KR20140019992A - Organic fertilizer containing antifungal valuable microbes as effective ingredient and its preparation method - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 유기질비료에 관한 것으로, 특히 유기물 분해능과 항진균성을 지닌 미생물 배양체를 포함하는 유기질비료 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.The present invention relates to an organic fertilizer, and more particularly, to an organic fertilizer composition including a microbial culture having an organic matter-decomposing ability and an antifungal property, and a method for producing the same.
유기질비료는 비료공정규격상 동식물을 원료로 하는 비료를 일컫는 것이나, 통상적으로 무기질 비료의 상대 개념으로써 사용되고 있다. 이들 유기질비료는 질소(N), 인(P), 칼륨(K) 등의 무기양분이 풍부하여 미생물에 의해 각종 아미노산, 유기산, 핵산 등으로 분해되어 식물체에 다양한 영양분을 공급할 수 있는 것으로, 식물성유박, 퇴구비, 녹비 등을 포함하는 식물성 유기질비료와 어박, 골분, 중피혁제 등을 포함하는 동물성 유기질비료로 크게 분류된다.Organic fertilizers are used for fertilizer processing, which refers to fertilizers made from plants and animals as raw materials, but is usually used as a relative concept of inorganic fertilizers. These organic fertilizers are rich in inorganic nutrients such as nitrogen (N), phosphorus (P) and potassium (K), and can be decomposed into various amino acids, organic acids and nucleic acids by microorganisms to supply various nutrients to plants. Vegetable organic fertilizer including fertilizer, sediment, and green foliage, and animal organic fertilizer including fish eggs, bone meal, heavy leather, and the like.
상기 식물성 유박은 식물의 종자에서 기름을 짜고 난 찌꺼기를 총칭하는 것으로 녹말 및 단백질 함량이 높아 각종 가축사료 및 유기질비료로 사용되고 있으며, 피마자박, 팜박, 채종박, 미강박, 대두박, 야자박 등이 주류를 이루고 있다. 최근 친환경에 대한 관심이 대두되면서, 토양 산성화를 막고, 안전한 먹거리를 생산할 수 있는 유기농을 선호하게 되었고, 이에 따라 식물성유박을 원료로 한 유기질비료의 사용이 급증하고 있다. 그러나, 단순히 식물성 유박으로만 제조된 유기질비료는 셀룰로오스, 리그닌 등의 분해가 어려워 식물체가 쉽게 흡수할 수 없으며, 토양중 이들을 분해 및 발효시킬 수 있는 미생물이 부족할 경우 혐기성 발효에 의한 부패가 일어나 유해가스가 발생할 수 있다. The above-mentioned vegetable oilseed is used as various livestock feed and organic fertilizer because it has high starch and protein content because it is a generic term for oil-squeezed waste from the seed of a plant. The vegetable oilseed oil is used as various livestock feeds and organic fertilizers, and includes castor oil, palm oil, It is mainstream. Recently, with the interest in environment friendly, the preference for organic farming that can prevent soil acidification and produce safe food, and the use of organic fertilizer made of vegetable oil as a raw material is increasing rapidly. However, the organic fertilizer, which is produced only with vegetable oil cake, can not easily absorb cellulose and lignin because the plant can not easily absorb it. When the microorganism that can decompose and ferment these substances in the soil is insufficient, anaerobic fermentation causes decay, May occur.
상기와 같은 문제를 해결하기 위하여 식물성 유박을 포함한 유기질비료에 이를 발효시킬 수 있는 미생물로서 효모균, 방선균, 유산균(Lactobacillus sp.), 고초균(Bacillus sp.) 등을 함께 혼합하여 제조하고 있다. 대한민국 등록특허 제298785호에서는 쌀겨, 어박에 대두박, 유채박, 면실박 등의 유박 및 발효미생물 액을 혼합하여 유기배합비료를 제조하는 기술이 개시되어 있으며, 공개특허공보 제10-2003-0043874호에는 피마자유박, 대두유박 등의 식물성 유박에 광합성세균, 효모, 방선균, 질소고정균, 유산균 등을 혼합하여 유기복합비료를 제조하는 방법이 기술되어 있다. 또한, 공개특허공보 제10-2006-0009689호에서는 새로운 식물성유박으로 커피박을, 등록특허 제709925호에서는 까나리박을 사용하고, 여기에 고초균, 유산균, 효모균 등의 발효균체를 혼합하여 발효시키는 유기질비료의 제조방법을 개시하고 있다. 그러나 종래에 유기질비료에 혼합되던 미생물들은 대부분 유기질 비료를 발효시켜 유기물을 분해시키는 정도의 역할을 할 뿐, 작물 재배에 요구되는 다른 기능성을 보유하지는 못하고 있었다.
To solve the above problems, yeast, Actinomycetes, Lactobacillus sp., Bacillus sp. And the like are mixed with organic fertilizers containing vegetable oilseed to produce fermentable microorganisms. Korean Patent No. 298785 discloses a technique for producing an organic compound fertilizer by mixing rice bran, oilseed rape such as soybean meal, rapeseed meal, cottonseed meal, and fermented microbial solution in a fish meal, and disclosed in Patent Document 10-2003-0043874 Discloses a method for producing an organic compound fertilizer by mixing photosynthetic bacteria, yeast, actinomycetes, nitrogen-fixed bacteria, lactic acid bacteria, and the like in vegetable oilseed crops such as castor oil leaves and soybean oil leaves. In addition, Japanese Patent Application Laid-Open No. 10-2006-0009689 discloses a new vegetable oil cake using a coffee bean, and Japanese Patent No. 709925, a canary bark, and fermenting microorganisms such as Bacillus, lactic acid bacteria, Discloses a method for producing a fertilizer. However, the microorganisms conventionally mixed with the organic fertilizer are mainly responsible for decomposing organic matter by fermenting the organic fertilizer, and have not possessed other functionalities required for crop cultivation.
한편, 식물병원성 곰팡이는 각종 채소, 과일, 화훼 등의 작물에 병해를 가져와 생산성 저하를 일으키는데, 주요 병원균으로는 시들음병균, 잿빛곰팡이병균, 역병균, 탄저병균, 균핵병균, 근부병균 및 모잘록병균 등이 있다. 이러한 식물병원성 진균에 의한 식물병을 방제하기 위한 방법으로는 화학적 방제방법과 미생물제를 이용한 생물학적 방제방법, 그리고 재배환경을 개선해주는 물리적 방제방법이 적용되고 있다. 이중 물리적 방제방법은 단독으로는 큰 효과를 기대할 수 없으므로, 현재 가장 많이 사용되고 있는 방법은 화학적 방제방법이다. 그러나 화학적 방제방법은, 최근 내성균주의 출현으로 포장에서의 방제효과가 크게 저하되었을 뿐 아니라, 인축에 대한 독성 및 환경오염으로 점차 사용이 제한되고 있다. 특히 친환경 농법으로 작물을 재배하는 경우에는 화학적 방제방법을 사용할 수 없어, 식물병원성 곰팡이에 대한 방제가 용이하지 않다. 이러한 경우 미생물제를 이용한 생물학적 방제방법이 권장되고 있으나, 화학적 방제방법에 비해 아직 효과가 미약한 반면 비용이 많이 소요되는 문제점이 있다. On the other hand, phytopathogenic fungi cause diseases in crops such as various vegetables, fruits, flowers, etc., resulting in deterioration of productivity. The main pathogens are vesicular fungi, gray mold fungi, rot fungi, anthracnose fungi, scleroderma fungi, . Methods for controlling plant diseases caused by phytopathogenic fungi include chemical control methods, biological control methods using microorganisms, and physical control methods for improving the cultivation environment. Since the physical control method can not be expected to have a great effect on its own, the most widely used method is a chemical control method. However, the chemical control method has recently been severely limited due to the toxicity and environmental pollution of the human body, as well as the remarkable deterioration effect in the packaging due to the emergence of resistant bacteria. Especially, when cultivating crops using environmentally friendly farming methods, chemical control methods can not be used and it is not easy to control against phytopathogenic fungi. In this case, a biological control method using a microbial agent is recommended, but the effect is still weak compared with the chemical control method, but it is costly.
본 발명은 식물성 유박을 주성분으로 하는 유기질비료에 발효 및 분해를 위해 포함되는 미생물로서, 유기물 분해능과 항진균성, 특히 고추 역병균, 시들음병균 등과 같이 방제가 어려운 식물병원성균에 대해 방제효과를 지닌 미생물을 발굴하여, 이용하고자 하는 것이다. 본 발명에서는 유기물 분해능과 항진균성을 지닌 미생물을 유기질 비료에 포함시켜, 유기물 분해능과 함께 항진균성을 발휘하도록 함으로써 별도의 방제비용을 따로 들이지 않고도 고추 역병균, 시들음병균 등의 식물병원성 곰팡이균을 예방 및 방제할 수 있는 항진균성 유기질 비료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다. The present invention relates to a method for fermenting and decomposing an organic fertilizer comprising vegetable oil cake as a main component Microorganisms having a controlling effect against phytopathogenic fungi which are difficult to control such as organic matter decomposition ability and antifungal activity, especially Pseudomonas aeruginosa and wilt disease are to be found and used. In the present invention, microorganisms having organic decomposing ability and antifungal property are included in organic fertilizer, thereby exhibiting antifungal activity in addition to decomposition of organic matter, thereby preventing phytopathogenic fungi such as pepper spp., Wilt disease and the like without separately controlling costs And an antifungal organic fertilizer composition which can be controlled.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에서는, 토양으로부터 유기물 분해능과 식물병원성 곰팡이균에 대한 길항력을 지닌 균주를 분리 및 동정하여, 유기질 비료에 이용하였다. In order to achieve the above object, the present invention separates and identifies organic matter-decomposing ability from the soil and a pathogen-resistant strain against the pathogenic fungus, and is used for the organic fertilizer.
본 발명에서는, In the present invention,
식물성유박 100 중량부, 어박 5~50 중량부 및 바실러스 서브틸리스 HSB1202(Bacillus subtilis HSB1202) KCTC 12239BP를 함유하는 미생물 배양체 0.1~20 중량부를 포함하는 항진균성 유기질 비료 조성물이 제공된다. 바람직하게는, 상기 미생물 배양체는,0.1 to 20 parts by weight of a microbial culture comprising 100 parts by weight of vegetable oilseed, 5 to 50 parts by weight of fish, and Bacillus subtilis HSB1202 KCTC 12239BP are provided. Preferably, the microorganism cultures are cultured in a medium,
(a) 호기조건하에 배양하여 얻은 1×107~1×1011 cfu/ml 농도의 바실러스 서브틸리스 HSB1202 KCTC 12239BP 균주 배양액 1 중량부,1 part by weight of a culture medium of Bacillus subtilis HSB1202 KCTC 12239BP at a concentration of 1 × 10 7 to 1 × 10 11 cfu / ml obtained by culturing under the aeration conditions (a)
(b) 제올라이트, 벤토나이트, 탈크, 디아토마이트, 카올린, 화이트카본 및 다공성실리카로 구성된 군으로부터 1종 이상 선택되는 증량제 1~70 중량부,(b) 1 to 70 parts by weight of an extender selected from the group consisting of zeolite, bentonite, talc, diatomite, kaolin, white carbon and porous silica,
(c) 염화암모늄, 황산암모늄, 질산암모늄, 효모추출액, 수크로즈, 당밀, 글루코오스, 현미유, 미강, 전분, 덱스트린 및 갈락토스로 구성된 군으로부터 1종 이상 선택되는 미생물 영양원 0.5~40 중량부, 및(c) 0.5 to 40 parts by weight of a microbial nutrient selected from the group consisting of ammonium chloride, ammonium sulfate, ammonium nitrate, yeast extract, sucrose, molasses, glucose, rice hull, rice bran, starch, dextrin and galactose,
(d) 폴리카복실레이트, 소듐 리그노설포네이트, 칼슘 리그노설포네이트, 소듐 다이알킬설포석시네이트, 소듐 알킬아릴설포네이트, 폴리옥시에틸렌 알킬페닐 에테르, 소듐 트리폴리포스페이트, 폴리옥시에틸렌 알킬아릴 포스포릭 에스테르, 폴리옥시에티렌 알킬아릴 에테르, 폴리옥시에틸렌 알킬아릴 폴리머, 폴리옥시알킬온알킬페닐 에테르, 폴리옥시에틸렌 노닐페닐 에테르, 소듐 설포네이트 나프탈렌 포름알데히드, 트리톤 100 및 트윈 80으로 구성된 군으로부터 1종 이상 선택되는 계면활성제 0.2~20 중량부를 포함하는 수화제 형태이다. (d) at least one compound selected from the group consisting of polycarboxylate, sodium lignosulfonate, calcium lignosulfonate, sodium dialkylsulfosuccinate, sodium alkylarylsulfonate, polyoxyethylene alkylphenyl ether, sodium tripolyphosphate, polyoxyethylene alkylarylphosphate Polyoxyethylene alkylarylpolyether, polyoxyethylene nonylphenyl ether, sodium sulfonate naphthalene formaldehyde, Triton 100, and Tween 80 to form 1, 2, 3, 4, And 0.2 to 20 parts by weight of a surfactant selected from the group consisting of a plurality of surfactants.
또한, 본 발명에서는, Further, in the present invention,
하기 (a) 내지 (d)를 포함하는 수화제 형태로 바실러스 서브틸리스 HSB1202(Bacillus subtilis HSB1202) (KCTC 12239BP)의 미생물 배양체를 얻는 단계와, Obtaining a microbial culture of Bacillus subtilis HSB1202 (KCTC 12239BP) in the form of a wetting agent comprising (a) - (d)
식물성 유박 100 중량부와 어박 5∼50 중량부를 포함하는 비료성분에 상기 단계에서 얻은 미생물 배양체 0.1∼20 중량부를 혼합하는 단계를 포함하는 항진균성 유기질비료의 제조방법이 제공된다.Mixing 0.1 to 20 parts by weight of the microorganism culture obtained in the above step with a fertilizer component comprising 100 parts by weight of vegetable oilseed and 5 to 50 parts by weight of a fish egg.
(a) 호기조건하에 배양하여 얻은 1×107~1×1011 cfu/ml 농도의 바실러스 서브틸리스 HSB1202 (KCTC 12239BP) 균주 배양액 1 중량부;1 part by weight of a culture medium of Bacillus subtilis HSB1202 (KCTC 12239BP) at a concentration of 1 × 10 7 to 1 × 10 11 cfu / ml obtained by culturing under aerobic conditions (a);
(b) 제올라이트, 벤토나이트, 탈크, 디아토마이트, 카올린, 화이트카본 및 다공성실리카로 구성된 군으로부터 1종 이상 선택되는 증량제 1~70 중량부;(b) 1 to 70 parts by weight of an extender selected from the group consisting of zeolite, bentonite, talc, diatomite, kaolin, white carbon and porous silica;
(c) 염화암모늄, 황산암모늄, 질산암모늄, 효모추출액, 수크로즈, 당밀, 글루코오스, 현미유, 미강, 전분, 덱스트린 및 갈락토스로 구성된 군으로부터 1종 이상 선택되는 미생물 영양원 0.5~40 중량부; 및(c) 0.5 to 40 parts by weight of a microbial nutrient selected from the group consisting of ammonium chloride, ammonium sulfate, ammonium nitrate, yeast extract, sucrose, molasses, glucose, rice hull, rice bran, starch, dextrin and galactose; And
(d) 폴리카복실레이트, 소듐 리그노설포네이트, 칼슘 리그노설포네이트, 소듐 다이알킬설포석시네이트, 소듐 알킬아릴설포네이트, 폴리옥시에틸렌 알킬페닐 에테르, 소듐 트리폴리포스페이트, 폴리옥시에틸렌 알킬아릴 포스포릭 에스테르, 폴리옥시에티렌 알킬아릴 에테르, 폴리옥시에틸렌 알킬아릴 폴리머, 폴리옥시알킬온알킬페닐 에테르, 폴리옥시에틸렌 노닐페닐 에테르, 소듐 설포네이트 나프탈렌 포름알데히드, 트리톤 100 및 트윈 80으로 구성된 군으로부터 1종 이상 선택되는 계면활성제 0.2~20 중량부.(d) at least one compound selected from the group consisting of polycarboxylate, sodium lignosulfonate, calcium lignosulfonate, sodium dialkylsulfosuccinate, sodium alkylarylsulfonate, polyoxyethylene alkylphenyl ether, sodium tripolyphosphate, polyoxyethylene alkylarylphosphate Polyoxyethylene alkylarylpolyether, polyoxyethylene nonylphenyl ether, sodium sulfonate naphthalene formaldehyde, Triton 100, and Tween 80 to form 1, 2, 3, 4, 0.2 to 20 parts by weight of a surfactant selected from the species or more.
본 발명에 따르면, 유기질 비료에 포함된 유기물에 대한 분해능과 식물병원성균에 대한 항진균성을 함께 지닌 기능성 미생물 균주와 이 균주를 유효성분으로 포함하는 항진균성 유기질 비료를 얻을 수 있다. 본 발명에서 제공되는 항진균성 유기질 비료는 유기물 분해능과 항진균성이 우수한 미생물의 작용으로, 생육에 필요한 영양분을 작물에 공급하는 동시에 식물병원성균을 방제할 수 있다. 본 발명에 따르면 방제비용을 추가로 들이지 않고도 유기질 비료의 시비로 식물 병원성 곰팡이균에 대한 방제효과를 같이 거둘 수 있어, 친환경 농법에 소요되는 비용을 절감할 수 있고, 토양 및 환경이 개선되는 효과를 기대할 수 있다.
According to the present invention, it is possible to obtain a functional microorganism strain having the resolving power against the organic matter contained in the organic fertilizer and the antifungal activity against the plant pathogenic bacteria, and the antifungal organic fertilizer containing the strain as an active ingredient. The antifungal organic fertilizer provided in the present invention can act as a microorganism having excellent organic decomposing ability and antifungal property, so that the nutrients necessary for growth can be supplied to the crops and the plant pathogenic bacteria can be controlled. According to the present invention, the addition of the organic fertilizer to the plant pathogenic fungus can be used to prevent the fungi, and the cost for the environment friendly farming method can be reduced, and the soil and environment can be improved You can expect.
도 1은 HSB1202 균주의 고추역병방제 효과를 실험한 결과이다.
도 2는 바실러스 서브틸리스 HSB1202 균주의 16S rRNA의 염기서열 분석결과이다.
도 3은 pH에 따른 바실러스 서브틸리스 HSB1202 균주의 생육곡선 결과이다.
도 4는 온도에 따른 미생물 균주의 온도별 생육곡선 결과이다.Fig. 1 shows the results of an experiment for the control of the HSB1202 strain against pepper blight.
2 shows the result of base sequence analysis of 16S rRNA of Bacillus subtilis HSB1202 strain.
FIG. 3 shows the growth curve of Bacillus subtilis strain HSB1202 according to pH.
FIG. 4 shows the growth curve of the microbial strain according to temperature according to temperature.
본 발명의 유기질비료 조성물은 식물성 유박 100 중량부, 어박 5~50 중량부 및 본 발명에서 분리 동정한 균주의 미생물 배양체 0.1~20 중량부를 포함한다. 본 발명에서 분리 동정한 균주는 유기물 분해능과 함께 식물병원성 곰팡이균에 대한 항진균력을 지닌 바실러스 서브틸리스 균주로 확인되었으며, 본 발명에서는 이 균주를 바실러스 서브틸리스 HSB1202(Bacillus subtilis HSB1202)로 명명하였으며, 한국생명공학연구원에 2012년 7월 9일자로, 수탁번호 KCTC 12239BP로 기탁하였다. The organic fertilizer composition of the present invention comprises 100 parts by weight of vegetable oilseed oil, 5 to 50 parts by weight of fish, and 0.1 to 20 parts by weight of microorganism cultures of the strain isolated and identified in the present invention. Strains identified by the present invention was identified as Bacillus subtilis strain with the organic matter with a resolution power of the anti-fungal phytopathogenic fungi, in the present invention, the strain Bacillus subtilis HSB1202 (Bacillus subtilis HSB1202) and deposited with KCTC 12239BP on July 9, 2012 at the Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology.
본 발명의 항진균성 유기질 비료 조성물에 포함되는 미생물 배양체는, 바람직하게는 아래 (a) 내지 (d)를 포함하는 수화제 형태이다. The microorganism cultures contained in the antifungal organic fertilizer composition of the present invention are preferably in the form of a wettable powder containing the following (a) to (d).
(a) 호기조건하에 배양하여 얻은 1×107~1×1011 cfu/ml 농도의 바실러스 서브틸리스 HSB1202 (KCTC 12239BP) 균주 배양액 1 중량부,1 part by weight of a culture medium of Bacillus subtilis HSB1202 (KCTC 12239BP) at a concentration of 1 × 10 7 to 1 × 10 11 cfu / ml obtained by culturing under aerobic conditions (a)
(b) 제올라이트, 벤토나이트, 탈크, 디아토마이트, 카올린, 화이트카본 및 다공성실리카로 구성된 군으로부터 1종 이상 선택되는 증량제 1~70 중량부,(b) 1 to 70 parts by weight of an extender selected from the group consisting of zeolite, bentonite, talc, diatomite, kaolin, white carbon and porous silica,
(c) 염화암모늄, 황산암모늄, 질산암모늄, 효모추출액, 수크로즈, 당밀, 글루코오스, 현미유, 미강, 전분, 덱스트린 및 갈락토스로 구성된 군으로부터 1종 이상 선택되는 미생물 영양원 0.5~40 중량부, 및(c) 0.5 to 40 parts by weight of a microbial nutrient selected from the group consisting of ammonium chloride, ammonium sulfate, ammonium nitrate, yeast extract, sucrose, molasses, glucose, rice hull, rice bran, starch, dextrin and galactose,
(d) 폴리카복실레이트, 소듐 리그노설포네이트, 칼슘 리그노설포네이트, 소듐 다이알킬설포석시네이트, 소듐 알킬아릴설포네이트, 폴리옥시에틸렌 알킬페닐 에테르, 소듐 트리폴리포스페이트, 폴리옥시에틸렌 알킬아릴 포스포릭 에스테르, 폴리옥시에티렌 알킬아릴 에테르, 폴리옥시에틸렌 알킬아릴 폴리머, 폴리옥시알킬온알킬페닐 에테르, 폴리옥시에틸렌 노닐페닐 에테르, 소듐 설포네이트 나프탈렌 포름알데히드, 트리톤 100 및 트윈 80으로 구성된 군으로부터 1종 이상 선택되는 계면활성제 0.2~20 중량부. (d) at least one compound selected from the group consisting of polycarboxylate, sodium lignosulfonate, calcium lignosulfonate, sodium dialkylsulfosuccinate, sodium alkylarylsulfonate, polyoxyethylene alkylphenyl ether, sodium tripolyphosphate, polyoxyethylene alkylarylphosphate Polyoxyethylene alkylarylpolyether, polyoxyethylene nonylphenyl ether, sodium sulfonate naphthalene formaldehyde, Triton 100, and Tween 80 to form 1, 2, 3, 4, 0.2 to 20 parts by weight of a surfactant selected from the species or more.
상기 미생물 배양체는, 미생물 배양체 100 중량부에 대해 카르복시메틸 셀룰로오스, 알지네이트, 잔탄 및 아라비아검으로 구성된 군으로부터 1종 이상 선택되는 기타보조제를 0.2~20 중량부 더 포함할 수 있다. The microorganism culturing body may further comprise 0.2 to 20 parts by weight of other adjuvants selected from the group consisting of carboxymethyl cellulose, alginate, xanthan gum and gum arabic against 100 parts by weight of the microorganism culture.
또한, 상기 미생물 배양체는, 본 발명에서 분리 동정한 바실러스 서브틸리스 HSB1202 외에도, 공지의 효모균, 방선균, 유산균(Lactobacillus sp.), 고초균(Bacillus sp.), 비저균(Burkholderia sp.) 등의 미생물을 더 포함하는 것도 가능하다. 상기 효모로는 유기물 발효능이 있는 것으로서, 예를 들어, 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae), 사카로마이세스 이탈리커스(Saccharomyces italicus), 사카로마이세스 로욱시(Saccharomyces rouxii), 쉬조사카로마이세스 폼베(Shizosaccharomyces pombe), 크루이베로마이세스 프라길리스(Kluyveromyces fragilis), 크루이베로마이세스 락티스(Kluyveromyces lactis), 피치아 안구스타(Pichia angusta), 피치아 아노마라(Pichia anomala), 피치아 파스토리스(Pichia pastoris), 피치아 캡슐라타(Pichia capsulata), 야로위아 리폴리티카(Yarrowia lipolytica) 등이 사용될 수 있다. The microorganism cultured product may be a microorganism such as known yeast, actinomycetes, Lactobacillus sp., Bacillus sp., Burkholderia sp., Etc., in addition to Bacillus subtilis HSB1202 isolated and identified in the present invention As shown in FIG. The yeast may be an organic substance-producing yeast, for example, Saccharomyces cerevisiae cerevisiae), a saccharide My process Italian carcass (Saccharomyces italicus , Saccharomyces rouxii , Shizosaccharomyces < RTI ID = 0.0 > pombe , Kluyveromyces < RTI ID = 0.0 > fragilis , Kluyveromyces < RTI ID = 0.0 > lactis , Pichia angusta , Pichia anomala , Pichia pastoris , Pichia < RTI ID = 0.0 > capsulata , Yarrowia lipolytica ) and the like can be used.
본 발명의 항진균성 유기질 비료 조성물에 포함되는 식물성 유박에는, 특히 피마자박, 채종박, 미강박, 대두박, 면실박, 카폭박, 코코아박, 야자박, 자트로파박 등이 1종 이상 포함될 수 있다. 사용 가능한 식물성 유박은 이에 한정되지 않고, 질소, 인, 칼륨을 함유하면서 수급이 가능한 식물성 유박이면 모두 사용 가능하다. The vegetable oil cake contained in the antifungal organic fertilizer composition of the present invention may include at least one kind selected from the group consisting of a castor oil, a seed oil, a rice oil, a soybean oil, a cottonseed oil, a carnauba, a cocoa butter, a palm oil, Usable vegetable oilseeds are not limited thereto, and any vegetable oilseeds containing nitrogen, phosphorus, and potassium and capable of supplying and receiving oil may be used.
어박은 일반적으로 정어리나 잡어 등의 어류를 물에 넣고 20~30분 삶아서 압착기로 압착한 후 수분과 지방을 짜낸 잔류물을 건조 및 분쇄하여 만든다. 어박의 비효는 화학비료보다 완효성이며, 조류 또는 박쥐의 배설물이 장기간에 걸쳐 집적되어 형성된 천연 유기물질인 광물로 채석한 인산질 비료인 구아노(guano)보다는 속효성이다. 어박은 약 질소 10%, 인 1.5%, 칼륨 0.6% 수준으로, 질소 성분을 가장 많이 함유하고 있다. 본 발명의 유기질 비료 조성물에서 어박은 식물성 유박에 부족한 영양성분을 보충하기 위해 포함되며, 식물성 유박 100 중량부에 대해 5~50 중량부 정도로 포함되는 것이 바람직하다.
Fish eggs are usually made by squeezing the sardines and fishes into water, boiling them for 20 to 30 minutes, squeezing them with a squeezer, and then drying and crushing the moisture and fat residue. The ineffectiveness of fish is slower than chemical fertilizer and is more effective than guano, a phosphoric acid fertilizer that is minerally-quarried natural organic material formed by long-term accumulation of algae or bat excrement. Fish eggs contain about 10% nitrogen, 1.5% phosphorus and 0.6% potassium, and contain the most nitrogen. In the organic fertilizer composition of the present invention, the fish is included in order to supplement nutritional ingredients lacking in the vegetable oilseed and is preferably contained in an amount of about 5 to 50 parts by weight based on 100 parts by weight of the vegetable oilseed oil.
본 발명의 일 실시예에서, 상기 식물성유박 및 어박을 포함하는 비료성분과 상기 미생물 배양체는 혼합되지 않은 상태로 있다가 작물에 시비할 때 혼합 처리되는 것도 가능하다. 이때 "혼합 처리"는 비료성분과 미생물 배양체를 혼합하여 작물에 시비하는 것과, 혼합하지 않고 동시에 또는 순차적으로 작물에 처리하는 것을 포함한다. 상기 "순차적으로는" 작물에 처리된 비료성분과 미생물 배양체가 작물에 대해 함께 작용을 나타낼 수 있는 정도의 시간 간격으로 처리되는 것을 포함한다. In one embodiment of the present invention, the fertilizer component including the vegetable oil cake and the fish hatchery and the microorganism cultured product may be mixed while being mixed with the crop and fertilized. The term "mixed treatment" includes mixing fertilizer components and microbial cultures to the crops, and treating the crops simultaneously or sequentially without mixing. This "sequential" includes treating the crop-treated fertilizer component and the microbial cultures at such time intervals that they can work together on the crop.
상기 비료성분은, 필요에 따라 펠릿으로 성형될 수 있다. 본 발명의 일 실시예에 따르면, 비료성분 총 중량 중 0.5∼20 중량%로 담체를 첨가하여 펠릿 성형시켜 입상제형으로 만들 수 있다. 담체로는 바람직하게는 제올라이트, 펄라이트, 분말 질석 등이 단독으로 또는 2종 이상 함께 사용될 수 있으며, 펠릿 성형에는 공지의 펠릿성형기 등을 이용할 수 있다.
The fertilizer component can be molded into pellets as needed. According to one embodiment of the present invention, a carrier may be added in an amount of 0.5 to 20% by weight based on the total weight of the fertilizer component and pelletized to form a granular formulation. As the carrier, zeolite, pearlite, powdered vermiculite and the like can be used singly or in combination of two or more kinds, and a known pellet molding machine can be used for the pellet molding.
본 발명에 따른 항진균성 유기질비료의 제조방법은,A method for producing an antifungal organic fertilizer according to the present invention comprises:
하기 (a) 내지 (d)를 포함하는 수화제 형태로 바실러스 서브틸리스 HSB1202(Bacillus subtilis HSB1202) (KCTC 12239BP)의 미생물 배양체를 얻는 단계와, 식물성 유박 100 중량부와 어박 5∼50 중량부를 포함하는 비료성분에 상기 단계에서 얻은 미생물 배양체 0.1∼20 중량부를 혼합하는 단계를 포함한다. Comprising the steps of: obtaining a microorganism culture of Bacillus subtilis HSB1202 (KCTC 12239BP) in the form of a wettable powder comprising (a) - (d) 0.1 to 20 parts by weight of the microorganism culture obtained in the above step is mixed with the fertilizer component.
(a) 호기조건하에 배양하여 얻은 1×107~1×1011 cfu/ml 농도의 바실러스 서브틸리스 HSB1202 (KCTC 12239BP) 균주 배양액 1 중량부;1 part by weight of a culture medium of Bacillus subtilis HSB1202 (KCTC 12239BP) at a concentration of 1 × 10 7 to 1 × 10 11 cfu / ml obtained by culturing under aerobic conditions (a);
(b) 제올라이트, 벤토나이트, 탈크, 디아토마이트, 카올린, 화이트카본 및 다공성실리카로 구성된 군으로부터 1종 이상 선택되는 증량제 1~70 중량부;(b) 1 to 70 parts by weight of an extender selected from the group consisting of zeolite, bentonite, talc, diatomite, kaolin, white carbon and porous silica;
(c) 염화암모늄, 황산암모늄, 질산암모늄, 효모추출액, 수크로즈, 당밀, 글루코오스, 현미유, 미강, 전분, 덱스트린 및 갈락토스로 구성된 군으로부터 1종 이상 선택되는 미생물 영양원 0.5~40 중량부; 및(c) 0.5 to 40 parts by weight of a microbial nutrient selected from the group consisting of ammonium chloride, ammonium sulfate, ammonium nitrate, yeast extract, sucrose, molasses, glucose, rice hull, rice bran, starch, dextrin and galactose; And
(d) 폴리카복실레이트, 소듐 리그노설포네이트, 칼슘 리그노설포네이트, 소듐 다이알킬설포석시네이트, 소듐 알킬아릴설포네이트, 폴리옥시에틸렌 알킬페닐 에테르, 소듐 트리폴리포스페이트, 폴리옥시에틸렌 알킬아릴 포스포릭 에스테르, 폴리옥시에티렌 알킬아릴 에테르, 폴리옥시에틸렌 알킬아릴 폴리머, 폴리옥시알킬온알킬페닐 에테르, 폴리옥시에틸렌 노닐페닐 에테르, 소듐 설포네이트 나프탈렌 포름알데히드, 트리톤 100 및 트윈 80으로 구성된 군으로부터 1종 이상 선택되는 계면활성제 0.2~20 중량부.(d) at least one compound selected from the group consisting of polycarboxylate, sodium lignosulfonate, calcium lignosulfonate, sodium dialkylsulfosuccinate, sodium alkylarylsulfonate, polyoxyethylene alkylphenyl ether, sodium tripolyphosphate, polyoxyethylene alkylarylphosphate Polyoxyethylene alkylarylpolyether, polyoxyethylene nonylphenyl ether, sodium sulfonate naphthalene formaldehyde, Triton 100, and Tween 80 to form 1, 2, 3, 4, 0.2 to 20 parts by weight of a surfactant selected from the species or more.
본 발명의 일 실시예에서는, 상기 비료성분에, 제올라이트, 펄라이트 및 분말 질석으로 구성된 군으로부터 하나 이상 선택된 담체를 상기 비료성분 전체 중량 중 0.5~20 중량%로 첨가하여 비료성분을 펠릿 성형시키는 단계를 더 포함한다.
In one embodiment of the present invention, the step of pelletizing the fertilizer component by adding at least one carrier selected from the group consisting of zeolite, pearlite and powdered vermiculite to the fertilizer component at 0.5 to 20 wt% of the total weight of the fertilizer component .
본 발명에 따라 얻어진 유기질 비료(조성물)는 다양한 작물에 시비될 수 있으며, 특히 유기농법과 같은 친환경 농법으로 재배되는 작물에 시비될 수 있다. 상기 작물에는 특히 상추, 배추, 고추가 포함된다.
The organic fertilizer (composition) obtained according to the present invention can be fertilized into various crops, and can be applied to crops cultivated in an environmentally friendly farming method such as organic farming. The crops include, in particular, lettuce, cabbage, and pepper.
[[ 실시예Example ]]
이하 구체적인 실시예를 통해 본 발명을 보다 상세히 설명한다. 그러나 다음의 실시예에 의해 본 발명의 범위가 한정되는 것은 아니며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 본 발명의 기술사상과 아래에 기재될 특허청구범위의 균등범위 내에서 다양한 수정 및 변형이 가능한 것은 물론이다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to specific examples. However, it should be understood that the scope of the present invention is not limited by the following embodiments, and that those skilled in the art will readily understand that the technical idea of the present invention and the equivalents of the claims It goes without saying that various modifications and variations are possible.
실험예Experimental Example 1. One. 길항력이Road drag 우수한 미생물의 선발 및 분리 동정 Selection and isolation of excellent microorganisms
길항력이Road drag 우수한 미생물의 선발 Selection of excellent microorganisms
식물병원성 곰팡이에 길항력을 나타내고 유기물분해능을 갖는 균을 수득하고자, 국내 비경작지 산림토양, 인산과다 집적토양 및 염류장해 발생토양의 시료에서 분리하였다. 상기 채집한 시료를 60 ℃에서 2시간 동안 건조시킨 후 멸균수로 희석한 다음 방선균 분리용 배지(DifcoTM Actinomycete Isolatio Agar) 및 세균 분리용 배지 (Nutrient Agar)에 도말하여 28 ℃의 배양기에서 배양하였다.In order to obtain pathogenic fungi and pathogenic bacteria with organic degradation ability, they were isolated from non - arable forest soil, phosphate - rich soil, and salt - induced soil samples. The collected samples were dried at 60 ° C. for 2 hours, diluted with sterilized water, and then streaked on a Difco ™ Actinomycete Isolatio Agar and a Nutrient Agar for culture in a 28 ° C. incubator.
상기 배양된 시험 균주를 감자한천배지(Potato dextrose agar)에 도말하고 식물병원성 곰팡이인 시들음병균(Fusarium oxysporum)을 대상으로 대치배양에 의한 항균활성을 조사하였다(도 1 참조). 상기 항균활성은 접종원(paper disc)과 식물병원성 곰팡이 생장 저해부위 균사와의 거리를 저해정도(Index of inhibition, + : 5mm 미만; ++ : 5~10mm 미만; +++ : 10~15mm 미만; ++++ : 16mm 이상)로 표시하였으며 그 결과는 하기 표 1과 같다. The cultured test strain was plated on a Potato dextrose agar and seeded with Fusarium , a phytopathogenic fungus, oxysporum ) was investigated for the antimicrobial activity by the confluent culture (see Fig. 1). The antimicrobial activity was evaluated by measuring the distance between the paper disc and the mycelial growth of the plant pathogenic fungus growth at an index of inhibition (+: less than 5 mm; ++: less than 5 to 10 mm; +++: less than 10 to 15 mm; ++++: 16 mm or more). The results are shown in Table 1 below.
상기 표 1에 나타난 바와 같이, HSD-2, ONB-083, JIK-43 및 바실러스 서브틸리스 HSB1202 균주의 길항력이 가장 우수하게 나타났으며, 이 중 상기 바실러스 서브틸리스 HSB1202 균주가 바실러스속의 전형적인 콜로니 형태를 나타내고 단백질에 대하여 유기물 분해능을 우수하게 나타내었으므로, 이 균주를 최종 선택하였다.
As shown in Table 1, the resistance of HSD-2, ONB-083, JIK-43 and Bacillus subtilis HSB1202 was the most excellent, and among them, the strain Bacillus subtilis HSB1202 was the typical This strain was finally selected because it exhibited a colony morphology and showed excellent ability to decompose organic matter with respect to protein.
선발된 미생물의 동정Identification of selected microorganisms
길항력 및 유기물 분해능이 우수한 균주를 대상으로 다음과 같은 방법으로 서열분석(sequencing analysis)을 실시하였다. 서열분석은 선발된 균주 중 방선균을 포함한 세균에 대하여 total RNA를 분리한 다음 16S rRNA sequencing에 사용되고 있는 primer 518F(5’-CCAA GCA GCC GCG GTA ATA CG-3’)와 primer 800R(5’-TAC CAG GGT ATC TAA TCC-3’)을 사용하여 95℃에서 5분간 predenaturation, 94℃에서 45초간 denaturation, 50℃에서 60초간 annealing, 72℃에서 60초간 extention, 72℃에서 10분간 final extention을 35cycle polymerization하여 PCR을 수행하였다. Sequencing analysis was performed on strains with excellent resistance to patholytic and organic matter in the following manner. For the sequencing analysis, total RNA was isolated from bacteria including actinomycetes and then primer 518F (5'-CCAA GCA GCC GCG GTA ATA CG-3 ') and primer 800R (5'-TAC The reaction mixture was pre-titrated at 95 ° C for 5 minutes, denaturation at 94 ° C for 45 seconds, annealing at 50 ° C for 60 seconds, extension at 72 ° C for 60 seconds, and final extension at 72 ° C for 10 minutes using 35 cycles PCR was performed.
증폭된 PCR 결과물을 1% agarose gel에서 전기영동하여 확인한 후, 약 1,200bp의 16S ribosomal RNA를 분리 정제하고 sequencing kit(ABI PRISM BigDye™ Terminator Cycle Sequencing Kits)를 이용하여 ABI PRISM 3730XL Analyzer로 염기서열 분석을 실시하였다. 염기서열분석결과는 서열목록의 서열번호 1 및 도 2와 같다. 분석된 미생물의 16S rRNA sequence를 BLASTN 프로그램을 이용하여 GENEBANK와 RDP(RNA database project)의 ribosomal RNA sequence와 비교하여 동정하였다. 그 결과 식물병원성 곰팡이인 시들음병균(Fusarium oxysporum)에 대한 길항력이 우수한 것으로 나타난 바실러스 서브틸리스 HSB1202 균주는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)로 동정되었다. 이 균주를 바실러스 서브틸리스 HSB1202로 명명하고, 한국생명공학연구원에 2012년 7월 9일자로, 수탁번호 KCTC 12239BP로 기탁하였다.
The amplified PCR product was electrophoresed on 1% agarose gel, followed by separation and purification of about 1,200 bp of 16S ribosomal RNA. Sequencing kit (ABI PRISM BigDye ™ Terminator Cycle Sequencing Kits) was used for sequencing with ABI PRISM 3730XL Analyzer Respectively. The results of the nucleotide sequence analysis are shown in SEQ ID NO: 1 and FIG. 2 of the Sequence Listing. The 16S rRNA sequence of the analyzed microorganism was compared with the ribosomal RNA sequence of GENEBANK and RDP (RNA database project) using the BLASTN program. As a result, Fusarium , a plant pathogenic fungus, The strain Bacillus subtilis HSB1202, which was shown to have superior resistance to the pathogen , was identified as Bacillus subtilis . This strain was designated as Bacillus subtilis HSB1202 and deposited on July 9, 2012 with the accession number KCTC 12239BP, Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology.
균주의 최적 생육 조건Optimum growth condition of strain
상기 동정된 바실러스 서브틸리스 HSB1202 균주의 최적 pH는 6.7로 나타났으며(도 3 참조), 30~42 ℃의 넓은 범위의 온도에서 생육이 가능하나 바람직하게는 36℃가 최적온도인 것으로 나타났다(도 4 참조).
The optimal pH of the identified strain of Bacillus subtilis HSB1202 was 6.7 (see FIG. 3), and it was possible to grow at a wide temperature range of 30 to 42 ° C., but it was preferably at 36 ° C. 4).
실시예Example 1~4. 미생물 배양체의 제조 1-4. Preparation of microbial cultures
증량제, 영양원, 계면활성제 및 기타 보조제의 구성을 달리하면서 선발된 바실러스 서브틸리스 HSB1202 균주를 포함하는 미생물 수화제 제형을 제조하였다. 미생물 배양액은 바실러스 서브틸리스 HSB1202을 당밀 배지, 호기조건하에 배양기(Jar fermenter)에서 3일간 배양하여 항진균력을 지닌 균주 배양액을 얻었다. 수화제의 구성은 하기 표 2과 같이 하였다.A microbial wettable formulation comprising Bacillus subtilis HSB1202 strains selected with different compositions of extenders, nutrients, surfactants and other adjuvants was prepared. Bacillus subtilis HSB1202 was cultured for 3 days in a jar fermenter under molar and aerobic conditions to obtain a culture medium having antifungal activity. The composition of the wettable powder was as shown in Table 2 below.
상기 기타보조제로서는 식물체에 대한 전착효과를 높일 수 있고 물에 분산시 주성분 및 보조성분의 침전을 방지하는 효과가 있는 CMC(Carboxymethyl cellulose), 알지네이트(Alginate), 잔탄(Xanthan), 아라비아검(Arabic gum) 등을 첨가하였다.
The other adjuvants include carboxymethyl cellulose (CMC), alginate, xanthan, arabic gum (arabic gum), which have the effect of enhancing the electrodeposition effect on plants and preventing the precipitation of main components and auxiliary components when dispersed in water. ) Were added.
실험예Experimental Example 2. 2. 고추역병균Pepper root germ 방제 시험 Control test
상기 실시예 4에 의해 제조된 바실러스 서브틸리스 HSB1202 제제의 고추역병균(Phytophthora capsici) 방제 효과를 상토 및 육묘 트레이를 이용하여 온실내에서 시험하였다. 시험 방법은 다음과 같다. 지름 9㎝ 포트에 정식한 후 3주 생육한 고추 유묘를 처리구 당 5주씩 3반복으로 제제를 처리하고 2주일 후 고추역병균을 접종하여 병방제 효과를 검정하였다. 처리구 및 처리내용은 하기 표 3과 같다. The bacterium belonging to the genus Bacillus subtilis HSB1202 prepared in Example 4 ( Phytophthora capsici ) were tested in the indoor environment using soil and seedling trays. The test method is as follows. After 3 weeks of seeding, the pepper seedlings grown in a 9 - cm diameter pot were treated with 3 repetitions of 5 weeks for each treatments. After 2 weeks, pepper spp. The treatments and contents of treatment are shown in Table 3 below.
고추역병균(Phytophthora capsici)를 10% V8 agar media plate, 25℃에서 5일간 배양하고 실온에서 균체에 NUV(근자외선)를 24시간 조사하여 포자를 유도하였다. 고추역병균의 유주자낭이 생성된 배지위에 멸균수 10㎖를 분주하여 도말봉으로 배지 표면을 문질러 상기 유주자낭을 균사로부터 탈락시킨 후 멸균된 거즈로 균사를 제거하였다. 수확한 유주자낭 현탁액을 10℃에서 10분간 chilling 처리하여 유주자 나출을 유도한 후 상기 유주자 농도가 최종 3×104 zoospores/㎖이 되도록 멸균수에 희석하여 고추유묘의 지제부에 25㎖씩 관주하여 접종하였다. Phytophthora capsici was cultured in a 10% V8 agar media plate at 25 ° C for 5 days and NUV (near ultraviolet) was irradiated to the cells at room temperature for 24 hours to induce spores. 10 ml of sterilized water was dispensed on the culture medium of the Porphyra graminifera, and the surface of the medium was rubbed with a smear bar to remove the papillae from the mycelia and then the mycelia were removed with sterile gauze. The suspension of the harvested zoosporangiae was chilled at 10 ° C for 10 minutes to induce the zoosporan excretion. The diluted zoospores were diluted in sterilized water to a final concentration of 3 × 10 4 zoospores / ㎖, .
그 결과 바실러스 서브틸리스 HSB1202 균주의 고체배양체의 병방제 실험을 위해 병원균 접종일로부터 5일째 처리구의 모든 샘플에 대한 전수조사를 실시하여 이병주를 선별하였다. 전수조사는 지제부에 형성되는 병반의 진전정도와 상관없이 이병유무로 나누어 조사하였다. 역병이 진전되어 쓰러진 식물체들을 대략적으로 선별하고, 상토에서 나머지 샘플을 캐내어 멸균수로 상토를 씻어낸 후 정밀하게 관찰하여 발병여부를 판단하였다. 그 결과 하기 표 4에 나타낸 바와 같이 바실러스 서브틸리스 HSB1202 균주 액상만을 접종한 경우에도 발병율이 비교예 1 및 비교예 2와 대비하였을 때 절반 이하로 감소하였으며, 상기 바실러스 서브틸리스 HSB1202 균주 액상 및 고체배양체를 함께 접종한 실시예 6에서 이병률이 40% 이하로 낮게 나타났다.As a result, for the control of disease control of the solid cultures of Bacillus subtilis strain HSB1202, all samples of the treatments at 5 days after the inoculation of the pathogen were subjected to a total investigation to select Bacillus subtilis. The preliminary survey was divided into whether or not the lesion was developed regardless of the degree of progression of the lesion formed in the department. Plants that have fallen due to the progress of the plague have been roughly selected, and the remaining samples were taken out from the soil, washed with sterilized water, and then observed with precision. As a result, as shown in the following Table 4, even when only the liquid phase of Bacillus subtilis HSB1202 strain was inoculated, the incidence rate was reduced to less than half when compared with Comparative Example 1 and Comparative Example 2. The Bacillus subtilis HSB1202 strain liquid and solid In Example 6 in which the cultures were inoculated together, the incidence was as low as 40% or less.
실시예Example 5. 유기질비료의 제조 5. Manufacture of organic fertilizer
미강유박 45 ㎏, 피마자박 20 ㎏, 어박 14 ㎏에 상기 실시예 4에서 얻은 바실러스 서브틸리스 HSB1202 균주의 미생물 배양체 1 ㎏을 혼합하여 유기질비료복합체 200㎏을 제조하였다.
200 kg of the organic fertilizer complex was prepared by mixing 45 kg of rice bran oil, 20 kg of castor oil, 14 kg of fish paste, and 1 kg of the microbial culture of Bacillus subtilis HSB1202 strain obtained in Example 4 above.
이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 균등한 범위는 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.
The present invention has been described with reference to the preferred embodiments. Those skilled in the art will appreciate that the present invention can be implemented in a modified form without departing from the essential features of the present invention. Therefore, the disclosed embodiments should be considered in an illustrative rather than a restrictive sense. The scope of the present invention is defined by the appended claims rather than by the foregoing description, and equivalents thereof are to be construed as being included in the present invention.
<110> HYOSUNG ONB CO., LTD <120> Organic fertilizer containing valuable microbes as effective ingredient and its preparation method <130> KP2311 <160> 1 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 967 <212> DNA <213> Burkholderia sp. HSB1201 KCTC 12238BP <400> 1 ggnnngtgac gnttatcgga ttactgggcg taagcgtgcg caggcggttt gctaagaccg 60 atgtgaaatc cccgggctca acctgggaac tgcattggtg actggcaggc tagagtatgg 120 cagagggggg tagaattcca cgtgtagcag tgaaatgcgt agagatgtgg aggaataccg 180 atggcgaagg cagccccctg ggccaatact gacgctcatg cacgaaagcg tggggagcaa 240 acaggattag ataccctggt agtccacgcc ctaaacgatg tcaactagtt gttggggatt 300 catttcctta gtaacgtagc taacgcgtga agttgaccgc ctggggagta cggtcgcaag 360 attaaaactc aaaggaattg acggggaccc gcacaagcgg tggatgatgt ggattaattc 420 gatgcaacgc gaaaaacctt acctaccctt gacatggtcg gaatcccgct gagaggtggg 480 agtgctcgaa agagaaccgg cgcacaggtg ctgcatggct gtcgtcagct cgtgtcgtga 540 gatgttgggt taagtcccgc aacgagcgca acccttgtcc ttagttgcta cgcaagagca 600 ctctaaggag actgccggtg acaaaccgga ggaaggtggg gatgacgtca agtcctcatg 660 gcccttatgg gtagggcttc acacgtcata caatggtcgg aacagagggt tgccaacccg 720 cgagggggag ctaatcccag aaaaccgatc gtagtccgga ttgcactctg caactcgagt 780 gcatgaagct ggaatcgcta gtaatcgcgg atcagcatgc cgcggtgaat acgttcccgg 840 gtcttgtaca caccgcccgt cacaccatgg gagtgggttt taccagaagt ggctagtcta 900 accgcaagag gacggtcacc acggtaggat tcatgactgg ggtgaagtcg tacagggtaa 960 ccgtaaa 967 <110> HYOSUNG ONB CO., LTD <120> Organic fertilizer containing ingredient and its preparation method <130> KP2311 <160> 1 <170> Kopatentin 2.0 <210> 1 <211> 967 <212> DNA <213> Burkholderia sp. HSB1201 KCTC 12238BP <400> 1 ggnnngtgac gnttatcgga ttactgggcg taagcgtgcg caggcggttt gctaagaccg 60 atgtgaaatc cccgggctca acctgggaac tgcattggtg actggcaggc tagagtatgg 120 cagagggggg tagaattcca cgtgtagcag tgaaatgcgt agagatgtgg aggaataccg 180 atggcgaagg cagccccctg ggccaatact gacgctcatg cacgaaagcg tggggagcaa 240 acaggattag ataccctggt agtccacgcc ctaaacgatg tcaactagtt gttggggatt 300 catttcctta gtaacgtagc taacgcgtga agttgaccgc ctggggagta cggtcgcaag 360 attaaaactc aaaggaattg acggggaccc gcacaagcgg tggatgatgt ggattaattc 420 gatgcaacgc gaaaaacctt acctaccctt gacatggtcg gaatcccgct gagaggtggg 480 agtgctcgaa agagaaccgg cgcacaggtg ctgcatggct gtcgtcagct cgtgtcgtga 540 gatgttgggt taagtcccgc aacgagcgca acccttgtcc ttagttgcta cgcaagagca 600 ctctaaggag actgccggtg acaaaccgga ggaaggtggg gatgacgtca agtcctcatg 660 gcccttatgg gtagggcttc acacgtcata caatggtcgg aacagagggt tgccaacccg 720 cgagggggag ctaatcccag aaaaccgatc gtagtccgga ttgcactctg caactcgagt 780 gcatgaagct ggaatcgcta gtaatcgcgg atcagcatgc cgcggtgaat acgttcccgg 840 gtcttgtaca caccgcccgt cacaccatgg gagtgggttt taccagaagt ggctagtcta 900 accgcaagag gacggtcacc acggtaggat tcatgactgg ggtgaagtcg tacagggtaa 960 ccgtaaa 967
Claims (9)
(a) 호기조건하에 배양하여 얻은 1×107~1×1011 cfu/ml 농도의 바실러스 서브틸리스 HSB1202 (KCTC 12239BP) 균주 배양액 1 중량부,
(b) 제올라이트, 벤토나이트, 탈크, 디아토마이트, 카올린, 화이트카본 및 다공성실리카로 구성된 군으로부터 1종 이상 선택되는 증량제 1~70 중량부,
(c) 염화암모늄, 황산암모늄, 질산암모늄, 효모추출액, 수크로즈, 당밀, 글루코오스, 현미유, 미강, 전분, 덱스트린 및 갈락토스로 구성된 군으로부터 1종 이상 선택되는 미생물 영양원 0.5~40 중량부, 및
(d) 폴리카복실레이트, 소듐 리그노설포네이트, 칼슘 리그노설포네이트, 소듐 다이알킬설포석시네이트, 소듐 알킬아릴설포네이트, 폴리옥시에틸렌 알킬페닐 에테르, 소듐 트리폴리포스페이트, 폴리옥시에틸렌 알킬아릴 포스포릭 에스테르, 폴리옥시에티렌 알킬아릴 에테르, 폴리옥시에틸렌 알킬아릴 폴리머, 폴리옥시알킬온알킬페닐 에테르, 폴리옥시에틸렌 노닐페닐 에테르, 소듐 설포네이트 나프탈렌 포름알데히드, 트리톤 100 및 트윈 80으로 구성된 군으로부터 1종 이상 선택되는 계면활성제 0.2~20 중량부를 포함하는 수화제 형태인 것을 특징으로 하는 항진균성 유기질 비료 조성물.The microorganism culturing apparatus according to claim 1,
1 part by weight of a culture medium of Bacillus subtilis HSB1202 (KCTC 12239BP) at a concentration of 1 × 10 7 to 1 × 10 11 cfu / ml obtained by culturing under aerobic conditions (a)
(b) 1 to 70 parts by weight of an extender selected from the group consisting of zeolite, bentonite, talc, diatomite, kaolin, white carbon and porous silica,
(c) 0.5 to 40 parts by weight of a microbial nutrient selected from the group consisting of ammonium chloride, ammonium sulfate, ammonium nitrate, yeast extract, sucrose, molasses, glucose, rice hull, rice bran, starch, dextrin and galactose,
(d) at least one compound selected from the group consisting of polycarboxylate, sodium lignosulfonate, calcium lignosulfonate, sodium dialkylsulfosuccinate, sodium alkylarylsulfonate, polyoxyethylene alkylphenyl ether, sodium tripolyphosphate, polyoxyethylene alkylarylphosphate Polyoxyethylene alkylarylpolyether, polyoxyethylene nonylphenyl ether, sodium sulfonate naphthalene formaldehyde, Triton 100, and Tween 80 to form 1, 2, 3, 4, 0.0 > 20 < / RTI > parts by weight of at least one surfactant selected from the group consisting < RTI ID = 0.0 > of. ≪ / RTI >
식물성 유박 100 중량부와 어박 5∼50 중량부를 포함하는 비료성분에 상기 단계에서 얻은 미생물 배양체 0.1∼20 중량부를 혼합하는 단계를 포함하는 항진균성 유기질비료의 제조방법.
(a) 호기조건하에 배양하여 얻은 1×107~1×1011 cfu/ml 농도의 바실러스 서브틸리스 HSB1202 (KCTC 12239BP) 균주 배양액 1 중량부;
(b) 제올라이트, 벤토나이트, 탈크, 디아토마이트, 카올린, 화이트카본 및 다공성실리카로 구성된 군으로부터 1종 이상 선택되는 증량제 1~70 중량부;
(c) 염화암모늄, 황산암모늄, 질산암모늄, 효모추출액, 수크로즈, 당밀, 글루코오스, 현미유, 미강, 전분, 덱스트린 및 갈락토스로 구성된 군으로부터 1종 이상 선택되는 미생물 영양원 0.5~40 중량부; 및
(d) 폴리카복실레이트, 소듐 리그노설포네이트, 칼슘 리그노설포네이트, 소듐 다이알킬설포석시네이트, 소듐 알킬아릴설포네이트, 폴리옥시에틸렌 알킬페닐 에테르, 소듐 트리폴리포스페이트, 폴리옥시에틸렌 알킬아릴 포스포릭 에스테르, 폴리옥시에티렌 알킬아릴 에테르, 폴리옥시에틸렌 알킬아릴 폴리머, 폴리옥시알킬온알킬페닐 에테르, 폴리옥시에틸렌 노닐페닐 에테르, 소듐 설포네이트 나프탈렌 포름알데히드, 트리톤 100 및 트윈 80으로 구성된 군으로부터 1종 이상 선택되는 계면활성제 0.2~20 중량부Obtaining a microbial culture of Bacillus subtilis HSB1202 (KCTC 12239BP) in the form of a wetting agent comprising (a) - (d)
A method for producing an antifungal organic fertilizer comprising the step of mixing 0.1 to 20 parts by weight of the microbial culture obtained in the step to a fertilizer component containing 100 parts by weight of vegetable oil and 5 to 50 parts by weight of fish.
1 part by weight of a culture medium of Bacillus subtilis HSB1202 (KCTC 12239BP) at a concentration of 1 × 10 7 to 1 × 10 11 cfu / ml obtained by culturing under aerobic conditions (a);
(b) 1 to 70 parts by weight of an extender selected from the group consisting of zeolite, bentonite, talc, diatomite, kaolin, white carbon and porous silica;
(c) 0.5 to 40 parts by weight of microbial nutrients selected from the group consisting of ammonium chloride, ammonium sulfate, ammonium nitrate, yeast extract, sucrose, molasses, glucose, brown rice oil, rice bran, starch, dextrin and galactose; And
(d) polycarboxylate, sodium lignosulfonate, calcium lignosulfonate, sodium dialkylsulfosuccinate, sodium alkylarylsulfonate, polyoxyethylene alkylphenyl ether, sodium tripolyphosphate, polyoxyethylene alkylaryl phosph 1 from the group consisting of polyesters, polyoxyethylene alkylaryl ethers, polyoxyethylene alkylaryl polymers, polyoxyalkyl-onalkylphenyl ethers, polyoxyethylene nonylphenyl ethers, sodium sulfonate naphthalene formaldehyde, Triton 100 and Tween 80 0.2-20 parts by weight of surfactants selected from species or more
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