KR20130100918A

KR20130100918A - Ｃｌｌ 혈액 샘플에서의 ｃｄ37 항체의 우수한 효능

Info

Publication number: KR20130100918A
Application number: KR1020127032811A
Authority: KR
Inventors: 슈테판 스틸겐바우어; 토르슈텐 젠츠; 칼-하인츠 하이더
Original assignee: 베링거 인겔하임 인터내셔날 게엠베하
Priority date: 2010-07-16
Filing date: 2011-07-15
Publication date: 2013-09-12
Also published as: BR112013001012A2; JP2013538790A; US20150266967A1; US20130236454A1; AU2011278227A1; EP3252077A1; IL222775A0; NZ603161A; NZ703225A; CL2013000101A1; EP2593479A1; EA025365B1; WO2012007576A1; AU2011278227B2; CN103003309A; JP2017019800A; EA201201660A1; IL222775A; MX341463B; US20120189618A1

Abstract

본 발명은 만성 림프구성 백혈병(CLL)을 지닌 환자, 특히 "고위험" 또는 "초고위험" 그룹 환자에 속하는 환자를 치료하기 위한 CD37 항체, 특히 A2 및 B2에 관한 것이다. 상기 환자들은 플루다라빈 치료에 대해 난치성인 환자 또는 불량한 예후 또는 치료 실패의 위험 증가를 나타내는 유전적 마커를 갖는 환자, 예를 들면, TP53 돌연변이 또는 염색체 17p13 결손을 갖는 환자 또는 이전의 항 CD20 치료에 대한 실패 후의 환자이다. CLL 세포를 감소시키는 A2 및 B2의 효능은 통상의 위험을 갖는 환자로부터 유도된 환자 샘플과 증가된 위험을 갖는 환자로부터 유도된 환자 샘플 모두에서 높으며 리툭시맙과 알렘투주맙의 효능에 비해 명백히 우수하다.

Description

ＣＬＬ 혈액 샘플에서의 ＣＤ37 항체의 우수한 효능{SUPERIOR EFFICACY OF CD37 ANTIBODIES IN CLL BLOOD SAMPLES}

본 발명은 B 세포 고갈에 기초한 면역치료요법에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 이러한 치료요법, 예를 들면, B 세포 악성종양 및 자가면역 병태의 치료에 사용하기 위한 CD37 항체 분자, 특히 A2 및 B2에 관한 것이다.

암 및 기타 질환의 치료를 위한 안전하고 선택적인 방법으로서, 단일클론 항체(mAb)를 이용한 면역치료요법이 최근 생겨나고 있다. 구체적으로, B 세포 고갈에 기초한 치료요법, 예를 들면 B 세포 악성종양의 치료에서의 단일클론 항체의 역할은 B 세포 표면 상의 CD20 항원에 대해 지시된 항체인 리툭시맙(rituximab)(Rituxan®)의 도입 이래로 확대되었다. 수많은 연구에서, 단일 제제로서 및 저등급의 NHL(참조: [Hiddemann W, et al. Frontline therapy with rituximab added to the combination of cyclophosphamide, doxorubicin, vincristine, and prednisone (CHOP) significantly improves the outcome for patients with advanced-stage follicular lymphoma compared with therapy with CHOP alone: results of a prospective randomized study of the German Low-Grade Lymphoma Study. Group. Blood 2005; 106: 3725-3732 (2005)]), 맨틀 세포 림프종(참조: [Forstpointner R, et al. The addition of rituximab to a combination of fludarabine, cyclophosphamide, mitoxantrone (FCM) significantly increases the response rate and prolongs survival as compared with FCM alone in patients with relapsed and refractory follicular and mantle cell lymphomas: results of a prospective randomized study of the German Low-Grade Lymphoma Study Group. Blood, 2004; 104: 3064-3071.), 미만성 거대 B 세포 림프종(DLBCL) (참조: [Coiffier B, et al. Rituximab (anti-CD20 monoclonal antibody) for the treatment of patients with relapsing or refractory aggressive lymphoma: a multicenter phase II study. Blood 1998; 92: 1927-1932]) 및 버킷 림프종(참조: [Thomas DA, et al., Chemoimmunotherapy with hyper-CVAD plus rituximab for the treatment of adult Burkitt and Burkitt-type lymphoma or acute lymphoblastic leukemia. Cancer 2006; 106: 1569-1580])의 병용요법에서의 리툭시맙의 효능을 확인하였다.

그러나, 환자들 중 서브세트만이 치료요법에 반응하고, 환자의 대부분은 리툭시맙 치료 후 결국 재발한다. 따라서, 리툭시맙보다 더 높은 효능을 갖는, 특히 리툭시맙 치료에 불량하게 반응하는 환자들의 서브세트에 대해 더 높은 효능을 갖는 면역치료요법을 발견할 필요가 있다.

본 발명은 만성 림프구성 백혈병(CLL)을 지닌 환자, 특히 "고위험" 그룹 환자에 속하는 환자를 치료하기 위한 CD37 항체, 특히 A2 및 B2를 기술한다. 이러한 환자들은 플루다라빈 치료에 대한 난치성 환자 또는 불량한 예후 또는 치료 실패의 위험 증가를 나타내는 유전적 마커를 갖는 환자, 예를 들면, TP53 돌연변이 또는 염색체 17p13 결손을 갖는 환자이다. 악성 CLL 세포를 고갈시키는 이들의 능력과 관련하여 CLL 환자 유래의 전혈 샘플에서 A2 및 B2 항체를 시험한다. CD20 항체인 리툭시맙 및 CD52 항체인 알렘투주맙을 비교 항체로서 병행하여 시험한다. A2와 B2 모두는 이러한 샘플에서 고도의 CLL 세포 고갈을 매개하는데, 이는 CD20 항체인 리툭시맙 및 CD52 항체인 알렘투주맙보다 명백히 우수하다. 다양한 환자로부터 유도된 21개의 일련의 혈액 샘플은 이들의 유전적 상태 및 (임상 노출 및 시험관내 시험 후) 플루다라빈 치료에 대한 반응에 따라 특성화된다. 이러한 환자의 서브세트 분석은 A2 및 B2의 우수한 CLL 고갈 활성이 분석한 모든 서브세트에 존재함을 밝혔다. 특히, A2 및 B2는 염색체 17p13에서 결손을 갖거나 TP53 돌연변이를 갖거나 플루다라빈 치료에 대해 난치성인 "고위험" 환자에서 리툭시맙 및 알렘투주맙보다 우수하다. 또한, A2 및 B2의 CLL 고갈 효과는 통상의 위험 환자뿐만 아니라 "고위험" 환자에서 뛰어나고, 이는 CD37 항체, 특히 A2 및 B2의 우수한 CLL 고갈 활성이 치료 실패에 대한 통상의 위험을 갖는 환자에 제한되지 않고 특히 치료 실패에 대한 증가된 위험을 갖는 환자에 적용됨을 나타낸다. 표준 치료와 대조적으로, CD37 항체, 특히 A2 및 B2는 시험관내 다양한 CLL 환자 서브그룹에 대해 우수한 CLL 고갈 활성을 나타내고, 놀랍게도 이는 승인된 항체, 리툭시맙 및 알렘투주맙보다 명백히 우수하다.

지금까지, 시험관내에서 일차 CCL 세포에 대해 CD37을 표적화하기 위해 이용할 수 있는 유일한 실험 데이터는 CD37 항체 또는 항-CD37 SMIP 분자가 일차 CLL 세포에 대해 아폽토시스 및 ADCC를 유도할 수 있으나 시험관내 전혈 검정에서 CLL 세포 고갈이 관찰되는 증거가 없음을 나타낸다(참조: [Zhao XB, Lapalombella R, Joshi T, Cheney C, Gowda A, Hayden-Ledbetter MS, Baum PR, Lin TS, Jarjoura D, Lehman A, Kussewitt D, Lee RJ, Caligiuri MA, Tridandapani S, Muthusamy N, Byrd JC. Targeting CD37+ lymphoid malignancies with a novel engineered small modular immunopharmaceutical 2007; BLOOD, 1 OCTOBER 2007, VOLUME 110, NUMBER 7, Epub ahead of print . Blood. 2007 Apr 17]). 또한, CD37 항체를 사용하여 환자 유도된 혈액 샘플에서 CLL 세포 고갈이 기타 B 세포 지시된 항체를 사용하는 것보다 우수하다는 증거는 없다. 최근 공보(참조: [Zenz et al. Abstract 2379, ASH 2009, New Orleans] 및 [Platz et al. Abstract 2365, ASH 2009, New Orleans])에서, 리툭시맙 및 Fc-조작된 신규 CD20 항체 GA101의 효능은 비교할 만한 검정 방식으로 CLL 환자 유래의 혈액 샘플에서 시험된다. 이들 공보에서 개시된 결과는 상기 신규 Fc-조작된 CD20 항체 GA101이 리툭시맙보다는 우수하지만, GA101의 최대 관찰 효과는 A2 및 B2로 관찰된 것보다 명백히 낮다는 것을 나타낸다. 따라서, Fc-조작된 CD37 항체가 Fc-조작된 CD20 항체보다 훨씬 우수한 활성을 나타낸다는 것은 예상치 않았다.

이점

CLL을 지닌 환자에서의 고도의 CLL 세포 고갈은 CLL 환자의 치료에 유리한 것으로 고려되며, 이러한 제제로 치료된 환자에 대해 임상 이익의 증가로 해석하는 것으로 고려된다. A2 및 B2 항체는 전혈 검정에서 이러한 고도의 CLL 세포 고갈을 나타내는데, 이는 CD20 항체인 리툭시맙(본원에 개시된 데이터 참조) 및 GA101(참조: [(Zenz et al., 2009, Abstract 2379, ASH 2009, New Orleans])의 효과보다 우수하다. A2 및 B2의 이러한 우수한 효능은 고위험 그룹에 속하는 환자, 예를 들면, 플루다라빈에 대한 난치성 환자 또는 현재 표준 치료요법(예를 들면, CD20 항체와 플루다라빈 함유 화학치료요법의 병용 치료요법)을 사용하여 불량한 치료 결과가 예측되는 유전적 마커(예를 들면, TP53 돌연변이 또는 17p13 결손)를 갖는 환자로부터 유도된 환자 샘플에서 특히 명백하다. 추가로, 이전의 항-CD20 치료에 실패한 환자는 개선된 치료 양식을 필요로 한다. 따라서, CD20과 관련되지 않은 치료 양식(예를 들면, CD37에 특이적인 항체, 특히 A2 및 B2)의 적용은 CLL을 앓고 있는 환자, 특히 환자를 위한 개선된 치료를 제공할 것으로 기대된다. CLL 세포를 고갈시키기 위한 CD37 항체, 특히 A2 및 B2의 능력은 통상의 위험을 갖는 환자 및 증가된 위험을 갖는 환자("고위험" 또는 "초고위험 환자")로부터 유도된 환자 샘플 모두에서 높으며 리툭시맙 및 알렘투주맙보다 명백히 우수하다.

치료 용도의 적용 및 방법

본 발명에 따르면, 본 발명에 기재된 CD37 항체를 사용하는 신규한 지표(indication)가 제공된다. 따라서, 본 발명의 CD37 항체는 B 세포 악성종양을 앓고 있는 "고위험" 또는 "초고위험" 환자를 치료하는데 사용될 수 있다. 치료요법에서 사용되기 위해, CD37 항체는 동물 또는 사람에게 용이하게 투여하기에 적합한 약제학적 조성물에 포함된다. CD37 항체 분자의 일반적인 제형은 CD37 항체 분자를 생리학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 안정화제와 혼합하여 동결건조 또는 다른 건조 제형, 또는 수용액, 또는 수성 또는 비수성 현탁액 형태로 제조될 수 있다.

본 발명에 따른 CD37 항체와 사용하기 위한 약제학적으로 허용되는 담체 및 보조제에는, 예를 들면, 이온 교환체, 알루미나, 스테아르산알루미늄, 레시틴, 혈청 단백질, 완충 물질, 물, 염 또는 전해액 및 셀룰로스계 물질이 포함된다.

담체, 부형제, 개질제 또는 안정화제는 사용된 용량 및 농도에서 비독성이다. 이러한 것들에는 인산염, 시트르산염, 아세트산염, 기타 무기산 또는 유기산 및 이들의 염과 같은 완충 시스템; 아스코르브산 및 메티오닌을 포함하는 항산화제; 보존제(예를 들면, 옥타데실디메틸벤질 암모늄 클로라이드; 헥사메토늄 클로라이드; 벤즈알코늄 클로라이드, 벤즈에토늄 클로라이드; 페놀, 부틸 또는 벤질 알콜; 알킬 파라벤, 예를 들면, 메틸 또는 프로필 파라벤; 카테콜; 레조르시놀; 사이클로헥산올; 3-펜탄올; 및 m-크레졸); 단백질, 예를 들면, 혈청 알부민, 젤라틴 또는 면역글로불린; 친수성 중합체, 예를 들면, 폴리비닐피롤리돈 또는 폴리에틸렌 글리콜(PEG); 아미노산, 예를 들면, 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 히스티딘, 아르기닌 또는 리신; 단당류, 이당류, 올리고당류 또는 다당류 및 기타 탄수화물, 예를 들면, 글루코스, 만노스, 슈크로스, 트레할로스, 덱스트린 또는 덱스트란; 킬레이트제, 예를 들면, EDTA; 당알콜, 예를 들면, 만니톨 또는 소르비톨; 염-형성 상대이온, 예를 들면, 나트륨; 금속 착물(예를 들면, Zn-단백질 착물); 및/또는 이온성 또는 비이온성 계면활성제, 예를 들면, TWEEN™(폴리소르베이트), PLURONICS™ 또는 지방산 에스테르, 지방산 에테르 또는 당 에스테르가 포함된다. 또한, 에탄올 또는 이소프로판올과 같은 유기 용매도 항체 제형에 함유될 수 있다. 또한, 부형제는 방출-개질 또는 흡수-개질 기능을 가질 수 있다. 이는 가능한 약제학적으로 허용되는 담체 및 보조제의 완전한 목록이 아니며, 당업자 중 하나는 본 발명에 충분한 기타 가능성을 알고 있다.

CD37 항체 분자는 또한 건조(동결-건조, 분무-건조, 분무-동결 건조, 근임계 또는 초임계 기체에 의한 건조, 진공 건조, 공기-건조), 침전 또는 결정화되거나, 예를 들면, 하이드록시메틸셀룰로스 또는 젤라틴과 폴리(메틸메타크릴레이트)를 각각 사용하는, 예를 들면, 계면 중합 또는 코아세르베이션(coacervation) 기술에 의해 제조된 마이크로캡슐에, 콜로이드성 약물 전달 시스템(예를 들면, 리포솜, 알부민 미소구, 마이크로에멀젼, 나노-입자 및 나노캡슐)에 또는 마크로에멀젼에 포획되거나, 예를 들면, pcmc 기술(단백질 코팅된 미세결정)에 의해 담체 또는 표면에 침전 또는 고정화될 수 있다. 이러한 기술들은 당업계에 공지되어 있다.

당연히, 생체내 투여용으로 사용되는 약제학적 조성물/제형은 멸균되어야 하고; 멸균은 종래 기술, 예를 들면, 멸균 여과 막을 통한 여과에 의해 달성될 수 있다.

소위 고농도 액체 제형(HCLF)이 되도록 CD37 항체의 농도를 증가시키는 것이 유용할 수 있으며; 이러한 HCLF를 생산하는 다양한 방법이 기술되어 있다.

CD37 항체 분자는 또한 지속-방출 제제에 함유될 수 있다. 이러한 제제에는 소수성 또는 친수성 중합체의 고체, 반-고체 또는 액체 매트리스가 포함되며, 예를 들면, 필름, 스틱 또는 마이크로캡슐의 성형 물품의 형태일 수 있거나, 적용 기구를 통해 적용될 수 있다. 지속-방출 매트리스의 예에는 폴리에스테르, 하이드로겔[예를 들면, 폴리(2-하이드록시에틸-메타크릴레이트), 또는 슈크로스 아세테이트 부티레이트 또는 폴리(비닐알콜)], 폴리락타이드(미국 특허 제3,773,919호), L-글루탐산과 γ-에틸-L-글루타메이트의 공중합체, 비분해성 에틸렌-비닐 아세테이트, 분해성 락트산-글리콜산 공중합체, 예를 들면, LUPRON DEPOT™(락트산-글리콜산 공중합체와 류프롤라이드 아세테이트로 이루어진 주사가능한 마이크로구), 및 폴리-D-(-)-3-하이드록시부티르산이 포함된다. 에틸렌-비닐 아세테이트 및 락트산-글리콜산과 같은 중합체는 100일 초과 동안 분자의 방출을 가능하게 하는 반면, 특정 하이드로겔은 이보다 짧은 기간 동안 단백질을 방출한다. 캡슐화된 항체는 장시간 동안 체내에 잔존할 때, 37℃에서 수분에 대한 노출의 결과로 변성 또는 응집하여, 생물학적 활성을 소실하거나 아마도 면역원성의 가능한 변화를 야기할 수 있다. 관련 기작에 따라 안정화를 위한 합당한 전략을 고안할 수 있다. 예를 들면, 응집 기작이 티오-디설파이드 상호교환을 통한 분자간 S-S 결합 형성인 것으로 밝혀지는 경우, 안정화는 설프하이드릴 잔기의 개질, 산성 용액으로부터의 동결건조, 적당한 첨가제를 사용한 수분 함량의 조절, 및 특이적 중합체 매트릭스 조성물의 개발에 의해 달성될 수 있다.

CD37 항체 분자, 특히 A2 및 B2는 기타 적용 형태, 예를 들면, 분산액, 현탁액, 또는 리포솜, 정제, 캡슐, 분말, 스프레이, 투과 증강 기구의 존재 또는 부재 하의 경피 또는 피내 패치 또는 크림, 웨이퍼, 비강, 협측 또는 폐 제형에 혼입될 수 있거나, 이식 세포에 의해 생산되거나, 유전자 치료요법 후 개체 자신의 세포에 의해 생산될 수 있다.

CD37 항체 분자, 특히 A2 및 B2는 또한 폴리에틸렌 글리콜(PEG), 메틸 또는 에틸 그룹, 또는 탄수화물 그룹과 같은 화학적 그룹에 의해 유도체화될 수 있다. 이러한 그룹들은 항체의 생물학적 특징을 향상시키기 위해, 예를 들면, 혈청 반감기를 증가시키거나 조직 결합을 증가시키기 위해 사용될 수 있다.

바람직한 적용 방식은 비경구, 주입 또는 주사(정맥내, 근육내, 피하, 복강내, 피내)에 의하지만, 기타 적용 방식, 예를 들면, 흡입, 경피, 비강내, 협측 및 경구도 또한 적용할 수 있다.

치료 용도의 경우, 상기 화합물은 임의의 종래 방식으로 임의의 종래 용량으로 치료학적 유효량으로 투여될 수 있다. 투여 경로에는 정맥내, 근육내, 피하, 윤활낭내, 주입, 설하, 경피, 경구, 국소, 또는 흡입, 정제, 캡슐, 캐플렛(caplet), 액체, 용액, 현탁액, 유화액, 로젠지, 시럽, 복원가능한 분말, 과립, 좌제 및 경피 패치가 포함된다. 이러한 용량 형태의 제조방법은 공지되어 있다(참조예: [H.C. Ansel and N.G. Popovish, Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 5th ed., Lea and Febiger (1990)]). 치료학적 유효량은 체중, 대사, 고통의 중증도 등과 같은 인자에 기초하여 당업자에 의해 결정될 수 있다.

바람직하게는, 활성 화합물은 하루에 체중 1kg당 약 1mg 내지 약 500mg으로 투약된다. 보다 바람직하게는, 활성 화합물은 하루에 체중 1kg당 약 1mg 내지 약 100mg으로 투약된다.

질환의 예방 또는 치료의 경우, 항체의 적절한 용량은 치료되는 질환의 유형, 질환의 중증도 및 경과, 예방 또는 치료의 목적으로 항체가 투여되는지의 여부, 이전의 치료요법, 환자의 임상 이력, 및 항체에 대한 반응, 및 주치의의 재량에 좌우될 것이다. 항체는 환자에게 1회 또는 일련의 치료에 걸쳐 투여되는 것이 적합하다.

질환의 유형 및 중증도에 따라, 환자에게 투여하기 위한 초기 후보 용량은, 예를 들면, 1회 이상의 분리 투여에 의해서, 또는 연속 주입에 의해서 약 0.01㎍/kg 내지 40mg/kg(예를 들면, 0.1 내지 20mg/kg)의 항체, 특히 A2 및 B2이다. 병태에 따라 수일 동안 또는 그 이상 동안 반복 투여하는 경우, 질환 증상의 원하는 억제가 나타날 때까지 치료를 지속한다. 그러나, 다른 투약 요법이 유용할 수 있다. 이러한 치료요법의 진행은 종래 기술 및 검정법에 의해, 예를 들면, B 세포 고갈 정도를 측정함으로써 (예를 들면, 흐름세포측정법을 사용하여) 용이하게 모니터링될 수 있다.

A2의 경우, 70kg의 사람에 대한 1주일 용량 추정치는 86 내지 184mg의 범위 내이다. B2의 경우, 70kg의 사람에 대한 1주일 용량 추정치는 189 내지 404mg이다.

투여되는 항체의 "치료학적 유효량"은 질환 또는 장애를 예방, 완화 또는 치료하는데 필요한 최소량이다.

B 세포 악성종양에는 B 세포 림프종(예를 들면, 다양한 형태의 호지킨 질환), B 세포 비호지킨 림프종(NHL) 및 관련 림프종[예를 들면, 발덴스트룀 마크로글로불린혈증(림프형질세포성 림프종 또는 면역세포종이라고도 불림) 또는 중추 신경계 림프종], 백혈병[예를 들면, 급성 림프아구성 백혈병(ALL), 만성 림프구성 백혈병(CLL; B 세포 만성 림프구성 백혈병(BCLL)), 모발상 세포 백혈병 및 만성 골수성 백혈병) 및 골수종(예를 들면, 다발성 골수종)이 포함된다. 추가의 B 세포 악성종양에는 소림프구 림프종, B 세포 전림프구성 백혈병, 림프형질세포성 림프종, 비장 변연부 림프종, 형질 세포 골수종, 골의 고립 형질세포종, 골외 형질세포종, 점막 -관련 림프구성 조직(MALT)의 결절외 변연부 B 세포 림프종, 결절 변연부 B 세포 림프종, 여포성 림프종, 맨틀 세포 림프종, 미만성 거대 B 세포 림프종, 종격(흉선) 거대 B 세포 림프종, 혈관내 거대 B 세포 림프종, 원발성 삼출 림프종, 버킷 림프종/백혈병, 그레이존 림프종, 악성 잠재력 불명의 B 세포 증식, 림프종양 육아종증, 및 이식후 림프증식성 장애가 포함된다.

CD37 항체는 단독으로 투여되거나, 안정성을 향상시키고 특정 실시형태에서 이들을 함유하는 약제학적 조성물의 투여를 용이하게 하고 용해 또는 분산을 증가시키고 활성을 증가시키고 보조 치료요법을 제공하는 등의 보조제와 배합하여 투여될 수 있다. 유리하게는, 이러한 배합은 저용량의 활성 성분을 이용할 수 있고, 따라서 가능한 독성 및 역효과를 감소시킬 수 있다.

치료될 장애에 따라, CD37 항체 분자, 특히 A2 및 B2는 단독으로 사용되거나, 특히 암세포에서 혈관신생, 신호 전달 경로 또는 유사분열 체크포인트를 저해하는 치료학적 활성 화합물, 또는 DNA 손상제 또는 튜불린 결합제로부터 선택되는 하나 이상의 추가의 치료제와 배합하여 사용될 수 있다.

추가의 치료제는 임의로 동일한 약제학적 제제의 성분으로서 CD37 항체 분자, 특히 A2 및 B2의 투여와 동시에 또는 투여 전에 또는 투여 후에 투여될 수 있다.

도 1: 전혈 검정: 생존 CLL 세포에 대한 A2 및 B2 항체의 효과
A2 및 B2 항체의 농도를 증가시키면서(0.001㎍/ml 내지 100㎍/ml) CLL 환자로부터 유래한 전혈 샘플을 3시간 동안 항온처리하였다. 항온처리 기간의 종료시에 항체 농도에 대한 생존 CLL 세포의 백분율을 나타내며, 곡선은 11개의 각각의 환자 샘플의 평균을 나타낸다. 시험한 각각의 농도에 대한 표준 편차를 나타낸다. A2: 흑색 삼각형; B2: 백색 삼각형. 점선은 동형(isotype)에 대응하는 대조군 항체의 활성을 나타낸다.
도 2: CLL 환자 샘플에 대한 전혈 검정: 다양한 항체의 비교
혈액 샘플을 10㎍/ml의 항체 A2, B2, 리툭시맙, 알렘투주맙 및 동형에 대응하는 대조군 항체와 함께 3시간 동안 항온처리하였다. 항온처리 기간의 종료시에 생존 CLL 세포의 백분율을 나타내며, 막대는 11개의 환자 샘플의 평균을 나타낸다. 표준 편차를 나타낸다. 점선은 동형에 대응하는 대조군 항체의 활성을 나타낸다.
도 3: CLL 환자 샘플에 대한 전혈 검정: 다양한 환자 서브그룹의 비교
(도 3a) 혈액 샘플을 10㎍/ml의 항체 A2, B2, 리툭시맙 및 알렘투주맙과 함께 3시간 동안 항온처리하였다. 다양한 환자 서브그룹에 대한 항온처리 기간의 종료시에 생존 CLL 세포의 백분율을 나타내며, 막대는 표시된 수의 환자 샘플의 평균을 나타낸다. 표준 편차를 나타낸다.
(도 3b) 통상의 위험 환자(n=11) 및 고위험 환자(n=10)로부터 유래한 혈액 샘플을 10㎍/ml의 항체 A2, B2, 리툭시맙 및 알렘투주맙과 함께 8시간 동안 항온처리하였다. 2개의 환자 서브그룹에 대한 항온처리 기간의 종료시에 생존 CLL 세포의 백분율을 나타내며, 막대는 평균치를 나타내고, 표준 편차를 나타낸다.
도 4: Fc γ-수용체 3A에 대한 결합
Fcγ-수용체 3A에 대한 항체 A2 및 B2의 친화력을 표면 플라즈몬 공명 분석(SFP)(참조: [Edwards and Leatherbarrow, Analytical Biochemistry 246, 1997; Nieba et al., Analytical Biochemistry 234, 1996])으로 측정한다.
Fcγ-수용체 3a 단백질 고친화력 동종이형(allotype): V158.
Fcγ-수용체 3a 단백질 저친화력 동종이형: F158.
Fc-조작되지 않은 IgG1형 항체를 기준 항체로서 사용한다.
항체를 센서 표면에 코팅하고, SFP로 측정한 복합체 형성(k_a) 및 해리(k_d)의 속도를 사용하여 항체 A2 및 B2의 해리 상수(K_D)를 산출한다. 바는 3개의 독립적인 측정값의 평균을 나타내고, 표준 편차를 나타낸다.
서열 목록에 대한 범례
서열번호 1: 핵산 서열 가변 중쇄(Vh)
서열번호 2: 아미노산 서열 가변 중쇄
서열번호 3: 핵산 서열 가변 경쇄(Vl)
서열번호 4: 아미노산 서열 가변 경쇄
서열번호 5: A2 중쇄 아미노산 서열
서열번호 6: A2 경쇄 아미노산 서열
서열번호 7: 불변 중쇄 아미노산 서열
서열번호 8: 불변 경쇄 아미노산 서열
서열번호 9: A4 중쇄 아미노산 서열
서열번호 10: A4 경쇄 아미노산 서열
서열번호 11: B2 중쇄 아미노산 서열
서열번호 12: B2 경쇄 아미노산 서열
서열번호 13: B4 중쇄 아미노산 서열
서열번호 14: B4 경쇄 아미노산 서열
서열번호 15: CDR1 중쇄(H1)
서열번호 16: CDR2 중쇄(H2)
서열번호 17: CDR3 중쇄(H3)
서열번호 18: CDR1 경쇄(L1)
서열번호 19: CDR2 경쇄(L2)
서열번호 20: CDR3 경쇄(L3)
서열번호 21: 대체 CDR2 중쇄(H2b)

CLL 환자 혈액 샘플에 대한 전혈 검정: 초기 실험에서, CD37 항체인 A2 및 B2의 농도를 증가시키면서(0.001 내지 100㎍/ml) 11명의 CLL 환자로부터 유래한 전혈 샘플을 3시간 동안 처리하였다. 두 항체는 모두 전혈 검정에서 효과적이고 농도 의존적인 CLL 세포 고갈을 나타낸다. 도 1에 도시된 바와 같이, A2와 B2는 모두 약 1000ng/ml의 EC₅₀ 값으로 매우 강력하게 CLL 세포를 고갈시킨다. 10㎍/ml의 항체 농도에서 A2 및 B2의 CLL 세포 고갈 효과는 혈액 샘플을 3시간 동안 항온처리한 후 동일한 항체 농도에서 리툭시맙 및 알렘투주맙의 효과와 비교한다. 도 2에서 도시된 바와 같이, 10㎍/ml의 항체 농도에서 A2(9% 생존 세포) 및 B2(26% 생존 세포)의 CLL 세포 고갈은 알렘투주맙(71% 생존 세포) 및 리툭시맙(80% 생존 세포)으로 관찰된 것보다 명백히 우수하다. 모두 종합해보면, 이들 데이터는 항체 A2 및 B2가 시험관내 전혈 샘플로부터 유래한 CLL 세포의 강력하고 농도 의존적인 고갈을 발휘하는 것을 입증한다. CLL 세포 고갈의 정도는 리툭시맙 및 알렘투주맙으로 관찰된 것보다 명백히 우수하다.

본 발명의 특정 실시형태에서, 유전체 이상(genomic aberration)(예를 들면, TP53 돌연변이 또는 17p13 결손)의 경우에서, 플루다라빈 난치성의 경우에서 및 이전의 항-CD20 치료에 실패한 환자에서 CD37 항체인 A2 및 B2의 효과를 조사한다(도 3a 및 도 3b). 이들 경우는 일반적으로 현재 치료 접근법으로 중간 생존기간이 약 2년인 고위험 또는 초고위험 환자 집단으로 간주된다. 이 때문에, 21명의 환자로부터 유래한 혈액 샘플은 고위험 또는 초고위험 그룹의 10개의 환자 샘플 및 어떠한 특정 위험 특징도 갖지 않는 11개의 샘플을 포함하는 것을 특징으로 한다(도 3b). 본 발명자들은 고위험 그룹(17p13 결손, TP53 돌연변이, 플루다라빈 난치성) 및 어떠한 특정 위험도 갖지 않는 나머지 환자에서 CLL 세포 고갈을 비교한다. A2와 B2 항체 모두의 경우, CLL 세포 고갈은 위험 그룹 둘 다에서 높고, 즉, 10㎍/ml A2에서 평균 생존 CLL 세포: 11.1%(8시간)의 통상의 위험 대 21.3%의 고위험; 10㎍/ml B2에서 평균 생존 CLL 세포: 33.2%(8시간)의 통상의 위험 대 43.1%의 고위험(도 3b).

결론적으로, CD37 항체, 특히 A2 및 B2는 CLL 환자로부터 유래한 전혈 샘플에서 매우 효과적이고 강력한 CLL 세포 고갈을 나타낸다. 이러한 효과는 시험한 모든 환자 위험 그룹에서 높으며, 특히 고위험 환자로부터 유래한 혈액 샘플은 통상의 위험 그룹으로부터 유래한 혈액 샘플과 유사한 고도의 CLL 세포 고갈을 나타낸다. 따라서, CD37 항체, 특히 A2 및 B2는 유전적 위험과 무관하게 시험한 모든 CLL 샘플에서 매우 효과적이고, 따라서 특히 치료 실패의 위험이 증가한 환자, 소위 "고위험" 환자 또는 환자 집단(예를 들면, TP53 돌연변이, 17p13 결손, 플루다라빈 난치성 또는 항-CD20 치료요법의 실패) 또는 "초고위험" 환자 또는 환자 집단의 치료에 매우 적합하다.

정의

일반적인 실시형태 "포함함" 또는 "포함됨"은 보다 구체적인 실시형태 "로 이루어짐"을 포함한다. 또한, 단수 및 복수 형태는 제한 방식으로 사용되지 않는다. 본 발명 중에 사용된 용어는 이하의 의미를 갖는다.

테트라스파닌 상과(superfamily)의 일원인 "CD37"은 4개의 막관통 도메인과 2개의 세포외 루프를 갖는 상당히 글리코실화된 세포 표면 분자이다. CD37은 대부분 B 세포 및 B 세포 악성종양에서 발현되고, T 세포, 과립구 및 단핵구에서의 CD37의 저수준 발현이 보고되었다. CD37의 고수준 발현은 맨틀 세포 림프종(MCL)을 포함한 만성 림프구성 백혈병(CLL) 및 다양한 서브타입의 비호지킨 림프종(NHL)을 앓고 있는 환자의 샘플에서 관찰되었다(참조: [Schwartz-Albiez et al, Journal Immunol 140: 905-914, 1988; Barrena et al., Leukemia 19: 1376-1383, 2005]). 이러한 발현 패턴은 CD37을 항체-매개된 암 치료요법을 위한 매력적인 표적이 되게 한다.

암세포에 대한 CD37-특이적인 mAb의 결합은 다양한 기작의 작용을 유발할 수 있다: 첫째로, 상기 항체가 CD37 항원의 세포외 도메인에 결합한 후 보체 캐스케이드를 활성화하여 표적 세포를 용해할 수 있다. 둘째로, 항-CD37 항체는 표적 세포에 대한 항체-의존성 세포-매개된 세포독성(ADCC)을 매개할 수 있고, 이는 결합된 항체의 Fc 부분이 면역계의 세포독성 세포 상의 적당한 수용체에 의해 인식된 후 일어난다. 셋째로, 상기 항체는 항원 또는 기타 자극에 반응하는 B 세포의 능력을 변화시킬 수 있다. 마지막으로, 항-CD37 항체는 프로그래밍된 세포 사멸(아폽토시스)을 개시할 수 있다.

본 발명에 사용된 용어 "CD37 항체", "CD37 항체 분자", "항-CD37 항체" 및 "항-CD37 항체 분자"는 구체적으로 CD37 항원에 대한 결합 특이성을 갖는 항체와 관련된다. 이러한 항체의 예는 당업계에 공지되어 있으며, 이하에 추가로 기재된다.

용어 "항-CD37 항체 분자", "항-CD37 항체", "CD37 항체" 및 "CD37 항체 분자"는 상호교환적으로 사용된다.

용어 "고위험 환자" 또는 "고위험" 환자 집단은 이러한 환자 그룹의 기대 수명이 매우 짧고(2 내지 3년의 중간 기대 수명) 및 현재 표준 치료에 대한 반응이 이러한 고위험 특징을 갖지 않는 환자보다 상당히 나쁨을 의미한다. 보다 구체적으로, 이러한 그룹은 플루다라빈 난치성 질환을 지닌 환자를 포함하고, 이러한 환자는 플루다라빈을 단독 또는 병용하여 투여받고 반응하지 않거나(부분 반응 또는 완전 반응을 달성하는데 실패함) 치료후 6개월 내에 진행한 환자를 의미한다. 또한, 이러한 고위험 환자는 "TP53 기능장애" 환자 및 17p13 결손과 같은 염색체 이상을 갖는 환자를 포함한다.

"TP53 기능장애" 환자란 종양 억제 유전자 TP53 또는 p53 단백질의 기능을 손상하였음을 의미한다. 이는 현재 돌연변이에 의한 p53 단백질의 불활성화, TP53 유전자의 1회 카피의 결손 또는 이들의 조합과 관련된다. 이러한 이상들 중 하나는 난치성 CLL, 표준 치료에 대한 불량한 반응 및 단기 무진행 생존 및 전반적인 생존과 관련된다.

17p13 결손은 유전적 현상, 예를 들면, 유전체 불안정성에 의한 염색체 17p13 또는 이의 부분 결손을 의미한다.

용어 "초고위험" 환자 또는 "초고위험" 환자 집단은 구체적으로 특정 불량한 예후 또는 위험 인자, 예를 들면, TP53 기능장애 및 17p13 결손 및 플루다라빈에 대한 난치성의 조합을 갖는 고위험 환자의 그룹을 포함한다. 초고위험 환자는 고위험 환자보다 적은 중간 기대 수명, 예를 들면, 중간 생존이 2년 미만인 중간 기대 수명을 갖는다. 또한, 초고위험 환자는 초기에 치료에 대해 난치성인 환자, 예를 들면, 플루다라빈 난치성 환자로서 정의될 수 있다.

용어 "항체" 또는 "항체들"은 단일클론, 다클론, 다특이적 및 단일쇄 항체 및 이들의 단편, 예를 들면, Fab, Fab', F(ab')₂, Fc 및 Fc' 단편, 면역글로불린 경쇄(L) 및 중쇄(H), 및 불변, 가변 또는 이들의 초가변 영역뿐만 아니라 Fv 및 Fd 단편을 포함한다. 용어 "항체" 또는 "항체들"은 사람 또는 비사람 기원 항체, 사람화 항체, 키메라 항체, 및 또한 Fc-조작된 항체 또는 Fc-융합 분자를 포함한다.

Fab 단편(단편 항원 결합 = Fab)은 인접 불변 영역에 의해 결합되어 있는 2개의 쇄의 가변 영역으로 이루어진다. 이들은 파파인과 같은 프로테아제로 처리하거나 DNA 클로닝에 의해, 예를 들면, 종래 항체로부터 제조될 수 있다. 기타 항체 단편은 F(ab')₂ 단편이고, 이는 펩신을 이용한 단백질 가수분해적 소화에 의해 생성될 수 있다.

유전자 클로닝에 의해, 중쇄 가변 영역(VH)과 경쇄 가변 영역(VL)으로만 이루어진 짧은 항체 단편을 제조하는 것도 가능하다. 이들은 Fv 단편(단편 가변 = 가변 부분의 단편)으로서 공지되어 있다. 불변 쇄의 시스테인 그룹을 통한 공유 결합은 이러한 Fv 단편에서 가능하지 않기 때문에, 이들은 종종 일부 다른 방법에 의해 안정화된다. 이러한 목적을 위해, 중쇄 및 경쇄의 가변 영역을 약 10 내지 30개의 아미노산, 바람직하게는 15개의 아미노산의 짧은 펩타이드 단편에 의해 결합한다. 이는 VH 및 VL이 펩타이드 링커에 의해 결합되어 있는 단일 폴리펩타이드 쇄를 생성한다. 이러한 항체 단편은 또한 단일 쇄 Fv 단편(scFv)으로도 지칭된다. scFv 항체의 예는 당업계에 공지되어 있다.

지난 수년 동안, 다합체성 scFv 유도체를 제조하기 위한 다양한 전략들이 개발되었다. 그 목적은 약동학적 특성이 개선되고 결합력(binding avidity)이 증가한 재조합 항체를 제조하는 것이다. scFv 단편의 다합체화를 달성하기 위해, 이들은 다합체화 도메인을 갖는 융합 단백질로서 제조된다. 다합체화 도메인은, 예를 들면, IgG 또는 헬릭스 구조("코일드 코일 구조")의 CH3 영역, 예를 들면, 류신 지퍼 도메인일 수 있다. 기타 전략으로, 다합체화[예를 들면, 디아바디(diabody), 트리아바디(triabody) 및 펜타바디(pentabody)]를 위해 scFv 단편의 VH와 VL 영역 사이의 상호작용을 이용한다.

용어 "디아바디"는 당업계에서 2가의 동종이합체성 scFv 유도체를 나타내기 위해 사용된다. scFv 분자 중의 펩타이드 링커를 5 내지 10개의 아미노산으로 단축시키면, VH/VL 쇄를 중첩시켜(superimposing) 동종이합체가 형성된다. 디아바디는 삽입된 디설파이트 가교에 의해 추가로 안정화될 수 있다. 디아바디의 예는 문헌에서 찾을 수 있다.

용어 "미니바디(minibody)"는 당업계에서 2가 동종이합체성 scFv 유도체를 나타내기 위해 사용된다. 이는 이합체화 영역으로서 면역글로불린, 바람직하게는 IgG, 가장 바람직하게는 IgG1의 CH3 영역을 포함하는 융합 단백질로 이루어진다. 이는 scFv 단편을 힌지 영역에 의해, 또한 IgG 및 링커 영역에 의해 연결한다. 이러한 미니바디의 예는 당업계에 공지되어 있다.

용어 "트리아바디"는 당업계에서 3가 동종삼합체성 scFv 유도체를 나타내기 위해 사용된다. 삼합체는 링커 서열을 사용하지 않고 VH-VL을 직접 융합시켜 형성된다.

2가, 3가, 또는 4가 구조를 갖는 미니 항체로서 당업계에 공지되어 있는 단편도 또한 scFv 단편의 유도체이다. 다합체화는 이합체성, 삼합체성, 또는 사합체성 코일드 코일 구조에 의해 달성된다.

"스캐폴드(scaffold) 단백질" 또는 "스캐폴드 항체"도 또한 당업계에 공지되어 있다. 이러한 용어를 사용하는 경우, 스캐폴드 단백질은 단백질, 특히 항체의 임의의 기능성 도메인을 의미하는데, 이는 다른 단백질 또는 다른 기능을 갖는 단백질의 부분과의 동시-번역 과정에 의해 또는 유전자 클로닝에 의해 결합되어 있다.

용어 항체/항체 분자의 "상보성 결정 영역", "CDR" 또는 "CDR들"은 면역글로불린의 초가변 영역(상보성 결정 영역으로도 칭함, 약어 "CDR들"로도 표기함)을 의미한다. CDR들은 본래 다수의 항체 서열의 서열 가변성의 정도에 기초하여 문헌(참조: [Kabat et al., "Sequences of Proteins of Immunological Interest" Kabat, E., et al., U.S. Department of Health and Human Services, (1983); 및 Kabat E. A., Wu T. T., Perry H. M., Gottesman K. S., and Foeller C. Sequences of Proteins of Immunological Interest (5th Ed.); 및 NIH Publication No. 91-3242. U.S. Department of Health and Human Services, Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD 1991])에 정의되어 있다. CDR들은 항체의 표적 항원과 접촉하고 주로 결합을 담당하는 것으로 사료된다. 초가변 영역 또는 CDR들의 대체 정의는 문헌(참조: [Chothia and Lesk, J. Mol. Biol., 196: 901- 917 (1987)])에 기재되어 있다. Chothia 정의는 항체의 3차원 구조에서 루프를 구성하는 잔기에 기초한다.

본 발명의 특정 맥락에서, CDR들은 Kabat 시스템에 기초하여 결정된다. 서열번호 2 및 서열번호 4에서 나타낸 가변 영역의 서열로부터, CDR 서열은 서열 특징에 대하여 Kabat 서열 데이터베이스를 검색하여 통상적으로 결정될 수 있다. 서열번호 2에 나타낸 가변 중쇄 내에 포함된 3개의 CDR들은 바람직하게는 31번 내지 35번의 위치(H1, 서열번호 15), 50번 내지 66번의 위치(H2, 서열번호 16) 또는 50번 내지 62번의 위치(H2b, 서열번호 21) 및 99번 내지 105번의 위치(H3, 서열번호 17)를 포함하며, 서열번호 4에 나타낸 가변 경쇄 내에 포함된 3개의 CDR들은 바람직하게는 24번 내지 34번의 위치(L1, 서열번호 18), 50번 내지 56번의 위치(L2, 서열번호 19) 및 89번 내지 97번의 위치(L3, 서열번호 20)를 포함한다.

실시 형태

본 발명은 B 세포 악성종양을 앓고 있는 고위험 환자를 치료하기 위한 CD37 항체에 관한 것이다.

다른 실시형태에서, 본 발명은 B 세포 악성종양을 앓고 있는 고위험 환자를 치료하기 위한 CD37 항체와 약제학적으로 허용되는 부형제 또는 담체를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.

본 발명은 또한 B 세포 악성종양을 앓고 있는 고위험 또는 초고위험 환자의 치료를 위한 약제를 제조하기 위한 CD37 항체 또는 CD37 항체를 포함하는 약제학적 조성물의 용도에 관한 것이다.

본 발명은 또한 B 세포 악성종양을 앓고 있는 고위험 환자의 치료에 사용하기 위한 CD37 항체 또는 CD37 항체를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 구체적으로 만성 림프구성 백혈병(CLL) 고위험 환자(들)의 치료에 사용하기 위한 CD37 항체 또는 CD37 항체를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.

본 발명은 또한 B 세포 악성종양을 앓고 있는 고위험 환자의 치료방법에 사용하기 위한 CD37 항체 또는 CD37 항체를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 구체적으로 만성 림프구성 백혈병(CLL) 고위험 환자(들)의 치료방법에 사용하기 위한 CD37 항체 또는 CD37 항체를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.

본 발명은 또한 CD37 항체 또는 CD37 항체를 포함하는 약제학적 조성물의 치료학적 유효량을 치료를 필요로 하는 고위험 환자에게 투여함을 포함하는, B 세포 악성종양의 치료방법에 관한 것이다.

본 발명은 또한 B 세포 악성종양을 앓고 있는 고위험 환자의 치료방법에 관한 것이고, 상기 방법은 CD37 항체를 치료학적 유효량으로 상기 환자에게 투여함을 포함한다.

다른 실시형태에서, 본 발명은 B 세포 악성종양 또는 B 세포 악성종양을 앓고 있는 고위험 환자의 치료방법에 관한 것이고, 상기 방법은 (i) B 세포 악성종양의 치료를 필요로 하는 고위험 또는 초고위험 환자를 확인는 것, 및 (ii) CD37 항체 또는 CD37 항체를 포함하는 약제학적 조성물을 치료학적 유효량으로 상기 고위험 또는 초고위험 환자에게 투여하는 것을 포함한다.

상기 기술된 본 발명의 특정 실시형태에서, 고위험 환자는 플루다라빈 치료에 대해 난치성인 환자, TP53 기능장애를 갖는 환자, 17p13 결손을 갖는 환자, 및 리툭시맙 치료에 더 이상 반응하지 않는 환자로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 특정 실시형태에서, 고위험 환자는 2년 내지 3년의 중간 기대 수명, 특히 2년 이하의 중간 기대 수명을 갖는다.

본 발명의 특정 실시형태에서, 환자는 초고위험 환자이다.

특정 실시형태에서, 항체는 a) 서열번호 2에 나타낸 가변 중쇄 내에 포함된 CDR들, 및 b) 서열번호 4에 나타낸 가변 경쇄 내에 포함된 CDR들을 포함하는 항체이다. 상기 가변 중쇄 내에 포함된 상기 CDR들은 바람직하게는 서열번호 15, 서열번호 16 또는 서열번호 21, 및 서열번호 17을 갖는다. 상기 가변 경쇄 내에 포함된 상기 CDR들은 바람직하게는 서열번호 18, 서열번호 19 및 서열번호 20을 갖는다.

본 발명의 특정 실시형태에서, 항-CD37 항체 분자/CD37 항체는

i) 서열번호 2에 나타낸 아미노산 서열을 포함하는 가변 중쇄; 및

ii) 서열번호 4에 나타낸 아미노산 서열을 포함하는 가변 경쇄로 정의된 키메라 항체이다.

불변 중쇄 및 경쇄는 바람직하게는 사람 기원이다. 키메라 마우스/사람 항체의 작제 및 제조는 당업계에 잘 공지되어 있다.

바람직하게는, i) 상기 불변 중쇄는 IgG1 쇄이며, ii) 상기 불변 경쇄는 kappa 쇄이다. 특정 실시형태에서, 항체 분자는 하나 이상의 효과기 기능을 조절하는 Fc 도메인에서 하나 이상의 돌연변이를 갖고, 바람직하게는 상기 효과기 기능의 조절은 항체-의존성 세포-매개된 세포독성의 증가이고, 바람직하게는 상기 Fc 도메인에서의 상기 하나 이상의 돌연변이는 Kabat EU 넘버링 체계에 따라 넘버링된 239번 및 332번; 또는 236번 및 332번; 또는 236번, 239번 및 332번의 위치에서의 치환의 조합이고, 상기 치환은 바람직하게는 I332E 및 S239D; I332E 및 G236A; 또는 S239D, I332E 및 G236A이다.

바람직하게는, CD37 항체는 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 바람직하게는 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 갖는다. 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 바람직하게는 서열번호 8의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 갖는 CD37 항체가 보다 바람직하다.

또한, 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 바람직하게는 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 갖는 CD37 항체도 바람직하다.

본 발명의 다른 특정 실시형태에서, 항-CD37 항체 분자는 사람 CD37에 결합하고,

ii) 서열번호 4에 나타낸 아미노산 서열을 포함하는 가변 경쇄로 정의된 뮤린 단일클론 항체로부터 유도되고,

상기 항체는

a) 서열번호 2에 나타낸 가변 중쇄 내에 포함된 CDR들,

b) 서열번호 4에 나타낸 가변 경쇄 내에 포함된 CDR들, 및

c) 사람 항체로부터 유도된 상기 CDR들을 지지하는 골격들로 정의된 사람화 항체이고,

상기 불변 중쇄 및 경쇄는 사람 항체로부터 유래한다. 상기 가변 중쇄 내에 포함된 상기 CDR들은 바람직하게는 서열번호 15, 서열번호 16 또는 서열번호 21, 및 서열번호 17을 갖는다. 상기 가변 경쇄 내에 포함된 상기 CDR들은 바람직하게는 서열번호 18, 서열번호 19 및 서열번호 20을 갖는다. 특정 실시형태에서, 항체 분자는 하나 이상의 효과기 기능을 조절하는 Fc 도메인에서 하나 이상의 돌연변이를 갖고, 바람직하게는 상기 효과기 기능의 조절이 항체-의존성 세포-매개된 세포독성의 증가이고, 상기 Fc 도메인에서의 상기 하나 이상의 돌연변이는 바람직하게는 Kabat EU 넘버링 체계에 따라 넘버링된 239번 및 332번; 또는 236번 및 332번; 또는 236번, 239번 및 332번의 위치에서 치환의 조합이고, 상기 치환은 바람직하게는 I332E 및 S239D; 또는 I332E 및 G236A; 또는 S239D, I332E 및 G236A이다.

바람직한 실시형태에서, CD37 항체는 서열번호 11의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 바람직하게는 서열번호 12의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 갖는다. 서열번호 13의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 바람직하게는 서열번호 14의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 갖는 항체가 또한 바람직하다.

본 발명의 항체에서의 Fc 변이체는 이를 구성하는 아미노산 변형에 따라 정의된다. 따라서, 예를 들면, I332E는 모 Fc 폴리펩타이드에 비하여 I332E 치환을 갖는 Fc 변이체이다. 이와 마찬가지로, S239D/I332E는 S239D 및 I332E 치환을 갖는 Fc 변이체를 나타내고, S239D/I332E/G236A는 모 Fc 폴리펩타이드에 대해 S239D, I332E 및 G236A 치환을 갖는 Fc 변이체를 나타낸다.

넘버링은 EU 항체의 넘버링을 나타내는 EU 넘버링 체계(Kabat et al., 1991, 상기 참조)를 따른다(참조: [Edelman et al., Proc Natl Acad Sci USA 63: 78-85, 1969]). 당업자는 이러한 관례가 면역글로불린 서열의 특정 영역에서의 비순차적 넘버링으로 이루어져 면역글로불린 계열의 보존 위치들에 대한 정규화 표준(normalized reference)을 가능하게 한다는 것을 이해할 것이다.

상기에 기재된 항체들에서, 치환된 236번, 239번 및 332번의 위치는 각각 서열번호 7에 기술된 IgG1 중쇄의 119번, 122번 및 215번의 위치에 대응한다. 서열번호 5, 서열번호 9, 서열번호 11 및 서열번호 13에 나타낸 A2, A4, B2 및 B4 항체의 중쇄의 전장 서열에서, 치환된 아미노산은 235번, 238번 및 331번 위치이다.

본 발명의 특정 실시형태에서, B 세포 악성종양은 B 세포 림프종, 호지킨 질환, B 세포 비호지킨 림프종(NHL), 발덴스트룀 마크로글로불린혈증(림프형질세포성 림프종 또는 면역세포종이라고도 칭함), 중추 신경계 림프종, 백혈병, 급성 림프아구성 백혈병(ALL), 만성 림프구성 백혈병(CLL; B 세포 만성 림프구성 백혈병(B-CLL)으로도 칭함), 모발상 세포 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 골수종, 다발성 골수종, 소림프구 림프종, B 세포 전림프구성 백혈병, 림프형질세포성 림프종, 비장 변연부 림프종, 형질 세포 골수종, 골의 고립 형질세포종, 골외 형질세포종, 점막-관련 림프구성 조직(MALT)의 결절외 변연부 B 세포 림프종, 결절 변연부 B 세포 림프종, 여포성 림프종, 공격성 B-세포 림프종, 맨틀 세포 림프종, 미만성 거대 B 세포 림프종, 종격(흉선) 거대 B 세포 림프종, 혈관내 거대 B 세포 림프종, 원발성 삼출 림프종, 버킷 림프종/백혈병, 그레이존 림프종, 악성 잠재력 불명의 B 세포 증식, 림프종양 육아종증, 및 이식후 림프증식성 장애로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 바람직하게는 상기 B 세포 악성 종양은 CLL이다.

본 발명은 또한 TP53 결핍 세포의 집단으로부터 B 세포를 발현하는 CD37을 고갈시키는 방법에 관한 것이고, 상기 방법은 CD37 항체 또는 CD37 항체와 약제학적으로 허용되는 부형제 또는 담체를 포함하는 약제학적 조성물을 상기 세포의 집단에 투여함을 포함한다. 바람직하게는, 상기 방법은 시험관내에서 수행된다.

특정 실시형태에서, 상기 방법의 상기 CD37 항체는 a) 서열번호 2에 나타낸 가변 중쇄 내에 포함된 CDR들, 및 b) 서열번호 4에 나타낸 가변 경쇄 내에 포함된 CDR들을 포함하는 항체이다. 상기 고갈 방법에 유용한 이러한 CD37 항체의 특정 예는 상기에 기재되어 있다.

본 발명의 실시는, 달리 지시되지 않는 경우, 당업계에 공지되어 있는 세포 생물학, 분자 생물학, 세포 배양, 면역학 등의 종래 기술을 사용할 것이다. 이러한 기술은 현재 문헌에 잘 공지되어 있다.

본 명세서에 언급된 모든 공보 및 특허 출원은 본 발명과 관련되는 당업 기술의 수준의 지표이다. 본원에 인용된 모든 공보 및 특허 출원은 본 발명과 관련되는 기술의 상태를 보다 완전하게 설명하기 위해 그 전체가 본원에 참조로 인용된다. 상기에 일반적으로 기술된 본 발명은 하기의 실시예를 참조하여 보다 용이하게 이해될 것이며, 이로써 실시예는 본 발명의 특정 실시형태를 설명할 목적으로만 포함된다. 하기의 실시예는 제한적이지 않다. 이들은 단지 본 발명의 가능한 실시형태를 나타낸다. 당업자는 조건을 용이하게 조정하여 이를 다른 실시형태에 적용할 수 있다.

실험 재료 및 방법

수개의 항체(A2, B2, 리툭시맙, 알렘투주맙)의 CLL 세포 고갈 활성은 시험관내에서 일련의 CLL 환자 혈액 샘플로 연구된다. CLL 샘플은 유전학(유전체 이상, TP53 돌연변이, 17p13 결손)뿐만 아니라 임상 경과 및 면역표현형과 관련하여 특성화된다. TP53 돌연변이 상태는 문헌(참조: [Zenz T, Krober A, Scherer K, Habe S, Buhler A, Benner A, Denzel T, Winkler D, Edelmann J, Schwanen C, Dohner H, Stilgenbauer S. Monoallelic TP53 inactivation is associated with poor prognosis in chronic lymphocytic leukemia: results from a detailed genetic characterization with long-term follow-up. Blood. 2008 Oct 15;112(8):3322-9. Epub 2008 Aug 8])에 기재된 자동화 형광 서열분석에 의해 또는 당업계에 공지되어 있는 다른 적합한 방법(참조예: [Coll-Mulet et al., Multiplex ligation-dependent probe amplification for detection of genomic alterations in chronic lymphocytic leukaemia., Br J Haematol. 2008 Sep;142(5):793-801. Epub 2008 Jun 17])에 의해 p53의 DNA 결합 도메인의 코딩 엑손(예를 들면, 엑손 4 내지 10) 또는 기타 관련 엑손을 서열분석하여 결정될 수 있다. 유전자 이상(예를 들면, 염색체 17p13의 결손) 및 VH 상태(예를 들면, IGVH 돌연변이 상태)의 분석은 문헌(참조예: [Dohner et al., Genomic aberrations and survival in chronic lymphocytic leukemia. N Engl J Med. 2000 Dec 28;343(26):1910-6; Krober et al., Additional genetic high-risk features such as 11q deletion, 17p deletion, and V3-21 usage characterize discordance of ZAP-70 and VH mutation status in chronic lymphocytic leukemia. J Clin Oncol. 2006 Feb 20;24(6):969-75. Epub 2006 Jan 17])에 기재된 바와 같이 수행할 수 있다. 현장 혼성화(in situ hybridization)(FISH)의 형광은 유전체 이상 및 염색체 결손, 예를 들면, 17p13 결손을 검지하기 위해 당업계에 공지되어 널리 사용되는 방법이다(참조: [Dohner et al., 11q deletions identify a new subset of B-cell chronic lymphocytic leukemia characterized by extensive nodal involvement and inferior prognosis. Blood. 1997 Apr 1;89(7):2516-22]).

CLL 세포에 대한 효과를 연구하기 위해, 본 발명자들은 전혈 배양 시스템에서 시험관내 처리한 후 리툭시맙 및 알렘투주맙과 병행하여 CD37 항체를 평가한다. PBS에서 희석된 항체 20㎕를 헤파린 처리되거나 ACD(산-시트레이트-덱스트로스) 혈액 180㎕에 첨가하고, 일정한 진탕하에 48웰 플레이트에 실온에서 3시간 또는 8시간 동안 항온처리한다. 이후, 일정량의 혈액 - 항체 혼합물을 BD TruCount 튜브로 옮기고, CLL 세포를 확인하기 위해 FITC-표지된 CD19 항체 20㎕를 첨가한다. 적혈구의 용해 후, 샘플을 FACS Calibur 유동 세포측정 장치로 측정한다. 생존 CLL 세포를 측방 산란(side scatter)으로 CD19 포지티비티(positivity) 및 외관을 통해 측정한다. 가변 CLL 세포의 정량화는 TruCount 튜브에 공지된 수로 함유되어 있는 내부 표준물로서 형광 표지된 비드를 사용하여 수행한다. 농도 반응 곡선은 GraphPad Prism 소프트웨어 패키지 버전 5.02를 사용하여 산출한다.

실시예

실시예 1: CLL 전혈 검정

CLL 환자로부터 유도된 전혈 샘플에서 CLL 세포에 대한 항체 처리의 효과를 전혈 검정으로 평가한다. A2 및 B2 항체의 농도를 증가시키면서(0.001㎍/ml 내지 100㎍/ml), 이를 헤파린화되거나 산-시트레이트-덱스트로스 혈액에 첨가하고, 실온에서 3시간 동안 항온처리한다. 항체의 항온처리 후, 정량 검정을 사용하는 FACS 분석으로 남아있는 생존 CLL 세포(CD19-포지티브)를 측정한다. 도 1에 도시된 바와 같이, A2와 B2는 모두 약 1000ng/ml의 EC₅₀ 값으로 매우 강력하게 CLL 세포를 고갈시킨다. 고농도의 항체에서 CLL 세포 고갈의 평균 최대 정도는 A2의 경우 90% 초과이며, B2의 경우 약 75% 초과이다. 이러한 데이터는 A2 및 B2 항체가 시험관내에서 CLL 환자의 전혈 샘플로부터 유래한 CLL 세포의 강력하고 농도 의존적인 고갈을 발휘하는 것을 입증한다.

실시예 2: CLL 절혈 검정: 리툭시맙 및 알렘투주맙과의 비교

A2 및 B2의 효과를 CLL 처리에 대해 승인된 항체와 비교하기 위해, CD20 항체인 리툭시맙 및 CD52 항체인 알렘투주맙을 동일 환자 샘플에서 병행하여 시험한다. 도 2에 도시된 바와 같이, A2(9% 생존 세포) 및 B2(26% 생존 세포)로 3시간 항온처리한 후 10㎍/ml의 항체 농도에서의 2개의 CLL 세포 고갈은 알렘투주맙(71% 생존 세포) 및 리툭시맙(80% 생존 세포)으로 관찰된 것보다 명백히 우수하다. 이들 데이터는 CLL 환자로부터 유래한 전혈 샘플에서 A2 및 B2의 CLL 세포 고갈 정도가 리툭시맙 및 알렘투주맙으로 관찰된 것보다 명백히 우수하다는 것을 입증한다.

실시예 3: CLL 전혈 검정: 다양한 환자 위험 그룹의 비교

본 발명자들은 유전체 이상(예를 들면, TP53 돌연변이 또는 17p13 결손)의 경우에서, 플루다라빈 난치성의 경우에서 및 항-CD20 치료요법에 실패한 후의 환자에서 A2 및 B2의 효과에 특히 관심을 갖고 있다. 이들 경우는 일반적으로 "고위험" 또는 "초고위험" 환자 집단으로 간주된다. 이 때문에, 19명(도 3a) 내지 21명(도 3b)의 환자로부터 유래한 혈액 샘플은 고위험 또는 초고위험 그룹의 10개의 환자 샘플 및 어떠한 특정 위험 특징도 갖지 않는 9개(도 3a) 내지 11개(도 3b)의 샘플을 포함하는 것을 특징으로 한다. 고위험 또는 초고위험 환자 그룹은 17p13 결손 환자, TP53 돌연변이 환자, 플루다라빈 치료에 대해 난치성인 환자 및 항-CD20 치료 후의 환자를 포함한다. 본 발명자들은 고위험 또는 초고위험 그룹(17p13 결손, TP53 돌연변이, 플루다라빈 난치성 및 항-CD20 치료 후; n=10; 도 3b) 및 어떠한 특정 위험도 없는 나머지 환자(n=9, 도 3a; 및 n=11, 도 3b)에서 CLL 세포 고갈을 비교한다. A2와 B2 항체 모두의 경우, CLL 세포 고갈은 위험 그룹에서 높고; 즉, 10㎍/ml A2에서 평균 생존 CLL 세포: 11.1%(8시간)의 통상의 위험; 21.3%의 고위험; 10㎍/ml B2에서 평균 생존 CLL 세포: 33.2%(8시간)의 통상의 위험; 43.1%의 고위험(도 3b). 도 3, 특히 도 3b에 도시된 바와 같이, 조사된 모든 환자 서브그룹에서, A2 및 B2의 효능은 리툭시맙 및 알렘투주맙보다 명백히 우수하다. 이러한 분석으로부터의 발견은 A2 및 B2 항체가 조사된 모든 환자 서브그룹에서 우수한 CLL 고갈 활성을 나타내며, 특히 치료 실패의 위험이 증가한 CLL 환자의 치료에 매우 적합하다는 것을 입증한다.

실시예 4: A2 및 B2 항체는 Fc γ 수용체 3A에 대한 결합을 상당히 개선시킨다 .

Fcγ-수용체 3a에 대한 A2 및 B2 항체의 친화력을 표면 플라즈몬 공명 분석(SFP)(참조: [Edwards and Leatherbarrow, Determination of Association Rate Constants by an Optical Biosensor Using Initial Rate Analysis. Analytical Biochemistry 246, 1-6, 1997; Nieba et al., Competition BIAcore for Measuring True Affinities: Large Differences from Values Determined from Binding Kinetics. Analytical Biochemistry 234, 155-165, 1996])으로 측정한다. 요약하면, 재조합 Fcγ-수용체 3a 단백질, 고친화력 V158 동종이형 또는 저친화력 F158 동종이형을 센서 표면에 코팅하고, SFP로 측정한 복합체 형성(k_a) 및 해리(k_d)의 속도를 사용하여 A2 및 B2 항체의 해리 상수(K_D)를 산출하였다. Fc-조작되지 않은 IgG1형 항체를 기준 항체로서 사용한다. A2는 V158 동종이형에 대해 8.8nM의 K_D 및 F158 동종이형에 대해 17.5nM의 K_D를 나타내며, B2는 9.3nM 및 21.1nM의 K_D를 각각 나타낸다. 대조적으로, Fc-조작되지 않은 IgG1 기준 항체는 고친화력 동종이형 V158에 대해 379nM의 K_D 및 저친화력 동종이형 F158에 대해 1400nM의 K_D를 나타낸다. 요약하면, A2 및 B2 항체는 Fcγ-수용체 3a V158에 대해 약 40배의 결합 증가 및 Fcγ 수용체 3a F158에 대해 약 60배 내지 80배의 결합 증가를 나타내고, 이는 항체 의존성 세포의 세포독성(ADCC)을 상당히 증가시키고 A2 및 B2의 임상 효능을 상당히 개선시킬 것으로 예상된다.

SEQUENCE LISTING <110> BOEHRINGER INGELHEIM INTERNATIONAL GMBH <120> SUPERIOR EFFICACY OF CD37 ANTIBODIES IN CLL BLOOD SAMPLES <130> P01-2642 pct <150> EP 10169795.1 <151> 2012-07-16 <150> EP 10175586.6 <151> 2012-09-07 <160> 21 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 348 <212> DNA <213> Mus musculus <400> 1 gcggtccagc tgcagcagtc tggacctgag ctggaaaagc ctggcgcttc agtgaagatt 60 tcctgcaagg cttctggtta ctcattcact ggctacaata tgaactgggt gaagcagaat 120 aatggaaaga gccttgagtg gattggaaat attgatcctt attatggtgg tactacctac 180 aaccggaagt tcaagggcaa ggccacattg actgtagaca aatcctccag cacagcctac 240 atgcagctca agagtctgac atctgaggac tctgcagtct attactgtgc aagatcggtc 300 ggccctatgg actactgggg tcaaggaacc tcagtcaccg tctcttct 348 <210> 2 <211> 116 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 2 Ala Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Glu Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr 20 25 30 Asn Met Asn Trp Val Lys Gln Asn Asn Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Asn Ile 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Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 11 <211> 446 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct heavy chain B2 <400> 11 Ala Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr 20 25 30 Asn Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Asn Ile Asp Pro Tyr Tyr Gly Gly Thr Thr Tyr Asn Arg Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Ser Val Gly Pro Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala 115 120 125 Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu 130 135 140 Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly 145 150 155 160 Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser 165 170 175 Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu 180 185 190 Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr 195 200 205 Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr 210 215 220 Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Asp Val Phe 225 230 235 240 Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 245 250 255 Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val 260 265 270 Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 275 280 285 Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 290 295 300 Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 305 310 315 320 Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Glu Glu Lys Thr Ile Ser 325 330 335 Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 340 345 350 Ser 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Lys Thr 275 280 285 Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 290 295 300 Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 305 310 315 320 Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Glu Glu Lys Thr Ile Ser 325 330 335 Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 340 345 350 Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val 355 360 365 Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 370 375 380 Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 385 390 395 400 Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 405 410 415 Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 420 425 430 Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 14 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct light chain B4 <400> 14 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Thr Ser Glu 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Claims

B 세포 악성종양을 앓고 있는 고위험 환자를 치료하기 위한 CD37 항체.
B 세포 악성종양을 앓고 있는 고위험 환자의 치료에 사용하기 위한, 바람직하게는 만성 림프구성 백혈병(CLL) 고위험 환자의 치료에 사용하기 위한 CD37 항체 또는 CD37 항체를 포함하는 약제학적 조성물.
B 세포 악성종양을 앓고 있는 고위험 환자의 치료방법에 사용하기 위한, 바람직하게는 만성 림프구성 백혈병(CLL) 고위험 환자의 치료방법에 사용하기 위한 CD37 항체 또는 CD37 항체를 포함하는 약제학적 조성물.
제1항 내지 제3항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 고위험 환자가 플루다라빈 치료에 대해 난치성인 환자, TP53 기능장애를 갖는 환자, 17p13 결손을 갖는 환자, 및 리툭시맙 치료에 더 이상 반응하지 않는 환자로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, CD37 항체.
제1항 내지 제4항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 고위험 환자가 2년 내지 3년의 중간 기대 수명, 특히 2년 이하의 중간 기대 수명을 갖는, CD37 항체.
제1항 내지 제5항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가
a. 서열번호 2에 나타낸 가변 중쇄 내에 포함된 CDR들(바람직하게는 상기 CDR들은 서열번호 15, 서열번호 16 또는 서열번호 21, 및 서열번호 17을 갖는다) 및
b. 서열번호 4에 나타낸 가변 경쇄 내에 포함된 CDR들(바람직하게는 상기 CDR들은 서열번호 18, 서열번호 19 및 서열번호 20을 갖는다)을 포함하는 항체인, CD37 항체.
제1항 내지 제6항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 CD37 항체가
a. 서열번호 2에 나타낸 아미노산 서열을 포함하는 가변 중쇄, 및
b. 서열번호 4에 나타낸 아미노산 서열을 포함하는 가변 경쇄로 정의된 키메라 항체이며, 상기 불변 중쇄 및 경쇄가 바람직하게는 사람 기원인, CD37 항체.
제6항에 있어서, 상기 항체가 사람 항체로부터 유도된 상기 CDR들을 지지하는 골격들로 정의된 사람화 항체이며, 상기 불변 중쇄 및 경쇄가 사람 항체로부터 유래하는, CD37 항체.
제6항에 있어서, 상기 항체가 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄, 및 바람직하게는 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 갖는, CD37 항체.
제6항에 있어서, 상기 항체가 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄, 및 바람직하게는 서열번호 8의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 갖는, CD37 항체.
제6항에 있어서, 상기 항체가 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄, 및 바람직하게는 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 갖는, CD37 항체.
제6항에 있어서, 상기 항체가 서열번호 11의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄, 및 바람직하게는 서열번호 12의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 갖는, CD37 항체.
제6항에 있어서, 상기 항체가 서열번호 13의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄, 및 바람직하게는 서열번호 14의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 갖는, CD37 항체.
제1항 내지 제13항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 B 세포 악성종양이 B 세포 림프종, 공격성 B 세포 림프종, 호지킨 질환, B 세포 비호지킨 림프종(NHL), 림프종, 발덴스트룀 마크로글로불린혈증(림프형질세포성 림프종 또는 면역세포종이라고도 칭함), 중추 신경계 림프종, 백혈병, 급성 림프아구성 백혈병(ALL), 만성 림프구성 백혈병(CLL; B 세포 만성 림프구성 백혈병(BCLL)으로도 칭함), 모발상 세포 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 골수종, 다발성 골수종, 소림프구 림프종, B 세포 전림프구성 백혈병, 림프형질세포성 림프종, 비장 변연부 림프종, 형질 세포 골수종, 골의 고립 형질세포종, 골외 형질세포종, 점막-관련 림프구성 조직(MALT)의 결절외 변연부 B 세포 림프종, 결절 변연부 B 세포 림프종, 여포성 림프종, 맨틀 세포 림프종, 미만성 거대 B 세포 림프종, 종격(흉선) 거대 B 세포 림프종, 혈관내 거대 B 세포 림프종, 원발성 삼출 림프종, 버킷 림프종/백혈병, 그레이존 림프종, 악성 잠재력 불명의 B 세포 증식, 림프종양 육아종증, 및 이식후 림프증식성 장애로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 B 세포 악성종양이 바람직하게는 CLL인, CD37 항체.
B 세포 악성종양의 치료방법으로서, 상기 방법이
a. 제1항 내지 제14항에 기재된 CD37 항체, 또는
b. CD37 항체를 포함하는 약제학적 조성물의 치료학적 유효량을 상기 치료를 필요로 하는 고위험 또는 초고위험 환자에게 투여함을 포함하는, B 세포 악성종양의 치료방법.
제15항에 있어서, 상기 항체가
a. 서열번호 2에 나타낸 가변 중쇄 내에 포함된 CDR들(바람직하게는 상기 CDR들은 서열번호 15, 서열번호 16 또는 서열번호 21, 및 서열번호 17을 갖는다) 및
b. 서열번호 4에 나타낸 가변 경쇄 내에 포함된 CDR들(바람직하게는 상기 CDR들은 서열번호 18, 서열번호 19 및 서열번호 20을 갖는다)을 포함하는 항체인, B 세포 악성종양의 치료방법.
제15항 또는 제16항에 있어서, 상기 CD37 항체가
a. 서열번호 2에 나타낸 아미노산 서열을 포함하는 가변 중쇄, 및
b. 서열번호 4에 나타낸 아미노산 서열을 포함하는 가변 경쇄로 정의된 키메라 항체이며, 바람직하게는 상기 불변 중쇄 및 경쇄가 사람 기원인, B 세포 악성종양의 치료방법.
제16항에 있어서, 상기 항체가 사람 항체로부터 유도된 상기 CDR들을 지지하는 골격들로 정의된 사람화 항체이며, 상기 불변 중쇄 및 경쇄가 사람 항체로부터 유래하는, B 세포 악성종양의 치료방법.
제16항에 있어서, 상기 항체가 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄, 및 바람직하게는 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 갖는, B 세포 악성종양의 치료방법.
제16항에 있어서, 상기 항체가 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄, 및 바람직하게는 서열번호 8의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 갖는, B 세포 악성종양의 치료방법.
제16항에 있어서, 상기 항체가 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄, 및 바람직하게는 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 갖는, B 세포 악성종양의 치료방법.
제16항에 있어서, 상기 항체가 서열번호 11의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄, 및 바람직하게는 서열번호 12의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 갖는, B 세포 악성종양의 치료방법.
제16항에 있어서, 상기 항체가 서열번호 13의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄, 및 바람직하게는 서열번호 14의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 갖는, B 세포 악성종양의 치료방법.
제15항 내지 제23항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 B 세포 악성종양이 B 세포 림프종, 공격성 B 세포 림프종, 호지킨 질환, B 세포 비호지킨 림프종(NHL), 림프종, 발덴스트룀 마크로글로불린혈증(림프형질세포성 림프종 또는 면역세포종이라고도 칭함), 중추 신경계 림프종, 백혈병, 급성 림프아구성 백혈병(ALL), 만성 림프구성 백혈병(CLL; B 세포 만성 림프구성 백혈병(BCLL)으로도 칭함), 모발상 세포 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 골수종, 다발성 골수종, 소림프구 림프종, B 세포 전림프구성 백혈병, 림프형질세포성 림프종, 비장 변연부 림프종, 형질 세포 골수종, 골의 고립 형질세포종, 골외 형질세포종, 점막-관련 림프구성 조직(MALT)의 결절외 변연부 B 세포 림프종, 결절 변연부 B 세포 림프종, 여포성 림프종, 맨틀 세포 림프종, 미만성 거대 B 세포 림프종, 종격(흉선) 거대 B 세포 림프종, 혈관내 거대 B 세포 림프종, 원발성 삼출 림프종, 버킷 림프종/백혈병, 그레이존 림프종, 악성 잠재력 불명의 B 세포 증식, 림프종양 육아종증, 및 이식후 림프증식성 장애로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 바람직하게는 상기 B 세포 악성종양이 CLL인, B 세포 악성종양의 치료방법.
제15항 내지 제24항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 고위험 환자가 플루다라빈 치료에 대해 난치성인 환자, TP53 기능장애를 갖는 환자, 17p13 결손을 갖는 환자, 및 리툭시맙 치료에 더 이상 반응하지 않는 환자로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, B 세포 악성종양의 치료방법.
제15항 내지 제25항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 고위험 환자가 2년 내지 3년의 중간 기대 수명, 특히 2년 이하의 중간 기대 수명을 갖는, B 세포 악성종양의 치료방법.
TP53 결핍 세포의 집단으로부터 B 세포를 발현하는 CD37의 고갈방법으로서,
상기 방법이 CD37 항체 또는 CD37 항체와 약제학적으로 허용되는 부형제 또는 담체를 포함하는 약제학적 조성물을 상기 세포의 집단에 투여함을 포함하며,
상기 방법이 바람직하게는 시험관내에서 수행되는, CD37의 고갈방법.