KR20090092408A - 포도 과피를 이용한 안토시안닌 추출방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 포도 과피를 이용하여 안토시안닌을 추출하는 방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 친소수성용제인 에탄올을 추출용매로 하여 포도 과피에서 안토시안닌을 추출하는 추출방법에 관한 것이다.

이를 위한 본 발명에 따른 포도 과피를 이용하여 안토시안닌 추출방법에 의하면, 포도 과피을 파쇄하고, 추출용매로서 에탄올을 첨가한 후 이를 추출, 증류, 농축하고, 이를 원심분리하여 안토시아닌을 추출하는 제조방법에 있어서,

상기 포도 과피를 파쇄하고,

상기 에탄올은 순도 80%이되, 상기 포도 부산물에 대하여 10배로 첨가되어 혼합물을 이룬 후 60℃ ~ 70℃에서 24시간 동안 환류추출되고,

상기 환류추출된 혼합물은 착즙기로 착즙한 후 30℃로 냉각하고 이를 400메쉬(mm)의 여과망으로 여과한 후 농축하고,

상기 농축된 농축액에 pH 3.1 ~ 3.5인 증류수를 첨가한 후 5시간동안 방치하고, 이를 3000rpm으로 원심분리한 후 감압여과를 수행하여 상청액을 수득하는 것을 특징으로 한다.

Description

포도 과피를 이용한 안토시안닌 추출방법{.}

본 발명은 포도 과피를 이용하여 안토시안닌을 추출하는 방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 친소수성용제인 에탄올을 추출용매로 하여 포도 과피에서 안토시안닌을 추출하는 추출방법에 관한 것이다.

대한민국 공개특허공보 공개번호 제1993-0021220호 "포도껍질 추출물을 이용한 소취제"

대한민국 등록특허공보 등록번호 제0447928호 "안토시아노사이드 저중합체 85 ｗ/ｗ%이상 함유추출물의 제조방법과 그를 함유한 조성물"

일반적으로 안토시아닌(anthocyanin)은 천연 항산화제로서 생명체의 노화와 질병을 유발하는 산화물질(프리래디칼 : 자외선,중금속,활상산소,아시드알대히드발암물질)을 중화하거나 제거시키고, 활성산소를 중화시키는 항산화 작용으로 피부 노화방지는 물론 주름개선에 효과가 뛰어나다는 것이 알려져 있다.

이러한 안토시아닌은 블루베리, 포도 등을 통해 추출되고, 특히 포도에 그 함량이 많은 것으로 알려져 있고, 포도 그 알갱이 또는 과피의 가공을 통해 포도주 또는 그 가공품에 의해서 안토시아닌을 공급하고 있다.

공지의 예로서, 포도의 과피를 이용한 가공품의 일례로 대한민국 공개특허공보 공개번호 제1993-0021220호 "포도껍질 추출물을 이용한 소취제"가 개시되어 과피의 유효성분을 추출하고 있다.

다른 공지의 예로서, 포도 과피에 함유된 안토시아노사이드 단위체를 얻는 방법으로 대한민국 등록특허공보 등록번호 제0447928호 "안토시아노사이드 저중합체 85 ｗ/ｗ%이상 함유추출물의 제조방법과 그를 함유한 조성물"이 개시되어 있으나, 보다 간편하고 효율적으로 과피의 유효성분을 추출하는 방법의 안출이 요구되었다.

본 발명은 이러한 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로서, 본 발명의 목적은 포도의 이용률을 증대시키고, 부산물로서 발생되는 포도 과피를 통해 유효한 안토시아닌을 추출할 수 있는 그 추출방법을 제공하는데 있다.

하나의 바람직한 실시 양태에 있어서 본 발명에 따른 포도 과피를 이용한 안토시아닌 추출방법은 전술한 문제를 모두 해소하도록,

포도 과피을 파쇄하고, 추출용매로서 에탄올을 첨가한 후 이를 추출, 증류, 농축하고, 이를 원심분리하여 안토시아닌을 추출하는 제조방법에 있어서,

상기 포도 과피를 파쇄하고,

상기 에탄올은 순도 80%이되, 상기 포도 부산물에 대하여 10배로 첨가되어 혼합물을 이룬 후 60℃ ~ 70℃에서 24시간 동안 환류추출되고,

상기 환류추출된 혼합물은 착즙기로 착즙한 후 30℃로 냉각하고 이를 400메쉬(mm)의 여과망으로 여과한 후 농축하고,

상기 농축된 농축액에 pH 3.1 ~ 3.5인 증류수를 첨가한 후 5시간동안 방치하고, 이를 3000rpm으로 원심분리한 후 감압여과를 수행하여 상청액을 수득하는 것을 특징으로 한다.

본 발명의 또 다른 목적 및 효과는 이하의 상세한 설명으로부터 명확하게 되고, 본 발명의 바람직한 실시예를 나타내는 상세한 설명 및 실시예는 본 발명의 범주를 제한하는 것이 아니다.

이상에서 상세히 설명한 바와 같이, 본 발명에 따른 포도 과피를 이용한 안토시안닌 추출방법에 의하면, 포도가공 공정에서 버려지고 있는 부산물인 포도과피를 통해 보다 간단하고 효율적으로 안토시아닌을 추출하여 부산물의 처리에 드는 비용을 절감 및 부산물에 의한 환경오염을 줄일 수 있는 효과가 있다.다.

도 1은 본 발명에 따라 포도 과피를 이용한 안토시아닌 추출방법을 단계적으로 보여주는 공정도

이하, 본 발명에 따른 하나의 바람직한 실시예를 첨부도면을 참조하여 상세히 설명한다. 먼저, 도면에 걸쳐 기능적으로 동일하거나, 유사한 부분에는 동일한 부호를 부여한다.

도 1은 본 발명에 따라 포도 과피를 이용한 안토시아닌 추출방법을 단계적으로 보여주는 공정도이다.

공지의 예와 같이 안토시아닌은 인체에 유익한 성분이고, 통상적으로는 포도 및 그 과피의 가공을 통해 인위적으로 추출하고 있다.

이러한 추출방법은 전술한 대한민국 공개특허공보 공개번호 제1993-0021220호와 대한민국 등록특허공보 등록번호 제0447928호에 개시된 통상의 방법을 이용할 수 있다.

즉, 포도 파괴를 파쇄하고, 추출용매로서 에탄올을 첨가한 후 환류추출하고, 이를 원심분리하고 감압추출시켜 안토시안닌을 추출하게 되고, 이러한 추출방법을 각 단계별로 살펴보면 다음과 같다.

1. 포도 과피 파쇄 단계

포도를 가공하고 남은 포도 과피를 분리하여 이를 파쇄한다.

2. 에탄올(주정) 첨가 단계

순도 50%인 에탄올을 파쇄된 포도 과피를 1로 할 때 10배의 비율로 첨가하여 희석 혼합한다.

3. 희석, 혼합된 포도 과피를 환류추출하는 단계

포도 과피를 60℃ ~ 70℃로 24시간 동안 환류추출한다.

4. 착즙기로 착즙하는 단계

환휴추출된 추출물을 착즙기로 착즙하여 30℃로 냉각한다.

5. 여과처리단계

착즙된 추출물을 필터(400mesh)로 여과한 후 농축하여 농축물을 수득한다.

6. 상청액 수득단계

농축액에 pH 3.1 ~ 3.5인 증류수를 첨가한 후 5시간동안 방치하고, 이를 3000rpm으로 원심분리한 후 감압여과를 수행하여 상청액을 수득한다.

* 본 발명에 따른 최선의 실시예 *

포도 줄기를 파쇄하여 30kg을 준비하였다.

300L, 순도 50%의 에탄올을 주정으로 하여 상기 30kg의 파쇄된 포도 줄기에 첨가하여 혼합물을 얻었다.

위와 같이 주정이 첨가된 포도 과피를 70℃의 상태에서 24시간동안 환류추출한 후 착즙기로 착즙한 후 30℃로 냉각하였다.

냉각된 추출물을 다시 400mesh의 여과지로 여과하여 3.6kg의 농축액을 얻었다.

상기 농축액에 pH 3.4인 증류수 18L를 첨가하여 5시간동안 방치한 후 이를 3000rpm의 상태에서 원심분리하여 불용성 물질을 제거한 후 상청액을 취하였다.

실시예에 의해서 추출된 안토시아닌 HPLC 분석

시료 : 본 발명에 따른 추출방법에 의해서 수득된 안토시아닌

분석방법

기기 : HPLC

컬럼 : LICHROSRB 게 18, (250x4)

흐름속도 : 1㎖/min

검출기 : 270nm

주입량 : 10μL

실시예에 의해서 추출된 안토시안닌의 DPPH 라디칼 소거 활성 실험

상기와 같은 방법으로 얻은 안토시안닌 추출물은일반적으로 항산화 활성을 측정하기 위하여 DPPH(2,2-diphenyl-picryl-hydrazyl)법을 사용하게 되는데, DPPH는 짙은 자주색을 나타내며 그 자체가 질소 중심원력의 라디칼로 구성되어 있다. 시료의 항산화 활성은 시료 첨가 후 시료의 활성평가를 DPPH 흡광도 변화에 대한 값을 구하여 산정하였다.

본 실험에서 24well microplate을 사용하여 DPPH소거 활성도를 실험하였으며, 이에 대한 시약 및 기구는DPPH (2.2-dipheyl-1picrylhydrazyl :Sigma Cat # D-9132, Tocopherol:Sigma Cat # T-3251, Ascorbic acid:Applichem, Butylated hydroxyanisole:Sigma Cat # B-1253, 24well microplate, MeOH (EtOH) 등을 사용하여 실험하였다.

실험에 쓰여진 DPPH solution은 MeOH으로 희석하여 12mM DPPH을 사용하여 24well microplate상에서 사용하였고, 측정에 사용할 Total volum은 well 당1.5mL을 사용하였다. 대조시약과 포도추출물은 다음 표 1의 24well microplate 평면도와 같은 상태로 분주하였으며, 여기에 들어간 포도추출물의 경우 농축된 시료를 1/10로 희석하였고 대조시약의 경우 1 mg/mL로 희석하여 plate상에 분주하였고 12mM DPPH solution을 0.5mL 가한 후 시간에 따른 항산화능력을 측정하였다.

표 1

전자공여능에 대하여 산술한 결과 항산화능력 측정의 대조군으로는 BHA, Tocopherol, Ascorbic acid를 1 mg/mL 농도로 사용하였다. 포도추출물의 DPPH 소거 활성도는 DPPH solution의 투입 후 5분 전 상황에서는 낮은 전자 공여능을 표 2와 표 3에서 볼 수 있으며, 시간 경과 후 대조군과 같은 수준으로 나타났다. 그러나 포도추출물이 정제되지 않았다는 사실을 감안하면 포도추출물의 항산화능력은 다른 항산화제에 비해 결코 뒤떨어지지 않는다고 판단할 수 있다.

표 2

표 3

본 발명은 그 정신 또는 주요한 특징으로부터 일탈하는 일없이, 다른 여러 가지 형태로 실시할 수 있다. 그 때문에, 전술한 실시예는 모든 점에서 단순한 예시에 지나지 않으며, 한정적으로 해석해서는 안된다. 본 발명의 범위는 특허청구의 범위에 의해서 나타내는 것으로써, 명세서 본문에 의해서는 아무런 구속도 되지 않는다. 다시, 특허청구범위의 균등 범위에 속하는 변형이나 변경은, 모두 본 발명의 범위 내의 것이다.

Claims (1)

1. 포도 과피을 파쇄하고, 추출용매로서 에탄올을 첨가한 후 이를 추출, 증류, 농축하고, 이를 원심분리하여 안토시아닌을 추출하는 제조방법에 있어서,

   상기 포도 과피를 파쇄하고,

   상기 에탄올은 순도 80%이되, 상기 포도 부산물에 대하여 10배로 첨가되어 혼합물을 이룬 후 60℃ ~ 70℃에서 24시간 동안 환류추출되고,

   상기 환류추출된 혼합물은 착즙기로 착즙한 후 30℃로 냉각하고 이를 400메쉬(mm)의 여과망으로 여과한 후 농축하고,

   상기 농축된 농축액에 pH 3.1 ~ 3.5인 증류수를 첨가한 후 5시간동안 방치하고, 이를 3000rpm으로 원심분리한 후 감압여과를 수행하여 상청액을 수득하는 것을 특징으로 하는 포도 과피를 이용한 안토시안닌 추출방법.