子产生的烟草植物或其部分制得的烟草产品，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏，其中所述产品选自烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟丝(shredded tobacco)和生切烟丝(cut tobacco)。
在一个方面中，本发明包括从通过种植烟草栽培品种ALBEX1F的种子产生的烟草植物或其部分制得的烟草产品，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏，其中所述产品选自烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟丝和生切烟丝，并且其中所述产品进一步选自小雪茄、不通气的凹过滤嘴香烟、通气的凹过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。
在一个方面中，本发明包括从通过种植烟草栽培品种ALBEX1F的种子产生的烟草植物或其部分制得的烟草产品，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏，其中所述产品选自烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟丝和生切烟丝，并且其中所述产品进一步选自小雪茄、不通气的凹过滤嘴香烟、通气的凹过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，其中与从相似条件下种植和加工的TN90或大部分其他商业白菜烟栽培品种制得的产品相比，所述产品具有降低量的去甲烟碱和／或N’-亚硝基去甲烟碱(NNN)和／或更稳定的低烟碱转化。
在一个方面中，本发明包括通过种植烟草栽培品种ALBEX1F的种子产生的植物的部分，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏，其中植物部分选自叶、花粉、胚珠、胚芽、子叶、胚轴、分生细胞、原生质体、根、根尖、雌蕊、花粉囊、花、芽、茎、荚和叶柄。
在一个方面中，本发明包括从通过种植烟草栽培品种ALBEX1F的种子产生的植物的原生质体或细胞产生的组织培养物，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏，其中所述组织培养物的细胞或原生质体产自选自叶、花粉、胚芽、子叶、胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花粉囊、花、芽、茎、荚和叶柄的植物部分。
在一个方面中，本发明包括从通过种植烟草栽培品种ALBEX1F的种子产生的植物的原生质体或细胞所产生的组织培养物再生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏，其中所述组织培养物的细胞或原生质体由选自叶、花粉、胚芽、子叶、胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花粉囊、花、芽、茎、荚和叶柄的植物部分产生，其中所述植物具有在相似条件下种植的栽培品种ALBEX1F的基本上全部形态学和生理学特征。
在另一个方面中，本发明包括烟草栽培品种ALBEX1MS的种子，该栽培品种的代表性样品种子已经于2011年2月28日以Altria ClientServices Inc.的名义以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC进行了保藏。
在一个方面中，本发明提供了通过种植烟草栽培品种ALBEX1MS的种子产生的烟草植物或其部分，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC进行了保藏。
在一个方面中，本发明提供了通过种植烟草栽培品种ALBEX1MS的种子产生的烟草植物或其部分的采收烟叶，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC进行了保藏。
在一个方面中，本发明提供了通过种植烟草栽培品种ALBEX1MS的种子产生的烟草植物或其部分的采收烟叶，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC进行了保藏，其中与在相似条件下种植的TN90或大部分其他商业白菜烟栽培品种的烟叶相比，所述烟叶具有降低量的去甲烟碱和／或N’-亚硝基去甲烟碱(NNN)和／或更稳定的低烟碱转化。
在一个方面中，本发明提供了通过种植烟草栽培品种ALBEX1MS的种子产生的烟草植物或其部分的采收烟叶，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC进行了保藏，其中与在相似条件下种植的TN90或大部分其他商业白菜烟栽培品种的烟叶相比，所述烟叶具有降低量的去甲烟碱和／或N’-亚硝基去甲烟碱(NNN)，并且其中所述降低量的去甲烟碱和／或N-亚硝基去甲烟碱(NNN)在从所述烟叶产生的烟雾流中降低。
在一个方面中，本发明提供了从通过种植烟草栽培品种ALBEX1MS的种子产生的烟草植物或其部分制得的烟草产品，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC进行了保藏，其中所述产品选自烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟丝和生切烟丝。
在一个方面中，本发明提供了从通过种植烟草栽培品种ALBEX1MS的种子产生的烟草植物或其部分制得的烟草产品，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC进行了保藏，其中所述产品选自烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟丝和生切烟丝，其中所述产品选自小雪茄、不通气的凹过滤嘴香烟、通气的凹过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。
在一个方面中，本发明提供了从通过种植烟草栽培品种ALBEX1MS的种子产生的烟草植物或其部分制得的产品，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC进行了保藏，其中所述产品选自烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟用烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟丝和生切烟丝，其中所述产品选自小雪茄、不通气的凹过滤嘴香烟、通气的凹过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，其中与从相似条件下种植的TN90或大部分其他商业白菜烟栽培品种制得的产品相比，所述产品具有降低量的去甲烟碱和／或N’-亚硝基去甲烟碱(NNN)和／或更稳定的低烟碱转化。
在一个方面中，本发明提供了通过种植烟草栽培品种ALBEX1MS的种子产生的植物的部分，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC进行了保藏，其中植物部分选自叶、花粉、胚珠、胚芽、子叶、胚轴、分生细胞、原生质体、根、根尖、雌蕊、花粉囊、花、芽、茎、荚和叶柄。
在一个方面中，本发明提供从通过种植烟草栽培品种ALBEX1MS的种子产生的植物的原生质体或细胞所产生的组织培养物，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC进行了保藏，其中所述组织培养物的细胞或原生质体由选自叶、花粉、胚芽、子叶、胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花粉囊、花、芽、茎、荚和叶柄的植物部分产生。
在一个方面中，本发明提供了从通过种植烟草栽培品种ALBEX1MS的种子产生的植物的原生质体或细胞所产生的组织培养物再生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC进行了保藏，其中所述组织培养物的细胞或原生质体由选自叶、花粉、胚芽、子叶、胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花粉囊、花、芽、茎、荚和叶柄的植物部分产生，其中所述植物具有在相似条件下种植的栽培品种ALBEX1MS的基本上全部形态学和生理学特征。
在一个方面中，本发明包括烟草栽培品种ALBEX1F的F1后代植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏。
烟草栽培品种ALBEX1F的F1后代植物，栽培品种的代表性样品种子已经依据ATCC保藏号No.PTA-11716在ATCC进行了保藏，其中所述F1植物是雄性不育的(MS)。
在一个方面中，本发明包括烟草栽培品种ALBEX1MS的F1后代植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC进行了保藏。
在一个方面中，本发明提供了一种用于产生烟草种子的方法，包括将两种烟草植物杂交并采收所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是烟草栽培品种ALBEX1F的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏。
在一个方面中，本发明提供了一种用于产生烟草种子的方法，包括将两种烟草植物杂交并采收所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是烟草栽培品种ALBEX1F的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏，其中ALBEX1F植物是母本。
在一个方面中，本发明提供了一种用于产生烟草种子的方法，包括将两种烟草植物杂交并采收所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是烟草栽培品种ALBEX1F的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏，其中另一种烟草植物是雄性不育的(MS)。
在一个方面中，本发明提供了通过将两种烟草植物杂交并采收所得到的烟草种子的方法产生的F1后代种子，其中至少一种烟草植物是烟草栽培品种ALBEX1F的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏，其中另一种烟草植物是雄性不育的(MS)。
在一个方面中，本发明提供了通过将两种烟草植物杂交并采收所得到的烟草种子的方法产生的F1后代种子的容器，其中至少一种烟草植物是烟草栽培品种ALBEX1F的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏，其中另一种烟草植物是雄性不育的(MS)。
在一个方面中，本发明提供了通过将两种烟草植物杂交并采收所得到的烟草种子的方法产生的种子进行种植产生的F1后代植物，其中至少一种烟草植物是烟草栽培品种ALBEX1F的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏，其中另一种烟草植物是雄性不育的(MS)。
在一个方面中，本发明提供了通过将两种烟草植物杂交并采收所得到的烟草种子的方法产生的种子进行种植产生的F1后代植物的烟草植物或其部分的采收烟叶，其中至少一种烟草植物是烟草栽培品种ALBEX1F的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏，其中另一种烟草植物是雄性不育的(MS)。
在一个方面中，本发明提供了通过将两种烟草植物杂交并采收所得到的烟草种子的方法产生的种子进行种植产生的F1后代植物的采收烟叶，其中至少一种烟草植物是烟草栽培品种ALBEX1F的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏，其中另一种烟草植物是雄性不育的(MS)，其中与相似条件下种植的TN90或大部分其他商业白菜烟栽培品种的烟叶相比，所述烟叶具有降低量的去甲烟碱和／或N’-亚硝基去甲烟碱(NNN)和／或更稳定的低烟碱转化。
在一个方面中，本发明提供了通过将两种烟草植物杂交并采收所得到的烟草种子的方法产生的种子进行种植产生的F1后代植物的采收烟叶，其中至少一种烟草植物是烟草栽培品种ALBEX1F的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏，其中另一种烟草植物是雄性不育的(MS)，其中与相似条件下种植的TN90或大部分其他商业白菜烟栽培品种的烟叶相比，所述烟叶具有降低量的去甲烟碱和／或N’-亚硝基去甲烟碱(NNN)和／或更稳定的低烟碱转化，其中与相似条件下种植的TN90或大部分其他商业白莱烟栽培品种的烟叶相比，所述降低量的去甲烟碱和／或N-亚硝基去甲烟碱(NNN)在由所述烟叶产生的烟雾流中降低。
在一个方面中，本发明提供了通过将两种烟草植物杂交并采收所得到的烟草种子的方法产生的种子进行种植产生的F1后代植物制得的烟草产品，其中至少一种烟草植物是烟草栽培品种ALBEX1F的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏，其中另一种烟草植物是雄性不育的(MS)，其中所述产品选自烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟丝和生切烟丝。
在一个方面中，本发明提供了通过将两种烟草植物杂交并采收所得到的烟草种子的方法产生的种子进行种植产生的F1后代植物制得的烟草产品，其中至少一种烟草植物是烟草栽培品种ALBEX1F的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏，其中另一种烟草植物是雄性不育的(MS)，其中所述产品选自烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟丝和生切烟丝，并且其中所述产品进一步选自小雪茄、不通气的凹过滤嘴香烟、通气的凹过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。
在一个方面中，本发明提供了通过将两种烟草植物杂交并采收所得到的烟草种子的方法产生的种子进行种植产生的F1后代植物制得的烟草产品，其中至少一种烟草植物是烟草栽培品种ALBEX1F的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏，其中另一种烟草植物是雄性不育的(MS)，其中所述产品选自烟斗丝、雪茄烟叶、卷烟用烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟丝和生切烟丝，并且其中所述产品进一步选自小雪茄、不通气的凹过滤嘴香烟、通气的凹过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，其中与相似条件下种植的TN90或大部分其他商业白菜烟栽培品种制得的产品相比，所述产品具有降低量的去甲烟碱和／或N’-亚硝基去甲烟碱(NNN)和／或更稳定的低烟碱转化。
在一个方面中，本发明提供了一种用于产生烟草种子的方法，包括将两种烟草植物杂交并采收所得到的烟草种子，其中至少一种烟草植物是烟草栽培品种ALBEX1F的烟草植物，该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏，其中另一种烟草植物是雄性不育的(MS)，其中所述MS植物是烟草栽培品种ALBEX1MS的植物，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC进行了保藏。
在一个方面中，本发明包括无性繁殖烟草栽培品种植物的方法，其包括步骤(a)从选自ALBEX1F(已经以据ATCC保藏号PTA-11716在ATCC保藏了该栽培品种的代表性样品种子)和ALBEX1MS的烟草栽培品种植物收集能够繁殖的组织；(b)培养该组织以获得增殖的芽；和(c)将增殖的芽生根以获得生根的幼苗。
在一个方面中，本发明包括无性繁殖烟草栽培品种植物的方法，其包括步骤(a)培养来自烟草栽培品种植物的能够繁殖的组织以获得增殖的芽，所述植物选自ALBEX1F(已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC保藏进行该栽培品种的代表性样品种子)和ALBEX1MS；(b)将增殖的芽生根以获得生根的幼苗，其中该方法进一步包括从所述生根的幼苗生长植物。
在一个方面中，本发明包括将所需的性状引入烟草栽培品种中的方法，其包括：(a)将选自已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的ALBEX1F和已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的ALBEX1MS的烟草栽培品种植物与包含所需性状的第二种烟草植物杂交以产生F1后代种子；(b)将F1后代种子种植并选择包含所需性状的F1后代植物；(c)将选定的F1后代植物与选自ALBEX1F和ALBEX1MS的烟草栽培品种植物杂交以产生回交F2后代种子；(d)将F2后代种子种植并选择包含所需性状的回交F2后代植物；和(e)连续重复步骤(c)和(d)三次或更多次以产生包含所需性状以及选自ALBEX1F和ALBEX1MS的烟草栽培品种的基本上全部的生理学和形态学特征的选定的第四代或更高的回交后代。
在一个方面中，本发明提供了将所需的性状引入烟草栽培品种中的方法，其包括：(a)将选自已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC保藏进行栽培品种的代表性样品种子的ALBEX1F和已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的ALBEX1MS的烟草栽培品种植物与包含所需性状的第二烟草植物杂交以产生F1后代种子；(b)将F1后代种子种植并选择包含所需性状的F1后代植物；(c)将选定的F1后代植物与选自ALBEX1F和ALBEX1MS的烟草栽培品种植物杂交以产生回交F2后代种子；(d)将F2后代种子种植并选择包含所需性状的回交F2后代植物；和(e)连续重复步骤(c)和(d)三次或更多次以产生包含所需性状以及选自ALBEX1F和ALBEX1MS的烟草栽培品种基本上全部生理学和形态学特征的选定的第四代或更高代的回交后代，其中所述性状是雄性不育(MS)。
在一个方面中，本发明提供了将所需的性状引入烟草栽培品种中的方法，其包括：(a)将选自已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的ALBEX1F和已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的ALBEX1MS的烟草栽培品种植物与包含所需性状的第二烟草植物杂交以产生F1后代种子；(b)将F1后代种子种植并选择包含所需性状的F1后代植物；(c)将选定的F1后代植物与选自ALBEX1F和ALBEX1MS的烟草栽培品种植物杂交以产生回交F2后代种子；(d)将F2后代种子种植并选择包含所需性状的回交F2后代植物；和(e)连续重复步骤(c)和(d)三次或更多次以产生包含所需性状以及选自ALBEX1F和ALBEX1MS的烟草栽培品种的基本上全部生理学和形态学特征的选定的第四代或更高代的回交后代，其中所述性状是雄性不育(MS)，并且进一步其中所述MS性状获自Nicotiana suaveolens的细胞质。
在一个方面中，本发明提供了将所需的性状引入烟草栽培品种中的方法，其包括：(a)将选自已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的ALBEX1F和已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的ALBEX1MS的烟草栽培品种植物与包含所需性状的第二种烟草植物杂交以产生F1后代种子；(b)将F1后代种子种植并选择包含所需性状的F1后代植物；(c)将选定的F1后代植物与选自ALBEX1F和ALBEX1MS的烟草栽培品种植物杂交以产生回交F2后代种子；(d)将F2后代种子种植并选择包含所需性状的回交F2后代植物；和(e)连续重复步骤(c)和(d)三次或更多次以产生包含所需性状以及选自ALBEX1F和ALBEX1MS的烟草栽培品种的基本上全部生理学和形态学特征的选定的第四代或更高代的回交后代，其中所述性状是雄性不育(MS)，并且其中所述MS性状获自Nicotiana suaveolens的细胞质，并且进一步地其中所述第二烟草植物是MS TN90。
在一个方面中，本发明提供了通过将所需性状引入烟草栽培品种中的方法产生的烟草植物，所述方法包括：(a)将选自已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的ALBEX1F和已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的ALBEX1MS的烟草栽培品种植物与包含所需性状的第二烟草植物杂交以产生F1后代种子；(b)将F1后代种子种植并选择包含所需性状的F1后代植物；(c)将选定的F1后代植物与选自ALBEX1F和ALBEX1MS的烟草栽培品种植物杂交以产生回交F2后代种子；(d)将F2后代种子种植并选择包含所需性状的回交F2后代植物；和(e)连续重复步骤(c)和(d)三次或更多次以产生包含所需性状以及选自ALBEX1F和ALBEX1MS的烟草栽培品种的基本上全部生理学和形态学特征的选定的第四代或更高代的回交后代，其中所述性状是雄性不育(MS)。
在另一个方面中，本发明包括将所需性状引入烟草栽培品种中的方法，其包括：(a)将选自已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的ALBEX1F和已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的ALBEX1MS的烟草栽培品种植物与包含所需性状的另一种烟草栽培品种植物杂交以产生后代植物，其中所需性状选自除草剂抗性、抗害虫性、抗病性、高产量、高等级指数、可保存性、晾干质量、机械采收性、保持能力、烟叶质量、高度、植物成熟、早熟、早至中熟、中熟、中至晚熟、晚熟；小茎、中茎、大茎、每株植物叶数、每株植物5-10片叶、每株植物11-15片叶、每株植物16-21片叶，及其任意组合，以产生F1后代种子；(b)将F1后代种子种植成F1后代植物并选择具有所需性状的F1后代植物；(c)将选定的F1后代植物与选自ALBEX1F和ALBEX1MS的烟草栽培品种植物杂交以产生回交后代植物种子；(d)使回交后代植物种子生成成回交后代植物并选择包含所需性状的回交后代植物；和(e)连续重复步骤(c)和(d)一次或更多次以产生包含所需性状以及在相似条件下种植的选自ALBEX1F和ALBEX1MS的烟草栽培品种的基本上全部生理学和形态学特征的选定的第四代或更高代的回交后代植物。
在一个方面中，本发明包括通过将所需性状引入烟草栽培品种中的方法产生的烟草植物，所述方法包括：(a)将选自已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的ALBEX1F和已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的ALBEX1MS的烟草栽培品种植物与包含所需性状的另一种烟草栽培品种植物杂交以产生后代植物，其中所需性状选自除草剂抗性、抗害虫性、抗病性、高产量、高等级指数、可保存性、晾干质量、机械采收性、保持能力、烟叶质量、高度、植物成熟、早熟、早至中熟、中熟、中至晚熟、晚熟；小茎、中茎、大茎、每株植物叶数、每株植物5-10片叶、每株植物11-15片叶、每株植物16-21片叶，及其任意组合，以产生F1后代种子；(b)将F1后代种子生成成F1后代植物并选择具有所需性状的F1后代植物；(c)将选定的F1后代植物与选自ALBEX1F和ALBEX1MS的烟草栽培品种植物杂交以产生回交后代植物种子；(d)将回交后代植物种子生成成回交后代植物并选择包含所需性状的回交后代植物；和(e)连续重复步骤(c)和(d)一次或更多次以产生包含所需性状以及在相似条件下种植的选自ALBEX1F和ALBEX1MS的烟草栽培品种的基本上全部生理学和形态学特征的选定的第四代或更高代的回交后代植物，其中所述植物具有所需性状。
在一个方面中，本发明包括通过将所需性状引入烟草栽培品种中的方法产生的烟草植物，所述方法包括：(a)将选自已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的ALBEX1F和已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的ALBEX1MS的烟草栽培品种植物与包含所需性状的另一种烟草栽培品种植物杂交以产生后代植物，其中所需性状选自除草剂抗性、抗害虫性、抗病性、高产量、高等级指数、可保存性、晾干质量、机械采收性、保持能力、烟叶质量、高度、植物成熟、早熟、早至中熟、中熟、中至晚熟、晚熟；小茎、中茎、大茎、每株植物叶数、每株植物5-10片叶、每株植物11-15片叶、每株植物16-21片叶，及其任意组合，以产生F1后代种子；(b)将F1后代种子生长成F1后代植物并选择具有所需性状的F1后代植物；(c)将选定的F1后代植物与选自ALBEX1F和ALBEX1MS的烟草栽培品种植物杂交以产生回交后代植物种子；(d)将回交后代植物种子生长成回交后代植物并选择包含所需性状的回交后代植物；和(e)连续重复步骤(c)和(d)一次或更多次以产生包含所需性状以及在相似条件下种植的选自ALBEX1F和ALBEX1MS的烟草栽培品种的基本上全部生理学和形态学特征的选定的第四代或更高代的回交后代植物，其中所述植物具有所需性状，并且其中所述性状是除草剂抗性。
在另一个方面中，本发明包括用于产生具有降低的烟碱转化的烟草植物的方法，其包括：鉴定具有SEQ ID NO：1所示序列的第一烟草植物；将第一烟草植物与第二烟草植物杂交，并收集F1种子；将F1种子生长的植物与第三烟草植物杂交；并且鉴定对于SEQ ID NO：1所示序列纯合的烟草植物。
在一个方面中，本发明包括用于产生具有降低的烟碱转化的烟草植物的方法，其包括：鉴定具有SEQ ID NO：1所示序列的第一烟草植物；将第一烟草植物与第二烟草植物杂交，并收集F1种子；将F1种子生长的植物与第三烟草植物杂交；并且鉴定对于SEQ ID NO：1所示序列纯合的烟草植物，其中所述第二烟草植物具有SEQ ID NO：1所示的序列。
在一个方面中，本发明包括用于产生具有降低的烟碱转化的烟草植物的方法，其包括：鉴定具有SEQ ID NO：1所示序列的第一烟草植物；将第一烟草植物与第二烟草植物杂交，并收集F1种子；将F1种子生长的植物与第三烟草植物杂交；并且鉴定对于SEQ ID NO：1所示序列纯合的烟草植物，其中所述第二烟草植物不具有SEQ ID NO：1所示的序列，并且所述第三烟草植物是具有SEQ ID NO：1所示序列的烟草植物。
在一个方面中，本发明包括用于产生具有降低的烟碱转化的烟草植物的方法，其包括：鉴定具有SEQ ID NO：1所示序列的第一烟草植物；将第一烟草植物与第二烟草植物杂交，并收集F1种子；将F1种子生长的植物与第三烟草植物杂交；并且鉴定对于SEQ ID NO：1所示序列纯合的烟草植物，其中所述第一烟草植物是选自已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的ALBEX1F和已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的ALBEX1MS的烟草栽培品种植物。
在一个方面中，本发明包括用于产生具有降低的烟碱转化的烟草植物的方法，其包括：鉴定具有SEQ ID NO：1所示序列的第一烟草植物；将第一烟草植物与第二烟草植物杂交，并收集F1种子；将F1种子生长的植物与第三烟草植物杂交；并且鉴定对于SEQ ID NO：1所示序列纯合的烟草植物，其中所述第一烟草植物是选自已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的ALBEX1F和已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的ALBEX1MS的烟草栽培品种植物，其中所述第三烟草植物是选自已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的ALBEX1F和已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的ALBEX1MS的烟草栽培品种植物。
在另一个方面中，本发明包括生产选自具有另外的所需性状的ALBEX1F和ALBEX1MS的烟草栽培品种植物的方法，所述方法包括步骤：(a)从选自已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的ALBEX1F和已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的ALBEX1MS的烟草栽培品种植物收集能够繁殖的组织；和(b)将给予所需性状的转基因引入该组织中。
在一个方面中，本发明包括产生除草剂抗性烟草植物的方法，包括用转基因转化通过种植已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC保藏了所述栽培品种的代表性样品种子的烟草栽培品种ALBEX1F的种子产生的烟草植物，其中转基因赋予针对选自咪唑啉酮、环己二酮、磺酰脲、草甘膦、草铵磷、苯氧基丙酸、L-草胺膦、三嗪和苯基氰的除草剂的除草剂抗性。
在一个方面中，本发明包括通过产生除草剂抗性烟草植物的方法产生的除草剂抗性烟草植物，所述方法包括用转基因转化通过种植已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的烟草栽培品种ALBEX1F的种子产生的烟草植物，其中转基因赋予针对选自咪唑啉酮、环己二酮、磺酰脲、草甘膦、草铵磷、苯氧基丙酸、L-草胺膦、三嗪和苯基氰的除草剂的除草剂抗性。
在一个方面中，本发明包括产生抗害虫或抗昆虫烟草植物的方法，其中该方法包括用赋予害虫或昆虫抗性的转基因转化由已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的烟草栽培品种ALBEX1F的种子产生的烟草植物。
在一个方面中，本发明包括通过用赋予害虫或昆虫抗性的转基因转化由已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的烟草栽培品种ALBEX1F的种子产生的烟草植物所产生的抗害虫或抗昆虫烟草植物。
在一个方面中，本发明包括通过用赋予害虫或昆虫抗性的转基因转化由已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的烟草栽培品种ALBEX1F的种子产生的烟草植物所产生的抗害虫或抗昆虫烟草植物，其中所述转基因编码苏云金杆菌(Bacillusthuringiensis)(BT)内毒素。
在一个方面中，本发明包括产生抗病烟草植物的方法，其中该方法包括用赋予抗病性的转基因转化通过种植已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的烟草栽培品种ALBEX1F的种子产生的烟草植物。
在一个方面中，本发明包括用赋予抗病性的转基因转化通过种植已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC保藏了栽培品种的代表性样品种子的烟草栽培品种ALBEX1F的种子产生的烟草植物而产生的抗病性烟草植物。
序列简述
SEQ ID NO：1列出了cyp82e4W329Stop核苷酸序列。
SEQ ID NO：2列出了cyp82e4W329Stop氨基酸序列。
SEQ ID NO：3列出了CYP82E4野生型核苷酸序列。
SEQ ID NO：4列出了CYP82E4野生型氨基酸序列。
发明详述
ALBEX1F
本发明包括来自ALBEX1F的烟草栽培品种及其部分，其中该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏。在另一个方面中，本发明包括通过种植ALBEX1F的种子产生的烟草植物或一部分。本发明的植物可以包括具有相似条件下种植的栽培品种ALBEX1F的基本上全部形态学和生理学特征的植物。
尽管不受方法的限制，ALBEX1F是Tennessee90(非LC)(“TN90”)栽培品种中引入突变的CYP84基因的结果。该基因是2006年12月15日提交的并于2007年8月23日作为US2007／0199097公开的U.S.专利申请No.11／611,782中描述为4246的突变CYP82E4基因(SEQ ID NO：1，其示出了cyp82e4W382Stop，按引用将其全部并入本文中作为参考)。突变导致了截短的蛋白。
通过用TN90作为回交亲本回交五次和自交两次来产生ALBEX1F。ALBEX1F对cyp82e4W382Stop是纯合的。再次，不受任何特定科学理论的限制，cyp82e4W382Stop是隐性的。cyp82e4W382Stop编码将烟碱转化成去甲烟碱的能力降低或消除的蛋白。ALBEX1F具有至少95％，至少97％，至少98％或至少99％与TN90相似的遗传背景。ALBEX1F呈现出低NNN，并且没有发生高NNN的转化。
ALBEX1MS
本发明还提供了来自ALBEX1MS的烟草栽培品种及其部分，其中该栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC进行了保藏。本发明还包括通过种植ALBEX1MS的种子产生的烟草植物或其部分。本发明的植物可以包括具有相似条件下种植的栽培品种ALBEX1MS的基本上全部形态学和生理学特征的植物。尽管不受方法的限制，ALBEX1MS是从BCsF1TN90引入cyp82e4W382Stop突变的结果并且作为父本与TN90雄性不育(“MS”)系杂交以制备MS F1后代植物的结果。
BCsF1×MS TN90杂交的MS F1后代植物是雄性不育的。筛选这些MS F1后代植物(例如，BC6F1MS)的cyp82e4W382Stop突变。相似地，将BCsF1与TN90杂交以产生用于筛选该突变的可育BC6F1植物。鉴定为具有该突变的MS F1后代植物是随后与也具有该突变的可育父本BC6F1杂交的母本。这一杂交的后代(例如，BC7F1MS后代)是雄性不育的，并且是通过基因分鉴定为对cyp82e4W382Stop突变纯合的那些，且命名为ALBEX1MS。为了保持该品系，用ALBEX1F植物对品系ALBEX1MS植物的植物授粉。ALBEX1MS具有至少95％，至少97％，至少98％，至少99％与TN90相似的遗传背景。ALBEX1MS呈现出低NNN，并且没有发生高NNN的转化。
其他植物
本申请的后代植物可以是通过两种亲本植物杂交或一种植物自交获得的F1、F2、F3、F4或后续世代的植物。
本申请定义的在相似条件下可以是在相似环境条件下或在相似实验室条件下。
本发明包括通过将两种亲本烟草植物杂交并采收所得到的烟草种子产生的烟草种子，其中至少一种亲本烟草植物是ALBEX1F。在一个方面中，ALBEX1F是母本植物。在另一个方面中，ALBEX1MS是父本植物。本发明的一个方面提供了对于SEQ ID NO：1的cyp82e4基因座是纯合的烟草植物，其与TN90共有高于75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％的遗传背景。在一个方面中，大约或高于50％、75％或100％的后代的遗传是由在SEQ ID NO：1的cyp82e4基因座处纯合的本发明的植物提供的。在一个方面中，本发明的植物具有至少95％，至少97％，至少98％，或至少99％与TN90相似的遗传背景。在另一个方面中，本发明的植物呈现出低NNN并且没有发生高NNN的转化。在一个实施方案中，本发明的植物是抗镰刀菌(Fusarium)枯萎的母本或父本植物的后代植物。
在一个方面中，本发明的植物是具有适度高产潜能的中-晚熟品种。在另一个方面中，本发明的植物提供了宽范围的重要的农艺学特征。在再一个方面中，本发明的植物具有一个、两个、三个、四个或更多个性状，包括对黑梗病的适度抗性、对青霉病的一定耐受性、黑根腐病抗性和对常见病毒病的抗性。在另一个方面中，本发明的植物具有青霉病耐受性以及对黑梗病和高根腐病抗性两个种类的水平4的抗性。在一个方面中，本发明的植物，如ALBEX1F和ALBEX1MS，缺乏镰刀菌枯萎抗性。在另一个实施方案中，本发明的植物是抗镰刀菌枯萎的。
在一个方面中，与相似条件下种植的TN90或大部分其他商业白菜烟栽培品种相比，本发明的植物具有降低的或消除的将烟碱转化成去甲烟碱的能力。在一个方面中，烟碱百分转化率低于TN90中发现的转化率的75％、70％、60％、50％或25％。本发明的植物(包括ALBEX1F和ALBEX1MS)中的烟碱转化率可以低于约4％，3-1％，3-0.5％、2-0.5％、约2％、约1％。在优选方面中，烟碱百分转化率低于不具有cyp82e4W329Stop突变的TN90中发现的转化率的25％、10％、5％或2％。在一个方面中，本发明的烟草植物具有3.5、3.25、3.0或2.75％或更低的烟碱转化率。在另一个方面中，本发明的烟草植物的烟碱转化率可以为2.9、2.8、2.6、2.5、2.4、2.3、2.2、2.1、2.0、1.9、1.8、1.7、1.6、1.5、1.4、1.3、1.2、1.1、1.0、0.9、0.8、0.7、0.6％或更低。在另一个方面中，烟碱转化率可以为0.5至0.9％，0.5至1.5％，0.5至2.0％，0.5至2.5％，0.5至2.75％和0.5至3.0％。在另一个方面中，烟碱转化率可以为1.0至1.5％，1.0至1.75％，1.0％至2.0％，1.0至2.5％，1.0至2.75％和1.0至3.0％。在另一个方面中，本发明植物中的烟碱转化率可以低于2.9、2.75、2.5、2.25、2.0、1.9、1.8、1.7、1.6、1.5、1.4、1.3、1.2、1.1或1.0％。在一个方面中，本发明的烟草植物具有3.5、3.25、3.0或2.75％或更低的烟碱转化率。在另一个方面中，本发明烟草植物的烟碱转化率可以为2.9、2.8、2.7、2.6、2.5、2.4、2.3、2.2、2.1、2.0、1.9、1.8、1.7、1.6、1.5、1.4、1.3、1.2、1.1、1.0、0.9、0.8、0.7、0.6％或更低。在另一个方面中，烟碱转化率可以为0.5至0.9％，0.5％至1.5％，0.5至2.0％，0.5至2.5％，0.5至2.75％和0.5至3.0％。在另一个方面中，烟碱转化率可以为1.0至1.5％，1.0至1.75％，1.0％至2.0％，1.0至2.5％，1.0至2.75％和1.0至3.0％。在另一个方面中，本发明植物中的烟碱转化率可以低于2.9、2.75、2.5、2.25、2.0、1.9、1.8、1.7、1.6、1.5、1.4、1.3、1.2、1.1或1.0％。
在另一个方面中，与相似条件下生长和加工的TN90或大部分其他商业白菜烟栽培品种相比，本发明的烟草植物通常具有降低量的低于约0.10％干重的去甲烟碱。例如，这些植物中的去甲烟碱含量可以为1.2、1.0、0.7、0.5、0.4、0.2、0.1、0.075、0.05、0.025、0.01、0.009、0.0075、0.005、0.0025、0.001、0.0009、0.00075、0.0005、0.00025、0.0001％干重，或不可检测。在另一个方面中，去甲烟碱含量可以低于1.2、1.0、0.7、0.5、0.4、0.2、0.1、0.075、0.05、0.025、0.01、0.009、0.0075、0.005、0.0025、0.001、0.0009、0.00075、0.0005、0.00025、0.0001％干重。在另一个方面中，这些植物中的去甲烟碱含量可以为1.2-1.0、0.7-0.5、0.4-0.2、0.1-0.075、0.05-0.025、0.01-0.0075、0.005-0.0025、0.001-0.00075、0.0005-0.00025或0.0005-0.0001％干重。在本发明的植物中，与TN90的商业种子批相比，去甲烟碱是植物中的总生物碱的相对小的百分比。本发明植物中的去甲烟碱可以为总生物碱的2-1％，低于3％，约2％，约1.5％，约1％或0.75％百分比。使用来自本发明的植物或植物部分的烟草植物材料，可以制造出与相似条件下种植和加工的TN90或大部分其他商业白菜烟栽培品种制得的产品相比具有降低量的亚硝胺含量和／或更稳定的低烟碱转化的烟草产品。烟草产品通常具有低于约3mg／g的降低量的去甲烟碱。例如，这样的产品中的去甲烟碱含量可以为3.0mg／g、2.5mg／g、2.0mg／g、1.5mg／g、1.0mg／g、750μg／g、500pg／g、250pg／g、100pg／g、75pg／g、50pg／g、25pg／g、10pg／g、7.0pg／g、5.0pg／g、4.0pg／g、2.0pg／g、1.0pg／g、0.5pg／g、0.4pg／g、0.2pg／g、0.1pg／g、0.05pg／g、0.01pg／g，或不可检测。烟草产品通常具有低于10pg／g的降低量的NNN。例如，这样的产品中的NNN含量可以为约10pg／g、7.0pg／g、5.0pg／g、4.0pg／g、2.0pg／g、1.0pg／g、0.5pg／g、0.4pg／g、0.2pg／g、0.1pg／g、0.05pg／g、0.01pg／g，或不可检测。次要生物碱相对于本发明植物中所含的总生物碱含量的百分比与TN90的商业种子批没有统计学差异。
可以使用统计学方法来评价两个近交烟草品种或两个杂种烟草品种之间的差异。统计学分析包括平均值的计算、变异来源的统计显著性的确定和合适方差成分的计算。用于确定统计显著性的方法是本领域已知的。统计软件是可获得的，例如，SAS的PROC GLM函数。显著性通常呈现为“p-值”。统计学上显著的p-值小于0.10。在优选的方面中，p-值小于或等于0.05。在另一个方面中，p-值为0.04或更小，0.03或更小，0.02或更小。在再另一个方面中，统计学显著的值小于0.01。在再另一个方面中，其可以小于0.009，小于0.008，小于0.007，小于0.006，小于0.005，小于0.004，小于0.003，小于0.002或小于0.001。
对cyp82e4W329Stop等位基因纯合的本发明烟草植物具有统计学上显著低于具有野生型烟碱脱甲基酶CYP82E4基因的相应对照TN90植物的回复率。此外，纯合的CYP82E4突变体烟草植物具有低于3％的去甲烟碱百分转化率，例如，1至3％，2至3％，1.8至3.15％，1.8至2.0％，或1.0或2.0％。本发明的植物也可以是具有降低的回复率的非转化体，如2006年12月15日提交的并于2007年8月23日作为US2007／0199097公开的US专利申请No.11／611,782所列的，在此将其全部按引用并入本文中作为参考。
可以使用本领域已知的方法(例如，气相色谱)，在乙烯处理的叶子中测量烟碱和去甲烟碱。通过将样品中测量的去甲烟碱水平除以烟碱和去甲烟碱的总水平并乘以100来计算样品中烟碱脱甲基百分比。来自本发明植物的样品中的烟碱脱甲基百分比为由TN90商业种子批生长的个体植物的样品的50、40、30、20、10％。
在一个方面中，本发明的烟草植物具有约65的USDA质量指数。在另一个方面中，质量指数可以至少为约55、60、62.5或更高。在另一个方面中，本发明的烟草植物可以具有60-65、60-65、60-65、60-70、62.5-65、62.5-70或65-70的质量指数。
本发明的植物，包括ALBEX1F和ALBEX1MS，可以具有任何产量，包括高(例如，超过30001bs／A)、中等高(例如，2200-30001bs／A)和中等(例如，低于20001bs／A)的产能。
在另一个方面中，本发明还提供了从ALBEX1F或ALBEX1MS植物的种子生长的植物以及来自这些植物的植物部分和组织培养物，其中从所述种子生长的烟草植物获得的生物碱具有降低的去甲烟碱，这些栽培品种的代表性样品种子已经各自以ATCC保藏号PTA-11716和PTA-11717在ATCC进行了保藏。
本发明的一个方面提供了栽培品种ALBEX1F和ALBEX1MS的部分。例如，栽培品种ALBEX1F和ALBEX1MS的叶、花粉、胚芽、子叶、胚轴、根、根尖、花粉囊、花、胚珠、芽、茎、杆、木髓和蒴果、组织培养物(包括组织)、愈伤组织、细胞或原生质体。在另一个方面中，本发明提供了来自具有栽培品种ALBEX1F和ALBEX1MS作为亲本或祖先的杂种的部分，以及ALBEX1F和ALBEX1MS来源的烟草植物。在再另一个方面中，本发明提供了来自前述植物和组织培养物的遗传修饰(例如，通过常规育种或遗传工程化技术)的形式。
本发明的其他方面提供了包含烟草的产品，其中烟草进一步包含来自本发明植物及其部分的烟草。本发明的其他方面提供风干的植物叶和其他植物部分。因此，在一些方面中，风干的植物部分包括，但不限于，叶、花粉、胚芽、子叶、胚轴、分生细胞、原生质体、根、根尖、雌蕊、花粉囊、花、芽、茎、荚、叶柄等，及其组合。
因此，在一些方面中，本发明提供了风干的烟草，其包含命名为ALBEX1F的烟草植物的叶子，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏。在另一个方面中，本发明提供了风干的烟草，其包含命名为ALBEX1MS的烟草植物的叶子，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC进行了保藏。
因此，在一些方面中，本发明提供了风干的烟草，其包含命名为ALBEX1F的烟草植物的茎，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏。在另一个方面中，本发明提供了风干的烟草，其包含命名为ALBEX1MS的烟草植物的茎，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC进行了保藏。
在再其他的方面中，本发明提供了风干的烟草，其包含命名为ALBEX1F和ALBEX1MS的烟草植物的叶和茎，这些栽培品种的代表性样品种子已经各自以ATCC保藏号PTA-11716和PTA-11717在ATCC进行了保藏。
本发明还提供了本发明的ALBEX1F和ALBEX1MS种子或其他种子的容器，其中获自从高于50％的种子种植的烟草植物获得的生物碱具有降低的去甲烟碱。在另一个方面中，获自从高于55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％的容器中种子生长的本发明ALBEX1F或ALBEX1MS植物或其他植物的生物碱具有降低的去甲烟碱，这些栽培品种的代表性样品种子已经各自以ATCC保藏号PTA-11716和PTA-11717在ATCC进行了保藏。
本发明的ALBEX1F或ALBEX1MS种子或其他种子的容器可以包含任何数量、重量或体积的种子。例如，容器可以包含至少或高于约100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000或更多颗种子。或者，容器可以包含至少或高于约1盎司、5盎司、10盎司、1磅、2磅、3磅、4磅、5磅或更多的种子。ALBEX1F或ALBEX1MS栽培品种的代表性样品种子已经各自以ATCC保藏号PTA-11716和PTA-11717在ATCC进行了保藏。
本发明的ALBEX1F或ALBEX1MS种子或其他种子的容器可以是本领域中可得的任何容器。作为非限制性实例，容器可以是盒子、包、袋子、小袋、胶带卷(tape roll)、桶、锡箔或管子，这些栽培品种的代表性样品种子已经在ATCC进行了保藏。ALBEX1F和ALBEX1MS栽培品种的代表性样品种子已经各自以ATCC保藏号PTA-11716和PTA-11717在ATCC进行了保藏。
在另一个方面中，本发明还提供了ALBEX1F或ALBEX1MS的容器，其中高于50％的本发明ALBEX1F或ALBEX1MS种子或其他种子具有降低的去甲烟碱，这些栽培品种的代表性样品种子已经在ATCC进行了保藏。ALBEX1F和ALBEX1MS栽培品种的代表性样品种子已经分别以ATCC保藏号PTA-11716和PTA-11717在ATCC进行了保藏。
在一个方面中，本发明提供了本发明的ALBEX1F或ALBEX1MS植物或其他植物的种子，其中从种子生长的植物是雄性不育的。ALBEX1F和ALBEX1MS栽培品种的代表性样品种子已经分别以ATCC保藏号PTA-11716和PTA-11717在ATCC进行了保藏。
从本发明的烟草品系、栽培品种或杂种获得的烟草材料可以用于制备烟草产品，包括，但不限于，香烟产品(例如，香烟和bidi香烟)、雪茄产品(例如，雪茄包封烟草和小雪茄)、烟斗烟丝产品、无烟香烟产品、无烟烟草产品(例如，湿鼻烟、干鼻烟和嚼烟)、薄膜、咀嚼物、小垂片、成型部分、凝胶、可食用单位、不溶性基质、中空形状等。参见，例如，U.S.专利公开No.US2006／0191548，其按引用将其并入本文中作为参考。
源自本发明植物的烟草产品还包括香烟和其他抽烟物品，特别是包括滤嘴元件的抽烟物品，其中可抽吸材料的杆包括烟草混合物内的风干烟草。在一个方面中，烟草产品可以是烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、嚼烟、整烟叶、切碎烟丝和生切烟丝。
在一个方面中，本发明的烟草产品可以是混合的烟草产品。在本发明的其他方面中，与相似条件下种植和加工的TN90或大部分其他商业白菜烟栽培品种制备的产品相比，本发明的烟草产品可以是烟碱降低的烟草产品。在再其他的方面中，与相似条件下种植和加工的TN90或大部分其他商业白菜烟栽培品种制备的产品相比，本发明的烟草产品可以是具有降低的烟碱含量的混合烟草产品。因此，与相似条件下种植和加工的TN90或大部分其他商业白菜烟栽培品种制备的产品相比，本发明的烟草产品可以是混合的烟碱降低的烟草产品。烟草产品材料包括来自本发明的烟草材料的混合物，其中该混合物包括至少约5、10、20、30、40、50、60、70、80、90或95％重量的风干烟草，其基于烟草材料的干重。对于掺混混合物，按引用将US2008／0245377并入本文中作为参考。
在一个方面中，可以使用来自本发明的植物和植物部分的烟草植物材料制造与相似条件下种植和加工的TN90或大部分其他商业白菜烟栽培品种制备的产品相比具有降低量的去甲烟碱含量和／或更稳定的低烟碱转化的烟草产品。该烟草产品通常具有降低量的低于约3mg／g的去甲烟碱。例如，这样的产品中的去甲烟碱含量可以为3.0mg／g、2.5mg／g、2.0mg／g、1.5mg／g、1.0mg／g、750μg／g、500pg／g、250pg／g、100pg／g、75pg／g、50pg／g、25pg／g、10pg／g、7.0pg／g、5.0pg／g、4.0pg／g、2.0pg／g、1.0pg／g、0.5pg／g、0.4pg／g、0.2pg／g、0.1pg／g、0.05pg／g、0.01pg／g，或不可检测。该烟草产品通常具有低于约10pg/g的降低量的NNN。例如，这样的产品中的去甲烟碱含量可以为约10pg／g、7.0pg／g、5.0pg／g、4.0pg／g、2.0pg／g、1.0pg／g、0.5pg／g、0.4pg／g、0.2pg／g、0.1pg／g、0.05pg／g、0.01pg／g，或不可检测。次要生物碱相对于本发明植物中所含的总生物碱含量的百分比与TN90LC的商业种子批没有统计学差异。
本发明命名为ALBEX1F或ALBEX1MS的携带cyp82e4W329Stop等位基因的烟草植物可以用于植物育种程序中以形成有用的品系、栽培品种、品种、后代、近交系和杂种。因此，在一些方面中，将含有cyp82e4W329Stop等位基因的F1、F2、F3或后续世代的烟草植物与第二烟草属(Nicotiana)植物杂交，并且鉴定其中存在cyp82e4W329Stop等位基因的杂交后代。可以理解第二烟草属植物是ALBEX1F或ALBEX1MS，任选携带其他所需性状，如以下提及的除草剂抗性。还可以理解第二TN90或TN90LC烟草属植物将含有cyp82e4W329Stop等位基因。
在再其他的方面中，本发明的方法进一步包括自花授粉或用能够用于产生本发明后代(如，本发明的雄性不育杂种)的花粉供体给雄性不育花粉受体。雄性不育花粉受体植物或花粉供体植物在烟碱脱甲基酶基因座(如，cyp82e4W329Stop)处具有至少一个突变等位基因。在一个方面中，烟碱脱甲基酶基因座处的等位基因是突变等位基因，从而使得植物对cyp82e4W329Stop等位基因是纯合的。
可以通过任何已知程序来进行育种。DNA指纹、SNP或相似技术可以用于标记辅助选择(MAS)育种程序中，以将烟碱脱甲基酶基因的突变等位基因转移或繁殖至其他烟草中。例如，育种者可以从含有cyp82e4W329Stop等位基因的基因型与农业经济上所需的基因型的杂交来形成隔离群。可以使用从cyp82e4W329Stop等位基因或其片段产生的标记物，使用本领域已知的或本文中所列的技术之一筛选F2或回交世代的植物。可以将鉴定为具有cyp82e4W329Stop等位基因的植物回交或自花授粉以形成待筛选的第二群体。根据预期的遗传模式或所用的MAS技术，在每轮回交之前，可能需要将选定的植物自花授粉以帮助鉴定所需的单株植物。回交或其他育种程序可以重复直至恢复回交亲本的所需表型。本发明中的回交亲本可以是ALBEX1F或TN90。其他育种技术可以在例如Wersman，E.A.和Ruffy，R.C.1987，第17章，Tobacco，第669-698页，见：Cultivar Development.Crop Species.W.H.Fehr(编辑)，MacMillanPublishing Go.，Inc.，New York，N.Y中找到，按引用将其全部并入本文中作为参考。
呈现出与烟草(Nicotiana tabacum)育种相容性的烟草属物种包括Nicotiana amplexicaulis，PI271989；本氏烟(Nicotiana benthamiana)PI55478；印度烟草(Nicotianabigelovii)PI555485；Nicotiana debneyi；Nicotiana excelsior PI224063；粘毛烟草(Nicotiana glutinosa)PI555507；Nicotiana goodspeedii PI241012；野生烟草(Nicotiana gossei)PI230953；西烟草(Nicotiana hesperis)PI271991；Nicotiana knightiana PI555527；Nicotiana maritima PI555535；麦格隆熄丰烟(Nicotiana megalosiphon)PI555536；Nicotiana nudicaulis PI555540；Nicotiana paniculata PI555545；皱叶烟草(Nicotiana plumbaginifolia)PI555548；Nicotiana repanda PI555552；黄花烟草(Nicotiana rustica)；Nicotiana suaveolens PI230960；林烟草(Nicotiana sylvestris)PI555569；Nicotiana tomentosa PI266379；绒毛烟草(Nicotiana tomentosiformis)和Nicotiana trigonophyllaPI555572。还可以参阅，美国植物病理学学会出版的Compendium of TobaccoDiseases，或日本烟草公司说明、出版的The Genus Nicotiana，按引用将其全部并入本文中作为参考。
使用本文中所述的突变烟草植物的植物育种程序的结果包括有用的品系、栽培品种、品种、后代、近交系和杂种。如本文中所用的，术语“品种，，指的是共有恒定特征的植物群体，所述特征将其与相同物种的其他植物区分出来。品种常常是，尽管不总是，商业销售的。尽管具有一个或多个截然不同的性状，品种进一步的特征在于品种内个体之间非常小的总体变异。可以通过几个世代的自花授粉和选择或使用组织或细胞培养技术从单个亲本无性繁殖来形成“纯系”品种。品种可以基本上源自另一个品系或品种。如保护植物新品种国际公约(InternationalConvention for the Protection of New Varieties of Plants)(1962年12月2日，如在日内瓦1972年11月10日，1978年10月23日和1991年3月19日修订的)中所限定的，如果：a)主要源自初始品种，或来自主要源自初始品种的品种，同时保持获自初始品种的基因型或基因型组合的关键特征的表达；b)与初始品种可明显区分；和c)除了源自衍生作用的差异，源自初始品种的基因型或基因型组合的关键特征的表达符合初始品种，那么品种是“基本上源自”初始品种。特别地，例如，可以通过天然或诱导突变体的选择、体细胞无性系变体、来自初始品种的变体个体、回交或转化来获得基本衍生的品种。与品种区分开来的“品系”最常用来表示非商业使用的一组植物，例如，在植物研究中。品系通常对于个体之间的一个或多个目标性状展示出很小的总体变异，尽管在个体之间对于其他性状上存在一定变异。
可以通过防止第一品种的母本植物(即，种子亲本)的自花授粉，使得来自第二品种的父本植物的花粉使母本植物受精，并且允许在母本植物上形成F1杂体种子来产生杂种烟草品种。可以通过在花朵发育早期对花朵去雄来防止母本植物的自花授粉。或者，可以使用雄性不育形式防止母本植物上的花粉形成。例如，可以通过雄性不育(MS)或其中转基因抑制小孢子发生和／或花粉形成的转基因雄性不育或自交不亲和性来产生雄性不育。含有MS的母本植物特别有用。在其中母本植物是MS的方面中，从雄性不育植物收集花粉并人工施加至MS母本植物的柱头中，并收集所得到的F1种子。
植物可以用于形成单交烟草F1杂种。在这样一个方面中，可以作为基本上同源的邻接群来种植亲本品种的植物以有助于从父本植物自然地异花授粉至母本植物上。通过常规方式选择性地收集母本植物上形成的F1种子。还可以大批种植两个亲本品种，并收集作为自花授粉的结果在母本上形成的F1杂种种子和父本上形成的种子的混合物。或者，可以进行三元杂交，其中将单交F1杂种用作母本，并且与不同的父本杂交。作为另一个替代方案，可以形成双杂交杂种，其中将两个不同单交体的F1后代自交。自交不亲和性可以特别有利地用于防止形成双杂交杂种时母本的自花授粉。
成功杂交产生了F1植物(其是能育的)具有cyp82e4W329Stop等位基因，并且如果需要，可以与亲本之一回交，如ALBEX1F或TN90。在一些方面中，筛选F2代中植物群体的cyp82e4W329Stop等位基因。选定的植物可以与亲本之一杂交，并且将第一代回交(BC1)植物自花授粉以产生BC1F2群体，将其再次针对变体烟碱脱甲基酶基因表达(例如，烟碱脱甲基酶基因的无效突变形式)进行筛选。重复回交、自花授粉和筛选的过程，例如，重复至少4次，直至最终筛选产生了能育的并且与回交亲本相当相似的植物。如果需要，将这一植物自花授粉，并且随后再次筛选后代以证实植物呈现出与ALBEX1F相同的低烟碱转化表型。使用标准方法产生选定植物的育种者种子，所述方法包括，例如，田间试验、烟碱脱甲基酶的无效状况的证实、测定生物碱水平的风干烟叶的化学分析和／或测定去甲烟碱与烟碱+去甲烟碱比例的风干烟叶的化学分析。
在一个方面中，F1后代是ALBEX1F和ALBEX1MS之间的杂交以产生雄性不育的F1后代的结果。可以通过本领域已知的任何方法来产生雄性不育烟草植物。产生雄性不育烟草的方法描述于Wemsman，E.A.和Rufty,R.C.1987.第17章，Tobacco.Pages669-698，见：CultivarDevelopment.Crop Species.W.H.Fehr(编辑)，MacMillan Publishing Go.，Inc.，New York，N.Y761pp。
本发明进一步提供了通过将栽培品种ALBEX1F和ALBEX1MS之一与其自身或不同的烟草品系杂交来产生烟草植物的方法。本发明进一步涉及通过将栽培品种ALBEX1F和ALBEX1MS的植物与第二烟草植物杂交并且种植后代种子来产生ALBEX1F-或ALBEX1MS-汀生的烟草植物，从而产生源自栽培品种ALBEX1F和ALBEX1MS的其他烟草栽培品种或育种品系的方法。本发明的另外的方面提供了用于在其遗传材料中含有一个或多个转基因的烟草植物的方法，包括将本发明的栽培品种与含有一个或多个转基因的第二栽培品种杂交，其中产生后代，以使得从杂交获得的后代的遗传材料包含任选可操作连接一个或多个调控元件的转基因。在一个方面中，第二栽培品种可以是源自用一个或多个转基因转化的栽培品种ALBEX1F或ALBEX1MS的植物。
本发明进一步提供了栽培品种ALBEX1F和ALBEX1MS植物及其杂种和后代的无性繁殖。在一个方面中，本发明提供了无性繁殖烟草栽培品种植物的方法，包括从栽培品种ALBEX1F和ALBEX1MS植物收集能够繁殖的组织，培育该组织以获得增殖的芽，并将增殖的芽生根以获得生根的幼苗。在另一个方面中，可以从栽培品种ALBEX1F和ALBEX1MS植物的F1杂种收集植物组织。在一个方面中，可以从通过栽培品种ALBEX1F和ALBEX1MS植物育种获得的F2、F3、F4或之后的后代植物收集植物组织。
可以通过选择或筛选诱变的植物材料或其后代来鉴定在烟碱脱甲基酶基因中包含突变的植物。这样的筛选和选择方法是本领域普通技术人员已知的。筛选和选择方法的实例包括，但不限于，Southern分析、用于检测多核苷酸的PCR扩增、Northem印迹、RNase保护、引物延伸、用于检测RNA转录本的RT-PCT扩增、用于检测多肽和多核苷酸的酶或核酶活性的酶试验和蛋白凝胶电泳、Western印迹、免疫沉淀和检测多肽的酶联免疫实验。其他技术，如原位杂交、酶染色和免疫染色，也可以用于检测多肽和／或多核苷酸的存在或表达。用于进行所有提及技术的方法是已知的。
可以理解，可以使用本领域已知的技术，通过遗传构建体或转基因转化本发明的烟草植物，包括ALBEX1F和ALBEX1MS。没有限制，所需性状的实例是除草剂抗性、抗害虫性、抗病性；高产量；高等级指数；可保存性；晾干质量；机械采收性；保持能力；烟叶质量；高度、植物成熟(例如，早熟、早至中熟、中熟、中至晚熟或晚熟)；茎大小(例如，小茎、中茎、大茎)；或每株植物的叶数(例如，小(例如，5-10片叶)、中(例如，11-15片叶)，或大(例如，16-21片叶)叶数)，或其任意组合。本发明的任何植物可以用作用于组织培养、再生、转化的基础，或这些的任意组合。在一个方面中，通过组织培养、转化或两者衍生的本发明的植物具有在相似条件下种植的栽培品种ALBEX1F或ALBEX1MS的基本上全部形态学和生理学特征。
尽管现在已经概括地描述了本发明，通过参考以下作为说明提供的实施例将更容易理解本发明，但以下实施例不是用来限制本发明，除非特意指出。
实施例
实施例1
纯合cyp82e4W329Stop突变植物繁育至TN90背景中
ALBEX1F是在cyp82e4中携带引入的有害突变的白菜烟栽培品种TN90的回交衍生形式，cys82e4是之前证明编码烟碱脱甲基酶的基因。为了制备ALBEX1F，选择从TN90的商业种子批生长的单株植物，并且最初在温室中与植物4246-8杂交。4246-8是对于cyp82e4W329Stop突变杂合的烟草栽培品种。筛选多个F1植物中cyp82e4W329Stop突变的存在。选择单株F1植物，并且在温室中与TN90回交以产生BC1F1后代。筛选多个BC1F1后代，并且鉴定对于cyp82e4W329Stop突变杂合的单株植物。将选定的杂合BC1F1植物在温室中与TN90回交以产生BC2F1种子。筛选多个BC2F1植物中cyp82e4W329Stop突变的存在以鉴定杂合的后代植物用于随后一轮的回交育种。使用这种回交程序，在BC3F1、BC4F1和BC5F1后代中鉴定出具有cyp82e4W329Stop突变的单株杂合植物。
为了产生对于cyp82e4W329Stop突变纯合的植物，筛选BC5F1后代植物中的cyp82e4W329Stop突变以鉴定出杂合植物。将对于cyp82e4W329Stop突变杂合的单株植物自花授粉以产生BC5F2种子。对多个BC5F2后代进行基因分型以鉴定对于cyp82e4W329Stop突变纯合的个体。将四个单株BC5F2后代植物自花授粉以产生四个BC5F3后代品系。BC5F3对于cyp82e4W329Stop突变是纯合的。
实施例2
雄性不育系的制备
为了制备雄性不育(MS)系，选择(上述)实施例1中制备的对于cyp82e4W329Stop突变杂合的BC5F1的后代植物，并且作为花粉亲本与MS TN90杂交。BC5F1×MS TN90杂交的MS F1后代植物是雄性不育的。筛选这些MS F1后代植物(例如，BC6F1MS)的cyp82e4W329Stop突变。相似地，将BC5F1与TN90杂交以产生用于筛选该突变的可育BC6F1。鉴定为具有该突变的MS F1后代植物是随后与也具有该突变的可育父本BC6F1杂交的母本。这种杂交的后代(例如，BC7F1MS后代)是雄性不育的，并且通过基因分型鉴定对于cyp82e4W329Stop突变纯合的那些，并命名为ALBEX1MS。为了维持该品系，用ALBEX1F植物给ALBEX1MS品系植物的植物授粉。
实施例3
ALBEX1MS杂种的田间试验
在2010年期间，在Blackstone田间研究区域，将来自四个ALBEX1MS后代品系的植物种植于随机完成的地块设计中，进行三次重复，用于评价晾干烟叶化学性质、产量和物理性质。每个重复的地块是2-排用地，每块25株植物。成熟时将植物割下主茎，风干并且通过先前的USDA烟草等级进行评价。地块体量(plot weight)用于确定每英亩产量。收集十二株不同测试植物顶部的第四片叶子以制备来自各地块的五十克复合烟叶样品。通过气相色谱分析复合样品的烟碱、去甲烟碱、新烟草碱和假木贼碱的百分比。
ALBEX1MS杂种的分析
气相色谱生物碱分析的结果呈现于表1中。使用JMP统计学软件分析了气相色谱结果，并进行了一元方差分析。发现ALBEX1MS杂种对于烟碱、去甲烟碱、假木贼碱和新烟草碱、烟碱转化、次要生物碱与总生物碱的比例、产量或风干烟叶质量的差异没有显著不同。
Figure BPA0000179613820000431
保藏信息
以上公开的和所附权利要求中具有所有权的近交植物系的至少2500粒种子已经在10801University Boulevard，Manassas，VA20110的美国典型培养物保藏中心(ATCC)进行了保藏。ALBEX1F和ALBEX1MS的保藏日为2011年2月28日，两者的保藏者都为Altria Client Services Inc。从直至在本申请的申请日之前维持的相同保藏获取了每个品种的2500粒种子的保藏。在专利授权时，对保藏的所有限制将解除，并且确定该保藏满足37C.F.R.§1.801-1.809的所有要求。近交系ALBEX1F和ALBEX1MS的ATCC保藏号各自为PTA-11716和PTA-11717。这些保藏将在保藏机构维持30年的时间，或在最后要求后5年，或持续专利的有效期，以较长的时间为准，并且在该时间段内可以按照需要替换。申请人不豁免依据该专利或依据植物品种保护法(7U.S.C.2321et seq.)授予的权利的任何侵犯。
Figure IPA0000179613780000021
Figure IPA0000179613780000031
Figure IPA0000179613780000041
Figure IPA0000179613780000051
Figure IPA0000179613780000061

Claims (21)

1.一种由通过种植烟草栽培品种ALBEX1F的种子产生的烟草植物或其部分制得的烟草产品，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏。
2.权利要求1的烟草产品，其中所述产品选自小雪茄、不通气的凹过滤嘴香烟、通气的凹过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟、烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、整烟叶、切碎烟丝、生切烟丝和嚼烟。
3.权利要求2的烟草产品，其中所述产品具有降低量的去甲烟碱。
4.一种由通过种植烟草栽培品种ALBEX1MS的种子产生的烟草植物或其部分制得的烟草产品，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC进行了保藏。
5.权利要求4的烟草产品，其中所述产品选自小雪茄、不通气的凹过滤嘴香烟、通气的凹过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟、烟斗烟丝、雪茄烟叶、卷烟烟叶、整烟叶、切碎烟丝、生切烟丝和嚼烟。
6.权利要求5的烟草产品，其中所述产品具有降低量的去甲烟碱。
7.烟草栽培品种ALBEX1F的种子，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏。
8.通过种植权利要求7的种子产生的烟草植物或其部分。
9.权利要求8的烟草植物或其部分的采收烟叶。
10.权利要求9的采收烟叶，其中所述烟叶具有降低量的去甲烟碱。
11.权利要求10的采收烟叶，其中所述降低量的去甲烟碱是在由所述烟叶产生的烟雾流中降低的。
12.权利要求8的植物的部分，其选自叶、花粉、胚珠、胚芽、子叶、胚轴、分生细胞、原生质体、根、根尖、雌蕊、花粉囊、花、芽、茎、荚和叶柄。
13.烟草栽培品种ALBEX1MS的种子，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC进行了保藏。
14.通过种植权利要求13的种子产生的烟草植物或其部分。
15.权利要求14的烟草植物或其部分的采收烟叶。
16.权利要求15的采收烟叶，其中所述烟叶具有降低量的去甲烟碱。
17.权利要求16的采收烟叶，其中所述降低量的去甲烟碱是在由所述烟叶产生的烟雾流中降低的。
18.权利要求14的植物的部分，选自叶、花粉、胚珠、胚芽、子叶、胚轴、分生细胞、原生质体、根、根尖、雌蕊、花粉囊、花、芽、茎、荚和叶柄。
19.烟草栽培品种ALBEX1F的F2后代植物，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11716在ATCC进行了保藏。
20.烟草栽培品种ALBEX1MS的F2后代植物，所述栽培品种的代表性样品种子已经以ATCC保藏号PTA-11717在ATCC进行了保藏。
21.权利要求19的F2后代植物，其中所述F2植物是雄性不育的(MS)。
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