KR20120083359A

KR20120083359A - ＥｐＣＡＭｘＣＤ３ 이중특이성 항체를 투여하기 위한 투약 용법

Info

Publication number: KR20120083359A
Application number: KR1020127007677A
Authority: KR
Inventors: 저할드 주그메이어; 피터 쿠퍼; 도미니크 뤼팅거; 사비네 카우비즈취
Original assignee: 마이크로메트 에이지
Priority date: 2009-09-18
Filing date: 2010-09-20
Publication date: 2012-07-25
Also published as: JP2013505223A; AU2010297258A1; MX2012003175A; SG179027A1; WO2011033105A1; CN102711825A; RU2012115480A; CA2774732A1; SG10201405434VA; IN2012DN03172A; BR112012008345A2; US20120244161A1; IL218637A0; NZ598601A; EP2477653A1

Abstract

본 발명은, (a) 제1 용량의 EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 제1 기간 동안 연속 투여하는 단계, 및 이어서 (b) 제2 용량의 상기 항체를 제2 기간 동안 연속 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 상기 제2 용량은 상기 제1 용량을 초과하는, EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 사람 환자에게 투여하는 방법(투약 용법)에 관한 것이다. 본 발명의 방법(및 또한 본 발명의 투약 용법)은 또한 사람 환자에서의 EpCAM 양성 상피 암 세포를 치료하거나, EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 사람 환자에서의 연속 투여함으로써 매개된 의학적 증상을 완화 및/또는 예방하기에 적합하다. 본 발명은 또한 상기 특허청구범위 청구항 중의 어느 한 항에 정의된 방법에 사용되는 약제학적 조성물을 제조하기 위한 EpCAMxCD3 이중특이성 항체의 용도에 관한 것이다. 본 발명의 방법/투약 용법에 정의된 제1 용량 및 제2 용량을 포함하는 약제학적 팩키지 또는 키트가 또한 개시되어 있다.

Description

ＥｐＣＡＭｘＣＤ３ 이중특이성 항체를 투여하기 위한 투약 용법{Dosage regimen for administering an EpCAMxCD3 bispecific antibody}

본 발명은, (a) 제1 용량의 EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 제1 기간 동안 연속 투여하는 단계, 및 이어서 (b) 제2 용량의 상기 항체를 제2 기간 동안 연속 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 상기 제2 용량은 상기 제1 용량을 초과하는, EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 사람 환자에게 투여하는 방법(투약 용법)에 관한 것이다. 본 발명의 방법(및 또한 본 발명의 투약 용법)은 또한 사람 환자에서의 EpCAM 양성 상피 암 세포를 치료하거나, EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 사람 환자에게 연속 투여함으로써 매개된 의학적 증상을 완화 및/또는 예방하기에 적합하다. 본 발명은 또한 상기 특허청구범위 청구항 중의 어느 한 항에 정의된 방법에서 사용되는 약제학적 조성물을 제조하기 위한 EpCAMxCD3 이중특이성 항체의 용도에 관한 것이다. 본 발명의 방법/투약 용법에 정의된 제1 용량 및 제2 용량을 포함하는 약제학적 팩키지 또는 키트가 또한 개시되어 있다.

항체 기반 암 치료는 활성적으로 되도록 암 세포의 표면에 단단하게 결합된 표적 항원을 필요로 한다. 표면 표적에 결합함으로써, 항체는 치사 시그날을 세포 암에 전달할 수 있다. 이상적인 치료 시나리오에 있어서, 표적 항원은 모든 암 세포 상에서는 풍부하게 존재하고 접근가능하며, 정상 세포 상에서는 부재하거나, 차단되거나 훨씬 덜 풍부하다. 이러한 상태는 소정량의 항체 기반 치료제가 암 세포를 효과적으로 타격하지만 정상 세포를 타격하지 않는 치료 윈도우에 대한 기초를 제공한다.

EpCAM은 결장, 유방, 폐, 위장, 방광, 전립선, 난소 및 췌장 기원의 암을 포함하는 대부분의 사람 선암 상에서 발견된다. 예를 들면, 결장암에서, 환자의 98% 이상은 원발성 종양의 암 세포 상에서 EpCAM의 강력한 및 빈번한 발현을 나타낸다[참조: P. Went et al., Br. J. Cancer 94: 128 (2006)]. EpCAM은 이들이 탈분화하고 전이 단계로 진행할 때에 암 세포로부터 소실되지 않는다. 유방, 난소 및 특정한 평편상피암 등의 일부 암들에서, EpCAM 발현은 정상 상피 조직과 비교하여 새롭거나 고도로 상향조절된다. EpCAM 발현이 항-센스 또는 siRNA에 의해 암 세포에서 녹 다운되는 경우, 세포는 반고형 한천(soft agar)에서 증식, 이동 및 침략적 성장을 중단한다. 반대로, 당해 세포에서 EpCAM의 이소성 발현은 이들 특성을 제공하고, 이들의 혈청 성장 인자-독립적 성장을 유도한다[참조: M. Munz et al., Oncogene 23: 5748 (2004)]. EpCAM은 현재 암 줄기세포 마커의 목록에 부가되어 있다[참조: J.E. Visvader and G.J. Lindeman, Nat. Rev. Cancer 8: 755(2008)]. 암 줄기세포는 종양을 일정하게 재거주시키고 화학 내성 및 종양 재발에 관여하는 것으로 생각된다. EpCAM 발현은 유방, 결장, 전립선, 간 및 췌장 종양으로부터 유도된 암 간세포상에서 발견되었다.

EpCAM은, 상이한 임상 개발 단계에 있는, 몇몇 항체 기반 치료적 접근법에 의해 현재 표적화되고 있다. 하기 이상 반응(adverse events)이 이들 EpCAM 항체를 사용한 환자의 치료시에 보고되었다.

카투막소맵 ( Catumatomab ):

발열을 유발하는 전신 사이토킨 방출, 심박급속증

림프구의 감소

저용량의 덱사메타손과 함께 고용량에서 등급 4까지 트랜스아미나제에 의한 간 파라미터의 증가

VB4 -845

미열, 오심, 구토

트랜스아미나제의 증가

MT110은 상피 기원의 대부분의 고형 충실성 암 상에서 발현된 상피 세포 부착 분자(EpCAM), 및 T 세포 상의 CD3에 결합하는 이중특이성 단일쇄 항체 작제물(BiTE)이다. MT110은 사람 결장암(CRC) 이종이식편을 포함하는 다양한 임상전 모델에서 고도의 항종양 활성을 나타냈다. BiTE 항체에 대한 개념의 임상적 증거는 B 세포 임파종을 갖는 환자(pts)에서 블리나투모맵(blinatumomab)(CD19xCD3 BiTE)으로 증명되었다[참조: Bargou R et al. (2008) Science 321:9741]. MT110은 (전이성) 위장암 및 폐암 환자로 용량 증가 상 1 시험하에 현재 연구되고 있다. 항-EpCAM x 항-CD3 이중특이성 단일쇄 항체의 안전성 및 내성을 평가하기 위해, 당해 화합물을 장기간 연속 주입에 의해 투여했다. 어떠한 환자도 주입 개시 후에 열병, 냉한 또는 기타 주입 반응을 나타내지 않았다. 전신 사이토킨(cytokine) 수준도 실질적으로 발견할 수 없었다. 그러나, 간 효소의 일시적 상승이 EpCAMxCD3 이중특이성 단일쇄 항체의 주입 개시로 관찰되었다.

명백하게는, 치료된 환자의 간 효소 등의 간 파라미터에 영향을 미치지 않는 항-EpCAM-항체 기반 요법을 설계하는 것은 곤란하다.

따라서, 본 발명의 근본적인 기술적 과제는 상기 과제를 해결하는 방법을 제공하는 것이다.

본 발명은 이러한 요구를 해결하고, 따라서 EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 사람 환자에게 투여하는 투약 용법 뿐만 아니라 방법에 관한 양태를 제공한다.

이들 실시양태는 본 출원에서 특징으로하여 설명되며, 특허청구범위에 반영된다.

본 출원에 사용된 바와 같이, 단수 형태 "a", "an" 및 "the"는 문맥이 달리 명시하지 않는 한 복수의 참조를 포함한다. 따라서, "시약"에 대한 참조는 하나 이상의 이러한 상이한 시약을 포함하고, "방법"에 대한 참조는 동등한 단계에 대한 참조를 포함하며, 당해 기술분야의 통상의 지식을 가진 자에게 공지된 방법은 본 출원에 기재된 방법을 위해 변형 또는 치환될 수 있다.

본 명세서에 인용된 모든 공개문헌 및 특허는 이들의 전체가 참고로서 인용된다. 참고로 인용된 자료가 모순되거나 본 명세서와 일치하지 않는 정도까지, 본 명세서는 이러한 임의의 자료를 대체할 것이다. 달리 명시하지 않는 한, 일련의 요소에 선행하는 용어 "적어도"는 일련의 모든 요소를 지칭하는 것으로 이해되어야 한다. 당해 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 단지 통상의 실험만을 사용하여 본 출원에 기재된 본 발명의 구체적 실시양태에 대한 다수의 등가물을 인지하거나 확인할 수 있을 것이다. 이러한 등가물은 본 발명에 포함되는 것으로 의도된다.

하기의 본 명세서 및 특허청구범위 전체에 걸쳐, 달리 명시되지 않는 한, 용어 "들을 포함하다" 및 이의 변형태 "를 포함하다" 및 "포함하는"는 언급된 정수 또는 단계 또는 정수 또는 단계의 그룹의 포함을 의미하고 임의의 기타 정수 또는 단계 또는 정수 또는 단계의 그룹의 배제를 의미하는 것이 아닌 것으로 이해될 것이다.

몇몇 문헌은 본 발명의 본문 전체에 걸쳐 인용된다. 본 출원에 인용된 문헌(모든 특허, 특허 출원, 과학 공개문헌, 제조업자의 명세서, 지침서 등을 포함) 각각은, 상기 또는 하기에서, 이의 전체가 참고로 본 출원에 포함된다. 본 출원의 어떠한 것도, 본 발명이 종래 발명에 비추어 이러한 개시를 선행하는 자격이 없음을 인정하는 것으로서 간주되지 않아야 한다.

이상 반응, 특히 EpCAM 특이적 항체로 관찰된 ALT, AST, AP 등(용어 "AP, ALT 및 AST 등"은 본 출원의 다른 부분에서 설명된다)과 같은 간 파라미터의 놀랄만한 증가에 비추어, 본 출원에 제공된 투약 용법에 따라 투여하는 경우, EpCAMxCD3 이중특이성 단일쇄 항체는 환자에게 내성이 있다는 발견은 명백하게 주목할 만하다.

구체적으로, 본 발명자들은, EpCAMxCD3 이중특이성 항체와 같은 EpCAM 특이적 항체로 치료한 환자에게 추가로 부담이 될 수 있기 때문에 바람직하지 않은 정도까지 간 효소의 혈청 수준이 현저히 증가함을 관찰했다. 그러나, 놀랍게도, 본 출원에 개시된 방법/투약 용법에 따라 EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 투여하는 경우, 트랜스아미나제의 증가는 당해 항체에 재노출시에 발생하지 않았다. 요컨대, 본 발명자들은 EpCAMxCD3 이중특이성 항체로 치료하기 전에 EpCAMxCD3 이중특이성 항체에 대한 환자의 "적응"이 바람직하지 않은 이상 반응(특히 간 파라미터의 바람직하지 않은 증가)을 피하는데 유리함을 발견했다.

따라서, 본 발명은 첫번째 양태에서

(a) 제1 용량의 EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 제1 기간 동안 연속 투여하는 단계, 및 이어서 (b) 제2 용량의 상기 항체를 제2 기간 동안 연속 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 상기 제2 용량은 상기 제1 용량을 초과하는,

EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 사람 환자에게 투여하는 방법(투약 용법)에 관한 것이다.

본 발명의 맥락에서 사람 환자는 EpCAM 양성 상피 암 세포를 포함하거나 포함하는 것으로 추정되는 것이 바람직하다.

본 발명의 맥락에서 용어 "방법"은 본 발명의 방법에 사용되는 "투약 용법"을 포함하는 것으로 이해될 것이다.

본 발명의 맥락에서, "EpCAMxCD3 이중특이성 항체의 투여" 또는 "EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 투여하는" 또는 이의 임의의 기타 문법적 형태는 EpCAMxCD3 항체가 약제학적으로 허용되는 담체를 임의로 포함하는 약제학적 조성물 형태로 존재함을 의미한다. 따라서, EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 포함하는 약제학적 조성물은 사람 환자에게 투여되는 것으로 이해되어야 한다.

본 발명의 맥락에서, 용어 "환자"는 EpCAM 양성 상피 암 세포의 치료를 필요로 하는 대상 또는 개체를 의미한다. 환자는 포유동물, 특히 사람이다.

모든 문법적 형태에서 용어 "투여하는"은 단독 치료제로서 또는 또 다른 치료제와 배합하여 EpCAMxCD3 이중특이성 항체(약제학적 조성물 형태)의 투여를 의미한다.

따라서, 본 발명의 약제학적 조성물은 동시 치료 접근법, 즉 다른 의약 또는 약물, 예를 들면, 사람 환자에서 EpCAM 양성 상피 암 세포를 치료하기 위한 다른 의약 및/또는 글루코코르티코이드 및/또는 본 발명의 방법의 맥락에서 유리할 수 있는 임의의 기타 치료제와 함께 동시 투여로 사용되는 것으로 상정된다.

본 출원에서 언급된 약제학적 조성물의 투여는 바람직하게는 정맥내 투여이다. 본 발명의 방법에서 단계(a)의 투여 경로 및/또는 단계(b)의 투여 경로는 정맥내이다.

EpCAMxCD3 이중특이성 항체(예: 약제학적 조성물 형태)의 투여는 연속적이거나 또한 본 출원에서 연속적으로 사용된다. 연속 투여는 실질적으로 중단 없는 투여를 지칭한다. "실질적으로 중단 없는"은 통상적으로 중단된 유동 또는 공간적 연장 없이 연속 투여를 포함한다.

본 발명의 바람직한 실시양태에서, 제2 용량은 치료학적으로 활성이 있다. 바람직하게는, 활성 용량은 CD8+-T 세포의 활성화를 나타낸다. 활성화된 CD8+-T 세포는 바람직하게는 CD25 및/또는 CD69 표현형을 특징으로 한다. 용어 "활성화된 CD8+-T 세포" 및 "CD25 및/또는 CD69 표현형"은 본 출원의 다른 부분에 기재되어 있다.

"치료학적 유효량" 또는 "치료학적 활성"이란 투여되어 치료학적 효과를 생성하는 EpCAMxCD3 이중특이성 항체의 용량을 의미한다.

정확한 용량은 치료 목적에 좌우될 것이며, 공지된 기술을 사용하여 당해 기술분야의 통상의 지식을 가진 자에 의해 확인될 것이다. 당해 기술분야에 공지되고 상기 기재된 바와 같이, 연령, 체중, 일반 건강, 성별, 식이, 약물 반응 및 증상의 중증도의 조정이 필요할 수도 있고, 당해 기술분야의 통상의 지식을 가진 자에 의한 통상의 실험으로 확인될 것이다. "치료학적 활성"은 본 발명의 맥락에서 치료학적 접근법에 대한 전제조건인 CD8+-T 세포의 상술한 활성화를 적어도 포함한다. 본 발명의 각각의 방법 또는 방법 단계의 치료학적 효과는 치료학적 효과를 나타낼 수 있는 모든 확립된 방법 및 접근법에 의해 추가로 검출할 수 있다. 예를 들면, 치료학적 효과는 발병된 조직/기관의 외과적 절제 또는 생체검사에 의해 검출되고, 그 다음에 면역조직화학(IHC) 또는 필적하는 면역학적 기술에 의해 분석되는 것으로 상정된다. 또는, 환자 혈청(존재하는 경우) 중의 종양 마커는 치료학적 접근법이 이미 효과적인지 아닌지의 여부를 진단하기 위해 검출되는 것으로 또한 상정된다. 추가로 또는 대안적으로, 치료학적 효과가 이미 존재하는지를 평가하기 위해 숙련된 실시자를 또한 보조할 수 있는 개개 환자의 일반적 외관(체력, 웰빙, 종양 매개된 병의 감소 등)을 평가할 수 있다. 숙련자들은 본 발명의 화합물의 치료학적 효과를 관찰할 수 있는 다수의 다른 방법을 인지한다.

추가의 양상에서, 본 발명은

사람 환자의 EpCAM 양성 상피 암 세포를 치료하는 방법에 관한 것이다.

다른 추가의 양상에서, 본 발명은

사람 환자에 대한 EpCAMxCD3 이중특이성 항체의 연속 (치료학적) 투여에 의해 매개된 의학적 증상, 바람직하게는 부작용을 완화 및/또는 예방하는 방법에 관한 것이다. 상기 사람 환자는 EpCAM 양성 상피 암 세포를 포함하거나 포함하는 것으로 추정되는 것이 바람직하다.

사람 환자에 대한 EpCAMxCD3 이중특이성 항체의 투여에 의해 매개된 의학적 증상, 바람직하게는 부작용을 완화 또는 예방하는 방법의 바람직한 실시양태에서, 상기 의학적 증상은 적어도 하나의 간 효소의 혈청 수준의 증가를 특징으로 한다.

적어도 하나의 간 효소의 혈청 수준의 증가는 본 출원에서 하기에 추가로 기재되는 이상 반응 표준 용어 기준(Common Terminology Criteria for Adverse Events) v3.0(CTCAE)에 따라 등급 4까지 이의 최대로 존재한다. 따라서, 상기 적어도 하나의 간 효소의 혈청 수준의 증가는 또한 등급 1, 2 또는 3 이하일 수 있고, 등급 4가 최대이다.

당해 증가는 바람직하게는 일시적인 것이다. 상기 적어도 하나의 간 효소의 혈청 수준의 증가의 맥락에서 사용되는 경우, "일시적"은 당해 증가가 영구적이지 않고 치료 중단 또는 연속된 추가 주입 동안 사라짐을 의미한다. 또한, 간 효소의 혈청 수준의 일시적 증가는 간의 영상화, 실질적인 조직 손상 또는 손상된 합성 파라미터의 병리학적 발견을 반드시 수반하는 것은 아닌 것으로 상정된다. 이는 MT110, 즉 본 발명의 항체로 치료된 환자의 간 유조직을 나타내는 도 7에 예시적으로 도시되어 있다. 알 수 있는 바와 같이, 간 유조직은 간 트랜스아미나제의 피크에서 실질적인 세포 손상(HE 오염)의 징후를 나타내지 않는다.

일반적으로 말하면, 간 효소의 활성은 통상적으로 간에 대한 "윈도우"로서 사용되며, 이는 간의 증상/상태에 대한 지침을 제공하기 때문이다. 예를 들면, 간이 알콜 또는 기타 의약에 의해 손상되거나 다른 임의의 이유로 인해 경우, 비정상 기능을 갖는 경우, 간 효소는 이들이 보통 존재하지 않는 혈액 내로 누출된다.

따라서, 간 효소의 혈청 수준은 간 효소의 활성에 의해 측정될 수 있다. 상기(즉, 증가 또는 상승한)한 통상적으로 허용되는 참조 값인 간 효소의 활성은 간의 잠재적 비정상 기능 및/또는 손상을 일반적으로 나타낸다.

간 효소의 활성은 간 기능 시험(LFT 또는 LF), 즉 환자 간의 상태에 대한 정보를 제공하도록 설계된 임상 생화학적 실험실 혈액 분석에 의해 측정할 수 있다. 간 효소에 있어서, 참조 값(정상 값)은 공지되어 있고, 통상적으로 인정되고 있다. 참조 값은 의학 시험 결과의 세트를 해석하기 위해 건강 전문가에 의해 사용된 값의 세트이다. 참조 값은 정상 모집단의 95%가 포함하는 값의 세트, 또는 평균으로부터의 2개 표준 편차로서 보통 정의된다. 이는 다양한 수의 실험실 시험의 데이타를 수집함으로써 측정된다.

간 효소의 경우에, 참조 값은 국제 단위(IU)로서 제공된다. 국제 단위는 측정된 생물학적 활성 또는 효과를 기초로 한다.

간 효소의 혈청 수준의 증가(바람직하게는 일시적)은 정상 상한치(ULN)의 배수로 측정된다. NCI 이상 반응 표준 용어 기준(Common Terminology Criteria for Adverse Events) v3.0(CTCAE)(공개일: 2003년 12월 12일)에 따라, ULN의 배수는 등급으로 분류된다. 등급은 부작용의 중증도를 지칭한다. CTCAE v3.0은 각 부작용에 대한 중증도의 독특한 임상적 기재와 함께 등급 1 내지 5를 나타낸다:

등급 1: 약간의 부작용

등급 2: 중간의 부작용

등급 3: 심각한 부작용

등급 4: 생명 위협 또는 장애 부작용

등급 5: 환자의 사망

아스파르테이트 트랜스아미나제(AST) 및 알라닌 트랜스아미나제(ALT) 등과 같은 간 트랜스아미나제는, 간 손상 또는 기능부전의 경우에 이들 효소가 손상된 또는 기능부전 간 세포로부터 혈액으로 누출하기 때문에, 간의 세포 통합 상태를 제공한다.

따라서, 본 발명의 방법의 맥락에서, AST 및/또는 ALT는 바람직한 간 효소(간 마커)이다. 일부 바람직한 양태에서, 적어도 하나의 간 효소는 AST 및/또는 ALT 및 임의로 또한 GGT 및/또는 AP를 포함한다.

혈청 글루타믹 옥살로아세틱 트랜스아미나제(SGOT)로도 지칭되는 아스파르테이트 트랜스아미나제(AST)는 간 유조직 세포와 관련된 또 다른 효소라는 점에서 알라닌 트랜스아미나제(ALT)와 유사하다. 이는 급성 간 손상에서 상승하지만 적혈구, 심장 및 골격근에 존재하고, 따라서 간에 특이적이지 않다. AST 대 ALT의 비는 종종 간 손상의 원인들을 구별하는데 유용하다. 상승된 AST 수준은 간 손상에 대해 특이적이지 않다. AST에 대한 유용한 참조 값은 10 내지 50 IU/I이다.

이상 반응 표준 용어 기준 v3.0에 따라, AST에 대한 등급은 다음과 같다:

혈청 글루타믹 피루베이트 트랜스아미나제(SGPT)로도 지칭되는 알라닌 트랜스아미나제(ALT) 또는 알라닌 아미노트랜스퍼라제(ALAT)는 간세포(간 세포)에 존재하는 효소이다. 세포가 손상되면, 이는 당해 효소를 측정되는 혈액으로 누출한다. ALT는 급성 간 손상, 예를 들면, 간염 또는 파라세타몰(아세트아미노펜) 과다복용시에 현저하게 상승한다. ALT에 대한 통상의 참조 값은 5 내지 50 IU/I이다.

이상 반응 표준 용어 기준 v3.0에 따라, ALT에 대한 등급은 다음과 같다:

감마-글루타밀 트랜스퍼라제(GGT) 또는 알칼리 포스파타제(AP) 등과 같은 기타 간 효소는 담도에 연결된 증상를 제공한다.

따라서, 추가의 간 효소 알칼리 포스파타제(AP 또는 ALP)로서 각각 증가 또는 감소는 본 발명의 맥락에서 측정될 수 있는 것으로 상정된다. AP는 간의 담도를 정렬하는 세포 중의 효소이다. 혈장 중의 AP 수준은 거대 담관 장애, 간즙 정체 또는 간의 침윤성 질환과 함께 상승할 것이다. AP는 또한 골 및 췌장 조직에 존재하고, 따라서 성장하는 어린이(이들이 골이 개조됨에 따라) 및 파겟 질환(Paget's disease)을 갖는 노령 환자에서 보다 높다. AP에 대한 통상의 참조 값은 30 내지 120 IU/I이다.

이상 반응 표준 용어 기준 v3.0에 따라, AP에 대한 등급은 다음과 같다:

증가 또는 감소를 각각 본 발명의 맥락에서 측정할 수 있는 또 다른 간 효소는 감마 글루타밀 트랜스펩티다제(GGT)이다. 이는 간 기능부전의 보다 작은 준임상 수준으로 상승되는 것으로 공지되어 있다. 또한, 이는 ALP에서 분리된 상승의 원인을 동정하는데 도움을 줄 수 있다. GGT에 대한 유용한 참조 값은 0 내지 51 IU/I이다.

이상 반응 표준 용어 기준 v3.0에 따라, GGT에 대한 등급은 다음과 같다:

본 발명의 방법의 한 가지 관점에서, 상기 제2 기간은 상기 제1 기간을 초과한다. 용어 "초과한다"는 제2 기간이 제1 기간보다 긴, 바람직하게는 적어도 1일 긴 것을 의미한다. 본 발명의 방법/투약 용법의 또 다른 관점에서, 상기 제1 기간은 상기 제2 기간을 초과하거나 동등하다.

또한, 제1 기간 및 제2 기간은 제3 기간에 의해 중단되는 것으로 상정된다(즉, 제1 기간과 제2 기간 사이의 단절). 상기 제3 기간은 바람직하게는 가능한 한 짧지만(EpCAM 양성 상피 암은 동시에 성장할 수도 있다), 환경에 따라 1일 이상 또는 심지어 1 또는 2주 이상 더 지속할 수 있다. 이러한 중단의 목적은 상기 적어도 하나의 간 효소의 혈청 수준의 증가로부터 환자를 회복시키는 휴양 기간으로서 보아야 하며, 이는 필수적이다. 바람직한 양태에서, 상기 제3 기간(이는 제1 및 제2 기간 사이에 존재한다)은 2주 이하, 보다 바람직하게는 1주 이하이다.

본 발명의 또 다른 양상에서, 상기 제1 기간은 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6 또는 7일이고, 이에 의해 보다 긴 기간, 예를 들면, 8, 9, 10, 11, 12, 13 또는 14일이 배제되는 것은 아니다. "보다 긴"은 최저 시간 단위로서 완전한 하루(1일)로 한정되지 않고, 즉 1/2일, 또는 완전한 시간으로 생각할 수 있다. 그러나, 최소 시간 단위는 완전한 1일인 것이 바람직하다. 첨부된 실시예에 나타낸 결과에를 비추어 보아, 제1 기간은 이상적으로는 7일 내지 9일(7, 8, 9일), 바람직하게는 7일인 것으로 밝혀졌다. 바람직하게는, EpCAMxCD3 이중특이성 항체는 적어도 하나의 간 효소의 혈청 수준이 등급 4이하(바람직하게는 등급 3)로 증가되고 다음에 등급 2로 감소되도록 제1 기간 내에 투여된다. 간 효소의 이러한 증가 및 감소는 본 출원의 다른 부분에서 설명되어 있다.

본 출원에 사용된 바와 같이, "X 내지 Y'로 정의되는 시간 간격은 "X와 Y 사이"로 정의되는 시간 간격과 동등하다. 시간 간격은 구체적으로 상한치 및 또한 하한치를 둘다 포함한다. 이는, 예를 들면, 시간 간격 "1 내지 4일" 또는 "1 내지 4일" 사이가 1일, 2일, 3일 및/또는 4일의 기간을 포함함을 의미한다.

본 출원에 언급된 바와 같이, 본 발명자들은 제1 기간 동안 EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 사용한 처리에 대한 사람 환자의 "적응"이 제2 기간 동안 증가된 제2 용량의 항체를 사용하여 사람 환자를 치료하여 이것에 의해 부작용(적어도 하나의 간 효소의 혈정 수준의 증가)을 보다 양호하게 조절, 즉 CTCAE에 따라 허용가능한 등급 내로 유지할 수 있음을 발견했다.

그러나, 이러한 개선을 달성하기 위해, 제1 용량의 항체를 제1 기간 동안 연속 투여함으로써 사람 환자를 EpCAMxCD3 이중특이성 항체에 대해 "적응"시킬 필요가 있다(여기서, 상기 제1 용량은 연속 (제2) 용량보다 적다).

제1 용량의 EpCAMxCD3 이중특이성 항체가 사람 환자에게 연속 투여되는 제1 기간은, 바람직하게는 적어도 하나의 간 효소의 혈청 수준을 등급 3 또는 4까지 증가시킴을 특징으로 한다(따라서, 적어도 하나의 간 효소의 혈청 수준을 등급 1 또는 2로 증가시키는 것을 포함함). 당해 증가는 제1 기간의 개시 시점에 상기 적어도 하나의 간 효소의 혈청 수준과 비교하여 관찰된다.

"적응" 단계(이는 제1 용량의 EpCAMxCD3 이중특이성 항체가 사람 환자에게 연속 투여되는 제1 기간을 포함함)는 바람직하게는 상기 적어도 하나의 간 효소의 증가된 혈청 수준이 바람직하게는 등급 2 또는 심지어 등급 1로 감소될 때까지 지속한다. 상기 적응 단계는 또한 상술한 제3 기간(제3 기간이 사용되는 경우)을 포함하며, 제3 기간은 적어도 하나의 간 효소의 혈청 수준의 증가로부터 사람 환자를 회복시키는 휴양 중단(필요한 경우)을 나타낸다.

요컨대, 제1 용량의 EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 사람 환자에게 연속 투여하는 제1 기간은 이전 기술한 바와 같이 적어도 하나의 간 효소의 혈청 증가 및 적어도 하나의 간 효소의 혈청 수준의 감소를 특징으로 한다. 상기 감소는, 제3 기간이 사용되는 경우, 제3 기간 동안 또한 일어날 수 있다. 따라서, 이러한 증가 및 감소는 EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 투여하는 사람 환자의 적응 단계를 특성화하고, 이에 의해 적어도 하나의 간 효소의 혈청 수준을 과도하게 증가시키지 않고서, 제2 기간 동안 제2 용량의 EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 연속 투여할 수 있게 한다.

따라서, 제1 기간(또는 제1 및 제3 기간)은 증가 및 감소에 요구되는 시간에 좌우되며, 따라서 환자마다 달라질 수 있다. 그러나, 본 발명의 교시를 적용함으로써 숙련된 실시자는 혈청 수준을 측정하고 이를 "적응 단계"의 개시 시점, 즉 제1 용량의 EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 사람 환자에게 연속 투여하는 제1 기간(및, 존재하는 경우, 제3 기간)의 개시 시점의 혈청 수준과 비교함으로써 적어도 하나의 간 효소의 혈청 수준의 증가를 측정하는 것이 용이하다.

마찬가지로, 숙련된 실시자는 최대 등급 4에 도달한 후의 혈청 수준을 측정하고, 이들이 그 후 감소되는지를 평가함으로써 적어도 하나의 간 효소의 혈청 수준의 감소를 측정하는 것이 용이하다.

본 발명의 방법의 특히 바람직한 양태에서, EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 사람 환자에게 연속 투여하는 제1 기간은 4일 이하(예: 3일)이고, 단, 상기 적어도 하나의 간 효소의 혈청 수준은 상기 기간 동안 등급 2 이상으로 증가하지 않는다.

제1 기간과 마찬가지로, 제2 기간 및 제3 기간은, 예를 들면, 사람 환자의 연령, 성별, 체중 등에 비추어 달라질 수 있다.

제2 기간은 바람직하게는 상기 사람 환자의 CD8+-T-세포가 활성화될 때까지 지속한다.

CD8+-T 세포의 활성화는 CD8에 대한 항체를 적용하여 CD8+-T 세포에 대해 분류하고/하거나 CD8+-T 세포의 활성화를 나타내는 세포 표면 마커에 특이적인 항체를 적용함으로써 당해 기술분야에 공지된 수단 및 방법, 예를 들면, FACS-분석에 의해 측정할 수 있다.

따라서, CD8+-T 세포 활성화는 바람직하게는 상기 CD8+-T-세포중 적어도 20%, 30%, 40%, 50% 또는 그 이상의 CD25 및/또는 CD69-양성 표현형의 증가를 특징으로 한다. CD8+-T 세포의 전체 수는, 예를 들면, 상기 환자의 말초혈 샘플의 FACS-분석에 의해 당해 기술분야에 공지된 수단 및 방법으로 측정할 수 있다. 제2 기간 동안의 상기 증가는 제1 기간 전 또는 제2 기간 전에 환자의 CD8+-T 세포의 CD25 및/또는 CD69-양성 표현형과 관련하여 관찰되어야 한다. 따라서, 환자의 CD8+-T 세포의 표현형은 참조 값을 이용할 수 있도록 제1 기간 전 또는 제2 기간 전에 측정되는 것으로 상정된다.

본 발명의 방법의 또 다른 실시양태에서, 상기 제2 기간은 적어도 2주, 즉 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8주 이상, 바람직하게는 3주이다. 용어 "1주"는 완전한 7일을 의미하는 것으로 이해될 것이다.

바람직한 실시양태에서, 상기 제2 기간은 적어도 19일, 즉 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30일, 또는 그 이상이다. 상기 제2 기간은 치료 효과의 검출때까지 지속되는 것이 바람직하다. "치료 효과"는 본 발명의 맥락에서, 임의의 치료 효과의 전제 조건인, CD8+-T 세포의 상기 언급한 활성화를 적어도 포함한다.

본 발명의 방법/투약 용법의 보다 바람직한 양태에서, 상기 제1 기간은 1 내지 10일이고, 상기 제2 기간은 적어도 19일이다.

보다 바람직한 양태에서, 상기 제1 기간은 7일 내지 9일이고, 상기 제2 기간은 19일 내지 21일이다. 7일의 제1 기간 및 21일의 제2 기간이 특히 바람직하다. 또 다른 바람직한 양태에서, 상기 제1 기간은 1주이고, 상기 제2 기간은 적어도 3주이고, 상기 제3 기간은 1주 또는 2주이다.

몇몇 양태에서, 상기 제1 용량은 치료학적으로 활성이 없다. "치료학적으로 활성이 없는"은 이러한 맥락에서 상기 기술한 CD8+-T 세포 활성화가 바람직하게는 CD8+-T 세포의 CD25 및/또는 CD69-양성 표현형의 20% 이하의 증가를 특징으로 한다. CD8+-T 세포의 전체 수는, 예를 들면, 상기 환자의 말초혈 샘플의 FACS-분석에 의해 당해 기술분야에 공지된 수단 및 방법으로 측정할 수 있다. 상기 증가는 제1 기간 전에 환자의 CD8+-T 세포의 CD25 및/또는 CD69-양성 표현형과 관련하여 관찰되어야 한다. 따라서, 환자의 CD8+-T 세포의 표현형은 참조 값을 이용할 수 있도록 제1 기간 전에 측정된다.

제2 용량은 치료학적으로 활성이 있는 것으로 상정된다. 상기 제2 용량의 치료학적 활성은 본 출원의 다른 부분에 기재된 활성화된 CD8+-T 세포를 특징으로 한다. 상기 활성화는 상기 CD8+-T 세포의 20% 이상의 CD25 및/또는 CD69-양성 표현형을 특징으로 한다(제2 기간 전에 CD25 및/또는 CD69-양성 표현형과 관련하여).

본 발명의 방법의 또 다른 양태에서, 상기 제1 용량은 적어도 하나의 간 효소의 혈청 수준이 등급 3 또는 4의 혈청 수준으로 증가시키고 제1 기간 내에 등급 2의 혈청 수준으로 다시 감소시키도록 하는 양이다. 용어 "간 효소", "등급" 등은 본 출원의 다른 부분에 기재되어 있다.

본 발명의 방법/투약 용법의 추가의 관점에서, 상기 제1 용량은 1 내지 6 ㎍/d, 즉 1, 2, 3, 4, 5 또는 6 ㎍/d(1 내지 3 ㎍/d, 즉 1, 2 또는 3 ㎍/d가 바람직하다)이다. "d"는 1일을 나타낸다. 예를 들면, 1 ㎍/d의 용량은 EpCAMxCD3 이중특이성 항체의 1 ㎍이 1일에 걸쳐 균일하게 또는 연속적으로 투여됨을 의미한다. "1일에 걸쳐 연속적으로"는 중단 없이 영구적으로 진행시키는 주입을 지칭한다. 또한, 제1 용량은 상기 제1 기간 동안 시간 경과에 따라 증가하고(즉, 제1 기간은 용량 증가를 특징으로 하는 몇몇 단계로 분할된다), 여기서 상기 증가는 상기 제2 용량보다 적은 용량에서 종결된다. 제1 기간 내에서 상기 단계식 증가는 일마다 또는 주마다 발생할 수 있다(참조: 도 8 참조). 따라서, 제1 기간은 치료에 대한 환자의 단계식 적응을 특징으로하는 "용량 증가" 처리/투약 용법으로 개시한다(예를 들면, 1주 3 ㎍/일, 이어서 1주 6 또는 12 ㎍/일).

본 발명의 방법/투약 용법의 추가의 관점에서, 상기 제2 용량은 10 내지 120 ㎍/d, 즉 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110 또는 120 ㎍/d 또는 그 이상이다.

용어 "㎍"은 "EpCAMxCD3 이중특이성 항체 제제의 ㎍"를 포함한다. 상기 EpCAMxCD3 이중특이성 항체 제제의 10% 이하가 부정확하게 접히는 것이 바람직하다. 바람직한 양태에서, EpCAMxCD3 이중특이성 항체의 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 심지어 100%가 정확하게 접힌다. 또한, 항체 제제는 임의로 추가 성분들, 예를 들면, 동결보호제, 계면활성제, 충전제, 결합제 및/또는 벌크제 등을 포함한다. 이러한 추가 성분들의 양은 바람직하게는 본 발명의 "용량" 및/또는 방법과 관련하여 사용된 용어 "㎍"에 포함되지 않는다.

바람직한 양태에서, 상기 제1 용량은 1 내지 3 ㎍/d(즉, 1, 2 또는 3)이고, 제2 용량은 20 내지 90 ㎍/d(즉, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80 또는 90)이다.

본 출원에 제공된 범위는 10의 증량분에 의해 설명되는 것으로 이해되어야 한다. 그러나, 이러한 범위는 또한 보다 작은 증량분, 예를 들면, 1의 증량분에 의해 예시된 것들(10 내지 30은, 예를 들면, 10, 11, 12, 13, 등 30까지를 포함함) 또는 보다 작은 증량분, 예를 들면, 소수점 이후의 값을 포괄한다.

바람직한 실시양태에서, 상기 투약 용법은 도 8에 도시되어 있다. 이들 투약 용법에 대한 추가의 상세는 본 발명의 실시양태를 포함하는 실시예 4 또는 5에 설명되어 있다.

본 출원에 상기 언급된 바와 같이, 본 발명은 사람 CD3 엡실론 쇄의 에피토프에 결합할 수 있는 제1 결합 도메인 및 사람 EpCAM에 결합할 수 있는 제2 결합 도메인을 포함하는, EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 사용하는 치료/투약 용법에 관한 것이다. 본 발명의 방법에 따르는 이중특이성 분자의 예는 전체 내용이 본 출원에서 참고로 도입되는 국제 공개공보 제WO2005/040220호(PCT/EP2004/011646)에 보다 상세히 기재되어 있다. 상기 문헌에 기재된 모든 특정한 EpCAMxCD3 이중특이성 항체(이들의 변이체, 단편, 등가물 등을 포함함)는 본 발명의 특히 바람직한 EpCAMxCD3 이중특이성 항체이다.

본 출원에 사용된 바와 같이, "EpCAMxCD3 이중특이성 단일쇄 항체"는 2개의 결합 도메인을 포함하는 단일 폴리펩티드 쇄를 나타낸다. 이러한 단일쇄 항체는 본 발명의 방법/투약 용법과 관련하여 바람직하다. 각각의 결합 도메인은 항체 중쇄로부터의 적어도 하나의 가변 영역("VH 또는 H 영역")을 포함하고, 여기서 제1 결합 도메인의 VH 영역은 CD3 엡실론 분자에 특이적으로 결합하고, 제2 결합 도메인의 VH 영역은 EpCAM에 특이적으로 결합한다. 2개의 결합 도메인은 짧은 폴리펩티드 스페이서에 의해 임의로 서로 작동적으로 연결되어 있다. 폴리펩티드 스페이서의 비제한적 예는 Gly-Gly-Gly-Gly-Ser (G-G-G-G-S) 및 이의 반복체이다. 각각의 결합 도메인은 항체 경쇄로 부터의 하나의 가변 도메인("VL 또는 L 영역")을 추가로 포함하고, 여기서 각각의 제1 및 제2 결합 도메인 내의 VH 영역 및 VL 영역은, 예를 들면, 유럽 특허 제623679 B1호에 개시되고 특허청구된 형태의 폴리펩티드 링커에 의해 서로 연결되어 있지만, 어느 경우에는 제1 결합 도메인의 VH 영역과 VL 영역 및 제2 결합 도메인의 VH 영역과 VL 영역이 서로 쌍을 이루게 하여, 이들은 함께 각각의 제1 및 제2 결합 도메인에 특이적으로 결합할 수 있다. 이러한 EpCAMxCD3 이중특이성 단일쇄 항체는 전체 내용이 본 출원에서 참고로 도입되는 국제공개공보 제WO2005/040220호(PCT/EP2004/011646)에 보다 상세히 기재되어 있다.

용어 "결합 도메인"은, 본 발명과 관련하여, 소정의 표적 구조물/항원/에피토프에 특이적으로 결합/상호작용하는 폴리펩티드의 도메인을 특성화한다. 따라서, 결합 도메인은 "항원-상호작용-부위"이다. 용어 "항원-상호작용-부위"는, 본 발명에 따라, 특이성 항원 또는 특이성 항원 그룹, 예를 들면, 상이한 종의 동일한 항원과 특이적으로 상호작용할 수 있는 폴리펩티드 모티브를 규정한다. 상기 결합/상호작용은 또한 "특이적 인식"을 규정하는 것으로 이해된다. 용어 "특이적으로 인식하는"은, 본 발명에 따라서, 항체 분자가 항원, 예를 들면, 본 출원에 규정된 바와 같은 사람 CD3 항원의 적어도 2개, 바람직하게는 적어도 3개, 보다 바람직하게는 적어도 4개 아미노산과 특이적으로 상호작용하고/하거나 결합할 수 있음을 의미한다. 이러한 결합은 "록-앤드-키(lock-and-key) 원리"의 특이성에 의해 예시될 수 있다. 따라서, 결합 도메인 및 항원의 아미노산 서열 중의 특이적 모티브는 상기 구조물의 2차 변형의 결과뿐만 아니라 이들의 1차, 2차 또는 3차 구조물의 결과로서 서로 결합한다. 항원 상호작용 부위와 이의 특이적 항원과의 특이적 상호작용은 또한 항원에 대한 상기 부위의 단순한 결합을 생성할 수도 있다. 더욱이, 결합 도메인/항원-상호작용-부위와 이의 특이적 항원과의 특이적 상호작용은 달리는, 예를 들면, 항원 형태의 변화, 항원의 올리고머화 등의 유도에 기인하여 시그날의 개시를 생성할 수도 있다. 본 발명과 관련하여 결합 도메인의 바람직한 예는 항체이다. 결합 도메인은 모노클로날 또는 폴리클로날 항체일 수 있거나, 모노클로날 또는 폴리클로날 항체로부터 유도될 수 있다. 용어 "항체"는 결합 특이성을 여전히 보유하는 유도체 또는 이의 작용성 단편을 포함한다. 항체의 생산 기술은 당해 기술분야에 공지되어 있고, 문헌[참조: Harlow and Lane "Antibodies, A Laboratory Manual", Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1988 and Harlow and Lane "Using Antibodies: A Laboratory Manual" Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1999]에 기재되어 있다. 용어 "항체"는 또한 상이한 부류(즉, IgA, IgG, IgM, IgD 및 IgE) 및 아부류(예: IgG1, IgG2 등)의 면역글로불린(Ig's)을 포함한다.

용어 "항체"의 정의는 또한 항체 단편, 그와 비슷한 것, 그 중에서도, 특히 Fab 단편 뿐만 아니라 키메라, 단일쇄 및 사람화 항체 등의 양태를 포함한다. 항체 단편 또는 유도체는 추가로 F(ab')₂, Fv, scFv 단편 또는 단일 도메인 항체, 단일 가변 도메인 항체, 또는 VH 또는 VL일 수 있고 다른 V 영역 또는 도메인과 독립적으로 항원 또는 에피토프에 특이적으로 결합하는 하나의 가변 도메인만을 포함하는 면역글로불린 단일 가변 도메인을 포함한다[참조: Harlow and Lane (1988) and (1999), 생략]. 이러한 면역글로불린 단일 가변 도메인은 분리된 항체 단일 가변 도메인 폴리펩티드 뿐만 아니라, 항체 단일 가변 도메인 폴리펩티드 서열의 단량체를 하나 이상 포함하는 보다 큰 폴리펩티드를 포함한다.

본 출원에 사용된 바와 같이, CD3 엡실론은 T 세포 수용체의 일부로서 나타낸 분자를 지칭하며, 종래 기술에서 통상 기재된 바와 같은 의미를 갖는다. 사람에 있어서, 이는 개별적으로 또는 독립적으로 조합된 형태로 모든 공지된 CD3 아단위, 예를 들면, CD3 엡실론, CD3 델타, CD3 감마, CD3 제타, CD3 알파 및 CD3 베타를 포함한다. 사람 CD3 엡실론은 GenBank 수탁번호 NM_000733으로 나타낸다.

사람 EpCAM은 GenBank 수탁번호 NM_002354로 나타낸다.

본 발명의 방법/투약 용법의 바람직한 실시양태에서, 이중특이성 단일쇄 항체 작제물은 EpCAM VL-EpCAM VH-CD3 VH-CD3 VL 이중특이성 단일쇄 항체 작제물이다.

본 발명의 방법/투약 용법의 보다 바람직한 양태에서, 이중특이성 단일쇄 항체 작제물은 국제공개공보 제WO2005/040220호(PCT/EP2004/011646)호에 개시된 서열번호: 88(CDRH1), 서열번호: 92(CDRH2) 및 서열번호: 96(CDRH3)로 기재된 바와 같은 CDR H1-3, 및 국제공개공보 제WO2005/040220호(PCT/EP2004/011646)에 개시된 서열번호:100(CDRL1), 서열번호: 102(CDRL2) 및 서열번호: 104(CDRL3)로 기재된 바와 같은 CDR L1-3, 즉 MT110을 특성화하는 CDR을 포함한다.

상기 서열번호는 또한 하기 표에 제시되어 있다:

본 발명의 방법의 보다 바람직한 양태에서, EpCAMxCD3 이중특이성 단일쇄 항체 작제물은 국제공개공보 제2005/040220호(PCT/EP2004/011646호)에 개시되고 하기에 도시된 서열번호: 63에 기재된 아미노산 서열, 또는 상기 서열번호: 63과 적어도 90%, 바람직하게는 95% 동일한 아미노산 서열(이는 또한 본 출원에서 하기에 개시되어 있다)를 포함한다(또는 구성된다). 당해 서열을 특징으로 하는 EpCAMxCD3 이중특이성 단일쇄 항체 작제물은 MT110이다.

MT110 의 아미노산 서열

따라서, 본 발명의 방법/투약 용법의 가장 바람직한 실시양태에서, EpCAMxCD3 이중특이성 단일쇄 항체는 상기 나타낸 아미노산 서열을 특징으로 하는 MT110이다.

본 발명은 상기 서열번호: 63[또는 국제공개공보 제WO2005/040220호(PCT/EP2004/011646)]호에 나타낸 아미노산 서열 뿐만 아니라, 상기 아미노산 서열과 적어도 90% 또는 바람직하게는 95% 동일한, 가장 바람직하게는 적어도 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 EpCAMxCD3 이중특이성 단일쇄 항체 분자를 기재한다. 서열 동일성은 전체 아미노산 서열에 걸쳐 결정되는 것으로 이해되어야 한다. 서열 정렬을 위해, 예를 들면, 프로그램 Gap 또는 BestFit를 사용할 수 있고[참조: Needleman and Wunsch J. Mol. Biol. 48 (1970), 443-453; Smith and Waterman, Adv. Appl. Math 2 (1981), 482-489], 이는 GCG 소프트웨어 팩키지에 함유되어 있다[참조: Genetics Computer Group, 575 Science Drive, Madison, Wisconsin, USA 53711 (1991)]. 예를 들면, 본 출원에 기재된 EpCAMxCD3 이중특이성 단일쇄 항체(바람직하게는 MT110)의 아미노산 서열과의 서열 동일성이 90%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99%인 아미노산 서열을 결정하고 동정하는 것은 당해 기술분야의 통상의 지식을 가진 자에게 통상적인 방법이다. 예를 들면, 크릭 우블(Crick's Wobble) 가설에 따라, 안티-코돈 상의 5' 염기는 다른 2개의 염기와 공간적으로 제한된 것과 상이하고, 따라서 비표준 염기 쌍을 가질 것이다. 달리 말하면, 코돈 삼염기 중의 제3 위치는 당해 제3 위치에서 상이한 2개의 삼염기가 동일한 아미노산 잔기를 코딩할 수 있도록 달라질 수 있다. 상기 가설은 당해 기술분야의 통상의 지식을 가진 자에게 공지되어 있다[참조: http://en.wikipedia.org/wiki/Wobble_Hypothesis; Crick, J Mol Biol 19 (1966): 548-55]. 추가로, 예를 들면, 본 출원에 기재된 EpCAMxCD3 이중특이성 단일쇄 항체의 뉴클레오티드 또는 아미노산 서열과의 서열 동일성이 90%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99%인 아미노산 서열의 세포독성 활성을 측정하는 것은 당해 기술분야의 통상의 지식을 가진 자에게 통상적인 절차이다. EpCAMxCD3 이중특이성 단일쇄 항체, 또는 EpCAMxCD3 이중특이성 단일쇄 항체와의 서열 동일성이 90%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99%인 항체 작제물의 세포독성 활성은, 예를 들면, 국제공개공보 제WO2005/040220호(PCT/EP2004/011646)에 설명된 방법에 의해 검출할 수 있다.

또한, 본 발명의 방법은 바람직하게는 글루코코르티코이드의 투여, 바람직하게는 동시 투여를 추가로 특징으로 하는 것으로 생각된다.

첨부 실시예 2에 제시된 바와 같이, 글루코코르티코이드는 본 발명의 치료 방법의 과정에서 간 효소의 상기한 증가를 다소 완화시키는 것으로 밝혀졌다. 따라서, 본 발명의 방법(및 이에 의해 본 발명의 투약 용법)은 적어도 하나의 글루코코르티코이드의 임의의 투여를 추가로 특징으로 하는 것으로 생각된다. 상기 투여는 바람직하게는 본 출원에 기재된 바와 같은 제1 및/또는 제2 기간에 수반된다. 글루코코르티코이드(GC)는 사람을 포함하는 거의 모든 척추동물 세포에 존재하는 글루코코르티코이드 수용체(GR)에 결합하는 스테로이드 호르몬 부류이다. 이들 화합물은 염증의 원인과 무관하게 효능있는 소염제이다. 글루코코르티코이드는 특히 사이토킨 IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8 및 IFN-γ를 코딩하는 유전자를 억제함으로써 세포 매개된 면역성을 억제한다.

본 출원에 사용된 바와 같이, 용어 "글루코코르티코이드"는 적어도 코르티손, 코르티솔, 클로프레드놀, 프레드니손, 프레드니솔론, 메틸프레드니솔론, 데플라자코르트, 플루오코르톨론, 트리암시놀론, 덱사메타손 및 베타메타손을 포함한다. 프레드니손, 프레드니솔론 및/또는 메틸프레드니솔론이 바람직하다.

EpCAM은 거의 모든 암종의 (기저-측면) 세포 표면 상에서 발현되는 pan-상피 분화 항원이다. 암종이란 상피 세포로부터 발생하는 임의의 악성 암을 나타낸다. 암종은 주변위 조직 및 기관을 침략하고, 림프절 및 기타 부위로 전이시키거나 확산시킬 수 있다. 따라서, 본 출원에 사용된 바와 같은 용어 "EpCAM 양성 상피 암 세포"는, 이들의 세포 표면 상에서 EpCAM을 발현시키는 모든 종류의 암종(이의 단일 또는 전이 세포 포함)을 지칭한다. EpCAM 양성 상피 암(세포)의 예는 위장암(세포), 폐암(세포), 전립선암(세포) 및 난소암(세포)이다. "위장"은, 예를 들면, 식도, 위(위장), 소장 및 대장, 방광, 담관, 간 및 췌장을 포함한다. 폐암의 주요 유형은 소세포 폐암 및 비소세포 페암이다.

암 세포는 원발성 종양으로부터 이탈, 누출 또는 확산하고, 림프 및 혈관으로 유입하고, 혈류를 통해 순환하고, 체내의 다른 정상 조직 내에 침착될 수 있다. 대부분의 악성 종양 및 기타 악성 신생물은 상이한 정도로 전이할 수 있다. 이들 전이 암 세포는 종종 "전이성 변이체" 또는 "전이체"로서 언급된다. 전이 암 세포는 특히 본 발명의 범위에 포함된다.

본 발명의 방법의 바람직한 실시양태에서, 상기 위장 암은 위암, 결장암 또는 이들의 전이성 변이체이고, 상기 폐암은 소폐암, 비소폐암(NSCLC) 또는 이의 전이성 변이체이다.

또한, 폐 선암, 위-식도 접합부 선암, 호르몬-난치성 전립선암, 난소암 및 유방암 등이다.

본 발명의 방법의 또 다른 바람직한 실시양태에서, 당해 방법은 (전이성) EpCAM 양성 상피 암 세포를 갖는 환자에서 최소 잔류 질환(MRD)의 치료, 완화 또는 제거를 위한 것이다. "MRD"는 치료 동안 또는 환자가 완화 상태에 있을 때(즉, 환자가 질환의 어떠한 증상 또는 징후도 나타내지 않을 때)의 치료 후에 환자에 잔류하는 소수의 암 세포에 대해 제공된 명칭이다. 이는 상피 암 및 백혈병에서의 재발의 주요 원인이다.

추가의 양태에서 본 발명은,

(i) EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 사람 환자에게 투여하거나,

(ii) 사람 환자에서 EpCAM 양성 상피 세포 암을 치료하거나,

(iii) 사람 환자에게 EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 투여함으로써 매개된 의학적 증상을 완화 또는 예방하는 방법에 관한 것이며, 상기 방법은

(a) EpCAMxCD3 이중특이성 항체를, 적어도 하나의 간 효소의 혈청 수준을 등급 4 이하(바람직하게는 등급 3)로 증가시킨 다음 등급 2로 감소시키도록 연속 투여하는 단계; 및 이어서

(b) 상기 항체를 치료학적 활성이 있도록 투여하는 단계를 포함한다.

본 발명의 방법의 추가의 실시양태에서, 1회의 처리 사이클(제1 및 제2 기간 및 임의로 또한 제3 기간 포함)에는 무처리 간격 후에 1회 이상의 반복 사이클(들)이 수반된다. 본 발명의 방법의 바람직한 실시양태에서, 1회의 처리 사이클(제1 및 제2 기간, 및 임의로 또한 제3 기간 포함)은 4 내지 8주 연속 주입이고, 이어서 2 내지 6주 무처리 간격 후에 반복 사이클(들)이 수반된다. 또한, 상기 제2 처리 사이클은, 제1 기간 및/또는 제2 사이클의 투약이 상이하고/하거나 제2 기간 및/또는 투약이 제1 처리 사이클과 비교할 때에 상이하다는 점에서 제1 처리 사이클("제1 처리 사이클"은 이와 관련하여 "제2 처리 사이클" 직전인 처리 사이클을 나타냄)과 상이한 것으로 상정된다. 마찬가지로, 제3 기간(제1 처리 사이클에 존재하는 경우)는 제2 사이클과 상이하거나 심지어 부재할 수 있다(또는 그 반대. 즉, 이는 제2 사이클에 존재하고 제1 사이클로부터 부재할 수 있다). 또한, 제2 처리 사이클은 단지 제2 기간만으로 이루어지는 것으로 상정된다. 즉, 이는 명백하게는 제2 처리 사이클이 치료학적 활성 투약으로 직접 개시하고, 제1 기간(존재하는 경우, 제3 기간 포함)에 대한 본 출원에 기재된 제1 용량을 특징으로 하는 적응 단계를 벗어나는 것으로 상정된다. 제2 처리 사이클의 상기 치료학적 활성 투약은 제1 처리 사이클의 제2 기간에 사용된 용량과 동일하거나 이와 상이하다(바람직하게는 이를 초과한다). 도 8에 도시되거나 첨부된 실시예에 예시된 투약 용량이 특히 바람직하다.

본 발명은 추가로,

(i) EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 사람 환자에게 투여하거나,

(ii) 사람 환자에서 EpCAM 양성 상피 암 세포를 치료하거나,

(iii) 사람 환자에게 EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 투여함으로써 매개된 의학적 증상을 완화 또는 예방하기 위한 EpCAMxCD3 이중특이성 항체로서,

여기서 상기 항체는 본 출원 발명의 방법 또는 투약 용법에 따라 투여되는, EpCAMxCD3 이중특이성 항체에 관한 것이다.

본 발명은 또한 전술한 청구항의 어느 하나에 정의된 방법에 사용되는 약제학적 조성물을 조제/제조하기 위한 EpCAMxCD3 이중특이성 항체의 용도에 관한 것이다. 본 발명의 약제학적 조성물은 임의로 약제학적 담체를 포함할 수 있다. 적합한 약제학적 담체의 예는 당해 기술분야에 공지되어 있고, 인삼염 완충된 염수 용액, 멸균 용액 등을 포함한다. 정맥내 비히클은 유체 및 영양 보충제, 전해질 보충제(예: 링거 덱스트로즈에 기반한 것들) 등을 포함한다. 보존제 및 기타 첨가제, 예를 들면, 항균제, 항산화제, 킬레이트제, 및 불활성 가스 등이 또한 존재할 수도 있다. 추가로, 본 발명의 약제학적 조성물은 본 출원의 다른 부분에서 설명된 바와 같은 글루코코르티코이드와 같은 추가의 제제를 포함할 수 있다.

추가의 양상에서, 본 발명은 본 출원에 정의된 바와 같은 제1 용량 및 제2 용량을 포함하는 (약제학적) 키트 또는 약제학적 팩키지에 관한 것이다. 따라서 상기 제1 및 제2 용량은 하나의 밀봉된 약제학적 팩키지 또는 키트에 함께 팩키징된다. "제1 용량" 및 "제2 용량"은 이와 관련하여 소장 기간(제1 또는 제2 기간) 동안 사용될 수 있는 각각의 단일 용량을 포함하는 것으로 이해될 것이다. 이는, 예를 들면, 본 발명의 약제학적 팩키지 또는 키트에 포함되는 "제1 용량" 또는 "제2 용량"이 분리되어 있는 7개의 1일 용량을 포함하는 것을 의미한다. 팩키징된 1일 용량의 수는 의도된 기간(상기 기간이 X일인 경우의 X개 1일 용량, 기간이 Y일인 경우의 Y개 1일 용량 등)을 반영한다. 이들 양태에서, (약제학적) 키트 또는 약제학적 팩키지는 분리된 용기에 단일 팩키지로 1일 용량을 포함한다. 본 출원의 다른 부분에서 언급된 바와 같이, 상기 분리된 용기는, 예를 들면, 본 출원에 기재된 제1 또는 제2 기간 동안 증가하는 투약량의 맥락에서 상이한 용량을 함유할 수도 있다 - 제1 용기는 1일당 3 ㎍ 투약량(예: × 7)을 포함할 수 있는 반면, 추가의 용기는 12 ㎍/1일(예: × 7)을 포함한다. 그러나, 이들 모든 용기는 여전히 "제1 용량"의 일부를 형성한다.

대안적으로, 의도된 제1 용량 및/또는 제2 용량은 각 수의 1일 용량으로 분리되지 않고, 전체로서 또는 부분적으로 하나의 단일 용기(예: 주입 백)에 함유되며, 이는 제1 및/또는 제2 기간 동안 부분적으로(예: 1 내지 3일 동안) 또는 전체로서(즉, 제1 또는 제2 기간 동안) 필요 용량을 포함한다. 이는 하나의 단일 용기가, 예를 들면, 제1 기간 동안 사용되어야 하는 "제1 용량"에 대한 7개의 1일 용량을 포함하는 것을 의미한다.

본 발명의 (약제학적) 키트 또는 약제학적 팩키지는 또한 각 기간 동안 필요한 보다 많거나 적은 1일 용량(분리되거나 분리되지 않음)을 포함할 수 있는 것으로 이해된다. 이외는 달리, (약제학적) 키트 또는 약제학적 팩키지는 본 출원에 정의된 제1 및 제2 기간 동안 요구된 수의 1일 용량(분리되거나 분리되지 않음), 즉 하나의 단일 팩키지 중의 "제1 용량" 및 "제2 용량"을 함유하도록 제조된다. 이러한 팩키지는 이상적으로는 환자의 하나의 완전한 처리(제1 및 제2 기간 포함)에 충분하다. 본 발명의 키트 및 팩키지의 일부는 바이알 또는 병에 또는 용기 또는 다중용기와 조합하여 개별적으로 팩키징할 수 있다. 키트의 제조업자는 바람직하게는 당해 기술분야의 통상의 지식을 가진 자에게 공지된 표준 공정에 따른다.

추가로, 본 발명은 활성 성분으로서 본 출원에 기재된 제1 용량 및 제2 용량, 및 본 발명의 방법에 따라 이의 순차적 사용을 위한 서면 지침을 포함하는 약제학적 팩키지 또는 키트에 관한 것이다. 상기 약제학적 팩키지 또는 키트는 당해 내용물이 사람 환자에서 EpCAM 양성 상피 암 세포의 치료; 또는 EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 사람 환자에게 투여함으로써 매개된 의학적 증상의 완화 또는 예방에 사용될 수 있음을 나타내는 라벨 또는 인쇄를 추가로 포함할 수 있다.

또한, 본 발명의 약제학적 팩키지 또는 키트는 환자에게 제1 및/또는 제2 용량을 투여하는 수단 및/또는 완충제, 바이알, 테플론 백 또는 치료제의 주입에 통상 사용되는 주입 백을 추가로 포함하는 것으로 상정된다. "수단"은 시린지, 피하 주사 니들, 캐뉼라, 카테터, 정맥내 투여용 주입 백, 정맥내 비히클, 바이알, 완충제, 발명의 각 용량 및 주입액의 제조에 있어서 숙련가를 보조하는 서면 지침으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 하나 이상의 제품(들)을 포함한다.

또한, 본 발명의 약제학적 팩키지 또는 키트는 글루코코르티코이드를 추가로 포함하는 것으로 상정된다.

추가의 양태에서, 본 발명은 상기 청구항 중의 어느 하나의 방법에 따라 투여/투약 용법에 적합하도록 상기 제1 및/또는 상기 제2 용량이 정렬되어 있는 약제학적 팩키지 또는 키트를 제공한다. "~하도록 정렬된"은 1일 용량이 함께 서로 분리되어 팩키징되어 있고/있거나 제1 및/또는 제2 용량이 전체로서 또는 이의 배합물로 팩키징되어 있음을 포함한다.

본 발명은 또한 하기 항목에 관한 것이다:

1. (a) 제1 용량의 EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 제1 기간 동안 연속 투여하는 단계, 및 이어서 (b) 제2 용량의 상기 항체를 제2 기간 동안 연속 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 상기 제2 용량은 상기 제1 용량을 초과하는, 사람 환자에게 EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 투여하는 방법(투약 용법).

2. (a) 제1 용량의 EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 제1 기간 동안 연속 투여하는 단계, 및 이어서 (b) 제2 용량의 상기 항체를 제2 기간 동안 연속 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 상기 제2 용량은 상기 제1 용량을 초과하는, 사람 환자에서서 EpCAM 양성 상피 암 세포를 치료하는 방법.

3. (a) 제1 용량의 EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 제1 기간 동안 연속 투여하는 단계, 및 이어서 (b) 제2 용량의 상기 항체를 제2 기간 동안 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 상기 제2 용량은 상기 제1 용량을 초과하는, 사람 환자에게 EpCAMxCD3 이중특이성 항체의 연속 (치료학적) 투여에 의해 매개된 의학적 증상, 바람직하게는 부작용을 완화시키고/시키거나 예방하는 방법.

4. 항목 1, 2 또는 3에 있어서, 사람 환자가 EpCAM 양성 상피 암 세포를 포함하거나 이를 포함하는 것으로 여기지는 방법.

5. 항목 1 내지 3 중의 어느 한 항에 있어서, 단계(a)의 투여 경로 및/또는 단계(b)의 투여 경로가 정맥내인 방법.

6. 항목 3에 있어서, 의학적 증상, 바람직하게는 부작용이 적어도 하나의 간 효소의 혈청 수준을 증가시킴을 특징으로 하는 방법.

7. 항목 1 내지 6 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 기간이 상기 제1 기간을 초과하는 방법.

8. 항목 1 내지 7 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 기간이 적어도 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 6일 또는 7일(이상), 바람직하게는 7일인 방법.

9. 항목 1 내지 8 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 기간이 적어도 하나의 간 효소의 혈청 수준을 등급 3 또는 4 까지로 증가시킴을 특징으로 하는 방법.

10. 항목 9에 있어서, 상기 제1 기간이 상기 간 효소의 혈청 수준 증가를 등급 2로 감소시킬 때까지 지속되는 방법.

11. 항목 1 내지 10 중의 어느 한 항에 있어서, 제1 기간이 4일이고, 단 상기 적어도 하나의 간 효소의 혈청 수준이 등급 2 이하인 방법.

12. 항목 6 내지 11 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 적어도 하나의 간 효소가 AST 및/또는 ALT 및 임의로 또한 GGT 및/또는 AP인 방법.

13. 항목 1 내지 제12 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 기간이 적어도 환자의 CD8+-T-세포를 활성화시킬 때까지 지속되는 방법.

14. 항목 13에 있어서, 활성화가 CD8+-T-세포중 적어도 20%의 CD25 및/또는 CD69-양성 표현형을 특징으로 하는 방법.

15. 항목 1 내지 14 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 기간이 적어도 2주, 3주, 4주, 5주 또는 6주, 바람직하게는 3주인 방법.

16. 항목 1 내지 15 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 기간이 적어도 19일인 방법.

17. 항목 1 내지 16 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 기간이 1 내지 10일이고, 상기 제2 기간이 적어도 19일인 방법.

18. 항목 17에 있어서, 상기 제1 기간이 7 내지 9일이고, 상기 제2 기간이 19 내지 21일인 방법.

19. 항목 18에 있어서, 상기 제1 기간이 7일이고, 상기 제2 기간이 21일인 방법.

20. 항목 1 내지 19 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 용량이 치료학적으로 활성이 있는 방법.

21. 항목 20에 있어서, 상기 제2 용량의 상기 치료학적 활성이 활성화된 CD+-T-세포를 특징으로 하는 방법.

22. 항목 21에 있어서, 상기 활성화가 (제2 기간 전에 CD25 및/또는 CD69-양성 표현에 비하여) 상기 CD8+-T-세포중 적어도 20%의 CD25 및/또는 CD69-양성 표현형을 특징으로 하는 방법.

23. 항목 1 내지 22 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 용량이, 적어도 하나의 간 효소의 혈청 수준을 등급 3 또는 4의 혈청 수준까지 증가시키고 제1 기간 이내에 등급 2의 혈청 수준까지 다시 감소시키도록 하는 방법.

24. 항목 23에 있어서, 상기 적어도 하나의 간 효소가 AST 및/또는 ALT 및 임의로 또한 GGT 및/또는 AP인 방법.

25. 항목 1 내지 24 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 용량이 1 내지 6 ㎍/d, 바람직하게는 1 내지 3 ㎍/d인 방법.

26. 항목 1 내지 25 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 용량이 10 내지 120 ㎍/d(또는 치료학적 관련 양상에 따라 요구되는 경우, 그 이상)인 방법.

27. 항목 1 내지 26 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 용량이 1 내지 3 ㎍/d이고, 상기 제2 용량이 20 내지 90 ㎍/d인 방법.

28. 항목 1 내지 27 중의 어느 한 항에 있어서, 이중특이성 항체가 단일쇄 항체인 방법.

29. 항목 1 내지 28 중의 어느 한 항체 있어서, 상기 항체가 MT110인 방법.

30. 항목 1 내지 29 중의 어느 한 항에 있어서, 글루코코르티코이드의 (동시) 투여를 추가로 특징으로 하는 방법.

31. 항목 30에 있어서, 상기 글루코코르티코이드가 프레드니손, 프레드니솔론 및/또는 메틸프레드니솔론인 방법.

32. 항목 1 또는 4에 있어서, 상기 EpCAM 양성 상피 암 세포가 위장 암 및/또는 폐 암 세포인 방법.

33. 항목 32에 있어서, 상기 위장 암이 위암, 결장암 또는 이의 전이암 변이체이고, 상기 폐 암이 소세포 폐암, 비소세포 폐암 또는 이의 전이암 변이체인 방법.

도면은 다음을 나타낸다:
도 1은 실시예 1에 따르는 EpCAMxCD3 이중특이성 단일쇄 항체의 T 세포 활성화 효능을 나타낸다.
도 2는 실시예 2에 따르는 예시적 투약 용법을 나타낸다.
도 3은 MT110의 생성 및 작용 방식을 나타낸다.
도 4는 스케쥴 A, B 또는 C에서 10 또는 12 ㎍/일의 MT110 유지 용량으로 처리한 환자에 대한 MT110 혈장 수준이 비교가능한 프로파일을 나타냄을 도시한다.
도 5a는 환자 114-012에서 MT110 주입 개시후 및 7일에 용량 증가(코호르트 B2: 3 → 12 ㎍/d) 후에 관찰된 림프구 재분포를 나타낸다.
도 5b는 환자 114-012에서 MT110 주입 개시후 및 7일에 용량 증가(코호르트 B2: 3 → 12 ㎍/d) 후에 관찰된 T 세포 활성화를 나타낸다.
도 6a는 절개된 폐 병변, 많은 수의 CD3 양성 림프구(적색 화살표), 괴사 조직(녹색 화살표), 종양 세포(오렌지색 화살표)를 나타낸다.
도 6b는 절개된 폐 병변, 즉 CD8 양성 림프구(적색 화살표)의 침윤을 나타낸다.
도 7은 트랜스아미나제의 피크에서 간 유조직을 나타낸다.
도 8은 본 발명의 특정한 투약 용법을 나타낸다.

실시예

하기 실시예는 본 발명을 설명한다. 이들 실시예는 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 해석되어서는 않된다. 당해 실시예는 설명을 위해 포함되며, 본 발명은 특허청구범위에 의해서만 한정된다.

실시예 1

EpCAMxCD3 이중특이성 단일쇄 항체는 EpCAM 양성 표적 세포에 대한 T 세포 특이적 세포독성 및 이에 의해 사이토킨의 방출 및 T 세포 표면 마커의 상향조절에 의해 측정가능한 T 세포의 활성화를 매개한다. 본 방법은 엄격하게 용량 의존적이며, EpCAM 양성 표적 세포의 존재에 전적으로 좌우된다. EpCAMxCD3 이중특이성 단일쇄 항체 MT110의 엄격한 생물학적 효과는 다음과 같이 생체내에서 분석되었다:

건강한 무작위 공여자의 사람 PBMC를, EpCAM을 자연적으로 발현시키는 0.2%, 2% 또는 10% KatoIII 세포의 부재 또는 존재하에 지시된 농도의 EpCAMxCD3 이중특이성 단일쇄 항체와 함께 배양했다. 40시간 동안 37℃로 습윤 배양기에서 배양한 후, 세포를 CD4, CD8 및 CD25에 대한 형광 표지된 항체로 염색하여 효과 세포(CD4 또는 CD8-양성) 및 이들의 활성화 상태(CD25의 드 노보 발현)를 유동식 혈구계산기로 동정했다. CD25⁺ T 세포의 비율을 프리즘 소프트웨어(Graph Pad Software Inc., version 4.02)를 사용하여 BiTE 농도의 대수에 대해 플롯팅했다. 수득된 용량-반응 곡선을 통합된 4개 파라미터 비선형 적합 모델로 분석하여 특이적 생물활성에 대한 지표로서 최대 절반 치사(EC₅₀)의 농도를 계산했다. 100 ng/ml의 EpCAMxCD3 이중특이성 단일쇄 항체를 함유하는 샘플의 상청액은 제조업자의 지시에 따라 사람 Th1/Th2 혈구계산 비드 어레이(CBA) 키트(BD Bioscience)를 사용하여 사이토킨 함량에 대해 분석했다.

EpCAMxCD3 이중특이성 단일쇄 항체의 T 세포 활성화 효능은 도 1에 제시되어 있다. 사람 PBMC에 대한 10% EpCAM⁺ 세포의 첨가는 40시간 이내에 항체 용량-의존적 방식으로 대략 95%의 CD8⁺ 및 85%의 CD4⁺ T 세포의 활성화를 유도하였다. 2% EpCAM⁺ 세포의 첨가는 대략 50%의 CD8⁺ 및 25%의 CD4⁺ T 세포의 중간적 활성을 초래한 반면, 0.2% EpCAM⁺ 세포 단독의 첨가는 시험된 BiTE의 모든 농도에 있어서 효과기 세포 상에서 CD25 발현을 거의 유도하지 못했다. EC50 값은 존재하는 표적 세포의 양이 감소함에 따라 증가했고, 10, 2 및 0.2% katoIII 세포는 CD8⁺ T 림프구의 경우 0.26, 0.99 및 5.98 ng/ml로 존재하고, CD4⁺ T 림프구의 경우 0.8, 2.35 및 3.50 ng/ml로 존재한다. CD25의 BiTE-매개된 상향조절은 사람 PBMC로부터의 IFN-γ, TNF-α 및 IL-10의 방출을 수반했고, 이의 강도는 존재하는 EpCAM 양성 표적 세포의 비율과 관련되었다. CD8⁺ 또는 CD4⁺ T 세포 상에서 어떠한 사이토킨 방출 또는 CD25의 분비도 평가된 BiTE 농도에서 EpCAM⁺ 표적 세포의 부재하에 검출되지 않았다. 이는 EpCAM 풍부 종양 환경에서 EpCAMxCD3 이중특이성 단일쇄 항체의 고효능을 나타내고, 동시에 EpCAM이 T 세포에 직접 접근할 수 없는 조직에서 양호한 내성을 나타낼 수 있다.

실시예 2

전이성 결장암, 위암 또는 폐암을 갖는 환자에서 EpCAM / CD3 - 이중특이성 BiTE 항체의 안전성 및 약리학

1.1 시험 설계

1차 목적: 안전성 및 내성 평가

2차 목적: 약물동태학(PK), 약력학(PD) 및 MT110의 항종양 활성의 평가

환자: EpCAM을 넓게 발현하는 것으로 공지된 국지 진행된, 재발 또는 전이성 고형 종양

- 폐 선암

- 소세포 폐암

- 위암

- 결장암

기타 주요 적용 기준:

표준 치료 옵션은 소진되거나 감퇴된다.

선행 화학요법의 적어도 하나의 과정

ECOG 실행 상태 ≤ 2

환자 정보 및 통지된 동의 형태를 이해하는 능력

기준선 CT 또는 MRI 스캔 상에서 CNS 전이물 또는 CNS 병리의 기타 이력의 증거 없음

호중구수 < 1,500/mm³ (= 1.5 ×109/l)

혈소판수 < 100,000/mm³(= 100 ×109/l)

WBC < 3 ×109/l; 헤모글로빈 < 9.0 g/dl

비정상적인 신장 또는 간 기능 없음

92% 미만의 O² 포화 없음(실온 공기 조건하)

일시적인 방사선치료를 제외한 동시 항-신생물 치료 없음

사람 항-쥐 항체(HAMA)의 부재

1.2 MT110 처리 및 용량 증가

MT110: 2 내지 4주 처리 중단과 함께 질환 진행이 중단될 때까지 연속 정맥내 주입 d1-28 반복 사이클

용량 코호트 ( cohort ): 1일당 1/3/4/10/12/24(현재 진행)㎍에서 MT110

예정된 코호트 B/C에서 추가의 용량 증가(도 2 참조).

DLT의 발생의 의존하여 3+3 설계, 각 코호트에서 각 환자의 제1 사이클 완성후에 용량 증가에 대한 결정.

계획 A, B 또는 C로 수행된 처리

DLT 기준: 적절한 환자 관리에도 불구하고 예정된 것보다 오래 지속되는 임의의 등급 3 또는 4 관련된 AE

동시 투약: MT110 주입 또는 용량 증가 전에 코르티코이드, 항히스타민제, 제산제-허용된 추가의 보조 투약-

1.3 평가

안전성: 안전성 파라미터의 연속 평가(CTCAE 버젼 3.0에 따라 이상 반응(AE) 보고), 1일차 및 2일차에서 적어도 1일당 2회 이상, 3일차에서 1일 1회, 및 1주 및 2주차에서 5회; 및 그 이후 1주 2회.

항종양 활성: 각 처리 사이클 후에 평가(측정가능한 병변의 경우에 RECIST 버젼 1.0에 따름).

PK / PD: PK 분석을 위한 샘플, 사이토킨, 림프구 소집단, 순환 종양 세포 및 면역원성은 예정된 시점에서 수집된다.

EpCAM 발현은 파라핀 삽입 종양 조직에서 분석된다.

2. 결과

2.1 환자 및 MT110 처리

본 출원에 제공된 데이타는 2009년 9월 10일 현재 시험이 진행중이다.

● 22명의 환자에게 MT110 치료를 개시하고, 중간 분석은 다음을 포함한다:

- 20명 환자의 인구통계

- 20명 환자의 안전성 및 약력학

[표 1] 용량 코호트당 환자 인구통계

2.2 안전성 및 내성

이상 반응 요약

● 20명 환자 중의 17명은 적어도 1회의 4주 사이클의 MT110 정맥내 주입을 완결할 수 있었다.

● 관찰된 임상적 이상 반응의 대부분은 주요 질환과 관련되었다.

● MT110과 관련된 비혈액학적 임상 이상 반응은 몇몇 환자에서 미열 및 피로로 구성되었고, 열은 제1 주입 반응과 관련이 없었다.

● MT110과 관련되고 주입후 1주 이내 또는 용량 증가 후에 주로 발생한 실험 변화는 짧은 기간 이루어졌고, 대부분의 경우에 주입 과정 동안 해결되었다. 간 파라미터의 변화는 또한 일시적 및 무증후성이었고; 영상화시의 병적 발견, 실질적인 조직 손상 또는 간의 손상된 합성 파라미터를 동반하지 않았다.

[표2] 3명 이상의 환자에서 발생하는 관련성과 무관한 AE 의 발병률

[표 3] 1명 이상의 환자에서 발생하는 MT110 과 관련된 이상 반응의 발병률

[표 4] 보고된 용량-한계 독성

2.3 약물동태학 프로파일

PK 파라미터의 요약

● MT110에 대한 혈청 반감기는 3.5 내지 6.8시간에서 측정했다.

● 용량 및 체중에 대한 규정화 후에 현재까지 시험된 용량 수준에 대해 용량 선형성을 평가할 수 있다.

2.4 약력학 마커

● 어떠한 환자도 현저한 전신 사이토킨 방출을 나타내지 않았고, 낮은 IL-6 수준은 상이한 시점에서 측정가능했고, IFNγ 및 IL-10의 단일 측정가능한 수준은 몇몇 환자에서 관찰되었다.

● 림프구의 재분포는 모든 환자에서 용량 증가(도 5a)후 뿐만 아니라 MT110 주입 개시후에 관찰되었다.

● T 세포 활성화의 1차 징후는 제1 사이클(도 5b)후에 임상적 잇점을 갖는 환자에서 관찰되었다.

● CellSearch 방법을 통한 순환 종양 세포의 1차 분석은 CRC 환자로부터 7.5ml 샘플당 6개 세포 까지로 나타났다.

2.5 환자의 결과

RECIST 기준에 따르는 종양 평가

● 질환 안정화는 91일의 중간 기간(범위 29+ 내지 150일)으로 제1 사이클후에 18명의 평가가능한 환자 중의 7명에서 관찰되었다.

사건 보고: 생물학적 항종양 활성의 증거

● 환자(여성, 85세)는 시험 참가시에 CRC의 폐에서 전이성 병변을 나타냈다.

● 28일 동안 1 ㎍/d의 MT110으로 처리

● MT110의 개시 80일후에 폐 병변을 외과적으로 절개한 환자, 나타난 병리:

- 당해 병변에서 70% 초과의 괴사 조직(도 6a)

- 종양 조직 내 및 조직 주위에 CD8 양성 세포를 포함하는 다수의 침투성 T-림프구(도 6b)

3. 요약

20명의 적격 환자를 5개의 용량 코호트로 처리하고, 현재까지 총 25회의 MT110-사이클을 제공했다:

● 28일에 걸쳐 MT110 정맥내 주입은 임상적으로 내성이 매우 양호했다:

- 미열 및 피로가 소수의 환자에서 발생했고, 시험 약제와 관련되었다.

- 관련 전신 사이토킨 방출의 어떠한 징후도 관찰되지 않았다.

- 초기의 일시적 림프구감소증 이외에, 간 효소에서 등급 3/4 까지의 일시적 무증후성 증가가, 가장 빈번한 실험실 이상 반응이었다.

● 생물학적 활성의 1차 징후

- MT110은 주입 직후에 림프구의 신속한 재분포를 유발했다. T 세포 확산/활성화의 징후는 4주 후에 임상적 잇점을 갖는 환자에서 관찰되었다.

- RECIST에 따르는 질병 안정화는 18명의 환자 중의 7명에서 확인되었고, 평균 91일 지속했다.

- 1명의 환자에서, 폐 전이를 MT110 처리 개시 11주후에 절개했다. 면역조직화학은 MT110 활성의 가능한 증거로서 종양 세포 괴사 및 거대 T 세포 침식을 나타냈다.

- 어떠한 환자도 MT110에 대한 항체를 나타내지 않았다.

4. 결론

● MT110은 EpCAM-발현 고형 종양이 발병된 환자에게 안전하게 정맥내로 투여할 수 있다.

● 생물학적 활성의 1차 징후는 임상적으로 내성이 양호한 용량에서 관찰되었다.

● 용량 증가시에 BiTE 항체 MT110의 평가는 현재 진행중이다.

실시예 3

연구 MT110 -101에서 MT110 로 처리된 제1 환자 코호트에서 간 파라미터의 변화 비교

하기 표에서, 피크 혈액 수준의 평균 진폭(표 1) 및 평균 혈액 수준 값(표 2)으로 나타낸 간 파라미터의 증가를 MT110 용량, 처리 스케쥴 및 코르티코스테로이드 치료의 의존성에서 각각의 환자 그룹에 대해 분석했다. 아미노트랜스퍼라제 AST 및 ALT는 MT110 주입에 의해 주로 영향을 받는 간 파라미터이다.

개개의 간 파라미터의 피크 혈액 수준의 진폭은 당해 그룹의 각 환자에 대해 각 용량에서 MT110 주입 1주에서 측정한 피크 수준으로부터 스크리닝 평가에서 측정한 기준 값을 공제하여 계산했다. 각 그룹 환자에 대해 수득한 진폭 값을 사용하여 각 그룹에 대한 평균을 계산했다.

평균 혈액 값의 진폭은 당해 그룹의 각 환자에 대해 각 용량에서 MT110 주입 1주의 모든 측정 값으로부터 계산된 평균 수준으로부터 스크리닝 평가에서 측정한 기준 값을 공제하여 계산했다. 각 그룹 환자에 대해 수득한 진폭 값을 사용하여 각 그룹에 대한 평균을 계산했다.

상이한 그룹의 비교는 다음과 같이 요약될 수 있다:

- 추가의 동시 코르티코스테로이드 치료는 1 ㎍/d의 MT110으로 처리한 환자에 대해 간 파라미터(주로 AST 및 ALT)의 증가를 감소시킬 수 있다(그룹 II를 그룹 I과 비교함).

- MT110 용량의 증가에 따라, 간 파라미터의 피크 및 평균 혈액 수준은 동시 코르티코이드 치료에도 불구하고 증가 값을 나타낸다(그룹 V 및 III을 그룹 II와 비교함).

결론: 간 파라미터의 증가는 동시 코르티코스테로이드 치료에 의해 방지할 수 없었다.

- 코르티코스테로이드 용량의 추가의 증가는 또한 용량 증가에 따라 간 파라미터의 증가를 방지할 수 없었다(그룹 IV를 그룹 III과 비교함).

- 저용량의 1주 이내에 및 고용량의 개시 2주에서 MT110 처리의 개시는 제1 주에서 간 효소의 약간의 증가만을 제공한다(그룹 VII를 그룹 V와 비교함).

결론: 용량 증가는 주입 1주 동안 낮은 MT110 개시 용량으로 가능하다.

[표 1] 표준편차 없이 소정 용량에서 제1 처리 주의 피크 및 스크리닝 값의 진폭 평균

[표 2] 표준편차 없이 소정 용량에서 제1 처리 주의 평균 및 스크리닝 값의 진폭 평균

Wk: 주

W1: 1주

Scr: 스크리닝 평가

Cort: 코르티코스테로이드

실시예 4

* A3에서의 보충 종료 대신에 개방 코호트 B1에 대한 위원회 결정 모니터링

++ 코호트 진행

+ 대체된 코호트에서 1명의 환자

△ 용량 한계 독성을 갖는 1명의 환자 포함

실시예 5

<110> Micromet AG <120> Dosage regimen for administering an EpCAMxCD3 bispecific antibody <130> IPA120206 <150> EP 09170715.8 <151> 2009-09-18 <150> US 61/243,651 <151> 2009-09-18 <150> EP 10164596.8 <151> 2010-06-01 <150> US 61/344,147 <151> 2010-06-01 <160> 7 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> vH CDR1 VH5,7 <400> 1 Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr Thr Met His 1 5 10 <210> 2 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> vH CDR2 VH5 <400> 2 Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 3 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> vH CDR3 wt anti-CD3 VH2,3,5,7 <400> 3 Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr 1 5 10 <210> 4 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> vK CDR1 VL 1,2 <400> 4 Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Tyr Met Asn 1 5 10 <210> 5 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> vK CDR2 wt anti-CD3 VL1-3 <400> 5 Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser 1 5 <210> 6 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> vK CDR3 wt anti-CD3 VL1-3 <400> 6 Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr 1 5 <210> 7 <211> 515 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 5-10(VL-VH)xanti-CD3(VH(5)-VL(2)) <400> 7 Met Gly Trp Ser Cys Ile Ile Leu Phe Leu Val Ala Thr Ala Thr Gly 1 5 10 15 Val His Ser Glu Leu Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Thr Val 20 25 30 Thr Ala Gly Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu 35 40 45 Leu Asn Ser Gly Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys 50 55 60 Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu 65 70 75 80 Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe 85 90 95 Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr 100 105 110 Cys Gln Asn Asp Tyr Ser Tyr Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys 115 120 125 Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 130 135 140 Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val 145 150 155 160 Arg Pro Gly Thr Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala 165 170 175 Phe Thr Asn Tyr Trp Leu Gly Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly His Gly 180 185 190 Leu Glu Trp Ile Gly Asp Ile Phe Pro Gly Ser Gly Asn Ile His Tyr 195 200 205 Asn Glu Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser 210 215 220 Ser Thr Ala Tyr Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Phe Glu Asp Ser Ala 225 230 235 240 Val Tyr Phe Cys Ala Arg Leu Arg Asn Trp Asp Glu Pro Met Asp Tyr 245 250 255 Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser 260 265 270 Asp Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 275 280 285 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr 290 295 300 Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 305 310 315 320 Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val 325 330 335 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Thr Thr Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 340 345 350 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 355 360 365 Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 370 375 380 Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Glu Gly Thr Ser Thr Gly Ser Gly 385 390 395 400 Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ala Asp Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser 405 410 415 Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys 420 425 430 Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro 435 440 445 Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser 450 455 460 Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser 465 470 475 480 Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys 485 490 495 Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val 500 505 510 Glu Ile Lys 515

Claims

(a) 제1 용량의 EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 제1 기간 동안 연속 투여하는 단계, 및 이어서 (b) 제2 용량의 상기 항체를 제2 기간 동안 연속 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 상기 제2 용량은 상기 제1 용량을 초과하는,
사람 환자의 EpCAM 양성 상피 암 세포를 치료하는 방법에 사용하기 위한 EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
(a) 제1 용량의 EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 제1 기간 동안 연속 투여하는 단계, 및 이어서 (b) 제2 용량의 상기 항체를 제2 기간 동안 연속 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 상기 제2 용량은 상기 제1 용량을 초과하는,
사람 환자에서 EpCAMxCD3 이중특이성 항체의 연속 (치료학적) 투여에 의해 매개된 의학적 증상, 바람직하게는 부작용을 완화 및/또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 사람 환자가 EpCAM 양성 상피 암 세포를 포함하거나 포함하는 것으로 추정되는, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제1항 내지 제3항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 단계(a)의 투여 경로 및/또는 단계(b)의 투여 경로가 정맥내인, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제2항에 있어서, 상기 의학적 증상, 바람직하게는 상기 부작용이 적어도 하나의 간 효소의 혈청 수준을 증가시킴을 특징으로 하는, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제1항 내지 제5항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 기간이 제1 기간을 초과하는, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제1항 내지 제6항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 기간이 적어도 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 6일 또는 7일(이상), 바람직하게는 7일인, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제1항 내지 제7항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 기간이 적어도 하나의 간 효소의 혈청 수준을 등급 3 또는 4 까지로 증가시킴을 특징으로 하는, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제8항에 있어서, 상기 제1 기간이 상기 간 효소의 혈청 수준 증가를 등급 2로 감소시킬 때까지 지속되는, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제1항 내지 제9항 중의 어느 한 항에 있어서, 적어도 하나의 간 효소의 혈청 수준이 등급 2 이하라면, 상기 제1 기간이 4일인, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제5항 내지 제10항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 적어도 하나의 간 효소가 AST 및/또는 ALT 및 임의로 GGT 및/또는 AP인, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제1항 내지 제11항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 기간이 상기 환자의 CD8+-T-세포가 활성화될 때까지 지속되는, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제12항에 있어서, 상기 활성화가 상기 CD8+-T-세포중 적어도 20%의 CD25 및/또는 CD69-양성 표현형을 특징으로 하는, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제1항 내지 제13항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 기간이 적어도 2주, 3주, 4주, 5주 또는 6주, 바람직하게는 3주인, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제1항 내지 제14항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 기간이 적어도 19일인, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제1항 내지 제15항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 기간이 1 내지 10일이고, 제2 기간이 적어도 19일인, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제16항에 있어서, 상기 제1 기간이 7 내지 9일이고, 제2 기간이 19 내지 21일인, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제17항에 있어서, 제1 기간이 7일이고, 제2 기간이 21일인, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제1항 내지 제18항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 용량이 치료학적으로 활성이 있는, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제19항에 있어서, 상기 제2 용량의 치료학적 활성이 활성화된 CD+-T-세포를 특징으로 하는, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제20항에 있어서, 상기 활성화가 (제2 기간 전에 CD25 및/또는 CD69-양성 표현형과 비교하여) CD8+-T-세포중 적어도 20%의 CD25 및/또는 CD69-양성 표현형을 특징으로 하는, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제1항 내지 제21항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 용량이, 제1 기간 이내에 적어도 하나의 간 효소의 혈청 수준을 등급 3 또는 4의 혈청 수준까지 증가시키고 등급 2의 혈청 수준까지 다시 감소시키도록 하는, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제22항에 있어서, 상기 적어도 하나의 간 효소가 AST 및/또는 ALT 및 임의로 GGT 및/또는 AP인, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제1항 내지 제23항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 용량이 1 내지 6 ㎍/d, 바람직하게는 1 내지 3 ㎍/d인, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제1항 내지 제24항 중의 어느 한 항에 있어서, 제2 용량이 10 내지 120 ㎍/d(또는 치료학적 관련 양상에 따라 요구되는 경우에는 그 이상)인, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제1항 내지 제25항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 용량이 1 내지 3 ㎍/d이고, 제2 용량이 20 내지 90 ㎍/d인, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제1항 내지 제26항 중의 어느 한 항에 있어서, 상기 이중특이성 항체가 단일쇄 항체인, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제1항 내지 제27항 중의 어느 한 항체 있어서, 상기 항체가 MT110인, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제1항 내지 제28항 중의 어느 한 항에 있어서, 추가로 글루코코르티코이드의 (동시) 투여를 특징으로 하는, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제29항에 있어서, 상기 글루코코르티코이드가 프레드니손, 프레드니솔론 및/또는 메틸프레드니솔론인, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제1항 또는 제3항에 있어서, 상기 EpCAM 양성 상피 암 세포가 위장 암 및/또는 폐 암 세포인, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제31항에 있어서, 상기 위장 암이 위암, 결장암 또는 이의 전이암 변이체이고, 상기 폐 암이 소세포 폐암, 비소세포 폐암 또는 이의 전이암 변이체인, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
(a) EpCAMxCD3 이중특이성 항체를, 적어도 하나의 간 효소의 혈청 수준을 등급 4 이하(바람직하게는 등급 3)로 증가시킨 다음 등급 2로 감소시키도록 연속 투여하는 단계, 및 이어서
(b) 상기 항체를 치료학적 활성이 있도록 투여하는 단계를 포함하는,
(i) EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 사람 환자에게 투여하거나,
(ii) 사람 환자에서 EpCAM 양성 상피 세포 암을 치료하거나,
(iii) 사람 환자에게 EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 투여함으로써 매개된 의학적 증상을 완화 또는 예방하는 방법.
(i) EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 사람 환자에게 투여하거나,
(ii) 사람 환자에서 EpCAM 양성 상피 암 세포를 치료하거나,
(iii) 사람 환자에게 EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 투여함으로써 매개된 의학적 증상을 완화 또는 예방하기 위한 EpCAMxCD3 이중특이성 항체로서,
상기 항체는 제1항 내지 제33항 중의 어느 한 항에서 정의된 투약 용법에 따라 투여되는, EpCAMxCD3 이중특이성항체.
(i) EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 사람 환자에게 투여하거나,
(ii) 사람 환자에서 EpCAM 양성 상피 암 세포를 치료하거나,
(iii) 사람 환자에게 EpCAMxCD3 이중특이성 항체를 투여함으로써 매개된 의학적 증상을 완화 또는 예방하기 위한 EpCAMxCD3 이중특이성 항체로서,
상기 항체는 제1항 내지 제34항 중의 어느 한 항에서 정의된 방법에 따라 투여되는, EpCAMxCD3 이중특이성 항체.
제1항 내지 제35항 중의 어느 한 항에서 정의된 방법에 사용되는 약제학적 조성물을 제조하기 위한 EpCAMxCD3 이중특이성 항체의 용도.
제1항 내지 제35항 중의 어느 한 항에서 정의된 제1 용량 및 제2 용량을 포함하는 약제학적 팩키지 또는 키트.
제37항에 있어서, 제1 및/또는 제2 용량을 환자에게 투여하는 수단을 추가로 포함하는, 약제학적 팩키지 또는 키트.
제37항 및 제38항에 있어서, 상기 제1 및/또는 제2 용량이, 제1항 내지 제35항 중의 어느 한 항에 따르는 투여/투약 용법에 적합하도록 배열되는, 약제학적 팩키지.