KR20100111839A

KR20100111839A - 다이피리다몰을 포함하는 이상지질혈증 관련 질환 예방 또는 치료용 조성물

Info

Publication number: KR20100111839A
Application number: KR1020090030248A
Authority: KR
Inventors: 박화진; 김형수; 옥우정; 강희진; 이동하; 조현정; 김현홍; 김윤정; 이동석; 김정락; 황용일; 이만휘; 조재열
Original assignee: 인제대학교 산학협력단
Priority date: 2009-04-08
Filing date: 2009-04-08
Publication date: 2010-10-18

Abstract

본 발명은 다이피리다몰을 포함하는 이상지질혈증 관련 질환 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 다이피리다몰, 그의 약제학적으로 허용되는 염 또는 그 유도체를 유효성분으로 포함하는, MTP에 의해 유발되는 이상지질혈증 관련 질환 예방 또는 치료용 조성물, 및 이를 이용한 이상지질혈증 관련 질환 치료방법에 관한 것이다. 상기 조성물은 MTP 억제 활성을 가지므로, MTP에 의해 유발되는 이상지질혈증 관련 질환 예방 또는 치료를 위한 약제 또는 식품 개발에 유용하게 이용될 수 있다.

다이피리다몰, 동맥경화, 이상지질혈증, MTP

Description

다이피리다몰을 포함하는 이상지질혈증 관련 질환 예방 또는 치료용 조성물{Composition for preventing or treating dyslipidemia related diseases comprising dipyridamole}

본 발명은 다이피리다몰을 포함하는 이상지질혈증 관련 질환 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 다이피리다몰, 그의 약제학적으로 허용되는 염 또는 그 유도체를 유효성분으로 포함하는, MTP에 의해 유발되는 이상지질혈증 관련 질환 예방 또는 치료용 조성물, 및 이를 이용한 이상지질혈증 관련 질환 치료방법에 관한 것이다.

최근, 생활습관의 서구화 등 건강 환경의 변화로 고지혈증, 동맥경화 등의 심혈관계 질환의 발병률이 높아지고 있다. 이러한 심혈관계 질환은 지질대사 이상으로 일어나는 경우가 대부분인 것으로 알려져 있으며, 특히, 혈중 콜레스테롤이나 중성지방 농도를 결정하는 지단백(lipoprotein) 대사에 이상이 생겨 발생하는 이상지질혈증은 심혈관계 질환을 유발하는 주요 원인으로 지적되고 있다.

이상지질혈증(dyslipidemia)이란 고지혈증, 동맥경화증 등 혈장 내 총 콜레스테롤, 저밀도지단백-콜레스테롤(LDL-Cholesterol), 중성지방(triglyceride)이 증가되거나 고밀도지단백-콜레스테롤(HDL-Cholesterol)의 감소로 유발되는 혈관질환을 통칭하는 것으로, 동맥내벽에 콜레스테롤 등이 침착돼 동맥의 내면이 좁아짐에 따라 여러 장기와 사지말단에 혈액공급이 원활치 않은 혈액순환장애 등의 증상을 의미한다.

이상지질혈증은 혈중 내 지질 농도 변화에 따른 다양한 질환을 유발시키기도 하는데, 특히, 동맥경화의 발생은 동맥내벽세포의 이상적인 분화에 의한 것으로 혈중 콜레스테롤 농도와 높은 상관관계를 가진다고 보고되었다[Casteli, W. P. et al., JAMA., 256, 2835-2845(1986)]. 동맥경화는 동맥이 비후되고 경화되어 탄력을 잃고 약해진 것으로서, 노화와 더불어 발생하는 주요 질환 중의 하나이다. 동맥경화는 뇌동맥 또는 관상동맥에서 일어나기 쉬운데, 뇌동맥경화증의 경우에는 두통, 현기증, 정신장애를 나타내고 뇌연화증의 원인이 되며 관상동맥경화증의 경우에는 심장부에 동통과 부정맥을 일으켜 협심증, 심근경색 등의 원인이 되는 것으로 알려져 있다. 또한 이로 인해 고혈압, 심장병, 뇌일혈 등이 유발되어, 동맥경화증으로 인한 질병이 현대 사회에 있어, 특히 50∼60대의 남성들에게 가장 큰 사망요인으로 부각되고 있다.

혈중 콜레스테롤 농도가 높으면 이러한 심혈관계 질환이 유발되기 쉬우므로, 혈중 콜레스테롤 농도를 줄이기 위해서는 콜레스테롤 및 지방의 섭취를 줄이는 식 이요법을 시행하거나 지질대사와 관련된 단백질의 작용을 저해함으로써 콜레스테롤의 흡수를 억제시킬 수 있다.

동맥경화 발생에 관여하는 혈중의 지단백질은 저밀도 지단백질(low density lipoprotein, LDL)이며, 이것은 간에 있는 초저밀도 지단백질(very low density lipoprotein; TG-rich VLDL)이 MTP(microsomal triglyceride transfer protein)에 의해 혈중으로 분비되어 혈중의 지단백 분해효소(lipoprotein lipase)에 의해 분해, 생성된것이다(Shelness et al., 1999; Rustaeus et al., 1999; Gordon and Jamil, 2000). MTP의 활성 촉진에 의해서 간으로부터 혈중으로 분비된 TG-rich VLDL중의 TG(triglyceride; 중성지방)만 지단백 분해효소에 의해 분해되고 콜레스테롤이 풍부한 LDL로 변한다. MTP의 활성이 촉진된다는 것은 혈중 LDL농도가 증가되어 동맥경화의 발생 위험이 증가한다는 것이다(Teng et al., 1986; Venkatesan et al., 1993). 궁극적으로 동맥경화의 발생 위험을 억제하기 위해서는 간으로부터 TG-rich VLDL를 혈중으로 분비시키는 MTP의 활성을 억제시켜야 한다(Davis et al., 1990; Bonnardel and Davis, 1995; McLeod et al., 1996; Taghibiglou et al., 2000; Cho et al., 2006; Shelness et al., 1999; Rustaeus et al., 1999; Gordon and Jamil, 2000).

그러므로, MTP의 활성을 억제시키는 약물은 동맥경화를 포함한 이상지질혈증 치료제로서 이용될 수 있으며, 이와 관련된 몇몇 화합물들이 보고되었다. 현재 MTP의 저해제로는 Bristol-Myers-Squibb 사의 BMS-200150, Pfizer 사의 CP-1044, Glaxowelcome 사의 개발한 4’-bromo-3’-methylmetaqualone, 및 Bayer 사의 BAY13-9952(implitapide) 등이 공지되어 있다.

그러나, 이들 약물들은 값이 매우 비싸고, 세포 내에서 어떠한 기작으로 작용하는지 밝혀지지 않아, 다른 부작용을 유발할 가능성이 있어 안전성이 높지 않은 문제점이 있었다.

이에, 본 발명자들은 새로운 이상지질혈증 관련 질환 치료제를 개발하기 위해, 다양한 화합물들을 탐색하던 중, 다이피리다몰 화합물이 MTP 활성을 저해시킨다는 것을 발견하고, 상기 화합물이 동맥경화, 고지혈증을 포함한 이상지질혈증 관련 질환 치료에 유효하다는 것을 밝힘으로써 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 목적은 다이피리다몰, 그의 약제학적으로 허용되는 염 또는 그 유도체를 유효성분으로 포함하는, MTP(microsomal triglyceride transfer protein)에 의해 유발되는 이상지질혈증 관련 질환, 예를 들어, 동맥경화, 고지혈증, 고콜레스테롤혈증, 고중성지방혈증, 췌장염, 과혈당증, 비만 및 당뇨병 등의 이상지질혈증 관련 질환 예방 또는 치료용 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 다이피리다몰, 그의 약제학적으로 허용되는 염 또는 그 유도체를 유효성분으로 포함하는, MTP 억제제를 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 다이피리다몰, 그의 약제학적으로 허용되는 염 또는 그 유도체를 투여하는 것을 포함하는, MTP에 의해 유발되는 이상지질혈증 관련 질환을 치료하는 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 다이피리다몰, 그의 약제학적으로 허용되는 염 또는 그 유도체를 포함하는, MTP에 의해 유발되는 이상지질혈증 관련 질환 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공하는 것이다.

하나의 양태로서, 본 발명은 다이피리다몰, 그의 약제학적으로 허용되는 염 또는 그 유도체를 유효성분으로 포함하는, MTP에 의해 유발되는 이상지질혈증 관련 질환 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.

또 다른 양태로서, 본 발명은 다이피리다몰, 그의 약제학적으로 허용되는 염 또는 그 유도체를 유효성분으로 포함하는, MTP 억제제에 관한 것이다.

이하, 본 발명의 구성을 더욱 상세히 설명한다.

본 발명에서 사용되는 다이피리다몰(dipyridamole)은 분자식 C₂₄H₄₀N₈O₄, 분자량 504.63의 화합물로서, 하기 화학식1의 구조식을 가질 수 있다.

상기 본 발명의 다이피리다몰 화합물은 공지의 합성방법을 통해 직접 합성시켜 사용하거나, 시판되는 것을 이용할 수 있다.

또한, 본 발명의 상기 화합물은 유효한 MTP 억제 활성을 잃지 않는 범위에서, 화합물의 약제학적으로 허용되는 염 또는 화합물의 유도체 형태로 이용가능하며, 상기 화합물의 염 또는 유도체는 당해 기술분야에서 통상적인 방법으로 제조될 수 있다.

본 발명에서 상기 화합물의 "약제학적으로 허용되는 염”이란 약리학적 또는 생리학적으로 허용되는 무기산, 유기산 및 염기로부터 유도된 염을 의미한다. 적합한 산의 예로는 염산, 브롬산, 황산, 질산, 과염소산, 푸마르산, 말레산, 인산, 글리콜산, 락트산, 살리실산, 숙신산, 톨루엔-p-설폰산, 타르타르산, 아세트산, 시트르산, 메탄설폰산, 포름산, 벤조산, 말론산, 나프탈렌-2-설폰산, 벤젠설폰산 등을 포함할 수 있고, 적합한 염기로부터 유도된 염은 알칼리 금속, 예들 들어, 나트륨, 알칼리토금속, 예들 들어, 마그네슘, 암모늄 등을 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명에서 "MTP(microsomal triglyceride transfer protein; 마이크로좀 트리글리세라이드 운반 단백질)"는 중성지방(triglyceride, TG), 아포(apo) B 지단백질을 회합하여 그것을 혈액으로 운반하는 간세포 및 장세포의 세망에 있는 운반 단백질을 말한다. 또한, "MTP 억제"란 MTP(microsomal triglyceride transfer protein) 단백질 활성을 억제하는 작용, 즉, 단백질에 작용하여 단백질의 정상적인 기작을 방해함으로써 그 촉매반응이 저해되는 것을 의미하는 것이다.

본 발명의 상기 다이피리다몰 화합물은 상기와 같은 MTP 억제 활성을 가짐을 특징으로 한다.

상기에서 언급했듯이, MTP의 활성 촉진으로 인해 혈중 LDL농도가 증가되어 이상지질혈증을 유발하므로, 본 발명의 화합물은 이러한 MTP 활성을 억제함으로써 MTP에 의해 유발되는 이상지질혈증 관련 질환의 예방 또는 치료에 유용하게 이용될 수 있다.

본 발명에서, "MTP에 의해 유발되는 이상지질혈증 관련 질환"은 MTP에 의해 혈중 LDL농도가 증가되어 발생되는 질환을 의미하는 것으로, 동맥경화, 고지혈증, 고콜레스테롤혈증, 고중성지방혈증, 췌장염, 과혈당증, 비만 및 당뇨병 등을 포함하지만, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명의 '예방 또는 치료'에서 '예방'이란 다이피리다몰, 그의 약제학적으로 허용되는 염 또는 그 유도체를 포함하는 조성물을 투여함으로써 MTP에 의해 유발되는 이상지질혈증과 관련된 모든 질병의 발병을 억제시키거나 발병을 지연하는 모든 행위를 말하며, '치료'란 상기 조성물을 투여함으로써 MTP에 의해 유발되는 이상지질혈증과 관련된 모든 질병을 호전시키거나 이롭게 변경하는 모든 행위를 의미한다.

본 발명의 상기 조성물은 cGMP를 GMP로 분해시키는 cGMP 특이성 포스포디에스터라제의 저해를 통한 cGMP 증진 활성을 가진다. 다시 말해, 상기 조성물에 포함된 본 발명의 화합물 다이피리다몰은 세포 내에서 포스포디에스터라제 저해를 통해 cGMP를 증진시키고, 증가된 cGMP가 MTP 활성을 억제시킬 수 있다.

본 발명의 구체적인 실시예에서, 쥐의 간세포현탁액에 본 발명의 다이피리다몰 화합물을 처리한 결과, MTP 활성이 억제되는 것을 확인하였다. 또한, 간세포현탁액에 cGMP를 처리한 결과, MTP 활성이 억제되는 것을 확인하였다.

따라서, 본 발명의 상기 조성물은 상기 다이피리다몰 이외에도 MTP 억제제로서 MTP 활성을 억제시킬 수 있는 cGMP 분자, 또는 cGMP 수준을 증진시킬 수 있는 제제를 추가로 포함할 수 있다.

또한, 본 발명의 상기 MTP에 의해 유발되는 이상지질혈증 관련 질환 예방 또는 치료용 조성물은 공지의 콜레스테롤 및 트리글리세라이드 저하제를 추가로 포함할 수 있다. 본 발명의 조성물에 포함될 수 있는 콜레스테롤 및 트리글리세라이드 저하제로는 아토르바스타틴(Atorvastatin), 로바스타틴(Lovastatin), 엡타스타틴(Eptastatin), 심바스타틴(Simvastatin), 플루바스타틴(Fluvastatin), 달바스타틴(Dalvastatin), 이타바스타틴(Itavastatin), 로수바스타틴(Rosuvastatin), 프라바스타틴(Pravastatin), 폴리코사놀(Polycosanol), 시프로피브레이트(Ciprofibrate), 페노피브레이트(Fenofibrate), 벤자피브레이트(Benzafibrate), 클로피브레이트(Clofibrate), 필리콜(Filicol), 겜피브로질(Gemfibrozil), 벤플루오렉스(Benfluorex), 콜레스티라민(Colestyramine), 피토스테롤스(Phytosterols), 콜레스틸란(Colestilan), 아시피목스(Acipimox), 메글루톨(Meglutol), 니세리트롤(Niceritrol), 비니피브레이트(Binifibrate), 클리노피브레이트(Clinofibrate), 술로덱시드(Sulodexide), 멜리나미드(Melinamide), 에토피브레이트(Etofibrate), 피리피브레이트(Pirifibrate), 프로부콜(Probucol) 및 소르비니케이트(Sorbinicate) 등이 가능하지만, 이에 제한되는 것은 아니며, 이들 화합물은 단독으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다.

본 발명의 다이피리다몰, 그의 약제학적으로 허용되는 염 또는 그 유도체를 유효성분으로 포함하는, MTP에 의해 유발되는 이상지질혈증 관련 질환 예방 또는 치료용 조성물은 약학적으로 허용가능한 담체를 추가로 포함할 수 있으며, 담체와 함께 제제화될 수 있다.

본 발명에서 용어, "약학적으로 허용가능한 담체"란 생물체를 자극하지 않고 투여 화합물의 생물학적 활성 및 특성을 저해하지 않는 담체 또는 희석제를 말한다.

본 발명의 상기 조성물은 본 발명의 화합물을 포함하는 캡슐에 부형제 없이 충전하거나 미립화된 고체 담체, 액체 담체 또는 그 양자와 균일하게 충분히 접촉시켜 제조될 수 있으며, 필요한 경우 생성물을 바람직한 제제로 성형하여 사용할 수 있다. 적합한 담체 부형제의 예로서 전분, 물, 식염수, 에탄올, 글리세롤, 링거액 및 덱스트로스 용액 등을 들 수 있으며, 문헌(Remington`s Pharmaceutical Science, 19^thEd., 1995, Mack Publishing Company, Easton PA)등에 개시되어 있는 바에 따라 당해 기술 분야에 알려진 적합한 제제로 제제화할 수 있다.

이때, 본 발명의 화합물은 전체 조성물 총 중량에 대하여 0.0001 ~ 10 중량%, 바람직하게는 0.001 ~ 1 중량%의 양으로 포함되어 제제화될 수 있다.

또한, 본 발명의 상기 조성물은 이를 유효성분으로 포함하는 어떠한 제형으로도 적용가능하며, 경구용 또는 비경구용 제형으로 제조할 수 있다. 본 발명의 약 학적 제형은 구강(oral), 직장(rectal), 비강(nasal), 국소(topical; 볼 및 혀 밑을 포함), 피하, 질(vaginal) 또는 비경구(parenteral; 근육내, 피하 및 정맥내를 포함) 투여에 적당한 것 또는 흡입(inhalation) 또는 주입(insufflation)에 의한 투여에 적당한 형태를 포함한다.

본 발명의 조성물을 유효성분으로 포함하는 경구 투여용 제형으로는, 예를 들어 정제, 트로키제, 로렌지, 수용성 또는 유성현탁액, 조제분말 또는 과립, 에멀젼, 하드 또는 소프트 캡슐, 시럽 또는 엘릭시르제로 제제화할 수 있다. 정제 및 캡슐 등의 제형으로 제제화하기 위해, 락토오스, 사카로오스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아밀로펙틴, 셀룰로오스 또는 젤라틴과 같은 결합제, 디칼슘 포스페이트와 같은 부형제, 옥수수 전분 또는 고구마 전분과 같은 붕괴제, 스테아르산 마그네슘, 스테아르산 칼슘, 스테아릴푸마르산 나트륨 또는 폴리에틸렌글리콜 왁스와 같은 윤활유를 포함할 수 있으며, 캡슐제형의 경우 상기 언급한 물질 외에도 지방유와 같은 액체 담체를 더 함유할 수 있다.

본 발명의 조성물을 유효성분으로 포함하는 비경구 투여용 제형으로는, 피하주사, 정맥주사 또는 근육내 주사 등의 주사용 형태, 좌제 주입방식 또는 호흡기를 통하여 흡입이 가능하도록 하는 에어로졸제 등 스프레이용으로 제제화할 수 있다. 주사용 제형으로 제제화하기 위해서는 본 발명의 조성물을 안정제 또는 완충제와 함께 물에서 혼합하여 용액 또는 현탁액으로 제조하고, 이를 앰플 또는 바이알의 단위 투여용으로 제제화할 수 있다. 좌제로 주입하기 위해서는, 코코아버터 또는 다른 글리세라이드 등 통상의 좌약 베이스를 포함하는 좌약 또는 체료 관장제와 같 은 직장투여용 조성물로 제제화할 수 있다. 에어로졸제 등의 스프레이용으로 제형화하는 경우, 수분산된 농축물 또는 습윤 분말이 분산되도록 추진제 등이 첨가제와 함께 배합될 수 있다.

또 다른 양태로서, 본 발명은 상기 다이피리다몰, 그의 약제학적으로 허용되는 염 또는 그 유도체를 투여하는 것을 포함하는, MTP에 의해 유발되는 이상지질혈증 관련 질환을 치료하는 방법에 관한 것이다.

본 발명에서 용어, "투여"는 어떠한 적절한 방법으로 환자에게 본 발명의 약제학적 조성물을 도입하는 것을 의미하며, 본 발명의 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 경구 또는 비경구의 다양한 경로를 통하여 투여될 수 있으며, 구체적으로, 구강, 직장, 국소, 정맥내, 복강내, 근육내, 동맥내, 경피, 비측내, 흡입, 안구 내 또는 피내경로를 통해 통상적인 방식으로 투여될 수 있다. 바람직하게는 경구 투여한다.

본 발명의 치료방법은 상기 화합물을 약학적 유효량으로 투여하는 것을 포함한다. 적합한 총 1일 사용량은 올바른 의학적 판단범위 내에서 처치의에 의해 결정될 수 있다. 특정 환자에 대한 구체적인 치료적 유효량은 달성하고자 하는 반응의 종류와 정도, 경우에 따라 다른 제제가 사용되는지의 여부를 비롯한 구체적 조성물, 환자의 연령, 체중, 일반 건강 상태, 성별 및 식이, 투여 시간, 투여 경로 및 조성물의 분비율, 치료기간, 구체적 조성물과 함께 사용되거나 동시 사용되는 약물을 비롯한 다양한 인자와 의약 분야에 잘 알려진 유사 인자에 따라 다르게 적용하 는 것이 바람직하다. 따라서, 본 발명의 화합물의 바람직한 투여량은 전술한 사항을 고려하여 결정할 수 있으며, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나, 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 화합물은 0.0001 내지 100mg/kg, 바람직하게는 0.001~10mg/kg의 양을 일일 1회 내지 수회로 나누어 투여할 수 있다.

또한, 본 발명의 치료방법은 상기 화합물 외에 상기에 언급된 공지의 콜레스테롤 및 트리글리세라이드 저하제를 병용 투여하는 것을 포함할 수 있다.

콜레스테롤 및 트리글리세라이드 저하제의 약학적 유효량은 당업계에 공지되어 있으며 증상의 정도, 상기 화합물과의 병용 투여 등의 제반 조건을 고려하여 처치의가 그 양을 조절할 수 있다. 이들 콜레스테롤 및 트리글리세라이드 저하제는 경우에 따라 복합제제로 제제화되어 투여되거나, 별도의 제제로 동시 투여되거나 시간 간격을 두고 순차적으로 투여될 수 있다.

또한, 본 발명의 다이피리다몰 화합물은 MTP에 의해 유발되는 이상지질혈증 관련 질환의 예방 및 치료를 위하여 단독으로 사용하거나, 수술, 호르몬 치료, 약물 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.

본 발명의 이상지질혈증 관련 질환을 예방 또는 치료하는 방법은 이상지질혈증 관련 질환이 발생할 수 있는 임의의 동물에 적용가능하며, 동물은 인간 및 영장류뿐만 아니라, 소, 돼지, 양, 말, 개 및 고양이 등의 가축을 포함한다.

또 다른 양태로서, 본 발명은 다이피리다몰, 그의 약제학적으로 허용되는 염 또는 그 유도체를 유효성분으로 포함하는, MTP에 의해 유발되는 이상지질혈증 관련 질환 예방 또는 개선용 건강기능식품에 관한 것이다.

본 발명의 상기 화합물은 MTP에 의해 유발되는 이상지질혈증 관련 질환의 예방 또는 개선을 목적으로 건강기능식품에 첨가될 수 있다.

본원에서 정의되는 "건강기능식품"은 건강기능식품에 관한 법률 제6727호에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 의미하며, "기능성"이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미한다.

상기 건강기능식품은 최종 제품의 상품성과 소비자 기호도에 따라 다른 식품소재를 첨가하여 제조될 수 있다. 상기 화합물의 유효한 첨가량은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있으며, 바람직하게는 총 원료에 대하여 10 중량% 이하, 바람직하게는 1 중량% 이하의 양으로 첨가할 수 있다.

상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 기능성 식품을 모두 포함한다. 특히, 본 발명의 화합물은 식품학적으로 허용가능한 식품첨가제를 추가로 포함하여 제제화함으로써 제제 형태의 건강기능식품으로 제조할 수 있으며, 제제의 형태로는 정제, 캡슐제, 환제, 액제 등이 가능하다.

또한, 본 발명의 건강기능식품은 다양한 향미제, 천연 탄수화물, 감미제, 비타민, 전해질, 착색제, 펙트산, 알긴산, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산화제 등을 추가로 함유할 수 있다. 특히, 상기 천연 탄수화물로는 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 수크로오스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜을 사용할 수 있으며, 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0.01~0.1 중량부 범위에서 선택되는 것이 바람직하다.

본 발명에 따른 화합물은 MTP 억제 활성을 나타내므로, 세포 내에서 혈중 LDL 농도를 저하시킴으로써 MTP에 의해 유발되는 이상지질혈증의 생성을 저하시킬 수 있다. 그러므로 본 발명의 화합물을 포함하는 조성물은 MTP에 의해 유발되는 이상지질혈증 관련 질환 예방 또는 치료를 위한 약제 또는 식품 개발에 유용하게 이용될 수 있다.

이하, 본 발명을 하기 실시예를 참조하여 구체적으로 설명한다. 다만, 하기 실시예는 본 발명의 이해를 돕기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 하기 실시예에 한정되지는 않는다.

실시예 1. 재료 준비

<1-1> 동물처리

일본 SLC inc. (Tokyo, Japan) 으로부터 수컷 C57BL/6 mice(생쥐)를 구입하여 본 연구에 사용하였다. 동물들은 개별적으로 플라스틱 케이지에서 온도와 습도가 자동 조절되는 장소에서 12시간 간격으로 점등이 유지되는 환경에서 사육시켰다. 사육중인 동물들에게는 표준 펠렛 사료와 물을 자유급식시켰다. 생쥐를 에테르로 마취시킨 후 혈액과 간을 채취하였으며, 이와 같은 실험은 <Inje University Animal Care and Use Committee>의 규정에 준하여 승인받은 후 이행되었다.

<1-2> 화합물 및 cGMP준비

본 발명의 화합물인 다이피리다몰, 및 cGMP는 Sigma-Aldrich (Missouri, USA)에서 구입하였다.

<1-3> 간세포현탁액 준비

모든 공정들은 4℃ 이하에서 이행되었다. 상기 <1-1> 동물처리과정을 통해 간 조직을 채취한 직후, 적정 용량의 차가운 250 mM 수크로오스로 간 내에 잔존하는 혈액을 세척하였다. 이렇게 세척한 간 조직의 무게를 측정하여 그것의 2배에 해 당하는 용량의 간 세포 현탁액의 완충액(50 mM Tris, pH 7.4, 250 mM 수크로오스, 0.02% 아지드화나트륨)를 첨가한 후 teflon fitted glass homogenizer로 균질화시켰다. 균질화시킨 간세포 현탁액은 미리 완충액에 적셔두었던 cheese cloth로 여과시킨 후 분석할 때까지 -70℃에서 냉동보관 하여 1주일 이내에 측정에 이용하였다.

실시예 2. 화합물 처리에 따른 MTP 활성 측정

본 발명의 화합물인 다이피리다몰이 MTP 활성에 미치는 효과를 조사하기 위해, 상기 실시예 1에서 준비된 간세포현탁액에 화합물을 농도별로 처리한 후, MTP 활성 변화를 측정하였다.

MTP 활성은 Wetterau와 Zilversmit(1984)가 제시한 방법을 응용하여 측정하였다. 간세포현탁액 중의 단백질 함량을 브래드포드(Bradford)법 (1976)을 이용하여 측정한 후, 500㎍의 단백질을 함유하는 간세포현탁액에 TG 공여체 (74 pmol (5,000 cpm) [¹⁴C]-triolein, 148 nmol phosphatidylcholin, 0.74 nmol cardiolipin, 0.1% butylated hydroxytoluene)와 TG 수용체(222 pmol triolein, 444 nmol phosphatidylcholin, 2.22 nmol cardiolipin, 0.1% butylated hydroxytoluene)를 첨가한 후, 상기 화합물을 첨가하거나(1μM 및 5μM 농도로 처리) 첨가하지 않은 상태(대조군)에서 한 시간 반응시킨 직후에 반응액과 동일한 용량의 반응정지 완충액(25% DEAE-cellulose/15 mM tris, pH 7.4, 1 mM EDTA:0.02% sodium azaid,1:1)을 첨가하여 반응을 정지시켰다.

[¹⁴C]-방사능(radioactivity)은 Liquid Scintillation counter(Packard)로 10분간의 maximum counting cycle 조건 하에서 측정하였으며, SIS(spectral index of sample)의 평균 QIP(quench indicating parameter) 값을 이용하여 cpm(counts per minute)의 평균값으로 산출하여 표기하였다. 측정된 값들은 MTP 측정에 사용한 간세포현탁액의 단백질 량을 기준으로 절대값으로 계산하였다.

통계분석은 Microsoft Excel ver. 2002를 이용하여 student’s t-test를 실시하여 군간의 차이를 분석함으로써 수행되었다. P value가 0.05 이하일 때를 통계적으로 유의 차가 있는 것으로 간주하였고 이를 *표로 표기하였다(도 1).

도 1에서 보듯이, 대조군의 MTP 활성 (2812 ± 29 cpm/protein-mg)에 비해, 본 발명의 화합물은 1μM 및 5μM 농도에서 MTP 활성을 억제하는 것으로 나타났다. 저해된 정도는 대조군에 비해 1μM 농도의 화합물인 경우 15%, 5μM 농도에서 22%정도인 것으로 계산되었다.

실시예 3. cGMP 처리에 따른 MTP 활성 측정

상기와 같은 본 발명의 화합물의 MTP 억제 활성이 cGMP 특이성 포스포디에스터라제의 저해를 통한 cGMP 증진에 의한 것인지를 확인하기 위해, 간세포현탁액에 cGMP 분자를 직접 처리한 후, MTP 활성 변화를 측정하였다.

MTP 활성은 간세포 현탁액에 cGMP를 첨가하거나(100nM 및 500nM 농도로 처리), 첨가하지 않고(대조군) 측정하였으며, 실시예 2에 기재된 방법과 동일한 절차 로 측정하였다(도 2).

도 2에서 보듯이, cGMP는 대조군의 MTP 활성(2812 ± 29 cpm/protein-mg)에 비해, MTP 활성을 억제하는 것으로 나타났으며, 저해 정도는 100 nM 농도에서 38%, 500 nM은 36% 정도인 것으로 계산되었다. 이는 본 발명의 화합물이 세포 내에서 cGMP를 증진시킴으로써 MTP를 저해할 수 있음을 보여주는 결과이다.

도 1은 본 발명의 화합물인 다이피리다몰을 간세포현탁액에 농도별로 처리한 후, MTP 활성 변화를 측정한 결과를 나타낸 그래프이다.

도 2는 cGMP를 간세포현탁액에 농도별로 처리한 후, MTP 활성 변화를 측정한 결과를 나타낸 그래프이다.

Claims

다이피리다몰, 그의 약제학적으로 허용되는 염 또는 그 유도체를 유효성분으로 포함하는, MTP(microsomal triglyceride transfer protein)에 의해 유발되는 이상지질혈증 관련 질환 예방 또는 치료용 조성물.
제1항에 있어서, 상기 MTP에 의해 유발되는 이상지질혈증 관련 질환은 동맥경화, 고지혈증, 고콜레스테롤혈증, 고중성지방혈증, 췌장염, 과혈당증, 비만 및 당뇨병으로 구성된 군으로부터 선택되는 질환임을 특징으로 하는, MTP에 의해 유발되는 이상지질혈증 관련 질환 예방 또는 치료용 조성물.
제1항에 있어서, 상기 조성물은 포스포디에스터라제 저해를 통한 cGMP 증진 활성을 가지는 것을 특징으로 하는, MTP에 의해 유발되는 이상지질혈증 관련 질환 예방 또는 치료용 조성물.
제1항에 있어서, 상기 조성물은 아토르바스타틴(Atorvastatin), 로바스타틴(Lovastatin), 엡타스타틴(Eptastatin), 심바스타틴(Simvastatin), 플루바스타 틴(Fluvastatin), 달바스타틴(Dalvastatin), 이타바스타틴(Itavastatin), 로수바스타틴(Rosuvastatin), 프라바스타틴(Pravastatin), 폴리코사놀(Polycosanol), 시프로피브레이트(Ciprofibrate), 페노피브레이트(Fenofibrate), 벤자피브레이트(Benzafibrate), 클로피브레이트(Clofibrate), 필리콜(Filicol), 겜피브로질(Gemfibrozil), 벤플루오렉스(Benfluorex), 콜레스티라민(Colestyramine), 피토스테롤스(Phytosterols), 콜레스틸란(Colestilan), 아시피목스(Acipimox), 메글루톨(Meglutol), 니세리트롤(Niceritrol), 비니피브레이트(Binifibrate), 클리노피브레이트(Clinofibrate), 술로덱시드(Sulodexide), 멜리나미드(Melinamide), 에토피브레이트(Etofibrate), 피리피브레이트(Pirifibrate), 프로부콜(Probucol), 소르비니케이트(Sorbinicate) 및 이들의 혼합물에서 선택되는 콜레스테롤 및 트리글리세라이드 저하제를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는, MTP에 의해 유발되는 이상지질혈증 관련 질환 예방 또는 치료용 조성물.
제1항에 있어서, 상기 조성물은 약학적으로 허용가능한 담체를 추가적으로 포함하는 약제학적 조성물인, MTP에 의해 유발되는 이상지질혈증 관련 질환 예방 또는 치료용 조성물.
다이피리다몰, 그의 약제학적으로 허용되는 염 또는 그 유도체를 유효성분으 로 포함하는, MTP 억제제.
다이피리다몰, 그의 약제학적으로 허용되는 염 또는 그 유도체를 유효성분으로 포함하는, MTP에 의해 유발되는 이상지질혈증 관련 질환 예방 또는 개선용 건강기능식품.