KR20120081803A - 구강질환 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents

구강질환 예방 또는 치료용 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR20120081803A
KR20120081803A KR1020110003139A KR20110003139A KR20120081803A KR 20120081803 A KR20120081803 A KR 20120081803A KR 1020110003139 A KR1020110003139 A KR 1020110003139A KR 20110003139 A KR20110003139 A KR 20110003139A KR 20120081803 A KR20120081803 A KR 20120081803A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
composition
fraction
formula
oral
compound
Prior art date
Application number
KR1020110003139A
Other languages
English (en)
Inventor
박남희
김양춘
최재석
최인순
Original Assignee
신라대학교 산학협력단
기장물산 (주)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 신라대학교 산학협력단, 기장물산 (주) filed Critical 신라대학교 산학협력단
Priority to KR1020110003139A priority Critical patent/KR20120081803A/ko
Publication of KR20120081803A publication Critical patent/KR20120081803A/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A47—FURNITURE; DOMESTIC ARTICLES OR APPLIANCES; COFFEE MILLS; SPICE MILLS; SUCTION CLEANERS IN GENERAL
    • A47G—HOUSEHOLD OR TABLE EQUIPMENT
    • A47G21/00—Table-ware
    • A47G21/10—Sugar tongs; Asparagus tongs; Other food tongs
    • A47G21/103—Chop-sticks
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A47—FURNITURE; DOMESTIC ARTICLES OR APPLIANCES; COFFEE MILLS; SPICE MILLS; SUCTION CLEANERS IN GENERAL
    • A47G—HOUSEHOLD OR TABLE EQUIPMENT
    • A47G2400/00—Details not otherwise provided for in A47G19/00-A47G23/16
    • A47G2400/02—Hygiene
    • A47G2400/025—Avoiding contact with unclean surfaces
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B02—CRUSHING, PULVERISING, OR DISINTEGRATING; PREPARATORY TREATMENT OF GRAIN FOR MILLING
    • B02C—CRUSHING, PULVERISING, OR DISINTEGRATING IN GENERAL; MILLING GRAIN
    • B02C23/00—Auxiliary methods or auxiliary devices or accessories specially adapted for crushing or disintegrating not provided for in preceding groups or not specially adapted to apparatus covered by a single preceding group
    • B02C23/08—Separating or sorting of material, associated with crushing or disintegrating

Landscapes

  • Cosmetics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

본 발명은 항균 활성을 가진 화합물 및 이의 용도에 관한 것으로, 보다 구체적으로 파래로부터 유래된 화합물 및 이의 용도에 관한 것이다.
상기 화합물은 본 발명을 통하여 구강 질환의 원인이 되는 미생물, 특히 치은염의 주 원인균인 프레보텔라 인터메디아(Prevotella intermedia)에 대한 항균 활성과 치주염의 주 원인균인 포피로모나스 긴기발리스(Porphyromonas gingivalis)에 대한 항균 활성이 우수하여 치주염 및 치은염을 포함한 구강 질환에 대한 치료, 예방 또는 개선 효과가 인정되고, 오랫동안 식용으로 사용하였던 잎파래 추출물로부터 분리된 것으로 안전성이 인정되며, 본 발명의 기술은 풍부한 해양 자원 특히 최근 과도한 생산이 문제되는 파래를 이용하여 고부가가치 제품을 생산할 수 있는 기술이므로, 이러한 점에서 본 발명은 그 산업적 가치가 매우 크다 할 것이다.

Description

구강질환 예방 또는 치료용 조성물{COMPOSITION FOR TREATING OR PREVENTING ORAL BACTERIAL INFECTION DISEASES}
본 발명은 구강질환 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 치주염 또는 치은염의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
치과 의학상 충치, 치주염 및 치은염 등을 포함하는 다양한 구강질환은 여러 가지 원인에 의해 발병할 수 있다. 상기 원인은 전신적인 원인 및 국소적인 원인으로 나눌 수 있는데, 보다 중요한 원인은 국소적인 원인인 것으로 알려져 있다. 국소적인 원인으로 가장 중요한 것은 구강 내에 상주하는 세균 즉, 병원성 미생물이다.
한편, 자연계에는 수 만 종에 이르는 미생물들이 각종 생태계에 폭 넓게 서식하고 있으며, 이러한 미생물들은 여러 질병 및 오염의 원인이 되기도 한다. 예를 들어, 사람의 구강 내에는 현재까지 밝혀진 바에 의하면 약 300 여종의 미생물이 치아표면, 치근부의 치아와 잇몸사이, 혀의 표면 등에 상주하고 있는 것으로 알려져 있으며, 이러한 미생물의 존재는 적절한 구강위생 활동이 이루어지는 경우 정상적 현상이라 할 수 있다.
그러나, 적절한 구강위생 활동이 이루어지지 아니하는 경우, 상기한 미생물 중 병원성 미생물에 의해 충치, 구취, 치은염 또는 치주질환 등 각종 구강질환이 야기될 수 있으며, 심한 경우 치아를 상실할 수도 있다. 일 예로, 구강 내에 상주하는 병원성 미생물의 발효작용에 의해 치아에 부착된 음식찌꺼기의 당분이나 전분 등의 탄수화물이 분해되어 생기는 젖산이 치아 경조직의 석회를 탈각시켜 충치가 발생할 수 있고, 혐기성 병원균체들이 대량 증식하는 경우 다양한 구강질환의 원인이 될 수 있다.
보다 상세하게는, 구강 내에 상주하는 병원성 미생물은 치아표면에 부착하여 몇 시간만 지나면 치태라고 하는 세균군집을 형성하고 증식하게 되며, 처음에는 눈에 보이는 치은 상부의 치아 표면에 집중적으로 병원성 미생물이 부착하여 치태를 형성하지만, 점차 진행되면 치은하부에 있는 치아표면에도 치태가 형성되게 된다. 상기 치태가 치아표면에서 형성될 경우, 상기 병원성 미생물은 구강 내에 들어온 당분을 이용하여 산을 생산하고 이 산은 치아의 주 성분인 무기질을 탈회시킴으로써 치아가 파괴되는 충치를 유발할 수 있다.
한편, 치은하부 치태에 있는 세균들 중 특히 혐기성 그람음성 미생물들은 독소, 단백질 분해효소 등을 분비하여 치주조직을 직접 파괴하거나 우리 몸의 면역세포들과 반응함으로써 다양한 면역물질의 생산을 유도하고 이들 물질이 치주조직의 염증과 파괴를 초래할 수 있다.
치아나 치주조직은 한번 파괴되면 치료는 될 수 있지만, 원래의 조직 상태로 복구되지는 않는다는 점에서 그 심각성이 있고, 따라서 이들 국소원인의 대표적 요인인 병원성 미생물이 구강 내에서 번식하는 과정을 근본적으로 차단하는 것이 구강질환을 예방 또는 신속히 치료하는 방법일 수 있다.
상기와 같은 구강질환을 유발하는데 가장 중요한 역할을 하는 미생물로는 스트렙토코커스 뮤탄스(Steptococcus mutans), 포피로모나스 긴기발리스(Porphyromonas gingivalis) 또는 프레보텔라 인터메디아(Prevotella intermedia) 등이 있다.
따라서, 종래 상기 미생물들에 대한 살균 및 정균작용을 갖는 항생제를 포함한 다양한 종류의 항균제제가 충치, 치주질환 또는 치은염 등의 억제 및 치료제로써 개발되어 왔다.
그러나, 치은염이나 치주염과 같은 일부 구강질환의 경우 이들을 치료 또는 예방하기 위하여 개발된 항생제 혹은 화학약품은 매우 제한적이므로, 대부분의 경우 치주질환수술 등의 수술요법이나 기계적 요법에 의해 치료하고 있으며, 그 예방을 위한 방법은 제한적으로 제안되고 있다.
또한, 항생제의 경우 설사, 구토 등을 포함한 신체 전반에 대한 전신적인 부작용을 일으킬 수 있고, 구강 내 내성균의 출현 및 균교대증을 유발할 수 있기 때문에 장기적인 사용이 곤란하여 단지 치료제만으로 이용될 수 있는 단점이 있다. 예를 들어, 현재 널리 사용되고 있는 항생제인 클로로헥시딘(cholrohexidin)은 고농도로 구강 내에 사용하거나 혹은 저농도로 오랫동안 사용할 경우, 혀나 치아에 착색을 일으키고, 구강점막이 벗겨지거나, 미각이상을 일으키는 등의 부작용이 발생할 수 있으며, 균교대증이 유발될 수 있는 부작용이 있고, 발암성이 있어 임산부의 경우 사용이 제한된다는 단점이 있다. 또한, 트리클로산(triclosan)의 경우, 세포독성이 높아 장기간 사용시 부작용의 우려가 높고 내성균주의 발현이라는 문제점이 있다.
이 외에 항균제인 불소의 경우는 충치예방효과는 뚜렷하지만 아직까지 치주나 치수, 치근단 질환에 대한 효과는 보고된 바 없고, 치약이나 구강청정제에 사용되고 있는 항균제제인 생쿠이나린(Sangquinarine)은 구강 내에서 세균에 대한 효과가 불분명하고 가격이 비싸다는 단점이 있으며, 리스테린(Listerine)은 알코올이 주성분으로 실제 구강 내에서는 일시적인 효과 내지는 약간의 정균작용만이 인정되고, 장기간 사용시 조직에 대해 위해 작용이 나타날 수 있다는 단점이 있으며, 최근 미백제로 사용되는 퍼록사이드(Peroxide)의 경우 세균에 대한 독성이 있으나, 동시에 인체조직에도 독작용을 나타내어 안정성에 문제가 있다는 문제점이 있다.
따라서, 수술요법이나 기계적 요법에 비하여 그 예방 또는 치료가 용이하고, 장기간 사용하여도 항생제와 같이 내성이나 안정성에 대한 문제가 대두되어지지 아니하며, 부작용도 문제되지 아니하는 천연물질 유래의 구강질환 예방 또는 치료 조성물을 개발하는 것이 시급한 실정이다.
특히, 3면이 바다여서, 해양자원이 풍부한 우리나라의 지리적 환경을 고려하면 해양 동식물을 포함한 해양 천연물질로부터 구강질환을 예방 또는 치료할 수 있는 조성물을 개발하고자 하는 요구가 증가되고 있다.
일 예로, 파래의 경우 양식을 통해 연간 800톤 정도 생산되나, 주로 1차 가공 식품으로밖에 이용되지 않아, 생산금액을 기준으로 약 10억원 정도의 생산금액을 나타내고 있다. 또한, 최근에는 제주도 연안에서 파래의 과잉번식으로 인한 환경오염 등의 문제가 제기되고 있다.
따라서, 상기 파래류와 같은 예로부터 식용으로 사용해오던 해조류로부터 기능성 물질을 분리하여 해조 산업을 고부가가치화하기 위한 연구에 대해 긴급한 필요성이 요구되고 있다.
본 발명은 상기와 같은 종래기술의 문제점을 개선하기 위한 것으로, 해조류로부터 유래한 화합물을 유효성분으로 포함하는 구강질환 예방 또는 치료용 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다. 또한, 본 발명은 상기 해조류로부터 유래한 화합물을 제조하는 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
또한, 본 발명은 해조류로부터 유래한 화합물을 유효성분으로 포함하는 프레보텔라 인터메디아(Prevotella intermedia) 및 포피로모나스 긴기발리스(Porphyromonas gingivalis)로 이루어진 군에서 선택된 1 이상에 대한 항균 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
또한, 본 발명은 상기 화합물의 용도, 구체적으로 치료용 용도를 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 과제의 해결 수단, 청구범위, 실시예 및 도면에 의해 보다 명확하게 된다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 파래로부터 유래한 화합물을 유효성분으로 포함하는 프레보텔라 인터메디아(Prevotella intermedia) 및 포피로모나스 긴기발리스(Porphyromonas gingivalis)로 이루어진 군에서 선택된 1 이상에 대한 항균 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 파래로부터 상기 해조류로부터 유래한 상기 프레보텔라 인터메디아 및 포피로모나스 긴기발리스로 이루어진 군에서 선택된 1 이상에 대한 항균 활성을 가진 화합물을 제조하는 방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 파래로부터 유래한 화합물을 유효성분으로 포함하는 구강질환 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 파래로부터 유래한 화합물을 유효성분으로 포함하는 구강질환 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다. 본 발명의 식품 조성물의 예로는 식품, 식품첨가제, 음료 또는 음료첨가제를 들 수 있다.
또한, 본 발명은 파래로부터 유래한 화합물을 유효성분으로 포함하는 구강질환 예방 또는 개선용 구강 위생 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 화합물의 용도, 구체적으로 치료용 용도를 제공한다.
상기 화합물의 용도는 프레보텔라 인터메디아 및 포피로모나스 긴기발리스에 대한 항균 용도일 수 있고, 상기 치료의 대상이 되는 질병은 구강질환, 바람직하게는 치주염 또는 치은염일 수 있다. 또한, 상기 화합물의 용도는 상기 구강질환의 예방 또는 개선을 위한 식품일 수 있다. 또한, 상기 화합물의 용도는 상기 구강질환의 예방 또는 개선을 위한 위생 조성물일 수 있다.
본 발명자들은 프레보텔라 인터메디아 및 포피로모나스 긴기발리스에 대한 항균 활성이 우수한 잎파래 추출물에 대하여 추가적인 연구를 진행하던 중, 상기 프레보텔라 인터메디아 및 포피로모나스 긴기발리스에 대해 항균활성이 우수한 화합물을 정제하여, 그 구조를 확인한 결과, 상기 화합물이 스테아리돈 산(stearidonic acid)임을 확인하여 본 발명을 완성하였다. 본 발명의 조성물에 포함되는 유효성분은 상기 스테아리돈 산 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 수화물의 형태로 포함될 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어 파래란 해조류의 일종으로 파래 속(Enteromorpha sp) 식물을 의미한다. 상기 파래 속 식물이란 녹조식물 갈파래과에 속하는 식물로, 잎파래(E. linza), 창자파래(E. intestinalis), 납작파래(E. compressa), 가시파래(E. prolifera) 또는 격자파래(E. clathrata) 등이 포함될 수 있으며, 바람직하게는 잎파래일 수 있다.
상기 파래 속 식물은 대부분 원통 모양을 한 엽상체가 분지하거나 단조이고, 종류에 따라서는 상부가 엽상으로 퍼질 수 있으며, 분류학적으로는 중공인 원통 모양을 한 종류를 이 속에 포함시키고 있다. 이들은 주로 바닷가의 조간대 상부, 특히 민물이 흘러들어오는 곳에서 잘 자라며, 조용한 조수웅덩이 따위에서 큰 군락을 이루는 경우가 많다. 주로 늦가을부터 초여름까지 번식하며, 한국과 일본 등지에서는 식용으로 사용된다.
상기 잎파래(Enteromorpha linza)는 녹조식물 갈파래과의 바닷말에 속하는 녹조류로 엽체는 길쭉하고 편평한 엽상체이고, 단조이며, 하부는 더러 조금의 가지를 부출하는 경우가 있다. 전 세계에 널리 분포하고, 한국의 경우, 전 연안에 분포하고 있으며, 조간대 상부의 바위 또는 만내의 목공사물에 주로 서식한다. 또한, 잎파래는 식용으로 주로 이용되며 김치 또는 국거리로 이용되기도 한다.
본 명세서에 사용되는 용어 “약제학적으로 허용가능한 염”은 투여대상 유기체에 심각한 자극을 유발하지 않고 화합물의 생물학적 활성과 물성들을 손상시키지 않는, 제형을 의미하고, 예컨대 암모니움 염, 알칼리 금속염, 알칼리 토금속염, 전이금속염, 4차 아민 염 또는 아미노산 염 등이 있으나, 반드시 이에 제한되는 것은 아니다.
본 명세서에 사용되는 용어 “수화물(hydrate)”은 비공유적 분자간력(non-covalent intermolecular force)에 의해 결합된 화학양론적(stoichiometric) 또는 비화학양론적(non-stoichiometric) 량의 물을 포함하고 있는 형태를 의미한다.
본 명세서에 사용되는 용어 “용매화물”은 비공유적 분자력간에 의해 결합된 화학양론적 또는 비화학양론적 량의 용매를 포함하고 있는 형태를 의미한다. 상기 용매는 휘발성, 비독성 및/또는 인간에게 투여되기에 적합한 용매들이다.
본 명세서에 사용되는 용어 “약제학적 유효량”은 질병의 치료 효과 또는 치료제의 약리학적 효과를 나타내는데 필요한 양을 의미한다.
본 명세서에서 사용되는 “구강질환”이란 구강에 살고 있는 각종 세균에 의해 발생되는 질병을 의미하고, 구체적으로 스트렙토코커스 뮤탄스(Steptococcus mutans), 포피로모나스 긴기발리스(Porphyromonas gingivalis), 프레보텔라 인터메디아(Prevotella intermedia), 액티노바실러스 액티노마이세템코미탄스(Actinobacillus actinomycetemcomitans) 또는 칸디다 알비칸스(Candida albicans)를 포함하는 칸디다 속(Candida spp.)의 병원성 미생물에 의해 발병되는 치주염, 치은염, 충치, 구강 내 점막궤양, 구취, 구강건조증 및 아구창으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나를 포함하는 구강 내 질환을 의미할 수 있다. 상기 구강질환은 바람직하게는 치은염, 치주염 또는 충치일 수 있고, 더욱 바람직하게는 치은염 또는 치주염일 수 있다.
본 명세서에 사용되는 용어 “항균 조성물”이란 항미생물제를 총칭하는 의미인 항생제와 같은 의미일 수 있고, 항균제, 살균제, 방부제, 보존제 또는 제균제와 같은 의미일 수 있으며, 바람직하게는 구강 질환의 원인이 되는 스트렙토코커스 뮤탄스(Steptococcus mutans), 포피로모나스 긴기발리스(Porphyromonas gingivalis), 프레보텔라 인터메디아(Prevotella intermedia), 악티노바실러스 악티노마이세템코미탄스(Actinobacillus actinomycetemcomitans) 또는 칸디다 알비칸스(Candida albicans)를 포함하는 칸디다 속(Candida spp.) 미생물, 더욱 바람직하게는 포피로모나스 긴기발리스 또는 프레보텔라 인터메디아 등을 포함하는 병원성 미생물의 발육과 생활 기능을 저지 또는 억제할 수 있는 물질을 의미한다.
본 명세서에 사용되는 용어 “식품”은 인간이 섭취하기 위한 것 또는 인간이 먹을 수 있는 모든 재료의 총칭을 의미한다. 상기 식품(food)은 영양소를 한 가지 또는 그 이상 함유하고 유해한 물질을 함유하지 않는 천연물 또는 가공품과 가공품의 원재료를 모두 포함하는 개념으로, 일 예로 식품가공품, 어육제품, 두부류, 묵류, 건강보조식품, 조미식품, 제빵 및 제과류, 유가공품, 절임식품, 발효식품 또는 음료 등이 이에 포함된다.
이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.
본 발명의 한 측면에 있어서, 본 발명은 하기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물, 하기의 화학식 1의 구조를 갖는 화합물의 약학적으로 허용되는 염, 하기의 화학식 1의 구조를 갖는 화합물 또는 그 염의 수화물 또는 용매화물을 유효성분으로 포함하는 항균 조성물일 수 있다.
[화학식 1]
Figure pat00001
상기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물은 6, 9, 12, 15-옥타데카테트라에노익 산(6, 9, 12, 15-octadecatetraenoic acid, C18:4 ω-3 PUFA(polyunsaturated fatty acid)) 또는 스테아리돈 산(stearidonic acid, SA) 또는 모록트 산(moroctic acid)라 불리울 수 있다. 상기 스테아리돈산은 EPA(eicosapentaenoic acid, 20:5n-3) 또는 DHA(docosahexaenoic acid, 22:6n-3)와 같이 탄소수 20 내지 22(C20-22)의 불포화지방산(polyunsaturated fatty acid, PUFA)으로 이어지는 대사경로에서 알파 리놀렌산(alpha-linolenic acid, ALA)의 첫 번째 물질 대사의 산물을 구성하는 불포화 지방산이다.
상기 항균 조성물은, 조성물 총 중량에 대하여 상기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물을 0.001 내지 99.99중량%, 바람직하게는 0.1 내지 99 중량%로 포함할 수 있으며, 상기 항균 조성물의 사용방법 및 사용목적에 따라 유효성분의 함량을 적절히 조절할 수 있다.
상기 항균 조성물은 미생물, 바람직하게는 구강 질환의 원인이 되는 미생물, 구체적으로 스트렙토코커스 뮤탄스, 포피로모나스 긴기발리스, 프레보텔라 인터메디아, 악티노바실러스 악티노마이세템코미탄스 및 칸디다 알비칸스를 포함하는 칸디다 속 미생물로 이루어진 군 중에서 선택된 1종 이상의 미생물, 보다 바람직하게는 포피로모나스 긴기발리스 및 프레보텔라 인터메디아로 이루어진 군중에서 선택된 1종 이상의 미생물에 대한 항균 활성을 갖는 것일 수 있다.
상기 포피로모나스 긴기발리스는 치주질환의 가장 중요한 원인균으로 black pigmented bacteroides(BPB)이고, 그람음성균이며, 혐기성 세균이고, 운동성이 없는 비당분해성의 간균이다. 또한, 태생적으로 일부 항생제에 대하여 저항성을 갖는 동시에 다른 많은 항생제에 저항성을 획득하는 경향을 보이는 세균으로서, 구강 세균 중에서 가장 강하고 많은 독성인자를 갖고 있는 세균 중 하나이다. 상기 독성인자들의 종류는 포피로모나스 긴기발리스의 외막에 있는 내독소와 콜라겐분해효소, 탈인산분해효소 등이 있다. 치주질환 환자의 치주병소 내에서 상기 포피로모나스 긴기발리스의 수가 증가되는 것을 확인할 수 있고, 치주질환이 진행됨에 따라 열구상피에 침투하는 포피로모나스 긴기발리스가 빈번히 발견되는 것으로 보고되고 있다. 또한, 상기 포피로모나스 긴기발리스는 치주치료를 하면 감소되거나 제거되며, 치주질환이 재발하는 병소에서는 또 다시 발견되는 것으로 보고되고 있다.
상기 프레보텔라 인터메디아는 혐기성 세균으로, 성인성 치주염이나 임신성 치은염 등과 같은 여러 가지 종류의 치주질환에 원인균 중의 하나로 알려져 있고, 상기 포피로모나스 긴기발리스와 달리 건강한 치주를 가진 성인에게서도 발견되는 것으로 보고되고 있다.
상기 화학식 1의 화합물은 우수한 항균, 특히 포피로모나스 긴기발리스 및 프레보텔라 인터메디아에 대한 우수한 항균 활성을 보여주면서도, 식용으로 오랫동안 사용되어온 파래, 구체적으로 잎파래로부터 분리된 성분으로 인체에 안전하다는 장점이 있다.
본 발명의 항균 조성물은 인간을 포함한 동물에 직접 적용되어 항균 활성을 나타낼 수 있다. 상기 동물은 식물에 대응하는 생물군으로 주로 유기물을 영양분으로 섭취하며, 소화나 배설 및 호흡기관이 분화되어 있는 것을 말하고, 바람직하게는 포유류 또는 조류일 수 있다.
상기 항균 조성물은 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 외에 당질, 단백질, 지질, 비타민류 및 미네랄 류를 더욱 포함할 수 있다.
상기 당질은 그 사용 목적 및 용도에 따라 적의 선택될 수 있으며, 일예로 벌꿀, 덱스트린, 수크로오스, 팔라티노스, 포도당, 과당, 물엿, 당알콜(sugar alcohol), 소르비톨, 크실리톨, 말티톨일 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 단백질은 그 사용 목적 및 용도에 따라 적의 선택될 수 있으며, 일예로, 카제인(casein), 유청 단백질(whey protein) 등의 우유 유래 단백질, 대두 단백질, 이들 단백질의 트립신, 펩신 등의 동물 유래 효소 및 뉴트라아제(neutrase), 알칼라아제(alkilase)에 의한 가수분해물일 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 지질은 그 사용 목적 및 용도에 따라 적의 선택될 수 있으며, 일예로, 제1가 포화지방산, 다가 불포화지방산을 포함하는 해바라기유, 채종유(rapeseed oil), 올리브유, 홍화유(safflower oil), 옥수수유, 대두유, 팜유(palm oil), 야자유 등의 각종 식물 유래 유지, 중쇄 지방산(middle-chain fatty acid), EPA, DHA, 대두유래 인지질, 우유 유래 인지질일 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 비타민류는 특별한 제한은 없으며, 상기 미네랄류는 그 사용 목적 및 용도에 따라 적의 선택될 수 있으며, 일예로, 인산칼륨, 탄산칼륨, 염화칼륨, 염화나트륨, 유산칼슘, 글루콘산칼슘, 판토텐산칼슘, 카제인칼슘, 염화마그네슘, 황산제1철, 탄산수소나트륨일 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 당질, 단백질, 지질, 비타민류 및 미네랄류 중 어느 것에 대해서도, 조성물의 항균성이 유지되는 한 상기 구체예에 한정되지 않고 다른 성분을 포함할 수 있으며, 각각의 함량은 항균 활성이 유지되는 한 제한되지 아니하고, 바람직하게는 전체 조성물 대비 0.1 내지 15 중량%, 바람직하게는 0.5 내지 10 중량%일 수 있다.
상기 항균 조성물은 항균 활성이 요구되는 다양한 목적 및 용도로 사용될 수 있으며, 상기 항균 활성의 대상이 되는 미생물인 구강질환의 원인균, 구체적으로 포피로모나스 긴기발리스 또는 프레보텔라 인터메디아와 관련된 구강질환, 바람직하게는 충치, 치주염 및 치은염으로 이루어진 군에서 선택된 1 이상, 더욱 바람직하게는 치주염 및 치은염으로 이루어진 군에서 선택된 1 이상의 질환에 대한 치료, 예방 및 개선 효과를 갖는다.
따라서, 상기 항균 조성물은 상기 구강 질환의 원인이 되는 미생물의 감염에 의한 질병, 바람직하게는 충치, 치주염 및 치은염으로 이루어진 군에서 선택된 1 이상의 질환의 예방 또는 치료용 조성물, 상기 구강 질환의 원인이 되는 미생물의 감염에 의한 질병을 예방 또는 개선하기 위한 식품 조성물 또는 상기 구강 질환의 원인이 되는 미생물의 감염에 의한 질병을 완화하기 위한 목적의 세정용 조성물을 포함한 화장료 조성물이나 외용 조성물의 유효성분으로 사용될 수 있다.
본 발명의 또 다른 측면에 있어서, 본 발명은 상기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물, 상기의 화학식 1의 구조를 갖는 화합물의 약학적으로 허용되는 염, 상기의 화학식 1의 구조를 갖는 화합물 또는 그 염의 수화물 또는 용매화물을 유효성분으로 포함하는 구강질환 예방 또는 치료용 조성물일 수 있다.
상기 구강질환이란 치주염, 치은염, 충치, 구강 내 점막궤양, 구취, 구강건조증 및 아구창으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나를 포함하는 구강 내 질환을 의미할 수 있다. 상기 구강질환은 바람직하게는 치은염, 치주염 또는 충치일 수 있고, 더욱 바람직하게는 치은염 또는 치주염일 수 있다.
상기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물은 실시예에 의해 확인된 결과, 포피로모나스 긴기발리스 및 프레보텔라 인터메디아에 대한 항균 활성을 가지고 있으므로, 상기 구강질환의 원인균에 의한 구강질환, 바람직하게는 충치, 치주염 및 치은염으로 이루어진 군에서 선택된 1 이상, 더욱 바람직하게는 치주염 및 치은염으로 이루어진 군에서 선택된 1 이상의 질환에 대한 예방 및 치료 효과를 갖는다.
본 발명에 있어서, 치은염(gingivitis)은 구강점막의 일부인 잇몸에 염증이 발생하는 것으로 종창, 발적, 통증 또는 국소 열감의 증세가 나타나고, 심한 경우, 궤양 또는 괴저가 발생할 수 있는 질환을 의미하며, 주 원인균은 혐기성 세균인 프레보텔라 인터메디아인 것으로 보고되어 있다. 따라서, 상기 치은염을 치료하기 위하여는 원인균인 프레보텔라 인터메디아에 대한 항균활성이 있는 물질을 처방할 수 있다.
본 발명에 있어서, 치주염(periodontitis)은 치주위염이라고도 하며, 잇몸과 골성조직(bony tissue)에 주로 발병하는 질병으로, 만성 감염증이 될 경우, 세포조직이 파괴됨으로써 치아를 잃게 되는 치주질환을 의미하며, 주 원인균은 그람음성 균인 포피로모나스 긴기발리스인 것으로 보고되어 있다. 따라서, 상기 치주염을 치료하기 위하여는 원인균인 포피로모나스 긴기발리스에 대한 항균활성이 있는 물질을 처방할 수 있다.
상기 구강질환 예방 또는 치료용 조성물 및 항균 조성물은 인간을 포함한 동물에 직접 적용될 수 있다. 상기 동물은 식물에 대응하는 생물군으로 주로 유기물을 영양분으로 섭취하며, 소화나 배설 및 호흡기관이 분화되어 있는 것을 말하고, 바람직하게는 척추동물, 더욱 바람직하게는 포유류 또는 조류, 더더욱 바람직하게는 포유류일 수 있다. 구체적으로는 상기 포유류는 인간, 돼지, 소, 개, 고양이, 말 또는 염소 등일 수 있다.
상기 구강질환 예방 또는 치료용 조성물은 상기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물, 상기의 화학식 1의 구조를 갖는 화합물의 약학적으로 허용되는 염, 상기의 화학식 1의 구조를 갖는 화합물 또는 그 염의 수화물 또는 용매화물을 유효성분으로 단독으로 포함할 수 있고, 이외 제형, 사용방법 및 사용목적에 따라 추가성분 즉, 약제학적으로 허용되거나 영양학적으로 허용되는 담체, 부형제, 희석제 또는 부성분을 추가로 포함할 수 있다. 일 예로, 상기 추가성분은 일 예로 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 중진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등일 수 있다.
상기 추가성분은 상기 구강질환 예방 또는 치료용 조성물에 독립적으로 또는 조합하여 추가될 수 있다. 상기 추가성분의 함량은 상기 유효성분 100 중량부 당 0.1 내지 20 중량부 범위에서 추가될 수 있으나, 상기 추가성분의 함량은 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 상기 구강질환 예방 또는 치료용 조성물은 상기 구강질환 예방 또는 치료 효과, 구체적으로 포피로모나스 긴기발리스 및 프레보텔라 인터메디아로 이루어진 군 중에서 선택된 1종 이상의 균에 대한 항균 활성 또는 상기 균의 감염에 의한 질환의 치료제로서의 효능 증진을 위해 다른 약학적 활성성분과 조합하여 투여될 수 있다.
상기와 같이 추가성분 또는 다른 약학적 활성 성분과 함께 사용되는 경우, 상기 구강질환 예방 또는 치료용 조성물 내 상기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물, 상기의 화학식 1의 구조를 갖는 화합물의 약학적으로 허용되는 염, 상기의 화학식 1의 구조를 갖는 화합물 또는 그 염의 수화물 또는 용매화물의 함량은 0.001 내지 99 중량%일 수 있다. 상기 조성물 내 상기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물, 상기의 화학식 1의 구조를 갖는 화합물의 약학적으로 허용되는 염, 상기의 화학식 1의 구조를 갖는 화합물 또는 그 염의 수화물 또는 용매화물 즉, 유효성분의 함량이 0.001 중량% 미만인 경우 효과적인 효능을 위해선 다량의 투여가 필요할 수 있으며, 99 중량% 초과하는 경우 사용량에 비해 효능이 일정할 수 있어 비경제적일 수 있다. 또한, 사용방법 및 사용목적에 따라 상기 구강질환 예방 또는 치료용 조성물은 유효성분의 함량을 적절히 조절할 수 있다.
상기 구강질환 예방 또는 치료용 조성물에 있어서, 상기 유효성분은 상기 약학 조성물 또는 상기 구체적 질환의 치료 또는 예방용 조성물 내에 단독으로 사용될 수 있으며, 그 외 약제학적으로 허용 가능한 담체, 부형제, 희석제 또는 부성분을 추가로 포함할 수 있다. 보다 상세하게는, 상기 구강질환 예방 또는 치료용 조성물이 약제로 사용되거나, 의약 또는 약학적 용도로 사용되는 경우, 상기 유효성분은 통상적인 방법에 따라 약제적으로 허용되는 담체 또는 부형제와 혼합하거나 희석제로 희석하여 사용될 수 있다.
상기 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제의 예로는, 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로즈, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸하이드록시벤조에이트, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유, 덱스트린, 칼슘카보네이트, 프로필렌글리콜, 리퀴드 파라핀 및 생리식염수로 이루어진 군에서 선택된 1 이상을 들 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니며 통상의 담체, 부형제 또는 희석제 모두 사용가능하다.
또한, 상기 구강 질환 예방 또는 치료용 조성물은 통상의 충진제, 증량제, 결합제, 붕해제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, pH 조절제, 영양제, 비타민, 전해질, 알긴산 및 그의 염, 펙트산 및 그의 염, 보호성 콜로라이드, 글리세린, 향료, 유화제 또는 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다. 상기 성분들은 상기 유효성분에 독립적으로 또는 조합하여 추가될 수 있다.
또한, 상기 구강 질환 예방 또는 치료용 조성물은 상기 약학 조성물이 의도하는 약리 효과를 갖는 것으로 알려지거나 상기 약리 효과를 위하여 사용되는 공지의 물질을 더욱 포함할 수 있다. 보다 구체적으로, 상기 구강 질환의 치료 또는 예방용 조성물은 상기 유효성분 이외에 구강 질환의 치료 또는 예방, 일 예로 치주염 또는 치은염의 치료 또는 예방 효과가 있는 것 또는 포피로모나스 긴기발리스 및 프레보텔라 인터메디아로 이루어진 군중에서 선택된 1종 이상의 균에 대한 항균 활성이 있는 것으로 알려지거나 사용되는 공지의 물질을 더욱 포함할 수 있다.
상기 조성물이 약제로 사용하는 경우 투여방법은 경구 또는 비경구 모두 가능하며, 일 예로는 경구, 경피, 피하, 정맥 또는 근육을 포함한 여러 경로를 통해 투여될 수 있다.
또한, 상기 약학 조성물 또는 상기 구체적 질환의 치료 또는 예방용 조성물의 제형은 사용방법에 따라 달라질 수 있으며, 포유동물에 투여된 후 활성 성분의 신속, 지속 또는 지연된 방출을 제공할 수 있도록 본 발명이 속하는 기술 분야에서 잘 알려진 방법을 사용하여 제형화 될 수 있다.
일반적으로는, 경구 투여를 위한 고형제제에는 정제(TABLETS), 알약, 연질 또는 경질 캅셀제(CAPSULES), 환제(PILLS), 산제(POWDERS) 및 과립제(GRANULES) 등이 포함되고, 이러한 제제는 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제(SUSTESIONS), 내용액제, 유제(EMULSIONS) 및 시럽제(SYRUPS) 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제 예를 들면, 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
더 나아가, 본 발명의 조성물은 당해 기술 분야의 공지된 적절한 방법을 사용하여 또는 레밍턴의 문헌(Remington's Pharmaceutical Science(19th ed., 1995), Mack Publishing Company, Easton PA)에 개시되어 있는 방법을 이용하여 제형화될 수 있다.
상기 조성물의 투여량은 투여방법, 복용자의 연령, 성별, 환자의 중증도, 상태, 체내에서 활성 성분의 흡수도, 불활성율 및 병용되는 약물을 고려하여 결정할 수 있으며, 일 예로 1일 유효성분을 기준으로 하였을 때 0.001 mg/kg(체중) 내지 100 mg/kg(체중), 0.01 mg/kg(체중) 내지 50 mg/kg(체중) 또는 0.1 mg/kg(체중) 내지 10 mg/kg(체중)으로 투여할 수 있으며, 예컨대 1일 유효 투여량은 통상적으로 성인(70 kg)의 경우, 10 내지 5000 mg/kg 또는 100 내지 3000 mg/kg일 수 있다. 또한, 상기 조성물의 투여횟수는 하루 1 내지 수회 투여될 수 있으며, 일 예로 하루 1 내지 3회 투여될 수 있다. 상기 투여량과 투여횟수는 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
상기 투여량은 여러 가지 조건에 따라 변동가능하기 때문에, 상기 투여량에 가감이 있을 수 있다는 사실은 당업자에게 자명하며, 따라서 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다. 또한, 투여횟수는 원하는 범위 내에서 하루에 1회, 또는 수회로 나누어 투여할 수 있으며, 투여 기간도 특별히 한정되지 않는다.
본 발명의 유효성분, 보다 구체적으로 화학식 1의 구조를 갖는 화합물은 치주염과 치은염의 원인 균주인 포피로모나스 긴기발리스 및 프레보텔라 인터메디아에 대해 우수한 항균 활성을 가질 뿐만 아니라 오랜 시간 식용으로 사용된 잎파래로부터 추출된 것이므로 그 안전성이 긍정되어 장기간 복용하여도 부작용 등의 문제가 발생되지 않을 수 있다는 장점이 있다.
본 발명의 또 다른 측면에 있어서, 본 발명은 상기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물을 유효성분으로 포함하는 구강질환 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다. 본 발명의 식품 조성물의 예로는 식품, 식품첨가제, 음료 또는 음료첨가제를 들 수 있다.
상기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물을 유효성분으로 포함하는 식품 조성물은 그 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.
본 명세서에서 식품이라 함은 영양소를 한 가지 또는 그 이상 함유하고 있는 천연물 또는 가공품을 의미하며, 바람직하게는 어느 정도의 가공 공정을 거쳐 직접 먹을 수 있는 상태가 된 것을 의미하며, 통상적인 의미로서, 식품, 식품 첨가제, 건강 기능성 식품 및 음료를 모두 포함하는 의도이며, 바람직하게는 껌 또는 캔디일 수 있다.
본 발명의 상기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물을 첨가할 수 있는 식품으로는 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 캔디, 차, 비타민 복합제, 기능성 식품 등이 있다. 추가로, 본 발명에서 식품에는 특수영양식품(예, 조제유류, 영,유아식 등), 식육가공품, 어육제품, 두부류, 묵류, 면류(예, 라면류, 국수류 등), 건강보조식품, 조미식품(예, 간장, 된장, 고추장, 혼합장 등), 소스류, 과자류(예, 스넥류), 유가공품(예, 발효유, 치즈 등), 기타 가공식품, 김치, 절임식품(각종 김치류, 장아찌 등), 음료(예, 과실,채소류 음료, 두유류, 발효음료류, 아이스크림류 등), 천연조미료(예, 라면 스프 등), 비타민 복합제, 알코올 음료, 주류 및 그 밖의 건강보조식품류를 포함하나 이에 한정되지 않는다. 상기 식품, 음료 또는 식품첨가제는 통상의 제조방법으로 제조될 수 있다.
본 발명에서 기능성 식품이란 식품에 물리적, 생화학적, 생물 공학적 수법 등을 이용하여 해당 식품의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 식품군이나 식품 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체조절 기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 식품을 의미하며, 바람직하게는 본 발명의 기능성 식품은 구강질환의 예방 또는 개선에 관한 체조절 기능을 생체에 대하여 충분히 발현할 수 있는 식품을 의미한다. 상기 기능성 식품에는 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함할 수 있으며, 기능성 식품의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.
본 발명에서 음료란 갈증을 해소하거나 맛을 즐기기 위하여 마시는 것의 총칭을 의미하며 기능성 음료를 포함하는 의도이다. 상기 음료는 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물을 유효성분으로 포함하는 것 외에 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기의 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어 포도당, 과당 등 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 수크로스 등 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상기한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100㎖ 당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 5 내지 12g이다. 그밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일 주스, 과일 주스 음료, 야채 음료의 제조를 위한 과육을 추가로 함유할 수 있다.
상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 이러한 성분을 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 상기 첨가제는 본 발명의 상기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물 100 중량부 당 0.00001 내지 20,000,000 중량부, 바람직하게는 0.01 내지 1,000,000 중량부 일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에서 기능성 음료란 음료에 물리적, 생화학적, 생물 공학적 수법 등을 이용하여 해당 음료의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 음료 군이나 음료 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체조절 기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 음료를 의미한다.
상기 기능성 음료는 지시된 비율로 필수 성분으로서 본 발명의 상기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어 포도당, 과당 등 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 수크로스 등 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상기한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물은 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0 중량부 내지 20 중량부, 바람직하게는 1 중량부 내지 18 중량부, 더욱 바람직하게는 5 중량부 내지 12 중량부 포함될 수 있다.
또한, 구강질환의 예방 또는 개선의 효과를 목적으로 하는 식품 조성물에 있어서, 상기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물의 양은 전체 식품 중량의 0.00001 중량% 내지 1 중량%로 포함될 수 있으며, 음료 조성물의 경우 식품 전체의 부피 100 mL를 기준으로 0.000001 g 내지 10 g, 바람직하게는 0.0001 g 내지 1 g의 비율로 포함될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 또 다른 측면에 있어서, 본 발명은 상기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물을 유효성분으로 포함하는 구강질환 예방 또는 개선용 구강 위생 조성물을 제공한다. 본 발명의 구강 위생 조성물의 예로는 치약류, 바람직하게는 치약, 양치용액, 구강세척제, 치약크림 또는 로렌지 등일 수 있다.
본 발명의 구강 위생 조성물이 치약류인 경우, 유효성분으로 상기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물을 포함하는 외에, 연마제, 점결제, 보습제, 발포제, 감미료, 미백제 또는 향미제를 추가로 포함할 수 있다.
상기 연마제로는 수산화알루미늄, 무수규산, 규산알루미늄, 제2인산칼슘 2 수산화물 및 무수물, 제3인산칼슘, 탄산칼슘, 피로인산칼슘, 불용성 메타인산나트륨, 제3인산마그네슘, 탄산마그네슘, 황산칼슘, 폴리메타아크릴산메틸 등을 단독 또는 복합적으로 사용할 수 있다. 상기 연마제의 함량은 전체 조성물을 기준으로 통상 20 중량% 내지 90중량%일 수 있으나, 상기 함량에 의해 한정되는 것은 아니다.
상기 구강 위생 조성물이 페이스트상 조성물일 경우에는 상기 점결제는 가라기닌, 각종 점증용 셀룰로오스 유도체, 잔탄검, 트라가칸트 검(tragacanth gum) 등의 검류, 폴리비닐 알콜, 폴리아크릴산 나트륨, 폴리아크릴산/말레인산 공중합체, 카르복시비닐 폴리머 등의 합성 고분자 유도체 등의 유기계 점결제와 실리카, 라포나이트 등의 무기계 점결제 등을 단독 또는 복합적으로 사용할 수 있다. 상기 점결제의 함량은 전체 조성물을 기준으로 통상 0.3 중량% 내지 5 중량%일 수 있으나, 상기 함량에 의해 한정되는 것은 아니다.
또한, 상기 구강 위생 조성물에는 그 제조시 보습제로 솔비톨, 글리세린, 에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 폴리에테르 글리콜, 폴리프로필렌 글리콜 등을 추가로 포함할 수 있다.
또한, 상기 구강 위생 조성물에는 향료 또는 감미제 등을 추가로 포함할 수 있다. 상기 감미제는 수크로즈, 락토오즈, 말토오즈, 솔비톨, 크실리톨, 나트륨시클라메이트, 글리세린, 사카린나트륨, 스테비오사이드, 아스파탐 등일 수 있고, 상기 향료는 페퍼민트, 멘톨, 아네톨, 오이게놀, 리모넨, 시트로네놀, 알파터피네올, 살리실메틸, 시네올, 리나롤, 에틸리나롤, 바닐린, 티몰, 스피아민트유, 세지유, 로즈마리유, 계피유 등일 수 있으며, 상기 감미제 또는 향료는 단독으로 또는 복합적으로 사용될 수 있다.
또한, 본 발명의 구강 위생 조성물에는 발포성분으로 사용되는 계면활성제나 추가 효능성분이 단독으로 또는 복합적으로 포함될 수 있다. 상기 발포성분으로 사용되는 계면활성제는 음이온 계면활성제, 비이온 계면활성제 및 양이온 계면활성제로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나일 수 있다.
본 발명의 구강 위생 조성물이 치약인 경우에는, 유효성분으로 상기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물을 포함하는 것을 제외하고는 통상적인 치약 제조방법으로 제조될 수 있으며, 본 발명의 구강 위생 조성물이 양치용액인 경우에는 통상적인 용액제에 상기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물을 혼합하고 양치용액으로 제형화하여 제조될 수 있으며, 하루 2 내지 10회 구강을 세척함으로써 구강질환을 예방 또는 치료할 수 있다.
또한, 본 발명의 구강 위생 조성물이 치약크림인 경우에는, 물과 보습제를 포함하는 액체, 겔화제 또는 수불용성 광택제, 감미료, 향료 등을 추가로 포함할 수 있다.
또한, 본 발명의 구강 위생 조성물이 구강 세척제인 경우에는, 치약 담체, 보다 상세하게는, 비독성 알콜을 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 또 다른 측면에 있어서, 본 발명은 상기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물의 용도를 제공한다. 상기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물의 용도가 질병의 치료와 관련된 용도인 경우에는 상기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물의 용도는 상기의 화학식 1의 구조를 갖는 화합물의 약학적으로 허용되는 염, 상기의 화학식 1의 구조를 갖는 화합물 또는 그 염의 수화물 또는 용매화물의 용도일 수 있다.
구체적으로, 본 발명은 상기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물의 질환 치료와 관련된 용도, 보다 구체적으로 구강 질환, 일 예로 치주염 또는 치은염의 치료 또는 구강 질환 미생물에 대한 항균 용도일 수 있다. 또한, 상기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물의 용도는 구강 질환, 구체적으로 치주염 또는 치은염의 개선 또는 예방용 용도일 수 있으며, 상기 용도는 일 예로 구강 위생 조성물의 유효성분 등에 대한 용도일 수 있다.
본 발명의 다른 측면에 있어서, 본 발명은 상기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 화합물은 도 1에 도시된 방법에 의해 제조될 수 있지만, 이들 예로만 한정되는 것은 아니다.
구체적으로, 상기 화합물은 파래 추출물을 제조하는 단계; 상기 파래 추출물로부터 파래 분획물을 제조하는 단계 및 상기 파래 분획물로부터 상기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물을 분리하는 단계를 포함하는 방법으로 제조할 수 있다.
상기 파래 추출물을 제조하는 단계는 파래, 바람직하게는 잎파래를 세척하는 과정; 상기 세척한 잎파래를 건조하여 잎파래 건조시료를 제조하는 과정 및 상기 잎파래 건조시료에 에탄올 또는 에탄올 수용액을 첨가하고 추출하는 과정을 포함하는 방법으로 수행할 수 있다.
상기 잎파래를 세척하는 과정은 잎파래의 염분 및 불순물을 제거하기 위하여 유수를 이용하여 잎파래를 세척하는 방법으로 수행할 수 있다. 상기 잎파래 건조시료를 제조하는 과정은 상기 잎파래를 열풍건조법, 냉동건조법 또는 자연건조법 등으로 건조하는 방법으로 수행할 수 있고, 추가로 상기 건조된 잎파래를 분쇄기 또는 세절기 등을 이용하여 분쇄하는 과정을 더 수행할 수 있다. 상기 추출하는 과정은 용매 추출법으로 수행할 수 있고, 상기 용매는 에탄올 또는 50% 내지 99% 또는 75% 내지 80%의 에탄올 수용액일 수 있으며, 상기 용매 추출법은 상온 또는 10℃ 내지 55℃ 또는 15℃ 내지 30℃에서 수행할 수 있다. 상기 추출하는 과정은 상기 용매 추출법을 통하여 수득한 추출액을 감압 농축하는 과정 및 동결 건조 과정으로부터 이루어진 군 중에서 선택된 1 이상을 수행하는 과정을 더욱 포함할 수 있다.
상기 파래 추출물로부터 파래 분획물을 제조하는 단계는 상기 파래 추출물에 황산을 가하여 pH를 pH 2 내지 pH 6, 바람직하게는 pH 3 내지 pH 4로 조절한 후에, 클로로포름을 가하고 분획과정을 수행하여 유기층의 분획물을 수득하는 방법으로 수행할 수 있다.
상기 파래 분획물로부터 상기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물을 분리하는 단계는 상기 파래 분획물, 구체적으로 파래 클로로포름 분획물에 대해 전개용매를 이용한 겔 크로마토그래피법을 수행하는 과정 및 상기 겔 크로마토그래피법을 수행하여 수득한 분획에 대해 고성능액체크로마토그래피(High Performance Liquid Chromatography)를 수행하여 상기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물을 정제하는 과정을 포함하는 방법으로 제조할 수 있다.
상기 전개용매를 이용한 겔 크로마토그래피법과 관련하여, 상기 전개용매는 에탄올 또는 메탄올일 수 있고, 상기 전개용매를 이용한 용출 속도는 0.5 mL/min 내지 1.5 mL/min 또는 0.8 mL/min 내지 1.2 mL/min일 수 있으며, 상기 컬럼은 TE 컬럼(column)일 수 있다. 상기 고성능액체크로마토그래피와 관련하여, 상기 컬럼은 C18 컬럼(column)일 수 있고, 상기 용매는 95% 아세토니트릴(acetonitrile)일 수 있으며, 상기 유속은 3.5 mL/min 내지 4.5 mL/min 또는 3.8 mL/min 내지 4.2 mL/min일 수 있다. 상기 고성능액체크로마토그래피에 있어서 용출시간은 바람직하게는 5분 내지 7분 30초, 더욱 바람직하게는 5분 45초 내지 6분 45초일 수 있다.
본 발명의 화합물은 치은염의 원인균인 프레보텔라 인터메디아(Prevotella intermedia)에 대한 우수한 항균 활성을 갖고 있을 뿐만 아니라, 치주염의 원인균인 포피로모나스 긴기발리스(Porphyromonas gingivalis)에 대한 우수한 항균 활성을 갖는 있으므로, 구강질환에 대한 우수한 예방 또는 치료용 효과가 있을 뿐만 아니라, 기존의 항생물질과는 달리 식용으로 사용하고 있는 해조류인 파래에서 유래된 것이므로, 상기 화합물을 유효성분으로 포함하는 항균 조성물 또는 치료용 조성물은 기존 치주염 또는 치은염 치료제와 달리 부작용 등이 문제되지 아니하고, 풍부한 해조류인 파래의 부가가치를 향상시킨 사용방법을 제안하는 것이므로 경제적으로도 유리하여 산업적으로 그 효과가 매우 크다 할 것이다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 본 발명의 일 실시예에 따른 잎파래의 추출물 및 분획물을 제조하고 이로부터 유효성분을 확인하여, 본 발명의 화합물을 제조하는 공정을 나타내는 흐름도이다. 도 1의 화살표는 정제과정의 흐름을 나태내고, 붉은색으로 표시된 화살표는 본 발명의 화합물의 정제 과정을 나타낸다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 컬럼 크로마터그래피 분획물인 S14에 대한 고성능액체크로마토그래피(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)를 수행한 결과를 나타낸 그래프이다. 상기 그래프에서 가로축은 용출시간을 나타내고, 각각의 Peak는 HPLC 분획(Sub-fraction)을 나타낸다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 고성능액체크로마토그래피 분획물인 S14-2의 분자량을 분석하기 위하여, LC QDECA XP(Thermo Finnigan) 분석기기를 보유한 한국기초과학연구소(KBSI, KOLAS 국제공인시험기관, 대한민국)에 의뢰하여 ESI-MS를 수행한 결과를 나타내는 그래프이다. 상기 그래프에서 (A)는 Positive mode의 결과를 나타내고, 상기 (B)는 Negative mode의 결과를 나타낸다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 FT-NMR을 통해 구조 분석한 결과를 나타낸 그래프로, 상기 도 4a는 Proton(1H) NMR 스펙트럼을 나타낸 그래프이고, 상기 도 4b는 Carbon(13C) NMR 스펙트럼을 나타낸 그래프이며, 상기 도 4c는 1H-1H COSY NMR 스펙트럼을 나타낸 그래프이고, 상기 도 4d는 HMQC NMR 스펙트럼을 나타낸 그래프이며, 상기 도 4e는 HMBC NMR 스펙트럼을 나타낸 그래프이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 S14-2 분획 및 스테아리돈 산(stearidonic acid, SA)에 대해 각각 GC/MS를 수행한 결과를 나타내는 그래프이다. 상기 그래프에서 (A)는 스테아리돈 산(stearidonic acid, SA) 표준물질의 결과를 나타내고, 상기 (B)는 S14-2 분획의 결과를 나타낸다.
도 6은 본 발명의 일 실시예에 따른 S14-2 분획 및 스테아리돈 산(stearidonic acid, SA)에 대해 각각 고성능액체크로마토그래피(HPLC)를 수행한 결과를 나타내는 그래프이다. 상기 도 6a는 메탄올 용매(methanol solvent)에 대한 HPLC 결과를 나타낸 그래프이고, 상기 도 6b는 S14-2 분획 및 스테아리돈 산 표준물질의 HPLC 결과를 나타낸 그래프로, 상기 그래프에서 (A)는 스테아리돈 산(stearidonic acid, SA) 표준물질의 결과를 나타내고, (B)는 S14-2 분획의 결과를 나타낸다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것은 아니다.
잎파래로부터 구강질환 미생물에 대한 항균활성을 갖는 물질을 분리 정제하기 위하여 도 1과 같은 방법으로 실험을 수행하였다. 보다 구체적으로, 각 과정은 다음과 같다.
실시예 1: 잎파래 분획물의 제조
실시예 1-1: 잎파래 분획물의 제조
시험에 사용한 잎파래는 2009년 제주도에서 수확한 것을 사용하였다. 상기 잎파래는 엽상체의 부착생물을 제거한 후, 깨끗한 담수로 씻어 자연 건조하였다. 상기 건조된 잎파래를 마쇄기를 이용하여 분쇄하여 분말 시료를 제조하였다.
상기 분쇄한 잎파래 분말 150g에 대해 10배량의 80% 에탄올을 가하여 교반하면서 하루 동안 상온에서 추출하여 조추출액을 제조하였다. 상기 조추출액을 여과하고 남은 잔류물(잔사)에 상기 잔류물의 10배량의 80% 에탄올을 첨가하여 상기와 같은 방법으로 2회 더 추출하여 여액을 합하였다. 상기 수득한 조추출액을 여과하여, 수득한 여액을 감압증발기(EYELA N-1100, Tokyo Rikakikai Co, 일본)를 사용하여 감압 농축하여 1/10 부피의 농축액을 제조하여, 에탄올 추출물을 제조하였다.
상기 잔류된 고상의 잔류물은 건조과정을 수행하였다. 상기 건조된 고상의 잔류물에 에틸아세테이트 100ml를 가하고 추출과정을 수행한 후에, 여과하여 에틸아세테이트 분획물(분획물 I)과 잔류된 고상의 잔류물을 수득하였다. 상기 수득한 고상의 잔류물을 건조시킨 후에, 상기 건조시킨 잔류물에 100 ℃의 물 100ml를 가하고, 30분간 추출과정을 수행하여 물 분획물(분획물 II)을 제조하였다.
또한, 상기 조추출액을 여과하여 수득한 에탄올 추출물에 2M 황산을 가하여 pH를 pH 3으로 조절하였다. 상기 pH를 조절한 추출물에 클로로포름 100ml을 가하고 추출과정을 수행하는 과정을 각 3회 반복하여 유기층의 분획물을 수득하여 클로로포름 분획물(분획물 III)을 제조하였다. 상기 유기층을 분리한 수용액층에 암모니아용액을 가하여 pH를 pH 10으로 조절하였고, 상기 pH를 조절한 수용액층에 클로로포름과 에탄올을 중량을 기준으로 3:1로 혼합한 혼합용매 100ml를 가하고 2회 추출과정을 수행한 후에, 추가로 클로로포름 100ml를 가하고 1회 추출과정을 수행한 유기층의 분획물을 혼합한 유기층의 분획물을 수득하여 클로로포름과 에탄올 혼합액의 분획물(분획물 IV)을 제조하였다.
상기 클로로포름과 에탄올 혼합액의 분획물을 수득하고 남은 잔류 수용액층을 완전히 증발시켜 건조한 후, 상기 건조물에 에탄올 100ml을 가하고 추출과정을 수행하여 에탄올 분획물(분획물 V)을 수득하였다.
상기 수득한 각각의 분획물은 0.22μm 필터를 이용하여 제균 처리를 수행하고, 상기 제균 처리된 분획물의 농도를 40mg/ml로 조절하였으며, 상기 농도를 조절한 분획물은 사용 시까지 급속 냉동고(deep freezer)에서 -20℃로 보관하였다.
이때, 얻어진 분획물의 총량 및 분획수율은 하기 표 1에 기재된 바와 같다.
분획물 종류 weigh(g) 수율(%) 성상 색
분획물 I(물 분획물) 5.0 3.33 점액성 액체 짙은 녹색
분획물 II(에틸아세테이트 분획물) 0.6 0.40 액체 짙은 녹색
분획물 III(클로로포름 분획물) 4.4 2.93 액체 갈색
분획물 IV(클로로포름과 에탄올 혼합액의 분획물) 0.2 0.13 액체 갈색
분획물 V(에탄올 분획) 10 6.66 액체 노란색
상기 표 1에 기재된 바와 같이, 분획물의 수율은 분획물 V가 가장 우수하고, 분획물 I 및 분획물 III이 우수한 것으로 확인되었다.
상기 실시예 1-1에서 제조된 잎파래 분획물에 대하여, 평판배지 확산법(Agar diffusion method) 및 최소저지농도(Minimum Inhibitory Concentration, MIC)를 측정하는 방법으로 치은염의 원인균인 프레보텔라 인터메디아(Prevotella intermedia)과 치주염의 원인균인 포피로모나스 긴기발리스(Porphyromonas gingivalis)에 대한 항균활성을 측정하였다.
실시예 1-2: 잎파래 분획물의 항균활성의 측정(1)
상기 항균활성을 측정하기 위한 프레보텔라 인터메디아 균주는 Korean Collection for Type Culture(Deajeon, Korea)에서 분양하는 Prevotella intermedia KCTC 25611를 사용하였고, 포피로모나스 긴기발리스 균주는 Achi-gakuin University Graduate School of dentistry(Nagoya, Japan)에서 치주질환 환자에서 분리하여 수득한 Porphyromonas gingivalis 381을 사용하였다. 상기 두 균주는 모두 37℃로 유지된 혐기성 챔버(Anaerobic chamber)인 Bactron Ⅳ Chamber(SHELLAB, USA)에서 배양하였으며, 배양을 위한 혐기조건은 5% CO2, 10% H2, 및 85% N2로 유지하였고, 배양배지는 하기 조성의 배지를 사용하였다.
배양배지의 조성 : Tryptic Soy Agar (TSA, Difco Laboratories, USA) with 5% defibrinated Sheep Blood +5.0 mg/L (final) hemin (H5533, Sigma Chemical Co. USA) solution +1.0 mg/L (final) menadione (M5625, Sigma Chemical Co. USA) solution.
상기 평판배지 확산법은 종이 디스크(paper disk)를 사용하여 평판배지 확산법으로 수행하였다.
구체적으로, 종이 디스크는 상기 실시예 1-1에서 제조된 분획물(분획물 I 내지 분획물 V) 5mg 씩을 각각 30 μL 용매를 이용하여 녹이고, 상기 분획물 용액을 직경 8mm, 두께 1.5mm의 종이 디스크(paper disk, Advantec Filter Paper, Toyo Roshi Kaisha Ltd, Japan)에 50 μL씩 흡수시킨 후에, 용매를 완전히 증발시켜 제조하였다. 상기 용매는 각각의 분획용매와 동일한 것을 사용하였다.
상기 제조된 종이 디스크를 각 병원균, 구체적으로는 상기 실시예 2-1의 Prevotella intermedia KCTC 25611와 상기 Porphyromonas gingivalis 381가 도말된 상기 조성을 가진 Tryptic Soy Agar 평판배지에 올려 놓고, 혐기성 조건으로 37℃에서 48시간 배양하여 평판배지 확산법을 수행하였다.
상기 항균활성의 측정은 종이 디스크(paper disk) 주변에 형성된 원형 발육 저지환의 크기(mm 단위)를 측정하고 비교하는 방법으로 수행하였고, 모든 시험은 독립적으로 3회 반복하였다. 상기 측정 결과의 평균값을 항균 활성 값으로 하기 표 2 및 표 3에 기재하였으며, 대조예 및 비교예로 아무런 시료를 사용하지 아니한 대조예와 항생제인 가나마이신(Kanamycin)을 0.5 mg 사용한 비교예를 사용하였다. 상기 치은염의 원인균인 프레보텔라 인터메디아에 대한 항균 활성의 결과를 표 2에 나타내고, 상기 치주염의 원인균인 포피로모나스 긴기발리스에 대한 항균 활성의 결과를 표 3에 나타내었다. 하기 표에 기재된 수치는 저해환의 직경에서 디스크의 직경 8mm의 크기를 제외한 값((측정값 - 8mm)/2)이다.
종류 분획물 대조예 비교예
I II III IV V
평균(mm) 0 1.3 2.3 4.0 0 0 0
오차(mm) - ±0.15 ±0.15 ±0 - - -
종류 분획물 대조예 비교예
I II III IV V
평균(mm) 0 1.0 1.6 4.3 0 0 0
오차(mm) - ±0.1 ±0.2 ±0.15 - - -
상기 표 2 및 표 3에 나타낸 바와 같이, 잎파래 분획물의 경우, 에틸아세테이트 분획물인 분획물 Ⅱ, 클로로포름을 분획용매로 이용한 분획물 Ⅲ 및 클로로포름과 에탄올을 중량을 기준으로 3:1로 혼합한 혼합용매를 이용한 분획물 Ⅳ의 경우 치은염에 대한 치은염의 원인균인 프레보텔라 인터메디아 및 치주염의 원인균인 포피로모나스 긴기발리스에 대한 우수한 항균 활성을 나타내었다.
실시예 1-3: 잎파래 분획물의 항균활성의 측정(2)
상기 실시예 1-2로부터 항균 활성이 우수한 것으로 확인된 분획물 Ⅱ, 분획물 Ⅲ 및 분획물 Ⅳ에 대하여 액체배지감수성실험(Broth Microdilution Susceptibility Tests)법을 이용하여 상기 분획물의 농도를 2배씩 연속희석(two-fold serial dilution)하면서 상기 시료의 최소저지농도(Minimum Inhibitory Concentration, MIC)를 측정하는 방법으로 최소저지농도를 통한 항균 활성을 비교하여 측정하였다.
상기 액체배지감수성 실험법은 NCCLS Guide Line M11-A6을 응용하였다(National Committee for Clinical Laboratory Standards, Methods for antimicicrobial susceptibility testing of anaerobic bacteria; Approved Standard. NCCLS Document M11-A6. Villanova, Pa, NCCLS(2004)).
보다 상세하게는, 최소저지농도를 측정하기 위한 시료는 상기 항균 활성이 우수한 것으로 확인된 분획물 Ⅱ, 분획물 Ⅲ 및 분획물 Ⅳ에 대하여 무균 여과처리를 수행한 후에, 최고 농도 5 mg/mL에서 최저 9.76 μg/mL에 이르도록 10% DMSO(dimethyl sulfoxide, Sigma, USA) 생리식염수를 용매로 사용하여 단계적으로 2배씩 연속희석하여 제조하였다.
또한, 대상 시험균주인 프레보텔라 인터메디아와 포피로모나스 긴기발리스의 대상 균액은 상기 균주를 활성화시키기 위해, defibrinated Sheep Blood(5%), hemin (5.0 gL/L), menadione (1.0 mg/L)를 첨가한 Tryptic Soy 액체배지에서 24시간 동안 전배양하고, 맥파란(Mcfarland) 0.5로 탁도를 조절한 후에, 상기 균주의 세포수가 약 1×106 CFU/mL가 되도록 희석액인 상기 액체배지를 이용하여 희석하여 준비하였다.
상기 최종농도가 약 1×106 CFU/mL가 되도록 조절한 대상 균액을 96-well U-form micro plate(Falcon, USA)의 각 well에 100μL를 넣고, 상기 2배씩 연속희석하여 제조한 시료를 차례대로 각 well에 100μL씩 첨가하였다. 상기 well의 한 줄은 blank로서 균액 대신 배지를 주입하였으며, 대조구로서 상기 시료 대신 상기 액체배지를 100μL씩 넣었다.
상기 시료를 첨가한 후, 37℃의 조건에서 혐기성 배양기(anaerobic incubator)를 이용하여 2일간 배양한 후, 균의 성장 정도를 육안 및 도립현미경(Inverted microscope TMS, Nikon)으로 관찰하여 최소저지농도(MIC)를 결정하였고, 모든 시험은 독립적으로 3회 반복하였다. 상기 실험에 의해 측정된 최소저지농도(MIC)의 평균값으로 나타낸 프레보텔라 인터메디아에 대한 각 시료의 최소저지농도는 표 4에 나타내었고, 최소저지농도(MIC)의 평균값으로 나타낸 포피로모나스 긴기발리스에 대한 각 시료의 최소저지농도는 표 5에 나타내었다.
분획물 II 분획물 III 분획물 IV
농도(㎍/ml) 1250 625 625
농도(%) 125.0 62.5 62.5
분획물 II 분획물 III 분획물 IV
농도(㎍/ml) 312 156 156
농도(%) 31.2 15.6 15.6
상기 표 4 및 표 5에 나타낸 바와 같이, 프레보텔라 인터메디아와 포피로모나스 긴기발리스에 대한 에틸아세테이트 분획물인 분획물 Ⅱ의 최소저지농도는 클로로포름을 분획용매로 이용한 분획물 Ⅲ 및 클로로포름과 에탄올을 중량을 기준으로 3:1로 혼합한 혼합용매를 이용한 분획물 Ⅳ의 2배이어서, 상기 분획물 Ⅲ 및 상기 분획물 Ⅳ의 최소저지농도가 각각의 균주에 대해 가장 낮은 것으로 확인되었다.
실시예 2: 잎파래 분획물의 유효성분의 정제
상기 실시예 1로부터 항균 활성이 가장 우수할 뿐만 아니라 분획물의 수율도 가장 우수한 것으로 확인된 클로로포름을 분획용매로 이용한 분획물 Ⅲ을 이용하여, 잎파래 분획물의 유효성분을 정제하였다.
실시예 2-1: 잎파래 분획물의 크로마토그래피 분획(1)
우선, 상기 분획물 Ⅲ을 sephadex LH-20 gel column(25-100μ, 85.5g, 2.2cm i.d. × 90cm)에서 메탄올을 전개용매로 사용하여 유속 1mL/min으로 용출하였다. Void volume은 110mL이고, 각 10mL씩 총 20개의 분획물을 분취하여, falcon tube에 담았고, 상기 샘플명을 S1 내지 S20으로 명명하였다.
상기 각각의 분획물에 대하여 무균 여과처리를 수행한 후에, 최고 농도 625 μg/mL에서 최저 9.76 μg/mL에 이르도록 10% DMSO(dimethyl sulfoxide, Sigma, USA) 생리식염수를 용매로 사용하여 단계적으로 2배씩 연속희석하여 제조하였다.
상기 2배씩 연속희석하여 제조한 시료를 상기 실시예 1-3의 방법에 따라 프레보텔라 인터메디아와 포피로모나스 긴기발리스의 액체 배양배지에 첨가한 후, 37℃의 조건에서 혐기성 배양기(anaerobic incubator)를 이용하여 2일간 배양한 후, 균의 성장 정도를 육안 및 도립현미경(Inverted microscope TMS, Nikon)으로 관찰하여 최소저지농도(MIC)를 결정하였고, 모든 시험은 독립적으로 3회 반복하였다. 상기 실험에 의해 측정된 최소저지농도(MIC)의 평균값으로 나타낸 프레보텔라 인터메디아 및 포피로모나스 긴기발리스에 대한 각 시료의 최소저지농도는 표 6에 나타내었다.
sephadex fraction NO. MIC 농도(㎍/ml)
Prevotella intermedia Porphyromonas gingivalis
S 20 1250 312.5
S 19 1250 78.12
S 18 - 1250
S 17 - 625
S 16 625 625
S 15 156.25 36.06
S 14 78.12 19.53
S 13 78.12 36.06
S 12 156.25 36.06
S 11 156.25 312.5
S 10 312.5 312.5
S 9 312.5 312.5
S 8 312.5 625
S 7 312.5 625
S 6 1250 1250
S 5 1250 1250
S 4 1250 625
S 3 1250 625
S 2 - 625
S 1 - 1250
상기 표 6에 나타낸 바와 같이, 프레보텔라 인터메디아에 대해서는 S13 및 S14 분획이 가장 우수한 것으로 확인되었고, 포피로모나스 긴기발리스에 대한 각 시료의 최소저지농도를 확인한 결과 S14가 가장 우수한 것으로 확인되었다.
상기 결과에 따라, 유효성분의 정제를 위한 추가적인 작업 즉, 고성능액체크로마토그래피(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)는 S14를 시료로 수행하기로 결정하였다.
실시예 2-2: 잎파래 분획물의 크로마토그래피 분획(2)
상기 Sephadex 컬럼을 이용한 크로마토그래피의 분획물 중, 항균 활성이 가장 우수한 S14를 이용하여 고성능액체크로마토그래피(HPLC)를 통해 정제를 수행하였다.
구체적으로, 상기 HPLC는 C18 column(10 mm i.d. × 25cm, Alltima C18 5 μ column, USA)을 이용하여 HPLC 기기(WatersTM Delta 600 Prep 150 mL)로 수행하였다. 상기 HPLC의 조건은 4.0 ml/min의 유속에서 95% Acetonitrile을 등용매로 UV 197 nm에서 모니터링(monitoring)하면서 수행하였다.
상기 분리결과, 3개의 분획(sub fraction)으로 분리되었다. 상기 분리된 분획에 대해서 실시예 2-1과 같이 2배씩 연속희석된 시료를 제조하여, 프레보텔라 인터메디아와 포피로모나스 긴기발리스의 액체 배양배지에 첨가하고 배양하는 방법으로 최소저지농도(MIC)를 결정하였고, 모든 시험은 독립적으로 3회 반복하였다. 상기 실험에 의해 측정된 최소저지농도(MIC)의 평균값으로 나타낸 프레보텔라 인터메디아 및 포피로모나스 긴기발리스에 대한 각 시료의 최소저지농도는 표 7에 나타내었다.
HPLC sub fraction Prevotella intermedia Porphyromonas gingivalis
S14-1 156.25 39.06
S14-2 39.06 9.76
S14-3 39.06 9.76
상기 표 7에 나타낸 바와 같이, S14-1의 분획(sub fraction)에 비하여 S14-2 및 S14-3의 분획이 항균 활성이 더 우수한 것으로 확인되었다. 도 2에 나타낸 바와 같이 상기 S14-2는 6.3분에서 용출되었고, 총 9.5 mg이 분리되었으며, 상기 S14-3은 8.2분에서 용출되었으며, 총 9.7 mg이 분리되었다.
상기 결과에 따라, 항균 활성이 가장 우수한 것으로 확인된 S14-2에 대해서 항균물질의 규명을 위한 작업을 수행하기로 결정하였다.
실시예 3: 잎파래 분획물의 유효성분의 규명
상기 실시예 2로부터 항균 활성이 가장 우수한 것으로 확인된 HPLC 분획인 S14-2에 대해 그 화학식을 규명하기 위하여, ESI-MS법과 GC/MS법을 이용하여 구조를 분석하였다.
실시예 3-1: 유효성분의 분자량 분석
상기 S14-2에 대한 잎파래에서 분리한 항균 물질을 규명하기 위해 ESI-MS를 이용하여 분자량을 분석하였다. 상기 분석은 한국기초과학연구소(KBSI, KOLAS 국제공인시험기관, 대한민국)에 의뢰하여 수행하였다. 상기 한국기초과학연구소의 분석기기는 LC QDECA XP(Thermo Finnigan)이고, 분석 조건은 다음과 같다.
우선, Ionization source는 ESI(electrospray ionization)이고, Polarity는 Positive, Negative이며 Analyze type은 Ion trap analyzer이고, Mass range는 250 m/z 내지 2,000 m/z이며, Scan mode는 MS이었다. 상기 분석 결과를 도 3에 나타내었다.
상기 도 3에 나타낸 바와 같이, Negative mode(도 3의 (B))에서 상기 S14-2의 분자량은 551.1 m/z로 추정되었다. 상기 값은 [2M-H]-이므로 상기 분자량 551.1 m/z은 상기 S14-2의 두 분자가 서로 붙어 있는 것의 값으로 추정되므로, 최종적으로 상기 S14-2의 분자량은 275.5로 추정되었다.
실시예 3-2: 유효성분의 NMR을 이용한 구조 분석
상기 S14-2의 구조 분석은 분자량이 분석된 유기물의 화학적 구조 분석에 사용되는 방법인 NMR을 이용한 구조 분석법으로 수행하였다. 보다 구체적으로, 상기 S14-2을 1 mg/mL의 농도로 조절하고, MeOD에 녹인 후, 퓨리에 변환 핵자기공명 분석기(Fourier Transform Nuclear Magnetic Resonance Spectrometer, FT-NMR)인 JNM ECP-400(JNJEOL, 일본)을 이용하여 분석을 수행하였다. 또한, 1H-1H COSY NMR, HMQC NMR 및 HMBC NMR 기법을 이용하여 화합물의 구조를 분석하였다. 상기 분석한 결과를 도 4에 나타내었다.
상기 도 4a에 나타난 상기 S14-2의 Proton(1H) NMR의 스펙트럼을 통해 확인된 바와 같이, 1H-NMR의 signal은 다음과 같다.
1개의 methyl proton은 δ0.965(3H, t, H-18)에서 나타났고, 8개의 methylene protons은 δ1.41(2H, m, H-4), δ1.61(2H, m, H-3), δ2.10-2.08(4H, m, H-5, H-17), δ2.27(2H, t, H-2), δ2.83-2.81(6H, m, H-8, H-11, H-14)에서 그리고 8개의 methine proton signals은 다음과 같이 나타났다. δ5.36-5.34(8H, m, H-6, H-7, H-9, H-10, H-12, H-13, H-15, H-16) ; carboxyl group의 proton(H-1)은 δ4.89에서 나타났다.
상기 1H-NMR spectrum으로부터 1H-NMR의 signal을 분석한 결과, 1개의 methyl proton과 8개의 methylene proton signal, 8개의 methine proton signal이 관찰되었다.
또한, 상기 도 4b에 나타난 상기 S14-2의 Carbon(13C) NMR의 스펙트럼을 통해 확인된 바와 같이, 13C-NMR의 signal은 다음과 같다.
1개의 carbonyl carbon은 δc177.53(C-1)에서 나타났고, 1개의 methyl carbon은 δc14.65(C-18), 8개의 methylene carbons은 δc21.49(C-17), δc25.73(C-3), δc26.43(C-8), δc26.52(C-11), δc26.54(C-14), δc27.90(C-5), δc30.19(C-4), δc34.83(C-2) 그리고 8개의 methine carbons은 다음과 같다. δc128.19(C-15), δc128.95(C-7), δc129.01(C-13), δc129.19(C-9), δc129.29(C-12), δc 129.40(C-10), δc130.66(C-6), δc132.78(C-16).
상기 13C-NMR spectrum으로부터 13C-NMR의 signal을 분석한 결과, 1개의 carbonyl carbon(C-1), 1개의 methyl carbon(δ14.65), 8개의 methylene carbon 및 8개의 methine carbon이 관찰되었다.
또한, 상기 도 4c에 나타난 상기 S14-2의 COSY NMR 스펙트럼을 통해 분석한 결과, 말단 methyl proton(H-18), methylene proton(H-17, H-5) 및 methine proton(H-16)이 첫 번째 이중 결합이 세 번째 위치에 존재하는 것으로 확인되는 일련의 COSY 상관관계를 나타내, 상기 S14-2의 말단의 methyl carbon(C-18)으로부터 첫 번째 이중 결합의 위치가 세 번째 위치(n-3 또는 C-16)에 존재하는 것이 확인되었다.
또한, 상기 도 4d에 나타난 상기 S14-2의 HMQC NMR 스펙트럼 및 상기 도 4e에 나타난 상기 S14-2의 HMBC NMR 스펙트럼을 통해 탄소(carbon) 및 수소(proton)의 상관관계를 분석한 결과, 상기 S14-2는 최종적으로 6번, 9번, 12번, 15번 위치에 이중결합을 갖는 탄소수 18개의 지방산인 6, 9, 12, 15-옥타데카테트라에노익 산(octadeca-6, 9, 12, 15-tetraenoic acid, C18:4)의 구조를 갖는 것으로 예상되었다.
상기 S14-2의 예상구조인 6, 9, 12, 15-옥타데카테트라에노익 산의 화학식을 하기 화학식 1에 나타내었다.
[화학식 1]
Figure pat00002

실시예 3-3: GC/MS를 통한 유효성분 구조의 확인
GC/MS를 수행하기 위해 우선, 상기 S14-2를 신라대학교 산학협력단 산하 식품분석센터에 의뢰하여 메틸 에스테르화(methyl ester)시켰다. 보다 구체적으로, 상기 메틸 에스테르화는 S14-2의 1/2량에 12% BF3/MeOH 용액 2mL을 가하고 100℃에서 10분간 가열하는 방법으로 수행하였다. 상기 메틸 에스테르화시킨 S14-2에 포화식염수 5mL을 가한 후, iso-octane 1mL을 가하여 잘 흔들어 메틸 에스테르화 유도체들을 iso-octane 층으로 이행시켰다. 상기 iso-octane 층은 따로 분리하여 질소 기류 하에서 농축한 다음 hexane 1mL 용액으로 조제하였다.
상기 메틸 에스테르화시킨 S14-2을 한국기초과학연구소(KBSI, KOLAS 국제공인시험기관)에 의뢰하여 가스크로마토그래피-질량분석기(Gas Chromatography/Mass Spectrometer, GC/MS)를 수행하여 분석하였다. 보다 구체적으로, 상기 GC/MS는 컬럼(column)으로 HP-5MS(30m×250μm0.25μm)이 장착된 가스크로마토그래피-질량분석기(CTC GC-MSD, 7890N GC, 5975C MSD, Agillent Co, USA)를 이용하였고, 캐리어 가스(carrier gas)로는 헬륨(helium)을 1 mL/min의 유속(flow rate)으로 사용하였다. 상기 온도(oven temperature)는 2분 동안 80℃에서 유지했고, 승온조건은 300℃까지 5℃/min으로 온도를 상승시켰다. 상기 주입량(injection volumn)은 1 μL이고, 분할비(split ratio)는 20:1이었다.
상기 분석 후, S14-2의 질량스펙트럼을 라이브러리 서치(Library search)를 통해 얻어진 결과 및 상기 예상구조인 6, 9, 12, 15-옥타데카테트라에노익 산 즉, 스테아리돈 산과 관련하여, 상기 스테아리돈 산 표준 물질(Sigma-aldrich, USA)을 메틸 에스테르화시켜 상기와 동일한 조건으로 가스크로마토그래피-질량분석기를 이용하여 GC/MS를 수행한 결과를 비교하였다.
상기 S14-2의 분석결과 및 상기 스테아리돈 산 표준물질의 분석결과를 도 5에 나타내었다.
상기 도 5에 나타낸 바와 같이, 표준물질의 GC/MS 크로마토그램(chromatogram)과 상기 S14-2의 GC/MS 크로마토그램이 약 95% 정도 일치하는 것이 확인되어, 상기 S14-2는 스테아리돈 산인 것으로 확인되었다.
실시예 3-4: 잎파래 분획물 내에 유효성분의 순도 분석
상기 S14-2 내에 스테아리돈 산의 순도를 확인하기 위하여, 상기 S14-2 및 표준물질인 스테아리돈 산(Sigma-aldrich, USA)을 동일한 농도(10 mg/mL) 및 동일 조건(95% Acetonitrile)으로 상기 실시예 2-2와 같은 방법에 따라 고성능액체크로마토그래피(HPLC)를 수행하였다. 상기 HPLC의 결과를 도 6에 나타내었다. 상기 도 6에 나타낸 크로마토그램(chromatogram)을 적분하여 % 면적을 통해 상기 S14-2 내에 스테아리돈 산의 순도를 확인하였다.
상기 도 6a에 나타낸 바와 같이, 용매인 메탄올에 대해 HPLC를 수행한 결과, 3.232분에서 95% 면적을 나타내어, 상기 메탄올의 용출시간은 3.232분인 것으로 확인되었다.
또한, 상기 도 6b에 나타낸 바와 같이, 스테아리돈 산 표준물질(A)의 경우 3.239분에서 최초에 나온 피크(peak)는 상기 도 6a에서 확인된 바와 같이 용매 분획으로, 약 5.69%의 면적을 나타내었고, 6.332분에서 용출된 두 번째 피크는 스테아리돈 산으로, 약 92.46%면적을 나타내었다. 한편, S14-2(B)의 경우, 3.219분에서 최초에 나온 피크(peak)는 상기 도 6a에서 확인된 바와 같이 용매 분획으로, 약 4.86%의 면적을 나타내었고, 3.853분의 두 번째의 피크(peak)는 노이즈 피크(noise peak)로 추측되며, 약 2.55%면적을 나타내었고, 6.355분에서 용출된 세 번째의 피크(peak)는 약 89.78%면적을 나타내었다.
상기 결과에 의하면, 스테아리돈 산 표준물질(A)의 두 번째 피크 면적의 적분값이 92.46%이고, S14-2(B)의 세 번째 피크 면적의 적분값이 89.78%으로, 상기 S14-2는 정제된 기준물질인 표준물질과 거의 유의한 수준의 순도를 나타내어, 상기 S14-2내 유효성분의 순도가 우수한 것으로 확인되었다.
실시예 4: 유효성분의 항균 활성
상기 실시예 3으로부터 S14-2의 유효성분 즉, 구조가 확인된 물질인 스테아리돈 산의 항균 활성을 확인하였다. 구체적으로, 상기 잎파래 분획물(S14-2)의 유효성분과 동일한 물질인 스테아리돈 산(SA, 18:4n-3, Sigma-aldrich, USA)을 이용하여, 실시예 2-1과 같은 방법으로 최소저지농도(MIC)를 결정하였다. 보다 구체적으로, 최고 농도 625 μg/mL에서 최저 9.76 μg/mL에 이르도록 10% DMSO(dimethyl sulfoxide, Sigma, USA) 생리식염수를 용매로 사용하여 단계적으로 2배씩 연속희석하여 시료를 제조하였다.
상기 2배씩 연속희석하여 제조한 시료를 상기 실시예 1-3의 방법에 따라 프레보텔라 인터메디아와 포피로모나스 긴기발리스의 액체 배양배지에 첨가한 후, 37℃의 조건에서 혐기성 배양기(anaerobic incubator)를 이용하여 2일간 배양한 후, 균의 성장 정도를 육안 및 도립현미경(Inverted microscope TMS, Nikon)으로 관찰하여 최소저지농도(MIC)를 결정하였고, 모든 시험은 독립적으로 3회 반복하였다. 상기 실험에 의해 측정된 최소저지농도(MIC)의 평균값으로 나타낸 프레보텔라 인터메디아 및 포피로모나스 긴기발리스에 대한 각 시료의 최소저지농도(μg/mL)는 표 8에 나타내었다.
Prevotella intermedia Porphyromonas gingivalis
SA MIC 39.06 9.76
상기 표 8에 나타낸 바와 같이, 치은염의 원인균인 프레보텔라 인터메디아에 대해서는 39.06 μg/mL이었고, 치주염의 원인균인 포피로모나스 긴기발리스에 대해서는 9.76 μg/mL인 것으로 확인되어, 상기 스테아리돈 산은 프레보텔라 인터메디아 및 포피로모나스 긴기발리스에 대한 항균 활성이 우수한 것으로 확인되었다.
대한구강보건학회지 제29권 제2호(Curcuma zanthorrhiza 추출물 및 함유 치약의 구취 억제 효과와 구강 유해균에 대한 선택적 항균 효과(2005))에서 보고된 내용, 구체적으로 클로르헥시딘(chlorhexidine)의 치주염 원인균에 대한 최소저지농도(MIC)가 8 ㎍/㎖이고, 천연물질인 강황(Curcuma zanthorrhiza) 추출물의 MIC가 32 ㎍/㎖인 것과 비교하면, 상기 스테아리돈 산은 구강세정제의 대표적인 성분인 클로르헥시딘과 거의 유사한 항균 활성을 가질 뿐만 아니라, 강황 추출물의 항균 활성에 비하여 약 3배 이상의 우수한 항균 활성을 갖는 것으로 확인되어, 상기 스테아리돈 산의 구강질환 원인균에 대한 항균 활성은 현저하게 우수한 것으로 확인되었다.

Claims (8)

  1. 하기 화학식 1로 표시되는 항균 활성을 갖는 화합물.
    [화학식 1]
    Figure pat00003
  2. 제1항에 있어서, 상기 항균 활성은 프레보텔라 인터메디아(Prevotella intermedia) 및 포피로모나스 긴기발리스(Porphyromonas gingivalis)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상에 대한 항균 활성인 화합물.
  3. 하기 화학식 1로 표시되는 화합물을 유효성분으로 포함하는 항균 조성물.
    [화학식 1]
    Figure pat00004
  4. 제3항에 있어서,
    상기 조성물은 레보텔라 인터메디아(Prevotella intermedia) 및 포피로모나스 긴기발리스(Porphyromonas gingivalis)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상에 대한 항균 활성을 갖는 항균 조성물.
  5. 하기 화학식 1로 표시되는 화합물을 유효성분으로 포함하는 구강질환 치료 또는 예방용 조성물.
    [화학식 1]
    Figure pat00005
  6. 제5항에 있어서,
    상기 구강질환은 치주염, 치은염, 충치, 구강내 점막궤양, 구취, 구강건조증 및 아구창으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나인 구강질환 치료 또는 예방용 조성물.
  7. 하기 화학식 1로 표시되는 화합물을 유효성분으로 포함하는 구강질환 예방 또는 개선용 식품 조성물.
    [화학식 1]
    Figure pat00006
  8. 하기 화학식 1로 표시되는 화합물을 유효성분으로 포함하는 구강질환 예방 또는 개선용 구강 위생 조성물.
    [화학식 1]
    Figure pat00007
KR1020110003139A 2011-01-12 2011-01-12 구강질환 예방 또는 치료용 조성물 KR20120081803A (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020110003139A KR20120081803A (ko) 2011-01-12 2011-01-12 구강질환 예방 또는 치료용 조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020110003139A KR20120081803A (ko) 2011-01-12 2011-01-12 구강질환 예방 또는 치료용 조성물

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20120081803A true KR20120081803A (ko) 2012-07-20

Family

ID=46713821

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020110003139A KR20120081803A (ko) 2011-01-12 2011-01-12 구강질환 예방 또는 치료용 조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR20120081803A (ko)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20190094988A (ko) * 2018-02-06 2019-08-14 주식회사 엘지생활건강 해바라기유를 포함하는 구강질환 예방 또는 치료용 조성물

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20190094988A (ko) * 2018-02-06 2019-08-14 주식회사 엘지생활건강 해바라기유를 포함하는 구강질환 예방 또는 치료용 조성물

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR100871629B1 (ko) 해조류 추출물을 포함하는 항균 조성물
KR101841181B1 (ko) 생약 추출물을 함유하는 치약 조성물
KR101856602B1 (ko) 왕귀뚜라미 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화 조성물
JP2007320926A (ja) プラーク形成抑制剤、または抗う蝕菌剤
KR101046621B1 (ko) 천일염 및 꾸지뽕나무 추출물을 포함하는 항균 조성물
JP2023118853A (ja) 抗老化用組成物、抗老化用皮膚化粧料および抗老化用飲食品
KR100873180B1 (ko) 갈조류 추출물을 포함하는 항균 조성물
KR100871627B1 (ko) 파래 추출물을 포함하는 구강질환 예방 또는 치료용 조성물
KR101894807B1 (ko) 생열귀나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 항균용 조성물
KR101747246B1 (ko) 벌꿀을 유효성분으로 포함하는 항 헬리코박터 파이로리 조성물
KR20090103823A (ko) 항노화제, 피부외용제 및 음식품
KR20120081803A (ko) 구강질환 예방 또는 치료용 조성물
KR101889331B1 (ko) 섬오가피나무 줄기 추출물, 이의 분획물 또는 이로부터 분리된 화합물을 유효성분으로 함유하는 항산화, 항염증 또는 항균용 조성물
KR102353335B1 (ko) 무궁화 에탄올 추출물의 분획물을 포함하는 tlr4-md2 저해제 조성물
KR101466769B1 (ko) 큰비쑥 추출물을 포함하는 구강질환 예방 또는 치료용 조성물
KR100871628B1 (ko) 비틀대모자반 추출물을 포함하는 구강질환 예방 또는치료용 조성물
KR101280868B1 (ko) 야콘 추출물을 유효성분으로 함유하는 충치와 치주질환 예방 또는 치료용 약학조성물 및 식품 조성물
KR20180098737A (ko) 부처손 추출물, 이의 분획물 또는 이로부터 분리된 화합물을 유효성분으로 함유하는 항산화 또는 항염증용 조성물
KR101826823B1 (ko) 새송이버섯 및 포도가지의 추출 혼합물을 유효성분으로 함유하는 아토피 피부염의 예방, 개선 또는 치료용 조성물
JP2022062913A (ja) サツマイモ由来のイモ蜜又はイモ蜜の上清を含有する口腔ケア組成物
KR102433124B1 (ko) 아세틸쿠마로일슈크로스 유도체 및 이의 용도
KR101750854B1 (ko) 프로폴리스 추출분획물, 또는 이로부터 소분획된 추출물을 유효성분으로 포함하는 항 헬리코박터 파이로리 조성물
KR102748071B1 (ko) 동방초매 추출물을 유효성분으로 포함하는 기능성 건강 식품 조성물
KR101630829B1 (ko) 에키나코사이드 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 함유하는 구강질환 예방 또는 치료용 조성물
KR101074348B1 (ko) 녹조류 추출물을 함유하는 항헬리코박터 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
PA0109 Patent application

Patent event code: PA01091R01D

Comment text: Patent Application

Patent event date: 20110112

PA0201 Request for examination
PG1501 Laying open of application
E902 Notification of reason for refusal
PE0902 Notice of grounds for rejection

Comment text: Notification of reason for refusal

Patent event date: 20120828

Patent event code: PE09021S01D

E601 Decision to refuse application
PE0601 Decision on rejection of patent

Patent event date: 20130402

Comment text: Decision to Refuse Application

Patent event code: PE06012S01D

Patent event date: 20120828

Comment text: Notification of reason for refusal

Patent event code: PE06011S01I