KR20090079277A - 항산화, 항염 및 항주름 효과를 가지는 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 항산화, 항염 및 항주름 효과를 가지는 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 주요 구성 허브로서 라벤다, 로즈마리, 오레가노, 타임으로 구성되어지는 혼합물을 발효 공정을 거치어 저온 초음파 추출하여 제조한 허브 추출물을 함유하여 항산화, 항염 및 항주름 효과가 우수한 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

항산화, 라벤다, 로즈마리, 오레가노, 타임

Description

항산화, 항염 및 항주름 효과를 가지는 화장료 조성물 { Cosmetic composition with the anti-oxidant, anti-inflammatory and anti-wrinkled effect }

도 1은 본 발명의 허브 발효 추출물의 농도에 따른 DPPH 소거능을 나타내는 그래프,

도 2는 본 발명의 허브 발효 추출물의 농도에 따른 슈퍼록사이드 음이온 소거능을 나타내는 그래프,

도 3은 본 발명의 허브 발효 추출물의 농도에 따른 콜라게나아제 저해 활성을 나타내는 그래프,

도 4는 본 발명의 허브 발효 추출물의 농도에 따른 세포 증식능을 나타내는 그래프,

도 5는 본 발명의 허브 발효 추출물의 농도에 따른 리폭시게나아제 저해 활성을 나타내는 그래프

본 발명은 항산화, 항염 및 항주름 효과를 가지는 화장료 조성물에 관한 것 으로, 더욱 상세하게는 주요 구성 허브로서 라벤다, 로즈마리, 오레가노, 타임으로 구성되어지는 혼합물을 발효 공정을 통하여 유효 성분 함량을 극대화시키고, 저온의 초음파 추출 공정을 통하여 유효 성분의 추출 효율을 높이어 제조된 허브 추출물을 함유하여 항산화, 항염 및 항주름 효과를 제공할 수 있는 화장료 조성물에 관한 것이다.

일반적으로 민감성 피부는 피지 분비량은 적당하나 외부의 자극에 민감해 염증 등을 일으키기 쉬운 피부로 작은 물리적, 화학적인 변화나 자극, 환경적인 외부 요인, 생리적인 내부의 변화에 대해 정상적인 피부보다 매우 민감하게 반응하는 피부를 말한다. 이러한 민감성 피부에 의해 질환으로 습진, 주사형 피부염, 접촉성 피부염 등을 들 수 있으며 그 중에서도 가장 대표적인 질환으로 아토피성 피부염을 들 수 있다.

아토피성 피부염은 알레르기를 가진 사람들에게 나타나는 대표적인 피부 질환의 일종으로 매우 간지러운 만성 염증성 피부염이며 주로 신생아나 유아기에 많이 발생하고 대부분 9세 내지 10세가 되면 자연 치유되나 최근에는 성인이 되어서도 아토피가 지속되는 경우가 늘어나고 있다. 두 돌 이내에 없어지는 경우가 50% 정도이고 25%는 청소년기에 없어지고 나머지 25%는 성인이 되어서도 없어지지 않는다고 한다. 또한 최근에는 환경적인 요인과 스트레스 등으로 인해 성인이 되어 아토피가 처음 발병하는 경우도 급속히 증가하고 있는 추세이다. 국내 의학계에 따르면 우리나라 전체 국민의 약 15% 정도가 아토피성 피부염을 앓고 있다고 한다.

피부의 수분이 보호되지 않음으로서 피부건조증으로 시작되며 극심한 가려움 증을 동반하고 붉게 변하며 피부가 부어 오르면 가렵게 된다. 이에 따라서 자꾸 피부를 긁게 되면 손톱 사이의 세균들에 의해서 염증성 질환으로 발전하게 되어 심한 경우 진물이 나고 딱지가 질 수 있는 병이다.

염증 반응은 생체나 조직에 물리적 작용이나 화학적 물질, 세균 감염 등의 어떠한 기질적 변화를 가져오는 침습이 가해질 때 그 손상부위를 수복 재생하려는 기전이며, 일단 자극이 가해지면 국소적으로 히스타민, 세로토닌, 브라디키닌, 프로스타글란딘, 하이드록실에이코사테트라에논산(HETE), 류코트리엔과 같은 혈관 활성물질이 유리되어 혈관 괴성이 증대되면서 염증을 유발한다.

대부분의 질환과 마찬가지로 피부 질환 역시 염증 반응을 동반하는데 대표적인 피부 질환인 알레르기 접촉피부염, 건선, 아토피성 피부염 등은 면역세포인 T세포가 매개하는 염증성 질환이다. 따라서 주요 피부 질환에 대한 관리 및 치료에는 반드시 항염증제가 응용되어야 한다. 이러한 염증성 질환을 치료하기 위해 스테로이드성 항염증 제제가 사용되고 있으나 스테로이드성 제제들은 여러 가지 많은 부작용을 나타내고 있어 그 사용을 제한하고 있다. 비스테로이드성 항염 제제도 천연 항균제와 마찬가지로 천연 식물 자원에서 얻어낼 수 있으며 한의학 및 중의학에서 뿐만 아니라 양의학에서도 이미 많은 연구가 진행되고 있다.

본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위한 것으로서, 아토피성 피부 보호 및 피부 진정 효과를 위한 천연 소재로서 라벤다, 로즈마리, 오레가노, 타임으로 구성되어지는 주요 허브를 발효 공정을 거친 후 저온 초음파 추출하여 이를 함 유하여 항산화, 항염 및 항주름 효과가 우수한 화장료를 제공하는 것이다.

이하 본 발명을 보다 상세히 설명한다.

본 발명은 항산화, 항염 및 항주름 효과를 갖는 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 주요 구성 허브로서 라벤다, 로즈마리, 오레가노, 타임으로 구성되어지는 혼합물을 발효 공정을 거치어 저온 초음파 추출하여 이 추출물을 함유한 항산화, 항염 및 항주름 효과를 가지도록 기능을 제공하는 것이다.

본 발명에 따르는 조성물에서 주요 천연 허브로서 라벤다, 로즈마리, 오레가노, 타임의 유효 성분을 발효 공정을 통해 추출하여 발효 추출물의 건조중량을 기준으로 하여 0.1 ~ 20 중량% 함량으로 배합하여 사용한다.

본 발명에 선택적으로 사용되는 허브로서 로즈마리, 라벤다, 오레가노, 타임의 주요 함유 성분인 Cineol, pinene, limonene의 특성은 피부 조직을 팽팽하게 하는 작용을 한다. 몸에 활력을 주는 작용이 있어 신체 방어 체계를 강화하고 뇌하수체나 난소에 작용해 내분비계 강장효과가 있다고 알려져 있다. 또한 뛰어난 거담 작용과 알레르기 완화 작용이 있다. 특히, Cineol 성분은 천연 유기화합물로 향긋한 향, 시원한 맛을 가지고 있으며, 염증 및 고통 경감에 효과를 가지고 있으며 향신료, 향수, 화장품에 많이 이용되는 성분이다. 이들은 천연 유기 화합물로 페놀 구조를 가지고 있으며 박테리아나 바이러스, 곰팡이 박멸, 가려움 제거 등에 효과가 있고 시원한 느낌으로 피부 정화 작용, 항곰팡이 작용 효과를 가지고 있어, 화농성 피부, 여드름 치료에 탁월하게 이용될 수 있다.

본 발명에 사용되는 허브 발효 추출물을 제조하기 위한 원료로서 라벤다, 로즈마리, 오레가노, 타임을 사용하여 건조중량을 기준으로 하여 라벤다 1 내지 30 중량%, 오레가노 1 내지 30 중량%, 로즈마리 1 내지 30 중량%, 타임 1 내지 30 중량%로 구성한다.

본 발명은 라벤다, 로즈마리, 오레가노, 타임으로 이루어진 허브 혼합물을 건조 과정을 거치거나 생물로서의 혼합물을 80 내지 100도씨 온도에서 30분 내지 1시간 동안 습식 열처리를 하여 미생물 오염도를 낮추며 각 혼합물을 구성하는 원료의 영양성분이 용출되어 이용되기 쉽도록 화학적 조건을 형성하는 단계를 거친 후 30 내지 60도씨 온도와 pH 5.5 내지 8.5 및 통성 혐기적인 발효 조건에서 라벤다, 로즈마리, 오레가노, 타임으로 구성되어진 열처리된 허브 혼합물을 건식 배양 조건하에서 바실러스속 미생물을 이용하여 고체 발효하여 고분자 물질을 생산한 후 제균 단계를 거치어 정제수 또는 유기용매로서 저급 알코올 특히 에탄올을 1:1 내지 1:5의 부피비로 혼합 첨가하여 저온의 초음파 추출 방법을 사용하여 추출액을 회수하고 이를 농축하여 1차 정제한다. 더욱 정제하고자 할 때는 섭씨 4도에서 분자량 10kD의 막 필터를 이용한 투석을 통해 저분자량의 물질을 제거할 수 있다. 분리된 용액의 부피와 동일한 부피의 증류수를 첨가하여 추출물의 점도를 낮춘 후 동결건조하여 건조중량을 측정하여 생산성을 결정한다.

이렇게 제조된 허브 추출물을 화장료 제조시 첨가한다.

본 발명의 바실러스속 균주의 특성은 그람 양성균으로서 내생 포자 형성능이 있으며, 장간균의 형태를 가지고 있다. 또한 호기성 또는 통성혐기성 조건에서 생장이 가능하지만 혐기적인 조건에서는 생장이 불가능하며 카탈라아제 생산 및 카제인과 젤라틴, 전분 분해능의 특징을 가진다. 생장 조건으로서는 7% 식염수 조건에서 생장이 가능하며 발효 조건인 약 45도씨에서 생장이 가능하며 약 pH 5.0 내지 7.5에서 생장이 활발하다. 또한 글루코오스, 아라비노오스, 크실로오스, 만니톨을 이용하여 산을 생성할 수 있는 특징을 가진다.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 상기 제조된 라벤다, 로즈마리, 오레가노, 타임으로 구성되어진 발효 추출물을 0.1 내지 20 중량%로 바람직하게는 2 중량%가 되게 함유하는 것을 특징으로 한다.

본 발명에 따른 항산화, 항염, 항주름 효과를 가지는 라벤다, 로즈마리, 오레가노, 타임으로 구성되어진 허브 혼합물의 발효 추출물을 함유하여 제조한 화장료 조성물은 통상의 제형을 가질 수 있으며, 예를 들어 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 바디로션, 바디오일, 바디에센스 등으로 제형화될 수 있다. 이들 각 제형의 조성물은 그 제형의 제제화에 필요하고 적절한 각종의 기제와 첨가물을 함유할 수 있으며, 이들 성분의 종류와 양은 당업자에 의해 용이하게 선정될 수 있다. 이하에 항산화, 항염, 항주름 효과를 갖는 화장료 조성물의 대표적인 스킨과 로션 조성물을 예를 들어 설명한다.

또한 본 발명에 따른 항산화, 항염, 항주름 효과를 가지는 화장료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용 횟수를 달리할 수 있다.

이하 본 발명의 실시예를 통하여 본 발명의 항산화, 항염, 항주름 효과를 가지는 화장료 조성물을 더욱 상세하게 설명하지만 본 발명이 이들 실시예에만 국한되는 것은 아니다.

실시예 1 : 라벤다, 로즈마리, 오레가노, 타임으로 구성되어진 허브 혼합물의 발효 추출물의 제조

라벤다, 로즈마리, 오레가노, 타임의 각각의 허브 원료가 각각 중량 25%로 균일 하게 구성되어진 혼합물을 80 내지 100도씨 온도에서 30분 내지 1시간 동안 습식 열처리를 하여 위해 미생물 오염도를 낮추며 각 혼합물을 구성하는 원료의 영양성분이 용출되어 이용되기 쉽도록 조건을 형성하는 단계를 거친 후 30 내지 60도씨 온도와 pH 5.5 내지 8.5 및 통성 혐기적인 발효 조건에서 열처리된 허브 혼합물을 건식 배양 조건하에서 바실러스속 미생물을 이용하여 고체 발효하여 고분자 물질을 생산한 후 제균 단계를 거치어 정제수 또는 유기용매로서 저급 알코올 특히 에탄올을 1:1 내지 1:5의 부피비로 혼합 첨가하여 저온의 초음파 추출 방법을 사용하여 추출액을 회수하고 이를 농축하여 1차 정제한다. 더욱 정제하고자 할 때는 4도씨에서 분자량 10kD의 막 필터를 이용한 투석을 통해 저분자량의 물질을 제거할 수 있다. 분리된 용액의 부피와 동일한 부피의 증류수를 첨가하여 추출물의 점도를 낮춘 후 동결건조하여 건조중량을 측정하여 생산성을 결정한다.

실시예 2 : 본 발명에 따른 허브의 발효 추출물을 함유한 피부 진정 효과가 있는 스킨 로션의 제조

하기 표 1에 나타난 바와 같은 조성비율로 스킨 로션을 제조하였다. 알콜 부분은 곡정에서 생산하여 78℃ 증류한 알콜에 M-P, tween 20, NP-12의 순서대로 용해시켜 제조하였고, 정제수 부분은 멸균 처리된 정제수에 글리세린, 1,3-BG, DC-193, 히아루론산, 알란토인, 구연산, 구여산소다의 순서대로 용해시켜 제조한 다음 상기 실시예 1에서 제조한 라벤다, 로즈마리, 오레가노, 타임으로 구성되어진 허브 발효 추출물과 혼합하여 스킨 로션을 제조하였다.

분류	원료명	무게(중량%)
알콜부분	에탄올	7
	메틸파라히드록시벤조익산	0.1
	tween-20	0.2
	노닐페닐에테르-12	0.2
정제수부분	정제수	89.51
	글리세린	0.1
	1,3-부틸렌글리콜	0.2
	알라닌 193	0.1
	히아루론산	0.5
	알란토인	0.05
	구연산	0.01
	구연산소다	0.03
천연 성분부분	본 발명의 허브 발효 추출물	2
합계		100

실시예 3 : 본 발명에 따른 허브 발효 추출물을 함유한 피부 진정 효과가 있는 밀크 로션의 제조

실시예 2와 동일한 방법으로 밀크 로션을 제조하였다.

분류	원료명	무게(중량%)
알콜부분	스테아린산	2.1
	세탄올	1.3
	유동파라핀	7.0
	스쿠알렌	0.5
	이소프로필 미리스테이트	1.0
	글리세릴 모노스테아레이트	0.5
	아라셀-60	0.85
	tween-20	0.1
	이소스테아릴-이소스테아레이트	0.5
	프로필파라벤	0.1
	알라닌 200F/100CS	0.1
정제수부분	정제수	73.65
	트리에탄올아민	0.7
	프로필렌글리콜	7.0
	글리세린	3.0
	메틸파라히드록시벤조익산	0.1
천연성분	본 발명의 허브 발효 추출물	1.5
합계		100

실험예 1 : 본 발명에 따른 허브 추출물을 함유한 스킨 로션의 피부 자극성 및 피부 진정 효과 확인

건강한 성인 남녀 20명(남자 10명, 여자 10명)의 전박부에 상기 실시예 2에서 제조한 스킨 로션을 일정량(10m/5㎠)씩 도포하고, 그외의 부위를 알루미늄 호일로 차폐하여 30분 후에, 자외선 조사기를 이용하여 장파장 자외선을 10.2J/㎠ 의 용량으로 조사하고 24시간 후에 피부 상태(홍반, 부종, 구진 등)를 관찰하였다. 관찰 결과 피부에 홍반 등의 부작용이 발생되지 않아 상기 스킨 로션은 광독성이 없으므로서 피부 자극성 및 피부 진정 효과가 있음을 확인할 수 있었다.

실험예 2 : 본 발명에 따른 허브 발효 추출물을 함유한 밀크 로션의 피부 자극성 및 피부 진정 효과 확인

건강한 성인 남녀 20명(남자 10명, 여자 10명)의 전박부에 상기 실시예 3에서 제조한 밀크 로션을 일정량(10m/5㎠)씩 도포하고, 그외의 부위를 알루미늄 호일로 차폐하여 30분 후에, 자외선 조사기를 이용하여 장파장 자외선을 10.2J/㎠ 의 용량으로 조사하고 24시간 후에 피부 상태(홍반, 부종, 구진 등)를 관찰하였다. 관찰 결과 피부에 홍반 등의 부작용이 발생되지 않아 상기 밀크 로션은 광독성이 없으며 피부 자극성 및 피부 진정 효과가 있음을 확인할 수 있었다.

실험예 3 : 본 발명에 따른 약재 추출물을 함유한 스킨 로션 및 밀크 로션의 피부 안정성 확인

건강한 성인 남녀 20명(남자 10명, 여자 10명)의 전박부에 상기 실시예 2와 3에서 제조한 스킨 로션 및 밀크 로션을 인체 첩포 시험을 실시하였다. 시험대상자의 전박부를 70% 에탄올로 잘 닦은 다음 그 부위에, 통상의 화장료 기제에 상기 실시예 2와 3에서 제조한 스킨 로션 및 밀크 로션을 20㎕씩 담은 핀 챔버를 점착 테이프를 이용하여 24시간 폐쇄 부착시켰다. 24시간 후에 점착 테이프와 핀 챔버를 제거하고, 가제로 피부에 잔존된 시료를 가볍게 닦아 제거한 뒤에 피부 상태를 관찰하고 다시 24시간 후에 한번 더 관찰하였다. 실험 결과 표 3에 나타난 바와 같이 본 발명에 따른 스킨 로션 및 밀크 로션의 피부 안정성을 확인하기 위한 인체 첩포 시험에서 양성 반응을 보이지 않아 인체 피부에 자극성이 전혀 없는 것으로 확인되었다.

시료	24시간 후(n=20)	48시간 후(n=20)	비고
스킨로션	0/20	0/20	반응양성자수/총대상자수
밀크 로션	0/20	0/20

실험예 4 : 본 발명의 허브 발효 추출물의 농도에 따른 DPPH 소거 활성 효과

활성 산소에 의한 반응은 거의 대부분 라디칼 반응으로서 자동산화반응 과정이 포함된다. 생체 내에서 자동산화반응을 차단시키는 역할은 항산화제가 담당하고 있다. 전자를 주는 능력으로서 환원력이 클수록 강한 항산화제가 된다. 항산화제의 환원력을 측정하는 시약으로 1,1-diphenyl-2 picrylhydrazyl radical(DPPH)가 있다. DPPH는 화합물 내 질소 중심의 안정화된 구조의 라디칼로 존재한다. 517nm에서 최대 흡수를 나타내며 환원되면 517nm에서 흡수가 없어진다. 본 발명의 식물 추출물의 환원력의 크기는 라디칼 소거활성(Scavenging activity, SC50)으로 표시하며 SC50은 DPPH의 농도가 50% 감소하는데 필요한 농도를 나타낸다. 본 발명의 라벤다, 로즈마리, 오레가노, 타임으로 구성된 허브 발효 추출물에 대하여 농도별 SC50을 측정하여 나타난 결과를 표 4와 도 1에 나타내었다. 도 1에서 본 발명의 허브 발효 추출물의 농도에 따라 DPPH 소거 능력이 증가하여 항산화 효과가 있음을 확인하였다.

	SC 50
허브 발효 추출물	??? ㎕/㎖
Ascorbic acid	??? ㎍/㎖

실험예 5 : 본 발명의 허브 발효 추출물의 농도에 따른 슈퍼록사이드 음이온 소거 활성 효과

활성산소 가운데 슈퍼록사이드 음이온은 자외선 흡수로 시작되는 광증감반응에 의해 생성되고, 생체내에 존재하는 SOD(Superoxide dismutase) 효소에 의해 과산화수소로 전환된다. 슈퍼록사이드 음이온과 과산화수소는 반응성이 약하여 직접적으로 조직세포 손상에 참여하는 경우는 드물지만 보다 위험한 하이드록시라디칼 생성에 참여한다. 즉 슈퍼록사이드 음이온은 철과 구리 이온을 환원시킬 수 있고, 환원된 철과 구리 이온은 과산화수소를 환원시키면서 결과적으로 하이드록실 라디칼을 생성시킨다. 또한 생체내에서 슈퍼록사이드 음이온은 페리틴으로부터 철 이온(II)을 방출시킬 수 있다. 이러한 현상은 자외선 조사 후에 나타나며 자외선으로 인해 생성된 슈퍼록사이드 음이온의 작용으로 간주되고 있다.

본 발명의 허브 발효 추출물을 농도에 따라 슈퍼록사이드 음이온의 소거 활성 (SC 50)은 표 5과 도 2에서 보여주듯이 우수하였으며 ??? ㎕/㎖을 나타내었다.

	SC 50
허브 발효 추출물	??? ㎕/㎖
Trolox	??? uM

실험예 6 : 본 발명의 허브 발효 추출물의 농도에 따른 콜라게나아제 활성 저해 효과

피부 주름의 발생 원인 중 하나로 피부교원질, 즉 콜라겐의 결핍을 들 수 있다. 콜라겐은 피부 진피를 구성하는 주요 단백질로서, 피부 구조와 탄력을 유지하는 역할을 하고 있다. 콜라겐은 나이가 들면서 생성은 감소되며, 분해도는 증가되어 피부 진피층의 함몰을 유도하여 피부의 주름을 생성하는 것으로 알려져 있다. 또한 광노화의 원인인 자외선에 의해 콜라게나아제와 같은 MMP (matrix metalloproteinase)가 발현되고, 이에 의해 콜라겐의 분해가 증가되어 주름이 생성된다. 따라서 본 발명의 복합 생약 추출물이 콜라게나아제 활성을 저해하는지 여부를 확인하여, 피부 주름 개선의 효과를 보고자 하였다. 반응구로, 0.05M tricine buffer(pH7.5) 0.8ml에, 0.2mM 농도의 FALGPA을 녹인 기질액0.05ml 및 시료용액을 농도별로 0.05ml 첨가하고, 여기에 콜라게나아제(3mg/ml) 0.05ml을 첨가하여 20 ℃ 에서 18시간 방치하였다. 그 후, 1N 아세테이트 10ul를 넣어 반응을 정지시킨 후, 흡광도324nm에서 저해 활성을 측정하여 도 3및 표 6에 나타내었다. 표 6과 도 3에 나타난 바와 같이, 본 발명에 의한 실시예 1의 추출물은 농도에 따라 콜라게나아제 활성 저해능이 증가함을 나타내었으며, 콜라게나아제 저해능(IC 50) 또한 우수한 것으로 나타났다.

	SC 50
허브 발효 추출물	??? ㎕/㎖

실험예 7 : 본 발명에 의한 허브 발효 추출물의 세포 증식능에 의한 항주름 효과

CCK-8은 살아 있는 세포수를 결정하기 위한 colormetric assay 이다. 세포 증식능의 측정은 WST-8 formazan dye 의 형성 정도로 측정하며, WST-8은 살아있는 세포의 디하이드로게나아제에 의해 환원되어 노랑색의 formazan을 생성한다. 따라서 이 formazan 의 양을 흡광도로 측정함으로서 살아 있는 세포의 수를 비율적으로 알 수 있다. 또한 MTT, WST-1 과 같은 다른 tetrazolium salts 를 이용한 방법보다 sensitivity 가 높다. 본 실험은 normal human dermal fibroblast 에 허브 추출물을 농도별로 투입하여 3일 배양 후 CCK-8 정량법을 수행하였다. 그 결과 도 4에서와 보여주듯이 허브 발효 추출물이 발효 전과 비교하여 발효 후 세포 증식능이 월등히 높음을 알 수 있다.

실험예 8 : 본 발명의 허브 발효 추출물의 농도에 따른 리폭시게나아제 활성 저해 효과

리폭시게나제(5-LO, 5-lipoxygenase)는 리놀산, 리놀렌산, 아라키돈산과 같이 분자 내에 1,4-cis , cis-pentadiene(1,4-pentadiene) 구조를 갖는 불포화 지방산에 분자상 산소를첨가하여 1,3-cis , trans-diene 5-hydroperoxide 를 생성하는 산화효소로 아라키돈산으로부터 각종 염증 및 알러지성 질환에 관여하는 로이코트리엔 (leucotriene) 생합성의 첫번째 반응에 관여하는 효소이다. 따라서 구조적, 메커니즘적으로 5-LO와 유사한 SLO(soybean lipoxygenase)를 이용하여 리폭시게나제의 저해활성을 측정하여 항염효과를 확인하였다. 즉, 0.1M Tris 완충용액 200 ul에 2 ul의 시료를 첨가하고, 여기에 500 unit의 15-lipoxygenase를 넣어서 25℃에서 5분간 반응시켰다. 반응 후, 에탄올에 녹인 linolenic acid를 최종농도 110 uM이 되도록 첨가하여 섞은 후 234 nm에서 5분간 흡광도를 측정하여 추출물의 lipoxygenase 저해활성(%)을 계산하였다. 도 5에 나타난 바와 같이, 본 발명에 의한 실시예 1의 허브 발효 추출물은 농도에 따라 리폭시게나아제 활성 저해능이 증가함을 나타내었으며 특히 발효 후에 저온 초음파 추출 방법에 의해 리폭시게나아제 저해능이 더욱 우수한 것으로 나타났다.

이상 상기 실시예와 실험예를 통하여 본 발명의 라벤다, 로즈마리, 오레가노, 타임으로 구성되어지는 허브 추출물을 함유함으로써 항산화, 항염 및 항주름 효과가 우수한 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

Claims (4)

1. 항산화, 항염 및 항주름 효과를 가지는 천연 허브 성분으로서 라벤다, 로즈마리, 오레가노, 타임을 사용하여 건조중량을 기준으로 하여 라벤다 1 내지 30 중량%, 오레가노 1 내지 30 중량%, 로즈마리 1 내지 30 중량%, 타임 1 내지 30 중량%로 구성되어지는 허브 발효 추출물을 0.1 내지 20 중량%, 바람직하게는 2 중량%가 되게 함유하는 것을 특징으로 하는 항산화, 항염 및 항주름 효과가 우수한 화장료 조성물
2. 제 1항에 있어서,

   라벤다, 로즈마리, 오레가노, 타임으로 구성되어지는 허브 혼합물을 80 내지 100도씨 온도에서 30분 내지 1시간 동안 습식 열처리를 하여 미생물 오염도를 낮추는 공정과 30 내지 60도씨 온도와 pH 5.5 내지 8.5 및 통성 혐기적인 발효 조건에서 열처리된 약재 혼합물을 건식 배양 조건하에서 바실러스속 미생물을 이용하여 고체 발효하여 고분자 물질을 생산한 후 제균 단계를 거치어 정제수 또는 유기용매로서 저급 알코올 특히 에탄올을 1:1 내지 1:5의 부피비로 혼합 첨가하여 저온의 초음파 추출 방법을 사용하여 추출액을 회수하고 이를 농축하여 정제하는 단계로 구성되는 허브 발효 추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는 항산화, 항염 및 항주름 효과가 우수한 화장료 조성물
3. 제 2항에 있어서,

   1차 정제되어 얻어진 라벤다, 로즈마리, 오레가노, 타임으로 구성되어지는 허브 발효 추출물을 추가적으로 섭씨 4도에서 분자량 10 kD의 막 필터를 이용한 투석을 통해 저분자량의 물질을 제거하는 단계를 가지는 것을 특징으로 하는 항산화, 항염 및 항주름 효과가 우수한 화장료 조성물
4. 제 2항에 있어서,

   그람 양성균으로서 내생 포자 형성능이 있으며, 장간균의 형태를 가지며, 또한 호기성 또는 통성혐기성 조건에서 생장이 가능하지만 혐기적인 조건에서는 생장이 불가능하며 카탈라아제 생산 및 카제인과 젤라틴, 전분 분해능의 특징을 가지며, 생장 조건으로서는 7% 식염수 조건에서 생장이 가능하며 발효 조건인 약 45도씨에서 생장이 가능하며 약 pH 5.0 내지 7.5에서 생장이 활발하며, 글루코오스, 아라비노오스, 크실로오스, 만니톨을 이용하여 산을 생성할 수 있는 것을 특징으로 하는 바실러스 속 미생물을 사용하여 발효 단계를 거치는 것을 특징으로 하는 항산화, 항염 및 항주름 효과가 우수한 화장료 조성물

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