KR20130115786A - 탈모 방지 및 모발 생장 촉진용 한방 조성물, 그리고 이의 제조 방법 - Google Patents

Abstract

상황버섯 추출물, 황금 추출물, 목단피 추출물, 산수유 추출물, 칡 추출물, 고삼 추출물, 숙지황 추출물, 녹차잎 추출물 및 금은화 추출물을 포함하는 한방 추출물; 및 제니스테인(genistein) 및 레스베라트롤(resveratrol)을 포함하는 폴리페놀을 포함하는 탈모 방지 및 모발 생장 촉진용 한방 조성물, 그리고 이의 제조 방법이 제공된다.

Description

탈모 방지 및 모발 생장 촉진용 한방 조성물, 그리고 이의 제조 방법{ORIENTAL COMPOSITION FOR PREVENTING LOSS OF HAIR AND PROMOTING GROWTH OF HAIR, AND METHOD OF PREPARING THE SAME}

본 발명은 탈모 방지 및 모발 생장 촉진용 한방 조성물, 그리고 이의 제조 방법에 관한 것이다.

머리카락은 태양광선으로부터 두피를 보호하며, 건강을 나타내는 중요한 척도로 건강이 나빠졌을 때 머리카락이 거칠어지거나 빠지는 현상이 나타난다. 인간의 머리는 보통 100,000 개의 성모가 있으며, 이들이 생장기(anagen), 퇴행기(catagen), 휴지기(telogen) 및 탈모기(exogen)의 주기적인 변화를 거치면서 생성 및 소멸을 반복한다.

탈모란 머리카락이 새로 나는 숫자보다 빠지는 숫자가 많은 상태를 말하는 것으로, 탈모의 원인은 개인마다 차이가 있지만 유전적인 요인 및 호르몬의 영향을 포함하여 노화에 의한 두피 세포의 퇴화, 모근에 공급되는 영양소의 부족, 두피 세포의 과다한 각질/피지 배출로 인한 산소공급의 부족, 모공의 폐쇄현상, 스트레스와 질병으로 인한 두피 염증 등을 들 수 있다.

탈모증은 크게 반흥성과 비반흥성으로 구분된다. 반흥성 탈모증은 모낭이 파괴되고 섬유 조직이 생겨 영구적 탈모상태가 되는 것으로, 화상이나 상처 등의 외상, 방사선 피부염, 감염, 모낭염, 모공성 편평태선, 홍반성 루푸스, 경피증, 종양 등이 원인이 된다. 반면 비반흥성 탈모증은 조직이 섬유화 되지 않고 모낭도 그대로 보존되는 탈모증으로 원형 탈모증, 남성형 탈모증, 생장기 모발탈모증, 발모벽 등이 있으며, 비반흥성 탈모도 질병이 계속되면 반흥성 탈모로 전환될 수 있으며, 반흥성 탈모가 되면 내과적으로 치료가 되지 않는다.

비반흥성 탈모증 중 원형 탈모증은 90% 이상이 스트레스가 원인이며, 한 두 개의 원형이나 타원형의 탈모가 발생하는데 이는 두피뿐만 아니라 눈썹, 속눈썹, 수염 등에서도 나타나며, 심한 경우 원형 탈모증이 진행되어 전두 탈모증이나 전신 탈모증으로 진행되기도 한다.

남성형 탈모증은 남성 호르몬에 의한 탈모증으로 이 증상을 보이는 환자들의 두피를 보면 기름기가 많아서 유달리 번들거리는 것이 관찰되는데, 이는 호르몬의 영향으로 피지선이 발달하여 피지를 많이 분비하기 때문이며 지루성 피부염이 생겨 탈모를 더욱 촉진시킨다. 남성 호르몬(안드로겐)은 부신 피질 및 성선에서 합성, 분비되며 가장 강력하고 대표적인 것이 테스토스테론(testosterone)이다.

테스토스테론은 5알파-리덕타아제(5α-reductase)라는 효소에 의해서 활성형 남성 호르몬인 디하이드로테스토스테론(dihydrotestosterone)으로 전환된다. 5알파-리덕타아제(5a-reductase)는 모근에 존재하며 디하이드로테스토스테론이 모낭의 생장기를 단축시키고 모낭의 크기도 감소시키는 역할을 한다. 즉, 굵고 검은 머리털이 충분히 자라지 못하고 점점 가늘어지고 힘이 없어지면서 정상보다 훨씬 빨리 빠지도록 작용, 헤어 사이클을 단축시키기 때문에 처음에는 머리카락이 힘이 없고 가늘어지다 점차로 머리가 빠지고 새로 나지 않게 된다.

이처럼 남성형 탈모증은 여러 가지 유전자가 어떤 환경적인 요인들과 상호 작용하여 발현되는 유전질환이다.

현재 약효가 알려져 세계적으로 사용되고 있는 제제는 '미녹시딜'과 최근 미국 식품의약국(FDA)의 공인을 받은 '피나스테라이드'가 있으며, 이들은 효과가 제한적이기 때문에 완벽하게 대머리를 치료하지는 못한다. 남성 호르몬 외에도 사이토킨, EGF(epidermal growth factor), PDGF(platelet-derived growth factor), TGF-α(transforming growth factor-α), TGF-β 등과 같은 성장 요소들도 모발의 성장에 영향을 미친다.

탈모 환자의 조직검사에서 염증 소견이 약 50%에서 관찰되는데 이것이 사이토킨과 성장 요소들을 자극한다. EGF와 TGF-α는 곤봉모와 같은 구조 형성을 촉진하며 TGF-β는 모발 성장을 억제한다. 유전적 요인과 호르몬에 의한 탈모의 생리적 인자들과 더불어, 모발 손상의 원인에는 물리적 원인과 화학적 원인으로 나눌 수 있다. 물리적 원인은 기술적인 자극(브러싱이나 역모), 열, 등에 의한 것으로 주로 형태적인 변화를 주지만, 웨이브제나 염색제 등에 의해 모발성분에 화학적 변화를 주어 질적 손상을 일으키며, 모발의 큐티클에서 시작된 손상은 모피질에 까지 영향을 주게 되며, 모발의 멜라닌 색소가 자외선에 의해 산화 반응이 일어나 탈색된다.

이외에도 커트, 대기오염, 과도한 다이어트, 편식 등에 의해서도 모발의 손상이 일어난다. 현대 사회는 다양한 오염물질, 물리적 작용 인자, 과도한 흡연 및 스트레스에 의해 여러 종류의 산화적 스트레스를 받게 되며 이로 인해 탈모증으로 연결된다.

현재 탈모 방지 및 모발생장 촉진에 대한 다양한 제품들이 출시되어 널리 사용되고 있으나, 이들 제품들 중 일부 제품에는 유해성 논란이 일고 있는 파라벤 등의 화학적 보존제 등이 사용되고 있으며, 상기 화학적 보존제는 세포의 미토콘드리아를 공격하여 세포 돌연변이을 일으키고 세포 사멸을 촉진하는 등 세포독성을 유발시킨다는 연구 결과가 보고되고 있다.

그리고, 탈모 방지 및 모발생장 촉진에 대한 특허 문헌들이 존재하는데, 예를 들면, 한국공개특허 제2004-0008916호는 우골, 우담낭, 기타 우지에서 추출된 기름, 카세인 등을 함유한 머리비누에 관한 것이고, 한국등록특허 제0609210호는 당귀뿌리 및 우엉뿌리에서 에탄올에 의해 추출된 추출물을 함유하는 샴푸 조성물에 관한 것이며, 한국공개특허 제2004-0105048호는 인삼, 뽕잎, 솔입, 감초, 백작약 및 하수오를 물에 넣고 감압 저온 중탕하여 추출한 추출물을 함유하는 조성물에 관한 것이며, 한국공개특허 제2004-0030036호는 하수오, 석창포, 생지황, 단삼, 잔대, 천문동, 상엽, 오가피, 복분자 및 행인을 믹싱하여 혼합물로 제조하고, 혼합물에 증류수를 가해 달인 후 엑기스를 추출하는 열수 추출법으로 조성물을 제조하는 방법에 관한 것이다.

또한 한국특허출원 제1997-034216호는 숙지황 등을 포함한 16종의 생약을 에틸알코올 및 생수에 담아 15일 이상 숙성시켜 추출액을 제조하는 기술에 관한 것이고, 한국등록특허 제0603122호는 당약, 감국, 측백엽 및 상백을 포함하는 생약재를 물로 추출하고, 천초, 백지 등의 생약재를 식물성 기름으로 추출하고, 생강을 에틸알코올과 물의 혼합용매로 추출한 조성물을 혼합하여 제조하는 생약재 조성물의 제조방법 등이 개시되어 있으며, 그 외에도, 한국공개특허 제2005-0050321호, 한국공개특허 제2004-0030036호, 한국등록특허 제0624544호, 한국공개특허 제2006-0121060호 등의 특허문헌이 존재한다.

그러나 이들 모두 테스토스테론을 억제 또는 중화하지는 못하며, 홍반, 가려움증 등 피부 자극 및 세포 독성을 일으키는 문제를 동반하기도 한다.

본 발명의 일 구현예는 장기간 보관시 미생물의 천이가 발생하지 않으며, 각질형성세포(keratinocyte)에 대한 독성이 없고 항산화능이 우수한 탈모 방지 및 모발 생장 촉진용 한방 조성물을 제공하기 위한 것이다.

본 발명의 다른 일 구현예는 상기 탈모 방지 및 모발 생장 촉진용 한방 조성물의 제조 방법을 제공하기 위한 것이다.

본 발명의 일 구현예는 상황버섯 추출물, 황금 추출물, 목단피 추출물, 산수유 추출물, 칡 추출물, 고삼 추출물, 숙지황 추출물, 녹차잎 추출물 및 금은화 추출물을 포함하는 한방 추출물; 및 제니스테인(genistein) 및 레스베라트롤(resveratrol)을 포함하는 폴리페놀을 포함하는 탈모 방지 및 모발 생장 촉진용 한방 조성물을 제공한다.

상기 한방 조성물은 상기 한방 추출물 96 내지 98 중량% 및 상기 폴리페놀 2 내지 4 중량%를 포함할 수 있다.

상기 한방 조성물은 상기 한방 추출물 및 상기 폴리페놀을 25:1 내지 40:1의 중량비로 포함할 수 있다.

상기 한방 조성물은 상기 한방 조성물 총량에 대하여, 상기 상황버섯 추출물 20 내지 25 중량%, 상기 황금 추출물 20 내지 25 중량%, 상기 목단피 추출물 15 내지 20 중량%, 상기 산수유 추출물 5 내지 10 중량%, 상기 칡 추출물 5 내지 10 중량%, 상기 고삼 추출물 5 내지 10 중량%, 상기 숙지황 추출물 5 내지 10 중량%, 상기 녹차잎 추출물 5 내지 10 중량% 및 상기 금은화 추출물 5 내지 10 중량%를 포함하는 한방 추출물; 및 상기 제니스테인(genistein) 1 내지 2 중량% 및 상기 레스베라트롤(resveratrol) 1 내지 2 중량%를 포함하는 폴리페놀을 포함할 수 있다.

상기 한방 조성물은 실크 추출물, 황련 추출물 및 상백피 추출물로부터 선택되는 적어도 하나를 더 포함할 수 있고, 상기 한방 조성물 총량에 대하여, 상기 실크 추출물, 상기 황련 추출물 및 상기 상백피 추출물로부터 선택되는 적어도 하나를 5 내지 10 중량%로 포함할 수 있다.

본 발명의 다른 일 구현예는 황금 및 목단피를 초음파 추출기에 투입하여 제1 추출물을 추출하는 단계; 상황버섯, 산수유, 칡, 고삼, 숙지황, 녹차잎 및 금은화를 열탕 증류기에 투입하여 제2 추출물을 추출하는 단계; 및 상기 제1 추출물과 상기 제2 추출물을 혼합한 복합 추출물에 제니스테인(genistein) 및 레스베라트롤(resveratrol)을 포함하는 폴리페놀을 투입하여 교반하는 단계를 포함하는 탈모 방지 및 모발 생장 촉진용 한방 조성물의 제조 방법을 제공한다.

상기 한방 조성물의 제조 방법은 상기 제2 추출물을 추출하는 단계에서 생성되는 증기를 냉각시켜 증류액을 수득하는 단계를 더 포함할 수 있다.

상기 한방 조성물의 제조 방법은 상기 제1 추출물과 상기 제2 추출물을 혼합하기 전, 상기 제1 추출물로부터 고형분 불순물을 제거하는 단계를 더 포함할 수 있다.

상기 한방 조성물의 제조 방법은 상기 제1 추출물과 상기 제2 추출물을 혼합하기 전, 상기 제2 추출물로부터 고형분 불순물을 제거하는 단계를 더 포함할 수 있다.

상기 제1 추출물을 추출하는 단계는 40 내지 80 ℃에서 추출할 수 있다.

상기 제2 추출물을 추출하는 단계는 80 내지 120 ℃에서 가열할 수 있고, 20 내지 24 시간 동안 가열할 수 있다.

상기 교반하는 단계는 25 내지 28 ℃에서 교반할 수 있다.

상기 교반하는 단계는 상기 복합 추출물 96 내지 98 중량% 및 상기 폴리페놀 2 내지 4 중량%를 혼합할 수 있다.

투입되는 원료의 총량에 대하여, 상기 황금은 20 내지 25 중량%로, 상기 목단피는 15 내지 20 중량%로, 상기 상황버섯은 20 내지 25 중량%로, 상기 산수유는 5 내지 10 중량%로, 상기 칡은 5 내지 10 중량%로, 상기 고삼은 5 내지 10 중량%로, 상기 숙지황은 5 내지 10 중량%로, 상기 녹차잎은 5 내지 10 중량%로, 상기 금은화는 5 내지 10 중량%로, 상기 제니스테인(genistein)은 1 내지 2 중량%로, 그리고 상기 레스베라트롤(resveratrol)은 1 내지 2 중량%로 투입될 수 있다.

상기 제2 추출물을 추출하는 단계는 투입되는 원료의 총량에 대하여, 실크, 황련 및 상백피로부터 선택되는 적어도 하나를 더 투입할 수 있고, 상기 실크, 상기 황련 및 상기 상백피로부터 선택되는 적어도 하나를 5 내지 10 중량%로 투입할 수 있다.

기타 본 발명의 구현예들의 구체적인 사항은 이하의 상세한 설명에 포함되어 있다.

상기 탈모 방지 및 모발 생장 촉진용 한방 조성물을 두피에 도포할 경우, 피부 자극이 없으며, 피지 및 이상 과다 각질이 감소함에 따라, 탈모가 방지되며 모발 생장이 촉진된다.

도 1은 실시예 1의 한방 조성물에 대한 인간 각질형성 세포 독성 정도를 나타낸 그래프이다.
도 2는 실시예 1의 한방 조성물의 항산화능을 나타낸 그래프이다.
도 3은 실시예 1에서 제조된 제2 추출물의 제조 직후의 세균(A) 및 진균(B)과 30일 방치 후의 세균(C) 및 진균(D)의 존재를 보여주는 사진이다.
도 4는 본 발명의 실시예 1에 따른 한방 조성물의 사용 전 및 사용 2주 후에 대한 두피 각질의 변화를 나타내는 그래프이다.
도 5a 및 5b는 각각 실시예 1의 한방 조성물의 사용 전 및 사용 2주 후의 두피 각질의 변화를 보여주는 사진이다.
도 6은 실시예 1에 따른 한방 조성물의 사용 전 및 사용 2주 후의 두피 모공 청결도 변화를 보여주는 그래프이다.
도 7a 및 도 7b는 각각 실시예 1의 한방 조성물의 사용 전 및 사용 2주 후의 두피 모공 청결도 변화를 보여주는 사진이다.
도 8은 실시예 1의 한방 조성물의 사용 전 및 사용 2주 후의 두피 피지량 변화를 보여주는 그래프이다.
도 9는 실시예 1의 한방 조성물을 이용한 모발 생장 촉진 결과를 보여주는 그래프이다.
도 10은 실시예 1의 한방 조성물을 적용한 임상 사례자 5인 각각의 모주기 검사 사진이다.
도 11은 탈모증이 있는 피험자에 대한 실시예 1에 따른 한방 조성물의 사용 전 및 사용 3개월 후의 모발 상태를 보여주는 사진이다.

이하, 본 발명의 구현예를 상세히 설명하기로 한다. 　다만, 이는 예시로서 제시되는 것으로, 이에 의해 본 발명이 제한되지는 않으며 본 발명은 후술할 청구범위의 범주에 의해 정의될 뿐이다.

일 구현예에 따른 탈모 방지 및 모발 생장 촉진용 한방 조성물은 한방 추출물과 폴리페놀을 포함할 수 있다.

상기 한방 추출물은 상황버섯 추출물, 황금 추출물, 목단피 추출물, 산수유 추출물, 칡 추출물, 고삼 추출물, 숙지황 추출물, 녹차잎 추출물 및 금은화 추출물을 포함할 수 있고, 상기 폴리페놀은 제니스테인(genistein) 및 레스베라트롤(resveratrol)을 포함할 수 있다.

상기 한방 조성물은 상기 한방 추출물 96 내지 98 중량% 및 상기 폴리페놀 2 내지 4 중량%를 포함할 수 있다. 구체적으로, 상기 한방 조성물은 상기 한방 추출물 및 상기 폴리페놀을 25:1 내지 40:1의 중량비 로 포함할 수 있다. 상기 한방 조성물이 상기 함량 비율 범위 내로 이루어지는 경우 피부 자극을 감소시키며, 피지 및 이상 과다 각질을 감소시킬 수 있고, 이에 따라 탈모를 방지하고 모발 생장을 촉진시킬 수 있다.

상기 상황버섯 추출물의 성분인 상황버섯은 목질진흙 버섯이라고도 하며, 동의보감에서는 상목이(桑木耳)라는 이름으로 탕액편에 기록되어 있다. 이는 칼슘, 칼륨, 마그네슘, 비타민B2, 비타민C, 섬유질 및 아미노산이 풍부하게 함유되어 있으며, 베타글루칸 다당체가 다량 함유되어 있다. 상기 베타글루칸은 면역력이 저하된 상태에서는 면역력을 향상시키고 과잉일 때는 면역력을 억제하는 면역 조절 기능 및 면역 기능 강화의 효능을 나타낸다. 상기 상황버섯은 특히 암세포에만 작용하여 항암효과 약 96.7%를 나타내는 귀중한 약재로 알려져 있다.

상기 상황버섯 추출물은 상기 한방 조성물 총량에 대하여 20 내지 25 중량%로 포함될 수 있고, 구체적으로는 22 내지 23 중량%로 포함될 수 있다. 상기 상황버섯 추출물이 상기 범위 내로 포함될 경우 장기간 보관시 미생물의 천이가 발생하지 않으며, 각질형성세포(keratinocyte)에 대한 독성이 없고 항산화능이 우수하다.

상기 황금 추출물은 꿀풀과의 다년생 약초인 황금에서 추출한 천연성분으로, 멜라닌 색소 생성 효소인 티로시나제(tirosinase)의 활성을 억제하고 자외선을 차단하며 미백효과와 함께, 한방에서는 얼굴에 붉은 기운을 조정하고 입술의 색을 밝게 하는 열을 내리고 체온을 조절하는 용도의 한약제로 그 사용범위가 넓다.

상기 황금 추출물의 활성 성분은 바이칼린(baicalin), 바이칼레인(baicalein), 워고닌(wogonin), 워고노사이드(wogonoside), DTF(dimethyltetrahydroxyflavone) 등으로, 이들은 항균, 항염증, 항산화, 항아토피성 물질에 해당된다. 다시 말하면, 상기 황금 추출물은 두피 가려움증과 비듬균을 억제하면서 식물성 천연항균제로서 제품의 방부력을 유지하는 역할을 한다.

상기 황금 추출물은 상기 한방 조성물 총량에 대하여 20 내지 25 중량%로 포함될 수 있고, 구체적으로는 23 내지 25 중량%로 포함될 수 있다. 상기 황금 추출물이 상기 범위 내로 포함될 경우 장기간 보관시 미생물의 천이가 발생하지 않으며, 각질형성세포(keratinocyte)에 대한 독성이 없고 항산화능이 우수하다.

상기 목단피 추출물의 성분인 목단피는 모란의 뿌리껍질을 말린 것으로, “동의보감”에서는 성질은 약간 차며 맛은 쓰고 매우며 독이 없으며 어혈을 없애고 여자의 월경불순, 요통을 낫게 하며 유산시키고 태반을 나오게 하고 산후의 모든 혈병(血病), 기병(氣病)을 치료한다고 기록되어 있다. 상기 목단피는 혈액순환을 촉진하여 어혈을 없애고 과로로 발생한 요통이나 관절통의 진통작용이 있다. 또한 혈압 강화 작용, 항균작용이 뛰어나며, 혈액순환 작용을 향상시켜 모발의 탈모를 막고 발모를 촉진하여 검고 윤기있는 모발을 유지시키며 식물성 천연항균제로서 제품의 방부력을 유지하는 역할을 한다.

상기 목단피 추출물은 상기 한방 조성물 총량에 대하여 15 내지 20 중량%로 포함될 수 있고, 구체적으로는 17 내지 18 중량%로 포함될 수 있다. 상기 목단피 추출물이 상기 범위 내로 포함될 경우 장기간 보관시 미생물의 천이가 발생하지 않으며, 각질형성세포(keratinocyte)에 대한 독성이 없고 항산화능이 우수하다.

상기 산수유 추출물의 성분인 산수유는 층층나무과의 낙엽교목으로 산수유나무의 열매로 약간의 단맛과 함께 떫고 강한 신맛이 난다. 산수유에는 코르닌, 모로니사이드, 로가닌, 탄닌, 사포닌 등의 배당체와 포도주산, 사과산, 주석산 등의 유기산이 함유되어 있으며, 비타민 A와 다량의 당도 함유하고 있다. 상기 산수유는 몸을 보하는 효과가 있어 내과, 부인과, 소아질환의 허증에 쓰이며, 기운을 돕고 몸을 가볍게 하며, 항균력과 항산화능이 뛰어나 특히 머리털이 희어지지 않게 하는 효능이 있다.

상기 산수유 추출물은 상기 한방 조성물 총량에 대하여 5 내지 10 중량%로 포함될 수 있고, 구체적으로는 6 내지 6.5 중량%로 포함될 수 있다. 상기 산수유 추출물이 상기 범위 내로 포함될 경우 장기간 보관시 미생물의 천이가 발생하지 않으며, 각질형성세포(keratinocyte)에 대한 독성이 없고 항산화능이 우수하다.

상기 칡 추출물의 성분인 칡은 다년생 식물로서 겨울에도 얼어 죽지 않고 대부분의 줄기가 살아남는다. 줄기는 매년 굵어져서 굵은 줄기를 이루기 때문에 나무로 분류된다. 오래 전부터 구황작물로 식용되었고 자양강장제 등 건강식품으로 이용되기도 하였다. 한방에서는 뿌리를 갈근(葛根)이라는 약재로 쓰는데, 발한·해열 및 진정제로 사용되며, 감기, 몸살, 두통에 근육을 풀어주고 피부를 열어 땀이 나게 하며, 주독(酒毒)을 풀어주고 성질이 차가워 열을 내려준다고 하였다. 다량의 플라보노이드 성분의 함유로 피부 청정 및 노화 예방이 우수하며, 티로시나아제 활성을 억제하여 멜라닌 색소의 생성을 억제하는 작용으로 피부 미백에 탁월한 효과를 보인다. 상기 칡 추출물은 패인 상처와 지혈에 효과적이며, 유해산소에 의해 피부가 손상되는 것을 막고 어혈을 풀어 피부를 윤택하게 하는 작용을 한다.

상기 칡 추출물은 상기 한방 조성물 총량에 대하여 5 내지 10 중량%로 포함될 수 있고, 구체적으로는 9 내지 9.5 중량%로 포함될 수 있다. 상기 칡 추출물이 상기 범위 내로 포함될 경우 장기간 보관시 미생물의 천이가 발생하지 않으며, 각질형성세포(keratinocyte)에 대한 독성이 없고 항산화능이 우수하다.

상기 고삼 추출물의 성분인 고삼은 콩과의 높이 약 1m에 이르는 다년생 초본이며, 잎 모양이 회화나무(괴화)와 비슷하여 지괴, 수괴 및 야괴라는 별명이 있다. 가을에 뿌리를 캐어 씻어 말리며 그 맛은 쓰지만 인삼과 같은 효과가 있다고 하여 고삼이라 한다. 한의에서 뿌리를 건위약, 이뇨약, 해열약, 진통약, 살충약으로 황달, 배뇨곤란, 옴, 습진, 마른버짐 등에 쓰인다. 또한 수렴성 지혈 작용이 있어 적리와 설사, 치질, 자궁출혈 및 흰이슬에도 쓰며 오래 복용하면 좋은 강장약이 된다고 한다. 민간에서는 뿌리, 줄기 및 잎을 가루 내거나 달여서 피부 살충약으로 널리 사용되어 왔다.

상기 고삼 추출물은 상기 한방 조성물 총량에 대하여 5 내지 10 중량%로 포함될 수 있고, 구체적으로는 9 내지 9.5 중량%로 포함될 수 있다. 상기 고삼 추출물이 상기 범위 내로 포함될 경우 장기간 보관시 미생물의 천이가 발생하지 않으며, 각질형성세포(keratinocyte)에 대한 독성이 없고 항산화능이 우수하다.

상기 숙지황 추출물의 성분인 숙지황은 현삼과(玄蔘科)에 속하는 다년생초인 생지황의 뿌리를 술에 담갔다가 9번 찌고, 9번 건조한 한약재로서, 지황소(地黃素)와 만니톨 및 당질을 많이 함유하고 있으며, 맛은 달면서도 쓴맛이 돌고 따뜻한 성질이 있어 혈을 보(補)하고 정(精: 생명이 발생하고 활동하는 데 기본이 되는 물질)을 보충해서 허리와 무릎이 시리고 아픈 증상이나 월경이상, 어지럼증 등을 치료하고 머리를 검게 하는 효능이 있다.

상기 숙지황은 사물탕(四物湯)의 주요 약재이며, 각종 만성병 중 몸이 허약하여 나타나는 내열(內熱), 인후건조(咽喉乾燥), 갈증 등의 증상에 쓰인다. 상기 사물탕은 여성의 출산 후나 월경 등으로 인한 과다출혈, 허약, 어지럼증 등에 널리 쓰인다. 예로부터 허담(虛痰)을 치료하는 데 효과가 있어 차로 달여 마셨으며, 기침과 천식에 복령(茯笭)·반하(半夏) 등과 배합하여 사용하였다. 이 밖에도 돼지고기를 삶은 국물과 함께 복용하면 습관성 변비에 효과가 있다. 영양분이 많고 기름기가 있어 장기간 복용하면 소화 장애를 일으켜 설사·복창(腹脹) 등 부작용이 생긴다.

상기 숙지황 추출물은 상기 한방 조성물 총량에 대하여 5 내지 10 중량%로 포함될 수 있고, 구체적으로는 5 내지 5.5 중량%로 포함될 수 있다. 상기 숙지황 추출물이 상기 범위 내로 포함될 경우 장기간 보관시 미생물의 천이가 발생하지 않으며, 각질형성세포(keratinocyte)에 대한 독성이 없고 항산화능이 우수하다.

상기 녹차잎 추출물의 대표적인 항산화 성분은 카테킨이며, 폴리페놀 화합물의 일종으로 특유의 쓴맛을 가지며, 플라반-3-올(flavan-3-ol)을 기본구조로 하고 있다.

적정량의 활성 산소는 생체 내 면역기능에 관계된 식세포 등의 살균 작용 등에서 긍정적인 효과를 나타내지만, 산화-항산화의 균형을 깨뜨리는 과다한 양의 활성산소는 단백질의 변성, 생체 내의 지질산화, DNA의 파괴 등을 일으켜 산화적 스트레스를 발생시킨다. 체내에 적당량의 항산화제가 존재하지 않으면 호흡을 통해 유입된 산소가 여러 가지 과산화물과 과산화 라디칼을 생성시키며, 이들은 정상 세포에 손상을 주게 된다. 따라서 야채나 과일 등을 통하여 항산화 물질을 섭취하는 것이 중요하다. 상기 카테킨은 주로 에피카테킨(EC), 에피갈로카테킨(EGC), 에피카테킨갈레이트(ECG), 에피갈로카테킨갈레이트(EGCG)와 이들의 광학이성질체 등이 존재한다. 일반적으로 이 네 가지가 차카테킨류로 불리어지며, 이 중 EGCG가 가장 많은 양을 차지하며, 생리활성 또한 가장 높은 것으로 알려져 있다. 상기 녹차잎 추출물을 섭취시킨 후 체내에서 단량체 카테킨(monomeric catechin)이 가장 많이 발견되었으며, EGCG의 생물학적 유용성(bioavailability)이 가장 높았다는 연구 결과가 보고된 바 있다.

상기 녹차잎 추출물은 상기 한방 조성물 총량에 대하여 5 내지 10 중량%로 포함될 수 있고, 구체적으로는 6 내지 6.5 중량%로 포함될 수 있다. 상기 녹차잎 추출물이 상기 범위 내로 포함될 경우 장기간 보관시 미생물의 천이가 발생하지 않으며, 각질형성세포(keratinocyte)에 대한 독성이 없고 항산화능이 우수하다.

상기 금은화 추출물의 성분인 금은화는 인동덩굴의 꽃봉오리로서, 작은 깔대기 모양을 한 꽃봉오리로서 15 내지 35 mm의 길이를 가지며, 확대경으로 보면 엷은 갈색의 털이 많고, 꽃받침은 녹색으로 끝이 5개로 갈라져 있고 갈라진 조각은 털이 있고 길이가 약 2 mm이다. 플라보노이드의 루테올린(luteolin), 로니세린(lonicerin), 오크나플라본(ochnaflavone)의 성분이 있으며, 이리도이드(iridoid)계의 로가닌(loganin), 세콜로가닌(secologanin), 세콜로가닌 디메틸아세탈(secologanin dimethylacetal), 스웨로사이드(sweroside), 세콜로가노사이드 7-메틸 에스터(secologanoside 7-methyl ester), 로니세라세탈라이드 A와 B(loniceracetalide A, B), 페닐알라니노세콜로가닌(phenylalaninosecologanin) 등이 있다.

상기 폴리페놀은 클로로제닌산(chlorogenic aicd), 이소클로로제닌산(isochlorogenic acid), 이노시톨(inositol) 등의 페놀성 화합물을 함유하고 있다. 상기 금은화 추출물은 살모넬라 타이피(Salmonella typhi), S. paratyphi, 대장균 등의 균뿐만 아니라 인플루엔자 바이러스를 감염시킨 실험동물에 클로로제닌산을 투여하면 증상이 호전되었다. 또한, 발 등의 부종 등을 억제하고, 간에서의 IκBα분해를 줄여 NFκB의 활성을 억제함으로써 항염 작용을 나타낸다. 또한, 상기 오크나플라본은 포스포리파제 A2의 활성을 억제한다.

상기 금은화 추출물은 상기 한방 조성물 총량에 대하여 5 내지 10 중량%로 포함될 수 있고, 구체적으로는 6 내지 6.5 중량%로 포함될 수 있다. 상기 금은화 추출물이 상기 범위 내로 포함될 경우 장기간 보관시 미생물의 천이가 발생하지 않으며, 각질형성세포(keratinocyte)에 대한 독성이 없고 항산화능이 우수하다.

상기 한방 조성물은 전술한 한방 추출물 성분들 외에, 실크 추출물, 황련 추출물 및 상백피 추출물로부터 선택되는 적어도 하나의 한방 추출물을 더 포함할 수 있다.

상기 실크 추출물은 누에고치에서 풀어낸 고치실에서 추출한 단백질의 일종으로 실크 단백질이라고도 하며, 75% 내외의 피브로인 단백질, 25% 내외의 세리신 단백질, 그리고 3% 내외의 무기질 및 탄수화물로 구성되며, 자연계에 존재하는 수 많은 단백질 중에서 가장 순도가 높은 단백질이다. 주요성분인 피브로인과 세리신 단백질은 아미노산이 탈수 축합하여 펩티드 결합을 하고 있는 폴리펩티드의 일종으로, 세리신 단백질의 구성 아미노산은 세린, 글리신, 아스파라긴산, 스레오닌, 알라닌이 각각 18%, 13%, 12%, 8% 및 6% 내외로 존재하며, 그 외 다수의 아미노산으로 구성되어 있다. 또한 인체 표피에 존재하는 천연보습인자(natural moisture factor)의 아미노산 조성과 매우 일치하고 있어 세리신 단백질을 이용한 피부친화성 소재개발 가능성을 제시해 주고 있으며, 세리신 단백질과 함께 실크 단백질의 대부분을 차지하고 있는 피브로인 단백질은 18종의 아미노산이 대부분 골고루 존재하며, 양모섬유의 케라틴 단백질과는 달리 글리신과 알라닌의 함량이 매우 높은 것이 특징이다. 인체 피부를 구성하고 있는 주요 단백질인 콜라겐 단백질의 아미노산과 매우 유사하며, 피부 콜라겐 단백질의 아미노산 중에서 가장 많은 성분이 피브로인 단백질중의 글리신과 알라닌이다. 이와 같이 사람의 피부와 유사한 아미노산 구조를 갖는 피브로인 단백질은 피부의 수분 손실로 인한 피부 노화방지, 보습, 피부콜라겐 생성유도 등의 효과가 기대되며, 견 피브로인을 가수분해하여 저분자화 한 실크 펩타이드는 머릿 결을 피복, 보호하는 작용을 하며, 동시에 염료의 흡착을 촉진시켜 모발표면의 손상부위, 즉, 스케일의 손상이나 변색을 방지하는 효과가 있어 두발용 소재로 활용되기도 한다.

상기 황련 추출물은 미나리아재비과에 속하는 여러해살이 초본식물인 황련(Coptis Chinensis FRANCH)의 뿌리로 약효성분은 베르베린(Berberine), 콥티신(Coptisine), 워레닌(Worenine), 팔마틴(Palmatine) 등이 알려져 있다. 맛은 쓰고 차다. 효능은 사화(瀉火) 작용이 있어서 일체의 열로 인한 질환에 탁월한 치료반응을 나타낸다. 이를테면 전염성열병·장티프스 등에 해열효과가 현저하고, 열이 많아서 가슴이 타오르고 갈증이 나면서 번민이 심한 증상을 해소시킨다. 탕화상이나 화상에 효력을 보이는 것은 열을 내리면서 살균작용을 하므로 상처가 쉽게 치유되기 때문이다. 체내에 열이 쌓여서 안구 층열이 되거나 혈압이 상승되는 증상을 치료한다. 뿐만 아니라 결막염 등에 다린 물로 세척하면 살균·해열 효과를 얻게 된다. 소량을 복용하면 소화촉진 효과가 높고, 위장에 염증이 있어서 가슴이 답답하고 배가 부르면서 머리가 아픈 증상을 치료하고, 또한 신경과민으로 인한 가슴 두근거림 증상을 해소시키는 데도 탁월한 효과가 있다. 역시 열로 인한 구내염, 설염(舌炎), 구각염(口角炎)에도 치유율이 높다. 여름에 유행하는 이질과 설사에도 이질균을 억제시키면서 설사를 그치게 하고, 폐결핵이나 토혈, 코피·대변 출혈을 그치게 하고 당뇨병에도 열을 띤 증상에 유효하며, 백일해와 인후염에도 효력이 있다. 살균작용이 현저하여 피부감염증에 널리 활용된다. 동물실험에서는 항균, 소염, 해열, 담즙분비촉진, 혈압하강작용 등이 나타났다.

상기 상백피 추출물은 뽕나무과 카라구와의 황갈색의 콜크층을 제거한 뿌리의 백색부분의 피층에서 추출한 물질로, 상백피는 내복하면 폐의 염증을 제거하고 기침을 멈추게 하는 작용으로 많이 이용되는 생약이다. 만성기관지염의 기성 발작 때나 폐렴 치유 후의 흉통이나 기침, 침출성 흉막염의 침출액에 의한 흉부통증의 팽만감 등에 효과가 있다. 또한 이뇨작용도 높아서 급성위염의 초기에 이용된다. 각기, 류마티스 등에는 상백피에 백술, 복령, 진구를 함께 사용해서 더욱 효과를 높인다. 유행성 간염의 초기에는 상백피 2량에 소량의 설탕을 첨가해서 이용하면 좋다. 매일 1회, 1주일간 계속하면 청열, 이뇨, 퇴황에 도움이 된다. 또한 관상동맥경화성 고혈압증 및 본태성 고혈압증의 치료약으로서도 그 동물실험에서의 작용이 증명되어 있다. 고문헌에 따르면 상백피를 실로 만들어, 칼에 상처받은 장이 나온 것을 묶어서 고친 예가 있다. 이것은 상백피 실로 상처를 봉합하면 생체에 흡수되어 실을 뽑을 필요가 없다고 적혀있다. 이것은 외용에서의 효과를 나타내는 것으로 화장품 원료뿐만 아니라 외용약으로의 응용이 기대된다.

상기 추가 가능한 한방 추출물은 상기 한방 조성물 총량에 대하여 5 내지 10 중량%로 포함될 수 있고, 구체적으로는 8 내지 10 중량%로 포함될 수 있다. 상기 범위 내로 포함될 경우 장기간 보관시 미생물의 천이가 발생하지 않으며, 각질형성세포(keratinocyte)에 대한 독성이 없고 항산화능이 우수하다.

상기 폴리페놀의 일종인 상기 제니스테인(genistein)은 폴리페놀인 대두 이소플라본(isoflavone)에서 분리 추출된 폴리페놀로서, 일 구현예에서는 순도 99%인 제니스테인 99%를 사용하였다. 상기 제니스테인은 다국적 화장품 및 건강식품공급회사인 미국 MMP사 공급 원료이다.

상기 제니스테인은 식물계의 에스트로겐 유사체로서 강력한 항산화 효과, 항염증 효과, 항암 효과와 함께 정상세포의 복제를 촉진한다. 탈모를 억제하는 성분으로 SCI급 임상논문이 게재되었으며, 최근에는 광노화를 억제하는 물질로도 임상결과가 보고되었다. 일 구현예에서는 제니스테인의 에스트로겐 유사체로서의 호르몬 효과, 세포재생효과, 광노화 억제 효과, 탈모 억제 및 육모를 촉진하는 작용을 한다.

상기 제니스테인은 상기 한방 조성물 총량에 대하여 1 내지 2 중량%로 포함될 수 있고, 구체적으로는 1.5 내지 1.6 중량%로 포함될 수 있다. 상기 제니스테인이 상술한 범위 내로 포함될 경우 장기간 보관시 미생물의 천이가 발생하지 않으며, 각질형성세포(keratinocyte)에 대한 독성이 없고 항산화능이 우수하다.

상기 폴리페놀의 다른 일종인 상기 레스베라트롤(resveratrol)은 포도, 땅콩, 작약 등의 식물에서 추출된 폴리페놀로서, 일 구현예에서는 순도 99%인 레스베라트롤 99%를 사용하였으며, 미국 MMP사 공급 원료이다. 1997년 Jang 박사 등에 의해 “암예방물질(chemopreventive activity)”로 입증되어 Science지(vol 275, pp 218-220)에 발표되었고 2003년 8월, 하버드 의과대학 교수인 데이비드 싱클레어 박사가 레스베라트롤의 세포수명연장 효과를 네이처지에 발표한 이래 현재는 세계적으로 연구개발이 가장 활발한 생리활성 물질 중의 하나가 되었다.

상기 레스베라트롤은 암예방, 항암, 항혈전, 항염증, 항고지혈증, 항균 및 간보호작용, 항비만, 항대사증후군 작용을 가지며, 탈모를 억제하고 육모 효과도 가지고 있다. 일 구현예에서는 레스베라트롤의 에스트로겐 유사체로서의 호르몬 효과, 세포수명연장 효과, 탈모 억제 및 육모를 촉진하는 작용을 한다.

상기 레스베라트롤은 상기 한방 조성물 총량에 대하여 1 내지 2 중량%로 포함될 수 있고, 구체적으로는 1.5 내지 1.6 중량%로 포함될 수 있다. 상기 레스베라트롤이 상기 범위 내로 포함될 경우 장기간 보관시 미생물의 천이가 발생하지 않으며, 각질형성세포(keratinocyte)에 대한 독성이 없고 항산화능이 우수하다.

상기 한방 조성물은 다음과 같은 방법으로 제조될 수 있다.

우선, 상기 황금 및 목단피를 초음파 추출기에 투입하여 제1 추출물을 추출한다. 또한 상황버섯, 산수유, 칡, 고삼, 숙지황, 녹차잎 및 금은화를 열탕 증류기에 투입하여 제2 추출물을 추출한다. 이때 상기 제1 추출물을 추출하는 단계와 상기 제2 추출물을 추출하는 단계는 서로 순서가 바뀔 수 있다.

상기 제1 추출물을 추출하는 단계는 상기 초음파 추출기를 이용하여 40 내지 80 ℃의 온도, 구체적으로는 40 내지 50 ℃의 온도, 더욱 구체적으로는 40 내지 41℃의 온도에서 수행될 수 있다. 상기 범위 내의 온도에서 수행되는 경우 열에 약한 유효성분의 손실을 최소화할 수 있다.

그리고 상기 제2 추출물을 추출하는 단계는 상기 열탕 증류기를 이용하여 열수 추출하는 과정으로서, 80 내지 120 ℃의 온도에서 가열이 수행될 수 있고, 구체적으로는 100 내지 110 ℃의 온도에서 가열이 수행될 수 있다. 또한 상기 가열은 20 내지 24 시간 동안 수행될 수 있고, 구체적으로는 23 내지 24 시간 동안 수행될 수 있다. 상기 범위 내의 온도에서 또한 상기 범위 내의 시간 동안 수행되는 경우, 열에 강한 폴리페놀(이소플라본 류)의 녹는점인 120℃ 전까지 가열하여 열에 강한 폴리페놀의 손실을 최소화하고 한방 식물성분의 섬유질 등 피부 투과를 방해하는 성분을 열수로 분쇄하면서 충분한 증기를 발생시킬 수 있다.

상기 제2 추출물의 추출 시, 상기 열탕 증류기에 실크, 황련 및 상백피로부터 선택되는 적어도 하나를 더 투입할 수도 있다.

상기 제2 추출물을 추출한 후, 상기 제2 추출물을 추출 시 생성되는 증기를 냉각시켜 증류액을 수득할 수도 있다.

이어서, 상기 제1 추출물과 상기 제2 추출물을 혼합한 복합 추출물에 제니스테인(genistein) 및 레스베라트롤(resveratrol)을 포함하는 폴리페놀을 투입하여 교반함으로써, 상기 한방 조성물을 제조할 수 있다.

이때 상기 제1 추출물과 상기 제2 추출물을 혼합 시, 각각 상기 제1 추출물로부터 고형분 불순물을 제거한 것과 상기 제2 추출물로부터 고형분 불순물을 제거한 것을 사용하여 혼합할 수 있다.

상기 복합 추출물과 상기 폴리페놀은 각각 1 내지 2 중량% 및 1 내지 2 중량%로 서로 혼합될 수 있고, 구체적으로는 각각 1.5 내지 1.6 중량% 및 1.5 내지 1.6 중량%로 서로 혼합될 수 있으며, 상술한 비율 범위로 혼합할 경우 피부 자극을 감소시키고, 피지 및 이상 과다 각질을 감소시킬 수 있으며, 이에 따라 탈모를 방지하고 모발 생장을 촉진시킬 수 있다.

상기 교반은 25 내지 30 ℃에서, 구체적으로는 25 내지 28 ℃에서, 더욱 구체적으로는 25 내지 27 ℃에서 수행될 수 있다. 상기 온도 범위 내에서 교반이 이루어지는 경우 열에 약한 폴리페놀의 파괴를 막을 수 있다.

상기 한방 조성물의 제조 시 투입되는 각 성분의 원료의 함량은 원료의 총량을 기준으로 앞에서 전술한 한방 조성물을 이루는 각 성분의 함량과 동일하다.

이하에서는 본 발명의 구체적인 실시예들을 제시한다. 다만, 하기에 기재된 실시예들은 본 발명을 구체적으로 예시하거나 설명하기 위한 것에 불과하며, 이로 인해 본 발명이 제한되어서는 아니된다.

(한방 조성물 제조)

실시예 1

황금 200g 및 목단피 200g을 정제수에 충분히 세척한 후, 초음파 추출기에서 부틸렌글리콜을 추출 용매로 하여 40℃에서 5시간 정도 추출하여 제1 추출물을 수득하였다. 이후, 상기 제1 추출물을 원심분리기에서 10,000 내지 12,000 rpm, 5℃ 및 30분 동안 원심 분리하여 고형분 불순물을 제거하였다.

상황버섯 200g, 녹차잎 50g, 산수유 50g, 고삼 50g, 금은화 50g, 숙지황 100g 및 칡 100g의 한약재들을 정제수에 충분히 세척한 후, 열탕 증류기에서 정제수를 이용하여 24 시간 동안 100℃에서 가열하여 제2 추출물을 수득하였다. 이때 제2 추출물 수득 과정 중 증기로 휘발되는 유효 성분을 획득하기 위하여 증기 회수용 냉수 냉각관을 설치하여 증류액을 수득하였다. 이후, 제2 추출물을 원심분리기에서 10,000 내지 12,000 rpm, 5℃ 및 30분 동안 원심 분리하여 고형분 불순물을 제거하였다.

각각 고형분 불순물이 제거된 제1 추출물과 제2 추출물을 혼합한 복합 추출물 970g에, 25℃의 온도에서 제니스테인(genistein) 15g 및 레스베라트롤(resveratrol) 15g을 투입한 후, 교반기에서 3,000 rpm 및 30분 동안 교반하여, 한방 조성물을 제조하였다.

상기 한방 조성물 제조시 사용된 원료의 학명을 하기 표 1에 정리하였다.

원료	학명
황금	Scutellaria baicalensis Georgi root
목단피	Paeonia suffruticosa root
상황버섯	Phellinus linteus
녹차잎	Camellia Sinensis Leaf Extract
산수유	Cornus officinalis fruit
고삼	Sophora angustifola root
금은화	Lonicer aflower
숙지황	Rehmannia glutinosa var.purpurea MAKINO
칡	Pueraria thunbergiana Benth root
제니스테인	Genistein
레스베라트롤	Resveratrol

시험예 1: 한방 조성물의 세포 독성 시험

상기 한방 조성물을 장기간 사용 시 두피 자극의 정도를 확인하기 위하여, 인간 각질형성 세포에 대한 세포 독성 유무를 평가하였다.

평가 방법은 인간 유래의 각질형성 세포주 HaCaT을 이용하여 3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-2,5-디페닐 테트라졸륨 브로마이드(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide, MTT) 분석법으로 평가하였다.

상기 MTT 분석법은 살아있는 세포에서만 활성을 보이는 미토콘드리아의 탈수소 효소작용을 이용하여 최종적으로 프로마잔(fromazan)이라는 색소 산물을 형성시켜 시험물질의 세포 독성 정도를 측정하는 방법이다.

상기 배양한 인간 각질형성 세포를 24 well plate에 5×103 cells/well씩 동일하게 헤마사이토미터(heamacytometer)를 이용하여 계수한 후 나누어 주입하였다. 10% FBS(fetal bovine serum)를 함유하는 DMEM(dulbeco's modified eagle's medium)에서 48시간 동안 배양하여 배양용기 표면적의 25% 내지 30%만큼 배양되면, 실시예 1에서 제조된 한방 조성물이 0.1 내지 10 % 농도로 함유된 FBS-free DMEM으로 교체하여 24시간 더 배양하였다. 배양 후 MTT(Sigma M5655, USA) 용액(2.5 mg/ml)을 50㎕ 첨가하고 3시간 동안 추가로 배양하였다. 그 후, 세포 배양액을 전부 버리고, 200㎕의 디메틸 술폭사이드(Sigma D2650, USA)를 각 well당 200㎕ 처리하여 교반한 후, 100㎕씩을 96 well로 취하여 ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)로 570nm에서 흡광도를 측정하였다. 세포의 독성 정도는 순수한 물을 사용한 대조군(무처리군)의 흡광 강도를 기준으로 백분율로 표시하였고, 그 결과를 도 1에 나타내었다.

도 1은 실시예 1의 한방 조성물에 대한 인간 각질형성 세포 독성 정도를 나타낸 그래프로서, 인간 각질형성 세포에 대한 본 발명에 따른 한방 조성물의 세포 독성 시험결과를 나타낸 그래프이다.

도 1을 참고하면, 한방 조성물이 각각 10%, 5%, 1%, 0.5% 및 0.1%의 농도로 함유된 경우 대조군 대비 3.55 내지 9.73%의 흡광 강도의 차이로, 대조군과 큰 차이가 나타나지 않았다. 이에 따르면, 일 구현예에 따른 한방 조성물은 항산화능을 가짐으로써 장기간 사용하여도 세포 독성에 의한 두피 자극이 발생하지 않음을 알 수 있다.

시험예 2: 한방 조성물의 항산화능 평가

실시예 1의 한방 조성물의 항산화능을 1,1-디페닐-2-피크릴히드라질(1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl, 이하 'DPPH'라 칭함)(Sigma D9132-1G, USA)을 이용하여 평가하였다.

상기 DPPH는 에탄올 내에서 자유 라디칼을 발생시킨다. 이에 따라 실시예 1의 한방 조성물과 상기 DPPH를 일정 비율로 혼합하여 생성된 자유 라디칼의 양이 어느 정도 감소하는지를 확인함으로써 항산화능을 측정하였다.

구체적으로, 에탄올 0.4 ml에 에탄올로 제조된 0.1 mM DPPH 용액 0.5 ml, 및 최종 농도가 0.1% 내지 10%가 되도록 복합 추출물 0.1ml를 첨가하였다. 10초 동안 강하게 보르텍싱(vortexing)하고, 냉암소에서 30분간 보관하였다. ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)를 이용하여 517nm에서 흡광도를 측정하였다. 항산화능의 정도는 순수한 물을 사용한 대조군의 흡광 강도를 기준으로 백분율로 표시하였고, 그 결과를 도 2에 나타내었다.

환경오염에 의한 오염 물질과 과도한 모발 제품들의 화학적 인자들은 모발에 과도한 산화적 스트레스의 주범이다. 이러한 과도한 산화적 스트레스는 성장기 모발을 휴지기로 전환시킬 수 있으며, 다양하게 모발 상태를 악화시켜 탈모의 원인이 될 수 있다. 또한 산화적 스트레스는 모낭 주위의 제2형 베타-코르티코르틴 분비 호르몬 수용체를 활성화시키는 기전으로 원형 탈모증의 원인이 될 수도 있다고 알려져 있다. 일 구현예에 따른 한방 조성물은 항산화능을 가짐으로써 육모 및 탈모 예방 효과를 가질 수 있는지를 DPPH의 자유 라디칼 소거능으로 확인하였다.

도 2는 실시예 1의 한방 조성물의 항산화능을 나타낸 그래프로서, 보다 구체적으로는 본 발명에 따른 한방 조성물의 DPPH 자유 라디칼 소거능을 통한 항산화능을 나타낸 그래프이다.

도 2를 참고하면, 정제수를 사용한 대조군과 비교하여, 한방 조성물을 각각 10%, 5%, 1% 및 0.5%의 농도로 함유한 경우, 반응계의 DPPH 자유 라디칼이 각각 94.21%, 85.23%, 69.89% 및 52.13%가 감소됨을 확인할 수 있었다. 이러한 결과는 한방 조성물을 모발관련 제품에 응용할 경우, 한방 조성물을 1 내지 10%의 높은 농도로 사용하여도 세포 독성이 적으면서 항산화능을 가져, 탈모 방지 및 모발 생장 촉진이 가능함을 알 수 있다.

시험예 3: 한방 조성물의 정균능 평가

실시예 1의 한방 조성물이 방부제 처리 없이도 미생물의 천이를 억제할 수 있는 자발적 정균능이 존재하는지 확인하였다.

한방 조성물 내 발생 가능한 생균의 수를 확인하기 위하여 상기 실시예 1에서 제조된 제2 추출물을 제조한 직후, 그리고 30일간 상온에서 방치한 후의 생균수 확인 시험을 실시하였다.

구체적으로, 실시예 1에서 제조된 제2 추출물 원액 0.1 ml을 레틴 한천배지(Difco, USA)에 도말하고, 30℃에서 48시간 배양하여 세균의 존재를 확인하였으며, 0.1ml를 사브로우드 덱스트로즈 한천배지(Difco, USA)에 도말하고, 25℃에서 72시간 배양하여 진균의 존재를 확인하여, 그 결과를 도 3에 나타내었다.

도 3은 실시예 1에서 제조된 제2 추출물의 제조 직후의 세균(A) 및 진균(B)과 30일 방치 후의 세균(C) 및 진균(D)의 존재를 보여주는 사진이다.

도 3을 참고하면, 제2 추출물의 제조 직후의 세균(A)과 진균(B)의 존재를 한천 배지에 도말 후 배양하는 방법으로 확인한 결과 생균이 존재하지 않았음을 확인할 수 있다. 또한 상온에서 30일간 방치 후에도 세균(C)과 진균(D)이 존재하지 못하였음을 확인할 수 있다. 이에 따라, 일 구현예에 따른 한방 조성물을 상온에서 장기간 보관 시 방부제의 첨가 없이 미생물의 천이를 억제하는 정균능을 가짐에 따라 비듬 생성균 등의 비정상적 천이를 억제함으로써 탈모 방지 및 모발 생장 촉진이 가능함을 알 수 있다.

시험예 4: 한방 조성물을 이용한 두피 각질량 변화, 모공 청결도, 그리고 피지량 변화의 임상시험

실시예 1의 한방 조성물을 이용한 두피 각질량 변화, 모공 상태, 그리고 피지량 변화 정도를 한국 식약청 지정 GCP(Good Clinical Practice) 임상시험을 하는 외부기관(㈜더마프로/피부과학연구소)을 통하여 조사하였다.

본 시험 목적에 적합한 지성 두피를 가진 20 내지 50세(평균연령 39.1±6.3세)의 여성 피험자 15명을 선발하여 상기 한방 조성물의 사용 전과 사용 2주 후 시점에서 두피의 각질, 모공 청결도에 대한 사진평가, 그리고 두피 피지량 측정을 실시하여 두피 상태를 평가 하였으며, SPSS Package Program 11.5의 paired t-test 방법을 이용하여 통계 분석하였다(p<0.05). 이때 p는 유의확률로서 p<0.05 이면 유의함을 나타낸다. 결과값은 하기 식 1에 따라 상기 한방 조성물의 사용 전 대비 사용 후 측정값의 증감률(△ 증가, ▼ 감소)을 계산하였다.

[식 1]

증감율(%) = (사용 전 측정값 - 사용 후 측정값) / 사용 전 측정값 X 100

측정 기기는 하기 표 2에 나타낸 바와 같다.

	측정 기기	측정 부위
두피 각질 촬영	AramoTs?(x60) (AramHuvis, Korea)	두피
두피 모공 촬영	AramoTs?(x200) (AramHuvis, Korea)	두피
두피 피지량 측정	Sebumeter? (C+K, Germany)	두피

4-1: 두피 각질량 변화의 임상시험

두피 확대 촬영장치인 AramoTS^?(AramHuvis, Korea) 60배 렌즈를 이용하여 각 평가시점에서 두피 각질을 확대 촬영한 후 그 이미지를 이용하여 2명의 연구자가 7단계(-3 매우 감소, -2 중간 정도 감소, -1 약간 감소, 0 변화 없음, +1 약간 증가, +2 중간 정도 증가, +3 매우 증가)로 두피각질 상태를 평가하여, 그 결과를 하기 표 3, 도 4, 및 도 5a 및 5b에 나타내었다.

	피험자의 수(N)	측정 값의 산술평균	표준 편차	표준 평균 오차	유의확률 (p-value)
사용 전	15	0.00	0.00	0.00	-
사용 2주 후	15	-2.10	0.54	0.14	0.000*

도 4는 실시예 1의 한방 조성물의 사용 전 및 사용 2주 후에 대한 두피 각질의 변화를 나타내는 그래프이고, 도 4a 및 4b는 각각 실시예 1의 한방 조성물의 사용 전 및 사용 2주 후의 두피 각질의 변화를 보여주는 사진이다.

상기 표 3, 도 4, 및 도 5a 및 5b를 참고하면, 상기 한방 조성물의 사용 전 대비 사용 2주 후 시점에서 두피 각질이 감소하여 두피 각질의 상태가 우수함을 확인할 수 있다.

4-2: 두피 모공 청결도 변화의 임상시험

두피 확대 촬영장치인 AramoTS^?(AramHuvis, Korea) 200배 렌즈를 이용하여 각 평가시점에서 두피의 모공 부위를 확대 촬영한 후 그 이미지를 이용하여 2명의 연구자가 7단계(-3 매우 감소, -2 중간 정도 감소, -1 약간 감소, 0 변화 없음, +1 약간 증가, +2 중간 정도 증가, +3 매우 증가)로 두피 모공 청결 개선 정도를 평가하여, 그 결과를 하기 표 4, 도 6, 및 도 7a 및 7b에 나타내었다.

시간	피험자의 수(N)	측정 값의 산술평균	표준 편차	표준 평균 오차	유의확률 (p-value)
사용 전	15	0.00	0.00	0.00	-
사용 2주 후	15	-1.47	0.44	0.11	0.000*

도 6은 실시예 1의 한방 조성물의 사용 전 및 사용 2주 후의 두피 모공 청결도 변화를 보여주는 그래프이고, 도 7a 및 도 7b는 각각 실시예 1의 한방 조성물의 사용 전 및 사용 2주 후의 두피 모공 청결도 변화를 보여주는 사진이다.

상기 표 4, 도 6, 및 도 7a 및 7b를 참고하면, 상기 한방 조성물의 사용 전 대비 사용 2주 후 시점에서 두피 모공이 청결해진 상태가 됨을 확인할 수 있다.

4-3: 두피 피지량 변화의 임상시험

두피 피지량은 각 평가시점에서 Sebumeter^?(C+K, Germany)를 이용하여 3회씩 측정하여 평균값을 분석하여, 그 결과를 하기 표 5 및 도 8에 나타내었다.

	피험자의 수(N)	측정 값의 산술평균	표준 편차	표준 평균 오차	유의확률 (p-value)	감소율(%)
사용 전	15	100.87	56.46	14.58	-	-
사용 2주 후	15	61.96	45.51	11.75	0.002*	38.57▼

도 8은 실시예 1의 한방 조성물의 사용 전 및 사용 2주 후의 두피 피지량 변화를 보여주는 그래프이다.

도 8을 참고하면, 상기 한방 조성물의 사용 전 대비 사용 2주 후 시점에서 두피 피지량이 감소함을 확인할 수 있다.

시험예 5 : 한방 조성물의 모발 생장 촉진 평가

실시예 1의 한방 조성물의 탈모 방지 및 모발 생장 촉진을 평가하기 위해, 현재 탈모증이 있는 20 내지 40세(평균연령 32.1±5.3세)의 남성 및 여성 피험자 10명을 선정하여, 일 구현예에 따른 한방 조성물을 적용한 경우와 적용하지 않은 경우로 나누어 모주기 검사 및 모발 생장 촉진 변화를 측정하여, 그 결과를 도 9에 나타내었다.

대조군 5명에게는 동일한 형태의 용기에 모발 생장 촉진 효과가 없는 순수한 물을 사용하게 하였으며. 나머지 피험자 5명에게는 실시예 1의 한방 조성물을 매일 50ml를 주어 수시로 두피에 도포하게 하였다. 측정은 사용 전 측정과 사용 후 3개월로 총 2회 측정하였으며, 측정은 모주기 검사와 일반 육안(디지털카메라)으로 측정하였으며, 측정 장비는 하기 표 6에 나타내었다.

	측정 기기	측정 부위	측정 시점
모주기 검사	Multicam bomtec(x80) (Damomedica,Korea)	두피	1) 사용 전 2) 사용 3개월 후
육안 검사	Nikon DSLR D40 표준줌렌즈	두피	1) 사용 전 2) 사용 3개월 후

5-1: 모주기 검사

모주기 검사는 포토트리코그램(phototricogram, 모주기검사)으로 머리카락이 자라는 주기를 보는 검사로서. 측정할 부위의 모발을 직경 5mm로 컷한 후 헤나로 측정할 위치를 표시 한 다음 Multicam bomtec 80배율 렌즈로 동일한 위치에 대해 컷팅 직후 및 3일 후 각각 촬영하여 휴지기 모발의 생장주기 등을 분석하는 검사이다. 상기 모주기 검사를 통해서 탈모가 진행될 것인지 또는 진행되고 있는 것인지 알 수 있다.

상기 모주기 검사를 통하여 모발의 성장 수치를 백분율로 표시한 모주기율을 측정하였으며, 상기 모주기율은 하기 식 2에 따라 측정 값을 얻었으며, 모주기 검사는 사용 전 1회, 사용 3개월 후 1회로 총 2회 측정하였다. 그 결과를 하기 표 7, 도 9 및 도 10에 나타내었다.

[식 2]

모주기율(%) = (컷팅 3일 이후 성장한 모발의 개수 / 최초 모발의 컷팅 개수) X 100

	피험자의 수(N)	측정 값의 산술평균	표준 편차	표준 평균 오차	유의확률 (p-value)	감소율(%)
대조군	5	-1.88	1.47	0.66	-	-
피험자	5	27.8	3.35	1.50	0.0000044	27.80△

도 9는 실시예 1의 한방 조성물을 이용한 모발 생장 촉진 결과를 보여주는 그래프이고, 도 10은 실시예 1의 한방 조성물을 적용한 임상 사례자 5인 각각의 모주기 검사 사진이다.

상기 표 7, 도 9 및 도 10을 참고하면, 대조군의 탈모증은 계속 진행되는 반면, 일 구현예에 따른 한방 조성물을 사용한 피험자들은 탈모증이 멈추고 모발이 생장하였으며, 모발 성장 수치가 증가함을 확인할 수 있다.

5-2: 육안 검사

위 모주기 검사를 실시하는 동시에 육안 검사를 실시하였다. 육안 검사의 근거를 남기기 위해 탈모증이 일어난 부위를 Nikon DSLR D40 표준줌렌즈로 임상 전/후 사진을 촬영하였으며, 그 결과를 도 11에 나타내었다.

도 11은 실시예 1의 한방 조성물의 사용 전 및 사용 3개월 후의 탈모증이 있는 피험자의 모발 상태를 보여주는 사진이다.

도 11을 참고하면, 3개월 후 물을 사용한 대부분의 대조군은 탈모증에 변화가 없거나 탈모증이 더 진행되었으나, 일 구현예에 따른 한방 조성물을 사용한 피험자는 탈모증이 멈추고 모발이 생장하는 변화가 뚜렷이 나타남을 확인할 수 있다.

이상에서 본 발명의 바람직한 실시예들에 대하여 상세하게 설명하였지만 본 발명의 권리 범위는 이에 한정되는 것은 아니고 다음의 청구 범위에서 정의하고 있는 본 발명의 기본 개념을 이용한 당업자의 여러 변형 및 개량 형태 또한 본 발명의 권리 범위에 속하는 것이다.

Claims (18)

1. 상황버섯 추출물, 황금 추출물, 목단피 추출물, 산수유 추출물, 칡 추출물, 고삼 추출물, 숙지황 추출물, 녹차잎 추출물 및 금은화 추출물을 포함하는 한방 추출물; 및
   제니스테인(genistein) 및 레스베라트롤(resveratrol)을 포함하는 폴리페놀;을 포함하는 탈모 방지 및 모발 생장 촉진용 한방 조성물.
2. 제1항에 있어서,
   상기 한방 조성물은;
   상기 한방 추출물 96 내지 98 중량%, 그리고
   상기 폴리페놀 2 내지 4 중량%를 포함하는 탈모 방지 및 모발 생장 촉진용 한방 조성물.
3. 제1항에 있어서,
   상기 한방 조성물은, 상기 한방 추출물 및 상기 폴리페놀을 25:1 내지 40:1의 중량비로 포함하는 탈모 방지 및 모발 생장 촉진용 한방 조성물.
4. 제1항에 있어서,
   상기 한방 조성물은:
   상기 한방 조성물 총량에 대하여,
   상기 상황버섯 추출물 20 내지 25 중량%, 상기 황금 추출물 20 내지 25 중량%, 상기 목단피 추출물 15 내지 20 중량%, 상기 산수유 추출물 5 내지 10 중량%, 상기 칡 추출물 5 내지 10 중량%, 상기 고삼 추출물 5 내지 10 중량%, 상기 숙지황 추출물 5 내지 10 중량%, 상기 녹차잎 추출물 5 내지 10 중량% 및 상기 금은화 추출물 5 내지 10 중량%를 포함하는 한방 추출물; 및
   상기 제니스테인(genistein) 1 내지 2 중량% 및 상기 레스베라트롤(resveratrol) 1 내지 2 중량%를 포함하는 폴리페놀;을 포함하는 탈모 방지 및 모발 생장 촉진용 한방 조성물.
5. 제1항에 있어서,
   상기 한방 조성물은, 실크 추출물, 황련 추출물 및 상백피 추출물로부터 선택되는 적어도 하나를 더 포함하는 탈모 방지 및 모발 생장 촉진용 한방 조성물.
6. 제5항에 있어서,
   상기 한방 조성물은;
   상기 한방 조성물 총량에 대하여.
   상기 실크 추출물, 상기 황련 추출물 및 상기 상백피 추출물로부터 선택되는 적어도 하나를 5 내지 10 중량%로 포함하는 탈모 방지 및 모발 생장 촉진용 한방 조성물.
7. 황금 및 목단피를 초음파 추출기에 투입하여 제1 추출물을 추출하는 단계;
   상황버섯, 산수유, 칡, 고삼, 숙지황, 녹차잎 및 금은화를 열탕 증류기에 투입하여 제2 추출물을 추출하는 단계; 및
   상기 제1 추출물과 상기 제2 추출물을 혼합한 복합 추출물에 제니스테인(genistein) 및 레스베라트롤(resveratrol)을 포함하는 폴리페놀을 투입하여 교반하는 단계;를 포함하는 탈모 방지 및 모발 생장 촉진용 한방 조성물의 제조 방법.
8. 제7항에 있어서,
   상기 한방 조성물의 제조 방법은;
   상기 제2 추출물을 추출하는 단계에서 생성되는 증기를 냉각시켜 증류액을 수득하는 단계를 더 포함하는 탈모 방지 및 모발 생장 촉진용 한방 조성물의 제조 방법.
9. 제7항에 있어서,
   상기 한방 조성물의 제조 방법은;
   상기 제1 추출물과 상기 제2 추출물을 혼합하기 전, 상기 제1 추출물로부터 고형분 불순물을 제거하는 단계를 더 포함하는 탈모 방지 및 모발 생장 촉진용 한방 조성물의 제조 방법.
10. 제7항에 있어서,
    상기 한방 조성물의 제조 방법은;
    상기 제1 추출물과 상기 제2 추출물을 혼합하기 전, 상기 제2 추출물로부터 고형분 불순물을 제거하는 단계를 더 포함하는 탈모 방지 및 모발 생장 촉진용 한방 조성물의 제조 방법.
11. 제7항에 있어서,
    상기 제1 추출물을 추출하는 단계는 40 내지 80 ℃에서 추출하는 탈모 방지 및 모발 생장 촉진용 한방 조성물의 제조 방법.
12. 제7항에 있어서,
    상기 제2 추출물을 추출하는 단계는 80 내지 120 ℃에서 가열하는 탈모 방지 및 모발 생장 촉진용 한방 조성물의 제조 방법.
13. 제7항에 있어서,
    상기 제2 추출물을 추출하는 단계는 20 내지 24 시간 동안 가열하는 탈모 방지 및 모발 생장 촉진용 한방 조성물의 제조 방법.
14. 제7항에 있어서,
    상기 교반하는 단계는 25 내지 30 ℃에서 교반하는 탈모 방지 및 모발 생장 촉진용 한방 조성물의 제조 방법.
15. 제7항에 있어서,
    상기 교반하는 단계는 상기 복합 추출물 96 내지 98 중량% 및 상기 폴리페놀 2 내지 4 중량%를 혼합하는 탈모 방지 및 모발 생장 촉진용 한방 조성물의 제조 방법.
16. 제7항에 있어서,
    투입되는 원료의 총량에 대하여,
    상기 황금은 20 내지 25 중량%로,
    상기 목단피는 15 내지 20 중량%로,
    상기 상황버섯은 20 내지 25 중량%로,
    상기 산수유는 5 내지 10 중량%로,
    상기 칡은 5 내지 10 중량%로,
    상기 고삼은 5 내지 10 중량%로,
    상기 숙지황은 5 내지 10 중량%로,
    상기 녹차잎은 5 내지 10 중량%로,
    상기 금은화는 5 내지 10 중량%로,
    상기 제니스테인(genistein)은 1 내지 2 중량%로, 그리고
    상기 레스베라트롤(resveratrol)은 1 내지 2 중량%로
    투입되는 탈모 방지 및 모발 생장 촉진용 한방 조성물의 제조 방법.
17. 제7항에 있어서,
    상기 제2 추출물을 추출하는 단계는, 실크, 황련 및 상백피로부터 선택되는 적어도 하나를 더 투입하는 탈모 방지 및 모발 생장 촉진용 한방 조성물의 제조 방법.
18. 제17항에 있어서,
    상기 제2 추출물을 추출하는 단계는;
    투입되는 원료의 총량에 대하여,
    상기 실크, 상기 황련 및 상기 상백피로부터 선택되는 적어도 하나를 5 내지 10 중량%로 투입하는 탈모 방지 및 모발 생장 촉진용 한방 조성물의 제조 방법.

Images