KR20090090492A - 장군차 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨합병증의 예방 및 치료용 조성물 - Google Patents
장군차 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨합병증의 예방 및 치료용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 장군차 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨 합병증의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것으로, 상세하게는 본 발명의 장군차 추출물은 혈장 총콜레스테롤 및 중성지방의 농도를 감소시키고, 체중 및 체지방량을 감소시키는 효과를 확인하여, 지질대사의 개선 및 비만 억제에 의한 당뇨 합병증의 예방 및 치료를 위한 약학 조성물 및 건강기능식품으로 유용하게 이용될 수 있다.
장군차, 지질대사, 당뇨합병증, 중성지방
Description
본 발명은 장군차 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨 합병증의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다.
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[문헌 10] Sale, F.O., et al., Anal . Biochem ., 142, pp347-348, 1984
당뇨병은 인슐린 분비가 감소되거나 인슐린의 기능이 저하되어 체내의 세포가 당을 이용하지 못하여 고혈당이 나타나는 질환이다. 당뇨병의 경우 인슐린을 비롯한 호르몬 불균형으로 탄수화물을 비롯한 단백질, 지질 및 전해질 대사 등 생리적 대사 조절 기능 이상으로 고혈당의 특징적인 증세를 나타내며(Gonuth, S.M., Ann . Intern . Med ., 79, pp812-822, 1973) 이러한 고혈당 증세가 지속되면 혈액순환 장애, 망막손상, 신경세포 손상, 신장 기능 저하 및 혈관 합병증을 유발한다. 를 비롯한 심각한 만성적 합병증(Kannel, W.B. and McGee, D.L. JAMA , 241, pp2035-2038, 1979)을 가져오게 된다.
특히, 정상인에 비해서 당뇨환자에 있어서는 동맥경화증, 뇌경색, 뇌혈전, 심근경색과 같은 심혈관계 질환의 발병율이 높다(Fuller, J.H., Lancet , 1, pp1373-1376, 1980). 당뇨병환자는 관상동맥질환이나 뇌혈관질환에 의한 사망 위험률이 높고, 이는 고혈압과 고지혈증, 비만 등에 의해 흔히 발병된다(허갑범. 한국영양학회. 초록발표논문집. pp15-18, 1984). 제 2형 당뇨환자 중 67%가 한 종류 또는 그 이상의 지질대사 이상을 가지고 있다고 보고되었다(Harris, M.I. Diabetes Care, 23, pp754-758, 2000). 제 2형 당뇨환자는 중성지방 및 콜레스테롤 농도가 증가하고 및 HDL-콜레스테롤이 감소하는 지질대사의 이상이 일어나며(Goldberg, R.B. Diabetes Care , 4, pp561-572, 1981), 이것은 당뇨 합병증인 관상동맥 질환의 원인이 된다(Reaven, J.W. Am . J. Med ., 83, pp31-40, 1987).
장군차는 하동이나 보성 등지에 자라는 소엽종 찻잎과는 달리 잎이 크고 넓어 인도산 대엽종으로 구분하기도 하며, 김해 동상동, 대성동 일대 차밭골에 야생차 군락과 진례면 다곡(茶谷), 상동면 다시곡(茶時谷)등 차와 관련된 지명이 많아 옛 가야지역에 차가 많이 심어졌다는 근거로 내세우기도 한다. 장군차 잎은 타원형으로 자행력이 강하고 녹차와 홍차로 가공하면 쓴 맛이 적고 담백하다(한국차인연합회 회지, 제98호, pp60-61, 2006).
일반적인 녹차에 비하여 장군차의 생리활성에 대한 연구보고는 전혀 없는 상태이며 장군차의 혈당 저하 활성 및 당뇨병성 신증 개선효과에 대한 연구 역시 전무한 상태이다. 장군차는 녹차 형태 외에 황차 형태의 경우에도 맛이 우수하여 기호성이 높은 것으로 알려져 있다. 따라서 장군차의 생잎, 세작 및 황차의 생리활성을 구체적으로 규명할 필요성이 있다고 사료된다.
이에 본 발명자들은 우수한 지질대사 개선효과를 갖는 장군차 추출물을 제조하여 혈액 지질조성, 체중, 부고환지방량을 측정한 결과, 지질대사 개선효과 및 비만 개선효과가 우수하여 당뇨 합병증 개선에 효과가 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 장군차(Camellia sinensis assamica) 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨 합병증의 예방 및 치료용 약학조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 장군차(Camellia sinensis assamica) 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨 합병증의 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다.
상기 추출물은 정제수를 포함한 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매, 바람직하게는 물 및 메탄올의 혼합용매, 보다 바람직하게는 70 내지 100% 메탄올로부터 추출한 것을 포함한다.
본원에서 정의되는 상기 당뇨 합병증은 지질대사 질환, 고콜레스테롤증, 관상동맥성 심장질환, 동맥경화증, 심근경색 등의 심혈관 질환, 피부 감염, 세소혈관증, 신경병증, 치료약제에 의한 피부반응 등에 의한 피부 증상 및 수정체의 혼탁과 백내장, 당뇨병성 망막증, 당뇨병성 신증 또는 당뇨병성 신경병증이며, 바람직하게는 지질대사 질환 또는 고콜레스테롤증임을 특징으로 한다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명의 장군차 추출물은 하기와 같이 수득될 수 있다.
본 발명의 장군차를 구입하여, 동결건조하여 마쇄한 후 장군차 시료 중량의 약 2 내지 15배, 바람직하게는 약 5 내지 10배에 달하는 부피의 물 및 메탄올, 에탄올, 부탄올 등과 같은 C1 내지 C4의 저급알콜의 극성 용매 또는 이들의 약 1:0.1 내지 1:10의 혼합비를 갖는 혼합용매로, 바람직하게는 물 및 메탄올의 혼합용매, 보다 바람직하게는 70 내지 100%의 메탄올로 실온에서 약 1시간 내지 1일, 바람직하게는 6시간 내지 12시간 동안 열수 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출 또는 초음파 추출 등의 추출방법을 사용하여, 바람직하게는 열수추출하여 감압여과에 의해 추출액과 잔사를 분리한 다음, 얻어진 잔사에 추출 시작 당시의 장군차 시료 중량의 약 2 내지 10배, 바람직하게는 약 3 내지 5배에 달하는 부피의 물 및 메탄올, 에탄올, 부탄올 등과 같은 C1 내지 C4의 저급알콜의 극성 용매 또는 이들의 약 1:0.1 내지 1:10의 혼합비를 갖는 혼합용매로, 바람직하게는 물 및 메탄올의 혼합용매, 보다 바람직하게는 70 내지 100%의 메탄올로 실온에서 약 1시간 내지 5시간 동안 열수 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출 또는 초음파 추출 등의 추출방법을 사용하여, 바람직하게는 열수추출한 후 감압여과 및 농축하여 장군차잎의 추출물을 수득할 수 있다.
본 발명은 상기의 제조공정으로 얻어진 장군차 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨 합병증의 예방 및 치료를 위한 약학조성물을 제공한다.
본 발명의 조성물은, 조성물 총 중량에 대하여 상기 추출물을 0.1 내지 50 중량%로 포함한다.
본 발명의 추출물을 포함하는 약학조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.
본 발명의 추출물의 약학적 투여 형태는 이들의 약학적 허용가능한 염의 형태로도 사용될 수 있고, 또한 단독으로 또는 타 약학적 활성 화합물과 결합뿐만 아니라 적당한 집합으로 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 추출물을 포함하는 약학조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 장군차를 포함하는 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 목초액에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 추출물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나, 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 장군차 추출물은 1일 0.0001 내지 100mg/kg으로, 바람직하게는 0.001 내지 100mg/kg으로 투여하는 것이 좋다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 추출물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내(intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다.
본 발명은 장군차 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨 합병증의 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다. 본 발명의 추출물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강 기능성 식품류 등이 있다.
또한 당뇨 합병증의 예방 및 개선 효과를 목적으로 식품 또는 음료에 첨가될 수 있다. 이 때, 식품 또는 음료 중의 상기 추출물의 양은 전체 식품 중량의 0.01 내지 15 중량%로 가할 수 있으며, 건강 음료 조성물은 100 ㎖를 기준으로 0.02 내지 5g, 바람직하게는 0.3 내지 1g의 비율로 가할 수 있다.
본 발명의 건강 기능성 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 추출물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같 이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 약 5 내지 12g이다.
상기 외에 본 발명의 추출물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 장군차 천연 과일 주스 및 과일 주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 추출물 100 중량부 당 0 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
본 발명의 장군차 추출물은 혈장 총콜레스테롤 및 중성지방의 농도를 감소시키고, 체중 및 체지방량을 감소시키는 효과를 확인하여, 지질대사의 개선 및 비 만 억제에 의한 당뇨 합병증의 예방 및 치료를 위한 약학 조성물 및 건강기능식품으로 유용하게 이용될 수 있다.
이하, 본 발명을 하기 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실험예에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예
1.
장군차
추출물의 제조
1-1. 장군차 생잎 추출물(CSM-1)의 제조
김해 장군차 영농조합에서 구입한 장군차 생잎 50g을 동결건조하여 마쇄한 후, 500 mL의 100% 메탄올을 첨가하여 12시간 동안 자석교반기를 이용하여 추출한 후, 감압여과하여 추출액과 잔사를 분리한 다음 얻어진 잔사에 추출 시작 당시의 장군차 생잎 중량의 5배인 250 mL의 100% 메탄올을 첨가하여 6시간 동안 자석교반기를 이용하여 추출하였다. 다시 감압여과한 후, 얻어진 잔사에 추출 시작 당시의 장군차 생잎 중량의 3배인 150 mL의 100% 메탄올을 첨가하여 3시간 동안 자석교반기를 이용하여 추출한 다음 감압여과 및 농축하여 장군차 생잎 메탄올 가용 추출물 12.4g을 수득하였다 (이하 ‘CSM-1'이라 명명함).
1-2. 장군차 세작 추출물(CSM-2)의 제조
김해 장군차 영농조합에서 구입한 장군차 세작(약 일주일에서 보름 정도의 간격을 두고 딴 차잎) 50g을 동결 건조하여 마쇄한 후, 500 mL의 100% 메탄올을 첨가하여 12시간 동안 자석교반기를 이용하여 추출한 후, 감압여과하여 추출액과 잔사를 분리한 다음 얻어진 잔사에 추출 시작 당시의 장군차 세작 중량의 5배인 250 mL의 100% 메탄올을 첨가하여 6시간 동안 자석교반기를 이용하여 추출하였다. 다시 감압여과한 후, 얻어진 잔사에 추출 시작 당시의 장군차 세작 중량의 3배인 150 mL의 100% 메탄올을 첨가하여 3시간 동안 자석교반기를 이용하여 추출한 다음 감압여과 및 농축하여 장군차 세작 에탄올 가용 추출물 11.15g을 수득하였다 (이하 ‘CSM-2'라 명명함).
1-3. 장군차 황차 추출물(CSM-3)의 제조
김해 장군차 영농조합에서 장군차 황차(황차 제조는 차잎에 열을 가하여 발효를 멈추게 하는 과정으로 열을 가하여 산화효소가 작용하지 않도록하는 과정(살청), 차를 잘 우러나게 하거나 발효를 촉진시키기 위해 손으로 비비는 과정(유념)을 거쳐 열을 가해 수분을 없애면서 차 잎을 건조시키는 첫째 공정인 초홍, 수분을 많이 함유하고 있는 차 잎을 고온다습한 장소에서 가볍게 후발효시키는 과정(민황), 열을 가해서 차 잎을 건조시키는 두번째 공정(복홍), 다시 한번 약하게 후발효를 시켜 차의 색이 황색으로 변화하게 되는 과정(민황), 수분함량이 4% 이하가 되도록 하는 과정(민황)의 공정을 거친다)50g을 구입하여, 동결건조하여 마쇄한 후 500 mL의 100% 메탄올을 첨가하여 12시간 동안 자석교반기를 이용하여 추출한 후, 감압여과하여 추출액과 잔사를 분리한 다음 얻어진 잔사에 추출 시작 당시의 장군차 황차 중량의 5배인 250 mL의 100% 메탄올을 첨가하여 6시간 동안 자석교반기를 이용하여 추출하였다. 다시 감압 여과한 후, 얻어진 잔사에 추출 시작 당시의 장군차 황차 중량의 3배인 150 mL의 100% 메탄올을 첨가하여 3시간 동안 자석교반기를 이용하여 추출한 다음 감압여과 및 농축하여 장군차 황차 에탄올 가용 추출물 9.55g을 수득하였다 (이하, ‘CSM-3'이라 명명함).
참고예 1. 제2형 당뇨 동물모델 및 시료의 준비
1-1. 실험동물 및 식이
장군차의 생체내(In vivo) 당뇨병 합병증 개선효과를 측정하기 위해 제 2형 당뇨동물 모델인 6주령의 db/db 마우스(n=20)를 4 군의 평균 체중이 비슷하도록 난괴법으로 분리하여(각 군당 n=5) 대조군에게는 AIN-93G 기초 식이(basal diet)(하기 표 1 참조)를, 상기 실시예 1의 CSM-1, CSM-2, CSM-3 투여군에게는 생잎, 세작 및 황차 추출물을 각각 1%를 함유한 식이를 6주 동안 섭취시켰다. 식이와 식수는 자유롭게(ad libitum) 섭취할 수 있도록 하였으며, 사육실의 온도 및 습도는 각각 20~25℃, 50~60%로 유지하였고, 명암은 12시간 간격으로 점등 및 소등을 하였다. 동물 체중과 식이 섭취량은 일주일에 2회 측정하였다.
조성 | 대조군 식이(%) |
옥수수 녹말1 ) | 39.7 |
카제인(casein)2 ) | 20.0 |
덱스티리나이즈드 전분 | 13.2 |
수크로오스3 ) | 10.0 |
α-셀룰로오스4 ) | 5.0 |
미네랄 혼합물5 ) | 3.5 |
비타민 혼합물5 ) | 1.0 |
L-시스틴5 ) | 0.3 |
콜린 바이타르트레이트3 ) | 0.25 |
Tert-부틸하이드로퀴논 | 0.0014 |
콩 오일6 ) | 7.0 |
1) 대상사, 한국 2) 머리고울번사(Murry goulburn Co.), 오스트레일리아 3) 삼양사, 한국 4) 시그마사, 미국 5) ICN 바이오케미컬, 미국 6) 제일제당, 한국 |
체중 및 식이 섭취량 측정결과, 6주령의 db/db 마우스에게 기초식이, 장군차 생잎, 세작, 황차 추출물 함유 식이를 6주간 공급 후 체중은 각각 41.4 ± 2.7g, 35.0 ± 1.9g, 34.6 ± 3.3g, 35.6 ± 2.7g로 나타나, 상기 실시예 1의 CSM-1, CSM-2, CSM-3의 체중이 대조군에 비해 유의적으로 작게 나타났음을 알 수 있는 바(p<0.05), CSM-1, CSM-2, CSM-3의 장기간 섭취는 당뇨동물에 있어서 체중을 유의적으로 감소시키는 비만 억제효과를 나타냄을 확인할 수 있었다. 식이 섭취량은 대조군 및 CSM-1, CSM-2, CSM-3이 각각 4.0 ± 0.3g/일, 3.8 ± 0.2g/일, 3.8 ± 0.3g/일, 3.9 ± 0.2g/일, 로 유의적인 차이를 나타내지는 않았다(표 2 참조).
대조군 | CSM-1 | CSM-2 | CSM-3 | |
체중(g)1 ) | 41.4 ± 2.72) | 35.0 ± 1.9*3) | 34.6 ± 3.3* | 35.6 ± 2.7* |
식이 섭취량(g/일) | 4.0 ± 0.3 | 3.8 ± 0.2 | 3.8 ± 0.3 | 3.9 ± 0.2 |
1) 식이 섭취 6주 후의 체중 2) 평균 ± S.D. 3) p<0.05 |
1-2. 시료 채취
식이 섭취 6주째 실험동물을 희생하였다. 실험동물은 희생하기 전 14시간 절식시킨 후 이산화탄소 가스로 질식시켜 EDTA(ethylene diamine tetra acetic acid)를 10 ㎎씩 넣은 주사기로 심장에서 채혈하였다. 혈액은 3,000rpm에서 15분간 원심분리하여 혈장을 수집하여 -70℃에서 보관하였다. 부고환지방을 채취하여 무게를 측정하였다.
그 결과, 표 3에서 나타나는 바와 같이, 부고환지방 무게는 대조군 및 CSM-1, CSM-2, CSM-3이 각각 1.96 ± 0.11g, 1.68 ± 0.12g, 1.61 ± 0.16g, 1.68 ± 0.14g로 나타나, CSM-1, CSM-2, CSM-3의 부고환지방 무게가 대조군에 비해 유의적으로 작게 나타남을 알 수 있는 바(p<0.05, 표 3 참조), CSM-1, CSM-2, CSM-3의 장기간 섭취는 당뇨동물에 있어서 체지방량을 유의적으로 감소시킴을 확인할 수 있었다.
대조군 | CSM-1 | CSM-2 | CSM-3 | |
부고환지방무게(g) | 1.96 ± 0.111) | 1.68 ± 0.12*2) | 1.61 ± 0.16* | 1.68 ± 0.14* |
1) 평균 ± S.D. 2) p<0.05 |
1-3. 통계분석
모든 결과는 평균± 표준편차로 나타내었으며, 대조군과 장군차 추출물 투여군 사이의 유의성 검정은 일원분산분석(One way ANOVA)을 사용하여 실시하였고, 투키법(Tukey's test)을 사후검정에 사용하였다(α = 0.05).
실험예
1.
장군차
추출물의 지질대사 개선효과 측정
1-1. 혈장 중성지방 측정
혈장 중 중성지방은 부오콜의 방법(Buoccole, G. and David, H., Clin . Chem ., 19, pp476, 1973)에 의하여 측정하였다.
구체적으로, 트리글리세라이드가 리파아제에 의해서 글리세롤과 지방산으로 분해되고 글리세롤은 다시 글리세롤-1-포스페이트 변화되고 글리세롤-1-포스페이트는 GPO에 의해 분해되어 H2O2가 생성되며, 생성된 H2O2는 아미노아티피린 및 TOOS와 반응하여 산화적 축합반응으로 적색의 퀴논을 생성하며 이를 비색하여 중성지방을 정량하는 방법을 사용하여 37℃에서 5분간 반응시킨 후 546 nm에서 검체 및 표준으로 흡광도를 측정하여 정량하였다.
그 결과, 표 4에서 나타나는 바와 같이, 혈장 중성지방 농도는 대조군 및 CSM-1, CSM-2, CSM-3이 각각 134.0 ± 12.2 mg/dL, 106.8 ± 11.1 mg/dL, 109.4 ± 10.5 mg/dL, 111.1 ± 10.9 mg/dL로 나타나, CSM-1, CSM-2, CSM-3의 중성지방의 농도가 대조군에 비해 유의적으로 감소된 바(p<0.05), CSM-1, CSM-2, CSM-3의 장기간 섭취는 당뇨동물에 있어서 중성지방의 농도를 유의적으로 감소시킴을 확인할 수 있었다.
대조군 | CSM-1 | CSM-2 | CSM-3 | |
혈장중성지방(mg/dL) | 134.0 ±12.21) | 106.8 ±11.1*2) | 109.4 ± 10.5* | 111.1 ± 10.9* |
1) 평균 ± S.D. 2) p<0.05 |
1-2. 혈장 총콜레스테롤 측정
혈장 총 콜레스테롤은 살레의 방법(Sale, F.O., et al., Anal . Biochem ., 142, pp347-348, 1984)에 의해 측정하였다.
구체적으로, 혈청 중에는 유리형 및 에스테르형 콜레스테롤이 존재하며 에스테르형에 콜레스테롤에스테르 가수분해효소(hydrolase)를 반응시키면 유리형과 지방산으로 분해되고 유리형에 콜레스테롤 산화효소를 반응시키면 H2O2와 δ-콜레스테논(Cholestenone)이 생성된다. 생성된 H2O2에 과산화효소와 4-아미노안티피린 및 페놀을 동시에 반응시키면 산화적 축합반응으로 퀴논이 생성되며 이를 비색하여 콜레스테롤을 정량하는 방법을 사용하여 37℃에서 5분간 반응시킨 후 500nm에서 검체 및 표준으로 흡광도를 측정하여 정량하였다.
그 결과, 표 5에서 나타나는 바와 같이, 혈장 총콜레스테롤 농도는 대조군 및 CSM-1, CSM-2, CSM-3이 각각 116.0 ± 19.0 mg/dL, 74.6 ± 8.5 mg/dL, 77.2± 9.6 mg/dL, 79.2 ± 8.1 mg/dL로 나타나, CSM-1, CSM-2, CSM-3의 총콜레스테롤의 농도가 대조군에 비해 유의적으로 감소된 바(p<0.01), CSM-1, CSM-2, CSM-3의 장기간 섭취는 당뇨동물에 있어서 혈장 콜레스테롤 농도를 유의적으로 감소시킴을 확인할 수 있었다.
대조군 | CSM-1 | CSM-2 | CSM-3 | |
혈장총콜레스테롤(mg/dL) | 116.0 ±19.01) | 74.6 ± 8.5*2) | 77.2± 9.6* | 79.2 ± 8.1* |
1) 평균 ± S.D. 2) p<0.01 |
실험예 2. 급성독성실험
6 주령의 특정병원체부재(specific pathogen-free, SPF) SD계 랫트를 사용하여 급성독성실험을 실시하였다. 각 그룹당 2마리씩의 동물에 상기 실시예 1의 CSM-1, CSM-2, CSM-3을 100㎎/㎏의 용량으로 1회 경구투여 하였다. 실험 물질 투여 후 동물의 폐사여부, 임상증상 및 체중변화를 관찰하고 혈액학적 검사와 혈액생화학적 검사를 실시하였으며, 부검하여 육안으로 강장기와 흉강 장기의 이상여부를 관찰하였다.
그 결과, 실험 물질을 투여한 모든 동물에서 특기할 만한 임상증상이나 폐사된 동물은 없었으며, 체중변화, 혈액검사, 혈액생화학 검사 및 부검 소견 등에서도 독성변화는 관찰되지 않았다. 이상의 결과, 본 발명의 장군차는 랫트에서 각각 100㎎/㎏ 까지도 독성변화를 나타내지 않았으며, 경구투여 최소치사량(LD50)은 100㎎/㎏ 이상인 안전한 물질로 판단되었다.
본 발명의 장군차 추출물을 함유하는 조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
제제예 1. 산제의 제조
CSM-1 20 mg
유당 100 mg
탈크 10 mg
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.
제제예 2. 정제의 제조
CSM-2 10 mg
옥수수전분 100 mg
유당 100 mg
스테아린산 마그네슘 2 mg
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.
제제예 3. 캅셀제의 제조
CSM-3 10 mg
결정성 셀룰로오스 3 mg
락토오스 14.8 mg
마그네슘 스테아레이트 0.2 mg
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.
제제예 4. 주사제의 제조
CSM-1 10 mg
만니톨 180 mg
주사용 멸균 증류수 2974 mg
Na2HPO4·12H2O 26 mg
통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당(2㎖) 상기의 성분 함량으로 제조한다.
제제예 5. 액제의 제조
CSM-2 20 mg
이성화당 10 g
만니톨 5 g
정제수 적량
통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100㎖로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.
제제예
6. 건강 기능 식품의 제조
CSM-3 1000 ㎎
비타민 혼합물 적량
비타민 A 아세테이트 70 ㎍
비타민 E 1.0 ㎎
비타민 B1 0.13 ㎎
비타민 B2 0.15 ㎎
비타민 B6 0.5 ㎎
비타민 B12 0.2 ㎍
비타민 C 10 ㎎
비오틴 10 ㎍
니코틴산아미드 1.7 ㎎
엽산 50 ㎍
판토텐산 칼슘 0.5 ㎎
무기질 혼합물 적량
황산제1철 1.75 ㎎
산화아연 0.82 ㎎
탄산마그네슘 25.3 ㎎
제1인산칼륨 15 ㎎
제2인산칼슘 55 ㎎
구연산칼륨 90 ㎎
탄산칼슘 100 ㎎
염화마그네슘 24.8 ㎎
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
제제예
7. 건강 음료의 제조
CSM-1 100 ㎎
비타민 C 15 g
비타민 E(분말) 100 g
젖산철 19.75 g
산화아연 3.5 g
니코틴산아미드 3.5 g
비타민 A 0.2 g
비타민 B1 0.25 g
비타민 B2 0.3g
물 정량
통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2ℓ 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다.
상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
Claims (5)
- 장군차(Camellia sinensis assamica) 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨 합병증의 예방 및 치료용 약학조성물.
- 제 1항에 있어서, 상기 추출물은 정제수를 포함한 물, 탄소수 1 내지 4의 저 급알코올 또는 이들의 혼합용매로부터 선택된 용매에 가용한 추출물인 약학조성물.
- 제 1항에 있어서, 상기 당뇨 합병증은 지질대사 질환, 고콜레스테롤증, 관상동맥성 심장질환, 동맥경화증, 심근경색 등의 심혈관 질환, 피부 감염, 세소혈관증, 신경병증, 치료약제에 의한 피부반응 등에 의한 피부 증상 및 수정체의 혼탁과 백내장, 당뇨병성 망막증, 당뇨병성 신증 또는 당뇨병성 신경병증인 약학조성물.
- 장군차(Camellia sinensis assamica) 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨 합병증의 예방 및 개선용 건강기능식품.
- 제 4항에 있어서, 분말, 과립, 정제, 캡슐 또는 음료인 건강기능식품.
Priority Applications (1)
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KR1020080015733A KR20090090492A (ko) | 2008-02-21 | 2008-02-21 | 장군차 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨합병증의 예방 및 치료용 조성물 |
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2008
- 2008-02-21 KR KR1020080015733A patent/KR20090090492A/ko not_active Application Discontinuation
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