KR20090092764A - 신규한 리노바이러스 중화 면역원 및 이의 백신 용도로의 이용 - Google Patents
신규한 리노바이러스 중화 면역원 및 이의 백신 용도로의 이용Info
- Publication number
- KR20090092764A KR20090092764A KR1020097008950A KR20097008950A KR20090092764A KR 20090092764 A KR20090092764 A KR 20090092764A KR 1020097008950 A KR1020097008950 A KR 1020097008950A KR 20097008950 A KR20097008950 A KR 20097008950A KR 20090092764 A KR20090092764 A KR 20090092764A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- nimiv
- vector
- hrv
- rhinovirus
- peptide
- Prior art date
Links
- 241000709661 Enterovirus Species 0.000 title claims description 57
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 title claims description 30
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 title claims description 14
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title description 43
- 241000430519 Human rhinovirus sp. Species 0.000 claims abstract description 190
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 38
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 27
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 93
- 241001325977 Human rhinovirus B6 Species 0.000 claims description 45
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 45
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 42
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 29
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 24
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 23
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 23
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 21
- 241000178587 Human rhinovirus B72 Species 0.000 claims description 18
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 12
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 11
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 10
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims description 7
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 claims description 4
- 108010087302 Viral Structural Proteins Proteins 0.000 claims description 4
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims description 4
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 claims description 3
- 101710197658 Capsid protein VP1 Proteins 0.000 claims description 3
- 241000710122 Rhinovirus B14 Species 0.000 claims description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 3
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 claims description 3
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 claims description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 2
- 101710118046 RNA-directed RNA polymerase Proteins 0.000 claims 2
- 101710108545 Viral protein 1 Proteins 0.000 claims 2
- 150000001399 aluminium compounds Chemical class 0.000 claims 1
- 229940077746 antacid containing aluminium compound Drugs 0.000 claims 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 claims 1
- 206010061494 Rhinovirus infection Diseases 0.000 abstract description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 36
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 35
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 16
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 16
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 14
- ZJWIXBZTAAJERF-IHRRRGAJSA-N Lys-Lys-Arg Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N ZJWIXBZTAAJERF-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 12
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 12
- 101100315624 Caenorhabditis elegans tyr-1 gene Proteins 0.000 description 11
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 11
- OQSGBXGNAFQGGS-CYDGBPFRSA-N Pro-Val-Ile Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O OQSGBXGNAFQGGS-CYDGBPFRSA-N 0.000 description 11
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 11
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 11
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 11
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 11
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 9
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 9
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 8
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 7
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 7
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 6
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 6
- GVNNAHIRSDRIII-AJNGGQMLSA-N Ile-Lys-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N GVNNAHIRSDRIII-AJNGGQMLSA-N 0.000 description 6
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 6
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 6
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 6
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 5
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 5
- 108010013835 arginine glutamate Proteins 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 108010053725 prolylvaline Proteins 0.000 description 5
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 5
- YFSLJHLQOALGSY-ZPFDUUQYSA-N Asp-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N YFSLJHLQOALGSY-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 4
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 4
- JVTHIXKSVYEWNI-JRQIVUDYSA-N Thr-Asn-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O JVTHIXKSVYEWNI-JRQIVUDYSA-N 0.000 description 4
- GRIUMVXCJDKVPI-IZPVPAKOSA-N Thr-Thr-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O GRIUMVXCJDKVPI-IZPVPAKOSA-N 0.000 description 4
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 4
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 4
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 4
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 4
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 4
- 239000007758 minimum essential medium Substances 0.000 description 4
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 4
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 4
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 description 4
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 4
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 3
- UWQJHXKARZWDIJ-ZLUOBGJFSA-N Ala-Ala-Cys Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O UWQJHXKARZWDIJ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 3
- PXKLCFFSVLKOJM-ACZMJKKPSA-N Ala-Asn-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O PXKLCFFSVLKOJM-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 3
- OYJCVIGKMXUVKB-GARJFASQSA-N Ala-Leu-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N OYJCVIGKMXUVKB-GARJFASQSA-N 0.000 description 3
- OQWQTGBOFPJOIF-DLOVCJGASA-N Ala-Lys-His Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N OQWQTGBOFPJOIF-DLOVCJGASA-N 0.000 description 3
- PEIBBAXIKUAYGN-UBHSHLNASA-N Ala-Phe-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C)CC1=CC=CC=C1 PEIBBAXIKUAYGN-UBHSHLNASA-N 0.000 description 3
- MAZZQZWCCYJQGZ-GUBZILKMSA-N Ala-Pro-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O MAZZQZWCCYJQGZ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- VQAVBBCZFQAAED-FXQIFTODSA-N Ala-Pro-Asn Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N VQAVBBCZFQAAED-FXQIFTODSA-N 0.000 description 3
- OEVCHROQUIVQFZ-YTLHQDLWSA-N Ala-Thr-Ala Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O OEVCHROQUIVQFZ-YTLHQDLWSA-N 0.000 description 3
- WNHNMKOFKCHKKD-BFHQHQDPSA-N Ala-Thr-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(O)=O WNHNMKOFKCHKKD-BFHQHQDPSA-N 0.000 description 3
- AOAKQKVICDWCLB-UWJYBYFXSA-N Ala-Tyr-Asn Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N AOAKQKVICDWCLB-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 3
- SNBHMYQRNCJSOJ-CIUDSAMLSA-N Arg-Gln-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O SNBHMYQRNCJSOJ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- BTJVOUQWFXABOI-IHRRRGAJSA-N Arg-Lys-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N BTJVOUQWFXABOI-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 3
- FANGHKQYFPYDNB-UBHSHLNASA-N Asn-Asp-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N FANGHKQYFPYDNB-UBHSHLNASA-N 0.000 description 3
- FTCGGKNCJZOPNB-WHFBIAKZSA-N Asn-Gly-Ser Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FTCGGKNCJZOPNB-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- IBLAOXSULLECQZ-IUKAMOBKSA-N Asn-Ile-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O IBLAOXSULLECQZ-IUKAMOBKSA-N 0.000 description 3
- NCFJQJRLQJEECD-NHCYSSNCSA-N Asn-Leu-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O NCFJQJRLQJEECD-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 3
- FTSAJSADJCMDHH-CIUDSAMLSA-N Asn-Lys-Asp Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N FTSAJSADJCMDHH-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- GMUOCGCDOYYWPD-FXQIFTODSA-N Asn-Pro-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O GMUOCGCDOYYWPD-FXQIFTODSA-N 0.000 description 3
- DPWDPEVGACCWTC-SRVKXCTJSA-N Asn-Tyr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DPWDPEVGACCWTC-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- PDECQIHABNQRHN-GUBZILKMSA-N Asp-Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O PDECQIHABNQRHN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- PGUYEUCYVNZGGV-QWRGUYRKSA-N Asp-Gly-Tyr Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 PGUYEUCYVNZGGV-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 3
- WMLFFCRUSPNENW-ZLUOBGJFSA-N Asp-Ser-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O WMLFFCRUSPNENW-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 3
- BRRPVTUFESPTCP-ACZMJKKPSA-N Asp-Ser-Glu Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O BRRPVTUFESPTCP-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 3
- DRCOAZZDQRCGGP-GHCJXIJMSA-N Asp-Ser-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O DRCOAZZDQRCGGP-GHCJXIJMSA-N 0.000 description 3
- JEKIARHEWURQRJ-BZSNNMDCSA-N Cys-Phe-Tyr Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N JEKIARHEWURQRJ-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 3
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 3
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 3
- QKWBEMCLYTYBNI-GVXVVHGQSA-N Gln-Lys-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O QKWBEMCLYTYBNI-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 3
- ZXQPJYWZSFGWJB-AVGNSLFASA-N Glu-Cys-Phe Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N ZXQPJYWZSFGWJB-AVGNSLFASA-N 0.000 description 3
- QJCKNLPMTPXXEM-AUTRQRHGSA-N Glu-Glu-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O QJCKNLPMTPXXEM-AUTRQRHGSA-N 0.000 description 3
- WVYJNPCWJYBHJG-YVNDNENWSA-N Glu-Ile-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O WVYJNPCWJYBHJG-YVNDNENWSA-N 0.000 description 3
- TWYSSILQABLLME-HJGDQZAQSA-N Glu-Thr-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O TWYSSILQABLLME-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 3
- CCBIBMKQNXHNIN-ZETCQYMHSA-N Gly-Leu-Gly Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O CCBIBMKQNXHNIN-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 3
- 241001364929 Havel River virus Species 0.000 description 3
- YPLYIXGKCRQZGW-SRVKXCTJSA-N His-Arg-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O YPLYIXGKCRQZGW-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- AZEYWPUCOYXFOE-CYDGBPFRSA-N Ile-Arg-Val Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)N AZEYWPUCOYXFOE-CYDGBPFRSA-N 0.000 description 3
- NBJAAWYRLGCJOF-UGYAYLCHSA-N Ile-Asp-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N NBJAAWYRLGCJOF-UGYAYLCHSA-N 0.000 description 3
- NHJKZMDIMMTVCK-QXEWZRGKSA-N Ile-Gly-Arg Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N NHJKZMDIMMTVCK-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 3
- PHRWFSFCNJPWRO-PPCPHDFISA-N Ile-Leu-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N PHRWFSFCNJPWRO-PPCPHDFISA-N 0.000 description 3
- QHUREMVLLMNUAX-OSUNSFLBSA-N Ile-Thr-Val Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)N QHUREMVLLMNUAX-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 3
- ZYVTXBXHIKGZMD-QSFUFRPTSA-N Ile-Val-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N ZYVTXBXHIKGZMD-QSFUFRPTSA-N 0.000 description 3
- YWCJXQKATPNPOE-UKJIMTQDSA-N Ile-Val-Glu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N YWCJXQKATPNPOE-UKJIMTQDSA-N 0.000 description 3
- 108010065920 Insulin Lispro Proteins 0.000 description 3
- 241000880493 Leptailurus serval Species 0.000 description 3
- BQSLGJHIAGOZCD-CIUDSAMLSA-N Leu-Ala-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BQSLGJHIAGOZCD-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- VIWUBXKCYJGNCL-SRVKXCTJSA-N Leu-Asn-His Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 VIWUBXKCYJGNCL-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- QVFGXCVIXXBFHO-AVGNSLFASA-N Leu-Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O QVFGXCVIXXBFHO-AVGNSLFASA-N 0.000 description 3
- BABSVXFGKFLIGW-UWVGGRQHSA-N Leu-Gly-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N BABSVXFGKFLIGW-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 3
- BRTVHXHCUSXYRI-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BRTVHXHCUSXYRI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- MVJRBCJCRYGCKV-GVXVVHGQSA-N Leu-Val-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O MVJRBCJCRYGCKV-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 3
- HQXSFFSLXFHWOX-IXOXFDKPSA-N Lys-His-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)NC(=O)[C@H](CCCCN)N)O HQXSFFSLXFHWOX-IXOXFDKPSA-N 0.000 description 3
- KYNNSEJZFVCDIV-ZPFDUUQYSA-N Lys-Ile-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O KYNNSEJZFVCDIV-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 3
- XIZQPFCRXLUNMK-BZSNNMDCSA-N Lys-Leu-Phe Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N XIZQPFCRXLUNMK-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 3
- YSPZCHGIWAQVKQ-AVGNSLFASA-N Lys-Pro-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CCCCN YSPZCHGIWAQVKQ-AVGNSLFASA-N 0.000 description 3
- YKBSXQFZWFXFIB-VOAKCMCISA-N Lys-Thr-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O YKBSXQFZWFXFIB-VOAKCMCISA-N 0.000 description 3
- LRALLISKBZNSKN-BQBZGAKWSA-N Met-Gly-Ser Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O LRALLISKBZNSKN-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 3
- XPCLRYNQMZOOFB-ULQDDVLXSA-N Met-His-Phe Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=CC=C2)C(=O)O)N XPCLRYNQMZOOFB-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 3
- MUDYEFAKNSTFAI-JYJNAYRXSA-N Met-Tyr-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O MUDYEFAKNSTFAI-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WUGMRIBZSVSJNP-UHFFFAOYSA-N N-L-alanyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)C)C(O)=O)=CNC2=C1 WUGMRIBZSVSJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010079364 N-glycylalanine Proteins 0.000 description 3
- 101100068676 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) gln-1 gene Proteins 0.000 description 3
- RBRNEFJTEHPDSL-ACRUOGEOSA-N Phe-Phe-Lys Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RBRNEFJTEHPDSL-ACRUOGEOSA-N 0.000 description 3
- MVIJMIZJPHQGEN-IHRRRGAJSA-N Phe-Ser-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H]([NH3+])CC1=CC=CC=C1 MVIJMIZJPHQGEN-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 3
- VGTJSEYTVMAASM-RPTUDFQQSA-N Phe-Thr-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O VGTJSEYTVMAASM-RPTUDFQQSA-N 0.000 description 3
- LEIKGVHQTKHOLM-IUCAKERBSA-N Pro-Pro-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1NCCC1 LEIKGVHQTKHOLM-IUCAKERBSA-N 0.000 description 3
- 238000010240 RT-PCR analysis Methods 0.000 description 3
- YQHZVYJAGWMHES-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ala-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YQHZVYJAGWMHES-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 3
- BQWCDDAISCPDQV-XHNCKOQMSA-N Ser-Gln-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O BQWCDDAISCPDQV-XHNCKOQMSA-N 0.000 description 3
- KDGARKCAKHBEDB-NKWVEPMBSA-N Ser-Gly-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)CNC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O KDGARKCAKHBEDB-NKWVEPMBSA-N 0.000 description 3
- XERQKTRGJIKTRB-CIUDSAMLSA-N Ser-His-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)N)CC1=CN=CN1 XERQKTRGJIKTRB-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- UIPXCLNLUUAMJU-JBDRJPRFSA-N Ser-Ile-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UIPXCLNLUUAMJU-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 3
- 108010008038 Synthetic Vaccines Proteins 0.000 description 3
- DFTCYYILCSQGIZ-GCJQMDKQSA-N Thr-Ala-Asn Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O DFTCYYILCSQGIZ-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 3
- ZUUDNCOCILSYAM-KKHAAJSZSA-N Thr-Asp-Val Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O ZUUDNCOCILSYAM-KKHAAJSZSA-N 0.000 description 3
- SLUWOCTZVGMURC-BFHQHQDPSA-N Thr-Gly-Ala Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O SLUWOCTZVGMURC-BFHQHQDPSA-N 0.000 description 3
- ADPHPKGWVDHWML-PPCPHDFISA-N Thr-Ile-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)N ADPHPKGWVDHWML-PPCPHDFISA-N 0.000 description 3
- KZSYAEWQMJEGRZ-RHYQMDGZSA-N Thr-Leu-Val Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O KZSYAEWQMJEGRZ-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 3
- SIEZEMFJLYRUMK-YTWAJWBKSA-N Thr-Met-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N)O SIEZEMFJLYRUMK-YTWAJWBKSA-N 0.000 description 3
- SOUPNXUJAJENFU-SWRJLBSHSA-N Thr-Trp-Gln Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N)O SOUPNXUJAJENFU-SWRJLBSHSA-N 0.000 description 3
- OGOYMQWIWHGTGH-KZVJFYERSA-N Thr-Val-Ala Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O OGOYMQWIWHGTGH-KZVJFYERSA-N 0.000 description 3
- ADECJAKCRKPSOR-ULQDDVLXSA-N Tyr-His-Arg Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N)O ADECJAKCRKPSOR-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 3
- WQOHKVRQDLNDIL-YJRXYDGGSA-N Tyr-Thr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WQOHKVRQDLNDIL-YJRXYDGGSA-N 0.000 description 3
- IVXJODPZRWHCCR-JYJNAYRXSA-N Val-Arg-Phe Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)N IVXJODPZRWHCCR-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 3
- CFSSLXZJEMERJY-NRPADANISA-N Val-Gln-Ala Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O CFSSLXZJEMERJY-NRPADANISA-N 0.000 description 3
- DJEVQCWNMQOABE-RCOVLWMOSA-N Val-Gly-Asp Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N DJEVQCWNMQOABE-RCOVLWMOSA-N 0.000 description 3
- XBRMBDFYOFARST-AVGNSLFASA-N Val-His-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)N XBRMBDFYOFARST-AVGNSLFASA-N 0.000 description 3
- ZHQWPWQNVRCXAX-XQQFMLRXSA-N Val-Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N ZHQWPWQNVRCXAX-XQQFMLRXSA-N 0.000 description 3
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 3
- 108010077245 asparaginyl-proline Proteins 0.000 description 3
- 108010040443 aspartyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 3
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 3
- VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N glycyl-DL-alpha-alanine Natural products OC(=O)C(C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 3
- 108010017391 lysylvaline Proteins 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 3
- 108010004914 prolylarginine Proteins 0.000 description 3
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 3
- 229940124551 recombinant vaccine Drugs 0.000 description 3
- 108010071207 serylmethionine Proteins 0.000 description 3
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 3
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 3
- 108010020532 tyrosyl-proline Proteins 0.000 description 3
- 108010015385 valyl-prolyl-proline Proteins 0.000 description 3
- PBVAJRFEEOIAGW-UHFFFAOYSA-N 3-[bis(2-carboxyethyl)phosphanyl]propanoic acid;hydrochloride Chemical compound Cl.OC(=O)CCP(CCC(O)=O)CCC(O)=O PBVAJRFEEOIAGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XYTNPQNAZREREP-XQXXSGGOSA-N Ala-Glu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O XYTNPQNAZREREP-XQXXSGGOSA-N 0.000 description 2
- LDLSENBXQNDTPB-DCAQKATOSA-N Ala-Lys-Arg Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](N)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N LDLSENBXQNDTPB-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 2
- PBSOQGZLPFVXPU-YUMQZZPRSA-N Arg-Glu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O PBSOQGZLPFVXPU-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- NGTYEHIRESTSRX-UWVGGRQHSA-N Arg-Lys-Gly Chemical compound NCCCC[C@@H](C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N NGTYEHIRESTSRX-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- VZNOVQKGJQJOCS-SRVKXCTJSA-N Asp-Asp-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O VZNOVQKGJQJOCS-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 2
- CITDWMLWXNUQKD-FXQIFTODSA-N Gln-Gln-Asn Chemical compound C(CC(=O)N)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N CITDWMLWXNUQKD-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- SGVGIVDZLSHSEN-RYUDHWBXSA-N Gln-Tyr-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)NCC(O)=O SGVGIVDZLSHSEN-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 2
- AFODTOLGSZQDSL-PEFMBERDSA-N Glu-Asn-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N AFODTOLGSZQDSL-PEFMBERDSA-N 0.000 description 2
- ZJFNRQHUIHKZJF-GUBZILKMSA-N Glu-His-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O ZJFNRQHUIHKZJF-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- QLPYYTDOUQNJGQ-AVGNSLFASA-N Glu-His-Lys Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N QLPYYTDOUQNJGQ-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- NNQDRRUXFJYCCJ-NHCYSSNCSA-N Glu-Pro-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O NNQDRRUXFJYCCJ-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 2
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 2
- RQZFWBLDTBDEOF-RNJOBUHISA-N Ile-Val-Pro Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N RQZFWBLDTBDEOF-RNJOBUHISA-N 0.000 description 2
- CLBGMWIYPYAZPR-AVGNSLFASA-N Lys-Arg-Arg Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O CLBGMWIYPYAZPR-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- JGAMUXDWYSXYLM-SRVKXCTJSA-N Lys-Arg-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O JGAMUXDWYSXYLM-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- YFGWNAROEYWGNL-GUBZILKMSA-N Lys-Gln-Asn Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O YFGWNAROEYWGNL-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- 241000709664 Picornaviridae Species 0.000 description 2
- LNOWDSPAYBWJOR-PEDHHIEDSA-N Pro-Ile-Ile Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O LNOWDSPAYBWJOR-PEDHHIEDSA-N 0.000 description 2
- FIDNSJUXESUDOV-JYJNAYRXSA-N Pro-Tyr-Val Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O FIDNSJUXESUDOV-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 2
- PXQUBKWZENPDGE-CIQUZCHMSA-N Thr-Ala-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)N PXQUBKWZENPDGE-CIQUZCHMSA-N 0.000 description 2
- GMXIJHCBTZDAPD-QPHKQPEJSA-N Thr-Ile-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)N GMXIJHCBTZDAPD-QPHKQPEJSA-N 0.000 description 2
- PRTHQBSMXILLPC-XGEHTFHBSA-N Thr-Ser-Arg Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O PRTHQBSMXILLPC-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 2
- RRXPAFGTFQIEMD-IVJVFBROSA-N Trp-Ile-Pro Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)N RRXPAFGTFQIEMD-IVJVFBROSA-N 0.000 description 2
- 101150024766 VP1 gene Proteins 0.000 description 2
- 108010064997 VPY tripeptide Proteins 0.000 description 2
- XGJLNBNZNMVJRS-NRPADANISA-N Val-Glu-Ala Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O XGJLNBNZNMVJRS-NRPADANISA-N 0.000 description 2
- RKIGNDAHUOOIMJ-BQFCYCMXSA-N Val-Glu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 RKIGNDAHUOOIMJ-BQFCYCMXSA-N 0.000 description 2
- SDUBQHUJJWQTEU-XUXIUFHCSA-N Val-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N SDUBQHUJJWQTEU-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 2
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 2
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 2
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical class [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 2
- 108010062796 arginyllysine Proteins 0.000 description 2
- 108010038633 aspartylglutamate Proteins 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 210000000234 capsid Anatomy 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 108060003552 hemocyanin Proteins 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 2
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 2
- 230000002601 intratumoral effect Effects 0.000 description 2
- 238000007914 intraventricular administration Methods 0.000 description 2
- 108010054155 lysyllysine Proteins 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 201000009240 nasopharyngitis Diseases 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 2
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PMJWDPGOWBRILU-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 4-[4-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)phenyl]butanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCC(C=C1)=CC=C1N1C(=O)C=CC1=O PMJWDPGOWBRILU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- AXAVXPMQTGXXJZ-UHFFFAOYSA-N 2-aminoacetic acid;2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol Chemical compound NCC(O)=O.OCC(N)(CO)CO AXAVXPMQTGXXJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QRXMUCSWCMTJGU-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate Chemical compound C1=C(Br)C(Cl)=C2C(OP(O)(=O)O)=CNC2=C1 QRXMUCSWCMTJGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010001076 Acute sinusitis Diseases 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- ZPXCNXMJEZKRLU-LSJOCFKGSA-N Ala-His-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C)CC1=CN=CN1 ZPXCNXMJEZKRLU-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 1
- NYDBKUNVSALYPX-NAKRPEOUSA-N Ala-Ile-Arg Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N NYDBKUNVSALYPX-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- VWVPYNGMOCSSGK-GUBZILKMSA-N Arg-Arg-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O VWVPYNGMOCSSGK-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- JUWQNWXEGDYCIE-YUMQZZPRSA-N Arg-Gln-Gly Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O JUWQNWXEGDYCIE-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- KMFPQTITXUKJOV-DCAQKATOSA-N Arg-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KMFPQTITXUKJOV-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- INOIAEUXVVNJKA-XGEHTFHBSA-N Arg-Thr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O INOIAEUXVVNJKA-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- SWLOHUMCUDRTCL-ZLUOBGJFSA-N Asn-Ala-Asn Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N SWLOHUMCUDRTCL-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- PAXHINASXXXILC-SRVKXCTJSA-N Asn-Asp-Tyr Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N)O PAXHINASXXXILC-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- AWXDRZJQCVHCIT-DCAQKATOSA-N Asn-Pro-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CC(N)=O AWXDRZJQCVHCIT-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- VCJCPARXDBEGNE-GUBZILKMSA-N Asn-Pro-Pro Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 VCJCPARXDBEGNE-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- ZUFPUBYQYWCMDB-NUMRIWBASA-N Asn-Thr-Glu Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O ZUFPUBYQYWCMDB-NUMRIWBASA-N 0.000 description 1
- KZYSHAMXEBPJBD-JRQIVUDYSA-N Asn-Thr-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O KZYSHAMXEBPJBD-JRQIVUDYSA-N 0.000 description 1
- MJIJBEYEHBKTIM-BYULHYEWSA-N Asn-Val-Asn Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N MJIJBEYEHBKTIM-BYULHYEWSA-N 0.000 description 1
- VPPXTHJNTYDNFJ-CIUDSAMLSA-N Asp-Ala-Lys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N VPPXTHJNTYDNFJ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- BUVNWKQBMZLCDW-UGYAYLCHSA-N Asp-Asn-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O BUVNWKQBMZLCDW-UGYAYLCHSA-N 0.000 description 1
- OGTCOKZFOJIZFG-CIUDSAMLSA-N Asp-His-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O OGTCOKZFOJIZFG-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- VNXQRBXEQXLERQ-CIUDSAMLSA-N Asp-Ser-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N VNXQRBXEQXLERQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- KBJVTFWQWXCYCQ-IUKAMOBKSA-N Asp-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O KBJVTFWQWXCYCQ-IUKAMOBKSA-N 0.000 description 1
- 208000037874 Asthma exacerbation Diseases 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 102100021277 Beta-secretase 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710150190 Beta-secretase 2 Proteins 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 101100075830 Caenorhabditis elegans mab-5 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100505161 Caenorhabditis elegans mel-32 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 244000135860 Capparis spinosa subsp spinosa Species 0.000 description 1
- 102000006303 Chaperonin 60 Human genes 0.000 description 1
- 108010058432 Chaperonin 60 Proteins 0.000 description 1
- 108050001186 Chaperonin Cpn60 Proteins 0.000 description 1
- 102000052603 Chaperonins Human genes 0.000 description 1
- 208000003322 Coinfection Diseases 0.000 description 1
- 241000975300 Concholepas concholepas Species 0.000 description 1
- 241000557626 Corvus corax Species 0.000 description 1
- 239000004971 Cross linker Substances 0.000 description 1
- SBMGKDLRJLYZCU-BIIVOSGPSA-N Cys-Asn-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CS)N)C(=O)O SBMGKDLRJLYZCU-BIIVOSGPSA-N 0.000 description 1
- NQSUTVRXXBGVDQ-LKXGYXEUSA-N Cys-Asn-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O NQSUTVRXXBGVDQ-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 1
- LHMSYHSAAJOEBL-CIUDSAMLSA-N Cys-Lys-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O LHMSYHSAAJOEBL-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- 201000003883 Cystic fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 101000874334 Dalbergia nigrescens Isoflavonoid 7-O-beta-apiosyl-glucoside beta-glycosidase Proteins 0.000 description 1
- 102000007260 Deoxyribonuclease I Human genes 0.000 description 1
- 108010008532 Deoxyribonuclease I Proteins 0.000 description 1
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 101000757733 Enterococcus faecalis (strain ATCC 700802 / V583) Autolysin Proteins 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- LKUWAWGNJYJODH-KBIXCLLPSA-N Gln-Ala-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O LKUWAWGNJYJODH-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- WMOMPXKOKASNBK-PEFMBERDSA-N Gln-Asn-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O WMOMPXKOKASNBK-PEFMBERDSA-N 0.000 description 1
- JNENSVNAUWONEZ-GUBZILKMSA-N Gln-Lys-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O JNENSVNAUWONEZ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- PIUPHASDUFSHTF-CIUDSAMLSA-N Gln-Pro-Asn Chemical compound C1C[C@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O PIUPHASDUFSHTF-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- SBCYJMOOHUDWDA-NUMRIWBASA-N Glu-Asp-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O SBCYJMOOHUDWDA-NUMRIWBASA-N 0.000 description 1
- UMIRPYLZFKOEOH-YVNDNENWSA-N Glu-Gln-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O UMIRPYLZFKOEOH-YVNDNENWSA-N 0.000 description 1
- MTAOBYXRYJZRGQ-WDSKDSINSA-N Glu-Gly-Asp Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O MTAOBYXRYJZRGQ-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- SJJHXJDSNQJMMW-SRVKXCTJSA-N Glu-Lys-Arg Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O SJJHXJDSNQJMMW-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- 239000005562 Glyphosate Substances 0.000 description 1
- 102000004457 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 1
- KZTLOHBDLMIFSH-XVYDVKMFSA-N His-Ala-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O KZTLOHBDLMIFSH-XVYDVKMFSA-N 0.000 description 1
- 101000619564 Homo sapiens Putative testis-specific prion protein Proteins 0.000 description 1
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 1
- DMHGKBGOUAJRHU-UHFFFAOYSA-N Ile-Arg-Pro Natural products CCC(C)C(N)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(=O)N1CCCC1C(O)=O DMHGKBGOUAJRHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CYHJCEKUMCNDFG-LAEOZQHASA-N Ile-Gln-Gly Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)NCC(=O)O)N CYHJCEKUMCNDFG-LAEOZQHASA-N 0.000 description 1
- WZDCVAWMBUNDDY-KBIXCLLPSA-N Ile-Glu-Ala Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)O)N WZDCVAWMBUNDDY-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- DFJJAVZIHDFOGQ-MNXVOIDGSA-N Ile-Glu-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N DFJJAVZIHDFOGQ-MNXVOIDGSA-N 0.000 description 1
- PNTWNAXGBOZMBO-MNXVOIDGSA-N Ile-Lys-Gln Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N PNTWNAXGBOZMBO-MNXVOIDGSA-N 0.000 description 1
- GLYJPWIRLBAIJH-UHFFFAOYSA-N Ile-Lys-Pro Natural products CCC(C)C(N)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)N1CCCC1C(O)=O GLYJPWIRLBAIJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AKOYRLRUFBZOSP-BJDJZHNGSA-N Ile-Lys-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N AKOYRLRUFBZOSP-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- CKRFDMPBSWYOBT-PPCPHDFISA-N Ile-Lys-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N CKRFDMPBSWYOBT-PPCPHDFISA-N 0.000 description 1
- SAEWJTCJQVZQNZ-IUKAMOBKSA-N Ile-Thr-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N SAEWJTCJQVZQNZ-IUKAMOBKSA-N 0.000 description 1
- 102000015271 Intercellular Adhesion Molecule-1 Human genes 0.000 description 1
- 108010064593 Intercellular Adhesion Molecule-1 Proteins 0.000 description 1
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 1
- 108090000176 Interleukin-13 Proteins 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- WXUOJXIGOPMDJM-SRVKXCTJSA-N Leu-Lys-Asn Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O WXUOJXIGOPMDJM-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- ZQCVMVCVPFYXHZ-SRVKXCTJSA-N Lys-Asn-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN ZQCVMVCVPFYXHZ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- NCTDKZKNBDZDOL-GARJFASQSA-N Lys-Asn-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCCCN)N)C(=O)O NCTDKZKNBDZDOL-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- QUCDKEKDPYISNX-HJGDQZAQSA-N Lys-Asn-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O QUCDKEKDPYISNX-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- GHOIOYHDDKXIDX-SZMVWBNQSA-N Lys-Glu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN)C(O)=O)=CNC2=C1 GHOIOYHDDKXIDX-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 1
- GPJGFSFYBJGYRX-YUMQZZPRSA-N Lys-Gly-Asp Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O GPJGFSFYBJGYRX-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- JYXBNQOKPRQNQS-YTFOTSKYSA-N Lys-Ile-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O JYXBNQOKPRQNQS-YTFOTSKYSA-N 0.000 description 1
- WAIHHELKYSFIQN-XUXIUFHCSA-N Lys-Ile-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O WAIHHELKYSFIQN-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- RIJCHEVHFWMDKD-SRVKXCTJSA-N Lys-Lys-Asn Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O RIJCHEVHFWMDKD-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- YFQSSOAGMZGXFT-MEYUZBJRSA-N Lys-Thr-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O YFQSSOAGMZGXFT-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 1
- 241000282561 Macaca nemestrina Species 0.000 description 1
- HWROAFGWPQUPTE-OSUNSFLBSA-N Met-Ile-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCSC)N HWROAFGWPQUPTE-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 1
- AOFZWWDTTJLHOU-ULQDDVLXSA-N Met-Lys-Tyr Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 AOFZWWDTTJLHOU-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 101000757734 Mycolicibacterium phlei 38 kDa autolysin Proteins 0.000 description 1
- 108010002311 N-glycylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 108091007491 NSP3 Papain-like protease domains Proteins 0.000 description 1
- 108091061960 Naked DNA Proteins 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 1
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- ZSKJPKFTPQCPIH-RCWTZXSCSA-N Pro-Arg-Thr Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O ZSKJPKFTPQCPIH-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- VWHJZETTZDAGOM-XUXIUFHCSA-N Pro-Lys-Ile Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O VWHJZETTZDAGOM-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- XYAFCOJKICBRDU-JYJNAYRXSA-N Pro-Phe-Val Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O XYAFCOJKICBRDU-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- LZHHZYDPMZEMRX-STQMWFEESA-N Pro-Tyr-Gly Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)NCC(O)=O LZHHZYDPMZEMRX-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- 102100022208 Putative testis-specific prion protein Human genes 0.000 description 1
- WTUJZHKANPDPIN-CIUDSAMLSA-N Ser-Ala-Lys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N WTUJZHKANPDPIN-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- HEUVHBXOVZONPU-BJDJZHNGSA-N Ser-Leu-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O HEUVHBXOVZONPU-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710085955 Structural protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101710106388 Structural protein VP1 Proteins 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- PZBFGYYEXUXCOF-UHFFFAOYSA-N TCEP Chemical group OC(=O)CCP(CCC(O)=O)CCC(O)=O PZBFGYYEXUXCOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MQCPGOZXFSYJPS-KZVJFYERSA-N Thr-Ala-Arg Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O MQCPGOZXFSYJPS-KZVJFYERSA-N 0.000 description 1
- CTONFVDJYCAMQM-IUKAMOBKSA-N Thr-Asn-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)N CTONFVDJYCAMQM-IUKAMOBKSA-N 0.000 description 1
- UHBPFYOQQPFKQR-JHEQGTHGSA-N Thr-Gln-Gly Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O UHBPFYOQQPFKQR-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 1
- XYFISNXATOERFZ-OSUNSFLBSA-N Thr-Ile-Val Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)N XYFISNXATOERFZ-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 1
- KKPOGALELPLJTL-MEYUZBJRSA-N Thr-Lys-Tyr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 KKPOGALELPLJTL-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 1
- WCRFXRIWBFRZBR-GGVZMXCHSA-N Thr-Tyr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 WCRFXRIWBFRZBR-GGVZMXCHSA-N 0.000 description 1
- PALLCTDPFINNMM-JQHSSLGASA-N Trp-Val-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)N PALLCTDPFINNMM-JQHSSLGASA-N 0.000 description 1
- UEOOXDLMQZBPFR-ZKWXMUAHSA-N Val-Ala-Asn Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N UEOOXDLMQZBPFR-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- QSPOLEBZTMESFY-SRVKXCTJSA-N Val-Pro-Val Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O QSPOLEBZTMESFY-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- MNSSBIHFEUUXNW-RCWTZXSCSA-N Val-Thr-Arg Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N MNSSBIHFEUUXNW-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- 101710185494 Zinc finger protein Proteins 0.000 description 1
- 102100023597 Zinc finger protein 816 Human genes 0.000 description 1
- HMNZFMSWFCAGGW-XPWSMXQVSA-N [3-[hydroxy(2-hydroxyethoxy)phosphoryl]oxy-2-[(e)-octadec-9-enoyl]oxypropyl] (e)-octadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCCC\C=C\CCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCCO)OC(=O)CCCCCCC\C=C\CCCCCCCC HMNZFMSWFCAGGW-XPWSMXQVSA-N 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940047712 aluminum hydroxyphosphate Drugs 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 210000003484 anatomy Anatomy 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 108010060035 arginylproline Proteins 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 description 1
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 108091036078 conserved sequence Proteins 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 238000002050 diffraction method Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 108010030074 endodeoxyribonuclease MluI Proteins 0.000 description 1
- 230000003628 erosive effect Effects 0.000 description 1
- 230000005713 exacerbation Effects 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- XDDAORKBJWWYJS-UHFFFAOYSA-N glyphosate Chemical compound OC(=O)CNCP(O)(O)=O XDDAORKBJWWYJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940097068 glyphosate Drugs 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 230000028802 immunoglobulin-mediated neutralization Effects 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 229940031551 inactivated vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 208000022760 infectious otitis media Diseases 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 108010076718 lysyl-glutamyl-tryptophan Proteins 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 125000001446 muramyl group Chemical group N[C@@H](C=O)[C@@H](O[C@@H](C(=O)*)C)[C@H](O)[C@H](O)CO 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 229920002627 poly(phosphazenes) Polymers 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 239000012090 serum-supplement Substances 0.000 description 1
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 1
- 239000008247 solid mixture Substances 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000014599 transmission of virus Effects 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 238000002424 x-ray crystallography Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/125—Picornaviridae, e.g. calicivirus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
- C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
- C07K16/1009—Picornaviridae, e.g. hepatitis A virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55505—Inorganic adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
- A61K2039/6031—Proteins
- A61K2039/6081—Albumin; Keyhole limpet haemocyanin [KLH]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/32011—Picornaviridae
- C12N2770/32711—Rhinovirus
- C12N2770/32722—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/32011—Picornaviridae
- C12N2770/32711—Rhinovirus
- C12N2770/32734—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
본 발명은 인간 리노바이러스 감염을 예방 또는 치료하기 위한 방법 및 조성물에 관한 것이다.
Description
본 발명은 인간 리노바이러스(rhinovirus)감염을 예방하고 치료하는 방법 및 이를 위한 조성물에 관한 것이다.
인간 리노바이러스(rhinovirus)(HRV)는 감기의 가장 중요한 단일 병인이다(Arruda et al. J. Clin . Microbiol. 35:2864-2868 (1997); Couch, "Rhinoviruses." In: Fields, B.N., Knipe, D. M. (Eds.), Virology. Raven Press, New York, 607-629 (1990); Turner, Antivir . Res. 49(1):1-14 (2001)). 감기의 약 3분의 1을 발병시키는 HRV는 100개의 혈청형을 나타내며, 이들 혈청은 완전히 크로스 뉴트럴라이징되지 않은 감염된 환자의회복기의 혈청이다. HRV에 의한 상부호흡기 질환이 종종 심하지 않고 자가 한계가 있더라도, 학업과 업무의 공백으로 오는 사회 경제학적 손실은 막대하며 부적당한 항생제의 남용은 중요한 문제이다. 상부 호흡기질환은 미국에서 연간 2천5백만 명의 직장결근과 2천3백만 명의 학교결석의 원인이 되는 것으로 추정된다(Anzueto et al. Chest 123(5):1664-1672 (2003); Rotbart. Antivir . Res . 53:83-98 (2002)).
HRV가 보다 심각한 의료적 문제와 연관이 있다는 증거가 있다. 예를 들어, HRV에 의해 유발된 감기는 급성중이염(acute otitis media)과 동염(sinusitis)의 중요한 유발인자가 되며, 소아와 성인의 천식 악화 유발의 주요 요인이 된다. HRV 감염은 낭성섬유종(cystic fibrosis), 기관지염 및 그 밖의 호흡기 질환을 가진 환자들에게서의 하기도 증후군(lower respiratory tract syndromes) 유발과 관련되어 있다(Gern, Pediatr . Infect . Dis . J. 23:S78-S86 (2004); Anzueto et al, Chest 123(5):1664-1672 (2003); Gern et al, Clin . Microbiol . Rev . 12(1):9-18 (1999); Pitkaranta et al. J. Clin . Microbiol. 35:1791-1793 (1997); Pitkaranta et al, Pediatrics 102:291-295 (1998); Rotbart, Antivir . Res . 53:83- 98 (2002)).
오늘날까지, HRV 감염에 의한 질병을 예방하고 치료하는 효과적인 항바이러스 치료법은 개발되지 못했다. 따라서 HRV 감염을 막고, HRV-유발 질병의 발병기간을 줄이고, 증상의 고통을 완화시키고, 박테리아의 2차 감염 및 상기 질병들의 악화를 최소화시키고, 바이러스 전염을 감소시킬 수 있는 시약을 발견해야 할 중요한 의료적 요구가 대두된다.
HRV 예방 백신은 수많은 HRV 감염 및 그 임상적 증상을 감소시키기 위해서 다양한 혈청형에 대한 보호가 가능해야 한다. HRV 백신을 만드려는 시도는 구조 단백질 (structural proteins)의 보존 부위(conserved region)에 해당하는 합성 펩타이드(McCray et al, Nature 329:736-738 (1987)) 또는 생물학적 융합 부분으로서의 합성 펩타이드(Brown et al, Vaccine 9:595-601 (1991); Francis et al, Proc . Natl Acad . ScL U.S.A. 87:2545-2549 (1990))에 기초한 방법만이 제한적인 성공을 거둔 바 있으며, 이는 선택된 펩타이드들이 바이러스 표면에서 잘 노출되지 않거나(항체로의 접근이 제한됨) 외형적 제약이 있어 낮은 면역원성을 가지는 것에 기인한 것이다.
본 발명은 이러한 제약들을 극복하고, 크로스 리액티브하고 항체반응을 중화시키는 방어적 혈청을 유도함으로써 HRV 감염을 예방하고 치료하는 백신을 제공하는 데 특징이 있다.
본 명세서 전체에 걸쳐 다수의 논문 및 특허문헌이 참조되고 그 인용이 표시되어 있다. 인용된 논문 및 특허문헌의 개시 내용은 그 전체로서 본 명세서에 참조로 삽입되어 본 발명이 속하는 기술 분야의 수준 및 본 발명의 내용이 보다 명확하게 설명된다.
도 1은 CR6 유전자의 구조 부위(하부 패널)와, HRV 6 및 HRV 14의 NimⅣ의 아미노산 서열의 정렬(상부 패널)을 나타낸 그림이다.
도 2 a-b는 CR6(NimⅣ 서열을 제외한 HRV 14 서열을 포함하는 키메라로 HRV6서열; 여기서는 CR6로 명명; 각 막대에서 오른쪽 부분) 및 HRV 14(각 막대의 왼쪽 부분)을 기니피그 포리클로날 항체인 항-HRV 14(도 2a) 및 항-HRV 6(도 2b)로 플라그 감소 중화 분석(plaque reduction neutralization assay)을 한 결과를 나타낸 그림이다. 2OK, 4OK, 6OK, 80K 는 각각 항체 타이터 2x104, 4x104, 6x104 및 8x104 에 상응한다. 위의 점선과 아래의 점선은 각각 HRV14 및 HRV6 의 플라그 숫자 50%의 감소를 나타낸다.
도 3a-d는 HRV 14 및 CR 6의 3차원 모형을 나타낸다. 도 3a 및 도 3b는 알려진 결정구조(Che et al. J. Virol. 72:4610-4622 (1998))를 바탕으로 Chimera software(http://www.cgl.ucsf.edu/chimera/)를 이용하여 디자인 된 HRV 14 바이러스 입자의 3차원 모형이다. VP1, Vp2, 및 VP2는 각각 다크블루, 자홍색 및 회색으로 표시하였다. HRV 14 입자는 SpaceFill 모형으로 나타냈는데, 여기서 Nim들은 반데르발스 공간에 색상 표지(color-coded)가 되었다. 녹색, 파란색 및 자홍색 줄무늬 표면은 각각 NimⅢ, NimⅣ 및 NimⅡ를 나타낸다. NimⅢ와 NimⅣ간의 접촉은 K287을 통해 이루어지는 것으로 보인다. 본 모델에서 NimⅠ은 다크그린으로 칠해진 NimⅠ-특이적 Fab 17에 의해 덮혀있다.
도 3c-d는 Accelrys Discovery Studio vl .5.1 (Accelrys Software, Inc.)을 이용하여 만든 3차원 모형이다. 도 3c는 HRV 14 입자의 NimⅠ, NimⅡ, NimⅢ 및 NimⅣ의 SpaceFill 모형이다. Nim의 아미노산 잔기는 반데르발스 입체공간으로 나타냈다. 양전하 및 음전하를 띄는 표면은 각각 파란색과 빨간색으로 표시하였다. 도 3d는 HRV 14 및 CR6 바이러스의 SpaceFill 모형을 비교한 그림이다(NimⅢ 및 NimⅣ만을 나타냈다). CR6의 구조는 알려진 결정구조 및 CR6의 단백질 서열 정보(도 1)에 기초하여 예측하였다. 주의: HRV 14의 NimⅣ 의 양전하를 띈 K287과 NimⅢ의 음전하를 띈 잔기들이 가까이서 결합하지만, CR6에서는 K287T 치환으로 인해 이러한 결합이 붕괴된다.
도 4는 CR6이 마우스 항-HRV37, 항-HRV92 및 항-HRV6 혈청에 의해 중화된 결과를 보여준다. 도 4a는 HRV 14, HRV37, HRV6 및 HRV92에서의 NimⅣ 나열을 나타낸 그림이다. 아미노산은 HRV 14 주형에 따라 하기에 번호가 매겨져있다. 동일한 부위는 직사각형(파란색)으로 표시하였다. 도 4b는 상응하는 정제 바이러스에 의해 생성된 항-HRV37, 항-HRV92 및 항-HRV6 마우스 항체에 의한 HRV 14(양 막대의 왼쪽 ; 갈색) 및 CR6(양 막대의 오른쪽 ; 녹색)의 플라그 감소 중화 실험(PRNT) 결과를 나타낸 그래프이다. 50%의 중화 타이터가 그래프의 점선 및 그래프 밑의 박스에 숫자로 표시되었다(50% NUT).
도 5는 NimⅣHRV6 및 NimⅣHRV14 특이적 합성 펩타이드에 기초한 실험 데이터를 나타낸 그림이다. 도 5a는 기니피그 항-HRV14(GP14) 및 항-HRV6(GP6) 폴리클로날 항체에 의해 검출된 KLH-결합 펩타이드 H6 (NimⅣHRV6) 및 H14(NimⅣHR14)의 웨스턴 블롯 결과를 나타낸 그림이다. 도 5b는 동일한 항체에 의해 검출된 프리 H6 및 H14 펩타이드의 웨스턴 블롯 결과이다; 레인 1은 단백질 중량마커, 레인 2는 H6-KLH (A) 또는 H6 (B), 레인 3은 H14-KLH (A) 또는 H14 (B)이다. 도 5c는 GP6 및 GP 14를 이용한 H6 및 H14의 ELISA 결과를 나타낸 그래프이다.
도 6은 마우스 항-HRV14-NimⅣHRV6혈청에 의한 HRV14 및 HRV6의 플라그 감소 중화 실험(PRNT) 결과를 나타낸 그래프이다. 이들 데이터는 HRV 14 캡시드 내에서의 NimⅣHRV6의 면역결정부위를 보여준다.
도 7은 HRV14 및 CR6의 플라그 감소 중화 실험(PRNT) 결과를 나타낸 그래프이며, NimⅢ 모노클로날 항체(Mab5)가 HRV 14보다 10배 덜 CR6를 중화시킴을 보여준다.
도 8은 HRV14 및 CR6의 플라그 감소 중화 실험(PRNT) 결과를 나타낸 그래프이며, NimⅡ 모노클로날 항체(Mab16)가 HRV 14보다 5배 더 CR6를 중화시킴을 보여준다.
도 9는 HRV14 및 CR6의 플라그 감소 중화 실험(PRNT) 결과를 나타낸 그래프이며, NimⅠ 모노클로날 항체(Mab17)가 HRV 14보다 1.5배 덜 CR6를 중화시킴을 보여준다.
도 10은 NimⅣ가 NimⅠ, NimⅡ 및 NimⅢ에 영향을 미침을 보여주는 표이다(50% 중화 타이터)
도 11은 NimⅢ 및 NimⅣ 서열과 HRV 구조 단백질에서 이들 서열의 위치를 보여주는 그림이다.
도 12a는 CR6 및 CR72 키메라의 VP1 서열을 나타낸 그림이다.
도 12b는 HRV 유전자의 개략도와 HRV6, HRV72 및 HRV 14의 NimⅣ들의 나열을 나타낸 그림이다.
도 13은 NimⅣ가 키메라 재조합체에 공여 혈청형의 중화특성을 부여하는 것을 나타낸 2개의 그래프이다. 도 13a는 GP72 항체에 의한 CR72(흰색 막대) 및 HRV 14(검은색 막대)의 중화 타이터를 나타낸 그림이다. 도 13b는 GP6 항체에 의한 GP6(흰색 막대) 및 HRV 14(검은색 막대)의 중화 타이터를 나타낸 그림이다. 주의: GP6 및 GP72-기니피그 폴리클로날 항체(ATCC)는 각각 HRV6 및 HRV72에 대한 항체이다.
도 14는 HRV 14 백본의 다른 Nim들이 NimⅣ로 대체됨에 따른 영향을 보여주는 표이다(NimⅠ, NimⅡ 및 NimⅢ 마우스 항체에 의한 HRV 14, CR6 및 CR72의 중화).
도 15는 HRV 14, HRV6, HRV72, CR6 및 CR72에 대한 항-CR6 및 항-CR72 마우스 항혈청의 50% 중화 타이터를 보여주는 표이다.
본 발명은 분리된 리노바이러스(rhinovirus)의 NimlV(neutralizing immunogen IV) 펩타이드들을 제공한다. 이들 펩타이드들은 인간 리노바이러스처럼 어떤 혈청형의 리노바이러스로부터 유래된 것이라도 무관하다(예를 들어, HRV 14). 상기 펩타이드들은, 예를 들어 인간 리노바이러스의 바이러스 구조단백질 1(VP1)의 카르복시기 말단 부분의 아미노산 277-283(예를 들어, 275-285)을 포함할 수 있다. 예시적인 서열은 다음을 포함한다: PVIKKR, PVIKKRK (HRV 14), PVIKKRE (HRV6 and HRV72), PVIKKRS (HRV92), PVIEKRT (HRV83), PKIIKKR (HRV86), PVIKRRE (HRV35), PIIAKRE (HRV79), TIIKKRT (HRV3), NTEPVIKKRKGDIKS Y (HRV 14), 및 A- X1-X2-I-X3-X4-R-X5-B, X1 = P 또는 T; X2 = V, K, 또는 I; X3 = K, E, I, 또는 A; X4 = K 또는 R; X5 = S, E, D, T, R, T, 또는 K; A = 0-10 의 추가적 아미노산; 및 B = 0-10 의 추가적 아미노산.
본 발명은 또한 NimlV 펩타이드를 코딩하는 분리된 핵산 분자 또는 이들과 상보적인 핵산 분자를 제공한다. 나아가, 본 발명은 본 발명의 펩타이드나 핵산분자를 포함하는 벡터(예를 들어, HRV 14 벡터)를 제공한다. 상기 벡터는, 예를 들어, 인간 리노바이러스벡터일 수 있으며, 예를 들어 NimIV 펩타이드가 유래된 인간 리노바이러스의 혈청형과 다른 혈청형의 인간리노바이러스이다. 일례로, NimⅣ 펩타이드 또는 핵산분자가 상기 인간 리노바이러스 벡터에 원래 존재하는 NimⅣ 서열 대신에 존재한다. 또 다른 예로, NimIV 펩타이드가 유래된 인간 리노바이러스는 인간 리노바이러스 6(HRV6) 또는 인간 리노바이러스 72(HRV72)이다. 뒷부분의 펩타이드는 예를 들어 인간 리노바이러스 14(HRV 14) 벡터에 포함될 수 있다. 또 다른 예로, 벡터의 VP1 단백질 또는 핵산 분자는 NimⅣ 펩타이드가 유래된 인간 리노바이러스의 VP1 단백질 또는 핵산 분자로 대체된다. 또 다른 예로, 벡터는 NimⅣ 펩타이드가 크로스링크된 불활성화된 인간 리노바이러스 또는 NimⅣ 서열이 융합된 B형 간염 코어 서열를 포함한다(Fiers et al. Virus Res. 103:173-176, (2004); WO 2005/055957; US 2003/0138769 A1; US 2004/0146524A1 ; US 2007/0036826 A1).
본 발명은 본 명세서에서 기술한 펩타이드, 핵산 분자 및 벡터를 포함하는 약제학적 조성물을 추가적으로 포함한다. 선택적으로, 약제학적 조성물은 1개 또는 그 이상의 약제학적으로 허용 가능한 희석액, 첨가제, 수송체 및/또는 보조제를 포함할 수도 있다. 예시적인 보조제는 키틴 미세입자 및 알루미늄 화합물이다. 나아가, 상기 조성물은 선택적으로 1개 또는 그 이상의 추가적인 인간 리노바이러스 중화 면역원을 포함할 수 있다.
본 발명은 또한 대상체에서 리노바이러스에 대한 면역반응을 유발하는 방법을 제공한다. 이러한 방법은 분리된 NimⅣ 펩타이드 또는 핵산 분자를 대상체에 투여하는 단계를 포함한다. 몇몇 예에서, 대상체는 리노바이러스에 감염되진 않았지만 감염의 위험을 가지고 있다. 다른 예에서는 대상체는 리노바이러스에 감염되었다.
본 명세서에서 용어 “투여”또는“투약”은 본 발명의 조성물의 투여량을 포유류(예를 들어 인간)에 주입하는 방법을 의미하며, 상기 방법은 예를 들어 비강, 국소적, 전신적, 흡입, 구강, 정맥내, 피하내, 혈관내, 동맥내, 종양내, 복강내, 뇌실내, 육아종내, 비강, 직장, 인두, 눈, 안구내 또는 근육내 주입이다.
투여의 바람직한 방법은 약제학적 조성물의 성분, 잠재적 또는 현실적 질병의 위치(예를 들어 종양의 위치 또는 치료될 혈관의 상태) 및 질병의 정도 등의 다양한 요소에 따라 다를 수 있다.
본 명세서에서 용어 “인간 리노바이러스”(HRV)는 피코르나비리대 속 리노바이러스(Picornaviridae genus Rhinovirus) 패밀리의 모든 바이러스를 의미한다. HRV는 약 100개의 알려진 혈청형에 의해 분류된다. 예를 들어, HRV14, HRV6, HRV37 및 HRV92는 각각 혈청 번호 14, 6, 37 및 92의 인간 리노바이러스를 의미한다.
본 명세서에서 용어 “약제학적으로 허용 가능한 수송체”는 치료되는 포유류에 생리적으로 허용되며 이에 의해 수송되는 물질이 예방 또는 치료 효능을 유지하는 수송체를 의미한다. 약제학적으로 허용 가능한 수송체의 예는 생리적 염류용액(physiological saline)이다. 다른 생리학적으로 허용가능한 수송체 및 그들의 화학식은 당업계에 알려져 있으며, 그 예는 Remington 's Pharmaceutical Sciences, ((18th edition), ed. A. Gennaro, (1990), Mack Publishing Company, Easton, PA)에 서술되어 있고 본 명세서에 참고문헌으로 소개되었다.
본 명세서에서 용어 “중화 면역원(Nim)”은 인간에 투여됐을때 항-HRV 중화 항체를 만들어내는 HRV 서열을 의미한다. 본 명세서에서 서술한 바와 같이 재조합 HRV 백신의 경우 NimⅣ 혈청형이 어깨글자로 놓여서 Nim의 소스를 특이적으로 서술한다(예를 들어 NimⅣHRV6는 HRV6 혈청형으로부터 유래된 NimⅣ 서열이라는 의미이다).
본 명세서에서 용어 “중화 면역원(Nim)Ⅳ 펩타이드”또는 "NimⅣ 펩타이드"는 리노바이러스 구조단백질 1(VP1)의 카르복실기 말단 부위의 서열(예를 들어 HRV 14 (NTEPVIKKRKGDIKSY)를 기준으로 한 아미노산 274-289, 도 12b 참조)을 가지는 펩타이드를 의미한다. NimⅣ 펩타이드는 하기에 기재된 바 대로 특이적 서열 및 추가적인 측면서열을 포함하거나 보존적 코어 서열만을 포함할 수도 있다. 또한, 펩타이드는 변형되지 않을 수 있고 따라서 자연계의 NimⅣ 서열과 동일할 수 있으며, 혹은 1개 또는 그 이상의 치환, 삭제, 삽입 또는 다른 변형을 포함할 수 있으며(예를 들어 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 또는 25개의 치환, 삭제 또는 삽입), 이로 인해 펩타이드의 면역원성이 실질적으로 유지된다. 나아가, NimⅣ 펩타이드는 L 또는 D 아미노산 또는 이들의 혼합물을 포함할 수 있다.
본 발명에서 사용될 수 있는 NimⅣ 펩타이드 서열의 예는 하기에 나열하였다. 펩타이드는 예를 들어 5-30, 8-25, 10-20, 14-19, 15-18 또는 16-17 길이의 아미노산이다. 펩타이드는 코어 NimⅣ 서열을 포함할 수 있고, 선택적으로 추가적인 NimⅣ 서열 또는 링커 서열(예를 들어 아미노 말단 및/또는 카르복시기 말단의 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10 아미노산)과 결합할 수 있다. 코어 NimⅣ 서열의 예는 PVIKKR, PVIKKRK (HRV 14), PVIKKRE (HRV6 and HRV72), PVIKKRS (HRV92), PVIEKRT (HRV83), PKIIKKR (HRV86), PVIKRRE (HRV35), PIIAKRE (HRV79), TIIKKRT (HRV3), TIVKKRT (HRV3), TAIVTRP (HRV2), VAIRPRT (HRV 16), TAIVRRN (HRVlA), NTEPVIKKRKGDIKSY (HRV 14) 또는 이들 서열과 함께 나열된 다른 HRV 서열을 포함한다(예를 들어 도 11 참조). 코어 서열은 예를 들어 하기의 화학식으로 정의될 수 있다 : A- X1-X2-I-X3-X4-R-X5-B, X1 = P 또는 T; X2 = V, K, 또는 I; X3 = K, E, I, 또는 A; X4 = K 또는 R; X5 = S, E, D, T, R, T, 또는 K; A = 0-10 의 추가적 아미노산; 및 B = 0-10 의 추가적 아미노산. A 및/또는 B의 서열은 자연계의 NimⅣ /VP1 서열, 인공서열(예를 들어 링커서열) 또는 이들의 혼합물일 수 있다.
본 명세서에서 용어 “중화 면역원 Ⅳ 핵산 분자”또는“NimⅣ 핵산 분자”는 본 명세서에서 정의하는 NimⅣ 펩타이드를 코딩하는 핵산분자 또는 이들과 상보적인 핵산분자를 의미한다.
NimⅣ 펩타이드나 핵산분자는 자연계의 바이러스에 인접한 연결(flanking)서열을 포함하고 있지 않는 경우“분리”되어있다. 이러한 펩타이드들 또는 핵산분자들은, 예를 들어, VP1의 전체 길이 서열, VP1의 카르복시기 말단 절반, VP1의 카르복시기 말단 4분의 1 및 VP1의 카르복시기 말단의 15-30 아미노산 또는 이에 상응하는 핵산서열에 의해 제한될 수 있다(Laine et al, J. Gen . Virol . 87: 129-138, (2006)).
만약에 NimⅣ 펩타이드가 아미노기 말단 및/또는 카르복시기 말단에서 자연계의 서열, 인공서열(예를 들어 링커서열) 또는 이들의 조합인 연결 서열의 최소량(예를 들어 1 -10, 2-9, 3-8, 4-7, 또는 5-6 아미노산)과 함께 특이적 서열만을 포함하는 경우에, NimⅣ 펩타이드는 특이적 서열로 “본질적으로 구성”되어있다. 이러한 서열은 더 긴 서열(예를 들어 이종 바이러스나 다른 벡터서열)의 컨텍스트에 존재할 수도 있다.
만약에 NimⅣ 핵산분자가 5`말단 및/또는 3`말단에서 자연계의 서열, 인공서열(예를 들어 링커서열) 또는 이들의 조합인 연결 서열의 최소량(예를 들어 3-30, 6-27, 9-24, 12-21, 또는 15-18뉴클레오타이드)과 함께 특이적 서열만을 포함하는 경우에, NimⅣ 펩타이드는 특이적 서열로 “본질적으로 구성”되어있다. 이러한 서열은 더 긴 서열(예를 들어 이종 바이러스나 다른 벡터서열)의 컨텍스트에 존재할 수도 있다.
일반적으로 본 발명은 인간 리노바이러스(HRV)에 대한 새로운 면역원성 좌위(locus) 및 HRV 감염을 치료하거나 예방하는 백신으로써의 용도에 관한 것이다. 본 발명은 본 발명자들이 새로운 중화 면역원(Nim)인 NimⅣ를 발견한 데에 기초하고 있으며, 이들은 백신으로 사용될 수 있다. 이 백신은, 하기 기술한대로 몇몇 구현예를 포함한다. 이 백신들은 이종 NimⅣ 항원, 단독의 혹은 바이러스, 단백질 또는 화학적으로 결합된 수송체에 포함된 합성 NimⅣ 펩타이드 또는 생물학적 수송체 내의 혈청형-상이 NimⅣ 펩타이드의 생물학적 또는 화학적 융합의 혼합물을 제시하는 단일 또는 다중 재조합 HRV를 포함한다. 넓은 범위의 HRV 혈청형에 대한 NimⅣ-특이적 면역반응을 유발하는 이러한 HRV 백신은 HRV 감염에 대한 예방 및 치료 모두에 있어 유용하다. NimⅣ 항원, NimⅣ를 포함하는 백신 조성물 및 이들 조성물을 이용하는 방법은 이후 자세히 서술한다.
중화 면역원 Ⅳ (
Neutralizing
Immunogen
Ⅳ,
Nim
Ⅳ)
리노바이러스의 세가지 주요한 표면 중화 면역원(NimⅠ, NimⅡ 및 NimⅢ)은 매우 높은 특이성을 갖는 중화 면역 반응을 유도한다. Nim-특이적 항체는 세포 수용체(ICAM-1)에 바이러스가 흡착하는 것을 막는다. 본 발명은 구조 단백질 VP1의 C-말단부의 17-25 아미노산 서열을 둘러싸는 새로운 Nim(NimⅣ)의 발견에 기초하며, 이는 분자 유전 실험에 의해 동정되었다. 본 발명자들은 NimⅣ가 다른 HRV 혈청형간에도 치환 가능하다는 사실을 증명하였다. 예를 들어, 공여 혈청형 HRV(예를 들어 HRV6 또는 HRV72)의 NimⅣ가 다른 혈청형의 숙주 바이러스(예를 들어 HRV 14)에 주입되었을때, 결과적으로 공여 혈청형의 키메라 재조합 중화 특성이 주어지는데, 이로써 숙주 바이러스의 중화 특성이 크게 변한다. NimⅣ의 재조합 HRV로의 결합은 넓은 범위의 HRV 혈청형에 대한 혈청형 교차 반응성 면역반응을 일으킨다.
키메라
Nim
Ⅳ 항원을 이용하는 재조합
HRV
백신
이상적인 HRV 백신의 한가지 특성은 넓은 범위의 HRV 혈청형의 HRV 감염 위험으로부터 인간을 보호하는 능력이다. 본 발명의 백신은 인간의 질병을 일으키는 많은 수의 HRV 혈청형(대다수 혹은, 더 이상적으로는 모든 혈청형)에 대한 방어적이고 치료적인 면역반응을 유발한다. 이것은 백신 내의 다중 NimⅣ 서열을 사용함으로써 가능한데, 여기에는 예를 들어 공여 혈청형의 NimⅣ항원을 숙주혈청형 HRV의 소집단에 주입하는 단계가 포함될 수 있다. 하기에 기술하듯이, 주입된 NimⅣ 항원은 혈청형 특이적인 강력한 중화 항체반응을 일으킨다. 키메라 혹은 재조합 백신 중에서, 첫 번째 혈청형의 NimⅣ 항원을 숙주 HRV의 두 번째 혈청형과 조합하는 경우 양 HRV 혈청형 모두에 대한 항체 중화 반응이 유발되며, 따라서 NimⅣ 좌위에서의 키메라가 아닌 백신 전체의 방어적 및 치료적 이점이 확대된다. 예를 들어, HRV 14의 NimⅣHRV14 (HRV 혈청형 14의 NimⅣ 항원)를 NimⅣHRV6로 대체하여 HRV 백신 CR6 (하기에 상술되었다)가 만들어진다. 이 백신은 HRV 14 및 HRV 6 모두에 대한 중화 항체의 생성을 유도한다. 또다른 예에서, HRV 14의 NimⅣHRV14를 NimⅣHRV72로 대체하면 HRV 백신 CR72 (하기에 상술되었다)가 만들어진다. 이 백신은 HRV 14 및 HRV 72 모두에 대한 중화 항체의 생성을 유도한다. 다수의 공여 혈청형 NimⅣ 항원과 제한된 수의 숙주 혈청형 HRV와의 조합을 포함하는 재조합 HRV들의 혼합은 HRV 감염을 예방하거나 치료하는 이상적인 백신을 제공한다.
Nim
Ⅳ
펩타이드
본 발명의 두 번째 구현예는 NimⅣ 유전 좌위의 아미노산 서열과 동일한 합성된 또는 자연계의 NimⅣ 펩타이드의 이용에 관한 것이다. 이들 펩타이드들의 예는 본 명세서에 기재되었다(발명의 요약 및 실험예 참조). 광범위한 HRV 혈청형으로부터 만들어진 펩타이드 혼합물들의 투여는 HRV 감염에 대한 예방 또는 치료를 위한 광범위한 방어적 중화 항체 반응을 유발한다. NimⅣ 펩타이드들의 혼합물은 단독으로 또는 약제학적으로 허용 가능한 보조제나 면역 체계 촉진제와 함께 투여될 수 있다(하기 참조).
Nim
Ⅳ 융합 분자
본 발명의 또 다른 양태는 HRV 백신으로 쓰이기 위해 NimⅣ 항원과 생물학적 수송체간의 화학적 또는 생물학적 융합에 관한 것이다. 이러한 정황에 의하여 단일 혹은 다중 혈청형으로부터 유래된 NimⅣ 펩타이드는 적합한 생물학적 수송체(예를 들어 B형 간염 코어 항원)에 결합하여 분해 반감기, 조직 침투성과 특이성 및 검출 또는 면역원성을 향상시킨다.
이러한 다양한 HRV 혈청형으로부터 만들어진 NimⅣ 융합 분자의 혼합물은 HRV 감염을 예방하거나 치료하기 위해 인간을 면역화하는 데에 사용된다. 다른 예로써, NimⅣ 펩타이드(다수의 이종 혈청형으로부터 유래된)들은 HRV 수송체와 크로스링크된다.
투여 및 투여량
본 발명은 한 개 또는 그 이상의 인간 리노바이러스 백신의 예방적 또는 치료적 유효량을 포함하는 조성물을 제공한다. HRV 백신의 혼합물은 동일한 약제학적 조성물(단일 투약 형태)을 가질수도 있고, 혹은 별개의 약제학적 조성물(별개 투약 형태)을 가질수도 있으며, 동시에 투약할 수도 있고, 혹은 이시에 투약할 수도 있다. 조성물은 다양한 약물전달체계를 이용하기 위해 제형화될 수 있다. 적절한 제형을 위해 한 개 또는 그 이상의 생리학적으로 허용 가능한 첨가제 또는 수송체가 조성물에 포함될 수 있다. 바이러스는 동결건조 형태이거나 식염수 또는 물과 같은 생리학적으로 적당한 용액 또는 완충액에 용해된 상태일 수 있다. 제조 및 제형화의 표준적인 방법은 예를 들어, Remington 's Pharmaceutical Sciences (18 판, ed. A. Gennaro, (1990), Mack Publishing Company, Easton, PA)의 방법을 이용하여 실시될 수 있다.
조성물은 예방 및/또는 치료를 위해 비강, 비경구, 국소적, 구강 또는 국부적 투여를 할 수 있다. 전형적으로, 조성물은 비강 투여(예를 들어 분무기 흡입또는 노즈 드랍), 비경구 투여(예를 들어 근육내, 피하내 또는 정맥내 주사), 경구 투여, 국소 투여 또는 관절내 투여할 수 있다. 투여의 추가적 경로는 혈관내, 동맥내, 종양내, 복강내, 심실내, 경막내, 안구, 공막내, 안와내, 직장 또는 국소 투여를 포함한다. 데포 주사(depot injection)나 침식 임플란트 등의 수단에 의한지속 분비 투약은 본 발명에 특이적으로 포함되어 있다. 따라서 본 발명은 적합한 수송체에 용해 또는 현탁시킨 상기 기술한 시약을 포함하는 점막 또는 비경구 투여하는 조성물을 제공하며, 수송체는 바람직하게는 용액이고, 예를 들어 물, 완충액, 식염수 또는 PBS(phosphate buffered saline) 등이다. 조성물은 pH 조절 및 완충 시약, 탄성 조절 시약, 습윤제 및 세정제 등 생리적 상태에 가깝게 만드는 약제학적으로 허용 가능한 보조 물질을 포함할 수 있다. 본 발명은 바인더(binder)나 필러(filler)와 같이 정제, 캡슐 등의 제형화를 위한 불활성 물질을 포함하는 구강 전달을 위한 조성물을 제공한다. 나아가, 본 발명은 크림, 연고 등의 형성을 위한 용매나 유화제같은 불활성 물질을 포함하는 국부 투여를 위한 조성물을 제공한다.
이들 조성물은 공지의 방법에 의해 살균되거나 살균 여과될 수 있다. 결과물인 용액은 상용화를 위해 동결 건조하여 포장될 수 있으며, 동결 건조물은 투여 전에 살균 수용액 수송체에 결합시킬 수 있다. 조성물의 pH는 전형적으로 3-11이고, 예를 들어 5-9, 6-8, 또는 7-7.5와 같이 7-8범위이다. 고형 상태의 조성물은 각각 고정된 양의 시약을 함유하는 밀봉된 정제 또는 갭슐 같은 다중 싱글 도스 유닛(multiple single dose unit)으로 포장될 수 있다. 조성물은 동결 건조 상태의활성 물질을 포함할 수도 있으며, 이들은 투여를 위해 액상화 된다.
유효량의 백신을 포함하는 조성물은 예방 및/또는 치료를 위해 투여될 수 있다. 예방 목적의 적용에 있어서, 조성물은 HRV 감염에 대한 증가된 민감성으로 대상체(예를 들어 인간)에 투여될 수 있다. 본 발명의 조성물은 임상적 또는 준 임상적 질병의 발병을 지연시키거나, 감소시키거나, 막기 위해 대상체(예를 들어 인간)에 투여될 수 있다. 치료 목적의 적용에 있어서, 조성물은 이미 HRV 감염으로 고통받는 환자(예를 들어 인간)에 증상과 합병증을 치료하거나 적어도 부분적으로 억제시키기에 충분한 양 만큼 투여된다. 이러한 목적 달성을 위한 적당량을 “치료적 유효량”이라 정의한다. 적정 투여량 및 처방 계획은 당업자에 의해 결정된다. 상기 용도를 위한 유효량은 발병과 증상의 정도 및 환자의 체중과 일반적 상태에 의해 좌우될 수 있으나, 일반적으로 시약 당 또는 환자당 일회 복용량 시약당 약0.5 mg - 3000 mg의 범위이다. 백신은 1회 투여되거나 또는 최초/부스팅 투여될 수도 있다. 초기 투여 및 부스팅 투여를 위한 적절한 투약은 초기 투여를 뒤 1시간이상, 일, 주 또는 월의 간격을 두고 반복적인 투약을 하는 것이 전형적인 방법이다. 본 발명의 조성물 내의 시약의 총 유효량은 환약형태로 혹은 비교적 짧은 시간 동안의 주입을 통해 포유류에 단일 투약으로 투여될 수 있으며, 또는 분별 처리 방법에 의해 긴 시간동안 다중 투약(예를 들어 4-6, 8-12, 14-16 또는 18-24 시간마다 또는 2-4일, 1-2주, 1개월마다)으로 투여될 수 있다.
본 발명의 조성물 내의 1개 또는 그 이상의 시료의 치료적 유효량은 포유류(예를 들어 인간)에 적용될 수 있으며, 각 개체의 나이, 체중, 면역체계의 보전성 및 어떠한 포유류인지를 기준으로 당업자에 의해 결정된다. 본 발명의 시약은 치료 대상인 대상체에 바람직한 결과(예를 들어 HRV감염을 막거나 감염된 대상체의 증상을 완화시킴)를 만들어내는 유효량이 대상체(예를 들어 인간, 마우스, 소, 양, 돼지 등의 가축, 개, 고양이 등의 애완동물과 같은 포유류)에 투여된다. 이러한 치료적 유효량은 경험있는 당업자에 의해 결정될 수 있다. 본 발명의 백신은 다른 치료법(예를 들어 소분자 치료법(small molecule-based approaches)) 뿐 아니라 다른 백신 치료법과 함께 사용될 수 있다. 예를 들어, 바이러스는 동일하거나 상이한 항원을 포함하는 다른 재조합 백신과 함께 사용될 수 있다. 본 발명의 조합 방법은 본 발명의 백신과 다른 형태의 항원을 함께 투여하는 것을 포함할 수 있다. 또는, 본 발명의 백신은 초기-부스팅 전략으로써 다른 치료법(예를 들어 서브유닛 또는 HBc 치료법(HBc-M2e; Fiers et al. Virus Res . 103:173-176 (2004); WO 2005/055957; US 2003/0138769 Al; US 2004/0146524A1; US 2007/0036826 Al))과 함께 사용될 수 있는데, 본 발명의 백신이나 다른 치료법이 초기 백신화 방법으로 사용되고 다른 치료법이 부스팅을 위해 사용되거나, 그 반대일 수 있다. 나아가, 본 발명은 본 발명의 백신을 초기 백신화 및 부스팅 시약으로 모두 사용하는 초기-부스팅 전략을 포함한다.
본 발명의 백신은 포유류와 같은 대상체(예를 들어 인간)에 표준적인 방법으로 투여될 수 있다. 비강내 투여에 있어서, 벡터는 노즈-드랍(nose-drop) 또는 에어로졸이나 분무 형태의 흡입으로 투여될 수 있다.
본 발명의 벡터는 인간과 같은 대상체에 살아있거나 또는 죽은 백신으로써 투여될 수 있다. 살아있는 백신은 당업계에 알려진 방법(Griinberg et al. Am . J. Respir . Crit . Car . Med. 156:609-616 (1997))으로 비강내 투여될 수 있다. 적당한 투여량 및 처방량은 당업자에 의해 결정될 수 있다. 예로써, 투약 범위는 예를 들어 도스 (dose)당 103-108 pfu이다. 백신은 유익하게는 단일 투여로 투약될 수 있으나, 당업자가 필요하다고 결정할 경우 부스팅이 수행될 수도 있다. 불활성화 백신에 있어서, 바이러스는 예를 들어 포르말린이나 자외선 처리로 죽일 수 있으며, 이후 도스 당 108 pfu로 비강내 투여될 수 있고, 선택적으로 적합한 보조제(예를 들어 키틴이나 LT변이체)와 함께 투여될 수 있다. 이러한 치료법에서 1회 이상 투여(예를 들어 2-3 도스)가 바람직하다.
본 발명의 백신에 포함된 펩타이드나 단백질은 그 길이가 예를 들어 당업자가 적당하다고 결정하는 바에 따라 3-100, 5-500, 10-100, 20-55, 25-45 또는 35-40 아미노산일 수 있다. 따라서 본 발명에서는 7-25, 12-22 및 15-20 아미노산 길이의 범위인 펩타이드가 사용될 수 있다. 나아가, 여기서 언급된 펩타이드들은 당업자가 적당하다고 판단하는 바에 따라 추가적인 서열을 포함하거나, 또는 길이가 감소할 수도 있다. 여기서 나열된 펩타이드들은 본 발명의 벡터 내에 존재할 수도 있고, 또는 변형될 수도 있는데, 예를 들어 1개 또는 2 이상(예를 들어 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 또는 그 이상)의 아미노산이 치환 또는 삭제될 수 있다. 또한 펩타이드들은 더 큰 펩타이드의 일부로서 백신 내에 존재할 수 있다. 또는, 본 명세서에서 언급된 펩타이드는 아미노기 말단 및/또는 카르복시기 말단부에 추가적인 서열을 포함할 수 있는데, 이들 서열은 펩타이드 서열과 자연적으로 결합된 것일 수도 있고(예를 들어 인플루엔자 바이러스 유전자에서 펩타이드가 인접하는 경우) 아닐수도 있다(예를 들어 합성 링커 서열). 펩타이드는 한쪽 또는 양쪽 말단에 예를 들어 1-25, 2- 20, 3-15, 4-10 또는 4-8 아미노산을 포함할 수 있다. 특별한 예로써, 펩타이드는 아미노기 말단 및/또는 카르복시기 말단부에 1-3 링커 서열을 포함할 수 있다.
보조제
백신의 사용을 위해서, 선택적으로 당업자에 알려진 보조제를 사용할 수 있다. 보조제는 투약 경로에 기초하여 선택된다. 비강내 투여에 있어서, 키틴 미세입자(CMP)가 사용될 수 있다(Asahi Ozaki et al. Microbes and Infection 8:2706-2714 (2006) Ozdemir et al. Clinical and Experimental Allergy 36:960-968 (2006) Strong et al. Clinical and Experimental Allergy 32:1794-1800 (2002)). 그 밖에 점막 투여(예를 들어 비강 또는 구강내 투여)에 있어서 사용에 적합한 보조제는 대장균의 이열성 톡신(LT) 또는 이들의 변이체를 포함한다. 불활성 바이러스에 있어서, 비경구 보조제가 사용될 수 있는데 상기 보조제는 예를 들면 알루미늄 화합물(예를 들어 알루미늄 하이드록사이드, 알루미늄 포스페이트 또는 알루미늄 하이드록시포스페이트), 리포좀 제형, QS21과 같은 합성 보조제, DMP(muramyl dipeptide), 모노포스포릴 리피드 A 또는 폴리포스파진(polyphosphazine)을 포함한다. 또한 보조 활성을 가진 사이토카인 코딩 유전자도 벡터에 삽입될 수 있다. 따라서, GM-CSF, IL-2, IL-12, IL-13 또는 IL-5과 같은 사이토카인 코딩 유전자도 외부 항원 유전자와 함께 삽입되어 면역반응을 촉진시키거나 세포성, 체액성 또는 점액성 면역반응을 더 특이적으로 만드는 백신을 생산한다. 또는, 사이토카인은 알려진 방법(예를 들어 직접 접종, 네이키드 DNA 또는 바이러스 벡터 등)에 의해 재조합 백신으로부터 동시에, 연속적으로 또는 개별적으로 전달될 수 있다.
본 발명의 다른 특성이나 이점은 이하 발명의 상세한 설명, 도면 및 청구항들을 통해 보다 명확하게 된다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.
NimIV 의
동정
본 발명자들은 바이러스 구조단백질 1(VP1)의 C 말단의 비보존 서열인 17-25 아미노산을 포함하는 중화 면역원인 NimⅣ을 발견하였다. 이 에피토프는 HRV 혈청형에 따라 바뀔 수 있다. NimⅣ가 치환되는 경우, 이에 의해 이종 HRV에 중화 특성을 제공한다. NimⅣ에 상응하는 합성 펩타이드는 ELISA(enzyme linked immunosorbent assay) 및 웨스턴 블롯팅 실험에서 바이러스-특이적 항체에 의해 인식되었다.
두 개의 생존 키메라인 HRV14-NimⅣHRV6(CR6) 및 HRV14-NimⅣHRV72(CR72)가 하기에 기술한 방법으로 실행한 분자진화 실험(VPl 유전자 셔플링)동안 분리되었다. 도 12a에 나열된 바대로, CR6 및 CR72의 VP1서열은 CR6 및 CR72에서 NimⅣHRV14를 NimⅣH R V6 또는 NimⅣHRV72로 대체할 뿐 아니라 몇몇 개별 아미노산의 치환을 포함하였다. NimIV들의 나열(도 12b)은 모든 NimIV 바이러스들이 보존적 중앙 도메인(PVIKKRK/E)을 가지는 반면, 측면부위는 다양함을 보여준다. 흥미롭게도, 279 및 282 위치의 아미노산은 모든 HRV 혈청형(RM2506)에서 보존되어 있거나 유사한 것으로 보였다. 폴리클로날 기니피그(guinea pig) 항체인 GP6 및 GP72 (ATCC)는 CR6 및 CR72 키메라를 강하게 중화시키는 것으로 나타난 반면, 백본 바이러스(backbone virus)인 HRV 14는 중화시키지 못했다(도 13). HRV6 및 HRV72에 대해 제조된 마우스 폴리클로날 항체도 CR6 및 CR72를 GP6 또는 GP72보다 10배 낮은 타이터로 중화시키는 것으로 나타났다.
CR6 및 CR72에서의 NimIV 결정자는 중화 항체가 결합하기 좋은 형태로 표면에 노출되어 있다. 키메라에서 이 에피토프들의 형태는 야생형 바이러스들의 그것과 일치할 것으로 보인다.
NimIV
대체물의 분리방법으로서의
DNA
셔플링
NimIV의 발견은 HRV 키메라인 CR6의 합성 이후 가능해졌으며, CR6은 VPl의 C-말단의 18 아미노산을 HRV 6의 상응하는 17 아미노산 부위로 대체한다(도 1). 이 서열은 DNA 셔플링(shuffling)(자세한 방법은 Patten et al. "Applications of DNA shuffling to pharmaceuticals and vaccines," Curr Opin Biotechnol 8:724-733 (1997); 실험예는 Zhang et al. "Broadly cross-reactive mimotope of hypervariable region 1 of hepatitis C virus derived from DNA shuffling and screened by phage display library," J Med Virol 71 :51 1-517 (2003), Castle, et al., "Discovery and directed evolution of a glyphosate tolerance gene," Science 304:1151-1154 (2004); Pekrun et al. "Evolution of a human immunodeficiency virus type 1 variant with enhanced replication in pig-tailed macaque cells by DNA shuffling," J Virol 76:2924-2935 (2002); Toth et al. "Improvement of the movement and host range properties of a plant virus vector through DNA shuffling," Plant J 30:593-600 (2002); Kaper et al, "DNA family shuffling of hyperthermostable beta-glycosidases," Biochem J 368:461-470 (2002); Wang et al, "Directed evolution of substrate- optimized GroEL/S chaperonins," Cell 111 : 1027-1039 (2002); 및 Hurt et al, "Highly specific zinc finger proteins obtained by directed domain shuffling and cell- based selection," Proc Natl Acad Sci U.S.A 100:12271-12276 (2003))에 기재되어 있다.)를 한 후 이들 절편을 HRV 14 감염성 클론에 다시 클로닝한다. 약 100 VP1서열이 DNA 셔플링 실험에 사용되었다(Ledford et ah, "VPl sequencing of all human rhinovirus serotypes: insights into genus phylogeny and susceptibility to antiviral capsid-binding compounds," J Virol 78:3663-3674 (2004)).
GP
6 및
GP
14에 의한
CR6
의 중화
CR6 키메라의 중화 특이성은 근원인 HRV 14벡터(pWR3.26 감염성 클론)와 다른 것으로 나타났다. HRV14-특이적 폴리클로날 기니피그 항체(GP 14; 도 2a)에서 검출된 중화 뿐 아니라 본 발명자들은 기니피그 HRV6-특이적 항체(GP6; 도 2b)에 의해 GR6가 중화되는 반면, 근원인 HRV14는 GP6에 의해 중화되지 않는다는 사실을 발견하였다. 이는 HRV6의 C-말단 부위가 면역원성이 있으며 중화능력이 있음을 보여준다.
CR6
은
Nim
Ⅰ- 및
Nim
Ⅱ-에 의해 강하게 중화되지만
Nim
Ⅲ-특이적
모노클로날
항체에 의해서는 중화되지 않는다
HRV14 백그라운드에 NimⅣHRV6가 존재하는 경우 다른 Nim(HRV 14)의 NA 를 바꾼다. NimHRV14-특이적 모노클로날 항체와 PRNT는 CR6 NimⅢ-특이적 중화가 감소한 반면(-10배, 도 7) NimⅡ-특이적 NA는 증가했고(5배, 도 8), NimⅠ-특이적 중화는 미세한 영향만을 받음(1.5배, 도 9 및 도 16)을 보여주었다. 이러한 발견들은 도 10에 요약하였다.
근원
Nim
의 잠재적
중화력에
대해
Nim
Ⅳ
HRV6
and
HRV72
가 미치는 영향
NimⅣ 대체가 근원 Nim의 중화 특성에 미치는 영향에 대해 연구하기 위해 CR6 및 CR72에 대해 HRV 14 Nim-특이적 마우스 모노클로날 항체가 사용되었다(도 14). 양 키메라의 NimⅠ의 중화능력은 미미한 영향을 받았지만, CR6의 NimⅡ 및 NimⅢ는 각각 5배 높거나 10배 낮은 중화율을 보였다. 반대로 NimⅢ-의존성 CR72 중화는 영향을 받지 않았다. 불행하게도 NimⅡ-특이적 항체에 의한 CR72의 중화는 항체공급이 제한된 이래 연구되지 못했다. 이들 데이터에 의해 결정학 및 이전의 돌연변이연구 데이터와 일치하는 NimⅣ 및 NimⅢ 도메인간의 강력한 상호작용이 증명되었다.
CR6
및
HRV
14내에서
Nim
Ⅳ와 다른
Nim
들과의 상호작용 모형
본 실험 결과는, CR6의 형태적 보존(integrity)에 있어서의 NimⅣ HRV6의 중요성을 보여준다. 알려진 결정구조(Che et al. "Antibody-mediated neutralization of human rhinovirus 14 explored by means of cryoelectron microscopy and X-ray crystallography of virus-Fab complexes," J Virol 72:4610-4622 (1998))를 기초로 만들어진 3D 모형은 HRV 14에서 NimⅢ 와 NimⅣ 가깝게 접촉하지만 CR6 입자에서는 그렇지 않다는 것을 보여준다(도3 b 및 도 3d). HRV 14에서의 이러한 접촉은 VP1의 K287의 (+)전하가 NimⅢ의 (-)전하의 잔기와 반응함으로서 이루어진다. CR6에서 T287의 돌연변이는 이러한 연결을 파괴한다(도 3d). 흥미롭게도, K287에서의 돌연변이의 NimⅢ-특이적 중화에 대한 부정적 영향은 이미 기록되었으나 (Sherry et al. "Use of monoclonal antibodies to identify four neutralization immunogens on a common cold picornavirus, human rhinovirus," J Virol 57:246-257 1986)), 저자는 VP1의 C-말단 부위가 중화 면역원이 아니라고 주장하였는데 이는 그 부위에 특이적인 모노클로날 항체에 의해 중화되는 이스케이프 변이(escape mutant)가 없다는 이유이다. CR6의 NimⅣHRV6는 Nim-특이적 중화에 미세한 영향만을 미치는데 이는 NimⅣ의 이러한 에피토프가 더 거리가 멀기 때문이다(도 3c).
CR6의 독특한 특성은 NimⅡ-특이적 중화에 5배 더 민감하다는 것이다(도 14). 이러한 민감도 상승은 NimⅣHRV6 및 NimⅡHRV14의 직접적인 물리적 접촉으로 설명될 수 있다. 3D 모형은 바이러스 입자내 이들 Nim의 거리 위치를 알려주었다(도 3 a-c). 아마도 이런 현상은 바이러스입자 표면의 NimⅡ의 노출부위가 모노크로날 항체에 잘 결합하도록 하는 VP2의 형태변화 때문일 것으로 보인다.
CR6
의 교차 중화(
Cross
-
neutralization
) 프로파일
NimⅣHRV6 를 100개의 혈청형의 NimⅣ와 나열하여 가장 가까운 두 개의 일치 부위인 HRV37 및 HRV92의 C-말단을 동정하였다(도 4a). 분석에 의해 NimⅣ 내에 세 부위가 있음이 밝혀졌는데 이들은 6 아미노산(P-V-I-K-K-R)으로 구성된 보존(코어)부위 및 코어로부터 각각 업스트림과 다운스트림인 부위이다. 코어는 NimⅣ의 연관 바이러스들(HRV 14, HRV72, HRV83, HRV86, HRV35, HRV79, 및 HRV3)에서도 발견되었다(도 11). R282가 100개 혈청형 중에서 보존적이라는 점은 주목할 필요가 있다. 도 4a에서 보는 바와 같이, NimⅣHRV6 및 NimⅣHRV37 의 다운스트림의 부위의 6 아미노산은 거의 동일한 반면(D/E-N-I-T-T-Y), HRV92 의 상응하는 부위는 이들과 매우 다르다(S-L-I-T-N-Y). NimⅣHRV6 및 NimⅣHRV92 의 업스트림 부위는 두 개의 동일한 아미노산을 가지는 반면, NimⅣHRV37의 상응하는 부위는 NimⅣHRV6와 명확한 유사점을 보이지 않는다. Nim들 간의 이러한 차이는 CR6 바이러스의 중화에 있어서 에피토프의 어느 부위가 중요한지에 대한 평가가 가능하도록 한다. 이를 연구하기 위해 본 발명자들은 세가지 혈청형 모두에 대한 마우스의 회복기 혈청을 만들고 CR6에 대한 중화 실험을 하였다(도 4b). 항-HRV37 NimⅣHRV6 및 NimⅣHRV7 의 다운스트림 부위의 광범위한 유사성에도 불구하고 혈청은 중화를 보이지 않음으로써 다운스트림 부위가 중화에 중요한 부위가 아니란 점이 확인되었다. 반대로, 항-HRV92 혈청은 항-HRV6 보다 조금 감소된 NA를 보였다. 이들 세가지 혈청 보두 HRV14를 중화시키지 못했다. 이 결과는 NimⅣ의 기능적 해부도를 제공함으로써 코어나 다운스트림 부위에 비하여 업스트림 부위가 교차 중화 활성이 높다는 증거를 제시한다. 마우스 항체에 의해 이들 바이러스들이 구별되어 인식되는지 여부는 NimⅣ-특이적 서열과 이들 항체가 실제로 반응을 하는지에 의해 확인되는데, 이를 알아보기 위해 본 발명자들은 NimⅣHRV14 및 NimⅣHRV6-특이적 펩타이드를 합성하여 동일한 항체 세트를 가지고 웨스턴 블롯 및 ELISA 분석을 실시하였다.
Nim
Ⅳ-특이적
펩타이드
GP
14 및
GP
6의 면역반응성은 혈청형 특이적
펩타이드들을
구별짓는다
GP6 및 GP14는 웨스턴 블롯(도 5a-b) 및 ELISA 분석(도 5c)에서 특히 상동성 NimⅣ-특이적 펩타이드를 인식한다. 도 5a-b는 KLH 결합 물질과 프리 아미노산을 이용한 웨스턴 블롯 결과를 나타낸다. KLH의 높은 분자량(-3 x 105kDa) 때문에 도 5a의 단백질 밴드는 선명하지 않다. 펩타이드/항체 간 이종 조합(GP6/NimⅣHRV14 또는 GP14/NimⅣHRV6)에 의해선 어떤 신호도 검출되지 않는 바 상기 펩타이드들의 면역반응성은 매우 특이적이다. KLH-결합 물질의 이종 조합에서의 미량의 신호는 KLH의 특성에 기인한다. 이러한 결과는 GP6 및 GP 14를 합성하기 위해 사용된 정제된 HRV 6 및 HRV 14 표면의 NimⅣ 에피토프의 직선성과 높은 특이성에 대한 증거가 된다. 이들 펩타이드간의 명확한 교차 중화가 없음은 이들 Nim의 코어 부분이 면역원성이 낮음을 보여준다. 만약 이것이 사실이 아니라면, 높은 교차-면역반응이 본 실험에서 관찰되었을 것이다.
이들 펩타이드가 GP 6 및 GP 14을 높은 특이성으로 인식한다는 사실도 ELISA 분석을 통해 확인되었다(도 5c). H 14의 GP 14에 대한 반응성이 H 6의 GP 6에 대한 반응성보다 낮음은 바이러스 입자 표면에서의 NimⅣ 에피토프의 공여가 차이가 남을 의미한다. 이러한 결과는 도 2에 나타난 PRNT 데이터와 일치한다. 양 실험 모두에서 HRV 14와 HRV6 또는 그들의 NimⅣ-특이적 펩타이드간의 명확한 교차-반응성은 관찰되지 않았다.
인 비보(
In
vivo
) 연구: 항-
CR6
혈청의
HRV6
중화
11-12주령의 암컷 Blb/c 마우스를 보조제(알루미늄 하이드록사이드) 또는 모크(희석액)와 혼합한 바이러스 현탁액(105 pfu/ml)을 100 μl 부피로 복강내 투여함으로써 3차례(1일, 14일 및 28일) 면역화시켰다. 마우스는 49일째 출혈을 출혈을 보였다. 혈청 항체의 양을 측정하기 위해 마우스는 접종(기준선) 전 및 이소플루오란 흡입 마취 하에서의 후안와(retro-orbital)경로 혹은 마취 없이 하악(mandibular) 경로로 면역화(7.7μl/ 체중g 이하 부피로)한 뒤 30-40일 후 출혈시켰다. PRNT 분석에 의해 HRV 6가 2번 마우스의 혈청에 대한 특이적 중화를 보임을 확인하였다(도 6). 또한 HRV 14 바이러스의 감소된 중화를 보였는데, 이는 CR 6의 NimⅣHRV6 가 면역결정부위(mmunodominant)에피토프임을 나타낸다.
실험방법
펩타이드
및
콘쥬게이트
HRV6 (CKNIVP VIKKRENITT Y), HRV 14 (CNTEPVIKKRKGDIKSY) 및 HRV72 (CNPKPVIKKREGDIKTY)의 구조 부위의 C-말단 부위와 상응하는 올리고 펩타이드인 NimⅣHRV6 NimⅣHRV72 및 NimⅣHRV14는 표준적인 고체상합성(solid-phase synthesis)방법에 따라 Biosynthesis, Inc (Lewisville, TX)에 의해 만들었다. 일부 펩타이드 물질들은 크로스링커인 sMBS(succinimidyl-4-(p-maleimidophenyl)- butyrate) 및 환원제인 TCEP HCL(TCEP HCl Tris (2-carboxyethyl) phosphine hydrochloride)를 사용하여 콘콜레파스 콘콜레파스(Concholepas concholepas)(KLH)의 헤모사이아닌(Hemocyanin)과 접합시켰다.
세포배양, 바이러스 증식 및 시약
HRV 혈청형 6, 14, 35, 37, 72, 83, 86 및 92 저장액(ATCC)을 H1 HeLa 세포의 연속적인 감염에 의해 높은 타이터(titer)로 증폭하였다. HeLa 세포(ATCC)는 일상적인 증식을 위해 MEM(Minimum Essential Medium)(Invitrogen)에 5% 우태아혈청(JRH Biosciences, KS)과 함께 배양되었다. 세포는 아포화(subconfluent) 성장상태에서 배양되었다. 34℃에서 48시간이 지난 후 각각 -80℃와 370℃의 세 번의 결빙-해빙 순환(freeze-thaw cycle)에 의해 바이러스들이 세포 밖으로 분비되었다. 세포 파편들을 버리고, 증폭된 바이러스들을 포함한 상등액을 분주하고 -80℃에서 동결시켰다. HRV 혈청형 6, 14, 72, 92,및 37에 대한 기니피그 항혈청은 ATCC에서 구입하였다.
VPl
유전자
셔플링
바이러스 라이브러리
VP1의 DNA 절편은 HRV 혈청형 6, 14, 35, 37, 72, 79, 83, 86, 및 92의 RNA로부터 역전사효소 중합연쇄반응(RT-PCR)에 의해 증폭하였다. HRV 혈청형 83, 86 및 92의 VP1 유전자의 내부 AvrⅡ 위치들을 추가적으로 클로닝하기 위하여, 재조합 PCR 방법을 실시하였다. 모든 PCR 절편들은 합쳐지고 뒤섞인 후 변형된 HRV 14 cDNA 벡터인 pWR3.26 (ATCC)에서 클로닝되었다. 요약하자면, 합쳐진 PCR 절편의 2μg 이 DNase I (Amersham Pharmacia Biotech, Inc)으로 처리되어 50-100 bp DNA 절편이 겔로 정제된 후 프라이머 없이 94℃, 30초, 72℃, 1분간 15-25 사이클을 PCR을 한 뒤 클로닝 프라이머로 94℃ 30 초, 55℃ 30 초, 72℃ l분으로 25 사이클동안 PCR을 하였다. 뒤섞인 증폭 VP1 서열의 라이브러리는 변형된 pWR3.26 플라스미드의 XhoⅠ 및 AvrⅡ 사이트로 클로닝하였다. 이를 위해 HRV 14 cDNA 클론 pWR3.26은 VP1 서열의 5'의 XhoⅠ사이트를 삽입하는 변형이 가해졌다(도 12). XhoⅠ 및 AvrⅡ 사이트는 각각 VP1의 정방향 및 역방향 프라이머에 결합되었다.
VP1 셔플링 플라스미드 DNA 라이브러리는 MluⅠ 소화(digestion)에 의해 선형화된 후 인 비트로(in vitro)에서 T7 트랜스크립션 키트(Epicentere, Inc)에 의해 전사되었다. RNA가 H1-Hela 세포(ATCC)에 리포펙틴(Invitrogen, Inc)에 의해 형질전환되었다. 세포들은 34℃에서 2-4일 배양 후 수집되었다. 세포 샘플들은 세 번의 결빙-해빙 순환 후 부유물이 H1-Hela 세포의 모노 레이어를 감염시키는데 사용되었다. 바이러스 라이브러리는 -80℃에서 저장하였다.
HRV14
-
Nim
Ⅳ 재조합 바이러스의 분리
HRV14-NimⅣHRV6(CR6) 키메라는 상기 기술한 바이러스 라이브러리에서 분리한 플라그이다. 다른 HRV14-NimⅣHRVX 재조합체를 분리하기 위해 바이러스 라이브러리의 총 RNA가 VP1 유전자의 3` 말단을 잇는 8개의 혈청형-특이적 역방향 프라이머를 사용하는 8개의 다른 RT-PCR 반응의 주형으로 사용된다. VP1 유전자의 업스트림의 보존부위에 상보적인 동일한 정방향 프라이머가 모든 반응에 사용되었다. 생성된 PCR 절편들은 다시 상기의 방법으로 pWR3.26 플라스미드로 클로닝 되었다. 전사 및 H1 Hela 세포로의 형질전환 후, 각각의 바이러스들은 플라그로 정제되고 시퀀싱되었다.
동물 프로토콜
8주령 암컷 Balb/c 마우스(그룹당 10마리)가 0일째 에 준비되었고, 이후 14일 및 28째에 여과된 세포 배양액 (1)HRV14-NimⅣHRV6, (2)HRV14-NimⅣHRV72 또는(3)근원(parental)HRV 14 또는 음성 대조군으로서 모크(배양 부유물)를 100 μg의 보조제(알루미늄 하이드록사이드)와 함께 500 μL 의 부피로 도스(dose)당 ~1.0x106pfu를 함유하는 여과된 세포 배양액을 복강내 투여함으로써 부스팅시켰다.
KLH 펩타이드에 결합한(혹은 결합하지 않은) HRV14-NimⅣHRV6와 HRV14-NimⅣRV6 는 8주령 암컷 Balb/c 마우스를 면역화하는 데에 사용되었다. 마우스는 0일째에 15 μg의 KLH-결합 펩타이드 100 μl 를 Titermax Gold(1:1 에멀젼)에서 피하주사함으로써 준비하였고, 36일째 및 49일째에 100 μl 우태아혈청에 용해된 15 μg의 프리 아미노산의 복강투여를 통해 두 번 부스팅시켰다.
혈청내 NimⅣ-특이적 항체 타이터는 상응하는 합성 NimⅣ 펩타이드로 코팅된 마이크로타이터 플레이트에서 수행되는 ELISA 분석실험으로 결정되었다.
플라그
감소 중화 실험(
Plaque
Reduction
Neutralization
Test
,
PRNT
)
연구된 약 50 pfu의 HRV는 MEM + 5% 우태아혈청 배양 배지에서 시료 혈청의 다양한 희석비로 총 부피가 300μL가 되도록 혼합되어 4℃에서 밤새 배양하였다. 각각의 혼합물의 100 마이크로 타이터가 H1 Hela 세포의 12개 웰 조직배양 플레이트 중 1개 웰을 감염시키기 위해 사용되었다(웰당 6x105 H1 Hela 세포를 37℃ 인큐베이터에서 밤새 배양하였다). 34℃에서 한시간 배양 후, 세포들은 0.4% 아가로스 1 mL 와 함께 MEM에서 도말되었다. 단일층이 최종 농도 3.7%의 포름알데히드와 함께 고정된 후 70% 메탄올에서 1% 크리스탈 바이올렛으로 염색되었다.
ELISA
96 웰 플레이트는 NimⅣ-특이적 펩타이드 5μg/ml 또는 정제된 HRV 14 바이러스로 4℃에서 밤새 코팅되었다. 플레이트는 다양한 희석비의 항혈청과 함께 37℃에서 한시간 동안 배양한 후, 1:1000 염소 항-마우스 IgG-AP 접합 항체(Southern Biotech, Inc)와 함께 37℃에서 한시간 동안 배양하였다. 플레이트는 vendor (Sigma, Inc)의 방법으로 알칼린 포스페이타제 기질에서 성장시켰다.
웨스턴
블롯
20 μg 의 펩타이드를 10% 트리스-글라이신 SDS 겔(Novex, Invitrogen, Inc)에 로드시켰다. 짧은 시간의 전기영동 후, 펩타이드를 니트로셀룰로스(Novex, Invitrogen, Inc)막에 옮겼다. 상온에서 1시간동안 블로킹 용액(우태아혈청/0.05% tween에 5% 탈지유를 용해시킴)에 막을 적심으로써 막에 대한 비특이적 결합이 이루어졌다. 막은 기니피그 항-HRV 6 또는 항-HRV 14 폴리클로날 항체(ATCC)와 함께 1:1000 블로킹 용액과 함께 4℃에서 밤새 배양하였다. 우태아혈청/0.05% tween에서 15분간 세 번 세척 후, 막을 염소 항-마우스 IgG-AP 접합 항체(Southern Biotech)와 함께 블로킹 용액과 함께 상온에서 1시간 동안 배양하였다. 막은 AP 기질(Sigma SIGMA FAST™ BCIP/NBT)에서 10분간 만들었다.
본 명세서의 모든 간행물, 특허 출원 및 특허문헌은 본 명세서에 참조로서 삽입된다.
본 명세서에서 기술된 방법의 다양한 변형과 파생형은 본 발명의 사상과 범위 내에서 당업자에게 자명하다. 비록 본 발명에서 바람직한 특별한 구현예를 제시하였으나, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 본 발명을 실시하기 위한 바람직한 형식의 다양한 변형은 의료계, 약학계 또는 기타 관련 분야의 당업자에게 명백한 것으로 본 발명의 범위를 벗어나지 않는다. 본 명세서에서 “a”및 “the” 같은 단수형은 특별한 언급이 없는 한 상응하는 복수형을 제외하는 것이 아니다.
<110> Acambis Inc. et al.
<120> Novel Neutralizing Immunogen (NIMIV) of RHINOVIRUS and Its Use
for Vaccine Applications
<130> 06132/113WO2
<140> PCT/US07/21053
<141> 2007-10-01
<150> US 60/848,451
<151> 2006-09-29
<160> 43
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 6
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 1
Pro Val Ile Lys Lys Arg
1 5
<210> 2
<211> 7
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 2
Pro Val Ile Lys Lys Arg Lys
1 5
<210> 3
<211> 7
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 3
Pro Val Ile Lys Lys Arg Glu
1 5
<210> 4
<211> 7
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 4
Pro Val Ile Lys Lys Arg Ser
1 5
<210> 5
<211> 7
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 5
Pro Val Ile Glu Lys Arg Thr
1 5
<210> 6
<211> 7
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 6
Pro Lys Ile Ile Lys Lys Arg
1 5
<210> 7
<211> 7
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 7
Pro Val Ile Lys Arg Arg Glu
1 5
<210> 8
<211> 7
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 8
Pro Ile Ile Ala Lys Arg Glu
1 5
<210> 9
<211> 7
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 9
Thr Ile Ile Lys Lys Arg Thr
1 5
<210> 10
<211> 16
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 10
Asn Thr Glu Pro Val Ile Lys Lys Arg Lys Gly Asp Ile Lys Ser Tyr
1 5 10 15
<210> 11
<211> 7
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 11
Thr Ile Val Lys Lys Arg Thr
1 5
<210> 12
<211> 7
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 12
Thr Ala Ile Val Thr Arg Pro
1 5
<210> 13
<211> 7
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 13
Val Ala Ile Arg Pro Arg Thr
1 5
<210> 14
<211> 7
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 14
Thr Ala Ile Val Arg Arg Asn
1 5
<210> 15
<211> 17
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 15
Cys Lys Asn Ile Val Pro Val Ile Lys Lys Arg Glu Asn Ile Thr Thr
1 5 10 15
Tyr
<210> 16
<211> 17
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 16
Cys Asn Thr Glu Pro Val Ile Lys Lys Arg Lys Gly Asp Ile Lys Ser
1 5 10 15
Tyr
<210> 17
<211> 17
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 17
Cys Asn Pro Lys Pro Val Ile Lys Lys Arg Glu Gly Asp Ile Lys Thr
1 5 10 15
Tyr
<210> 18
<211> 17
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 18
Lys Asn Lys Ile Val Pro Val Ile Lys Lys Arg Glu Asn Ile Thr Thr
1 5 10 15
Tyr
<210> 19
<400> 19
000
<210> 20
<211> 16
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 20
Gln Ala Ile Val Pro Val Ile Lys Lys Arg Ser Leu Ile Thr Asn Tyr
1 5 10 15
<210> 21
<211> 15
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 21
Met Ile Thr Pro Val Ile Lys Lys Arg Asp Asn Ile Thr Thr Tyr
1 5 10 15
<210> 22
<211> 7
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 22
Thr Gln Gly Leu Lys Asn Ala
1 5
<210> 23
<211> 7
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 23
Thr Ala Asn Arg Gln Asn Asp
1 5
<210> 24
<211> 7
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 24
Thr Ala Asn Lys Gln Asn Gly
1 5
<210> 25
<211> 7
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 25
Gln Pro Asn Arg Gln Gly Glu
1 5
<210> 26
<211> 7
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 26
Ile Gln Gly Gln Lys Asn Glu
1 5
<210> 27
<211> 7
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 27
Asn Val Asn Lys Gln Asn Glu
1 5
<210> 28
<211> 7
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 28
Val Ala Asn Gln Gln Asn Glu
1 5
<210> 29
<211> 7
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 29
Thr Ala Asn Gln Gln Asn Thr
1 5
<210> 30
<211> 7
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 30
His Ala Asp Arg Gln Asn Glu
1 5
<210> 31
<211> 7
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 31
Asn Ala Asn Arg Gln Asn Glu
1 5
<210> 32
<211> 16
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 32
Asn Pro Lys Pro Val Ile Lys Lys Arg Glu Gly Asp Ile Lys Thr Tyr
1 5 10 15
<210> 33
<211> 16
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 33
Gln Asn Ile Lys Pro Val Ile Glu Lys Arg Thr Ser Ile Lys Gln Tyr
1 5 10 15
<210> 34
<211> 15
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 34
Asn Pro Pro Lys Ile Ile Lys Lys Arg Asp Thr Ile Asn Thr Tyr
1 5 10 15
<210> 35
<211> 15
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 35
Ser Ala Lys Pro Val Ile Lys Arg Arg Glu Gln Ile Thr Lys Tyr
1 5 10 15
<210> 36
<211> 15
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 36
Asp Ala Lys Pro Ile Ile Ala Lys Arg Glu Asn Ile Met Lys Tyr
1 5 10 15
<210> 37
<211> 15
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 37
Asp Ser Lys Thr Ile Ile Lys Lys Arg Thr Asn Ile Lys Thr Tyr
1 5 10 15
<210> 38
<211> 289
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 38
Gly Leu Gly Asp Glu Leu Glu Glu Val Ile Val Glu Lys Thr Lys Gln
1 5 10 15
Thr Val Ala Ser Ile Ser Ser Gly Pro Lys His Thr Gln Lys Val Pro
20 25 30
Ile Leu Thr Ala Asn Glu Thr Gly Ala Thr Met Pro Val Leu Pro Ser
35 40 45
Asp Ser Ile Glu Thr Arg Thr Thr Tyr Met His Phe Asn Gly Ser Glu
50 55 60
Thr Asp Val Glu Cys Phe Leu Gly Arg Ala Ala Cys Val His Val Thr
65 70 75 80
Glu Ile Gln Asn Lys Asp Ala Thr Gly Ile Asp Asn His Arg Glu Ala
85 90 95
Lys Leu Phe Asn Asp Trp Lys Ile Asn Leu Ser Ser Leu Val Gln Leu
100 105 110
Arg Lys Lys Leu Glu Leu Phe Thr Tyr Val Arg Phe Asp Ser Glu Tyr
115 120 125
Thr Ile Leu Ala Thr Ala Ser Gln Pro Asp Ser Ala Asn Tyr Ser Ser
130 135 140
Asn Leu Val Val Gln Ala Met Tyr Val Pro Pro Gly Ala Pro Asn Pro
145 150 155 160
Lys Glu Trp Asp Asp Tyr Thr Trp Gln Ser Ala Ser Asn Pro Ser Val
165 170 175
Phe Phe Lys Val Gly Asp Thr Ser Arg Phe Ser Val Pro Tyr Val Gly
180 185 190
Leu Ala Ser Ala Tyr Asn Cys Phe Tyr Asp Gly Tyr Ser His Asp Asp
195 200 205
Ala Glu Thr Gln Tyr Gly Ile Thr Val Leu Asn His Met Gly Ser Met
210 215 220
Ala Phe Arg Ile Val Asn Glu His Asp Glu His Lys Thr Leu Val Lys
225 230 235 240
Ile Arg Val Tyr His Arg Ala Lys His Val Glu Ala Trp Ile Pro Arg
245 250 255
Ala Pro Arg Ala Leu Pro Tyr Thr Ser Ile Gly Arg Thr Asn Tyr Pro
260 265 270
Lys Asn Thr Glu Pro Val Ile Lys Lys Arg Lys Gly Asp Ile Lys Ser
275 280 285
Tyr
<210> 39
<211> 289
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 39
Gly Leu Gly Asp Glu Leu Glu Glu Val Ile Val Glu Lys Thr Lys Gln
1 5 10 15
Thr Val Ala Ser Ile Ser Ser Gly Pro Lys His Thr Gln Lys Val Pro
20 25 30
Ile Leu Thr Ala Asn Glu Thr Gly Ala Thr Met Pro Val Leu Pro Ser
35 40 45
Asp Ser Ile Glu Thr Arg Thr Thr Tyr Met His Phe Asn Gly Ser Glu
50 55 60
Thr Asp Val Glu Cys Phe Leu Gly Arg Ala Ala Cys Val His Val Thr
65 70 75 80
Glu Ile Gln Asn Lys Asp Ala Thr Gly Ile Asp Asn His Arg Glu Ala
85 90 95
Lys Leu Phe Asn Asp Trp Lys Ile Asn Leu Ser Ser Leu Val Gln Leu
100 105 110
Arg Lys Lys Leu Glu Leu Phe Thr Tyr Val Arg Phe Asp Ser Glu Tyr
115 120 125
Thr Ile Leu Ala Thr Ala Ser Gln Pro Asp Ser Ala Asn Tyr Ser Ser
130 135 140
Asn Leu Val Val Gln Ala Met Tyr Val Pro Pro Gly Ala Pro Asn Pro
145 150 155 160
Val Glu Trp Asp Asp Tyr Thr Trp Gln Ser Ala Ser Asn Pro Ser Val
165 170 175
Phe Phe Lys Val Gly Asp Thr Ser Arg Phe Ser Val Pro Tyr Val Gly
180 185 190
Leu Ala Ser Ala Tyr Asn Cys Phe Tyr Asp Gly Tyr Ser His Asp Asp
195 200 205
Glu Asp Thr Pro Tyr Gly Ile Thr Val Leu Asn His Met Gly Ser Met
210 215 220
Ala Phe Arg Ile Val Asn Asp His Asp Ala His Arg Thr Leu Val Lys
225 230 235 240
Ile Arg Val Tyr His Arg Ala Lys His Ile Glu Ala Trp Val Pro Arg
245 250 255
Ala Pro Arg Ala Leu Pro Tyr Thr Ser Ile Gly Arg Thr Asn Tyr Pro
260 265 270
Lys Asn Pro Lys Pro Val Ile Lys Lys Arg Glu Gly Asp Ile Lys Thr
275 280 285
Tyr
<210> 40
<211> 290
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 40
Gly Leu Gly Asp Glu Leu Glu Glu Val Ile Val Glu Lys Thr Lys Gln
1 5 10 15
Thr Val Ala Ser Ile Ser Ser Gly Pro Lys His Thr Gln Lys Val Pro
20 25 30
Ile Leu Thr Ala Asn Glu Thr Gly Ala Thr Met Pro Val Leu Pro Ser
35 40 45
Asp Ser Ile Glu Thr Arg Thr Thr Tyr Met His Phe Asn Gly Ser Glu
50 55 60
Thr Asp Val Glu Cys Phe Leu Gly Arg Ala Ala Cys Val His Val Thr
65 70 75 80
Glu Ile Gln Asn Lys Asp Ala Thr Gly Ile Asp Asn His Arg Glu Ala
85 90 95
Lys Leu Phe Asn Asp Trp Lys Ile Asn Leu Ser Ser Leu Val Gln Leu
100 105 110
Arg Lys Lys Leu Glu Leu Phe Thr Tyr Val Arg Phe Asp Ser Glu Tyr
115 120 125
Thr Ile Leu Ala Thr Ala Ser Gln Pro Asp Ser Ala Asn Tyr Ser Ser
130 135 140
Asn Leu Val Val Gln Ala Met Tyr Val Pro Pro Gly Ala Pro Asn Pro
145 150 155 160
Val Glu Trp Asn Asp Tyr Thr Trp Gln Ser Ala Ser Asn Pro Ser Val
165 170 175
Phe Phe Lys Val Gly Asp Thr Ala Arg Phe Ser Val Pro Phe Val Gly
180 185 190
Leu Ala Ser Ala Tyr Asn Cys Phe Tyr Asp Gly Tyr Ser His Asp Asp
195 200 205
Ala Glu Thr Gln Tyr Gly Ile Thr Val Leu Asn His Met Gly Ser Met
210 215 220
Ala Phe Arg Ile Val Asn Glu His Asp Glu His Lys Thr Leu Val Lys
225 230 235 240
Ile Arg Val Tyr His Arg Ala Lys His Val Glu Ala Trp Ile Pro Arg
245 250 255
Ala Pro Arg Ala Leu Pro Tyr Thr Ser Ile Gly Arg Thr Asn Tyr Pro
260 265 270
Lys Lys Asn Lys Ile Val Pro Val Ile Lys Lys Arg Glu Asn Ile Thr
275 280 285
Thr Tyr
290
<210> 41
<211> 27
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<220>
<221> UNSURE
<222> (1)..(10)
<223> Xaa = any amino acid or is absent
<220>
<221> UNSURE
<222> (11)
<223> Xaa = Pro or Thr
<220>
<221> UNSURE
<222> (12)
<223> Xaa = Val, Lys, or Ile
<220>
<221> UNSURE
<222> (14)
<223> Xaa = Lys, Glu, Ile, or Ala
<220>
<221> UNSURE
<222> (15)
<223> Xaa = Lys or Arg
<220>
<221> UNSURE
<222> (17)
<223> Xaa = Ser, Glu, Asp, Thr, Arg, or Lys
<220>
<221> UNSURE
<222> (18)..(27)
<223> Xaa = any amino acid or is absent
<400> 41
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Ile Xaa Xaa Arg
1 5 10 15
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
20 25
<210> 42
<211> 6
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<220>
<221> UNSURE
<222> (1)
<223> Xaa = Asp or Glu
<400> 42
Xaa Asn Ile Thr Thr Tyr
1 5
<210> 43
<211> 6
<212> PRT
<213> Rhinovirus (Human rhinovirus)
<400> 43
Ser Leu Ile Thr Asn Tyr
1 5
Claims (24)
- 분리된 리노바이러스 중화 면역원 Ⅳ(NimⅣ) 펩타이드.
- 제 1 항에 있어서, 상기 NimⅣ 펩타이드는 인간 리노바이러스 14(HRV 14) NimⅣ 펩타이드인 것을 특징으로 하는 펩타이드.
- 제 1 항에 있어서, 상기 NimⅣ 펩타이드는 인간 리노바이러스의 바이러스 구조 단백질(VPl)의 카르복시기 말단 277-283 아미노산을 포함하는 것을 특징으로 하는 펩타이드.
- 제 3 항에 있어서, 상기 펩타이드는 인간 리노바이러스의 바이러스 구조 단백질(VPl)의 카르복시기 말단 275-285 아미노산을 포함하는 것을 특징으로 하는 펩타이드.
- 제 1 항에 있어서, 상기 펩타이드의 서열은 다음의 서열로 구성된 군으로부터 선택되는 서열인 것을 특징으로 하는 펩타이드: PVIKKR, PVIKKRK (HRV 14), PVIKKRE (HRV6 and HRV72), PVIKKRS (HRV92), PVIEKRT (HRV83), PKIIKKR (HRV86), PVIKRRE (HRV35), PIIAKRE (HRV79), TIIKKRT (HRV3), NTEPVIKKRKGDIKS Y (HRV 14), 및 A- X1-X2-I-X3-X4-R-X5-B, X1 = P 또는 T; X2 = V, K, 또는 I; X3 = K, E, I, 또는 A; X4 = K 또는 R; X5 = S, E, D, T, R, T, 또는 K; A = 0-10 의 추가적 아미노산; 및 B = 0-10 의 추가적 아미노산.
- NimⅣ 펩타이드를 코딩하는 분리된 핵산 분자 또는 이와 상보적인 서열을 가지는 핵산 분자.
- 분리된 NimⅣ 펩타이드 또는 핵산분자를 포함하는 벡터.
- 제 7 항에 있어서, 상기 벡터는 인간 리노바이러스 벡터인 것을 특징으로 하는 벡터.
- 제 8 항에 있어서, 상기 인간 리노바이러스 벡터는 NimⅣ 펩타이드가 유래된 인간 리노바이러스와 혈청형이 다른 것을 특징으로 하는 벡터.
- 제 9 항에 있어서, 상기 벡터는 NimⅣ 펩타이드 또는 핵산 분자가 상기 인간 리노바이러스 벡터에서 원래 존재하는 NimⅣ 서열을 대신하여 존재하는 것을 특징으로 하는 벡터.
- 제 8 항에 있어서, 상기 인간 리노바이러스 벡터는 인간 리노바이러스 14(HRV 14) 벡터인 것을 특징으로 하는 벡터.
- 제 7 항에 있어서, 상기 NimⅣ 펩타이드가 유래된 인간 리노바이러스는 인간 리노바이러스 6(HRV 6) 또는 인간 리노바이러스72(HRV 72)인 것을 특징으로 하는 벡터.
- 제 8 항에 있어서, 상기 인간 리노바이러스 벡터는 인간 리노바이러스 14(HRV 14) 벡터이고, 상기 NimⅣ 펩타이드가 유래된 인간 리노바이러스는 인간 리노바이러스 6(HRV 6) 또는 인간 리노바이러스72(HRV 72)인 것을 특징으로 하는 벡터.
- 제 10 항에 있어서, 상기 벡터의 VP1 단백질 또는 핵산분자는 NimⅣ 펩타이드가 유래된 인간 리노바이러스의 VP1 단백질 또는 핵산분자로 대체된 것을 특징으로 하는 벡터.
- 제 7 항에 있어서, 상기 벡터는 NimⅣ 펩타이드가 크로스링크되어 불활성화된 인간 리노바이러스를 포함하는 것을 특징으로 하는 벡터.
- 제 7 항에 있어서, 상기 벡터는 NimⅣ 서열이 융합된 B형 간염 코어 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 벡터.
- 제 1 항의 펩타이드 또는 제 6 항의 핵산 분자를 포함하는 약제학적 조성물.
- 제 17 항에 있어서, 상기 펩타이드는 벡터 내에 포함된 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
- 제 17 항에 있어서, 상기 조성물은 1개 이상의 약제학적으로 허용 가능한 희석액, 첨가제, 수송체 또는 보조제를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
- 제 19 항에 있어서, 상기 보조제는 키틴 미세입자 및 암루미늄 화합물로 구성된 군으로부터 선택된 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
- 제 17 항에 있어서, 상기 조성물은 1 개 또는 그 이상의 인간 리노바이러스 중화 면역원을 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
- 대상체에 있어서 리노바이러스에 대한 면역반응을 유도하는 방법으로서, 상기 방법은 분리된 NimⅣ 펩타이드 또는 핵산분자를 대상체에 투여하는 단계를 포함하는 방법.
- 제 22 항에 있어서, 상기 대상체는 리노바이러스에 감염되지 않았지만 감염의 위험이 있는 대상체인 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 22 항에 있어서, 상기 대상체는 리노바이러스에 감염된 대상체인 것을 특징으로 하는 방법.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US84845106P | 2006-09-29 | 2006-09-29 | |
| US60/848,451 | 2006-09-29 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20090092764A true KR20090092764A (ko) | 2009-09-01 |
Family
ID=39364960
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020097008950A KR20090092764A (ko) | 2006-09-29 | 2007-10-01 | 신규한 리노바이러스 중화 면역원 및 이의 백신 용도로의 이용 |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US8652486B2 (ko) |
| EP (2) | EP2066343B1 (ko) |
| JP (1) | JP2010504759A (ko) |
| KR (1) | KR20090092764A (ko) |
| CN (1) | CN101678095B (ko) |
| AU (1) | AU2007318206A1 (ko) |
| BR (1) | BRPI0719443A2 (ko) |
| CA (1) | CA2664628C (ko) |
| IL (1) | IL197755A (ko) |
| MX (1) | MX2009003301A (ko) |
| WO (1) | WO2008057158A2 (ko) |
| ZA (1) | ZA200901993B (ko) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20090096414A (ko) * | 2006-09-29 | 2009-09-10 | 사노피 파스테르 바이오로직스 씨오 | 재조합 리노바이러스 벡터 |
| MX2010010457A (es) * | 2008-03-27 | 2010-11-05 | Sanofi Pasteur Biologics Co | Vectores recombinantes de rinovirus. |
| EP2316481A1 (en) | 2009-10-30 | 2011-05-04 | Biomay Ag | Pharmaceutical composition for the treatment and prevention of a rhinovirus infection |
| GB201115910D0 (en) | 2011-09-14 | 2011-10-26 | Univ Manchester | Peptides |
| ES2924914T3 (es) | 2013-03-15 | 2022-10-11 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Vacuna contra rinovirus humano |
| CA2906909A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Biological Mimetics, Inc. | Immunogenic human rhinovirus (hrv) composition |
| WO2016205389A1 (en) * | 2015-06-15 | 2016-12-22 | Emory University | Multivalent enterovirus vaccine compositions and uses related thereto |
| GB201616904D0 (en) | 2016-10-05 | 2016-11-16 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Vaccine |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0169146A3 (en) | 1984-07-20 | 1988-07-20 | Merck & Co. Inc. | Monoclonal antibodies directed against the cellular receptor of human rhinovirus |
| JPS6147191A (ja) * | 1984-07-20 | 1986-03-07 | メルク エンド カムパニー インコーポレーテッド | ヒト・ライノウイルスｒｎａおよびたんぱく |
| US5541100A (en) * | 1990-09-12 | 1996-07-30 | Rutgers University | Chimeric rhinoviruses |
| US20030138769A1 (en) | 2000-08-16 | 2003-07-24 | Birkett Ashley J. | Immunogenic HBc chimer particles having enhanced stability |
| US7361352B2 (en) | 2001-08-15 | 2008-04-22 | Acambis, Inc. | Influenza immunogen and vaccine |
| US20040146524A1 (en) | 2002-02-21 | 2004-07-29 | Katelynne Lyons | Stabilized immunogenic HBc chimer particles |
| US7429472B2 (en) * | 2003-01-31 | 2008-09-30 | Promega Corporation | Method of immobilizing a protein or molecule via a mutant dehalogenase that is bound to an immobilized dehalogenase substrate and linked directly or indirectly to the protein or molecule |
| MX2007003726A (es) * | 2004-09-28 | 2007-06-15 | Johnson & Johnson | Estabilizaci??n de agentes inmunologicamente activos con adyuvantes de alumbre. |
| WO2006078648A2 (en) * | 2005-01-19 | 2006-07-27 | Donald Danforth Plant Science Center | Rhinovirus vaccines |
-
2007
- 2007-10-01 EP EP07867176.5A patent/EP2066343B1/en not_active Not-in-force
- 2007-10-01 JP JP2009530456A patent/JP2010504759A/ja active Pending
- 2007-10-01 BR BRPI0719443-9A2A patent/BRPI0719443A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2007-10-01 CN CN2007800443578A patent/CN101678095B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2007-10-01 CA CA2664628A patent/CA2664628C/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-10-01 KR KR1020097008950A patent/KR20090092764A/ko not_active Application Discontinuation
- 2007-10-01 AU AU2007318206A patent/AU2007318206A1/en not_active Abandoned
- 2007-10-01 EP EP12180443A patent/EP2548573A1/en not_active Withdrawn
- 2007-10-01 US US12/442,988 patent/US8652486B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-10-01 ZA ZA200901993A patent/ZA200901993B/xx unknown
- 2007-10-01 WO PCT/US2007/021053 patent/WO2008057158A2/en active Application Filing
- 2007-10-01 MX MX2009003301A patent/MX2009003301A/es unknown
-
2009
- 2009-03-23 IL IL197755A patent/IL197755A/en active IP Right Grant
-
2014
- 2014-02-18 US US14/182,731 patent/US9381237B2/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU2007318206A1 (en) | 2008-05-15 |
| EP2066343A4 (en) | 2010-05-19 |
| CA2664628C (en) | 2016-08-09 |
| IL197755A (en) | 2015-09-24 |
| JP2010504759A (ja) | 2010-02-18 |
| AU2007318206A2 (en) | 2009-06-04 |
| ZA200901993B (en) | 2010-07-28 |
| CA2664628A1 (en) | 2008-05-15 |
| CN101678095B (zh) | 2013-04-24 |
| EP2548573A1 (en) | 2013-01-23 |
| US20100297169A1 (en) | 2010-11-25 |
| EP2066343A2 (en) | 2009-06-10 |
| WO2008057158A2 (en) | 2008-05-15 |
| CN101678095A (zh) | 2010-03-24 |
| US20140161833A1 (en) | 2014-06-12 |
| BRPI0719443A2 (pt) | 2013-12-10 |
| EP2066343B1 (en) | 2017-06-14 |
| IL197755A0 (en) | 2011-08-01 |
| MX2009003301A (es) | 2009-07-15 |
| US9381237B2 (en) | 2016-07-05 |
| WO2008057158A9 (en) | 2008-09-18 |
| WO2008057158A3 (en) | 2008-08-07 |
| US8652486B2 (en) | 2014-02-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US9381237B2 (en) | Neutralizing immunogen (NimIV) of rhinovirus and its uses for vaccine applications | |
| JP2003529319A (ja) | ＨＩＶ−１ｇｐ４１を標的化する広範に中和する抗体を誘発する方法 | |
| US8372963B2 (en) | RSV F-protein and its use | |
| EA021391B1 (ru) | Способ индукции иммунного ответа, вакцинная композиция, ее применение и набор | |
| JPH11507808A (ja) | 核酸ｒｓウイルスワクチン | |
| JPH09501933A (ja) | 植物、動物、およびヒトのワクチンとして並びに免疫療法に有用な抗体の免疫優性エピトープの弱化 | |
| US10493145B2 (en) | Immunogenic rhinovirus peptides | |
| CN105555958B (zh) | 水疱性口炎病毒的改性基质蛋白 | |
| Pan et al. | Development of horse neutralizing immunoglobulin and immunoglobulin fragments against Junín virus | |
| JP2023523423A (ja) | ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対するワクチン及びその調製物 | |
| AU2022368453A1 (en) | Chimeric betacoronavirus spike polypeptides | |
| WO2021039873A1 (ja) | ウイルスの非構造タンパク質が担持された複合タンパク質単量体、当該単量体の会合体、及び当該会合体を有効成分とするコンポーネントワクチン | |
| US9796773B2 (en) | Neutralizing antibodies that bind to the HIV-1 Env V2 critical neutralization domain | |
| KR100496062B1 (ko) | 재조합 사빈 1형 폴리오바이러스 벡터 및 이를 이용한 개량형의 재조합 소아마비 백신 조성물 | |
| WO2007107597A2 (en) | Immunogenic construct and a method for the prophylactic or therapeutic treatment of aids | |
| WO2024061188A1 (zh) | 一种冠状病毒多价疫苗及其应用 | |
| US20230355745A1 (en) | Coronavirus-derived receptor-binding domain variant having reduced ace2-binding affinity and vaccine composition comprising the same | |
| WO2016115665A1 (en) | Immunoglobulin g monoclonal antibodies against 3d proteins of enteroviruses | |
| BRPI0009746B1 (pt) | molécula de veículo contendo plasmídeo pg-pviii compreendendo uma seqúência que codifica uma parte de uma glicoproteína de lissavírus contendo pelo menos o sítio iii da glicoproteína de lissavírus mas não contendo o sítio ii, e, composição imunogênica | |
| WO2022104465A1 (en) | Severe acute respiratory syndrome coronavirus dna vaccines | |
| KR20240052044A (ko) | 코로나바이러스과 바이러스에 의한 감염을 치료 또는 예방하기 위한 바이러스-유사 입자 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A201 | Request for examination | ||
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| E601 | Decision to refuse application |