KR20130128907A - 보글리보스를 포함하는 피부 미백용 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 멜라닌 생성을 억제 또는 저해시키는 피부 미백용 조성물에 관한 것으로서, 구체적으로 발리올아민(valiolamine) 유도체를 포함하는 피부 미백용 조성물에 관한 것이다.
Description
본 발명은 멜라닌 생성을 억제 또는 저해시키는 피부 미백용 조성물에 관한 것으로서, 구체적으로 발리올아민(valiolamine) 유도체를 포함하는 피부 미백용 조성물에 관한 것이다.
사람의 피부색을 결정하는 멜라닌(melanin)은 멜라노사이트(melanocyte)라 불리는 피부 세포에서 만들어져 케라티노사이트(keratinocyte)라는 표피 세포로 이동한다. 여기에서 멜라닌은 핵주변에 모자와 같은 구조를 형성하여 자외선으로부터 유전자를 보호하고, 자유 라디칼(free radical)을 제거하여 세포 내 단백질을 보호하는 등 중요한 역할을 하게 된다. 이러한 멜라닌을 분해하는 효소가 생체 내에는 없고, 다만 케라티노사이트가 표피에서 떨어져나갈 때 같이 피부에서 떨어져나가는 것으로 제거된다. 하지만, 멜라닌이 필요 이상으로 많이 생기게 되면 기미나 주근깨, 점 등과 같은 과색소침착증을 유발하여 미용상으로 좋지 않은 결과를 가져오게 된다. 또한, 레져 인구의 증가로 외부에서 활동하는 것을 즐기는 사람들이 많아지면서 자외선에 의한 멜라닌 색소 침착을 막고자 하는 요구가 더욱 늘어나게 되었다. 이에 과도한 멜라닌 생성을 막는 미백제 개발이 필요하게 되었고 그 동안 많은 노력들이 이루어졌다.
이제까지의 미백제 개발은 주로 멜라닌 생합성에서 없어서는 안될 기본적이면서도 가장 중요한 역할을 하는 효소인 타이로시나아제 (tyrosinase)의 효소 활성을 저해하는 것을 통해 멜라닌 양을 줄이는 물질을 찾는 것으로 이루어져왔다. 이렇게 개발된 미백제로 코지산, 알부틴, 글루타치온, 비타민 A, 비타민 C 등이 있지만, 소비자들이 만족할 만한 미백효과를 갖지 못하고 있으며 부작용 때문에 그 사용량에 제한적인 문제점이 있다. 따라서, 이제까지의 미백제보다 효능이 뛰어나고 좀 더 안전한 미백제를 개발하는 것이 절실한 실정이다.
한편, 멜라닌을 생합성하는 효소인 타이로시나아제(tyrosinase)는 당이 결합되어 있는 당단백질로서, 생체 내 당단백질 합성 과정인 글리코실레이션(glycosylation) 과정을 통해 만들어진다. 이 글리코실레이션 과정에는 많은 효소가 관여하는데, 그 중 중요한 효소는 만노시다제(mannosidase)와 글루코시다제 (glucosidase)이다. 타이로시나아제의 글리코실레이션이 저해되면 타이로시나아제의 안정성이 떨어져 분해가 가속화 되고, 멜라닌을 만드는 세포 내 소기관으로의 이동과 효소 활성이 떨어져 멜라닌 생성이 억제된다.
본 발명자들은 발리올아민(valiolamine) 유도체가 타이로시나아제의 안정성을 약화시켜 분해를 가속화시킴에 따라, 멜라닌 생성이 억제됨을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명의 목적은 멜라닌의 생성을 근원적으로 억제하면서 부작용이 없는 신규한 미백 조성물을 제공하는 데 있다.
상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 화학식 1의 발리올아민(valiolamine) 유도체 또는 약학적으로 허용가능한 그들의 염을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물을 제공한다.
[화학식 1]
본 발명의 일 관점인 피부 미백용 조성물은 멜라닌 생성의 원인이 되는 근원물질인 타이로시나아제를 불안정하게 하여 분해를 촉진시킨다. 이에 따라, 멜라닌 생성을 효과적으로 저해하여 우수한 미백효과를 나타내면서도, 또한 피부에 부작용이 없는 조성물을 제공하게 되어, 유용하다. 구체적으로, 본 발명의 일 관점인 피부 미백용 조성물은 유효성분으로서 발리올아민(valiolamine) 유도체, 구체적으로 보글리보스를 함유하여, 멜라닌 생성 효소인 타이로시네이즈(tyrosinase)의 발현을 억제, 멜라닌 생성을 저해함으로써 미백 효과를 나타낼 수 있다. 또한, 본 발명의 일 관점인 피부 미백용 조성물은 타이로시나아제 단백질의 전체적인 양도 감소시킬 수 있다.
도 1은 인간 흑색종 세포를 이용한 보글리보스의 세포 독성 실험 결과를 나타낸다.
도 2는 인간 흑색종 세포를 이용한 보글리보스의 멜라닌 생성 억제 효능을 나타낸다.
도 3은 인간 정상 멜라닌 생성 세포를 이용하여 보글리보스가 타이로시나아제 글라이코실레이션 및 타이로시나아제 단백질 발현에 미치는 영향을 보여준다.
도 2는 인간 흑색종 세포를 이용한 보글리보스의 멜라닌 생성 억제 효능을 나타낸다.
도 3은 인간 정상 멜라닌 생성 세포를 이용하여 보글리보스가 타이로시나아제 글라이코실레이션 및 타이로시나아제 단백질 발현에 미치는 영향을 보여준다.
본 발명은 일 관점에서, 화학식 1의 발리올아민(valiolamine) 유도체 또는 약학적으로 허용가능한 그들의 염을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물에 관한 것이다.
[화학식 1]
상기 화학식 1에서, A는 다음의 화합물로 치환될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 구체적으로, 상기 A는 히드록실, 페녹시, 티에닐, 푸릴, 피리딜, 시클로헥실, 알킬알콜, 알킬디알콜 또는 임의 치환된 페닐로 치환될 수 있는 C1 -10 비사이클릭 탄화수소기; 히드록실, 히드록시메틸, 메틸 또는 아미노로 치환될 수 있는 C5 -6 사이클릭 탄화수소기; 또는 당 잔기를 나타낸다.
상기 화학식 1에서, A는 또한 포화 또는 불포화될 수 있는 C1 -10 직쇄 또는 분지 지방족 탄화수소기를 포함하며, 이들은 히드록시, 페녹시, 티에닐, 푸릴, 피리딜, 시클로헥실, 또는 치환될 수 있는 페닐로 치환될 수 있다. 치환될 수 있는 페닐기의 치환기는 저급 알킬 (예를 들어 C1 -6), 저급 알콕시 (예를 들어 C1 -6), 저급 디알콕시 (예를 들어 C1 -6), 할로겐 (예를 들어 불소, 염소, 브롬, 요오드), 페닐 등을 포함할 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, A는 C5 -6 시클릭 탄화수소기 또는 당 잔기를 나타낸다. 이들 기는 히드록시, 히드록시메틸, 메틸 또는 아미노로 치환될 수 있다. 본 명세서에서 '당 잔기'라는 용어는 다당류 분자로부터 1개의 수소 원자의 제거시의 기를 의미하며, 따라서 예를 들어 단당류 또는 올리고당으로부터 유래된 잔기를 의미할 수 있다.
상기 유도체는 무기산 (예를 들어 염산), 또는 유기산 (예를 들어 시트르산)과의 염의 형태로 사용될 수 있다.
본 명세서에서 "약학적으로 허용 가능"이란 통상의 의약적 복용량(medicinal dosage)으로 이용할 때 상당한 독성 효과를 피함으로써, 동물, 더 구체적으로는 인간에게 사용할 수 있다는 정부 또는 이에 준하는 규제 기구의 승인을 받을 수 있거나 승인 받거나, 또는 약전에 열거되거나 기타 일반적인 약전으로 인지되는 것을 의미한다.
본 명세서에서 "약학적으로 허용 가능한 염"은 약학적으로 허용 가능하고 모 화합물(parent compound)의 바람직한 약리 활성을 갖는 본 발명의 일 관점에 따른 염을 의미한다. 상기 염은 (1) 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 인산 등과 같은 무기산으로 형성되거나; 또는 아세트산, 프로파이온산, 헥사노산, 시클로펜테인프로피온산, 글라이콜산, 피루브산, 락트산, 말론산, 숙신산, 말산, 말레산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 3-(4-히드록시벤조일) 벤조산, 신남산, 만델산, 메테인설폰산, 에테인설폰산, 1,2-에테인-디설폰산, 2-히드록시에테인설폰산, 벤젠설폰산, 4-클로로벤젠설폰산, 2-나프탈렌설폰산, 4-톨루엔설폰산, 캄퍼설폰산, 4-메틸바이시클로 [2,2,2]-oct-2-엔-1-카르복실산, 글루코헵톤산, 3-페닐프로파이온산, 트리메틸아세트산, tert-부틸아세트산, 라우릴 황산, 글루콘산, 글루탐산, 히드록시나프토산, 살리실산, 스테아르산, 뮤콘산과 같은 유기산으로 형성되는 산 부가염(acid addition salt); 또는 (2) 모 화합물에 존재하는 산성 프로톤이 치환될 때 형성되는 염을 포함할 수 있다.
본 명세서에서 "유효성분"은 단독으로 목적하는 활성을 나타내거나 또는 그 자체 활성이 없는 담체와 함께 활성을 나타낼 수 있는 성분을 의미하는 것이다.
본 명세서에서, "피부 미백"은 멜라닌의 생성이 저해됨에 따른 결과로서 이해되는데, 구체적으로는 멜라닌의 생성에 의한 증상, 예컨대 기미, 주근깨, 피부노화 등의 예방, 발현 지연 또는 치료를 의미하는 것이다.
본 발명의 일 관점인 조성물에 있어서, 상기 발리오아민 유도체는 보글리보스(voglibose, (1S,2S,3R,4S,5S)-5-(1,3-dihydroxypropan-2-ylamino)-1-(hydroxymethyl)cyclohexane-1,2,3,4-tetraol), 그의 유도체 또는 약학적으로 허용가능한 그들의 염을 포함할 수 있다. 보글리보스의 화학구조는 아래 그림 2와 같다.
[화학식 2]
본 명세서에서 "보글리보스의 유도체"는 보글리보스의 치환 가능한 위치에서 다른 치환기로 변경되는 모든 화합물을 의미하는 것이며, 이러한 치환기의 종류에는 제한이 없다. 일 구현예로서, 상기 보글리보스 유도체는 화학식 3을 의미할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 구체적으로, 하기 화학식 2에서 n 또는 m은 독립적으로 2 내지 10의 정수일 수 있다.
[화학식 3]
본 발명의 일 관점인 조성물에 있어서, 상기 조성물은 발리올아민(valiolamine) 유도체 또는 약학적으로 허용가능한 그들의 염을 조성물 총 중량에 대하여 0.001~20 중량%로 함유할 수 있다.
발리올아민(valiolamine) 유도체 또는 약학적으로 허용가능한 그들의 염이 0.001중량% 미만으로 함유되면 피부의 미백을 위하여 티로시나제의 발현을 저해시키기에 충분하지 못하고, 20중량%를 초과하여 함유되면 다른 성분의 함량 및 제형화에 있어서 적절하지 못하다. 상기와 같은 관점에서, 본 발명의 일 관점인 피부 미백용 조성물은 발리올아민(valiolamine) 유도체 또는 약학적으로 허용가능한 그들의 염을 조성물 총 중량에 대하여 0.002~19.8중량%, 0.004~19.6중량%, 0.006~19.4중량%, 0.008~19.2중량%, 0.01~19중량%, 0.012~18.8중량%, 0.014~18.6중량%, 0.016~18.4중량%, 0.018~18.2중량%, 0.02~18중량%, 0.022~17.8중량% 또는 0.024~17.6중량%의 농도로 포함할 수 있다.
본 발명의 일 관점인 조성물에 있어서, 상기 유효성분은 타이로시나아제 (tyrosinase)의 발현을 억제시킬 수 있다.
본 명세서에서 "타이로시나아제의 발현을 억제"한다는 의미는 타이로시나아제의 구조를 불안정하게 하여 분해를 촉진시킬 수 있는 용도를 의미한다. 구체적으로, 상기 타이로시나아제의 분해를 촉진시킴에 따라, 타이로신이 도파 (DOPA)로 전환되는 것을 억제하거나 저해시킬 수 있고, 도파옥시다제(dopaoxidase)의 활성을 억제하거나 저해시킬 수 있으며, 도파가 도파-퀴논(Dopa-quinone)으로 전환되는 것을 억제하거나 저해시켜서, 멜라닌의 생성을 억제하거나 저해시킬 수 있다.
본 발명의 일 관점인 조성물에 있어서, 상기 유효성분은 DOPA(3,4-dihydroxyphenylalanine)의 생성을 억제시킬 수 있다.
본 명세서의 "DOPA(3,4-dihydroxyphenylalanine) 생성을 억제시킨다"는 의미는 DOPA의 생성을 억제하거나 저해시킬 수 있는 용도를 의미한다. 구체적으로, 상기 DOPA를 억제함에 따라, 도파옥시다제(dopaoxidase)의 기능을 억제하거나 저해시킬 수 있으며, 도파가 도파-퀴논(Dopa-quinone)으로 전환되는 것을 억제하거나 저해시켜서, 멜라닌의 생성을 억제하거나 저해시킬 수 있다.
본 발명의 일 관점인 조성물에 있어서, 상기 유효성분은 도파옥시다제(dopaoxidase)의 생성을 억제시킬 수 있다.
본 명세서의 "도파옥시다제(dopaoxidase)의 생성을 억제시킨다"는 의미는 DOPA의 생성을 억제하거나 저해시켜서, 도파옥시다제(dopaoxidase)가 작용하는 대상의 농도를 낮추어 줌으로 인하여, 도파-퀴논(Dopa-quinone)의 생성을 억제하거나 저해시켜서, 멜라닌의 생성을 억제하거나 저해시킬 수 있다.
본 발명의 일 관점인 조성물에 있어서, 상기 유효성분은 도파-퀴논(Dopa-quinone)의 생성을 억제시킬 수 있다.
본 명세서의 "도파-퀴논(Dopa-quinone)의 생성을 억제시킨다"는 의미는 도파-퀴논(Dopa-quinone)의 생성을 억제하거나 저해시켜서, 멜라닌의 생성을 억제하거나 저해시키는 용도를 의미한다.
본 발명의 일 관점인 조성물에 있어서, 상기 유효성분은 멜라닌의 생성을 억제시킬 수 있다.
본 명세서에서 "멜라닌의 생성을 억제"한다는 의미는 멜라닌을 생성하는 체내 기작의 업-스트림(up-stream)에 관여하는 단백질 또는 효소의 활성을 억제하거나 저해함에 따라, 멜라닌의 생성을 억제하거나 저해하는 것을 의미한다.
본 발명의 일 관점인 조성물에 있어서, 상기 조성물은 화장료 조성물을 포함한다.
상기 화장료 조성물은 제형이 특별히 한정되지 않으며, 목적하는 바에 따라 적절히 선택할 수 있다. 예를 들어, 유연화장수(스킨로션 및 밀크로션), 영양화장수, 에센스, 영양크림, 마사지크림, 팩, 젤, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 파우더, 보디로션, 보디크림, 보디오일 및 보디 에센스로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 제형으로 제조될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 아울러, 상기 화장료 조성물은 연고, 패치 등의 형태로 피부 외용제의 제형으로 사용하는 것을 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물은 상기한 물질 이외에 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서, 바람직하게는 주 효과에 상승 효과를 줄 수 있는 다른 성분들을 포함할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 화장료 조성물은 보습제, 에몰리언트제, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, pH 조정제, 유기 및 무기 안료, 향료, 냉감제 또는 제한제를 더 포함할 수 있다. 상기 성분의 배합량은 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 당업자가 용이하게 선정 가능하며, 그 배합량은 조성물 전체 중량을 기준으로 0.01 내지 5 중량%, 구체적으로 0.01 내지 3 중량%일 수 있다.
본 발명의 일 관점인 조성물에 있어서, 상기 조성물은 약학 조성물을 포함한다.
본 발명에 따른 약학 조성물의 제형은 용액제, 현탁제, 유액제, 겔, 점적제, 좌제(坐劑), 패취 또는 분무제일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 제형은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 용이하게 제조될 수 있으며, 부형제, 수화제, 유화 촉진제, 현탁제, 삼투압 조절을 위한 염 또는 완충제, 착색제, 향신료, 안정화제, 방부제, 보존제 또는 기타 상용하는 보조제를 적당히 사용할 수 있다.
본 발명의 약학 조성물의 유효 성분은 투여 받을 대상의 연령, 성별, 체중, 병리 상태 및 그 심각도, 투여 경로 또는 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 적용량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 이의 1일 투여 용량은 예를 들어 0.000025mg/g/일 내지 0.025mg/g/일, 보다 구체적으로는 0.00025mg /g/일 내지 0.01mg/g/일이 될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 약학 조성물은 경구 또는 경피로 투여될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 일 관점인 조성물에 있어서, 상기 조성물은 건강식품 조성물을 포함한다.
본 발명의 건강식품 조성물은 다양한 형태의 식품 첨가제 또는 기능성 식품을 제공한다. 상기 조성물을 포함하는 침출차, 액상차, 음료, 발효유, 치즈, 요구르트, 주스, 생균제제 및 건강보조식품 등으로 가공될 수 있으며, 그 외 다양한 식품 첨가제의 형태로 사용될 수 있다.
일 실시예에서 상기 조성물은, 본 발명이 목적으로 하는 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 주 효과에 상승 효과를 줄 수 있는 다른 성분 등을 함유할 수 있다. 예를 들어, 물성 개선을 위하여 향료, 색소, 살균제, 산화방지제, 방부제, 보습제, 점증제, 무기염류, 유화제 및 합성 고분자 물질 등의 첨가제를 더 포함할 수 있다. 그 외에도, 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당 및 해초 엑기스 등의 보조 성분을 더 포함할 수도 있다. 상기 성분들은 제형 또는 사용 목적에 따라서 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있으며, 그 첨가량은 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 선택될 수 있다. 예를 들어, 상기 성분들의 첨가량은, 조성물 전체 중량을 기준으로, 0.01~5 중량%, 보다 구체적으로는 0.01~3 중량% 범위일 수 있다.
본 발명에 따른 조성물의 제형은 용액, 유화물, 점성형 혼합물, 타블렛, 분말 등의 다양한 형태일 수 있으며, 이는 단순 음용, 주사 투여, 스프레이 방식 또는 스퀴즈 방식 등의 다양한 방법으로 투여될 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
인간 흑색종 세포를 이용한 세포 독성 실험
인간 흑색종 세포인 MNT1 세포 (Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2001 98: 10698-10703., Proc Natl Acad Sci USA 2004, 101: 14865-70.)를 우태아혈청이 20% 들어간 Minimum Essential Medium(MEM) 배지에 넣어 37℃, 5% CO2 조건 하에서 배양하였다. 이렇게 배양한 세포에 보글리보스를 0.5, 1, 2 mM씩 각각 처리하여, 0, 2, 4, 6일 동안 배양한 후에 MTT(thiazolyl blue) assay를 이용한 세포 독성 실험을 실시하였다.
그 결과 (도 1), 0.5, 1, 2 mM의 고농도에서 6일 이상 장기 배양시 보글리보스를 처리하지 않은 대조군(NC)과 비교했을 때 세포 독성을 보이지 않고, 대조군과 비슷한 세포 성장 커브를 나타냄을 확인할 수 있었다. 그러므로, 보글리보스는 세포 독성과 같은 부작용 없이 미백 효과를 나타낼 수 있는 물질임을 확인할 수 있었다.
인간 흑색종 세포를 이용한
보글리보스
멜라닌 억제 실험
상기 실시예 1과 동일한 방법으로 MNT1 세포를 배양한 후, 세포수가 각 디쉬 당 1×105 이 되도록 60디쉬로 깔아주고, 하룻밤 동안 세포가 기벽에 붙기를 기다린 후 다음날부터 보글리보스가 들어 있는 새 배지로 갈아주었다. 보글리보스는 1mM를 사용하였다. 시료가 들어 있는 새 배지는 이틀에 한 번씩 갈아주고 세포가 디쉬에 찰 때까지 배양하였다.
세포가 다 성장한 후, 보글리보스를 처리하지 않은 대조군과의 색비교를 위하여 사진을 찍었다.
또한, 성장이 끝난 세포를 1N NaOH로 완전히 녹인 후, 490 nm에서의 흡광도를 측정하여 얻어진 상대적인 멜라닌 양을 그래프로 나타내었다.
그 결과 (도 2), 보글리보스에 의해 인간 흑색종 세포의 멜라닌 생성량이 농도의존적으로 감소하고 이로써 보글리보스의 미백 효과를 확인할 수 있었다.
인간 정상 멜라닌 생성 세포를 이용한
보글리보스의
타이로시네이즈
글리코
실레이션 억제 효능 및 미백 작용 기작
미디움 254(Medium 254, Cascade Biologics 사)에 포볼 12-미리스테이트 13-아세테이트(PMA, phorbol 12-myristate 13-acetate) 10 ng/ml을 함유한 인간 멜라노사이트 성장 보충제(HMGs, human melanocyte growth supplement)를 넣고, 이를 배지로 사용하여 인간 정상 멜라닌 생성 세포(normal human melanocyte, Cascade Biologics 사)를 37oC, 5% CO2 인큐베이터에서 배양하였다.
이렇게 배양한 세포 각각에 보글리보스 또는 DNJ(deoxynojirimycin)를 각각 1 mM씩 처리하고 3일 동안 배양한 후 세포를 모아 세포 용해액(lysis buffer: 2 % CHAPS in 50 mM Hepes and 200 mM NaCl, pH 7.5, protease inhibitors)을 넣고 초음파로 파세하였다. 세포 파세액을 4℃, 12000 rpm에서 30분 동안 원심 분리하여 깨어지지 않은 세포와 멜라닌(melanin)을 분리하여 제거하고, 상층액만을 취하였다. 도 3에서 배양한 세포를 그대로 사용한 군을 N, DNJ(deoxynojirimycin)를 처리한 군을 D, 보글리보스를 처리한 군을 V로 표시하였다.
이 상층액(단백질 양: 10 mg)에 엔도글라이코시다제 H (endoglycosidase H, 125 units) 또는 PNase를 각각 처리하여 37℃에서 하룻밤 동안 효소 반응시킨 후 전기 영동으로 상층액에 있는 단백질들을 크기별로 분리하였다. 이렇게 전기 영동으로 분리한 단백질 중 타이로시나아제를 항체(antibody)로 이용하여 웨스턴 블랏팅 방법으로 확인하였다.
당 잔기가 정상적으로 형성된 타이로시나아제는 엔도글라이코시다제 H 에 의해 당 잔기가 효소 분해되지 않아 약 62 kD 크기의 당단백질로 나타나는 반면, 보글리보스에 의해 정상적인 당 잔기가 형성되지 못한 타이로시나아제는 엔도글라이코시다제 H에 의해 당 잔기가 가수분해 되어 약 50 kD의 크기로 단백질이 나타나게 된다. PNase는 정상적인 당잔기, 비정상적인 당잔기 모두를 가수분해하여 당이 없는 단백질을 나타낸다.
도 3에서, EndoH를 보면 보글리보스를 처리하지 않은 대조군(N)의 타이로시나아제는 엔도글라이코시다제 H에 의해 당이 분해되지 않아 큰 크기(약 62 kD)가 대부분인데 비해, DNJ 및 보글리보스 1 mM 처리한 멜라닌 생성 세포의 타이로시나아제는 당 부분이 엔도글라이코시다제 H에 의해 분해되어 작은(약 50 kD) 크기로 나타나는 것을 확인할 수 있었다.
뿐만 아니라, Ctrl을 보면, 보글리보스는 타이로시나아제의 전체적인 단백질 양도 감소시킴을 확인할 수 있었다.
이상의 결과로부터, 보글리보스는 타이로시나아제의 발현양을 감소시키고 이로써 멜라닌 생성을 저해하는 미백 효과를 가짐을 확인할 수 있었다.
이하, 본 발명에 따른 조성물의 제형 예를 설명하나, 약학 조성물, 화장료 조성물 또는 건강식품 조성물은 여러 가지 제형으로 응용 가능하며, 이는 본 발명을 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
[제형예 1] 유연화장수(스킨로션)
배합 성분 | 함량 (중량 %) |
보글리보스 | 0.0025 |
글리세린 | 3.0 |
부틸렌글리콜 | 2.0 |
프로필렌글리콜 | 2.0 |
카르복시비닐폴리머 | 0.1 |
피이지-12 노닐페닐에테르 | 0.2 |
폴리솔베이트 80 | 0.4 |
에탄올 | 10.0 |
트리에탄올아민 | 0.1 |
방부제, 색소, 향료 | 적량 |
정제수 | 잔량 |
[제형예 2] 영양화장수(밀크로션)
배합 성분 | 함량 (중량 %) |
보글리보스 | 0.0025 |
글리세린 | 3.0 |
부틸렌글리콜 | 3.0 |
프로필렌글리콜 | 3.0 |
카르복시비닐폴리머 | 0.1 |
밀납 | 4.0 |
폴리솔베이트 60 | 1.5 |
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 | 5.0 |
스쿠알란 | 5.0 |
솔비타세스퀴올레이트 | 1.5 |
유동파라핀 | 0.5 |
세테아릴 알코올 | 1.0 |
트리에탄올아민 | 0.2 |
방부제, 색소, 향료 | 적량 |
정제수 | 잔량 |
[제형예 3] 영양크림
배합 성분 | 함량(중량%) |
보글리보스 | 0.0025 |
글리세린 | 3.0 |
부틸렌글리콜 | 3.0 |
유동파라핀 | 7.0 |
베타글루칸 | 7.0 |
카보머 | 0.1 |
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 | 3.0 |
스쿠알란 | 5.0 |
세테아릴 글루코사이드 | 1.5 |
소르비탄 스테아레이트 | 0.4 |
폴리솔베이트 60 | 1.2 |
트리에탄올아민 | 0.1 |
방부제, 색소, 향료 | 적량 |
정제수 | 잔량 |
[제형예 4] 마사지 크림
배합 성분 | 함량(중량%) |
보글리보스 | 0.0025 |
글리세린 | 8.0 |
부틸렌글리콜 | 4.0 |
유동파라핀 | 45.0 |
베타글루칸 | 7.0 |
카보머 | 0.1 |
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 | 3.0 |
밀납 | 4.0 |
세테아릴 글루코사이드 | 1.5 |
세스퀴 올레인산 소르비탄 | 0.9 |
바세린 | 3.0 |
파라핀 | 1.5 |
방부제, 색소, 향료 | 적량 |
정제수 | 잔량 |
[제형예 5] 팩
배합 성분 | 함량(중량%) |
보글리보스 | 0.0025 |
글리세린 | 4.0 |
폴리비닐알콜 | 15.0 |
히알루론산 추출물 | 5.0 |
베타글루칸 | 7.0 |
알란토인 | 0.1 |
노닐 페닐에테르 | 0.4 |
폴리솔베이트 60 | 1.2 |
에탄올 방부제 | 6.0적량 |
방부제, 색소, 향료 | 적량 |
정제수 | 잔량 |
[제형예 6] 연고
배합 성분 | 함량(중량%) |
보글리보스 | 0.0025 |
글리세린 | 8.0 |
부틸렌글리콜 | 4.0 |
유동파라핀 | 15.0 |
베타글루칸 | 7.0 |
카보머 | 0.1 |
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 | 3.0 |
스쿠알란 | 1.0 |
세테아릴 글루코사이드 | 1.5 |
소르비탄 스테아레이트 | 0.4 |
세테아릴 알코올 | 1.0 |
밀납 | 4.0 |
방부제, 색소, 향료 | 적량 |
정제수 | 잔량 |
[제제예 1] 연질캅셀제
보글리보스 0.0025g, 홍삼추출물 50 mg, 팜유 2 mg, 팜경화유 8 mg, 황납 4 mg 및 레시틴 6 mg을 혼합하고, 통상의 방법에 따라 1 캡슐당 400 mg씩 충진하여 연질캅셀을 제조하였다.
[제제예 2] 정제
보글리보스 0.0025g, 포도당 100 mg, 홍삼추출물 50 mg, 전분 96 mg 및 마그네슘 스테아레이트 4 mg을 혼합하고 30% 에탄올을 40 mg 첨가하여 과립을 형성한 후, 60℃에서 건조하고 타정기를 이용하여 정제로 타정하였다.
[제제예 3] 과립제
보글리보스, 그의 유도체 및 약학적으로 허용가능한 그들의 염으로 구성된 군에서 선택된 1종 이상을 함유하는 유효성분 150 mg, 포도당 100 mg, 홍삼추출물 50 mg 및 전분 600 mg을 혼합하고 30% 에탄올을 100 mg 첨가하여 과립을 형성한 후, 60℃에서 건조하여 과립을 형성한 다음 포에 충진하였다. 내용물의 최종 중량은 1 g으로 하였다.
[제제예 4] 드링크제
보글리보스 0.0025g, 포도당 10 g, 홍삼추출물 50 mg, 구연산 2 g 및 정제수 187.8 g을 혼합하고 병에 충진하였다. 내용물의 최종 용량은 200 ml로 하였다.
[제제예 5] 건강 식품의 제조
보글리보스..................................... 0.0025g
비타민 혼합물
비타민 A 아세테이트.......................70 ㎍
비타민 E ............................................ 1.0 ㎎
비타민 B1........................................... 0.13 ㎎
비타민 B2 .......................................... 0.15 ㎎
비타민 B6........................................... 0.5 ㎎
비타민 B12......................................... 0.2 ㎍
비타민 C............................................. 10 ㎎
비오틴.................................................. 10 ㎍
니코틴산아미드.................................. 1.7 ㎎
엽산...................................................... 50 ㎍
판토텐산 칼슘.................................... 0.5 ㎎
무기질 혼합물
황산제1철.......................................... 1.75 ㎎
산화아연.............................................. 0.82 ㎎
탄산마그네슘...................................... 25.3 ㎎
제1인산칼륨.......................................... 15 ㎎
제2인산칼슘.......................................... 55 ㎎
구연산칼륨............................................ 90 ㎎
탄산칼슘.............................................. 100 ㎎
염화마그네슘..................................... 24.8 ㎎
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
[제제예 6] 건강 음료의 제조
보글리보스.......................... 0.0025g
구연산..................................................... 1000 ㎎
올리고당..................................................... 100 g
매실농축액..................................................... 2 g
타우린............................................................ 1 g
정제수를 가하여 전체......................... 900 ㎖
통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2ℓ용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다.
상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용 용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비율을 임의로 변형 실시하여도 무방하다. 본 발명이 속한 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 상기 내용을 바탕으로 본 발명의 범주 내에서 다양한 응용 및 변형을 행하는 것이 가능할 것이다.
이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시태양일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
Claims (11)
- 제1항에 있어서, 상기 발리올아민 유도체는 보글리보스(voglibose, (1S,2S,3R,4S,5S)-5-(1,3-dihydroxypropan-2-ylamino)-1-(hydroxymethyl)cyclohexane-1,2,3,4-tetraol), 그의 유도체 또는 약학적으로 허용가능한 그들의 염을 포함하는, 피부 미백용 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 조성물은 발리올아민(valiolamine) 유도체 또는 약학적으로 허용가능한 그들의 염을 조성물 총 중량에 대하여 0.001~20 중량%로 함유하는, 피부 미백용 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 유효성분은 타이로시나아제의 발현을 억제하는, 피부 미백용 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 유효성분은 DOPA(3,4-dihydroxyphenylalanine)의 생성을 억제하는, 피부 미백용 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 유효성분은 도파옥시다제(dopaoxidase)의 생성을 억제하는, 피부 미백용 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 유효성분은 도파-퀴논(Dopa-quinone)의 생성을 억제하는, 피부 미백용 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 유효성분은 멜라닌의 생성을 억제하는, 피부 미백용 조성물.
- 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 화장료 조성물인, 조성물.
- 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 약학 조성물인, 조성물.
- 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 건강식품 조성물인, 조성물.
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KR20050097537A (ko) * | 2003-02-07 | 2005-10-07 | 아지노모토 가부시키가이샤 | 당뇨병 치료제 |
WO2007054203A2 (de) * | 2005-11-08 | 2007-05-18 | Henkel Ag & Co. Kgaa | Enzym / subtstrat sytem zur generierung von wasserstoffperoxid enthaltend sorbitol oxidase aus streptomyces c0elic0l0r und sorbitol |
WO2007086446A1 (ja) * | 2006-01-27 | 2007-08-02 | Daiichi Sankyo Company, Limited | 心不全の予防又は治療のための医薬組成物 |
-
2012
- 2012-05-18 KR KR1020120053095A patent/KR101904920B1/ko active IP Right Grant
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비특허문헌 (METABOLISM CLINICAL AND EXPERIMENTAL, 2006) * |
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