KR101936688B1 - 트롤룩스를 포함하는 미백용 조성물 - Google Patents

트롤룩스를 포함하는 미백용 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR101936688B1
KR101936688B1 KR1020120039939A KR20120039939A KR101936688B1 KR 101936688 B1 KR101936688 B1 KR 101936688B1 KR 1020120039939 A KR1020120039939 A KR 1020120039939A KR 20120039939 A KR20120039939 A KR 20120039939A KR 101936688 B1 KR101936688 B1 KR 101936688B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
composition
acid
trolox
present
inhibiting
Prior art date
Application number
KR1020120039939A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20130117445A (ko
Inventor
김주원
조은경
이태룡
Original Assignee
(주)아모레퍼시픽
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by (주)아모레퍼시픽 filed Critical (주)아모레퍼시픽
Priority to KR1020120039939A priority Critical patent/KR101936688B1/ko
Publication of KR20130117445A publication Critical patent/KR20130117445A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR101936688B1 publication Critical patent/KR101936688B1/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/49—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds
    • A61K8/4973—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with oxygen as the only hetero atom
    • A61K8/498—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with oxygen as the only hetero atom having 6-membered rings or their condensed derivatives, e.g. coumarin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
    • A23L29/03—Organic compounds
    • A23L29/035—Organic compounds containing oxygen as heteroatom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline 
    • A61K31/353—3,4-Dihydrobenzopyrans, e.g. chroman, catechin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/02—Preparations for care of the skin for chemically bleaching or whitening the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00—Function of food ingredients
    • A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/318—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on skin health and hair or coat

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

본 발명은 미백용 조성물에 관한 것으로서, 구체적으로는 트롤룩스를 포함하는 미백용 조성물에 관한 것이다.

Description

트롤룩스를 포함하는 미백용 조성물{WHITENING COMPOSITION CONTAINING TROLOX}
본 발명은 미백용 조성물에 관한 것으로서, 구체적으로는 트롤룩스를 포함하는 미백용 조성물에 관한 것이다.
멜라닌은 사람의 피부색을 결정하는 색소로 이 멜라닌의 양과 분포에 의해 피부색이 결정된다. 멜라닌을 만드는 세포는 피부 표피 밑에 멜라닌 형성 세포(Melanocyte)라고 불리는 세포에서 만들어져서 피부의 신진대사로 각질 표면으로 이동하여 떨어져 나간다. 피부색에 관계없이 멜라닌 형성 세포의 수는 거의 동일하다. 단지 멜라닌이 생성되는 양과 종류, 분포가 다르기 때문에 피부색이 차이가 나는 것이다.
피부에서 티로신(Tyrosine)이 티로시나제(Tyrosinase)라는 인체 효소에 의해 도파(DOPA)로 전환되고, 계속되는 일련의 산화과정을 통해 최종적으로 흑갈색의 중합체인 멜라닌이 생성된다.
멜라닌 형성 과정은 산화과정이므로 산화를 촉진하는 물질인 인체 내 활성산소나 자외선에 의해 생성된 활성산소에 의해서 더욱 촉진된다. 따라서 항산화제(비타민A/E, 플라보노이드, 탄닌 등)는 직접적인 멜라닌의 생성을 억제하지는 못해도 과다한 생성을 지연시키는 역할을 한다.
항산화는 간접적으로 미백을 도와준다. 자외선에 의해 생성된 자유 라디칼을 소거하여 과도한 멜라닌의 생성을 억제하는 것이다. 자외선 이외에도 피부 내 염증반응이나 담배연기, 매연 등의 자극에 의해 과도하게 생성된 자유 라디칼은 멜라닌 생성을 간접적으로 촉진하는 것으로 알려져 있다. 또한 멜라닌 생성 자체가 하나의 산화반응으로 특히 활성 산소 중에서 과산화물 음이온의 영향을 많이 받는다. 따라서 항산화 물질은 과도한 활성 산소를 제거하여 미백에 영향을 줄 수 있으나 현재까지 실제로 두드러진 미백 효과는 나타나지 않는 것으로 알려져 있다.
본 발명자들은 항산화제로 알려져 있는 트롤룩스가 티로시나제의 활성을 억제하여 미백 효능을 가지는 것을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.
대한민국 공개특허 제10-2005-0071605호
본 발명의 목적은 피부의 미백용 조성물을 제공하는 데 있다.
상기 목적을 달성하기 위해 본 발명은 화학식 1로 표시되는 트롤록스(Trolox, 6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxylic acid), 그의 유도체 또는 약학적으로 허용가능한 그들의 염을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물을 제공한다.
[화학식 1]
Figure 112012030521200-pat00001
본 발명의 저해제는 티로시나제의 활성을 저해하여, 멜라닌의 생성을 저해 또는 억제시켜서, 우수한 미백 효과를 가진다. 아울러, 미백 효과를 가지면서도 세포의 형태, 증식에 있어서 변형을 초래하지 않으며, 세포 독성 성분을 가지지 않아 무해하다는 장점이 있다. 특히, 본 발명은 미백 효과를 위한 원료로서 트롤룩스를 사용할 수 있음을 밝힌 것에 그 의의가 있다.
도 1은 트롤룩스에 의한 멜라닌 생성 감소 효과를 보인다.
도 2 또한 트롤룩스에 의한 멜라닌 생성 감소 효과를 보이며, 멜라닌을 정량하였다.
도 3은 트롤룩스에 의한 타이로시나제의 활성 감소에 관한 것이다.
도 4는 트롤룩스에 의한 MNT-1세포의 형태 변화가 없는 것을 보여준다.
도 5는 트롤룩스가 세포 증식에 영향을 미치지 않음을 보여준다.
도 6은 트롤룩스에 의한 세포 독성이 없음을 나타낸다.
도 7은 트롤룩스에 의한 멜라노 생성과 관련된 유전자의 발현을 보여준다.
도 8은 트롤룩스에 의한 멜라노 생성과 관련된 단백질의 발현을 보여준다.
본 발명은 일 관점에서 화학식 1로 표시되는 트롤록스(Trolox, 6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxylic acid), 그의 유도체 또는 약학적으로 허용가능한 그들의 염을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물에 관한 것이다.
[화학식 1]
Figure 112012030521200-pat00002
본 명세서에서 "트롤룩스의 유도체"는 트롤룩스의 치환 가능한 위치에서 다른 치환기로 변경되는 모든 화합물을 의미하는 것이며, 이러한 치환기의 종류에는 제한이 없다. 일 구현예로서, 상기 트롤룩스 유도체는 화학식 2를 의미할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 하기 화학식 2에서 R1, R2, R3 또는 R4 위치에 치환가능한 치환기의 종류에는 제한이 없으나, 예컨대 알킬기, 알콕시기, 알케닐기 또는 알키닐기를 포함할 수 있다. 구체적으로, 하기 화학식 2의 R1, R2, R3 또는 R4 치환기는 C2 내지 C18의 알킬기, C1 내지 C18의 알콕시기, C1 내지 C18의 알케닐기 또는 C1 내지 C18의 알키닐기를 포함할 수 있다.
[화학식 2]
Figure 112012030521200-pat00003
본 명세서에서 "약학적으로 허용 가능"이란 통상의 의약적 복용량(medicinal dosage)으로 이용할 때 상당한 독성 효과를 피함으로써, 동물, 더 구체적으로는 인간에게 사용할 수 있다는 정부 또는 이에 준하는 규제 기구의 승인을 받을 수 있거나 승인 받거나, 또는 약전에 열거되거나 기타 일반적인 약전으로 인지되는 것을 의미한다.
본 명세서에서 "약학적으로 허용 가능한 염"은 약학적으로 허용 가능하고 모 화합물(parent compound)의 바람직한 약리 활성을 갖는 본 발명의 일 관점에 따른 염을 의미한다. 상기 염은 (1) 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 인산 등과 같은 무기산으로 형성되거나; 또는 아세트산, 프로파이온산, 헥사노산, 시클로펜테인프로피온산, 글라이콜산, 피루브산, 락트산, 말론산, 숙신산, 말산, 말레산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 3-(4-히드록시벤조일) 벤조산, 신남산, 만델산, 메테인설폰산, 에테인설폰산, 1,2-에테인-디설폰산, 2-히드록시에테인설폰산, 벤젠설폰산, 4-클로로벤젠설폰산, 2-나프탈렌설폰산, 4-톨루엔설폰산, 캄퍼설폰산, 4-메틸바이시클로 [2,2,2]-oct-2-엔-1-카르복실산, 글루코헵톤산, 3-페닐프로파이온산, 트리메틸아세트산, tert-부틸아세트산, 라우릴 황산, 글루콘산, 글루탐산, 히드록시나프토산, 살리실산, 스테아르산, 뮤콘산과 같은 유기산으로 형성되는 산 부가염(acid addition salt); 또는 (2) 모 화합물에 존재하는 산성 프로톤이 치환될 때 형성되는 염을 포함할 수 있다.
본 명세서에서 "유효성분"은 단독으로 목적하는 활성을 나타내거나 또는 그 자체 활성이 없는 담체와 함께 활성을 나타낼 수 있는 성분을 의미하는 것이다.
본 명세서에서, "피부 미백"은 멜라닌의 생성이 저해됨에 따른 결과로서 이해되는데, 구체적으로는 멜라닌의 생성에 의한 증상, 예컨대 기미, 주근깨, 피부노화 등의 예방, 발현 지연 또는 치료를 의미하는 것이다.
본 발명의 일 관점인 피부 미백용 조성물에 있어서, 상기 조성물은 트롤록스, 그의 유도체 또는 약학적으로 허용가능한 그들의 염을 조성물 총 중량에 대하여 0.000025~0.025중량%로 함유할 수 있다. 트롤록스, 그의 유도체 또는 약학적으로 허용가능한 그들의 염이 0.000025중량% 미만으로 함유되면 피부의 미백을 위하여 티로시나제의 활성을 저해시키기에 충분하지 못하고, 0.025중량%를 초과하여 함유되면 다른 성분의 함량 및 제형화에 있어서 적절하지 못하다. 상기와 같은 관점에서, 본 발명의 일 관점인 피부 미백용 조성물은 트롤록스, 그의 유도체 또는 약학적으로 허용가능한 그들의 염을 조성물 총 중량에 대하여 0.00005~0.022중량%, 0.000075~0.019중량%, 0.0001~0.016중량%, 0.000125~0.013중량%, 0.00025~0.011중량%, 0.00075~0.008중량% 또는 0.001~0.005중량%의 농도로 포함할 수 있다.
본 발명의 일 관점인 피부 미백용 조성물에 있어서, 상기 유효성분은 티로시나제의 활성 저해용을 포함한다.
본 명세서의 "티로시나제(tyrosinase) 활성 저해용"는 티로시나제의 활성을 억제하거나 저해시킬 수 있는 용도를 의미한다. 구체적으로, 상기 티로시나제를 억제함에 따라, 티로신이 도파 (DOPA)로 전환되는 것을 억제하거나 저해시킬 수 있고, 도파옥시다제(dopaoxidase)의 활성을 억제하거나 저해시킬 수 있으며, 도파가 도파-퀴논(Dopa-quinone)으로 전환되는 것을 억제하거나 저해시켜서, 멜라닌의 생성을 억제하거나 저해시킬 수 있다.
본 발명의 일 관점인 피부 미백용 조성물에 있어서, 상기 유효성분은 DOPA(3,4-dihydroxyphenylalanine) 생성 억제용을 포함한다.
본 명세서의 "DOPA(3,4-dihydroxyphenylalanine) 생성 억제용"는 DOPA의 생성을 억제하거나 저해시킬 수 있는 용도를 의미한다. 구체적으로, 상기 DOPA를 억제함에 따라, 도파옥시다제(dopaoxidase)의 기능을 억제하거나 저해시킬 수 있으며, 도파가 도파-퀴논(Dopa-quinone)으로 전환되는 것을 억제하거나 저해시켜서, 멜라닌의 생성을 억제하거나 저해시킬 수 있다.
본 발명의 일 관점인 피부 미백용 조성물에 있어서, 상기 유효성분은 도파옥시다제(dopaoxidase)의 활성 저해용일 수 있다.
본 명세서의 "도파옥시다제(dopaoxidase)의 활성 저해용"는 DOPA의 생성을 억제하거나 저해시켜서, 도파옥시다제(dopaoxidase)가 작용하는 대상의 농도를 낮추어 줌으로 인하여, 도파-퀴논(Dopa-quinone)의 생성을 억제하거나 저해시켜서, 멜라닌의 생성을 억제하거나 저해시킬 수 있다.
본 발명의 일 관점인 피부 미백용 조성물에 있어서, 상기 유효성분은 도파-퀴논(Dopa-quinone) 생성 억제용일 수 있다.
본 명세서의 "도파-퀴논(Dopa-quinone) 생성 억제용"는 도파-퀴논(Dopa-quinone)의 생성을 억제하거나 저해시켜서, 멜라닌의 생성을 억제하거나 저해시키는 용도를 의미한다.
본 발명의 일 관점인 피부 미백용 조성물에 있어서, 상기 유효성분은 멜라닌 생성 억제용일 수 있다.
본 명세서에서 "멜라닌 생성 억제"는 멜라닌을 생성하는 체내 기작의 업-스트림(up-stream)에 관여하는 단백질 또는 효소의 활성을 억제하거나 저해함에 따라, 멜라닌의 생성을 억제하거나 저해하는 것을 의미한다.
본 발명의 일 관점인 조성물에 있어서, 상기 조성물은 화장료 조성물일 수 있다.
상기 화장료 조성물은 제형이 특별히 한정되지 않으며, 목적하는 바에 따라 적절히 선택할 수 있다. 예를 들어, 유연화장수(스킨로션 및 밀크로션), 영양화장수, 에센스, 영양크림, 마사지크림, 팩, 젤, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 파우더, 보디로션, 보디크림, 보디오일 및 보디 에센스로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 제형으로 제조될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 아울러, 상기 화장료 조성물은 연고, 패치 등의 형태로 피부 외용제의 제형으로 사용하는 것을 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물은 국소 적용에 적합한 모든 제형으로 제공될 수 있다. 예를 들면, 용액, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 유상에 수상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 고체, 겔, 분말, 페이스트, 포말(foam) 또는 에어로졸 조성물의 제형으로 제공될 수 있다. 이러한 제형의 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물은 상기한 물질 이외에 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서, 바람직하게는 주 효과에 상승 효과를 줄 수 있는 다른 성분들을 포함할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 화장료 조성물은 보습제, 에몰리언트제, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, pH 조정제, 유기 및 무기 안료, 향료, 냉감제 또는 제한제를 더 포함할 수 있다. 상기 성분의 배합량은 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 당업자가 용이하게 선정 가능하며, 그 배합량은 조성물 전체 중량을 기준으로 0.01 내지 5 중량%, 구체적으로 0.01 내지 3 중량%일 수 있다.
본 발명의 일 관점인 조성물에 있어서, 상기 조성물은 약학 조성물일 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물의 제형은 용액제, 현탁제, 유액제, 겔, 점적제, 좌제(坐劑), 패취 또는 분무제일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 제형은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 용이하게 제조될 수 있으며, 부형제, 수화제, 유화 촉진제, 현탁제, 삼투압 조절을 위한 염 또는 완충제, 착색제, 향신료, 안정화제, 방부제, 보존제 또는 기타 상용하는 보조제를 적당히 사용할 수 있다.
본 발명의 약학 조성물의 유효 성분은 투여 받을 대상의 연령, 성별, 체중, 병리 상태 및 그 심각도, 투여 경로 또는 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 적용량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 이의 1일 투여 용량은 예를 들어 0.000025g/g/일 내지 0.025g/g/일, 보다 구체적으로는 0.00025g /g/일 내지 0.01g/g/일이 될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 약학 조성물은 경구 또는 경피로 투여될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 일 관점인 조성물에 있어서, 상기 조성물은 건강식품 조성물일 수 있다.
본 발명의 건강식품 조성물은 다양한 형태의 식품 첨가제 또는 기능성 식품을 제공한다. 상기 조성물을 포함하는 침출차, 액상차, 음료, 발효유, 치즈, 요구르트, 주스, 생균제제 및 건강보조식품 등으로 가공될 수 있으며, 그 외 다양한 식품 첨가제의 형태로 사용될 수 있다.
일 실시예에서 상기 조성물은, 본 발명이 목적으로 하는 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 주 효과에 상승 효과를 줄 수 있는 다른 성분 등을 함유할 수 있다. 예를 들어, 물성 개선을 위하여 향료, 색소, 살균제, 산화방지제, 방부제, 보습제, 점증제, 무기염류, 유화제 및 합성 고분자 물질 등의 첨가제를 더 포함할 수 있다. 그 외에도, 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당 및 해초 엑기스 등의 보조 성분을 더 포함할 수도 있다. 상기 성분들은 제형 또는 사용 목적에 따라서 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있으며, 그 첨가량은 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 선택될 수 있다. 예를 들어, 상기 성분들의 첨가량은, 조성물 전체 중량을 기준으로, 0.01~5 중량%, 보다 구체적으로는 0.01~3 중량% 범위일 수 있다.
본 발명에 따른 조성물의 제형은 용액, 유화물, 점성형 혼합물, 타블렛, 분말 등의 다양한 형태일 수 있으며, 이는 단순 음용, 주사 투여, 스프레이 방식 또는 스퀴즈 방식 등의 다양한 방법으로 투여될 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
[ 실시예 1] 멜라닌 양 측정 실험
멜라닌 생성이 과도한 MNT-1 세포(Human melanoma cell line, Lonza, SWISS)에 1nM, 10nM, 100nM, 1μM, 10μM, 100μM 트롤룩스를 하루에 한번씩 이틀간 처리한 후, 세포 용해질을 원심분리(eppendorf, centrifuge 5415R, Germany)하여 그 펠렛을 분리해 색깔을 관찰하였다 (도 1). 수산화나트륨으로 상기 펠렛 속의 내용물을 용해시키고, 멜라닌 색소에 특이적인 OD490에서 흡광도를 측정하고 전체 단백질 양으로 보정하였다 (도 2).
그 결과, 트롤룩스의 처리에 의하여 멜라닌 생성이 감소되었으며, 특히 100 nM의 트롤룩스를 처리하면 멜라닌의 생성량이 현저히 감소하는 것을 확인할 수 있었다.
[ 실시예 2] 타이로시나제 활성 억제 실험
실시예 1에서 얻어진 세포 용해질에 DOPA (dihydroxyphenylalanine)를 첨가하였다. DOPA로부터 타이로시나제의 작용으로 생성되는 도파크롬(dopachrome)의 생성량을 OD490의 흡광도를 이용하여 비교하였다 (도 3).
그 결과, 트롤룩스의 처리에 의하여 타이로시나제 활성 감소 효과를 보이며 특히 100 nM에서 타이로시나제 활성이 현저히 감소된 것을 확인할 수 있었다.
[ 실시예 3] 안정성 평가
[ 실시예 3-1] 세포 형태 관찰
100nM 트롤록스를 하루에 한번씩 이틀간 처리한 세포를 현미경(Olympus IX71, Japan)의 DP70 camera를 이용하여 촬영하였다.
그 결과(도 4), 멜라닌 생성이 현저하게 감소한 100 nM 에서 세포 형태는 변화가 없었다.
[ 실시예 3-2] 세포 증식 관찰
멜라닌 생성이 과도한 MNT-1세포에 1nM, 10nM, 100nM, 1μM, 10μM, 100μM의 트롤룩스를 하루에 한번씩 이틀간 처리한 후, MTT-1 assay를 이용하여 살아있는 세포의 비율을 측정하였다.
MTT assay는 탈수소 효소작용에 의하여 노란색의 수용성 기질인 MTT 테트라조리움(MTT tetrazolium)을 청자색을 띄는 비수용성의 MTT 포르마잔(MTT formazan) (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)- 2,5-diphenyl-tetrazolium bromide)으로 환원시키는 미토콘드리아의 능력을 이용하는 검사법이다. MTT 포르마잔의 흡광도는 540nm의 파장에서 최대가 되며, 이 파장에서 측정된 흡광도는 살아있고 대사가 왕성한 세포의 농도를 반영한다.
1. 상기 트롤룩스를 처리한 세포 각각의 세포 부유액을 해마사이토미터(haemacytometer)를 사용하여 카운팅(counting)한 다음, 96 웰 플레이트의 각 웰에 목표하는 적정농도의 세포 부유액 180ul를 넣었다.
- 블랭크(Blank) ; 배지 180ul와 PBS 20ul.
- 대조군 (Control) ; 세포부유액 180ul와 PBS 20ul
2. 측정하고자 하는 시료는 PBS에 녹인 후 농도별로 20ul씩 각 웰에 첨가하
였다.
3. 1시간 동안 배양하였다.
4. 시료를 제거하고, 각 웰에 MTT 용액을 100ul씩 첨가하였다.
5. 1시간동안 배양한 후, MTT 희석액을 제거하였다.
6. 각 웰에 100ul의 DMSO를 첨가하고 15-20분간 플레이트 쉐이커로 흔들었다.
7. ELISA 리더를 사용하여 파장 540nm에서 흡광도를 측정하였다.
(이 흡광도는 MTT가 세포의 의해 환원된 양을 나타내며 각 웰에 존재하는 생존 세포수와 비례한다.)
그 결과 (도 5), 트록룩스의 처리가 세포 증식에 영향을 주지 않는 것으로 확인되었다.
[ 실시예 3-3] 세포 독성 관찰
1.100 μl의 MNT-1 세포(Human melanoma cell line, Lonza, SWISS)에 부유액을 96-웰 플레이트에서 24시간 동안 전배양하였다.
2.상기 전배양한 부유액 10 μl에 1nM, 10nM, 100nM, 1μM, 10μM, 100μM 트롤룩스를 각각 첨가하여 이틀동안 배양시켰다.
3.시료를 제거하고, 각 웰에 MTT 용액을 100ul씩 첨가하였다.
4. 1시간동안 배양한 후, MTT 희석액을 제거하였다.
5. 각 웰에 100ul의 DMSO를 첨가하여 15-20분간 플레이트 쉐이커로 흔들어 주었다.
6. ELISA 리더를 사용하여 파장 540nm에서 흡광도를 측정하였다.
그 결과 (도 6), 트록룩스의 처리가 세포 독성에 영향을 주지 않는 것으로 확인되었다.
[ 실시예 4] 유전자/단백질 발현
실시예 1에서 얻어진 세포 용해질을 이용하여, Q-PCR (mRNA), 웨스턴 블롯 시험 (단백질)을 진행하였다.
100ul 트롤록스를 이틀간 MNT-1 세포(Human melanoma cell line, Lonza, SWISS)에 처리하였다. 이로부터 분리한 RNA로부터 cDNA를 합성하였고, MITF, Tyrosinase, TYRP1, DCT의 프라이머를 이용하여 Q-PCR (Applied biosystems, 7500 Fast)로 mRNA양의 변화를 측정하였다.
100ul 트롤록스를 이틀간 MNT-1 세포(Human melanoma cell line, Lonza, SWISS)에 처리하였다. 상기 세포의 용해물 20ug을 로딩하여 웨스턴블랏으로 MITF, Tyrosinase, TYRP1, DCT의 단백질 발현량을 확인하였다.
그 결과 (도 7 및 도 8), 트로룩스의 처리에 의한 멜라닌 생성의 감소는 타이로시나제, DCT의 감소에 의한 것으로 확인되었다.
이하, 본 발명에 따른 조성물의 제형 예를 설명하나, 약학 조성물 및 화장료 조성물은 여러 가지 제형으로 응용 가능하며, 이는 본 발명을 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
[제형예 1] 유연화장수(스킨로션)
배합 성분 함량 (중량 %)
트롤록스 0.0025
글리세린 3.0
부틸렌글리콜 2.0
프로필렌글리콜 2.0
카르복시비닐폴리머 0.1
피이지-12 노닐페닐에테르 0.2
폴리솔베이트 80 0.4
에탄올 10.0
트리에탄올아민 0.1
방부제, 색소, 향료 적량
정제수 잔량
[제형예 2] 영양화장수(밀크로션)
배합 성분 함량 (중량 %)
트롤록스 0.0025
글리세린 3.0
부틸렌글리콜 3.0
프로필렌글리콜 3.0
카르복시비닐폴리머 0.1
밀납 4.0
폴리솔베이트 60 1.5
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 5.0
스쿠알란 5.0
솔비타세스퀴올레이트 1.5
유동파라핀 0.5
세테아릴 알코올 1.0
트리에탄올아민 0.2
방부제, 색소, 향료 적량
정제수 잔량
[제형예 3] 영양크림
배합 성분 함량(중량%)
트롤록스 0.0025
글리세린 3.0
부틸렌글리콜 3.0
유동파라핀 7.0
베타글루칸 7.0
카보머 0.1
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 3.0
스쿠알란 5.0
세테아릴 글루코사이드 1.5
소르비탄 스테아레이트 0.4
폴리솔베이트 60 1.2
트리에탄올아민 0.1
방부제, 색소, 향료 적량
정제수 잔량
[제형예 4] 마사지 크림
배합 성분 함량(중량%)
트롤록스 0.0025
글리세린 8.0
부틸렌글리콜 4.0
유동파라핀 45.0
베타글루칸 7.0
카보머 0.1
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 3.0
밀납 4.0
세테아릴 글루코사이드 1.5
세스퀴 올레인산 소르비탄 0.9
바세린 3.0
파라핀 1.5
방부제, 색소, 향료 적량
정제수 잔량
[제형예 5] 팩
배합 성분 함량(중량%)
트롤록스 0.0025
글리세린 4.0
폴리비닐알콜 15.0
히알루론산 추출물 5.0
베타글루칸 7.0
알란토인 0.1
노닐 페닐에테르 0.4
폴리솔베이트 60 1.2
에탄올 방부제 6.0적량
방부제, 색소, 향료 적량
정제수 잔량
[제형예 6] 연고
배합 성분 함량(중량%)
트롤록스 0.0025
글리세린 8.0
부틸렌글리콜 4.0
유동파라핀 15.0
베타글루칸 7.0
카보머 0.1
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 3.0
스쿠알란 1.0
세테아릴 글루코사이드 1.5
소르비탄 스테아레이트 0.4
세테아릴 알코올 1.0
밀납 4.0
방부제, 색소, 향료 적량
정제수 잔량
[제제예 1] 연질캅셀제
트롤록스 0.0025g, 홍삼추출물 50 mg, 팜유 2 mg, 팜경화유 8 mg, 황납 4 mg 및 레시틴 6 mg을 혼합하고, 통상의 방법에 따라 1 캡슐당 400 mg씩 충진하여 연질캅셀을 제조하였다.
[제제예 2] 정제
트롤록스 0.0025g, 포도당 100 mg, 홍삼추출물 50 mg, 전분 96 mg 및 마그네슘 스테아레이트 4 mg을 혼합하고 30% 에탄올을 40 mg 첨가하여 과립을 형성한 후, 60℃에서 건조하고 타정기를 이용하여 정제로 타정하였다.
[제제예 3] 과립제
트롤록스, 그의 유도체 및 약학적으로 허용가능한 그들의 염으로 구성된 군에서 선택된 1종 이상을 함유하는 유효성분 150 mg, 포도당 100 mg, 홍삼추출물 50 mg 및 전분 600 mg을 혼합하고 30% 에탄올을 100 mg 첨가하여 과립을 형성한 후, 60℃에서 건조하여 과립을 형성한 다음 포에 충진하였다. 내용물의 최종 중량은 1 g으로 하였다.
[제제예 4] 드링크제
트롤록스 0.0025g, 포도당 10 g, 홍삼추출물 50 mg, 구연산 2 g 및 정제수 187.8 g을 혼합하고 병에 충진하였다. 내용물의 최종 용량은 200 ml로 하였다.
[제제예 5] 건강 식품의 제조
트롤록스.......................... 0.0025g
비타민 혼합물
비타민 A 아세테이트.......................70 ㎍
비타민 E ............................................ 1.0 ㎎
비타민 B1........................................... 0.13 ㎎
비타민 B2 .......................................... 0.15 ㎎
비타민 B6........................................... 0.5 ㎎
비타민 B12......................................... 0.2 ㎍
비타민 C............................................. 10 ㎎
비오틴.................................................. 10 ㎍
니코틴산아미드.................................. 1.7 ㎎
엽산...................................................... 50 ㎍
판토텐산 칼슘.................................... 0.5 ㎎
무기질 혼합물
황산제1철.......................................... 1.75 ㎎
산화아연.............................................. 0.82 ㎎
탄산마그네슘...................................... 25.3 ㎎
제1인산칼륨.......................................... 15 ㎎
제2인산칼슘.......................................... 55 ㎎
구연산칼륨............................................ 90 ㎎
탄산칼슘.............................................. 100 ㎎
염화마그네슘..................................... 24.8 ㎎
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
[제제예 6] 건강 음료의 제조
트롤록스.......................... 0.0025g
구연산..................................................... 1000 ㎎
올리고당..................................................... 100 g
매실농축액..................................................... 2 g
타우린............................................................ 1 g
정제수를 가하여 전체......................... 900 ㎖
통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2ℓ용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다.
상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용 용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비율을 임의로 변형 실시하여도 무방하다. 본 발명이 속한 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 상기 내용을 바탕으로 본 발명의 범주 내에서 다양한 응용 및 변형을 행하는 것이 가능할 것이다.
이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시태양일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (10)

  1. 피부 미백용 화장료 조성물로서,
    화학식 1로 표시되는 트롤록스(Trolox, 6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxylic acid), 또는 약학적으로 허용가능한 그들의 염을 유효성분으로 포함하고,
    [화학식 1]
    Figure 112019500954850-pat00004

    상기 조성물은 트롤록스, 또는 약학적으로 허용가능한 그들의 염을 조성물 총 중량에 대하여 1 nM 내지 10 μM로 함유하는, 피부 미백용 화장료 조성물.
  2. 피부 미백용 식품용 조성물로서,
    화학식 1로 표시되는 트롤록스(Trolox, 6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxylic acid), 또는 약학적으로 허용가능한 그들의 염을 유효성분으로 포함하고,
    [화학식 1]
    Figure 112019500954850-pat00013

    상기 조성물은 트롤록스, 또는 약학적으로 허용가능한 그들의 염을 조성물 총 중량에 대하여 1 nM 내지 10 μM로 함유하는, 피부 미백용 화장료 조성물.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 유효성분은 티로시나제의 활성 저해용인, 조성물.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 유효성분은 DOPA(3,4-dihydroxyphenylalanine) 생성 억제용인, 조성물.
  5. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 유효성분은 도파옥시다제(dopaoxidase)의 활성 저해용인, 피부 미백용 조성물.
  6. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 유효성분은 도파-퀴논(Dopa-quinone) 생성 억제용인, 조성물.
  7. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 유효성분은 멜라닌 생성 억제용인, 조성물.
  8. 삭제
  9. 삭제
  10. 삭제
KR1020120039939A 2012-04-17 2012-04-17 트롤룩스를 포함하는 미백용 조성물 KR101936688B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020120039939A KR101936688B1 (ko) 2012-04-17 2012-04-17 트롤룩스를 포함하는 미백용 조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020120039939A KR101936688B1 (ko) 2012-04-17 2012-04-17 트롤룩스를 포함하는 미백용 조성물

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20130117445A KR20130117445A (ko) 2013-10-28
KR101936688B1 true KR101936688B1 (ko) 2019-04-09

Family

ID=49636201

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020120039939A KR101936688B1 (ko) 2012-04-17 2012-04-17 트롤룩스를 포함하는 미백용 조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR101936688B1 (ko)

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100456974B1 (ko) * 2002-05-10 2004-11-10 주식회사 태평양 신규한 크로만 유도체 및 이의 제조방법, 및 이를함유하는 피부 외용제 조성물
CA2503196C (en) 2002-10-21 2011-08-02 Metaproteomics, Llc Compositions that treat or inhibit pathological conditions associated with inflammatory response

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry, Vol.73, No.3, pp.627-632, 2009

Also Published As

Publication number Publication date
KR20130117445A (ko) 2013-10-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101909235B1 (ko) 피부주름 개선 및 탄력 증진용 조성물
KR20150057911A (ko) 항염증 또는 피부 미백용 조성물
US20160271028A1 (en) Novel use of panduratin derivatives or extract of kaempferia pandurata comprising the same
KR20210014231A (ko) 해조류 추출물을 함유하는 근육 질환 예방 또는 치료용 또는 근 기능 개선용 조성물
KR20180106155A (ko) 천연 혼합물의 발효물질을 포함하는 미백 및 보습기능성 조성물
JP6753602B2 (ja) プロトンポンプ機能促進剤
KR102371419B1 (ko) 신규한 퀘르세틴계 화합물을 포함하는 미백용 조성물
KR102158134B1 (ko) 오미자 추출물을 유효성분으로 함유하는 항균용 조성물
KR101936688B1 (ko) 트롤룩스를 포함하는 미백용 조성물
KR102123588B1 (ko) 복합 해조류 발효 추출물을 함유하는 항산화 및 미백 활성 조성물
KR102359443B1 (ko) 후발효차 유래의 신규한 캄페롤계 화합물을 포함하는 항염 조성물
JP4413272B1 (ja) ヒアルロン酸産生促進剤
JP6045164B2 (ja) 長命草ポリフェノール並びにビタミンｅ及び／又はビタミンｃを含む組成物
KR101746622B1 (ko) 땅빈대 발효물을 포함하는 미백용 조성물
KR101965590B1 (ko) Ａｂｈ 항원의 발현을 조절하는 물질을 포함하는 피부 미백용 조성물
KR101936689B1 (ko) Ａｒｐ１０１을 포함하는 피부 미백용 조성물
KR101940052B1 (ko) 포제 추출물을 포함하는 조성물
EP3510991A1 (en) Skin anti-aging composition containing dehydrogenated abietic acid and compound k
KR101904920B1 (ko) 보글리보스를 포함하는 피부 미백용 조성물
KR101436923B1 (ko) 서시움 속 식물 추출물을 포함하는 항균용 구강 조성물
KR102359442B1 (ko) 신규한 퀘르세틴계 화합물을 포함하는 항염 조성물
KR102394640B1 (ko) 후발효차 유래의 신규한 캄페롤계 화합물을 포함하는 미백용 조성물
KR20140017259A (ko) 비타민 ｃ와 트롤룩스를 포함하는 미백용 조성물
KR20180010084A (ko) 3-O-갈로일-3,3',5,5',7-펜타하이드록시플라반(3-O-galloyl-3,3',5,5',7- pentahydroxyflavan)을 포함하는 보습용 조성물
CN112912057A (zh) 含有聚酯型儿茶素a的化妆料组合物

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right