KR20120121425A

KR20120121425A - 헤파린-도세탁셀 접합체로 이루어진 수용성 항암제 및 그의 제조방법

Info

Publication number: KR20120121425A
Application number: KR1020110038448A
Authority: KR
Inventors: 이용규; 이정희
Original assignee: 한국교통대학교산학협력단
Priority date: 2011-04-25
Filing date: 2011-04-25
Publication date: 2012-11-06

Abstract

본 발명은 헤파린-도세탁셀 접합체로 이루어진 수용성 항암제 및 그의 제조방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 저분자량 헤파린에 아민화 도세탁셀이 자가 응집된 접합체로서 구형 나노입자를 구성하여, 상기 나노입자의 표면에 헤파린의 친수성 세그멘트가 도입된 수용성 항암제와, 저분자량 헤파린의 소디움 염을 제거하는 과정, 도세탁셀에 아민기를 도입하는 과정, 상기 소디움 염이 제거된 헤파린과 아민기가 도입된 도세탁셀을 혼합하여 자가 응집시키는 과정, 및, 상기 자가 응집된 헤파린-도세탁셀 접합제를 정제하는 과정을 포함하여 이루어지는 수용성 항암제의 제조방법에 관한 것이다.
본 발명에 의하면, 도세탁셀의 낮은 수용해성을 극복할 수 있으며, 헤파린의 투약성을 향상시킬 수 있고, 도세탁셀의 항암성과 헤파린의 항암성을 동시에 적용할 수 있는 시너지 효과를 기대할 수 있는 수용성 항암제를 제공할 수 있다.

Description

헤파린-도세탁셀 접합체로 이루어진 수용성 항암제 및 그의 제조방법{Water soluble anti cancer agent with Heparin-DTX conjugates and preparing method for the same}

본 발명은 헤파린과 도세탁셀이 자가 응집되어 접합체를 구성하여 수용성이 향상된 항암제 및 그의 제조방법에 관한 것이다.

헤파린은 글루코스아미노글리칸(GAG)계열에 속하는 황산화된 다당류로서 넓은 분자량 분포를 가지고 있고, 또한 헤파린은 다양한 구조의 혼합체로 항 혈전성, 염증 억제, 신규혈관형성 암 성장 억제 및 면역 억제 등의 다양한 성질을 가지고 있다. 이러한 헤파린은 화학 구조가 다양하게 변화하며, 두 종류의 음 이온성 작용기의 구조적 특이성이 여러 가지 활성을 결정하게 된다. 화학식 1에 나타낸 바와 같이 이러한 단당류의 관능기를 살펴보면 황산화된 잔기(sulfated residues)를 많이 포함하고 있으며, 이외에도 음이온기인 -OH와 ??COOH 그룹을 다량 보유하고 있다.

이러한 헤파린의 구조적 특징으로 인해 헤파린은 암 환자들에게 많이 생길 수 있는 혈전 현상을 막기 위해 사용되는 항 혈전성 약물로 사용되고 있으며, 지난 40년간 종양 성장 과정과 암 전이 과정을 방해하여 항암 효과를 나타내는 헤파린의 또 다른 몇 가지 메커니즘이 밝혀지고 있다. 최근에는 폐정맥이나 심부정맥 혈전증(deep vein thrombosis)를 치료하거나 예방하는데도 사용되고 있다.

항 혈전성 약물로는 이외에도 많은 약물들이 사용되고 있는데 대표적인 것이 와파린(wafarin)이라는 경구용 약물이 있다. 그러나, 이 약물은 긴 반감기로 인해 부작용을 쉽게 유발시키며 다른 혈액내의 물질과 비특정적으로 결합하여 효력을 예측하기가 힘들다. 그리하여 현재 사용되고 있는 항 혈전성 약물로는 헤파린이 가장 좋은 것으로 인정받고 있다. 헤파린의 이러한 효능에도 불구하고 문제점으로 생각되는 것이 경구용으로 이용할 수 없다는 것이다.

헤파린이 경구용으로 사용될 수 없는 가장 큰 이유는 큰 분자량과 음이온 성질에 기인한다. 특히 넓은 분자량 분포로 인해 현재에는 저분자량 헤파린과 고분자량 헤파린으로 나누어지고 있으며, 저분자량 헤파린은 적은 부작용과 높은 효능으로 인해 병원에서 많이 사용되고 있다. 저분자량 헤파린의 경우 분자량의 분포가 3,000에서 5,000정도 의 좁은 분자량범위를 가지고 있다. 그러나, 사람의 위장에서 흡수되는 보통 약물의 분자량은 400 이하가 대부분이며 이러한 것도 약물의 용해도와 성질에 따라 변화된다. 따라서 헤파린의 치료적 효과는 아직 의학적인 적용을 하기에 충분하지 않기 때문에 오로지 헤파린 만을 이용한 근본적인 치료는 제한 받고 있다.

헤파린의 두번째 특징은 음이온기를 많이 가지고 있다는 것이다. 화학식 2에서 보는 것처럼 글루코사민이 황산이온으로 되어 있으며 다른 단당류도 하나씩의 음이온기를 함유하고 있다. 이러한 음이온기는 헤파린이 위장에서 흡수되는 것을 막아주는 주된 원인이다. 특히 위 장막은 친수성기와 소수성기가 일정하게 배열되어 있으며, 음이온기가 소수성기를 거쳐 위장벽안으로 흡수되기 힘든 구조로 되어있다. 이러한 헤파린의 특징으로 인해 헤파린 자체적으로는 위장흡수가 되지 않는 것으로 확인되고 있다.

상기와 같은 헤파린은 고분자 나노입자로 활용되고 있는데, 다양한 헤파린 함유생체재료들이 항 응고, 조직재생 및 약물전달과 같은 응용분야를 위해 개발되어 왔다. 이러한 생체재료들은 주로 화학적 또는 물리적으로 가교된 내부구조를 가지는 수화젤 형태이며, 이들의 연구는 폭넓게 수행되어 보고되고 있다.

생분해성 고분자의 이용은 조직공학, 유전자치료, 새로운 약물전달시스템, 이식용 장치 등 다양한 응용분야에서 최근까지 각광을 받고 있다. 헤파린을 생분해성 고분자에 화학적으로 결합하는 방법은 일반적인 약물뿐만 아니라 성장인자의 방출을 조절하기 위한 수단이 될 수 있다.

한편, 도세탁셀(Docetaxel)은 다소 복잡한 IUPAC명인 1,7ββ, 10ββ-trihydroxy-9-oxo-5ββ,20-epoxytax-11-ene-2αα,4,13αα??triyl4-acetate2-benzoate13-{(2R,3S)-3-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-2-hydroxy-3-phenylpropanoate}를 갖고, MW가 861.9인 백색 또는 거의 백색의 분말이다.(Figure1.4.) 이것은 유럽산 주목(Taxus baccata)의 침엽에서 분리, 추출되는 탁소이드(toxoid)의 일종의 천연물질로써 항종양 약제로 사용되고 있다. 이것의 임상 약동학적 용어에 있어서는 도세탁셀은 유사분열 및 간기의 세포 기능에 필수적인 세포 내 미세소관 망을 붕괴함으로써 작용하는 항종양제로써 도세탁셀은 유리 튜불린(tubulin)에 결합하고, 이 튜불린 결합물의 분해를 억제함과 동시에 중합(polymerization)과 미세소관의 해중합화(depolymerization)을 유발하여 미세천연 탁산(taxane)보다 2배의 효력을 가진다.

또한 이는 폐암뿐만 아니라 많은 고형암의 성장을 억제하는 강력한 항암제로도 잘 알려져 있다[화학식 3]. 최근에 도세탁셀(Docetaxel)과 관련된 연구에 있어서 세포의 미세관에 결합하여 중합반응을 유도하고 탈중합반응을 방해하여 세포의 유사분열을 지연시켜 그 결과로 암세포의 사멸을 유도한다고 보고되었으나, 아직은 그 기전이 명확하게 밝혀져 있지 않다.

화학식 3 에서 보면 알 수 있듯이 도세탁셀의 독특한 화학구조는 파크리탁셀과 비교하여 탁솔 B 고리상의 C-10에서 하이드록시 그룹이 아세틸 그룹으로 바뀌었고, C-13에서 탁솔 측쇄 상의 N-벤조일 그룹 대신 N-tert-부톡시카르보닐 그룹으로 바뀐 것을 알 수 있다.

이러한 중요한 구조적 차이점은 파크리탁셀과 도세탁셀이 서로 상이한 작용을 갖게 한다. 이러한 서로 상이한 작용기전은 도세탁셀의 유사분열을 일으키는데 필수적일 뿐만 아니라 정상적인 미세소관-조절 세포 활성을 유효하게 하는 세포 내 미세소관망(microtubular network)을 붕괴하므로 도세탁셀이 파크리탁셀 보다 부작용이 적다.

그러나 도세탁셀은 일반적으로 물에 대한 용해도가 매우 낮기 때문에 수용액으로 제제화하는데 많은 어려움이 따르며 이 때문에 난용성인 도세탁셀의 용해도를 높이기 위한 많은 연구가 이루어지고 있다.

본 발명은 상기한 바와 같이 탁산계 항암제의 일반적인 낮은 수용성을 극복하기 위하여 안출된 것으로, 도세탁셀의 낮은 수용성이 친수성 세그먼트를 갖는 저분자량 헤파린을 사용함으로써, 나노 입자의 자가응집에 의하여 탁산계 항암제를 고분자 미셀 내에 봉입하여 도세탁셀의 수용성을 개선할 수 있음을 알게 되어 본 발명을 완성하였다.

본 발명에 의하면, 기존과 비교하여 부작용을 경감시키고, 더 높은 약효를 발휘시키기 위하여 우리는 저분자량 헤파린을 합성시킴으로써 항암제로서 더 큰 시너지 효과를 나타내는 항암제를 제공할 수 있다.

또한 본 발명에 의하여 제시되는 항암제는 수용성이 향상되어 쉽게 투약할 수 있을 뿐만 아니라, 이 제제를 통해 암을 보다 쉽게 예방 할 수 있을 것이라 생각된다.

상기한 목적을 달성하기 위한 일례로서 본 발명의 수용성 항암제는, 저분자량 헤파린에 아민화 도세탁셀이 자가 응집된 접합체로서 구형 나노입자를 구성하여, 상기 나노입자의 표면에 헤파린의 친수성 세그멘트가 도입된 것을 특징으로 한다.

상기한 목적을 달성하기 위한 다른 일례로서 본 발명의 수용성 항암제의 제조방법은, 저분자량 헤파린의 소디움 염을 제거하는 과정, 도세탁셀에 아민기를 도입하는 과정, 상기 소디움 염이 제거된 헤파린과 아민기가 도입된 도세탁셀을 혼합하여 자가 응집시키는 과정, 및, 상기 자가 응집된 헤파린-도세탁셀 접합제를 정제하는 과정을 포함하여 이루어지는 것을 특징으로 한다.

상기 저분자량 헤파린은 분자량이 3000 내지 5000 da 범위인 것을 사용하는 것이 바람직하다.

또한, 상기 헤파린과 도세탁셀은 몰비가 1 : 1 내지 10 범위로 결합되는 것이 바람직하다.

본 발명에서는, 약물의 수용성 향상과 항응고, 항암치료를 위해 도세탁셀이 결합된 헤파린 유도체를 합성한 나노 입자를 제조하였다. 자가 응집이 가능한 공중합체는 약물 전달체로써 활용될 수 있는 마이셀을 형성 할 수 있으며[도 1], 헤파린은 이와 같이 입자들의 표면에 위치하도록 하기 위해 결합되기도 한다.

비록 헤파린이 혈관신생, 암의 성장을 조절할 수 있을지라도, 담체로 사용된저분자량 헤파린(Low molecular weight heparin, LMWH)와 마찬가지로 암 치료를 위한 의학적 적용은 헤파린의 혈액응고 방지제의 활성, 출혈의 위험 때문에 제한 받았다. 이러한 담체는 생물학적 적합성, 높은 용해도, 안정성, 수용 가능한 항암제의 로딩 량이 요구 될 뿐만 아니라 이것에 표적 분자를 합성 시킬 수도 있다.

도세탁셀은 다양한 형태의 치료를 위해 오늘날 널리 사용되고 있는 천연 신약이다. 이것은 치료적 효과를 위해 저분자량 헤파린 속에 존재하게 된다. 그러나 도세탁셀의 의학적인 사용에 있어서는 일반적으로 물에 대한 용해도가 매우 낮기 때문에 이것을 제제화하는데 많은 어려움이 따른다.

본 발명에서는 저분자량 헤파린(LMWH)-도세탁셀(DTX) 접합체로서, 저분자량 헤파린의 친수성 세그먼트와 도세탁셀의 소수성 세그먼트를 사용하여 자가 응집된 나노 입자의 형태로 구상하였고, 이 접합체는 1H-NMR, FT-IR, UV/Vis 분광분석기(spectroscopy), 유동 광산란(dynamic light scattering, DLS)을 통해 화학적 결합을 확인하였다.

또한 본 발명에서는 약제로 쓰이는 도세탁셀 이외에도 헤파린 자체도 항암 기능을 가지고 있으므로, 본 발명의 헤파린-도세탁셀 접합체는 두 약물의 더 큰 시너지 효과와 더불어 LMWH-DTX 접합체로 이루어진 나노입자의 강화된 투과성과 지속성(enhanced permeability and rentention, (EPR)) 효과와 부작용의 감소를 기대해 본다. 또한 이러한 합성을 통한 항암제는 수용성이 향상되어 기존 약물 보다 더 쉽게 투약할 수 있을 뿐만 아니라, 이 제제를 통해 암을 보다 쉽게 예방 할 수 있을 것이다.

상기한 본 발명에 의하면, 도세탁셀이 지니고 있는 소수성 세그먼트가 도세탁셀의 항암제로써의 이용을 상당히 제한시켰던 문제점을 해결할 수 있는 효과를 기대할 수 있다.

본 발명에 의하면, 혈액과의 양립성과 생체적합성의 연관성을 향상 시킬 수 있는 LMWH(Low-molecular-weight-heparin)와 도세탁셀을 자가 응집시켜 마이셀 구조 표면에 친수성 환경을 제공해줌으로써 이것의 생물학적 이용 가능성을 입증시킬 수 있다.

또한, 본 발명에 의하면, LMWH와 도세탁셀을 자가 응집시켜 나노 입자 사이즈의 접합체인 마이셀을 만듦으로써 주사제로만 사용되는 기존의 항암제를 천연물을 사용하여 수용성이 향상된 항암제로 사용될 수 있도록 한 효과를 기대할 수 있다.

또한, 본 발명은 실용화가 되면 기존약물보다 쉽게 투약할 수 있을 뿐만 아니라, 암을 보다 쉽게 예방할 수 있는 약물로 개발 될 수 있는 가능성을 가지고 있다.

또한, 본 발명의 헤파린-도세탁셀 접합체는 수용성 항암제로서 기존 항암제보다 효율성이나 생체이용율이 높아질 수 있는 개량형 신약으로의 가능성이 높을 것이다.

도 1은 나노입자의 자가 응집 원리를 간단하게 나타낸 그림이다.
도 2는 소디움이 제거된 저분자량 헤파린의 1H-NMR 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 도세탁셀의 1H-NMR 결과를 나타낸 것이다.
도 4 내지 7은 헤파린과 도세탁셀 몰비에 따른 헤파린-도세탁셀 접합체의 1H-NMR 결과를 나타낸 것으로, 도 4은 몰비가 1 : 1이고, 도 5는 몰비가 1: 2.6이며, 도 6는 몰비가 1 : 5이고, 도 7은 몰비가 1 : 8이며, 도 8은 몰비가 1 : 10인 경우이다.
도 9는 헤파린-도세탁셀 접합체의 FT-IR 결과를 나타낸 것이다.
도 10은 헤파린-도세탁셀 접합체의 입자 크기를 측정한 결과를 나타낸 것이다.

이하, 본 발명을 실시예 등에 의거하여 구체적으로 설명하겠는 바, 본 발명이 다음 실시예 등에 의하여 한정되는 것은 아니다.

참고예. 사용성분

저분자량 헤파린(LMWH, Low-molecular-weight-heparin, Fraxiparin; average MW 5.0KDa)(이하, "헤파린" 이라 표시), 도세탁셀(DTX, Docetaxel, average MW 807.5Da), 트리에틸아민(Triethylamine), NPC(4-Nitrophenyl chloroformate), DMSO(Dimethyl Sulfoxide), 메탄올, 헥산, MMP(4-Methylpholine), 에틸렌디아민(Ethylendiamine), DCC 및 닌히드린 용액(NHS).

실시예 1. 헤파린-도세탁셀 접합체의 제조

1) 소디움이 제거된 헤파린의 제조

LMWH(Low-molecular weight Heparin) 2g을 중수소수(D₂O water) 40ml에 넣은 다음 마그네틱 바로 10 ~15분간 교반시켜 용해시켰다. 이렇게 용해된 용액에 pH 미터를 이용하고 0.1mol의 HCl을 사용하여 pH 4로 조절하였다. 상기 용액들은 MW 3500Da 막에 2일간 투석시킨 후 동결건조시켜 소디움이 제거된 헤파린을 제조하엿다. 소디움이 제거된 헤파린의 1H-NMR 결과는 도 2에 나타내었다.

2) 아민화 도세탁셀의 제조

도세탁셀에 아민그룹을 결합시키는 과정은 다음과 같다. 먼저, 도세탁셀을 표 1에 기재된 함량으로 칭량한 후 DMSO(5ml)에 용해시켰다. 여기에, 표 2에 기재된 함량으로 칭량한 트리에틸아민을 첨가하였다. 다음으로 표 1에 기재된 함량의 NPC(4-nitrophenyl chloroformate)를 첨가한 후, 실온에서 12시간 동안 교반 시켰다. 반응이 끝난 후 미반응 물질을 제거시키기 위해서 메탄올(20ml) + 헥산(20ml)으로 1회 추출한 후, 헥산(20ml x 2회)으로 2회 추출을 해 주었다. 이와 같은 생성물 용액에 표 2에 기재된 함량과 동량의 MMP( 4-methylpholine)를 첨가한 후 1시간동안 교반시키고, 다음으로 이 용액에 표 2에 기재된 함량과 동량의 에틸렌디아민을 서서히 첨가한 후 10시간 동안 교반시켰다. 반응이 끝나면 다시 한번 미반응 물질을 제거하기 위해서 헥산으로 추출한 후, 회전식 감압 농축기를 이용하여(42℃) 15분 동안 반응물 내 메탄올을 제거시킨 아민화 도세탁셀을 제조하였다. 도세탁셀의 1H-NMR은 도 3에 나타내었다.

몰비(LMWH : DTX)	도세탁셀	트리에틸아민	NPC
1:1	9㎎	8㎕	12㎎
1:2.6	25㎎	24.4㎕	35㎎
1:5	46㎎	45㎕	64㎎
1:8	73㎎	72㎕	103㎎
1:10	90㎎	100㎕	141㎎

몰비(LMWH : DTX)	MMP	EDA
1:1	2㎕	100㎕
1:2.6	5㎕	290㎕
1:5	10㎕	530㎕
1:8	16㎕	600㎕
1:10	22㎕	1.1㎖

3) 활성화 헤파린의 제조

상기 헤파린(Fraxiparin) 50ml을 포름아마이드 5ml에 용해시킨 후, 99분 동안 30℃에서 초음파 처리 시켰다. 헤파린이 완전하게 용해된 용액에 DCC+DMSO(1ml)을 첨가 후 5분간 0 ℃에서 활성화시켰다. 활성화된 헤파린 용액에 표 3에 기재된 함량의 NHS + DMSO (1ml)을 첨가 후 30분간 반응시켜 활성화 헤파린을 제조하였다.

몰비(LMWH : DTX)	DCC	NHS
1:1	40㎎	3㎎
1:2.6	40㎎	6㎎
1:5	40㎎	11㎎
1:8	40㎎	17㎎
1:10	40㎎	34㎎

4) 헤파린-도세탁셀 접합체의 제조

상기 활성화 헤파린에 아민화 도세탁셀을 서서히 첨가하여 실온(30℃)에서 12시간 동안 반응시킨 후 반응이 끝나면 투석(MWCO: 3500)을 통해 1박 2일 동안 용매 치환하고, DCC와 NHS를 완전히 제거시켰다. 도 4 내지 도 8에는 몰비(LMWH:DTX)에 따른 헤파린-도세탁셀 접합체의 1H-NMR을 각각 나타내었다. 도 4은 몰비가 1 : 1이고, 도 5는 몰비가 1: 2.6이며, 도 6는 몰비가 1 : 5이고, 도 7은 몰비가 1 : 8이며, 도 8은 몰비가 1 : 10인 경우이다.

다음 화학식 5에는 헤파린과 도세탁셀의 자가 응집을 간단하게 나타내었다.

상기 화학식 5에 나타낸 바와 같이, 도세탁셀은 4-NPC와 결합되어 도세탁셀-NPC 우레탄 결합을 형성한다. 도세탁셀-NPC는 에틸렌디아민의 1차 아민 그룹과 반응하고, 이때 4-MMP가 촉매한다. 상기 도세탁셀-NPC를 과량의 에틸렌디아민 용액에 첨가하는데, 이때 매우 서서히 첨가하여 도세탁셀 다이머(dimer)가 형성되는 것을 방지하도록 한다. 헤파린-도세탁셀 접합체 유도체는 아민그룹의 N-과 헤파린의 카르복실산기 사이의 공유결합에 따라 아미이드 결합을 형성하면서 이루어진다.

실험예.

1) 헤파린-도세탁셀 접합체의 1H-NMR 과 FT-IR에 의한 분석

헤파린-도세탁셀 접합체의 합성 여부를 확인하기 위해 1H-NMR과 FT-IR를 사용하였다. 우선, 헤파린의 1H-NMR(D2O)는 δ 5.38 [H1 of glucosamine residue (A)], δ 5.04 [H1 of iduronic acid residue (I)], δ 4.84 [I-5], δ 4.36-4.23 [A-6], δ 4.12-4.40[I-3], δ4.08j [I-4], δ4.02 [A-5], δ3.78 [I-2], δ3.71 [A-4], δ3.65-3.69 [A-3], δ 3.24 [A-2]에서 확인할 수 있었고, 아민화 도세탁셀(D2O)의 1H NMR은 δ 1.2-1.9 [m, five and six rings of DTC, 1H], δ 2.1-2.3 [m, CH3 of DTX, 1H], δ 3.15[d, 12R-OH of DTX, 2H], δ 8.0 [H of CONH]에서 확인 가능했다.

또한, 헤파린-도세탁셀 사이의 합성을 확인할 수 있는 새로운 아마이드 결합(-CONH)은 8.04ppm에서 확인 가능했다[도 2 내지 8]. 헤파린-도세탁셀 접합체의 새로운 아마이드 결합(-CONH)은 FT-IR 스펙트럼에서 1665 cm-1에서 확인할 수 있었다[도 9].

비록 헤파린의 FT-IR 스펙트라가 아무런 흡수를 보여주지 않았어도, 2360cm-1에서 헤파린의 intrinsic sulfonamide(-NHSO3)의 피크를 보여준다고 여러 연구자들에 의해 보고된 바 있다.

2) 도세탁셀 표준 검량선

용매를 PBS 완충액과 메탄올을 3: 2로 혼합하여 사용하고, 여기에 용해된 도세탁셀 함량에 따른 흡광도를 230 nm에서 측정한 결과, Y=17.6280X + 0.03233 의 기울기를 가지는 표준 검량선을 얻었다. 그 결과를 표 4 에 나타내었다.

시료	흡광도(230nm)
DTX 0.1㎎/㎖	1.8003
DTX 0.05㎎/㎖	0.9154
DTX 0.025㎎/㎖	0.4465
DTX 0.0125㎎/㎖	0.2432
DTX 0.00625㎎/㎖	0.1717

3) 헤파린-도세탁셀 접합체의 커플링 비율

적용된 도세탁셀의 표준 검량선의 검량식은 Y=17.6280X + 0.03233(Mw(Heparin(5000mg), 도세탁셀은 (807.879mg), '0.1mg/ml')이다. 헤파린과 도세탁셀의 몰비에 따른 커플링 비율은 다음 표 5에 나타내었다.

시료의 몰비(LMWH : DTX)	흡광도(230 nm)	커플링 비율
1:1	0.2525	1:1.1
1:2.6	0.1367	1:2.56
1:5	0.2335	1:1.25
1:8	0.2195	1:1.36
1:10	0.2627	1:1.07

4) 헤파린-도세탁셀 접합체의 입자 크기 측정

헤파린-도세탁셀 접합체의 입자 크기를 측정하여 도 10에 나타내었다. 도 10에 의하면, 본 발명에 의하여 얻어진 헤파린-도세탁설 접합체의 크기가 균일하게 형성되었음을 확인할 수 있으며, 입자의 크기는 60 내지 700 ㎚m으로 이루어짐을 확인할 수 있다.

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Claims

저분자량 헤파린에 아민화 도세탁셀이 자가 응집된 접합체로서 구형 나노입자를 구성하여, 상기 나노입자의 표면에 헤파린의 친수성 세그멘트가 도입된 수용성 항암제.
청구항 1에 있어서,
상기 저분자량 헤파린은 분자량이 3000 내지 5000 da 범위인 것을 특징으로 하는 수용성 항암제.
저분자량 헤파린의 소디움 염을 제거하는 과정,
도세탁셀에 아민기를 도입하는 과정,
상기 소디움 염이 제거된 헤파린과 아민기가 도입된 도세탁셀을 혼합하여 자가 응집시키는 과정, 및 ,
상기 자가 응집된 헤파린-도세탁셀 접합체를 정제하는 과정
을 포함하여 이루어지는 것을 특징으로 하는 수용성 항암제의 제조방법.
청구항 3에 있어서,
상기 헤파린과 도세탁셀은 몰비가 1 : 1 내지 10 범위로 결합되는 것을 특징으로 하는 수용성 항암제의 제조방법.