KR20110049575A - Composition comprising the essential oil extract of laminaria japonica showing anti-oxidant activity - Google Patents

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Abstract

PURPOSE: A composition containing Laminaria japonica extract with an antioxidation activity is provided to remove free radical and to prevent oxidative stress-associated diseases. CONSTITUTION: A pharmaceutical composition for preventing and treating oxidative stress-associated diseases contains Laminaria japonica extract with an antioxidation activity as an active ingredient. The Laminaria japonica extract is isolated using water, ethanol, or mixture solvent. A health food for preventing and treating oxidative stress-associated diseases contains the Laminaria japonica extract as an active ingredient. The health food is manufactured in the form of powder, granule, tablet, capsule, or beverage.

Description

항산화 활성을 갖는 다시마 정유 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물{Composition comprising the essential oil extract of Laminaria japonica showing anti-oxidant activity}Composition comprising the essential oil extract of Laminaria japonica showing anti-oxidant activity}

본 발명은 항산화 활성을 갖는 다시마 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for the prevention and treatment of a composition containing kelp extract having antioxidant activity as an active ingredient.

[문헌 1] Tiidus PM., et al., Sported Med, 20, pp.12-13, 1995[Reference 1] Tiidus PM., Et al., Sported Med, 20 , pp. 12-13, 1995

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[문헌 4] Kumar CT., et al., Mol. Cell Biochem., 111, pp.109-115, 1992Kumar CT., Et al., Mol. Cell Biochem., 111 , pp. 109-115, 1992

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[문헌 7] Bray, T.M. Nutrition. 16, pp.578-581, 20007 Bray, TM Nutrition. 16 , pp. 578-581, 2000

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[문헌 9] Tauberet al., Blood, 53, pp.666-676, 19799, Tauberet al., Blood, 53 , pp. 666-676, 1979.

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[문헌 11] Davies, KJA and Goldberg, AL., J. Biol. Chem., 262, pp.8220-8226, 1987[11] Davies, KJA and Goldberg, AL., J. Biol. Chem., 262 , pp. 8220-8226, 1987

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[문헌 14] Branen., AL, J. Am. Oil. Chem. Soc., 55, pp.123-126, 1975Document 14 Branen., AL, J. Am. Oil. Chem. Soc., 55 , pp. 123-126, 1975

[문헌 15] Ito N., et al., J. Natl. Cancer Inst., 70, pp.343-349, 198315 Ito N., et al., J. Natl. Cancer Inst., 70 , pp. 343-349, 1983

[문헌 16] Lim DK., et al., Korean J. Food Sci. Technol., 28, pp.83-89, 199616. Lim DK., Et al., Korean J. Food Sci. Technol., 28 , pp.83-89, 1996

[문헌 17] Kim HK., et al., Korean J. Food Sci. Technol., 27, pp.80-85, 199517. Kim HK., Et al., Korean J. Food Sci. Technol., 27 , pp. 80-85, 1995

[문헌 18] Cha JY., J. Korean Soc, Food Nutr., 28, pp.1131-1136, 199918. Cha JY., J. Korean Soc, Food Nutr., 28 , pp. 1131-1136, 1999

[문헌 19] Kim MH., et al., Korean J. Food Sci. Technol., 31, pp.273-279, 1999[19] Kim MH., Et al., Korean J. Food Sci. Technol., 31 , pp. 273-279, 1999

[문헌 20] Blois, M. S. : Antioxidant determination by the use of a stable free radical, Nature, 26, pp.1199-1200, 1958Blois, MS: Antioxidant determination by the use of a stable free radical, Nature, 26 , pp. 1199-1200, 1958

[문헌 21] Bios, M. S., Antioxide determination by the use of a stable free radical, Nature. 4617, pp.1198, 1958Bios, MS, Antioxide determination by the use of a stable free radical, Nature. 4617, pp.1198, 1958

[문헌 22] Shin YS. et al., Antioxidant and antimicrobial Effects of extract with water and ethanol of oriental melon(CucumismeloL.varmakuwaMakino), J Korean Soc Appl Biol Chem., 51(3), pp.194-199, 2008[Reference 22] Shin YS. et al., Antioxidant and antimicrobial Effects of extract with water and ethanol of oriental melon (Cucumismelo L. varmakuwa Makino), J Korean Soc Appl Biol Chem., 51 (3) , pp.194-199, 2008

본 발명은 다시마 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물, 구체적으로는 산화적 스트레스 관련의 예방 및 치료를 위한 약학 조성물, 건강기능식품, 식품첨가제 또는 항산화제를 제공하는 것이다.The present invention provides a composition containing kelp extract as an active ingredient, specifically, a pharmaceutical composition, a dietary supplement, a food additive, or an antioxidant for preventing and treating oxidative stress.

항산화(antioxidation)는 체내에서 일어나는 여러 산화작용을 방지하는 것을 말하며, 생체막이나 지단백질로서 존재하는 지질은 체내에서 발생하는 자유 라디칼(free radical)의 공격을 받아 여러 종류의 과산화물을 형성하는데, 과산화물들과 분해산물 등은 반응성이 높아 주변의 생체분자들의 구조와 기능을 변환시켜 증가하면 노화 현상 및 여러 가지 만성질환을 초래한다. 생체 내에는 이러한 자유 라디칼(free radical)을 중화시키고 몸을 보호할 수 있는 여러 항산화 방어기구가 있다. 인간의 질병 및 노화는 체내 대사과정 중 발생하는 O2-(superoxide), NO(nitric oxide), NO2(nitrogen dioxide), OH(hydroxyl), ROO(proxyl), RO(alkoxyl), HO2(hydroperoxyl) 라디칼(radical) 등의 산화반응에 기인하며 생체 내에서는 이런 유해한 라디칼인 유리기로부터 생체를 방어하기 위한 수단으로써 이중 간과 적혈구에 있는 항산화 효소인 슈퍼옥시드 디스무타제(SOD, superoxide dismutase)는 슈퍼옥시드 라디칼(superoxide radical)을 환원시켜 H2O2로 전환시키며 이때 생성된 H2O2등은 카탈라제(CAT; catalase), 글루타치온 퍼옥시다제(GSH-px; glutathione-peroxidase) 등의 항산화 효소나 비타민 E, 글루타치온 등의 항산화 물질이 존재하 여 유리기를 제거함으로써 생체를 산화적 손상으로부터 보호한다(Tiidus PM., et al., Sported Med, 20, pp.12-13, 1995; Britton, C., et al., Hydroperoxide metablism in mammalian organ, Physio. Rev., 59, pp.527-605, 1979; Ishinaga M, et al., daily intake of fatty acids, sterols, and phospholipids by Japanese women and serum cholesterol, J. Nutr. Sci. Vitaminol, 40, pp.557-567, 1994).Antioxidation refers to the prevention of various oxidation reactions in the body. Lipids present as biofilms or lipoproteins are attacked by free radicals in the body to form various kinds of peroxides. Decomposition products are highly reactive and convert and increase the structure and function of surrounding biomolecules, leading to aging and various chronic diseases. There are several antioxidant defenses in the body that can neutralize these free radicals and protect the body. Human disease and aging occur during metabolism in the body: O 2- (superoxide), nitric oxide (NO), nitrogen dioxide (NO 2 ), hydroxy (OH), proxy (ROO), ro (alkoxyl), HO 2 ( This is due to oxidation reactions such as hydroperoxyl radicals, and in vivo, as a means of defending the body from these free radicals, which are harmful radicals, superoxide dismutase (SOD), an antioxidant enzyme found in liver and red blood cells, antioxidants, such as super oxide radical by reducing (superoxide radical) sikimyeo converted to H 2 O 2 in this case the generated H 2 O 2 and the like catalase (CAT;; catalase), glutathione peroxidase (glutathione-peroxidase GSH-px) Antioxidants such as enzymes, vitamin E, and glutathione are present to protect the living body from oxidative damage by removing free radicals (Tiidus PM., Et al., Sported Med, 20 , pp. 12-13, 1995; Britton, C., et al., Hydroperoxide metablism in mammalian organ, Physio.R ev., 59 , pp. 527-605, 1979; Ishinaga M, et al., daily intake of fatty acids, sterols, and phospholipids by Japanese women and serum cholesterol, J. Nutr. Sci. Vitaminol, 40 , pp. 557 -567, 1994).

그러나 이러한 항산화 방어계가 유리기 생성을 조절할 수 없을 정도로 저하될 때 조직의 산화적 스트레스와 손상이 촉진되며 체내에서 생성된 과잉의 유리기와 지질 과산화물은 단백질의 산화, DNA 손상과 같은 산화적 스트레스에 의한 상해를 증가시킨다(Kumar CT., et al., Mol. Cell Biochem., 111, pp.109-115, 1992).However, when these antioxidant defenses are too low to control the production of free radicals, oxidative stress and damage of tissues are promoted. Excess free radicals and lipid peroxides produced in the body are injured by oxidative stress such as protein oxidation and DNA damage. Increase (Kumar CT., Et al., Mol. Cell Biochem., 111 , pp. 109-115, 1992).

현재 보고된 바에 의하면 2003년 한국인의 주요 사망요인은 암, 뇌혈관질환, 심혈관질환, 당뇨병 순으로 나타났다(Korea National Statistical Office : The cause of death Statistics 2003; Annual Report of on the Cause of Death Statistics. Korea National Statistical Office, 2004). 활성산소종(reactive oxygen species, ROS)은 심혈관질환, 당뇨병, 암, 퇴행성 신경병, 노화 등 만성퇴행성질환을 유발하는 주요 요인이 될 수 있으며, 항산화물질은 만성퇴행성의 예방에 도움을 줄 수 있다고 알려져 있다(Bray, T.M. Nutrition. 16, pp.578-581, 2000). Currently, the main causes of death in Korea in 2003 were cancer, cerebrovascular disease, cardiovascular disease, and diabetes mellitus (Korea National Statistical Office: The cause of death Statistics 2003; Annual Report of on the Cause of Death Statistics. National Statistical Office, 2004). Reactive oxygen species (ROS) may be a major factor causing chronic degenerative diseases such as cardiovascular disease, diabetes mellitus, cancer, degenerative neuropathy and aging, and antioxidants are known to help prevent chronic degenerative diseases. (Bray, TM Nutrition. 16 , pp. 578-581, 2000).

모든 호기성 유기체는 대사과정 중에서 필연적으로 해로운 활성 산소종을 수반하게 되므로, 이 활성 산소종을 제거하는 기작을 모든 유기체가 가지고 있어야 생존이 가능하다. 활성 산소종은 크게 과산화수소와 같이 산소 라디칼종을 형성하 게 하는 화합물과 산소 라디칼종의 두가지로 분류될 수 있다. 이미 알려진 바와 같이, 과산화수소는 카탈라제(catalase)나 퍼록시다제(peroxidase)에 의해 산소나 물로 전환되나, 산소 라디칼종 제거 기작의 경우, O2 -(superoxide anion)를 제거하는 기작 이외의 다른 산소 라디칼종 제거 기작은 아직 확실히 규명 되지 않은 상태이다.Since all aerobic organisms inevitably carry harmful free radical species during metabolism, all organisms must have a mechanism to remove these free radical species in order to survive. Active oxygen species can be classified into two types, compounds that form oxygen radical species such as hydrogen peroxide and oxygen radical species. As already known, the hydrogen peroxide is catalase (catalase) or the case of peroxidase (peroxidase) oxygen, but the conversion of water, oxygen radical species are removed by the mechanism, O 2 - other oxygen radicals other than the mechanism of removing (superoxide anion) Species removal mechanisms are not yet clear.

산소 라디칼종의 일종인 하이드록시 라디칼은 생명체 내에서 H2O2 및 O2의 반응에 의해 형성되며, 거의 모든 생체물질(biomolecules)에 존재하는 것으로 알려져 있다(Fridovich et al., Ann. Rev. Biochem., 44, pp.147-159, 1975; Tauberet al., Blood, 53, pp.666-676, 1979). 따라서, 생체내에서의 항상성을 유지하기 위해서는 필연적으로 반응성이 강한 하이드록시 라디칼에 대한 방어가 요구된다고 하는 것은 자명하다. Hydroxy radicals, a type of oxygen radical species, are formed by the reaction of H 2 O 2 and O 2 in living organisms and are known to exist in almost all biomolecules (Fridovich et al., Ann. Rev. Biochem., 44 , pp. 147-159, 1975; Tauberet al., Blood, 53 , pp. 666-676, 1979). Therefore, it is obvious that defense against highly reactive hydroxy radicals is required in order to maintain homeostasis in vivo.

이러한 측면에서, 아스코르브산, 요산 등 유기물질은 화학반응으로 하이드록시 라디칼을 제거하는 것으로 알려져 있으나, 이는 근원적으로 하이드록시 라디칼을 제거하는 것이 아니라 반응성이 적은 라디칼로 변환시킴은 물론, 생체내에서 산화제로 철과 같은 전이금속과 반응하여 오히려 활성 산소라디칼종의 생성을 촉진시킬 수 있는 것으로 보고되고 있다(Borg, DC and Schaich, KM., Handbook of Free Radicals and Antioxidant in Biomedicine, Vol. I, pp.63-80, CRC press, 1989). 인체 생리과정 중 발생하는 활성산소(O2 -, H2O2, OH 및 O2)는 반응성이 매우 강하여 이들에 의하여 야기되는 프리라디칼 반응은 지질을 포함한 주요 거대분자의 파괴효과를 나타낸다(Davies, KJA and Goldberg, AL., J. Biol. Chem., 262, pp.8220-8226, 1987). 이들은 정상적인 대사과정, 광증감반응, 약물대사과정 및 기타 세포대사의 이상을 초래하는 여러 요인에 의해 그 생성이 증가하며, 따라서 생체는 이들에 의하여 일어나는 프리라디칼 반응의 유해효과에 항상 노출되어 있다고 볼 수 있다(Morehouse, LA and Thomas, CE., J. Free Radicals Biol. Med., 1, p.8, 1985). 특히 세포가 나이가 들어감에 따라 이들의 유해 라디칼에 의한 유해작용이 계속적으로 누적될 경우 발암, 동맥경화, 심장질환 및 피부노화 등 연령증가에 따른 여러 성인병과 관련된 질환은 물론 전반적인 세포의 노화를 야기하여 인간의 질병발생과 노화의 원인으로 제시되고 있다(Harman, D., FreeRadicals in Biology, Academic Press, New York, pp.255-275, 1982). In this respect, organic materials such as ascorbic acid and uric acid are known to remove hydroxy radicals by chemical reaction, but this is not fundamentally to remove hydroxy radicals but to convert them into less reactive radicals, as well as oxidizing agents in vivo. It has been reported to react with transition metals, such as iron, rather to promote the production of reactive oxygen radical species (Borg, DC and Schaich, KM., Handbook of Free Radicals and Antioxidant in Biomedicine, Vol. I, pp. 63-80, CRC press, 1989). Physiological processes radicals generated during (O 2 -, H 2 O 2, OH and O 2) is a free radical reaction in which a very strong reactivity caused by these represents the destruction effect of major macromolecules, including lipids (Davies , KJA and Goldberg, AL., J. Biol. Chem., 262 , pp. 8220-8226, 1987). Their production is increased by a number of factors that cause abnormal metabolic processes, photosensitization, drug metabolism, and other cellular metabolism, and therefore, living organisms are always exposed to the harmful effects of free radical reactions caused by them. (Morehouse, LA and Thomas, CE., J. Free Radicals Biol. Med., 1 , p. 8, 1985). In particular, if cells continue to accumulate harmful effects due to their harmful radicals as they age, they cause aging of the cells as well as diseases related to various adult diseases such as carcinogenesis, arteriosclerosis, heart disease, and skin aging. It has been suggested as a cause of human disease occurrence and aging (Harman, D., Free Radicals in Biology, Academic Press, New York, pp.255-275, 1982).

따라서 반응성 산소대사물에 의해 생체내 프리 라디칼 반응을 억제시키거나 인체에 누적되어 있는 유해 활성산소를 제거함으로써, 지질제거함으로써, 지질대사, 면역질환 및 암 등의 질환치료에 유용할 것으로 예상되는 후보물질을 찾고자 하는 연구들이 계속되어 왔다.Therefore, the candidate is expected to be useful for treating diseases such as lipid metabolism, immune disease and cancer by inhibiting free radical reaction in vivo by reactive oxygen metabolites or removing harmful free radicals accumulated in the human body, thereby removing lipids. Research has continued to find a substance.

그러므로 이러한 산화적 스트레스의 감소를 위해 많은 합성 또는 천연 항산화 물질이 개발되어 왔으나 합성 항산화제의 경우 안전성에 취약하다는 문제점이 발생하였다(Branen., AL, J. Am. Oil. Chem. Soc., 55, pp.123-126, 1975; Ito N., et al., J. Natl. Cancer Inst., 70, pp.343-349, 1983).Therefore, many synthetic or natural antioxidants have been developed for the reduction of oxidative stress, but synthetic antioxidants have a problem in safety (Branen., AL, J. Am. Oil. Chem. Soc., 55 , pp. 123-126, 1975; Ito N., et al., J. Natl. Cancer Inst., 70 , pp. 343-349, 1983).

최근에는, 비타민 A, C, E와 더불어 각종 생약과 식용식물 추출물 등에 존재 하는 항산화제 물질인 카로티노이드류, 플라보노이드류, 폴리페놀물질들을 이용하여 보다 안전하며 항산화 효과가 뛰어난 천연 항산화제를 개발하기 위한 노력을 하고 있다(Lim DK., et al., Korean J. Food Sci. Technol., 28, pp.83-89, 1996; Kim HK., et al., Korean J. Food Sci. Technol., 27, pp.80-85, 1995; Cha JY., J. Korean Soc, Food Nutr., 28, pp.1131-1136, 1999; Kim MH., et al., Korean J. Food Sci. Technol., 31, pp.273-279, 1999).Recently, carotenoids, flavonoids, and polyphenols, which are present in various herbal medicines and edible plant extracts, along with vitamins A, C, and E, are used to develop safer and more natural antioxidants. (Lim DK., Et al., Korean J. Food Sci. Technol., 28 , pp. 83-89, 1996; Kim HK., Et al., Korean J. Food Sci. Technol., 27 , pp. 80-85, 1995; Cha JY., J. Korean Soc, Food Nutr., 28 , pp. 1131-1136, 1999; Kim MH., et al., Korean J. Food Sci.Technol., 31 , pp. 273-279, 1999).

다시마(Laminaria)는 갈조식물 다시마목 다시마과의 한 속으로서, 한 대, 아한대의 연안에 분포하는 한해성(寒海性) 식물로서 한국에는 동해안 북부, 원산 이북의 함경남도, 함경북도 일대에서 자라는 것으로 알려져 있다. 이밖에 일본 홋카이도와 도호쿠[東北] 지방 이북 연안, 캄차카반도, 사할린섬 등의 태평양 연안에도 분포한다. 다시마속 식물은 태평양 연안에 20여 종이 자라고 있으며, 주요 종으로는 참다시마(Laminaria japonica), 오호츠크다시마(Laminaria ochotensis), 애기다시마(Laminaria religiosa) 등이 있다. 옛날부터 한국을 비롯하여 일본, 중국에서 식용해왔다. 다시마에는 카로틴류, 크산토필류, 엽록소 등의 여러 가지 색소 외에 탄소동화작용으로 만들어지는 마니트, 라미나린 등의 탄수화물과 세포벽의 성분인 알긴산이 많이 들어 있고, 요오드, 비타민 B2, 글루탐산 등의 아미노산이 들어 있다. 성분은 종류에 따라서 다르지만, 대체로 수분 16%, 단백질 7%, 지방 1.5%, 탄수화물 49%, 무기염류 26.5% 정도이며, 탄수화물의 20%는 섬유소이고 나머지는 알긴산과 라미나린 등 다당류이다. 특히 요오드·칼륨·칼슘 등 무기염류가 많이 들어 있으므로, 다시마를 조금씩 자주 먹는 것은 무기염류의 공급을 위해서 좋다. 다 시마에 들어 있는 라미닌이라는 아미노산은 혈압을 낮추는 효과가 있다.Laminaria is a genus of brown seaweed kelp, a genus of seaweed, which is distributed along the coast of Hanbok, Korea. It is known to grow in the north east coast, Hamgyongnam-do north of Wonsan, and North Hamgyong in Korea. . It is also distributed in the Pacific coasts of Hokkaido and Tohoku, Japan, Kamchatka Peninsula and Sakhalin Island. Kelp plants grow over 20 species on the Pacific coast. Major species include Laminaria japonica, Laminaria ochotensis, and Laminaria religiosa. It has been edible in Korea, Japan and China since ancient times. In addition to various pigments such as carotene, xanthophylls, and chlorophyll, kelp contains a lot of carbohydrates, such as manit and laminarin, which are made by carbon assimilation, and alginic acid, which is a component of cell walls. This contains. The ingredients vary depending on the type, but are generally 16% moisture, 7% protein, 1.5% fat, 49% carbohydrate, and 26.5% inorganic salts. 20% of the carbohydrates are fiber and the rest are polysaccharides such as alginic acid and laminarin. In particular, since a lot of inorganic salts such as iodine, potassium, calcium, etc., eating a little bit of kelp is good for the supply of inorganic salts. The amino acid called laminin in Dashima has the effect of lowering blood pressure.

따라서 본 발명자들은 일상적으로 식용하여 독성에 대해 안전하고, 동해안에서 다량 채취가 가능한 해조류의 추출물에 의한 항산화 활성에 대해 지속적으로 연구한 결과, 다시마 추출물이 강한 항산화 효과를 나타냄을 확인하여 본 발명을 완성하게 되었다.Therefore, the present inventors conducted a continuous study on the antioxidant activity by the extract of seaweed, which is safe for toxicity by routinely edible, and can be collected in large amounts on the east coast, confirming that the kelp extract exhibits a strong antioxidant effect, thereby completing the present invention. Was done.

상기 목적을 수행하기 위하여, 본 발명은 항산화 활성을 갖는 다시마 추출물을 유효성분으로 함유하는 산화적 스트레스 관련 질환의 예방 및 치료를 위한 약학조성물을 제공한다.In order to accomplish the above object, the present invention provides a pharmaceutical composition for the prevention and treatment of oxidative stress-related diseases containing kelp extract having antioxidant activity as an active ingredient.

또한, 본 발명은 항산화 활성을 갖는 다시마 추출물을 유효성분으로 함유하는 산화적 스트레스 관련 질환의 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다.The present invention also provides a health functional food for the prevention and improvement of oxidative stress-related diseases containing kelp extract having antioxidant activity as an active ingredient.

또한, 본 발명은 항산화 활성을 갖는 다시마 추출물을 유효성분으로 함유하는 식품첨가제를 제공한다.The present invention also provides a food additive containing the kelp extract having antioxidant activity as an active ingredient.

또한, 본 발명은 항산화 활성을 갖는 다시마 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화제를 제공한다.The present invention also provides an antioxidant containing the kelp extract having antioxidant activity as an active ingredient.

또한, 본 발명은 항산화 활성을 갖는 다시마 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물을 제공한다.The present invention also provides a cosmetic composition containing the kelp extract having antioxidant activity as an active ingredient.

본원에서 정의되는 다시마는 참다시마(Laminaria japonica), 오호츠크다시마(Laminaria ochotensis), 애기다시마(Laminaria religiosa), 바람직하게는 참다 시마(Laminaria japonica)를 포함한다.Kelp as defined herein includes Laminaria japonica, Laminaria ochotensis, Laminaria religiosa, preferably Laminaria japonica.

본원에서 정의되는 추출물은 구체적으로는, 극성용매 추출물로서, 정제수를 포함한 물, C1 내지 C4의 저급 알콜 또는 이들의 혼합용매, 바람직하게는 물, 에탄올 또는 이들의 혼합용매, 보다 바람직하게는 70 내지 99% 에탄올에 가용한 추출물을 포함한다.Extracts defined herein are specifically polar solvent extracts, which include water containing purified water, lower alcohols of C 1 to C 4 or mixed solvents thereof, preferably water, ethanol or mixed solvents thereof, more preferably Extracts soluble in 70-99% ethanol.

본원에서 정의되는 산화적 스트레스 관련 질환은 구체적으로는 고지혈증 등의 지질대사질환; 동맥경화증, 심부전증, 고혈압성 심장질환, 부정맥 심근경색증, 협심증 등의 심장질환; 주름살, 기미, 주근깨에 등의 피부노화, 면역질환 및 암, 바람직하게는 주름살, 기미, 주근깨 등의 피부노화이다.Oxidative stress related diseases as defined herein are specifically lipid metabolism diseases such as hyperlipidemia; Heart diseases such as atherosclerosis, heart failure, hypertensive heart disease, arrhythmia myocardial infarction and angina pectoris; Skin aging such as wrinkles, blemishes and freckles, immune diseases and cancer, preferably skin aging such as wrinkles, blemishes and freckles.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명의 다시마 추출물은 하기와 같이 수득될 수 있다.Kelp extract of the present invention can be obtained as follows.

본 발명의 추출물은 자연산 참다시마(Laminaria japonica) 건조물을 세절 및 분쇄하는 제 1단계; 분쇄물 각각에 약 1 내지 50배(w/v), 바람직하게는 약 1 내지 5배(w/v)의 정제수를 포함한 물, C1 내지 C4의 저급 알콜 또는 이들의 혼합용매, 바람직하게는 물, 에탄올 또는 이들의 혼합용매, 보다 바람직하게는 70 내지 99% 에탄올 등의 극성 유기용매로 약 0℃ 내지 100℃, 바람직하게는 약 20℃ 내지 70℃, 보다 바람직하게는 약 40℃의 온도에서 약 10분 내지 1시간, 바람직하게는 20 내지 40분 동안 교반추출, 열수 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출 또는 초음파 추출 등의 추출방법, 바람직하게는 초음파 추출방법으로 추출하는 제 2단계; 제 2단계의 추출액을 여과, 감압 농축 및 동결건조 등의 건조하는 건조단계를 통하여 본 발명의 추출물을 수득할 수 있다.The extract of the present invention comprises the first step of slicing and pulverizing the dried natural Laminaria japonica; Water containing about 1 to 50 times (w / v), preferably about 1 to 5 times (w / v) purified water, C 1 to C 4 lower alcohols or mixed solvents thereof, preferably in each comminute Is a polar organic solvent such as water, ethanol or a mixed solvent thereof, more preferably 70 to 99% ethanol, and is about 0 ° C to 100 ° C, preferably about 20 ° C to 70 ° C, and more preferably about 40 ° C. A second step of extracting by stirring extraction, hot water extraction, cold extraction, reflux cooling extraction or ultrasonic extraction for about 10 minutes to 1 hour, preferably 20 to 40 minutes at a temperature, preferably ultrasonic extraction; The extract of the present invention may be obtained through a drying step of drying the extract of the second step, such as filtration, concentration under reduced pressure, and lyophilization.

본 발명은 항산화 활성을 갖는 상기의 제조공정으로 얻어진 다시마 추출물을 유효성분으로 함유하는 산화적 스트레스 관련 질환의 예방 및 치료용 약학조성물을 제공한다.The present invention provides a pharmaceutical composition for the prevention and treatment of oxidative stress-related diseases containing the kelp extract obtained by the above manufacturing process having an antioxidant activity as an active ingredient.

또한, 본 발명은 항산화 활성을 갖는 상기의 제조공정으로 얻어진 다시마 추출물을 유효성분으로 함유하는 산화적 스트레스 관련 질환의 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다.In another aspect, the present invention provides a health functional food for the prevention and improvement of oxidative stress-related diseases containing the kelp extract obtained by the above manufacturing process having an antioxidant activity as an active ingredient.

또한, 본 발명은 항산화 활성을 갖는 상기의 제조공정으로 얻어진 다시마 추출물을 유효성분으로 함유하는 식품첨가제를 제공한다.The present invention also provides a food additive containing the kelp extract obtained by the above manufacturing process having an antioxidant activity as an active ingredient.

또한, 본 발명은 항산화 활성을 갖는 상기의 제조공정으로 얻어진 다시마 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화제를 제공한다.The present invention also provides an antioxidant containing the kelp extract obtained by the above manufacturing process having an antioxidant activity as an active ingredient.

또한, 본 발명은 항산화 활성을 갖는 상기의 제조공정으로 얻어진 다시마 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물을 제공한다.The present invention also provides a cosmetic composition containing the kelp extract obtained by the above manufacturing process having an antioxidant activity as an active ingredient.

상기와 같은 방법으로 얻어진 다시마 추출물의 유리자유기 소거능을 측정한 결과, 합성항산화제인 BHA보다 강한 항산화 효과를 나타내었다.As a result of measuring the free radical scavenging ability of the kelp extract obtained by the above method, it showed a stronger antioxidant effect than the synthetic antioxidant BHA.

구체적으로, 상기 조성물은 약학적으로 허용되는 담체 및 부형제를 포함하는 약학 조성물을 포함한다.In particular, the composition comprises a pharmaceutical composition comprising a pharmaceutically acceptable carrier and excipients.

또한, 다시마는 오랫동안 식용으로 사용되어 오던 약재로서 이로부터 추출된 본 발명의 추출물 역시 독성 및 부작용 등의 문제가 없다.In addition, kelp is a drug that has been used for a long time as an edible extract of the present invention extracted therefrom also has no problems such as toxicity and side effects.

본 발명의 약학조성물은, 조성물 총 중량에 대하여 상기 추출물을 0.02 내지 50 중량%로 포함한다. 본 발명의 추출물을 포함하는 약학조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.The pharmaceutical composition of the present invention comprises the extract in an amount of 0.02 to 50% by weight based on the total weight of the composition. Pharmaceutical compositions comprising the extract of the present invention may further comprise suitable carriers, excipients and diluents commonly used in the manufacture of pharmaceutical compositions.

본 발명의 추출물의 약학적 투여 형태는 이들의 약학적 허용가능한 염의 형태로도 사용될 수 있고, 또한 단독으로 또는 타 약학적 활성 화합물과 결합뿐만 아니라 적당한 집합으로 사용될 수 있다.Pharmaceutical dosage forms of the extracts of the present invention may be used in the form of their pharmaceutically acceptable salts, or may be used alone or in combination with other pharmaceutically active compounds, as well as in any suitable collection.

본 발명에 따른 추출물을 포함하는 약학조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 추출물을 포함하는 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.Pharmaceutical compositions comprising extracts according to the invention, in the form of powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols and the like, oral preparations, suppositories and sterile injectable solutions, respectively, according to conventional methods. Can be formulated and used. Examples of carriers, excipients and diluents that can be included in the composition containing the extract include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia rubber, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate , Cellulose, methylcellulose, microcrystalline cellulose, polyvinylpyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil. When formulated, diluents or excipients such as fillers, extenders, binders, wetting agents, disintegrating agents, and surfactants are usually used. Solid preparations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, capsules, and the like, and the solid preparations may include at least one excipient such as starch, calcium carbonate, sucrose in the extract. ) Or lactose, gelatin and the like are mixed. In addition to simple excipients, lubricants such as magnesium stearate and talc are also used. Liquid preparations for oral use include suspensions, solvents, emulsions, and syrups, and may include various excipients, such as wetting agents, sweeteners, fragrances, and preservatives, in addition to commonly used simple diluents such as water and liquid paraffin. . Formulations for parenteral administration include sterile aqueous solutions, non-aqueous solvents, suspensions, emulsions, lyophilized preparations, suppositories. As the non-aqueous solvent and suspending agent, propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil, injectable ester such as ethyl oleate and the like can be used. As the base of the suppository, witepsol, macrogol, tween 61, cacao butter, laurin butter, glycerogelatin and the like can be used.

본 발명의 조성물은 상기 제조방법에 따라 얻어진 다시마 추출물을 활성성분으로 포함하는 산화적 스트레스 관련 질환의 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다.The composition of the present invention provides a health functional food for the prevention and improvement of oxidative stress-related diseases comprising the kelp extract obtained according to the preparation method as an active ingredient.

또한 본 발명은 항산화 효과를 나타내는 다시마 추출물 및 식품학적으로 허용 가능한 식품보조 첨가제를 포함하는 건강보조식품을 제공한다. 다시마 추출물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강 기능성 식품류 등이 있다.In another aspect, the present invention provides a dietary supplement comprising a kelp extract exhibiting an antioxidant effect and a food supplement acceptable food supplement. Examples of foods to which kelp extract can be added include various foods, beverages, gums, teas, vitamin complexes, and health functional foods.

또한, 항산화 효과를 목적으로 식품 또는 음료에 첨가될 수 있다. 이 때, 식품 또는 음료 중의 상기 추출물의 양은 전체 식품 중량의 0.01 내지 15 중량%로 가할 수 있으며, 건강 음료 조성물은 100 ㎖를 기준으로 0.02 내지 5g, 바람직하게는 0.3 내지 1g의 비율로 가할 수 있다.It may also be added to foods or beverages for the purpose of antioxidant effects. At this time, the amount of the extract in the food or beverage may be added in 0.01 to 15% by weight of the total food weight, the health beverage composition may be added in a ratio of 0.02 to 5g, preferably 0.3 to 1g based on 100ml. .

본 발명의 건강 기능성 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 추출물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 약 5 내지 12g이다.The health functional beverage composition of the present invention is not particularly limited to other ingredients except for containing the extract as an essential ingredient in the indicated proportions, and may contain various flavors or natural carbohydrates as additional ingredients, such as ordinary drinks. Examples of the above-mentioned natural carbohydrates include monosaccharides such as glucose, fructose and the like; Disaccharides such as maltose, sucrose and the like; And conventional sugars such as polysaccharides such as dextrin, cyclodextrin, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, and erythritol. As flavoring agents other than those mentioned above, natural flavoring agents (tauumatin, stevia extract (for example, rebaudioside A, glycyrrhizin, etc.) and synthetic flavoring agents (saccharin, aspartame, etc.) can be advantageously used. The proportion of natural carbohydrates is generally about 1-20 g, preferably about 5-12 g per 100 ml of the composition of the present invention.

상기 외에 본 발명의 추출물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 추출물들은 천연 과일 주스 및 과일 주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용 할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 추출물 100 중량부 당 0 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.In addition to the above, the extract of the present invention includes various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), flavors such as synthetic flavors and natural flavors, coloring and neutralizing agents (such as cheese and chocolate), pectic acid and salts thereof, alginic acid and its Salts, organic acids, protective colloidal thickeners, pH adjusters, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonation agents used in carbonated beverages, and the like. In addition, the extracts of the present invention may contain flesh for the production of natural fruit juices and fruit juice beverages and vegetable beverages. These components can be used independently or in combination. The proportion of such additives is not so critical but is usually selected in the range of 0 to about 20 parts by weight per 100 parts by weight of the extract of the present invention.

본 발명의 조성물은 상기 제조방법에 따라 얻어진 다시마 추출물을 활성성분으로 포함하는 주름 생성 억제 및 개선용 화장료 조성물을 제공한다.The composition of the present invention provides a cosmetic composition for inhibiting and improving wrinkle formation comprising the kelp extract obtained according to the preparation method as an active ingredient.

본 발명의 추출물을 포함하는 조성물은 피부노화방지 효과를 위한 화장품, 세안제 및 샴푸 등에 다양하게 이용될 수 있다. 본 조성물을 첨가할 수 있는 제품으로는, 예를 들어, 각종 크림, 로션, 스킨 등과 같은 화장품류와 샴푸, 린스, 클렌징, 세안제, 비누, 트리트먼트, 미용액 등이 있다.The composition containing the extract of the present invention can be used in various ways, such as cosmetics, face wash and shampoo for the skin anti-aging effect. Examples of products to which the present composition can be added include cosmetics such as various creams, lotions, and skins, and shampoos, rinses, cleansing agents, face washes, soaps, treatments, and cosmetic liquids.

본 발명의 화장료는 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 조성물을 포함한다. 본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효성분으로서 상기 추출물 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예를 들면, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제 및 담체를 포함한다.Cosmetics of the present invention comprises a composition selected from the group consisting of water-soluble vitamins, oil-soluble vitamins, polymer peptides, polymer polysaccharides, sphingolipids and seaweed extract. Ingredients included in the cosmetic composition of the present invention may include components commonly used in cosmetic compositions in addition to the extract as an active ingredient, for example, conventional auxiliary agents such as stabilizers, solubilizers, vitamins, pigments and flavorings. And carriers.

본 발명의 피부노화방지 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어 유액, 크림, 화장수, 팩, 파운데이션, 로션, 미용액, 모발화장료 등을 들 수 있다.The anti-aging cosmetic composition of the present invention can be prepared in any formulation commonly prepared in the art, for example, emulsion, cream, lotion, pack, foundation, lotion, essence, hair cosmetics and the like.

본 발명의 다시마 추출물은 DPPH 라디칼 소거능 실험에서 강력한 자유 라디칼 소거 작용을 나타내는 바, 항산화 활성을 증진시킴을 확인한 바, 산화적 스트레스 관련의 예방 및 치료에 유용한 약학조성물 및 건강기능식품에 이용될 수 있다.The kelp extract of the present invention shows a potent free radical scavenging effect in the DPPH radical scavenging experiment, and has been found to enhance antioxidant activity, and thus can be used in pharmaceutical compositions and health functional foods useful for the prevention and treatment of oxidative stress. .

이하, 본 발명을 하기 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to the following examples and experimental examples.

단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실험예에 한정되는 것은 아니다.However, the following Examples and Experimental Examples are merely illustrative of the present invention, and the content of the present invention is not limited to the following Experimental Examples.

실시예Example 1. 다시마 에탄올 추출물의 제조 1. Preparation of Kelp Ethanol Extract

다시마(Laminaria)는 참다시마(Laminaria japonica)로 동해산으로 건조된 상태로 주문진 수산시장에서 구입하여 분쇄 후 건조 분말로 만들어 사용하였다.Kelp (Laminaria) was dried in the East Sea as Laminaria japonica and purchased at Jumunjin Fish Market.

상기에서 준비한 다시마 건조 분말 100g에 95% 에탄올을 1:5(w/v)의 비율로 첨가하고 혼합한 후, 30℃에서 30분 동안 초음파 추출(sonication; power SONIC 520 HWASHIN)하였다. 추출한 추출액을 여과지(1 mm-pore-size filter, Whatman No. 2)로 여과하여 에탄올 추출액을 수득하였다. 수득한 추출액을 회전 감압농축기 (Rotavator; R-200, Buchi, switzerland)로 40℃에서 에탄올을 제거하기 위해 감압농축하고 동결건조기(PVIFD30A, 한국 일신랩)로 동결 건조하여 본 발명의 다시마 에탄올 추출물(이하, “LJ95E"라 함) 1.76g을 수득하였으며, 이를 -40℃이하에서 보관하였다.To 100 g of dried kelp dried powder prepared above, 95% ethanol was added at a ratio of 1: 5 (w / v), mixed, and then ultrasonically extracted at 30 ° C. for 30 minutes (power SONIC 520 HWASHIN). The extracted extract was filtered through a filter paper (1 mm-pore-size filter, Whatman No. 2) to obtain an ethanol extract. The resulting extract was concentrated under reduced pressure to remove ethanol at 40 ° C. with a rotary depressurizer (Rotavator; R-200, Buchi, switzerland) and freeze-dried with a lyophilizer (PVIFD30A, Ilsin Lab, Korea). , “LJ95E”) was obtained, which was stored at −40 ° C. or lower.

실험예Experimental Example 1. 추출 수율 측정 1. Extraction yield measurement

상기 실시예에서 수득한 추출물의 수율은 추출에 사용한 시료의 건조물에 대한 추출물의 총 수용성 고체상(Soluble Solid) 함량의 백분비로 하여 그 수율을 하기 수학식 1로 산출하여 그 결과를 하기 표 1 에 기재하였다. Yield of the extract obtained in the above Example was calculated as a percentage of the total solid content of the solid solution (Soluble Solid) of the extract to the dried material of the sample used for extraction, the yield is calculated by the following formula 1 and the results are shown in Table 1 below It was.

Figure 112009068181164-PAT00001
Figure 112009068181164-PAT00001

본 실험 결과, 다시마 의 가루 시료를 에탄올로 추출하여 얻은 추출 수율을 측정한 결과, 표 1에 나타난 바와 같이, 다시마의 에탄올 추출 수율은 1.76%의 값을 나타내었다. As a result of the experiment, the extraction yield obtained by extracting a powder sample of kelp with ethanol was measured. As shown in Table 1, the ethanol extraction yield of kelp was 1.76%.

Solvent(v/w)Solvent (v / w) Extraction Yield (%)Extraction Yield (%) 95% ethanol95% ethanol 1.761.76 *Unit: g/100g* Unit: g / 100g

실험예Experimental Example 2. 항산화 활성 측정  2. Antioxidant Activity Measurement

다시마 추출물의 시험관내(In vitro) 항산화 효과 측정을 위해 문헌에 개시된 DPPH법을 응용하여 하기와 같이 실험하였다(Blois, M. S. : Antioxidant determination by the use of a stable free radical, Nature, 26, pp.1199-1200, 1958).To determine the in vitro antioxidant effect of kelp extract, DPPH method disclosed in the literature was applied and tested as follows (Blois, MS: Antioxidant determination by the use of a stable free radical, Nature, 26 , pp.1199 -1200, 1958).

DPPH(1,1- diphenyl picrylhydrazyl)법은 토코페롤(tocopherol), 아스코베이트(ascorbate), 플라보노이드(flavonoid) 화합물, 방향족 아민류, 마일라드(Maillard)형 갈변 생성물질, 펩티드 등의 항산화활성을 나타내는 생리활성물질에 의해 환원됨으로써 짙은 자색이 탈색되는 정도에 따라 항산화 효과를 수소공여능으로 측정하는 방법이다.DPPH (1,1-diphenyl picrylhydrazyl) method is a biological activity showing the antioxidant activity of tocopherol, ascorbate, flavonoid compounds, aromatic amines, Maillard browning products, peptides, etc. It is a method of measuring the antioxidant effect by the hydrogen donating ability according to the degree to which the dark purple color is reduced by being reduced by the substance.

2-1. 시약 준비2-1. Reagent Preparation

항산화 활성 측정용 시약인 DPPH(α,α-diphenyl-β-picrylhydrazyl; SIGMA), 대조군으로서 BHA(Butylated hydroxyanisole; SIGMA) 및 포도씨유(오뚜기사)를 구입하여 본 실험에 사용하였다.DPPH (α, α-diphenyl-β-picrylhydrazyl; SIGMA), a reagent for measuring antioxidant activity, BHA (Butylated hydroxyanisole; SIGMA) and grape seed oil (Ottogi Corp.) were purchased and used as a control.

2-2. DPPH(α,α-diphenyl-β-picrylhydrazyl) 시료 조제2-2. Preparation of DPPH (α, α-diphenyl-β-picrylhydrazyl) Sample

DPPH 시료조제는 상기 추출물을 에탄올과 증류수(1:5:4)로 용해하여 사용하였고 에탄올과 증류수(5:4)에 녹여서 0.1, 1, 10 및 100 ㎍/㎖의 농도로 하였고 DPPH 3.94 ㎎을 에탄올 25 ㎖에 녹여 DPPH용액을 만들었다.DPPH sample preparation was used by dissolving the extract in ethanol and distilled water (1: 5: 4), dissolved in ethanol and distilled water (5: 4) to a concentration of 0.1, 1, 10, and 100 ㎍ / ml and DPPH 3.94 mg. It was dissolved in 25 ml of ethanol to make a DPPH solution.

2-3. DPPH 라디칼 소거능 측정2-3. DPPH radical scavenging activity measurement

불포화 지방산 라디칼의 모델로서 안정한 유리 라디칼인 DPPH(α,α-diphenyl-β-picrylhydrazyl)을 이용하여 DPPH 라디칼이 감소하는 정도를 분광광도계(자외-가시분광광도계 Jasco. JP/V-550)로 측정하여 간접적으로 시료의 항산화 활성을 측정하였다. Spectrophotometer (Ultraviolet-visible spectrophotometer Jasco.JP/V-550) was used to measure the extent of DPPH radical reduction using DPPH (α, α-diphenyl-β-picrylhydrazyl), a stable free radical as a model of unsaturated fatty acid radicals. Indirectly, the antioxidant activity of the sample was measured.

상기 실험예 2-1에서 조제한 DPPH 용액 1 ㎖을 시료 용액 250 ㎕에 첨가한 후에 10초 동안 진탕한 뒤 6,000× g 로 15℃에서 3분 동안 원심분리기로(미량원심분리기; Mega 21R) 원심분리하고 상온에서 30분간 방치하였다. 미리 에탄올 용액을 blank로 하여 분광광도계의 영점을 조정한 후에 혼합물의 흡광도를 측정하였다(Bios, M. S., Antioxide determination by the use of a stable free radical, Nature. 4617, pp.1198, 1958).1 ml of the DPPH solution prepared in Experimental Example 2-1 was added to 250 µl of the sample solution, followed by shaking for 10 seconds, followed by centrifugation (microcentrifuge; Mega 21R) for 3 minutes at 15 ° C. at 6,000 × g. And left at room temperature for 30 minutes. Advance by an ethanol solution as a blank to measure the absorbance of the mixture after adjusting the zero point of the spectrophotometer (Bios, MS, Antioxide determination by the use of a stable free radical, Nature. 4617, pp.1198, 1958).

분광광도계로 517nm에서의 흡광도를 측정하여 하기 수학식 2를 사용하여 DPPH 라디칼 소거능을 산출하였으며, 시료의 blank로 DPPH 용액 대신 같은 양의 에탄올을 가하였고, 대조군으로 시료 용액 대신에 같은 양의 에탄올을 가하여 측정하였으며 3회 반복 실험하여 결과를 평균하여 하기 수학식 2로 산출하여 DPPH 소거능(%) 수치를 구하였다.The absorbance at 517 nm was measured by spectrophotometer to calculate DPPH radical scavenging ability using Equation 2 below, the same amount of ethanol was added to the blank of the sample instead of the DPPH solution, and the same amount of ethanol was used as a control instead of the sample solution. It was measured by adding and repeating three times the averaged results were calculated by the following equation 2 to obtain the DPPH scavenging capacity (%) value.

Figure 112009068181164-PAT00002
Figure 112009068181164-PAT00002

C : ControlC: Control

Sb : SampleSb: Sample

Ss : Sample blankSs: Sample blank

실험예Experimental Example 3. 농도별 다시마 에탄올 추출물의 자유기 소거 효과 측정 3. Determination of Free radical scavenging effect of kelp ethanol extract by concentration

자유기 소거 효과의 측정에 사용된 DPPH(α,α-diphenyl-β-picrylhydrazyl) 는 안정한 자유 라디칼로서 그것의 비공유전자로 인해 517nm 부근에서 최대 흡광도를 나타내며 전자 또는 수소를 받으면 517nm 부근에서 흡광도가 감소하며 각 추출물에서 이러한 라디칼을 환원시키거나 상쇄시키는 능력이 크면 높은 항산화 활성 및 활성 산소를 비롯한 다른 라디칼에 대한 소거 활성을 기대할 수 있으며 인체 내에서 활성 라디칼에 의한 노화를 억제하는 척도로도 이용할 수 있다(Shin YS. et al., Antioxidant and antimicrobial Effects of extract with water and ethanol of oriental melon(CucumismeloL.varmakuwaMakino), J Korean Soc Appl Biol Chem., 51(3), pp.194-199, 2008). DPPH (α, α-diphenyl-β-picrylhydrazyl), used for the measurement of free radical scavenging effect, is a stable free radical, exhibiting a maximum absorbance near 517 nm due to its unshared electrons and a decrease in absorbance near 517 nm upon receipt of electrons or hydrogen. In addition, if each extract has a high ability to reduce or offset such radicals, it can be expected to have high antioxidant activity and scavenging activity against other radicals including active oxygen, and can also be used as a measure of inhibiting aging by active radicals in the human body. Shin YS. Et al., Antioxidant and antimicrobial Effects of extract with water and ethanol of oriental melon (Cucumismelo L. varmakuwa Makino), J Korean Soc Appl Biol Chem., 51 (3) , pp.194-199, 2008).

양성 대조군으로 합성 항산화제인 BHA(Butylated hydroxyanisole)와 포도씨유를 사용하였으며, 다시마 추출물을 여러 농도, 즉, 0.1, 1, 10, 및 100㎍/㎖ 농도로 시료를 처치하여 자유기 소거 효과를 농도별로 확인하였다.As a positive control, synthetic antioxidant BHA (Butylated hydroxyanisole) and grapeseed oil were used, and the kelp extract was treated at various concentrations, that is, 0.1, 1, 10, and 100 µg / ml, and the free radical scavenging effect was Confirmed.

그 결과, 하기 표 2에 나타난 바와 같이, 다시마 추출물 100㎍/㎖ 농도처리군의 경우(86.84%)로 소거효과를 나타내, 포도씨유의 100㎍/㎖ 농도 처리군(93.00%)보다 낮았지만 BHA의 100㎍/㎖ 농도 처리군(75.58%) 결과보다 높은 자유기 소거 효과를 보였다. 또한 다시마 추출물 1㎍/㎖ 농도처리군의 경우(1.88%)로 소거효과를 나타내, 동일농도의 BHA(-4.42%)와 포도씨유(-4.75%)를 비교시에 다시마 에탄올 추출물이 보다 높게 측정됨을 확인하였다.As a result, as shown in Table 2, the kelp extract 100g / ㎖ concentration group showed a scavenging effect (86.84%), lower than the 100 ㎍ / ㎖ concentration group of grapeseed oil (93.00%) but BHA 100 The free radical scavenging effect was higher than that of the treatment group (75.58%). The kelp ethanol extract was also higher when compared to BHA (-4.42%) and grapeseed oil (-4.75%) at the same concentration (1.88%). It was confirmed.

SampleSample DPPH radical scavenging effect (%) (Mean±SD)DPPH radical scavenging effect (%) (Mean ± SD) 0.1㎍/㎖   0.1 µg / ml 1㎍/㎖      1 µg / ml 10㎍/㎖     10 µg / ml 100㎍/㎖     100 µg / ml LJ95E  LJ95E 1.21± 0.52 1.21 ± 0.52 1.18± 1.071.18 ± 1.07 9.25± 1.14 9.25 ± 1.14 86.84± 0.3086.84 ± 0.30 BHABHA -5.13± 2.44-5.13 ± 2.44 -4.42± 2.42 -4.42 ± 2.42 1.51± 2.29 1.51 ± 2.29 75.58± 0.4675.58 ± 0.46 Grape seed oilGrape seed oil -6.20± 2.40 -6.20 ± 2.40 -4.75± 2.40-4.75 ± 2.40 18.51± 2.4018.51 ± 2.40 93.00± 2.1493.00 ± 2.14

또한, 상기에서 얻은 항산화 활성결과를 50% 저해하는 데 필요한 DPPH 양을 IC50로 환산하여, 이 활성 측정 양상은 도 1과 표 3과 같이 나타내었다.In addition, the amount of DPPH required to inhibit the antioxidant activity result obtained by 50% in terms of IC 50 , this activity measurement mode is shown in Figure 1 and Table 3.

SampleSample IC50 value(㎍/㎖) (Mean±SD)IC 50 value (µg / mL) (Mean ± SD) LJ95ELJ95E 60.39± 1.2560.39 ± 1.25 BHABHA 71.92± 1.7771.92 ± 1.77 Grape seed oilGrape seed oil 51.05± 1.1351.05 ± 1.13

실험결과, 상기 표 3과 하기 도 1에 나타난 바와 같이, 다시마 에탄올 추출물의 자유기 소거 효과는 일정한 농도 100㎍/㎖부터 더 큰 효과를 가지는 것을 확인할 수 있었다. 또한, 합성항산화제인 BHA의 항산화 능력에 비해서 강한 항산화 효과를 보였다. 따라서 다시마 에탄올 추출물은 항산화 건강 기능성 식품의 소재 뿐 아니라 항산화 천연식품첨가물 소재로서 유용하게 활용될 가능성이 있는 것으로 사료된다.As a result, as shown in Table 3 and Figure 1, it was confirmed that the free radical scavenging effect of kelp ethanol extract has a greater effect from a constant concentration 100㎍ / ㎖. In addition, it showed a strong antioxidant effect compared to the antioxidant capacity of the synthetic antioxidant BHA. Therefore, kelp ethanol extract may be useful as an antioxidant natural food additive material as well as an antioxidant health functional food material.

하기에 본 발명의 추출물을 포함하는 약학 조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.Hereinafter, an example of the preparation of a pharmaceutical composition comprising the extract of the present invention will be described, but the present invention is not intended to be limited thereto, but is intended to be described in detail.

제제예 1. 산제의 제조Formulation Example 1 Preparation of Powder

LJ95E 20 mgLJ95E 20 mg

유당 100 mgLactose 100 mg

탈크 10 mgTalc 10 mg

상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.The above ingredients are mixed and filled in an airtight cloth to prepare a powder.

제제예 2. 정제의 제조Formulation Example 2 Preparation of Tablet

LJ95E 10 mgLJ95E 10 mg

옥수수전분 100 mgCorn starch 100 mg

유당 100 mgLactose 100 mg

스테아린산 마그네슘 2 mg2 mg magnesium stearate

상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.After mixing the above components and tableting according to the conventional tablet manufacturing method to prepare a tablet.

제제예 3. 캅셀제의 제조 Formulation Example 3 Preparation of Capsule

LJ95E 10 mgLJ95E 10 mg

결정성 셀룰로오스 3 mg3 mg of crystalline cellulose

락토오스 14.8 mgLactose 14.8 mg

마그네슘 스테아레이트 0.2 mgMagnesium Stearate 0.2 mg

통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.According to a conventional capsule preparation method, the above ingredients are mixed and filled into gelatin capsules to prepare capsules.

제제예 4. 주사제의 제조Formulation Example 4 Preparation of Injection

LJ95E 10 mgLJ95E 10 mg

만니톨 180 mg180 mg mannitol

주사용 멸균 증류수 2974 mgSterile distilled water for injection 2974 mg

Na2HPO4,12H2O 26 mgNa 2 HPO 4 , 12H 2 O 26 mg

통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당(2㎖) 상기의 성분 함량으로 제조한다.According to the conventional method for preparing an injection, the amount of the above ingredient is prepared per ampoule (2 ml).

제제예 5. 액제의 제조Formulation Example 5 Preparation of Liquid

LJ95E 20 mgLJ95E 20 mg

이성화당 10 g10 g of isomerized sugar

만니톨 5 g5 g of mannitol

정제수 적량Purified water

통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100㎖로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.After dissolving each component in purified water according to the usual method of preparing a liquid solution, adding lemon flavor appropriately, mixing the above components, adding purified water, adjusting the whole to 100 ml by adding purified water, and then filling into a brown bottle. The solution is prepared by sterilization.

하기에 본 발명의 추출물을 포함하는 건강식품의 제조예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.Hereinafter, an example of manufacturing a health food comprising the extract of the present invention will be described, but the present invention is not intended to be limited thereto but is intended to be described in detail.

제제예 6. 건강 식품의 제조Formulation Example 6 Preparation of Healthy Food

LJ95E 1000 ㎎LJ95E 1000 mg

비타민 혼합물 적량Vitamin mixture proper amount

비타민 A 아세테이트 70 ㎍70 μg of Vitamin A Acetate

비타민 E 1.0 ㎎Vitamin E 1.0 mg

비타민 B1 0.13 ㎎0.13 mg vitamin B1

비타민 B2 0.15 ㎎0.15 mg of vitamin B2

비타민 B6 0.5 ㎎0.5 mg vitamin B6

비타민 B12 0.2 ㎍0.2 [mu] g vitamin B12

비타민 C 10 ㎎10 mg vitamin C

비오틴 10 ㎍Biotin 10 μg

니코틴산아미드 1.7 ㎎Nicotinic acid amide 1.7 mg

엽산 50 ㎍50 ㎍ of folic acid

판토텐산 칼슘 0.5 ㎎Calcium pantothenate 0.5 mg

무기질 혼합물 적량Mineral mixture quantity

황산제1철 1.75 ㎎1.75 mg of ferrous sulfate

산화아연 0.82 ㎎0.82 mg of zinc oxide

탄산마그네슘 25.3 ㎎Magnesium carbonate 25.3 mg

제1인산칼륨 15 ㎎15 mg of potassium phosphate monobasic

제2인산칼슘 55 ㎎Secondary calcium phosphate 55 mg

구연산칼륨 90 ㎎Potassium citrate 90 mg

탄산칼슘 100 ㎎100 mg of calcium carbonate

염화마그네슘 24.8 ㎎Magnesium chloride 24.8 mg

상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.Although the composition ratio of the above-mentioned vitamin and mineral mixture is comparatively mixed with a composition suitable for health food as a preferred embodiment, the compounding ratio may be arbitrarily modified, and the above ingredients are mixed according to a conventional method for producing healthy foods , Granules can be prepared and used in the manufacture of health food compositions according to conventional methods.

제제예Formulation example 7. 건강 음료의 제조 7. Manufacture of health drinks

LJ95E 1000 ㎎LJ95E 1000 mg

구연산 1000 ㎎Citric acid 1000 mg

올리고당 100 g100 g of oligosaccharide

매실농축액 2 gPlum concentrate 2 g

타우린 1 gTaurine 1 g

정제수를 가하여 전체 900 ㎖Purified water was added to a total of 900 ml

통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2ℓ 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다. The above components were mixed according to a conventional health drink manufacturing method, and the mixture was heated at 85 DEG C for about 1 hour with stirring, and the solution thus prepared was filtered to obtain a sterilized 2-liter container, which was sealed and sterilized, ≪ / RTI >

상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 수요계층, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.Although the composition ratio is a mixture of the components suitable for the preferred beverage as a preferred embodiment, the blending ratio may be arbitrarily varied according to the regional and national preferences such as the demand level, the demanding country, and the intended use.

하기에 본 발명의 추출물을 포함하는 화장료의 제조예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.Hereinafter, a description will be given of an example of preparing a cosmetic including an extract of the present invention, but the present invention is not intended to be limited thereto but merely to be described in detail.

제제예Formulation example 1. 헤어토닉의 제조 1. Preparation of Hair Tonic

레조시놀 0.1%Resorcinol 0.1%

멘톨 0.05%Menthol 0.05%

판테놀 0.2% Panthenol 0.2%

살리실산 0.1%Salicylic Acid 0.1%

토코페릴 아세테이트 0.1%Tocopheryl Acetate 0.1%

염산피리독신 0.1%Pyridoxine hydrochloride 0.1%

피마자유 5.0%Castor Oil 5.0%

LJ95E 10.0%LJ95E 10.0%

색소 적량Pigment amount

향료 적량Spices

에탄올 적량Ethanol

정제수 잔량Purified water level

계 100.0%Total 100.0%

제제예Formulation example 2.  2. 헤어컨디셔너의Of hair conditioner 제조 Produce

세탄올 3.5%Cetanol 3.5%

자기유화형 모노스테아린산글리세린 1.5%Self-emulsifying glycerin monostearate 1.5%

프로필렌 글리콜 2.5%Propylene Glycol 2.5%

염화스테아릴메틸벤질 암모늄(25%) 7.0% Stearylmethylbenzyl Ammonium Chloride (25%) 7.0%

파라옥시안식향산메틸 0.3%0.3% methyl paraoxybenzoate

LJ95E 2.5%LJ95E 2.5%

색소 적량Pigment amount

향료 적량Spices

정제수 잔량Purified water level

계 100.0%Total 100.0%

제제예Formulation example 3.  3. 헤어로션의Hair lotion 제조 Produce

레조시놀 2.0%Resorcinol 2.0%

멘톨 2.0%Menthol 2.0%

판테놀 0.5%Panthenol 0.5%

피록톤올아민 0.1%Pyroctonolamine 0.1%

LJ95E 5.0%LJ95E 5.0%

향료, 색소 0.5%Fragrance, pigment 0.5%

정제수 잔량Purified water level

계 100.0%Total 100.0%

제제예Formulation example 4.  4. 헤어비누의Hair soap 제조 Produce

LJ95E 0.1%LJ95E 0.1%

이산화티탄 0.2%Titanium dioxide 0.2%

폴리에틸렌글리콜 0.8%Polyethylene Glycol 0.8%

글리세린 0.5%Glycerin 0.5%

에틸렌디아민테트라아세트산 0.05%Ethylenediaminetetraacetic Acid 0.05%

나트륨 1.0%Sodium 1.0%

색소 적량Pigment amount

비누향 적량Soap flavor

화장비누베이스 (수분 13%, 중량부) 잔량Cosmetic soap base (13% moisture, parts by weight)

계 100.0%Total 100.0%

[이 발명을 지원한 국가연구개발사업][National R & D project supporting this invention]

[과제고유번호][Task unique number]

F20815508H220000110/RRC00200-0000-00/B0010517-2008-01/R01-2007-000-20704-0F20815508H220000110 / RRC00200-0000-00 / B0010517-2008-01 / R01-2007-000-20704-0

[부처명][Name of Buddha]

한국해양수산기술진흥원/지식경제부/지식경제부/한국과학재단Korea Ocean Fisheries Technology Development Institute / Ministry of Knowledge Economy / Ministry of Knowledge Economy / Korea Science Foundation

[연구사업명][Name of research project]

수산특정연구개발산업/지역협력센터사업/지역산업진흥사업/특정기초연구Fisheries-specific R & D industry / regional cooperation center project / regional industry promotion project / specific basic research

[연구과제명][Name of Research Project]

해조정유(essence oil)의 수산가공품 고품질화 첨가제로서의 응용 및 기능성 소재 제품화/동해안해양생물자원연구센터 성과활용사업/속초웰빙젓갈명산품육성사업/대중식용 어패.해조류의 건강 기능성 검증과 그 key compounds 분리동정 및 기능성 소재화Application of high-quality processed fish products of essence oil as a high quality additive and commercialization of functional materials / Performance utilization business of East Coastal Marine Biological Resources Research Center / Sokcho Wellbeing Salted Fish Product Development Project And functional materialization

[주관기관][Host]

강릉원주대학교/강릉원주대학교/강릉원주대학교/강릉원주대학교Gangneung-Wonju National University / Gangneung-Wonju National University / Gangneung-Wonju National University / Gangneung-Wonju National University

[연구기간][Research period]

2008년 12월 01일 ~ 2011년 11월 30일/2009년 01월 01일 ~ 2009년 12월 30일/2008년 07월 01일 ~ 2011년 06월 30일/2007년 09월 01일 ~ 2010년 08월 31일December 01, 2008 ~ November 30, 2011 / January 01, 2009 ~ December 30, 2009 / July 01, 2008 ~ June 30, 2011 / September 01, 2007 ~ 2010 August 31,

도 1은 다시마 에탄올 추출물의 DPPH 자유기 소거 효과를 나타낸 도이다.1 is a diagram showing the DPPH free radical scavenging effect of kelp ethanol extract.

Claims (9)

항산화 활성을 갖는 다시마 추출물을 유효성분으로 함유하는 산화적 스트레스 관련 질환의 예방 및 치료를 위한 약학조성물.A pharmaceutical composition for the prevention and treatment of oxidative stress-related diseases containing kelp extract having antioxidant activity as an active ingredient. 제 1항에 있어서, 상기 추출물은 극성용매 추출물인 약학조성물.The pharmaceutical composition according to claim 1, wherein the extract is a polar solvent extract. 제 2항에 있어서, 상기 추출물은 물, 에탄올 또는 이들의 혼합용매에 가용한 추출물인 약학조성물.The pharmaceutical composition according to claim 2, wherein the extract is an extract available in water, ethanol or a mixed solvent thereof. 제 1항에 있어서, 상기 산화적 스트레스 관련 질환은 고지혈증 등의 지질대사질환; 동맥경화증, 심부전증, 고혈압성 심장질환, 부정맥 심근경색증, 협심증 등의 심장질환; 주름살, 기미, 주근깨 등의 피부노화, 면역질환 또는 암인 약학조성물.According to claim 1, wherein the oxidative stress-related diseases are lipid metabolism diseases such as hyperlipidemia; Heart diseases such as atherosclerosis, heart failure, hypertensive heart disease, arrhythmia myocardial infarction and angina pectoris; Pharmaceutical composition which is skin aging such as wrinkles, blemishes, freckles, immune diseases or cancer. 항산화 활성을 갖는 다시마 추출물을 유효성분으로 함유하는 산화적 스트레 스 관련 질환의 예방 및 개선용 건강기능식품.Health functional food for the prevention and improvement of oxidative stress-related diseases containing kelp extract with antioxidant activity as an active ingredient. 제 5항에 있어서, 분말, 과립, 정제, 캡슐 또는 음료인 건강기능식품.A dietary supplement according to claim 5 which is a powder, granule, tablet, capsule or beverage. 항산화 활성을 갖는 다시마 추출물을 유효성분으로 함유하는 식품첨가제.Food additive containing an extract of kelp with antioxidant activity as an active ingredient. 항산화 활성을 갖는 다시마 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화제.Antioxidant containing kelp extract having antioxidant activity as an active ingredient. 항산화 활성을 갖는 다시마 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물.Cosmetic composition containing a kelp extract having antioxidant activity as an active ingredient.
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