KR20090098425A - Composition comprising placenta extract as an effective component for improving gastrointestinal disease - Google Patents

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Abstract

A composition for treating gastric disorder, which contains placental extract as an active ingredient is provided to suppress the colony formation of Helicobacter pylori. A composition for treating gastric disorder comprises a placental extract as an active ingredient. A method for manufacturing the placental extract comprises: a step of pulverizing placenta in the sized of 2~5 mm; a step of adding lipase and water to react the placenta at 39~45°C for five to ten hours; a step of adding emulsifier and collecting suspension; a step of adding water and protease and collecting at 28~40°C for 12~20 hours; and a step of mixing suspension.

Description

태반 추출물을 유효성분으로 함유하는 위장 질환 개선용 조성물 {Composition comprising Placenta extract as an effective component for improving gastrointestinal disease}Composition comprising Placenta extract as an effective component for improving gastrointestinal disease}

본 발명은 태반 추출물을 유효성분으로 함유하는 위장 질환 개선용 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a composition for improving gastrointestinal diseases containing placenta extract as an active ingredient.

위염(gastritis) 및 위궤양(gastric ulcer)은 위산과 펩신의 작용으로 상부 소화관이 손상을 받아 발생한 결손이 위점막근층 이하까지 침범한 상태를 말한다. 이러한 위염 및 위궤양은 세계적으로 발생 빈도가 높은 질환 중의 하나로 미국 성인 인구의 반 이상과 우리나라를 비롯한 많은 개발 도상 국가 성인의 90% 이상이 H. pylori에 감염되어 있다고 알려져 있다 (Scrip, 1993, 1820, 18). Gastritis and gastric ulcer refers to a condition in which the defects caused by damage to the upper digestive tract due to the action of gastric acid and pepsin invade below the gastric mucosal layer. Gastritis and gastric ulcers are one of the most common diseases in the world, and more than half of the US adult population and 90% of adults in many developing countries, including Korea, are infected with H. pylori (Scrip, 1993, 1820, 18).

이 질환의 특징은 급성인 경우 궤양 발생 후 정신적, 육체적 안정, 식이요법, 약물요법 등으로 치료될 수 있으나, 일정기간 내에 재발될 확률이 높으므로 완치된다고 할 수 없으며 만성궤양으로 진행되어 위장관의 출혈, 유문부 협착, 천공 등의 합병증을 나타내기도 한다(Jeen,Y.T. 와 Hyun,J.H. 1991). 위염 및 위궤양은 한 가지 원인에 의해 발생하는 것이 아니고 여러 가지 인자들이 복합적으로 작용한다. 1963년 Shay와 Sun (Shay 등,1945)은 위점막 손상은 공격 인자와 방어 인자의 균형이 깨어짐으로써 야기된다고 주장하여 현재까지 이 “Balance theory"가 받아들여지고 있다. 또한 1983년의 Dr. Warren과 Marshall에 의해 Helicobacter pylori(H. pylori)가 분리 동정됨에 따라 위염, 위궤양 및 십이지장궤양의 병태생리에 대한 새로운 사실이 밝혀지게 되었다.This disease is characterized by acute and ulceration, which can be treated with mental and physical stability, diet, medication, etc., but it is not likely to be cured because of the high probability of recurrence within a certain period of time. , Complications such as pyloric stenosis and perforation (Jeen, YT and Hyun, JH 1991). Gastritis and gastric ulcers are not caused by one cause, but a combination of factors. Shay and Sun (Shay et al., 1945) in 1963 argued that gastric mucosal damage is caused by a breakdown of attack and defense factors, and this "Balance theory" has been accepted to date. The identification of Helicobacter pylori (H. pylori) by Marshall has led to new findings on the pathophysiology of gastritis, gastric ulcer and duodenal ulcer.

과거의 항궤양제 연구는 주로 공격 인자를 억제하는 약리작용을 중심으로 이루어져 왔으나 위궤양을 염산의 생산과 분비만을 조절하여 치료하였을 경우에는 재발빈도가 높기 때문에 위궤양의 완전한 치료를 위해서는 새로운 약물의 개발이 요구된다. 최근 소화성궤양의 병인성 인자로 Helicobacter pylori라는 그람음성간균이 지목되고 있으며 이 병원성 미생물은 neutrophil을 매개하여 활성 산소 라디칼을 생성하고 이때 강력한 활성을 지닌 hydroxyl radical이 소화관 조직의 점막 세포를 공격하여 막의 과산화지질을 생성하게 함으로써 조직 손상이 야기된다는 사실이 새로이 밝혀졌다. In the past, anti-ulcer drugs have been mainly focused on pharmacological action that inhibits attack factors, but when gastric ulcers are treated only by controlling the production and secretion of hydrochloric acid, the recurrence rate is high. Required. Helicobacter as a Pathogen of Recent Peptic Ulcer Disease Gram-negative bacillus called pylori is pointed out, and pathogenic microorganisms generate free radicals through neutrophils, and the highly active hydroxyl radicals attack the mucosal cells of digestive tract tissues to produce lipid peroxide of the tissue, causing tissue damage. It turns out that it is new.

한편, 태반은 필수 아미노산, 멜라토닌, RNA, DNA 등의 핵산 성분, 항산화 효소인 SOD(Super Oxide Dismutase), 히알루론산(Hyaluronic acid), 항산화제, 면역보조인자(cytokine), 태반펩타이드, 인슐린유사성장촉진인자(insulin-like-growth factor), 표피성장촉진인자(EGF, Epidermal Growth Factors) 및 독특한 노 쇠세포활성인자(SCAF, Senescent Cell Acdivating Factors) 등의 성장인자와 사이토카인 류가 포함되어 있어 피로회복, 면역증강 등에 유용한 것으로 알려져 건강기능식품 원료로 주목받고 있다. Placenta, on the other hand, nucleic acid components such as essential amino acids, melatonin, RNA, DNA, antioxidants, SOD (Super Oxide Dismutase), hyaluronic acid (Hyaluronic acid), antioxidants, immune cofactors (cytokine), placental peptide, insulin-like growth It contains growth factors and cytokines such as insulin-like-growth factor, epidermal growth factors (EGF), and unique senescent cell activating factors (SCAF). It is known to be useful for recovery, immunity, etc., and is attracting attention as a raw material for health functional food.

본 발명자 등은 태반 추출물의 유효성분 분석과 함께, 이를 소화기 계통, 특히 위장 질환에 적용시킬 수 알아보기 위하여, in vivo 및 in vitro 시험을 통해 위 기능 개선에 대한 효능을 검증함으로써 태반 추출물의 위장 질환 개선용 용도를 확인하고 본 발명을 완성하였다. The present inventors, along with the analysis of the active ingredient of the placenta extract, in order to find out whether it can be applied to the digestive system, especially gastrointestinal diseases, intestinal gastrointestinal diseases by verifying the efficacy of gastric function improvement through in vivo and in vitro tests The use for improvement was confirmed and the present invention was completed.

본 발명의 목적은 태반 추출물을 유효성분으로 함유하는 위장 질환 개선용 조성물을 제시함으로써 태반 추출물의 새로운 용도를 제공하는 것이다.An object of the present invention is to provide a new use of the placenta extract by presenting a composition for improving gastrointestinal diseases containing the placenta extract as an active ingredient.

또한, 본 발명의 목적은 상기 조성물을 포함하는 위장 질환 개선용 건강식품 및 약학 조성물을 제공하는 것이다. In addition, an object of the present invention is to provide a health food and pharmaceutical composition for improving gastrointestinal diseases comprising the composition.

상기 목적을 달성하기 위하여, In order to achieve the above object,

본 발명의 일 측면에 따르면,According to one aspect of the invention,

태반 추출물을 유효성분으로 함유하는 위장 질환 개선용 조성물을 제시할 수 있다. It can provide a composition for improving gastrointestinal diseases containing placenta extract as an active ingredient.

또한, 본 발명의 다른 일 측면에 따르면, 상기 조성물을 포함하는 위장 질환 개선용 약학 조성물을 제시할 수 있다. In addition, according to another aspect of the present invention, it is possible to provide a pharmaceutical composition for improving gastrointestinal disease comprising the composition.

아울러, 본 발명의 또 다른 일 측면에 따르면, 상기 조성물을 포함하는 위장 질환 개선용 건강식품을 제시할 수 있다. In addition, according to another aspect of the present invention, it is possible to present a health food for improving gastrointestinal disease comprising the composition.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다. Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명의 태반 추출물의 태반 원료로서는 사람, 양, 소, 개, 돼지 등 포유류의 태반이면 크게 제한되지 않지만, 바람직하게는 돼지 태반을 사용할 수 있다. 돼지 태반은 회수가 용이하고 많은 양을 확보할 수 있는 장점이 있을 뿐만 아니라, 포유류의 태반 중에서도 인태반의 분자 구조와 놀라울 정도로 흡사한 것으로 밝혀졌기 때문이다. The placenta raw material of the placenta extract of the present invention is not particularly limited as long as it is a placenta of mammals such as humans, sheep, cows, dogs, and pigs, but preferably, pig placenta can be used. Porcine placenta not only has the advantages of easy recovery and large amounts, but also has been found to be surprisingly similar to the molecular structure of placenta among mammalian placenta.

본 발명의 태반 추출물을 제조하기 위해서는, 우선 태반을 수거하여야 하는데, 구체적으로 수의사의 검증을 거친 돼지의 정상 태반을 냉동고(-20℃ 이하)에 입고시켜 수거한다. 상기 냉동된 태반을 톱밥 크기(2 내지 5 mm)로 파쇄하여 세척기에 넣고 소금물로 세척한 후 탈수한다. 냉동된 태반을 그대로 사용하지 않고, 해동한 후 세절하여 사용하면 후속 공정에서 오염 문제가 발생할 수 있어 바람직하지 않다. In order to prepare the placenta extract of the present invention, the placenta must first be collected, and in particular, the normal placenta of swine, which has been verified by a veterinarian, is collected in a freezer (-20 ° C. or lower) and collected. The frozen placenta is crushed into sawdust size (2 to 5 mm), put in a washing machine, washed with brine and dehydrated. It is not preferable to use frozen placenta as it is, and to use it after thawing and then use it in a subsequent process to cause contamination problems in subsequent processes.

이어, 상기 세척하여 탈수된 돼지 태반 20 내지 30 중량%에 리파아제 1 내지 5 중량% 및 잔량의 정제수를 넣어 39 내지 45℃에서 5 내지 10시간, 바람직하게는 7 내지 8시간 동안 지질 분해 반응시킨다.Then, 1 to 5% by weight of lipase and the remaining amount of purified water are added to 20 to 30% by weight of the dehydrated pig placenta, followed by lipolysis reaction at 39 to 45 ° C. for 5 to 10 hours, preferably 7 to 8 hours.

상기 태반 함량 및 리파아제 함량의 범위는 지질분해 효율의 측면에서 바람직한 범위로 선택되었다. 상기 반응 시간과 온도는 지질분해효율 및 단가를 고려하여 바람직한 범위로 선택되었다. The range of placental content and lipase content was chosen as the preferred range in terms of lipolysis efficiency. The reaction time and temperature were selected in the preferred range in consideration of lipolysis efficiency and unit cost.

상기 지질 분해 반응 후에는 식물성 유화제를 1 내지 5 중량%, 바람직하게는 2 중량% 첨가하여 1.5 내지 3시간 교반시킨 후 상등액(이하, '상등액 1'이라 칭함) 과 태반 잔사물을 분리한다.After the lipolysis reaction, 1 to 5% by weight, preferably 2% by weight of vegetable emulsifier is added and stirred for 1.5 to 3 hours, and then the supernatant (hereinafter referred to as 'supernatant 1') and the placental residue are separated.

이어 상기 태반 잔사물 30 내지 40 중량%에 단백분해효소 0.5 내지 5 중량% 및 잔량의 물을 첨가하여 28 내지 40℃에서 12 내지 20시간, 바람직하게는 15 내지 17시간 반응시킨다. 상기 단백분해효소는 미생물, 식물 또는 동물에서 유래한 것으로, 크게 제한은 없으나, 파파인이 바람직하다. Subsequently, 0.5 to 5% by weight of protease and the remaining amount of water are added to 30 to 40% by weight of the placental residue and reacted at 28 to 40 ° C for 12 to 20 hours, preferably 15 to 17 hours. The protease is derived from a microorganism, a plant or an animal, and is not particularly limited, but papain is preferred.

상기 태반 잔사물 함량 및 단백분해효소 함량의 범위는 가수분해 효율을 고려하여 바람직한 범위로 선택되었다. 상기 가수분해반응은 12 내지 20 시간, 바람직하게는 15 내지 17시간 반응시키는 것이 좋다. 12시간 미만으로 반응시키는 경우에는 가수분해 반응이 충분히 일어나지 않으며, 20시간 초과하여 반응시키는 경우에는 원하는 가수분해 효율에 필요한 시간 이상이 되어 생산 단가가 높아져 비경제적이다. The range of placental residue content and protease content was selected as a preferred range in consideration of hydrolysis efficiency. The hydrolysis reaction is carried out for 12 to 20 hours, preferably 15 to 17 hours. When the reaction is carried out for less than 12 hours, the hydrolysis reaction does not occur sufficiently. When the reaction is carried out for more than 20 hours, it is more than the time required for the desired hydrolysis efficiency, resulting in high production cost, which is uneconomical.

상기 반응 온도는 28 내지 40℃가 바람직하며, 30 내지 35℃가 보다 바람직하다. 28℃ 미만으로 반응시키는 경우에는 가수분해 반응이 제대로 일어나지 않을 수 있고, 40℃ 초과하는 경우에는 효소가 불활성화될 수 있다. 28-40 degreeC is preferable and, as for the said reaction temperature, 30-35 degreeC is more preferable. In the case of reacting below 28 ° C, the hydrolysis reaction may not occur properly, and in excess of 40 ° C, the enzyme may be inactivated.

상기 가수분해반응 산물을 원심분리하여 상등액(이하, '상등액 2'라 칭함)을 회수하고 상등액 1과 상등액 2를 혼합하여 본 발명의 돼지 태반 추출물을 제조한다. The hydrolysis reaction product is centrifuged to recover the supernatant (hereinafter referred to as 'supernatant 2'), and the supernatant 1 and the supernatant 2 are mixed to prepare the pig placenta extract of the present invention.

본 발명의 태반 추출물은, 상등액 1 및 2의 혼합 이후 85 내지 100℃로 가열함으로써 가수분해 반응을 종결시키는 과정을 더 포함할 수 있다. 이 과정은 예를 들어, 95℃에서 30분간 수행될 수 있다. The placental extract of the present invention may further include a process of terminating the hydrolysis reaction by heating to 85 to 100 ° C. after mixing the supernatants 1 and 2. This process can be carried out, for example, at 95 ° C. for 30 minutes.

또한, 활성탄을 첨가하여 교반시킴으로써 냄새를 제거할 수도 있고, 필터를 이용한 여과 과정을 거칠 수도 있으며 식용안정제인 트레할로스를 투입하여 반응물의 안정을 꾀할 수도 있다. 이들 공정들은 선택 또는 조합하여 행하는 것이 가능하다. In addition, the odor may be removed by adding and stirring activated carbon, may be subjected to a filtration process using a filter, and the reaction product may be stabilized by adding trehalose, an edible stabilizer. These processes can be performed by selecting or combining.

여과 과정에서는 0.1 내지 10 ㎛ 필터를 사용하여 1회 이상 여과를 수행하는 것이 바람직하다. 필터의 기공 사이즈가 0.1 ㎛ 미만인 경우에는 필터가 초정밀하여 초고가이므로(한외여과) 경제성이 떨어지는 문제가 있고, 10 ㎛를 초과하는 경우는 최종 산물에 부유물이 생겨 상품성이 현저히 떨어지는 문제가 있다. In the filtration process, it is preferable to perform filtration one or more times using a 0.1 to 10 μm filter. If the pore size of the filter is less than 0.1 μm, the filter is very precise and extremely expensive (ultrafiltration), and thus, the economy is inferior. If the pore size is more than 10 μm, there is a problem in that a float is formed in the final product and the product quality is significantly decreased.

상기 여과를 통해 얻어진 본 발명의 태반 추출물은 질소 총량을 재고, 아미노산 분석을 실시하였다. 표 1에 그 결과를 나타내었다. Placenta extract of the present invention obtained through the filtration was carried out for amino acid analysis by weighing the total amount of nitrogen. Table 1 shows the results.

완제품을 생산하기 위해서는 본 발명의 추출물을 병에 충진하기 위해 용기를 200℃에서 2시간 멸균하고 멸균된 용기에 본 발명의 추출물을 충진한 뒤, 121℃에서 15분간 고압증기멸균을 수행하여 포장할 수 있다. To produce the finished product, the container is sterilized at 200 ° C. for 2 hours to fill the extract of the present invention in a bottle, and the sterilized container is filled with the extract of the present invention, followed by high-pressure steam sterilization at 121 ° C. for 15 minutes. Can be.

본 발명의 태반 추출물은 예를 들어,Placenta extract of the present invention is, for example,

i) 냉동된 돼지 태반을 2~5 mm 크기로 파쇄하는 단계;i) crushing the frozen pig placenta to 2-5 mm in size;

ii) 상기 파쇄된 돼지 태반에 물 및 리파아제를 첨가하여 39 내지 45℃에서 5 내지 10시간 반응시키는 단계;ii) adding water and lipase to the crushed pig placenta and reacting at 39 to 45 ° C. for 5 to 10 hours;

iii) 단계 ii)의 반응액에 유화제를 첨가한 뒤 교반하여 상등액을 회수하는 단계;iii) recovering the supernatant by adding an emulsifier to the reaction solution of step ii) and then stirring;

iv) 단계 iii)의 잔사물에 단백분해효소와 물을 첨가하여 28 내지 40℃에서 12 내지 20시간 반응시켜 상등액을 회수하는 단계; 및iv) recovering the supernatant by adding protease and water to the residue of step iii) for 12 to 20 hours at 28 to 40 ° C; And

v) 단계 iii)과 iv)의 상등액을 혼합하는 단계를 포함하는 제조방법에 의하여 제조될 수 있다. v) can be prepared by a manufacturing method comprising the step of mixing the supernatant of steps iii) and iv).

본 발명자 등은 이와 같이 제조된 태반 추출물의 위장 질환 개선 효과를 검증하고자 하였다. The present inventors tried to verify the gastrointestinal disease improvement effect of the prepared placenta extract.

위염(gastritis) 및 위궤양(gastric ulcer)은 위산과 펩신의 작용으로 상부 소화관이 손상을 받아 발생한 결손이 위점막근층 이하까지 침범한 상태를 말한다. 과거의 항궤양제 연구는 주로 공격 인자를 억제하는 약리작용을 중심으로 이루어져 왔으나 위궤양을 염산의 생산과 분비만을 조절하여 치료하였을 경우에는 재발빈도가 높기 때문에 위궤양의 완전한 치료를 위해서는 새로운 약물의 개발이 요구된다. 최근 소화성 궤양의 병인성 인자로 헬리코박터 파일로리(Helicobacter pylori)라는 그람 음성 간균이 지목되고 있다. Gastritis and gastric ulcer refers to a condition in which the defects caused by damage to the upper digestive tract due to the action of gastric acid and pepsin invade below the gastric mucosal layer. In the past, anti-ulcer drugs have been mainly focused on pharmacological action that inhibits attack factors, but when gastric ulcers are treated only by controlling the production and secretion of hydrochloric acid, the recurrence rate is high. Required. Recently, a Gram-negative bacillus called Helicobacter pylori has been pointed out as a pathogenic factor of peptic ulcer disease.

본 발명자들은 본 발명의 돼지 태반 추출물을 위염, 위궤양과 같은 위장 질환에 적용시킬 수 있는지 알아보기 위하여 in vitro 상에서 제산력 시험, 헬리코박터 파일로리 균에 대한 콜로니 형성 억제능 시험을 수행하였다. The inventors performed an antacid test, colony formation inhibitory test against Helicobacter pylori bacteria in vitro to determine whether the pig placenta extract of the present invention can be applied to gastrointestinal diseases such as gastritis and gastric ulcer.

제산력 시험에서 검체들의 pH 변화는 위염과 같은 상태의 위액을 제조하여 시료를 가하고 처리한 후 측정한 NaOH 소비량으로 결정하였는데, 여기서 본 발명의 돼지 태반 추출물은 50%의 억제력을 갖고 있음을 확인하였다(표 3). 처리 방식의 변화에 따른 시료(실시예 2 내지 4)의 테스트 결과 각각 19.8, 12.5, 21.2%의 제산력이 있음이 확인되었다. 이는 본 발명의 태반 추출물이 위산을 중화시키는 능력을 갖고 있음을 의미한다. In the antacid test, the pH change of the samples was determined by the NaOH consumption measured after preparing and treating gastric juice in the same state as gastritis, wherein the placental placenta extract of the present invention was found to have 50% inhibitory power. (Table 3). As a result of the test of the samples (Examples 2 to 4) according to the change in the treatment method, it was confirmed that there were antacids of 19.8, 12.5, and 21.2%, respectively. This means that the placental extract of the present invention has the ability to neutralize stomach acid.

검체 모두에 대해 10, 50, 100 μg/mL의 농도로 항균실험을 실시한 결과, 50 μg/mL까지는 콜로니의 수가 감소되었고 100 ug/mL의 농도에서는 콜로니의 생성이 완전히 억제된 것을 확인할 수 있었다(표 4).Antimicrobial experiments were conducted at 10, 50, and 100 μg / mL concentrations on all samples, indicating that the number of colonies was reduced up to 50 μg / mL and that colony production was completely inhibited at 100 ug / mL. Table 4).

따라서, 본원 발명의 태반 추출물은 위산을 효과적으로 억제하고, 위 궤양의 일 요인인 헬리코박터 파일로리 균의 콜로니 형성을 효과적으로 억제함으로서 위염이나 위궤양과 같은 위장 질환의 개선에 유용하게 사용될 수 있다. Therefore, the placental extract of the present invention can be effectively used to improve gastrointestinal diseases such as gastritis and gastric ulcer by effectively inhibiting gastric acid and effectively inhibiting colony formation of Helicobacter pylori, which is a factor of gastric ulcer.

또한, 본 발명의 다른 일 측면에 따르면, 상기 태반추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물을 포함하는 위장 질환 개선용 약학 조성물을 제시할 수 있다. In addition, according to another aspect of the present invention, it is possible to provide a pharmaceutical composition for improving gastrointestinal diseases, including a composition containing the placenta extract as an active ingredient.

본 발명의 조성물은 상기 태반 추출물에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다. 본 발명의 조성물은 상기 태반 추출물에 추가로 다른 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다.The composition of the present invention may contain one or more active ingredients exhibiting the same or similar function in addition to the placenta extract. The composition of the present invention may contain one or more active ingredients exhibiting other functions in addition to the placenta extract.

본 발명의 조성물은, 투여를 위해서 상기 기재한 유효성분 이외에 추가로 약제학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 포함하여 제조할 수 있다. 약제학적으로 허용 가능한 담체는 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 덱스트로즈 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다. 더 나아가 당 분야의 적정한 방법으로 또는 Remington's Pharmaceutical Science(최근판), Mack Publishing Company, Easton PA에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화할 수 있다.The composition of the present invention may be prepared by including one or more pharmaceutically acceptable carriers in addition to the above-described active ingredients for administration. Pharmaceutically acceptable carriers may be used in combination with saline, sterile water, Ringer's solution, buffered saline, dextrose solution, maltodextrin solution, glycerol, ethanol and one or more of these components, if necessary, as antioxidants, buffers And other conventional additives such as bacteriostatic agents can be added. Diluents, dispersants, surfactants, binders and lubricants may also be added in addition to formulate into injectable formulations, pills, capsules, granules or tablets such as aqueous solutions, suspensions, emulsions and the like. Furthermore, it may be preferably formulated according to each disease or component by an appropriate method in the art or using a method disclosed in Remington's Pharmaceutical Science (Recent Edition), Mack Publishing Company, Easton PA.

본 발명의 조성물은 목적하는 방법에 따라 경구 또는 비경구 투여(예를 들어 정맥 내, 피하, 복강 내 또는 국소에 적용)하거나 경구 투여할 수 있으며, 투여량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설율 및 질환의 중증도 등에 따라 그 범위가 다양하다. 일일 투여량은 0.1~10 ㎎/㎏, 바람직하게는 0.1~3㎎/㎏이며, 하루 일회 내지 수회에 나누어 투여하는 것이 더욱 바람직하다.The compositions of the present invention may be administered orally or parenterally (eg, intravenously, subcutaneously, intraperitoneally or topically) or orally, depending on the desired method, and the dosage may be weight, age, sex, health of the patient. The range varies depending on the condition, diet, administration time, administration method, excretion rate and severity of the disease. The daily dosage is 0.1 to 10 mg / kg, preferably 0.1 to 3 mg / kg, and more preferably administered once to several times a day.

본 발명의 태반 추출물을 마우스에 경구 투여시 독성 실험을 수행한 결과, 경구 독성 시험에 의한 50% 치사량(LD50)은 적어도 1g/㎏ 이상인 것으로 나타나 안전한 물질로 판명되었다.When the placenta extract of the present invention was administered orally to mice, 50% lethal dose (LD 50 ) by oral toxicity test was found to be at least 1 g / kg or more, which proved to be a safe substance.

본 발명의 조성물은 위장 질환의 예방 및 치료를 위하여 단독으로, 또는 수술, 방사선 치료, 호르몬 치료, 화학 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.The composition of the present invention may be used alone or in combination with methods using surgery, radiation therapy, hormone therapy, chemotherapy and biological response modifiers for the prevention and treatment of gastrointestinal diseases.

또한, 본 발명의 다른 일 측면에 따르면, 상기 조성물을 포함하는 위장 질환 개선용 건강식품을 제시할 수 있다. In addition, according to another aspect of the present invention, it is possible to present a health food for improving gastrointestinal disease comprising the composition.

본 발명의 조성물은 위장 질환의 개선을 목적으로 건강식품에 첨가될 수 있 다. 본 발명의 태반 추출물을 식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 태반 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에는 본 발명의 추출물이 원료에 대하여 100 중량% 이하, 바람직하게는 50 중량% 이하의 양으로 첨가된다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.The composition of the present invention can be added to health food for the purpose of improving gastrointestinal diseases. When the placenta extract of the present invention is used as a food additive, the placenta extract may be added as it is or may be used together with other food or food ingredients, and may be appropriately used according to a conventional method. The mixed amount of the active ingredient may be suitably determined depending on the purpose of use (prevention, health or therapeutic treatment). Generally, in the preparation of foods or beverages, the extract of the present invention is added in an amount of up to 100% by weight, preferably up to 50% by weight relative to the raw material. However, in the case of long-term intake for health and hygiene or health control, the amount may be below the above range, and the active ingredient may be used in an amount above the above range because there is no problem in terms of safety. .

상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.There is no particular limitation on the kind of food. Examples of the food to which the substance can be added include dairy products including meat, sausage, bread, chocolate, candy, snacks, confectionery, pizza, ramen, other noodles, gums, ice cream, various soups, drinks, tea, drinks, Alcoholic beverages and vitamin complexes, and the like and include all of the health foods in the conventional sense.

본 발명의 건강음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물 의 비율은 본 발명의 조성물 100㎖당 일반적으로 약 0.1~20g, 바람직하게는 약 1~10g 이다.The health beverage composition of the present invention may contain various flavors or natural carbohydrates, etc. as additional components, as in the general beverage. The above-mentioned natural carbohydrates are glucose, monosaccharides such as fructose, disaccharides such as maltose and sucrose, and polysaccharides such as dextrin and cyclodextrin, sugar alcohols such as xylitol, sorbitol and erythritol. As the sweetening agent, natural sweetening agents such as tautin and stevia extract, synthetic sweetening agents such as saccharin and aspartame, and the like can be used. The ratio of the natural carbohydrate is generally about 0.1 to 20 g, preferably about 1 to 10 g per 100 ml of the composition of the present invention.

상기 성분 외에 본 발명의 조성물은 여러가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0.05~50 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.In addition to the above components, the composition of the present invention may contain various nutrients, vitamins, electrolytes, flavors, colorants, pectic acid and salts thereof, alginic acid and salts thereof, organic acids, protective colloidal thickeners, pH regulators, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, And a carbonation agent used for the carbonated beverage. In addition, the composition of the present invention may contain a flesh for preparing natural fruit juice, fruit juice beverage and vegetable beverage. These components can be used independently or in combination. The proportion of such additives is not critical but is usually selected in the range of 0.05 to 50 parts by weight per 100 parts by weight of the composition of the present invention.

상기에서 살펴본 바와 같이, 본 발명의 태반 추출물은 위산과 헬리코박터 파일로리 균의 형성을 효과적으로 억제하여 위장 질환 개선용 약학 조성물이나 건강식품 등의 제조에 유용하게 사용될 수 있다.As described above, the placental extract of the present invention can be effectively used in the manufacture of pharmaceutical compositions or health foods for improving gastrointestinal diseases by effectively inhibiting the formation of gastric acid and Helicobacter pylori bacteria.

이하, 본 발명의 바람직한 실시예를 통해 본 발명의 구성 및 작용을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 다만, 이는 본 발명의 바람직한 예시로 제시된 것이며 어떠한 의미로도 이에 의해 본 발명이 제한되는 것으로 해석될 수는 없다. 여기에 기재 되지 않은 내용은 이 기술 분야에서 숙련된 자이면 충분히 기술적으로 유추할 수 있는 것이므로 그 설명을 생략하기로 한다. Hereinafter, the configuration and operation of the present invention through the preferred embodiment of the present invention will be described in more detail. However, this is presented as a preferred example of the present invention and in no sense can be construed as limiting the present invention. Details that are not described here will be omitted because those skilled in the art can sufficiently infer technically.

실시예Example 1:  One:

냉동된 돼지 태반을 파쇄기(일성2축파쇄기 ISM-410, 일성리싸이클링(주))로 톱밥 크기(2~5 mm)로 파쇄하여 세척기에 넣고 소금물로 세척하였다. 상기 세척하여 탈수된 태반 25 중량%에 리파제 2 중량%(Lot# 18525, 2,000 U/mg, Sigma-Aldrich) 및 물 73 중량%을 첨가하여 43℃에서 8시간 반응시켰다.Frozen pig placenta was crushed into sawdust size (2 ~ 5 mm) with a crusher (Ilsung biaxial crusher ISM-410, Ilsung recycling) and put into a washing machine and washed with brine. 2 wt% of lipase (Lot # 18525, 2,000 U / mg, Sigma-Aldrich) and 73 wt% of water were added to 25 wt% of the dehydrated placenta and reacted at 43 ° C. for 8 hours.

이어, 식물성 유화제(친환경 녹차유화제인 녹차농축액, 영농조합법인 해록)를 2중량% 첨가하여 2시간 동안 65℃에서 교반시켰다. 이것을 원심분리하여 상등액 1과 태반 잔사물을 분리하고, 상기 태반 잔사물 35 중량%에, 파파인(Lot# 1095981, 30 U/mg, Sigma-Aldich) 3중량% 및 62중량%의 물을 첨가하고 35℃에서 16시간 반응시킨 뒤, 원심분리하여 상등액 2를 분리하였다. 상기 상등액 1과 상등액 2를 혼합하여 95℃에서 30분간 가열하고, 65℃에서 0.4%의 활성탄을 넣어 교반하면서 냄새를 제거한 뒤 1 ㎛ 필터 및 0.45 ㎛ 필터를 이용하여 순차적으로 여과하였다. Subsequently, 2% by weight of a vegetable emulsifier (green tea concentrate, an eco-friendly green tea emulsifier, and a halo-green farming method) was added, followed by stirring at 65 ° C. for 2 hours. After centrifugation, the supernatant 1 and the placental residue were separated, and to 35% by weight of the placenta residue, 3% by weight of papain (Lot # 1095981, 30 U / mg, Sigma-Aldich) and 62% by weight of water were added. After reacting at 35 ° C. for 16 hours, the supernatant 2 was separated by centrifugation. The supernatant 1 and the supernatant 2 were mixed and heated at 95 ° C. for 30 minutes, and 0.4% activated carbon was added at 65 ° C. to remove the odor while stirring, followed by filtration using a 1 μm filter and a 0.45 μm filter.

상기 여과를 통해 고형물질이 제거된 조성물은 질소 총량을 재고(최종 질소 총량은 2.06 mg/ml 이었다), 아미노산 분석을 실시하였다(표 1 참조). 질소 총량은 한국식품의약품안정청(KFDA)에서 규정한 태반의 투입량을 말하는 것으로, 이 값이 같으면 최초 태반의 투입량이 같은 것으로 볼 수 있다.The composition from which the solid material was removed through the filtration was weighed in total nitrogen (final nitrogen was 2.06 mg / ml), and an amino acid analysis was performed (see Table 1). The total amount of nitrogen refers to the input of placenta prescribed by Korea Food and Drug Administration (KFDA). If this value is the same, the input of the first placenta can be regarded as the same.

실시예Example 2:  2:

실시예 1의 추출물을 동결건조한 분말 5g을 증류수 30ml에 녹인 후 30 분간 초음파 추출한 뒤 0.22 ㎛ 필터에 여과하여 상층액을 동결건조하였다. 5 g of the lyophilized powder of Example 1 was dissolved in 30 ml of distilled water, followed by ultrasonic extraction for 30 minutes, and then filtered through a 0.22 μm filter to freeze-dry the supernatant.

실시예Example 3:  3:

실시예 1의 추출물을 동결건조한 분말 5g을 증류수 30ml에 녹인 후 1 시간 초음파 추출한 뒤 0.22 ㎛ 필터에 여과하여 상층액을 동결건조하였다. 5 g of the lyophilized powder of Example 1 was dissolved in 30 ml of distilled water, and then ultrasonically extracted for 1 hour and then filtered through a 0.22 μm filter to freeze-dry the supernatant.

실시예Example 4:  4:

실시예 1의 추출물을 동결건조한 분말 5g을 증류수 30ml에 녹인 후 1.5 시간 초음파 추출한 뒤 0.22 ㎛ 필터에 여과하여 상층액을 동결건조하였다. 5 g of the lyophilized powder of Example 1 was dissolved in 30 ml of distilled water, and then ultrasonically extracted for 1.5 hours and then filtered through a 0.22 μm filter to freeze-dry the supernatant.

시험예Test Example 1 : 성분 분석 및 정량시험 1: Component Analysis and Quantitative Test

1-1: 아미노산 분석1-1: Amino Acid Analysis

본 발명의 실시예 1의 아미노산 정량은 Waters사의 AccQ-Tag Chemistry Package를 이용하여 수행하였다. 이 방법은 펩타이드와 단백질 가수분해 아미노산을 분석하기 위한 precolumn 유도체화 방법이다.Amino acid quantification of Example 1 of the present invention was carried out using Waters' AccQ-Tag Chemistry Package. This method is a precolumn derivatization method to analyze peptides and proteolytic amino acids.

그 결과를 표 1에 나타내었는데, 이에 따르면, 본 발명의 방법에 의한 태반 추출물은 여러 아미노산을 높은 농도로 함유하는 것을 알 수 있다. The results are shown in Table 1, whereby, it can be seen that the placenta extract by the method of the present invention contains various amino acids in high concentrations.

[표 1]TABLE 1

아미노산amino acid 리파제 + 단백분해효소추출(실시예 1)Lipase + Protease Extraction (Example 1) L - Aspartic acidL-Aspartic acid 2.16 2.16 L - SerineL-Serine 0.84 0.84 L - Glutamic acidL-Glutamic acid 2.54 2.54 Aminoacetic acidAminoacetic acid 3.86 3.86 L - ArginineL-Arginine 1.54 1.54 L - ThreonineL-Threonine 0.78 0.78 L - AlanineL-Alanine 2.04 2.04 L - ProlineL-Proline 2.51 2.51 L - ValineL-Valine 1.03 1.03 L - LysineL-Lysine 0.94 0.94 L - LeucineL-Leucine 1.21 1.21

이하, 1-2 내지 1-5의 시료는 실시예 1의 추출물을 동결건조한 분말 5g을 증류수 30ml에 녹인 후 30분간 초음파 추출한 뒤 0.22 ㎛ 필터에 걸러 동결건조한 것을 사용하였다. Hereinafter, samples 1-2 to 1-5 were dissolved in 30ml of distilled water 5g lyophilized powder of the extract of Example 1 and then ultrasonically extracted for 30 minutes and then lyophilized using a 0.22 ㎛ filter.

1-2: 1-2: 우론산Uronic acid 정량 ( Quantitative CarbazoleCarbazole assayassay ))

우론산은 당의 알데히드기 또는 카르복실기를 가진 당유도체로 인체의 해독에 중요한 역할을 함과 동시에 히아루론산, 코드로이친 황산 등의 점질 다당류의 구성성분으로 중요하다.Uronic acid is a sugar derivative having an aldehyde or carboxyl group of sugars and plays an important role in detoxification of the human body, and is also important as a component of viscous polysaccharides such as hyaluronic acid and cord leucine sulfate.

D-glucuronic acid lactone을 standard 로 사용하여 carbazole 반응에 의해 530 nm에서 UV spectrophotometer를 이용하여 흡광도를 측정하였다. 시료는 증류수에 녹여 Cabazole 반응에 의해 530 nm에서 UV spectrophotometer를 이용하여 흡광도를 측정하고 D-glucuronic acid lactone에 대한 함유량으로 계산하여 함량을 정하였다.Absorbance was measured using UV spectrophotometer at 530 nm by carbazole reaction using D-glucuronic acid lactone as standard. The sample was dissolved in distilled water, and the absorbance was measured using a UV spectrophotometer at 530 nm by Cabazole reaction, and the content was determined by calculating the content of D-glucuronic acid lactone.

1-3: 1-3: 글리코사미노글리칸Glycosaminoglycans 정량 ( Quantitative CarbazoleCarbazole assayassay ))

GAG는 결합조직 중 복합 단백질의 대부분을 차지하는 단백당의 구성성분이며, 현재 관절염 치료제의 지표 물질로 관심이 증대되고 있다. GAG is a component of protein sugar that accounts for most of the complex protein in connective tissue, and is currently increasing interest as an indicator of arthritis therapeutics.

NZP chondroitin sulfate를 standard로 사용하여 carbazole 반응에 의해 530 nm에서 UV spectrophotometer를 이용하여 흡광도를 측정하였다. 시료는 증류수에 녹여 carbazole 반응에 의해 530 nm에서 UV spectrophotometer를 이용하여 흡광도를 측정하고 NZP chondroitin sulfate에 대한 함유량으로 계산하여 함량을 정하였다.Absorbance was measured by UV spectrophotometer at 530 nm by carbazole reaction using NZP chondroitin sulfate as standard. The sample was dissolved in distilled water and the absorbance was measured by UV spectrophotometer at 530 nm by carbazole reaction, and the content was determined by calculating the content of NZP chondroitin sulfate.

1-4: 시알산 정량 (1-4: Sialic Acid Determination ( WarrenWarren assayassay ))

시알산은 당단백질이나 당지질의 구성당으로 잘 알려져 있는 아미노당으로 특히 악하선의 뮤신에 많이 함유되어 있으며, 인플루엔자에 의한 혈구 응집작용이 저해되어 면역기능을 돕는 감염방어인자로서 중요한 생리적 의의가 있다.Sialic acid is an amino sugar that is well known as a glycoprotein or glycolipid constituent sugar, and is particularly contained in mucin of the submandibular gland, and has an important physiological significance as an infection defense factor that helps immune function by inhibiting hemagglutination by influenza.

N-acetylneuraminic acid를 standard로 사용하여 Warren 방법에 의해서 549 nm에서 UV spectrophotometer를 이용하여 흡광도를 측정하였다. 시료는 80℃에서 1시간 0.1 N 황산으로 가수분해한 후에 Warren 방법에 의해서 549 nm에서 UV spectrophotometer를 이용하여 흡광도를 측정하고 N-acetylneuraminic acid에 대한 함유량으로 계산하여 함량을 정하였다.Using N-acetylneuraminic acid as a standard, the absorbance was measured by using a UV spectrophotometer at 549 nm by the Warren method. After the sample was hydrolyzed with 0.1 N sulfuric acid at 80 ° C. for 1 hour, the absorbance was measured using a UV spectrophotometer at 549 nm by the Warren method, and the content was determined by calculating the content of N-acetylneuraminic acid.

1-5: 효소에 의한 1-5: by enzyme 콘드로이친Chondroitin 황산( Sulfuric acid ( ChondroitinChondroitin sulfatesulfate )과 히아루론산() And hyaluronic acid ( HyaluronicHyaluronic acidacid )의 분해Disassembly

콘드로이친 황산은 연골, 혈관벽, 힘줄 등의 결합조직을 구성하는 황산화 뮤코다당류이다. 생체 안에서는 단백질과 결합하여 콜라겐과 함께 세포간 물질의 주 성분을 이룬다. 히아루론산은 생명체를 이루는 기본적인 구성물질로 피부를 만드는 중심물질이다. 특히 피부세포들을 엮어주는 역할을 하고, 피부의 수분을 유지시키는 성분으로서 자기보다 214배 큰 물분자를 끌어들이는 특성을 가지고 있어 피부에 수분이 오랜 시간 지속되게 해 준다. Chondroitin sulfate is a sulfated mucopolysaccharide that makes up connective tissues such as cartilage, blood vessel walls, and tendons. In vivo, it binds to proteins and together with collagen forms a major component of intercellular matter. Hyaluronic acid is a basic substance that makes up the living body and is the central substance for making skin. In particular, it acts to weave the skin cells and keeps the moisture of the skin as it attracts water molecules that are 214 times larger than its own.

Proteus vulgaris에서 유래한 Chondroitinase ABC (C2905, Sigma)를 50 mM Tris-HCl 60 mM Sodium acetate buffer (pH 8.0)에 녹여서 1U/ml 되게 하였다. NZP CS를 standard로 사용하여 standard와 sample을 10 mg/ml로 녹여서 buffer와 섞어 enzyme을 30 mU넣어 37℃에서 12시간 반응하여 chondroitin sulfate의 함유량을 분석하였다. Proteus Chondroitinase ABC (C2905, Sigma) derived from vulgaris was dissolved in 50 mM Tris-HCl 60 mM Sodium acetate buffer (pH 8.0) to 1U / ml. Using NZP CS as a standard, the standard and sample were dissolved at 10 mg / ml, mixed with buffer, 30 mU of enzyme, and reacted at 37 ° C. for 12 hours to analyze the content of chondroitin sulfate.

Strepromyces hyalurolyticus에서 유래한 Hyaluronidase (H1136, Sigma) 62 U을 사용하여 Hyaluronic acid를 standard로 사용하여 standard와 sample을 10 mg/ml되게 50 mM Sodium phosphate buffer (pH 7.1) containing 0.15 M NaCl에 녹여 Hyaluronidase 62 U을 넣어 60℃에서 12시간 반응하여 hyaluronic acid의 함유량을 분석하였다. Strepromyces hyalurolyticus the Hyaluronidase (H1136, Sigma) Hyaluronidase 62 U Dissolve the standard and sample by using Hyaluronic acid as a standard, using a 62 U to 10 mg / ml to be 50 mM Sodium phosphate buffer (pH 7.1 ) containing 0.15 M NaCl derived from The reaction was carried out at 60 ℃ for 12 hours to analyze the content of hyaluronic acid.

반응확인은 SAX-HPLC column을 gradient NaCl 0M~2M (pH 3.5)로 AKTA Purifier (Amersham Phaimacia)에 연결하여 유속은 1ml/min로 유지하면서 UV 232 nm에서 검출하였다. The reaction was detected at UV 232 nm while maintaining a flow rate of 1 ml / min by connecting the SAX-HPLC column to AKTA Purifier (Amersham Phaimacia) with gradient NaCl 0M ~ 2M (pH 3.5).

[표 2] 단위 % (w/w)Table 2 Unit% (w / w)

시료  sample Sialic acidSialic acid GAGGAG Uronic acidUronic acid Chondroitin sulfateChondroitin sulfate Hyaluronic acidHyaluronic acid 실시예 1Example 1 0.001±0.0000.001 ± 0.000 2.109±0.8962.109 ± 0.896 0.053±0.040.053 ± 0.04 1.161.16 2.822.82

시료의 성분에 대해 분석한 결과 표 2와 같은 결과를 얻었다. 각각은 standard를 100%로 보고, 시료에 함유되어 있는 양을 %로 수치화 하였다. 측정은 콘드로이친 황산과 히아루론산을 제외하고, 모두 3번씩 측정하여 평균값을 구하고 STDEV를 계산하였다. As a result of analyzing the components of the sample, the results shown in Table 2 were obtained. Each reported a standard of 100% and quantified the percentage contained in the sample. The measurement was performed three times except for chondroitin sulfate and hyaluronic acid, and the average value was calculated and STDEV was calculated.

상기 표 2에 나타난 바와 같이, 본 발명의 방법으로 제조된 돼지 태반 추출물에는 시알산, 글리코사미노클리칸, 우론산, 콘드로이친 황산 또는 히아루론산 등 인체 내 유용한 여러 생리활성물질의 함량이 높은 것을 알 수 있다. As shown in Table 2, the pig placenta extract prepared by the method of the present invention has a high content of various bioactive substances useful in the human body such as sialic acid, glycosaminoclican, uronic acid, chondroitin sulfate or hyaluronic acid. have.

시험예Test Example 2 :  2 : 랫트에On the rat 대한 경구투여 급성 독성 실험 Acute toxicity test for oral administration

본 발명의 추출물이 급성 독성을 갖는지 알아보기 위하여 하기와 같은 실험을 수행하였다.In order to determine whether the extract of the present invention has acute toxicity, the following experiment was performed.

실험동물로 6주령의 특정병원부재(SPF) SD계 랫트를 사용하여 급성독성실험을 실시하였다. 8마리씩의 동물에 본 발명의 실시예 2의 조성물을 1g/㎏/10㎖의 용량으로 단회 경구 투여하였다. 시험물질 투여 후 동물의 폐사여부, 임상증상 및 체중변화 등을 관찰하고 혈액학적 검사와 혈액생화학적 검사를 실시하였으며, 부검하여 육안으로 복강장기와 흉강 장기의 이상 여부를 관찰하였다. 시험결과, 시험물질을 투여한 모든 동물에서 특기할 만한 임상 증상은 없었고 폐사된 동물도 없었으며, 또한 체중변화, 혈액검사, 혈액생화학검사, 부견소견 등에서도 독성변화는 관 찰되지 않았다. 이상의 결과 본 발명의 조성물은 랫트에서 1g/㎏까지 독성변화를 나타내지 않았으며, 경구투여 최소치사량(LD50)은 적어도 1g/㎏ 이상인 안전한 물질로 판단되었다.Acute toxicity test was performed using 6 week-old SPF rats. Eight animals were orally administered with the composition of Example 2 of the present invention at a dose of 1 g / kg / 10 ml. After administration of the test substance, mortality, clinical symptoms, and changes in body weight were observed, and hematological and hematological examinations were performed. As a result, no significant clinical symptoms were observed in all animals treated with the test substance, no animals died, and no toxic changes were observed in weight change, blood test, blood biochemistry, and side findings. As a result, the composition of the present invention did not show a change in toxicity in rats up to 1 g / kg, and the minimum lethal dose (LD 50 ) was determined to be a safe substance of at least 1 g / kg or more.

시험예Test Example 3:  3: 제산력Antacid (산 중화 능력) 시험(Acid neutralization ability) test

제산력 시험법은 위산과 반응하여 제산작용을 나타내는 제제의 제산력을 구하는 시험법으로, 대한약전에 명시된 제산력 시험법을 변경하여 0.1 N 염산에 검체(본 발명의 실시예 2 내지 4) 1 mg 취하여 혼합 후 37 ℃의 shaking incubator에서 1시간 동안 반응시킨 후 0.1 N 수산화나트륨 수용액으로 적정하였다. 지시약으로 메틸오렌지, 양성대조약물로 hydrotalcite를 사용하였다(대한약전 제8개정, 2003). 그 결과를 표 3에 나타낸다. 음성대조군은 위액 조건 즉, 0.1N 염산에 0.1N NaOH로 적정한 것이다. 처리 방식의 변화에 따른 시료(실시예 2 내지 4)의 테스트 결과 각각 19.8, 12.5, 21.2%의 제산력이 있음이 확인되었다. 이는 본 발명의 태반 추출물이 위산을 중화시키는 능력을 갖고 있음을 의미한다. The antacid test method is a test method for determining the antacid power of an agent that reacts with gastric acid and changes the antacid test method specified in the Korean Pharmacopoeia to 0.1 N hydrochloric acid (Examples 2 to 4 of the present invention). After taking mg, the mixture was reacted for 1 hour in a shaking incubator at 37 ° C, and titrated with 0.1 N aqueous sodium hydroxide solution. Methyl orange was used as an indicator and hydrotalcite was used as a positive control (KEPCO Amendment, 2003). The results are shown in Table 3. The negative control group is titrated with 0.1 N NaOH in gastric juice conditions, that is, 0.1 N hydrochloric acid. As a result of the test of the samples (Examples 2 to 4) according to the change in the treatment method, it was confirmed that there were antacids of 19.8, 12.5, and 21.2%, respectively. This means that the placental extract of the present invention has the ability to neutralize stomach acid.

[표 3]TABLE 3

시료sample NaOH 소비량(volume)NaOH consumption (volume) 억제(%)control(%) 음성 대조군Negative control 122.67±2.52122.67 ± 2.52 -- 실시예 2Example 2 98.33±6.1198.33 ± 6.11 19.819.8 실시예 3Example 3 107.33±6.43107.33 ± 6.43 12.512.5 실시예 4Example 4 96.67±2.3196.67 ± 2.31 21.221.2 hydrotalcitehydrotalcite 104.67± 2.53104.67 ± 2.53 14.714.7

시험예Test Example 4: 헬리코박터  4: Helicobacter 파일로리균에To pylori 대한  About 콜로니Colony 형성  formation 억제능Inhibitory ability 시험 exam

검체 시료 모두에 대해 10, 50, 100 ㎍/mL의 농도로 H. pyroli 콜로니 형성 억제능을 테스트한 결과(표 3), 50 ㎍/mL까지는 colony의 수가 감소되었고, 100 ㎍/mL의 농도에서는 colony의 생성이 완전히 억제되었다(도 1a 참조). 음성대조군은 H. pyroli 검체 시료를 처리하지 않은 배지이다. 도 1a 내지 도 1e는 콜로니의 형성 정도를 나타낸 것으로서 순서대로 표 4의 -, +, ++, +++, ++++에 상당한다.The concentrations of H. pyroli at concentrations of 10, 50 and 100 μg / mL for all specimens As a result of testing the inhibition of colony formation (Table 3), the number of colonies was reduced up to 50 µg / mL, and colony production was completely suppressed at the concentration of 100 µg / mL (see FIG. 1A). Negative controls are on H. pyroli It is a medium which is not treated with a sample sample. 1A to 1E show the degree of colony formation and correspond to-, +, ++, +++, and ++++ in Table 4 in order.

본 발명의 태반 추출물은 H. pyroli의 증식을 강력하게 억제함으로써 H. pyroli의 위궤양 및 위암 기전인 carcinogen에 대한 저항성 저하, mucosal hyperproliferation 유발, carcinogenic N-nitroso compound의 증가 등을 완화하고 2차적인 감염의 증상들을 효과적으로 예방할 수 있을 것으로 생각된다. Placenta extract of the present invention by strongly inhibited the growth of H. pyroli mitigate degradation resistance, mucosal hyperproliferation induced increase of carcinogenic N-nitroso compound such as gastric ulcer and for the mechanism of gastric H. pyroli carcinogen and secondary infection It is thought that the symptoms can be effectively prevented.

[표 4]TABLE 4

시료sample dose(ug/ml)dose (ug / ml) 콜로니 형성 정도Degree of colony formation 음성 대조군Negative control -- ++++++++ 실시예 2  Example 2 1010 ++++++++ 5050 ++++ 100100 - - 실시예 3  Example 3 1010 ++++++++ 5050 ++++ 100100 -- 실시예 4  Example 4 1010 ++++++++ 5050 ++++ 100100 --

이상 첨부된 표를 참조하여 본 발명의 실시예를 설명하였으나, 본 발명은 상기 실시예에 한정되는 것이 아니라 다양한 형태로 구현될 수 있으며, 본 발명이 속 하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야 한다.While the embodiments of the present invention have been described with reference to the accompanying tables, the present invention is not limited to the above embodiments but can be embodied in various forms, and those skilled in the art to which the present invention belongs It will be appreciated that the invention may be embodied in other specific forms without changing the technical spirit or essential features of the invention. Therefore, it should be understood that the embodiments described above are exemplary in all respects and not restrictive.

도 1a 내지 도 1e는 본 발명의 태반 추출물이 그 농도에 따라 헬리코박터 파일로리균의 콜로니 형성 정도를 억제한 결과를 나타내는 사진으로서, 순서대로 표 4의 -, +, ++, +++, ++++에 해당하는 사진이다.1A to 1E are photographs showing the results of suppressing the degree of colony formation of Helicobacter pylori according to the concentration of the placental extract of the present invention, in order of-, +, ++, +++, ++ This is the picture for ++.

Claims (5)

태반 추출물을 유효성분으로 함유하는 위장 질환 개선용 조성물.Composition for improving gastrointestinal disease, containing placenta extract as an active ingredient. 제1항에 있어서, 상기 태반 추출물은 돼지의 태반으로부터 추출된 것인, 위장 질환 개선용 조성물.According to claim 1, The placenta extract is extracted from the placenta of pigs, composition for improving gastrointestinal disease. 제 1항의 태반 추출물은Placenta extract of claim 1 i) 냉동된 돼지 태반을 2~5 mm 크기로 파쇄하는 단계;i) crushing the frozen pig placenta to 2-5 mm in size; ii) 상기 파쇄된 돼지 태반에 물 및 리파아제를 첨가하여 39 내지 45℃에서 5 내지 10시간 반응시키는 단계;ii) adding water and lipase to the crushed pig placenta and reacting at 39 to 45 ° C. for 5 to 10 hours; iii) 단계 ii)의 반응액에 유화제를 첨가한 뒤 교반하여 상등액을 회수하는 단계;iii) recovering the supernatant by adding an emulsifier to the reaction solution of step ii) and then stirring; iv) 단계 iii)의 잔사물에 단백분해효소와 물을 첨가하여 28 내지 40℃에서 12 내지 20시간 반응시켜 상등액을 회수하는 단계; 및iv) recovering the supernatant by adding protease and water to the residue of step iii) for 12 to 20 hours at 28 to 40 ° C; And v) 단계 iii)과 iv)의 상등액을 혼합하는 단계;v) mixing the supernatant of steps iii) and iv); 를 포함하는 제조방법에 의하여 제조되는, 위장 질환 개선용 조성물.Prepared by the manufacturing method comprising a, gastrointestinal disease improvement composition. 제1항의 조성물을 포함하는 위장 질환 개선용 약학 조성물.A pharmaceutical composition for improving gastrointestinal disease, comprising the composition of claim 1. 제1항의 조성물을 포함하는 위장 질환 개선용 건강식품.Health foods for improving gastrointestinal disease comprising the composition of claim 1.
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