KR20130057742A

KR20130057742A - 살비성 조성물

Info

Publication number: KR20130057742A
Application number: KR1020110123637A
Authority: KR
Inventors: 채숙희; 박병묵; 박홍묵
Original assignee: 주식회사 엔에이치바이오
Priority date: 2011-11-24
Filing date: 2011-11-24
Publication date: 2013-06-03

Abstract

본 발명은 집먼지진드기 살비제에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는, 인체에 무해하고, 친환경적이면서, 유기화합물을 대체할 수 있는 집먼지진드기 살비제에 관한 것이다.
본 발명에 따른 집먼지진드기 살비제는, 산시올(sanshol, C16H27ON)을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하고, 이때, 산시올(sanshol, C16H27ON)은 초피나무 추출물 또는 산초나무 추출물에 포함된 것을 이용한다.
이에 따르면, 천연 물질인 초피나무 또는 산초나무로부터 추출한 조추출물, 정유, 및 산시올 중 어느 하나를 이용하여 집먼지진드기 살비 효과가 우수하고 인체에 해가 없는 집먼지진드기 살비제를 구현할 수 있다.

Description

살비성 조성물{ACARICIDAL COMPONENT}

본 발명은 살비성 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는, 인체에 무해하고, 친환경적이면서, 기존에 사용되는 유기화합물을 대체할 수 있는 집먼지진드기 살비제에 관한 것이다.

본 발명은 식물에서 추출한 살비성 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 집먼지진드기에 살충력을 가지는 조추출물 및 화합물에 관한 것이다.

집먼지진드기는 인간 주거지에서 가장 핵심적인 알레르기원으로서, 특히 천식과 비염을 유발하는 인자이다.(Maunsell, K., Wratith, D.C. and Cunnington, A.M.; Mites and house dust allergy in bronchial asthma. Lancet 1 : 1267-1270). 진드기 중 필로그리피대(Pylogryphidae)과에 속하는 진드기들은 먼지내에서 서식하고 있으며(Voorhorst, R., Spieksma-Boezeman, M.I.A. and Spieksma, F.Th.; Is a mite Dermatophagoides spp. the producer of the house dust allergen Allerg. Asthma. 10(6):329-334, 1964), 특히 세로무늬 먼지진드기(Dermatophagoides pteronyssinus), 큰다리 먼지진드기(D. farinae), 마이크로세라스진드기(D.microceras) 및 유로글리퍼스 마이네(Euroglyphus maynei)등의 진드기들은 아토피성(Atopy) 체질의 사람들에게서 비염, 천식 또는 습진과 같은 증상을 유발한다.(International Workshop Report; Dust mite allergens and asthma-a worldwide problem. The Journal of Allergy and Clinical Immunology 83:416-427, 1989; International Workshop Report; Dust mite allergens and asthma; Report of a second international Workshop. The Journal of Allergy and Clinical Immunology 89: 1046-1060, 1992).

최근에는 중앙난방식 관리 방식의 아파트 증가, 보조 난방장치의 사용 증가, 항상 주거내에서 상존하는 카펫 및 침대 등의 사용량의 증가 등의 주거환경 변화가 진드기 생육에 필요한 최적조건을 부여하게 되었으며, 그로 인하여 진드기는 빠른 증식과 4계절 실내 조건하에서 생존할 수있게 되었다.(Susan M.P. and Ward G.W. Jr, 1987, House dust sensitivity and environmental control. Immunol. Allergy North Amer 7, 447-461; Pollart S.M., Ward G.W. Jr and Platts-Mills A.E., 1989, House Dust sensitivity and environmental control. Immunol. Allergy Clinics of North America 7, 447-461) 이러한 집먼지진드기들의 개체군을 감소시키기 위해 현재까지 주로 철저한 청결유지, 건조, 공기 중 상대습도 조절과 같은 물리적 방제와 피리미포스-메틸(pirimiphos-methyl), 벤젤 벤조에이트(benzyl benzoate), 디에틸-메타-톨류아마이드(diethyl-m-toluamide(DEET)) 및 디뷰틸프랄레이트(dibutyl phthalate)와 같은 유기화합물에 의존한 화학적 방제에 크게 의존해 왔다.(Heller-Haupt A. and Busvine J.R., 1974; Tests of acaricides against house dust mites (Dermatophagoides pteronyssinus, Dermatophagoides farinae), Journal of Medical Entomology 11, 551-558).

상기한 집먼지 진드기를 퇴치하기 위한 다양한 방제법들이 존재함에도 불구하고 물리적 방제법의 어려움과 유기합성 방제제들의 고독성 문제로 인해 보다 신규하고 안전한 천연 화합물들을 이용하고자 하는 각국의 연구가 활발히 진행되고 있다. (Pollart S.M., Ward G.W. Jr and Platts-Mills A.E., 1987. House dust sensitivity and environmental control. Immunol Allergy Clinics of North America 7, 447-461)

그래서 식물체 또는 그 유래물질이 집먼지진드기 방제원으로 이용될 수 있다. 식물체들은 다양한 생리활성 물질들을 함유하고 있고, 이들 화합물 대다수는 쉽게 생분해되어 무독성 물질로 분해될 수 있으며, 특정한 목적 충만을 선택적으로 치사시킬 수 있을 뿐 만아니라 집먼지진드기의 종합적방제(IPM, integrated mite management program)원으로 이용될 수 있기 때문이다.(Namba t., 1993, The Encyclopedia of Wakan-YAku(Traditional Sino-Japanese Medicines) with Color Pictures, Hoikusha, Osaca, Japan) 따라서 많은 노력이 상업적인 집먼지진드기 방제원이나 그 선도화합물로서 식물체 추출물이나 식물체 유래물질들을 이용하는데 집중되고 있다.

본 발명은 상기 내용에 착안하여 제안된 것으로, 인체에 무해하고, 친환경적이면서, 유기화합물인 대체할 수 있는 집먼지진드기 살비제를 제공하는데 그 목적이 있다.

상기 목적을 달성하기 위해, 본 발명에 따른 집먼지진드기 살비제는, 산시올(sanshol, C16H27ON)을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 한다.

그리고, 상기 산시올(sanshol, C16H27ON)은 초피나무 추출물 또는 산초나무 추출물에 포함된 것을 이용한다.

이때, 상기 초피나무 추출물 또는 상기 산초나무 추출물은 각 열매의 메탄올 조추출물 또는 정유를 이용한다.

바람직하게, 상기 초피나무 또는 상기 산초나무 열매의 메탄올 조추출물 함량을 집먼지진드기 살비제의 전체 중량에 대해 35 내지 40 중량％로 포함하거나, 상기 초피나무 또는 상기 산초나무 열매의 정유 함량을 집먼지진드기 살비제의 전체 중량에 대해 20 내지 25 중량％로 포함할 수 있다.

그리고, 상기 산시올의 함량을 집먼지진드기 살비제의 전체 중량에 대해 5 내지 10 중량％로 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 모기 기피제는 천연 물질인 초피나무 또는 산초나무로부터 추출한 조추출물, 정유, 및 산시올 중 어느 하나를 이용하여 집먼지진드기 살비 효과가 우수하고 인체에 해가 없는 집먼지진드기 살비제를 구현할 수 있다.

이하, 본 발명의 바람직한 실시예를 설명하되, 이 분야의 종사자들이 용이하게 알 수 있는 구성과 그에 대한 작용 및 효과에 대한 상세한 설명은 간략히 하거나 생략한다.

본 발명에 따른 집먼지진드기 살비제는 본 발명자들은 큰다리 먼지진드기(American house dust mite, Dermatophagoides farinae)와 세로무늬 먼지진드기(European house dust mite, Dermatophagoides pteronyssinus)을 대상으로 초피나무 추출물 또는 산초나무 추출물의 살비활성을 조사하여 이들이 인체에 무해하면서도 집먼지진드기에 대해 살비활성이 우수함을 확인하여 본 발명을 완성하였다.

본 발명에서는 집먼지진드기에 대한 살비활성을 조사하기 위해 초피나무 및 산초나무의 추출물은 수증기 추출, 열수 추출, 유기용매 추출(예컨대 메탄올, 에탄올 등의 알코올용매 추출) 또는 환류냉각 추출방법으로 추출되는 것을 특징으로 한다. 본 발명의 구체적인 실시예에서는 물 또는 유기용매로 조추출한 추출물과 수증기 증류 추출하여 초피나무와 산초나무의 추출물을 얻어내었다.

초피나무와 산초나무의 추출물은 각 나무의 껍질, 잎, 및 열매를 이용하여 추출할 수 있지만, 본 실시예에서는 각 나무의 열매를 이용하여 추출하였다.

상기 산초와 초피는 한의학에서 방향성 건위, 소염, 이뇨, 구충제로서 사용되고 위장을 자극하여 신진대사를 항진시키는 기능이 있으며, 치통, 신경통, 저혈압, 감기, 중풍 치료에 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 초피는 중국, 일본에서 Chinese pepper, Japanese pepper로 불리면서 향신료로 사용되어 왔고, 국내에서는 김치의 고추 대신 사용되었으며, 한약재 등으로 사용되었다. 또한, 상기와 같은 정유 성분은 면역력 증강, 항암 효과, 노화 억제, 항균력 등의 활성을 지니기 때문에, 천연 향신료나 감미료, 방부제로 이용되어 왔다. 서구에서는 정유를 사용하여 정신적 질병을 치유하는 향기요법으로도 이용되고 있다. 상기 산초 및 초피의 정유는 주로 테르펜(terpenoid) 화합물로서 생물학적 활성이 발견되면서 향식제, 음료, 화장품 및 청결제 등에 사용이 증가하고 있다.

본 발명의 상기 초피나무(Zanthoxylum piperitum)추출물은 리모넨(limonene), 제라닐아세테이트(geranyl acetate), β-미르센(β-myrcene) 및 산시올(sanshol)을 함유한다. 또한, 상기 산초나무(Zanthoxylum schinifolium)의 추출물은 에스트라골(estragole), 헥사데카노익산(hexadecanoic acid), 올레익산(oleic acid) 및 산시올(sanshol)을 함유한다.

상기 초피나무(Zanthoxylum piperitum)추출물, 산초나무(Zanthoxylum schinifolium)의 추출물은 살비제 조성물에 단독으로 사용하거나 통상적인 살비제에 포함되는 물질과 혼합 사용할 수 있다.

그리고, 혼합 사용되는 경우 상기 초피나무 메탄올 조추출물 또는 산초나무 메탄올 조추출물의 함량은 35 내지 40 중량％로 포함하는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 20 내지 25 중량％의 초피 정유 또는 산초 정유를 포함하거나 5 내지 10 중량％의 산시올을 포함하는 것이 바람직하는 사실을 다수의 실험을 통해 확인할 수 있었다.

본 발명의 집먼지진드기 살비제 조성물의 제형은 유제, 수화제, 액제, 분제, 입제상, 미분제, 미립제, 저비산분제, 액상수화제, 훈연제, 훈증제, 정제, 에어로졸, 도포제, 스프레이상 또는 젤상으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것이 바람직하고, 살비제 조성물의 휘발성을 적절히 조절할 수 있는 제형이 가장 바람직하다.

이러한 본 발명의 집먼지진드기 살비제 조성물은 집먼지진드기가 서식하는 곳에 사용하는 것이 바람직하며, 본 발명의 살비제 조성물의 적용용량은 통상적인 살비제를 적용시키는 용량으로 사용할 수 있다.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위해 제공되는 것일 뿐 본 발명이 하기의 실시예에 한정되는 것은 아니다.

[실시예 1]

시료 제조

본 발명의 초피 및 산초 건조 시료는 2010년 10월 경북 영천시에서 채집한 초피 열매 및 산초 열매와 과피 시료를 구입하여 사용하였다.

1. 초피 및 산초 정유물의 추출

초피 건조 시료 각각 1kg을 마쇄하여 클레벤저 형태(Clavenger type) 장치를 이용하여 2시간 동안 수증기 증류하였다. 즉, 시료 플라스크 하단에 deodorized distilled water 1L를 넣고 상단에 초피 분말을 담은 거즈 주머니를 넣은 후, 가열하여 발생하는 수증기와 향기 성분을 냉각 장치에 통과시켰다. 이를 튜브(falcon conical tube)에 모아 상층에 위치한 정유만을 따로 분리한 후, 여과하여 초피 정유를 얻었다. 얻어진 초피의 정유 추출물은 초피 건조 시료의 중량에 대해 0.6％의 중량이었다.

그리고, 동일한 방법으로, 산초 건조 시료 각각 1kg을 마쇄하여 클레벤저 형태(Clavenger type) 장치를 이용하여 2시간 동안 수증기 증류하였다. 즉, 시료 플라스크 하단에 deodorized distilled water 1L를 넣고 상단에 산초 분말을 담은 거즈 주머니를 넣은 후, 가열하여 발생하는 수증기와 향기 성분을 냉각 장치에 통과시켰다. 이를 튜브(falcon conical tube)에 모아 상층에 위치한 정유만을 따로 분리한 후, 여과하여 산초 정유를 얻었다. 이때, 산초의 정유 추출물은 0.5％이었다.

2. 초피 및 산초의 유기용매 추출

초피 건조 시료 1kg을 마쇄하여 실온에서 메탄올로 2회 추출하고 와트만 여과지로 여과하여 그 여과액을 35℃의 진공상태에서 농축하여 메탄올 조추출물을 수율 6％로 수득하였다. 메탄올 조출물의 수율은 마쇄한 시료 중량 대비 수득된 메탄올 추출물의 중량으로 계산되었다.

그리고, 산초 건조 시료 1kg을 마쇄하여 동일한 조건과 방법으로 추출한 결과 메탄올 조추출물을 수율 6％로 수득하였다.

3. 산시올의 추출

본 발명에서 초피 또는 산초나무의 열매 및 과피를 에탄올로 추출하여 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트, 물층으로 분획한 후 집먼지진드기 살비 기능을 잔류박막법 시험으로 실시하여 집먼지진드기에 살비능을 가지는 헥산층을 여러 단계의 크로마토그래피를 실시하여 색층분리를 수행하였고, 최종 단계에서 한 종류의 살비능을 가지는 화합물을 분리하였다. 상기 화합물의 구조를 분석한 결과, 산시올(sanshol, C16H27ON)이었다.

[실험예 1]

상기 실시예 1에서 추출한 초피 및 산초의 정유와, 초피 및 산초의 메탄올 조추출물과, 산시올의 살비활성을 큰다리 먼지진드기(American house dust mite, Dermatophagoides farinae)와 세로무늬 먼지진드기(European house dust mite, Dermatophagoides pteronyssinus)를 대상으로 하여 조사하였다.

실험에 사용한 검정용 집먼지진드기

살비 활성은 큰다리 먼지진드기(American house dust mite, Dermatophagoides farinae)와 세로무늬 먼지진드기(European house dust mite, Dermatophagoides pteronyssinus)의 2종의 먼지진드기에 대하여 실시하였다. 상기 큰다리 먼지진드기와 세로무늬 먼지진드기는 상대습도 75±5 ％, 온도 25±1 ℃를 유지한 사육실에서 사육하였으며, 12.5×10.5×5cm의 용기에 치어사료와 복합비타민제(에비오제)를 1:1로 혼합한 사료 및 17.5×17.5×17.5cm 부피의 용기 바닥에 식염수를 적당량 부어 사육실에 넣어 주었다. 상기 큰다리 먼지진드기와 세로무늬 먼지진드기는 살비제에 노출없이 사육하였다.

살비활성 검정

(1) 튜브테스트(잔류박막법 ; Dry film method)

식물체의 생리활성물질을 탐색하기 위해서는 초기 생물검정의 농도를 결정하는 것이 가장 중요한 요인으로 작용한다. 너무 낮은 농도를 설정시 그 생리활성물질을 놓칠 수 있고, 너무 높게 산정시 정확한 결과치의 해석이 어렵기 때문이다.

초피 및 산초 조추출물, 초피 및 산초의 정유, 산시올(Sanshol) 각 화합물 2mg을 40㎕ 에탄올에 녹이고, 무색의 마이크로튜브(2ml)내의 벽면에 골고루 분산하여 묻을 수 있도록 수회 상하로 흔들어 준 후, 동결건조기에서 1시간 동안 용매를 휘발시켰다. 각각의 튜브에 25개체의 진드기를 넣어 준 후, 25±1℃의 조건하에서 검정을 하였다. 실험에 이용한 진드기들은 광학현미경(배율 20배)에서 관찰하여 활동력이 우수한 개체들만을 선별한 것들이였다. 검정결과는 처리 24시간 후에 광학현미경(배율 20배)하에서 조사하였는데, 미세한 붓을 이용해 부속지 및 몸통을 자극하여 전혀 움직임이 없는 개체는 사망한 것으로 간주하였다. 모든 검정은 5회 이상 반복하였으며, 살비율에 대한 평균간의 비교는 쉐페(Scheffe's test, SAS Institute,1996)를 이용하였다. 대조구 역시 동일하게 처리하고 조사하였다.

(2) 섬유확산법 (Fabric diffusion method)

휘발성 화합물들의 활성을 보다 자세히 조사하고 잔류박막법의 단점을 보완하기 위해 본 발명자들은 섬유확산법을 고안하였다. 잔류박막법과의 차이는 튜브를 반지름 5.5cm, 높이 0.9cm(부피 21.4㎤)의 페트리디쉬로 대체하였고, 물질 처리를 위해 여지를 검은색의 혼방천으로 대체하여 사용하였다. 또한 잔류박막법에 사용된 튜브보다는 섬유확산법에 이용한 페트리디쉬의 공간이 더 넓기 때문에 제형화 연구를 위한 전단계 실험으로도 응용될 수 있다.

하기 표 1은 화합물들을 여지와 검은색 천에 각각 2mg씩 처리하고 잔류박막법과 섬유확산법을 이용해 24시간 후 진드기에 대한 살비율을 비교, 측정한 것이다.

상기 표 1의 동일한 문자(a,b)는 평균이 통계상(P=0.05, Sheffe 검정) 별다른 차이가 없음을 나타내며, 살충율은 아크사인 제곱근으로 변형시켜 나타내었다.

상기 표 1에서 제시된 바와 같이 초피 및 산초 정유, 산시올에서 잔류박막법과 섬유확산법에서 진드기 2종 모두에 대해 100％의 강한 살비율을 보였다.

상기의 결과에 근간하여 본 발명자들은 섬유확산법으로 3종 화합물들의 농도별 활성을 검정하여 표 2에 제시하였다.

상기 표 2와 같이 초피 및 산초 정유와 산시올이 세로무늬먼지진드기와 큰다리먼지진드기에 대해 각 섬유당 1.0mg 처리시 모두 90％ 이상의 우수한 살비율을 나타내었고, 특히 산시올은 각 섬유당 0.5mg 처리시에도 94％, 97％의 우수한 살비율을 나타내었다.

이상에서 설명한 것은 본 발명에 따른 집먼지진드기 살비제를 실시하기 위한 하나의 실시예에 불과한 것으로서, 본 발명은 상기한 실시예에 한정되지 않고, 이하의 특허청구범위에서 청구하는 바와 같이 본 발명의 요지를 벗어나지 않은 범위 내에서 당해 발명이 속하는 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 누구든지 다양한 변경실시가 가능한 범위까지 본 발명의 기술적 사상이 있다고 할 것이다.

Claims

산시올(sanshol, C16H27ON)을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 집먼지진드기 살비제.
제1항에 있어서,
상기 산시올(sanshol, C16H27ON)은 초피나무 추출물 또는 산초나무 추출물에 포함된 것을 특징으로 하는 집먼지진드기 살비제.
제2항에 있어서,
상기 초피나무 추출물 또는 상기 산초나무 추출물은 각 열매의 메탄올 조추출물 또는 정유인 것을 특징으로 하는 집먼지진드기 살비제.
제3항에 있어서,
상기 초피나무 또는 상기 산초나무 열매의 메탄올 조추출물 함량을 집먼지진드기 살비제의 전체 중량에 대해 35 내지 40 중량％로 포함하거나, 상기 초피나무 또는 상기 산초나무 열매의 정유 함량을 집먼지진드기 살비제의 전체 중량에 대해 20 내지 25 중량％로 포함하는 것을 특징으로 하는 집먼지진드기 살비제.
제2항에 있어서,
상기 산시올의 함량을 집먼지진드기 살비제의 전체 중량에 대해 5 내지 10 중량％로 포함하는 것을 특징으로 하는 집먼지진드기 살비제.