KR20100042616A - 아토피 피부에 치료 효과를 가지는 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 아토피 피부에 치료효과를 가지는 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 주요 성분으로 세이지, 카모마일, 라벤더 등 추출물을 함유하여 아토피 피부에 치료 효과가 우수한 화장료 조성물을 제공하는 것이다

Description

아토피 피부에 치료 효과를 가지는 화장료 조성물{Cosmetic composition with the effect of Atopy skins}

본 발명은 추출물을 함유하는 아토피 피부의 개선효과를 갖는 화장료에 관한 것으로서 더욱 상세하게는 세이지, 카모마일, 라벤더 추출물을 일정비율로 혼합함으로서 항균효과, 항염효과, 자유 라디칼 소거 등이 나타나 아토피 피부의 치유 개선 효과를 갖는 화장료에 관한 것이다.

아토피 증상은 흔히 태열이라고 불리며 유아 습진 중 가장 흔한 피부병이다. 아토피성 피부염은 악화시키는 요인을 피하고 예방하는데 주의를 기울이는 것이 매우 중요하다. 아토피는 아토피 유발 인자를 가지고 있는 사람은 집 먼지, 진드기 동물의 털, 음식물, 꽃가루, 곰팡이 등과 같이 자주 외부 환경에 접하는 단백물질에 대한 피부반응은 검사에서 흔히 두드러기 반응을 나타내고 특정한 단백물질을 먹거나 흡입할 때 가려움증, 피부 발작, 두드러기, 혈관부종, 재채기, 콧물, 코 막힘, 결막출혈, 눈물 등의 증상을 나타난다. 이러한 아토피 유발 인자는 유전되어 가족적으로 나타난다. 아토피 유발 인자에 의한 알레르기 질환으로 아토피 피부염, 알레르기성 비염, 천식, 알레르기성 결막염, 알레르기성 장관염, 아토피성 두드러기 등이 있으며 이들 질환이 환자 개개인의 유전적 소인, 환경 연령 등에 따라 단독으로 또는 여러 질환이 동시에 나타날 수 있다.

아토피 증상은 시기에 따라 약간씩 다른 양상을 보이는데 시기별로 보면 다음과 같다. 유아기 (2개월∼2세) 초기에는 이마·뺨·머리 등에 증세가 나타난다. 간혹 전신에 증상이 나타나는 경우도 있으나, 붉고 진물이 많이 나고 기름지고 딱지를 형성하는 병변의 양상을 흔히 나타낸다. 유아기 후반기에는 귓볼이나 무릎 뒤와 등에 습진 형태로 흔히 증상이 나타나며 가려움증은 그리 심하지 않습니다만 경우에 따라 약간씩 다르다. 소아기 (2∼10세)에는 얼굴 부위에 나타나는 피부염은 비교적 적어지는데, 접히는 부위의 피부가 건조하고 두터워지며 눈 주위의 홍반, 귀 주위 피부의 균열, 손이나 발의 습진도 흔히 동반된다.

무릎 뒤와 팔꿈치 앞쪽 부위는 날이 갈수록 더 심해진다. 건조한 형태의 증세가 많이 나타나고 습기가 많지 않은 겨울철에 악화되는 경우가 많다. 입술 주위가 갈라지기도 하며 귓바퀴 위나 아래가 찢어지기도 한다. 엉덩이에는 변기에 앉는 자리와 일치하는 곳에 나타나기도 하며, 건성이므로 가려움증이 심해서 잠을 설치는 경우도 있으며 계속 피부를 긁어서 딱딱하게 굳어지기도 한다. 사춘기 및 성인기에는 아토피 피부염은 나이가 들면서 자연히 소실되는 경우가 많으나 때로 성인기까지 심한 피부염이 지속될 수도 있다. 가려움증·발진이 주 증상으로 나타나며 피부가 서로 닿는 부위나 목뿐만 아니라 얼굴·손에도 많이 나타난다. 항생제는 아토피 치료에 필수적이다. 아토피 환자의 피부는 장기간 긁고 건조해진 결과로 세균 감염이 꼭 따라 온다. 아토피 환자의 90% 이상이 포도상 구균에 감염되어 있는데 이 균은 환자가 가려움을 참지 못해 긁어서 생기기도 하지만 최근의 보고에 의하면 이 세균의 외독소가 우리 몸의 면역체계를 자극하여 알레르기를 일으키는 화학물질을 나오게 하여 아토피를 악화시킨다고 한다. 즉 이 세균 자체가 알레르겐으로 작용한다는 것이다. 따라서 아토피 치료에는 적절한 항생물질의 사용이 필수적이다. 그 외 약물 치료로 비스테로이드 연고제로는 보습제 종류인데 피부가 좋아진 후에도 계속 사용하는 것이 좋다.

그리고, 진정시키기 위해 진정제나 신경 안정제를 사용하기도 하며 밤에는 보습을 위해 연고를 바른 후 내부로 도포 부위를 감싸는 방법도 사용하고 있다. 이러한 아토피의 특성으로 볼 때 아토피 치료제에 필수 항목으로 항균효과, 보습효과, 항염 효과를 지닌 물질의 개발이 필요함을 알 수 있다.

세이지 (sage/Salvia officinalis)는 통화식물목 광대나물과의 여러해살이풀로서 높이 50∼90㎝. 줄기의 밑동은 목질화하여 관목모양으로 된다. 줄기에 나 있는 잎의 뒤쪽은 벨벳 모양의 흰색의 부드러운 털로 덮여 있다. 5∼7월에 보라·파랑·흰색 등의 꽃이 핀다. 잎은 피넨·시네올 등의 정유(精油)를 함유하여 향기가 좋으며, 예로부터 약용되어 약용샐비어라 하였다. 현재의 주요 용도는 소스 등에 첨가하는 향료이다.

일반적으로 재배되는 것은 이 종의 변종인 가는 잎 샐비어로서, 잎이 이 종보다 긴 7∼10㎝이고, 향도 더 강하며, 꽃은 담청색이다 이 생약은 동서의약에 만병 통치약으로 널리 알려져 온 역사가 오래된 약용식물이다. 세이지는 차, 향수원료, 약용, 목욕제, 화장품(린스,로션) 포플리, 염색, 비네거 밀원식물, 육류가공 부황제(고기냄새를 없애고 지방분 분해작용)등으로 쓰이고 있다. 잎을 말린 것을 향신료로서 이용한다. 두뇌활동을 자극하고 심신(心身)의 강장제로서, 장수에도 효과가 있다고 한다. 유고슬라비아·알바니아·이탈리아·그리스·터키·미국에서 생산된다. 건조한 잎은 언뜻 보기에 곰팡이가 나 있는 것 같은 짧고 가는 섬모로 덮여 있고 회록색을 띠고 있다. 향신료로서는 상쾌하고 약간 씁쓸한 맛, 장뇌(樟腦)와 같은 시네올 냄새와 쑥과 같은 신선하고 강한 향이 특징이다. 고기의 냄새를 없애는 효과가 있으며, 특히 돼지고기요리와 소시지에 잘 어울린다. 향이 강하므로 약간만 사용하는 것이 좋다. 남유럽·지중해연안 원산이다. 주요 효능으로는 강장효과, 방부효과, 항균효과, 항염효과, 살균소독효과, 해열효과, 구풍효과, 정혈작용효과, 수렴작용효과, 신경계통효과, 소화기계통효과, 구내염효과 등이 있다.

라벤더(Lavender/Lavendula L.)라는 이름은 라틴어의 lavando에서 비롯된 것으로서 lavare 즉 "씻는다" 라는 동사에서 유래한 것이다. "향의 여왕" 또는 "성처녀 마리아의 식물"이라는 칭송을 받고 있는 라벤다는 가장 많은 사랑을 받고 있는 허브 가운데 하나이다. 정신을 편안하게 하여 숙면에 도움을 주며 정신을 진정시켜 준다. 향긋한 라벤다티는 숙면을 유도하여 이브닝티로 즐겨 마시면 좋다. 40여 종의 많은 종이 있으며 대표적인 종으로는 잉글리쉬 라벤다, 프린지 드라벤다, 스위트라벤다, 프렌치라벤다 등의 종이 있다 그리스 로마시대부터 입욕제로 쓰였으며 중세에는 세탁물의 향을 내는데도 사용되었다.

1미터에서 1.5미터까지 성장하며 종류에 따라 6월에서 8월까지 보라색, 자색, 분홍색, 백색 등의 꽃이 아름답다. 허브 정원을 꾸밀 때 아주 좋다. 방향유 성분이 잎과 꽃의 표면을 얇게 덮고 있어 빛나는 것처럼 보이기 때문에 관상용 허브로 인기가 높은데, 특히 개화기 때는 보랏빛의 화려함이 더욱 신비롭다. 라벤더의 향기는 청결, 순수함의 상징으로 쓰였는데 기독교의 전설에는 라벤더가 원래는 향기가 없는 식물이었으나 성모 마리아가 이 꽃 덤불 위에 아기 예수의 속옷을 널어 말린 후부터 향기가 생겨났다고 전하고 있다. 주요효능으로는 두통, 간질병, 현기증 등에 좋으나 임신 초기에는 금지하는 것이 좋다.

케모마일(CHAMOMILE/Chamaemelum nobile)은 다년초 식물에 속하며 인도와 유럽이 원산지이며 국화과에 허브이다. 꽃에는 달콤한 사과향이 있는데 봄이 되면 자그마한 꽃이 여기저기 일시에 개화하여 달콤한 향기가 가득 퍼져 나간다. 정원에 심어 놓으면 바람에 흔들릴 때마다 그 향기가 그윽하게 퍼져 나간다. 유럽에서는 비상 상비약 하면 카모마일을 떠올릴 정도로 보편화된 약초이다. 예전부터 관상용, 식용(요리, 차, 향신료), 향료, 포푸리로 많이 사용되었으며, 이용 부위는 꽃을 이용하며, 재배 시에 햇볕과 바람을 좋아하며 폭염에 약하다. 월동 가능하며 병충해에 강하다. 그 효능 효과로서는 정신을 안정시키며 불면증과 불안증에 효과가 있으며 스트레스 해소에 좋다. 진정효과, 냉증완화효과, 세정효과, 항염효과, 항진균효과 등이 있다

상기 물질들의 아토피 치유에 대한 연구는 아직까지 보고된바 없다

이에 본 발명자들은 아토피 피부 개선용 화장료를 연구한 결과 세이지, 카모마일, 라벤더를 일정 비율 혼합 추출하여 화장료를 제조하고 이 화장료가 아토피 피부의 치유 효과를 확인함으로써 본 발명을 완성하게 되었다. 따라서 본 발명은 세이지, 카모마일, 라벤더을 함유하는 아토피 피부의 치유 개선 효과를 갖는 화장료를 제공하는데 목적이 있다. 본 발명은 세이지, 카모마일, 라벤더 추출물을 함유하는 아토피 피부의 치유 개선 효과를 갖는 화장료를 제공하는데 그 특징으로 한다.

본 발명은 세이지, 카모마일, 라벤더를 일정 비율로 혼합함으로서 항균효과, 보습효과, 항염효과 자유라디칼 소거효과 등이 나타나는 아토피 피부의 치유 개선 효능을 갖는 화장료에 관한 것이다. 세이지, 카모마일, 라벤더 추출물을 일정비율 혼합하여 에탄올, 프로판올, 부탄올, 글리세린 프로필렌글리콜 및 부틸렌글리콜 중에서 선택된 유기용매 또는 상기 유기용매와 물의 혼합용매 1~20배 부피량을 가하여 추출한다. 이때 세이지, 카모마일, 라벤더의 혼합 시는 2~30 : 1~25 : 6~35 중량비로 혼합하는 것이 바람직하다.

이때 상기 범위를 벗어나면 아토피 피부 개선 효과와 보습력이 떨어지는 문제가 있기 때문에 바람직하지 못하다. 상기 재료를 각각 추출하여도 되고 혼합하여 추출하여도 된다. 추출방법으로는 냉각콘덴서가 장치되어 용매가 증발되는 것을 방지한 상태에서 50~95℃, 4~20시간 가열하여 추출하거나 5~37℃에서 1~15일 간 침적시킨 후, 초음파로 진동을 주어 식물체의 유효성분을 추출하는 방법을 사용할 수 있다.

이렇게 제조된 혼합 추출물은 항균효과, 보습효과, 항염효과, 자유라디칼 소거 작용 등이 나타나며 인체에 임상실험을 통해 아토피 피부를 치료하는데 매우 효과적이다. 따라서 상기 추출물을 화장료에 적용 시 기초제품(화장수, 크림, 에센스, 클렌징폼, 클렌징 워터, 팩), 바디제품 화장료(바디로션, 바디오일, 바디 젤), 색조 화장료(화운데이션, 립스틱, 마스카라, 메이크업 베이스), 두발제품 화장료(샴푸, 린스, 헤어 콘디셔너, 헤어젤)등으로 가능하나 바람직하게는 화장수(스킨로션) 영양로션, 영양크림, 맛사지 크림 및 영양 에센스 등으로 전체 화장료 조성에 대하여 0.0001~30.0 중량% 으로 배합한다. 이하 본 발명은 다음 실시 예에 의거하여 더욱 상세히 설명하겠는바 본 발명이 이에 한정하는 것이 아니다.

본 발명은 아토피 피부에 치료효과를 가지는 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 주요 천연 성분으로 세이지, 카모마일, 라벤더 추출물을 함유하여 항균효과, 프리라디칼 소거 효능 실험, 항염증 실험, 보습실험, 세포 보호 효과 실험, 세포막 보호 실험, 피지 과다분비 억제 실험, 피지 분비 억제실험, 지성피부 완화실험, 아토피 치유 개선효과 확인 실험 등에 효과를 가지며, 비 흡광도가 크며, 화장료용의 각종 기제 및 첨가제, 유기용제 등에 대한 용해성, 친화성 및 안정성이 좋고, 특히 기존의 자외선 차단제와 병용하였을 때 자외선 차단 지수를 현저히 높이는 상승 작용을 제공하는 것이다.

본 발명에 따르는 조성물에서 주요 천연 성분으로서 세이지 추출물의 건조중량을 기준으로 하여 0.1 ~ 15 중량%의 함량으로 배합하여 사용한다. 상기의 세이지, 카모마일, 라벤더에 10배의 증류수를 가하여 100±10℃에서 6시간 3회 반복 추출한 후 여과하고, 감압 농축하여 화장료 제조시 첨가한다. 본 발명에 따른 화장료 조성물은 상기 제조된 세이지, 카모마일, 라벤더추출물을 0.1 ~ 15 중량%로 바람직하게는 2 중량%가 되게 함유하는 것을 특징으로 한다.

본 발명에 따른 아토피 피부에 치료효과를 가지는 화장료 조성물은 통상의 제형을 가질 수 있으며, 예를 들어 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 바디로션, 바디오일, 바디에센스 등으로 제형화 될 수 있다. 이들 각 제형의 조성물은 그 제형의 제제화에 필요하고 적절한 각종의 기제와 첨가물을 함유할 수 있으며, 이들 성분의 종류와 양은 당업자에 의해 용이하게 선정될 수 있다. 이하에 아토피 피부에 치료효과를 가지는 화장료 조성물의 대표적인 스킨과 로션 조성물을 예를 들어 설명한다. 또한 본 발명에 따른 아토피 피부에 치료효과를 가지는 화장료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용 횟수를 달리할 수 있다.

이하 본 발명의 실시 예를 통하여 본 발명의 아토피 피부에 치료효과를 가지는 화장료 조성물을 보다 상세히 설명하지만 본 발명이 이들 실시 예 에만 국한되는 것은 아니다.

본 발명에 의한 세이지, 카모마일, 라벤더의 천연추출물을 함유한 화장료 조성물로 인하여 IN VITRO 실험에 의한 항염, 항균효과, 프리라디칼 소거 효능 실험, 보습실험, IN VIVO 실험으로는 세포 보호 효과 실험, 세포막 보호 실험, 피지과다분비 억제 실험, 피지분비 억제실험, 지성피부 완화실험, 아토피 치유 개선효과 확인 실험 등에 효과를 가지며, 비 흡광도가 크며, 화장료용의 각종 기제 및 첨가제, 유기용제 등에 대한 용해성, 친화성 및 안정성이 좋고, 특히 기존의 자외선 차단제와 병용하였을 때 자외선 차단 지수를 현저히 높이는 상승 작용을 제공하는 것으로 결과적으로 아토피 피부염에 우수한 개선효과를 가지는 화장품 조성료를 개발하여 피부 보호나 치유효과를 개선할 것으로 기대된다.

아토피 치료를 위하여 4주간의 장기 측정하여 안면 피부 수분량의 변화를 나타내었다. 수분량이 점차적으로 증가하여 아토피 피부의 치료 개선 효과를 알 수 있다.

실시 예 1 :

건조된 세이지 잎사귀 분쇄물 50g, 건조된 카모마일 잎사귀 분쇄물 50g, 건조된 라벤더 꽃 분쇄물 50g 사용하여 40% 함수 부틸렌글리콜 150g과 약간의 증류수를 가하여 넣고 냉각 콘덴서가 부착되어 용매가 증발되는 것을 방지한 상태에서 교반기를 회전시키면서 상온에서 3일간 추출하고 200메쉬 여과포로 여과한 후, 0.4㎛의 필터 여과하여 추출액 295g을 얻었다.

실시 예 2~6 :

다음 표 1의 용매를 사용하고 상기 실시 예 1과 동일한 방법으로 추출하여 그 결과를 다음 (표 1)에 기재 하였다.

구분	solvent	수득량
실시예2	정제수	299
실시예3	95%에탄올	293
실시예4	40% 함수 프로필렌 글리콜	298
실시예5	40% 함수 에탄올	296
실시예6	40% 함수 글리세린	294

실시예 7 :

건조된 세이지 잎사귀 분쇄물 50g, 건조된 카모마일 잎사귀 분쇄물 50g, 건조된 라벤더 꽃 분쇄물 50g 사용하여 40% 함수 부틸렌글리콜 150g과 약간의 증류수를 가하여 넣고 냉각 콘덴서가 부착되어 용매가 증발되는 것을 방지한 상태에서 교반기를 회전시키면서 100℃, 1시간 가열한 후, 200메쉬 여과포로 여과한 후, 0.4㎛의 필터 여과하여 추출액 250g을 얻었다.

실시 예 8~12 : 다음 표 2의 용매를 사용하고 상기 실시 예 7과 동일한 방법으로 추출하여 그 결과를 다음 (표 2)에 기재 하였다.

구분	solvent	수득량
실시예 8	정제수	294
실시예 9	95%에탄올	273
실시예10	40% 함수 프로필렌 글리콜	291
실시예11	40% 함수 에탄올	280
실시예12	40% 함수 글리세린	291

실시 예 13 :

건조된 세이지 잎사귀 분쇄물 50g, 건조된 카모마일 잎사귀 분쇄물 50g, 건조된 라벤더 꽃 분쇄물 50g 사용하여 30% 함수 에탄올 150g과 약간의 증류수를 가하여 넣고 냉각 콘덴서가 부착되어 용매가 증발되는 것을 방지한 상태에서 교반기를 회전시키며 상온에서 3일간 추출한 후, 200메쉬 여과포로 여과한 후, 0.4㎛의 필터 여과하여 감압건조시켜 60g의 추출물을 얻었다.

실시예 14~16 :

다음 표 3의 용매를 사용하고 상기 실시 예 13과 동일한 방법으로 추출하여 그 결과를 다음 (표 3)에 기재 하였다.

구분	용매	고형분(g)
실시예14	초순수	70
실시예15	95% 에탄올	42
실시예16	50% 에탄올	50

실험 예 1. 항균효과실험

상기 혼합추출물 중 상기 실험 실시예 1에 대하여 항균효과를 측정하였다. 항균성 실험은 페이퍼 디스크(Paper disc)를 이용한 아가 확산(Agar diffusion)법으로 측정하였다. 균주들은 액체 배지 100ml에 한 백금 이를 접종하여 32℃에서 72시간 배양하여 활성화시켰다. 그 액을 각각의 배지에 100㎕접종(10^{7 ~}108 cfu/ml)하여 플레이트 위에 덮고 각 추출물을 멸균된 디스크 플레이트 표면위에 올려놓고 시료 20㎕씩 접종하였다. 120시간 배양하여 디스크 주위에 생성된 저해환의 직경(mm)으로 항균력을 측정하였다.

(표 4) 각각의 시료는 상기 실시 예 1~3의 추출액을 그대로 사용하였으며 상기 실시 예 1~3을 40% 함수 부틸렌글리콜 99g 에 1g의 추출물을 넣어 1%(w/w)용액을 만들어 사용하였다. 균주는 다음과 같은 미생물 공시 균주로 사용하였다. 대장균(Escherichia coli), 스타필로코커스 아우레어스(Staphy lococcus aureus), 바실러스 섭틸리스(Bacillus subtilis) 칸디다 알비칸(Candida albicans)을 선택하였다. 균의 생육조건은 다음 (표 4)에 나타내었다.

번호	균주	배지	시간 온도	타입
1	candida albicans(atcc 10259)	Nutrient agar	45시간, 35℃	호기
2	escherichia coli(ATCC 25922)	Tripticase soy agar	45시간, 35℃	호기
3	staphy lococcus aureus(ATCC29737)	Nutrient agar	45시간, 35℃	호기
4	bacillus subtilis(ATCC 6633)	Nutrient agar	45시간, 35℃	호기

번호	시료	디스크 주위에 생성된 저해환의 직경(mm)
		균주 1	균주2	균주3	균주4
1	실시예 1	13	11	9	13
2	실시예 2	12	12	11	11
3	실시예 3	13	10	12	14
4	실시예 4	11	9	9	15
5	실시예 5	12	8	8	14
6	실시예 6	12	9	9	16
7	실시예 7	11	8	11	12
8	실시예 8	11	8	12	14
9	실시예 9	11	7	11	13
10	실시예 10	13	9	11	12
11	실시예 11	12	9	9	12
12	실시예 12	13	10	10	10
13	실시예 13	11	11	9	10
14	실시예 14	15	11	12	17
15	실시예 15	14	9	8	13
16	실시예 16	15	7	8	12

실험 예 2 : 프리라디칼 소거 효능 실험

0.2mM의 DPPH(1.1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl)용액 2ml에 상기 실시예 1 혼합추출물을 각 농도별로 상온에서 10분간 반응시킨 후, 520nm에서 흡광도를 측정하여 프리라디칼 소거작용(%)을 구하였다. 이때 대조시험을 동시에 실시하였다.

상기 혼합 추출물 실시 예 1의 최종농도(%)	프리라디칼 소거작용(%)	IC50
0.5	10	1.7
1.0	20
1.5	42
2.0	60
2.5	70
3.0	79

실험 예 3 : 프리라디칼 소거 효능 실험

상기 실험 예 2와 동일한 방법으로 상시 실시 예 2~16 을 실험하여 얻은 IC₅₀ 값을 다음 (표 7)에 나타내었다. 각각의 시료는 상기 실시 예 2~11은 추출액을 그대로 사용하였으며 상기 실시 예 12~16은 40% 함수 부틸렌글리콜 99g에 1g의 추출물을 넣어 1%(w/w)용액을 만들어 사용하였다

시료	IC50(시료 %)
실시 예 2	2.3
실시 예 3	2.7
실시 예 4	3.5
실시 예 5	3.0
실시 예 6	3.4
실시 예 7	3.4
실시 예 8	3.5
실시 예 9	4.0
실시 예 10	3.0
실시 예 11	2.5
실시 예 12	2.6
실시 예 13	2.7
실시 예 14	4.0
실시 예 15	2.5
실시 예 16	2.2

실험 예 4 : 항염증 실험

본 추출물에 대한 항염증 효과를 알아보기 위하여 마우스 좌측 귀를 대조부위, 우측 귀를 시험부위로 하여 시료를 적용 전 에탄올로 귀를 깨끗하게 세척하고 시료 20㎕를 1일 1회 4일간 지속적으로 도포하고 마지막 도포 1시간 후에 좌측 귀에 에탄올을 우측 귀에는 아라키돈산(Arachidonic acid)을 2mg/ear을 도포하고 1시간 후 귀의 부종(ear edema)정도를 마이크로 미터로 양쪽 귀를 3회씩 반복 측정하였다. 항염효과는 아라키돈산(Arachidonic acid)처리군을 기준으로 부종액제 정도로 판정하였으며 이는 다음 수학식 1로 계산하여 그 결과를 다음 (표 8)에 나타내었다.

A : 대조군 귀의 평균 두께 (아라키돈산 처리 귀의 두께-비 처리 귀의 두께)

B : 시료 도포군 귀의 두께 (시료처리 귀의 두께 - 비 처리 귀의 두께)

시료	농도(%)	용매	귀두께(㎛)		억제율(%)
			시료 처리전	시료 처리후
아라키돈산	2mg/ear	ETOH	298	549	-
실시 예 1	0.5	"	297	511
실시 예 2	1.0	"	280	521
실시 예 3	0.5	"	277	509
실시 예 4	1.0	"	275	499
실시 예 5	2.0	"	289	506
실시 예 6	0.5	"	288	502
실시 예 7	2.0	"	290	498
실시 예 8	1.0	"	294	499
실시 예 9	1.0	"	284	497
실시 예 10	1.0	"	289	500
실시 예 11	1.0	"	286	501
실시 예 12	1.0	"	279	499
실시 예 13	1.0	"	291	497
실시 예 14	1.0	"	292	520
실시 예 15	1.0	"	289	502
실시 예 16	1.0	"	288	500

실험예 5: : 보습효과 실험

상기 실험 예 1-16에서 제조된 세이지, 카모마일, 라벤더의 천연추출물에 대하여 보습효과를 측정하기 위하여 세이지, 카모마일, 라벤더 혼합추출물을 동결 건조하고 오산화인 데시케이터 중에서 감압 하로 18시간 방치하여 충분히 건조시켰다. 이 건조된 시료에 대하여 10%의 물을 첨가하여 상대습도 41%의 데시케이터 중에 25℃온도로 방치하고, 중량변화를 경시적으로 측정하였다. 실시 예에 의하여 제조된 세이지, 카모마일, 라벤더 천연추출물에 대한 보습효과 측정 결과는 하기의 (표 9)에 기재하였다.

실시 예	측정시간(HR)	수분함유량(%)
실시 예 1	120	31.6
실시 예 2	120	34.5
실시 예 3	120	36.8
실시 예 4	120	37.5
실시 예 5	120	37.1
실시 예 6	120	36.4
실시 예 7	120	36.5
실시 예 8	120	36.5
실시 예 9	120	36.8
실시 예 10	120	36.9
실시 예 11	120	40.0
실시 예 12	120	39.5
실시 예 13	120	31.5
실시 예 14	120	41.5
실시 예 15	120	31.3
실시 예 16	120	31.2

실험 예 6 : 세포 보호 효과 실험

상기 실험 실시 예 1-16에서 제조된 세이지, 카모마일, 라벤더의 천연 추출물에 대하여 자외선으로 부터 세포 보호효과를 측정하기 위하여, 사람 섬유아세포를 2 X 10⁵ cell/well 로 웰 플레이트(well plate)에 놓고 10% 태아소의 혈청(fetal bovine serum, FBS)을 함유하는 둘베코 변형 이글 미디움(Dulbecco's Modified Eagle Medium DMEM)배지를 0.2ml 를 공급한 후, 24시간 동안 이산화탄소(CO₂) 배양기에서 배양한다. 여기서 디메틸셜포네이트(Dimethyl Sulfoxide ,DMSO)에 녹인 천연 혼합 추출액을 처리한 다음, 2MED의 자외선 양을 5분간 조사한 후, 1시간 동안 배양한다.

세포의 생존력을 알아보기 위하여 엠티티-에세이(microculturetetrazolium assay, MTT assay)를 수행한다. MTT assay는 배양한 세포에 MTT용액 0.1ml를 가한 후 4시간동안 배양한 다음 배지는 제거하고 DMSO 0.5ml를 넣어 형성된 포마즌(Formazan)을 마이크로플레이트(Elisa reader)를 사용해 570nm에서 흡광도를 측정하였다. 실시 예에 의해 제조된 세이지, 카모마일, 라벤더의 천연 추출물에 대한 자외선으로 부터 세포 보호 효과를 측정한 결과는 하기의 (표 10)에 기재하였다.

실시 예	반응액 중에 함유시킨 시료의 최종농도(㎍/㎖)	세포 보호 효과(%)
실시 예 1	100	87
실시 예 2	100	89
실시 예 3	100	85
실시 예 4	100	87
실시 예 5	100	86
실시 예 6	100	85
실시 예 7	100	85
실시 예 8	100	87
실시 예 9	100	89
실시 예 10	100	92
실시 예 11	100	91
실시 예 12	100	87
실시 예 13	100	82
실시 예 14	100	91
실시 예 15	100	85
실시 예 16	100	88

실험 예 7 : 세포막 보호 실험

상기 실시예 1-16에서 제조된 세이지, 카모마일, 라벤더의 천연 추출물에 대하여 세포막 보호 효과를 측정하기 위하여, 실험에 사용된 적혈구(백혈구 제거 된 상태)는 뉴질랜드산 알비노(albino)토끼로 부터 채혈하여 사용하였다. 적혈구 현탁액 은 700nm에서 광밀도(opitical density O,D)가 0.6이었고 적혈구 수는 1.5 X 10⁷ cell/ml이었다. 추출혼합물 50㎕를 적혈구 현탁액에 첨가하고 암소에서 30분간 사전-배양(pre-incubation)시킨 후, 광증감제(rose-bengal)를 가하고 광 조사하였다.

15분간 광 조사 후, 사후-배양(post-incubation)에 의한 적혈구의 파괴정도를 15분 간격으로 700nm에서 투광도(% transmittance)로부터 구하였다. 추출 혼합물의 광용혈에 미치는 효과는 사후-배양시간과 용혈정도를 나타내는 τ₅₀ 으로 나타내었다. τ₅₀값은 적혈구 세포가 50% 용혈 되는데 소요되는 시간(분0으로 하였다. 실시 예에 의해 제조된 세이지, 카모마일, 라벤더의 천연 추출물에 대한 세포막 보호효과를 측정한 결과는 하기의 (표 11)에 기재하였다.

실시 예	반응액 중에 함유시킨 시료의 최종농도(㎍/㎖)	세포 보호 효과(τ50 :min)
실시 예 1	100	80
실시 예 2	100	81
실시 예 3	100	87
실시 예 4	100	85
실시 예 5	100	86
실시 예 6	100	88
실시 예 7	100	85
실시 예 8	100	87
실시 예 9	100	84
실시 예 10	100	87
실시 예 11	100	88
실시 예 12	100	89
실시 예 13	100	85
실시 예 14	100	90
실시 예 15	100	92
실시 예 16	100	85

실험 예 8: 피지 과다분비 억제 시험 (1)

본 발명자 상기 실시 예 1 내지 16에 대하여 모공수축으로 인하여 피지 과다 분비 억제 효과를 하기와 같이 측정하였다. 피부의 대부분을 구성하고 있는 단백질은 폴리페놀과 결합하여 모공을 당겨 수축시킨다. 이와 같은 성질을 이용하여 모공수축시험을 수행하였다. 피부를 대신 할 단백질로 헤모글로빈을 사용하였다. 헤모글로빈은 뉴질랜드산 알비노 래빗(Albino Rabbit)의 혈액을 채취하여 사용하였다. 채취 후 50배의 정제수로 희석하였다. 이렇게 제조된 헤모글로빈 용액 2.0ml 와 농도별 희석된 시료 2.0ml를 원심분리관 용기에 넣어 진탕 혼합한 후, 3500rpm조건에서 20분간 원심분리 하였다. 그 후, 상등액을 취해 576nm에서 흡광도를 측정하였다. 피지 분비 억제 효과는 다음과 같이 계산하였다.

상기 실시 예 1 내지 16에 대한 피지 분비 억제 효과를 측정한 결과는 다음 (표 12)과 같다.

	반응액 중에 함유시킨 시료의 최종농도(㎕/ml)	피지분비 억제 효과(%)
실시 예 1	50	63
실시 예 2	50	56
실시 예 3	50	61
실시 예 4	50	75
실시 예 5	50	97
실시 예 6	50	68
실시 예 7	50	65
실시 예 8	50	82
실시 예 9	50	65
실시 예 10	50	63
실시 예 11	50	56
실시 예 12	50	75
실시 예 13	50	77
실시 예 14	50	97
실시 예 15	50	63
실시 예 16	50	56

상기 표 12에 나타난 바와 같이 실시 예2가 실시 예 1 및 실시 예3 내지 6의 경우보다 피지 분비 억제효과가 나타났고 그리고 실시 예 8이 실시 예 7 및 실시 예 9 내지 12의 경우보다 높게 나타났고 또한 실시 예 14가 실시 예 13 및 실시 예 15 내지 18의 경우보다 높게 나타냈으므로 추출용매로서 초순수 정제수를 사용하는 것이 바람직한 것임을 알 수 있다.

또한 세이지, 카모마일, 라벤더의 천연 추출물을 함께 사용한 실시예 13 내지 18의 경우 피지 분비 억제효과가 더 높은 것으로 보아 세이지, 카모마일, 라벤더의 천연 추출물을 함께 사용하는 것이 바람직하다고 할 수 있다. 즉, 세이지, 카모마일, 라벤더의 천연 추출물을 모두 함유하고 추출용매로서 초순수정제수를 사용한 화장료(실시 예 14)가 피지분비 억제 기능이 가장 우수한 것을 알 수 있다.

실험 예 9 : 피지분비 억제 시험 (2)

본 발명자 들은 피부를 대신할 단백질로서 알부민을 사용하여 피지 과다 분비 억제에 관하여 시험하였다. 알부민은 sigma사로부터 구입한 것을 사용하였다. 먼저 알부민 용액을 0.3%의 농도로 제조하였다. 그 후, 원심분리관 용기에 여러 농도의 시료(실시예 1 내지 18)2ml와 상기 제조된 알부민 용액 2ml를 혼합하였다. 그 혼합물을 실온에서 5분 방치한 후 650nm에서 흡광도를 측정하였다. 이 실험은 각 천연혼합물과 단백질과의 엉김에 의한 혼탁정도를 비교하는 것으로 흡광도의 값이 높을수록 좋은 수렴효과를 나타내는 것이다. 측정한 결과는 하기의 (표 13)에 기재하였다.

	반응액 중에 함유시킨 시료의 최종농도(㎕/ml)	피지 분비 억제 효과(흡광도 값)
실시 예 1	10	0.8245
실시 예 2	10	1.0978
실시 예 3	10	0.8152
실시 예 4	10	0.7932
실시 예 5	10	0.6541
실시 예 6	10	0.6543
실시 예 7	10	0.8597
실시 예 8	10	0.9237
실시 예 9	10	0.8654
실시 예 10	10	0.9237
실시 예 11	10	0.6251
실시 예 12	10	0.8887
실시 예 13	10	0.8882
실시 예 14	10	1.0439
실시 예 15	10	0.8754
실시 예 16	10	0.8625

상기 (표 13)에 나타난 바와 같이 실험 예 2 가 실시 예 1 및 실시 예2 내지 6의 경우보다 피지 분비 억제 효과가 높게 나타났고 그리고 실시 예 8이 실시 예 7 및 실시 예 9 내지 12의 경우 보다 또한 실시 예 14가 실시 예 13 및 실시 예 15 내지 16의 경우보다 높게 나타났으므로 세이지, 카모마일, 라벤더의 천연 추출물을 각각 사용한 실시 예 1 내지 12보다 세이지, 카모마일, 라벤더의 천연 추출물을 함유한 것이 가장 바람직한 것이라 할 수 있다.

본 발명자들은 상기 실험 예 1 및 실험 예 2를 통해 가장 효과가 높은 것으로 입증된 세이지, 카모마일, 라벤더의 천연 추출물을 함유한 본 발명에 의한 화장료 조성물 제형 예를 시험 예 10 이하에 제시하고 있다.

시험 예 10: 아토피 치유 개선 효과 확인 실험

하기 예시 실험예에 의하여 처방하여 세이지, 카모마일, 라벤더의 천연 추출물을 함유한 예시 처방과 그렇지 아니한 처방과 비교하여 입상한 결과를 조사하였으며, 그 실험 예시 처방은 아래와 같으며 처방에 제형 란에 함량을 기재한 것과 그렇지 않은 것으로 구분하여 실시하였다.

<실험예 1> 크림 제형

제형예 조성	제형예 1	제형예 2
밀납 글리세릴스테아레이트 세토스테아레이트 폴리솔베이트 60 솔비탄세스퀴올리에이트 세칠에칠헥사노에이트 스쿠알란 유동파라핀 글리세린 프로필렌글리콜 실시예 11 실시예 16 식물추출물 방부제 색소 향 증류수	2.0 2.5 1.5 0.5 5.0 5.0 8.0 8.0 4.0 5.0 5.0 - 미량 미량 미량 미량 to 100	2.0 2.5 1.5 0.5 5.0 5.0 8.0 8.0 4.0 5.0 - 5.0 미량 미량 미량 미량 to 100

<실험예 2> 영양화장수

제형예 조성	제형예 3	제형예 4
세칠에칠헥사노에이트 세토스테아릴알콜 친유형모노스테아린산스테아레이트 스쿠알란 폴리솔베이트 60 솔비탄세스퀴올리에이트 실시예 11 실시예 16 글리세린 트리에탄올아민 카르복시비닐폴리머 방부제 색소 향 증류수	5.0 1.0 0.8 2.0 1.5 0.5 5.0 - 8.0 0.2 0.2 미량 미량 미량 to 100	5.0 1.0 0.8 2.0 1.5 0.5 - 5.0 8.0 0.2 0.2 미량 미량 미량 to 100

<실험예 3> 유연화장수

제형예 조성	제형예 5	제형예 6
베타인 낫토검 셀룰로오스검 에탄올 폴리옥시에칠렌경화피마자유 초산토코페롤 실시예 11 실시예 16 방부제 색소 증류수	3.0 3.0 0.08 5.0 0.5 0.2 5.0 - 미량 미량 to 100	3.0 3.0 0.08 5.0 0.5 0.2 - 5.0 미량 미량 to 100

<실시예 4> 겔

제형예 조성	제형예 7	제형예 8
디소듐에틸렌디아민테트라아세테이트 에톡시글리콜 폴리아크릴레이트 에탄올 실시예 11 실시예 16 수소첨가피마자유 페닐트리메치콘 트리에탄올아민 향 증류수	0.02 1.00 20.00 30.00 5.0 - 0.80 0.20 0.40 미량 to 100	0.02 1.00 20.00 30.00 - 5.0 0.80 0.20 0.40 미량 to 100

<실험예 5> 분무제

제형예 조성	제형예 9	제형예 10	제형예 11
트리에탄올아민 폴리비닐피롤리돈 / 비닐아세테이트 실시예 3 실시예 6 실시예 9 실시예 12 실시예 15 실시예 16 실시예 10 글리세린 폴리아크릴레이트 증류수	0.2 3.0 5.0 - - - - - - 5.0 0.2 to 100	0.2 3.0 - 5.0 - - - - - 5.0 0.2 to 100	0.2 3.0 - - 5.0 - - - - 5.0 0.2 to 100

상기 처방을 펌프용기에 담아 사용한다.

<실험예 6> 연고

제형예 조성	제형예 12	제형예 13	제형예 14
카프린/카프릴트리글리세리드 액상 파라핀 솔비탄세스퀴올리에이트 옥틸도데세스-25 세칠에칠헥사노에이트 스쿠알란 살리실산 글리세린 솔비톨 실시예 3 실시예 6 실시예 9 증류수	10.0 10.0 6.0 9.0 10.0 1.0 1.0 15.0 10.0 5.0 - - to 100	10.0 10.0 6.0 9.0 10.0 1.0 1.0 15.0 10.0 - 5.0 - to 100	10.0 10.0 6.0 9.0 10.0 1.0 1.0 15.0 10.0 - - 5.0 to 100

<실험예 7> 패치

제형예 조성	제형예 15	제형예 16
폴리비닐알콜 폴리비닐피롤리돈 소듐폴리아크린산 소듐알지네이트 레티닐팔미테이트 부틸렌글리콜 황산콘드로이친 치마버섯추출물 메도폼오일 PEG(20)솔비탄스테아레이트 BHT 산화아연 실시예 11 실시예 15 증류수	2.0 3.0 3.0 1.0 1.0 3.0 1.0 1.0 1.0 1.0 미량 미량 5.0 - to 100	2.0 3.0 3.0 1.0 1.0 3.0 1.0 1.0 1.0 1.0 미량 미량 - 5.0 to 100

상기 처방 예 1~7에 대한 피부 도포 시, 아토피 치유 개선효과를 확인하기 위하여 다음과 같은 실험을 하였다. 5~30세의 아토피 환자로서 2년 이상 아토피 피부염을 앓고 있는 환자 중 20여 명에 대하여 아토피 개선효과를 조사하였다. 동일인에게 왼쪽 손에는 처방 예 1~7의 상기 처방예을 복부 오른쪽 손에는 비교처방 예 1~7의 영양크림을 매일 저녁 세정 후, 피부에 1일 1회 60일간 도포한 후, 아토피 상태 개선을 확인하기 위하여 아토피 상태 개선 정도를 측정하였다.

구분		아토피 상태 개선
처방 예	매우 좋다	15	75.0
	좋다	3	15.0
	보통이다	2	10.0
	그저 그렇다	0	00.0
비교 처방 예	매우 좋다	0	00.0
	좋다	2	10.0
	보통이다	7	35.0
	그저 그렇다	11	55.0

상기 표 21과 같이 상기 세이지, 카모마일, 라벤더 천연 혼합추출물을 첨가하여 제조한 처방 예의 화장료가 비교처방 예 보다 치유 개선 효과가 우수하다는 것을 알 수 있었다. 4주 간의 장기 측정 안면 피부 수분량의 변화를 (도 1)에 나타내었다

Claims (4)

1. 세이지 (sage/Salvia officinalis) 라벤더(Lavender/Lavendula L.) 케모마일(CHAMOMILE/Cha maemelum nobile)를 2~30 : 1~25 : 6~35의 중량비로 혼합하여 추출한 추출물을 함유하는 것을 특징으로 한 아토피 피부에 대하여 치유 개선효과를 가진 화장료
2. 제 1항에 있어서 상기추출물은 세이지 대 라벤더 대 케모마일의 중량비가 1:10:1 또는 1:1:10 또는 10:1:1인 것을 특징으로 하는 세이지, 라벤더, 케모마일을 함유하는 아토피 피부에 대하여 치유 개선 효과를 가지는 화장료 조성물
3. 제 1항에 있어서 상기 추출물은 추출방법으로는 냉각콘덴서가 장치되어 용매가 증발되는 것을 방지한 상태에서 50~95℃, 4~20시간 가열하여 추출하거나 5~37℃에서 1~15일 간 침적시킨 후, 얻어진 것에 대한 것을 특징으로 하는 아토피 피부에 대하여 치유 개선 효과를 가지는 화장료 조성물.
4. 제1항, 제2항, 제3항 중 어느 한 항에 있어서 상기 화장료 조성물은 크림, 영양화장수, 유연화장수, 겔, 분무제, 연고, 패치 중 어느 하나의 제형인 것을 특징으로 하는 아토피 피부에 대하여 치유 개선 효과를 가지는 화장료 조성물.

Images