KR20120003236A - Cosmetic composition containing broussonetia extract for improving acne - Google Patents

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Abstract

PURPOSE: A cosmetic composition for treating acne is provided to ensure anti-inflammation and antibacterial effect and to relieve acne. CONSTITUTION: A cosmetic composition for treating acne contains Broussonetia kazinoki Sieb extract as an active ingredient. The composition is used for antibacterial effect against Propionibacterium acnes. The composition suppresses adipogenesis. The extract is contained in 0.001-50 wt% based on total composition.

Description

닥나무 추출물을 함유하는 여드름 개선용 화장료 조성물{Cosmetic composition containing Broussonetia extract for improving acne} Cosmetic composition for improving acne containing a mulberry extract {Cosmetic composition containing Broussonetia extract for improving acne}

본 발명은 여드름 개선용 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 닥나무 추출물을 함유함으로써 우수한 염증 완화 및 항균 효과를 제공하고 여드름의 치료 또는 증상완화에 효과가 있는 화장료 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to a cosmetic composition for improving acne, and more particularly to a cosmetic composition that provides excellent inflammation relief and antimicrobial effect by containing a mulberry extract and is effective in treating or alleviating symptoms of acne.

여드름은 호르몬의 작용, 과도한 피지 분비, 세균의 감염 등에 의한 모피지선, 모낭 및 주변 조직의 염증성 질환을 말한다.Acne is an inflammatory disease of the fur branch, hair follicles and surrounding tissues caused by hormone action, excessive sebum secretion, bacterial infections, and the like.

여드름의 원인은 여러 가지로 나눌 수 있다. 첫번째 원인은 피지의 과다 분비이다. 피지는 피지선에서 분비되는 물질로서 정상적인 양에서는 피부 외부의 유해 물질이 각질 세포 사이를 침투하는 것을 막아주는 기능을 한다. 그러나 사춘기, 월경 전후, 임신 초기나 피임약 복용, 스트레스 등의 환경 하에서 인체는 정상 상태와는 다른 호르몬 밸런스를 나타낸다. 이렇게 달라진 호르몬 밸런스는 피지선을 자극하게 되고 이것은 피지의 과다분비로 유도된다. 또한 유전적으로 피지분비가 많은 경유도 있으며 외부 기온의 변화 또는 잘못된 식습관에 따른 피부 온도의 증가에 의해서도 증가될 수 있다.The causes of acne can be divided into several ways. The first cause is excessive secretion of sebum. Sebum is a substance secreted by the sebaceous glands, and in normal amounts it acts to prevent harmful substances outside the skin from penetrating keratinocytes. However, under puberty, before and after menstruation, early pregnancy, contraceptives, and stress, the human body shows a different hormonal balance than normal. This altered hormonal balance stimulates the sebaceous glands, which leads to an oversecretion of sebum. There are also genetically high levels of sebum secretion and may be increased by changes in the outside temperature or by increased skin temperature due to poor eating habits.

두번째 원인은 모공의 감염이다. 과도하게 분비된 피지에는 지방산이 많이 포함되어 있어 피부 표면의 pH를 높이고, 피부의 지질을 용해시켜 피부자체의 방어력을 저하시킨다. pH가 높아진 피부 표면에서는 여드름의 원인균이 증식하기 용이한 상태가 되고 증식한 여드름균은 약해진 피부를 통해 화농성 염증을 유발하게 된다.The second cause is infection of the pores. Excessively secreted sebum contains a lot of fatty acids to increase the pH of the skin surface, dissolving the lipids of the skin lowers the defense of the skin itself. On the surface of the skin with high pH, acne-causing bacteria become easy to multiply, and the multiplying acne bacteria cause purulent inflammation through weakened skin.

일반적으로 여드름은 증상에 따라 4단계로 나눌 수 있다. 1단계는 과다 분비된 피지가 피지선 주변의 모공에 쌓이면서 면포를 형성하게 되는 면포성 여드름이다. 1단계 면포성 여드름은 여드름 병변으로는 초기의 가벼운 단계이나 미용적으로는 좋지 않아 피부 고민이 된다. 이 단계에서는 잘 관리해주면 염증으로의 발전을 억제할 수도 있다. 2단계 구진성 여드름 단계에서는 여드름균이 번식되어 염증 반응이 생기면서 붉은 여드름이 나타나는데 이를 구진이라 하며 적절한 관리가 되지 않을 경우 흉터가 생길 수 있다. 3단계 화농성 여드름에서는 붉은색 여드름의 염증 반응이 더 심해지면서 내부에 고름 주머니가 생기는데 이를 농포라 하며 이 단계에서는 치료 후에도 흉터가 남게 될 수 있으므로 전문적인 치료가 필요하다. 마지막 4단계 결절성 여드름은 고름 주머니가 피부 안에서 터져 여드름 환부 주변에 더 많은 염증을 유발시키는 단계로 손가락만한 덩어리가 생기는데 이를 결절이라 하며 염증이 진피까지 파고 들어간 시기로 전문적인 치료를 요하며 치료 시기도 장기화 될 수 있다.In general, acne can be divided into four stages according to symptoms. The first stage is scleroderma acne, in which excessive secretion of sebum accumulates in the pores around the sebaceous glands, forming a scalp. Stage 1 spontaneous acne is an early stage of acne lesions, but cosmetically not good, causing skin concerns. Good care at this stage can also inhibit the development of inflammation. Stage 2 Papular Acne The acne germs multiply and cause inflammatory reactions that cause red acne, which is called papules and can cause scars if not properly managed. In the third stage purulent acne, the inflammatory reaction of red acne becomes more severe, and pus inside is formed. This is called pustules. In this stage, scars may remain even after treatment, so professional treatment is required. The final stage 4 nodular acne is a stage in which the pus breaks out of the skin and causes more inflammation around the acne lesion. Can be prolonged.

여드름의 치료는 국소 제제 도포 요법 및 경구 약물 복용 요법과 최근 시행되고 있는 레이저 시술, 박피술 등 수술 요법이 있다.Treatment of acne includes topical formulations and oral medications, and surgical treatments such as laser and dermabrasion that have recently been performed.

국소 도포 요법은 여드름의 원인균으로 알려진 프로피오니박테리움 아크네스(propionibacterium acnes)에 대한 항균 작용 목적으로 아젤라익 애씨드(azelaic acid), 살리실산 등의 항균제를 사용하거나 면포 용해 작용을 위해 벤조일퍼록사이드(benzoyl peroxide) 등을 외용 연고 타입으로 사용한다. 그러나 아젤라익 애씨드는 제형화하기 어렵고 살리실산의 경우 국내에서는 방부제로 분류되어 제형 내 0.5% 이상을 함유할 수 없는 문제가 있다. 벤조일퍼록사이드의 경우 국내에서는 화장품 원료로 사용할 수 없는 원료라는 문제가 있다.Topical application therapy uses benzoyl peroxide for antibacterial effects such as azelaic acid and salicylic acid for the purpose of antibacterial action against propionibacterium acnes, which is known as the cause of acne. peroxide) is used as external ointment type. However, azelaic acid is difficult to formulate and salicylic acid is classified as a preservative in Korea, there is a problem that can not contain more than 0.5% in the formulation. In the case of benzoyl peroxide, there is a problem that it cannot be used as a cosmetic raw material in Korea.

경구 약물 복용 요법은 피지선의 기능 억제와 모낭벽 파괴 억제 목적으로 레티노이드, 부신피질 호르몬 등을 이용한다. 이들 제제는 과량 복용시 피부 발진, 피부 건조증 등의 부작용이 있고 개인에 따라 알러지 현상이 유발될 수도 있으므로 사용에 주의가 요구된다.Oral drug therapy uses retinoids and corticosteroids to inhibit sebaceous gland function and inhibit hair follicle wall destruction. These preparations have side effects such as skin rash, dry skin, and allergies may occur depending on the individual.

이미 발병, 진행된 여드름 및 기타 피부 질환의 문제는 효과의 속도나 경제성 등 여러 측면을 고려할 때 피부에 직접 사용하는 외용제가 더욱 효과적이라고 할 수 있다(국내 특허공개번호 제2004-0056081호 참조).The problem of already developed, advanced acne and other skin diseases can be said that the external preparations used directly on the skin are more effective considering various aspects such as the speed and economical efficiency (see Korean Patent Publication No. 2004-0056081).

화장품의 단계에서 이러한 의학적인 치료 효과를 볼 수 있는 물질은 많지 않다. 그러나 장기적으로 사용할 수 있고 치료약에 비해 정상 피부의 손상이 적다는 것이 여드름 피부용 화장품의 특징이다. 그리하여 많은 식물 추출물과 합성 물질들이 여드름 피부 개선용 조성물로 개발되고 받고 있으나, 사용 후에 피부 각질이 일어나는 등 치료 효과와 함께 피부 부작용 또한 높아서 피부에 안전하고 소비자가 원하는 효과를 보이는 제품은 많지 않다.
There are not many substances that can see these medical effects at the cosmetic stage. However, it can be used for a long time and has less damage to normal skin than a therapeutic drug. Therefore, many plant extracts and synthetic materials are being developed as a composition for improving acne skin, but there are not many products that have a therapeutic effect such as skin exfoliation after use and high skin side effects, which are safe for the skin and show the effect desired by consumers.

이에 본 발명자들은 천연물 추출물 중에서 우수한 피부 보습 효과 등을 나타내는 물질을 찾고자 연구하던 중, 닥나무 추출물이 여드름 유발원인균에 대한 항균 효능과 더불어 염증 증상을 완화시킬 수 있음을 확인하여 본 발명을 완성하게 되었다.Accordingly, the present inventors have completed the present invention by confirming that the mulberry extract can alleviate the inflammatory symptoms as well as the antibacterial effect against the acne-causing bacteria, while researching to find a substance exhibiting excellent skin moisturizing effect among natural extracts.

따라서, 본 발명의 목적은 닥나무 추출물을 유효성분으로 함유하여 항염, 항균 효과를 제공하여 여드름의 증상을 개선시킬 수 있는 효능을 가지는 여드름 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
Therefore, an object of the present invention is to provide a cosmetic composition for improving acne having an effect of improving the symptoms of acne by providing an anti-inflammatory, antimicrobial effect by containing the extract of the mulberry as an active ingredient.

상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 닥나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 여드름 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
In order to achieve the above object, the present invention provides a cosmetic composition for improving acne containing a mulberry extract as an active ingredient.

본 발명의 닥나무 추출물을 함유한 화장료 조성물은 1차적으로 피부 여드름 발생 및 피부 염증에 관여하는 미생물의 성장 및 생장을 신속히 억제함으로써 그 효과를 나타내고, 2차적으로는 여드름 발생의 원인 중의 하나인 과잉 피지 분비를 억제하며 면포성 여드름을 소멸시킴으로써 여드름 피부를 개선한다. 또한 항염효과를 나타내어 여드름 피부를 개선한다.
The cosmetic composition containing the extract of the mulberry of the present invention primarily exhibits its effect by rapidly inhibiting the growth and growth of microorganisms involved in skin acne development and skin inflammation, and secondly, excess sebum, which is one of the causes of acne, Improves acne skin by suppressing secretion and eliminating vaginal acne. It also has an anti-inflammatory effect that improves acne skin.

본 발명의 화장료 조성물은 닥나무 추출물을 유효성분으로 함유한다.The cosmetic composition of the present invention contains a mulberry extract as an active ingredient.

본 발명에서 사용되는 닥나무속에는 닥나무(Broussonetia kazinoki Sieb), 꾸지나무(Broussonetia papyrifera Vent), 애기닥나무(Broussonetia kazinoki var. humilis) 등이 있으며, 낙엽활엽성의 관목으로 한국의 대부분 지역(주로 남부에 많이 분포됨), 중국, 대만, 일본 등에 분포하며 지리적으로 산기슭 양지쪽, 밭둑 등에 난다. 닥나무는 그 인피섬유가 제지의 원료로 사용되어 오고 있으며 또한 여러 가지 약효를 갖고 있어 강장, 명목(明目)작용, 음위, 수종, 익기, 이뇨 등에 효과가 있고 풍을 제거하며, 피를 맑게하고 시력감퇴 등에 효능이 있는 것으로 알려지고 있다. The mulberry used in the present invention includes the mulberry (Broussonetia kazinoki Sieb), the beech (Broussonetia papyrifera Vent), the cedar (Broussonetia kazinoki var. Humilis), etc., a deciduous broad-leaved shrub most of Korea (mainly distributed in the south It is distributed in China, Taiwan, Japan, etc., and it spreads geographically on both sides of the foothills and field banks. Its bast fiber has been used as a raw material for papermaking, and it has various medicinal effects, which is effective in tonic, nominal effect, tone, species, ripening, diuresis, removes wind, and clears blood. It is known to be effective in reducing vision.

본 발명에 사용된 닥나무 추출물은 닥나무로부터 침출, 전출하여 얻은 침출액 뿐 아니라 침출액을 다시 일부 또는 전부 농축하여 얻은 농축물 또는 상기의 농축물을 다시 건조시켜 제조한 침체, 전제, 정기, 유동엑기스 및 닥나무 중에 함유되어 주 효과를 발휘하는 화학 물질은 물론 식물 그 자체를 모두 포함한다. 또한 본 발명에서는 줄기, 뿌리, 잎, 꽃, 열매 등 닥나무의 모든 부분으로부터의 추출물을 사용할 수 있으며, 어느 특정 부분의 추출물로 한정되지 않는다.The extract of the mulberry used in the present invention is not only a leaching liquid obtained by leaching and transferring it from the mulberry, but also a concentrate obtained by partially or completely condensing the leaching liquid, or a stagnation, whole, regular, flow extract and dried mulberry prepared by drying the above concentrate again. It contains all the chemicals in the plant, as well as the main effect of the plant itself. In the present invention, extracts from all parts of the mulberry, such as stems, roots, leaves, flowers, fruits, etc. can be used, and are not limited to the extract of any particular part.

본 발명에서 사용되는 닥나무 추출물의 제조방법으로는 공지의 방법을 사용하는 것이 가능하다. 예를 들면, 닥나무를 자연 건조 또는 강제 건조 등 임의의 방법으로 건조하여 잘게 자른 후, 물, 에탄올, 부탄올, 아세톤 등의 극성 용매; 에테르, 헥산, 벤젠, 클로로포름, 에틸아세테이트 등의 비극성 용매; 상기 비극성 용매와 극성 용매의 혼합 요매; 알칼리 수 등의 용매, 또는 콩기름, 참기름 등의 식물유 등을 사용하여 냉침, 페르콜레이션(percolation), 온침 등의 임의의 방법에 의해서 치출 처리하여 유효 성분을 함유한 침출물을 얻는다. 침출 처리는 냉침과 페르콜레이션의 경우 12~96 시간 정도, 온침의 경우는 사용하는 용매 등의 종류와 온도에 따라 상이하나 바람직하게는 용매의 환류 온도에 가까운 온도로 0.5~24시간 정도 수행하는 것이 좋다. 특히, 함수 알코올에 침출한 틴크나 유동 엑기스 또는 엑기스의 것을 사용하는 것이 좋다.It is possible to use a well-known method as a manufacturing method of the mulberry extract used in the present invention. For example, the dried mulberry is dried by any method such as natural drying or forced drying and finely chopped, and then polar solvent such as water, ethanol, butanol, acetone, etc .; Nonpolar solvents such as ether, hexane, benzene, chloroform and ethyl acetate; Mixed solvents of the nonpolar and polar solvents; Using a solvent such as alkaline water, or vegetable oil such as soybean oil or sesame oil, it is extracted by any method such as cold sedimentation, percolation, and warm needle to obtain a leachate containing the active ingredient. The leaching treatment is about 12 to 96 hours for cold acupuncture and percolation, and depending on the type and temperature of the solvent used for warming, but preferably about 0.5 to 24 hours at a temperature close to the reflux temperature of the solvent. It is good. In particular, it is preferable to use a tincture, a liquid extract or an extract that has leached into the hydrous alcohol.

본 발명에 의한 화장료 조성물은 상기 닥나무 추출물을 조성물 총 중량에 대하여 0.0001~50중량%로 함유할 수 있다. 상기 닥나무 추출물의 함량이 0.0001중량% 미만이면 상기 추출물에 의한 항균, 항염 효과와 더불어 여드름 증상 개선 효과를 크게 얻을 수 없고, 50중량%를 초과하면 피부 안전성 또는 제형상의 문제가 있기 때문이다.The cosmetic composition according to the present invention may contain 0.0001 to 50% by weight of the mulberry extract based on the total weight of the composition. If the amount of the extract of the mulberry extract less than 0.0001% by weight can not obtain a significant improvement in acne symptoms with the antibacterial, anti-inflammatory effect by the extract, if it exceeds 50% by weight is due to skin safety or formulation problems.

본 발명에 의한 여드름 개선용 화장료 조성물은 항균 효과, 특히 여드름 원인균에 대한 항균 효과가 우수하며, 또한 항염 효과를 제공한다.The cosmetic composition for improving acne according to the present invention is excellent in antibacterial effect, in particular, the antibacterial effect against acne causing bacteria, and also provides an anti-inflammatory effect.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 화장품학 또는 피부과학적으로 허용가능한 매질 또는 기제를 함유하여 제형화될 수 있다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로서, 예를 들면, 용액, 겔, 고체, 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀) 및 비이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 또한 포말(foam)의 형태로 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 사용될 수 있다. 이들 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다.Cosmetic compositions according to the invention may be formulated containing a cosmetically or dermatologically acceptable medium or base. These are all formulations suitable for topical application, for example emulsions, suspensions, microemulsions, microcapsules, microgranules or ionic (liposomes) and non-obtained by dispersing an oil phase in solution, gels, solids, pasty anhydrous products, aqueous phases. It may be provided in the form of an ionic vesicle dispersant or in the form of a cream, skin, lotion, powder, ointment, spray or concealed stick. It may also be used in the form of a foam or in the form of an aerosol composition further containing a compressed propellant. These compositions may be prepared according to conventional methods in the art.

또한 본 발명에 의한 화장료 조성물은 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 상기 보조제는 화장품학 또는 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입된다.
In addition, the cosmetic composition according to the present invention is a fatty substance, an organic solvent, a dissolving agent, a thickening agent, a gelling agent, a softener, an antioxidant, a suspending agent, a stabilizer, a foaming agent, a fragrance, a surfactant, water, an ionic type or a non- With ionic emulsifiers, fillers, metal ion sequestrants, chelating agents, preservatives, vitamins, blockers, wetting agents, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic active agents, lipid vesicles or any other ingredients commonly used in cosmetics. It may contain adjuvants commonly used in the same cosmetic or dermatology field. Such adjuvants are introduced in amounts generally used in the cosmetic or dermatological arts.

이하, 시험예 및 실시예를 들어 본 발명의 구성 및 효과를 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 이들 시험예 및 실시예는 본 발명에 대한 이해를 돕기 위해 예시의 목적으로만 제공된 것일 뿐 본 발명의 범주 및 범위가 하기 실시예에 의해 제한되는 것은 아니다.
Hereinafter, the configuration and effects of the present invention will be described in more detail with reference to test examples and examples. However, these test examples and examples are provided only for the purpose of illustration in order to help the understanding of the present invention, but the scope and scope of the present invention is not limited by the following examples.

[실시예 1] 닥나무 추출물의 제조Example 1 Preparation of Methanol Extract

건조된 닥나무 전초 1kg을 정제수 10L에 가한 후 끓을 때까지 가열하고 10분간 더 가열한 다음 물을 제거하여 세척한 후 따로 정제수 10L를 가하여 다시 한 번 세척하였다. 잔류물을 풍건한 후 70% 에탄올 20L에 가한 다음 환류장치를 연결한 후 가온하여 24시간 환류 추출하였다. 80메쉬의 체를 이용하여 고형분을 제거한 후 남은 여액을 다시 여과한 후 감압 농축기를 이용하여 여액 중의 용매를 증류 제거하여 약 50g의 녹색 고형분을 얻었다.
After adding 1kg of dried mulberry starch to 10L purified water and heated until boiling, and further heated for 10 minutes, and then washed with water to remove, 10L purified water was added again and washed again. The residue was air-dried and added to 20L of 70% ethanol, and then connected to a reflux apparatus and then heated to reflux for 24 hours. After removing the solids using an 80 mesh sieve, the remaining filtrate was filtered again, and then the solvent in the filtrate was distilled off using a vacuum concentrator to obtain about 50 g of green solids.

[제형예 1 및 비교제형예 1~2][Formulation Example 1 and Comparative Formulation Examples 1 and 2]

하기 표 1에 나타낸 성분 및 함량(중량%)에 따라 제형예 1 및 비교제형예 1~2를 제조하였다. 구체적으로 설명하면, 제형예 1은 상기 실시예 1의 닥나무 추출물을 배합시킨 것이고, 비교제형예 1은 여드름 피부 개선의 유효성분을 전혀 포함시키지 않은 것이고, 비교제형예 2는 항균력에 대한 기준으로 삼을 표준물질로서, 여드름 치료제로 많이 사용하는 에리스롬보마이신(erythromycin)을 함유시킨 것이다.Formulation Example 1 and Comparative Formulation Examples 1 and 2 were prepared according to the ingredients and the contents (% by weight) shown in Table 1 below. Specifically, Formulation Example 1 is a combination of the extract of the mulberry of Example 1, Comparative Formulation Example 1 does not contain any active ingredients for improving acne skin, Comparative Formulation Example 2 is based on the antimicrobial activity As a standard, it contains erythromycin, which is widely used as an acne treatment.

제형예 1 및 비교제형예 1~2의 제조 방법은 다음과 같다. 하기 표 1의 A상의 성분들을 완전 용해시키고 별도의 용해조에서 B상의 성분들을 완전 용해시킨 다음, B상을 A상에 첨가하여 혼합가용화 시켰다. 여기에 C상의 성분들을 표 1에 기재된 배합비율에 따라 첨가하여 혼합 균일화시킨 다음 여과시켜 본 조성물들을 제조하였다.The preparation method of Formulation Example 1 and Comparative Formulation Examples 1 and 2 is as follows. The components of phase A in Table 1 were completely dissolved, and the components of phase B were completely dissolved in a separate dissolution tank, followed by mixing solubilization by adding phase B to phase A. The components of phase C were added thereto according to the blending ratios described in Table 1 to homogenize the mixture and then filtered to prepare the compositions.

구분division 제형예 1Formulation Example 1 비교제형예 1Comparative Formulation Example 1 비교제형예 2Comparative Formulation Example 2 AA 탈이온수(Deionized Water)Deionized Water To 100To 100 To 100To 100 To 100To 100 EDTA-2NaEDTA-2Na 0.020.02 0.020.02 0.020.02 글리세린glycerin 5.05.0 5.05.0 5.05.0 BB 에탄올ethanol PEG-60 경화 피마자유(hydrogenated castor oil)PEG-60 hydrogenated castor oil 0.40.4 0.40.4 0.40.4 향료(perfume)Perfume 0.040.04 0.040.04 0.040.04 CC 실시예 1Example 1 5.05.0 -- -- 에리스롬보마이신Erythrombomycin -- -- 5.05.0

[시험예 1] 여드름균에 대한 항균력 시험Test Example 1 Antibacterial Activity Test against Acne Bacteria

제형예 1 및 비교제형예 1~2의 조성으로 제조된 각각의 화장료 조성물을 가지고 여드름 원인 균주인 프로피오니박테리움 아크네스<ATCC 6919: 배지-BHI 브로쓰(broth)>에 대하여 항균력을 시험하였다.Antibacterial activity was tested against propionibacterium acnes <ATCC 6919: Medium-BHI broth>, an acne-causing strain, with the respective cosmetic compositions prepared in the formulations of Formulation Example 1 and Comparative Formulation Examples 1-2. .

여드름균에 대한 항균력 시험 방법은 다음과 같았다.The antibacterial test method for acne bacteria was as follows.

(1) 시험 균액 준비(1) Test bacteria preparation

프로피오니박테리움 아크네스는 BHI 브로쓰에 접종하여 혐기 배양한 배양액을 사용하였다.Propionibacterium acnes was used as a culture broth inoculated in BHI broth and anaerobic culture.

(2) 희석 용액 준비(2) dilution solution preparation

BHI 브로쓰(pH 6.8) 또는 LB 브로쓰(pH 4.5) 15ml에 상기 시험 균액을 0.15ml 첨가하여 잘 혼합한 것을 희석용액으로 사용하였다.0.15 ml of the test bacteria was added to 15 ml of BHI broth (pH 6.8) or LB broth (pH 4.5) and mixed well as a dilution solution.

(3) 시료 준비(3) sample preparation

제형예 1 및 비교제형예 1~2로부터 제조된 화장료 조성물 원액 그대로를 시료로 사용하였다.The cosmetic composition stock solutions prepared from Formulation Example 1 and Comparative Formulation Examples 1 and 2 were used as samples.

(4) 항균력 시험(4) antimicrobial activity test

1) 96웰의 세포배양관(96 well plate) 1번 행에 출발 농도에 맞도록 시료를 넣고 희석용액으로 총량을 200μl씩을 넣는다.1) Insert the sample to the starting concentration in the first well of 96-well cell culture tube (96 well plate) and add 200 μl of total amount into the dilution solution.

2) 1번 행의 혼합액을 잘 섞어준 다음 100μl를 취하여 2번 행에 넣고 잘 섞어준 다음, 다시 100μl를 취하여 3번 행에 넣는 방식으로 이중 희석(double dilution)을 행한다.2) Mix the mixed solution in the first row well, take 100μl into the second row, mix well, and then add 100μl to the third row and perform double dilution.

3) 32℃에서 24시간 및 48시간 정치 배양한 후 현탁된 정도로 균의 증식 유무를 판단하여 균의 증식이 없는 최소농도를 MIC(최소저지농도; Minimum Inhibitory Concentration) 값으로 결정한다. 만약 혼합액이 불투명하여 균의 증식 유무를 판단하기 어려우면 현미경 관찰을 통하여 확인한다.3) After incubation for 24 hours and 48 hours at 32 ℃, determine the growth of bacteria to the extent of suspension and determine the minimum concentration without growth of bacteria as MIC (Minimum Inhibitory Concentration) value. If the mixed solution is opaque and it is difficult to determine the growth of bacteria, check through a microscope.

여드름균에 대한 항균력 시험 결과를 아래 표 2에 나타내었다. MIC는 제형에 함유된 유효성분의 농도로 환산하여 표기하였다.The antimicrobial activity test results for acne bacteria are shown in Table 2 below. MIC is expressed in terms of the concentration of the active ingredient contained in the formulation.

항목Item pHpH 프로피오니박테리움 아크네스Propionibacterium Acnes 제형예 1Formulation Example 1 5.75.7 < 87 ppm<87 ppm 비교제형예 1Comparative Formulation Example 1 5.75.7 >최고 농도(항균력 없음)Maximum concentration (no antibacterial activity) 비교제형예 2Comparative Formulation Example 2 5.75.7 < 100 ppm<100 ppm

MIC에서 ppm 농도가 작을수록 여드름균에 대한 항균력에 대하여 유효한 물질이라고 할 수 있는데, 제형예 1의 경우 공지의 여드름 치료제인 에리스롬보마이신을 사용한 비교제형예 2보다 ppm 농도가 작게 나와 시험균에 대하여 우수한 항균력을 가짐을 확인할 수 있다.
The smaller the ppm concentration in MIC, the more effective the antimicrobial activity against acne bacteria. In the case of Formulation Example 1, the concentration of ppm was lower than that of Comparative Formulation Example 2 using the well-known acne treatment erythrombomycin. It can be confirmed that it has excellent antimicrobial activity.

[시험예 2] 지질합성(Lipogenesis) 억제 시험Experimental Example 2 Lipogenesis Inhibition Test

생쥐의 섬유아세포주(fibroblast cell line)인 3T3-L1 세포를 10%의 우태아 혈청(fetal bovine serum, FBS)이 함유된 DMEM(Dulbecos modified eagles medium, GIBCO BRL, Life Technologes 社) 배지가 담긴 6웰 배양 플레이트(culture plate)에 1×105 세포/웰로 부착시켰다. 2일이 지난 후 다시 새로운 DMEM(10% FBS 함유) 배지로 교환하고 2일 동안 배양하였다. 그 다음, 상기 배양한 세포를 다시 1㎍/㎖ 인슐린(insulin), 0.5mM IBMX 및 0.25μM 덱사메타손(dexamethasone)을 함유한 DMEM(10% FBS 함유)로 분화 유도를 하고 2일이 경과한 후 다시 인슐린이 포함된 DMEM으로 교환하여 5일 동안 배양하였다. 5일 후 다시 정상 배지(DMEM, 10% FBS 함유)로 교환하고 상기 세포가 형태적으로 지방세포로 변화할 때까지 관찰하면서 배양하였다.3T3-L1 cells, a mouse fibroblast cell line, were loaded with DMEM (Dulbecos modified eagles medium, GIBCO BRL, Life Technologes) medium containing 10% fetal bovine serum (FBS). The well culture plate was attached at 1 × 10 5 cells / well. After 2 days, it was again exchanged with fresh DMEM (containing 10% FBS) medium and incubated for 2 days. The incubated cells were then induced to differentiate with DMEM (containing 10% FBS) containing 1 μg / ml insulin, 0.5 mM IBMX and 0.25 μM dexamethasone, and again after 2 days. Incubated for 5 days by exchange with DMEM containing insulin. After 5 days, the cells were exchanged with normal medium (DMEM, containing 10% FBS) and cultured while observing until the cells changed to fat cells.

닥나무 추출물의 지방세포 내 지방 축적 억제 효능을 평가하기 위하여 상기에서 분화가 완료된 3T3-L1 지방세포를 이용하여 수단 III 염색(S4136, sigma-aldrich)을 실시하였다. 지방 세포를 인산염 버퍼 내에서 4% 파라포름알데하이드(pH 7.2)로 상온에서 고정한 후에 PBS(phsphate buffered saline)로 수세해준 후에 수단 III으로 염색한 후에 사진을 찍어서 육안 비교하였다. 대조군은 시험물질이나 비교물질을 첨가하지 않은 배지만을 사용한 것이고, 다른 비교군으로 카페인 50μM을 처리하였다. 지방 축적 억제 정도는 염색된 정도를 +++, ++, +,- 로 나누어 등급을 부여하였다. 그 결과를 표 3에 나타내었다.Sudan III staining (S4136, sigma-aldrich) was performed using the differentiated 3T3-L1 adipocytes to evaluate the inhibitory effect of adipocytes on adipocyte accumulation. Adipose cells were fixed at room temperature with 4% paraformaldehyde (pH 7.2) in phosphate buffer, washed with PBS (phsphate buffered saline), stained with Sudan III, and photographed for visual comparison. As a control group, only the medium without the test substance or the comparative substance was used, and 50 μM of caffeine was treated with another control group. The degree of fat accumulation inhibition was graded by dividing the degree of staining into +++, ++, +,-. The results are shown in Table 3.

시료sample 저해율%% Inhibition 대조군Control group ++++++ 비교군Comparison ++ 실시예 1Example 1 ++

상기 표 3에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 사용된 닥나무 추출물은 지질합성 저해 효과가 있음을 알 수 있다. 따라서, 지질합성이 억제됨으로써 피지가 감소되어 여드름 발생을 억제할 수 있다.
As shown in Table 3, it can be seen that the mulberry extract used in the present invention has a lipid synthesis inhibitory effect. Therefore, sebum is reduced by inhibiting lipid synthesis, thereby suppressing the occurrence of acne.

[시험예 3] 여드름 개선과 피지분비 감소 및 자극 유무의 시험[Test Example 3] Test for acne improvement and sebum secretion and irritation

여드름을 보유하고 있는 12명에게 상기 제형예 1 및 비교제형예 1~2로부터 제조된 화장료 조성물을 한 달간 사용하게 하였다. 여드름 개선 척도는 1점에서 5점까지로 하고, 1점은 ‘아니다’, 3점은 ‘보통이다’, 5점은 ‘매우 그렇다’로 표기하도록 하였다. 실험 결과는 하기의 표 4에 12명의 평균점수로 표기하였다.Twelve people with acne were allowed to use the cosmetic composition prepared from Formulation Example 1 and Comparative Formulation Examples 1 and 2 for one month. The acne improvement scale ranged from 1 to 5 points, with 1 being ‘no’, 3 being ‘normal’ and 5 being ‘very yes’. The experimental results are expressed in the average score of 12 people in Table 4 below.

여드름 소멸 시기는 소멸이 판독된 일수를 기준으로 하였으며, 여드름 재발은 유무로 1개월 뒤의 결과를 기준으로 하였다. 피지 분비감소는 1점에서 5점까지로 하고, 1점은 ‘아니다’, 3점은 ‘보통이다’, 5점은 ‘매우 그렇다’로 표기하도록 하였다. 실험 결과는 하기 표 4에 12명의 평균점수로 표기하였다. 피부자극의 유무는 (자극반응을 보인 명수)/(총 시험자수)로 보았다.Acne disappearance was based on the number of days the extinction was read, acne recurrence was based on the results after one month. Sebum secretion is reduced from 1 to 5 points, with 1 being ‘no’, 3 being ‘normal’ and 5 being ‘very yes’. The experimental results are expressed in the average score of 12 people in Table 4 below. The presence or absence of skin irritation was determined as (number of irritants) / (total number of test subjects).

염증성 여드름 개선Inflammatory Acne Improvement 면포성 여드름 소멸시기Cotton acne extinction 여드름 재발Acne recurrence 피지분비 감소Reduce sebum secretion 자극 유무Irritation 제형예 1Formulation Example 1 3.23.2 4일4 days radish 4.54.5 0/120/12 비교제형예 1Comparative Formulation Example 1 2.12.1 13일13th U 2.02.0 0/120/12 비교제형예 2Comparative Formulation Example 2 4.24.2 2일2 days radish 4.14.1 9/129/12

상기 표 4에 나타내 바와 같이, 제형예 1은 비교제형예 1에 비해 여드름이 재발되지 않았고, 전반적으로 여드름 개선에 대해 우수한 효과가 있음을 알 수 있다. 한편, 항균력 표준물질을 함유한 비교제형예 2의 경우, 제형예 1과 유사한 효능을 보이고 있으나, 사용함에 있어 자극이 강하여 장기적으로 사용하기에 피부자극의 우려가 있다.
As shown in Table 4, Formulation Example 1 did not recur acne compared to Comparative Formulation Example 1, it can be seen that there is an excellent effect on the overall acne improvement. On the other hand, Comparative Formulation Example 2 containing the antimicrobial activity standard, but shows a similar efficacy as Formulation Example 1, there is a fear of skin irritation in the long-term use is strong irritation in use.

[시험예 4] 염증 개선 효과Test Example 4 Inflammation Improvement

항염증 효과는 프로스타글란딘의 생성 억제 효과로 평가하였다. 상기 실시예 1의 닥나무 추출물을 이용하여 대식세포를 대상으로 효과를 측정하였다. 우선, 마우스의 복강에서 채취한 대식세포에 최종농도가 500M이 되도록 아스피린을 첨가해 세포에 잔존하는 시클로옥시제나제(cyclooxygenase, COX) 활성을 비가역적으로 억제하였다. 그런 다음 상기 현탁액을 96 웰의 세포배양관의 각 웰에 100μl를 넣어 5% CO2와 37℃ 조건의 배양기에서 2시간 동안 배양하여 대식 세포를 용기 표면에 부착시켰다. 이어, 부착된 대식 세포를 PBS로 3회 세척한 후 이를 추출물의 효과 시험에 사용하였다. 상기 배양된 대식세포 5x104 세포/ml에 LPS를 1%(w/v)로 함유하는 RPMI 배지를 첨가하여 12시간 동안 배양한 후 프로스타글란딘의 생성을 유발하고 추출물을 100μl 처리하여 유리된 프로스타글란딘을 효소면역 분석법(ELISA)을 이용하여 정량하였다.The anti-inflammatory effect was evaluated by the inhibitory effect of the production of prostaglandins. The effect was measured in macrophages using the extract of the mulberry of Example 1. First, aspirin was added to macrophages taken from the abdominal cavity of mice to a final concentration of 500 M, thereby irreversibly inhibiting cyclooxygenase (COX) activity remaining in the cells. Then, 100 μl of the suspension was added to each well of the 96 well cell culture tube and incubated for 2 hours in an incubator at 37 ° C. with 5% CO 2 to attach macrophages to the container surface. The attached macrophages were then washed three times with PBS and used for the effect test of the extract. The cultured macrophages 5x10 4 cells / ml by adding RPMI medium containing 1% (w / v) of LPS incubated for 12 hours to induce the production of prostaglandin and 100μl of the extract to the free prostaglandin enzyme Quantification using an immunoassay (ELISA).

이때, 추출물의 프로스타글란딘의 생성억제 활성은 LPS를 처리한 군과 처리하지 않은 군에서 각각 생성된 프로스타글란딘의 차이를 100%로 설정하고, LPS와 시료를 함께 처리하여 감소된 프로스타글란딘의 백분율을 통하여 대조군과 비교, 판정하였으며, 그 결과(프로스타글란딘의 생성억제 효과)를 하기 표 5에 나타내었다.In this case, the production inhibitory activity of the prostaglandin of the extract was set to 100% the difference between the prostaglandin produced in the LPS-treated and untreated groups, respectively, and treated with LPS and the sample to reduce the percentage of prostaglandin The results were compared and determined, and the results (the effect of inhibiting production of prostaglandins) are shown in Table 5 below.

블랭크(Blank)Blank 100%100% 대조군(아스피린 처리군)Control group (Aspirin treated group) 25.0%25.0% 실시예 1Example 1 26.1%26.1%

상기 표 5에서 보는 바와 같이, 실험결과 아스피린으로 처리한 대조군과 같이 실시예 1을 처리한 경우에도 프로스타글란딘의 생성억제효과가 매우 높음을 알 수 있다. As shown in Table 5, the experimental results, even when treated with Example 1 as a control group treated with aspirin it can be seen that the effect of inhibiting the production of prostaglandin is very high.

이를 통해 본 발명의 닥나무 추출물은 우수한 염증 개선 효과를 제공할 수 있음을 알 수 있다.
It can be seen that the mulberry extract of the present invention can provide an excellent inflammation improving effect.

Claims (6)

닥나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 여드름 개선용 화장료 조성물.Cosmetic composition for acne improvement containing the extract of the mulberry as an active ingredient. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 항균용임을 특징으로 하는 화장료 조성물.According to claim 1, wherein the composition is a cosmetic composition, characterized in that the antibacterial. 제2항에 있어서, 상기 조성물은 여드름 원인균인 프로피오니박테리움 아크네스에 대한 항균용임을 특징으로 하는 화장료 조성물.According to claim 2, wherein the composition is a cosmetic composition, characterized in that the antibacterial against acne cause bacteria Propionibacterium acnes. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 항염용임을 특징으로 하는 화장료 조성물.According to claim 1, wherein the composition is a cosmetic composition, characterized in that for anti-inflammatory. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 지질생성을 억제함을 특징으로 하는 화장료 조성물.The cosmetic composition according to claim 1, wherein the composition inhibits lipid formation. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 닥나무 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.001~50중량%의 양으로 함유됨을 특징으로 하는 화장료 조성물.The cosmetic composition according to any one of claims 1 to 5, wherein the mulberry extract is contained in an amount of 0.001 to 50% by weight based on the total weight of the composition.
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