CN105517430A - 烟草近交植物k326 src、cms k326 src、k346 src、cms k346 src、nc1562-1 src、nctg-61 src、cms nctg-61 src和杂交种nc196 src - Google Patents

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Abstract

本公开提供烟草近交植物K326？SRC、CMS？K326？SRC、K346SRC、CMS？K346？SRC、NC1562-1？SRC、NCTG-61？SRC、CMS？NCTG-61SRC和杂交种NC196？SRC。本公开还提供这些植物的部分和由这些部分制备的产品。本公开还包括所提供植物(包括杂交种)的后代。

Description

烟草近交植物K326 SRC、CMS K326 SRC、K346 SRC、CMS K346 SRC、NC1562-1 SRC、NCTG-61 SRC、CMS NCTG-61 SRC和杂交种NC196 SRC
优先权声明
本申请根据35U.S.C.§119(e)要求向美国专利商标局于2013年1月11日提交的美国临时专利申请第61/751,720号和于2013年6月4日提交的美国临时专利申请第61/830,908号的权益，所述申请的全文以引用的方式并入本文。
序列表引入
序列表全文以引用的方式并入本文，包括大小为38,002字节并创建于2013年1月10日的命名为P34035US00.txt的文件，其全文在此以引用方式并入本文。
技术领域
本公开提供烟草近交植物K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC、CMSNCTG-61SRC和杂交种NC196SRC。本公开还提供这些植物的部分和由这些部分制备的产品。本公开还包括所提供植物(包括杂交种)的后代。
背景技术
在美国和其他国家中红花烟草(NicotianatabacumL.)是一种重要的经济作物。在烟草植物中，烟碱N-去甲基化形成降烟碱，所述降烟碱已知是烤叶中形成N-亚硝基降烟碱(“NNN”)的前体的次级生物碱。NNN是烤叶中不期望的成分。
在商业烟草品种中发现的主要生物碱是烟碱，一般占总生物碱池的90-95％。剩下的生物碱部分主要由三种其他吡啶生物碱组成：降烟碱、假木贼碱和新烟草碱。降烟碱从烟碱直接通过酶烟碱N-脱甲基酶的活性生成。降烟碱通常占总吡啶碱池的小于5％，但通过称为“转化”的过程，初始产生非常少量降烟碱的烟草植物产生将大比例的叶片烟碱代谢“转化”为降烟碱的后代。在已经遗传转化的烟草植物(称为“转化体”)中，非常大量的降烟碱产生出现在成熟叶的衰老和熟化期间(Wernsman和Matzinger(1968)，Tob.Sci.，12：226-228)。白肋烟尤其易于遗传转化，其中在一些栽培品种中观察到每代高达20％的比率。
在烟草叶的熟化和加工期间，一部分降烟碱被代谢为化合物NNN，一种在实验室动物中被断言是致癌的烟草-特异性亚硝胺(TSNA)(Hecht和Hoffmann(1990)，CancerSurveys，8：273-294；Hoffmann等(1994)，J.Toxicol.Environ.Health，41：1-52；Hecht(1998)，Chem.Res.Toxicol.，11：559-603)。在烤制熟化的烟草中，发现TSNA主要通过生物碱与少量的氮氧化物的反应形成，所述氮氧化物存在于传统熟化室中发现的直燃式加热系统形成的燃烧气体中(Peele和Gentry(1999)，“FormationofTobacco-specificNitrosaminesinFlue-curedTobacco，”CORESTAMeeting，Agro-PhytoGroups，Suzhou，China)。用热交换器改造这些熟化室实质上消除了燃烧气体与熟化空气的混合且大幅降低了以这种方式熟化的烟草中TSNA的形成(Boyette和Hamm(2001)，Rec.Adv.Tob.Sci.，27：17-22)。相反，在空气熟化的白肋烟中，TSNA形成主要通过烟草生物碱与亚硝酸盐的反应进行，该反应是由叶载微生物催化的过程(Bush等(2001)，Rec.Adv.Tob.Sci.，27：2346)。因此到目前为止，尝试通过改变熟化条件同时保持可接受的质量标准来降低TSNA对于空气熟化烟草还没有被证明是成功的。
发明简述
在一个方面，本公开包括烟草栽培品种K326SRC的种子，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种K326SRC的种子产生的烟草植物或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC。
在进一步的方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种K326SRC的种子产生的烟草植物或其部分的收获叶或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC。
在一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种K326SRC的种子产生的烟草植物的收获叶或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC，其中所述叶具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量。
在一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种K326SRC的种子产生的收获叶或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC，其中所述叶具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量，其中所述降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量是在由叶产生的烟气流中降低。
在进一步的方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种K326SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草制品，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC，其中所述制品选自斗烟、雪茄、卷烟、嚼烟、烟叶、烟丝(shreddedtobacco)和烟丝(cuttobacco)。
在一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种K326SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草制品，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC，其中所述制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。
在另一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种K326SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草制品，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC，其中所述制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，且其中所述制品具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量。
在一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种K326SRC的种子产生的烟草植物的部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC，其中所述部分选自叶、花粉、胚珠、胚、子叶、下胚轴、分生细胞、原生质体、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚果和叶柄。
在另一个方面，本公开包括从通过种植烟草栽培品种K326SRC的种子产生的烟草植物或其部分的原生质体或细胞产生的组织培养物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC，其中所述组织培养物的细胞或原生质体从选自以下的植物部分产生：叶、花粉、胚珠、胚、子叶、下胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚果和叶柄。
在一个方面，本公开包括从来自通过种植烟草栽培品种K326SRC的种子产生的烟草植物或其部分的原生质体或细胞产生的组织培养物再生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC，其中所述组织培养物的细胞或原生质体从选自以下的植物部分产生：叶、花粉、胚珠、胚、子叶、下胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚果和叶柄，且所述再生植物具有栽培品种K326SRC所有或基本上所有的形态和生理特征。
在一个方面，本公开包括烟草栽培品种K326SRC的F1后代植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开包括烟草栽培品种K326SRC的F1后代植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC，其中所述F1植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在另一个方面，本公开包括通过包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种K326SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在另一个方面，本公开包括产生烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种K326SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开包括产生烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种K326SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC，其中所述烟草栽培品种K326SRC的植物是父本。
在另一个方面，本公开包括产生烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种K326SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC，其中所述烟草栽培品种K326SRC的植物是母本。
在另一个方面，本公开包括产生烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种K326SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在一个方面，本公开还包括通过包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子的容器，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种K326SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在一个方面，本公开包括种植通过包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的种子产生的F1后代植物，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种K326SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC，且其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在一个方面，本公开还包括通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的种子产生的F1后代植物的收获叶，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种K326SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在另一个方面，本公开进一步包括具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量的F1后代植物的收获叶，所述F1后代植物通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得烟草的种子的方法产生的种子产生，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种K326SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在一个方面，本公开还包括在由其产生的烟气流中具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量的F1后代植物的收获叶，所述植物通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得烟草的种子的方法产生的种子产生，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种K326SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在一个方面，本公开包括由F1后代烟草植物或其部分制备的烟草制品，其中所述植物或其部分通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子产生，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种K326SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育，和其中所述烟草制品选自斗烟、雪茄、卷烟、嚼烟、烟叶、烟丝(shreddedtobacco)和烟丝(cuttobacco)。
在一个方面，本公开进一步包括由F1后代烟草植物或其部分制备的烟草制品，其中所述植物或其部分通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子产生，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种K326SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育，和其中所述烟草制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。
在一个方面，本公开进一步包括由F1后代烟草植物或其部分制备的烟草制品，其中所述植物或其部分通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子产生，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种K326SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育，和其中所述烟草制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，且进一步其中所述制品具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量。
在另一个方面，本公开包括烟草栽培品种CMSK326SRC的种子，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC。
在一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种CMSK326SRC的种子产生的烟草植物或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种CMSK326SRC的种子产生的烟草植物或其部分的收获叶或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC。
在一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种CMSK326SRC的种子产生的烟草植物的收获叶或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC，其中所述叶具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量。
在另一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种CMSK326SRC的种子产生的收获叶或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC，其中所述叶具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量，其中所述降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量是在由叶产生的烟气流中降低。
在进一步的方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种CMSK326SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草制品，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC，其中所述制品选自斗烟、雪茄、卷烟、嚼烟、烟叶、烟丝(shreddedtobacco)和烟丝(cuttobacco)。
在一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种CMSK326SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草制品，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC，其中所述制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。
在另一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种CMSK326SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草制品，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC，其中所述制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，其中所述制品具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量。
在一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种CMSK326SRC的种子产生的烟草植物的部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC，其中所述部分选自叶、花粉、胚珠、胚、子叶、下胚轴、分生细胞、原生质体、根、根尖、雌蕊、花药、花瓣、芽、茎、荚果和叶柄。
在另一个方面，本公开包括从通过种植烟草栽培品种CMSK326SRC的种子产生的烟草植物或其部分的原生质体或细胞产生的组织培养物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC，其中所述组织培养物的细胞或原生质体从选自以下的植物部分产生：叶、花粉、胚珠、胚、子叶、下胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚果和叶柄。
在一个方面，本公开包括从通过种植烟草栽培品种CMSK326SRC的种子产生的烟草植物或其部分的原生质体或细胞产生的组织培养物再生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC，其中所述组织培养物的细胞或原生质体从选自以下的植物部分产生：叶、花粉、胚珠、胚、子叶、下胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚果和叶柄，且所述再生植物具有栽培品种K326SRC所有或基本上所有的形态和生理特征。
在一个方面，本公开包括烟草栽培品种CMSK326SRC的F1后代植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开包括烟草栽培品种CMSK326SRC的F1后代植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC，其中所述F1植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在另一个方面，本公开包括通过包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种CMSK326SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开包括产生烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种CMSK326SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开包括产生烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种CMSK326SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC，其中所述烟草栽培品种CMSK326SRC的植物是母本。
在另一个方面，本公开包括产生烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)，其中所述细胞质雄性不育植物是烟草栽培品种CMSK326SRC的植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC。
在一个方面，本公开还包括通过包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子的容器，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)，其中所述细胞质雄性不育植物是通过种植烟草栽培品种CMSK326SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC。
在一个方面，本公开包括种植通过包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的种子产生的F1后代植物，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)，其中所述细胞质雄性不育植物是通过种植烟草栽培品种CMSK326SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC。
在一个方面，本公开还包括通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的种子产生的F1后代植物的收获叶，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)，其中所述细胞质雄性不育植物是通过种植烟草栽培品种CMSK326SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开进一步包括具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量的F1后代植物的收获叶，所述F1后代植物通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的种子产生，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)，其中所述细胞质雄性不育植物是通过种植烟草栽培品种CMSK326SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC。
在一个方面，本公开还包括在由其产生的烟气流中具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量的F1后代植物的收获叶，所述植物通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的种子产生，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)，其中所述细胞质雄性不育植物是通过种植烟草栽培品种CMSK326SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC。
在一个方面，本公开包括由F1后代烟草植物或其部分制备的烟草制品，其中所述植物或其部分通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子产生，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)，其中所述细胞质雄性不育植物是通过种植烟草栽培品种CMSK326SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC，和其中所述烟草制品选自斗烟、雪茄、卷烟、嚼烟、烟叶、烟丝(shreddedtobacco)和烟丝(cuttobacco)。
在一个方面，本公开进一步包括由F1后代烟草植物或其部分制备的烟草制品，其中所述植物或其部分通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子产生，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)，其中所述细胞质雄性不育植物是通过种植烟草栽培品种CMSK326SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC，和其中所述烟草制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。
在一个方面，本公开进一步包括由F1后代烟草植物或其部分制备的烟草制品，其中所述植物或其部分通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子产生，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)，其中所述细胞质雄性不育植物是通过种植烟草栽培品种CMSK326SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC，和其中所述烟草制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，且进一步其中所述制品具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量。
在一个方面，本公开包括产生烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育，其中所述细胞质雄性不育植物是烟草栽培品种CMSK326SRC的植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开包括烟草栽培品种K346SRC的种子，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC。
在一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种K346SRC的种子产生的烟草植物或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种K346SRC的种子产生的烟草植物或其部分的收获叶或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC。
在一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种K346SRC的种子产生的烟草植物的收获叶或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC，其中所述叶具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量。
在另一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种K346SRC的种子产生的收获叶或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC，其中所述叶具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量，其中所述降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量是在由叶产生的烟气流中降低。
在进一步的方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种K346SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草制品，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC，其中所述制品选自斗烟、雪茄、卷烟、嚼烟、烟叶、烟丝(shreddedtobacco)和烟丝(cuttobacco)。
在一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种K346SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草制品，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC，其中所述制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。
在另一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种K346SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草制品，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC，其中所述制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，其中所述制品具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量。
在一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种K346SRC的种子产生的烟草植物的部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC，其中所述部分选自叶、花粉、胚珠、胚、子叶、下胚轴、分生细胞、原生质体、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚果和叶柄。
在另一个方面，本公开包括从通过种植烟草栽培品种K346SRC的种子产生的烟草植物或其部分的原生质体或细胞产生的组织培养物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC，其中所述组织培养物的细胞或原生质体从选自以下的植物部分产生：叶、花粉、胚珠、胚、子叶、下胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚果和叶柄。
在一个方面，本公开包括从来自通过种植烟草栽培品种K346SRC的种子产生的烟草植物或其部分的原生质体或细胞产生的组织培养物再生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC，其中所述组织培养物的细胞或原生质体从选自以下的植物部分产生：叶、花粉、胚珠、胚、子叶、下胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚果和叶柄，且所述再生植物具有栽培品种K346SRC所有或基本上所有的形态和生理特征。
在一个方面，本公开包括烟草栽培品种K346SRC的F1后代植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开包括烟草栽培品种K346SRC的F1后代植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC，其中所述F1植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在另一个方面，本公开包括产生烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种K346SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开包括产生烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种K346SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC，其中所述烟草栽培品种K346SRC的植物是父本。
在另一个方面，本公开包括产生烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种K346SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC，其中所述烟草栽培品种K346SRC的植物是母本。
在另一个方面，本公开包括产生烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种K346SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在一个方面，本公开还包括通过包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种K346SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在一个方面，本公开包括种植通过包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子的容器，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种K346SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC，且其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在一个方面，本公开还包括通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的种子产生的F1后代植物，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种K346SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在一个方面，本公开还包括通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的种子产生的F1后代植物的收获叶，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种K346SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在另一个方面，本公开进一步包括具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量的F1后代植物的收获叶，所述F1后代植物通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的种子产生，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种K346SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在一个方面，本公开还包括在由其产生的烟气流中具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量的F1后代植物的收获叶，所述植物通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的种子产生，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种K346SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在一个方面，本公开包括由F1后代烟草植物或其部分制备的烟草制品，其中所述植物或其部分通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子产生，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种K346SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育，和其中所述烟草制品选自斗烟、雪茄、卷烟、嚼烟、烟叶、烟丝(shreddedtobacco)和烟丝(cuttobacco)。
在一个方面，本公开进一步包括由F1后代烟草植物或其部分制备的烟草制品，其中所述植物或其部分通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子产生，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种K346SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育，和其中所述烟草制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。
在一个方面，本公开进一步包括由F1后代烟草植物或其部分制备的烟草制品，其中所述植物或其部分通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子产生，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种K346SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育，和其中所述烟草制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，且进一步其中所述制品具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量。
在另一个方面，本公开包括烟草栽培品种CMSK346SRC的种子，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC。
在一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种CMSK346SRC的种子产生的烟草植物或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种CMSK346SRC的种子产生的烟草植物或其部分的收获叶或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC。
在一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种CMSK346SRC的种子产生的烟草植物的收获叶或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC，其中所述叶具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量。
在另一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种CMSK346SRC的种子产生的收获叶或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC，其中所述叶具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量，其中所述降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量是在由叶产生的烟气流中降低。
在进一步的方面，本公开包括用通过种植烟草栽培品种CMSK346SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草制品，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC，其中所述制品选自斗烟、雪茄、卷烟、嚼烟、烟叶、烟丝(shreddedtobacco)和烟丝(cuttobacco)。
在一个方面，本公开包括通过用种植烟草栽培品种CMSK346SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草制品，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC，其中所述制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。
在另一个方面，本公开包括通过用种植烟草栽培品种CMSK346SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草制品，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC，其中所述制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，且其中所述制品具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量。
在一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种CMSK346SRC的种子产生的烟草植物的部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC，其中所述部分选自叶、花粉、胚珠、胚、子叶、下胚轴、分生细胞、原生质体、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚果和叶柄。
在另一个方面，本公开包括从通过种植烟草栽培品种CMSK346SRC的种子产生的烟草植物或其部分的原生质体或细胞产生的组织培养物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC，其中所述组织培养物的细胞或原生质体从选自以下的植物部分产生：叶、花粉、胚珠、胚、子叶、下胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚果和叶柄。
在一个方面，本公开包括从来自通过种植烟草栽培品种CMSK346SRC的种子产生的烟草植物或其部分的原生质体或细胞产生的组织培养物再生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC，其中所述组织培养物的细胞或原生质体从选自以下的植物部分产生：叶、花粉、胚珠、胚、子叶、下胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚果和叶柄，所述再生植物具有栽培品种K326SRC所有或基本上所有的形态和生理特征。
在一个方面，本公开包括烟草栽培品种CMSK346SRC的F1后代植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开包括烟草栽培品种CMSK346SRC的F1后代植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC，其中所述F1植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在另一个方面，本公开包括通过包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)，其中细胞质雄性不育植物是烟草栽培品种CMSK346SRC的植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开包括产生烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种CMSK346SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开包括产生烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种CMSK346SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC，其中所述烟草栽培品种CMSK326SRC的植物是母本。
在另一个方面，本公开包括产生烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育，其中所述细胞质雄性不育植物是烟草栽培品种CMSK346SRC的植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC。
在一个方面，本公开还包括通过包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子的容器，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)，其中所述细胞质雄性不育植物是通过种植烟草栽培品种CMSK346SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC。
在一个方面，本公开包括种植通过包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的种子产生的F1后代植物，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)，其中所述细胞质雄性不育植物是通过种植烟草栽培品种CMSK346SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC。
在一个方面，本公开还包括通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的种子产生的F1后代植物的收获叶，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)，其中所述细胞质雄性不育植物是通过种植烟草栽培品种CMSK346SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开进一步包括具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量的F1后代植物的收获叶，所述F1后代植物通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的种子产生，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)，其中所述细胞质雄性不育植物是通过种植烟草栽培品种CMSK346SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC。
在一个方面，本公开还包括在由其产生的烟气流中具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量的F1后代植物的收获叶，所述植物通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的种子产生，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)，其中所述细胞质雄性不育植物是通过种植烟草栽培品种CMSK346SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC。
在一个方面，本公开包括由F1后代烟草植物或其部分制备的烟草制品，其中所述植物或其部分通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子产生，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)，其中所述细胞质雄性不育植物是通过种植烟草栽培品种CMSK346SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC，和其中所述烟草制品选自斗烟、雪茄、卷烟、嚼烟、烟叶、烟丝(shreddedtobacco)和烟丝(cuttobacco)。
在一个方面，本公开进一步包括由F1后代烟草植物或其部分制备的烟草制品，其中所述植物或其部分通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子产生，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)，其中所述细胞质雄性不育植物是通过种植烟草栽培品种CMSK346SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC，和其中所述烟草制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。
在一个方面，本公开进一步包括由F1后代烟草植物或其部分制备的烟草制品，其中所述植物或其部分通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子产生，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)，其中所述细胞质雄性不育植物是通过种植烟草栽培品种CMSK346SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC，和其中所述烟草制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，且进一步其中所述制品具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量。
在一个方面，本公开包括烟草栽培品种NC1562-1SRC的种子，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种NC1562-1SRC的种子产生的烟草植物或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC。
在进一步的方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种NC1562-1SRC的种子产生的烟草植物或其部分的收获叶或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC。
在一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种NC1562-1SRC的种子产生的烟草植物的收获叶或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC，其中所述叶具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量。
在一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种NC1562-1SRC的种子产生的收获叶或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC，其中所述叶具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量，其中所述降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量是在由叶产生的烟气流中降低。
在进一步的方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种NC1562-1SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草制品，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC，其中所述制品选自斗烟、雪茄、卷烟、嚼烟、烟叶、烟丝(shreddedtobacco)和烟丝(cuttobacco)。
在一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种NC1562-1SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草制品，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC，其中所述制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。
在另一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种NC1562-1SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草制品，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC，其中所述制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，其中所述制品具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量。
在一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种NC1562-1SRC的种子产生的烟草植物的部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC，其中所述部分选自叶、花粉、胚珠、胚、子叶、下胚轴、分生细胞、原生质体、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚果和叶柄。
在另一个方面，本公开包括从通过种植烟草栽培品种NC1562-1SRC的种子产生的烟草植物或其部分的原生质体或细胞产生的组织培养物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC，其中所述组织培养物的细胞或原生质体从选自以下的植物部分产生：叶、花粉、胚珠、胚、子叶、下胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚果和叶柄。
在一个方面，本公开包括从来自通过种植烟草栽培品种NC1562-1SRC的种子产生的烟草植物或其部分的原生质体或细胞产生的组织培养物再生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC，其中所述组织培养物的细胞或原生质体从选自以下的植物部分产生：叶、花粉、胚珠、胚、子叶、下胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚果和叶柄，所述再生植物具有栽培品种NC1562-1SRC所有或基本上所有的形态和生理特征。
在一个方面，本公开包括烟草栽培品种NC1562-1SRC的F1后代植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开包括烟草栽培品种NC1562-1SRC的F1后代植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC，其中所述F1植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在另一个方面，本公开包括通过包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NC1562-1SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在另一个方面，本公开包括产生烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NC1562-1SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开包括产生烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NC1562-1SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC，其中所述烟草栽培品种NC1562-1SRC的植物是母本。
在另一个方面，本公开包括产生烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NC1562-1SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC，其中所述烟草栽培品种NC1562-1SRC的植物是父本。
在另一个方面，本公开包括产生烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NC1562-1SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在一个方面，本公开还包括通过包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子的容器，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NC1562-1SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在一个方面，本公开包括种植通过包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的种子产生的F1后代植物，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NC1562-1SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC，且其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在一个方面，本公开还包括通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的种子产生的F1后代植物的收获叶，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NC1562-1SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在另一个方面，本公开进一步包括具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量的F1后代植物的收获叶，所述F1后代植物通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的种子产生，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NC1562-1SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在一个方面，本公开还包括在由其产生的烟气流中具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量的F1后代植物的收获叶，所述植物通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的种子产生，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NC1562-1SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在一个方面，本公开包括由F1后代烟草植物或其部分制备的烟草制品，其中所述植物或其部分通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子产生，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NC1562-1SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育，和其中所述烟草制品选自斗烟、雪茄、卷烟、嚼烟、烟叶、烟丝(shreddedtobacco)和烟丝(cuttobacco)。
在一个方面，本公开进一步包括由F1后代烟草植物或其部分制备的烟草制品，其中所述植物或其部分通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子产生，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NC1562-1SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育，和其中所述烟草制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。
在一个方面，本公开进一步包括由F1后代烟草植物或其部分制备的烟草制品，其中所述植物或其部分通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子产生，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NC1562-1SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育，和其中所述烟草制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，且进一步其中所述制品具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量。
在一个方面，本公开包括烟草栽培品种NCTG-61SRC的种子，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种NCTG-61SRC的种子产生的烟草植物或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC。
在进一步的方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种NCTG-61SRC的种子产生的烟草植物或其部分的收获叶或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC。
在一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种NCTG-61SRC的种子产生的烟草植物的收获叶或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC，其中所述叶具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量。
在一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种NCTG-61SRC的种子产生的收获叶或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC，其中所述叶具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量，其中所述降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量是在由叶产生的烟气流中降低。
在进一步的方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种NCTG-61SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草制品，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC，其中所述制品选自斗烟、雪茄、卷烟、嚼烟、烟叶、烟丝(shreddedtobacco)和烟丝(cuttobacco)。
在一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种NCTG-61SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草制品，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC，其中所述制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。
在另一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种NCTG-61SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草制品，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC，其中所述制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，其中所述制品具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量。
在一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种NCTG-61SRC的种子产生的烟草植物的部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC，其中所述部分选自叶、花粉、胚珠、胚、子叶、下胚轴、分生细胞、原生质体、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚果和叶柄。
在另一个方面，本公开包括从通过种植烟草栽培品种NCTG-61SRC的种子产生的烟草植物或其部分的原生质体或细胞产生的组织培养物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC，其中所述组织培养物的细胞或原生质体从选自以下的植物部分产生：叶、花粉、胚珠、胚、子叶、下胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚果和叶柄。
在一个方面，本公开包括从来自通过种植烟草栽培品种NCTG-61SRC的种子产生的烟草植物或其部分的原生质体或细胞产生的组织培养物再生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC，其中所述组织培养物的细胞或原生质体从选自以下的植物部分产生：叶、花粉、胚珠、胚、子叶、下胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚果和叶柄，且所述再生植物具有栽培品种NCTG-61SRC所有或基本上所有的形态和生理特征。
在一个方面，本公开包括烟草栽培品种NCTG-61SRC的F1后代植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开包括烟草栽培品种NCTG-61SRC的F1后代植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC，其中所述F1植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在另一个方面，本公开包括通过包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NCTG-61SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在另一个方面，本公开包括产生烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NCTG-61SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开包括产生烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NCTG-61SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC，其中所述烟草栽培品种NCTG-61SRC的植物是母本。
在另一个方面，本公开包括产生烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NCTG-61SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC，其中所述烟草栽培品种NCTG-61SRC的植物是父本。
在另一个方面，本公开包括产生烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NCTG-61SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在一个方面，本公开还包括通过包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子的容器，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NCTG-61SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在一个方面，本公开包括种植通过包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的种子产生的F1后代植物，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NCTG-61SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC，且其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在一个方面，本公开还包括通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的种子产生的F1后代植物的收获叶，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NCTG-61SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在另一个方面，本公开进一步包括具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量的F1后代植物的收获叶，所述F1后代植物通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的种子产生，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NCTG-61SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在一个方面，本公开还包括在由其产生的烟气流中具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量的F1后代植物的收获叶，所述植物通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的种子产生，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NCTG-61SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在一个方面，本公开包括由F1后代烟草植物或其部分制备的烟草制品，其中所述植物或其部分通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子产生，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NCTG-61SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育，和其中所述烟草制品选自斗烟、雪茄、卷烟、嚼烟、烟叶、烟丝(shreddedtobacco)和烟丝(cuttobacco)。
在一个方面，本公开进一步包括由F1后代烟草植物或其部分制备的烟草制品，其中所述植物或其部分通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子产生，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NCTG-61SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育，和其中所述烟草制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。
在一个方面，本公开进一步包括由F1后代烟草植物或其部分制备的烟草制品，其中所述植物或其部分通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子产生，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NCTG-61SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育，和其中所述烟草制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，且进一步其中所述制品具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量。
在另一个方面，本公开包括烟草栽培品种CMSNCTG-61SRC的种子，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC。
在一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种CMSNCTG-61SRC的种子产生的烟草植物或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种CMSNCTG-61SRC的种子产生的烟草植物或其部分的收获叶或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC。
在一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种CMSNCTG-61SRC的种子产生的烟草植物的收获叶或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC，其中所述叶具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量。
在另一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种CMSNCTG-61SRC的种子产生的收获叶或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC，其中所述叶具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量，其中所述降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量是在由叶产生的烟气流中降低。
在进一步的方面，本公开包括用通过种植烟草栽培品种CMSNCTG-61SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草制品，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC，其中所述制品选自斗烟、雪茄、卷烟、嚼烟、烟叶、烟丝(shreddedtobacco)和烟丝(cuttobacco)。
在一个方面，本公开包括通过用种植烟草栽培品种CMSNCTG-61SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草制品，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC，其中所述制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。
在另一个方面，本公开包括通过用种植烟草栽培品种CMSNCTG-61SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草制品，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC，其中所述制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，其中所述制品具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量。
在一个方面，本公开包括通过种植烟草栽培品种CMSNCTG-61SRC的种子产生的烟草植物的部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC，其中所述部分选自叶、花粉、胚珠、胚、子叶、下胚轴、分生细胞、原生质体、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚果和叶柄。
在另一个方面，本公开包括从通过种植烟草栽培品种CMSNCTG-61SRC的种子产生的烟草植物或其部分的原生质体或细胞产生的组织培养物所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC，其中所述组织培养物的细胞或原生质体从选自以下的植物部分产生：叶、花粉、胚珠、胚、子叶、下胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚果和叶柄。
在一个方面，本公开包括从来自通过种植烟草栽培品种CMSNCTG-61SRC的种子产生的烟草植物或其部分的原生质体或细胞产生的组织培养物再生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC，其中所述组织培养物的细胞或原生质体从选自以下的植物部分产生：叶、花粉、胚珠、胚、子叶、下胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚果和叶柄，且所述再生植物具有栽培品种CMSNCTG-61SRC所有或基本上所有的形态和生理特征。
在一个方面，本公开包括烟草栽培品种CMSNCTG-61SRC的F1后代植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开包括烟草栽培品种CMSNCTG-61SRC的F1后代植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC，其中所述F1植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在另一个方面，本公开包括通过包含杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)，其中所述细胞质雄性不育植物是烟草栽培品种CMSNCTG-61SRC的植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开包括产生烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种CMSNCTG-61SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开包括产生烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中至少一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种CMSNCTG-61SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC，其中所述烟草栽培品种CMSNCTG-61SRC的植物是母本。
在一个方面，本公开包括产生烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育，其中所述细胞质雄性不育植物是烟草栽培品种CMSNCTG-61SRC的植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC。
在一个方面，本公开还包括通过包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子的容器，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)，其中所述细胞质雄性不育植物是通过种植烟草栽培品种CMSNCTG-61SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC。
在一个方面，本公开包括种植通过包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的种子产生的F1后代植物，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)，其中所述细胞质雄性不育植物是通过种植烟草栽培品种CMSNCTG-61SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC。
在一个方面，本公开还包括通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的种子产生的F1后代植物的收获叶，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)，其中所述细胞质雄性不育植物是通过种植烟草栽培品种CMSNCTG-61SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开进一步包括具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量的F1后代植物的收获叶，所述F1后代植物通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的种子产生，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)，其中所述细胞质雄性不育植物是通过种植烟草栽培品种CMSNCTG-61SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC。
在一个方面，本公开还包括在由其产生的烟气流中具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量的F1后代植物的收获叶，所述植物通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的种子产生，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)，其中所述细胞质雄性不育植物是通过种植烟草栽培品种CMSNCTG-61SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC。
在一个方面，本公开包括由F1后代烟草植物或其部分制备的烟草制品，其中所述植物或其部分通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子产生，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)，其中所述细胞质雄性不育植物是通过种植烟草栽培品种CMSNCTG-61SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC，和其中所述烟草制品选自斗烟、雪茄、卷烟、嚼烟、烟叶、烟丝(shreddedtobacco)和烟丝(cuttobacco)。
在一个方面，本公开进一步包括由F1后代烟草植物或其部分制备的烟草制品，其中所述植物或其部分通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子产生，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)，其中所述细胞质雄性不育植物是通过种植烟草栽培品种CMSNCTG-61SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC，和其中所述烟草制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。
在一个方面，本公开进一步包括由F1后代烟草植物或其部分制备的烟草制品，其中所述植物或其部分通过种植由包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子的方法产生的F1后代种子产生，其中至少一株烟草植物是细胞质雄性不育(CMS)，其中所述细胞质雄性不育植物是通过种植烟草栽培品种CMSNCTG-61SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC，和其中所述烟草制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，且进一步其中所述制品具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量。
在一个方面，本公开包括杂交种烟草栽培品种NC196SRC的种子，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开包括通过种植杂交种烟草栽培品种NC196SRC的种子产生的烟草植物或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC。
在进一步的方面，本公开包括通过种植杂交种烟草栽培品种NC196SRC的种子产生的烟草植物或其部分的收获叶或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC。
在一个方面，本公开包括通过种植杂交种烟草栽培品种NC196SRC的种子产生的烟草植物的收获叶或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC，其中所述叶具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量。
在一个方面，本公开包括通过种植杂交种烟草栽培品种NC196SRC的种子产生的收获叶或其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC，其中所述叶具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量，其中所述降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量是在由叶产生的烟气流中降低。
在进一步的方面，本公开包括通过种植杂交种烟草栽培品种NC196SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草制品，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC，其中所述制品选自斗烟、雪茄、卷烟、嚼烟、烟叶、烟丝(shreddedtobacco)和烟丝(cuttobacco)。
在一个方面，本公开包括通过种植杂交种烟草栽培品种NC196SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草制品，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC，其中所述制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。
在另一个方面，本公开包括通过种植杂交种烟草栽培品种NC196SRC的种子产生的烟草植物或其部分制备的烟草制品，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC，其中所述制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟，其中所述制品具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量。
在一个方面，本公开包括通过种植杂交种烟草栽培品种NC196SRC的种子产生的烟草植物的部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC，其中所述部分选自叶、花粉、胚珠、胚、子叶、下胚轴、分生细胞、原生质体、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚果和叶柄。
在另一个方面，本公开包括从通过种植杂交种烟草栽培品种NC196SRC的种子产生的烟草植物或其部分的原生质体或细胞产生的组织培养物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC，其中所述组织培养物的细胞或原生质体从选自以下的植物部分产生：叶、花粉、胚珠、胚、子叶、下胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚果和叶柄。
在一个方面，本公开包括从来自通过种植杂交种烟草栽培品种NC196SRC的种子产生的烟草植物或其部分的原生质体或细胞产生的组织培养物再生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC，其中所述组织培养物的细胞或原生质体从选自以下的植物部分产生：叶、花粉、胚珠、胚、子叶、下胚轴、分生细胞、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚果和叶柄，且所述再生植物具有栽培品种NC196SRC所有或基本上所有的形态和生理特征。
在一个方面，本公开包括杂交种烟草栽培品种NC196SRC的F1后代植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC。
在一个方面，本公开包括杂交种烟草栽培品种NC196SRC的F1后代植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC，其中所述烟草栽培品种NC196SRC植物是母本。
在一个方面，本公开包括杂交种烟草栽培品种NC196SRC的F1后代植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC，其中所述烟草栽培品种NC196SRC植物是父本。
在另一个方面，本公开包括杂交种烟草栽培品种NC196SRC的F1后代植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC，其中所述F1植物是细胞质雄性不育(CMS)。
在另一个方面，本公开包括产生NC196SRC的烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NC1562-1SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开包括产生NC196SRC的烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NCTG-61SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开包括产生NC196SRC的烟草种子的方法，包括杂交两株烟草植物并收获所得的烟草种子，其中一株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NCTG-61SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种NCTG-61SRC的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC，和第二株烟草植物是通过种植烟草栽培品种NC1562-1SRC的种子产生的烟草植物，所述栽培品种NC1562-1SRC的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC。
在一个方面，本公开包括无性繁殖烟草栽培品种植物的方法，包括以下步骤：(a)从选自以下的烟草栽培品种植物收集能够被繁殖的组织：其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的栽培品种K326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC的栽培品种CMSK326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的栽培品种K346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC的栽培品种CMSK346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的栽培品种NC1562-1SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的栽培品种NCTG-61SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC的栽培品种CMSNCTG-61SRC，和其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC的杂交栽培品种NC196SRC；(b)栽培所述组织以获得增殖芽；和(c)使所述增殖芽生根以获得带根的苗。
在一个方面，本公开包括无性繁殖烟草栽培品种植物的方法，包括以下步骤：(a)从选自以下的烟草栽培品种植物收集能够被繁殖的组织：其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的栽培品种K326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC的栽培品种CMSK326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的栽培品种K346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC的栽培品种CMSK346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的栽培品种NC1562-1SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的栽培品种NCTG-61SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC的栽培品种CMSNCTG-61SRC，和其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC的杂交栽培品种NC196SRC；(b)栽培所述组织以获得增殖芽；(c)使所述增殖芽生根以获得带根的苗；和(d)从所述带根的苗生长植物。
在一个方面，本公开包括将期望性状引入烟草栽培品种中的方法，包括：(a)将选自以下的第一烟草栽培品种植物与包含期望性状的第二烟草植物杂交以产生F1后代种子：其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的栽培品种K326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC的栽培品种CMSK326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的栽培品种K346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC的栽培品种CMSK346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的栽培品种NC1562-1SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的栽培品种NCTG-61SRC，和其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC的栽培品种CMSNCTG-61SRC；(b)种植所述F1后代种子并选择包含期望性状的F1后代植物；(c)将选择的F1后代植物与选自以下的所述第一烟草栽培品种植物杂交以产生回交BC1F1后代种子：其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的栽培品种K326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC的栽培品种CMSK326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的栽培品种K346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC的栽培品种CMSK346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的栽培品种NC1562-1SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的栽培品种NCTG-61SRC，和其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC的栽培品种CMSNCTG-61SRC；(d)种植所述BC1F1后代种子并选择包含期望性状和所述第一烟草栽培品种K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC或CMSNCTG-61SRC基本上所有的生理和形态特征的回交BC1F1后代植物；和(e)连续重复步骤(c)和(d)三次或更多次以产生选择的包含期望性状的第四代或更高代的回交后代。
在一个方面，本公开包括将期望性状引入烟草栽培品种中的方法，包括：(a)将选自以下的第一烟草栽培品种植物与包含期望性状的第二烟草植物杂交以产生F1后代种子：其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的栽培品种K326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC的栽培品种CMSK326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的栽培品种K346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC的栽培品种CMSK346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的栽培品种NC1562-1SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的栽培品种NCTG-61SRC，和其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC的栽培品种CMSNCTG-61SRC；(b)种植所述F1后代种子并选择包含期望性状的F1后代植物；(c)将选择的F1后代植物与所述选自以下的第一烟草栽培品种植物杂交以产生回交BC1F1后代种子：其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的栽培品种K326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的栽培品种K346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的栽培品种NC1562-1SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的栽培品种NCTG-61SRC，和其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC的栽培品种CMSNCTG-61SRC；(d)种植所述BC1F1后代种子并选择包含期望性状和所述第一烟草栽培品种K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC或CMSNCTG-61SRC基本上所有的生理和形态特征的回交BC1F1后代植物；和(e)连续重复步骤(c)和(d)三次或更多次以产生选择的包含期望性状的第四代或更高代的回交后代，其中所述性状是细胞质雄性不育(CMS)。
在一个方面，本公开包括将期望性状引入烟草栽培品种中的方法，包括：(a)将选自以下的第一烟草栽培品种植物与包含期望性状的第二烟草植物杂交以产生F1后代种子：其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的栽培品种K326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的栽培品种K346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的栽培品种NCTG-61SRC，和其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的杂交栽培品种NC1562-1SRC；(b)种植所述F1后代种子并选择包含期望性状的F1后代植物；(c)将选择的F1后代植物与所述选自以下的第一烟草栽培品种植物杂交以产生回交BC1F1后代种子：其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的栽培品种K326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的栽培品种K346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的栽培品种NCTG-61SRC，和其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的杂交栽培品种NC1562-1SRC；(d)种植所述BC1F1后代种子并选择包含期望性状和所述第一烟草栽培品种K326SRC、K346SRC、NCTG-61SRC或NC1562-1SRC的生理和基本上所有的形态特征的回交BC1F1后代植物；和(e)连续重复步骤(c)和(d)三次或更多次以产生选择的包含期望性状的第四代或更高代的回交后代，其中所述性状是细胞质雄性不育(CMS)且所述CMS性状获自香甜烟草(Nicotianasuaveolens)或粉蓝烟草(Nicotianaglauca)。
在一个方面，本公开包括将期望性状引入烟草栽培品种中的方法，包括：(a)将选自以下的第一烟草栽培品种植物与包含期望性状的第二烟草植物杂交以产生F1后代种子：其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的栽培品种K326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的栽培品种K346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的栽培品种NC1562-1SRC，和其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的栽培品种NCTG-61SRC；(b)种植所述F1后代种子并选择包含期望性状的F1后代植物；(c)将选择的F1后代植物与所述选自K326SRC、K346SRC、NCTG-61SRC和NC1562-1SRC的第一烟草栽培品种植物杂交以产生回交BC1F1后代种子；(d)种植所述BC1F1后代种子并选择包含期望性状和所述第一烟草栽培品种K326SRC、K346SRC、NCTG-61SRC或NC1562-1SRC基本上所有的生理和形态特征的回交BC1F1后代植物；和(e)连续重复步骤(c)和(d)三次或更多次以产生选择的包含期望性状的第四代或更高代的回交后代，其中所述性状是细胞质雄性不育(CMS)且所述CMS性状获自香甜烟草，其中所述第二烟草植物选自CMSK326SRC、CMSK346SRC和CMSNCTG-61SRC。
在一个方面，本公开包括通过包含将期望性状引入烟草栽培品种中的方法产生的烟草植物，所述方法包括：(a)将选自以下的第一烟草栽培品种植物与包含期望性状的第二烟草植物杂交以产生F1后代种子：其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的栽培品种K326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC的栽培品种CMSK326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的栽培品种K346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC的栽培品种CMSK346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的栽培品种NC1562-1SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的栽培品种NCTG-61SRC，和其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC的栽培品种CMSNCTG-61SRC；(b)种植所述F1后代种子并选择包含期望性状的F1后代植物；(c)将选择的F1后代植物与选自K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC和CMSNCTG-61SRC的所述第一烟草栽培品种植物杂交以产生回交BC1F1后代种子；(d)种植所述BC1F1后代种子并选择包含期望性状和所述第一烟草栽培品种K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC或CMSNCTG-61SRC基本上所有的生理和形态特征的回交BC1F1后代植物；和(e)连续重复步骤(c)和(d)三次或更多次以产生选择的包含期望性状的第四代或更高代的回交后代。
在另一个方面，本公开包括将期望性状引入烟草栽培品种中的方法，所述方法包括：(a)将选自以下的第一烟草栽培品种植物与包含期望性状的第二烟草栽培品种的植物杂交以产生后代植物并产生F1后代种子：其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的栽培品种K326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC的栽培品种CMSK326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的栽培品种K346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC的栽培品种CMSK346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的栽培品种NC1562-1SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的栽培品种NCTG-61SRC，和其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC的栽培品种CMSNCTG-61SRC，其中所述期望性状选自抗除草剂、抗虫性、抗病性、高产量、高等级指标、熟化性(curability)、熟化质量、机械收成、保持能力(holdingability)、叶片质量、高度、植物成熟、早熟、早中熟、中熟、中晚熟、晚熟、小杆、中杆、大杆、叶片数/植物、5-10叶/植物、11-15叶/植物、16-21叶/植物，和它们的任何组合；(b)使所述F1后代种子生长成F1后代植物，并选择具有期望性状的F1后代植物；(c)将选择的F1后代植物与选自以下的所述第一烟草栽培品种植物杂交以产生回交后代植物种子：其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的栽培品种K326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC的栽培品种CMSK326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的栽培品种K346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC的栽培品种CMSK346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的栽培品种NC1562-1SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的栽培品种NCTG-61SRC，和其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC的栽培品种CMSNCTG-61SRC；(d)使所述回交后代植物种子生长成回交后代植物，并选择包含期望性状和所述第一烟草栽培品种K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC或CMSNCTG-61SRC基本上所有的生理和形态特征的回交后代植物；和(e)连续重复步骤(c)和(d)一次或多次以产生选择的包含期望性状和所述第一烟草栽培品种K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC或CMSNCTG-61SRC基本上所有的生理和形态特征的第四代或更高代的回交后代植物。
在另一个方面，本公开包括将期望性状引入烟草栽培品种中的方法，所述方法包括：(a)将选自以下的第一烟草栽培品种植物与包含期望性状的第二烟草栽培品种的植物杂交以产生后代植物并产生F1后代种子：其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的栽培品种K326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC的栽培品种CMSK326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的栽培品种K346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC的栽培品种CMSK346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的栽培品种NC1562-1SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的栽培品种NCTG-61SRC，和其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC的栽培品种CMSNCTG-61SRC，其中所述期望性状选自抗除草剂、抗虫性、抗病性、高产量、高等级指标、熟化性、熟化质量、机械收成、保持能力、叶片质量、高度、植物成熟、早熟、早中熟、中熟、中晚熟、晚熟、小杆、中杆、大杆、叶片数/植物、5-10叶/植物、11-15叶/植物、16-21叶/植物，和它们的任何组合；(b)使所述F1后代种子生长成F1后代植物，并选择具有期望性状的F1后代植物；(c)将选择的F1后代植物与选自以下的所述第一烟草栽培品种植物杂交以产生回交后代植物种子：其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的栽培品种K326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC的栽培品种CMSK326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的栽培品种K346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC的栽培品种CMSK346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的栽培品种NC1562-1SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的栽培品种NCTG-61SRC，和其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC的栽培品种CMSNCTG-61SRC；(d)使所述回交后代植物种子生长成回交后代植物，并选择包含期望性状和烟草栽培品种K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC或CMSNCTG-61SRC基本上所有的生理和形态特征的回交后代植物；和(e)连续重复步骤(c)和(d)一次或多次以产生选择的包含期望性状和所述第一烟草栽培品种K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC或CMSNCTG-61SRC基本上所有的生理和形态特征的第四代或更高代的回交后代植物，其中所述植物具有期望性状。
在另一个方面，本公开包括将期望性状引入烟草栽培品种中的方法，所述方法包括：(a)将选自以下的第一烟草栽培品种植物与包含期望性状的第二烟草栽培品种的植物杂交以产生后代植物并产生F1后代种子：其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的栽培品种K326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC的栽培品种CMSK326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的栽培品种K346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC的栽培品种CMSK346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的栽培品种NC1562-1SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的栽培品种NCTG-61SRC，和其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC的栽培品种CMSNCTG-61SRC，其中所述期望性状选自抗除草剂、抗虫性、抗病性、高产量、高等级指标、熟化性、熟化质量、机械收成、保持能力、叶片质量、高度、植物成熟、早熟、早中熟、中熟、中晚熟、晚熟、小杆、中杆、大杆、叶片数/植物、5-10叶/植物、11-15叶/植物、16-21叶/植物，和它们的任何组合；(b)使所述F1后代种子生长成F1后代植物，并选择具有期望性状的F1后代植物；(c)将选择的F1后代植物与选自以下的所述第一烟草栽培品种植物杂交以产生回交后代植物种子：其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的栽培品种K326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC的栽培品种CMSK326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的栽培品种K346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC的栽培品种CMSK346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的栽培品种NC1562-1SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的栽培品种NCTG-61SRC，和其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC的栽培品种CMSNCTG-61SRC；(d)使所述回交后代植物种子生长成回交后代植物，并选择包含期望性状和所述第一烟草栽培品种K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC或CMSNCTG-61SRC基本上所有的生理和形态特征的回交后代植物；和(e)连续重复步骤(c)和(d)一次或多次以产生选择的包含期望性状和所述第一烟草栽培品种K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC或CMSNCTG-61SRC基本上所有的生理和形态特征的第四代或更高代的回交后代植物，其中所述植物具有抗病性的期望性状。
在另一个方面，本公开包括产生具有降低的烟碱转化率的烟草植物的方法，所述方法包括：鉴定具有选自SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：11和它们的组合的序列的第一烟草植物；将所述第一烟草植物与第二烟草植物杂交并收集F1种子；将从所述F1种子生长的植物与第三烟草植物杂交并收集第二烟草种子；和鉴定对选自SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：11和它们的组合的序列是纯合子的第二烟草种子或从所述第二种子生长的植物。
在一个方面，本公开包括产生具有降低的烟碱转化率的烟草植物的方法，所述方法包括：鉴定具有选自SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：11和它们的组合的序列的第一烟草植物；将所述第一烟草植物与第二烟草植物杂交并收集F1种子；将从所述F1种子生长的植物与第三烟草植物杂交并收集第二烟草种子；和鉴定对选自SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：11和它们的组合的序列是纯合子的第二烟草种子或从所述第二种子生长的植物，其中所述第二烟草植物具有选自SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：11和它们的组合的序列。
在一个方面，本公开包括产生具有降低的烟碱转化率的烟草植物的方法，所述方法包括：鉴定具有选自SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：11和它们的组合的序列的第一烟草植物；将所述第一烟草植物与第二烟草植物杂交并收集F1种子；将从所述F1种子生长的植物与第三烟草植物杂交并收集第二烟草种子；和鉴定对选自SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：11和它们的组合的序列是纯合子的第二烟草种子或从所述第二种子生长的植物，其中所述第二烟草植物不具有选自SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：11和它们的组合的序列，且所述第三烟草植物是具有选自SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：11和它们的组合的序列的烟草植物。
在一个方面，本公开包括产生具有降低的烟碱转化率的烟草植物的方法，所述方法包括：鉴定具有选自SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：11和它们的组合的序列的第一烟草植物；将所述第一烟草植物与第二烟草植物杂交并收集F1种子；将从所述F1种子生长的植物与第三烟草植物杂交并收集第二烟草种子；和鉴定对选自SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：11和它们的组合的序列是纯合子的第二烟草种子或从所述第二种子生长的植物，其中所述第一烟草植物具有如SEQIDNO：1或SEQIDNO：2所示的序列。
在一个方面，本公开包括产生具有降低的烟碱转化率的烟草植物的方法，所述方法包括：鉴定具有选自SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：11和它们的组合的序列的第一烟草植物；将所述第一烟草植物与第二烟草植物杂交并收集F1种子；将从所述F1种子生长的植物与第三烟草植物杂交并收集第二烟草种子；和鉴定对选自SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：11和它们的组合的序列是纯合子的第二烟草种子或从所述第二种子生长的植物，其中所述第三烟草植物是具有选自SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：11和它们的组合的序列的烟草植物。
在一个方面，本公开包括产生具有降低的烟碱转化率的烟草植物的方法，所述方法包括：鉴定具有选自SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：11和它们的组合的序列的第一烟草植物；将所述第一烟草植物与第二烟草植物杂交并收集F1种子；将从所述F1种子生长的植物与第三烟草植物杂交并收集第二烟草种子；和鉴定对选自SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：11和它们的组合的序列是纯合子的第二烟草种子或从所述第二种子生长的植物，其中所述第一烟草植物是选自以下的烟草栽培品种的植物：其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的栽培品种K326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC的栽培品种CMSK326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的栽培品种K346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC的栽培品种CMSK346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的栽培品种NC1562-1SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的栽培品种NCTG-61SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC的栽培品种CMSNCTG-61SRC，和其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC的杂交栽培品种NC196SRC。
在一个方面，本公开包括产生具有降低的烟碱转化率的烟草植物的方法，所述方法包括：鉴定具有选自SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：11和它们的组合的序列的第一烟草植物；将所述第一烟草植物与第二烟草植物杂交并收集F1种子；将从所述F1种子生长的植物与第三烟草植物杂交并收集第二烟草种子；和鉴定对选自SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：11和它们的组合的序列是纯合子的第二烟草种子或从所述第二种子生长的植物，其中所述第三烟草植物是选自以下的烟草栽培品种的植物：其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的栽培品种K326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC的栽培品种CMSK326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的栽培品种K346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC的栽培品种CMSK346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的栽培品种NC1562-1SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的栽培品种NCTG-61SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC的栽培品种CMSNCTG-61SRC，和其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC的杂交栽培品种NC196SRC。
在另一个方面，本公开包括产生选自其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的栽培品种K326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC的栽培品种CMSK326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的栽培品种K346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC的栽培品种CMSK346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的栽培品种NC1562-1SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的栽培品种NCTG-61SRC，和其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC的栽培品种CMSNCTG-61SRC的具有其他期望性状的烟草栽培品种植物的方法，所述方法包括以下步骤：(a)收集能够从选自其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的栽培品种K326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC的栽培品种CMSK326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的栽培品种K346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC的栽培品种CMSK346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的栽培品种NC1562-1SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的栽培品种NCTG-61SRC，和其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC的栽培品种CMSNCTG-61SRC的烟草栽培品种植物繁殖的组织；和(b)将赋予所述期望性状的转基因引入所述组织。
在另一个方面，本公开包括产生抗除草剂的烟草植物的方法，包括用转基因转化通过种植选自其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的栽培品种K326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC的栽培品种CMSK326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的栽培品种K346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC的栽培品种CMSK346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的栽培品种NC1562-1SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的栽培品种NCTG-61SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC的栽培品种CMSNCTG-61SR，和其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC的杂交栽培品种NC196SR的烟草栽培品种的种子产生的烟草植物或其部分，其中所述转基因赋予对选自以下的除草剂的抗性：咪唑啉酮、环己二酮、磺酰脲、草甘膦、草铵膦、苯氧基丙酸、L-草丁膦、三嗪和苯甲腈。
在另一个方面，本公开包括通过以下方法产生的抗除草剂的烟草植物，所述方法包括用转基因转化通过种植选自其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的栽培品种K326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC的栽培品种CMSK326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的栽培品种K346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC的栽培品种CMSK346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的栽培品种NC1562-1SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的栽培品种NCTG-61SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC的栽培品种CMSNCTG-61SR，和其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC的杂交栽培品种NC196SR的烟草栽培品种的种子产生的烟草植物或其部分，其中所述转基因赋予对选自以下的除草剂的抗性：咪唑啉酮、环己二酮、磺酰脲、草甘膦、草铵膦、苯氧基丙酸、L-草丁膦、三嗪和苯甲腈。
在另一个方面，本公开包括产生抗害虫或昆虫的烟草植物的方法，其中所述方法包括用赋予害虫或昆虫抗性的转基因转化通过种植选自其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的栽培品种K326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC的栽培品种CMSK326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的栽培品种K346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC的栽培品种CMSK346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的栽培品种NC1562-1SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的栽培品种NCTG-61SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC的栽培品种CMSNCTG-61SR，和其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC的杂交栽培品种NC196SR的烟草栽培品种的种子产生的烟草植物。
在进一步的方面，本公开包括通过以下方法产生的抗害虫或昆虫的烟草植物，所述方法包括用赋予害虫或昆虫抗性的转基因转化通过种植选自其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的栽培品种K326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC的栽培品种CMSK326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的栽培品种K346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC的栽培品种CMSK346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的栽培品种NC1562-1SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的栽培品种NCTG-61SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC的栽培品种CMSNCTG-61SR，和其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC的杂交栽培品种NC196SR的烟草栽培品种的种子产生的烟草植物。
在进一步的方面，本公开包括通过以下方法产生的抗害虫或昆虫的烟草植物，所述方法包括用赋予害虫或昆虫抗性的转基因转化通过种植选自其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的栽培品种K326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC的栽培品种CMSK326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的栽培品种K346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC的栽培品种CMSK346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的栽培品种NC1562-1SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的栽培品种NCTG-61SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC的栽培品种CMSNCTG-61SR，和其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC的杂交栽培品种NC196SR的烟草栽培品种的种子产生的烟草植物，其中所述转基因编码苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)内毒素。
在另一个方面，本公开包括产生抗病烟草植物的方法，其中所述方法包括用赋予抗病性的转基因转化通过种植选自其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的栽培品种K326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC的栽培品种CMSK326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的栽培品种K346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC的栽培品种CMSK346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的栽培品种NC1562-1SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的栽培品种NCTG-61SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC的栽培品种CMSNCTG-61SR，和其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC的杂交栽培品种NC196SR的烟草栽培品种的种子产生的烟草植物。
在进一步的方面，本公开包括括通过以下方法产生的抗病烟草植物，所述方法包括用赋予抗病性的转基因转化通过种植选自其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的栽培品种K326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC的栽培品种CMSK326SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的栽培品种K346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC的栽培品种CMSK346SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的栽培品种NC1562-1SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的栽培品种NCTG-61SRC、其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC的栽培品种CMSNCTG-61SR，和其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC的杂交栽培品种NC196SR的烟草栽培品种的种子产生的烟草植物。
序列简述
SEQIDNO：1显示cyp82e4W329Stop核苷酸序列。
SEQIDNO：2显示cyp82e5v2W422Stop核苷酸序列。
SEQIDNO：3显示cyp82e4W329Stop氨基酸序列。
SEQIDNO：4显示cyp82e5v2W422Stop氨基酸序列。
SEQIDNO：5显示CYP82E4野生型核苷酸序列。
SEQIDNO：6显示CYP82E5v2野生型核苷酸序列。
SEQIDNO：7显示CYP82E4野生型氨基酸序列。
SEQIDNO：8显示CYP82E5v2野生型氨基酸序列。
SEQIDNO：9显示CYP82E10野生型核苷酸序列。
SEQIDNO：10显示CYP82E10野生型氨基酸序列。
SEQIDNO：11显示CYP82E10P381S核苷酸序列。
SEQIDNO：12显示CYP82E10P381S氨基酸序列。
所有三个烟草烟碱脱甲基酶基因(CYP82E4、CYP82E5v2、CYP82E10)具有共同结构：被大的内含子分开的939bp的外显子1和612bp的外显子2，所述内含子的长度在三个基因之间不同。参见Lewis等，“ThreenicotinedemethylasegenesmediatenornicotinebiosynthesisinNicotianatabacumL.：FunctionalcharacterizationoftheCYP82E10gene，”Phytochemistry，71(2010)，1988-1998。SEQIDNOs：1、2、5、6、9和11是CYP82E4、CYP82E5v2和CYP82E10的编码序列的野生型或突变型。如在此所用，应理解包含、具有选自SEQIDNOs：1、2、5、6、9和11的序列或是对于选自SEQIDNOs：1、2、5、6、9和11的序列是纯合子的植物是指在CYP82E4、CYP82E5v2或CYP82E10内源位点包含含有SEQIDNOs：1、2、5、6、9或11的编码序列的基因组序列的植物。
附图说明
图1：K326SRC(如“K326e4e5e10突变体”所示)和K326之间烟草填料和香烟烟雾中的NNN浓度，以及烟草填料中烟碱转化百分比的比较。K326SRC在烟草填料(～0.22对比～0.53ppm，如“填料NNN”所示)和香烟烟雾(～0.015对比～0.04ng/mg总颗粒物质(TPM)，如“烟雾NNN”所示)中的NNN水平均低于K326。K326SRC烟草填料(～0.8％)中的烟碱转化百分比低于K326烟草填料(～3.1％，如“填料％转化”所示)。
发明详述
除非另有定义，本文使用的技术和科学术语具有与本领域技术人员通常理解的相同含义。本领域技术人员将认识到，很多方法可用于实施本公开。实际上，本公开决不限制于描述的方法和材料。出于本公开的目的，将以下术语定义如下。
本文引用的任何文献通过引用以其全文并入。
如本文所使用，除非另有清楚指明，单数形式的“一”(a)、“一”(an)和“所述”(the)包括多指。例如，术语“化合物”或“至少一种化合物”可包括多种化合物，包括它们的混合物。
在此所用的术语“约”是指大约、大体上、左右或在其区间。当术语“约”与数值范围一起使用时，它通过将边界延伸至设定的数值之上或之下改变所述范围。
“烟草制品”定义为“意欲用于人类使用或消费的由烟草制备或来自烟草的任何产品，包括烟草制品的任何成分、部分或附属品(除了用于生产烟草制品的成分、部分或附属品的烟草之外的原材料)”(FD&CAct的第201节；21U.S.C.321)。标签和包装是烟草制品的一部分。
术语“烟碱转化率”、“烟草转化百分比”(percentnicotineconversion)和“烟草转化百分比”(percentagenicotineconversion)可交替使用。样品中烟碱去甲基化百分比通过将样品中测得的降烟碱水平除以烟碱和降烟碱的总水平，再乘以100来计算。
K326SRC
本公开还提供来自K326SRC的烟草栽培品种和其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC。本公开还包括通过种植K326SRC的种子产生的烟草植物或其部分。本公开的植物可进一步包括具有栽培品种K326SRC所有或基本上所有的形态和生理特征的植物。
不被过程所限制，K326SRC是在烤制熟化的烟草栽培品种K326中引入三个突变的CYP82基因的结果。所述三个基因是：在Lewis等(“ThreenicotinedemethylasegenesmediatenornicotinebiosynthesisinNicotianatabacumL.：FunctionalcharacterizationoftheCYP82E10gene，”Phytochemistry，71(2010)，1988-1998)中记载为325-6#775的突变的CYP82E4基因(显示cyp82e4W329Stop的SEQIDNO：1，其整体通过应用并入本文)、在Lewis等(以上)中记载为325-6#1-13的突变的CYP82E5v2基因(显示cyp82e5v2W422Stop的SEQIDNO：2，其整体通过应用并入本文)、和在Lewis等(以上)中记载为325-6#1041的突变的CYP82E10(显示cyp82e10P381S的SEQIDNO：11，其整体通过应用并入本文)。突变cyp82e4W329Stop和cyp82e5v2W422Stop形成截断蛋白，而cyp82E10P381S形成无功能蛋白。从来自强转化体白肋烟背景的e4e5|e4e5|e10e10三重突变体(DH98-325-6系，如Lewis等(以上)的表2中所列)中将cyp82e4N329Stop(“e4”)、cyp82e5v2W422Stop(“e5”)和cyp82e10P381S(“e10”)突变引入烤制熟化的烟草栽培品种K326背景中。
K326SRC是用烤制熟化的栽培品种K326作为回交亲本回交七次，然后自交两轮并为cyp82e4W329Stop，thecyp82e5v2W422Stop，和cyp82e10P381S突变选择纯合性以产生BC7F3植物(K326SRC)的结果，在所述BC7F3植物中K326的野生型CYP82E4、CYP82E5v2和CYP82E10等位基因被突变体(即cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S)等位基因取代。
K326SRC后代植物的遗传背景与K326至少95％、至少97％、至少98％或至少99％相似。K326SRC植物显示低的降烟碱水平，且产生具有降低的在熟化、储存和吸烟过程中积累衍生NNN的潜力的叶。
CMSK326SRC
本公开还提供来自CMSK326SRC的烟草栽培品种和其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC。本公开还包括通过种植CMSK326SRC的种子产生的烟草植物或其部分。本公开的植物可进一步包括具有栽培品种CMSK326SRC所有或基本上所有的形态和生理特征的植物。CMSK326SRC是K326SRC的雄性不育(CMS)版本(CMSK326SRC)，其通过将CMSK326植物作为母本与K326SRCBC6F1的花粉杂交以产生对于所有三个突变均是杂合的雄性不育植物而产生。CMSK326xK326SRCBC6F1杂交的后代植物是雄性不育的。筛选多株CMSK326xK326SRCBC6F1xCMS植物(例如CMSF1后代植物)的cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S突变以鉴定对于所有三个突变均是杂合的植物。将来自该杂交的单株雄性不育植物作为母本与K326SRC回交以制备BC7F1CMS后代。通过基因分型鉴定对于cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S突变是纯合子的BC7F1CMS后代，并命名为CMSK326SRC。因为CMSK326SRC系是雄性不育的，其通过用K326SRC授粉来维持。将K326SRC作为父本与CMSK326SRC杂交以制备CMSK326SRCF1后代植物。
CMSK326SRC和CMSK326SRCF1后代植物的遗传背景与K326至少95％、至少97％、至少98％或至少99％相似。CMSK326SRC和CMSK326SRCF1后代植物显示低的降烟碱水平，且产生具有降低的在熟化、储存和吸烟过程中积累衍生NNN的潜力的叶。
K346SRC
本公开还提供来自K346SRC的烟草栽培品种和其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC。本公开还包括通过种植K346SRC的种子产生的烟草植物或其部分。本公开的植物可包括具有栽培品种K346SRC所有或基本上所有的形态和生理特征的植物。不被过程所限制，K346SRC是从DH98-325-6引入cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S突变的结果。将来自K346与DH98-325-6的杂交且每个突变均是杂合的F1个体与K346回交七次以产生BC7F1后代。将对于所有三个突变均是杂合的BC7F1个体自花受粉以产生BC7F2种子，并鉴定对于所有三个突变均是纯合的个体。将单株BC7F2个体自花受粉以产生BC7F3(K346SRC)，其中K346的野生型CYP82E4、CYP82E5v2和CYP82E10等位基因被突变体(即cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S)取代。
K346SRC的遗传背景与K346至少95％、至少97％、至少98％或至少99％相似。K346SRC植物显示低的降烟碱水平，且产生具有降低的在熟化、储存和吸烟过程中积累衍生NNN的潜力的叶。
CMSK346SRC
本公开还提供来自CMSK346SRC的烟草栽培品种和其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC。本公开还包括通过种植CMSK346SRC的种子产生的烟草植物或其部分。本公开的植物可进一步包括具有栽培品种CMSK426SRC所有或基本上所有的形态和生理特征的植物。CMSK346SRC是K346SRC的雄性不育(CMS)版本(CMSK346SRC)，其通过将CMSK346植物作为母本与K346SRCBC6F1的花粉杂交以产生对于所有三个突变均是杂合的雄性不育植物而产生。CMSK346xK346SRCBC6F1杂交的后代植物是雄性不育的。筛选多株CMSK346xK346SRCBC6F1xCMS植物(例如CMSF1后代植物)的cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S突变以鉴定对于所有三个突变均是杂合子的植物。将来自该杂交的单株雄性不育植物作为母本与K346SRC回交以制备BC7F1CMS后代。通过基因分型鉴定对于cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S突变是纯合子的BC7F1CMS后代，并命名为CMSK346SRC。因为CMSK346SRC系是雄性不育的，其通过用K346SRC授粉来维持。将K346SRC作为父本与CMSK346SRC杂交以制备CMSK346SRCF1后代植物。
CMSK346SRC和CMSK346SRCF1后代植物的遗传背景与K346至少95％、至少97％、至少98％或至少99％相似。CMSK346SRC和CMSK346SRCF1后代植物显示低的降烟碱水平，且产生具有降低的在熟化、储存和吸烟过程中积累衍生NNN的潜力的叶。
NC1562-1SRC
本公开还提供来自NC1562-1SRC的烟草栽培品种和其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC。本公开还包括通过种植NC1562-1SRC的种子产生的烟草植物或其部分。本公开的植物可进一步包括具有栽培品种NC1562-1SRC所有或基本上所有的形态和生理特征的植物。不被过程所限制，NC1562-1SRC是从DH98-325-6引入cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S突变的结果。将来自NC1562-1与DH98-325-6的杂交且对于每个突变均是杂合的F1个体与NC1562-1回交七次以产生BC7F1后代。将对于所有三个突变均是杂合的BC7F1个体自花受粉以产生BC7F2种子，并鉴定对于所有三个突变均是纯合的个体。将单株BC7F2植物自花受粉以产生BC7F3(NC1562-1SRC)，其中K346的野生型CYP82E4、CYP82E5v2和CYP82E10等位基因被突变体(即cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S)取代。
NC1562-1SRC的遗传背景与NC1562-1至少95％、至少97％、至少98％或至少99％相似。K346SRC植物显示低的降烟碱水平，且产生具有降低的在熟化、储存和吸烟过程中积累衍生NNN的潜力的叶。
NCTG-61SRC
本公开还提供来自NCTG-61SRC的烟草栽培品种和其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC。本公开还包括通过种植NCTG-61SRC的种子产生的烟草植物或其部分。本公开的植物可进一步包括具有栽培品种NCTG-61SRC所有或基本上所有的形态和生理特征的植物。不被过程所限制，NCTG-61SRC是从DH98-325-6引入cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S突变的结果。将来自NCTG-61与DH98-325-6的杂交且对于每个突变均是杂合的F1个体与NCTG-61回交七次以产生BC7F1后代。将对于所有三个突变均是杂合的BC7F1个体自花受粉以产生BC7F2种子，并鉴定对于所有三个突变均是纯合的个体。将单株BC7F2植物自花受粉以产生BC7F3(NCTG-61SRC)，其中K346的野生型CYP82E4、CYP82E5v2和CYP82E10等位基因被突变体(即cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S)取代。
NCTG-61SRC的遗传背景与NC1562-1至少95％、至少97％、至少98％或至少99％相似。K346SRC植物显示低的降烟碱水平，且产生具有降低的在熟化、储存和吸烟过程中积累衍生NNN的潜力的叶。
CMSNCTG-61SRC
本公开还提供来自CMSNCTG-61SRC的烟草栽培品种和其部分，所述栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC。本公开还包括通过种植CMSNCTG-61SRC的种子产生的烟草植物或其部分。本公开的植物可进一步包括具有栽培品种CMSNCTG-61SRC所有或基本上所有的形态和生理特征的植物。
CMSNCTG-61SRC是NCTG-61的雄性不育(CMS)版本(CMSK346SRC)，其通过将CMSNCTG-61植物作为母本与NCTG-61SRC的花粉杂交以产生对于三个突变均是杂合的雄性不育植物而产生。CMSNCTG-61xNCTG-61SRCBC6F1杂交的CMS后代植物是雄性不育的。筛选多株CMSNCTG-61xNCTG-61SRCBC6F1xCMS植物(例如CMSF1后代植物)的cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S突变以鉴定对于所有三个突变均是杂合子的植物。将来自该杂交的单株雄性不育植物作为母本与NCTG-61SRC回交以制备BC7F1CMS后代。通过基因分型鉴定对于cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S突变是纯合子的BC7F1CMS后代，并命名为CMSNCTG-61SRC。因为CMSNCTG-61SRC系是雄性不育的，其通过用NCTG-61SRC授粉来维持。将NCTG-61SRC作为父本与CMSNCTG-61SRC杂交以制备CMSNCTG-61SRCF1后代植物。
CMSNCTG-61SRC和CMSNCTG-61SRCF1后代植物的遗传背景与NCTG-61至少95％、至少97％、至少98％或至少99％相似。CMSNCTG-61SRC和CMSNCTG-61SRCF1后代植物显示低的降烟碱水平，且产生具有降低的在熟化、储存和吸烟过程中积累衍生NNN的潜力的叶。
NC196SRC
本公开还提供来自NC196SRC的烟草栽培品种和其部分。在另一个方面，本公开还包括通过种植NC196SRC的种子产生的烟草植物或其部分。本公开的植物可包括具有栽培品种NC196SRC所有或基本上所有的形态和生理特征的植物。
不被过程所限制，NC196SRC通过用NC1562-1SRC的花粉授粉CMSNCTG-61SRC植物产生。再一次，不被任何特定科学理论所限制，cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S突变均编码具有降低的或消除的转化烟碱或降烟碱的能力的蛋白质。NC196SRC的遗传背景与烤制熟化的烟草栽培品种NC196至少95％、至少97％、至少98％或至少99％相似，所述栽培品种NC196是通过用可育系NC1562-1产生的花粉授粉雄性不育系NCTG-61产生的杂交种。NC196SRC植物显示低NNN，且不经过到高NNN的转化。
其他植物
本公开包括通过杂交两株亲本烟草植物并收获所得的烟草种子产生的烟草种子，其中至少一株亲本烟草植物是K326SRC。在一个方面，所述K326SRC是父本植物。在另一个方面，所述K326SRC是母本植物。本公开的一个方面提供分别在SEQIDNO：1、SEQIDNO：2和SEQIDNO：11的cyp82e4、cyp82e5v2和cyp82E10位点是纯合子的烟草植物，其遗传背景与K326或CMSK326超过75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％相似。在一个方面，大约或超过50％、75％或100％的后代遗传学由通过分别在SEQIDNO：1、SEQIDNO：2和SEQIDNO：11的cyp82e4、cyp82e5v2和cyp82E10位点是纯合子的本公开的植物提供。在一个方面，本公开的植物的遗传背景与K326或CMSK326至少95％、至少97％、至少98％或至少99％相似。在另一个方面，本公开的植物显示低的降烟碱，且不经过到高NNN的转化。在一个方面，本公开的植物是抗枯萎病(Fusariumwilt)的母本或父本植物的后代植物。在另一个方面，K326SRC植物对黑梗病有低抗性，对青枯病有中等抗性。
本公开包括通过杂交两株亲本烟草植物并收获所得的烟草种子产生的烟草种子，其中至少一株亲本烟草植物是K346SRC。在一个方面，所述K346SRC是父本植物。在另一个方面，所述K346SRC是母本植物。本公开的一个方面提供分别在SEQIDNO：1、SEQIDNO：2和SEQIDNO：11的cyp82e4、cyp82e5v2和cyp82E10位点是纯合子的烟草植物，其遗传背景与K346或CMSK346超过75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％相似。在一个方面，大约或超过50％、75％或100％的后代遗传学由通过分别在SEQIDNO：1、SEQIDNO：2和SEQIDNO：11的cyp82e4、cyp82e5v2和cyp82E10位点是纯合子的本公开的植物提供。在一个方面，本公开的植物的遗传背景与K346或CMSK346至少95％、至少97％、至少98％或至少99％相似。在另一个方面，本公开的植物显示低的降烟碱，且不经过到高NNN的转化。在一个方面，本公开的植物是抗枯萎病的母本或父本植物的后代植物。在另一个方面，K346SRC植物对黑梗病有高抗性，对青枯病有高抗性。
本公开包括通过杂交两株亲本烟草植物并收获所得烟草的种子产生的烟草种子，其中至少一株亲本烟草植物是NC1562-1SRC。在一个方面，所述NC1562-1SRC是父本植物。在另一个方面，所述CMSNCTG-61SRC是母本植物。本公开的一个方面提供分别在SEQIDNO：1、SEQIDNO：2和SEQIDNO：11的cyp82e4、cyp82e5v2和cyp82E10位点是纯合子的烟草植物，其遗传背景与NC1562-1或CMSNC1562-1超过75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％相似。在一个方面，大约或超过50％、75％或100％的后代遗传学由通过分别在SEQIDNO：1、SEQIDNO：2和SEQIDNO：11的cyp82e4、cyp82e5v2和cyp82E10位点是纯合子的本公开的植物提供。在一个方面，本公开的植物的遗传背景与NC1562-1SRC或CMSNC1562-1SRC至少95％、至少97％、至少98％或至少99％相似。在另一个方面，本公开的植物显示低的降烟碱，且不经过到高NNN的转化。在一个方面，本公开的植物是抗枯萎病的母本或父本植物的后代植物。在另一个方面，NC196SRC植物对黑梗病有中等抗性，对青枯病有中等抗性。
在一个方面，本公开的植物是具有中等高产量潜力的中-晚熟品种。在另一个方面，本公开的植物提供一系列重要的农艺特征。在进一步的方面，本公开的植物具有一个、两个、三个、四个或更多个以下性状，包括但不限于：对黑梗病的中等抗性、对青霉病的某些耐受性、抗黑根腐病和抗常见的病毒病。在另一个方面，本公开的植物耐青霉病，且对两种黑梗病有4级抗性，和对根腐病的高抗性。在一个方面，本公开的植物，例如K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC、CMSNCTG-61SRC和杂交栽培品种NC196SRC缺乏枯萎病抗性。在另一个方面，本公开的植物对黑梗病有低抗性，对青枯病有中等抗性。
在一个方面，本公开的植物具有降低的或消除的将烟碱转化为降烟碱的能力。在一个方面，烟碱转化百分比小于K326、K346、NC1562-1、NCTG-61或杂交栽培品种NC196中发现的75％、70％、60％、50％或25％。包括但不限于K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC、CMSNCTG-61SRC和杂交栽培品种NC196SRC的本公开植物中的烟碱转化率可小于约4％、约3.5％、约3％、约2.5％、约2％、约1.5％、约1％、约3-1％、约3-0.5％或约2-0.5％。在一个优选的方面，烟碱转化百分比小于不含cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S突变的K326、K346、NC1562-1、NCTG-61或杂交栽培品种NC196中发现的25％、10％、5％或2％。在一个方面，本公开烟草植物的烟碱转化率是3.5、3.25、3.0或2.75％或更小。在另一个方面，本公开烟草植物的烟碱转化率可以是4.0、3.9、3.8、3.7、3.6、3.5、3.4、3.3、3.2、3.1、3.0、2.9、2.8、2.7、2.6、2.5、2.4、2.3、2.2、2.1、2.0、1.9、1.8、1.7、1.6、1.5、1.4、1.3、1.2、1.1、1.0、0.9、0.8、0.7、0.6、0.5％或更小。在另一个方面，本公开烟草植物的烟碱转化率可以是2.9、2.8、2.7、2.6、2.5、2.4、2.3、2.2、2.1、2.0、1.9、1.8、1.7、1.6、1.5、1.4、1.3、1.2、1.1、1.0、0.9、0.8、0.7、0.6％或更小。在另一个方面，烟碱转化率可以是0.5-0.9％、0.5-1.5％、0.5-2.0％、0.5-2.5％、0.5-2.75％和0.5-3.0％。在另一个方面，烟碱转化率可以是1.0-1.5％、1.0-1.75％、1.0-2.0％、1.0-2.5％、1.0-2.75％和1.0-3.0％。在另一个方面，本公开烟草植物的烟碱转化率可以小于2.9、2.8、2.7、2.6、2.5、2.4、2.3、2.2、2.1、2.0、1.9、1.8、1.7、1.6、1.5、1.4、1.3、1.2、1.1或1.0％。在一个方面，本公开烟草植物的烟碱转化率是3.5、3.25、3.0或2.75％或更小。在另一个方面，本公开烟草植物的烟碱转化率可以是2.9、2.8、2.7、2.6、2.5、2.4、2.3、2.2、2.1、2.0、1.9、1.8、1.7、1.6、1.5、1.4、1.3、1.2、1.1、1.0、0.9、0.8、0.7、0.6％或更小。在另一个方面，烟碱转化率可以是0.5-0.9％、0.5-1.5％、0.5-2.0％、0.5-2.5％、0.5-2.75％和0.5-3.0％。在另一个方面，烟碱转化率可以是1.0-1.5％、1.0-1.75％、1.0-2.0％、1.0-2.5％、1.0-2.75％和1.0-3.0％。在另一个方面，本公开烟草植物的烟碱转化率可以小于2.9、2.8、2.7、2.6、2.5、2.4、2.3、2.2、2.1、2.0、1.9、1.8、1.7、1.6、1.5、1.4、1.3、1.2、1.1或1.0％。
在进一步的方面，从本公开植物制备的烟草填料包含0.05-0.5％、0.1-0.45％、0.15-0.4％、0.2-0.35％或0.25-0.3％的烟碱转化率。
在进一步的方面，从本公开植物制备的烟草填料包含0.05-0.5％、0.1-0.5％、0.15-0.5％、0.2-0.5％、0.25-0.5％、0.3-0.5％、0.35-0.5％、0.4-0.5％或0.45-0.5％的烟碱转化率。
在进一步的方面，从本公开植物制备的烟草填料包含0.05-0.5％、0.05-0.45％、0.05-0.4％、0.05-0.35％、0.05-0.3％、0.05-0.25％、0.05-0.2％、0.05-0.15％或0.05-0.1％的烟碱转化率。
在另一个方面，本公开的烟草植物通常具有小于约0.10％干重的降低的降烟碱含量。例如，这些植物中的降烟碱含量可以是1.2、1.0、0.7、0.5、0.4、0.2、0.1、0.09、0.085、0.08、0.075、0.07、0.065、0.06、0.055、0.05、0.045、0.04、0.035、0.025、0.01、0.009、0.0075、0.005、0.0025、0.001、0.0009、0.00075、0.0005、0.00025或0.0001％干重，或不可检测。在另一个方面，降烟碱含量可以小于1.2、1.0、0.9、0.8、0.7、0.5、0.4、0.2、0.1、0.075、0.05、0.025、0.01、0.009、0.0075、0.005、0.0025、0.001、0.0009、0.00075、0.0005、0.00025或0.0001％干重。在另一个方面，这些植物中的降烟碱含量可以是1.2-1.0、0.7-0.5、0.4-0.2、0.1-0.075、0.05-0.025，、0.01-0.0075、0.005-0.0025、0.001-0.00075、0.0005-0.00025或0.0005-0.0001％干重。与商业种子批K326、K346、NC1562-1、NCTG-61和杂交栽培品种NC196相比，本公开植物中的降烟碱在植物总生物碱的百分比相对较小。本公开植物中的降烟碱可以为总生物碱的2-1％、小于3％、约2％、约1.5％、约1％或0.75％。可以使用来自本公开植物和植物部分的烟草植物材料制备具有降低量的降烟碱含量的烟草制品。所述烟草制品通常具有少于约3mg/g的降低量的降烟碱。例如，这类植物中的降烟碱含量可以是3.0mg/g、2.5mg/g、2.0mg/g、1.5mg/g、1.0mg/g、750μg/g、500pg/g、250pg/g、100pg/g、75pg/g、50pg/g、25pg/g、10pg/g、7.0pg/g、5.0pg/g、4.0pg/g、2.0pg/g、1.0pg/g、0.5pg/g、0.4pg/g、0.2pg/g、0.1pg/g、0.05pg/g、0.01pg/g或不可检测。所述烟草制品通常具有少于约10pg/g的降低量的NNN。例如，这类植物中的降烟碱含量可以是约10pg/g、7.0pg/g、5.0pg/g、4.0pg/g、2.0pg/g、1.0pg/g、0.5pg/g、0.4pg/g、0.2pg/g、0.1pg/g、0.05pg/g、0.01pg/g或不可检测。本公开植物中包含的次级生物碱相对于总生物碱含量的百分比与商业种子批K326、K346、NC1562-1、NCTG-61和杂交栽培品种NC196可以没有统计上的差异。
在一个方面，本公开的植物或由其制备的烟草填料具有降低的NNN水平。在一个方面，NNN水平小于K326、K346、NC1562-1、NCTG-61或杂交栽培品种NC196中发现的75％、70％、60％、50％或25％。由包括但不限于K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC、CMSNCTG-61SRC和杂交栽培品种NC196SRC的本公开植物制备的烟草填料中的NNN水平可以小于约0.5、0.4、0.3、0.2或0.1ppm。在一个优选的方面，本文公开的烟草填料中的NNN水平是0.8-0.05、0.8-0.1、0.8-0.2、0.8-0.3、0.8-0.4、0.8-0.5、0.8-0.6、0.7-0.05、0.6-0.05、0.5-0.05、0.4-0.05、0.3-0.05、0.2-0.05、0.1-0.05、0.7-0.1/0.6-0.2或0.5-0.3ppm。在一个优选的方面，NNN水平小于不含cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S突变的K326、K346、NC1562-1、NCTG-61或杂交栽培品种NC196中发现的25％、10％、5％或2％。
在一个方面，由本公开植物制备的香烟在它的烟雾中具有降低的NNN水平。在一个方面，来自本公开植物的香烟烟雾NNN水平小于K326、K346、NC1562-1、NCTG-61或杂交栽培品种NC196中发现的75％、70％、60％、50％或25％。来自包括但不限于K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC、CMSNCTG-61SRC和杂交栽培品种NC196SRC的本公开植物的香烟烟雾NNN水平可以少于约0.035、0.03、0.025、0.02、0.015、0.01或0.005ng/mgTPM。在一个优选的方面，香烟烟雾NNN水平是0.035-0.005、0.035-0.01、0.035-0.015、0.035-0.02、0.035-0.025、0.03-0.005、0.025-0.005、0.02-0.005、0.015-0.005、0.03-0.01或0.025-0.015ng/mgTPM。在一个优选的方面，香烟烟雾NNN水平小于不含cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S突变的K326、K346、NC1562-1、NCTG-61或杂交栽培品种NC196中发现的25％、10％、5％或2％。
可以使用统计学方法评估两种近交烟草品种或两种杂交烟草品种之间的差异。统计学分析包括计算平均值、确定变异来源的统计学显著性和计算适当的方差分量。确定统计学显著性的方法是本领域已知的。统计软件是可获得的，例如SAS的PROCGLM函数。显著性通常以“p值”表示。统计学上显著的p值小于0.10。在一个优选的方面，p值小于或等于0.05。在另一方面，p值是0.04或更小、0.03或更小、或0.02或更小。还在另一个方面，统计学上显著的值小于0.01。还在另一个方面，它可以小于0.009、小于0.008、小于0.007、小于0.006、小于0.005、小于0.004、小于0.003、小于0.002、或小于0.001。
对于cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S等位基因是纯合子的本公开烟草植物的回复率显著低于具有野生型烟碱脱甲基酶CYP82E4、E5和E10基因的相应对照低转化植物。此外，纯合子的CYP82E4、CYP82E5和CYP82E10三重突变体烟草植物转化为降烟碱的百分比小于2.0％，例如不可检测至2.0％、1.0-2.0％、0.8-1.8％、0.8-2.0％或1.0-2.0％。
使用本领域已知的方法(例如气相色谱)可以测量乙烯处理的叶中的烟碱和降烟碱。样品中的烟碱去甲基化百分比通过将样品中测得的降烟碱水平除以烟碱和降烟碱的组合水平，再乘以100来计算。来自本公开植物样品中的烟碱去甲基化百分比是来自用商业种子批K326、K346、NC1562-1、NCTG-61和杂交栽培品种NC196种植的个体植物样品中的50％、40％、30％、20％或10％。
在一个方面，本公开烟草植物的USDA质量指标是约73、约72、约71、约70、约69、约68、约67或约66。在一个方面，本公开烟草植物的USDA质量指标是约65。在另一个方面，质量指标可以是至少约55、60、62.5或更大。在另一个方面，本公开烟草植物的质量指标可以是60-65、60-70、62.5-65、62.5-70或65-70。
本公开的植物，包括但不限于K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC、CMSNCTG-61SRC和杂交栽培品种NC196SRC可以具有任何产量，包括高(例如超过3000lbs/A)、中等高(例如2200-3000lbs/A)、和中等(例如少于2000lbs/A)产量潜力。
在另一个方面，本公开还提供从K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC、CMSNCTG-61SRC或杂交种NC196SRC植物的种子生长的植物以及来自这些植物的植物部分和组织培养物，其中从所述种子生长的烟草植物获得的生物碱具有降低的降烟碱，这些栽培品种的代表性样本种子已经，例如以ATCC保藏号PTA-13455(K326SRC)、ATCC保藏号PTA-13454(CMSK326SRC)、ATCC保藏号PTA-13453(K346SRC)、ATCC保藏号PTA-13452(CMSK346SRC)、ATCC保藏号PTA-13457(NC1562-1SRC)、ATCC保藏号PTA-120314(NCTG-61SRC)、ATCC保藏号PTA-13456(CMSNCTG-61SRC)和ATCC保藏号PTA-13458(杂交栽培品种NC196SRC)保藏于ATCC。
本公开的一方面提供栽培品种K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC、CMSNCTG-61SRC和杂交栽培品种NC196SRC的部分。例如，叶、花粉、胚、胚乳、子叶、下胚轴、根、根尖、花药、花、胚珠、芽、茎、杆、髓和囊、包含栽培品种K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC、CMSNCTG-61SRC和杂交栽培品种NC196SRC的组织、愈伤组织、细胞或原生质体的组织培养物。在另一个方面，本公开提供来自栽培品种K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC、CMSNCTG-61SRC和杂交栽培品种NC196SRC衍生的烟草植物的杂交种的部分。还在另一个方面，本公开提供上述植物和组织培养物的遗传修饰(例如通过常规育种或基因工程技术)形式。
在进一步的方面，本公开还提供栽培品种K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC、CMSNCTG-61SRC和杂交栽培品种NC196SRC的非可再生细胞。在另一个方面，本公开还提供栽培品种K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC、CMSNCTG-61SRC和杂交栽培品种NC196SRC的非可再生材料或非生殖细胞。
本公开的其他方面提供包含烟草的产品，其中所述烟草进一步包含来自本公开植物或其部分的烟草。本公开的其他方面提供熟化的植物叶和其他植物部分。因此，在一些方面，所述熟化的植物部分包括但不限于叶、花粉、胚珠、胚、子叶、下胚轴、分生细胞、原生质体、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚果、叶柄等和它们的组合。
因此，在一些方面，本公开提供包含其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的命名为K326SRC的栽培品种的烟草植物的叶的熟化烟草。在另一个方面，本公开提供包含其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC的命名为CMSK326SRC的栽培品种的烟草植物的叶的熟化烟草。在另一个方面，本公开提供包含其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的命名为K346SRC的栽培品种的烟草植物的叶的熟化烟草。在另一个方面，本公开提供包含其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC的命名为CMSK346SRC的栽培品种的烟草植物的叶的熟化烟草。在进一步的方面，本公开提供包含其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的命名为NC1562-1SRC的栽培品种的烟草植物的叶的熟化烟草。还在另一个方面，本公开提供包含其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的命名为NCTG-61SRC的栽培品种的烟草植物的叶的熟化烟草。还在另一个方面，本公开提供包含其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC的命名为CMSNCTG-61SRC的栽培品种的烟草植物的叶的熟化烟草。还在另一个方面，本公开提供包含其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC的命名为NC196SRC的杂交栽培品种的烟草植物的叶的熟化烟草。
在一个方面，本公开提供包含其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的命名为K326SRC的的栽培品种烟草植物的茎的熟化烟草。在另一个方面，本公开提供包含其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC的命名为CMSK326SRC的栽培品种的烟草植物的茎的熟化烟草。在另一个方面，本公开提供包含其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的命名为K346SRC的栽培品种的烟草植物的茎的熟化烟草。在另一个方面，本公开提供包含其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC的命名为CMSK346SRC的栽培品种的烟草植物的茎的熟化烟草。在进一步的方面，本公开提供包含其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的命名为NC1562-1SRC的栽培品种的烟草植物的茎的熟化烟草。还在另一个方面，本公开提供包含其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的命名为NCTG-61SRC的栽培品种的烟草植物的茎的熟化烟草。还在另一个方面，本公开提供包含其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC的命名为CMSNCTG-61SRC的栽培品种的烟草植物的茎的熟化烟草。还在另一个方面，本公开提供包含其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC的命名为NC196SRC的的杂交栽培品种烟草植物的茎的熟化烟草。
在一个方面，本公开提供包含其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13455保藏于ATCC的命名为K326SRC的栽培品种的烟草植物的叶和茎的熟化烟草。在另一个方面，本公开提供包含其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13454保藏于ATCC的命名为CMSK326SRC的栽培品种的烟草植物的叶和茎的熟化烟草。在另一个方面，本公开提供包含其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13453保藏于ATCC的命名为K346SRC的栽培品种的烟草植物的叶和茎的熟化烟草。在另一个方面，本公开提供包含其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13452保藏于ATCC的命名为CMSK346SRC的栽培品种的烟草植物的叶和茎的熟化烟草。在进一步的方面，本公开提供包含其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13457保藏于ATCC的命名为NC1562-1SRC的栽培品种的烟草植物的叶和茎的熟化烟草。还在另一个方面，本公开提供包含其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-120314保藏于ATCC的命名为NCTG-61SRC的栽培品种的烟草植物的叶和茎的熟化烟草。还在另一个方面，本公开提供包含其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13456保藏于ATCC的命名为CMSNCTG-61SRC的栽培品种的烟草植物的叶和茎的熟化烟草。还在另一个方面，本公开提供包含其代表性样本种子以ATCC保藏号PTA-13458保藏于ATCC的命名为NC196SRC的杂交栽培品种的烟草植物的叶和茎的熟化烟草。
本公开还提供K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC、CMSNCTG-61SRC或杂交种NC196SRC的种子或本公开的其他种子的容器，其中从超过50％的所述种子生长的烟草植物所得的生物碱具有降低的降烟碱。在另一方面，从容器中超过55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或95％的种子生长的K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC、CMSNCTG-61SRC或杂交种NC196SRC植物或本公开的其他植物所得的生物碱具有降低的降烟碱，这些栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号，例如PTA-13455(K326SRC)、PTA13454(CMSK326SRC)、PTA13453(K346SRC)、PTA13452(CMSK346SRC)、PTA13457(NC1562-1SRC)、PTA-120314(NCTG-61SRC)、PTA13456(CMSNCTG-61SRC)和PTA13458(杂交栽培品种NC196SRC)保藏于ATCC。
K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC、CMSNCTG-61SRC或杂交种NC196SRC的种子或本公开其他种子的容器可以包括任何数量、重量或体积的种子。例如，一个容器可以包含至少，或超过约100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000或更多粒种子。或者，所述容器可以包含至少，或超过约1盎司、5盎司、10盎司、1磅、2磅、3磅、4磅、5磅或更多种子。这些栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号，例如PTA-13455(K326SRC)、PTA13454(CMSK326SRC)、PTA13453(K346SRC)、PTA13452(CMSK346SRC)、PTA13457(NC1562-1SRC)、PTA-120314(NCTG-61SRC)、PTA13456(CMSNCTG-61SRC)和PTA13458(杂交栽培品种NC196SRC)保藏于ATCC。
K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC、CMSNCTG-61SRC或杂交种NC196SRC的种子或本公开其他种子的容器可以是现有技术中可获得的任何容器。作为非限制性的实例，容器可以是盒子、袋子、小包、小袋、磁带卷(taperoll)、桶、箔、管或瓶。这些栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号，例如PTA-13455(K326SRC)、PTA13454(CMSK326SRC)、PTA13453(K346SRC)、PTA13452(CMSK346SRC)、PTA13457(NC1562-1SRC)、PTA-120314(NCTG-61SRC)、PTA13456(CMSNCTG-61SRC)和PTA13458(杂交栽培品种NC196SRC)保藏于ATCC。
在另一个方面，本公开还提供K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC、CMSNCTG-61SRC或杂交种NC196SRC的种子的容器，其中超过50％的K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC、CMSNCTG-61SRC或杂交种NC196SRC的种子或本公开其他种子具有降低的降烟碱。这些栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号，例如PTA-13455(K326SRC)、PTA13454(CMSK326SRC)、PTA13453(K346SRC)、PTA13452(CMSK346SRC)、PTA13457(NC1562-1SRC)、PTA-120314(NCTG-61SRC)、PTA13456(CMSNCTG-61SRC)和PTA13458(杂交栽培品种NC196SRC)保藏于ATCC。
在一个方面，本公开提供K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC、CMSNCTG-61SRC或杂交种NC196SRC植物或本公开的其他植物的种子，其中从种子生长的植物雄性不育。这些栽培品种的代表性样本种子以ATCC保藏号，例如PTA-13455(K326SRC)、PTA13454(CMSK326SRC)、PTA13453(K346SRC)、PTA13452(CMSK346SRC)、PTA13457(NC1562-1SRC)、PTA-120314(NCTG-61SRC)、PTA13456(CMSNCTG-61SRC)和PTA13458(杂交栽培品种NC196SRC)保藏于ATCC。
本公开进一步提供熟化烟草材料、烟草共混物，和用本文公开的烟草植物制备的烟草制品。在一个方面，本公开的熟化烟草材料是烤制熟化的。在另一个方面，本公开的熟化烟草材料是阳光熟化、空气熟化的或火熟化的。
获自本公开的烟草系、品种或杂交种的烟草材料可用来制备烟草制品，包括但不限于卷烟制品(例如香烟和比迪烟)、雪茄制品(例如雪茄外包皮烟和小雪茄)、斗烟制品、衍生自烟草的制品、衍生自烟草的烟碱制品、无烟烟草制品(例如湿鼻吸烟、干鼻吸烟和嚼烟)、薄层(film)、咀嚼片、标签、成型制件、凝胶、消耗单元、不可溶基质、中空形等。参见例如其全文通过引用并入本文的美国专利申请号US2006/0191548。
来自本公开植物的烟草制品还包括香烟和其他吸烟物品，尤其是包括过滤嘴元件的那些吸烟物品，其中可吸材料的杆包括烟草共混物中的熟化烟草。在一个方面，烟草制品可以是斗烟、雪茄、卷烟、嚼烟、烟叶、烟丝(shreddedtobacco)和烟丝(cuttobacco)。
在一个方面，本公开的烟草制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟、斗烟、雪茄、卷烟、嚼烟、烟叶、水烟、烟丝(shreddedtobacco)和烟丝(cuttobacco)。在另一个方面，本公开的烟草制品是无烟烟草制品。在进一步的方面，本公开的烟草制品选自散装嚼烟、烟饼型嚼烟、湿鼻吸烟和鼻烟。还在另一个方面，本公开的烟草制品选自电子加热烟、电子烟、电子蒸发装置。
在一个方面，本公开的烟草制品可以是混合的烟草制品。在本公开的其他方面，本公开的烟草制品可以是烟碱降低的烟草制品。还在其他方面，本公开的烟草制品可以是具有降低的烟碱含量的混合烟草制品。因此，本公开的烟草制品可以是混合的烟碱降低的烟草制品。烟草制品材料包含来自本公开的烟草材料的混合物，其中根据烟草材料的干重，所述混合物包含熟化烟草重量的至少约5、10、20、30、40、50、60、70、80、90或95％。因为共混物，US2008/0245377的全文通过引用并入本文。
在一个方面，具有降低量的亚硝胺含量的烟草制品可以使用来自本公开植物和植物部分的烟草植物材料来制备。烟草制品通常具有少于约3mg/g的降低量的降烟碱。例如，此类制品中的降烟碱含量可以是3.0mg/g、2.5mg/g、2.0mg/g、1.5mg/g、1.0mg/g、750μg/g、500pg/g、250pg/g、100pg/g、75pg/g、50pg/g、25pg/g、10pg/g、7.0pg/g、5.0pg/g、4.0pg/g、2.0pg/g、1.0pg/g、0.5pg/g、0.4pg/g、0.2pg/g、0.1pg/g、0.05pg/g、0.01pg/g或不可检测。烟草制品通常具有少于约10pg/g的降低量的NNN。例如，此类制品中的降烟碱含量可以是约10pg/g、7.0pg/g、5.0pg/g、4.0pg/g、2.0pg/g、1.0pg/g、0.5pg/g、0.4pg/g、0.2pg/g、0.1pg/g、0.05pg/g、0.01pg/g或不可检测。本公开植物中包含的次级生物碱相对于总生物碱含量的百分比与K326、K346、NC1562-1、NCTG-61和杂交栽培品种NC196的商业种子批可以没有统计上的差异。
本公开进一步提供制备烟草制品的方法，所述方法包括调节用本文公开的烟草植物制备的老化烟草材料以将其含水量从约12.5％-约13.5％增加至约21％，混合所述调节的烟草材料以产生所需的共混物。在一个方面，本文公开的制备烟草制品的方法进一步包括包装或调味所述共混物。通常在包装工艺中，将包装或调味料添加至共混物以通过平衡化学组分和开发某些所需风味特征来增强它们的品质。包装工艺的进一步细节可以在由L.Davis和M.Nielsen主编的TobaccoProduction，ChemistryandTechnology，BlackwellScience，1999中找到。
携带cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S等位基因的命名为K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC、CMSNCTG-61SRC或杂交栽培品种NC196SRC的本公开的烟草植物可用于植物育种工程以生成有用的株系、栽培品种、品种、后代、近交系和杂交种。因此，在一些方面，将包含cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S等位基因的F1、F2、F3或更后代的烟草植物与第二烟草属(Nicotiana)植物杂交，鉴定其中存在cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S等位基因的杂交后代。将理解，所述第二烟草属植物将是K326、K346、NC1562-1、NCTG-61和杂交栽培品种NC196或任何其他的烟草属的种或系，任选的具有其他期望性状，例如如下提及的抗除草剂。
还在其他方面，本公开的方法进一步包括自花受粉或用花粉供体授粉雄性不育的花粉受体，所述花粉供体能够用于产生本公开的后代，例如本公开的雄性不育杂交种。所述雄性不育的花粉受体植物或所述花粉供体植物在烟碱脱甲基酶位点上具有至少一个突变等位基因、两个、或甚至三个突变等位基因，例如cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S。在一个方面，在每个烟碱脱甲基酶位点上的所有三个等位基因均是突变等位基因，使得所述植物对于cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S是纯合子的。
可通过任何已知程序进行育种。DNA指纹图谱、SNP或类似技术可用于标记辅助选择(MAS)育种以将烟碱脱甲基酶基因的突变等位基因转移或育种进入其他烟草。例如，育种者可从包含cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S等位基因的基因型和农艺上所需的基因型的杂交种生成分离群体。可以使用开发自cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S等位基因或其片段的标记，使用本领域已知的或本文所列的技术之一筛选F2或回交代的植物。鉴定为具有一个或多个cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S等位基因的植物可以回交或自花受粉以生成待筛选的第二代。取决于预期的遗传模式或所用的MAS技术，可能有必要在每轮回交前将选择的植物自花受粉以有助于鉴定所需的个体植物。可以重复回交或其他育种程序直到恢复回交亲本的所需表型。本公开的回交亲本可以是K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC、CMSNCTG-61SRC或NC196SRC。其他育种技术可发现于其全文通过引用并入本文的，例如Wernsman，E.A.和Rufty，R.C.1987.ChapterSeventeen.Tobacco.Pages669-698In：CultivarDevelopment.CropSpecies.W.H.Fehr(ed.)，MacMillanPublishingGo.，Inc.，NewYork，N.Y.。
显示与红花烟草(Nicotianatabacum)具有育种相容性的烟草种包括抱茎烟草(Nicotianaamplexicaulis)，PI271989；本塞姆氏烟草(Nicotianabenthamiana)PI555478；毕基劳式烟草(Nicotianabigelovii)PI555485；迪勃纳氏烟草(Nicotianadebneyi)；高烟草(Nicotianaexcelsior)PI224063；粘烟草(Nicotianaglutinosa)PI555507；古特斯比氏烟草(Nicotianagoodspeedii)PI241012；哥西氏烟草(Nicotianagossei)PI230953；西烟草(Nicotianahesperis)PI271991；奈特氏烟草(Nicotianaknightiana)PI555527；NicotianamaritimaPI555535；特大管烟草(Nicotianamegalosiphon)PI555536；NicotiananudicaulisPI555540；圆锥烟草(Nicotianapaniculata)PI555545；蓝茉莉叶烟草(Nicotianaplumbaginifolia)PI555548；残波烟草(Nicotianarepanda)PI555552；黄花烟草(Nicotianarustica)；NicotianasuaveolensPI230960；林烟草(Nicotianasylvestris)PI555569；绒毛烟草(Nicotianatomentosa)PI266379；绒毛状烟草(Nicotianatomentosiformis)；和三角叶烟草(Nicotianatrigonophylla)PI555572。还可参见其全文通过引用并入本文的由美国植物病理学学会出版的CompendiumofTobaccoDiseases或由JapanTobaccoInc出版的TheGenusNicotianaIllustrated。
使用本文所述的突变烟草植物的植物育种程序的结果包括有用的系、栽培品种、品种、后代、近交系和杂交种。如在此所用，术语“栽培品种”或“品种”是指具有将其与同物种的其他植物分离开来的恒定特征的植物群体。栽培品种或品种通常，尽管并不总是，商业销售的。当具有一个或多个特殊性状，栽培品种或品种的进一步特征是在那个品种内个体之间非常小的总体差异。可通过数代自花受粉和选择，或使用组织或细胞培养技术从单个亲本无性繁殖生成“纯系”品种。栽培品种或品种可以基本上衍生自另一个栽培品种、系或品种。根据国际公约对植物新品种保护所定义(1961年12月2日，于1972年11月10日、1978年10月23日和1991年3月19日在日内瓦修订)，栽培品种或品种“基本上衍生”自初始栽培品种或品种，如果：a)它主要衍生自初始栽培品种或品种，或从主要衍生自初始栽培品种或品种的栽培品种或品种衍生，同时保留由所述初始栽培品种或品种的基因型或基因型组合产生的必要特征的表达；b)它与初始栽培品种或品种有明显区别；c)除了由衍生行为产生的差异，它在由所述初始栽培品种或品种的基因型或基因型组合产生的必要特征的表达中与初始栽培品种或品种相符合。可通过例如选择天然或诱导的突变体、体细胞无性变异、来自初始品种植物的变异个体、回交或转化获得基本上衍生的品种。与栽培品种或品种不同，“系”最通常是指非商业使用的一组植物，例如用于植物研究。系通常对于一个或多个目标性状在个体间显示非常小的总体差异，尽管对于其他性状在个体间可能存在一些差异。
可通过以下产生杂交烟草品种：防止第一品种的母本植物(例如种子亲本)自花受粉，允许来自第二品种的父本植物的花粉使母本植物受精，和允许在母本植物上形成F1杂交种子。可通过在花发育早期去雄来防止母本植物的自花受粉。或者，可使用雄性不育的形式防止在母本植物上形成花粉。例如，可通过细胞质雄性不育(CMS)或其中转基因抑制小孢子形成和/或花粉形成的转基因雄性不育，或自交不亲和来产生雄性不育。包含CMS的母本植物尤其有用。在母本植物是CMS的情况下，可从雄性可育植物收获花粉，人工授粉至CMS母本植物的柱头，然后收获所得F1种子。
植物可用来形成单交烟草F1杂交种。或者，可进行三方杂交，其中将单交F1杂交种用作母本，并与不同的父本杂交。又或者，可创造双交杂交种，其中将两个不同的单交F1后代互相杂交。当形成双交杂交种时，自交不亲和尤其有利于防止母本自花受粉。
成功的杂交产生可育的、具有cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S等位基因的，且如果需要，可与亲本之一，例如K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC、CMSNCTG-61SRC或NC196SRC回交的F1植物。在一些方面，筛选F2代的植物群体中的cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S等位基因。可将选择的植物与亲本之一杂交，将第一次回交(BC1)代植物自花受粉以产生BC1F2群体，再次筛选各种烟碱脱甲基酶基因表达(例如缺乏烟碱脱甲基酶基因的版本)。重复回交、自花受粉和筛选过程，例如至少4次，直到最后的筛选产生可育的且与回交亲本合理地相似的植物。如果需要，将该植物自花受粉，并随后再次筛选后代以证实该植物显示与K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC、CMSNCTG-61SRC或NC196SRC相同的低烟碱转化率表型。使用标准方法，包括例如田间试验、验证烟碱脱甲基酶的缺失状况、化学分析熟化烟草叶以确定生物碱水平和/或化学分析熟化烟草叶以确定降烟碱与烟碱+降烟碱的比例来产生育种者的所选择植物的种子。
在一个方面，F1后代是为产生雄性可育的F1后代的K326SRC和CMSK326SRC之间杂交的结果。在另一个方面，F1后代是为产生雄性可育的F1后代的K346SRC和CMSK346SRC之间杂交的结果。可通过本领域已知的任何方法产生雄性可育的烟草植物。产生雄性可育烟草的方法描述于Wernsman，E.A.和Rufty，R.C.1987.ChapterSeventeen.Tobacco.Pages669-698In：CultivarDevelopment.CropSpecies.W.H.Fehr(ed.)，MacMillanPublishingGo.，Inc.，NewYork，N.Y.761pp。
本公开进一步提供通过将栽培品种K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC、CMSNCTG-61SRC和杂交种NC196SRC之一与它自己或不同的烟草系杂交来产生烟草植物的方法。本公开进一步涉及通过将栽培品种K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、CMSNCTG-61SRC和杂交种NC196SRC的植物与第二烟草植物杂交，并种植后代种子以产生K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、CMSNCTG-61SRC或杂交种NC196SRC衍生的烟草植物来产生衍生自栽培品种K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、CMSNCTG-61SRC和杂交种NC196SRC的其他烟草栽培品种或育种系的方法。本公开的其他方面提供在其遗传材料中包含一个或多个转基因的烟草植物的方法，包括将本公开的栽培品种与产生后代的包含一个或多个转基因的第二栽培品种杂交，使得杂交产生的后代的遗传材料包含任选的与一个或多个调控元件可操作连接的转基因。在一个方面，所述第二栽培品种可以是用一个或多个转基因转化的衍生自栽培品种K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、CMSNCTG-61SRC或杂交种NC196SRC的植物。
本公开进一步提供栽培品种K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、CMSNCTG-61SRC和杂交种NC196SRC的植物，其杂交种和后代的无性繁殖。在一个方面，本公开提供无性繁殖烟草栽培品种植物的方法，包括收集能够从栽培品种K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、CMSNCTG-61SRC和杂交种NC196SRC植物繁殖的组织，种植所述组织以获得增殖芽，使增殖芽生根以获得以获得带根的苗。在另一个方面，可从栽培品种K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、CMSNCTG-61SRC和杂交种NC196SRC植物的F1杂交种收集植物组织。在一个方面，可从通过育种栽培品种K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、CMSNCTG-61SRC和杂交种NC196SRC的植物获得的F2、F3、F4或更晚后代收集植物组织。
可通过选择或筛选诱变的植物材料或其后代鉴定在烟碱脱甲基酶基因中包含突变的植物。这种筛选和选择方法是本领域技术人员已知的。筛选和选择方法的实例包括但不限于Southern分析、检测聚核苷酸的PCR扩增、Northern印迹、RNase保护、引物延伸、检测RNA转录的RT-PCR扩增、检测多肽和聚核苷酸的酶或核酶活性的酶检测，和蛋白凝胶电泳，Western印迹、免疫沉淀，和检测多肽的酶联免疫分析。其他技术例如原位杂交、酶染色和免疫染色也可以用来检测多肽和/或聚核苷酸的存在或表达。进行所有参考技术的方法是已知的。
应当理解，可使用本领域已知的技术通过基因构建体或转基因转化本公开的烟草植物，包括但不限于K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、CMSNCTG-61SRC和杂交栽培品种NC196SRC。非限制性的，期望性状的实例是抗除草剂、抗虫性、抗病性、高产量、高等级指标、熟化性、熟化质量、机械收成、保持能力、叶片质量、高度、植物成熟(例如早熟、早中熟、中熟、中晚熟、或晚熟)、杆大小(例如小杆、中杆、或大杆)、每株植物的叶片数(例如少量(例如5-10叶)、中量(例如11-15叶)、大量(例如16-21)叶)，或任何组合。本公开的任何植物可用作组织培养、再生、转化或任何这些组合的基础。在一个方面，通过组织培养、转化或组织培养和转化衍生的本公开的植物具有栽培品种K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、CMSNCTG-61SRC或杂交种NC196SRC的所有形态和生理特征。
已经总体上描述了本公开，这将通过参照以下实施例更容易理解，所述实施例以说明性的方式提供，除非指明，其并不意欲限制本公开。
具体实施方式
实施例1
将纯合子的cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S突变植物育种为K326烤制熟化的烟草栽培品种
K326SRC是烤制熟化的烟草栽培品种K326的回交衍生版本，所述栽培品种K326在之前记载(Lewis等，2010)的编码烟碱脱甲基酶的三个基因CYP82E4(SEQIDNO：5)、CYP82E5(SEQIDNO：8)和CYP82E10(SEQIDNO：9)中携带引入的突变。在CYP82E4(cyp82e4W329Stop(SEQIDNO：1))和CYP82E5(cyp82e5v2W422Stop(SEQIDNO：2))中引入的突变编码未成熟的终止密码子，使该基因失去功能。在CYP82E10(cyp82e10P381S(SEQIDNO：11))中引入的突变不编码未成熟的终止密码子，但确实使该基因产物失去将烟碱转化为降烟碱的功能(Lewis等，2010)。在纯合子的情况下，所述三个突变使烟草植物(1)将烟碱去甲基化形成降烟碱的遗传能力降低，和(2)相应的积累N-亚硝基降烟碱(NNN，在很多烟草制品中发现的强效致癌物)的潜力消失。CYP82E4(cyp82e4W329Stop(SEQIDNO：1))中的突变也为“烟碱转化率”特征提供表型稳定性，并消除了使用繁琐的“LC”方法降低烟草栽培品种中降烟碱水平的需求。
初始的烟草栽培品种K326是可育近交系。CMSK326是K326的细胞质雄性不育版本。为了开发K326SRC，用在三个烟碱脱甲基酶基因的每一个携带突变的遗传背景DH98-325-6的植物授粉K326的个体植物。将来自该杂交且对于各突变均为杂合子的F1个体与回交亲本K326回交以产生BC1F1后代。用基因分型的方法筛选BC1F1后代以鉴定对于所有三个突变均是杂合的个体。将单株三重杂合的BC1F1植物与K326回交以产生BC2F1后代。在BC3F1、BC4F1、BC5F1、BC6F1和BC7F1阶段重复回交和鉴定对于所有三个突变均是杂合的个体的过程。在BC7F1阶段，将来自各谱系的对于所有三个突变均是杂合的个体自花受粉以产生BC7F2种子。将来自各谱系的大量BC7F2后代基因分型以鉴定对于所有三个突变均是纯合子的个体。将对于所有三个突变均是纯合子的单株BC7F2植物自花受粉以产生BC7F3家族(K326SRC)，其中K326的野生型CYP82E4、CYP82E5v2和CYP82E10等位基因被突变体(cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S等位基因)取代。
K326SRC的雄性不育(CMS)版本(CMSK326SRC)通过将CMSK326植物作为母本与K326SRC的花粉杂交以产生对于所有三个突变均是杂合的雄性不育植物来产生。然后将来自该杂交的单株雄性不育植物作为母本与K326SRC回交以产生后代，所述后代分离出对于所有三个突变均是纯合子的个体。通过DNA基因分型鉴定三纯合子个体以产生CMSK326SRC系。因为该系是雄性不育的，其通过用K326SRC授粉来维持。
用K326SRC的花粉授粉CMSK326SRC植物产生商业的K326SRC。
测试K326SRC
在2012年期间，在三个北加利福利亚的田间试验点(牛津、落基山、金斯顿)评估K326SRC的熟化叶化学、产量和物理质量。包括K326用于比较。在各点的实验设计是四次重复的随机化完全区组设计。实验单位是单个的20株植物小组。收获小组并烤制熟化。用小组重量来测定每英亩产量。通过之前的USDA烟草分级评估熟化叶。从各小组收集50g复合叶样品，并用色谱仪器分析烟碱、降烟碱、新烟草碱、假木贼碱和烟碱转化百分比。
使用最小显著差(LSD)测试的比较表明，K326SRC的降烟碱水平和烟碱转化率显著(P＜0.05)低于K326(表1)。K326和K326SRC在烟碱百分比、产量或熟化叶质量指标上没有显著差异。
分析K326SRC烟草填料和香烟烟雾中的NNN水平
在一个独立试验中，通过气相色谱进一步评估K326SRC的烟草填料和香烟烟雾中的NNN水平。还测量烟草填料中的烟碱转化百分比。包括K326用于比较。K326SRC在烟草填料(～0.22对比～0.53ppm)和香烟烟雾(～0.015对比～0.04ng/mg总颗粒物质(TPM))中的NNN水平均低于K326(图1)。K326SRC烟草填料(～0.8％)中的烟碱转化百分比低于K326烟草填料(～3.1％)(图1)。
实施例2
将纯合子的cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S突变植物育种为K346烤制熟化的烟草栽培品种
K346SRC是烤制熟化的烟草栽培品种K346的回交衍生版本，所述栽培品种K326在之前记载(Lewis等，2010)的编码烟碱脱甲基酶的三个基因CYP82E4(SEQIDNO：5)、CYP82E5(SEQIDNO：8)和CYP82E10(SEQIDNO：9)中携带引入的无效突变。在CYP82E4(cyp82e4W329Stop(SEQIDNO：1))和CYP82E5(cyp82e5v2W422Stop(SEQIDNO：2))中引入的突变编码未成熟的终止密码子，使该基因失去功能。在CYP82E10(cyp82e10P381S(SEQIDNO：11))中引入的突变不编码未成熟的终止密码子，但确实使该基因产物失去将烟碱转化为降烟碱的功能(Lewis等，2010)。在纯合子的情况下，所述三个突变使烟草植物(1)将烟碱去甲基化形成降烟碱的遗传能力降低，和(2)相应的积累N-亚硝基降烟碱(NNN，在很多烟草制品中发现的强效致癌物)的潜力消失。CYP82E4(cyp82e4W329Stop(SEQIDNO：1))中的突变也为“烟碱转化率”特征提供表型稳定性，并消除了使用繁琐的“LC”方法降低烟草栽培品种中降烟碱水平的需求。
初始的烟草栽培品种K346是可育近交系。CMSK346是初始K346的细胞质雄性不育版本。为了开发K346SRC，开始用在三个烟碱脱甲基酶基因的每一个携带突变的遗传背景DH98-325-6的植物授粉K346的个体植物。将来自该杂交且对于各突变均为杂合子的F1个体与回交亲本K346回交以产生BC1F1后代。用基因分型的方法筛选BC1F1后代以鉴定对于所有三个突变均是杂合的个体。将单株三重杂合的BC1F1植物与K346回交以产生BC2F1后代。在BC3F1、BC4F1、BC5F1、BC6F1和BC7F1阶段重复回交和鉴定对于所有三个突变均是杂合的个体的过程。在BC7F1阶段，将来自各谱系的对于所有三个突变均是杂合的个体自花受粉以产生BC7F2种子。将来自各谱系的大量BC7F2后代基因分型以鉴定三个突变均是纯合子的个体。将对于所有三个突变均是纯合子的单株BC7F2植物自花受粉以产生BC7F3家族(K346SRC)，其中K346的野生型CYP82E4、CYP82E5v2和CYP82E10等位基因被突变体(cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S等位基因)取代。
K346SRC的雄性不育(CMS)版本(CMSK346SRC)通过将CMSK346植物作为母本与K346SRC的花粉杂交以产生对于所有三个突变均是杂合的雄性不育植物来产生。然后将来自该杂交的单株雄性不育植物作为母本与K346SRC回交以产生后代，所述后代分离出对于所有三个突变均是纯合的个体。通过DNA基因分型鉴定三纯合子个体以产生CMSK346SRC系。因为该系是雄性不育的，其通过用K346SRC授粉来维持。
用K346SRC的花粉授粉CMSK346SRC植物产生商业的K346SRC。
测试K346SRC
在2012年期间，在三个北加利福利亚的田间试验点(牛津、落基山、金斯顿)评估K346SRC的熟化叶化学、产量和物理质量。包括K346用于比较。在各点的实验设计是四次重复的随机化完全区组设计。实验单位是单个的20株植物小组。收获小组并烤制熟化。用小组重量来测定每英亩产量。通过之前的USDA烟草分级评估熟化叶。从各小组收集50g复合叶样品，并用色谱仪器分析烟碱、降烟碱、新烟草碱、假木贼碱和烟碱转化百分比。
使用最小显著差(LSD)测试的比较表明，K346SRC的降烟碱水平和烟碱转化率显著(P＜0.05)低于K346(表1)。K346和K346SRC在烟碱百分比、产量或熟化叶质量指标上没有显著差异。
实施例3
将纯合子的cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S突变植物育种为NC196烤制熟化的烟草栽培品种
杂交栽培品种NC196SRC是烤制熟化的烟草栽培品种NC196的回交衍生版本，所述栽培品种K326在之前记载(Lewis等，2010)的编码烟碱脱甲基酶的三个基因CYP82E4(SEQIDNO：5)、CYP82E5(SEQIDNO：8)和CYP82E10(SEQIDNO：9)中携带引入的有害突变。在CYP82E4(cyp82e4W329Stop(SEQIDNO：1))和CYP82E5(cyp82e5v2W422Stop(SEQIDNO：2))中引入的突变编码未成熟的终止密码子，使该基因失去功能。在CYP82E10(cyp82e10P381S(SEQIDNO：11))中引入的突变不编码未成熟的终止密码子，但确实使该基因产物失去将烟碱转化率为降烟碱的功能(Lewis等，2010)。在纯合子的情况下，所述三个突变使烟草植物(1)将烟碱去甲基化形成降烟碱的遗传能力降低，和(2)相应的积累N-亚硝基降烟碱(NNN，在很多烟草制品中发现的强效致癌物)的潜力消失。CYP82E4(cyp82e4W329Stop(SEQIDNO：1))中的突变也为“烟碱转化率”特征提供表型稳定性，并消除了使用繁琐的“LC”方法降低烟草栽培品种中降烟碱水平的需求。
初始的烟草栽培品种NC196是用可育系NC1562-1产生的花粉授粉雄性不育系CMSNCTG-61植物制备的杂交种。为了开发杂交栽培品种NC196SRC，首先用在三个烟碱脱甲基酶基因的每一个携带突变的遗传背景DH98-325-6的植物授粉可育NCTG-61和NC1562-1的个体植物。将来自该杂交且对于各突变均为杂合子的F1个体与回交亲本(NCTG-61或NC1562-1)回交以产生BC1F1后代。
用基因分型的方法筛选BC1F1后代以鉴定对于所有三个突变均是杂合的个体。将单株三重杂合的BC1F1植物分别与NCTG-61或NC1562-1回交以产生BC2F1后代。在BC3F1、BC4F1、BC5F1、BC6F1和BC7F1阶段重复回交和鉴定对于所有三个突变均是杂合的个体的过程。在BC7F1阶段，将来自各谱系的对于所有三个突变均是杂合的个体自花受粉以产生BC7F2种子。将来自各谱系的大量BC7F2后代基因分型以鉴定对于所有三个突变均是纯合子的个体。将对于所有三个突变均是纯合子的单株BC7F2植物自花受粉以产生BC7F3家族(NCTG-61SRC和NC1562-1SRC)，其中NCTG-61和NC1562-1的野生型CYP82E4、CYP82E5v2和CYP82E10等位基因被突变体(cyp82e4W329Stop、cyp82e5v2W422Stop和cyp82e10P381S等位基因)取代。
NC196的母本系CMSNCTG-61是细胞质雄性不育的，其使得不产生花粉。为了开发CMSNCTG-61SRC，将CMSNCTG-61植物与NCTG-61SRC杂交以产生对于所有三个突变均是杂合的雄性不育植物。将来自该杂交的单株雄性不育植物作为母本与NCTG-61SRC杂交以产生后代，所述后代分离出对于所有三个突变均是纯合子的个体。通过DNA基因分型鉴定三纯合子个体以产生CMSNCTG-61SRC系。因为该系是雄性不育的，其通过用NCTG-61SRC授粉来维持。
用NC1562-1SRC的花粉授粉CMSNCTG-61SRC植物产生杂交栽培品种NC196SRC。
测试杂交栽培品种NC196SRC
在2012年期间，在三个北加利福利亚的田间试验点(牛津、落基山、金斯顿)评估杂交栽培品种NC196SRC的熟化叶化学、产量和物理质量。包括杂交栽培品种NC196用于比较。在各点的实验设计是四次重复的随机化完全区组设计。实验单位是单个的20株植物小组。收获小组并烤制熟化。用小组重量来测定每英亩产量。通过之前的USDA烟草分级评估熟化叶。从各小组收集50g复合叶样品，并用色谱仪器分析烟碱、降烟碱、新烟草碱、假木贼碱和烟碱转化百分比。
使用最小显著差(LSD)测试的比较表明，NC196SRC的降烟碱水平和烟碱转化率显著(P＜0.05)低于NC196(表1)。NC196和NC196SRC在烟碱百分比、产量或熟化叶质量指标上没有显著差异。
保藏信息
以上公开的和所附权利要求中记载的专有的近交植物系保藏于美国典型培养物保藏中心(ATCC)，10801UniversityBoulevard，Manassas，VA20110。K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NC196SRC和CMSNCTG-61SRC的保藏日期是2013年1月17日。NCTG-61SRC的保藏日期是2013年5月7日。各品种的2500粒种子的保藏取自从本申请的申请日之前保留的相同保藏。一旦获得专利，将去除对该保藏的所有限制，且该保藏意欲满足37C.F.R.§1.801-1.809的所有要求。ATCC发布了以下保藏号：K326SRC的ATCC保藏号是PTA-13455；CMSK326SRC的ATCC保藏号是PTA-13454；K346SRC的ATCC保藏号是PTA-13453；CMSK346SRC的ATCC保藏号是PTA-13452；NC1562-1SRC的ATCC保藏号是PTA-13457；CMSNCTG-61SRC的ATCC保藏号是PTA-13456；NCTG-61SRC的ATCC保藏号是PTA-120314；和杂交种NC196SRC的ATCC保藏号是PTA-13458。这些保藏将在保藏中心保留30年，或在最后请求之后保留5年，或在专利的有效期内保留(取最长时间)，且在上述期间将根据需要替换。

Claims (18)

1.熟化烟草材料或由其制备的烟草制品，其中所述熟化烟草材料来自杂交种、栽培品种或由所述栽培品种产生的后代杂交种的烟草植物或其部分，
所述杂交种是NC196SRC，
所述栽培品种选自K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC和CMSNCTG-61SRC；
所述K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC和CMSNCTG-61SRC的代表性样本种子分别以ATCC保藏号PTA-13455、PTA-13454、PTA-13453、PTA-13452、PTA-13457、PTA-13458、PTA-120314和PTA-13456保藏于ATCC。
2.权利要求1所述的烟草制品，其中所述烟草制品选自斗烟、雪茄、卷烟、嚼烟、烟叶、烟丝(shreddedtobacco)和烟丝(cuttobacco)。
3.权利要求1所述的烟草制品，其中所述烟草制品选自小雪茄、非通风过滤嘴香烟、通风过滤嘴香烟、雪茄、鼻烟和嚼烟。
4.权利要求3所述的烟草制品，其中所述烟草制品的降烟碱含量小于约3mg/g。
5.权利要求4所述的烟草制品，其中所述烟碱含量选自3.0mg/g、2.5mg/g、2.0mg/g、1.5mg/g、1.0mg/g、750μg/g、500pg/g、250pg/g、100pg/g、75pg/g、50pg/g、25pg/g、10pg/g、7.0pg/g、5.0pg/g、4.0pg/g、2.0pg/g、1.0pg/g、0.5pg/g、0.4pg/g、0.2pg/g、0.1pg/g、0.05pg/g、0.01pg/g和不可检测。
6.权利要求3所述的烟草制品，其中所述烟草制品的N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量小于约10pg/g。
7.权利要求6所述的烟草制品，其中所述NNN含量选自10pg/g、7.0pg/g、5.0pg/g、4.0pg/g、2.0pg/g、1.0pg/g、0.5pg/g、0.4pg/g、0.2pg/g、0.1pg/g、0.05pg/g、0.01pg/g和不可检测。
8.权利要求1所述的烟草制品，其中所述熟化烟草材料是所述烟草制品中总烟草材料干重的至少约5％。
9.权利要求8所述的烟草制品，其中所述熟化烟草材料占所述总烟草材料干重的百分比选自至少约10％、至少约20％、至少约30％、至少约40％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％、至少约90％和至少约95％。
10.产生烟草制品的方法，包括：
提供来自杂交种、栽培品种或由所述栽培品种产生的杂交种的烟草植物或其部分的熟化烟草材料，其中所述杂交种是NC196SRC，所述栽培品种选自K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC和CMSNCTG-61SRC；
从所述熟化烟草材料制备烟草制品，
所述K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC和CMSNCTG-61SRC的代表性样本种子分别以ATCC保藏号PTA-13455、PTA-13454、PTA-13453、PTA-13452、PTA-13457、PTA-13458、PTA-120314和PTA-13456保藏于ATCC。
11.选自K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC和CMSNCTG-61SRC的烟草栽培品种的种子；所述K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC和CMSNCTG-61SRC的代表性样本种子分别以ATCC保藏号PTA-13455、PTA-13454、PTA-13453、PTA-13452、PTA-13457、PTA-13458、PTA-120314和PTA-13456保藏于ATCC。
12.从权利要求11所述的种子产生的烟草植物或其部分。
13.权利要求12所述的植物部分，其中所述部分选自收获叶、花粉、胚珠、胚、子叶、下胚轴、分生细胞、原生质体、根、根尖、雌蕊、花药、花、芽、茎、荚果、叶柄和它们的组合。
14.权利要求12所述的烟草植物的收获叶。
15.权利要求14所述的收获叶，其中所述叶具有降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量。
16.权利要求15所述的收获叶，其中所述降低的降烟碱和/或N’-亚硝基降烟碱(NNN)含量是在由所述叶产生的烟气流中降低。
17.选自K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC和CMSNCTG-61SRC的烟草栽培品种的F1后代植物；所述K326SRC、CMSK326SRC、K346SRC、CMSK346SRC、NC1562-1SRC、NCTG-61SRC和CMSNCTG-61SRC的代表性样本种子分别以ATCC保藏号PTA-13455、PTA-13454、PTA-13453、PTA-13452、PTA-13457、PTA-13458、PTA-120314和PTA-13456保藏于ATCC。
18.权利要求17所述的F1后代植物，其中所述F1植物雄性不育。
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