KR20090121673A - ＩｇＡ 역가를 측정함으로써 돼지의 ＰＥＤＶ에 대한방어능력을 예측하는 방법 및 그를 위한 키트 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 암퇘지를 약독화된 돼지 유행성 설사 바이러스 (PEDV)로 예방접종하는 단계; 상기 예방접종된 암퇘지의 초유 중의 PEDV IgA 역가를 측정하는 단계; 및 상기 측정된 IgA의 역가가 양성으로 판정된 경우, 상기 암퇘지로부터 분만된 새끼 돼지는 PEDV에 대한 방어 능력이 있는 것으로 판단하는 단계;를 포함하는, 새끼 돼지의 PEDV에 대한 방어 능력을 예측하는 방법을 제공한다.
돼지, PEDV, 초유, IgA 역가, 생존율

Description

ＩｇＡ 역가를 측정함으로써 돼지의 ＰＥＤＶ에 대한 방어능력을 예측하는 방법 및 그를 위한 키트{Method for predicting protection against PEDV of pig by measuring IgA titer and a kit for the same}
본 발명은 IgA 역가를 측정함으로써 돼지의 PEDV에 대한 방어능력을 예측하는 방법 및 그를 위한 키트에 관한 것이다.
PED 바이러스 (PEDV)에 의해 야기된 돼지유행성설사는 감염성이며, 돼지에서 매우 전염성 바이러스 질환이다. 상기 바이러스는 코로나바이러스 속 (코로나비리대 과, 니도비랄레(Nidovirales) 목)의 멤버이다 (Debouck, P. & Pensaert, M. (1980). Am J Vet Res 41, 219-223; Ducatelle et al., (1981). Arch Virol 68, 35-44; Wood, E.N. (1977). Vet Rec 100, 243-244). PEDV는 소장의 융모를 덮은 분화된 장세포에서 복제하며, 융모위축 및 불량부착을 야기한다 (Debouck, P. & Pensaert, M. (1980). Am J Vet Res 41, 219-223). PED의 주요하고, 유일한 명백한 임상 신호는 물설사이다. 사망률은 80% 만큼 높을 수 있으나, 평균적으로 50%이다. 1주 이하의 새끼 돼지는 3-4일 후에 탈수로 인해 사망할 수 있다 (Wood, E.N. (1977). Vet Rec 100, 243-244). 신생 돼지는 실제로 글로불린이 부족하므 로, 바이러스 감염에 대해 장관점막을 보호하기 위해 수유 기간 동안 고농도의 글로불린을 포함하는 초유 및 우유를 계속적으로 받아야 한다 (Stone et al., (1997). Am J Vet Res 38, 1285-1288). 혈청중화 (SN) 시험은 PEDV에 대한 돼지 혈청 항체를 검출하기 위해 수의 진단 실험실에서 이용되는 가장 흔한 혈청학적 방법이다. ELISA는 특정 이차 접합물을 이용하여 IgG 또는 IgA를 검출하기 위해 적용된다. 그러나, SN 시험은 IgG, IgM, 및 IgA를 동시에 검출하기 위해 이용될 수 있다 (Oh et al., (2005). J Vet Sci 6, 349-352). 돼지의 초유는 89% IgG, 2.8% IgM, 및 8.4% IgA로 구성된다. 임신한 암퇘지에서 상기 바이러스를 이용한 챌린지에 대해 PEDV DR13 바이러스의 경구 대 근육내 접종의 유효성을 비교하는 최근의 시도 결과가 보고되었다.
한국특허공개 제2004-92760호에는 야생 PEDV인 DR13 주를 베로 세포에서 연속 계대 배양하여 약독화되어 있으면서도 면역원성, 특히 경구 투여에 의한 면역원성이 우수한 약독화된 PEDV DR13 (예, 수탁번호 KCCM-10474인 PEDV)이 개시되어 있다. 세포 적응된 PEDV DR13은 챌린지 후에 사망률을 감소시켰다.
그러나, 이들 선행기술에 의하더라도, 약독화된 PEDV로 예방접종된 돼지의 초유 중의 PEDV IgA 역가가, 초유를 수유 받은 새끼 돼지의 독성 PEDV 챌린지 후에 방어능력에 대한 양호한 마커라는 것은 개시된 바 없다.
본 발명에서 해결하고자 하는 과제는, 초유 중의 IgA 역가가, 초유를 수유 받은 새끼 돼지의 독성 PEDV에 대한 노출에 대해 방어 정도를 판단하는 중요한 변수라는 것을 확인하는 것이다. 또한, SN 역가 및 방어율 사이에 어떤 상관 관계가 없다는 것을 확인하는 것이다.
상기 과제를 해결하기 위해, 본 발명에서는 예방접종된 돼지의 초유 중의 PEDV IgA 역가를 측정함으로써, 새끼 돼지의 PEDV에 대한 방어 능력을 예측하는 방법 및 그를 위한 키트를 제공한다.
본 발명의 방법에 따르면, 예방접종된 돼지의 초유 중의 PEDV IgA 역가를 측정함으로써, 새끼 돼지의 PEDV에 대한 방어능력을 예측할 수 있다. 또한, 본 발명의 키트를 사용하여, 새끼 돼지의 PEDV에 대한 방어능력을 예측할 수 있다.
본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 암퇘지를 약독화된 돼지 유행성 설사 바이러스 (PEDV)로 예방접종하는 단계;
상기 예방접종된 암퇘지의 초유 중의 PEDV IgA 역가를 측정하는 단계; 및
상기 측정된 IgA의 역가가 양성으로 판정된 경우, 상기 암퇘지로부터 분만된 새끼 돼지는 PEDV에 대한 방어 능력이 있는 것으로 판단하는 단계;를 포함하는, 새 끼 돼지의 PEDV에 대한 방어 능력을 예측하는 방법을 제공한다.
본 발명의 방법에 있어서, "약독화된 PEDV"란 감염성은 있으나, 설사, 탈수 및 치사율과 같은 병원성 PEDV의 특성을 보이지 않는 PEDV를 의미한다. 약독화된 바이러스는 복제할 수는 있지만 병원성을 나타내지 않고, 따라서 좀더 장기간 지속되는 면역을 제공하고 좀더 확대된 보호를 가능하게 한다. 예를 들면, 상기 약독화된 PEDV는 특히 경구 투여에 의한 면역원성이 우수한 약독화된 PEDV DR13 (예, 수탁번호 KCCM-10474인 PEDV)일 될 수 있다. 상기 약독화된 PEDV는 경구투여된 것일 수 있다.
본 발명의 방법에 있어서, 상기 새끼 돼지는, 일주령 이내, 바람직하게는 1일 내지 7일령의 돼지가 바이러스에 대하여 가장 감수성이 높으며, 감염시 폐사율도 높다.
본 발명의 방법에 있어서, 상기 초유 중의 PEDV IgA 역가는 새끼 돼지의 생존율과 비례하는 것일 수 있다. 실시예 1 및 3, 및 도 2에서 알 수 있는 바와 같이, 경구 예방접종된 돼지의 IgA 역가는 근육 내 예방접종된 돼지의 IgA 역가보다 현저하게 높으며, 새끼 돼지의 생존율은 경구 접종 그룹에서 87.5%인 반면, 근육 내 접종 그룹에서 40%라는 것을 알 수 있다. 즉, 초유 중의 PEDV IgA 역가가 높을수록 새끼 돼지의 생존율은 증가하며, 초유 중의 PEDV IgA 역가가 낮을수록 새끼 돼지의 생존율은 감소하는 것이다. 따라서, 초유 중의 PEDV IgA 역가는 새끼 돼지의 생존율과 비례하는 것이다. 그러나, 도 1에서 알 수 있는 바와 같이, 초유 중의 PEDV IgG의 역가가 높다고 해서 새끼 돼지의 생존율은 크게 증가하지 않는다. 즉, 초유 중의 PEDV IgG의 역가와 새끼 돼지의 생존율은 상관 관계가 거의 없다는 것을 알 수 있다.
마찬가지로, 도 3에서 알 수 있는 바와 같이, 초유 중의 PEDV SN 역가가 높다고 해서 새끼 돼지의 생존율은 크게 증가하지 않는다. 즉, 초유 중의 PEDV SN 역가와 돼지의 생존율은 상관 관계가 거의 없다는 것을 알 수 있다.
또한, 실시예 2 및 도 4에서 알 수 있는 바와 같이, SN 역가 및 IgA 특이적 ELISA 사이에도 어떤 현저한 상관 관계가 존재하지 않는다는 것을 알 수 있다.
본 발명의 방법에 있어서, 상기 초유 중의 PEDV IgA 역가는 ELISA를 통해 측정될 수 있다. ELISA는 항체에 효소를 결합시켜 항원-항체 반응을 확인하는 방법으로, 그 방법이 간단하고 비용이 많이 들지 않으며 다량 분석이 가능하여 현재 가장 널리 쓰이고 있는 항원-항체 분석법의 하나가 되고 있다. 특히 이 방법은 방사능면역시헙법 (RIA, Radio ImmunoAssay)과 같이 매우 민감한 반응이면서도 RIA에서처럼 방사능을 사용하지 않는다는 이점이 있어서 그 사용이 증가하고 있는 방법이다. ELISA에는 직접 ELISA, 간접 ELISA 및 샌드위치 ELISA가 있는데, 직접 ELISA는 항원과 반응하는 항체에 바로 효소를 결합시켜 사용하는 방법을 말한다. 간접 ELISA는 항원과 결합하는 항체 (1차 항체)에는 효소가 없고, 그 항체와 결합하는 항체 (2차 항체)에 효소가 결합되어 있는 분석방법을 말한다. 샌드위치 ELISA는 항원이 플레이트에 잘 결합하도록, 항원에 대한 항체를 먼저 플레이트에 결합시키고, 그 항체에 항원을 결합시킨 다음, 직접법이나 간접법으로 조사하는 방법이다. 항원의 양이 적을 때 또는 미지의 샘플에 들어 있는 항원을 조사할 때 사용한다. 예를 들면, 상기 ELISA는 PEDV 바이러스 자체를 항원으로 하여 기판 상에 코팅하고, 여기에 초유 시료를 반응시켜 IgA 또는 IgG, 및 IgA 및 IgG 및 IgM 항체를 결합시키고, 결합된 항체를 2차 항체와 결합시킨 다음, 검출하는 과정에 의하여 검출될 수 있다.
본 발명은 또한, 항-돼지 IgA에 대한 항체, 및 PEDV가 코팅된 기판을 갖는 ELISA 플레이트를 포함하는, 암퇘지로부터 분만된 새끼 돼지의 PEDV에 대한 방어 능력을 검출하기 위한 키트를 제공한다.
상기 항-돼지 IgA는 다양한 동물 예를 들면, 토끼, 쥐, 양 등에서 유도된 것일 수 있다. PEDV가 코팅된 기판을 갖는 ELISA 플레이트는 당업계에 알려진 항원 코팅 방법에 의하여 용이하게 제조될 수 있다. 예를 들면, 한국특허공개 제2004-92760호에 기재된 방법이 사용될 수 있다.
상기 키트는 상기 키트를 사용하여 분만한 암퇘지의 초유 시료 중에 IgA 역가가 양성으로 판정되는 경우, 상기 암퇘지로부터 분만된 새끼 돼지는 PEDV에 대한 방어 능력이 있는 것으로 결정한다는 사용지침서를 더 포함하는 것일 수 있다.
이하 본 발명을 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예
재료 및 방법
암퇘지에서 항체 수준의 비교 및 챌린지 후에 새끼 돼지의 방어
돼지 잡종을 본 발명에 이용하였다 (요오크셔 x 랜드레이스 x 듀록). 경상 및 충청 지역에 위치한 상업 농장 유래의 모든 암퇘지는 PEDV 중화 항체에 대해 혈청학적으로 음성이었다. 3개의 PED가 없는 상업 농장 유래의 임신한 암퇘지를 분만 4주 전에, 106.0 TCID50/0.1 ml의 역가로 1 ml DR13 (계대 수준 100) (수탁번호 KCCM-10474)를 이용하여 경구로 (O 그룹: 50마리 암퇘지) 또는 근육내로 (IM 그룹: 50마리 암퇘지) 접종하였다. 동등한 바이러스 역가를 갖는 이차 접종을 2주 후에 투여하였다. 모든 그룹으로부터의 새끼 돼지를 분만 후 48시간 동안 초유 (새끼돼지를 분만하고 어미 돼지의 초유를 48~72시간 동안 급여한 후, 공격접종을 위해서 모돈에서 새끼돼지를 분리하여 실험에 공시하였다)를 또는 우유의 인위적인 공급 없이 (인공유를 공급하지 않고 자연적으로 어미젖을 먹을 수 있도록 함) 이의 모돈과 함께 수용하였다.
초유 시료를 2 또는 3개의 샘으로부터 수동으로 수득하고, 1 IU 옥시토신의 근육내 주사 후에 합하였다. 유장을 SN 및 ELISA 분석에 이용하기 위해 초유 시료로부터 수득하였다. 38마리의 3일령 새끼 돼지를 독성 PEDV에 대한 노출에 의한 챌린지를 위하여, 예방접종된 (O 및 IM) 그룹의 분만 암퇘지로부터 무작위로 선발하였다. 모든 그룹으로부터의 새끼 돼지를 5 ml 야생형 PEDV (바이러스 역가는 측정하지 않음)를 이용하여 경구로 챌린지하였다. 수유 3일령 돼지를, 3일령 돼지에 서 100% 사망률을 야기한 투여량인 5 ml 독성 PEDV를 이용한 챌린지 전 1시간에 암퇘지로부터 제거하였다. 각 그룹으로부터의 새끼 돼지를 환경적으로 조절된 건물의 1.3 m x 1.3 m (1.69m2) 우리에 수용하고, 대용 우유를 공급하였다. 설사 및 사망률의 임상 신호를 YANGSUNG Laboratory Animal Inc (용인, 한국)가 공급한 3일령의 챌린지 및 대조군 새끼 돼지 (요오크셔 x 랜드레이스 x 듀록) (PEDV에 대해 혈청음성, 1 SN 시험 ≤2)에서 10일 동안 관찰하였다.
모든 동물 실험은 한국의 현행법에 따랐다. 동물 보호 및 처리는 서울대학교 실험동물관리위원회에 의해 확립된 가이드라인에 따라 수행하였다.
상업 농장으로부터 항체 반응을 평가하기 위한 초유의 수집
231 개 초유 시료를 SN 역가 및 IgA의 S/P 비율의 비교를 위해 16개 상업 농장으로부터 수집하였다. 총 746가지 초유 시료를 65개 상업 농장 (경구 그룹: 28개 농장, IM: 28개 농장, 대조군: 9개 농장)으로부터 IgA ELISA 역가를 평가하기 위해 수득하였다. 예방접종 기록 및 이력을 양돈전문수의사에 의해 제공받았다.
혈청중화 (SN) 시험
SN 시험을 이전에 공개된 방법을 일부 변형하여 수행하였다. 초유를 96-웰 플레이트에 2배부터 64배까지 희석하였다. 그 후, PED 바이러스를 200TCID50/0.1ml 농도로 37℃에서 30분 반응시켰다. 상기 바이러스와 초유 혼합체를 베로 세포가 단 층으로 깔려있는 플레이트에 옮겨주고 1시간 반응시킨 후, 인산완충식염수로 세척하였다. 2㎍/ml의 트립신이 함유된 DMEM 배지를 200㎕ 넣어주고 3~4일간 CO2 인큐베이터에 배양하면서 세포 변성효과를 방해한 최대의 배율이 나오는 농도까지 항체가를 확인하였다. 과다면역 PEDV 기준 혈청을 1 ml의 PEDV (KPEDV-9 균주) (105.5 TCID50/0.1ml)로 접종된 무항체 및 PEDV 없는 2주령 돼지로부터 제조하고, 접종 후 4주에 수집하였다. 음성 기준 혈청을 2주령의 모방 감염된 돼지로부터 부가적으로 수득하였다. 간단하게, 돼지 혈청을 56℃에서 30분 동안 불활성화시키고, 사용시까지 -20℃에 저장하였다. 2배 희석 후에, 혈청을 동일 부피의 PEDV (200 TCID50/0.1㎖)와 혼합하고, 37℃에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 이어서, 0.1 ㎖의 각각의 바이러스-혈청 혼합물을 PBS로 2회 세정한 96-웰 조직 배양 플레이트의 베로 세포 단층에 옮겼다. 37℃에서 1시간 동안 흡착 후에, 접종물을 버리고, PBS로 2회 세정하였다. 트립신 (2 ㎍/㎖)을 포함하는 유지 배지를 각 웰에 첨가하고, 플레이트를 37℃에서 5일 동안 인큐베이션하였다. SN 역가를 세포변성효과 (CPE) 저해를 초래하는 가장 높은 혈청 희석의 역수로서 표시하였다.
ELISA
항원으로서, PEDV를 이전에 기재된 방법을 일부 변형하여 제조하였다. 간단하게, 항원 및 이차 항체 희석액을 음성 돼지 혈청을 이용하여 광학밀도 (OD)가 약 0.1(A405)로 조절하였다. 96-웰 마이크로플레이트 (Costar)의 각 웰을 5℃에서 밤새 50 mM 카보네이트 완충액 (pH 9.6) 중의 0.1㎍ 단백질로 코팅한 후, 5% 토끼 혈청 및 3% 젤라틴으로 37℃에서 블로킹하였다. 0.05% Tween-20을 포함하는 PBS (PBST) 중의 초유 (1/100 희석) 및 음성 돼지 초유 (항원 농도를 조절하기 위해 이용함)를 37℃에서 1시간 동안 반응시키고, PBST로 5회 세정하였다. 양성 및 음성 돼지 혈청을 이전에 기재된 바와 같이 수집하였다 (상기 혈청중화 시험방법에 제시된 양성 및 음성 대조군 수집 방법과 동일하다). 반응한 플레이트를 유사한 조건하에 재세정하고, 37℃에서 1시간 동안 각각 10,000배 및 2000배 희석된 호스래디쉬 퍼옥시다아제 (HRP)-표지된 항-돼지 IgG 및 IgA (KPL)와 인큐베이션하였다. 상기 플레이트를 실온에서 20분 동안 ABTS 기질 (KPL)에서 현상하였다. 반응을 405 nm에서 OD 측정 전에 2M H2SO4 를 이용하여 종료시켰다. S/P 비를 하기 식을 이용하여 ELISA 역가의 표시에 이용하였다:
S/P 비= (시료의 OD - 음성 시료의 OD)/(양성 시료의 OD - 음성 시료의 OD).
면역반응 결과의 통계학적 분석
모든 면역반응 데이타 (ELISA & SN 시험)를 S/P 비 또는 log2로 전환하였다. SPSS 버전 12.0 소프트웨어를 이용한 one-way ANOVA를 복수 비교를 위해 이용하였으며, p<0.05 값을 통계학적으로 유의한 것으로 고려하였다.
실시예 1: 임신한 암퇘지에서 PEDV에 대한 항체 반응
IgG 특이적인 ELISA (도 1) 및 SN 역가 (도 3) 결과는 경구 및 IM 그룹 사이에 초유 시료로부터 수득된 S/P 비 사이에 유의차를 나타내지 않았다. 그러나, 예방접종된 그룹 및 대조군 사이의 S/P 비의 차이는 현저하였다 (p<0.01). IgA 특이적인 ELISA에서, 초유 시료의 S/P 비 (도 2)는 경구 및 IM 그룹 사이에 현저하게 상이하였다 (p<0.01). 이는 분만한 암퇘지의 초유 중의 IgA를 검출함으로써, 경구 및 IM 그룹 사이를 구분할 수 있다는 것을 의미한다. 따라서, 하기하는 실시예 3에 의하면, 경구 그룹의 경우, 암퇘지로부터 분만된 돼지를 PEDV로부터 방어할 수 있으나, IM 그룹의 경우 그 효과가 적은 것으로 나타났으므로, IgA를 측정함으로써, 상기 암퇘지로부터 분만된 새끼 돼지의 PEDV에 대한 방어능력을 예측할 수 있다는 것을 의미한다. 반면, IgG 및 중화 항체 역가를 측정하여서는, 암퇘지로부터 분만된 새끼 돼지의 PEDV에 대한 방어능력을 예측할 수 없다는 것을 의미한다.
도 1은 IgG 특이적 ELISA를 이용하여 약독화된 DR13 균주로 접종된 임신한 암퇘지의 초유 중의 IgG 농도를 나타내는 도면이다.
도 2는 IgA 특이적 ELISA를 이용하여 약독화된 DR13 균주로 접종된 임신한 암퇘지의 초유 중의 IgA의 농도를 나타내는 도면이다.
도 3은 SN 시험을 이용하여 약독화된 DR13 균주로 접종된 임신한 암퇘지의 초유 중의 항체 농도를 나타내는 도면이다.
도 1, 2 및 5에서, S/P는 PEDV 감염된 암퇘지의 초유에 대한 시료군 암퇘지 초유에 대한 ELISA 신호(A405nm)의 비를 나타내는 것이다. 즉 PEDV 감염 양성군에 대한 시료군의 비를 나타내는 것으로, 이것이 높을수록 해당 항체 역가가 높다는 것은 나타낸다. 도 2에서, IgA의 경우, S/P 값은 IgG에 비하여 상대적으로 적은데, 이는 IgA의 생성 유도는 상대적으로 잘 되지 않기 때문에, 양성 대조군으로 사용된 암퇘지는 아주 심각한 상태의 암퇘지를 사용하여야 하였기 때문이다.
실시예 2: SN 역가 및 IgA 특이적 ELISA 사이의 상관 관계
도 4는 IgA ELISA의 S/P 비 및 SN 역가 사이의 상관 관계를 보여준다. 도 4에 나타낸 바와 같이, 예방접종된 암퇘지로부터 채취된 231개 초유 시료로부터 측정된 IgA ELISA 값의 S/P 비와 SN 역가 사이에는 어떠한 상관 관계도 명백하지 않았다 (R2=0.1105) (도 4). 이는 혈청 중화 역가를 측정하더라도, 새끼 돼지가 PEDV로부터 방어될 수 있는지 여부는 알 수 없다는 것을 나타낸다.
실시예 3: 방어에 대한 컷오프 값
야생형 PEDV를 이용한 챌린지 후에 새끼 돼지의 생존율은 대조군에서 0% (0/14)인 것에 비교하여, 경구 접종 그룹에서 87.5% (20/23)이었다. 대조적으로, IM 접종 그룹은 40% (6/15)의 생존율을 나타내었다. 경구 접종된 그룹 (50마리 암퇘지)의 초유의 IgA ELISA 측정값의 S/P 비를 평가하고, 평균+3SD 값을 87.5% 생존율을 표시하기 위한 컷오프 값으로서 이용하였다. 챌린지 후에 평가된 새끼 돼지의 상기 87.5% 생존율은 방어 마커로서 이용하였다. 0.370 A405 값 (평균+3SD)을 돼지 항- PEDV IgA 분석에 대한 임시적인 컷오프 값으로서 이용하였다. 도 5는 PEDV 바이러스의 경구, IM, 및 모방 접종 후 초유로부터 IgA ELISA 역가의 S/P 비를 나타내는 도면이다. 도 5는 65개의 상업적 농장 (이들 중 28개 농장은 경구 예방접종 군이고, 29개 농장은 근육 내 예방접종 (IM) 군이고, 9개 농장은 대조군임)으로부터 746개 초유 시료에 대하여 IgA ELISA 역가 분석을 한 결과를 나타내는 것이다. 도5에 나타낸 바와 같이, IgA의 역가를 측정함으로써, 실제 야생형 PEDV를 암퇘지의 초유를 수유받은 새끼 돼지에 챌리지한 결과와 유의한 상관관계가 있다는 것을 알 수 있다.
도 1은 IgG 특이적 ELISA를 이용하여 약독화된 DR13 균주로 접종된 임신한 암퇘지의 초유 중의 IgG 농도를 보여준다.
도 2는 IgA 특이적 ELISA를 이용하여 약독화된 DR13 균주로 접종된 임신한 암퇘지의 초유 중의 IgA의 농도를 보여준다.
도 3은 SN 시험을 이용하여 약독화된 DR13 균주로 접종된 임신한 암퇘지의 초유 중의 항체 농도를 보여준다.
도 4는 IgA ELISA의 S/P 비 및 SN 역가 사이의 상관 관계를 보여준다.
도 5는 바이러스의 경구, IM, 및 모방 접종 후 초유로부터 IgA 역가의 S/P 비를 보여준다.

Claims (7)

  1. 암퇘지를 약독화된 돼지 유행성 설사 바이러스 (PEDV)로 예방접종하는 단계;
    상기 예방접종된 암퇘지의 초유 중의 PEDV IgA 역가를 측정하는 단계; 및
    상기 측정된 IgA의 역가가 양성으로 판정된 경우, 상기 암퇘지로부터 분만된 새끼 돼지는 PEDV에 대한 방어 능력이 있는 것으로 판단하는 단계;를 포함하는, 새끼 돼지의 PEDV에 대한 방어 능력을 예측하는 방법.
  2. 제1항에 있어서, 상기 새끼 돼지는 7일령 이내 새끼 돼지인 것을 특징으로 하는 방법.
  3. 제1항에 있어서, 상기 초유 중의 PEDV IgA 역가는 돼지의 생존율과 비례하는 것을 특징으로 하는 방법.
  4. 제1항에 있어서, 상기 초유 중의 PEDV IgA 역가는 ELISA를 통해 측정되는 것을 특징으로 하는 방법.
  5. 제1항에 있어서, 상기 PEDV는 경구를 통하여 예방접종된 것인 방법.
  6. 항-돼지 IgA에 대한 항체, 및 PEDV가 코팅된 기판을 갖는 ELISA 플레이트를 포함하는, 암퇘지로부터 분만된 새끼 돼지의 PEDV에 대한 방어 능력을 검출하기 위한 키트.
  7. 제6항에 있어서, 상기 키트는 상기 키트를 사용하여 분만한 암퇘지의 초유 시료 중에 IgA 역가가 양성으로 판정되는 경우, 상기 암퇘지로부터 분만된 새끼 돼지는 PEDV에 대한 방어 능력이 있는 것으로 결정한다는 사용지침서를 더 포함하는 것인, 키트.
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