KR20120066297A - 인플루엔자 바이러스의 뉴라미니다아제 억제활성을 높인 김치의 제조방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 기존 배추김치 보다 인플루엔자 바이러스의 뉴라미니다아제(neuraminidase) 효소를 억제하는 효능을 높인 배추김치의 제조방법에 관한 것이다. 보다 상세하게는 하기 단계를 포함하는 인플루엔자 바이러스(influenza virus)의 뉴라미니다아제 억제활성을 높인 김치 제조방법을 제공한다: (a) 종류별 김치 제조에 사용되는 주요 재료(main material)에 최종 김치의 염도가 0.5-3.0 %(w/w)가 되도록 계산하여 소금을 가감하는 단계; (b) 상기 단계 (a)의 소금이 가감된 주요 재료에 유산균을 접종하고, 발효 전 초기 김치를 제조하는 단계; (c) 상기 단계 (b)에서 제조된 발효 전 초기 김치를 1차 발효하는 단계; 및 (d) 상기 단계 (c)에서 제조된 1차 발효된 김치를 2차 발효하는 단계.
본 발명에 의해 제조된 김치는 인플루엔자 바이러스의 뉴라미니다아제의 활성을 억제하여 본 발명의 김치를 섭취할 경우 인플루엔자 바이러스에 의해 유발된 독감을 치료하거나 또는 예방하는 기능을 한다.
본 발명에 의해 제조된 김치는 인플루엔자 바이러스의 뉴라미니다아제의 활성을 억제하여 본 발명의 김치를 섭취할 경우 인플루엔자 바이러스에 의해 유발된 독감을 치료하거나 또는 예방하는 기능을 한다.
Description
본 발명은 김치의 제조방법에 관한 것이다.
사람에서 독감을 일으키는 인플루엔자는 1919년 스페인 플루 이후 매년 발생하여, 큰 손해를 입히고 있다. 또한 닭이나 오리, 철새 등을 감염시키는 조류 인플루엔자(avian influenza)도 수년전부터 세계적으로 사람과 양계산업에 큰 피해를 주고 있다. 인플루엔자는 변종이 쉽게 발생하는 데, 2009년에는 신종 인플루엔자가 발생하여, 세계 약 48만명이 감염하였고, 이중 6,200명이 사망하였다(WHO). 2010년에도 인도에서 79명이 신종 인플루엔자로 사망하였다. 앞으로 항바이러스 약제에 내성을 가진 새로운 인플루엔자가 출현할 가능성도 높다. 인플루엔자 바이러스는 직경 0.1 nm의 입자로서, 표피를 가지고 있고, 내부에 RNA를 가진 바이러스이다. 이 인플루엔자 바이러스는 A, B, C형으로 분류되고 있으며, 이중 유행성 질병을 보이는 것은 A형과 B형이다. 인플루엔자 바이러스의 표피(surface)에는 헤마글루티닌(hemagglutinin, HA)과 뉴라미니다아제(neuaminidase, NA) 라는 두 종류의 당단백질이 돌출되어 있고, 내부에 RNA가 9개로 분절되어 있다. 인플루엔자 바이러스 표면에 있는 헤마글루티닌(HA)과 뉴라미니다아제(NA)는 변이를 자주 일으켜서, 새로운 변이주가 빈번하게 출현되고 있다.
인플루엔자 바이러스는 사람이나 돼지, 닭 등의 동물 코나 입에 침입하여 표피의 헤마글루티닌(HA)이 상기도의 점막 상피세포 중 시알산(sialic acid) 잔기에 결합되어, 세포내로 RNA를 침입시킨다. 인플루엔자 바이러스 RNA를 복제하고, 뉴라미니다아제(NA)가 숙주 세포막의 시알산(sialic acid)을 분해하여 출아로서 자손 인플루엔자 바이러스를 방출된다. 이러한 인플루엔자 바이러스가 감염되는 것을 억제하기 위하여서, 아만타딘(amantadine), 리만타딘(rimantadine), 인산오셀타미비르(oseltamivir phophate)(타미플루, Tamiflu), 자나미비어(zanamivir)(리렌자, Relenza)가 알려져 있다. 이중 아만타딘, 리만타딘은 인플루엔자 바이러스의 M2 단백질의 이온채널기능을 차단하는 것인데, 일부 인플루엔자에는 억제효과가 없고, 변종 바이러스를 만들기도 하고, 불안감, 몽롱함, 발작 같은 부작용이 심하여 사용이 제한되고 있다. 인산오셀타미비르(타미플루, Tamiflu)와 자나미비어(리렌자, Relenza)는 인플루엔자 바이러스 표피의 뉴라미니다아제 효소의 활성을 억제하는 것이다. 그러나 이 약제도 과민증, 정신신경증, 소화불량 등 부작용이 있어, 아직까지 제한적으로 사용되고 있다.
이와 같은 상황에서 인플루엔자를 효과적으로 억제하고, 일상적으로 안전하게 이용될 수 있는 인플루엔자 억제하는 방안이 요망되고 있다.
한편 김치는 오래전부터 한국에서 식용된 전통식품으로서, 배추, 파, 고춧가루, 마늘, 생강, 그리고 기타 조미료 등으로 구성된 발효식품이다. 배추를 절임하고 물로 세척하여 탈염시킨 후, 파, 고춧가루, 마늘, 생강, 기타 조미료 등을 넣어 양념으로 만들고, 절임배추와 혼합하여 발효시킨 것으로 독특한 맛과 풍미를 갖고 있다. 김치에는 다양한 유산균과 효모가 있고, 발효에 의하여 유산(lactic acid) 같은 유기산뿐만 아니라 만니톨(mannitol), 아스코르빈 산(ascorbic acid), 비타민 B 같은 다양한 성분도 생산됨이 보고되어 있다. 최근 김치에서 항산화성 효능, 간암 억제효능, 돌연변이 억제효능 등 다양한 효능도 보고되어 있다. 그리고 김치는 오래전부터 식용된 식품으로 매우 안전한 식품이다.
김치에 관한 기존 특허로는 다양한 맛과 생리활성기능을 부여한 것이 대부분이다. “한방 김치의 제조방법(등록번호 10-0632379-0000, 2006. 9. 28)” 은 상황버섯 등을 물을 넣고 끓여서 추출한 다음. 이 추출물에 소금과 배추, 무를 넣고 김치를 제조하는 방법이다.
“버섯을 이용한 김치의 제조방법(등록번호 10-0616524-0000, 2006. 8. 21)”은 절인 배추에 버섯 또는 버섯 분쇄물을 첨가하는 김치제조방법이다.
“마 김치의 제조방법(등록번호 10-0609468-0000, 2006. 7. 28)”은 절임배추에 마를 넣은 김치 제조방법이다.
“두부순물 첨가김치의 제조방법(등록번호 10-0493544- 0000, 2005. 5. 26)”은 두부순물을 첨가한 김치제조방법이다.
“백련잎을 이용한 김치의 제조방법 및 그로 제조된 김치(등록번호 10-0458914-0000, 2004. 12. 3)”은 백련수를 사용한 김치제조방법이다.
“유자김치 제조방법(등록번호 10-0457133-0000, 2004. 11. 4)은 유자껍질을 썰어 넣은 김치제조방법이다.
“토마토 케첩 등을 이용한 김치제조방법(공개번호 10-2004-0076522, 2004. 9. 1)”은 토마토 케첩과 설탕을 넣은 김치제조 방법이다.
“김치제조방법(등록번호 2004. 4. 20)”은 다시마 국물과 감자를 넣은 김치제조방법이다.
“쑥 김치제조방법(등록번호 10-0394510-0000, 2003. 7. 31)”은 쑥물을 넣은 김치제조방법이다.
“토종 갓을 이용한 김치제조방법(등록번호 10-0359897-0000, 2002. 10. 24)”는 토종 갓을 넣은 김치제조방법이다.
“한방김치의 제조방법(등록번호 10-0342606-0000, 20002. 6. 18)”은 한방 생약 분말을 넣은 김치제조방법이다.
“송이버섯김치 및 그 제조방법(등록번호 10-0333056-0000, 2002. 4. 4)”은 송이버섯을 넣은 김치제조방법이다.
이상과 같이 기존의 김치특허는 주로 한방재료, 버섯 등을 첨가하여 김치의 맛과 향기를 향상시키고 있다. 한편 인플루엔자 바이러스를 억제하기 위하여 천연물을 사용한 경우도 있다.
“솔잎 추출물을 함유하는 바이러스로 인한 인간질환의 치료 및 예방용 조성물(등록번호 10-0743861, 등록 2007,7.24)”는 솔잎 추출물로 인플루엔자 A 바이러스 등 여러 가지 바이러스를 예방 및 치료하기위한 조성물에 관한 것이다.
“천연 항바이러스제 및 이를 포함한 조성물(공개 10-2005-008742, 2005.8.31)”은 김치 숙성과정 중 발생하는 김치 유산균을 이용하여 바이러스의 감염을 억제하는 항바이러스제 및 조성물에 관한 것이다.
“오리나무 추출물을 함유하는 항바이러스 조성물(등록 10-0769050, 2007.10.16)”은 오리나무 추출물을 함유하는 항바이러스 조성물에 관한 것이다.
“바이셀라속 균주를 이용한 천연 항바이러스제 및 이를 포함하는 조성물 (공개 10-2007-0115356, 2007.12.6)”는 김치숙성과정에서 출현하는 김치유산균 즉 바이셀라속 균주를 이용하여 인플루엔자 바이러스 및 조류 인플루엔자 바이러스의 감염에 억제효과를 나타내는 항바이러스제 및 조성물에 관한 것이다.
“유산균 발효유 필터액을 함유하는 바이러스 감염질환 예방 또는 치료용 조성물 (공개 10-2010-0058823, 2010.6.4)”는 유산균 발효유 필터액을 함유하는 바이러스 감염질환 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
“고삼 추출물, 고삼분획물, 이로부터 분리한 테로카판계 및 플라보노이드계 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 인플루엔자 바이러스 감염질환의 예방 및 치료용 약학적 조성물(공개 10-2010-0038633, 2010.4.15)”은 고삼 추출물로 인플루엔자 바이러스 감염의 예방 및 치료용에 관한 것이다.
“항 인플루엔자 바이러스 효능을 갖는 락토바실러스 루테리 에이취와이 7501 및 이를 유효성분으로 함유하는 제품(공개 10-2010-0049828, 20105.13)”는 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) HY7501을 함유하는 항 인플루엔자 바이러스용 약학조성물, 발효유, 음료 등에 관한 것이다.
“울금으로부터 얻은 조류, 돼지 인플루엔자 및 신종플루에 대한 항 바이러스제(등록 10-0962334, 2010.6.1)”은 뉴라미니다아제 효소를 저해하는 울금 유래의 디아릴헵타노이드 계열의 화합물 및 이을 유효성분으로 함유하는 조류 및 돼지 인플루엔자와 신종플루의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다.
본 명세서 전체에 걸쳐 다수의 논문 및 특허문헌이 참조되고 그 인용이 표시되어 있다. 인용된 논문 및 특허문헌의 개시 내용은 그 전체로서 본 명세서에 참조로 삽입되어 본 발명이 속하는 기술 분야의 수준 및 본 발명의 내용이 보다 명확하게 설명된다.
본 발명자들은 일상적인 생활에서 김치를 섭취하는 것에 의해 인플루엔자 바이러스 등을 예방할 수 있는 김치를 발명하고자 예의 연구 노력하였다. 그 결과 본 발명자들은 배추김치에는 인플루엔자 바이러스의 뉴라미니다아제를 억제하는 효능이 있음을 발견하였고, 김치의 소금함량을 저 염도로 조절하고, 유산균을 사용하고, 1차발효 후 2차발효를 도입함으로서, 인플루엔자 바이러스의 뉴라미니다아제를 억제하는 효능을 높일 수 있다는 것을 발견하여 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 김치 재료를 유산균에 접종하여 1차발효 및 2차발효 과정을 거치는 김치 제조방법을 제공한다.
본 발명은 상기 제조 방법에 의해 제조된 김치를 제공한다.
본 발명은 일정 범위의 산도, pH, 소금함량 및 뉴라미니다아제 억제 효율을 나타내는 김치를 제공한다.
본 발명자들은 일상적인 생활에서 김치를 섭취하는 것에 의해 인플루엔자 바이러스 등을 예방할 수 있는 김치를 발명하고자 예의 연구 노력하였다. 그 결과 본 발명자들은 배추김치에는 인플루엔자 바이러스의 뉴라미니다아제를 억제하는 효능이 있음을 발견하였고, 김치의 소금함량을 저 염도로 조절하고, 유산균을 사용하고, 1차발효 후 2차발효를 도입함으로서, 인플루엔자 바이러스의 뉴라미니다아제를 억제하는 효능을 높일 수 있다는 것을 발견하여 본 발명을 완성하였다.
따라서 본 발명은 인플루엔자 바이러스의 뉴라미니다아제를 억제하는 효능을 높일 수 있는 김치를 제공한다.
본 발명의 일 양태에 따르면 본 발명은 하기 단계를 포함하는 인플루엔자 바이러스(influenza virus)의 뉴라미니다아제 억제활성을 높인 김치 제조방법을 제공한다:
(a) 종류별 김치 제조에 사용되는 주요 재료(main material)에 최종 김치의 염도가 0.5-3.0 %(w/w)가 되도록 계산하여 소금을 가감하는 단계;
(b) 상기 단계 (a)의 소금이 가감된 주요 재료에 유산균을 접종하고, 발효 전 초기 김치를 제조하는 단계;
(c) 상기 단계 (b)에서 제조된 발효 전 초기 김치를 1차 발효하는 단계; 및
(d) 상기 단계 (c)에서 제조된 1차 발효된 김치를 2차 발효하는 단계.
본 명세서에서의 용어‘인플루엔자 바이러스’는 독감을 일으키는 원인 바이러스로서, A형, B형 및 C형이 존재한다. A형의 경우 크게 헤마글루티닌(hemagglutinin)과 뉴라미니다아제(neuraminidase)의 형태의 차이를 주요 구분 수단으로 사용하고 있으며, 각각 H형 항원, N형 항원이라 한다. 현재 H형 항원이 16종류가 알려져 있으며(H1~H16), N형 항원이 9종류가 알려져 있다(N1-N9). 표기할 때는 H3N2형, H5N1형 등으로 한다.
본 명세서에서의 용어‘뉴라미니다아제 억제효율’이란 통상적인 인플루엔자 바이러스의 뉴라미니다아제의 효율을 100%라고 했을 경우, 상기 100% 효율과 비교하여 뉴라미니다아제 효율이 감소한 정도를 지칭한다.
본 발명의 바람직한 양태에 따르면, 상기 인플루엔자 바이러스는 바람직하게는 인플루엔자 바이러스 A형, B형 및 C형이고, 보다 더 바람직하게는 인플루엔자 바이러스 A형, B형이며, 가장 바람직하게는 인플루엔자 바이러스 A형이다.
본 발명의 바람직한 양태에 따르면, 상기 인플루엔자 바이러스 A형은 바람직하게는 H1N1형, H9N2형, H3N2형 및 H5N1형이고, 보다 바람직하게는 H1N1형, H9N2형, H3N2형이며, 가장 바람직하게는 H1N1형, H9N2형이다.
이하 본 발명의 방법에 대해서 구체적으로 설명하고자 한다.
단계 (a) : 김치 제조에 사용되는 주요 재료(
main
material
)의 염도 조절
단계 (a)에서는 종류별 김치 제조에 사용되는 주요 재료(main material)에 소금을 가감한다.
본 발명의 바람직한 양태에 따르면, 상기 종류별 김치는 바람직하게는 나박김치, 총각김치, 오이소박이김치, 열무김치, 갓김치, 파김치, 양배추김치, 깍두기김치, 배추 포기김치, 배추 맛 김치, 보쌈김치, 동치미, 고들빼기김치 및 섞박지이고, 보다 바람직하게는 총각김치, 열무김치, 갓김치, 배추 포기김치, 배추 맛 김치이며, 가장 바람직하게는 배추 포기김치 및 배추 맛 김치이다.
본 발명의 바람직한 양태에 따르면, 상기 종류별 김치 제조에 사용되는 주요 재료는 바람직하게는 배추, 무, 오이, 열무, 갓, 양파, 파 및 양배추이고, 보다 바람직하게는 배추, 무, 오이 및 열무이며, 가장 바람직하게는 배추이다.
본 발명의 가장 바람직한 실시예에 따르면, 상기 배추 포기김치 및 배추 맛 김치의 제조시 배추에 직접 소금을 뿌리고 물을 넣거나, 미리 소금을 녹인 소금물을 넣어서 로 절임하고, 물로 충분히 탈염하고, 절임배추를 제조한다. 절임배추중의 소금함량은 발효를 조절하는 데 매우 중요하므로 절임배추의 소금함량을 조절한다. 소금함량이 너무 높으면 맛이 짜고, 발효도 늦다. 소금함량이 너무 낮으면 발효가 빠르고, 잡균이 증식할 위험이 있기 때문이다.
본 발명의 바람직한 실시예에 따르면, 상기 소금의 가감에 의해 최종 김치의 염도를 바람직하게는, 0.5-5.0%(w/w)로 계산하여 조절하고, 보다 바람직하게는 0.5-4.0%(w/w)로 계산하여 조절하며, 가장 바람직하게는 0.5-3.0 %(w/w)로 계산하여 조절한다.
단계 (b) : 유산균 접종 단계
본 단계에서는 상기 단계 (a)의 소금이 가감된 주요 재료에 유산균을 접종하고, 발효 전 초기 김치를 제조한다.
본 명세서에서의 용어‘유산균’은 글루코오스 등 당류를 분해하여 젖산을 생성하는 세균으로 젖산균이라고도 한다. 젖산발효에 의해 생성되는 젖산에 의해서 병원균과 유해세균의 생육이 저지되는 성질을 유제품?김치류?양조식품 등의 식품제조에 이용한다. 유산균은 그람양성균이고, 통성혐기성 또는 혐기성이다. 상기 유산균의 종류에는 락토바실루스속(Lactobacillus), 스트렙토코쿠스속(Streptococcus), 페디오코쿠스속(Pediococcus) 및류코노스톡속(Leuconostoc)이 있다.
본 발명의 바람직한 양태에 따르면 상기 유산균의 접종은 하기 방법에 따라 제조된 유산균 현탁액을 통해 접종한다: (ⅰ) 유산균을 배지에 접종하여 배양하는 단계; 및 (ⅱ) 상기 단계 (ⅰ)의 배양된 유산균을 원심분리하고, 상층의 배지는 제거하는 단계. 보다 구체적으로 유산균 현탁액을 제조하는 방법을 설명하면 김치에 접종할 유산균을 충분히 얻기 위하여, 보관된 유산균을 121℃에서 15분간 멸균된 MRS 배지(Difco Co. USA)에 접종하고, 35-40℃에서 2-5일간 배양한다. 유산균이 배양된 MRS 배지를 원심분리(3,000 rpm, 5-20분)하여 균체를 침전시킨다. 상층의 MRS 배지는 제거하고, 침전된 균체를 생리식염수(0.85%, w/w, NaCl)에 현탁시키고, 원심분리한다. 상층의 생리식염수를 제거하고, 가라앉은 균체를 모아서 다시 생리식염수에 현탁시킨다. 이러한 과정을 3회 실시하여, 배양액 MRS 배지를 제거하고, 생리식염수에 현탁된 1 x 108 cfu/ml의 유산균 현탁액을 제조한다.
본 발명의 바람직한 양태에 따르면, 본 발명에서 접종하는 상기 유산균은 유산균의 종류에 따라 상기 뉴라미니다아제의 억제활성에 변화를 보이기 때문이다. 본 발명에 이용되는 유산균으로는 바람직하게는 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus, KCTC), 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei, KCTC), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum, KCTC) 및 류코노스톡 메센테로이데스 아종. 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides sub sp . mesenteroides, KCTC)이고, 보다 바람직하게는 락토바실러스 애시도필러스, 락토바실러스 카제이이며, 가장 바람직하게는 락토바실러스 카제이이다. 본 발명에서 상기 락토바실러스 카제이를 이용할 경우 상기 뉴라미니다아제의 억제활성이 가장 높게 나타났다.
단계 (c) : 1차 발효 단계
본 단계에서는 상기 유산균이 접종된 김치를 1차로 발효하는 과정을 거친다.
본 발명의 바람직한 양태에 따르면, 상기 1차 발효시 발효 조건으로서 온도는 바람직하게는 5-20℃이고, 보다 바람직하게는 7-17℃이며, 가장 바람직하게는 10-15℃이다. 상기 1차 발효에 의해 김치의 독특한 맛과 향기를 형성한다는 점에서 1차 발효 단계는 중요하다. 또한 1차 발효온도가 10-15℃가 가장 바람직한 이유는 발효속도가 적당하여, 김치즙에서 발효된 맛과 향기가 조직내부로 잘 침투되기 때문이다. 25℃를 넘으면, 발효하여 빨리 산패하고, 발효온도가 너무 낮으면, 발효가 늦어지게 된다.
본 발명의 바람직한 양태에 따르면, 상기 1차 발효시 발효 조건으로서 발효 시간은 바람직하게는 2-20일이고, 보다 바람직하게는 2-15일이며, 가장 바람직하게는 5-15일이다. 본 발명에서 가장 바람직한 발효 시간이 5-15시간인 이유는 그 이상으로 발효가 계속되면 산도(acidity)가 증가하고, 효모(yeast)와 곰팡이(mold)가 증식하여, 나쁜 맛과 냄새(off flavor)가 발생하여 관능적 품질이 저하되기 때문이다.
단계 (d) : 2차 발효 단계
본 단계에서는 상기 1차로 발효된 김치를 1차 발효와 다른 조건에서 2차 발효를 한다.
본 발명의 바람직한 양태에 따르면, 상기 2차 발효시 발효 조건으로서 온도는 바람직하게는 0-10℃이고, 보다 바람직하게는 0-8℃이며, 가장 바람직하게는 0-5℃이다. 상기 가장 바람직한 온도가 0-5℃인 이유는 이 보다 더 낮은 온도에서는 김치가 동결되며, 조직내부에 얼음이 형성되어 조직이 연화되고, 탈수될 우려가 있고, 온도가 높으면 유산균이 증식하여, 산도를 증가시키고, 나쁜 맛과 냄새를 생성시킬 위험이 있기 때문이다.
본 발명의 바람직한 양태에 따르면, 상기 2차 발효시 발효 조건으로서 발효 시간은 바람직하게는 10-1000일이고, 보다 바람직하게는 30-1000일이며, 가장 바람직하게는 50일 이상이다.
상기 2차발효하는 동안 산도(acidity)는 약간 증가한다. 상기 단계에서 인플루엔자 바이러스의 뉴라미니다아제를 억제하는 효능이 높아진다. 상기 1차발효단계와는 달리, 상기 2차발효단계에서 뉴라미니다아제를 억제하는 효능은 김치의 소금함량에 따라 영향을 받는다. 소금함량 0.5-2.5%(w/w)의 김치에서 뉴라미니다아제를 억제하는 효능은 높아지지만, 소금함량 3.5%(w/w)의 김치는 뉴라미니다아제를 억제하는 효능이 높아지지 않는 특징이 있다.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 상기 (a) 내지 (d) 단계의 방법으로 제조된 김치를 제공한다.
본 발명의 바람직한 양태에 따르면, 본 발명은 상기 김치로부터 얻은 추출물을 유효성분으로 포함하는 인플루엔자 바이러스(influenza virus)에 의한 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물, 인플루엔자 바이러스(influenza virus)에 의한 질환의 개선용 식품 조성물 및 인플루엔자 바이러스(influenza virus)에 의한 질환의 개선용 사료 조성물을 제공한다.
본 발명에서 용어‘인플루엔자 바이러스(influenza virus)에 의한 질환’이란 소위 독감이라고 말하는 질병이 동반하는 모든 증상을 말하는 것으로서, 통상적으로 1?3일간 잠복기를 거친 뒤 39℃이상의 고열, 오한과 심한 전신 근육통이 갑자기 나타나고 심한 두통, 눈이 시리고 목이 아프며 가래가 없는 마른기침이 계속된다. 이런 증상이 2주일 이상 계속되고 전신피로감이 심하고 회복기에 때로는 우울증에 빠질 수도 있다. 합병증으로는 인플루엔자성 폐렴, 2차적 세균감염에 의한 세균성 폐렴이 가장 흔하며, 폐 이외의 합병증으로는 중증의 뇌척수막염을 들 수 있다. 어린이에게는 뇌막염증세와 간장의 지방변성을 일으키는 중증의 라이중후군이 생길 수 있다. 그 외 심낭염이나 심근염 등이 일과성으로 생길 수 있다.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 하기 특징을 포함하는 인플루엔자 바이러스(influenza virus)의 뉴라미니다아제 억제활성을 높인 김치를 제공한다:
(a) pH 3.5-4.2;
(b) 산도 0.70-2.0%;
(c) 소금함량 0.5-3.0%(w/w); 및
(d) 뉴라미니다아제 억제효율 25-50%.
본 발명의 바람직한 양태에 따르면, 본 발명은 상기 김치로부터 얻은 추출물을 유효성분으로 포함하는 인플루엔자 바이러스(influenza virus)에 의한 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물, 인플루엔자 바이러스(influenza virus)에 의한 질환의 개선용 식품 조성물 및 인플루엔자 바이러스(influenza virus)에 의한 질환의 개선용 사료 조성물을 제공한다.
본 발명의 특징 및 이점을 요약하면 다음과 같다:
(a) 본 발명은 다음 단계를 포함하는 인플루엔자 바이러스(influenza virus)의 뉴라미니다아제 억제활성을 높인 김치 제조방법을 제공한다: (ⅰ) 종류별 김치 제조에 사용되는 주요 재료(main material)에 최종 김치의 염도가 0.5-3.0%(w/w)가 되도록 계산하여 소금을 가감하는 단계; (ⅱ) 상기 단계 (ⅰ)의 소금이 가감된 주요 재료에 유산균을 접종하고, 발효 전 초기 김치를 제조하는 단계; (ⅲ) 상기 단계 (ⅱ)에서 제조된 발효 전 초기 김치를 1차 발효하는 단계; 및 (ⅳ) 상기 단계 (ⅲ)에서 제조된 1차 발효된 김치를 2차 발효하는 단계.
(b) 본 발명의 김치는 사람을 감염시키는 인플루엔자뿐만 아니라, 조류 인플루엔자 바이러스의 뉴라미니다아제도 억제할 수 있는 장점을 제공한다.
(c) 본 발명의 김치는 오래전부터 식용된 전통식품이므로, 항바이러스 약제와는 달리 매우 안전한 장점을 제공한다.
도 1은 유산균 현탁액의 제조공정도를 나타낸다.
도 2는 배추 맛김치의 제조공정도를 나타낸다.
도 3은 배추 포기김치의 제조공정도를 나타낸다.
도 2는 배추 맛김치의 제조공정도를 나타낸다.
도 3은 배추 포기김치의 제조공정도를 나타낸다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명 하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
실시예
실시예
1 : 배추 맛김치의 제조
신선한 배추를 구입하여 4등분한 후 소금물(염도 16.7%, w/w)을 배추중량의 1.5 배로 넣고 4-5 시간 상온에서 침지하였다. 침지가 끝나면 배추를 세척하고 물기를 제거하고, 3~5 cm 길이로 절단하여 절임배추를 제조하였다. 절임배추 100 g 당 파 3.1 g, 고춧가루 1.8 g, 마늘 1.5 g, 생강 0.4 g, 물 2.9 g 으로 양념을 제조하였다. 절임배추의 염도를 AgNO3 적정법(Mohr 법)으로 측정하고, 소금을 보충하여 김치의 최종 염도를 2.5%(w/w)로 하였다. 온도 15℃에서 7일간 1차발효하였다. 발효 전 초기김치의 pH는 5.4 산도 0.1%(w/w)이었고, 1차발효후 김치는 pH 4.1, 산도 0.9%(w/w)이었다.
실시예
2 : 김치추출물의 제조
발효 전 초기김치와 1차발효 후 김치를 이용하여 에탄올로 추출을 실시하였다. 배추김치를 잘게 절단하고, 에탄올(99.5%, v/v)을 김치부피와 동량의 부피(v/v)로 넣어 혼합하고, 이 혼합액에 50%(v/v) 에탄올을 혼합액의 동량 부피로 더 넣어, 김치가 완전히 잠기게 하고, 상온에서 하룻밤 추출하였다. 추출액을 여과지(Whatman No. 4, fast)로 여과하여, 여액을 모아 감압 농축하여 에탄올을 제거하고 추출물을 얻었다. 각 김치추출액의 pH는 3.6이었다. 김치 추출액을 0.5 M NaOH로 pH 6.5-7.0 으로 중화하고, 미세 여과지(Whatman No. 5)로 여과하여 추출물을 얻었다. 김치추출물은 인플루엔자 바이러스의 뉴라미니다아제(neuramidase) 분석에 사용하였다.
실시예
3 : 인플루엔자 바이러스의 배양 및
역가
검증
인플루엔자 A/NWS/33(H1N1) 및 저병원성 조류 인플루엔자 A/CK/Kor/MS96/96(H9N2)를 사용하였다. 이들 인플루엔자 바이러스는 SPF(specific pathogen free) 부화란에서 증식시켰다. 즉 냉동 보관된 인플루엔자 바이러스(-80℃)를 녹여 인산완충생리식염수(PBS)에 희석한 후, 10일령 SPF 부화란 요막강에 접종하여 3일간 배양하였다. 부화란을 4℃에 냉각하고, 요막강액(allantoic fluid)을 취하여, 원심분리한 후(3,000rpm, 15분, 4℃), 혈구응집반응으로 인플루엔자 바이러스의 역가를 검정하였다.
실시예
4 : 인플루엔자 바이러스에 대한 김치 추출물의 뉴라미니다아제 효소 활성 억제효능
인플루엔자 바이러스의 뉴라미니다아제 활성(neuraminidase activity)은 세계보건기구(WHO)의 공인시험법(standard operating procedure WHO-025, 2009)에 의하여 실험하였다. 사용한 인플루엔자 바이러스는 상기의 인플루엔자 바이러스 H1N1과 H9N2로서, 인플루엔자 바이러스 시험액(H1N1)은 40 헤마글루티닌 단위(hemaggμltination unit, HAU)로 하였고, 조류 인플루엔자 바이러스(H9N2)인 경우, 4 HAU로 하였다. 김치추출액(25 μl)을 2-[N-몰포린] 에탄설폰산 버퍼(2-[N-morpholin] ethanesμlphonic acid(MES) buffer)(pH 6.5)를 이용하여 2배 계열로 희석하고, 동일량의 인플루엔자 바이러스 액을 혼합하였다. 반응기질 2-(4-메틸움벨리페릴)-a-D-N-아세틸뉴라민산(2-(4-methylumbelliferyl)-a -D-N-acetylneuraminic acid)(MUNANA, Sigma M8639)의 동일량(50 μl)을 혼합하고 37℃에서 1시간 반응시켰다. 반응 후 형광(excitation 360nm, emission 448nm)을 측정하고 하기 수학식 1로 뉴라미니다아제 활성과 뉴라미니다아제 억제효능을 계산하였다.
실시예
5
발효전
초기김치와
1차발효
후의 뉴라미니다아제 억제효능
발효전 초기김치와 발효후 김치에서 추출액을 제조하여 인플루엔자 바이러스(H1N1)와 조류 인플루엔자(H9N2)의 뉴라미니다아제 활성을 각각 조사하였다. 발효전 초기김치의 추출물과 발효후 김치의 추출물의 인플루엔자 바이러스에 대한 뉴라미니다아제 활성을 비교한 결과는 하기 표 1 및 표 2와 같다. 김치추출물이 전혀 없을 때 인플루엔자 바이러스(H1N1) 뉴라미니다아제 활성은 100%이었으나, 발효전 초기김치에서 얻은 추출물의 고형물이 증가함에 따라 뉴라미니다아제 활성은 점차 감소하였고, 고형물 50 mg/ml에서는 83.7%로 감소하였다. 따라서 발효전 초기김치는 뉴라미니다아제를 억제하는 효능이 존재하였다. 1차발효후 김치도 추출물의 고형물이 증가함에 따라 뉴라미니다아제 활성이 감소됨으로서, 뉴라미니다아제를 억제하는 효능이 있는 것으로 나타났다. 1차발효후 김치 추출물은 발효전 초기김치 추출물 보다 뉴라미니다아제활성이 약간 더 억제하였으나, 통계적으로 유의하지 않았다. 조류 인플루엔자(H9N2)의 뉴라미니다아제에 대하여서도 발효전 초기김치추출물과 1차발효후 김치 추출물은 억제하는 효능이 있는 것으로 나타났다. 1차발효후 김치 추출물은 발효전 초기김치의 경우보다 뉴라미니다아제를 약간 더 억제하였으나, 통계적으로 유의하지 않았다.
|
고형물농도( mg / ml ) |
뉴라미다아제 활성(%) | |
| 발효전 초기김치 | 1차발효후 김치 | |
| 0.0 | 100.0 ± 0.0a (0.0)** | 100.0±0.0 (0.0) |
| 12.5 | 96.6 ± 1.0a (3.6) | 95.6±0.5 (4.4) |
| 25.0 | 93.5 ± 1.4b (6.5) | 90.9±1.5 (9.1) |
| 50.0 | 83.7 ± 2.9c (16.3) | 80.2±3.2 (19.8) |
(단위 %)
*평균 ± 표준편차, 윗첨자의 동일한 알파벳 간에는 유의하지 않음(p<0.01)
**뉴라미니다아제 억제효능(%) = 100 - 뉴라미니다아제 활성
| 고형물농도(mg/ml) |
발효전 초기김치 | 1차발효후 김치 |
| 0.0 | 100.0 ± 0.0a (0.0)** | 100.0 ± 0.0 (0.0) |
| 12.5 | 97.2 ± 0.6b (2.8) | 96.6 ± 0.8 (3.6) |
| 25.0 | 94.5 ± 0.7c (5.5) | 92.6 ± 0.8 (7.7) |
| 50.0 | 85.7 ± 1.9d (14.3) | 82.6 ± 0.6 (17.4) |
*평균 ± 표준편차, 윗첨자의 동일한 알파벳 간에는 유의하지 않음(p<0.01)
**뉴라미니다아제 억제효능(%) = 100 - 뉴라미니다아제 활성
실시예
6 : 유산균이 접종된 배추 맛김치의 제조
유산균으로서 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus, KCTC), 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei, KCTC), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum, KCTC) 및 류코노스톡 메센테로이데스 아종. 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides sub sp . mesenteroides, KCTC)를 사용하였다. 유산균을 배양하기 위하여 MRS 배지(Difco. USA)를 121℃에서 15분간 고압멸균 한 후, 상기의 유산균을 각각 접종하고 35-38℃에서 2-5일 배양하였다. 유산균이 증식한 배지를 원심분리(3,000 rpm, 10분)하여 상층액을 제거하고 균체를 모아서, 멸균 생리식염수(염도 0.65%, w/w)에 현탁하고, 다시 원심분리하였다. 이와 같은 과정을 3회 실시하여 MRS 배지를 제거하고, 유산균 균체를 모으고, 멸균된 생리식염수(0.85%, w/w)에 108 CFU(colony forming unit)/ml 수준으로 현탁시킨 후, 유산균 현탁액을 제조하였다. 각 유산균 현탁액을 절임배추에 대하여 2.9%(w/w) 수준으로 넣고, 절임배추 1 kg당, 파 31 g, 고춧가루 18 g, 마늘 15 g, 생강 5 g과 혼합하여 1시간 숙성하여, 양념을 제조하였다. 유산균이 접종된 양념과 절단된 절임배추에 혼합하고, 15℃에서 9일간 1차발효시켰다. 발효 전 초기김치와 1차발효 후 김치의 pH와 산도를 측정한 결과는 하기 표 3과 같다. 발효 전 초기김치에서는 유산균을 접종하지 않은 대조군과 유산균을 접종한 김치, 모두 pH 5.4, 산도 0.10%(w/w)를 보였다. 1차발효 후 김치의 pH는 모두 3.9로 동일하였고, 산도는 0.65-0.67%(w/w)로서 거의 비슷하였다.
|
유산균 발효 김치 |
발효전
초기김치
(0일) |
1차발효후
김치
(9일) |
| 대조구 | 5.4 (0.10%) | 3.9 (0.65%) |
| Lactobacillus acidophilus 접종 김치 |
5.4 (0.10%) | 3.9 (0.65%) |
| Lactobacillus casei 접종 김치 |
5.4 (0.10%) | 3.9 (0.66%) |
| Lactobacillus acidophius 접종 김치 |
5.4 (0.10%) | 3.9 (0.66%) |
| Lactobacillus plantarum 접종 김치 |
5.4 (0.10%) | 3.9 (0.67%) |
| Leuconostoc mesenteroides sub sp. mesenteroides 접종 김치 |
5.4 (0.10%) | 3.9 (0.66%) |
실시예
7 : 유산균이 접종된
배추맛김치의
뉴라미니다아제 억제효능
각 유산균이 접종되어 1차발효된 김치에서 상기의 방법으로 에탄올로 하룻밤 추출하였다. 추출액을 여과하고, 60℃에서 감압농축하여 에탄올을 완전히 제거한 후, 0.5 M NaOH로 pH 6.5-7.0으로 중화하였다. 미세한 여과지로 다시 여과하고, 김치추출물이 인플루엔자 바이러스의 뉴라미니다아제(neuraminidase) 억제효능을 실험하였다(하기 표 4 참조). 1차발효된 김치 모두 인플루엔자 바이러스(H1N1)의 뉴라미니다아제와 조류 인플루엔자(H9N2)의 뉴라미니다아제를 억제하는 효능이 있는 것으로 나타났다. 이중 락토바실러스 카제이를 접종하여 1차발효된 김치가 다른 유산균 접종 김치보다 더 억제효능이 높은 것으로 나타났다.
|
1차발효후 김치추출물 * |
인플루엔자 바이러스 ( H1N1 ) 뉴라미니다아제 활성 | 조류 인플루엔자 바이러스 ( H9N2 ) 뉴라미니다아제 활성 |
| 대조군 김치 | 75.2 ± 1.8 (24.8)** | 63.8 ± 0.6 a,b,c (36.2) |
| Lactobacillus acidophilus 접종 김치 |
75.2 ± 1.6 c (24.8) | 67.3 ± 0.6 d (32.7) |
| Lactobacillus casei 접종 김치 |
69.8 ± 0.1 a (30.2) | 61.3 ± 0.8 a (38.7) |
| Lactobacillus acidophius 접종 김치 |
73.6 ± 0.5 b,c (26.4) | 65.8 ± 1.1 c,d (34.2) |
| Lactobacillus plantarum 접종 김치 |
92.9 ± 0.5 b,c (7.1) | 64.2 ± 0.0 b,c (35.8) |
| Leuconostoc mesenteroides sub sp. mesenteroides 접종 김치 |
72.0 ± 0.6 b (28.0) | 62.7 ± 1.0 a,b (37.2) |
* 김치추출물의 고형물 함량 100 mg/ml, 열 간에 같은 알파벳은 유의차 없음(p<0.01)
** 뉴라미니다아제 억제효능(%) = 100 - 뉴라미니다아제 활성
실시예
8 : 소금함량별
1차발효
및
2차발효에
의한 김치의 제조
김치의 염도를 0.5-3.5%로 하여 제조하고 15℃에서 6일간 1차발효시킨 후, 0℃에서 55일간 2차발효시켰다. 1차발효에서 염도에 따른 pH와 산도의 변화를 조사한 결과는 하기 표 5와 같다. 발효전 초기김치의 pH는 5.4-5.5 로서 거의 비슷하였으나, 발효 6일이 지나면 염도가 0.5%인 김치는 pH 3.64으로 가장 낮았고, 염도가 3.5%인 김치는 pH 3.82로서 가장 높았다. 산도를 보면 염도 0.5%인 김치는 0.85%로 가장 높았고, 염도 3.5% 김치는 산도 0.61% 로서 가장 낮았다. 따라서 김치의 염도가 0.5%이면, 유산발효가 많이 진행되고, 김치의 염도가 3.5%로 높아지면 유산발효가 적었다. 1차발효가 끝난 김치를 0℃로 이동하여 55일간 2차발효시키고, pH와 산도의 변화를 조사하였다. 염도 0.5%(w/w) 김치는 1차발효 후 pH 3.7이고, 2차발효 후 pH는 3.7로서, pH는 거의 차이가 없었으나, 산도를 비교하면 1차발효 후, 산도 0.85%(w/w), 2차발효 후 산도 1.03(%)로서, 산도가 0.18%(w/w) 더 증가하였다. 염도 1.5%(w/w)의 김치도 1차발효와 2차발효 후 pH 3.7로 동일하였다. 그러나 산도를 비교하면 1차발효 후 0.75%(w/w), 2차발효 후에는 산도 0.99%(w/w)로서, 산도는 0.24%(w/w) 더 증가하였다. 염도 2.5%(%)의 김치도 1차발효 후보다 2차발효 후에는 pH는 동일하였으나, 산도는 0.11%(w/w) 더 증가하였다. 그러나 염도 3.5%의 김치에서는 산도변화는 0.05%(w/w)로서 거의 차이가 없었다.
|
품목
발효시기 * |
배추김치
(염도 0.5%) |
배추김치
(염도 1.5%) |
배추김치
(염도 2.5%) |
배추김치
(염도 3.5%) |
| 발효전 초기(0일) 김치 | 5.4 (0.29%) ** | 5.4 (0.27%) | 5.5 (0.22%) | 5.5 (0.20%) |
| 1차발효(6일)후 김치 | 3.7 (0.85%) | 3.7 (0.75%) | 3.7 (0.71%) | 3.8 (0.61%) |
| 2차발효(55일)후 김치 | 3.7 (1.03%) | 3.7 (0.99%) | 3.7 (0.82%) | 3.8 (0.66%) |
* 1차발효 15℃, 2차발효 0℃
** pH (산도%), lactic acid 로서, 0.1M NaOH 적정법으로 분석
실시예
9 : 소금함량별 김치의 뉴라미니다아제 억제효능
발효전 초기김치, 1차발효후 김치, 2차발효후 김치에서 상기의 방법으로 추출하고 pH 6.5-7.0으로 중화하여 추출물을 제조하였다. 각 추출물을 인플루엔자 바이러스(H1N1)과 조류 인플루엔자 바이러스(H9N2)의 뉴라미니다아제에 미치는 영향을 조사하였다. 그 결과 인플루엔자 바이러스(H1N1)에 대하여 염도 1%(w/w)의 김치의 발효 전 초기김치에서 뉴라미니다아제 활성은 79%이었고, 1차발효 후 김치에서도 79%이었다. 그러나 2차발효한 김치는 64%로 나타나서, 2차발효 후에는 뉴라미니다아제를 더 크게 억제하는 것으로 나타났다. 염도 1.5%(w/w)로 제조한 김치도 발효 전 초기김치와 1차발효 후 김치를 비교하면 뉴라미니다아제 활성은 79%로 거의 동일하였다. 그러나 2차발효 후 김치는 뉴라미니다아제 활성이 70%로 감소함으로서, 뉴라미니다아제 억제효능이 증가하는 것으로 나타났다. 소금 2.5%로 제조한 김치의 경우도 2차발효 후 김치에서 뉴라미니다아제 억제효능이 증가하였다. 그러나 소금 3.5%로 제조한 김치는 1차발효도, 2차발효도 뉴라미니다아제 억제효능은 증가하지 않았다. 2차발효된 소금 0.5%의 김치가 다른 김치보다 뉴라미니다아제 억제효능이 가장 높았다. 조류 인플루엔자 바이러스(H9N2)에 대해서도 이와 비슷한 결과가 나타났다(하기 표 6 및 표 7 참조).
|
발효시기 * |
배추김치
(염도 0.5%) |
배추김치
(염도 1.5%) |
배추김치
(염도 2.5%) |
배추김치
(염도 3.5%) |
| 발효전 초기김치 | 84.5±2.0 (15.5)** |
81.4±1.9 (18.1) |
90.3±4.6 (9.7) |
88.7±3.9 (11.3) |
| 1차발효후 김치 | 80.3±5.5 (19.7) |
84.5±4.7 (15.5) |
78.7±5.7 (21.3) |
85.7±4.9 (14.1) |
| 2차발효후 김치 | 63.9±4.9 (36.1) |
68.5±4.8 (31.5) |
69.0±6.6 (31.0) |
80.3±6.3 (19.7) |
* 실험조건, 인플루엔자 바이러스 H1N1, 40 HAU; 김치추출물의 고형물 = 50mg/ml. ** 뉴라미니다아제 억제효능(%) = 100 - 뉴라미니다아제 활성
|
발효시기 * |
배추김치
(염도 0.5%) |
배추김치
(염도 1.5%) |
배추김치
(염도 2.5%) |
배추김치
(염도 3.5%) |
| 발효전 초기김치 | 78.9±3.8 (21.1)** |
75.1±6.1 (24.9) |
85.9±4.0 (14.1) |
84.5±3.9 (15.5) |
| 1차발효후 김치 | 79.1±2.6 (20.9) |
82.1±4.3 (17.9) |
79.0±5.0 (21.0) |
83.5±4.2 (16.5) |
| 2차발효후 김치 | 64.2±4.4 a (35.8) |
70.3±2.8 a,b (29.7) |
70.3±3.6 a,b (29.7) |
80.3±3.7 b (19.7) |
* 실험조건, 인플루엔자 바이러스 H9N2, 4 HAU; 김치추출물의 고형물 = 50mg/ml.
** 뉴라미니다아제 억제효능(%) = 100 - 뉴라미니다아제 활성
*** 알파벳 숫자가 같은 행간에는 유의하지 않음 p<0.05
Claims (18)
- 하기 단계를 포함하는 인플루엔자 바이러스(influenza virus)의 뉴라미니다아제 억제활성을 증가시킨 김치의 제조방법:
(a) 김치 제조에 사용되는 주재(main material)에 최종 김치의 염도가 0.5-3.0 %(w/w)가 되도록 절임을 실시하는 단계;
(b) 상기 절임된 주재에 유산균을 접종하여 발효 전 초기 김치를 얻는 단계;
(c) 상기 발효 전 초기 김치를 1차 발효하는 단계; 및
(d) 상기 1차 발효된 김치를 상기 1차 발효보다 낮은 온도에서 2차 발효하는 단계.
- 제 1 항에 있어서, 상기 인플루엔자 바이러스는 인플루엔자 바이러스 A형인 것을 특징으로 하는 방법
- 제 2 항에 있어서, 상기 인플루엔자 바이러스 A형은 H1N1형, H9N2형 및 H3N2형으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1 항에 있어서, 상기 김치는 나박김치, 총각김치, 오이소박이김치, 열무김치, 갓김치, 파김치, 양배추김치, 깍두기김치, 배추 포기김치, 배추 맛 김치, 보쌈김치, 동치미, 고들빼기김치 및 섞박지로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1 항에 있어서, 상기 단계 (a)에서 상기 종류별 김치 제조에 사용되는 주요 재료는 배추, 무, 오이, 열무, 갓, 양파, 파 및 양배추로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1 항에 있어서, 상기 단계 (b)의 유산균 접종은 하기 방법에 따라 제조된 유산균 현탁액을 통해 접종되는 것을 특징으로 하는 방법:
(ⅰ) 유산균을 배지에 접종하여 배양하는 단계;
(ⅱ) 상기 배양된 유산균을 원심분리하고 상층의 배지를 제거하여 침전된 유산균을 얻는 단계; 및
(iii) 상기 침전된 유산균을 현탁하여 유산균 현탁액을 제조하는 단계.
- 제 1 항 또는 제 6 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 단계 (b)의 상기 유산균은 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 및 류코노스톡 메센테로이데스 아종. 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides sub sp. mesenteroides)로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 7 항에 있어서, 상기 단계 (b)의 상기 유산균은 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei)인 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1 항에 있어서, 상기 단계 (c)의 상기 1차 발효시 발효 조건은 온도 5-20℃, 기간 2-20일인 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1 항에 있어서, 상기 단계 (d)의 상기 2차 발효시 발효 조건은 온도 0-10℃, 기간 10-1000일인 것을 특징으로 하는 방법.
- 상기 제 1 항 내지 제 10 항의 방법으로 제조된 인플루엔자 바이러스(influenza virus)의 뉴라미니다아제 억제활성이 증가된 김치.
- 하기 특징을 포함하는 인플루엔자 바이러스(influenza virus)의 뉴라미니다아제 억제활성이 증가된 김치:
(a) pH 3.5-4.2;
(b) 산도 0.70-2.0%;
(c) 소금함량 0.5-3.0%(w/w); 및
(d) 뉴라미니다아제 억제효율 25-50%.
- 상기 제 11 항의 김치로부터 얻은 추출물을 유효성분으로 포함하는 인플루엔자 바이러스(influenza virus)에 의한 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물.
- 상기 제 11 항의 김치로부터 얻은 추출물을 유효성분으로 포함하는 인플루엔자 바이러스(influenza virus)에 의한 질환의 개선용 식품 조성물.
- 상기 제 11 항의 김치로부터 얻은 추출물을 유효성분으로 포함하는 인플루엔자 바이러스(influenza virus)에 의한 질환의 개선용 사료 조성물.
- 상기 제 12 항의 김치로부터 얻은 추출물을 유효성분으로 포함하는 인플루엔자 바이러스(influenza virus)에 의한 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물.
- 상기 제 12 항의 김치로부터 얻은 추출물을 유효성분으로 포함하는 인플루엔자 바이러스(influenza virus)에 의한 질환의 개선용 식품 조성물.
- 상기 제 12 항의 김치로부터 얻은 추출물을 유효성분으로 포함하는 인플루엔자 바이러스(influenza virus)에 의한 질환의 개선용 사료 조성물.
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|---|---|---|---|
| KR1020100127559A KR20120066297A (ko) | 2010-12-14 | 2010-12-14 | 인플루엔자 바이러스의 뉴라미니다아제 억제활성을 높인 김치의 제조방법 |
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Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104323184A (zh) * | 2014-11-27 | 2015-02-04 | 南宁市绿宝食品有限公司 | 一种包菜腌制品及其腌制方法 |
| JP2022516116A (ja) * | 2018-12-28 | 2022-02-24 | シージェイ チェイルジェダン コーポレーション | ヘリコバクターピロリ連関疾患の予防又は治療用キムチ |
| KR20230058237A (ko) * | 2021-10-22 | 2023-05-03 | 이혜란 | 김치 소스 및 그 제조 방법 |
-
2010
- 2010-12-14 KR KR1020100127559A patent/KR20120066297A/ko active Application Filing
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