KR20110078185A - 폴리뉴클레오티드를 이용한 제품 인증 장치 및 방법 - Google Patents

폴리뉴클레오티드를 이용한 제품 인증 장치 및 방법 Download PDF

Info

Publication number
KR20110078185A
KR20110078185A KR1020090134927A KR20090134927A KR20110078185A KR 20110078185 A KR20110078185 A KR 20110078185A KR 1020090134927 A KR1020090134927 A KR 1020090134927A KR 20090134927 A KR20090134927 A KR 20090134927A KR 20110078185 A KR20110078185 A KR 20110078185A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
polynucleotide
segment
product
target
group
Prior art date
Application number
KR1020090134927A
Other languages
English (en)
Inventor
이주원
박경희
Original Assignee
삼성전자주식회사
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 삼성전자주식회사 filed Critical 삼성전자주식회사
Priority to KR1020090134927A priority Critical patent/KR20110078185A/ko
Priority to US12/859,868 priority patent/US20110159484A1/en
Publication of KR20110078185A publication Critical patent/KR20110078185A/ko

Links

Images

Classifications

    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
    • B01L3/50—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes
    • B01L3/502—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures
    • B01L3/5027—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip
    • B01L3/502707—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip characterised by the manufacture of the container or its components
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M3/00—Tissue, human, animal or plant cell, or virus culture apparatus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6806—Preparing nucleic acids for analysis, e.g. for polymerase chain reaction [PCR] assay
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6813—Hybridisation assays
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6813—Hybridisation assays
    • C12Q1/6816—Hybridisation assays characterised by the detection means
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2531/00—Reactions of nucleic acids characterised by
    • C12Q2531/10—Reactions of nucleic acids characterised by the purpose being amplify/increase the copy number of target nucleic acid
    • C12Q2531/125—Rolling circle
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2533/00—Reactions characterised by the enzymatic reaction principle used
    • C12Q2533/10—Reactions characterised by the enzymatic reaction principle used the purpose being to increase the length of an oligonucleotide strand
    • C12Q2533/107—Probe or oligonucleotide ligation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2563/00—Nucleic acid detection characterized by the use of physical, structural and functional properties
    • C12Q2563/173—Nucleic acid detection characterized by the use of physical, structural and functional properties staining/intercalating agent, e.g. ethidium bromide

Abstract

폴리뉴클레오티드를 이용한 제품 인증 장치 및 방법에 관한 것이다. 일 구체예에 따른 폴리뉴클레오티드를 이용한 제품 인증 장치 및 방법에 따르면, 위조품과 진품을 용이하게 구별할 수 있다.
제품 인증, 폴리뉴클레오티드

Description

폴리뉴클레오티드를 이용한 제품 인증 장치 및 방법{Apparatus and method for authenticating product using polynucleotides}
폴리뉴클레오티드를 이용한 제품 인증 장치 및 방법에 관한 것이다.
위조품을 생산하는 행위는 손실 판매, 제품에 대한 소비자의 불신, 및 위조품에 대해 이루어진 배상 청구로 인한 부담 등 진품의 생산자에게 상당한 손해를 미친다. 위조로 인한 손실이 전 세계적으로 연간 2000억 달러에 달하며, 세계 무역의 10％ 이상이 위조 거래라고 한다. 또한, 위조 약품들로 인한 제약 회사의 손실은 320억 달러 이상으로 추정한다. 따라서, 진품의 생산자 및 이를 신뢰하고 사용하는 소비자를 보호하기 위해 진품과 위조품 상호 간의 구별을 위한 진품의 인증 방법이 요구되고 있다.
제품을 인증하는 종래 기술은 RFID 태그가 있다. 이는 태그 자체에 제품의 코드 및 간단한 정보가 내장되나, RFID 태그 자체에 대한 보안 기능이 좋지 않은 문제점을 내재하고 있다. 또한, 제품의 코드만을 알게 되는 경우에도, 제품 정보를 가져올 수 있는 경우가 대부분이어서 제품에 대한 신뢰성 있는 정보를 기대하기 힘들다. 특히, 진품에 해당하는 제품의 코드만을 복사하거나 위조하여 제작한 RFID 태그를 붙인 위조품에 대해서도 진품 여부를 판별할 수 없다.
제품을 인증하는 다른 종래 기술들로는 3차원 홀로그램, 바코드 및 워터마킹 등의 라벨을 물품에 부착하여 제품에 대한 인증에 사용하는 것이다. 그러나, 물품의 구매자는 이 라벨이 올바른 것인지 확인할 방법이 없고, 전용 스캐너와 같은 별도의 장치가 없다면, 사용자가 쉽게 인증할 수 있는 방법이 없는 문제점이 여전히 존재한다. 또한, 이런 라벨들에 인증 정보를 담더라도 라벨에 들어갈 수 있는 정보의 양이 한정되어 있어 보안 취약성을 지니고, 유통 경로 및 이력 등의 파악이 어려워 정확한 제품 인증 기능을 제공할 수 없는 문제점이 있다.
폴리뉴클레오티드를 이용한 제품 인증 장치 및 방법을 제공한다.
일 양상은 인증하고자 하는 제품에 포함되며, 제1 표적 부위 및 상기 제1 표적 부위와 인접한 제2 표적 부위를 포함하는 표적 폴리뉴클레오티드와 상기 제1 표적 부위와 완전하게 상보적인 뉴클레오티드 서열을 포함하는 제1 세그먼트(segment) 및 상기 제2 표적 부위와 완전하게 상보적인 뉴클레오티드 서열을 포함하는 제2 세그먼트를 포함하는 프로브 폴리뉴클레오티드를 혼성화시키는 단계; 상기 프로브 폴리뉴클레오티드 상의 제1 세그먼트의 말단 및 제2 세그먼트의 말단을 연결시키는 단계; 상기 프로브 폴리뉴클레오티드를 증폭시키는 단계; 및 상기 증폭된 산물을 검출하는 단계를 포함하는 제품 인증 방법을 제공한다.
상기 혼성화시키는 단계에서 사용되는 표적 폴리뉴클레오티드는 제1 표적 부위 및 상기 제1 표적 부위와 인접한 제2 표적 부위를 포함한다.
용어 "폴리뉴클레오티드(polynucleotide)"는 단일가닥 또는 이중가닥 형태로 존재하는 디옥시리보뉴클레오티드 또는 리보뉴클레오티드의 중합체를 의미한다. 또한, 특별하게 다른 언급이 없는 한 상기 폴리뉴클레오티드는 천연의 폴리뉴클레오티드의 유사체를 포함한다.
상기 방법에 있어서, 표적 폴리뉴클레오티드는 암호(code)가 되는 대상으로, 인증하고자 하는 제품에 포함되어 있거나, 상기 제품의 외부에 부착되어 존재할 수 있다. 예를 들어, 액체 형태의 약물의 경우, 상기 표적 폴리뉴클레오티드는 약물 내에 포함될 수 있으며, 캅셀 형태의 의약품인 경우, 상기 표적 폴리뉴클레오티드는 캅셀의 표면에 부착될 수 있다.
상기 표적 뉴클레오티드에서 실질적으로 암호를 이루는 부위는 제1 표적 부위 및 제2 표적 부위이다. 상기 제1 표적 부위 및 제2 표적 부위는 예를 들어, 각각 2 내지 60개, 3 내지 40개 또는 4 내지 20개의 임의의 뉴클레오티드로 이루어진 것일 수 있다.
제품의 인증은 상기 표적 부위에 형성된 암호를 해독함으로써 이루어질 수 있다. 또한, 암호의 개수는 상기 제시된 뉴클레오티드 개수 범위 내에서 당업자에 의해 임의로 조절될 수 있다. 예를 들어, 상기 뉴클레오티드가 디옥시리보뉴클레오티드인 경우, 제1 표적 부위 및 제2 표적 부위가 각각 5개의 뉴클레오티드로 이루어진다고 하면, 형성될 수 있는 암호의 총 개수는 410개가 될 수 있다. 따라서, 상기 제1 표적 부위 및 제2 표적 부위의 뉴클레오티드 개수를 다르게 하여, 인증하고자 하는 제품의 종류만큼 암호를 생성할 수 있다.
상기 표적 폴리뉴클레오티드는 예를 들어, 20 내지 200개, 30 내지 150개 또는 40 내지 100개의 뉴클레오티드로 이루어진 것일 수 있다.
상기 표적 폴리뉴클레오티드는 제품을 인증하는 암호로서 기능을 하므로, 제3자에 의하여 상기 표적 폴리뉴클레오티드가 복제될 수 없도록 제작되어야 한다. 즉, 상기 표적 폴리뉴클레오티드의 3' 말단에 히드록실기가 발생하는 것을 차단하 여 상기 표적 부위의 뉴클레오티드 서열 분석이 불가능하도록 한다. 따라서, 상기 표적 폴리뉴클레오티드는 3' 말단의 히드록실기가 아미노기, 니트로기, 알데히드기, 알킬기, 알릴기, 아릴기 및 페닐기로 이루어진 군으로부터 선택되는 작용기로 치환된 것일 수 있다. 또한, 상기와 동일한 이유로 상기 표적 폴리뉴클레오티드는 5'말단의 인산기가 아미노기, 니트로기, 알데히드기, 알킬기, 알릴기, 아릴기 및 페닐기로 이루어진 군으로부터 선택되는 작용기로 치환된 것일 수 있다. 또한, 상기 표적 폴리뉴클레오티드 중의 모든 포스포디에스테르 결합은 엔도뉴클레아제에 의해 절단되지 않는 결합으로 변형되어 있을 수 있다. 상기 엔도뉴클레아제에 의해 절단되지 않는 결합은 예를 들어, 포스포로티오에이트(phosphorothioate) 결합, 보라노포스페이트(boranophosphate) 결합, 메틸포스포네이트(methylphosphonate) 결합, 포스포로디티오에이트(phosphorodithioate) 결합, 포스포르아미도티오에이트(phosphoramidothioate) 결합, 포스포르아미디트(phosphoramidite) 결합, 포스포르디아미데이트(phosphordiamidate) 결합, 알킬 포스포트리에스테르(alkyl phosphotriester) 결합 및 포름아세탈(formacetal) 결합이 있으나, 이에 한정되지 않으며, 상기 결합의 한 종류 또는 상기 결합의 조합에 의한 변형도 가능하다.
상기 혼성화시키는 단계에서 사용되는 프로브 폴리뉴클레오티드는 제1 세그먼트(segment) 및 제2 세그먼트를 포함한다.
상기 방법에 있어서, 프로브 폴리뉴클레오티드는 상기 표적 폴리뉴클레오티드의 암호를 해독하는 대상으로, 하기 설명할 제품 인증 장치에 포함될 수 있다. 상기 제1 세그먼트 및 제2 세그먼트는 각각 제1 표적 부위 및 제2 표적 부위에 대 응하는 뉴클레오티드 서열로, 상기 제1 세그먼트는 제1 표적 부위와 완전하게 상보적인 뉴클레오티드 서열을 포함하고, 상기 제2 세그먼트는 제2 표적 부위와 완전하게 상보적인 뉴클레오티드 서열을 포함할 수 있다. 즉, 상기 암호가 해독되기 위해서는 제1 세그먼트의 모든 뉴클레오티드와 제1 표적 부위의 모든 뉴클레오티드가 미스매치(mismatch)가 되는 뉴클레오티드 서열 없이 완전하게 상보적 결합을 하고, 제2 세그먼트의 모든 뉴클레오티드 또한, 제2 표적 부위의 모든 뉴클레오티드와 완전하게 상보적 결합을 하여야 한다.
상기 제1 세그먼트 및 제2 세그먼트는 각각 상기 프로브 폴리뉴클레오티드의 5' 말단 또는 3' 말단의 뉴클레오티드를 포함하며, 상기 말단의 뉴클레오티드로부터 2 내지 30개, 3 내지 20개 또는 4 내지 10개의 연속적인 뉴클레오티드로 이루어진 것일 수 있다. 즉, 상기 프로브 폴리뉴클레오티드 상에서 제1 세그먼트와 제2 세그먼트는 각각 양 말단에 위치할 수 있다.
상기 프로브 폴리뉴클레오티드는 예를 들어, 10 내지 300개, 20 내지 200개 또는 30 내지 100개의 뉴클레오티드로 이루어진 것일 수 있다. 또한, 상기 표적 폴리뉴클레오티드 및 프로브 폴리뉴클레오티드는 각각 단일 가닥일 수 있다.
상기 단계에서, 혼성화는 상기 표적 폴리뉴클레오티드 및 프로브 폴리뉴클레오티드를 접촉함으로써 이루어진다. 예를 들어, 캅셀 형태의 의약품의 진품 여부를 판단하는 경우, 상기 표적 폴리뉴클레오티드가 부착된 상기 캅셀의 표면을 상기 프로브 폴리뉴클레오티드가 포함되어 있는 제품 인증 장치에 접촉시켜 상기 혼성화 단계를 수행할 수 있다.
상기 방법은 상기 프로브 폴리뉴클레오티드 상의 제1 세그먼트의 말단 및 제2 세그먼트의 말단을 연결시키는 단계를 포함할 수 있다.
상기 혼성화 단계에서 혼성화된 폴리뉴클레오티드는 상기 제1 세그먼트의 말단 및 제2 세그먼트의 말단 사이에 하나의 닉(nick)을 갖는 것일 수 있다. 즉, 혼성화된 폴리뉴클레오티드 중 프로브 폴리뉴클레오티드가 닉을 갖는 폴리뉴클레오티드 가닥이다.
용어 "닉(nick)"은 이중 가닥의 폴리뉴클레오티드 중 하나의 폴리뉴클레오티드 가닥 상에서 인접한 뉴클레오티드 사이에 포스포디에스테르 결합이 없는 현상을 의미한다. 상기 혼성화된 폴리뉴클레오티드에 닉이 존재하기 위해서는, 상기 표적 폴리뉴클레오티드의 제1 표적 부위 및 제2 표적 부위와 프로브 폴리뉴클레오티드의 제1 세그먼트 및 제2 세그먼트가 각각 완전하게 상보적으로 결합하여 상기 제1 세그먼트의 5' 말단 또는 3' 말단의 뉴클레오티드와 상기 제2 세그먼트의 3' 말단 또는 5' 말단의 뉴클레오티드가 바로 인접한 위치에 존재하여야 한다.
상기 연결시키는 단계는 상기 닉을 연결하는 것을 의미한다. 즉, 상기 단계는 상기 혼성화 단계에서 혼성화된 표적 폴리뉴클레오티드 및 프로브 폴리뉴클레오티드의 이중 가닥 중 프로브 폴리뉴클레오티드 내의 닉을 인식하여 포스포디에스테르 결합을 형성하도록 한다. 상기 결합의 형성은 예를 들어, T4 DNA 리가제와 같은 리가제(ligase)에 의해 이루어질 수 있다.
상기 연결시키는 단계에 의해 상기 프로브 폴리뉴클레오티드는 단일 가닥의 원형(circular form) 폴리뉴클레오티드를 형성할 수 있다.
상기 방법은 상기 프로브 폴리뉴클레오티드를 증폭시키는 단계를 포함할 수 있다.
용어 "증폭(amplification)"은 단일 가닥의 폴리뉴클레오티드를 주형으로 하여 상기 폴리뉴클레오티드와 상보적인 폴리뉴클레오티드를 뉴클레오티드의 중합(polymerization)에 의해 대량으로 생산하는 것을 의미한다. 상기 증폭이 DNA의 중합에 의한 경우라면, 상기 증폭시키는 단계에서 당업계에 공지된 프라이머(primer)를 첨가하여 수행할 수 있다. 상기 프라이머는 상기 프로브 폴리뉴클레오티드와 상보적인 5 내지 30개의 뉴클레오티드로 이루어진 올리고뉴클레오티드 또는 6개의 임의의 뉴클레오티드로 이루어진 올리고뉴클레오티드(random hexamer)일 수 있다.
상기 증폭시키는 단계는 중합 효소 연쇄 반응(PCR), 리가제 연쇄 반응(ligase chain reaction), 전사 증폭법, 자립형 서열 복제법, 표적 폴리뉴클레오티드 서열의 선택적 증폭법, 공통 서열로써 프라이밍된 중합 효소 연쇄 반응(CP-PCR), 무작위로 프라이밍된 중합 효소 연쇄 반응(AP-PCR), 핵산계 서열 증폭법(NABSA), 회전환 증폭법(rolling circle amplification), 다중 분리 증폭법(multiple displacement amplification) 또는 원-대-원 증폭법(circle-to-circle amplification)에 의해 이루어질 수 있다. 또한, 상기 증폭은 상기 증폭 방법에 적당하도록 당업계에 공지된 조건에서 이루어질 수 있으나, 일반적으로, 상온에서 이루어질 수 있다.
상기 방법은 상기 증폭된 산물을 검출하는 단계를 포함할 수 있다.
상기 증폭된 산물을 검출하기 위해, 상기 증폭된 산물은 검출 가능한 표지를 포함할 수 있다.
용어 "검출 가능한 표지(detectable label)"는 표지가 없는 동일한 종류의 분자들 중에서 표지를 포함하는 분자의 특이적으로 검출하도록 하는 원자 또는 분자로, 상기 검출 가능한 표지는 예를 들어, 색깔 비드(colored bead), 항원 결정체, 효소, 혼성화 가능한 핵산, 발색 물질, 형광 물질, 인광 물질, 전기적으로 검출 가능한 분자, 변경된 형광-분극 또는 변경된 빛-확산을 제공하는 분자 또는 양자점 등을 포함할 수 있다. 또한, 상기 표지는 P32 및 S35와 같은 방사선동위원소, 화학발광 (chemiluminescent) 화합물, 표지된 결합 단백질, 중금속 원자 및 다이와 같은 분광학적 마커, 및 자기 표지물을 포함할 수 있다. 상기 다이는 예를 들어, 퀴놀린 다이, 트리아릴메탄 다이, 프탈레인, 아조 다이 및 시아닌 다이를 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 상기 형광 물질은 예를 들어, 플루오리신 (fluorescein), 피코에리트린 (phycoerythrin), 로다민, 리사민 (lissamine), 및 Cy3와 Cy5 (Pharmacia)를 포함하나 이에 한정되지 않는다.
상기 검출 가능한 표지는 상기 증폭된 산물, 즉 증폭된 프로브 폴리뉴클레오티드에 포함되어, 상기 증폭된 산물을 선택적으로 검출할 수 있다. 예를 들어, 형광 물질을 표지로 사용하는 경우라면, 형광을 검출하는 스캐너를 사용하여 형광 물질의 발광 여부를 검출할 수 있다.
상기 방법은 상기 검출하는 단계 이후, 상기 증폭된 산물이 검출되면 인증하 고자 하는 제품을 진품으로 결정하는 단계를 더 포함할 수 있다.
다른 양상은 상기 프로브 폴리뉴클레오티드 및 리가제를 포함하는 시료 주입부; 폴리뉴클레오티드 중합 효소, 프라이머 및 dNTP를 포함하는 증폭부; 및 상기 증폭된 폴리뉴클레오티드를 검출하는 검출부를 포함하는 제품 인증 장치를 제공한다.
상기 시료 주입부는 상기 제품 인증 방법에서 설명한 표적 폴리뉴클레오티드를 접촉시키는 부분이다. 상기 시료 주입부에서는 상기 프로브 폴리뉴클레오티드의 중의 제1 세그먼트 및 제2 세그먼트 사이의 닉을 연결하는 반응이 일어나므로, 액체 상에서 이루어져야 한다. 따라서, 상기 시료 주입부는 리가제가 기능을 할 수 있도록 당업계에 공지된 완충액이 포함될 수 있다.
상기 증폭부는 상기 프로브 폴리뉴클레오티드가 증폭되는 부분으로 폴리뉴클레오티드 중합 효소, 프라이머 및 dNTP를 포함한다. 또한, 상기 증폭부는 중합 효소가 기능을 할 수 있도록 당업계에 공지된 완충액이 포함될 수 있다. 증폭부에 포함되는 완충액은 상기 시료 주입부에 포함된 완충액과 호환 가능한 것일 수 있다. 이러한 경우라면, 시료 주입부에 포함된 완충액을 상기 증폭부로 이동하도록 하여 그대로 사용될 수 있다. 한편, 상기 dNTP는 검출 가능한 표지를 더 포함하는 것일 수 있다. 상기 검출 가능한 표지에 대한 설명은 상기와 같으며, 상기 검출 가능한 표지는 예를 들어, 색깔 비드(colored bead), 항원 결정체, 효소, 발색 물질, 형광 물질, 인광 물질, 전기적으로 검출 가능한 분자, 변경된 형광-분극 또는 변경된 빛-확산을 제공하는 분자 및 양자점으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.
상기 검출부는 상기 증폭된 프로브 폴리뉴클레오티드를 검출하는 부분이다. 상기 검출부는 폴리뉴클레오티드에 특이적으로 삽입되는 인터킬레이터(interchelator)를 더 포함하는 것일 수 있다. 상기 인터킬레이터는 예를 들어, Alexa Fluor 350®, Alexa Fluor 430®, Alexa Fluor 488®, Alexa Fluor 532®, Alexa Fluor 546®, Alexa Fluor 568®, Alexa Fluor 594®, Alexa Fluor 633®, Alexa Fluor 647®, Alexa Fluor 660®, Alexa Fluor 680®, Cy2®, Cy3.18, Cy3.5®, Cy3®, Cy5.18, Cy5.5®, Cy5®, Cy7®, Oregon Green, Oregon Green 488-X, Oregon Green®, Oregon Green®488, Oregon Green®500, Oregon Green®514, SYTO 11, SYTO 12, SYTO 13, SYTO 14, SYTO 15, SYTO 16, SYTO 17, SYTO 18, SYTO 20, SYTO 21, SYTO 22, SYTO 23, SYTO 24, SYTO 25, SYTO 40, SYTO 41, SYTO 42, SYTO 43, SYTO 44, SYTO 45, SYTO 59, SYTO 60, SYTO 61, SYTO 62, SYTO 63, SYTO 64, SYTO 80, SYTO 81, SYTO 82, SYTO 83, SYTO 84, SYTO 85, SYTOX Blue, SYTOX Green, SYTOX Orange, SYBR Green YO-PRO-1, YO-PRO-3, YOYO-1, YOYO-3 티아졸 오렌지(thiazole orange) 또는 에티디움 브로마이드(ethidium bromide)일 수 있으나, 이에 한정되지 않는다. 예를 들어, 상기 검출부에 에티디움 브로마이드가 포함되어 있는 경우, 검출부로 이동된 증폭된 프로브 폴리뉴클레오티드에 에티디움 브로마이드가 삽입되므로, 자외선을 통해 용이하게 증폭된 산물을 검출할 수 있다.
한편, 상기 시료 주입부, 증폭부 및 검출부는 유체소통 가능하게 연결될 수 있다. 또한, 상기 장치는 시료 주입부에 포함되어 있는 리가제가 증폭부로 이동하지 못하도록 상기 시료 주입부 및 증폭부가 연결되는 부분에 상기 리가제를 여과할 수 있는 필터를 더 포함할 수 있다. 또한, 상기 장치는 사용의 편의를 위해 예를 들어, 마이크로 플레이트와 같은 고체 지지체에 상기 시료 주입부, 증폭부 및 검출부가 고정되어 있는 것일 수 있다.
일 구체예에 따른 폴리뉴클레오티드를 이용한 제품 인증 장치 및 방법에 따르면, 위조품과 진품을 용이하게 구별할 수 있다.
이하 하나 이상의 구체예를 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 하나 이상의 구체예를 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
도 1은 일 구체예에 따른 제품 인증 장치의 모식도이며, 도 2는 일 구체예에 따른 제품 인증 방법에서 혼성화 단계를 나타내는 모식도이다. 도 1 및 도 2를 참조하여 폴리뉴클레오티드를 이용한 제품 인증 방법의 일 구체예를 설명하면 다음과 같다.
먼저, 프로브 폴리뉴클레오티드(100) 및 리가제(ligase)가 포함되어 있는 시료 주입부(10)에 인증하고자 하는 제품에 포함된 표적 폴리뉴클레오티드(110)를 접촉시킨다. 상기 표적 폴리뉴클레오티드(110)는 폴리뉴클레오티드를 안정화시킬 수 있는 당업계에 공지된 완충액에 포함되어 있을 수 있다. 또는, 상기 표적 폴리뉴클레오티드(110)는 건조 상태로 존재할 수 있으며, 이러한 경우에는 상기 시료 주입부(10)에 완충액이 포함되어 있을 수 있다. 인증하고자 하는 제품이 진품인 경우에는 시료 주입부(10) 내에서 상기 설명한 바에 따라, 표적 폴리뉴클레오티드(110)의 제1 표적 서열(60) 및 제2 표적 서열(70)과 프로브 폴리뉴클레오티드(100)의 제1 세그먼트(80) 및 제2 세그먼트(90) 사이에 혼성화, 즉, 완전하게 상보적인 결합이 이루어지고, 상기 혼성화된 이중 가닥의 폴리뉴클레오티드 상의 제1 세그먼트(80) 및 제2 세그먼트(90) 사이에는 닉(nick)이 생성된다. 상기 시료 주입부(10)에 포함된 리가제는 상기 닉을 연결시키고, 닉이 연결되어 닫힌 원형의 단일 가닥 폴리뉴클레오티드 형태의 프로브 폴리뉴클레오티드(100)는 필터(40) 상의 포어를 통해 증폭부(20)로 이동하게 된다. 이때, 리가제는 상기 필터(40)에 여과되어 증폭부(20)로 이동하지 못한다. 완충액과 함께 증폭부(20)로 이동된 상기 프로브 폴리뉴클레오티드(100)는 증폭부(20)에 포함된 폴리뉴클레오티드 중합 효소, 프라이머 및 dNTP를 이용하여 회전환 증폭법(rolling circle amplification)에 의해 증폭된다. 상기 증폭된 산물들은 유체소통 가능하게 연결된 이동 채널(50)을 통해 상기 완충액과 함께 검출 가능한 표지를 포함하는 검출부(30)로 이동된다. 이후, 검출부(30)로 이동된 증폭된 산물들에 폴리뉴클레오티드에 특이적으로 삽입될 수 있으며, 검출 표지로 사용될 수 있는 인터킬레이터(예를 들어, 에티디움 브로마이드)가 삽입된다. 상기 검출부(30)에 자외선을 조사하면, 증폭된 산물의 존재 여부 및 신호의 강도를 확인할 수 있고, 이로부터 인증하고자 하는 제품이 진품인지 여부를 확인할 수 있다.
하기 실시예는, 상기 하나 이상의 구체예에 따른 제품 인증 장치를 이용하여 제품을 인증하는 방법을 실시한 결과이다.
실시예 1: 표적 폴리뉴클레오티드 및 프로브 폴리뉴클레오티드의 제조
표적 폴리뉴클레오티드 및 프로브 폴리뉴클레오티드는 ㈜바이오니아에 주문 제작하였다. 표적 폴리뉴클레오티드는 총 39mer가 되도록 제작하였으며, 프로브 폴리뉴클레오티드는 총 69mer가 되도록 제작하였다. 상기 표적 폴리뉴클레오티드 중의 모든 포스포디에스테르 결합은 포스포로티오에이트(phosphorothioate) 결합이 되도록 변형하여 제작하였다. 모든 폴리뉴클레오티드는 0.2 μM의 스케일로 합성하였으며, PAGE 정제후 MALDI-TOF를 통해 품질 검사를 수행하였다.
도 3은 실시예 1에서 사용된 일 구체예에 따른 표적 폴리뉴클레오티드 서열을 나타낸다. 일 구체예에 따른 표적 폴리뉴클레오티드 서열은 5' 말단 및 3' 말단 모두 아민기로 치환되어 있다. 또한, 도 3에서 나타낸 바와 같이, 상기 표적 폴리뉴클레오티드 서열은 5' 말단의 뉴클레오티드로부터 19개의 연속된 뉴클레오티드 서열로 이루어진 제1 표적 서열(밑줄) 및 상기 제1 표적 서열과 인접하며, 상기 제1 표적 서열로부터 20개의 연속된 뉴클레오티드 서열로 이루어진 제2 표적 서열(윗줄)을 포함한다.
도 4는 실시예 1에서 사용된 일 구체예에 따른 프로브 폴리뉴클레오티드 서열을 나타낸다. 도 4에서 나타낸 바와 같이, 상기 프로브 폴리뉴클레오티드 서열은 5' 말단의 뉴클레오티드로부터 19개의 연속된 뉴클레오티드 서열로 이루어진 제1 세그먼트(밑줄), 3' 말단의 뉴클레오티드로부터 20개의 연속된 뉴클레오티드 서열로 이루어진 제2 세그먼트(윗줄) 및 상기 제1 세그먼트 및 제2 세그먼트 사이에 루프 구조를 형성하도록 하는 30개의 뉴클레오티드 서열을 포함한다.
상기 표적 폴리뉴클레오티드 및 프로브 폴리뉴클레오티드의 서열을 각각 서열목록에 기재하였다(서열 번호 1 및 서열 번호 2).
실시예 2: 표적 폴리뉴클레오티드 및 프로브 폴리뉴클레오티드를 사용한 제품 인증 실험
실시예 1에서 제작한 표적 폴리뉴클레오티드(1 fM) 및 프로브 폴리뉴클레오티드(1 pM)을 20 ㎕의 완충액 [50 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 1 mM ATP 및 10 mM 디티오트레이톨(dithiothreitol); pH 7.5]에 첨가하고 25℃에서 1-2분 동안 혼성화시켰다. 이후, 상기 반응액에 T4 DNA 리가제(Promega) 1 ㎕를 첨가하고, 37℃에서 10분 동안 반응시켰다. 반응이 완료된 후, 상기 결합 산물 1 ㎕를 이용하여 증폭 반응을 수행하였다. 상기 증폭 반응은 RepliG-ultra Fast mini KIT (Qiagen, cat No. 150035)를 사용하였으며, 상기 키트의 프로토콜에 따라 모든 실험을 수행하였다. 이때, 검출 표지로는 상기 프로토콜의 추천에 따라 SYBR® Green Ⅱ를 사용하였다. 상기 증폭 반응은 실시간 PCR(Real-time PCR) 기기인 TMC-1000(삼성종합기술원)을 사용하여 수행하였으며, 30℃의 등온 조건에서 115초 동안 반응시키고, 이후 5초 동안 형광 검출을 반복하였다. 상기 실험은 4회 반복 수행하였다.
도 5는 상기 증폭 반응을 수행한 결과를 나타낸 그래프이다. 도 5의 그래프에서 앞의 4개의 곡선 그래프(붉은색, 파란색, 녹색, 노란색)는 4회 반복한 실험 결과를 의미하고, 뒤의 2개의 곡선 그래프(갈색, 보라색)는 표적 폴리뉴클레오티드를 첨가하지 않은 대조군이다. 상기 실험 결과, 1 fM의 표적 폴리뉴클레오티드로 20 내지 40분 내에 증폭이 이루어졌으며, 대조군은 80분 이상이 지난 후에 증폭이 이루어졌다. 실시예 2에서 사용한 RepliG-ultra Fast mini KIT는 증폭이 민감하게 일어나기 때문에, 증폭 대상이 없더라도 자체 반응에 의해 비특이적으로 증폭 반응이 일어날 수 있으나, 이는 매우 오랜 시간 후의 일어나므로 표적의 존재 유무를 확인함에 있어서 크게 문제가 되지 않는다. 따라서, 상기 증폭 반응으로부터 일 구체예 따른 표적 폴리뉴클레오티드 및 프로브 폴리뉴클레오티드를 통해 제품 인증 과정을 수행할 수 있음을 확인할 수 있었다.
도 1은 일 구체예에 따른 제품 인증 장치의 모식도이다.
도 2는 일 구체예에 따른 제품 인증 방법에서 혼성화 단계를 나타내는 모식도이다.
도 3은 일 구체예에 따른 표적 폴리뉴클레오티드 서열을 나타낸다.
도 4는 일 구체예에 따른 프로브 폴리뉴클레오티드 서열을 나타낸다.
도 5는 일 구체예에 따른 증폭 반응을 수행한 결과를 나타낸 그래프이다.
<도면에 사용된 주요 부호에 대한 설명>
10: 시료 주입부
20: 증폭부
30: 검출부
40: 필터
50: 이동 채널
60: 제1 표적 부위
70: 제2 표적 부위
80: 제1 세그먼트
90: 제2 세그먼트
100: 프로브 폴리뉴클레오티드
110: 표적 폴리뉴클레오티드
<110> Samsung Electronics Co. Ltd <120> Apparutus and method for authenticating product using polynucleotides <160> 2 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 39 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> target polynucleotide for authenticating product <220> <221> misc_difference <222> (1) <223> 5' phosphate group is substituted by amine group <220> <221> misc_difference <222> (39) <223> 3' hydroxyl group is substituted by amine group <220> <221> misc_difference <222> (1)..(39) <223> all nucleotides are linked by phosphorothioate bonds <400> 1 gatgctaatt actatctccc ctactttata gagcataag 39 <210> 2 <211> 69 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> probe polynucleotide for authenticating product <400> 2 ggagatagta attagcatca tcaataaaac ctatacccgc cggaatggtc ttatgctcta 60 taaagtagg 69

Claims (20)

  1. 인증하고자 하는 제품에 포함되며, 제1 표적 부위 및 상기 제1 표적 부위와 인접한 제2 표적 부위를 포함하는 표적 폴리뉴클레오티드와 상기 제1 표적 부위와 완전하게 상보적인 뉴클레오티드 서열을 포함하는 제1 세그먼트(segment) 및 상기 제2 표적 부위와 완전하게 상보적인 뉴클레오티드 서열을 포함하는 제2 세그먼트를 포함하는 프로브 폴리뉴클레오티드를 혼성화시키는 단계;
    상기 프로브 폴리뉴클레오티드 상의 제1 세그먼트의 말단 및 제2 세그먼트의 말단을 연결시키는 단계;
    상기 프로브 폴리뉴클레오티드를 증폭시키는 단계; 및
    상기 증폭된 산물을 검출하는 단계를 포함하는 제품 인증 방법.
  2. 제1항에 있어서, 상기 제1 표적 부위 및 제2 표적 부위는 각각 2 내지 60개의 임의의 뉴클레오티드로 이루어진 것인 방법.
  3. 제1항에 있어서, 상기 표적 폴리뉴클레오티드는 20 내지 200개의 뉴클레오티드로 이루어진 것인 방법.
  4. 제1항에 있어서, 상기 표적 폴리뉴클레오티드는 3' 말단의 히드록실기가 아미노기, 니트로기, 알데히드기, 알킬기, 알릴기, 아릴기 및 페닐기로 이루어진 군 으로부터 선택되는 작용기로 치환된 것인 방법.
  5. 제1항에 있어서, 상기 표적 폴리뉴클레오티드 중의 모든 포스포디에스테르 결합은 엔도뉴클레아제에 의해 절단되지 않는 결합으로 변형되어 있는 것인 방법.
  6. 제1항에 있어서, 상기 제1 세그먼트 및 제2 세그먼트는 각각 상기 프로브 폴리뉴클레오티드의 5' 말단 또는 3' 말단의 뉴클레오티드를 포함하며 상기 말단의 뉴클레오티드로부터 2 내지 30개의 연속적인 뉴클레오티드로 이루어진 것인 방법.
  7. 제1항에 있어서, 상기 프로브 폴리뉴클레오티드는 10 내지 300개의 뉴클레오티드로 이루어진 것인 방법.
  8. 제1항에 있어서, 상기 표적 폴리뉴클레오티드 및 프로브 폴리뉴클레오티드는 단일 가닥인 것인 방법.
  9. 제1항에 있어서, 상기 혼성화된 폴리뉴클레오티드는 상기 제1 세그먼트의 말단 및 제2 세그먼트의 말단 사이에 하나의 닉(nick)을 갖는 것인 방법.
  10. 제1항에 있어서, 상기 연결시키는 단계는 리가제에 의해 이루어지는 것인 방법.
  11. 제1항에 있어서, 상기 증폭시키는 단계는 회전환 증폭법(rolling circle amplification) 또는 다중 분리 증폭법(multiple displacement amplification)에 의해 이루어지는 것인 방법.
  12. 제1항에 있어서, 상기 증폭은 상온에서 이루어지는 것인 방법.
  13. 제1항에 있어서, 상기 증폭된 산물은 검출 가능한 표지를 포함하는 것인 방법.
  14. 제1항에 있어서, 상기 검출하는 단계 이후, 상기 증폭된 산물이 검출되면 상기 제품을 인증 제품으로 결정하는 단계를 더 포함하는 것인 방법.
  15. 제1항의 프로브 폴리뉴클레오티드 및 리가제를 포함하는 시료 주입부;
    폴리뉴클레오티드 중합 효소, 프라이머 및 dNTP를 포함하는 증폭부; 및
    상기 증폭된 폴리뉴클레오티드를 검출하는 검출부를 포함하는 제품 인증 장치.
  16. 제15항에 있어서, 상기 검출부는 폴리뉴클레오티드에 특이적으로 삽입되는 인터킬레이터(interchelator)를 더 포함하는 것인 장치.
  17. 제16항에 있어서, 상기 인터킬레이터는 SYBR Green 또는 에티디움 브로마이드(ethidium bromide)인 것인 장치.
  18. 제15항에 있어서, 상기 dNTP는 검출 가능한 표지를 더 포함하는 것인 장치.
  19. 제18항에 있어서, 상기 검출 가능한 표지는 색깔 비드(colored bead), 항원 결정체, 효소, 발색물질, 형광 물질, 인광물질, 전기적으로 검출 가능한 분자, 변경된 형광-분극 또는 변경된 빛-확산을 제공하는 분자 및 양자점으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 것인 장치.
  20. 제15항에 있어서, 상기 시료 주입부, 증폭부 및 검출부는 유체소통 가능하게 연결되어 있는 것인 장치.
KR1020090134927A 2009-12-30 2009-12-30 폴리뉴클레오티드를 이용한 제품 인증 장치 및 방법 KR20110078185A (ko)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020090134927A KR20110078185A (ko) 2009-12-30 2009-12-30 폴리뉴클레오티드를 이용한 제품 인증 장치 및 방법
US12/859,868 US20110159484A1 (en) 2009-12-30 2010-08-20 Apparatus and method of authenticating product using polynucleotides

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020090134927A KR20110078185A (ko) 2009-12-30 2009-12-30 폴리뉴클레오티드를 이용한 제품 인증 장치 및 방법

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20110078185A true KR20110078185A (ko) 2011-07-07

Family

ID=44188011

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020090134927A KR20110078185A (ko) 2009-12-30 2009-12-30 폴리뉴클레오티드를 이용한 제품 인증 장치 및 방법

Country Status (2)

Country Link
US (1) US20110159484A1 (ko)
KR (1) KR20110078185A (ko)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2748320B1 (en) * 2011-08-24 2018-06-13 Grifols Therapeutics LLC Compositions and methods for nucleic acid hybridization
US9765386B2 (en) 2012-05-30 2017-09-19 Zhong Li Instantaneous detection of biomarks and uses thereof

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5198543A (en) * 1989-03-24 1993-03-30 Consejo Superior Investigaciones Cientificas PHI29 DNA polymerase
US5849544A (en) * 1992-07-24 1998-12-15 University Of Australia Amplification and detection process
JP2006520190A (ja) * 2003-01-21 2006-09-07 マイクロニクス， インコーポレイテッド 流体の微小流体的な操作、増幅、および分析（例えば、細菌アッセイおよびアンチグロブリン試験）のための方法およびシステム
US7972859B2 (en) * 2006-06-27 2011-07-05 Authentix, Inc. Authentication of ingestible products using saccharides as markers

Also Published As

Publication number Publication date
US20110159484A1 (en) 2011-06-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11718874B2 (en) Hybridization chain reaction methods for in situ molecular detection
US20180291434A1 (en) Nucleic acid-based linkers for detecting and measuring interactions
EP3768852B1 (en) Methods and compositions for molecular authentication
KR102415404B1 (ko) 핵산 타간트를 사용한 물품의 인증
CN105164279B (zh) 靶核酸的多重分析
US9476101B2 (en) Scanning multifunctional particles
EP2920320B1 (en) Rca reporter probes and their use in detecting nucleic acid molecules
CN105531408A (zh) 染色体构象划分产物捕获
CN1784590B (zh) 可光学解码的微载体,阵列和方法
JP2007500013A (ja) 生物学的バーコード
WO1998006084A1 (fr) Methode a technique analytique de code d&#39;acide nucleique utilisee dans des etiquettes infalsifiables
KR102129506B1 (ko) 핵산 에세이에서의 향상된 용융 식별 및 복합화를 위한 프로브
CN105358715A (zh) 正交合成测序
CA2959312A1 (en) In-field dna extraction, detection and authentication methods and systems therefor
EP3174998A1 (en) Method for selecting a target nucleic acid sequence
KR20110078185A (ko) 폴리뉴클레오티드를 이용한 제품 인증 장치 및 방법
CN105838711A (zh) 一种用于信息存储和加密的单链脱氧核糖核酸
US20230332208A1 (en) Non-amplifiable polynucleotides for encoding information
TW201634699A (zh) 現場去氧核醣核酸萃取、檢測與驗證之方法及其系統
WO2004053161A1 (en) Method for identification and/or authentication of articles
JP2010273675A (ja) Ｄｎａを用いた目的物の標識及び確認方法
CN1344808A (zh) 一种利用dna长度多态性分析技术将核酸应用于防伪的方法
CN1360055A (zh) 一种利用pcr技术将核酸应用于仿伪的方法

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E601 Decision to refuse application