KR20120091872A - 전도성 입자를 포함하는 바이오 칩 및 이를 포함하는 표적 항원 검출 장치 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 전도성 입자를 포함하는 바이오 칩 및 이를 포함하는 표적 항원 검출 장치에 관한 것이다. 일 구체예에 따른 바이오 칩 및 표적 항원 검출 장치에 의하면, 표적 항원의 검출을 효율적으로 수행할 수 있다.
Description
본 발명은 전도성 입자를 포함하는 바이오 칩 및 이를 포함하는 표적 항원 검출 장치에 관한 것이다.
현장 검사(point-of-care test)는 소량의 환자의 시료(혈액이나 체액)을 바탕으로 질병과 관련된 정보를 얻는 것이다. 이중에서 낮은 감지 한계를 얻기 위한 시도로 감지부 형성에 관한 다양한 구조적 접근이 있었다. 특히, 중합체 매트릭스 또는 폴리스티렌 나노입자, 실리카 나노입자, 마그네틱 나노입자를 이용한 3차원 감지부를 형성하여 부피 대 표면적의 비를 증가시키는 시도가 있다. 이러한 시도는 감지부의 부피 대 표면적의 비의 증가로 인하여 항원-항체간의 반응을 증대시켜 높은 신호를 검출하기 위함이다.
그러나 상기의 3차원 구조를 전기화학적 분석에 적용하는데 있어서, 구조적인 변형 자체로 인하여 시료 또는 시료로부터 발생한 전자가 전극 계면까지 흐르는 확산 속도를 저해한다는 문제점이 있기 때문에, 최종적으로 측정되는 신호는 오히려 감쇄된 형태로 나타날 수 있다.
기존의 중합체 매트릭스를 이용한 감지부는, 항원-항체반응을 통해 감지부에 항원과 효소가 결합된 항체가 포획된 후 주입된 분석 시료를 산화시켜 전자를 형성하고, 이때 생성된 전자는 중합체 매트릭스를 통한 경로를 따라 금속 전극으로 흘러들어 최종적인 전류값을 측정하게 된다. 이때 중합체 매트릭스의 종류와 두께에 따라 전자의 확산 속도가 제한된다. 또한, 형성된 중합체 매트릭스 자체가 저항으로 작용하여 IR 저하 현상이 발생하여 필요 이상의 전압을 요구로 하고 이에 따라 전력의 손실이 발생할 수 있다.
본 발명의 일 구체예는 고분자 물질이 연결된 전도성 입자가 금속 전극 기판의 표면에 배치된 바이오 칩을 제공한다.
본 발명의 다른 구체예는 상기 바이오 칩을 포함하는 표적 항원 검출용 장치를 제공한다.
본 발명의 일 양상은 고분자 물질이 연결된 전도성 입자가 금속 전극 기판의 표면에 배치된 것으로서, 상기 금속 전극 기판은 전류 검출부와 연결된 것인 바이오 칩을 제공한다.
본 발명은 현장 검사(point-of-care test)의 용도로 사용되는 바이오 칩에 관한 것으로, 특히, 분석하고자 하는 물질로부터 검출되는 전기적 신호를 더욱 효율적으로 획득할 수 있다.
상기 고분자 물질은 분석을 원하는 물질이면 어떠한 것이라도 가능하나, 일 구체예에 따르면, 상기 고분자 물질은 예를 들어, 항체, 항원, 핵산, 탄수화물 및 세포로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 가장 바람직하게는 항체일 수 있다.
일 구체예에 따르면, 상기 고분자 물질은 전도성 입자에 연결되어 있을 수 있다. 상기 전도성 입자는 상기 금속 전극 기판에 전자를 전달하기 위한 매개체로 사용되는 것으로, 상기 전도성 입자는 예를 들어, 화합물 반도체, 금속 산화막 반도체, 실리콘 반도체, 풀러렌 유도체, 탄소 나노튜브 유도체, 그라펜 유도체, 펜타센 유도체 및 티오펜 유도체로 이루어진 군으로부터 선택되는 것일 수 있으나, 이에 한정하지는 않는다.
일 구체예에 따르면, 상기 고분자 물질이 연결된 전도성 입자는 금속 전극 기판의 표면에 배치될 수 있다. 또한, 상기 금속 전극 기판은 전류 검출부와 연결되어 있어, 금속 전극 기판에 전달되는 전자의 흐름을 전류량으로서 검출할 수 있다. 상기 금속 전극 기판에 사용될 수 있는 금속은 예를 들어, 금, 백금, 은, 구리 및 인듐 틴 옥시드로 이루어진 군으로부터 선택되는 것일 수 있으나, 이에 한정하지는 않는다.
본 발명의 다른 양상은 검출 가능한 표지가 결합되어 있는 것으로, 표적 항원에 특이적으로 결합하는 제1 항체가 표면에 고정되어 있는 기판으로 이루어진 반응부; 및 상기 반응부와 유체 소통 가능하게 연결되어 있으며, 표적 항원에 특이적으로 결합하는 제2 항체가 연결된 전도성 입자가 금속 전극 기판의 표면에 배치된 것으로서, 상기 금속 전극 기판은 전류 검출부와 연결된 것인 바이오 칩을 포함하는 표적 항원 검출용 장치를 제공한다.
일 구체예에 따르면, 상기 표적 항원 검출용 장치는 검출 가능한 표지가 결합되어 있는 것으로, 표적 항원에 특이적으로 결합하는 제1 항체가 표면에 고정되어 있는 기판으로 이루어진 반응부를 포함할 수 있다. 또한, 본 발명의 장치는 상기 설명한 일 구체예의 바이오 칩을 포함한 것으로, 특히, 상기 고분자 물질로서 표적 항원에 특이적으로 결합하는 제2 항체를 사용한 것이다.
본 명세서에서, 용어 "검출 가능한 표지(detectable label)"는 표지가 없는 동일한 종류의 분자들 중에서 표지를 포함하는 분자의 특이적으로 검출하도록 하는 원자 또는 분자를 의미하는 것으로, 상기 제1 항체와 결합하는 것일 수 있다. 상기 검출 가능한 표지는 검출 과정에서 전자를 내보낼 수 있는 물질이면 어떠한 것이든 가능하며, 예를 들어, 색깔 비드(colored bead), 항원 결정체, 효소, 혼성화 가능한 핵산, 발색 물질, 형광 물질, 인광 물질, 전기적으로 검출 가능한 분자, 변경된 형광-분극 또는 변경된 빛-확산을 제공하는 분자 또는 양자점 등을 포함할 수 있으나, 이에 한정하지는 않는다. 또한, 상기 표지는 P32 및 S35와 같은 방사선동위원소, 화학발광 (chemiluminescent) 화합물, 표지된 결합 단백질, 중금속 원자 및 다이와 같은 분광학적 마커, 및 자기 표지물을 포함할 수 있다. 상기 다이는 예를 들어, 퀴놀린 다이, 트리아릴메탄 다이, 프탈레인, 아조 다이 및 시아닌 다이를 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명은 면역 분석 방법, 예를 들어, 캡쳐-ELISA 방식에 있어서, 표적 항원의 검출을 위해 사용될 수 있다. 캡처-ELISA는 일반적으로, (i) 포획항체(capturing antibody)를 고체 기질의 표면에 코팅하는 단계; (ⅱ) 포획항체와 시료(예를 들어, 표적이 되는 항원을 포함하는 시료)를 반응시키는 단계; (ⅲ) 상기 단계 (ⅱ)의 결과물을 신호를 발생시키는 검출 가능한 표지가 결합되어 있고, 표적 항원에 특이적으로 반응하는 검출 항체(detecting antibody)와 반응시키는 단계; 및 (ⅳ) 상기 검출 가능한 표지로부터 발생하는 신호를 측정하는 단계를 거치게 된다. 특히, 본 발명의 경우, 검출 가능한 표지로부터 발생하는 신호는 일 구체예에 따른 바이오 칩의 금속 전극 기판에 전달되는 전자의 흐름에 따라 전류 검출부에서 전류량으로서 측정할 수 있으며, 상기 바이오 칩에 포함되어 있는 전도성 입자는 상기 전자의 흐름을 촉진시키는 역할을 할 수 있다. 본 발명의 장치에 사용될 수 있는 전도성 입자의 예는 상기 설명한 바와 같다.
본 발명의 일 구체예에 따른 바이오 칩 및 표적 항원 검출 장치에 의하면, 표적 항원의 검출을 효율적으로 수행할 수 있다.
도 1은 일 구체예에 따른 바이오 칩의 모식도이다.
도 2는 일 구체예에 따른 바이오 칩을 포함하는 표적 항원 검출용 장치를 이용하여 표적 항원을 검출하는 방법을 나타낸 것이다.
도 2는 일 구체예에 따른 바이오 칩을 포함하는 표적 항원 검출용 장치를 이용하여 표적 항원을 검출하는 방법을 나타낸 것이다.
이하 하나 이상의 구체예를 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 하나 이상의 구체예를 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
도 1은 본 발명의 일 구체예에 따른 바이오 칩의 모식도이고, 도 2는 일 구체예에 따른 바이오 칩을 포함하는 표적 항원 검출용 장치를 이용하여 표적 항원을 검출하는 방법을 나타낸 도면이다.
이하 도 1 및 도 2를 참조하여 일 구체예에 따른 바이오 칩을 포함하는 표적 항원 검출용 장치를 이용하여 표적 항원을 검출하는 방법의 일 구체예를 설명하도록 한다.
도 1은 본 발명의 일 구체예에 따른 바이오 칩의 모식도를 나타낸 것으로, 제1 항체(100)가 결합되어 있는 전도성 입자(110)가 표면에 배치되어 있는 금속 전극 기판(120)이 도시되어 있다. 상기 금속 전극 기판(120)은 기판에 흐르는 전류를 측정하기 위한 전류 검출부(150)가 연결되어 있다. 상기 제1 항체(100)는 실험 목적에 따라 다른 고분자 물질, 예를 들어, 항원, 핵산, 당, 세포 등이 될 수 있다.
일 구체예는 전자(electron)의 전달체로 이용하는 전도성 입자(110), 예를 들어, n-형 반도체를 사용하여, 표적 항원의 검출 과정에서 발생되는 전자가 금속 전극 기판(120)까지 전달되는 확산 속도를 개선하여 최종적으로 측정되는 신호를 증폭시키는 바이오 칩을 나타낸다. 또한, 상기 바이오 칩을 3차원 구조로 형성하여 부피 대 표면적의 비를 증가시켜 표적 항원(130)과 제1 항체(100)의 반응을 증대 시킬 수 있다. 특히, n-형 산화물 반도체로 사용되는 티타늄 옥시드 나노 입자는 전자 이동성이 큰 것으로 알려져 있으며, 아미노산으로 구성된 항체의 카르복실화된 작용기와 화학적 결합이 용이하는 장점이 있다. 도 1에서와 같이, 항원-항체 반응을 통해 상기 바이오 칩에 표적 항원(130)과 검출 가능한 표지, 예를 들어 효소가 연결된 제2 항체(140)가 포획된 후, 주입된 생물학적 시료를 산화시키면 전자를 생성하게 된다. 생성된 전자는 전도성 입자(110), 예를 들어, n-형 반도체를 따르는 경로를 통해 금속 전극 기판(120)으로 이동하게 되고, 전류 검출부(150)를 통해 최종적인 전류값을 측정할 수 있게 된다.
일 구체예에 따른 바이오 칩을 포함하는 표적 항원 검출용 장치를 이용하여 표적 항원을 검출하는 방법은 도 2와 같은 과정을 따를 수 있다.
검출하고자 하는 표적 항원을 포함하는 생물학적 시료, 예를 들어, 혈액 또는 체액을 주입하면 일 구체예에 따른 표적 항원 검출용 장치의 반응부(160)에서 미리 도포된 효소 결합된 제2 항체(140)과 항원-항체 반응을 통하여 복합체를 형성한다. 그 후, 상기 복합체는 3차원 구조로 제1 항체(100)가 결합된 전도성 입자(110)가 표면에 배치되어 있는 감지부(170)에서 두번째 항원-항체 반응을 하게 되고, 이 때, 금속 전극 기판(120)의 표면에 3차원적으로 배치된 전도성 입자(110) 상의 제1 항체(100)에 의해 포획된다. 여기에 세척액을 주입하여 포획되지 않은 여분의 제2 항체(140)를 제거하고, 감지부(170)에서는 상기 제2 항체에 연결된 효소의 기질을 첨가하여 효소 반응을 유도한다. 이때 도 1에서 본 바와 같이, 생성된 전자는 전도성이 높은 전도성 입자(110), 예를 들어, n-형 반도체를 통해 금속 전극 기판(120), 예를 들어, 금 전극으로 확산되어 전달되고, 상기 금속 전극 기판(120)에 연결된 전류 검출부(150)를 통하여 생성된 전자를 전류 값으로 정량할 수 있다.
100: 제1 항체
110: 전도성 입자
120: 금속 전극 기판
130: 표적 항원
140: 제2 항체
150: 전류 검출부
160: 반응부
170: 감지부
110: 전도성 입자
120: 금속 전극 기판
130: 표적 항원
140: 제2 항체
150: 전류 검출부
160: 반응부
170: 감지부
Claims (6)
- 고분자 물질이 연결된 전도성 입자가 금속 전극 기판의 표면에 배치된 것으로서, 상기 금속 전극 기판은 전류 검출부와 연결된 것인 바이오 칩.
- 제1항에 있어서, 상기 고분자 물질은 항체, 항원, 핵산, 탄수화물 및 세포로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 바이오 칩.
- 제1항에 있어서, 상기 금속은 금, 백금, 은, 구리 및 인듐 틴 옥시드로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 바이오 칩.
- 제1항에 있어서, 상기 전도성 입자는 화합물 반도체, 금속 산화막 반도체, 실리콘 반도체, 풀러렌 유도체, 탄소 나노튜브 유도체, 그라펜 유도체, 펜타센 유도체 및 티오펜 유도체로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 바이오 칩.
- 검출 가능한 표지가 결합되어 있는 것으로, 표적 항원에 특이적으로 결합하는 제1 항체가 표면에 고정되어 있는 기판으로 이루어진 반응부; 및
상기 반응부와 유체 소통 가능하게 연결되어 있으며, 표적 항원에 특이적으로 결합하는 제2 항체가 연결된 전도성 입자가 금속 전극 기판의 표면에 배치된 것으로서, 상기 금속 전극 기판은 전류 검출부와 연결된 것인 바이오 칩을 포함하는 표적 항원 검출용 장치.
- 제1항에 있어서, 상기 전도성 입자는 화합물 반도체, 금속 산화막 반도체, 실리콘 반도체, 풀러렌 유도체, 탄소 나노튜브 유도체, 그라펜 유도체, 펜타센 유도체 및 티오펜 유도체로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 표적 항원 검출용 장치.
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