KR20100123694A

KR20100123694A - 소형 효소-함유 과립

Info

Publication number: KR20100123694A
Application number: KR1020107018075A
Authority: KR
Inventors: 나다니엘 티 벡커; 로버트 아이 크리스텐센; 마크 에스 게버트; 안띠 뻬까 바하-바헤
Original assignee: 다니스코 유에스 인크.
Priority date: 2008-02-14
Filing date: 2009-02-11
Publication date: 2010-11-24
Also published as: CN101946000A; EP3196302B1; BRPI0908237A2; US20170283785A1; US9657284B2; DK2240579T3; AU2009214868A1; RU2010137979A; EP2240579A1; EP3196302A1; DK3196302T3; NZ586750A; US20110065163A1; US9938517B2; CA2714751C; US20150275197A1; US20130288332A1; WO2009102770A1; EP2240579B1; JP5590727B2

Abstract

본 발명은 무기염 코어 및 상기 코어에 코팅되는 효소-함유 층을 갖는 소형 효소-함유 과립 및 상기 과립의 제조 방법을 제공한다. 효소 과립의 대부분은 300 ㎛ 미만의 직경을 포함한다. 과립은 세정, 직물 가공 및 동물 사료 조성물과 같은 조성물에 혼입되기에 적합하다.

Description

소형 효소-함유 과립 {SMALL ENZYME-CONTAINING GRANULES}

관련 출원의 상호 참조

본 출원은 본원에 전부 그대로 인용참조 되어 있는 미국 가출원 제 61/028,748 호 (출원일 2008년 2월 14일) 및 미국 가출원 제 61/115,146 호 (출원일 2008년 11월 17일) 의 이점을 주장한다.

발명분야

본 발명은 유동층 분무 코팅기에서 제조되는, 입자의 대부분이 300 마이크론 미만의 직경을 갖고 단일 코어를 함유하는 소형 효소-함유 과립에 관한 것이다.

효소-함유 과립은 세제, 직물-가공, 식품 (예를 들어, 베이킹), 동물 사료 및 연료 에탄올 산업과 같은 다양한 산업의 제품에 포함되어 있다. 상기 과립은 유동층 분무 코팅법, 고전단 과립화법, 압출법, 구형화법, 프릴링법, 및 분무 건조법을 포함하는 다수의 기술로 제조될 수 있다.

작은 크기 (예를 들어, 300 마이크론 미만의 직경) 의 효소-함유 과립은 작은 과립이 먼지를 덜 생성하고, 분무 건조된 분말보다 비활성화제에 대해 효소를 더 잘 보호하기 때문에, 특정 용품에 바람직한 반면, 이러한 공업에서 통상의 다른 분말화된 성분과 더욱 균일하게, 눈에 띄지 않게 배합하기가 더욱 쉽다. 상기 분말은 계면활성제 및 다른 세제 성분, 완충제, 염, 곡물 가루, 전분, 당, 및/또는 비활성 희석제를 포함한다. 더 작은 과립은, 상기 분말 및 미세 과립 물질에 배합될 때 분리되는 경향이 적다. 또한, 소정량의 더 작은 효소-함유 과립은 동일한 질량의 더 큰 과립보다 더욱 개별적인 과립을 많이 함유할 것이므로, 배합되는 분말의 표본 또는 부분 표본 내에서, 특히 더 작은 표본 크기, 예를 들어 부분 표본 당 분말 약 50 g 내지 100 g 미만에서 양호한 균일성 (덜 다양한 기본 농도(net concentration)) 을 제공할 것이다. 150 내지 350 마이크론 범위의 직경을 포함하는 과립은 다량의 먼지를 생성하거나 효소 능력을 상실시키기에 취약할 만큼 작지 않고, 전형적인 분말화된 생성물과 열악하게 배합할 만큼 크지 않기 때문에 유리하다.

상부-분무 유동층 코팅기에서 상기 과립을 제조하는 것이 바람직한데, 그 이유는 이러한 기술이 높은 생산성, 즉 단위 시간 당 생성되는 과립의 질량에 대해 비교적 적은 생산 비용 및 적은 장비 비용으로 코팅된 과립을 제조할 수 있기 때문이다. 코어 입자의 크기 분포의 신중한 선별에 의한 상기 코팅 공정을 이용하여, 그 결과로 생긴 최종 코팅된 생성물의 좁고 한정된 입자 크기 분포가 달성될 수 있는데, 이러한 분포는 균일한 품질 및 분말과의 배합에 유리하다.

상부-분무 유동층 코팅기는, 입자층이 용기 바닥의 고정판 또는 스크린을 통과한 공기의 상승류에 의해 형성되는 무작위 순환 또는 교반층에 부유되어 있고, 액체 코팅 용액이 상기 층에 삽입된 분무 노즐을 통해 상기 용기로 향할 수 있게 되어 있는 코팅 용기이다. 상부-분무 유동층 코팅법은 더 큰 크기 범위, 즉 과립의 대다수가 300 마이크론 초과의 직경을 포함하는 경우의 코팅된 효소-함유 과립을 제조하는 정착된 기술이다. 그러나, 더 작은 과립에는, 코팅 용액에 존재하는 결합제로 인해 효소 및 다른 용액과 함께 분무될 때 유동화 과립이 응집되거나 서로 접착하려는 강한 경향이 있다. 미세 분말의 응집체는 건조 생성물을 제조하는데 종종 의도적으로 이용되지만, 이러한 응집화된 분말은 전형적으로 넓은 입자 크기 분포를 갖고, 자유롭게 흐르지 못하며, 조작에서 발생되는 전단, 충격 또는 다른 힘이 적용될 때 먼지를 형성하거나 미세분으로 분쇄되는 경향이 있기 때문에 보통 바람직하지 않다. 게다가, 응집체의 코팅은, 많은 코팅 물질이 공업 구역에 혼입되어 있기 때문에, 기질 입자를 코팅하기보다는 전형적으로 비효율적이다.

상부-분무 유동층 코팅 방법으로 작고, 균일하게 코팅된, 실질적으로 별개의 효소-함유 과립의 개선된 제조 방법을 필요로 한다.

발명의 간단한 요약

하나의 양상에서, 본 발명은 효소-함유 과립의 집합체를 제공한다. 집합체에서 과립의 약 95 % 이상은 하나 이상의 무기염으로 이루어진 단일 코어를 함유하고, 상기 과립은 코어에 코팅되는 효소-함유 층을 함유한다. 일부 구현예에서, 과립의 적어도 약 50 %, 60 %, 70 %, 80 % 또는 90 % 는 약 150 내지 약 300 마이크론의 직경을 포함한다. 일부 구현예에서, 과립의 적어도 약 50 %, 60 %, 70 %, 80 % 또는 90 % 는 약 200 마이크론 내지 약 350 마이크론의 직경을 포함한다. 일부 구현예에서, 과립의 적어도 약 50 %, 60 %, 70 %, 80 % 또는 90 % 는 약 150 내지 약 355 마이크론의 직경을 포함한다.

하나의 구현예에서, 코어는 황산나트륨으로 이루어져 있다. 일부 구현예에서, 적어도 약 80 % 또는 90 % 의 코어는 약 150 내지 약 250 마이크론의 직경을 포함한다. 일부 구현예에서, 적어도 약 80 % 또는 90 % 의 코어는 약 200 내지 약 300 마이크론의 직경을 포함한다. 일부 구현예에서, 코어는 약 1.2 g/㎖ 초과 또는 1.4 g/㎖ 초과의 벌크 밀도를 포함한다.

일부 구현예에서, 효소-함유 층은 프로테아제, 셀룰라아제, 아밀라아제, 및 피타아제로부터 선택되는 효소를 함유한다. 일부 구현예에서, 효소-함유 층은 중합체, 당, 전분, 및 계면활성제 중 하나 이상을 추가로 함유한다.

일부 구현예에서, 과립은 효소-함유 층에 코팅되는, 차단염을 함유하는 층을 추가로 함유한다. 하나의 구현예에서, 차단염층은 황산나트륨을 함유한다. 일부 구현예에서, 차단염층은 2 종 이상의 염의 혼합물을 함유한다. 일부 구현예에서, 차단염층은 2 종 이상의 무기 술페이트 염의 혼합물을 함유한다. 하나의 구현예에서, 차단염층은 황산나트륨 및 황산마그네슘의 혼합물을 함유한다.

일부 구현예에서, 과립은 차단염층에 코팅되는, 중합체를 함유하는 외부 코팅층을 추가로 함유한다. 외부 코팅층은 중합체 이외에 임의로 추가의 안료를 함유한다. 하나의 구현예에서, 중합체는 폴리비닐 알코올이다.

일부 구현예에서, 과립은 차단염층에 코팅되는, 안료를 함유하는 외부 코팅층을 함유한다.

다른 양상에서, 본 발명은 상기 기재된 바와 같은 효소-함유 과립의 집합체를 함유하는 조성물을 제공한다. 일부 구현예에서, 조성물은 세제 조성물이다. 일부 구현예에서, 조성물은 직물 가공 조성물이다. 일부 구현예에서, 조성물은 동물 사료 조성물이다.

다른 양상에서, 본 발명은 유동층 분무 코팅기에서 코어에 효소-함유 층을 코팅하는 단계를 포함하는, 효소-함유 과립의 제조방법을 제공한다. 상기 방법에 의해 제조되는 과립의 약 95 % 이상은 하나 이상의 무기염으로 이루어진 단일 코어를 함유한다. 일부 구현예에서, 상기 방법에 의해 제조되는 과립의 적어도 약 50 %, 60 %, 70 %, 80 % 또는 90 % 는 약 150 내지 약 300 마이크론의 직경을 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 방법에 의해 제조되는 과립이 적어도 약 50 %, 60 %, 70 %, 80 % 또는 90 % 는 약 200 내지 약 350 마이크론의 직경을 포함한다. 일부 구현예에서, 과립의 적어도 약 50 %, 60 %, 70 %, 80 % 또는 90 % 는 약 150 내지 약 355 마이크론의 직경을 포함한다.

본 발명의 하나의 구현예에서, 코어는 황산나트륨으로 이루어져 있다. 일부 구현예에서, 과립의 적어도 약 80 % 또는 90 % 는 약 150 내지 약 250 마이크론의 직경을 포함한다. 일부 구현예에서, 과립의 적어도 약 80 % 또는 90 % 는 약 200 내지 약 300 마이크론의 직경을 포함한다. 일부 구현예에서, 코어는 약 1.2 g/㎖ 초과의 벌크 밀도를 포함한다. 일부 구현예에서, 코어는 약 1.2 g/㎖ 초과 또는 1.4 g/㎖ 초과의 벌크 밀도를 포함한다. 일부 구현예에서, 코어는 약 2.0 미만, 2.5 미만, 또는 3.0 미만의 입자 분포 지수에 미리 체질된다.

일부 구현예에서, 상기 방법은 효소-함유 층에 차단염을 함유하는 층을 코팅하는 단계를 추가로 포함하는데, 차단염층을 추가하기 이전에 유동층 분무 코팅기에서 과립을 제거하지 않는다. 하나의 구현예에서, 차단염층은 황산나트륨을 함유한다. 일부 구현예에서, 차단염층은 2 종 이상의 염의 혼합물을 함유한다. 일부 구현예에서, 차단염층은 2 종 이상의 무기 술페이트 염의 혼합물을 함유한다. 하나의 구현예에서, 차단염층은 황산나트륨과 황산마그네슘의 혼합물을 함유한다. 일부 구현예에서, 상기 방법은, 중합체를 함유하고, 임의로 추가적으로 안료를 함유하는 외부 코팅층을 차단염층에 코팅하는 단계를 추가로 포함하고, 외부 코팅층을 추가하기 이전에 유동층 분무 코팅기에서 과립을 제거되지 않는다. 하나의 구현예에서, 중합체가 폴리비닐 알코올이다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 안료를 함유하는 외부 코팅층을 차단염층에 코팅하는 단계를 추가로 포함하는데, 외부 코팅층을 추가하기 이전에 유동층 분무 코팅기에서 과립을 제거하지 않는다.

도 1 은 실시예 1-4 에 기재한 바와 같이 제조된 효소 과립에 대한 입자 크기 분포를 나타낸다.

상세한 설명

본 발명은 상부-분무 유동층 코팅 공정을 이용하는 작고, 균일하게 코팅된, 실질적으로 별개의 (즉 실질적으로 응집화 되지 않은) 효소-함유 과립의 개선된 제조 방법 및 상기 방법에 의해 제조된 효소-함유 과립을 제공한다.

본원에 기재된 바와 같은 효소-함유 과립은 세정 (예를 들어, 세제), 직물 공정, 식품 (예를 들어, 베이킹), 동물 사료, 및 연료 에탄올 제조와 같은 용도에 사용될 수 있다.

효소-함유 과립

본 발명은 소형 효소-함유 과립을 제공한다. 본 발명의 과립은 단일의, 별개의 코어 및 상기 코어에 코팅되는 효소-함유 층을 포함한다. 상기 코어는 하나 이상의 무기염으로 이루어져 있다. 하나의 구현예에서, 상기 코어는 황산나트륨으로 이루어져 있다. 본 발명의 효소 과립의 직경은 약 150 ㎛ 내지 약 300 ㎛, 약 150 ㎛ 내지 약 350 ㎛, 약 150 ㎛ 내지 약 355 ㎛, 약 180 ㎛ 내지 약 300 ㎛, 약 180 ㎛ 내지 약 350 ㎛, 약 210 ㎛ 내지 약 350 ㎛, 약 212 ㎛ 내지 약 355 ㎛, 또는 약 180 ㎛ 내지 약 355 ㎛ 이다. 다양한 구현예에서, 효소 과립의 직경은 약 150, 160, 170, 180, 190, 200, 또는 210 ㎛ 중 임의의 것 내지 약 250, 260, 270, 280, 290, 300, 310, 320, 330, 340, 350, 또는 355 ㎛ 중 임의의 것이다. 과립에서 염 코어의 직경은 약 100 ㎛ 내지 약 250 ㎛, 약 150 ㎛ 내지 약 250 ㎛, 또는 약 250 ㎛ 내지 약 300 ㎛ 이다. 본 발명의 효소-함유 과립은 유동층 분무 코팅기에서 제조된다.

효소층은 하나 이상의 효소를 함유한다. 효소층은 또한 중합체, 당, 전분, 및 계면활성제 중 하나 이상을 함유할 수 있다.

일부 구현예에서, 효소-함유 과립은 물 및 비활성화 물질을 효소로 이동하는 것을 격리 또는 지연시키고/시키거나 기계적 강도를 향상시키고 과립의 파쇄성을 감소시키기 위해, 효소층에 코팅되는 차단층을 포함한다. 차단층은 염 (예를 들어, 황산나트륨), 다당류 (예를 들어, 전분), 당 (예를 들어, 수크로오스), 또는 이들의 조합물을 함유한다.

일부 구현예에서, 효소-함유 과립은 외부 코팅층을 포함한다. 외부 코팅층은 효소층에 코팅될 수 있거나, 차단층에 코팅될 수 있다. 외부 코팅층은 과립의 마지막 사용에 따라 효소-함유 과립에 임의의 다수의 기능을 제공할 수 있다. 예를 들어, 외부 코팅은 표백에 의한 산화에 대한 저항성을 효소에 제공하고, 수성 매질에 과립을 투입할 때 바람직한 용해 속도를 유도하며, 효소의 저장 안정성을 향상시키기 위해 주위 수분에 대한 장벽을 제공하고/하거나 과립을 분쇄시키고 먼지를 형성하려는 경향을 감소시킬 수 있다. 외부 코팅층은 중합체, 예를 들어, 폴리비닐 알코올, 및/또는 안료를 함유할 수 있다.

일부 구현예에서, 효소-함유 과립은 약 50 중량% 내지 약 70 중량% 의 무기염 코어 (예를 들어, 황산나트륨), 약 1 중량% 내지 약 25 중량% 의 효소 고체층 (예를 들어, 효소, 및 수크로오스, 전분, 계면활성제 및 중합체 중 하나 이상), 약 10 중량% 내지 약 20 중량% 차단층 (예를 들어, 황산나트륨과 같은 염, 또는 황산나트륨 및 황산마그네슘의 혼합물과 같은 2 종 이상의 염의 혼합물) 및/또는 약 5 중량% 내지 약 10 중량% 의 외부 코팅층 (예를 들어, 중합체 및/또는 안료, 예컨대 폴리비닐 알코올, 이산화티탄, 및 계면활성제, 또는 폴리비닐 알코올 및 탈크를 함유하는 층) 을 함유한다. 일부 구현예에서, 과립은 과립의 약 0.5 중량% 내지 약 25 중량%, 예를 들어, 과립의 약 0.5, 1, 2, 5, 10, 15, 20, 또는 25 중량% 의 양으로 효소를 함유한다.

본 발명은 또한 집합체에서 과립의 적어도 약 95 %, 98 %, 또는 99 % 가 하나 이상의 무기염으로 이루어진 단독의 별개의 코어 및 상기 코어에 코팅되는 효소층을 함유하는 효소-함유 과립의 집합체를 제공한다. 본원에 기재된 바와 같은 과립의 집합체에서, 과립의 적어도 약 50 %, 60 %, 70 %, 80 %, 85 %, 90 %, 또는 95 % 는 약 150 ㎛ 내지 약 300 ㎛, 약 150 ㎛ 내지 약 350 ㎛, 약 150㎛ 내지 약 355㎛, 약 180 ㎛ 내지 약 300 ㎛, 약 180 ㎛ 내지 약 350 ㎛, 약 210 ㎛ 내지 약 350 ㎛, 약 212 ㎛ 내지 약 355 ㎛, 또는 약 180 ㎛ 내지 약 355 ㎛ 의 직경을 포함한다. 일부 구현예에서, 과립의 적어도 약 50 %, 60 %, 70 %, 80 %, 85 %, 90 %, 또는 95 % 는 임의의 약 150, 160, 170, 180, 190, 200, 또는 210 ㎛ 중 임의의 것 내지 임의의 약 250, 260, 270, 280, 290, 300, 310, 320, 330, 340, 350, 또는 355 ㎛ 중 임의의 것의 직경을 포함한다.

일부 구현예에서, 본원에 기재된 바와 같은 효소-함유 과립의 집합체는 입자 크기 분포 지수가 약 2.0 이하, 약 2.5 이하, 또는 약 3.0 이하이다. 본원에 사용되는 바와 같은 "입자 크기 분포 지수" ("PSDI") 는 표본에서 90^th 중량-평균 백분위수 (D90) 대 중량-평균 10^th 백분위수 (DlO) 의 입자 직경의 비를 지칭한다. 표본에서 입자의 10 중량% 는 D90 직경 초과이고, 표본에서 입자의 10 중량% 는 DlO 직경 미만이다.

일부 구현예에서, 본원에 기재된 바와 같은 과립의 집합체에 의해 발생되는 먼지 수준은 Heubach 시험으로 측정되어 약 50 ㎎/pad 미만, 40 ㎎/pad 미만, 30 ㎎/pad 미만, 20 ㎎/pad 미만, 10 ㎎/pad 미만, 또는 5 ㎎/pad 미만이다.

염 코어

본원에 기재된 바와 같은 효소-함유 과립의 코어는 하나 이상의 무기염으로 이루어져 있다. 일부 구현예에서, 코어는 황산나트륨, 시트르산 나트륨, 염화나트륨, 황산칼슘, 또는 이들의 조합물로 이루어져 있다. 하나의 구현예에서, 코어는 황산나트륨으로 이루어져 있다.

본원에 기재된 바와 같은 효소-함유 과립의 염 코어는 약 100 ㎛ 내지 약 250 ㎛, 약 150 ㎛ 내지 약 250 ㎛, 또는 약 250 ㎛ 내지 약 300 ㎛ 의 직경을 포함한다.

일부 구현예에서, 효소-함유 과립의 집합체 제조 이전에, 염 코어를 약 2.0 이하, 약 2.5 이하, 또는 약 3.0 이하의 입자 크기 분포 지수에서 미리 체질한다. 미리-체질하는 것은 종래 공지된 방법, 예를 들어 진동식 체진동기 또는 공기력 분급기를 사용하여 수행될 수 있다. 예를 들어, 코어를 250 ㎛ 체에 통과시키고, 150 ㎛ 초과의 체로부터 일부를 수집하며, 150 ㎛ 체를 통과한 미세분을 폐기하거나 재활용하는 통상의 체질로 미리 체질할 수 있다. 미리-체질하는 것은 또한 공기 흐름으로 미세분을 날려 버림으로써 유동층 코팅기에서 수행될 수 있다. 공기 흐름을 조절할 수 있어서 원하는 코어 크기를 유지할 것이다.

전형적으로, 염 코어는 약 1.0 g/㎖ 초과의 벌크 밀도를 포함한다. 일부 구현예에서, 벌크 밀도가 1.2 g/㎖ 초과이다. 일부 구현예에서, 벌크 밀도가 약 1.4 g/㎖ 초과이다. 일부 구현예에서, 벌크 밀도가 약 1.0, 1.2, 또는 1.4 g/㎖ 중 임의의 것 내지 약 1.6, 1.7 또는 1.8 g/㎖ 중 임의의 것이다. 벌크 밀도는 눈금 실린더에 입자의 기존의 부피를 충전시키고, 실린더에서 입자의 질량을 측정하고, 질량을 부피로 나누어 벌크 밀도를 계산하여 "유동 벌크 밀도" 또는 "비-압축 벌크 밀도" 로서 측정될 수 있다.

효소층

단일 효소 또는 2 종 이상의 효소의 조합물은 본원에 기재된 바와 같은 과립의 효소층에 포함될 수 있다. 일부 구현예에서, 효소층은 기질, 예를 들어 얼룩을 가수분해 할 수 있는 효소를 포함한다. 상기 효소는 전형적으로 가수분해효소, 예를 들어 프로테아제 (박테리아 {예를 들어, 서브틸리신) 또는 진균; 산, 중성 또는 알칼리), 아밀라아제 (알파 또는 베타), 리파아제, 또는 셀룰라아제이다. 일부 구현예에서, 효소는 예를 들어, 미국 특허 제 4,760,025 호, 유럽 특허 제 130 756 호 또는 PCT 출원 제 WO 91/06637 호에 기재된 바와 같은 서브틸리신이다. 일부 구현예에서, 효소는 셀룰라아제, 예를 들어, Danisco US, Inc., Genencor Division 사에서 시판되는 Multifect L250™ 또는 Puradax™ 이다. 일부 구현예에서, 효소층은 산화효소, 옥시제나아제, 전이효소, 탈수효소, 환원효소, 헤미셀룰라아제, 페록시다아제, 포스포리파아제, 에스테라아제, 큐티나아제, 펙티나아제, 케라티나아제, 리폭시제나아제, 리그니나아제, 풀루라나아제, 타나아제, 펜토사나아제, 말라나아제, β-글루카나아제, 아라비노시다아제, 히알루로니다아제, 콘드로이티나아제, 라카아제, 카탈라아제, 이성화효소, 펙테이트 리아제, 또는 만나나아제, 또는 이들의 조합물을 포함한다. 일부 구현예에서, 효소층은 피타아제를 포함한다. 일부 구현예에서, 효소층은 예를 들어, PCT 출원 제 WO 05/056782 호에 기재된 바와 같은 효소와 같은 퍼가수분해효소 (perhydrolase) 를 포함한다. 일부 구현예에서, 효소층은 Danisco US, Inc, Genencor Division 사의 상품명 Purafect™, Purastar™, Properase™, Puradax™, Clarase™, Multifect™, Maxacal™, Maxapem™, 및 Maxamyl™ (미국 특허 제 4,760,025 호 및 PCT 출원 제 WO 91/06637 호 참조); Novo Industries A/S (Denmark) 사의 Alcalase™, Savinase™, Primase™, Durazyme™, Duramyl™, Ovozyme™, Polarzyme™, 및 Termamyl™ 으로 시판되는 하나 이상의 효소를 포함한다.

효소층은 효소(들) 이외에 하나 이상의 다른 성분을 임의로 포함할 수 있다. 상기 비-효소 성분은 중합체 (예를 들어, 폴리비닐 알코올, 폴리에틸렌 글리콜), 당 (예를 들어, 수크로오스, 사카로오스, 글루코오스, 프럭토오스, 갈락토오스, 말토덱스트린), 전분 (예를 들어, 옥수수 전분, 밀 전분, 타피오카 전분, 감자 전분, 화학적 또는 물리적으로 개질된 전분), 덱스트린, 거품 억제제 (예를 들어, Foamblast 882 (Emerald Foam Control), Erol DF 204K (Ouvrie PMC), DG436 (ODG Industries, Inc.), KFO 880 (KABO Chemicals, Inc.) 와 같은 폴리에테르 폴리올), 당 알코올 (예를 들어, 소르비톨, 말티톨, 락티톨, 자일리톨), 계면활성제 (예를 들어, Neodol 23-6.5 (Shell Chemical LP, Houston, TX) 및 Lutensol TO65 (BASF) 와 같은 알코올 에톡실레이트), 및 재오염 방지제 (예를 들어, Repel-o-Tex SRP6 (Rhodia, Inc.), Texcare SRN-100 또는 SRN-170 (Clariant GmbH, Sorez-100(ISP Corp.) 와 같은 폴리에틸렌 글리콜 폴리에스테르) 을 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다.

"거품 억제제" 는 거품 형성을 방지하거나 거품을 파괴하는데 사용되는 화합물이다. 거품 억제제는 탈포기 또는 소포제로서 지칭될 수 있다. 이러한 화합물은 액체의 표면 탄성을 감소시키고 준안정 거품 형성을 방지하는 표면 활성 재료이다. 액체의 표면 탄성 및 표면 활성 재료 사이의 평형을 이루는 경향의 결과로서 거품이 파괴된다. (Vardar-Sukan (1991) Recent Adv . Biotechnol. 113-146) 본원에 기재된 과립에 유용한 거품 억제제는 일반적으로 생물학적 공정 (bioprocess) 에 사용하는데 적합하다. 적합한 거품 억제제는 지방, 오일, 왁스, 지방족 산 또는 에스테르, 알코올, 술페이트, 술포네이트, 지방산, 솝(soap), 질소 화합물, 인산염, 폴리글리콜, 술피드, 티오 화합물, 실록산 및 할로겐화 및 무기 화합물을 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다. (Ghildyal (1988) Adv . Appl Microbiol. (1988) 33:173-222). 일부 구현예에서, 오일, 지방산, 에스테르, 폴리글리콜 및 실록산이 유용하다. 일부 구현예에서, 거품 억제제는 에틸렌 옥시드 프로필렌 옥시드 공중합체이다. 하나의 구현예에서, 에틸렌 옥시드 프로필렌 옥시드 공중합체는 2200 의 대략적인 분자량을 갖는다 (예를 들어, Mazer Chemicals, Inc. 사의 Mazu™ 로서 입수가능).

차단층

일부 구현예에서, 차단층은 본원에 기재된 바와 같은 효소-함유 과립의 효소층에 코팅된다. 일부 구현예에서, 차단층은 하나 이상의 염, 예를 들어, 황산나트륨, 시트르산 나트륨, 황산마그네슘, 황산칼륨, 및/또는 황산암모늄을 함유한다. 일부 구현예에서, 차단층은 황산나트륨을 포함하거나, 황산나트륨으로 이루어져 있거나, 본질적으로 황산나트륨으로 이루어져 있다. 일부 구현예에서, 차단층은 황산나트륨 및 황산마그네슘의 혼합물을 포함하거나, 상기 혼합물로 이루어져 있거나, 본질적으로 상기 혼합물로 이루어져 있다. 일부 구현예에서, 차단층은 당 (예를 들어, 수크로오스), 다당류 (예를 들어, 전분), 또는 이들의 조합물을 함유한다.

일부 구현예에서, 차단층은 1가, 2가, 3가 수용성 무기 술페이트 염, 예를 들어, 나트륨, 칼륨, 암모늄, 마그네슘, 알루미늄, 철, 및/또는 철 술페이트 염(들) 또는 2 종 이상의 가용성 무기 술페이트 염의 혼합물을 함유한다.

일부 구현예에서, 차단층은 차단층의 총 중량에 대해 적어도 약 50 중량%, 60 중량%, 70 중량%, 80 중량% 또는 90 중량% 중 임의의 양으로 존재하는 하나의 염을 갖는 2 종의 염의 혼합물이다. 일부 구현예에서, 2 종의 염은 차단층의 중량에 대해 약 50:50, 55:45, 60:40, 65:35 또는 70:30 의 비로 존재한다. 하나의 구현예에서, 2 종의 염의 혼합물은 황산나트륨 및 황산마그네슘의 혼합물이다. 일부 구현예에서, 차단층은 차단층의 중량에 대해 약 30:70 내지 약 70:30, 예를 들어 30:70, 35:65, 40:60, 45:55, 50:50, 55:45, 60:40, 65:35, 또는 70:30 의 비로 황산나트륨 및 황산마그네슘으로 이루어져 있다.

일부 구현예에서, 차단층은 수화된다. 용어 "수화된" 은 차단성 물질이 유리된 또는 결합된 형태 또는 둘의 조합으로 물을 함유하는 것을 의미한다. 수화의 물은 코팅 공정 도중 또는 후에 첨가될 수 있다. 수화 정도는 물질 자체의 기능일 것이고, 온도, 습도 및 건조 조건하에 수화 정도가 적용된다.

"온건한 또는 높은" 수 활성은 적어도 약 0.25, 0.30, 0.35 의 수 활성을 갖는 것을 의미한다. 본원에서 지칭되는 수 활성은, 차단성 물질이 추가의 코팅 없이 과립에 코팅되었을 경우, 과립 자체의 수 활성이다. 추가의 코팅은 별개의 층으로서 차단성 물질의 수 활성의 정확한 측정을 방해한다.

이론에 제한됨이 없이, 0.25 초과의 수 활성을 가지는 물질은, 상대 습도가 25 % 초과인 저장 조건 하에 물을 흡수하는 감소된 동력을 가질 것이다. 대부분의 기후의 상대 습도는 25 % 초과이다. 많은 세제는 약 0.3 내지 0.4 범위의 수 활성을 갖는다. 과립의 수 활성이 주위 세제의 활성 또는 저장 기후보다 실제적으로 높을 경우, 과립에 의해 물을 흡수하는 동력이 제거되어야 하는데, 실제로 물은 과립에서 주위로 배출될 수 있을 것이다. 과립의 수 활성이 세제의 수 활성 또는 상응하는 상대 습도보다 낮더라도, 차단층에 존재하는 물은 과립에 의해 흡수되고 단백질 코어에 영향을 미치는 물의 양을 제한하는 방책으로 작용한다.

염 수화물의 경우에서, 수화된 물질은 갇힌 결정수를 함유하는 결정질 염 수화물이다. 수화물은 생성되는 코팅된 과립이 0.25 초과, 또는 가능한 높은 수 활성을 가지면서 여전히 만질 수 있도록 건조한 과립을 유지할 정도의 방식으로 선별 및 적용되어야 한다. 염 수화물, 또는 임의의 다른 적합한 수화된 차단성 물질을 상기 방식으로 적용함으로써, 과립에 의한 물의 추가 흡수를 위한 임의의 동력이 제거된다. 중요한 결과로서, 퍼보레이트 또는 과산화수소 음이온과 같은 효소 활성에 악영향을 끼칠 수 있는 물질의 이동을 위한 동력이 제거된다. 비히클로서 물 없이, 상기 물질은 효소 코어에 침투하기가 용이하지 않다. 실증적인 데이타는 안정한 염 수화물로 효소 코어를 코팅함으로써 과립의 효소 활성이 실질적으로 증대됨을 증명한다.

수화된 차단층의 생성을 위한 적합한 염의 예는 황산마그네슘 7수화물, 황산아연 7수화물, 황산구리 5수화물, 인산수소이나트륨 7수화물, 질산마그네슘 6수화물, 붕산나트륨 10수화물, 시트르산 나트륨 2수화물 및 아세트산마그네슘 4수화물을 포함한다.

외부 코팅층

일부 구현예에서, 효소 함유 과립은 외부 코팅층을 포함한다. 하나의 구현예에서, 외부 코팅층은 효소층에 코팅된다. 다른 구현예에서, 외부 코팅층은, 효소층에 코팅되는 차단층에 코팅된다.

일부 구현예에서, 외부 코팅층은 하나 이상의 중합체를 포함한다. 적합한 중합체는 폴리비닐 알코올 (PVA), 폴리비닐 피롤리돈 (PVP), 폴리비닐 아세테이트, PVA-메틸메타크릴레이트 공중합체, PVP-PVA 공중합체, 셀룰로오스 유도체, 예컨대 메틸셀룰로오스, 히드록시프로필메틸 셀룰로오스, 히드록시셀룰로오스, 에틸셀룰로오스, 카르복시메틸 셀룰로오스, 히드록시프로필 셀룰로오스, 폴리에틸렌 글리콜, 폴리에틸렌 옥시드, 키토산, 아라비아 고무, 크산탄, 카라기난, 라텍스 중합체, 및 장용성 중합체를 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다.

일부 구현예에서, 외부 코팅층은 PVA 를 포함한다. 외부 코팅층의 혼입에 적합한 PVA 는 저정도 내지 고정도의 점도를 갖는 부분적으로, 전체적으로 및 중간적으로 가수분해된 PVA 를 포함한다. (예를 들어, 미국 특허 제 5,324,649 호 참조) 하나의 구현예에서, 외부 코팅층은 저점도를 갖는 부분적으로 가수분해된 PVA 를 포함한다.

일부 구현예에서, 외부 코팅층은 하나 이상의 안료를 포함한다. 적합한 안료의 비제한적인 예는 미분 화이트너, 예컨대 이산화티탄, 탄산칼슘, 황산칼슘, 탈크 또는 착색된 안료 또는 염료를 포함한다. 전형적으로, 안료는 용해시 저잔류 안료이다. 중합체 및/또는 안료 이외에, 외부 코팅층은 가소제, 증량제, 윤활제, 계면활성제, 및 재오염 방지제 중에서 하나 이상을 또한 포함할 수 있다.

적합한 가소제는 폴리올 (예를 들어, 당, 당 알코올, 폴리에틸렌 글리콜 (PEG), 글리콜, 프로필렌 글리콜), 우레아, 트리에틸 시트레이트, 디부틸 또는 디메틸 프탈레이트 또는 물을 포함하나 이에 한정되지 않는다.

적합한 증량제는 당 (예를 들어, 수크로오스 또는 전분 가수분해물, 예컨대 말토덱스트린 또는 옥수수 시럽 고체), 점토 (예를 들어, 카올린 또는 벤토나이트), 및 탈크를 포함하나 이에 한정되지 않는다. "증량제" 는 개질하거나 희석하기 위해 다른 물질에 첨가되는 물질 (일반적으로 저비용) 이다.

적합한 윤활제는 비이온성 계면활성제 (예를 들어, Neodol, Lutensol TO 65), 우지 알코올, 지방산, 지방산 염 (예를 들어, 마그네슘 스테아레이트), 및 지방산 에스테르를 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다.

적합한 계면활성제는 Neodol 23-6.5 및 Lutensol TO65 와 같은 알코올 에톡실레이트를 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다.

적합한 재오염 방지제는 Repel-o-Tex SRP6, Texcare SRN-100 또는 SRN-170, 및 Sorex-100 과 같은 폴리에틸렌 글리콜 폴리에스테르를 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다.

효소 과립의 제조방법

본 발명은 코팅의 고효율 및 최소 응집화를 갖는 상기 기재된 바와 같은 효소-함유 과립의 제조 방법을 제공한다. 상기 방법은 유동층 분무 코팅기에서 무기염 코어에 효소-함유층을 코팅하는 단계를 포함한다. 임의로, 상기 방법은 또한 유동층 분무 코팅기에서 효소-함유층에 차단층을 코팅하는 단계, 효소-함유 층에 외부 코팅층을 코팅하는 단계 또는 효소-함유 층에 차단층 및 차단층에 외부 코팅층을 코팅하는 단계를 포함한다. 본원에 기재된 바와 같은 방법에 따라 제조된 효소-함유 과립의 적어도 약 95 %, 98 %, 또는 99 % 는 단일, 개별의 코어 (즉 응집화되지 않고, 과립 대 코어의 비가 1 : 1 임) 를 함유한다. 하나의 구현예에서, 무기염 코어는 황산나트륨으로 이루어져 있다.

본 발명의 방법에서, 염 코어의 입자 크기 분포, 모양 및 밀도가 작고, 실질적으로 개별의 코팅된 과립이 제조되도록 제어된다. 일부 구현예에서, 이는 유동층 분무 코팅기에 투입 이전에 약 2.0 이하, 약 2.5 이하, 또는 약 3.0 이하의 PSDI 로 초기 첨가량의 코어를 미리 체질하거나 미리 선택함으로써 달성된다. 염 코어는 약 1.0 g/㎖ 초과, 1.2 g/㎖ 초과, 또는 1.4 g/㎖ 초과의 벌크 밀도를 포함하고, 그 결과 낮은 벌크 밀도를 포함하는 염 코어보다 상부-분무 코팅기에서 더욱 제어된 유동화 및 코팅 효율성을 초래한다. 이러한 염 코어의 벌크 밀도 및 제어된 크기 분포의 인자는 물리적 정화의 최소화 (필터, 스크러버, 또는 출구 공기 스트림에서 입자의 손실) 를 제외하고는 (응집화를 막기 위해서) 층의 충분한 팽창을 갖는 제어된 유동화 패턴을 야기한다. 일부 구현예에서, 유동층 코팅기의 공기 흐름, 분무 속도, 층 온도 및/또는 원자화 공기 압력이 조절되어 실질적으로 응집화를 방지한다.

효소-함유 과립은 연속 또는 비연속 공정으로 제조될 수 있다. 연속 공정에서, 효소층 및 차단층 및/또는 외부 코팅층은 분무 코팅기로부터의 과립의 제거 없이 염에 코팅된다. 비연속 공정에서, 차단층 및/또는 외부 코팅층의 첨가 이전에 과립은 분무 코팅기로부터 제거되고, 분무 코팅기에 재투입된다.

본원에 기재된 바와 같은 연속 공정은, 코팅 단계 전에 효소 입자의 분리 제조, 또는 후속 작업에서 추가의 코팅층의 첨가를 위해 코팅기로부터의 미완성된 생성물의 제거를 필요로 하지 않는 유동층 코팅기의 효율적인 단일 작업 내에서 개별의 소형 효소 과립이 제조되도록 하는 장점을 갖는다. 작업 간에 코팅되지 않은 효소 코어를 이동시킬 필요성을 제거함으로써, 상기 단독 공정은 미작동 시간 및 이동 손실을 제거하고, 위험한 수준의 부유 효소 먼지 및 에어로졸에 대한 가공 공장에서 작업자의 노출을 최소화시킨다.

본원에 기재된 바와 같은 방법으로 제조된 과립의 적어도 약 50 %, 60 %, 70 %, 80 %, 85 %, 90 %, 또는 95 % 는 약 150 ㎛ 내지 약 300 ㎛, 약 150 ㎛ 내지 약 350 ㎛, 약 150 ㎛ 내지 약 355 ㎛, 약 180 ㎛ 내지 약 300 ㎛, 약 180 ㎛ 내지 약 350 ㎛, 약 210 ㎛ 내지 약 350 ㎛, 약 212 ㎛ 내지 약 355 ㎛, 또는 약 180 ㎛ 내지 약 355 ㎛ 의 직경을 포함한다. 일부 구현예에서, 과립의 적어도 약 50 %, 60 %, 70 %, 80 %, 85 %, 90 %, 또는 95 % 는 약 150, 160, 170, 180, 190, 200, 또는 210 ㎛ 중 임의의 것 내지 약 250, 260, 270, 280, 290, 300, 310, 320, 330, 340, 350, 또는 355 ㎛ 중 임의의 것을 갖는다.

일부 구현예에서, 본원에 기재된 바와 같은 방법으로 제조되는 효소-함유 과립의 집합체는 약 2.0 이하, 약 2.5 이하, 또는 약 3.0 이하의 입자 크기 분포 지수를 갖는다.

조성물

본 발명은 상기 기재한 바와 같은 효소-함유 과립을 함유하는 조성물을 제공한다. 효소-함유 과립 이외에, 조성물은 특정 용도, 예컨대 세정 (예를 들어, 세제), 직물 또는 동물 사료에 과립을 사용하는데 적합한 성분을 함유한다.

세정 조성물

일부 구현예에서, 본원에 기재된 바와 같은 효소-함유 과립은 세정 성능 및/또는 세정 효과를 제공하기 위해 예를 들어 세탁 또는 설거지 용도를 위한 세제와 같은 세정 조성물에 혼입된다. 세정 조성물에 포함되는 적합한 효소는 헤미셀룰라아제, 페록시다아제, 프로테아제, 셀룰라아제, 자일라나아제, 리파아제, 포스포리파아제, 에스테라아제, 큐티나아제, 펙티나아제, 케라티나아제, 환원효소, 산화효소, 페놀산화효소, 리폭시제나아제, 리그니나아제, 풀루라나아제, 타나아제, 펜토사나아제, 말라나아제, β-글루카나아제, 아라비노시다아제, 히알루로니다아제, 콘드로이티나아제, 라카아제, 퍼가수분해효소, 및 아밀라아제, 또는 이들의 혼합물을 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다. 전형적인 조합물은 프로테아제, 리파아제, 큐티나아제 및/또는 셀룰라아제와 같은 통상적인 적용가능한 효소와 아밀라아제의 혼합제이다.

부가 물질이 예를 들어, 세정되고자 하는 기질의 처리를 위한 세정 성능을 돕거나 향상시키기 위해, 또는 향, 착색제, 염료 등을 이용하는 경우와 같이 세정 조성물의 미적 특질을 개질하기 위해 세정 조성물에 포함될 수 있다. 상기 부가물은 본원에 기재된 바와 같은 효소-함유 과립에 첨가되는 것으로 이해된다. 이러한 추가 성분의 정확한 성질 및 이의 혼입 정도는 조성물의 물리적 형태 및 사용되고자 하는 세정 작업 성질에 따라 다를 것이다. 적합한 부가 물질은 계면활성제, 결합제, 킬레이트화제, 염료 이동 저해제, 침전 보조제, 분산제, 효소 안정화제, 촉매 물질, 표백 활성제, 표백 촉진제, 미리성형된 과산제 (preformed peracid), 중합체 분산제, 점토 오염 제거제/재오염 방지제, 광택제, 비누거품 억제제, 염료, 향, 구조 탄성화제 (elasticizing agent), 섬유 유연제, 담체, 하이드로트로프(hydrotrope), 가공 보조제 및/또는 안료를 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다. 하기 개시된 것 이외에, 다른 부가물의 적합한 예 및 사용 수준은 미국 특허 제 5,576,282 호, 제 6,306,812 호, 및 제 6,326,348 호에 기재되어 있다.

계면활성제 - 본원에 기재된 바와 같은 세정 조성물은 계면활성제 또는 계면활성제계를 포함할 수 있으며, 상기 계면활성제는 비이온성 계면활성제, 음이온성 계면활성제, 양이온성 계면활성제, 양쪽성 계면활성제, 쯔비터이온성 계면활성제, 반-극성 비이온성 계면활성제 및 이들의 혼합물에서 선택될 수 있다. 상기 계면활성제는 전형적으로는 대상 세정 조성물의 약 0.1 중량% 내지 약 60 중량%, 약 1 중량% 내지 약 50 중량% 또는 약 5 중량% 내지 약 40 중량% 수준으로 존재한다.

결합제 - 본원에 기재된 바와 같은 세정 조성물은 하나 이상의 세제 결합제 또는 결합제계를 포함할 수 있다. 결합제가 사용될 때, 대상 세정 조성물은 전형적으로 대상 세정 조성물의 중량에 대해 적어도 약 1 %, 약 3 % 내지 약 60 %, 또는 약 5 % 내지 약 40 % 의 결합제를 포함할 것이다.

결합제는 알칼리 금속, 암모늄 및 폴리포스페이트, 알칼리 금속 실리케이트, 알칼리 토금속 및 알칼리 금속 카르보네이트의 알칸올암모늄 염, 알루미노실리케이트 결합제, 폴리카르복실레이트 화합물, 에테르 히드록시폴리카르복실레이트, 말레산 무수물과 에틸렌 또는 비닐 메틸 에테르의 공중합체, 1,3,5-트리히드록시 벤젠-2,4,6-트리술폰산, 및 카르복시메틸옥시숙신산, 각종 알칼리 금속, 암모늄 및 폴리아세트산의 치환된 암모늄 염, 예컨대 에틸렌디아민 테트라아세트산 및 니트릴로트리아세트산 뿐만 아니라, 폴리카르복실레이트, 예컨대 멜리트산, 숙신산, 시트르산, 옥시디숙신산, 폴리말레산, 벤젠 1,3,5-트리카르복실산, 카르복시메틸옥시숙신산, 및 이의 가용성 염을 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다.

킬레이트화제 - 본원에 기재된 바와 같은 세정 조성물은 하나 이상의 킬레이트화제를 함유할 수 있다. 적합한 킬레이트화제는 구리, 철 및/또는 망간 킬레이트화제 및 이들의 혼합물을 포함하나 이에 한정되지 않는다. 킬레이트화제가 사용되는 경우, 세정 조성물은 대상 세정 조성물의 약 0.1 중량% 내지 약 15 중량% 또는 약 3.0 중량% 내지 약 10 중량% 의 킬레이트화제를 포함할 수 있다.

침전 보조제 - 본원에 기재된 바와 같은 세정 조성물은 하나 이상의 침전 보조제를 함유할 수 있다. 적합한 침전 보조제는 폴리에틸렌 글리콜, 폴리프로필렌 글리콜, 폴리카르복실레이트, 폴리텔레프탈산과 같은 방오성 중합체, 카올리나이트, 몬모릴로나이트, 애타풀자이트, 일라이트, 벤토나이트, 할로이사이트 및 이들의 혼합물의 점토를 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다.

염료 이동 저해제 - 본원에 기재된 바와 같은 세정 조성물은 하나 이상의 염료 이동 저해제를 포함할 수 있다. 적합한 중합체성 염료 이동 저해제는폴리비닐피롤리돈 중합체, 폴리아민 N-옥시드 중합체, N-비닐피롤리돈 및 N-비닐이미다졸의 공중합체, 폴리비닐옥사졸리돈 및 폴리비닐이미다졸 또는 이들의 혼합물을 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다. 염료 이동 저해제가 대상 세정 조성물에 존재하는 경우, 세정 조성물의 약 0.0001 중량% 내지 약 10 중량%, 약 0.01 중량% 내지 약 5 중량% 또는 약 0.1 중량% 내지 약 3 중량% 수준으로 존재할 수 있다.

분산제 - 본원에 기재된 바와 같은 세정 조성물은 또한 하나 이상의 분산제를 함유할 수 있다. 적합한 수용성 유기 분산제는 단일- 또는 공-중합체성 산 또는 이들의 염을 포함하나 이에 한정되지 않고, 여기서 폴리카르복실산은 2 개 이하의 탄소 원자만큼 서로 떨어져 있는 2 개 이상의 카르복실 라디칼을 포함한다.

효소 안정화제 - 세제에 사용하기 위한 효소는 다양한 기술에 의해 안정화될 수 있다. 본원에 이용되는 효소는, 효소에 칼슘 및/또는 마그네슘 이온을 제공하는 최종 조성물 중에 존재하는 상기 이온의 수용성 공급원에 의해 안정화될 수 있다.

촉매 금속 착물 - 본원에 기재된 바와 같은 세정 조성물은 하나 이상의 촉매 금속 착물을 포함할 수 있다. 금속-함유 표백 촉매의 한 가지 유형은 정의된 표백 촉매 활성의 전이 금속 양이온, 예컨대 구리, 철, 티탄, 루테늄, 텅스텐, 몰리브덴, 또는 망간 양이온, 표백 촉매 활성이 거의 없거나 없는 보조 금속 양이온, 예컨대 아연 또는 알루미늄 양이온, 및 상기 촉매 및 보조 금속 양이온에 대하여 정의된 안정도 상수를 가지는 기질, 특히 에틸렌디아민테트라아세트산, 에틸렌디아민테트라 (메틸렌포스폰산) 및 이들의 수용성 염을 포함하는 촉매계이다. 이러한 촉매는 미국 특허 제 4,430,243 호에 기술되어 있다. 본원에 유용한 망간-함유 촉매가 공지되어 있고, 예를 들어, 미국 특허 제 5,576,282 호에 기재되어 있다. 본원에서 유용한 코발트 표백 촉매는 공지되어 있고, 예를 들어, 미국 특허 제 5,597,936 호 및 제 5,595,967 호에 기재되어 있다. 이러한 코발트 촉매는 예를 들어 미국 특허 제 5,597,936 호 및 제 5,595,967 호에 교시된 바와 같이 공지된 절차들로 용이하게 제조된다.

본원에서 조성물들은 또한 거대 폴리시클릭 (macropolycyclic) 강성 리간드 ("MRL" 로 약기함) 의 전이 금속 착물을 포함할 수 있다. 실제적인 문제로서 및 비제한적으로, 본원의 조성물 및 세정 방법은 수성 세척 매질 중에 약 1 pphm (part per hundred million, 일억분의 1) 이상의 활성 MRL 화학종을 제공하도록 조절될 수 있으며, 상기 세척액 중에 약 0.005 ppm 내지 약 25 ppm, 약 0.05 ppm 내지 약 10 ppm, 또는 약 0.1 ppm 내지 약 5 ppm 의 MRL 을 제공할 것이다. 본 전이-금속 표백 촉매 중의 적합한 전이-금속은, 망간, 철 및 크롬을 포함한다. 일 구현예에서, MRL 은 5,12-디에틸-1,5,8,12-테트라아자비시클로[6.6.2]헥사데칸과 같은 가교된 초-강성 리간드이다. 적합한 전이 금속 MRL 은 예를 들어 PCT 출원 제 WO 00/332601 호 및 미국 특허 제 6,225,464 호에 교시된 바와 같이 공지된 절차들에 의해 용이하게 제조된다.

본원에 개시된 세정 조성물은 표면 또는 섬유 위의 부위를 세정하는데 사용될 수 있다. 전형적으로 상기 부위 중 일부 이상을, 순 형태로 또는 세척액 중 희석시켜 상기 기재된 바와 같은 세정 조성물과 접촉시키고, 그 후 상기 부위를 임의로는 세척 및/또는 헹군다. 세척은 스크러빙 (scrubbing) 및 기계적 교반을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 상기 섬유는 보통의 소비자 사용 조건에서 세탁될 수 있는 대부분의 임의의 섬유를 포함할 수 있다. 상기 개시된 세정 조성물은 전형적으로 용액 중 약 500 ppm 내지 약 15,000 ppm 의 농도로 이용된다. 세척 용매가 물인 경우, 수온은 전형적으로 약 5℃ 내지 약 90℃ 범위이고, 상기 부위가 섬유를 포함하는 경우, 물 대 섬유 질량비는 전형적으로 약 1:1 내지 약 30:1 이다.

직물 가공 조성물

일부 구현예에서, 본원에 기재된 바와 같은 효소-함유 과립은 직물 가공 조성물에 혼입된다. 직물 가공 조성물에 혼입되기에 적합한 효소는 셀룰라아제, 퍼가수분해효소, 폴리에스테라아제, 아밀라아제, 페놀 산화효소 (예를 들어, 라카아제), 및 카탈라아제를 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다. 일부 구현예에서, 직물 가공 조성물은 또한 재오염 방지제 (예를 들어, Repel-O-Tex, Sorez 100 (ISP Corp.)) 를 포함할 수 있다.

동물 사료 조성물

일부 구현예에서, 본원에 기재된 바와 같은 효소-함유 과립은 동물 사료 조성물에 혼입된다. 사료 조성물에 혼입되기에 적합한 효소는 셀룰로오스 가수분해 및/또는 헤미셀룰로오스 가수분해 효소를 포함한다. 사료 조성물에 혼입되기에 적합한 효소의 비제한적인 예는 피타아제, 자일라나아제, 포스파타아제, 프로테아제, 아밀라아제, 에스테라아제, 환원효소, 리파아제, 전이효소, 셀룰라아제, 포스포리파아제, 리그니나아제, 및 β-글루카나아제를 포함한다.

하기 실시예는 본 발명을 설명하기 위한 것으로 의도되나 이에 한정되지 않는다.

실시예

실시예 1

입자 직경 크기 범위가 150 ㎛ 내지 250 ㎛ 인 황산나트륨 결정 2296 g 을 Vector FL-1 유동층 코팅기에 적재하고, 유동화하였다. 23,608 g/㎖ 의 활성 중성 셀룰라아제, 3.6 % Sorez-100 (ISP Corp. 사) (재오염 방지제), 및 0.36 % 폴리비닐 알코올 (Erkol 사의 5/88) 를 함유하는 용액 5557 g 을 황산나트륨 결정에 분무 코팅하였다.

분무 코팅 변수는 하기와 같았다:

용액 분무 속도 6.5 gpm (분당 그램), 2.5 시간에 걸쳐 15.4 gpm

으로 증가

나머지 실험을 위해 15.4 gpm 으로 유지함

주입구 온도 85℃, 1 시간 후 9O℃ 로 증가

배출구 온도 42℃ 내지 46℃

유동화 공기 흐름 50 cfm (분 당 입방 피트)

원자화 공기 압력 평방 인치 당 40 파운드 (psi), 2.5 시간에 걸쳐

50 psi 로 증가.

생성물 3017 g 을 수득하였고, 이중 2899 g 을 40 메쉬 체 (425 ㎛) 에 통과시켰다. 입자 크기 분포를 표 1 및 도 1 에 나타내었다.

실시예 1 에서 제조한 효소 과립의 입자 크기 분석

입자 크기(㎛)	입자량 (%)
425 초과	3.8
354-425	1.1
297-354	2.6
210-297	59.0
149-210	34.5
149 미만	0.4

실시예 2

실시예 1 에서 제조한 효소 과립 1395 g 을 Vector FL-1 유동층 코팅기에 적재하고, 유동화하였다. 황산나트륨 172 g 을 함유한 수용액 861 g 을 효소 과립에 분무 코팅하였다.

분무 코팅 변수는 하기와 같았다:

용액 분무 속도 14.9 gpm

주입구 온도 90℃

배출구 온도 42℃ 내지 46℃

유동화 공기 흐름 53 cfm

원자화 공기 압력 40 psi

최종 생성물 1483 g 을 수득하였다. 입자 크기 분포를 표 2 및 도 1 에 나타내었다.

실시예 2 에서 제조한 효소 과립에 대한 입자 크기 분석

입자 크기(㎛)	입자량 (%)
425 초과	3.8
354-425	0.0
297-354	0.3
210-297	67.1
149-210	28.7
149 미만	0.1

실시예 3

실시예 2 에서 제조한 효소 과립 1395 g 을 Vector FL-1 유동층 코팅기에 적재하고, 유동화하였다. PVA (Erkol 5/88) 52 g, 탈크 (Nytal 400) 112 g, 및 Neodol 23/6.5 8.6 g 을 함유하는 수용액 861 g 을 효소 과립에 분무 코팅하였다.

분무 코팅 변수는 하기와 같았다:

용액 분무 속도 10.8 gpm

주입구 온도 95℃

배출구 온도 49℃ 내지 5O℃

유동화 공기 흐름 50 cfm

원자화 공기 압력 46 psi

최종 생성물 1477 g 을 수득하였다. 입자 크기 분포를 표 3 및 도 1 에 나타내었다.

실시예 3 에서 제조한 효소 과립에 대한 입자 크기 분석

입자 크기(㎛)	입자량 (%)
425 초과	9.2
354-425	8.6
297-354	7.4
210-297	64.5
149-210	10.4
149 미만	0.0

실시예 4

체질되지 않은 황산나트륨 결정 (Urumqi Huagao Trade Co., Ltd. 사, Urumqi City, China ("Hanhua Grade C")) 2820 g 을 Vector FL-1 유동층 코팅기에 적재하고, 공기 체질하였다, 즉 30 분 동안 유동화하였다. 체질되지 않은 Hanhua Grade C 황산나트륨 결정은 입자 크기 분포가 하기와 같았다:

스크린 (㎛) 최대% 최소%

355 0 0

280 0 0

250 25 5

200 43 22

150 89 80

유동화 후, 2660 g 의 황산나트륨 결정이 남았다.

공기 체질된 황산나트륨 결정 2287 g 을 Vector GL-1 유동층 코팅기에 적재하고, 유동화하였다. 23,608 g/㎖ 의 활성 중성 셀룰라아제, 3.6 % Sorez-100 (ISP Corp.) 및 0.36 % 폴리비닐 알코올 (Erkol 사의 5/88) 을 함유하는 용액 5670 g 을 황산나트륨 결정에 분무 코팅하였다.

분무 코팅 변수는 하기와 같았다:

술페이트 결정의 공기 체질

주입구 온도 85℃

유동화 공기 흐름 52 cfm

원자화 공기 압력 20 psi

효소 용액 분무 코팅

용액 분무 속도 7.2 gpm, 2.5 시간에 걸쳐 15.5 gpm 으로 증가

나머지 실험을 위해 15.5 gpm 에서 유지함

주입구 온도 85℃.

배출구 온도 39℃ 내지 48℃

유동화 공기 흐름 50 cfm

원자화 공기 압력 40 psi

생성물 3057 g 을 수득하였고, 이중 2952 g 을 40 메쉬 체에 통과시켰다.

입자 크기 분포를 표 4 및 도 1 에 나타내었다.

실시예 4 에서 제조한 효소 과립에 대한 입자 크기 분석

입자 크기(㎛)	입자량 (%)
425 초과	3.4
354-425	1.2
297-354	2.5
210-297	76.4
149-210	16.4
149 미만	0.1

실시예 5

크기 범위가 150 ㎛ 내지 250 ㎛ 인 황산나트륨 결정 (Hanhua Grade C, 실시예 4 에 기재한 입자 크기 분포) 149 ㎏ 을, 부피가 대략 93 ℓ 인 용기 및 3 개의 분무 노즐이 장착된 파일롯 (pilot) 유동층 코팅기에 적재하고 유동화 하였다. EG3 셀룰라아제 (216 U/g), 수크로오스 (2.6 ㎏) 및 밀 전분 (2.6 ㎏) 의 혼합물 66 ㎏ 을 황산나트륨 결정에 분무 코팅하였다. 120 ㎏ 의 황산나트륨 용액 (수중 25 %) 을 층을 함유하는 효소에 분무하였다.

분무 코팅 변수는 하기와 같았다:

워밍업 단계:

주입구 공기 온도 70 ℃

유동화 공기 흐름 1175 N㎥/h (시간 당 공기의 정규 또는 정상 ㎥)

원자화 공기 압력 5.5 bar

효소 용액 분무 코팅:

용액 분무 속도 20 분 동안 18.0 ℓ/h, 그 후 110 분에 걸쳐

33.0 ℓ/h 로 증가

나머지 실험을 위해 33.0 ℓ/h 에 유지함

층 온도 5O ℃

유동화 공기 흐름 1300 N㎥/h, 그 후 75 분에 걸쳐 1325 N㎥/h 로

증가

원자화 공기 압력 5.5 bar

술페이트 용액 분무 코팅:

용액 분무 속도 36 ℓ/h, 그 후 35 분에 걸쳐 51 ℓ/h 로 증가

나머지 실험을 위해 51 ℓ/h 에 유지함

층 온도 52 ℃

유동화 공기 흐름 1325 N㎥/h, 그 후 60 분에 걸쳐

1375 N㎥/h 로 증가

원자화 공기 압력 4.0 bar

과립 145 ㎏ 을 수득하였고, 이중 94 % 는 300 ㎛ 보다 작았고, 59 % 가 250 ㎛ 보다 작았다. 입자 크기 분포를 표 5 에 나타내었다.

실시예 5 에서 제조한 효소 과립에 대한 입자 크기 분석

입자 크기(㎛)	입자량 (%)
355 초과	1.1
300-355	4.9
250-300	34
212-250	51
180-212	9.2
150 미만	0

실시예 6

크기 범위가 150 ㎛ 내지 250 ㎛ 인 황산나트륨 결정 (Hanhua Grade C, 실시예 4 에 기재한 입자 크기 분포) 3156 ㎏ 을 5.6 ㎥ 용기가 장착된 상부 분무 유동층 코팅기에 적재하고 유동화하였다. 중성 셀룰라아제 (19062 U/g), 폴리비닐 알코올 (Celvol E 5/88, Celanese 사; 수중 10 % 용액 204 ㎏) 및 Repel-o-Tex (폴리에틸렌 글리콜 및 폴리에스테르의 블록 공중합체, Rhodia 사; 수중 현탄액 21 % 670 ㎏) 의 혼합물 8681 ㎏ 을 황산나트륨 결정에 분무 코팅하였다. 1462 ㎏ 의 황산나트륨 용액 (수중 25 %) 을 층을 함유하는 효소에 분무하였다.

분무 코팅 변수는 하기와 같았다:

워밍업 단계:

주입구 공기 온도 80 ℃

유동화 공기 흐름 23000 N㎥/h

원자화 공기 압력 5.0 bar

효소 용액 분무 코팅:

용액 분무 속도 20 분 동안 420 ℓ/h, 그 후 2 시간에 걸쳐

910 ℓ/h 로 증가.

나머지 실험을 위해 910 ℓ/h 에 유지함

층 온도 45-48 ℃

유동화 공기 흐름 23000 N㎥/h

원자화 공기 압력 5.0 bar

술페이트 용액 분무 코팅:

용액 분무 속도 5 분 동안 896 ℓ/h, 그 후 25 분에 걸쳐

1120 ℓ/h 로 증가.

나머지 실험을 위해 1120 ℓ/h 에 유지함

층 온도 45 ℃

유동화 공기 흐름 23000 N㎥/h

원자화 공기 압력 3.5 bar

과립 2950 ㎏ 을 355 ㎛ 체에 통과시켜 수득하였다. 355 ㎛ 보다 작은 직경을 포함하는 최종 생성물은 입자의 88 % 가 300 ㎛ 보다 작고, 1.0 % 가 212 ㎛ 보다 작으며, 0.02 % 가 180 ㎛ 보다 작고, 어느 것도 150 ㎛ 미만은 없다. 평균 입자 크기는 276 ㎛ 였다.

실시예 7

실험실 규모에서 제조된 작은 중성 셀룰라아제 기재 과립

1. 효소 과립의 제조 ("효소 코팅된 코어")

5,008 g 의 Indiage XL 중성 셀룰라아제 농축물을, 19.7 % 의 농도로 60℃ 에서 물에 미리 용해시킨 Repel-O-Tex SRP6 953 g, 13.5 % 의 농도로 80℃ 에서 물에 미리 용해시킨 PVA (Erkomat) 139 g 과 혼합하였다. 상기 효소/중합체 혼합물을, 하기 코팅 변수를 사용하여 Vector FL-1 유동층 코팅기에서 크기 범위가 150 ㎛ 내지 250 ㎛ 인 Hanhua Grade C 황산나트륨 종자 2,286 g 에 분무하였다:

종자 첨가량 (Seed Charge) 2286 g

효소 공급 속도 9 - 17 g/분

원자화 압력 40 - 46 psi

주입구 온도 80 - 95℃

배출구 온도 40 - 43℃

공기 흐름 50 - 53 cfm

효소로 황산나트륨 종자를 코팅 한 후, 효소 코팅된 코어를 코팅기에서 제거하고, 칭량하여 전체 효소 질량 수율을 결정하였다. 또한 425 마이크론 체에 통과시켜 425 마이크론 미만의 과립의 질량 수율을 결정하였다. 효소 질량 수율 및 425 마이크론 미만의 과립의 수율은 하기와 같았다:

효소 질량 수율: 92.15 %

< 425 마이크론 94.46 %

> 425 마이크론 (초과) 5.54 %

입자 크기 분포를 표 6 에 나타내었다.

실시예 7.1 에서 제조한 효소 과립에 대한 입자 크기 분석

입자 크기(㎛)	입자량 (%)
355 초과	0.0
300-355	16.3
250-300	72.4
212-250	11.0
150-212	0.3
150 미만	0.0

2. 황산나트륨 코팅된 효소 과립의 제조

대략 1,395 g 의 상기 제조한 효소 코팅된 코어를 코팅기에 재적재하고, 이어서 20 % 의 농도로 40℃ 에서 물에 미리 용해시킨 황산나트륨 861 g 으로 코팅하였다. 염 코어를 분부하기 위한 코팅 변수는 하기와 같았다:

효소 코팅된 코어 첨가량 1395 g

공급 속도 15 - 16 g/분

원자화 압력 40 psi

주입구 온도 9O ℃

배출구 온도 40 - 42℃

공기 흐름 52 - 54 cfm

전체 황산나트륨층 질량 수율 및 425 마이크론 미만이거나 초과인 입자의 질량 수율은 하기와 같았다:

염 층 질량 수율 88.84 %

< 425 마이크론 99.74 %

> 425 마이크론 (초과) 0.26 %

입자 크기 분포를 표 7 에 나타내었다.

실시예 7.2 에서 제조한 효소 과립에 대한 입자 크기 분석

입자 크기(㎛)	입자량 (%)
355 초과	1.3
300-355	2.4
250-300	12.2
212-250	44.5
180-212	29.7
180 미만	10.0

3. PVA / 탈크 코팅된 효소 과립의 제조

대략 1,395 g 의 상기 제조한 효소 코팅된 코어를 코팅기에 다시 적재하고, 이어서 80℃ 로 미리 가열 제조된 수중 Neodol 23-6.5-T (Shell Chemical LP, Houston, TX), PVA (Erkomat) 및 탈크의 10 % 용액 517 g 으로 코팅하였다. 상기 용액에는 PVA, 탈크 및 neodol 23-6.5-T 가 30:65:5 고체비로 포함되어 있다. 코팅 변수는 하기와 같았다:

효소 코팅된 코어 첨가량 1395 g

공급 속도 9 - 11 g/분

원자화 압력 46 psi

주입구 온도 94 ℃

배출구 온도 52 - 57℃

공기 흐름 50 cfm

전체 PVA 층 질량 수율 및 425 마이크론 미만이거나 초과인 입자의 질량 수율은 하기와 같았다:

PVA 층 질량 수율 88.26 %

< 425 마이크론 89 %

> 425 마이크론 (초과) 11 %

입자 크기 분포를 표 8 에 나타내었다.

실시예 7.3 에서 제조한 효소 과립에 대한 입자 크기 분석

입자 크기(㎛)	입자량 (%)
355 초과	13.8
300-355	12.4
250-300	36.8
212-250	26.3
180-212	9.7
180 미만	1.1

실시예 8

먼지를 감소시키기 위한 소형 과립에 코팅하기

보호 코팅이 없는 작은 과립은, 효소 과립 가공 공장 및 소비자의 가공 공장에서 공기압 수송 및 충전 작업 동안 유의량의 먼지를 발생한다. 먼지는 위생 문제 및 가공 문제가 될 수 있어서, 가능한 많이 감소되어야 한다. 하기 조성을 갖는 소형 효소 과립을 3,000 ㎏ 규모로 제조하였고, 유의량의 Heubach 먼지를 발생하였다. Heubach 먼지 시험은 예를 들어, 미국 특허 제 5,324,649 호, 제 5,879,920 호, 및 7,108,821 호, 및 [Becker 등 (1997) "Formulation of Detergent Enzyme" in Enzymes in Detergency, Van Ee, J. H., Misser, O., and Baas, E., eds. Marcel Dekker, New York, pp. 299-325] 에 기재되어 있다.

상기 코팅되지 않은 소형 과립에서의 Heubach 먼지 수준은 476 ㎎/pad 였고, 제조를 위해서는 50 ㎎/pd 미만의 먼지 수준을 갖는 과립이 바람직하다.

Neodol 코팅

유동층 분무 코팅기에서 하기 분무 변수를 사용하여 10 % 수용액으로부터 2% Neodol 23-6.5-T 의 코팅물을 상기 기재한 코팅되지 않은 과립에 분부하였다:

Neodol 분무 변수

과립 첨가량 1395 g

공급 속도 15 - 16 g/분

원자화 압력 40 psi

주입구 온도 9O ℃

배출구 온도 40 - 42℃

공기 흐름 52 - 54 cfm

입자 크기 분포를 표 9 에 나타내었다.

실시예 8 에서 제조한 효소 과립에 대한 입자 크기 분석 (Neodol 코팅)

입자 크기(㎛)	입자량 (%)
355 초과	0.0
300-355	21.6
250-300	68.0
212-250	9.6
150-212	0.5
150 미만	0.3

Neodol 코팅된 과립에서, Heubach 먼지가 55 ㎎/pad 수치로 유의하게 감소하였다.

HP MC /P EG 코팅

90 % Methocel E-15 HPMC (히드록시프로필 메틸 셀룰로오스, Dow Corning) A-15 및 물에 5 % 고체 수준으로 용해된 10 % 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 600 의 혼합물의 8 % 코팅물을 하기 분무 변수를 사용하여 코팅되지 않은 과립에 분무하였다:

과립 첨가량 1395 g

공급 속도 9 - 11 g/분

원자화 압력 46 psi

주입구 온도 94 ℃

배출구 온도 52 - 57℃

공기 흐름 50 cfm

입자 크기 분포를 표 10 에 나타내었다.

실시예 8 에서 제조한 효소 과립에 대한 입자 크기 분석 (HPMC/PEG 코팅)

입자 크기(㎛)	입자량 (%)
355 초과	1.4
300-355	32.8
250-300	61.2
212-250	3.5
180-212	0.4
180 미만	0.8

HPMC/PEG 코팅된 과립에서, Heubach 먼지가 20 ㎎/pad 의 수준으로 감소하였다.

탈크 / PVA / Neodol 코팅

10 % 고체 수준으로 물에 용해된 10 % Neodol 23-6.5-T, 50 % 탈크 및 40 % PVA 의 혼합물의 10 % 코팅물을 HPMC/PEG 코팅을 위해 하기 기재된 동일한 분무 변수를 이용하여 코팅되지 않은 과립에 분무하였다.

입자 크기 분포를 표 11 에 나타내었다.

실시예 8 에서 제조한 효소 과립에 대한 입자 크기 분석 (탈크/PVA/Neodol 코팅)

입자 크기(㎛)	입자량 (%)
355 초과	2.2
300-355	35.4
250-300	58.5
212-250	3.3
180-212	0.3
180 미만	0.3

탈크/PVA/Neodol 코팅된 과립에서, Heubach 먼지가 16 ㎎/pad 의 수준으로 감소하였다.

상기 물질이 Neodol 코팅을 위한 상기 기재된 분무 변수를 이용하여 10 % 용액으로부터 추가적인 2% Neodol 로 코팅하였을 때, 부가적으로 Heubach 먼지가 4 ㎎/pad 의 수준으로 감소하였다.

실시예 9

차단층 및 외부 코팅층을 갖는 효소-함유 과립을, 코팅층을 첨가하는 사이에 코팅기에서 과립을 제거하지 않고 연속 공정으로 유동층 분무 코팅기에서 제조하였다.

크기 범위가 150 ㎛ 내지 250 ㎛ 의 황산나트륨 결정 (Hanhua Grade C 사) 152 ㎏ 을 파일롯 유동층 코팅기에 적재하고, 유동화하였다. 453 ㎏ 의 중성 셀룰라아제 (19,295 U/g), 45 ㎏ 의 Repel-o-Tex 20 % 현탁액, 7.1 ㎏ 의 수크로오스, 및 4.7 ㎏ 의 밀 전분을 황산나트륨 결정에 분무 코팅하였다. 34 ㎏ 의 황산나트륨 용액 (수중 25 %) 을 효소층에 분무하였다. 33 ㎏ 의 PVA:탈크:Lutensol TO 65 (4:5:1, 수중 25 % 용액)을 분무함으로써 외부 코팅을 적용하였다.

분무 코팅 변수는 하기와 같았다:

워밍업 단계:

주입구 공기 온도 68℃

유동화 공기 흐름 1125 N㎥/h

원자화 공기 압력 4.0 bar

효소 용액 분무 코팅:

용액 분무 속도 20 분 동안 18.0 ℓ/h,

그 후 450 분에 걸쳐 45 ℓ/h 으로 증가시키고,

나머지 실험을 위해 42 ℓ/h 에 유지함

층 온도 48℃

유동화 공기 흐름 420 분에 걸쳐 1125 N㎥/h

원자화 공기 압력 4.0-5.5 bar, 450 분에 걸쳐 증가시킴

술페이트 용액 분무 코팅:

용액 분무 속도 36 ℓ/h, 그 후 30 분에 걸쳐 51 ℓ/h 로 증가시키고,

나머지 실험을 위해 51 ℓ/h 에 유지함

층 온도 50℃

유동화 공기 흐름 1170 N㎥/h

원자화 공기 압력 3.5-3.8 bar

외부 코팅:

용액 분무 속도 27 ℓ/h, 그 후 75 분에 걸쳐 21 ℓ/h 감소시키고,

그 후 나머지 실험을 위해 21 ℓ/h 에 유지함

층 온도 58℃

유동화 공기 흐름 1170 N㎥/h

원자화 공기 압력 5.5 bar

생성물 197 ㎏ 을 수득하여 425 ㎛ 스크린에 통과시켰다. 입자 크기 분포를 표 12 에 나타내었다.

실시예 9 에서 제조한 효소 과립에 대한 입자 크기 분석

입자 크기(㎛)	입자량 (%)
355 초과	0.7
300-355	15
250-300	59
212-250	24
180-212	1.8
150 미만	0

상기 본 발명이 이해의 명확성을 위해 설명 및 예로서 다소 상세히 기재되어 있을지라도, 특정 변화 및 변형은 본 발명의 취지 및 범주를 벗어나지 않고 실시될 수 있다는 것은 당업자에게 명백할 것이다. 따라서, 상세한 설명이 본 발명의 범주를 한정하는 것으로서 이해해서는 안된다.

본원에 인용된 모든 간행물, 특허, 및 특허 출원은, 마치 각 개별 간행물, 특허 또는 특허 출원이 인용참조 되도록 구체적 및 개별적으로 나타내어 있는 것처럼 모든 목적과 동일한 범위에 대해 전부 그대로 인용참조 된다.

Claims

효소-함유 과립의 집합체로서, 과립의 약 95 % 이상이, 하나 이상의 무기염으로 이루어진 단일 코어 및 상기 코어에 코팅되는 효소-함유 층을 포함하고, 과립의 약 80 % 이상은 약 150 내지 약 355 마이크론의 직경을 포함하는 효소-함유 과립의 집합체.
제 1 항에 있어서, 코어가 황산나트륨으로 이루어지는 과립의 집합체.
제 2 항에 있어서, 황산나트륨 코어의 약 80 % 이상이 약 100 내지 약 250 마이크론의 직경을 포함하는 과립의 집합체.
제 1 항에 있어서, 효소-함유 층이 중합체, 당, 전분 또는 계면활성제 중 하나 이상을 추가로 포함하는 과립의 집합체.
제 1 항에 있어서, 효소-함유 층에 코팅되는, 차단염을 포함하는 층을 추가로 포함하는 과립의 집합체.
제 5 항에 있어서, 차단염층이 황산나트륨을 포함하는 과립의 집합체.
제 5 항에 있어서, 차단염층이 2 종 이상의 염의 혼합물을 포함하는 과립의 집합체.
제 7 항에 있어서, 2 종 이상의 염의 혼합물이 황산나트륨 및 황산마그네슘으로 이루어지는 과립의 집합체.
제 8 항에 있어서, 황산나트륨 및 황산마그네슘이 차단층의 중량에 대해 약 30:70 내지 약 70:30 의 비로 차단염층에 존재하는 과립의 집합체.
제 5 항에 있어서, 차단염층에 코팅되는, 중합체를 포함하는 외부 코팅층을 추가로 포함하는 과립의 집합체.
제 10 항에 있어서, 중합체가 폴리비닐 알코올인 과립의 집합체.
제 5 항에 있어서, 차단염층에 코팅되는, 안료를 포함하는 외부 코팅층을 추가로 포함하는 과립의 집합체.
제 10 항에 있어서, 외부 코팅층이 안료를 추가로 포함하는 과립의 집합체.
제 1 항에 있어서, 코어가 약 1.2 g/㎖ 초과의 벌크 밀도를 포함하는 과립의 집합체.
제 1 항에 따른 과립의 집합체를 포함하는 세제.
제 1 항에 따른 과립의 집합체를 포함하는 직물 가공 조성물.
제 1 항에 따른 과립의 집합체를 포함하는 동물 사료 조성물.
유동층 분무 코팅기에서 코어에 효소-함유 층을 코팅하는 단계를 포함하는 효소-함유 과립의 제조방법으로서, 과립의 약 95 % 이상이, 하나 이상의 무기염으로 이루어지고 약 2.0 이하의 입자 분포 지수로 미리 체질되는 단일 코어를 포함하고, 과립의 약 80 % 이상이 약 150 내지 약 355 마이크론의 직경을 포함하는 효소-함유 과립의 제조방법.
제 18 항에 있어서, 코어가 황산나트륨으로 이루어지는 방법.
제 19 항에 있어서, 황산나트륨 코어의 약 80 % 이상이 약 100 마이크론 내지 약 250 마이크론의 직경을 포함하는 방법.
제 20 항에 있어서, 황산나트륨 코어가 약 1.2 g/㎖ 초과의 벌크 밀도를 포함하는 방법.
제 18 항에 있어서, 효소-함유 층에, 차단염을 포함하는 층을 코팅하는 단계를 추가로 포함하고, 상기 차단염층을 추가하기 이전에 유동층 분무 코팅기에서 과립을 제거하지 않는 방법.
제 22 항에 있어서, 차단염층이 황산나트륨을 포함하는 방법.
제 22 항에 있어서, 차단염층이 2 종 이상의 염의 혼합물을 포함하는 방법.
제 24 항에 있어서, 2 종 이상의 염의 혼합물이 황산나트륨 및 황산마그네슘으로 이루어지는 방법.
제 25 항에 있어서, 황산나트륨 및 황산마그네슘이 차단층의 중량에 대해 약 30:70 내지 약 70:30 의 비로 차단염층에 존재하는 방법.
제 22 항에 있어서, 차단염층에, 중합체를 포함하는 외부 코팅층을 코팅하는 단계를 추가로 포함하고, 상기 외부 코팅층을 추가하기 이전에 유동층 분무 코팅기에서 과립을 제거하지 않는 방법.
제 27 항에 있어서, 중합체가 폴리비닐 알코올인 방법.
제 22 항에 있어서, 차단염층에, 안료를 포함하는 외부 코팅층을 코팅하는 단계를 추가로 포함하고, 상기 외부 코팅층을 추가하기 이전에 유동층 분무 코팅기에서 과립을 제거하지 않는 방법.
제 27 항에 있어서, 외부 코팅층이 안료를 추가로 포함하는 방법.