KR20110008055A

KR20110008055A - 수성 약제학적 제제

Info

Publication number: KR20110008055A
Application number: KR1020107023886A
Authority: KR
Inventors: 디에터 길레센; 요르겐 야게르
Original assignee: 아시노 파르마 아게
Priority date: 2008-04-08
Filing date: 2008-04-08
Publication date: 2011-01-25
Also published as: CA2721014A1; EP2280688A1; AU2008354622A1; MX2010011117A; TW200942240A; EP2280688B1; WO2009124586A1; JP2011516509A; BRPI0822580A2; CN102112108A; ZA201007185B; ATE542522T1

Abstract

본 발명은 수용성 메탄술폰산 염 형태의 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]- 피리미딘-2,4-디아민, 생리적 염화소듐 용액, 에탄올, 및 포비돈 12 PF를 포함하는 안정한 수성 약제학적 조성물에 관한 것이며, 액상은 4.8 이상 및 5.2 이하의 pH를 가지며, 산소 함량은 0.8 ppm 또는 그 미만으로 조절되며; 여과 및/또는 열 처리에 의하여 살균되어 장기간 동안 저장될 수 있으며, 순간 주사를 위하여 사용되거나 또는 정맥 주입(i.v. infusion)을 위하여 희석될 수 있다.

Description

수성 약제학적 제제{AQUEOUS PHARMACEUTICAL FORMULATION}

본 발명은 이클라프림(iclaprim)으로 알려진 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민을 포함하는 안정한 수성 약제학적 조성물에 관한 것이다.

이클라프림은 MRSA(메티실린 내성 황색포도상구균, methicillin-resistant Staphylococcus aureus)를 비롯하여 광범위한 그람-양성 세균(Gram-positive bacteria)에 대한 잠재적인 활성을 갖는 신규한 디아미노피리미딘 항생물질이다. 이것은 또한 몇몇 중요한 그람-음성 및 세포내 병원체(pathogen)에 대하여 활성이다. 이클라프림은 신속한 살균 효능은 나타내므로, 병원체의 성장을 단순히 방지하기보다, 병원체를 능동적으로 사멸시킨다. 더욱이, 이클라프림이 종종 세균성 병원체를 치료하기 어려운 은신처인 조직(예를 들면 피부, 연조식 및 폐) 내로 잘 침투하는 것이 관찰되었다.

이러한 이클라프림을 비롯한 신규한 디아미노피리미딘 항생물질류가 US-A-5, 773,446에 태블릿, 코팅된 태블릿, 당의정(dragee), 경성 및 연성 젤라틴 캡슐, 물약(solution), 에멀젼 또는 현탁액의 단위 복용 형태로 개시되어 있다. 또한 물약, 에멀젼 또는 현탁액이 예를 들면 좌약 형태로 직장으로(rectally) 투여될 수 있거나, 또는 예를 들면 주사 물약 형태로 비경구적으로 투여될 수 있음이 US-A-5, 773,446에 개시되어 있으나, 상기 물약 조성물의 상세한 사항에 대해서는 개시되지 않았다. US-A-5, 773,446에서 제공된 예는 술파메톡사졸과 배합된 4-[5-(2,4-디아미노-피리미딘-5-일메틸)-8-메톡시-2H-1-벤조피란-7-일옥시]-부탄산을 포함하는 태블릿 제제에 관한 것이다. 물약(solution) 형태의 제제, 특히 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민을 포함하는 물약 형태의 제제는 예시되지 않았다.

몇몇 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민의 염은 수용성이며 따라서 예를 들면 메탄술폰산 염을 함유하는 수성 약제학적 조성물의 제조가 용이하게 달성될 수 있을 것이라 예상되었다. 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민을 함유하는 수성 약제학적 조성물을 메탄술폰산 염 형태로 제조할 때, 놀랍게도 수성 제제가 안정하지 않았음이 밝혀졌다. 이는 예상치 못한 것이었는데, 왜냐하면 고체 물질 형태의 이클라프림 염이 극한 상황에서도 안정하였기 때문이다.

예를 들면, 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민 메탄술폰산 염이 수성 30% 프로필렌 글리콜으로서 또는 10% 글리코푸롤 용액 내에서 제조되었을 때, 이러한 수성 표준 제제들은 모의 장기간 보관 조건 하에서 극심한 안정성 문제에 직면했다.

유사한 표준 제제들이 또한 모의 살균 조건 하에서의 그 안정성에 대하여 연구되었는데, 여기서 이들은 용액의 pH가 3.5 미만의 pH로 조절될 때 더욱 증가되는 극심한 안정성 문제를 또다시 나타냈다.

더욱이, 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민의 농도가 예를 들면 10% 프로필렌 글리콜 염수 용액과 같은 염수 용액에서 7.5 mg/mL 이상으로 증가될 때, 염수에서 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민 메탄술폰산 염의 침전이 관찰되었다.

그러므로, 여과 및/또는 열 살균과 같은 해당 업계에서 공지된 방법에 의해 살균될 수 있으며, 모 화합물(parent compound)의 변화 또는 부산물의 형성 없이 장기간의 저장을 가능하게 하는, 농축된 (저장(stock)) 용액 형태의 개선된 제제에 대한 수요가 존재하였다. 이렇게 제제화된 저장 용액(stock solution)은 적절한 주사액으로 희석시킨 후 순간 주사(bolus injection) 또는 정맥 주입(i.v. infusion)으로서의 직접적인 주사를 위하여 적절하게 사용될 수 있다.

그러므로, 본 발명의 목적 중 하나는 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민 산 첨가 염, 예를 들면 메탄술폰산 염의 농축된 (저장) 용액을 제조하는 것이며, 이는 비경구 투여를 위하여 그대로 사용되거나 또는 사용되기 전에 염수(normal saline)로 희석되어 사용될 수 있다.

본 발명의 또 다른 목적은 그 구성성분이 연장된 기간, 특히 1개월 내지 최소 24개월 동안 안정하며, 용이한 저장 및 운송의 장점을 갖는 바이알 또는 앰플(ampoule)과 같은 저장소에서 조절될 수 있는, 농축된 (저장) 용액을 제공하는 것이다.

본 발명에 따르면, 놀랍게도, 수성 농축액으로부터 산소를 제거 또는 실질적으로 제거하는 것이 이클라프림의 화학적 안정성을 상당히 개선시킨다는 것이 밝혀졌다. 또한 생리적으로 수용가능한 용액의 pH가 약 pH 4.2 내지 약 pH 5.7의 범위에서 유지된다면 이클라프림이 생리적으로 수용가능한 용액에서 충분히 가용성이며 안정하게 유지된다는 것이 밝혀졌다.

그러므로, 본 발명은 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민(이클라프림) 산 첨가 염의 생리적으로 수용가능한 용액으로 본질적으로 구성된 이클라프림의 안정한 수성 용액, 특히 농축된 (저장) 안정한 수성 용액을 포함하는 조성물을 제공하며, 상기 용액에 산소가 없거나 또는 본질적으로 없음을 특징으로 한다.

본 발명의 한 구체 예에서, 용액의 산소 함량은 0.8 ppm 또는 그 미만이다.

본 발명의 한 구체 예에서, 용액의 산소 함량은 0.8 ppm 미만이다.

한 구체 예에서, 본 발명에 따르며 앞서 언급된 조성물은 미네랄산, 유기 술폰산 및 유기 카르복시산 각각과의 염 또는 이들의 혼합물과의 염으로 구성된 염의 군으로부터 선택되는 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민(이클라프림) 산 첨가 염을 포함한다.

한 구체 예에서, 본 발명에 따르며 앞서 언급된 조성물은 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민(이클라프림)과 미네랄산과의 산 첨가 염을 포함하며, 특히 할로겐화수소산 예를 들면 염화수소산, 브로민화수소 및 요오드화수소, 황산, 질산, 인산 등으로 구성된 군으로부터 하나 이상 선택되는 미네랄산과의 산 첨가 염을 포함한다.

한 구체 예에서, 본 발명에 따르며 앞서 언급된 조성물은 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민(이클라프림)과 유기 술폰산, 특히 알킬술폰산 및 아릴술폰산과의 산 첨가 염을 포함하며, 특히 메탄술폰산, p-톨루엔-술폰산, 벤젠술폰산 등으로 구성된 군으로부터 하나 이상 선택되는 알킬술폰산 및 아릴술폰산과의 산 첨가 염을 포함한다.

한 구체 예에서, 본 발명에 따르며 앞서 언급된 조성물은 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민(이클라프림)과 유기 카르복시산과의 산 첨가 염을 포함하며, 특히 아세트산, 주석산, 말레산, 시트르산, 벤조산, 살리실산, 및 아스코르브산 등으로 구성된 군으로부터 하나 이상 선택되는 유기 카르복시산과의 산 첨가 염을 포함한다.

한 구체 예에서, 본 발명에 따르는 조성물이 앞서 언급된 바와 같이 제공되는데, 여기서 상기 용액의 pH가 pH 4.0 내지 pH 5.9 범위, 특히 pH 4.2 내지 pH 5.7 범위, pH 4.4 내지 pH 5.5 범위, 특히 pH 4.6 내지 pH 5.2 범위, pH 4.9 내지 pH 5.1 범위이며, 그 중에서도 pH 4.8 내지 pH 5.2 범위이다.

pH를 pH 4.5 미만의 범위로 조절하기 위하여, 본 발명에 따르며 앞서 언급된 조성물은 생리적으로 수용가능한 산, 특히 염화수소산, 브롬화수소산, 황산, 인산, 질산 등으로 구성된 군으로부터 하나 이상 선택되는 무기 미네랄산, 또는 아세트산, 숙신산, 주석산, 아스코르브산, 시트르산, 글루탐산, 벤조산, 메탄술폰산, 에탄술폰산 등으로 구성된 군으로부터 하나 이상 선택되는 유기 산을 단독으로 또는 혼합물로 함유할 수 있다.

한 구체 예에서, pH 조절은 생리적으로 수용가능한 산성 완충 용액, 특히 시트르산 완충액, 아세테이트 완충액, 포스페이트 완충액 등으로 구성된 군으로부터 하나 이상 선택되는 완충 용액에 의해 본 발명에 따르며 앞서 언급된 조성물에서 달성될 수 있다.

pH를 pH 4.5 이상의 범위로 조절하기 위하여, 본 발명에 따르며 앞서 언급된 조성물은 생리적으로 수용가능한 알칼리화제, 특히 수산화소듐, 모노-, 디-, 및 트리에탄올아민 등의 군으로부터 하나 이상 선택되는 알칼리화제를 함유할 수 있다.

한 구체 예에서, pH 조절은 생리적으로 수용가능한 완충 용액, 특히 포스페이트 완충액, TRIS 완충액, 등의 군으로부터 하나 이상 선택되는 알칼리 완충 용액에 의해 본 발명에 따르며 앞서 언급된 조성물에서 달성될 수 있다.

한 구체 예에서, 본 발명에 따르는 조성물은 앞서 언급된 바와 같이 제공되는데, 여기서 생리적으로 수용가능한 용매는 알코올, 생리적 염수, 지방족 아민, 글리콜, 폴리알코올, 폴리알코올의 에스테르, 폴리글리콜, 폴리에테르, 및 당알코올로 구성된 군으로부터 하나 이상 선택되는 유기 용매 또는 물이다.

본 발명의 한 구체 예에서, 상기 생리적으로 수용가능한 용매는 물과 유기 용매의 혼합물, 특히 부피%로서, 약 100% 내지 약 40%, 특히 약 95% 내지 약 55%, 특히 약 80% 내지 약 65%의 물을 함유하는 혼합물이다.

본 발명의 한 구체 예에서, 상기 생리적으로 수용가능한 용매는 물이다.

본 발명의 한 구체 예에서, 상기 생리적으로 수용가능한 유기 용매는 에탄올이다.

한 구체 예에서, 본 발명에 따르며 앞서 언급된 조성물은 용해보조제(co-solubilizing agent), 특히 폴리에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 트리아세틴(Triacetin), 에탄올, 폴리에틸렌 글리콜, 지방산의 에스테르, 프로필렌 글리콜 지방산의 에스테르, 글리세린, 올레인산, 등으로 구성된 군으로부터 하나 이상 선택되는 용해보조제를 포함한다.

한 구체 예에서, 본 발명에 따르며 앞서 언급된 조성물은 생리적으로 수용가능한 무기 염화물, 특히 염화소듐을 포함한다.

본 발명의 한 구체 예에서, 생리적으로 수용가능한 무기 염화물, 특히 염화소듐은 0% 내지 3%의 농도, 특히 0.1% 내지 2.5%의 농도, 특히 0.2% 내지 2.0%의 농도, 특히 0.5% 내지 1.5%의 농도, 특히 0.6% 내지 1 %의 농도로, 수성 용액 내에 존재한다.

한 구체 예에서, 본 발명에 따르는 조성물은 앞서 언급된 바와 같이 제공되는데, 여기서 용액 내 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민(이클라프림)의 농도는 최소 0.1% (w/w)의 범위, 특히 최소 0.5% (w/w)의 범위, 특히 최소 1.0% (w/w)의 범위, 특히 최소 2.0% (w/w)의 범위, 특히 최소 5.0% (w/w)의 범위, 특히 최소 8.0% (w/w)의 범위이다.

본 발명의 특정 구체 예에서, 용액 내 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민(이클라프림)의 농도는 최소 1% 범위이며 2%를 초과하지는 않는다.

한 구체 예에서, 본 발명에 따르며 앞서 언급된 조성물은 예를 들면, 습윤제, 특히 N-메틸피롤리돈, 폴리비닐피롤리돈 예를 들면 포비돈(Povidone) 12 PF, 포비돈 17 PF, 포비돈 25, 포비돈 30, 포비돈 90 F, 사이클로덱스트린 예를 들면 2-하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린, 마크로골(macrogol) 하이드록시스테아레이트, 및 마크로골 글리세롤 리시놀리에이트로 구성된 군으로부터 선택되는 습윤제를 비롯하여, 생리적으로 수용가능한 운반체(carrier) 및/또는 부형제를 더욱 포함한다.

본 발명의 한 구체 예에서, 습윤제의 농도는 0% 내지 20% 범위, 특히 0.5% 내지 15% 범위, 특히 1% 내지 10% 범위, 특히 6.5% 내지 9.5% 범위, 더욱 특히 5% 내지 10% 범위이다.

본 발명의 한 구체 예에서, 생리적으로 수용가능한 용매, 특히 물과 에탄올의 혼합물, 특히 부피%로, 약 100% 내지 약 40%, 특히 약 95% 내지 약 55%, 특히 약 80% 내지 약 65%의 물을 함유하는 물과 에탄올의 혼합물, 생리적으로 수용가능한 무기 염화물, 특히 염화소듐, 특히 0% 내지 3%의 농도, 특히 0.1% 내지 2.5%의 농도, 특히 0.2% 내지 2.0%의 농도, 특히 0.5% 내지 1.5%의 농도, 특히 0.6% 내지 1%의 농도인 염화소듐, 생리적으로 수용가능한 습윤제, 특히 폴리비닐피롤리돈 예를 들면 포비돈 12 PF, 포비돈 17 PF, 포비돈 25, 포비돈 30, 포비돈 90 F, 특히 0.5% 내지 15% 범위, 특히 1% 내지 10% 범위, 특히 6.5% 내지 9.5% 범위, 더욱 특히 5% 내지 10% 범위 농도, 그리고 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민(이클라프림) 산 첨가 염, 특히 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민(이클라프림) 메탄술폰산 첨가 염, 특히 최소 0.1% (w/w) 범위, 특히 최소 0.5% (w/w) 범위, 특히 최소 1.0% (w/w) 범위, 특히 최소 2.0% (w/w) 범위, 특히 최소 5.0% (w/w) 범위, 특히 최소 8.0% (w/w) 범위, 더욱 특히 최소 1% 내지 2% 이하 범위의 농도로 본질적으로 구성된 이클라프림의 안정한 수성 용액을 포함하는 조성물이 제공되며, 여기서 상기 용액은 산소가 없거나 또는 본질적으로 없으며, 특히 0.8 ppm 또는 그 미만의 산소 농도를 가지며 여기서 상기 용액의 pH는 pH 4.0 내지 pH 5.9 범위, 특히 pH 4.2 내지 pH 5.7 범위, 특히 pH 4.4 내지 pH 5.5 범위, 특히 pH 4.6 내지 pH 5.2 범위, 특히 pH 4.9 내지 pH 5.1 범위, 더욱 특히 pH 4.8 내지 pH 5.2 범위이다.

한 구체 예에서, 본 발명에 따르며 앞서 언급된 조성물은 장기간의 저장 및 용이한 운송을 위한 저장 용액, 특히 농축된 저장 용액으로서 제공된다.

한 구체 예에서, 상기 저장 용액은 수용액이다.

한 구체 예에서, 본 발명에 따르며 앞서 언급된 조성물은 순간 주사(bolus injection)를 위한 즉석-사용용(ready-to-use) 주사 물약으로서 제공된다.

한 구체 예에서, 본 발명에 따르며 앞서 언급된 조성물은 즉석-사용용 주사 물약으로서 제공되는데, 여기서 전술한 저장 용액은 주사가능한 물, 글루코오스 용액; 아미노산, 지방질, 비타민, 미량 원소(traces element) 및 그 밖의 다른 미네랄을 포함하거나 또는 포함하지 않는 완전 전해질 용액(full electrolyte solution); 링거-락테이트 용액, 링거-아세테이트 용액, 등장액(isotonic solution), 열장액(hypotonic solution), 또는 고장액(hypertonic solution) 형태의 염화소듐 용액으로 구성된 군으로부터 선택되는 생리적으로 수용가능한 용질로 보충되어 원하는 부피로 완성된다.

본 발명의 한 구체 예에서, 생물학적으로 활성인 시약 또는 화합물, 특히 약학적으로 활성인 시약 또는 화합물, 특히 추가적인 항미생물성 화합물, 특히 항균성 화합물을 더욱 포함하는 조성물이 앞서 언급한 바에 따라 제공된다.

한 구체 예에서, 조성물은 항균성 화합물, 특히 엽산 생합성에 관여하는 효소의 억제제로서 작용하는 항균성 화합물, 특히 이클라프림과 함께 투여될 때 시너지 효과를 나타내는 화합물, 특히 술폰아마이드 또는 프테리딘 유도체, 특히 술파메톡사졸, 술피스옥사졸, 술파디메톡신, 댑손으로 구성된 군으로부터 선택되는 술폰아마이드를 더욱 포함한다.

본 발명의 또 다른 관점은 장기간의 저장 및 비경구 투여를 위하여 적절하게 패키징된 본 발명에 따르며 앞서 언급된 조성물의 제공에 관한 것이다.

한 구체 예에서, 본 발명은 본 발명에 따르며 앞서 언급된 조성물을 포함하는 용기, 특히 밀봉된 용기, 특히 바이알 또는 앰플을 제공한다.

본 발명의 한 구체 예에서, 상기 용기는 플라스틱 또는 유리 용기이다.

본 발명의 한 구체 예에서, 상기 용기는 생리적으로 수용가능한 용액을 포함하는 본 발명에 따르며 앞서 언급된 조성물을 포함하며, 상기 용액은 산소가 없거나 또는 실질적으로 없으며 상부공간(headspace)의 산소 농도는 5% (v/v) 미만, 특히 4% (v/v) 미만, 더욱 특히 3% (v/v) 미만이다.

본 발명의 한 구체 예에서, 상기 유리 용기는 밀봉된 유리 바이알 또는 앰플, 특히 5 mL 내지 10 mL, 특히 5 mL 내지 8 mL, 특히 5.5 mL 내지 6.5 mL의 전체 부피를 갖는 밀봉된 유리 바이알 또는 앰플이다.

본 발명은 또한 생리적으로 수용가능한 용매 및 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민(이클라프림) 산 첨가 염으로 본질적으로 구성된 이클라프림의 안정한 수용액, 특히 농축된 안정한 수용액을 포함하는 조성물을 제조하는 방법을 제공하며, 여기서 상기 용액은 산소가 없거나 실질적으로 없음을 특징으로 하며, 상기 방법은 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민(이클라프림), 특히 이의 생리적으로 수용가능한 산 첨가 염을 생리적으로 수용가능한 용매에 용해시키는 단계; 상기 용액으로부터 산소를 제거하여 산소가 없거나 본질적으로 없는 용액, 특히 0.8 ppm 또는 그 미만의 산소 농도를 갖는 용액을 수득하는 단계; 및 상기 조성물을 살균하는 단계를 포함한다.

본 발명의 한 구체 예에서, 질소에 의해 상기 용액을 정화시킴으로써 산소가 상기 용액으로부터 제거될 수도 있다.

한 구체 예에서, pH를 pH 4.0 내지 pH 5.9 범위, 특히 pH 4.2 내지 pH 5.7 범위, 특히 pH 4.4 내지 pH 5.5 범위, 특히 pH 4.6 내지 pH 5.2 범위, 특히 pH 4.9 내지 pH 5.1 범위, 더욱 특히 pH 4.8 내지 pH 5.2 범위인 바람직한 범위로 조절하는 추가적인 단계를 포함하는 방법이 전술한 바와 같이 제공된다.

본 발명의 한 구체 예에서, pH는 전술한 바와 같이 생리적으로 수용가능한 산 및/또는 알칼리화제 및/또는 완충액을 첨가함으로써 전술한 바람직한 범위로 조절될 수 있다.

한 구체 예에서, 본 발명에 따르며 앞서 언급된 방법은 생리적으로 수용가능한 부형제 및/또는 앞서 구체적으로 나타낸 유형의 생리적으로 수용가능한 무기 염화물과 같은 추가 구성성분을 첨가하는 추가적인 단계를 포함한다.

본 발명의 한 구체 예에서, 본 발명에 따르며 앞서 언급된 조성물의 살균은 상기 용액을 살균 필터에 통과시킴으로써 달성된다.

본 발명의 한 구체 예에서, 본 발명에 따르는 조성물의 살균은 상기 용액을 소정의 시간 동안, 특히 5분 내지 2시간, 특히 10분 내지 30분의 시간 동안, 고온, 특히 100℃ 내지 175℃의 온도, 특히 115℃ 내지 160℃의 온도, 및 고압, 특히 997 mbar 내지 2900 mbar의 압력, 특히 1600 mbar 내지 2500 mbar의 압력에 둠으로써 달성된다.

본 발명의 한 구체 예에서, 본 발명에 따르는 조성물의 살균은 상기 용액을 결합된 살균 여과(combined sterile filtration) 및 전술한 고온/고압 영역을 거치게 함으로써 달성된다.

한 구체 예에서, 본 발명은 즉석-사용용 주사 물약, 특히 순간 주사를 위한 즉석-사용용 주사 물약의 제조 방법을 제공한다.

한 구체 예에서, 본 발명은 즉석-사용용 주사 물약, 특히 주입(infusion)을 위한 즉석-사용용 주사 물약의 제조 방법을 제공하는데, 상기 방법은 본 발명에 따르며 앞서 언급된 저장 용액을, 주사가능한 물, 글루코오스 용액; 아미노산, 지방질, 비타민, 미량 원소 및 그 밖의 다른 미네랄을 포함하거나 또는 포함하지 않는 완전 전해질 용액; 링거-락테이트 용액, 링거-아세테이트 용액, 등장액, 열장액(hypotonic solution), 또는 고장액 형태의 염화소듐 용액으로 구성된 군으로부터 선택되는 생리적으로 수용가능한 용질을 사용하여, 원하는 부피에 도달할 때까지 희석시키는 단계를 포함한다.

한 구체 예에서, 본 발명은 본 발명에 따르며 앞서 언급된 조성물을 포함하는 용기, 특히 밀봉된 용기, 특히 바이알 또는 앰플의 제조 방법을 제공하는데, 상기 방법은 다음 단계를 포함한다:

a) 산소 배제 또는 실질적으로 산소 배제 조건, 예를 들면 질소 분위기에서, 예를 들면 생리적으로 수용가능한 유기 용매, 생리적으로 수용가능한 무기 염화물, 생리적으로 수용가능한 습윤제와 같은 조성물의 구성성분과 물을 완전한 용해가 이루어질 때까지 혼합하는 단계,

b) 후속하여 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민 메탄술폰산 염을 완전한 용해가 이루어질 때까지 첨가하는 단계,

c) 후속하여 pH를 pH 4.0 내지 pH 5.9 범위, 특히 pH 4.2 내지 pH 5.7 범위, 특히 pH 4.4 내지 pH 5.5 범위, 특히 pH 4.6 내지 pH 5.2 범위, 특히 pH 4.9 내지 pH 5.1 범위, 더욱 특히 pH 4.8 내지 pH 5.2 범위의 바람직한 범위로 조절하는 단계,

d) 후속하여 살균 필터를 통하여 살균 여과, 특히 질소 압력 하에서 살균 여과하는 단계,

e) 후속하여 상기 용액을 깨끗하고 살균되며 파이로젠 제거된(depyrogenated) 유리 앰플 또는 바이알에 채우고, 질소로 정화하며, 후속하여 앰플을 밀봉하는 단계, 선택적으로

f) 후속하여 열처리 형태로 추가 살균하는 단계.

본 발명의 또 다른 관점에서, 본 발명에 따르며 앞서 언급된 조성물은 전염성 질환의 억제 또는 예방, 특히 세균 감염의 억제, 특히 그람-양성 균주, 다-약제-내성 그람-양성 균주, 그람-음성 균주, 프뉴모시스티다세아애(pneumocystidaceae), 기생충 및 기회성 병원체(opportunistic pathogen)의 억제에 사용될 수 있다.

한 구체 예에서, 본 발명에 따르며 앞서 언급된 조성물은 전염성 질환의 억제 또는 예방, 특히 세균 감염의 억제, 특히 그람-양성 균주, 다-약제-내성 그람-양성 균주, 그람-음성 균주, 프뉴모시스티다세아애, 기생충 및 기회성 병원체의 억제에서의 사용을 위하여 제공된다.

본 발명의 한 구체 예에서, 전염성 질환의 억제 또는 예방, 특히 세균 감염의 억제, 특히 그람-양성 균주, 다-약제-내성 그람-양성 균주, 그람-음성 균주, 프뉴모시스티다세아애, 기생충 및 기회성 병원체의 억제를 위한 방법이 제공되는데, 상기 방법은 본 발명에 따르는 조성물을 약학적 효과량으로 이러한 치료가 요구되는 환자에게 비경구적으로 투여하는 단계를 포함한다.

본 발명의 한 구체 예에서, 투여는 정맥내 순간 주사에 의하거나 또는 주입(infusion)에 의해 달성된다.

이하에서는, 본 발명의 구체적인 양상이 더욱 자세하게 설명될 것이며 구체적인 실시예가 본 발명의 조성물에 대하여 제공될 것이며, 이는 단지 본 발명을 더욱 예시하는 역할을 하며 어떠한 방식으로든 제한하는 것으로 간주되어서는 안 된다.

본 발명의 범위 내에서, 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민 및 이의 산 첨가 염의 다양한 표준 수성 제제가 장기간의 안정성에 대하여 시험되었다. 예를 들면, 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민 메탄술폰산 염의 바이알이 물에 용해된 30% 프로필렌 글리콜 내에서 20 mg/mL의 이클라프림 농도로 제조되었다.

상기 표준 제제의 안정성을 조사하기 위하여, 장기간 저장 조건을 모의실험(simulate)하기 위하여 모델 시스템이 사용되었다. 상기 모델 시스템 내에서, 시험되는 용액을 최소 12일 동안 40℃ 내지 70℃에서 압력 가열(stress heat)시켰다.

상기 표준 제제에 대한 추가 안정성 시험이 수행되었는데, 여기서 2h 동안 100℃와 같은 모의 살균 조건하에서 pH가 시트르산에 의해 3.5 미만으로 조절되었다.

가열 단계 완료 이후 용액의 분석이 예를 들면 HPLC 측정과 같은 통상의 기술자에게 공지된 방법에 의하여 수행되었다.

이러한 모델 조건 하에서, 상기 시험된 표준 제제는 극심한 안정성 문제를 나타냈다. HPLC 분석은 또한 이클라프림 화합물의 붕괴 생성물(degradation product)을 나타내는 새로운 피크를 나타냈다.

프로필렌 글리콜의 양을 감소시키고 pH를 4.0 이상으로 유지시킴으로써 이클라프림 화합물의 붕괴를 감소시킬 수 있으나, 염수 용액 내 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민 메탄술폰산 염에 대하여 달성된 최대 용해도는 앞서 정의된 20 mg/mL와 비교하여 단지 7.5 mg/mL이었다. 온화한 압력 가열(mild stress heating)을 적용하여 전술한 모델 시스템을 사용하여 얻은 이러한 발견에 의하면 실온에서의 장기간 저장이 사용된 구성성분에 따라 침전물 또는 부산물의 형성을 유발할 수 있다는 결론이 가능하다.

또한, 용액의 색깔 변화가 낮은 pH에서의 실험실-규모의 모의 살균 시험 동안 관찰되었는데, 이는 이러한 표준 제제가 이러한 조건 하에서 민감하며 그러므로 종국적으로 살균되지 않아야 한다는 추정을 유발한다.

그러므로, 본 발명의 목적은 모 화합물(parent compound)의 침전 또는 부산물의 형성 없이 저장 동안 장기간의 안정성을 확보하며, 열 살균을 가능하게 하는 고온에서의 단기간 노출에 안정한, 개선된 제제를 제공하는 것이다.

본 발명의 사상은 정맥내 순간 주사(i.v. bolus injection)를 위하여 그대로 사용되거나 또는 사용되기 전에 적절한 주사액으로 희석될 수 있는, 예를 들면 앰플 또는 바이알과 같은 적절한 용기 내의 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민 산 첨가 염의 농축된 용액의 제조를 포함한다. 본 발명의 사상은 또한 농축 용액의 제공을 포함하는데, 여기서 상기 농축 용액에 포함된 구성성분은 연장된 기간 동안 안정하며 용이한 저장 및 운송이라는 장점을 갖는 예를 들면 바이알 또는 앰플과 같은 용기 내에서 제어될 수 있다.

본 발명의 범위 내에서, 농축된 용액으로부터 및/또는 폐쇄된 용기 내에서 용액 상부에 위치하는 상부공간으로부터 산소를 제거하거나 또는 실질적으로 제거함으로써 상기 사상이 실현될 수 있다는 것이 밝혀졌다.

용액으로부터 산소의 제거는 통상의 기술자에게 공지된 방법에 의해 달성될 수 있다. 본 발명의 특정 구체 예에서, 생리적으로 수용가능한 용매 및 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민(이클라프림) 산 첨가 염으로 본질적으로 구성된 이클라프림의 수용액은, 산소 농도가 용액 내에서 0.8 ppm 또는 그 미만, 그리고 폐쇄된 용기 내에서 용액 상부에 위치한 상부공간에서 5% (v/v) 미만, 특히 4% (v/v) 미만, 더욱 특히 3% (v/v) 미만일 될때까지, 질소에 의해 정화될 수 있다.

용액의 안정도는 용액의 pH를 pH 4.0 내지 pH 5.9 범위, 특히 pH 4.2 내지 pH 5.7 범위, 특히 pH 4.4 내지 pH 5.5 범위, 특히 pH 4.6 내지 pH 5.2 범위, 특히 pH 4.8 내지 pH 5.0, 더욱 특히 pH 4.8 내지 pH 5.2 범위로 조절함으로써 더욱 증가시킬 수 있다.

전술한 범위 내로 pH를 조절하기 위하여, 생리적으로 수용가능한 산이 상기 용액에 첨가될 수 있다. 임의의 생리적으로 수용가능한 산이 pH를 바람직한 범위, 특히 약 4.0 내지 4.5 범위로 조절하고 유지하기 위하여 사용될 수 있는데, 예를 들면 염화수소산, 브롬화수소산, 요오드화수소산, 황산, 질산, 인산 등을 포함하는 무기 미네랄산, 또는 알킬술폰산 및 아릴술폰산 예를 들면 메탄- 또는 에탄-술폰산, p-톨루엔술폰산, 벤젠술폰산 등을 포함하는 유기 술폰산, 또는 아세트산, L-주석산, 말레산, 시트르산, 벤조산, 살리실산, 아스코르브산, D,L-락트산, L-락트산, D-락트산, 디글리콜산, 푸마르산, 겐티신산, 말론산, 옥살산, 등을 포함하는 카르복시산 등이다. 예를 들면 염화물 완충액, 아세테이트 완충액, 포스페이트 완충액과 같은 산성인 생리적으로 수용가능한 완충 용액이 또한 사용될 수 있다.

pH를 약 4.5 내지 약 5.9 범위로 조절하고 유지하기 위하여, 생리적으로 수용가능한 알칼리화제가 상기 용액에 첨가될 수 있는데, 예를 들면 수산화소듐, 모노-, 디-, 또는 트리에탄올아민 등이다. 그 대신에, 예를 들면 포스페이트 완충액, TRIS 완충액 등과 같은 생리적으로 수용가능한 완충 용액이 상기 용액에 첨가될 수도 있다.

한 구체 예에서, 따라서 본 발명에 따르는 조성물은 생리적으로 수용가능한 용매 및 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민(이클라프림) 산 첨가 염 및 pH 조절제로 본질적으로 구성된 이클라프림의 안정한 수용액을 포함하며, 여기서 상기 pH 조절제는 pH를 약 pH 4.2 내지 약 pH 5.7 범위로 유지시키고, 상기 용액은 산소가 없거나 또는 실질적으로 없다.

한 구체 예에서, 본 발명에 따르며 앞서 언급된 조성물은 0.1 % (w/w) 내지 10% (w/w) 범위, 특히 0.2% (w/w) 내지 8% (w/w) 범위, 특히 0.3% (w/w) 내지 5% (w/w) 범위, 특히 0.5% (w/w) 내지 3% (w/w) 범위, 특히 0,6% (w/w) 내지 2% (w/w) 범위, 특히 0.8% (w/w) 내지 1.8% (w/w) 범위, 더욱 특히 1 % (w/w) 내지 2% (w/w) 범위 농도의 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민(이클라프림) 또는 이의 산 첨가 염 및 생리적으로 수용가능한 용매로 본질적으로 구성된 이클라프림의 안정한 수용액을 포함한다. 이클라프림 화합물은, 예를 들면 미네랄산, 유기 술폰산 및 유기 카르복시산의 군으로부터 하나 이상 선택되는 첨가 염(addition salt)과 같은 메탄술폰산 첨가 염의 용해도와 상응하는 물에 대한 용해도를 나타내는 한, 임의의 약학적으로 수용가능한 산 첨가 염 형태로 본 발명에 따르는 조성물 내에 존재할 수 있다.

특히, 미네랄산은 염화수소산, 브로민화수소, 요오드화수소, 황산, 질산, 및 인산 등으로 구성된 군으로부터 선택되는 산 첨가 염으로서 사용될 수 있다.

안정한 유기 술폰산 첨가 염은 예를 들면 메탄술폰산, p-톨루엔-술폰산, 벤젠술폰산 등과 같은 알킬- 및 아릴술폰산으로 구성된 군으로부터 선택되는 것들이다.

본 발명의 범위 내에서 사용될 수 있는 카르복시산 첨가 염은 아세트산, 주석산, 말레산, 시트르산, 벤조산, 살리실산, 및 아스코르브산 등으로 구성된 군으로부터 선택되는 것이다.

또한, 생리적으로 수용가능하며 이클라프림을 용해시킬 수 있는 임의 용매가 본 발명에 따르는 조성물 내에서 사용될 수 있다. 적절한 용매는 예를 들면 물, 알코올, 특히 에탄올, 이소프로판올, 벤질 알코올 등으로 구성된 군으로부터 선택되는 알코올, 프로필렌글리콜 및 폴리글리콜, 특히 폴리에틸렌 글리콜(PEG 300, 400, 600, 2000, 3350, 8000..), 폴리프로필렌 글리콜 등으로 구성된 군으로부터 선택되는 폴리글리콜과 같은 글리콜, 글리세린과 같은 폴리알코올, 디아세틴, 트리아세틴 등과 같은 폴리알코올의 에스테르, 당 알코올, 특히 만니톨, 자일리톨, 소르비톨 등으로 구성된 군으로부터 선택되는 것들이다.

또한, 생리적 염수, 특히 주사가능한 물, 아미노산, 지방질, 비타민, 미량 원소 및 그 밖의 다른 미네랄을 포함하거나 또는 포함하지 않는 완전 전해질 용액, 링거-락테이트 용액, 링거-아세테이트 용액, 등장액, 열장액(hypotonic solution), 또는 고장액 형태 등의 염화소듐 용액, N-하이드록시-2-에틸-락트아마이드, N,N- 디메틸아세트아마이드, 등과 같은 지방족 아마이드로 구성된 군으로부터 선택되는 염수 용액이 사용될 수도 있다.

이클라프림 및/또는 그의 산 첨가 염의 용해도는 예를 들면, N-메틸피롤리돈, 폴리비닐피롤리돈: 포비돈 12 PF, 포비돈 17 PF, 포비돈 25, 포비돈 30, 포비돈 90 F, 사이클로덱스트린 특히 2-하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린, 마크로골 하이드록시스테아레이트, 마크로골 글리세롤 리시놀리에이트, 등으로 구성된 군으로부터 선택되는 습윤제와 같은 추가적인 용해보조제의 첨가에 의해 더욱 개선될 수 있다.

본 발명의 한 관점에서, 농축된 저장 용액은 이클라프림 산 첨가 염, 특히 이클라프림 메탄술폰산 첨가 염을 물 또는 알코올, 또는 이들의 혼합물에 용해시킴으로써 제조된다. 특히, 물/에탄올의 혼합물 또는 물/프로필렌 글리콜의 혼합물, 특히 부피%로서, 약 100% 내지 약 40%, 특히 약 95% 내지 약 55%, 특히 약 80% 내지 약 65%의 물을 함유하는 혼합물이 사용될 수 있다.

특히, 27% 내지 34% (wt/wt) 에탄올 및 73% 내지 66% (wt/wt) 물, 바람직하게는 29% 내지 31 % (wt/wt) 에탄올 및 71% 내지 69% (wt/wt) 물을 포함하는 혼합물, 더욱 특히 30.6% (wt/wt) 에탄올 및 69.4% (wt/wt) 물을 포함하는 혼합물이 사용될 수 있다.

이러한 저장 용액은 예를 들면 생리적으로 수용가능한 무기 염화물, 덱스트로스, 락토스, 만니톨 등과 같은 장력 조절제(tonicity adjustment agent)의 첨가에 의해 보충될 수 있다. 특히, 염화소듐이 상기 저장 용액의 장력(tonicity)을 조절하기 위하여 사용될 수 있다.

따라서 이러한 저장 용액의 pH는 염기를 저장 용액에 첨가함으로써, 4.2 내지 5.7 범위, 특히 4.8 내지 5.2 범위의 pH로 조절될 수 있으며, 특히 5.0의 pH로 조절될 수 있다. 특히, 수산화소듐, 특히 0.1 N 수산화소듐 용액이 상기 저장 용액의 pH를 조절하기 위하여 사용될 수 있다.

물 또는 물/알코올 혼합물에서의 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민 메탄술폰산 염의 용해도를 개선하기 위하여, 저장 용액은 예를 들면 N-메틸피롤리돈, 폴리비닐피롤리돈(포비돈 12 PF, 포비돈 17 PF, 포비돈 25, 포비돈 30, 포비돈 90 F), 사이클로덱스트린, 특히 2-하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린, 마크로골 하이드록시스테아레이트, 마크로골 글리세롤 리시놀리에이트, 등으로 구성된 군으로부터 선택되는 시약과 같은, 습윤제 또는 용해제의 첨가에 의해 추가로 보충될 수 있다.

특히, 포비돈 12 PF(포비돈)와 같은 폴리비닐피롤리돈이 본 발명에 따르는 저장 용액에서 습윤제로서 사용될 수도 있다.

저장 용액의 산소 농도는 0.8 ppm 또는 그 미만이다. 이는 무-산소 용액을 제조하기 위하여 흔히 사용되는 해당 업계에 공지된 표준 방법(예를 들면 삼투성 막)에 의하거나, 또는 이클라프림 산 첨가 염에 대한 용매로서 질소-발포 물(nitrogen-gassed water)을 사용하거나, 또는 특히 운송 및 저장을 위하여 저장 용액을 용기에 채우고 밀봉하는 동안 저장 용액을 질소로 정화시킴으로써 달성될 수 있다.

본 발명의 한 관점에서, 전술한 저장 용액은 살균되며, 특히 전술한 바와 같이 상기 용액을 살균 필터에 통과시킴으로써 살균된다.

본 발명의 또 다른 관점에서, 본 발명에 따르는 조성물의 살균은 상기 용액을 소정의 시간 동안, 특히 5분 내지 최소 2시간, 특히 10분 내지 30분의 시간 동안, 고온, 특히 100℃ 내지 175℃의 온도, 특히 115℃ 내지 160℃의 온도, 및 고압, 특히 997 mbar 내지 2900 mbar의 압력, 특히 1600 mbar 내지 2500 mbar의 압력을 거치게 함으로써 달성된다.

저장 용액의 살균은 또한 상기 용액을 결합된 살균 여과(combined sterile filtration) 및 전술한 고온/고압 영역을 거치게 함으로써 달성된다.

특히, 상기 용액을 1 내지 2 bar 질소 압력 하에서 0.2 μm의 정상 공극 크기를 갖는 미리 살균된 필터를 통하여 깨끗하고 살균된 용기 내로 보내질 수 있다. 이렇게 살균된 용액(약 5.3 mL)은 그 후 적절한 크기의 깨끗하고 살균되며, 파이로젠 제거된(depyrogenated) 유리 앰플에 채워질 수 있으며, 상기 앰플은 질소로 정화되고, 절단되고 밀봉된다.

그 후 앰플은 15분 동안 121℃에서 열 살균될 수 있다.

이렇게 제조된 앰플은 그 후 연장된 기간 동안, 특히 최소 24개월 동안 실온에서 저장될 수 있다.

이러한 저장 용액은 비경구 투여를 위한 즉석-사용용 주사 물약(injection solution) 또는 주입을 위한 즉석-사용용 주입 용액(infusion solution)을 제조하기 위하여 사용될 수 있다. 즉석-사용용 주사 물약은 상기 저장 용액을 그대로 사용하여 제조될 수 있다. 즉석-사용용 주입 용액은 주사가능한 물, 글루코오스 용액; 아미노산, 지방질, 비타민, 미량 원소 및 그 밖의 다른 미네랄을 포함하거나 또는 포함하지 않는 완전 전해질 용액; 링거-락테이트 용액, 링거-아세테이트 용액, 등장액, 열장액(hypotonic solution), 또는 고장액 형태의 염화소듐 용액 등을 개별적으로 또는 다양하게 배합하여 첨가함으로써 원하는 부피로 상기 저장 용액을 희석시켜 제조될 수 있다.

본 발명에 따르는 조성물은 그 후 치료가 필요한 환자에게 본 발명에 따르는 상기 조성물을 약학적 효과량으로 비경구적으로 투여함으로써 전염성 질환의 억제 또는 예방, 특히 세균 감염의 억제, 특히 그람-양성 균주, 다-약제-내성 그람-양성 균주, 그람-음성 균주, 프뉴모시스티다세아애(pneumocystidaceae), 기생충 및 기회성 병원체의 억제에 사용될 수 있다.

본 발명에 따르는 상기 조성물의 비경구적 투여는 i.v. 순간 주사에 의하거나 또는 주입에 의해 달성될 수 있다

특정 구체 예에서, 본 발명에 따르며 앞서 언급된 조성물은 추가적인 항균성 화합물, 특히 엽산 생합성에 관여하는 효소의 억제제로서 작용하는 항균성 화합물, 특히 이클라프림과 함께 투여될 때 시너지 효과를 나타내는 화합물, 특히 술폰아마이드 또는 프테리딘 유도체, 특히 술파메톡사졸, 술피스옥사졸, 술파디메톡신, 댑손으로 구성된 군으로부터 선택되는 술폰아마이드와 함께 사용될 수 있다.

추가적인 항균성 화합물과 함께 투여(Co-administration)하는 것은, 동일 조성물의 일부분으로서 또는 별개의 조성물 형태로서, 본 발명에 따르는 수성 약제학적 조성물의 투여와 동시에 이행될 수 있다. 그 대신에, 추가적인 항균성 화합물은 본 발명에 따르는 수성 약제학적 조성물의 투여 이전 또는 이후에 투여될 수 있다.

아래의 실시예 및 그 실시예에서 상세하게 설명되는 결과는 수성 약제학적 조성물의 개발이 어떻게 진행되었는지를 설명한다. 실험은 본 발명을 예시적으로 설명하며 본 발명의 범위를 제한하지 않는다.

실시예

A. 실시예에 사용된 화학약품 및 장비

화학약품:

아세토니트릴 바이오솔브 HPLC 등급(Biosolve HPLC grade)

포름산 피우카 푸럼(Fiuka purum)

염화수소산 32%, 피우카 푸리스, 피. 에이.

시트르산 피우카 푸리스, 피. 에이.(Fiuka puriss, p.a.)

프로필렌 글리콜 피우카 푸리스, 피. 에이.

글리코푸롤 75 로체(Roche)

장비:

고압 구배 HPLC 시스템(High pressure gradient HPLC system)

워터 얼라이언스(Waters Alliance)

HPLC 칼럼 수펠코 디스커버리 C18(HPLC column Supelco Discovery C18)

가열 챔버 살비스(Heating chamber Salvis)

B. 검출 방법

HPLC 측정

칼럼: 수펠코 디스커버리 C18(Supelco Discovery C18)

칼럼 온도: 실온

용리제 A: 10mM 포름산

용리제 B: 아세토니트릴

구배(Gradient): 10분에서 80% A 내지 20%

5분 동안 20% A

5분 동안 0% A 내지 80% A

주사 부피: 10㎕

검출 파장: 254nm

유속: 0.5mL/min

상부공간 또는 용액 내 산소 함량을 측정하는 방법:

용액 내 산소 함량의 결정:

용액 내 산소 함량은 산소농도계(oxymeter)를 사용하는 전류법적 정량법(amperometric determination)에 의해 측정된다:

- 보정(Calibration): - 탐침(probe)을 습한 스폰지를 함유하는 대기 보정 비이커에 놓는다.

- 시작 측정: 탐침의 상대 슬로프의 허용 가능한 범위가 올바른지 확인한다.

- 용존 산소 농도 측정 모드로 설정한다(mg/L).

상부공간 내 산소 함량의 결정:

앰플 상부공간 내 산소 함량은 약학 패키지 내 산소를 측정하기 위하여 고안된 특수 상부공간 산소 분석기를 사용하여 측정된다.

이러한 목적을 위하여, 앰플을 패키지 지지체에 결속시키고 앰플의 바닥을 다이아몬드 탭 연필로 절단한다. 탈기체 물을 앰플 내에 넣고 사전에 보정된 전류법 탐침(amperometric probe)으로 산소 함량을 측정한다.

실시예 1: 이클라프림에 대한 표준 제제의 제조 및 시험

정상 대기 하에서 밀리포어 수(Millipore water)에 용해된 30% 프로필렌 글리콜 내에서 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민 메탄술폰산 염(20 mg/mL)의 바이알이 제조되었다.

상기 제제의 안정성을 조사하기 위하여, 모델 시험이 개발되었는데 여기서 시험될 용액이 압력 가열되었다. 예를 들면 40℃ 내지 70℃와 같은 실온(약 20℃) 이상의 온도에서 장기간 동안 테스트 샘플을 가열함으로써, 장기간 저장 조건이 모의(simulate)될수 있음은 해당 업계에 공지되어 있다.

가열 단계 완료 이후 용액의 분석은 육안 검사 및 HPLC 측정을 이용하여 수행되었다.

표 1에서, 대표적인 실험의 결과가 제시된다.

표 1의 결과로부터, 활성 구성성분의 함량이 시간이 지남에 따라 감소하기 때문에 이러한 제제는 장기간의 저장에 적절하지 않다는 결론을 내릴 수 있다.

실시예 2: pH<3.5에서 모의 살균 조건 하에서 이클라프림의 안정성 연구

물에 용해된 30% 프로필렌 글리콜 또는 10% 글리코푸롤 내에서 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민 메탄술폰산 염의 바이알이 제조되었다.

이렇게 얻은 용액의 pH를 1 M 시트르산을 이용하여 pH 3으로, 또는 1N 염화수소산을 이용하여 pH 1로 조절하였으며, 살균 과정을 모의실험하기 위해 상기 바이알을 가열하였다.

가열 단계 완료 이후 용액의 분석은 육안 검사 및 HPLC 측정을 이용하여 수행되었다. 대표적인 실험 결과가 표 2에 제시된다.

표 2의 결과로부터, 활성 구성성분의 함량이 시간이 지남에 따라 감소하기 때문에 이러한 제제는 pH 3 또는 그 미만에서 열 살균에 적절하지 않다는 결론을 내릴 수 있다.

실시예 3: 이클라프림 메탄술폰산 염의 용해도

상이한 수성/유기 용액 내에서 이클라프림 메실레이트의 용해도를 연구하였으며 표 3에 제시된다. 일정량의 이클라프림 메실레이트를 서로 다른 수성/유기 용액에 현탁시켰다. 현탁액을 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 용액의 상청액을 HPLC로 분석하여 용액 내 이클라프림의 양을 결정하였다.

대표적인 결과를 표 3에서 제시한다.

실시예 4: 저장 용액의 제조

주사용 물(10 부피부(part) vol/vol), 포비돈 12 PF (2 부), 염화소듐 (0.2 부) 및 에탈올(7.5 부)을 질소를 연속적으로 흘려보내면서 스테인리스 강 혼합 탱크 내에서 완전한 용액이 될 때까지 교반시켰다. 용액 내 잔류 산소 함량이 0.8 ppm 미만이 되도록 상기 용액을 영구적으로 제어하였다.

후속하여, 5-[(2R,S)-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]- 피리미딘-2,4-디아민 메탄술폰산 염(0.4 부)을 상기 용액에 첨가하고 완전히 용해될 때까지 교반하였다. 그 후 용액의 pH를 0.1 N 수산화소듐 용액을 사용하여 pH 4.8 내지 5.2로 조절하였다. 용액의 부피를 조절하여 이클라프림의 1.28% 최종 농도에 도달하였다.

폐쇄 시스템 내에서, 상기와 같은 하여 얻은 용액을 1 내지 2 bar의 질소 스트림 하에서, 0.2 μm의 정상 공극 크기를 갖는 살균 필터를 통하여 여과시켰다.

적절한 크기와, 깨끗하고 살균되며, 파이로젠 제거된 유리 앰플에 상기 여과된 용액을 무균 조건 및 질소 분위기 하에서 채웠으며, 상기 용액을 1 내지 2 bar의 질소 스트림으로 세정함으로써 질소로 정화시키고 프레임 압축으로 밀봉하였다.

상기 앰플을 121℃에서 15분 동안 가열 처리함으로써 추가적인 살균 단계가 적용될 수 있다.

이러한 앰플의 내용물은 염수로 희석되어 대규모 부피 정맥 주사(i.v. infusion)를 위한 안정한 용액을 제공할 수 있다.

실시예 5: 안정성 시험

실시예 5.1:

저장 용액(전체 부피 5.3 mL)을 함유하기 위한 밀봉된 앰플(앰플의 전체 부피는 6.5 mL 내지 5.5 mL)을 전술한 실시예 4에서 설명한 바와 같이 제조하였는데, 상부공간 내의 산소 함량을 3% v/v 미만으로 유지하기 위하여 충전과정 동안 앰플을 질소로 정화시켰다. 단계 11에 따르는 열처리에 의한 살균은 수행되지 않았다.

앰플을 개봉하고 전술한 방법을 사용하여 HPLC에 의해 즉시 분석하였다.

실시예 5.2:

실시예 5.1에 설명된 것과 같은 밀봉된 앰플에 대하여 실시예 4의 단계 11에서 설명한 바와 같이 121℃에서 15분 동안의 열처리에 의한 추가 살균을 수행하였다.

실시예 5.3:

실시예 5.1의 것과 같은 밀봉된 앰플을 개봉하고 용액을 정상 대기 조건(ca. 20% 산소 함유) 하에서 또 다른 빈 앰플에 다시 채웠다.

이렇게 얻은 용액을 전술한 방법을 사용하여 HPLC에 의해 분석하였다.

실시예 5.4:

앰플에 대하여 실시예 4의 단계 11에서 설명한 바와 같이 121℃에서 15분 동안 열처리하는 추가 살균을 수행하였다.

대표적인 결과가 표 4에 제시된다.

칼럼: YMC ODS-AQ, 250 x 4.6 mm, 5 μm

칼럼 온도: 4O℃

이동상 A: H₃PO₄ 0.1 %

이동상 B: MeOH

이동상 C: CH₃CN

구배: 시간(분) %A %B %C

0 75 15 10

15 60 15 25

30 10 15 75

35 10 15 75

유속: 1 mL/min

포스트 런(Post run) 10 분

검출기 230 nm에서 UV

주사 부피: 10 μL

실행시간(Run time) 35 분

희석제 물/MeOH/CH₃CN 6/2/2 v/v/v

관찰된 불순물 1, 2 및 3은 이클라프림의 산화로 인한 붕괴 생성물이다:

이클라프림: [M+H]⁺ = 355, HPLC 체류 시간: 6.1

불순물 1 : [M+H]⁺ = 353, HPLC 체류 시간: 9.2

불순물 2: [M+H]⁺ = 371 , HPLC 체류 시간: 3.8

불순물 3: [M+H]⁺ = 389, HPLC 체류 시간: 3.3

실시예 5.4의 결과에 의하면, 샘플을 대기(약 20% 산소 함유)에 노출시키면 고압멸균(autoclavation) 이후 붕괴 생성물의 상당한 증가 및/또는 활성 구성성분의 감소뿐만 아니라 상당한 색깔 변화(BY6에서BY4)를 초래한다. 개봉하지 않은 샘플은 고압멸균(autoclavation) 이후 단지 미소한 색깔 변화(BY6에서 BY5)를 나타냈다(실시예 5.2).

실시예 5.3의 결과에 의하면, 용액의 안정성에 영향을 주지 않으면서, 정상 대기 하에서 바이알을 개봉하고 조작할 수 있다.

Claims

생리적으로 수용가능한 용매 및 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민(이클라프림) 첨가 염으로 본질적으로 구성된 용액 내 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민(이클라프림)을 포함하며, 상기 용액이 본질적으로 산소가 없음을 특징으로 하는, 조성물.
청구항 1에 있어서, 상기 용액 내 산소 농도가 0.8 ppm 또는 그 미만임을 특징으로 하는, 조성물.
청구항 1에 있어서, 상기 생리적으로 수용가능한 용매는 물, 알코올, 생리적 염수, 지방족 아마이드, 글리콜, 폴리알코올, 폴리알코올의 에스테르, 폴리글리콜, 폴리에테르, 및 당 알코올로 구성된 군으로부터 하나 이상 선택됨을 특징으로 하는, 조성물.
전술한 청구항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 생리적으로 수용가능한 용매는 물 또는 에탄올 또는 물/에탄올 혼합물임을 특징으로 하는, 조성물.
전술한 청구항 중 어느 한 항에 있어서, 0% 내지 50%, 특히 5% 내지 45%, 특히 20% 내지 35% 범위의 농도로 에탄올을 포함함을 특징으로 하는, 조성물.
전술한 청구항 중 어느 한 항에 있어서, 염화나트륨(NaCl)을 특히 0% 내지 3%, 특히 0.1 % 내지 1%의 농도로 포함함을 특징으로 하는, 조성물.
청구항 1에 있어서, 상기 용액의 pH가 pH 4.2 내지 pH 5.7, 특히 pH 4,4 내지 pH 5.5, 특히 pH 4.6 내지 pH 5.2, 특히 pH 4.9 내지 pH 5.1, 더욱 특히 pH 4.8 내지 pH 5.2의 범위임을 특징으로 하는, 조성물.
전술한 청구항 중 어느 한 항에 있어서, 용액 내 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민(이클라프림)의 농도가 최소 0.1% (w/w), 특히 최소 0.5% (w/w), 특히 최소 1.0% (w/w), 특히 최소 2.0% (w/w), 특히 최소 5.0% (w/w), 특히 최소 8.0% (w/w), 더욱 특히 최소 1%, 내지 2%를 초과하지 않는 범위임을 특징으로 하는, 조성물.
전술한 청구항 중 어느 한 항에 있어서, 추가로 습윤제, 특히 N-메틸피롤리돈, 폴리비닐피롤리돈, 사이클로덱스트린, 마크로골 하이드록시스테아레이트, 및 마크로골 글리세롤 리시놀리에이트로 구성된 군으로부터 선택되는 습윤제를, 특히 0% 내지 20%, 특히 0.1% 내지 10%, 특히 6.5% 내지 9.5%, 더욱 특히 5% 내지 10% 범위의 농도로 포함함을 특징으로 하는, 조성물.
전술한 청구항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 첨가 염은 미네랄산, 유기 술폰산 및 유기 카르복시산 중 하나 이상과의 염으로 구성된 염의 군으로부터 선택되는 산 첨가 염, 특히 메탄술폰산 첨가 염임을 특징으로 하는, 조성물.
전술한 청구항 중 어느 한 항에 있어서, 추가적인 생물학적으로 활성인 시약 또는 화합물, 특히 약학적으로 활성인 시약 또는 화합물, 특히 추가적인 항미생물성 화합물, 특히 엽산 생합성에 관여하는 효소의 억제제와 같은 항균성 화합물, 예를 들면 술폰아마이드 또는 프테리딘 유도체, 특히 술파메톡사졸, 술피스옥사졸, 술파디메톡신, 댑손으로 구성된 군으로부터 선택되는 술폰아마이드를 더욱 포함함을 특징으로 하는, 조성물.
전술한 청구항 중 어느 한 항에 따르는 조성물을 포함하는 용기, 특히 바이알 또는 앰플과 같은 밀봉된 용기.
전술한 청구항 중 어느 한 항에 따르는 조성물을 포함하는 전술한 청구항 중 어느 한 항에 따르는 용기에 있어서, 상기 조성물은 생리적으로 수용가능한 용액을 포함하고 상부공간 내 산소 농도가 5% (v/v) 미만, 특히 4% (v/v) 미만, 더욱 특히 3% (v/v) 미만임을 특징으로 하는 용기.
생리적으로 수용가능한 용매 및 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민(이클라프림) 산 첨가 염으로 본질적으로 구성된 이클라프림의 안정한 수용액을 포함하며 상기 용액이 본질적으로 산소가 없음을 특징으로 하는, 조성물의 제조 방법에 있어서, 상기 방법은 5-[(2RS)-2-사이클로프로필-7,8-디메톡시-2H-1-벤조피란-5-일메틸]-피리미딘-2,4-디아민(이클라프림), 특히 이의 생리적으로 수용가능한 산 첨가 염을 생리적으로 수용가능한 용매에 용해시키는 단계; 용액으로부터 산소를 제거하여 산소가 본질적으로 없는 용액, 특히 0.8 ppm 또는 그 미만의 산소 농도를 갖는 용액을 산출하는 단계; 및 조성물을 살균하는 단계;를 포함하는, 조성물의 제조 방법.
전술한 청구항 중 어느 한 항에 있어서, 예를 들면 생리적으로 수용가능한 산 및/또는 알칼리화제 및/또는 완충액을 첨가하여 pH를 pH 4.2 내지 pH 5.7, 특히 pH 4.4 내지 pH 5.5, 특히 pH 4.6 내지 pH 5.2, 특히 pH 4,9 내지 pH 5.1, 더욱 특히 pH 4.8 내지 pH 5.2의 바람직한 범위로 조절하는 추가 단계를 포함하는, 조성물의 제조 방법.
순간 주사를 위한 즉석-사용용 주사 물약의 제조를 위한 청구항 1 내지 청구항 11 중 어느 한 항에 따르는 조성물의 용도.
즉석-사용용 주입 용액의 제조를 위한 청구항 1 내지 청구항 11 중 어느 한 항에 따르는 조성물의 용도에 있어서, 상기 제조는 청구항 1 내지 청구항 11 중 어느 한 항에 따르는 저장 용액을 주사가능한 물, 글루코오스 용액; 아미노산, 지방질, 비타민, 미량 원소 및 그 밖의 다른 미네랄을 포함하거나 또는 포함하지 않는 완전 전해질 용액; 링거-락테이트 용액, 링거-아세테이트 용액, 등장액, 열장액(hypotonic solution), 또는 고장액 형태의 염화소듐 용액으로 구성된 군으로부터 선택되는 생리적으로 수용가능한 용질을 사용하여, 원하는 부피에 도달할 때까지 희석시키는 단계를 포함하는, 조성물의 용도.
인간 또는 동물에서 전염성 질환의 억제 또는 예방에서의 사용, 특히 세균 감염의 억제에서의 사용, 특히 그람-양성 균주, 다-약제-내성 그람-양성 균주, 그람-음성 균주, 프뉴모시스티다세아애(pneumocystidaceae), 기생충 및 기회성 병원체의 억제에서의 사용을 위한, 전술한 청구항 중 어느 한 항에 따르는 조성물.
치료가 필요한 환자에게 전술한 청구항 중 어느 한 항에 따르는 조성물을 약학적 효과량으로 비경구적으로 투여하는 단계를 포함하는, 인간 또는 동물에서 전염성 질환의 억제 또는 예방, 특히 세균 감염의 억제, 특히 그람-양성 균주, 다-약제-내성 그람-양성 균주, 그람-음성 균주, 프뉴모시스티다세아애(pneumocystidaceae), 기생충 및 기회성 병원체의 억제를 위한 방법.