KR20120110177A

KR20120110177A - 항-ｈｃｖ 화합물로서의 4''-아지도-뉴클레오시드

Info

Publication number: KR20120110177A
Application number: KR1020127022217A
Authority: KR
Inventors: 한 마; 케샤브 사르마; 데이비드 버나드 스미스
Original assignee: 에프. 호프만-라 로슈 아게
Priority date: 2010-01-28
Filing date: 2011-01-25
Publication date: 2012-10-09
Also published as: CN102725303A; US20110150829A1; TW201141488A; RU2012136379A; MX2012008443A; EP2528930B1; US8236779B2; PL2528930T3; DK2528930T3; HK1176938A1; RU2556991C2; ES2437933T3; MX337050B; PT2528930E; KR101384389B1; WO2011092158A1; EP2528930A1; JP2013518076A; JP5675849B2; CA2784330C

Abstract

R¹, R² 및 R³이 본원에 정의된 바와 같은 화학식 Ⅰ을 갖는 화합물은 C형 간염 바이러스 NS5b 중합효소 억제제이다. 또한, 본원에 따라 HCV 감염을 치료하고 HCV 복제를 억제하는 조성물 및 방법이 개시된다.

Description

항-ＨＣＶ 화합물로서의 4'-아지도-뉴클레오시드{4'-AZIDO-NUCLEOSIDES AS ANTI-HCV COMPUNDS}

본 발명은 C형 간염 바이러스(HCV) RNA-의존성 RNA 바이러스 중합효소의 억제제의 전구약물인 아실화 뉴클레오시드를 제공한다. 본 화합물은 경구로 투여되었을 때 위장관에서 쉽게 흡수되며 혈액 내에서 모 뉴클레오시드로 효과적으로 전환된다. 이 전구약물은 RNA-의존성 RNA 바이러스 복제의 억제제이고 HCV NS5B 중합효소의 억제제로서, HCV 복제의 억제제로서, 그리고 포유 동물에서 C형 간염 감염의 치료에 유용하다. 특히, 본 발명은 뉴클레오시드가 경구로 투여되었을 때 약물 흡수의 개선을 제공하는 아실화 피리미딘 뉴클레오시드 화합물의 용도에 관한 것이다.

C형 간염 바이러스는 전세계적으로 만성 간 질환의 주요 원인이다(Boyer, N. et al ., J. Hepatol . 2000 32:98-112). HCV에 감염된 환자들은 간경변 및 그 후에 간암을 발병시킬 위험을 갖고 있으므로, HCV는 간 이식에 대한 주요 지표이다.

HCV는 플라비바이러스(flaviviruses), 페스티바이러스(pestiviruses), 및 헤파시바이러스(hapaceiviruses)(C형 간염 바이러스를 포함함) 속을 포함하는 바이러스과 플라비비리대(Flaviviridae)의 구성원으로서 분류된다(문헌[Rice, C. M., Flaviviridae: The viruses and their replication. In: Fields Virology, Editors: B. N. Fields, D. M. Knipe and P. M. Howley, Lippincott-Raven Publishers, Philadelphia, Pa., Chapter 30, 931-959, 1996]). HCV는 약 9.4 kb의 양성-센스 단일-가닥 RNA 게놈을 함유하는 피막 바이러스이다. 이 바이러스의 게놈은 고보존(highly conserved) 5' 비-번역영역(UTR), 약 3011개 아미노산의 다단백질 전구체를 암호화하는 긴 오픈 리딩 프레임(open reading frame), 및 짧은 3' UTR로 구성되어 있다.

HCV의 유전자 분석에 따라 DNA 서열의 30% 이상이 상이한 6종의 주요 유전자형이 확인되었다. 30종이 넘는 아형(subtype)이 구별되었다. 미국에서는 감염된 사람의 약 70%가 1a형 감염 및 1b형 감염을 가진다. 1b형은 아시아에서 가장 흔한 아형이다(문헌[X. Forns and J. Bukh, Clinics in Liver Disease 1999 3:693-716; J. Bukh et al , Semin . Liv . Dis . 1995 15:41-63]). 불행하게도, 1형 감염은 2형 또는 3형 유전자형보다 치료법에 대해 더 강한 내성을 나타낸다(문헌[N. N. Zein, Clin . Microbiol. Rev ., 2000 13:223-235]).

바이러스성 구조 단백질은 뉴클레오캡시드 코어 단백질(C) 및 2종의 외피 당단백질 El 및 E2를 포함한다. HCV는 또한 NS2-NS3 영역에서 암호화된 아연-의존성 메탈로프로테나아제 및 NS3 영역에서 암호화된 세린 프로테아제의 2종의 프로테아제를 암호화한다. 이 프로테아제들은 전구체 다단백질의 특정 영역을 절단하여 성숙 펩티드를 생성하는 데 필요하다. 비-구조 단백질 5의 카르복실기 절반인 NS5B는 RNA-의존성 RNA 중합효소를 포함한다. 나머지 비-구조 단백질인 NS4A 및 NS4B의 기능 및 NS5A(비-구조 단백질 5의 아미노-말단 절반)의 기능은 알려지지 않았다. HCV RNA 게놈에 의해 암호화된 비-구조 단백질의 대부분이 RNA 복제에 관여한다고 여겨진다.

현재, 한정된 수의 승인받은 치료법들만이 HCV 감염의 치료에 이용될 수 있다. HCV 감염을 치료하고 HCV NS5B 중합효소 활성을 억제하기 위한 새로운 치료법 및 기존 치료법들이 문헌[R. G. Gish, Sem . Liver . Dis ., 1999 19:5; Di Besceglie, A. M. and Bacon, B. R., Scientific American , October: 1999 80-85; G. Lake-Bakaar, Current and Future Therapy for Chronic Hepatitis C Virus Liver Disease, Curr . Drug Targ . Infect Dis . 2003 3(3):247-253; P. Hoffmann et al, Recent patent on experimental therapy for hepatitis C virus infection (1999-2002), Exp . Opin . Ther . Patents 2003 13(11): 1707-1723; M. P. Walker et al., Promising Candidates for the treatment of chronic hepatitis C, Exp . Opin. Investing . Drugs 2003 12(8): 1269-1280; S.-L. Tan et al ., Hepatitis C Therapeutics: Current Status and Emerging Strategies, Nature Rev . Drug Discov. 2002 1 :867-881; J. Z. Wu and Z. Hong, Targeting NS5B RNA-Dependent RNA Polymerase for Anti-HCV Chemotherapy, Curr . Drug Targ . - Infect . Dis . 2003 3(3):207-219]에 검토되어 있다.

현재, 한정된 수의 승인받은 치료법만이 HCV 감염의 치료에 이용될 수 있다. HCV를 치료하고 HCV NS5B 중합효소를 억제하기 위한 새로운 치료법 및 기존 치료법들이 문헌[R. G. Gish, Sem . Liver . Dis ., 1999 19:5; Di Besceglie, A. M. and Bacon, B. R., Scientific American, October: 1999 80-85; G. Lake-Bakaar, Current and Future Therapy for Chronic Hepatitis C Virus Liver Disease, Curr. Drug Targ. Infect Dis. 2003 3(3):247-253; P. Hoffmann et al., Recent patents on experimental therapy for hepatitis C virus infection (1999-2002), Exp . Opin. Ther . Patents 2003 13(11): 1707-1723; F. F. Poordad et al. Developments in Hepatitis C therapy during 2000-2002, Exp . Opin . Emerging Drugs 2003 8(l):9-25; M. P. Walker et al ., Promising Candidates for the treatment of chronic Hepatitis C, Exp. Opin. Investig. Drugs 2003 12(8):1269-1280; S.-L. Tan et al., Hepatitis C Therapeutics: Current Status and Emerging Strategies, Nature Rev . Drug Discov . 2002 1 :867-881; R. De Francesco et al. Approaching a new era for hepatitis C virus therapy: inhibitors of the NS3-4A serine protease and the NS5B RNA-dependent RNA polymerase, Antiviral Res. 2003 58: 1-16; Q. M. Wang et al. Hepatitis C virus encoded proteins: targets for antiviral therapy, Drugs of the Future 2000 25(9):933-8-944; J. A. Wu and Z. Hong, Targeting NS5B-Dependent RNA Polymerase for Anti-HCV Chemotherapy Cur . Drug Targ .- Inf . Dis. 2003 3:207-219]에 검토되어 있다. 이들 문헌들은 현재 개발 과정의 다양한 단계에 있는 화합물들을 인용한다. 동일하거나 상이한 표적을 겨냥하는 2종 또는 3종 물질의 병용 치료법이 바이러스의 내성 균주의 발달을 회피하거나 늦추는 표준 치료법이 되었고, 상기 문헌들에 개시된 화합물들은 본 발명의 화합물과 조합하여 치료에 이용될 수 있으며, 이들 문헌들의 전체 내용은 본원에 참고로 혼입된다.

리바비린(Ribavirin)(1a; 1-((2R,3R,4S,5R)-3,4-다이하이드록시-5-하이드록시메틸-테트라하이드로-푸란-2-일)-1H-[1,2,4]트라이아졸-3-카르복실산 아마이드; 비라졸(VIRAZOLE^®)은 스펙트럼이 넓은 합성 비-인터페론-유도성 항바이러스 뉴클레오시드 유사체이다. 리바비린은 플라비비리대를 포함하는 여러 DNA 및 RNA 바이러스에 대해 시험관 내 활성을 갖는다(문헌[Gary L. Davis, Gastroenterology 2000 118:S104-Sl14]). 단일요법에서 리바비린은 환자의 40%에서 혈청 아미노 전이효소 수준을 정상으로 감소시키지만, HCV-RNA 혈청 수준을 감소시키지는 않는다. 또한, 리바비린은 상당한 독성을 보이며 빈혈을 유발하는 것으로 알려져 있다. 리바비린은 이노신 모노포스페이트 탈수소효소의 억제제이다. 리보비린은 HCV에 대한 단일요법으로는 승인받지 못하였지만, 이 화합물은 인터페론 α-2a 및 인터페론 α-2b와의 병용 치료법으로 승인되었다. 비라미딘(Viramidine) 1b는 간세포에서 1a로 전환되는 전구약물이다.

인터페론(IFN)은 거의 10년 동안 만성 간염의 치료에 사용되어 왔다. IFN는 바이러스 감염에 반응하여 면역 세포에 의해 생성되는 당단백질이다. 2종의 상이한 타입의 인터페론이 알려져 있다: 1형은 여러 종의 인터페론 α 및 1종의 인터페론 β를 포함하고, 2형은 인터페론 γ를 포함한다. 1형 인터페론은 주로 감염된 세포에 의해 생성되며 인접 세포를 새로운 감염으로부터 보호한다. IFN은 HCV를 포함하는 많은 바이러스의 바이러스 복제를 억제하고, C형 간염 감염에 대한 단독 치료제로서 사용되는 경우 IFN은 혈청 HCV-RNA를 감지할 수 없는 수준으로 억제시킨다. 또한, IFN은 혈청 아미노 전이효소의 수준을 정상화시킨다. 불행하게도, IFN의 효과는 일시적이다. 치료의 중단은 70%의 재발률을 야기하고 10% 내지 15%만이 정상 혈청 알라닌 전이효소 수준과 지속적인 바이러스 반응을 나타낸다(상기 문헌[L.-B. Davis]).

초기 IFN 치료법의 한가지 한계는 단백질이 혈액으로부터 신속히 소실된다는 점이었다. 폴리에틸렌글리콜(PEG)을 사용한 IFN의 화학적 유도체화는 실질적으로 개선된 약물동력학적 특성을 갖는 단백질을 생성시켰다. 페가시스(PEGASYS^®)는 인터페론 α-2a와 40 kD 분지쇄 모노-메톡시 PEG의 접합체이고, 페그-인트론(PEG-INTRON^®)은 인터페론 α-2b와 12 kD 모노-메톡시 PEG의 접합체이다(문헌[B. A. Luxon et al ., Clin . Therap . 2002 24(9): 13631383; A. Kozlowski and J. M. Harris, J. Control . Release, 2001 72:217-224]).

현재, 인터페론 α-2a 및 인터페론 α-2b는 HCV의 치료를 위한 단일요법으로 승인되어있다. 로페론-A(ROFERON-A^®)(로슈(Roche)사)는 인터페론 α-2a의 재조합 형태이다. 페가시스^®(로슈사)는 인터페론 α-2a의 PEG화된(pegylated)(즉, 폴리에틸렌글리콜로 변형된) 형태이다. 인트론-A(INTRON-A^®)(쉐링 코포레이션(Schering Corporation)사)는 인터페론 α-2b의 재조합 형태이며, 페그-인트론^®(쉐링 코포레이션사)는 인터페론 α-2b의 PEG화된 형태이다.

현재, 인터페론 β, γ, τ 및 ω뿐만 아니라 인터페론 α의 다른 형태들이 HCV 치료용으로 임상 개발 중이다. 예를 들면, 인터뮨(InterMune)사에 의한 인퍼젠(INFERGEN^®)(인터페론 알파콘-1), 비라젠(Viragen)사에 의한 옴니페론(OMNIFERON^®)(천연 인터페론), 휴먼 게놈 사이언스(Human Genome Sciences)사에 의한 알부페론(ALBUFERON^®), 아레스-세로노(Ares-Serono)사에 의한 리비프(REBIF^®)(인터페론 β-1a), 바이오메디슨(BioMedicine)사에 의한 오메가(Omega) 인터페론, 아마릴로 바이오사이언스(Amarillo Biosciences)사에 의한 경구 인터페론 α, 및 인터뮨(InterMune)사에 의한 인터페론 γ, 인터페론 τ, 및 인터페론 γ-1b가 개발 중이다.

현재, 리바비린과 인터페론-α를 사용한 HCV의 병용 치료법이 최적 요법을 대표한다. 리바비린과 PEG-IFN(하기 참조)의 병용은 환자의 54% 내지 56%에서 지속적인 바이러스 반응(SVR)을 나타낸다. SVR은 2형 HCV 및 3형 HCV의 경우 80%에 육박한다(상기 문헌[Walker]). 불행하게도, 이들 병용 치료법도 임상적 도전을 야기하는 부작용을 낳는다. 우울증, 독감-유사 증상 및 피부 반응은 피하 IFN-α와 관련되어 있고, 용혈성 빈혈은 리바비린을 사용한 지속적인 치료와 관련되어 있다.

현재, C형 간염 바이러스 감염 치료용으로 전임상 또는 임상 개발 중인 다른 거대분자 화합물은 쉐링-플라우(Schering-Plough)사에 의한 인터루킨-10, 인테뮤론(Intemeuron)사에 의한 IP-SO1, 버텍스(Vertex)사에 의한 메리메보디브(Merimebodib)(VX-497), RPI사에 의한 헵타자임(HEPTAZYME^®), 아이둔 파르마(Idun Pharma.)사에 의한 IDN-6556, XTL.사에 의한 XTL-002, 치론(Chiron)사에 의한 HCV/MFS9, 나비(NABI)사에 의한 시바시르(CIVACIR^®)(C형 간염 면역 글로불린), 싸이클론(SciClone)사에 의한 자다신(ZADAXIN^®)(티모신 α-1), 싸이클론사에 의한 티모신 플러스 PEG화된 인터페론인 세플렌(CEPLENE^®); 이노제네틱스(Innogenetics)사에 의한 E2에 대한 치료용 백신, 인터셀(Intercell)사에 의한 치료용 백신, 에피뮨(Epimmune)/제넨코(Genencor)사에 의한 치료용 백신, 메릭스(Merix)사에 의한 치료용 백신, 트리펩(Tripep)사에 의한 치료용 백신인 크론-벡(Chron-VacC)을 포함한다.

다른 거대분자성 방법들은 HCV RNA를 표적으로 하는 리보자임을 포함한다. 리보자임은 RNA의 서열-특이적 절단을 촉진시키는 엔도뉴클레아제 활성을 갖고 천연적으로 발생하는 짧은 분자이다. 대안적인 방법은 RNA에 결합하고 RNaseH 매개된 절단을 자극하는 안티센스 올리고뉴클레오티드의 사용이다.

현재, NS2-NS3 오토프로테아제, N3 프로테아제, N3 헬리카아제 및 NS5B 중합효소를 포함하나 이들로 한정되지 않는, 항-HCV치료제으로서의 약물 개발을 위한 다수의 잠재적 분자 표적들이 확인되어 있다. RNA-의존성 RNA 중합효소는 단일-가닥, 양성 센스, RNA 게놈의 복제에 매우 필수적이며 이 효소는 의약 화학자들 사이에서 상당한 관심을 불러 일으켰다.

뉴클레오시드 억제제는 사슬 종결자 또는 뉴클레오티드와 중합효소의 결합을 방해하는 경쟁적 억제자로서 작용할 수 있다. 사슬 종결자로 작용하기 위해 뉴클레오시드 유사체는 세포에 의해 섭취되어, 중합효소와 뉴클레오티드의 결합 부위에서 기질로서 경쟁하기 위해 생체 내에서 그의 트라이포스페이트 형태로 전환되어야 한다. 이러한 트라이포스페이트로의 전환은, 통상적으로 임의의 뉴클레오시드에 추가적인 구조적 한계를 부여하는 세포의 키나아제(kinase)에 의해 매개된다. 또한, 뉴클레오시드 중합효소는 정상 세포 분열에 있어 필수적인 성분이고, 잠재적인 독성 부작용을 제한하기 위해서 뉴클레오시드 억제제는 숙주 중합효소를 억제함으로써 필수적인 세포 성장 및 수선을 방해함이 없이 선택적으로 바이러스 중합효소를 억제하여야 한다. 따라서 내인성 키나아제에 의한 인산화와 내인성 중합효소에 관한 선택성에 대한 필요성이 잠재적 뉴클레오시드 치료제의 구조에 대한 엄격한 요건을 부과한다.

뉴클레오시드 전구약물

뉴클레오시드가 종종 강력한 항바이러스 및 화학요법제이긴 하지만, 이들의 실용성은 두 가지 요인에 의해 종종 제한된다. 첫째로, 열등한 약물동력학적 특성은 종종 소화관에서 뉴클레오시드의 흡수를 제한한다. 두번째로, 부적당한 물리적 특성은 활성 성분의 전달을 향상시키는데에 사용될 수 있는 제제의 선택을 제한한다.

알버트(Albert)는 고유한 생물학적 활성을 갖지 않지만 활성 약물 물질로 대사 전환(metabolic transformation)할 수 있는 화합물을 기술하기 위해 용어 전구약물을 도입하였다(문헌[A. Albert, Selective Toxicity, Chapman and Hall, London, 1951]). 전구약물은 문헌[P. Ettmayer et al ., J. Med Chem. 2004 47(10):2393-2404; K. Beaumont et al ., Curr . Drug Metab . 2003 4:461-485; H. Bundgaard, Design of Prodrugs: Bioreversible derivatives for various functional groups and chemical entities in Design of Prodrugs, H. Bundgaard (ed) Elsevier Science Publishers, Amersterdam 1985; G. M. Pauletti et al. Adv. Drug Deliv . Rev . 1997 27:235-256;R. J. Jones and N. Bischofberger, Antiviral Res . 1995 27; 1-15 and C. R. Wagner et al ., Med . Res . Rev . 2000 20:417-45]에 검토되어 있다. 대사 전환이 특정 효소, 종종 가수분해효소에 의해 촉진될 수 있지만, 활성 화합물은 비-특이적 화학적 과정에 의해 재생될 수도 있다.

약학적으로 허용가능한 전구약물은 숙주 내에서 대사되어, 예컨대 가수분해되거나 산화되어, 본 발명의 화합물을 형성하는 화합물을 지칭한다. 생물 전환(bioconversion)은 독성을 갖는 단편의 형성을 피해야 한다. 전구약물의 전형적인 예는, 활성 화합물의 작용성 잔기에 연결된 생물학적으로 불안정한 보호기를 갖는, 화합물을 포함한다. 당 잔기에서의 알킬화, 아실화 또는 하이드록시기의 친지질성 변경이 프로뉴클레오티드의 고안에 이용되어 왔다. 이러한 프로뉴클레오티드는 생체 내에서 가수분해되거나 탈알킬화되어 활성 화합물을 생성할 수 있다.

경구 생체이용률을 종종 제한하는 요인들은 소화관에서의 흡수와 소화관 벽 및 간에 의한 초회-통과 배설이다. 위장관을 통한 세포간 흡수의 최적화는 0 초과의 D_(7.4)를 요구한다. 하지만 분배계수의 최적화가 성공을 보장하지는 않는다. 전구약물은 장세포 내에서의 능동 유출 수송체를 피할 수 있어야 한다. 장세포 내에서의 세포내 대사는 소화관 루멘으로 복귀하는 유출 펌프에 의한 대사물질의 수동 수송 또는 능동 수송을 발생시킬 수 있다. 전구약물은 또한 표적 세포 또는 수용체에 도달하기 전에 혈액 내 바람직하지 않은 생체 전환에 저항하여야 한다.

내성 있는 집단을 생성시키는 위험을 최소화하기 위해 높은 혈액 농도의 API를 충분히 유지하는데에 높은 순환 농도의 항바이러스 약물이 종종 필요하다. 예를 들면, 최근 시도에서는 1500mg 이하의 투여량의 이소부티르산(2R,3R,4R,5R)-5-(4-아미노-2-옥소-2H-피리미딘-l-일)-4-플루오로-2-이소부티릴옥시메틸-4-메틸-테트라하이드로-푸란-3-일 에스터 이소부티르산(Ⅱ: R7128)을 1일 2회 및 1일 4회 투여하였다(문헌[S. Le Pogam et al, "No Evidence of R7128 Drug Resistance After Up To 4 Weeks Treatment of GT1,2 and 3 Hepatitis C Virus Infected Individuals", 44th Annual Meeting of the European Association for the Study of the Liver ( EASL ), Copenhagen, Denmark, Apr 22-Apr 26, 2009]). 이는 종종 큰 크기의 알약 또는 캡슐을 요구하는 높은 일일 투여량 또는 투여 형태의 더 잦은 투여를 야기한다. 약리활성물질의 높은 투여량이 요구될 때, 생체이용률을 개선하기 위한 희석제 또는 부형제를 첨가할 기회는 종종 제한된다. 따라서 새로운 HCV 중합효소 억제제의 고안은 생체이용가능하고, 상응하는 트라이포스페이트로 전환되며 강력한 HCV 중합효소 억제제인 화합물의 발견을 필요로 한다.

최근 생체 내 인산화에 대한 필수적인 요구는, 뉴클레오시드 모노포스페이트 생성으로 이어지는 세포내 효소적 활성화에 민감한 차폐된 포스페이트 잔기를 포함하는 뉴클레오시드 모노포스페이트 전구약물에 대한 관심으로 이어졌다. 뉴클레오시드 트라이포스페이트의 형성에서 속도 제한 단계가 모노포스페이트 생성으로 이어지는 첫번째 단계이기 때문에, 두 번째 및 세 번째 포스페이트의 후속 첨가는 모노포스페이트로부터 쉽게 형성된다(예를 들면, 문헌[P. Perrone et al ., J. Med . Chem.,2007, 50(8): 1840; S.J. Hecker and M.D. Erion, J. Med Chem. 2008 51(8):2328] 참조).

잠재적 전구약물을 제공하기 위한 활성 화합물의 화학적 변경은 모 화합물에는 없는 원하지 않는 물리적, 화학적 및 생물학적 특성을 보일 수 있는 완전히 새로운 분자 개체를 생성한다. 복수의 경로가 다수의 대사산물로 이어지는 경우, 대사산물의 확인을 위한 규제 요건이 도전을 제기할 수 있다. 따라서, 전구약물의 발견은 불확실하고 도전적인 일로 남아있다. 게다가, 잠재적 전구약물의 약물동력학적 특성을 평가하는 것은 어렵고 많은 비용과 노력이 든다. 동물 모델로부터의 약물동력학적 결과로부터 인간에 대해 추론하는 것은 어려울 것이다.

본 발명의 목적은 C형 간염 바이러스에 감염된 숙주를 치료하기 위한 새로운 화합물, 방법 및 조성물을 제공하는 것이다.

발명의 요약

현재, C형 간염 바이러스(HCV) 감염의 치료를 위한 예방적 치료법 또는 일반적으로 효과적인 치료법이 없다. 오직 HCV에 대항하여 존재하는 현재 승인된 치료법은 제한된 효과를 갖고 심각한 부작용을 수반한다. 그러므로, 더 적은 독성을 갖는 새롭고 더 효과적인 치료법의 고안과 개발이 필수적이다.

본 발명은 화학식 I의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염에 관한 것으로,

[화학식 I]

상기 식에서, R ¹ 및 R ² 는 (i) 독립적으로 수소, C_1-6 알킬카르보닐, C_1-6 알콕시카르보닐, 및 C_1-6 아미노알킬카르보닐로 이루어진 군으로부터 선택되거나 (ii) R ¹ 및 R ² 가 함께 C(=0)를 형성하고; R ³ 는 수소, C_1-6 알킬카르보닐, C_1-6 알콕시카르보닐 또는 C_1-6 아미노알킬카르보닐이나, 단, R ¹ , R ² 및 R ³ 중 하나 이상은 수소 이외의 것이다.

또한, 본 발명은 치료적 유효량의 화학식 I의 화합물을 치료가 필요한 환자에게 투여하는 것에 의해 C형 간염 바이러스(HCV) 감염 질병을 치료하는 방법을 제공한다. 본 화합물은 단독으로 투여되거나 다른 항바이러스성 화합물 또는 면역조절제와 함께 공-투여될 수 있다 .

또한, 본 발명은 HCV를 억제하기에 효과적인 양의 화학식 I의 화합물을 투여함으로써 세포 내에서 HCV의 복제를 억제하는 방법을 제공한다.

또한, 본 발명은 화학식 I의 화합물 및 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 약학 조성물을 제공한다.

4'-아지도-시티딘(4'-AC)의 트라이아실 유도체는 NS5B HCV 중합효소 억제제로서 연구되어왔다(문헌[K. Klumpp et al ., J. Bio . Chem ., 2008 283(4):2167-2176]). 불행하게도, 4'-AC가 강력한 바이러스 복제 억제제인 반면, 허용가능하지 않은 부작용의 발견에 의해 임상 시험이 중단되었다. 관련 피리미딘 뉴클레오시드인, 4'-아지도-우리딘(4'-AU)은 잠재적 중합효소 억제제를 평가하는 데에 널리 사용되는 레플리콘 분석에서 불활성이었다(문헌[V. Lohmann et al ., J. Virol. 2003 77:3007-3019, K.J. Blight et al ., Science 2000 290(5498): 1870-1871]). 트라이포스페이트가 화학적으로 제조되고 HCV 중합효소 분석에서 평가되는 경우, 트라이포스페이트는 4'-아지도-시티딘 트라이포스페이트에 대한 Ki값인 0.040 ± 25 μΜ에 비해 0.038 ± 8 μΜ의 K_i값으로 효소를 억제하였다(문헌[D. Smith et al ., Bioorg. Med . Chem . Lett. 2007 17:2570]). 그러므로, 레플리콘 분석에서의 활성 없음은 4'-AU가 생체내에서 인산화되지 않았음을 나타내는 것으로 추정되었다. 이 설명은, 4'-AC가 PBMC(말초 혈액 단핵구 세포)에 의해 인산화되는 반면, 4'-AU는 상응하는 인산화된 뉴클레오시드로 전환되지 않았다는 입증에 의해 뒷받침되었다(도 1).

최근, 놀랍게도, 4'-AU의 인산화가 1차 인간 간세포(primary human hepatocyte)에서 효율적으로 일어난다는 것이 밝혀졌다(도 2). 세포 특이적 인산화가 HCV 복제를 위한 표적 조직에서 일어나기 때문에, 선택적으로 인산화된 뉴클레오시드를 사용하는 치료법에 대한 가능성이 존재하는데, 이는 다른 세포에서의 제한적인 인산화가 원치 않는 독성에 관한 가능성을 더 줄이는 결과가 될 수도 있다는 것을 추가로 암시한다.

본원에 사용된 단수형은 그의 하나 이상을 의미하고, 예를 들면 화합물은 하나 또는 그 이상의 화합물, 또는 하나 이상의 화합물을 지칭한다. 이와 같이, 단수형과 "하나 이상" 및 "적어도 하나"는 본원에서 상호교환적으로 사용될 수 있다.

"상기 본원에 정의된 바와 같은"이라는 문구는 발명의 요약 또는 가장 넓은 청구항에 제공된 각각의 기에 대한 가장 넓은 정의를 의미한다. 이하에서 제공되는 모든 다른 실시양태에서, 각각의 실시양태에서 존재할 수 있는 치환기 및 명시적으로 정의되지 않은 치환기는 발명의 요약에 제공된 가장 넓은 정의를 갖는다.

본원에 사용된 용어 "포함한다" 및 "포함하는"은, 특허청구범위의 전이부에 사용되든 혹은 본문에서 사용되든 간에, 개방형의 의미를 갖는 것으로 해석되어야 한다. 즉, 상기 용어들은 "적어도 갖는" 또는 "적어도 포함하는"이라는 문구와 동의어로 해석되어야 한다. 공정과 관련해서 사용되는 경우, 용어 "포함하는"은 그 공정이 적어도 언급된 단계들을 포함하지만 추가 단계를 포함할 수 있음을 의미한다. 화합물 또는 조성물과 관련해서 사용되는 경우, 용어 "포함하는"은 그 화합물 또는 조성물이 적어도 언급된 특징 또는 성분들을 포함하지만 추가적인 특징 또는 성분들도 포함할 수 있음을 의미한다.

본원에 사용된 용어 "독립적으로"는 동일한 화합물 내의 동일한 또는 상이한 정의를 갖는 변수의 존재 또는 부재와 관계없이 임의의 한 경우에 변수가 적용됨을 의미한다. 따라서, R"이 2회 나타나고 "독립적으로 탄소 또는 질소"로서 정의된 화합물에서, 두 개의 R"이 탄소이거나, 두 개의 R"이 질소이거나, 또는 하나의 R"이 탄소이고 다른 것이 질소일 수 있다.

본 발명에서 사용되거나 특허청구된 화합물을 표시하고 기술하는 임의의 잔기 또는 화학식에서 임의의 변수(예를 들면, R¹, R^4a, Ar, X¹ 또는 Het)가 2회 이상 나타나는 경우, 각각의 경우에서 그의 정의는 모든 다른 경우에서의 그의 정의와 서로 독립적이다. 또한, 치환기 및/또는 변수들의 조합은 이러한 조합이 안정한 화합물을 형성하는 경우에만 허용된다.

결합의 말단에 있는 부호 "*" 또는 결합을 관통하여 표시된 부호 "------"는 작용기 또는 다른 화학적 잔기가 이를 일부로 함유하는 분자의 나머지 부분에 결합하는 지점을 각각 지칭한다. 따라서, 예를 들면 MeC(=0)OR⁴에서 R⁴가

또는

이면 이는

를 지칭한다.

고리 시스템 내로 표시되는 결합은 (각각의 꼭지점에 연결된 것과는 반대로) 이 결합이 적절한 고리 원자들 중 임의의 고리 원자에 결합될 수 있음을 의미한다.

본원에 사용된 용어 "임의의" 또는 "임의로"는 후술되는 사건 또는 상황이 일어날 수 있지만 반드시 일어나는 것은 아니고, 이러한 기재는 사건 또는 상황이 일어나는 경우와 일어나지 않는 경우를 포함함을 의미한다. 예를 들면, "임의로 치환되는"은 임의로 치환되는 잔기가 수소 또는 치환기를 포함할 수 있음을 의미한다.

본원에 사용된 용어 "약"은 대략적으로 거의 범위 내에 있거나 범위 근처에 있음을 의미한다. 용어 "약"이 수치 범위와 함께 사용되는 경우, 제시된 수치 값의 위아래로 범위를 확장함으로써 범위를 변경시킨다. 일반적으로, 용어 "약"은 수치 값을 기술된 값의 위아래로 20% 편차로 변경하기 위해 본원에 사용된다.

본원에 사용된 바와 같이, 변수에 대한 수치 범위의 언급은 본 발명이 그 범위 내의 임의의 값과 같은 변수를 이용하여 실시할 수 있음을 전달하기 위한 것이다. 따라서, 본질적으로 분리된 변수의 경우, 그 변수는 범위의 경계값을 포함하여 수치 범위의 임의의 정수 값과 동일할 수 있다. 유사하게, 본질적으로 연속된 변수의 경우, 그 변수는 범위의 경계값을 포함하여 수치 범위의 임의의 실수 값과 동일할 수 있다. 예를 들면, 0과 2사이의 값을 갖는 것으로 기술된 변수는, 본질적으로 분리된 변수인 경우 0, 1 또는 2일 수 있고, 본질적으로 연속된 변수인 경우 0.0, 0.1, 0.01, 0.001 또는 임의의 다른 실수 값일 수 있다.

화학식 I의 화합물은 호변이성질성(tautomerism)을 나타낸다. 호변이성질체 화합물은 2종 이상의 상호전환가능한 종으로서 존재할 수 있다. 양성자성 호변이성질체는 2개의 원자 사이에서 공유결합된 수소 원자의 이동으로 발생된다. 호변이성질체는 일반적으로 평형 상태로 존재하고, 개개의 호변이성질체를 단리하고자 하는 시도는 보통 그의 화학적 및 물리적 성질이 화합물의 혼합물과 일치하는 혼합물을 생성한다. 평형의 위치는 분자 내의 화학적 특징에 의존한다. 예를 들면, 많은 지방족 알데하이드 및 케톤, 예를 들면 아세트알데하이드에서 케토 형태가 우세한 반면, 페놀에서는 에놀 형태가 우세하다. 통상의 양성자성 호변이성질체는 케토/에놀(-C(=0)-CH- ↔ -C(-OH)=CH-), 아마이드/이미드 산(-C(=0)-NH- ↔ -C(-OH)=N-) 및 아미딘(C(=NR)-NH- ↔ -C(-NHR)=N-) 호변이성질체를 포함한다. 뒤의 2개의 호변이성질체는 헤테로아릴 및 헤테로사이클릭 고리에서 특히 일반적이고, 본 발명은 본 화합물의 모든 호변이성질체 형태를 포함한다.

본 발명의 제 1 실시양태에서, R¹, R² 및 R³이 상기 본원에서 기술된 바와 같은 화학식 I에 따른 화합물이 제공된다.

본 발명의 제 2 실시양태에서, R¹, R² 및 R³이 C₁ _-6 알킬카르보닐인 화학식 I에 따른 화합물이 제공된다.

본 발명의 제 3 실시양태에서, R¹ 및 R²가 C₁ _-6 알킬카르보닐이고 R³이 수소인 화학식 I에 따른 화합물이 제공된다.

본 발명의 제 4 실시양태에서, R¹ 및 R²가 수소이고 R³이 C₁ _-6 알킬카르보닐, 또는 C₁ _-6 아미노 알킬카르보닐인 화학식 I에 따른 화합물이 제공된다.

본 발명의 제 5 실시양태에서, 표 1의 화합물 1-1 내지 1-6으로부터 선택된 화합물이 제공된다.

본 발명의 제 6 실시양태에서, R¹, R² 및 R³이 상기 본원에 정의된 바와 같은 화학식 I에 따른 화합물의 치료적 유효량을 치료가 필요한 환자에게 투여하는 것을 포함하는 HCV 감염을 치료하는 방법이 제공된다. 이하에서 제공되는 모든 다른 실시양태에서, 각각의 실시양태에 존재할 수 있는 치환기 및 명시적으로 정의되지 않은 치환기는 발명의 요약에서 제공된 가장 넓은 정의를 갖는다.

본 발명의 제 7 실시양태에서, R¹, R² 및 R³가 C₁ _-6 알킬카르보닐인 화학식 I에 따른 화합물의 치료적 유효량을 치료가 필요한 환자에게 투여하는 것을 포함하는 HCV 감염을 치료하는 방법이 제공된다.

본 발명의 제 8 실시양태에서, R¹ 및 R²가 C₁ _-6 알킬카르보닐이고 R³가 수소인 화학식 I에 따른 화합물의 치료적 유효량을 치료가 필요한 환자에게 투여하는 것을 포함하는 HCV 감염을 치료하는 방법이 제공된다.

본 발명의 제 9 실시양태에서, R¹ 및 R²가 수소이고 R³가 C₁ _-6 알킬카르보닐, 또는 C₁ _-6 아미노알킬카르보닐인 화학식 I에 따른 화합물의 치료적 유효량을 치료가 필요한 환자에게 투여하는 것을 포함하는 HCV 감염을 치료하는 방법이 제공된다.

본 발명의 제 10 실시양태에서, R¹, R² 및 R³가 상기 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I에 따른 화합물의 치료적 유효량을 치료가 필요한 환자에게 투여하는 것 및 하나 이상의 면역 시스템 조절제 및/또는 HCV 복제를 억제하는 하나 이상의 항바이러스제를 공-투여하는 것을 포함하는 HCV 감염을 치료하는 방법이 제공된다.

본 발명의 제 11 실시양태에서, R¹, R² 및 R³가 상기 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I에 따른 화합물의 치료적 유효량을 치료가 필요한 환자에게 투여하는 것, 및 인터페론, 인터루킨, 종양 괴사 인자 및 집락 자극 인자로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 면역 시스템 조절제를 공-투여하는 것을 포함하는 HCV 감염을 치료하는 방법이 제공된다.

본 발명의 제 12 실시양태에서, R¹, R² 및 R³가 상기 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I에 따른 화합물의 치료적 유효량을 치료가 필요한 환자에게 투여하는 것, 및 인터페론 또는 화학적으로 유도된 인터페론인 하나 이상의 면역 시스템 조절제를 공-투여하는 것을 포함하는 HCV 감염을 치료하는 방법이 제공된다.

본 발명의 제 13 실시양태에서, R¹, R² 및 R³가 상기 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I에 따른 화합물의 치료적 유효량을 치료가 필요한 환자에게 투여하는 것 및 HCV 복제를 억제하는 하나 이상의 항바이러스제를 공-투여하는 것을 포함하는 HCV 감염을 치료하는 방법이 제공된다.

본 발명의 제 14 실시양태에서, R¹, R² 및 R³가 상기 본원에 기술된 바와 같은 화학식 I에 따른 화합물의 치료적 유효량을 치료가 필요한 환자에게 투여하는 것, 및 HCV 프로테아제 억제제, 다른 뉴클레오시드 HCV 중합효소 억제제, 비-뉴클레오시드 HCV 중합효소 억제제, HCV 헬리카아제 억제제, HCV 프리마아제 억제제 및 HCV 융합 억제제로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 항바이러스제를 공-투여하는 것을 포함하는 HCV 감염을 치료하는 방법이 제공된다.

본 발명의 다른 실시양태에서, R¹, R² 및 R³가 상기 본원에 정의된 바와 같은 화학식 I에 따른 화합물의 HCV 감염의 치료를 위한 용도가 제공된다.

본 발명의 다른 실시양태에서, R¹, R² 및 R³가 상기 본원에 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물의 HCV 감염의 치료를 위한 약제의 제조를 위한 용도가 제공된다.

본 발명의 다른 실시양태에서, R¹, R² 및 R³가 C₁ _-6 알킬카르보닐인 화학식 I에 따른 화합물의 HCV 감염의 치료를 위한 용도가 제공된다.

본 발명의 다른 실시양태에서, R¹, R² 및 R³가 C₁ _-6 알킬카르보닐인 화학식 I의 화합물의 HCV 감염의 치료를 위한 약제의 제조를 위한 용도가 제공된다.

본 발명의 다른 실시양태에서, R¹ 및 R²가 C₁ _-6 알킬카르보닐이고 R³가 수소인 화학식 I에 따른 화합물의 HCV 감염의 치료를 위한 용도가 제공된다.

본 발명의 다른 실시양태에서, R¹ 및 R²가 C₁ _-6 알킬카르보닐이고 R³가 수소인 화학식 I의 화합물의 HCV 감염의 치료를 위한 약제의 제조를 위한 용도가 제공된다.

본 발명의 다른 실시양태에서, R¹ 및 R²가 수소이고 R³가 C₁ _-6 알킬카르보닐 또는 C₁ _-6 아미노 알킬카르보닐인 화학식 I에 따른 화합물의 HCV 감염의 치료를 위한 용도가 제공된다.

본 발명의 다른 실시양태에서, R¹ 및 R²가 수소이고 R³가 C₁ _-6 알킬카르보닐 또는 C₁ _-6 아미노 알킬카르보닐인 화학식 I의 화합물의 HCV 감염의 치료를 위한 약제의 제조를 위한 용도가 제공된다.

본 발명의 다른 실시양태에서, 하나 이상의 면역 시스템 조절제 및/또는 HCV 복제를 억제하는 하나 이상의 항바이러스제와 조합된 화학식 I에 따른 화합물(R¹, R² 및 R³은 상기 본원에 기술된 바와 같음)의 HCV 감염의 치료를 위한 용도가 제공된다.

본 발명의 다른 실시양태에서, 인터페론, 인터루킨, 종양 괴사 인자 및 집락 자극 인자로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 면역 시스템 조절제와 조합된 화학식 I에 따른 화합물(R¹, R² 및 R³은 상기 본원에 기술된 바와 같음)의 HCV 감염의 치료를 위한 용도가 제공된다.

본 발명의 다른 실시양태에서, 인터페론 또는 화학적으로 유도된 인터페론인 하나 이상의 면역 시스템 조절제와 조합된 화학식 I에 따른 화합물(R¹, R² 및 R³은 상기 본원에 기술된 바와 같음)의 HCV 감염의 치료를 위한 용도가 제공된다.

본 발명의 다른 실시양태에서, HCV 복제를 억제하는 하나 이상의 항바이러스제와 조합된 화학식 I에 따른 화합물(R¹, R² 및 R³은 상기 본원에 기술된 바와 같음)의 HCV 감염의 치료를 위한 용도가 제공된다.

본 발명의 다른 실시양태에서, HCV 프로테아제 억제제, 다른 뉴클레오시드 HCV 중합효소 억제제, 비-뉴클레오시드 HCV 중합효소 억제제, HCV 헬리카아제 억제제, HCV 프리마아제 억제제 및 HCV 융합 억제제로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 항바이러스제와 조합된 화학식 I에 따른 화합물(R¹, R² 및 R³은 상기 본원에 기술된 바와 같음)의 HCV 감염의 치료를 위한 용도가 제공된다.

본 발명의 다른 실시양태에서, 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체, 희석제 또는 부형제와 혼합된 화학식 I에 따른 화합물(R¹, R² 및 R³은 상기 본원에 기술된 바와 같음)의 치료적 유효량을 포함하는 약학 조성물이 제공된다.

본원에 사용된 용어 "알킬카르보닐"은 R이 본원에 정의된 바와 같은 알킬인 화학식 -C(=0)R 기를 의미한다. 용어 C_1-6 아실(또는 "알카노일")은 1 내지 6개의 탄소 원자를 포함하는 -C(=0)R 기를 의미한다. C₁ 아실(또는 "알카노일")기는 R이 수소인 포르밀 기이고, C₆ 아실 기는 알킬 사슬이 분지되지 않은 헥사노일을 의미한다. 본원에 사용된 용어 "아릴카르보닐" 또는 "아로일"은 R이 아릴 기인 화학식 C(=O)R 기를 의미하고, 본원에 사용된 용어 "벤조일"은 R이 페닐인 "아릴카르보닐" 또는 "아로일"기를 의미한다.

본원에 사용된 용어 "알콕시카르보닐" 및 "아릴옥시카르보닐"은 R이 각각 알킬 또는 아릴이고 알킬 및 아릴이 본원에 정의된 바와 같은 화학식 -C(=O)OR기를 의미한다.

본원에 사용된 용어 "아미노알킬카르보닐"은 수소 하나가 아미노기로 치환된 본원에서 정의된 바와 같은 알킬카르보닐 잔기를 의미한다. 용어 C₁ _-6 아미노알킬카르보닐은 C₁ _-6알킬카르보닐 기를 명시한다. 아미노알킬카르보닐 잔기의 예는 글리실(COCH₂NH₂), 알라닐(COCH(NH₂)Me), 발리닐[COCH(NH₂)CHMe₂], 류시닐(COCH(NH₂)CH₂CHMe₂), 이소류시닐(COCH(NH₂)CHMeEt) 및 노르류시닐(COCH(NH₂)(CH₂)₃Me) 등을 포함하나 이들에 한정되지 않는다. 이 정의는 천연적으로 발생하는 아미노산에 한정되지 않는다.

통상적으로 사용되는 약어는 다음을 포함한다: 아세틸(Ac), 수성(aq.), 4AC (4-아지도시티딘), 4AU(4-아지도우리딘), 4AU-MP(4-아지도우리딘 모노포스페이트), 4AU-DP(4-아지도우리딘 다이포스페이트), 4AU-TP(4-아지도우리딘 트라이포스페이트), 대기(Atm), 3급-부톡시카르보닐(Boc), 다이-3급-부틸 파이로카보네이트 또는 boc 무수물(BOC₂O), 벤질(Bn), 부틸(Bu), 화학 초록 등록 번호(CASRN), 벤질옥시카르보닐(CBZ 또는 Z), 카르보닐 다이이미다졸(CDI), Ν,Ν'-다이사이클로헥실카르보다이이미드(DCC), 1,2-다이클로로에탄(DCE), 다이클로로메탄(DCM), 다이에틸 아조다이카르복실레이트(DEAD), 다이-이소-프로필아조다이카르복실레이트(DIAD), 다이-이소-부틸알루미늄하이드라이드(DIBAL 또는 DIBAL-H), 다이-이소-프로필에틸아민(DIPEA), N,N-다이메틸 아세트아마이드 (DMA), 4-N,N-다이메틸아미노피리딘 (DMAP), Ν,Ν-다이메틸포름아마이드(DMF), 다이메틸 설폭사이드(DMSO), 에틸(Et), 에탄올(EtOH), 1-(3-다이메틸아미노프로필)-3-에틸카르보다이이미드 하이드로클로라이드(EDCI), 에틸 아세테이트(EtOAc), 2-에톡시-2H-퀴놀린-l-카르복실산 에틸 에스터(EEDQ), 다이에틸 에터(Et₂0), 아세트산(HOAc), 1-N-하이드록시벤조트라이아졸(HOBt), 고압 액체 크로마토그래피(HPLC), 이소-프로판올(IPA), 메탄올(MeOH), 융점(mp), MeS0₂-(메실 또는 Ms), 메틸(Me), 아세토니트릴(MeCN), m-클로로퍼벤조산(MCPBA), 질량 분광(ms), 메틸 3급-부틸 에터 (MTBE), N-메틸모르폴린(NMM), N-메틸피롤리돈(NMP), 페닐(Ph), 프로필(Pr), 이소-프로필(i-Pr), 평방 인치 당 파운드(psi), 피리딘(pyr), 실온(rt 또는 RT), 포화된(satd.), 3급-부틸다이메틸실릴 또는 t-BuMe₂Si(TBDMS), 트라이에틸아민(TEA 또는 Et₃N), 트라이플레이트 또는 CF₃S0₂-(Tf), 트라이플루오르아세트산(TFA), 0-벤조트라이아졸-l-일-N,N,N',N'-테트라메틸유로늄 테트라플루오로보레이트(TBTU), 박층 크로마토그래피(TLC), 테트라하이드로푸란(THF), 테트라메틸에틸렌다이아민(TMEDA), 트라이메틸실릴 또는 Me₃Si (TMS), p-톨루엔설폰산 모노하이드레이트(TsOH 또는 pTsOH), 4-Me-C₆H₄S0₂- 또는 토실(Ts), N-우레탄-N-카르복시무수물(UNCA). 접두사 노멀(n-), 이소(i-), 2급(sec -), 3급(tert -) 및 네오 -를 포함하는 보편적인 명명은 알킬 잔기와 사용되는 경우 그들의 통상적인 의미를 가진다(문헌[J. Rigaudy and D. P. Klesney, Nomenclature in Organic Chemistry, IUPAC 1979 Pergamon Press, Oxford.]).

화합물 및 제조

본 발명의 범위 내에 있고 본 발명이 포함하는 대표적인 화합물들의 예가 하기 표에 제공된다. 하기 실시예 및 제조예는 통상의 기술자가 본 발명을 더욱 명확히 이해하고 실시할 수 있도록 하기 위해 제공된다. 이들은 본 발명의 범위를 한정하는 것으로 인식되어서는 안 되고, 단지 본 발명을 예시하고 대표하기 위한 것으로서 인식되어야 한다.

일반적으로, 본원에서 사용되는 명명법은 IUPAC 체계적 명명을 위한 베일스테인 인스티튜트(Beilstein Institute) 컴퓨터화된 시스템인 AUTONOM™ v.4.0에 기초한다. 표시된 구조식과 그 구조식에 부여된 명칭 사이에 불일치가 있는 경우, 표시된 구조식에 더 무게를 두어야 한다. 또한, 구조식 또는 구조식의 일부의 입체화학이, 예를 들면 굵은 선 또는 점선으로 표시되지 않은 경우, 그 구조식 또는 그 구조식의 일부는 그의 모든 입체이성질체를 포함하는 것으로 해석되어야 한다.

본 발명의 화합물은 하기 도시되고 기술된 예시적 합성 반응식에 나타낸 다양한 방법들에 의해 제조될 수 있다. 이러한 화합물의 제조에 사용되는 출발물질 및 시약은 일반적으로 상업적 공급처, 예를 들면 알드리치 케미칼 컴파니(Aldrich Chemical Co.)로부터 입수될 수 있거나, 또는 문헌, 예를 들면 문헌[Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis ; Wiley & Sons: New York, Volumes 1-21; R. C. LaRock, Comprehensive Organic Transformations, 2^nd edition Wiley-VCH, New York 1999; Comprehensive Organic Synthesis, B. Trost and I. Fleming (Eds.) vol. 1-9 Pergamon, Oxford, 1991; Comprehensive Heterocyclic Chemistry, A. R. Katritzky and C. W. Rees (Eds) Pergamon, Oxford 1984, vol. 1-9; Comprehensive Heterocyclic Chemistry II, A. R. Katritzky and C. W. Rees (Eds) Pergamon, Oxford 1996, vol. 1-11; and Organic Reactions, Wiley & Sons: New York, 1991, Volumes 1-40]에 설명된 절차에 따라 통상의 기술자에게 공지된 방법에 의해 제조된다. 하기 합성 반응식은 단지 본 발명의 화합물을 합성할 수 있는 여러 가지 방법들을 예시하는 것이고, 이 합성 반응식에 대한 다양한 변경이 이루어질 수 있으며 상기 변경은 본원의 개시내용을 참고한 통상의 기술자에게 시사될 것이다.

합성 반응식의 출발 물질 및 중간체는 필요한 경우, 여과, 증류, 결정화, 크로마토그래피 등을 포함하나 이들로 한정되지 않는 통상적인 기술을 이용하여 단리하고 정제할 수 있다. 이러한 물질들은 물리적 상수 및 분광 데이터를 포함하는 통상적인 수단을 이용하여 특징지어질 수 있다.

달리 명시하지 않는 한, 본원에 기술된 반응은 바람직하게는 약 -78 내지 약 150℃, 보다 바람직하게는 약 0 내지 약 125℃의 반응 온도 범위, 그리고 가장 바람직하고 편리하게는 약 실온(또는 주변 온도), 예를 들면 약 20℃의 반응 온도에서 대기압 및 불활성 대기 하에서 수행된다.

하기 반응식에서 일부 화합물들은 일반화된 치환기로 표시되지만, 통상의 기술자는 R기의 성질이 본 발명에서 고려되는 다양한 화합물을 제공할 수 있도록 변경될 수 있음을 즉시 이해할 것이다. 뿐만 아니라, 이 반응 조건들은 예시적인 것이고, 대안적인 조건들도 잘 알려져 있다. 하기 실시예에서 반응 순서는 특허청구범위에 기술된 본 발명의 범위를 한정하기 위한 것이 아니다.

본 발명의 화합물은 4-아지도-우라실(CASRN 139442-01-6) 또는 이들의 보호된 유도체, 예를 들면, 2',3'-아세토나이드(CASRN 690271-27-3)의 아실화에 의해 제조될 수 있다. 4'AU를 산 염화물 또는 산 무수물과 같은 활성화된 카르복실산 유도체로 처리하면 트라이아실 유도체를 제공한다. 상응하는 아세토나이드를 처리하면 5'-아실 유도체를 제공하고, 이는 이후 탈보호화된다.

본원에서 사용된 용어 "보호기"는 (a) 분자 내에서 반응기와 효율적으로 결합하고, (b) 반응기가 원하지 않는 화학반응에 참여하는 것을 방지하고, (c) 반응기의 보호가 더이상 필요하지 않게된 후에 쉽게 제거될 수 있는 화학기를 의미한다. 보호기는 작용기의 화학적 특성이 다른 반응을 방해하기 때문에 그 작용기의 화학적 특성을 일시적으로 가리기 위해 합성시에 사용된다. 보호기를 도입하고 제거하기 위한 시약 및 프로토콜이 잘 알려져 있고 다수의 문헌에서 검토되었다(예를 들면, 문헌[T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3^rd edition, John Wiley & Sons, New York, 1999, and Harrison and Harrison et al., Compendium of Synthetic Organic Methods, Vols. 1-8 John Wiley and Sons, 1971-1996]). 화학 분야의 통상의 기술자는 때때로 프로토콜이 특정한 분자에 최적화되어야 하고 이러한 최적화가 화학 분야의 통상의 기술자의 능력으로 가능함을 이해할 것이다.

2',3'-다이아실-4'-AU 유도체는 효소공정에 의해 제조되었다. 5'-아실-4'-AU 유도체는 4'-AU의 2',3'-아세토나이드의 아세틸화(실시예 3) 또는 4'-AU의 선택적인 효소-촉매 아실화에 의해 제조되었다.

투여량 및 투여방법

본 발명의 화합물은 매우 다양한 경구 투여 제형 및 담체 내에 제제화될 수 있다. 경구 투여는 정제, 피복정, 당의정, 경질 및 연질 젤라틴 캡슐제, 용액, 에멀젼, 시럽 또는 현탁액의 형태일 수 있다. 본 발명의 화합물은 다른 투여 경로들 중에서 연속적(정맥내 드립(drip)) 국소 비경구, 근육내, 정맥내, 피하, 경피(침투 증강제를 포함할 수 있음), 구강, 비강, 흡입 및 좌약 투여를 포함하는 다른 투여 경로로 투여되는 경우에도 효과적이다. 바람직한 투여 방법은 일반적으로 편리한 일일 투여 요법을 이용한 경구 투여인데, 이는 고통의 정도 및 활성 성분에 대한 환자의 반응에 따라 조절될 수 있다.

본 발명의 화합물 및 이의 약학적으로 사용가능한 염은 하나 이상의 통상적인 부형제, 담체 또는 희석제와 함께 약학 조성물 및 단위 투여량 형태로 될 수 있다. 약학 조성물 및 단위 투여량 형태는 추가 활성 화합물 또는 주성분과 함께 또는 추가 활성 화합물 또는 주성분 없이 통상적인 비율로 통상적인 성분들로 구성될 수 있고, 단위 투여량 형태는 적용되는 의도된 일일 투여량 범위에 상응하는 임의의 적절한 유효량의 활성 성분을 함유할 수 있다. 약학 조성물은 고체, 예를 들면 정제 또는 충전된 캡슐제, 반고체, 산제, 지속 방출 제제, 또는 액체, 예를 들면 용액, 현탁액, 에멀젼, 엘릭시르, 또는 경구용 충전된 캡슐제; 또는 직장 또는 질 투여용 좌약제의 형태; 또는 비경구용 멸균 주사가능 용액의 형태로서 적용될 수 있다. 전형적인 제제는 약 5 내지 약 95 (w/w)%의 활성 화합물 또는 화합물들을 함유할 것이다. 용어 "제제" 또는 "투여 형태"는 활성 화합물의 고체 및 액체 제제 둘 다를 포함하는 것이고, 통상의 기술자는 표적 기관 또는 조직 및 원하는 투여량 및 약물동력학적 파라미터에 따라 활성 성분이 상이한 제제 내에 존재할 수 있음을 이해할 것이다.

본원에 사용된 용어 "부형제"는, 약학 조성물의 제조에 유용하고 일반적으로 안전하고 무독성이고 생물학적으로나 다른 방식으로나 바람직한 화합물을 의미하며 인간 약학 용도뿐만 아니라 수의학 용도로 허용가능한 부형제를 포함한다. 본 발명의 화합물은 단독으로 투여될 수 있지만, 일반적으로 원하는 투여 경로 및 표준 약학 관행에 따라 선택된 하나 이상의 적절한 약학 부형제, 희석제 또는 담체와 혼합된 상태로 투여될 것이다.

"약학적으로 허용가능한"은 일반적으로 안전하고 무독성이고 생물학적으로나 다른 방식으로나 바람직한 약학 조성물의 제조에 유용한 것을 의미하며, 인간 약학 용도로 허용가능한 것을 포함한다.

또한, 활성 성분의 "약학적으로 허용가능한 염" 형태는 먼저 비-염 형태에서는 존재하지 않았던 바람직한 약물동력학적 성질을 활성 성분에 부여할 수도 있고, 활성 성분의 체내 치료 활성에 관해 활성 성분의 약력학적 성질에도 긍정적으로 영향을 미칠 수 있다. 화합물의 "약학적으로 허용가능한 염"이란 문구는 약학적으로 허용가능하고 모 화합물의 원하는 약학적 활성을 보유하는 염을 의미한다. 이러한 염은 (1) 무기산, 예를 들면 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 인산 등에 의해 형성되거나; 또는 유기산, 예를 들면 아세트산, 프로피온산, 헥산산, 사이클로펜탄프로피온산, 글리콜산, 피루브산, 락트산, 말론산, 석신산, 말산, 말레산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 3-(4-하이드록시벤조일)벤조산, 신남산, 만델산, 메탄설폰산, 에탄설폰산, 1,2-에탄-다이설폰산, 2-하이드록시에탄설폰산, 벤젠설폰산, 4-클로로벤젠설폰산, 2-나프탈렌설폰산, 4-톨루엔설폰산, 캄포르설폰산, 4-메틸바이사이클로[2.2.2]-옥트-2-엔-1-카르복실산, 글루코헵톤산, 3-페닐프로피온산, 트라이메틸아세트산, 3급 부틸아세트산, 라우릴 황산, 글루콘산, 글루탐산, 하이드록시나프토산, 살리실산, 스테아르산, 뮤콘산 등에 의해 형성된 산 부가 염; 또는 (2) 모 화합물에 존재하는 산성 양성자가 금속 이온, 예를 들면 알칼리 금속 이온, 알칼리토금속 이온 또는 알루미늄 이온에 의해 치환되거나; 또는 유기 염기, 예를 들면 에탄올아민, 다이에탄올아민, 트라이에탄올아민, 트로메타민, N-메틸글루카민 등과 배위결합하는 경우 형성된 염을 포함한다.

고체 형태 제제는 산제, 정제, 환제, 캡슐제, 카세제, 좌약제 및 분산가능한 과립제를 포함한다. 고체 담체는 희석제, 풍미제, 가용화제, 윤활제, 현탁제, 결합제, 보존제, 정제 붕해제 또는 캡슐화제로서 작용할 수도 있는 하나 이상의 물질일 수 있다. 산제에서, 담체는 일반적으로 미분된 활성 성분과의 혼합물 형태인 미분된 고체이다. 정제에서, 활성 성분은 일반적으로 필요한 결합능을 가진 담체와 적절한 비율로 혼합되어 원하는 형태 및 크기로 압착된다. 적절한 담체는 탄산마그네슘, 스테아르산마그네슘, 탈크, 당, 락토스, 펙틴, 덱스트린, 전분, 젤라틴, 트레거캔쓰, 메틸셀룰로오스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오스, 저융점 왁스, 코코아 버터 등을 포함하나 이들로 한정되지 않는다. 고체 형태 제제는 활성 성분 이외에 착색제, 풍미제, 안정화제, 완충제, 인공 감미제, 천연 감미제, 분산제, 비후제, 가용화제 등을 함유할 수 있다.

에멀젼, 시럽, 엘릭시르, 수용액, 수성 현탁액을 포함하는 액체 제제 또한 경구 투여에 적합하다. 이러한 액체 제제는 사용 직전에 액체 형태 제제로 전환되도록 의도된 고체 형태 제제도 포함한다. 에멀젼은 용액, 예를 들면 프로필렌 글리콜 수용액 중에서 제조될 수 있거나 레시틴, 소르비탄 모노올레에이트 또는 아카시아와 같은 에멀젼화제를 함유할 수 있다. 수용액은 활성 성분을 물에 용해시키고 적절한 착색제, 풍미제, 안정화제 및 비후제를 첨가하여 제조할 수 있다. 수성 현탁액은 미분된 활성 성분을 점성 물질, 예를 들면 천연 또는 합성 고무, 수지, 메틸셀룰로오스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오스 및 다른 잘 알려진 현탁제와 함께 물에 분산시켜 제조할 수 있다.

본 발명의 화합물은 비경구 투여용으로 제제화될 수 있고(예를 들면, 주사, 예컨대, 볼루스 주사 또는 연속 주입), 보존제가 첨가된 앰플, 예비-충전된 시린지, 작은 부피 주입 또는 다회-투여 용기 내의 단위 투여량 형태로 제공될 수 있다. 조성물은 유성 또는 수성 비히클 중의 현탁액, 용액 또는 에멀젼과 같은 형태, 예를 들면 수성 폴리에틸렌 글리콜 중의 용액 형태일 수 있다. 유성 또는 비수성 담체, 희석제, 용매 또는 비히클의 예로는 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 식물성 오일(예를 들면, 올리브유), 및 주사가능한 유기 에스터(예를 들면, 에틸 올레에이트)를 포함하고, 제제화제, 예를 들면 보존제, 습윤제, 에멀젼화제 또는 현탁제, 안정화제 및/또는 분산제를 함유할 수 있다. 대안적으로는, 활성 성분은 멸균 고체의 무균 단리에 의해 또는 용액으로부터의 동결건조에 의해 수득된 산제 형태일 수 있고, 이 형태는 사용 전에 적절한 비히클, 예를 들면 멸균 주사용 증류수로 재구성될 수 있다.

본 발명의 화합물은 연고, 크림 또는 로션 또는 경피 패치와 같이 표피로 국소 투여되도록 제제화될 수 있다. 연고 및 크림은, 예를 들면 적절한 비후제 및/또는 겔화제를 첨가하여 수성 또는 유성 베이스로 제제화될 수 있다. 로션은 수성 또는 유성 베이스로 제제화될 수 있으며, 일반적으로 하나 이상의 에멀젼화제, 안정화제, 분산제, 현탁제, 비후제, 또는 착색제도 포함할 것이다. 입으로의 국소 투여에 적합한 제제는 주로 수크로오스, 아카시아 또는 트래거캔쓰와 같은 향미 베이스 중에 활성제를 포함하는 로젠지, 젤라틴 및 글리세린 또는 수크로오스 및 아카시아와 같은 비활성 베이스 중에 활성 성분을 포함하는 향과(pastilles), 및 적절한 액체 담체 중에 활성 성분을 포함하는 구강 청결제를 포함한다.

본 발명의 화합물은 좌약제로서 투여되도록 제제화될 수 있다. 저융점 왁스, 예를 들면 지방산 글리세라이드의 혼합물 또는 코코아 버터를 먼저 용융시키고, 활성 성분을 예를 들면 교반을 통해 균질하게 분산시킨다. 이어서, 용융된 균질한 혼합물을 편리한 크기의 주형 내에 붓고 냉각시키고 고체화시킨다.

본 발명의 화합물은 질내 투여되도록 제제화될 수 있다. 활성 성분 이외에 담체를 함유하는 페서리(pessary), 탐폰, 크림, 겔, 페이스트, 발포체(foam) 또는 스프레이가 당해 분야에서 적절한 것으로 알려져 있다. 본 발명의 화합물은 코로 투여되도록 제제화될 수 있다. 용액 또는 현탁액은 통상적인 수단, 예를 들면, 드로퍼(dropper), 피펫 또는 스프레이를 사용하여 비강으로 직접 적용된다. 제제는 단일 또는 다회투여 형태로 제공될 수 있다. 후자 형태인 드로퍼 또는 피펫의 경우, 이는 용액 또는 현탁액을 적절한, 미리 결정된 용량만큼 환자에게 투여하는 것에 의해 달성될 수 있다. 스프레이의 경우, 이는 예를 들면 계량 세분화 스프레이 펌프를 이용하여 달성될 수 있다.

본 발명의 화합물은 비강내 투여를 포함하여 특히 기도로의 에어로솔 투여를 위해 제제화될 수 있다. 화합물은 일반적으로 작은 입자 사이즈, 예를 들면 대략 5 미크론 이하를 가질 것이다. 이러한 입자 사이즈는 당해 기술 분야에 알려진 수단, 예를 들면 미분화에 의해 수득될 수 있다. 활성 성분은 클로로플루오로카본(CFC), 예를 들면, 다이클로로다이플루오로메탄, 트라이클로로플루오로메탄, 또는 다이클로로테트라플루오로에탄, 또는 이산화탄소 또는 다른 적합한 기체와 같은 적합한 분사제로 가압팩 내에 제공된다. 에어로솔은 레시틴과 같은 계면활성제를 알맞게 함유할 수도 있다. 약물의 투여량은 계량 밸브에 의해 조절될 수 있다. 대안적으로는 활성 성분은 건조 산제의 형태, 예를 들면 락토오스, 전분, 전분 유도체, 예를 들면, 하이드록시프로필메틸 셀룰로오스 및 폴리비닐피롤리딘(PVP)과 같은 적합한 산제 베이스 중에 화합물의 산제 혼합물의 형태로 제공될 수 있다. 산제 담체는 비강 내에서 겔을 형성할 것이다. 산제 조성물은 흡입기의 사용에 의해 산제가 투여될 수 있는 단위 투여량 형태, 예를 들면 캡슐 또는 카트리지 중에, 예를 들면 젤라틴 또는 블리스터 팩으로 제공될 수 있다.

원하는 경우, 제제는 활성 성분의 지속적인 또는 통제된 방출 투여에 적합한 장용 코팅으로 제조될 수 있다. 예를 들면, 본 발명의 화합물은 경피 또는 피하 약물 전달 장치 내에 제제화될 수 있다. 이러한 전달 시스템들은 화합물의 지속적인 방출이 필요한 경우 및 치료 요법에 대한 환자의 순응도가 중요한 경우 유리하다. 경피 전달 시스템에서 화합물은 종종 피부-접착 고체 지지체에 부착된다. 또한, 원하는 화합물을 침투 증가제, 예를 들면 아존(1-도데실아자-사이클로헵탄-2-온)과 조합할 수도 있다. 지속적인 방출 전달 시스템은 수술 또는 주사에 의해 피하층으로 피하 삽입된다. 피하 이식제는 화합물을 지용성 막, 예를 들면 실리콘 고무, 또는 생분해성 중합체, 예를 들면 폴리락트산 중에 캡슐화한다.

약학적 담체, 희석제 및 부형제와 함께 적절한 제제는 문헌[Remington : The Science and Practice of Pharmacy 1995, edited by E. W. Martin, Mack Publishing Company, 19th edition, Easton, Pennsylvania]에 기술되어 있다. 제제화 분야의 통상의 기술자는 본 발명의 조성물을 불안정하게 만들거나 이의 치료 활성을 손상시키지 않으면서 본 명세서에 교시된 제제를 변경하여 특정 투여 경로를 위한 다수의 제제를 제공할 수 있다.

본 발명의 화합물이 물 또는 다른 비히클에서 더 잘 용해되도록 하기 위한 본 발명의 화합물의 변경은, 예를 들면 통상의 기술자에게 잘 알려진 작은 변경(염 형성, 에스터화 등)에 의해 용이하게 달성될 수 있다. 또한 환자에서 최대한 유리한 효과를 위한 본 발명의 화합물의 약물동력학적 성질을 조절하기 위해 특정 화합물의 투여 경로 및 투여 요법을 변경하는 것은 당해 분야의 통상의 기술에 포함된다.

본원에 사용된 용어 "치료적 유효량"은 개체에서 질환의 증상을 경감시키는 데 필요한 양을 의미한다. 투여량은 각각의 구체적인 경우에서 개체의 요건에 따라 조절될 것이다. 상기 투여량은 다수의 인자, 예를 들면 치료될 질환의 중증도, 환자의 연령 및 일반적인 건강 상태, 환자가 처방받은 다른 약제, 투여 경로 및 형태 및 관련 의료진의 선호도 및 경험에 따라 넓은 범위 내에서 달라질 수 있다. 경구 투여의 경우, 약 0.01 내지 약 1000mg/kg(체중)/일의 일일 투여량이 단일요법 및/또는 병용 요법에서 적절할 것이다. 바람직한 투여량은 약 0.1 내지 약 500mg/kg(체중)/일이고, 보다 바람직하게는 0.1 내지 약 100mg/kg(체중)/일이고, 가장 바람직하게는 1.0 내지 약 10mg/kg(체중)/일이다. 따라서, 70kg인 사람에게 투여되는 경우, 투여량 범위는 약 7mg 내지 0.7g/일이 될 것이다. 상기 일일 투여량은 단일 투여 또는 분할된 투여, 전형적으로 1일 1 내지 5회 투여로서 투여될 수 있다. 일반적으로, 치료는 화합물의 최적 투여량보다 적은, 소량의 투여량으로 시작된다. 그 후, 투여량은 개별 환자에 대해 최적 효과가 달성될 때까지 조금씩 증가된다. 본원에 기술된 질환의 치료에 있어서 통상의 기술자는 과도한 실험 없이 개인적 지식, 경험 및 본원의 개시내용에 의거하여 주어진 질환 및 환자에 대한 본 발명의 화합물의 치료적 유효량을 알 수 있을 것이다.

본 발명의 실시양태에서, 활성 화합물 또는 염은 다른 항바이러스제, 예를 들면 리바비린, 뉴클레오시드 HCV 중합효소 억제제, 다른 HCV 비-뉴클레오시드 중합효소 억제제 또는 HCV 프로테아제 억제제와 조합되어 투여될 수 있다. 활성 화합물 또는 이의 유도체 또는 염이 다른 항바이러스제와 조합되어 투여되는 경우, 활성은 모 화합물에 비해 증가될 수 있다. 치료가 병용 치료법인 경우, 이러한 투여는 뉴클레오시드 유도체에 대하여 동시적 또는 순차적일 수 있다. 따라서, 본원에 사용된 "동시 투여"는 동일한 시간 또는 상이한 시간에서의 약제들의 투여를 포함한다. 동일한 시간에서의 2종 이상의 약제의 투여는 2종 이상의 활성 성분을 함유하는 단일 제제에 의해서 또는 단일 활성 성분을 갖는 2종 이상의 투여 형태의 실질적인 동시 투여에 의해서 달성될 수 있다.

본원에서 치료에 대한 언급은 존재하는 증상의 치료뿐만 아니라 예방에까지 확장됨을 이해할 것이다. 나아가, 본원에 사용된 용어 HCV 감염의 "치료"는 HCV 감염과 관련되거나 HCV 감염에 의해 매개된 질환 또는 증상 또는 이들의 임상적 징후의 치료 또는 예방도 포함한다.

본원에 사용된 용어 "치료적 유효량"은 개체에서 질환의 증상을 경감시키는 데 필요한 양을 의미한다. 투여량은 각각의 구체적인 경우에서 개체의 요건에 따라 조절될 것이다. 상기 투여량은 다수의 인자, 예를 들면 치료될 질환의 중증도, 환자의 연령 및 일반적인 건강 상태, 환자가 처방받은 다른 약제, 투여 경로 및 형태 및 관련 의료진의 선호도 및 경험에 따라 넓은 범위 내에서 달라질 수 있다. 경구 투여의 경우, 약 0.01 내지 약 1000mg/kg(체중)/일의 일일 투여량이 단일요법 및/또는 병용 요법에서 적절할 것이다. 바람직한 일일 투여량은 일당 약 0.1 내지 약 500mg/kg(체중)/일이고, 보다 바람직하게는 0.1 내지 약 100mg/kg(체중)/일이고, 가장 바람직하게는 1.0 내지 약 10mg/kg(체중)/일이다. 따라서, 70kg인 사람에게 투여되는 경우, 투여량 범위는 약 7mg 내지 0.7g/일이 될 것이다. 상기 일일 투여량은 단일 투여 또는 분할된 투여, 전형적으로 1일 1 내지 5회 투여로서 투여될 수 있다. 일반적으로, 치료는 화합물의 최적 투여량보다 적은, 소량의 투여량으로 시작된다. 그 후, 투여량은 개별 환자에 대해 최적 효과가 달성될 때까지 조금씩 증가된다. 본원에 기술된 질환의 치료에 있어서 통상의 기술자는 과도한 실험 없이 개인적 지식, 경험 및 본원의 개시내용에 의거하여 주어진 질환 및 환자에 대한 본 발명의 화합물의 치료적 유효량을 알 수 있을 것이다.

본 발명의 화합물 및 선택적으로 하나 이상의 추가적인 항바이러스제의 치료적 유효량은 바이러스량(load)을 감소시키거나 또는 치료요법에 대한 지속된 바이러스 반응을 달성하기에 효과적인 양이다. 바이러스량 이외에도 지속된 반응에 관한 유용한 지표는 간 섬유화, 혈청 트랜스아미나제 수준의 상승 및 간에서의 괴사 염증 활성도를 포함하나 이들에 한정되지 않는다. 예시적이며 한정하는 것으로 의도되지 않은 마커에 대한 하나의 통상적인 예는 표준 임상 분석에 의해 측정되는 혈청 알라닌 트랜스아미나제(ALT)이다. 본 발명의 일부 실시양태에서, 효과적인 치료 요법은 ALT 수준을 약 45IU/mL 혈청 미만으로 감소시키는 것이다.

하기 실시예는 본 발명의 범위 내에 포함되는 화합물들의 제조 및 생물학적 평가를 예시한다. 하기 실시예 및 제조예는 통상의 기술자가 본 발명을 더욱 명확하게 이해하고 실시할 수 있도록 하기 위해 제공된다. 하기 실시예 및 제조예는 본 발명의 범위를 한정하기 위한 것으로 간주되어서는 안 되고, 단지 본 발명을 예시하고 대표하는 것으로서 간주되어야 한다.

본 발명은 C형 간염 바이러스에 감염된 숙주의 치료에 유용한 화합물 및 이를 포함하는 조성물을 제공한다.

본 발명은 C형 간염 바이러스 감염된 숙주의 치료에 유용한 화합물의 제조방법을 제공한다.

도 1a는 HCV 레플리콘 세포에서의 4'-AU(4'-아지도-우라실)의 인산화 프로파일을 도시한다.
도 lb는 인간의 간세포에서의 4'-AU의 인산화 프로파일을 도시한다.
도 2a는 PBMC에서의 4'-AU의 인산화 프로파일을 도시한다.
도 2b 및 도 2c는 각각 1시간 및 120시간 동안의 인큐베이션 이후, PBMC에서의 4'-아지도-시티딘(4'-AC)의 인산화 프로파일을 도시한다.
도 3a 및 3b는 1차 인간 간세포, 골수 세포 및 PBMC에서의 4'-AU의 인산화 프로파일의 비교를 제공한다. 3명의 기증자로부터 유사한 프로파일이 얻어졌다.
도 4는 인간 간세포에서의 4'AU 대 4'AC의 효율을 도시한다.

실시예 1

방법 A: 2',3',5'- 트라이아실 뉴클레오시드 유도체의 제조

아세트산 3,4-다이아세톡시-5-(4-아미노-2-옥소-2H-피리미딘-l-일)-테트라하이드로-푸란-2-일메틸 에스터 (22)

4'-아지도우리딘(0.330g, 1.15mmol), 피리딘(2mL) 및 아세트산 무수물(2mL)을 포함하는 교반된 용액에 DMAP(0.010g, 0.08mmol)를 첨가하였다. 12시간 후, 감압 하에서 반응 혼합물을 건조해질 때까지 증발시켰다. 수득된 잔여물을 다이클로로메탄에 용해시키고 포화 수용성 탄산수소나트륨 용액으로 세척하고, 황산 마그네슘으로 건조시키고, 건조해질 때까지 증발시켜 0.42g(88%)의 2',3',5'-트라이-아세톡시-4'-아지도우리딘(22: R=CH₃, Ⅰ-4)을 수득하였다.

아세트산 무수물을 에틸 클로로-포름산염으로 대체하는 것을 제외하고는 유사한 방법으로 (2R,3S,4R,5R)-2-아지도-5-(2,4-다이옥소-3,4-다이하이드로-2H-피리미딘-1-일)-4-에톡시카르보닐옥시-2-에톡시카르보닐옥시메틸-테트라하이드로-푸란-3-일-카르본산 에스터 에틸 에스터(22 R=OEt)를 제조할 수 있다.

실시예 2

방법 B: 5'-아실 뉴클레오시드 유도체의 제조

프로피온산(2R,3S,4R,5R)-2-아지도-5-(2,4-다이옥소-3,4-다이하이드로-2H-피리미딘-1-일)-3,4-다이하이드록시-테트라하이드로-푸란-2-일메틸 에스터(Ⅰ-6)

자석 교반 막대를 구비한 250mL 둥근 바닥 플라스크를 화합물 20(5.94g), 비닐 프로피오네이트(15mL) 및 THF(150mL)로 채웠다. 임모비드(Immobead) 150에 고정시킨 캔디다 안탈크티카(Candida antarctica) 리파아제 B(0.74 g, Sigma-Aldrich(시그마-알드리치), 아스페르길러스 오리재(Aspergillus oryzae)로부터 재조합됨, 5865U/g)를 첨가하였고 아르곤 대기 하에서 60℃로 가열하였다. 이틀 후에, 10g의 3Å체와 함께 추가적인 비닐 프로피오네이트(6mL) 및 효소(1.11g)를 첨가하였다. 하루가 더 지난 후, 반응물을 여과하여 고정된 효소를 제거하고 진공에서 농축시켰다. EtOAc/헥산 구배(50% 내지 100% EtOAc)로 용리시키는 Si0₂ 크로마토그래피로 조 생성물을 정제하였다. 용매를 제거하고 고진공에서 건조한 후 백색 발포체(4g)를 수득하였다. 이 물질(3.25g)을 3/1 헥산/IPA에 분산시키고 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 생성된 결정성 물질을 여과에 의해 회수하고 75℃의 진공 오븐에서 건조시켜 , m.p. 148 내지 150℃인 화합물 Ⅰ-6을 3.18g 수득하였다.

통상의 기술자는 5'-아실 유도체를 제조하기 위한 다른 일반적인 방법이 산 염화물 및 산 무수물에 의한 4'-C-아지도-2',3'-O-(1-메틸에틸리덴)-우리딘(CASRN 690271-27-3)의 아실화 및 그 후 수성 알코올 중의 HCl과 같은 온화한 산 조건 하에서 이소프로필리덴 보호기를 제거하는 것을 포함한다는 것을 인식할 것이다(2004년 6월 3일 공개되고, 그의 전체가 참고로서 본원에 혼입된 문헌 [J.A. Martin et al., WO2004/046159]).

실시예 3

프로피온산(2R,3S,4R,5R)-2-아지도-5-(2,4-다이옥소-3,4-다이하이드로-2H-피리미딘-1-일)-3,4-다이하이드록시-테트라하이드로-푸란-2-일메틸 에스터(Ⅰ-6)- 대안적인 방법

기포기(bubbler), 교반기, 온도계 및 얼음 냉각 배쓰를 구비한 3-목 둥근-바닥 플라스크를 화합물 24(10g, 30.7mmol, Eq: 1.00, CASRN 139442-01-6), DMAP(376mg, 3.07mmol, Eq: 0.1), DIPEA(7.95g, 10.7mL, 61.5mmol, Eq: 2.0), 아세토나이트릴(47.2g, 60.0mL, Eq: -)로 채웠다. 슬러리를 0.5시간동안 교반하였다. 프로피오닐 클로라이드(3.05g, 2.86mL, 32.3mmol, Eq: 1.05)를 0 내지 10℃에서 10분에 걸쳐 첨가하였다. 반응 혼합물이 균질해졌고, 이를 실온으로 가온시켰다. 반응 혼합물을 H₂0(30mL) 및 EtOAc(50mL)에서 분리시키고, 유기상을 2N HCl(2 x 30mL), NaHC0₃ 포화 수용액(20mL), 염수(10mL)로 세척하고, 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축하여 15.2g의 오일을 수득하였다. 이와 같이 수득된 생성물(5.37g)을 IPA(25 mL), 6N HCl 수용액(12 mL) 및 하이드록실아민 하이드로클로라이드(0.8g)의 용액에 용해시켰다. 반응 혼합물을 실온에서 교반하였다. 반응물을 5시간 동안 교반시키고, H₂0(30mL) 및 DCM(50mL)에서 분리하였다. 유기층을 순차적으로 NaHC0₃ 포화 수용액(30mL), 물(lOmL)로 세척하고, 건조시키고 여과시키고 진공에서 농축하였다. 헵탄(30mL)으로 잔여물을 저작하여(triturate) 발포체로서의 화합물 Ⅰ-6을 1.27g 수득하였다.

실시예 4

방법 C: 2',3'- 다이아실 뉴클레오시드 유도체의 제조

프로피온산(2R,3R,4S,5R)-5-아지도-2-(2,4-다이옥소-3,4-다이하이드로-2H-피리미딘-l-일)-5-하이드록시메틸-4-프로피오닐옥시-테트라하이드로-푸란-3-일 에스터 (Ⅰ-1)

아세트산 무수물을 프로피오닐 클로라이드 및 프로피온산 무수물로 대체하는 것을 제외하고는 실시예 1에 기술된 바와 같이 (2R,3S,4R,5R)-2-아지도-5-(2,4-다이옥소-3,4-다이하이드로-2H-피리미딘-l-일)-3,4-비스-프로피오닐옥시-테트라하이드로-푸란-2-일 메틸 프로피오네이트(28)를 제조하였다.

포스페이트 완충액(27mL, pH = 6.5) 및 염수(0.5mL)를 뜨거운(약 40℃) MTBE(20 mL)중에 용해된 화합물 28(4.42 g)의 용액에 첨가하였다. 리포라아제 효소 용액(5ml)을 첨가하고, 반응 혼합물을 30 내지 35℃에서 약 3시간 동안 교반시켰다. 가수 분해 속도는 꽤 느린 것으로 밝혀졌다. 추가적인 효소 용액(6ml)을 첨가하고, 반응 혼합물을 30 내지 35℃에서 3일 동안 교반하여 약 95% 전환을 달성하였다. EtOAc(30mL)으로 반응 혼합물을 추출하였다. 추출 동안 형성된 에멀젼을 메탄올(약 10 mL)의 첨가에 의해 용해 시켰다. 유기 추출물을 염수와 물로 세척하고 난 후 건조해질 때까지 증발시켜 5.7g 오일(89% 조 수율, 면적 표준화 HPLC에 의해 측정시 약 94% 다이프로피오네이트)을 수득하였다. 점성이 있는 오일을 약 50℃의 진공 오븐에서 추가적으로 건조시켜 발포체를 수득하였다. 조 생성물을 MeOH/DCM 구배로 용리시키는 Si0₂ 크로마토그래피로 추가로 정제하여 정치시켰을때(upon standing) 결정화되는 왁스 고체로서 화합물 I-1을 수득하였다.

실시예 5

(R)-2-아미노-3-메틸-부티르산(2R,3S,4R,5R)-2-아지도-5-(2,4-다이옥소-3,4-다이하이드로-2H-피리미딘-1-일)-3,4-다이하이드록시-테트라하이드로-푸란-2-일메틸 에스터

단계 1 - DMF(20mL) 중에 화합물 24(1.00g, 3.07mmol), Boc-(L)-발린(6.14mmol) 및 EDCI(6.14mmol)를 함유하는 교반된 용액에 DMAP(3.07mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 질소 대기 하의 실온에서 교반하였다. 12시간 후, 반응 혼합물을 감압 하에 건조해질 때까지 증발시켰다. 조 생성물을 EtOAc/헥산 구배로 용리시키는 Si0₂ 크로마토그래피에 의해 정제하여 화합물 24(R= CH(NHBoc)CHMe₂)를 수득하였다.

단계 2 - TFA 및 DCM 또는 HCl 및 다이옥산 또는 메탄올 용액에서 Boc 및 아세토나이드 보호기를 제거할 수 있다.

실시예 6

혈장 약물동력학

5mg/kg 투여량으로 전구약물 II의 단일 경구 투여 후, 4-아미노-1-((2R,3R,4S,5R)-5-아지도-3,4-다이하이드록시-5-하이드록시메틸-테트라하이드로-푸란-2-일)-1H-피리미딘-2-온(II)의 혈장 농도를 결정하는 데에 약물동력학 방법을 사용하였다. 제제는 5mL의 적절한 비히클 중에 0.0176mmol의 전구약물을 함유하는 용액/현탁액이다.

채혈을 용이하게 하기 위해 3마리의 절식하지 않은 수컷 사이노몰구스( Cynomolgus ) 원숭이(6 내지 9kg)들에게 배 또는 팔 카테터를 장착하였다. 시험하는 동안 항상 음식과 물에의 자유롭운 접근이 허용되었다. 시험 당일, 투여전 혈액 샘플(2 내지 3mL)을 각각의 원숭이에서 채취하였다. 원숭이들에게 1mL/kg의 투여 용액을 경구적으로 투여하였다. 하기의 각각의 투여 후 시점에서(0.25, 0.5, 1, 3, 5, 7, 10, 24, 32, 및 48시간), 약 0.5mL의 혈액을 헤파린-코팅된 리튬 튜브에 회수하였다. 혈액을 원심분리하여 혈장을 수득하고 혈장은 분석전까지 냉동시켰다.

각 혈장 샘플 중의 화합물 Ⅰa(R¹-R⁴ = H)의 농도는 LC-MS 분석으로 측정하였다. 표준 곡선은 미처치된(blank) 원숭이 혈장으로 얻었다. AUC는 시간에 대한 함수로서 체순환에서의 약물의 농도를 기술하는 것으로서, 농도 대 시간 그래프의 선아래 면적을 나타낸다(문헌[L. Z. Benet, D. L. Kroetz and L. B. Sheiner Pharmacokinetics in Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, J.G. Hardman & L.E. Limbird Eds., 9^th Edition, McGraw Hill, New York, p 17-23]). C_max는 발견된 최고점의 농도이다.

실시예 7

HCV NS5B RNA 중합효소 활성

뉴클레오시드 모노포스페이트는 문헌[M. Yoshikawa et al., Tetrahedron Lett. 1967 50:5065-5068]에 기술된 일반적인 방법에 따라 제조될 수 있다. 뉴클레오시드 트라이포스페이트의 제조 방법 또한 알려져 있다(문헌[K. Burgess and Dan Cook, Chem . Rev. 2000 100:2047]).

HCV 중합효소(NS5B570n-Con1)의 효소 활성은 방사성 표지된 뉴클레오티드 모노포스페이트를 산 불용성 RNA 생성물 내로 도입하여 측정하였다. 도입되지 않은 방사성 표지된 기질은 여과하여 제거하고, 방사성 표지된 RNA 생성물을 함유하는, 세척되고 건조된 필터 플레이트에 신틸란트(scintillant)를 첨가하였다. 반응 말미에 NS5B570n-Con1에 의해 생성된 RNA 생성물의 양은 신틸란트에 의해 방출된 빛의 양에 정비례하였다.

효소 활성 분석에 사용된 HCV 중합효소는 HCV Con1 균주, 유전자형 1b로부터 유래된 C-말단에서 21개의 아미노산이 결실된 전장 HCV 중합효소(진뱅크(GenBank) 접근 번호 AJ242654)(NS5B570n-Con1)이다. NS5B570n-Con1을 플라스미드 발현 구축물 pET17b의 T7 프로모터의 다운스트림 내로 서브-클로닝하고 단백질 발현을 위해 대장균(E. coli) 균주 BL21(DE3) pLysS 내로 형질전환시켰다. 단일 콜로니를 37℃에서 100㎍/㎖의 엠피실린으로 보충된 LB 배지 중의 10ℓ 배양물을 위한 접종을 시작하는데 사용하였다. 600nM에서 배양물의 광학 밀도가 0.8일 때 0.25mM의 이소프로필-β-D-티오갈락토피라노시드(IPTG)를 첨가하여 단백질 발현을 유도하였다. 30℃에서 16시간 동안 단백질 발현을 유도한 후 원심분리를 통해 세포를 수거하였다. Ni-NTA, SP-세파로스 HP 및 수퍼덱스 75 수지 상의 후속 컬럼 크로마토그래피를 포함하는 3-컬럼 정제 프로토콜을 이용하여 NS5B570n-Con1을 정제하여 균질화하였다.

cIRES RNA 템플레이트(섹션 0004 참조)가 존재할 때 효소 반응물은 20nM cIRES RNA, 20nM NS5B570n-Con1 효소, 0.5μCi의 삼중수소 UTP(퍼킨 엘머 카탈로그 번호 TRK-412; 특이적 활성: 30 내지 60 Ci/mmol), 각각 1μM의 ATP, CTP 및 GTP, 40mM Tris-HCl(pH 8.0), 40mM NaCl, 4mM DTT(다이티오트레이톨), 4mM MgCl₂, DMSO 중에 연속적으로 희석된 5㎕의 화합물, 및 최종 반응물 부피가 50㎕가 되도록 하는 양의 뉴클레아제-무함유 물을 포함하였다. 폴리 A RNA 템플레이트(섹션 0004 참조)가 존재할 때 효소 반응물은 20nM의 예비혼합된 폴리 A:올리고(rU)16(섹션 0004 참조), 20nM NS5B570n-Con1 효소, 1μCi의 삼중수소 UTP(퍼킨 엘머 카탈로그 번호 TRK-412; 특이적 활성: 30 내지 60 Ci/mmol), 40mM Tris-HCl pH 8.0, 40mM NaCl, 4mM DTT(다이티오트레이톨), 4mM MgCl₂, DMSO 중에 연속적으로 희석된 5㎕의 화합물, 및 최종 반응물 부피가 50㎕가 되도록 하는 양의 뉴클레아제-무함유 물을 포함하였다. 반응 혼합물을 96-웰 필터 플레이트(카탈로그 번호 MADVN0B, 밀리포어 코포레이션) 내에서 회합하고 30℃에서 2시간 동안 인큐베이션시켰다. 최종 10%(v/v)의 트라이클로로아세트산을 첨가하여 반응을 중단시키고 4℃에서 40분 동안 인큐베이션시켰다. 반응물을 여과하고, 8 반응 부피의 10%(v/v)의 트라이클로로아세트산 및 4 반응 부피의 70%(v/v)의 에탄올로 세척하고, 공기 중에서 건조하고, 25㎕의 신틸란트(마이크로신트(Microscint) 20, 퍼킨-엘머)를 각각의 반응물 웰에 첨가하였다.

본원에서 기술된 화합물을 분석하기 위해 2개의 RNA 템플레이트를 사용하였다. cIRES RNA 템플레이트는 377개의 뉴클레오티드 길이이며 코어 단백질의 부분적인 상보적 서열(36개의 뉴클레오티드) 및 뒤이어 내부 리보솜 유입점의 상보적 서열의 341개의 뉴클레오티드로 이루어졌다. 폴리 A RNA 템플레이트(GE 아머샴(Amersham) 카탈로그 번호 27-4110)는 3:1의 몰 비(프라이머-템플레이트)의 올리고(rU)16 프라이머에 프리-어닐링된 호모폴리머 RNA였다.

신틸란트로부터 방출된 빛의 양을 탑카운트(Topcount^®) 플레이트 판독기(퍼킨-엘머, 에너지 범위: 낮음, 효율 모드: 중간, 카운트 시간: 1분, 배경 차감: 없음, 누화 감소(Cross talk reduction): 꺼짐) 상에서 분 당 카운트(CPM)로 전환시켰다.

데이터를 엑셀^®(마이크로소프트^®) 및 액티비티베이스(ActivityBase^®)(idbs^®)에서 분석하였다. 효소 부재 하의 반응을 배경 신호를 결정하는데 이용하였고, 이 배경 신호는 효소 반응으로부터 차감되었다. 화합물의 부재 하에 양성 대조군 반응을 수행하였고, 이것으로부터 배경 보정된 활성을 100% 중합효소 활성으로서 설정하였다. 모든 데이터를 양성 대조군의 백분율로서 표시하였다. RNA 합성의 효소-촉진 속도가 50%만큼 감소되는 화합물 농도(IC₅₀)를 하기 수학식 (i)를 데이터에 피팅함으로써 계산하였다:

(i)

상기 식에서, "Y"는 상대적 효소 활성(%)에 상응하고, "%최소"는 포화 화합물 농도에서의 잔여 상대적 활성이고, "%최대"는 상대적 최대 효소 활성이고, "X"는 화합물 농도에 상응하고, "S"는 힐(Hill) 계수(또는 기울기)이다.

4'-AU 트라이포스페이트의 IC₅₀ 실험값은 0.46±0.088μM이고, 이는 4'-AC-트라이포스페이트의 29±0.13μM과 유사하다.

실시예 8

인간 간세포, 말초 혈액 단핵구 세포 ( PBMCs ), 및 골수 세포( BMCs )에서의 4 AU - 트라 이포스페이트의 형성

1차 인간 간세포에서 뉴클레오시드 유사체 4AU의 흡수 및 인산화 분석은 이전에 알려진 바에 따라 수행하였다(문헌[Ma, H. et al . J. Biol . Chem . 2007, 282:29812-29820]). 신선한 인간 간세포를 플레이팅하고 ³H-라벨된 4AU로 상이한 기간 동안 인큐베이션시켰다. 세포 채취 시점에 세포 배양 배지를 흡입시키고, 세포를 차가운 포스페이트-완충된 염수로 1회 세척하였다. 세포를 10mM EDTA를 함유하는 1mL의 미리 냉각시킨 60%(v/v) 메탄올에 회수하고 -20℃에서 24시간 동안 메탄올에서 추출하였다. 이어서, 추출한 샘플을 15분 동안 10,000 x g에서 원심분리하여 세포 조각을 제거하였다. 상청액을 새 튜브로 옮긴 후 실온의 진공농축기(speed vacuum) 내에서 증발시켰다. 세포 추출물의 건조한 펠릿을 H₂0에 용해시켰다. HPLC 분석 전에, 세포 추출물 샘플을 라벨되지 않은 표준 4AU 및 4AU-모노-, 다이- 및 트라이포스페이트 유도체와 혼합하였다.

상이한 시간 동안 ³H-RO 1080713으로 각각 2-4 x 10⁵세포수/ml 또는 5-6 x 10⁵세포수/ml에서 PBMC 또는 BMC 세포 현탁액을 인큐베이션시켜 인간 말초 혈액 단핵구 세포(PBMCs) 및 골수 세포(BMCs)에서의 4AU의 흡수 및 인산화를 수행하였다. ³H-RO 1080713를 함유하는 세포 배양 배지를 24시간 마다 보충하였다. 시간 지점 당 2 x 10⁶개의 살아있는 세포와 동등한 복제 샘플을 실험 말미에 회수하고, 5분 동안의 원심 분리로 펠렛을 제조하여 차가운 PBS로 1회 세척하였다. 최종 세포 펠렛을 즉시 드라이아이스에서 얼리고 추출 전까지 -80℃에 저장하였다. 세포 펠렛의 추출은 1차 간세포 경우와 같이 수행하였다.

4AU의 인산화 유도체를 방사 측정 탐지기(β-RAM, IN/US 시스템스 인코포레이디트)에 결합된 와트만 파티실(Whatman Partisil) 10 SAX(4.6 x 250 mm) 컬럼을 사용하여 이온 교환 HPLC로 분리하였다. 이동상 구배는 4분과 16분 사이에 99% 버퍼 A(H₂0) 및 1% 버퍼 B(0.5M KH₂P0₄ + 0.8M KCl)에서 100% 버퍼 B까지 선형적으로 변하였다. 100% 버퍼 B는 16분에서 26분까지 계속되었고 1분 안에 100% A로 다시 변하였다. 버퍼 A는 32분까지 계속되었다. 32분 동안의 유속은 1ml/분으로 일정하였다. 5:1 비율의 얼티마-플로(Ultima-Flo^TM) AP(퍼킨엘머) 대 컬럼 용리액을 사용하였다.

샘플내 RO 1080713 유도체는 라디오크로마토그램에서 방사성 대사 물질의 보존 시간과 샘플내 혼합된 비-방사성 참고 표준물질의 보존 시간을 비교하여 확인하였다.

도 3은 4'-AC보다 약 10배 높은 4'-AU의 효율적 인산화를 그래프로 도시한다.

실시예 9

여러 경로를 통한 투여를 위한 본 발명의 화합물의 약학 조성물을 본 실시예에서 기술된 바와 같이 제조하였다.

경구 투여를 위한 조성물(A)

성분들을 혼합하고 각각 약 100mg을 함유하도록 캡슐 내로 분배하였다; 1개의 캡슐은 대략적으로 총 1일 투여량일 것이다.

경구 투여를 위한 조성물(B)

성분들을 조합하고 메탄올과 같은 용매를 사용하여 과립화하였다. 이어서, 제제를 건조시키고 적절한 타정기로 정제(약 20mg의 활성 화합물을 함유함)를 형성하였다.

경구 투여를 위한 조성물(C)

성분들을 혼합하여 경구 투여를 위한 현탁액을 형성하였다.

비경구 제제(D)

활성 성분을 주사용수의 일부에 용해시켰다. 이어서, 충분한 양의 염화 나트륨을 교반시키면서 첨가하여 등장성 용액을 제조하였다. 나머지 주사용수로 상기 용액의 중량을 채우고, 상기 용액을 0.2 미크론 막 필터를 통해 여과시키고 멸균 조건 하에 포장하였다.

구체적인 형태 또는 개시된 기능을 수행하기 위한 수단 또는 개시된 결과를 달성하기 위한 방법 또는 공정의 관점에서 적절하다고 기술되어 있는, 상기 설명 또는 하기 청구범위에 개시된 특징들은 본 발명을 다양한 형태로 실현하는 데 있어서 단독으로 사용될 수 있거나 이러한 특징들의 임의의 조합 형태로 사용될 수 있다.

전술된 발명은 명료함 및 이해를 목적으로 설명 및 예시를 통해 다소 상세하게 기술되어 있다. 첨부된 특허청구범위 내에서 변화 및 변경을 수행할 수 있음이 통상의 기술자에게 자명할 것이다. 따라서, 상기 설명은 설명하기 위한 것이지 한정하기 위한 것이 아님을 이해되어야 한다. 그러므로, 본 발명의 범위는 상기 설명을 참조하면서 결정되지 않고 대신 하기 첨부된 청구범위 및 이 청구범위의 등가물의 전체 범위를 참조하여 결정되어야 한다.

본원에서 언급한 특허, 공개된 특허출원 및 과학 문헌은 통상의 기술자의 지식을 증명하기 위해, 각각이 참고로서 구체적으로 및 개별적으로 본원에 혼입된 것과 마찬가지로 그들 전체가 참고로서 본원에 혼입된다. 본원에서 인용된 임의의 참고문헌과 본 명세서의 구체적인 교시 사이의 임의의 모순은 본 명세서의 교시를 기준으로 해결되어야 할 것이다. 마찬가지로, 용어 또는 문구에 대해 당해 분야에서 이해되는 정의와 본 명세서에 구체적으로 교시된 용어 또는 문구의 정의 사이의 임의의 모순은 본 명세서의 교시를 기준으로 해결되어야 할 것이다.

Claims

화학식 I의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
화학식 I

상기 식에서,
R¹ 및 R²는 (i) 독립적으로 수소, C₁ _-6 알킬카르보닐, C₁ _-6 알콕시카르보닐, 및 C₁ _-6 아미노알킬카르보닐로 이루어진 군으로부터 선택되거나 ( ii ) R¹ 및 R²가 함께 C(=0)를 형성하고;
R³은 수소, C₁ _-6 알킬카르보닐, C₁ _-6 알콕시카르보닐 또는 C₁ _-6 아미노알킬카르보닐이나,
단 , R¹, R² 및 R³ 중 하나 이상은 수소 이외의 것이다.
제 1 항에 있어서,
R¹, R² 및 R³이 C₁ _-6 알킬카르보닐인 화합물.
제 10 항에 있어서,
R¹및 R²가 C_1-6 알킬카르보닐이고 R³이 수소인 화합물.
제 10 항에 있어서,
R¹ 및 R²가 수소이고 R³이 C₁ _-6 알킬카르보닐, 또는 C₁ _-6 아미노알킬카르보닐인 화합물.
제 1 항에 있어서,
프로피온산(2R,3R,4S,5R)-5-아지도-2-(2,4-다이옥소-3,4-다이하이드로-2H-피리미딘-l-일)-5-하이드록시메틸-4-프로피오닐옥시-테트라하이드로-푸란-3-일 에스터;
이소부티르산(2R,3R,4S,5R)-5-아지도-2-(2,4-다이옥소-3,4-다이하이드로-2H-피리미딘-1-일)-4-이소부티릴옥시-5-이소부티릴옥시메틸-테트라하이드로-푸란-3-일 에스터;
프로피온산(2R,3S,4R,5R)-2-아지도-5-(2,4-다이옥소-3,4-다이하이드로-2H-피리미딘-1-일)-3,4-비스-프로피오닐옥시-테트라하이드로-푸란-2-일메틸 에스터;
아세트산(2R,3R,4S,5R)-4-아세톡시-5-아세톡시메틸-5-아지도-2-(2,4-다이옥소-3,4-다이하이드로-2H-피리미딘-1-일)-테트라하이드로-푸란-3-일 에스터;
펜탄산(2R,3S,4R,5R)-2-아지도-5-(2,4-다이옥소-3,4-다이하이드로-2H-피리미딘-1-일)-3,4-비스-펜타노일옥시-테트라하이드로-푸란-2-일메틸 에스터; 및,
프로피온산(2R,3S,4R,5R)-2-아지도-5-(2,4-다이옥소-3,4-다이하이드로-2H-피리미딘-1-일)-3,4-다이하이드록시-테트라하이드로-푸란-2-일메틸 에스터
로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물.
치료적 유효량의 제 1 항의 화합물로 치료가 필요한 환자를 치료하는 것을 포함하는 C형 간염 바이러스(HCV) 감염을 치료하는 방법.
제 6 항에 있어서
R¹, R² 및 R³이 C₁ _-6 알킬카르보닐인 방법.
제 6 항에 있어서,
R¹ 및 R²가 C₁ _-6 알킬카르보닐이고 R³이 수소인 방법.
제 6 항에 있어서,
R¹ 및 R²가 수소이고 R³이 C₁ _-6 알킬카르보닐, 또는 C₁ _-6 아미노알킬카르보닐인 방법.
제 7 항에 있어서,
하나 이상의 면역 시스템 조절제 및/또는 HCV의 복제를 억제하는 하나 이상의 항바이러스제를 투여하는 것을 추가적으로 포함하는 방법.
제 10 항에 있어서,
상기 면역 시스템 조절제가 인터페론, 인터루킨, 종양 괴사 인자 및 집락 자극 인자로 이루어진 군으로부터 선택되는 방법.
제 11 항에 있어서,
상기 면역 시스템 조절제가 인터페론 또는 화학적으로 유도된 인터페론인 방법.
제 10 항에 있어서,
하나 이상의 다른 항바이러스제를 투여하는 것을 추가적으로 포함하는 방법.
제 13 항에 있어서,
상기 항바이러스 화합물이 HCV 프로테아제 억제제, 다른 뉴클레오시드 HCV 중합효소 억제제, 비-뉴클레오시드 HCV 중합효소 억제제, HCV 헬리카아제 억제제, HCV 프리마아제 억제제 및 HCV 융합 억제제로 이루어진 군으로부터 선택되는 방법.
R¹, R² 및 R³이 제 1 항에서 정의된 바와 같은 화학식 Ⅰ의 화합물의 HCV 감염 치료를 위한 용도.
제 15 항에 있어서,
하나 이상의 면역 시스템 조절제 및/또는 HCV 복제를 억제하는 하나 이상의 항바이러스제와 조합된 용도.
R¹, R² 및 R³이 제 1 항에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물의, HCV 감염을 치료하는 약제의 제조를 위한 용도.
하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체, 희석제 또는 부형제와 혼합된 제 1 항의 화합물의 치료적 유효량을 포함하는 약학 조성물.